381 |
从FFPE样本中快速提取核酸的试剂、试剂盒及其应用 |
CN202111036791.X |
2021-09-06 |
CN113584019A |
2021-11-02 |
崔国鹏; 董超; 张银; 张晓亮; 杨增利 |
本发明属于分子生物学技术领域,具体公开了一种从FFPE样本中快速提取核酸的试剂、试剂盒及其应用。本发明的试剂中结合缓冲液的配方简单,成本低廉,可以显著提高核酸与磁珠的结合效果,增加核酸的结合量。本发明将特定组成的裂解缓冲液、结合缓冲液和洗涤缓冲液组合使用,先充分裂解组织细胞,消化与核酸结合的蛋白质,完全释放出核酸,再将释放出的核酸特异性地结合到磁珠上,增大核酸的结合量,实现核酸与其他裂解物的有效分离,之后多次洗涤结合有核酸的磁珠,彻底去除蛋白质、脂质等杂质,最后从磁珠上洗脱核酸,得到高纯度、高收率的核酸。本发明的试剂/试剂盒组成简单,成本低廉,便于核酸提取操作,可以大幅度缩短提取时间。 |
382 |
一种提取川贝母DNA的方法 |
CN201610234966.0 |
2016-04-15 |
CN105713903A |
2016-06-29 |
陈学松; 罗达龙; 黄林杰; 黄琳 |
本发明提供了一种提取川贝母品DNA的方法,旨在提供一种专属性强、富集效率高、操作相对简单的方法,该方法依次包括下述步骤:1)前处理样品;2)取前处理好的样品,加入400μL裂解缓冲液和已融化的核糖核酸酶A5μL,振荡混匀;置于70℃金属浴中10?30分钟,期间取出振荡混匀数次;5000转离心10分钟,取上清进行提取;取出试剂盒中96位深孔板,于A行分别加入已裂解样品300μL,连接缓冲液600μL,磁珠60μL;F行加入清洗缓冲液Ⅰ500μL;G行加入清洗缓冲液Ⅱ550μL;H行加入清洗缓冲液Ⅲ550μL;取出试剂盒中洗脱条,加入洗脱缓冲液100μL;将混合后的96位深孔板和洗脱条,置于核酸提取仪,进行DNA提取;属于化学检测技术领域。 |
383 |
一种非妇科脱落细胞保存液 |
CN202310805337.9 |
2023-07-03 |
CN116711715A |
2023-09-08 |
朱峻; 杰西卡·朱 |
本发明公开了一种非妇科脱落细胞保存液,配方包括:三羟甲基氨基甲烷缓冲液、细胞固定剂、丙酮、HCl溶液、NaCl溶液、抑菌剂、ELS裂解液、去离子水和保持剂组成,各组分的重量份数分别是:5~8份的三羟甲基氨基甲烷缓冲液、15~25份的细胞固定剂、0.2~0.3份的丙酮、0.2~0.3份的HCl溶液、0.2~0.4份的NaCl溶液、2.3~2.5份的抑菌剂、3.5~4.5份的ELS裂解液、60~80份的去离子水和1.5~1.8份的保持剂,本发明,利用ELS裂解液对红细胞进行分解,提高了检测的精准性,通过添加保持剂避免了样品的结块凝固,提高了保存液的工作稳定性,通过添加抑菌剂抑制了病菌在保存液中的生长,延长了保存液的保存时间,提高了细胞保存液的实用性。 |
384 |
适用于单细胞测序的人冰冻肿瘤组织细胞核分离方法 |
CN201910091167.6 |
2019-01-30 |
CN109628555A |
2019-04-16 |
林锐; 郭成林 |
本发明公开了适用于单细胞测序的人冰冻肿瘤组织细胞核分离方法和提取细胞核的方法。该提取细胞核的方法包括:将待提取样品进行裂解处理,所述裂解处理是在第一缓冲液中进行的;将裂解产物进行第一离心处理,以便获得细胞核沉淀;将所述细胞核沉淀进行冲洗和重悬处理,冲洗和重悬处理是在第二缓冲液中进行的,以便获得所述细胞核;其中,所述第一缓冲液包括:116.8mM NaCl、pH 7.8的8mM Tris碱、0.8mM CaCl2、38mM MgCl2、0.04%BSA、0.16%Nonidet P‑40、1mM EDTA、1mg/mL DAPI;所述第二缓冲液包括:1×PBS、1.0%BSA以及0.2U/μL RNase抑制剂。该方法只需简单的试剂耗材,不需要昂贵的分离设备,便可从较少的冰冻肿瘤组织中获得足量、完整的单核用于单细胞RNA测序。 |
385 |
一种磁珠法提取金黄色葡萄球菌DNA的试剂盒及其提取方法 |
CN202310503255.9 |
2023-05-06 |
CN116814608A |
2023-09-29 |
寇增强; 刘海龙; 隋修磊; 刘盼 |
本申请提供了一种磁珠法提取金黄色葡萄球菌DNA的试剂盒及其提取方法,试剂盒包括裂解液、磁珠、前处理溶液A、清洗液I、清洗液II、洗脱液;所述裂解液包括盐酸胍、CHAPS、尿素、NP‑40、磷酸缓冲液、氨基磺酸、辛葡糖苷和异丙醇;所述前处理溶液A包括SDS、NP‑40和磷酸缓冲液;所述清洗液I包括盐酸胍、十四烷基磺基甜菜碱、对二乙胺苯甲酸、NP‑40、磷酸缓冲液和氯化钠;所述清洗液II为75%的乙醇;所述洗脱液包括磷酸缓冲液和EDTA。本申请提供的试剂盒经过对各组分进行合理复配,得到试剂盒复配体系的最佳比例,使得各原料之间发挥协同作用,使得该体系对金黄色葡萄球菌DNA具备优异的结合力和提取效果。 |
386 |
一种血液基因组DNA提取试剂盒及其使用方法 |
CN202110469862.9 |
2021-04-28 |
CN114317519A |
2022-04-12 |
曾亚平; 赖楚明 |
本发明涉及DNA提取领域,公开了一种血液基因组DNA提取试剂盒及其使用方法,包括包括细胞裂解液、洗涤缓冲液和洗脱缓冲液。细胞裂解液组分包括:浓度2~8M的盐酸胍或异硫氰酸胍中的一种、浓度20mM或50mMpH8.4的Tris‑HCl、浓度25mM的EDTA和浓度1%~20%的表面活化剂;洗涤缓冲液组分包括:浓度20mMpH8.4的的Tris‑HCl、浓度0.5M的NaCl、浓度1mM的EDTA和80%无水乙醇;洗脱缓冲液组分包括:浓度10mMpH7.0的Tirs‑HCl或10mMpH8.0的TE缓冲液中的一种。本发明提供的血液基因组DNA提取试剂盒在室温条件下储存和操作,其采用的磁珠法提取,操作简单,对全血样本可直接处理无需分离细胞,整个提取过程30min即可完成,提取效率高,获得的DNA浓度和纯度较好,方便下游进行基因检测操作。 |
387 |
一种改良型肠道菌群基因组快速提取试剂盒 |
CN201610573645.3 |
2016-07-21 |
CN106480013A |
2017-03-08 |
吴永红; 吴敏; 周奉雪; 王长振; 孙杨东; 张立松; 张展 |
本发明提供了一种改良型肠道菌群基因组快速提取试剂盒,具体包括改良型核酸提取柱、菌群富集液、细胞裂解液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等成分组成。其中,改良型核酸提取柱采用过滤膜和活性炭层压制而成,具有过滤吸附和过滤功能;菌群富集液由甘露醇、甘油、葡萄糖、维生素C和磷酸盐缓冲液组成,可实现粪便的快速溶解,大大节约溶解粪便的时间,结合细胞裂解液、洗涤缓冲液和洗脱缓冲液,可以快速有效地提取大量高纯度的核酸,同时可以大大节约实验成本,具有操作简单、成本低廉等特点。更重要地,通过该试剂盒纯化回收的核酸样品可直接用于宏基因组测序等实验,具有广泛的应用前景。 |
388 |
一种唾液斑DNA、RNA和蛋白质同时提取的方法 |
CN202211131689.2 |
2022-09-16 |
CN115287283A |
2022-11-04 |
王昕宇; 严江伟; 方晨; 周鹏; 李敏; 许晓群; 王盈; 郭艺琳; 孟德萍; 于春江; 熊若彤; 王嘉慧 |
本发明提供了一种唾液斑DNA、RNA和蛋白质同时提取的方法,属于生物技术领域。本发明所述方法的步骤包括:1)将唾液斑放于含有裂解缓冲液的反应体系中,得到裂解产物;2)离心裂解产物,收集裂解上清液,依次流经DNA吸附柱、RNA吸附柱,收集吸附有DNA的吸附柱和吸附RNA的吸附柱以及最后流RNA吸附柱的过柱液体;3)将所述含有DNA的吸附柱,所述含有RNA的吸附柱和第一次过RNA吸附柱的滤液分别纯化,得到DNA溶液、RNA溶液和蛋白质溶液。经检测结果显示,对获得的DNA、RNA和蛋白质样本进行STR分型、荧光定量PCR、ELISA唾液淀粉酶均可检测出相应浓度的样本,且最少唾液用量为10μL。 |
389 |
一种胎盘源胎儿干细胞的分离方法 |
CN201510169973.2 |
2015-04-10 |
CN104818243A |
2015-08-05 |
黄玉香; 高宏; 张鲁; 张贵芝; 陈春雷; 姜磊; 曹慧 |
本发明提供了一种胎盘源胎儿干细胞的分离方法,属于生物技术领域,具体是取新鲜胎盘,用缓冲液洗去污物及血液;分离得到绒毛膜,使用缓冲液洗去绒毛膜中的红细胞;然后将绒毛膜剪碎,用PBS缓冲液进行重悬,然后加入红细胞裂解液,室温裂解3min;然后加入L-DMEM培养基洗涤,离心弃上清,在组织块沉淀中加入含10%-20%FBS的DMEM培养基混匀,接种至细胞培养皿中进行培养。本发明制备过程程序化,简化操作步骤,缩短操作时间,减少工作量,避免污染,减少试剂和耗材的使用量,同时增加了间充质干细胞的产量,所得细胞全部为单一来源的胎盘源胎儿间充质干细胞。 |
390 |
一种流式细胞分析用溶血剂及其制备方法及其应用方法 |
CN202110390592.2 |
2021-04-12 |
CN113218847A |
2021-08-06 |
袁慎亮; 鲁翌; 代威 |
本发明公开了一种流式细胞分析用溶血剂。它包括磷酸盐缓冲液(PBS缓冲液)、氯化铵(NH4Cl)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA‑Na2)、牛血清白蛋白(BSA)、对氨基苯磺酸、胎牛血清、甲醛(CH2O)和乙二醇((CH2OH)2)。本发明具有对红细胞的裂解效果好,红细胞裂解完全,细胞分群效果好,裂解后的样品稳定性好,检测效率高的优点。本发明还公开了制备流式细胞分析用溶血剂的方法。本发明还公开了流式细胞分析用溶血剂的应用方法的应用方法。 |
391 |
一种制备担子菌原生质体的试剂盒及其使用方法和应用 |
CN201010129750.0 |
2010-03-18 |
CN101803530A |
2010-08-18 |
尹海滨 |
本发明公开了一种制备担子菌原生质体的试剂盒,该试剂盒含有担子菌裂解酶等的溶壁酶和等渗缓冲液R1或等渗缓冲液R2,所述的等渗缓冲液R1包括硫酸镁和磷酸缓冲液,所述的等渗缓冲液R2包括氯化钾和磷酸缓冲液;还公开了上述试剂盒的应用及使用方法;该试剂盒操作快速、简易高效高质价廉,整个过程只需要约2h;得率高,细胞生长状态好,可满足对目的基因进行细胞融合、细胞学定位、免疫共沉淀、Western杂交等多种研究的目的。 |
392 |
一种唾液斑DNA、RNA和蛋白质同时提取的方法 |
CN202211131689.2 |
2022-09-16 |
CN115287283B |
2025-05-23 |
王昕宇; 严江伟; 方晨; 周鹏; 李敏; 许晓群; 王盈; 郭艺琳; 孟德萍; 于春江; 熊若彤; 王嘉慧 |
本发明提供了一种唾液斑DNA、RNA和蛋白质同时提取的方法,属于生物技术领域。本发明所述方法的步骤包括:1)将唾液斑放于含有裂解缓冲液的反应体系中,得到裂解产物;2)离心裂解产物,收集裂解上清液,依次流经DNA吸附柱、RNA吸附柱,收集吸附有DNA的吸附柱和吸附RNA的吸附柱以及最后流RNA吸附柱的过柱液体;3)将所述含有DNA的吸附柱,所述含有RNA的吸附柱和第一次过RNA吸附柱的滤液分别纯化,得到DNA溶液、RNA溶液和蛋白质溶液。经检测结果显示,对获得的DNA、RNA和蛋白质样本进行STR分型、荧光定量PCR、ELISA唾液淀粉酶均可检测出相应浓度的样本,且最少唾液用量为10μL。 |
393 |
一种特异肽段质谱分析样本的制备方法 |
CN201911246411.8 |
2019-12-09 |
CN110850102A |
2020-02-28 |
徐耀瑜; 马军岩; 司伟杰; 吴汉夔 |
一种特异肽段质谱分析样本的制备方法,包括以下步骤:A:取所要分析的样本细胞,收集生物素培养环境的200万以上细胞数,溶于细胞裂解缓冲液中,超声裂解,定量蛋白质溶液浓度后进行肽段的胰蛋白酶消化;B:胰蛋白酶方法消化肽段;消化后进行-80℃冻干;C:预备Protein G珠子结合的生物素抗体;D:1 ml捕获缓冲液溶解得到的冻干肽段;E:合并C、D中的抗体和肽段,4℃孵育2小时,洗脱缓冲液洗脱4次;F:总上清液经3M C18固相萃取膜片装填200µl枪头制备的微过滤柱洗脱除盐后溶解肽段,进行质谱检测。本发明可以精确的查看细胞内天然生物素化蛋白质。 |
394 |
一种海桑属植物的叶绿体DNA提取方法 |
CN201910747696.7 |
2019-08-14 |
CN110283819A |
2019-09-27 |
张颖; 左欢欢; 钟军弟 |
本发明公开了一种海桑属植物的叶绿体DNA提取方法。该方法首先将海桑属植物叶片黑暗处理,匀浆,离心,过滤,得到的滤液即为海桑属植物叶绿体;然后在得到的叶绿体中加入裂解缓冲液充分裂解,将得到的裂解混合溶液先用酚抽提,再用酚-氯仿抽提,离心,得到的沉淀进行溶解,RNase消化,即可得到所述海桑属植物的叶绿体DNA;所述裂解缓冲液中的十二烷基硫酸钠的浓度为3.5%~4.5%。利用该方法成功提取分离获得了质量高、纯度高的海桑属植物的叶绿体DNA,对分析海桑属植物的进化关系,设计SSR引物对现存海桑属植物群体进行遗传多样性分析,以及分析外来海桑属植物在国内的扩张和演化情况等具有重要意义,具有广泛的推广应用前景。 |
395 |
BNP检测试剂盒和BNP的检测方法 |
CN202011482250.5 |
2020-12-15 |
CN112710855A |
2021-04-27 |
何裕勇; 黄金浪; 唐灿 |
本发明公开一种BNP检测试剂盒和BNP的检测方法。其中,所述BNP检测试剂盒包括磁微粒混悬液和酶结合物缓冲液,所述磁微粒混悬液为包被有BNP抗体的甲苯磺酰基化的磁微粒工作液,所述酶结合物缓冲液为酶标记的BNP抗体酶标工作液。本发明的技术方案能够解决因BNP分子易被裂解而导致其检测准确度较差的问题。 |
396 |
一种MTO烯烃裂解装置回收重烃中轻烃的装置 |
CN202022811406.1 |
2020-11-27 |
CN213708242U |
2021-07-16 |
周洪泽; 张善新; 李继翔; 李雪民; 刘海锋; 华国伟 |
本实用新型公开了一种MTO烯烃裂解装置回收重烃中轻烃的装置,包括循环塔和裂解气压缩机入口缓冲罐排液罐,其特征在于,所述的裂解气压缩机入口缓冲罐排液罐底部出口设置两条重烃管道,第一条管道与循环塔塔底出料管合并后输送至苯罐区,第二条管道连接至循环塔,将裂解气压缩机入口缓冲罐排液罐中的重烃送至循环塔内进行轻重组分分离。本实用新型的装置通过将压缩机入口处冷凝为液相的重烃全部送至循环塔进行轻重组分分离,可以有效地回收重烃中的轻组分,并避免粗苯罐区呼吸阀出现轻组分的逸出。 |
397 |
一种总蛋白提取试剂盒及提取方法 |
CN201910630054.9 |
2019-07-12 |
CN112213164A |
2021-01-12 |
孙林啸; 王成; 白永恒 |
本发明公开了一种总蛋白提取试剂盒及提取方法,所述试剂盒包括缓冲液I、缓冲液II、缓冲液III和助剂,所述缓冲液I在使用前需加入助剂,以对组织样本进行裂解。所述方法按照预处理蛋白提取样本与配置蛋白提取缓冲液,将蛋白提取缓冲液与蛋白提取样本混合;离心除去不溶物,沉淀杂质蛋白,然后再次离心,除去杂质;重复溶解、沉淀蛋白质;对得到的蛋白质进行干燥,溶解,储存备用的步骤进行。本发明所提供的总蛋白提取试剂盒,成分简单,成本低,适用范围广,所述方法操作简便,调节易控,提取效率高,质量好。 |
398 |
呼吸道病原微生物宏基因组去除宿主核酸提取方法 |
CN202111413370.4 |
2021-11-25 |
CN113980956A |
2022-01-28 |
魏少华; 舒小婷; 孙奉玉; 蔡昀 |
本公开涉及从呼吸道病原微生物样本中去宿主提取病原体DNA的方法,包括:(1)提供经前处理的样本;(2)将裂解组合物添加至所述经前处理的样本中,经裂解处理后,获得经裂解的样本;(3)将DNA酶缓冲液和DNA酶依次添加至所述经裂解的样本中,经消化处理后,获得去除宿主DNA的样本;(4)对所述去除宿主DNA的样本进行破壁处理,以获得经破壁处理的样本;(5)对所述经破壁处理的样本进行DNA提取,以获得病原体DNA。本公开的方法可有效降低背景宿主的人源比例、提高病原体检测灵敏度和检出效率、缩短操作时间并降低成本。 |
399 |
一种核酸提取纯化方法 |
CN202010810557.7 |
2020-08-13 |
CN111961706A |
2020-11-20 |
徐健林; 洪旭伟; 官振群 |
本发明公开一种核酸提取纯化方法,包括:在样品中加入PEG8000溶液和磁珠溶液充分混合,使磁珠充分抓取样品中的微生物,再将含有微生物的磁珠转移到含有GT缓冲液的孔中进行孵化裂解微生物外壳,将细胞乃至核酸暴露出来,利用裂解液对微生物细胞进行裂解;在结合液的环境下磁珠与核酸结合;在洗涤液1溶液下进行初洗去除大量杂质;在洗涤液2溶液下进行精洗;最后核酸在洗脱液里与磁珠分离,收集洗脱液,然后进行核酸测量。本发明利用细胞具有亲水的特性,采用同样具有亲水性的纤维素磁珠,在粘稠度大的缓冲液中抓取细胞,富集细胞以达到样品浓缩的效果,本发明无需使用离心机,简化检测操作步骤,节省检测成本,具有较高的经济效益。 |
400 |
耐高温的黄原胶裂解酶突变体及其制备方法 |
CN202510323443.2 |
2025-03-19 |
CN120137954A |
2025-06-13 |
任鑫坤; 程冰洁; 余克洋; 吴佳欣; 王天奇; 黄锦贤; 郑明枢 |
本发明公开了耐高温的黄原胶裂解酶突变体及其制备方法,野生型黄原胶裂解酶来自类芽孢杆菌(Paenibacillus nanensis),对其进行定点突变,得到耐高温的黄原胶裂解酶突变体,所述突变体包括N66V、R292A、S676V中的至少一种。所述黄原胶裂解酶突变体在pH 5.0的缓冲液中,65℃~85℃处理2 h的酶活性相比原始酶有显著提高,其中,N66V/R292A/S676V在85℃相对原始酶活性提高3.8倍。 |