首页 / 国际专利分类库 / 化学;冶金 / C07有机化学 / 杂环化合物 / 杂环化合物,含多亚甲基亚胺环、最少有五元环,3-氮杂二环[3.2.2]-壬烷,哌嗪,吗啉或硫吗啉环,仅有氢原子直接连在环碳原子上 / .环氮原子被酰基化 / KRASG12C的共价抑制剂

KRASG12C的共价抑制剂
申请号 CN201480025340.8 申请日 2014-03-14 公开(公告)号 CN105189456A 公开(公告)日 2015-12-23
申请人 亚瑞克西斯制药公司; 发明人 任平达; 刘毅; 李连升; 方俊; 吴涛;
摘要 本 发明 提供了G12C突变体K-Ras蛋白的不可逆 抑制剂 。本发明还公开了调节G12C突变体K-Ras蛋白的活性的方法以及 治疗 由G12C突变体K-Ras蛋白介导的疾患的方法。
权利要求

1.具有以下结构(V)的化合物：
或其药物可接受的盐、互变异构体、立体异构体或前药，其中：
1
R是芳基或杂芳基；
30a 30b
R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8
30a 30b 30a
环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；或R是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰
30b 31b
基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
31a 31b
R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8
31a 31b 31a
环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；或R是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰
31b 30b
基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
32a 32b
R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8
32a 32b 32a
环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；或R是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰
32b 33b
基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
33a 33b
R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8
33a 33b 33a
环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；或R是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰
33b 32b
基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
1
L是羰基、-NHC(＝O)-、亚烃基、亚烯基、亚杂烃基、亚杂环烃基、亚杂芳基、亚烃基羰基、亚烯基羰基、亚杂烃基羰基、亚杂环烃基羰基或亚杂芳基羰基；
2
L是键或亚烃基；
1 2 3 4
G、G、G和G 各自独立地为N或CR，其中R是H、氰基、卤素或C1-C6烃基；
1 2 3 4
n、n、n和n 各自独立地为1、2或3；以及
E是能够与K-Ras、H-Ras、或N-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
2.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构(Va)：
其中：
1a
L 是键、-NH-、亚烃基、亚烯基、亚杂烃基、亚杂环烃基或亚杂芳基。
3.如权利要求2所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构(Vb)：
其中：
Q是-C(＝O)-、-NR34C(＝O)-、-S(＝O)2-或-NR34S(＝O)2-；
R34是H、C1-C6烃基或羟烃基；
为碳-碳双键或碳-碳三键；以及
35 36
当 为双键时，R 和R 各自独立地为H、氰基、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基烃基或羟烃基，或R35和R36接合形成碳环或杂环；或当 为三键时R35不存在，且R36为H、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基烃基或羟烃基。
4.如权利要求3所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构(Vc)、(Vd)、(Ve)或(Vf)之一：
5.如权利要求3所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构(Vg)、(Vh)、(Vi)或(Vj)之一：
6.如权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构(Vk)、(Vl)、(Vm)、(Vn)、(Vo)或(Vp)之一：
7.如权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R1是芳基。
8.如权利要求7所述的化合物，其中所述芳基是二环的。
9.如权利要求8所述的化合物，其中所述芳基是稠合的二环芳基。
10.如权利要求9所述的化合物，其中所述芳基是萘基。
11.如权利要求7所述的化合物，其中所述芳基是单环的。
12.如权利要求11所述的化合物，其中所述芳基是苯基。
13.如权利要求7至12中任一项所述的化合物，其中所述芳基是未取代的。
14.如权利要求7至12中任一项所述的化合物，其中所述芳基被一个或多个取代基取代。
15.如权利要求14所述的化合物，其中所述取代基选自卤素、羟基、氰基、氨基羰基、甲酰基、C1-C6烃基、C1-C6烃基磺酰基、C1-C6卤代烃基、C3-C8环烃基、C1-C6烃氧基、C1-C6羟烃基、C1-C6烃氧基烃基、C1-C6氨基烃基、脂肪族杂环基、杂芳基和芳基。
16.如权利要求15所述的化合物，其中所述取代基选自氟、氯、溴、碘、羟基、氰基、甲基、乙基、异丙基、甲磺酰基、甲氧基、氨基羰基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、环丁基、环丙基和苯基，其中所述环丙基和苯基任选地被选自C1-C6烃基、卤素、羟基和氰基的一个或多个取代基取代。
17.如权利要求16所述的化合物，其中所述取代基选自氟、氯、溴、碘、羟基、甲基、乙基、环丁基和环丙基，其中所述环丙基任选地被选自C1-C6烃基、卤素、羟基和氰基的一个或多个取代基取代。
18.如权利要求17所述的化合物，其中所述取代基选自氟、氯、溴、羟基和环丙基，其中所述环丙基任选地被选自C1-C6烃基、卤素、羟基和氰基的一个或多个取代基取代。
1
19.如权利要求1至18中任一项所述的化合物，其中R 具有以下结构之一：
1
20.如权利要求1至6中任一项所述的化合物，其中R 是杂芳基。
21.如权利要求20所述的化合物，其中所述杂芳基是二环的。
22.如权利要求21所述的化合物，其中所述杂芳基是稠合的二环杂芳基。
23.如权利要求20所述的化合物，其中所述杂芳基是单环的。
24.如权利要求20至23中任一项所述的化合物，其中所述杂芳基包含氮、硫或其组合。
25.如权利要求20至24中任一项所述的化合物，其中所述杂芳基是二氢喹喔啉基、吲哚基、苯并咪唑基、吡啶基或噻唑基。
26.如权利要求20至25中任一项所述的化合物，其中所述杂芳基是未取代的。
27.如权利要求20至25中任一项所述的化合物，其中所述杂芳基被一个或多个取代基取代。
28.如权利要求21所述的化合物，其中所述取代基选自C1-C6烃基、卤素、和氧代。
29.如权利要求22所述的化合物，其中所述取代基选自乙基和氯。
1
30.如权利要求16至23中任一项所述的化合物，其中R 具有以下结构之一：
1a
其中R 每次出现时独立地为H、C1-C6烃基或卤素。
1
31.如权利要求30所述的化合物，其中R 具有以下结构之一：
32.具有以下结构(VI)的化合物：
或其药物可接受的盐、互变异构体、立体异构体或前药，其中：
37b 38a
A是CR 、N或NR ；
37c 38b
B是CR 、N、NR 或S；
37d 38c
C是CR 、N、NR 或S；
3 4
G和G 各自独立地为N或CR，其中R是H、氰基、卤素或C1-C6烃基；
1a
L 是键、-NH-、亚烃基或亚杂烃基；
2
L是键或亚烃基；
32a 32b
R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8
32a 32b 32a
环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；或R是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰
32b 33b
基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
33a 33b
R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8
33a 33b 33a
环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；或R是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰
33b 32b
基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
37a 37b 37c 37d 37e
R 、R 、R 、R 和R 各自独立地为H、卤素、氧代、羟基、氰基、氨基羰基、甲酰基、C1-C6烃基、C1-C6烃基磺酰基、C1-C6卤代烃基、C3-C8环烃基、C1-C6烃氧基、C1-C6羟烃基、C1-C6烃氧基烃基、C1-C6氨基烃基、杂环基或芳基；
38a 38b 38c
R 、R 和R 各自独立地为H、C1-C6烃基或芳基；
3 4
n和n 各自独立地为1、2或3；
m是0或1；
是单键或双键以满足所有的化合价；以及
E是能够与K-Ras、H-Ras、或N-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
33.如权利要求32所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构(VIa)、(VIb)、(VIc)、(VId)、(VIe)、(VIf)或(VIg)之一：
34.如权利要求32至33中任一项所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构
(VIa’)、(VIb’)、(VIc’)、(VId’)、(VIe’)、(VIf’)或(VIg’)之一：
其中：
Q是-C(＝O)-、-NR34C(＝O)-、-S(＝O)2-或-NR34S(＝O)2-；
R34为H、C1-C6烃基或羟烃基；
为碳-碳双键或碳-碳三键；以及
35 36
当 为双键时，R 和R 各自独立地为H、氰基、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基烃基，
35 36 35 36
或羟烃基，或R 和R 接合形成碳环或杂环；或当 为三键时R 不存在，且R 为H、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基烃基或羟烃基。
35.如权利要求32至34中任一项所述的化合物，其中G3是N，并且G4是CR。
36.如权利要求32至34中任一项所述的化合物，其中G3是CR，并且G4是N。
37.如权利要求32至34中任一项所述的化合物，其中G3是N，并且G4是N。
38.如权利要求32至37中任一项所述的化合物，其中n3是2，并且n4是2。
39.如权利要求32至37中任一项所述的化合物，其中n3是1，并且n4是1。
40.如权利要求32至37中任一项所述的化合物，其中n3是2，并且n4是1。
41.如权利要求32至40中任一项所述的化合物，其中R37a、R37b、R37c、R37d和R37e各自独立地为H、-OH、卤素、氧代、C1-C6烃基、C1-C6烃氧基、杂环基或芳基。
42.如权利要求41所述的化合物，其中R37a、R37b、R37c、R37d和R37e各自独立地为H、-OH、氟、氯、溴、碘、氧代、甲基、甲氧基、杂芳基或芳基。
43.如权利要求32至42中任一项所述的化合物，其中R37a或R37e是芳基。
44.如权利要求43所述的化合物，其中芳基是苯基。
45.如权利要求43或44中任一项所述的化合物，其中所述芳基是未取代的。
46.如权利要求43或44中任一项所述的化合物，其中所述芳基是取代的。
47.如权利要求46所述的化合物，其中所述芳基被一个或多个卤素取代基取代。
48.如权利要求47所述的化合物，其中所述卤素取代基选自氟和氯。
37a
49.如权利要求32至42中任一项所述的化合物，其中R 是杂芳基。
50.如权利要求49所述的化合物，其中所述杂芳基是未取代的。
51.如权利要求49所述的化合物，其中所述杂芳基是取代的。
52.如权利要求49至51中任一项所述的化合物，其中所述杂芳基包含氮、硫或其组合。
53.如权利要求49至52中任一项所述的化合物，其中所述杂芳基是噻吩基。
37a 37e
54.如权利要求32至42中任一项所述的化合物，其中R 或R 或二者均为卤素。
55.如权利要求54所述的化合物，其中卤素是氯、溴或碘。
37a 37e
56.如权利要求32至55中任一项所述的化合物，其中R 或R 具有以下结构之一：
38a 38b 38c
57.如权利要求32至56中任一项所述的化合物，其中R 、R 和R 各自独立地为H
或芳基。
38a 38b 38c
58.如权利要求57所述的化合物，其中R 、R 和R 各自独立地为H。
38c
59.如权利要求32至57中任一项所述的化合物，其中R 是芳基。
60.如权利要求59所述的化合物，其中所述芳基被一个或多个卤素取代基取代。
61.如权利要求60所述的化合物，其中卤素是氯。
62.如权利要求3至30或33至61中任一项所述的化合物，其中Q是-C(＝O)-。
63.如权利要求3至30或32至60中任一项所述的化合物，其中Q是-S(＝O)2-。
34
64.如权利要求3至30或33至61中任一项所述的化合物，其中Q是-NR C(＝O)-。
34
65.如权利要求3至30或33至61中任一项所述的化合物，其中Q是-NR S(＝O)2-。
34
66.如权利要求64或65中任一项所述的化合物，其中R 是H。
34
67.如权利要求64或65中任一项所述的化合物，其中R 是羟烃基。
68.如权利要求67所述的化合物，其中羟烃基是2-羟烃基。
35 36
69.如权利要求3至30或33至68中任一项所述的化合物，其中R 或R 中至少之一
为H。
35 36
70.如权利要求69所述的化合物，其中R 和R 各自为H。
36
71.如权利要求3至30或33至69中任一项所述的化合物，其中R 是烃基氨基烃基。
36
72.如权利要求71所述的化合物，其中R 具有以下结构：
36
73.如权利要求3至30或33至69中任一项所述的化合物，其中R 是羟烃基。
74.如权利要求73所述的化合物，其中羟烃基是2-羟烃基。
35 36
75.如权利要求3至30或33至69中任一项所述的化合物，其中R 和R 接合形成环。
76.如权利要求75所述的化合物，其中所述环是环戊烯、环己烯或苯环。
77.如权利要求1至76中任一项所述的化合物，其中E具有以下结构之一：
1
78.如权利要求1所述的化合物，其中L 是亚杂烃基。
79.如权利要求78所述的化合物，其中所述亚杂烃基是未取代的。
80.如权利要求78所述的化合物，其中所述亚杂烃基是取代的。
1
81.如权利要求78至80中任一项所述的化合物，其中L 是亚氨基烃基。
1
82.如权利要求81所述的化合物，其中L 是-CH2CH2NH-。
1
83.如权利要求1所述的化合物，其中L 是亚杂环烃基或亚杂芳基。
84.如权利要求83所述的化合物，其中所述亚杂环烃基或亚杂芳基是未取代的。
85.如权利要求83所述的化合物，其中所述亚杂环烃基或亚杂芳基是取代的。
1
86.如权利要求83所述的化合物，其中L 具有以下结构之一：
87.如权利要求2至77中任一项所述的化合物，其中L1a是键。
88.如权利要求2至82中任一项所述的化合物，其中L1a是亚烃基、亚烯基、亚杂烃基或亚杂环烃基。
89.如权利要求88所述的化合物，其中L1a是取代的亚烃基。
90.如权利要求88所述的化合物，其中L1a是未取代的亚烃基。
1a
91.如权利要求90所述的化合物，其中L 是
1a
92.如权利要求88所述的化合物，其中L 是取代的亚杂烃基。
1a
93.如权利要求88所述的化合物，其中L 是未取代的亚杂烃基。
1a
94.如权利要求92或93中任一项所述的化合物，其中L 是亚氨基烃基或亚硫代烃基。
1a
95.如权利要求94所述的化合物，其中L 具有以下结构之一：
1a
96.如权利要求88所述的化合物，其中L 是取代的亚烯基。
1a
97.如权利要求88所述的化合物，其中L 是未取代的亚烯基。
1a
98.如权利要求97所述的化合物，其中L 具有以下结构：
1a
99.如权利要求88所述的化合物，其中L 是取代的亚杂环烃基。
1a
100.如权利要求88所述的化合物，其中L 是未取代的亚杂环烃基。
1a
101.如权利要求100所述的化合物，其中L 具有以下结构：
102.如权利要求1至101中任一项所述的化合物，其中L2是键。
103.如权利要求1至101中任一项所述的化合物，其中L2是取代的亚烃基。
104.如权利要求1至101中任一项所述的化合物，其中L2是未取代的亚烃基。
105.如权利要求1至31或62至104中任一项所述的化合物，其中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为H。
106.如权利要求1至31或62至104中任一项所述的化合物，其中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b各自为H。
107.如权利要求1至31或62至105中任一项所述的化合物，其中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为羟烃基。
108.如权利要求1至31或61至105中任一项所述的化合物，其中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为氰基。
109.如权利要求1至31或62至105中任一项所述的化合物，其中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为氨基羰基。
110.如权利要求1至31或62至105中任一项所述的化合物，其中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为C1-C6烃基。
111.如权利要求32至104中任一项所述的化合物，其中R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为H。
112.如权利要求32至104中任一项所述的化合物，其中R32a、R32b、R33a或R33b各自为H。
113.如权利要求32至104中任一项所述的化合物，其中R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为羟烃基。
114.如权利要求32至104中任一项所述的化合物，其中R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为氰基。
115.如权利要求31至104中任一项所述的化合物，其中R32a、R32b、R33a或R33b中至少之一为氨基羰基。
116.如权利要求1所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构之一：
117.如权利要求32所述的化合物，其中所述化合物具有以下结构之一：
118.药物组合物，其包含权利要求1至117中任一项所述的化合物和药物可接受的载体。
119.如权利要求118所述的药物组合物，其中所述药物组合物被配制用于口服给药。
120.如权利要求118所述的药物组合物，其中所述药物组合物被配制用于注射。
121.如权利要求118至120中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物包含额外的抗癌剂。
122.用于治疗癌症的方法，所述方法包括给予有需要的个体有效量的权利要求118至
121中任一项所述的药物组合物。
123.如权利要求122所述的方法，其中所述癌症由K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-Ras G12C突变介导。
124.如权利要求122所述的方法，其中所述癌症是血液癌、胰腺癌、MYH相关性息肉病、结肠直肠癌或肺癌。
125.调节K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白的活性的方法，所述方法包括使所述K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白与权利要求1至117中任一项所述的化合物反应。
126.抑制细胞群体的增殖的方法，所述方法包括使所述的细胞群体与权利要求1至
105中任一项所述的化合物或权利要求118至121中任一项所述的药物组合物接触。
127.如权利要求126所述的方法，其中测量增殖的抑制作为所述细胞群体的细胞活力的下降。
128.用于治疗有需要的个体的由K-Ras G12C、H-Ras G12C或N-Ras G12C突变介导的疾患的方法，所述方法包括：
确定是否所述个体具有K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变；以及
如果确定所述个体具有所述的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变，则给予所述个体治疗有效量的权利要求118至121中任一项所述的药物组合物。
129.如权利要求128所述的方法，其中所述疾患是癌症。
130.如权利要求129所述的方法，其中所述癌症是血液癌、胰腺癌、MYH相关性息肉病、结肠直肠癌或肺癌。
131.制备标记的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白的方法，所述方法包括使所述K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体与权利要求1至117中任一项所述的化合物反应，以产生标记的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C蛋白。
132.抑制肿瘤转移的方法，所述方法包括给予有需要的个体有效量的权利要求118至
121中任一项所述的药物组合物。
说明书全文

KRAS G12C的共价抑制剂

[0001] 背景

技术领域

[0002] Ras表示一组密切相关的189个氨基酸(21kDa分子量)的单体球状蛋白质，其与质膜相连并且结合GDP或GTP。Ras充当分子开关。当Ras包含结合的GDP时，其是处于休眠或静止或关闭状态，并且是“非活化的”。响应于细胞暴露于某些促生刺激，诱导Ras将结合的GDP转换为GTP。随着GTP被结合，Ras是“开启的”，并且能够与其它蛋白相互作用且活化其它蛋白(其“下游靶标”)。Ras蛋白本身具有极低的将GTP水解回到GDP并由此将自身变为关闭状态的固有能力。将Ras转换为关闭需要称作GTP酶激活蛋白(GAPs)的外源性蛋白，其与Ras相互作用并且能大大促进GTP向GDP的转化。任何在Ras中的影响其与GAP相互作用或将GTP转化回到GDP的能力的突变，将会导致所述蛋白的延长的活化，并且因此产生到细胞的延长的信号，该信号告知其继续生长和分裂。因为这些信号会使得细胞生长和分裂，过度活化的Ras信号转导可能最终导致癌症。
[0003] 在结构上，Ras蛋白包含负责Ras-鸟嘌呤核苷酸结合和水解(GTP酶反应)的酶活性的G结构域。它还包含C-末端扩展，称为CAAX盒(box)，其可能是翻译后修饰的并负责将蛋白靶向至薄膜。G结构域的大小约为21-25kDa，并且它包含磷酸结合环(P-loop)。P-loop表示核苷酸结合蛋白质的囊(pocket)，并且这是具有保守氨基酸残基的结构域的刚体部件，其对于核苷酸的结合和水解(甘氨酸12、苏氨酸26和赖氨酸16)是必不可少的。
G结构域还包含所谓的开关I(残基30至40)和开关II(残基60至76)区域，二者均是该
蛋白质的动力部分，由于其在静止与负载状态之间转换的能力，经常被表示为“弹簧负载”机制。关键的相互作用是由苏氨酸-35和甘氨酸-60与GTP的γ-磷酸形成的氢键，其分别在它们的活性构象中维持开关1和开关2区域。GTP水解和磷酸释放后，这两者松弛变成非活化的GDP构象。
[0004] Ras子家族中最重要的成员是HRAS、KRAS和NRAS，主要因为其涉及多种癌症。然而，还有许多其它的成员，包括DIRAS1、DIRAS2、DIRAS3、ERAS、GEM、MRAS、NKIRAS1、NKIRAS2、NRAS、RALA RALB、RAP1A、RAP1B、RAP2A、RAP2B、RAP2C、RASD1、RASD2、RASL10A、RASL10B、RASL11A、RASL11B、RASL12、REM1、REM2、RERG、RERGL、RRAD、RRAS、RRAS2。
[0005] 在RAS基因三个主要亚型(H-Ras、N-Ras或K-Ras)的任一个中的突变均属于人类肿瘤发生的最常见事件。约30％的人类肿瘤中发现了在Ras基因携带一些突变。值得注意地是，在25-30％的肿瘤中检测有K-Ras突变。相比之下，发生在N-Ras和H-Ras家族成员的致癌突变的比率更低得多(分别是8％和3％)。最常见的K-Ras突变被发现在P-loop中的残基G12和G13以及残基Q61。
[0006] G12C是K-Ras基因的经常性突变(甘氨酸-12至半胱氨酸)。该突变已经发现于约13％的癌症事件、约43％的肺癌事件和几乎100％的MYH相关性息肉病(家族结肠癌综合症)。然而使用小分子靶向该基因是项挑战。因此，本领域需要用于靶向Ras(例如，K-Ras、H-Ras和/或N-Ras)的小分子，并且利用其治疗多种疾病，如癌症。本发明提供了这些及其它相关的优点。
[0007] 发明概述
[0008] 本发明提供了能够调节G12C突变体K-Ras、H-Ras和/或N-Ras蛋白的化合物。在一些实例中，该化合物充当能够与K-Ras、H-Ras、或N-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电体。
[0009] 在本发明的一些方面，本文所描述的化合物包含于药物组合物中。在一些实施方案中，该药物组合物包含药物可接受的载体。在本发明的一些方面，该药物组合物适合用于口服给药。在一些实施方案中，该药物组合物适合用于注射。
[0010] 在一个方面，提供了方法。该方法包括调节K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白的活性的方法，其中该方法包括使K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白与本文所描述的任何化合物反应。在一些实施方案中，该方法通过使细胞群体与本文所描述的任何化合物接触，抑制所述细胞群体的增殖。在一些实施方案中，测量抑制细胞增殖的方法作为细胞群体的细胞活力的下降。
[0011] 在一个方面，提供了治疗个体中疾患的方法。个体中疾患的治疗方法包括：(a)确定是否该个体具有K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变；以及(b)如果确定该个体具有所述的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变，则给予该个体治疗有效剂量的包含至少一种本文所描述的化合物的药物组合物。在一些实施方案中，所述疾患是癌症。在一些实施方案中，所述癌症是血液癌、胰腺癌、MYH相关性息肉病、结肠直肠癌或肺癌或NSCLC。
[0012] 在一个方面，提供了制备标记的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白的方法。制备标记的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白的方法包括使K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体与本文所描述的化合物反应，产生标记的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C蛋白。
[0013] 在一个方面，提供了具有通式I的化合物：
[0014]
[0015] 其中X是O或NH、S或CR23、R24；Y是CH2、CHR22、CO、SO或SO2；n是1至6的整数；R1是芳基或杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代；R2是卤素、-OH、氧代、烃氧基、烃基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R3取代基取代；R3是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R4取代基取代；R4是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基；C1是烃基、环烃基、杂环烃基、亚芳基、亚杂芳基或亚杂环烃基；其5
各自可被R取代基取代；C2是键、环烃基、杂环烃基、亚芳基、亚杂芳基、环亚烃基或亚杂环烃基，其中C1和C2可形成稠合的二环或螺二环；D是键、-NH-CH2-、-NH-或-CH2-；R5是OH、烃基或-CH2OH；以及E是能够与K-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电体。
[0016] 在一些实施方案中，通式I的化合物在X位具有O。在其它实施方案中，该X代表NH基团。
[0017] 在一些实施方案中，通式I的化合物在D位具有键。在其它实施方案中，D是NH基团。在其它实施方案中，通式I的化合物在D位具有-NH-CH2-，-NH-CH2-连接至羰基碳。
[0018] 在一些实施方案中，通式I的化合物在E位具有基团，该基团选自：
[0019]
[0020] 在一些实施方案中，通式I的化合物在R1位具有苯基部分，并且在R1位的苯基部分是未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式I的化合物在R1位具有苯并噻二唑基部分，并且其是未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式I的化合物在R1位具有萘基部分，并且其是未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式I的化合物在R1位具有咪唑并吡啶基部分，并且其是未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。
[0021] 在一些实施方案中，通式I的化合物在R2位具有卤素。在其它实施方案中，通式I的化合物在R2位具有OH。在其它实施方案中，通式I的化合物在R2位具有OMe。在其它实施方案中，通式I的化合物在R2位具有芳基或杂芳基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R3取代基取代。在其它实施方案中，通式I的化合物在R2位具有苯基、吡啶基或苯硫基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R3取代基取代。
[0022] 在一些实施方案中，通式I的化合物在-C1-C2-位具有稠合的二环环结构。在一些实施方案中，通式I的化合物在-C1-C2-位具有 在其它实施方案中，通式I的化合物在-C1-C2-位具有 在其它实施方案中，通式I的化合物
在-C1-C2-位具有
[0023] 在一些实施方案中，通式I的化合物在C1具有基团，该基团选自：
[0024]
[0025] 在一些实施方案中，通式I的化合物在C2有基团，该基团选自：
[0026]
[0027] 在一些实施方案中，通式I的化合物选自表1所示的化合物。
[0028] 在另一方面，提供了组合物；该组合物包含具有 结构的通式II的化合物，其中A是-CH2-、-O-或-NH-；R6是芳基或杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R7取代基取代；R7是卤素、-OH、OR10、NR11R12、烃基、氧代、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R8取代基取代；
R8是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R9取代基取代；R10、R11和R12独立地为氢、烃基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基或杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R13取代基取代；R9和R13独立地为卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基；E是能够与K-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电体。
[0029] 在一些实施方案中，通式II化合物的E代表
[0030] 在一些实施方案中，通式II化合物的R1代表芳基，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式II化合物的R1是杂芳基，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在一些实施方案中，通式II化合物的R1代表苯基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在一些实施方案中，通式II化合物的R1代表吡啶基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。
[0031] 在一些实施方案中，通式II化合物的A是O。在其它实施方案中，通式II化合物的A是NH。
[0032] 在一些实施方案中，通式II化合物选自表2所示的化合物。
[0033] 在另一方面，提供了化合物；通式III的化合物具有以下结构：
[0034]
[0035] 其中A是键、O、NH或-C(O)-；n是0或2；R14是环烃基、杂环烃基、芳基或杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R15取代基取代；R15是卤素、OR18、NR19R20、氧代、烃基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R16取代基取代；R16是卤素、OH、烃基、烃氧基、氰基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R17取代基取代；R18、R19和R20独立地为氢、烃基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R21取代基取代；R17或R21独立地为卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基；C1是环烃基或杂环烃基；C2是键、环烃基、杂环烃基、亚芳基或亚杂芳基；其中C1和C2可形成稠合的二环或螺二环；以及E是能够与K-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电体。
[0036] 在一些实施方案中，通式III化合物的A代表O。在其它实施方案中，通式III化合物的A代表-C(O)-。在其它实施方案中，通式III化合物的A代表键。
[0037] 在一些实施方案中，通式III化合物的n代表0。在其它实施方案中，通式III化合物的n代表1。在其它实施方案中，通式III化合物的n代表2。
[0038] 在一些实施方案中，通式III化合物的C2代表键。在一些实施方案中，通式III的化合物的C2代表吡啶基。
[0039] 在一些实施方案中，通式III化合物的C1选自：
[0040]
[0041] 在一些实施方案中，通式III化合物的R1是芳基或杂芳基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式III化合物的R1是苯基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式III化合物的R1是 在其它实施方案中，通式III化合物的R1代表 在其它实施方案中，R1代表吡啶基部分，其为未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在其它实施方案中，通式III化合物的R1代表 在其它实施方案中，通式III化
合物的R1代表
[0042] 在一些实施方案中，通式III化合物的R2代表卤素。在其它实施方案中，通式III化合物的R2代表烃基。在其它实施方案中，通式III化合物的R1代表-CH3。
[0043] 在一些实施方案中，通式III化合物的E代表：
[0044]
[0045] 在一些实施方案中，通式III化合物选自表3所示的化合物。
[0046] 在另一方面，提供了组合物；该组合物包含表4所示的化合物。
[0047] 在其它实施方案中，提供了结构(V)的化合物：
[0048]1 1 2 1 2 3
[0049] 或其药物可接受的盐、互变异构体、立体异构体或前药，其中R、L、L、E、G、G、G、4 30a 30b 31a 31b 32a 32b 33a 33b 1 2 3 4
G、R 、R 、R 、R 、R 、R 、R 、R 、n、n、n和n 如本文所定义。
[0050] 在多个不同的实施方案中还提供了结构(VI)的化合物：
[0051]
[0052] 或其药物可接受的盐、互变异构体、立体异构体或前药，其中A、B、C、L1a、L2、E、G3、4 32a 32b 33a 33b 37a 37e 3 4
G、R 、R 、R 、R 、R 、R 、n、n和m如本文所定义。
[0053] 参考以下详细描述，本发明的这些方面和其它方面将显而易见。为此，本文列出了多个参考文献，其更详细描述了某些背景信息、步骤、化合物和/或组合物，并且各自通过引用整体并入本文。
[0054] 附图的若干视图的简要描述
[0055] 在所附权利要求中具体表述本发明的新特征。参考以下表述示例性实施方案的详细描述可更好地理解本发明的特征和优点，其中利用了本发明的原理，其附图如下：
[0056] 图1示出了Ras的酶活性。
[0057] 图2示出了Ras的信号转导通路。
[0058] 图3示出了一些常见的致癌基因、它们各自的肿瘤类型以及累积突变频率(所有肿瘤)。
[0059] 图4示出了化合物I-189的细胞效价测定的结果。
[0060] 图5示出了化合物I-189、I-92和I-94的细胞效价测定的比较结果。
[0061] 图6示出了化合物I-92和I-95的细胞效价测定的比较结果。
[0062] 图7示出了化合物I-66、I-45和I-91的细胞效价测定的比较结果。
[0063] 图8示出了化合物I-47、I-42和I-60的细胞效价测定的比较结果。
[0064] 发明详述
[0065] 除非另有定义，本文所使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同含义。提到的所有专利和出版物通过引用并入本文。
[0066] 除非上下文另有清楚的指示，如本说明书和权利要求中所使用的，单数形式“一(a)”、“一(an)”以及“该(the)”包括复数个指称。
[0067] “氨基”是指-NH2基团。
[0068] “羧基(Carboxy)”或“羧基(carboxyl)”是指-CO2H基团。
[0069] “氰基”是指-CN基团。
[0070] “羟基(Hydroxy)”或“羟基(hydroxyl)”是指-OH基团。
[0071] “亚氨基”是指＝NH取代基。
[0072] “硝基”是指-NO2基团。
[0073] “氧代”是指＝O取代基。
[0074] “硫代”是指＝S取代基。
[0075] “烃基”是指仅由碳原子和氢原子组成的直链或支链的烃链基团，其为饱和或不饱和的(即包含一个或多个双键和/或三键)，其具有1至12个碳原子(C1-C12烃基)，优选具有1至8个碳原子(C1-C8烃基)或1至6个碳原子(C1-C6烃基)，并且其通过单键与该分子的剩余部分连接，如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)、3-甲基己基、2-甲基己基、乙烯基、丙-1-烯基、丁-1-烯基、戊-1-基、戊-1,4-二烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。烃基包括烯基(一个或多个碳-碳双键)和炔基(一个或多个碳-碳三键)。除非本说明书另外具体规定，烃基是任选取代的。
[0076] “亚烃基”或“亚烃基链”是指将分子的剩余部分连接至基团的仅由碳和氢组成的直链或支链的二价烃链，其为饱和或不饱和的(即包含一个或多个双键和/或三键)，并且具有1至12个碳原子，如亚甲基、乙烯基、丙烯基、正丁烯基、亚乙烯基、亚丙烯基、亚正丁烯基、亚丙炔基、亚正丁炔基等。通过单键或双键将亚烃基链与分子剩余部分连接，并通过单键或双键将亚烃基链与基团连接。亚烃基链与分子的剩余部分和基团的连接点可通过该亚烃基链内的一个碳或任意两个碳。除非本说明书另外具体规定，亚烃基链是任选取代的。
[0077] “亚烯基”是包含一个或多个碳-碳双键的如上所定义的亚烃基。除非本说明书另外具体规定，亚烯基是任选取代的。
[0078] “亚烃基羰基”是指通式-C(C＝O)Ra-的基团，其中Ra是如上所定义的亚烃基链。除非本说明书另外具体规定，亚烃基羰基是任选取代的。
[0079] “亚烯基羰基”是指包含一个或多个碳-碳双键的如上所定义的亚烃基羰基。除非本说明书另外具体规定，亚烯基羰基是任选取代的。
[0080] “烃氧基”是指通式-ORa的基团，其中Ra是包含1至12个碳原子的如上所定义的烃基基团。除非本说明书另外具体规定，烃氧基是任选取代的。
[0081] “烃基氨基”是指通式-NHRa或-NRaRa的基团，其中各个Ra独立地为包含1至12个碳原子的如上所定义的烃基基团。除非说明书另外具体规定，烃基氨基是任选取代的。
[0082] “氨基烃基”是指包含至少一个氨基取代基的烃基基团。该氨基取代基可在三级碳、二级碳或一级碳上。除非本说明书另外具体规定，氨基烃基是任选取代的。
[0083] “烃基氨基烃基”是指包含至少一个烃基氨基取代基的烃基基团。该烃基氨基取代基可以在三级碳、二级碳或一级碳上。除非本说明书另外具体规定，烃基氨基烃基是任选取代的。
[0084] “氨基羰基”是指通式-C(＝O)NRaRb的基团，其中Ra和Rb各自独立地为H或烃基。除非本说明书另外具体规定，氨基羰基是任选取代的。
[0085] “芳基”是指包含氢、6至18个碳原子和至少一个芳香族环的烃环体系。为了本发明的目的，该芳基是单环、二环、三环或四环的环体系，其可包括稠环体系或桥环体系。芳基包括但不仅限于：衍生自醋蒽烯、苊烯、醋菲烯、蒽、甘菊环、苯、 荧蒽、芴、不对称引达省、对称引达省、二氢化茚、茚、萘、迫苯并萘、菲、七曜烯、芘和苯并菲的芳基。除非本说明书另外具体规定，术语“芳基”或前缀“芳(ar-)”(例如在“芳烃基”中的)旨在包括任选取代的芳基基团。
[0086] “亚芳基”是指将分子的剩余部分(例如结构I-VI的化合物)与基团和/或分子的剩余部分连接的二价芳基基团。除非本说明书另外具体规定，亚芳基是任选取代的。
[0087] “芳烃基”是指通式-Rb-Rc-的基团，其中Rb是如上所定义的亚烃基链，并且Rc是一个或多个如上所定义的芳基基团，例如苄基、二苯基甲基等。除非本说明书另外具体规定，芳烃基基团是任选取代的。
[0088] “羧基烃基”是指通式-Rb-Rc-的基团，其中Rb是如上所定义的亚烃基链，并且Rc是如上所定义的羧基基团。除非本说明书另外具体规定，羧基烃基基团是任选取代的。
[0089] “氰基烃基”是指通式-Rb-Rc-的基团，其中Rb是如上所定义的亚烃基链，并且Rc是如上所定义的氰基基团。除非本说明书另外具体规定，氰基烃基基团是任选取代的。
[0090] “环烃基”或“碳环”是指仅由碳原子和氢原子组成的稳定的非芳香族单环或多环烃基团，其可包括稠环体系或桥环体系，并具有3至15个碳原子，优选具有3至10个碳原子，并且其是饱和或不饱和的且通过单键与分子的剩余部分连接。单环基团包括，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。多环基团包括，例如金刚烷基、降冰片基、十氢萘基、7,7-二甲基-二环[2,2,1]庚基等。“环烯基”是在所述环内包含一个或多个碳-碳双键的环烃基。除非本说明书另外具体规定，环烃基(或环烯基)基团是任选取代的。
[0091] 术语“二环烃基”是指由两个环烃基部分组成的未取代或取代的具有两个或更多共同的原子的结构。如果该环烃基部分确切含有两个共同的原子其为所述的“稠合”。实例包括但不限于：二环[3,1,0]己基、十氢萘基等。如果该环烃基部分具有多于两个共同的原子，其为所述的“桥”。实例包括但不仅限于：二环[3,2,1]庚基(“降冰片基”)、二环[2,2,2]辛基等。
[0092] 如本文所使用的，术语“杂原子”或“环杂原子”旨在包括氧(O)、氮(N)、硫(S)和磷(P)。
[0093] 除非另有规定，术语“杂烃基”，其自身或与其它术语结合，是指直链或支链、或环烃基团或其结合，其包含至少一个碳原子和至少一个选自O、N、P、Si和S的杂原子，并且其中所述的氮、磷和硫原子可任选被氧化，并且所述的氮原子可任选被季胺化。一个或多个杂原子O、N、P和S和Si可以在杂烃基基团的任何内部位置或烃基基团与该分子剩余部分连接的位置被替代。该部分的烃基部分是未取代或取代的。
[0094] “亚杂烃基”是指包含至少一个杂原子(例如N、O或S)的亚烃基基团。在一些实施方案中，杂原子在亚烃基链内(即该亚杂烃基包含至少一个碳-杂原子-碳键)。在其它实施方案中，杂原子在亚烃基的末端并因此使亚烃基与分子的剩余部分接合(例如，M1-H-A-M2，其中M1和M2是该分子的部分，H是杂原子，并且A是亚烃基)。除非本说明书另外具体规定，亚杂烃基是任选取代的。
[0095] “亚杂烃基羰基”是指通式-C(＝O)Ra-的基团，其中的Ra是如上所定义的亚杂烃基链。除非本说明书另外具体规定，亚杂烃基羰基是任选取代的。
[0096] 术语“杂二环烃基”是指未取代或取代的二环烃基结构，其中至少一个碳原子被独立地选自氧、氮和硫的杂原子替代。术语“螺烃基”是指未取代或取代的结构，其包含在单个碳接合的至少两个环烃基单元。在多个实施方案中，该螺烃基环可以是1至18个碳。
[0097] 术语“杂螺烃基”是指未取代或取代的螺烃基结构，其中至少一个碳原子被独立地选自氧、氮和硫的杂原子替代。
[0098] “环烃基烃基”是指通式-RbRd的基团，其中Rb是如上所定义的亚烃基链，并且Rd是如上所定义的环烃基基团。除非本说明书另外具体规定，环烃基烃基基团是任选取代的。
[0099] “稠合的”是指与本发明的化合物中存在的环结构稠合的如本文所描述的任何环结构。当该稠环是杂环或杂芳基环时，任何存在的成为稠合杂环或稠合杂芳基环一部分的环结构上的碳原子被氮原子替代。
[0100] “卤素(Halo)”或“卤素(halogen)”是指溴、氯、氟或碘。
[0101] “卤代烃基”是指被一个或多个如上所定义的卤素基团取代的如上所定义的烃基基团，例如三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基等。除非本说明书另外具体规定，卤代烃基基团是任选取代的。
[0102] “杂环基”或“杂环”是指稳定的3-至18-元的非芳香族环基团，其由2至12个碳原子和1至6个选自氮、氧和硫的杂原子构成。除非本说明书另外具体规定，杂环基基团是单环、二环、三环或四环的环体系，其可以包括稠环体系或桥环体系；并且杂环基基团中的氮、碳或硫原子任选被氧化；氮原子可任选被季胺化；并且杂环基基团是部分饱和或完全饱和的。这类杂环基基团的实例包括但不限于：二氧戊环基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、三噻烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基(thiomorpholinyl)、硫代吗啉基(thiamorpholinyl)、1-氧代-硫代吗啉基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。除非本说明书另外具体规定。除非本说明书另外具体规定，杂环基基团是任选取代的。
[0103] “亚杂环烃基”是指二价的饱和杂环基基团，其使该分子(如结构I-VI的化合物)的剩余部分与基团和/或该分子的剩余部分连接。除非本说明书另外具体规定，亚杂环烃基是任选取代的。
[0104] “亚杂环烃基羰基”是指通式-RaC(＝O)-的基团，其中Ra是如上所定义的亚杂环烃基。除非本说明书另外具体规定，亚杂环烃基羰基是任选取代的。
[0105] “N-杂环基”是指包含至少一个氮的如上所定义的杂环基基团，并且其中杂环基基团与分子的剩余部分的连接点是通过杂环基基团中的氮原子。除非本说明书另外具体规定，N-杂环基基团是任选取代的。
[0106] “杂环基烃基(Heterocyclylalkyl)”或“杂环烃基(heterocycloalkyl)”是指通式-RbRe的基团，其中Rb是如上所定义的亚烃基链，并且Re是如上所定义的杂环基基团，并且如果杂环基是含氮的杂环基时，则杂环基在氮原子处任选地与烃基基团连接。除非本说明书另外具体规定，杂环烃基基团是任选取代的。
[0107] “杂芳基”是指包含氢原子、1至13个碳原子、1至6个选自氮、氧和硫的杂原子以及至少一个芳香族环的5-至14-元的环体系基团。为了本发明的目的，杂芳基基团可以是单环、二环、三环或四环的环体系，其可以包括稠环体系和桥环体系；并且杂芳基基团中的氮、碳或硫原子可以任选被氧化；氮原子可以任选被季胺化。实例包括但不限于：氮杂环庚烯基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并吲哚基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂环庚烯基、1,4-苯并二环己烷基、苯并萘并呋喃基、苯并噁唑基、苯并间二氧杂环戊烯基、苯并二氧杂环己烯基、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基、苯并噻吩基、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、呋喃酮基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、吲哚啉基、异吲哚啉基、异喹啉基、吲哚嗪基、异噁唑基、萘啶基、噁二唑基、2-氧代氮杂环庚烯基、噁唑基、环氧乙烷基、1-氧化吡啶基、1-氧化嘧啶基、1-氧化吡嗪基、1-氧化哒嗪基、1-苯基-1H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、喋啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、奎宁环基、异喹啉基、四氢喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基和噻吩基。除非本说明书另外具体规定，杂芳基基团是任选取代的。
[0108] “亚杂芳基”是指二价的饱和杂芳基基团，其使分子(例如结构I-V的化合物)的剩余部分与基团和/或分子的剩余部分连接。除非本说明书另外具体规定，亚杂芳基是任选取代的。
[0109] “亚杂芳基羰基”是指通式-RaC(＝O)-的基团，其中Ra是如上所定义的亚杂芳基。除非本说明书另外具体规定，亚杂芳基羰基是任选取代的。
[0110] “N-杂芳基”是指包含至少一个氮的如上所定义的杂芳基基团，并且其中杂芳基基团与分子的剩余部分的连接点是通过杂芳基基团中的氮原子。除非本说明书另外具体规定，N-杂芳基是任选取代的。
[0111] “杂芳基烃基”是指通式-RbRf的基团，其中Rb是如上所定义的亚烃基链，并且Rf是如上所定义的杂芳基基团。除非本说明书另外具体规定，杂芳基烃基基团是任选取代的。
[0112] “羟烃基”是指包含至少一个羟基取代基的烃基基团。-OH取代基可以在一级碳、二级碳或三级碳上。除非本说明书另外具体规定，羟烃基基团是任选取代的。
[0113] “硫代烃基”是指通式-SRa的基团，其中Ra是包含1至12个碳原子的如以上所定义的烃基基团。除非本说明书另外具体规定，硫代烃基基团是任选取代的。
[0114] 本文中所使用的术语“取代的”是指其中至少一个氢原子被非氢原子的键所替代的任何上述基团(例如，烃基、亚烃基、亚烯基、亚烯基羰基、烃氧基、烃基氨基、氨基烃基、烃基氨基烃基、硫代烃基、芳基、亚芳基、芳烃基、羧基烃基、氰基烃基、环烃基、环烃基烃基、杂烃基、亚杂烃基、亚杂烃基羰基、杂二环烃基、螺烃基、杂螺烃基、卤代烃基、杂环基、亚杂环烃基、亚杂环烃基羰基、N-杂环基、杂环基烃基、杂芳基、亚杂芳基、亚杂芳基羰基、N-杂芳基、羟烃基、硫代烃基和/或杂芳基烃基)，所述的非氢原子例如，但不限于：诸如F、Cl、Br和I的卤素原子；在诸如羟基、烃氧基和酯基的基团中的氧原子；在诸如硫醇基、硫代烃基、砜基、磺酰基和亚砜的基团中的硫原子；在诸如胺、酰胺、烃基胺、二烃基胺、芳基胺、烃基芳基胺、二芳基胺、N-氧化物、酰亚胺和烯胺的基团中的氮原子；在诸如三烃基甲硅烷基、二烃基芳基甲硅烷基、烃基二芳基甲硅烷基和三芳基三芳基甲硅烷基的基团中的硅原子；以及在各种其它基团中的其它杂原子。“取代”还指其中一个或多个氢原子被杂原子的高位键(如双键或三键)替代的任何上述基团，所述杂原子为在例如氧代、羰基、羧基和酯基中的氧；以及在诸如亚胺、肟、腙和腈的基团中的氮。例如，“取代的”包括其中一个或多个氢原子被-NRgRh、-NRgC(＝O)Rh、-NRgC(＝O)NRgRh、-NRgC(＝O)ORh、-NRgSO2Rh、-OC(＝O)NRgRh、-ORg、-SRg、-SORg、-SO2Rg、-OSO2Rg、-SO2ORg、＝NSO2Rg和-SO2NRgRh替代的任何上述基团。“取代的”还指其中一个或多个氢原子被-C(＝O)Rg、-C(＝O)ORg、-C(＝O)NRgRh、-CH2SO2Rg、-CH2SO2NRgRh替代的任何上述基团。在前面所述中，Rg和Rh是相同或不同的，并且独立地为氢、烃基、烃氧基、烃基氨基、硫代烃基、芳基、芳烃基、环烃基、环烃基烃基、卤代烃基、杂环基、N-杂环基、杂环烃基、杂芳基、N-杂芳基和/或杂芳基烃基。“取代的”还指其中一个或多个氢原子被氨基、氰基、羟基、亚氨基、硝基、氧代、硫代基、卤素、烃基、烃氧基、烃基氨基、硫代烃基、芳基、芳烃基、环烃基、环烃基烃基、卤代烃基、杂环基、N-杂环基、杂环烃基、杂芳基、N-杂芳基和/或杂芳基烃基基团的键替代的任何上述基团。此外，各个前面所述的取代基任选地被一个或多个上述取代基取代。
[0115] “亲电体”或“亲电部分”是能够与亲核试剂(例如具有孤对电子、负电荷、部分负电荷和/或多余电子的部分，如-SH基团)反应的任何部分。亲电体通常是缺电子的或包含缺电子的原子。在某些实施方案中，亲电体包含正电荷或部分正电荷，具有包含正电荷或部分正电荷的共振结构，或是其中电子的离域或极化产生一个或多个包含正电荷或部分正电荷的原子的部分。在一些实施方案中，亲电体包含共轭双键，例如α,β-不饱和羰基或α,β-不饱和硫代羰基化合物。
[0116] 术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以实现下文所定义的预期应用的本文所描述的化合物的量，所述预期应用包括但不限于疾病治疗。治疗有效量可以根据预期治疗应用(在活体中)，或所治疗的个体和病况，例如所述个体的体重和年龄、病况的严重程度、给药方式等变化，其可以由本领域技术人员容易地确定。该术语还应用于在靶标细胞中诱导特定应答的剂量，例如血小板粘附和/或细胞移行的下降。具体剂量将根据所选择的具体化合物、即将遵循的给药方案、是否与其它化合物组合给药、给药的时机、给药的组织以及运送其的实体递送系统来变化。
[0117] 如本文所使用的，“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”是指用于获得关于疾病、疾患或医学病况的有益或期望的结果的方法，该结果包括但不限于治疗益处和/或预防益处。治疗益处是指根除或减轻所治疗的潜在疾患。此外，治疗益处是通过根除或减轻与潜在疾患相关的一种或多种生理症状实现的，从而在个体中观察到改善，尽管所述个体可能仍患有潜在疾患。在某些实施方案中，为了预防益处，将组合物给予处于患上特定疾病风险的个体或报告有一种或多种疾病的生理症状的个体，即使该疾病的诊断可能尚未进行。
[0118] 如本文所使用的，术语“治疗效果”包括如上所述的治疗益处和/或预防益处。预防效果包括延迟或消除疾病或病况的出现，延迟或消除疾病或病况症状的发作，减缓、停止或完全改变疾病或病况的发展或其任何组合。
[0119] 如本文所使用的，术语“组合给药(co-administration)”、“与...组合给药(administered in combination with)”和它们的语法上对等的术语，包括给予动物(包括人类)两种或更多的药剂，以使药剂和/或它们的代谢产物均同时存在于个体中。组合给药包括以单独的组合物同时给药、以单独的组合物在不同的时期给药，或以其中两种药剂均存在的组合物给药。
[0120] “药物可接受的盐”包括酸加成盐和碱加成盐。
[0121] “药物可接受的酸加成盐”是指那些保持游离碱的生物有效性和性质(不是生物学上或其它方面不期望的)，并且与无机酸和有机酸形成的盐，所述无机酸例如，但不限于：盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，以及所述有机酸例如，但不限于：乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、藻酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基磺酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、2-氧代-戊二酸、甘油磷酸、羟基乙酸、马尿酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、十二烷酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸、丙酸、焦谷氨酸、丙酮酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、丁二酸、酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟乙酸、十一碳烯酸等。
[0122] “药物可接受的碱加成盐”是指那些保持游离酸的生物有效性和性质(不是生物学上或其它方面不期望的)的盐。该盐由无机碱或有机碱与游离酸的加成制备。源自无机碱的盐包括但不限于：钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。优选的无机盐是铵盐、钠盐、钾盐、钙盐和镁盐。源自有机碱的盐包括但不限于下述物质的盐：伯胺、仲胺和叔胺，被取代的胺包括天然存在的被取代的胺、环胺和碱离子交换树脂，例如氨、异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、二甲基乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、哈胺、胆碱、甜菜碱、苯明、苄星、乙二胺、葡萄糖胺、葡甲胺、可可碱、三乙醇胺、氨基丁三醇、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。特别优选的有机碱是异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。
[0123] 术语“拮抗剂”和“抑制剂”是可交换使用的，并且它们是指具有抑制靶蛋白生物功能的能力的化合物，不论是通过抑制该蛋白如K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C的活性或表达。因此，术语“拮抗剂”和“抑制剂”在靶蛋白的生物学作用的上下文中定义。当本文的优选的拮抗剂特异性地与靶标相互作用(例如结合)时，通过与靶蛋白作为其成员的信号转导通路中的其它成员相互作用而抑制靶蛋白的生物活性的化合物，也特别地包括在该定义中。优选的被拮抗剂抑制的生物活性与肿瘤的发展、生长或扩散相关。
[0124] 本文所使用的术语“激动剂”是指具有能够引发或增强靶蛋白的生物功能的能力的化合物，不论是通过抑制靶蛋白的生物活性或表达。因此，术语“激动剂”在靶标多肽的生物学作用的上下文中定义。当本文优选的激动剂特异性地与靶标相互作用(例如结合)时，通过与靶标多肽作为其成员的信号转导通路的其它成员相互作用而引发或增强把靶标多肽的生物活性的化合物，也特别地包括在该定义中。
[0125] 如本文所使用的，“药剂”或“生物活性剂”是指生物学的、药物学的或化学的化合物或其它部分。非限制性的实例包括简单或复杂的有机或无机分子、肽、蛋白、寡核苷酸、抗体、抗体衍生物、抗体片段、维生素衍生物、碳水化合物、毒素或化学治疗化合物。多种化合物是可以合成的，例如小分子和寡聚物(例如，寡肽和寡核苷酸)，以及基于多种核心结构的合成的有机化合物。此外，多种天然来源可提供用于筛选的化合物，例如植物或动物提取物等。
[0126] “信号转导”是期间刺激性或抑制性信号被传输至细胞内并在细胞内引起应答的过程。信号转导通路的调节剂是指调节一种或多种细胞蛋白的活性的化合物，所述蛋白被定位至相同的特异性信号转导通路。调节剂可以增强(激动剂)或抑制(拮抗剂)信号转导分子的活性。
[0127] “抗癌剂”、“抗肿瘤剂”或“化学治疗剂”是指在肿瘤病况的治疗中有用的任何药剂。一种类型的抗癌剂包括化疗剂。“化学疗法”是指通过多种方法，包括静脉、口服、肌内、腹膜内、膀胱内、皮下、经皮、口腔或吸入或以栓剂形式，给予癌症患者一种或多种化学治疗药物和/或其它药剂。
[0128] 术语“细胞增殖”是指由于分裂而使细胞数目发生变化的现象。该术语还包括细胞生长，从而使细胞形态与增殖信号相一致地变化(例如尺寸增大)。
[0129] 术语“选择性抑制”或“选择性地抑制”是指生物活性剂，是指该试剂能够通过与靶标的直接或间接相互作用，与脱靶信号转导活性相比，优先地降低所述靶标信号转导活性的能力。
[0130] “个体”是指动物，例如哺乳动物如人类。本文所描述的方法均可用于人类治疗和兽医应用。在一些实施方案中，所述个体是哺乳动物，以及在一些实施方案中，所述个体是人类。
[0131] “哺乳动物”包括人类以及诸如实验室动物和家庭宠物(例如猫、狗、猪、牛、绵羊、山羊、马、兔子)的家畜和诸如野生动物等非家畜。
[0132] “放射疗法”是指采用对从业者是已知的常规方法和组合物，使个体暴露于辐射发射体例如发射α粒子的放射性核素(如锕和钍放射性核素)、低线性能量转移(LET)辐射发射体(即β发射体)、转换电子发射体(如锶-89和钐-153-EDTMP或高能辐射，包括但不限于X-射线、γ射线和中子。
[0133] “抗癌剂”、“抗肿瘤剂”或“化学治疗剂”是指在肿瘤病况的治疗中有用的任何药剂。一种类型的抗癌剂包括化疗剂。“化学疗法”是指通过多种方法，包括静脉、口服、肌内、腹膜内、膀胱内、皮下、经皮、口腔或吸入或以栓剂形式，给予癌症患者一种或多种化学治疗药物和/或其它药剂。
[0134] “前药”意为表示可在生理学条件下或通过溶剂分解转化为本文所描述的生物活性化合物(例如结构(I)的化合物)的化合物。因此，术语“前药”是指药物可接受的生物活性化合物的前体。在一些方面，当给药于个体时，前药是不具活性的，但在体内转化为活性化合物，例如通过水解作用。前药化合物通常提供在哺乳动物有机体中的溶解度、组织相容性或缓释方面的益处(参见，例如Bundgard,H.,Design of Prodrugs(前药设计)(1985),pp.7-9,21-24(Elsevier,Amsterdam)。在Higuchi,T.等人“Pro-drugs as Novel Delivery Systems(作为新型递送系统的前药)”,A.C.S.Symposium Series(A.C.S.研讨会系列),Vol.14,以及在Bioreversible Carriers in Drug Design(药物设计中的生物可逆载体),Edward B.Roche编辑，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press,1987中提供了前药的讨论，二者均通过引用全部并入本文。术语“前药”还意图包括当将这类前药给予哺乳动物受体时，在体内释放所述活性化合物的任何共价键合的载体。通常以常规操作或在体内将修饰断裂而成为母体活性化合物的方式，通过修饰存在于所述活性化合物中的官能团来制备如本文所描述的活性化合物的前药。前药包括其中羟基、氨基或巯基与任何基团键合的化合物，当将活性化合物的前药给予哺乳动物个体时，所述的任何基团断裂以分别形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的实例包括但不限于：在所述活性化合物中的羟基官能团的乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物，或氨基官能团的乙酰胺、甲酰胺和苯甲酰胺衍生物等。
[0135] 术语“在体内”是指发生在个体体内的事件。
[0136] 本文公开的发明还意图包括所有结构(I)的药物可接受的化合物，其通过被具有不同原子质量或质量数的原子替代的一个或多个原子进行同位素标记。可掺入所公开的化2 3 11 13 14
合物的同位素实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，分别例如 H、H、C、C、C、
13 15 15 17 18 31 32 35 18 36 123 125
N、N、O、O、O、P、P、S、F、Cl、I和 I。这些放射性同位素标记的化合物可以用
于帮助通过表征例如作用位点或模式或对药理学重要的作用位点的结合亲和力来确定或检测化合物的效能。某些同位素标记的结构(I)的化合物，例如包含放射性同位素的那些
3 14
可用于药物和/或底物组织分布研究。放射性同位素氚(即 H)和碳-14(即 C)，由于它们易于掺入和检测而特别有用于该目的。
[0137] 使用具有较重同位素如氘(即2H)的取代，可提供由较大的代谢稳定性产生的某些治疗益处，例如，增加体内半衰期或减少剂量需求，因此在一些情况下为优选的。
[0138] 具有正电子发射同位素如11C、18F、15O和13N的取代，可用于检测底物受体占有率的正电子发射断层扫描(PET)研究。通常，使用合适的同位素标记的试剂代替之前使用的非标记的试剂，通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与以下制备和实施例中所描述的类似方法来制备结构(I)的同位素标记的化合物。
[0139] 本文公开的发明还意图包括所公开的化合物的体内代谢物。这类产物可由例如所给予的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、酯化等，主要由于酶步骤而产生。因此，本发明包括通过下述方法制备的化合物，所述方法包括给予哺乳动物本发明的化合物，持续时间足以产生其代谢产物。通常，通过给予动物如大鼠、小鼠、豚鼠、猴子或人可检测剂量的本发明放射性同位素标记的化合物，允许足够时间以发生代谢，并分离尿、血液或其它生物样品的转化产物来鉴别这类化合物。
[0140] “稳定的化合物”和“稳定的结构”意为表示足够稳定而在经从反应混合物中分离后以有用的纯度存在并配置为有效治疗剂的化合物。
[0141] 通常，结晶产生所述化合物的溶剂化物。如本文所使用的，术语“溶剂化物”是指包含具有一个或多个溶剂分子的一个或多个本发明化合物分子的聚集体。在一些实施方案中，溶剂为水，在该情况下所述的溶剂化物是水合物。或者，在其它实施方案中，所述溶剂是有机溶剂。因此，本发明的化合物可以水合物存在，包括一水合物、二水合物、半水合物、倍半水合物、三水合物、四水合物等，以及相应的溶剂化物形式存在。在一些方面，本发明的化合物是真正的溶剂化物，而在其它情况下，本发明的化合物仅保持外来水或水和一些外来溶剂的混合物。
[0142] “任选的”或“任选地”意为随后所描述的各种情形的事件可能发生或可能不发生，并且该描述包括所述事件或情形发生的实例和不发生的实例。例如，“任选地取代的芳基”意味所述芳基可能被取代或可能不被取代，并且该描述包括取代的芳基基团和没有取代的芳基基团。
[0143] “药物组合物”是指本发明的化合物和通常本领域可接受的用于向哺乳动物如人递送生物活性化合物的媒介物的制剂。这类媒介物包括其中的所有药物可接受的载体、稀释剂或赋型剂。
[0144] “药物可接受的载体、稀释剂或赋型剂”包括但不限于，由美国食品或药物管理局批准为对用于人类或家畜可接受的任何辅药、载体、赋型剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、增味剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。
[0145] 本发明的化合物，或它们的药物可接受的盐可包含一个或多个不对称中心，并因此产生根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-，或氨基酸的(D)-或(L)-的对映异构体、非对映异构体和其它立体异构体形式。本发明意图包括所有这些可能的异构体，以及它们的外消旋形式和光学纯形式。可使用手性合成子或手性试剂制备光学活性的(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体，或采用常规技术例如色谱和分级结晶进行拆分。用于制备/分离单独的对映异构体的常规技术，包括从合适的光学纯前体进行手性合成或使用例如手性高压液相色谱(HPLC)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。当本文所描述的化合物包含烯烃双键或其它几何不对称中心时，并且除非另外规定，其旨在所述化合物包括E和Z几何异构体。同样地，还旨在包括所有互变异构形式。
[0146] 现有发明包括本发明化合物的所有旋转异构体形式和以构象限制的状态。
[0147] “立体异构体”是指由相同的键键合的相同原子组成的、但具有不同三维结构的化合物，其不可互相交换。本发明包括多种立体异构体及其混合物，并包括“对映异构体”，其是指分子间彼此为非重叠镜像的两个立体异构体。
[0148] “互变异构体”是指质子从分子的一个原子转移至相同分子的另一个原子。本发明包括任何所述化合物的互变异构体。
[0149] 本文所使用的化学命名规程和结构图是I.U.P.A.C.命名体系的修正形式，使用ACD/命名9.70版软件程序和/或ChemDraw Ultra 11.0.1版软件命名程序
(CambridgeSoft)。对于本文使用的复杂化学命名，通常在取代基所连接的基团之前命名该取代基基团。例如，环丙基乙基包含具有环丙基取代基的乙基骨架。除以下所述，本文所有的键在化学结构图中被确认，一些碳原子上的所有键除外，其被假设为与足够的氢原子键合以完成化合价。
[0150] 化合物
[0151] 在一个方面，本发明提供了能够选择性结合和/或调节G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的化合物。在一些实施方案中，化合物通过与氨基酸反应来调节G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白。在一些实施方案中，本发明的化合物通过与12位的半胱氨酸形成不可逆共价键，选择性地与G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白反应。本发明的化合物通过与半胱氨酸12结合可以锁定G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras的开关II为非活性状态。所述非活性状态可区别于所观察到的用于GTP和GDP结合K-Ras、H-Ras或N-Ras的那些状态。本发明的一些化合物还能够干扰开关I的构象。因为与K-Ras、H-Ras或N-Ras结合的效应器对开关I和开关II的构象高度敏感，所以这些化合物的不可逆的结合可以破坏K-Ras、H-Ras或N-Ras的下游信号转导。
[0152] 在一些实施方案中，本发明提供了通式I的化合物
[0153]
[0154] 在多个实施方案中，Y是-CH2-、-CHR22-、CO、SO或SO2。在一些实施方案中，Y是-CH2-。在一些实施方案中，Y是-CHR22-。在一些实施方案中，Y是CO。在一些实施方案中，Y是SO。在一些实施方案中Y，是SO2。
[0155] 在多个实施方案中，n是1至6的整数。在一些情况下，n是1。在一些情况下，n是2。在一些情况下，n是3。在一些情况下，n是4。在一些情况下，n是5。在一些情况下，n是6。
[0156] R1是芳基或杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R2取代基取代。在一些实施方案中，R1是取代的芳基。在一些情况下，R1是未取代的芳基。在一些情况下，R1是取代的杂芳基。在一些情况下，R1是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R1是一个或多个R3基团取代的芳基。在一些实施方案中，R1是一个或多个R3基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R1是取代或未取代的苯基。在一些实施方案中，R1是未取代的苄基。在一些实施方案中，R1是一个或多个独立的R2取代基取代的苯基。在一些实施方案中，R1是未取代的苯并噻二唑基团。在一些实施方案中，R1是一个或多个独立的R2取代基取代的苯并噻二唑基团。在一些实施方案中，R1是未取代的苯并噻二唑基。在一些实施方案中，R1是一个或多个独立的R2取代基取代的苯并噻二唑基。在一些实施方案中，R1是萘基。在一些实施方案中，R1是一个或多个独立的R2取代基取代的萘基。在一些实施方案中，R1是咪唑并吡啶基萘基。在一些实施方案中，R1是一个或多个独立的R2取代基取代的咪唑并吡啶基。
[0157] 在一些实施方案中，R1是未取代的苯基。在一些实施方案中，R1是取代的苯基(通式Ia)。在一些实施方案中，R1是在苯环4-位具有卤素取代基的苯基。在一些实施方案中，R1是在5-位的取代或未取代的芳基取代的苯基。在一些实施方案中，R1是在5-位的取代或未取代的杂芳基取代的苯基。在一些实施方案中，R1是在5-位的取代或未取代的环烃基取代的苯基。在一些实施方案中，R1是在5-位的取代或未取代的杂环芳基(杂芳基)取代的苯基。在一些实施方案中，R1是在苯环的2位具有烃氧基取代基的苯基。在一些实施方案中，R1是在苯环的2位具有甲氧基取代基的苯基。在一些实施方案中，R1是在苯环的2位具有甲氧基取代基，4位具有卤素取代基，以及5位具有芳基或杂芳基(二者均为取代或未取代的)取代基的苯基。
[0158]
[0159] 在一些实施方案中，R1能与K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白可逆相互作用。在一些实施方案中，R1对K-Ras、H-Ras或N-Ras具有高亲和力，并且对G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras具有高度特异性。在一些实施方案中，R1能够与K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白进行疏水相互作用。在一些实施方案中，R1能与G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的多个残基形成氢键。在一些实施方案中，R1与K-Ras G12C的G10、R68、Y71、Y96或Q99残基(图1)中一个或多个相互作用。在一些实施方案中，R1与K-Ras G12C中的G10残基相互作用。在一些实施方案中，R1与K-Ras G12C中的R68残基相互作用。在一些实施方案中，R1与K-Ras G12C中的Y71残基相互作用。在一些实施方案中，R1与K-Ras G12C中的Y96残基相互作用。在一些实施方案中，R1与K-Ras G12C中的Q99残基相互作用。
[0160] R2每次出现时独立地为卤素、氧代、羟基、取代或未取代的烃氧基、取代或未取代的烃基、取代或未取代的环烃基、取代或未取代的杂烃基、取代或未取代的杂环烃基、芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的亚芳基或取代或未取代的亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R3取代基取代。在一些实施方案中，R2是卤素。在一些实施方案中，R2是羟基。在一些实施方案中，R2是一个或多个独立的R3取代基取代的烃氧基。在一些实施方案中，R2是未取代的烃氧基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的烃基。在一些实施方案中，R2是未取代的烃基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R2是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R2是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R2是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的芳基。在一些实施方案中，R2是未取代的芳基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R2是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，R2是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，R2是一个或多个R3基团取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R2是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R2是卤素。
在一些实施方案中，R2是羟基。在一些实施方案中，R2是烃氧基。在一些实施方案中，R2是甲氧基。在一些实施方案中，R2是氧代。
[0161] R3是卤素、OH、氰基、取代或未取代的烃基、取代或未取代的烃氧基、取代或未取代的环烃基、取代或未取代的杂烃基、取代或未取代的环杂烃基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的亚芳基、取代或未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R3是卤素。在一些实施方案中，R3是羟基。在一些实施方案中，R3是氰基。在一些实施方案中，R3是未取代的烃基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的烃基。在一些实施方案中，R3是未取代的烃氧基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的烃氧基。在一些实施方案中，R3是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R3是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R3是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R3是未取代的芳基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的芳基。在一些实施方案中，R3是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R3是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，R3是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R3是一个或多个R4基团取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R3是卤素。在一些实施方案中，R3是羟基。在一些实施方案中，R3是氰基。
[0162] 在多个实施方案中，R4是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基部分。在一些实施方案中，R4是卤素。在一些实施方案中，R4是羟基。在一些实施方案中，R4是氰基。在一些实施方案中，R4是烃基。在一些实施方案中，R4是烃氧基。在一些实施方案中，R4是环烃基。在一些实施方案中，R4是杂烃基。在一些实施方案中，R4是杂环烃基。在一些实施方案中，R4是芳基。在一些实施方案中，R4是杂芳基。在一些实施方案中，R4是亚芳基。在一些实施方案中，R4是亚杂芳基。
[0163] 在多个实施方案中，C1是取代或未取代的烃基、取代或未取代的环亚烃基、取代或未取代的亚杂环烃基、取代或未取代的亚芳基、或取代或未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的环亚烃基。在一些实施方案中，C1是未取代的环亚烃基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的亚杂环烃基。在一些实施方案中，C1是未取代的亚杂环烃基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，C1是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C1是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C1选自：
[0164]
[0165]
[0166] 在一些实施方案中，C1是
[0167] 在一些实施方案中，R5是-OH。在一些实施方案中，R5是-CH2OH。在一些实施方案中，R5是烃基。在一些实施方案中，R5是甲基。
[0168] 在一些实施方案中，C2是键、环亚烃基、亚杂环烃基、亚芳基或亚杂芳基。在一些实施方案中，C2是键。在一些实施方案中，C2是未取代的环亚烃基。在一些实施方案中，C2是未取代的亚杂环烃基。在一些实施方案中，C2是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，C2是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C2选自：
[0169]
[0170] 在一些实施方案中，C1和C2形成稠合的二环或螺二环。在一些实施方案中，-C1-C2-形成稠合的二环。在一些实施方案中，-C1-C2-形成螺二环。在一些实施方案中，-C1-C2-是 在一些实施方案中，-C1-C2-是 在一些实施方
案中，-C1-C2-是
[0171] 在多个实施方案中，X是O、NH、S或CR23R24。在一些实施方案中，X是O。在一些实施方案中，X是NH。在多个实施方案中，X是S。在多个实施方案中，X是CR23R24。
[0172] 在多个实施方案中，D是键、-NH-CH2-、-NH-或-CH2-。在多个实施方案中，D是键。在多个实施方案中，D是-NH-CH2。在多个实施方案中，D是-NH-。在多个实施方案中，D是-CH2-。
[0173] R22、R23和R24各自独立地为氢、卤素、-OH、烃基、环烃基、芳基、杂芳基、杂烃基或杂环烃基。
[0174] 在一些实施方案中，E是能够与包含G12C突变的K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白键合的亲电体。在一些实施方案中，亲电体E能与G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白形成不可逆共价键。在一些情况下，亲电体E与G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的12位的半胱氨酸残基键合。在一些情况下E选自：
[0175]
[0176] 在一些实施方案中，E为 在一些实施方案中，E为 在一些实施方案中，E为 在一些实施方案中，E为 在一些实施方案中，E
为
[0177] 在一些实施方案中，本发明提供了如表1所示的通式I的化合物。
[0178] 在一些实施方案中，本发明提供了通式II的化合物
[0179]
[0180] 在多个实施方案中，A是CH2、O-或NH。在一些实施方案中，A是CH2。在一些实施方案中，A是O。在一些实施方案中，A是NH。
[0181] 在多个实施方案中，R6是芳基或杂芳基部分，其各自是未取代的或被一个或多个R7基团取代。在一些实施方案中，R6是未取代的芳基。在一些实施方案中，R6是一个或多个R7基团取代的芳基。在一些实施方案中，R6是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R6是一个或多个R7基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R6是取代或未取代的苯基部分。在一些实施方案中，R6是未取代的苯基部分。在一些实施方案中，R6是一个或多个R7基团取代的苯基部分。在一些实施方案中，R6是取代或未取代的吡啶基部分。在一些实施方案中，R6是未取代的吡啶基部分。在一些实施方案中，R6是一个或多个R7基团取代的吡啶基部分。
[0182] R7是卤素、-OH、OR10、NR11R12、氧代、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的亚芳基、或未取代或取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R7是卤素。在一些实施方案中，R7是OH。在一些实施方案中，R7是OR10。在一些实施方案中，R7是NR11R12。在一些实施方案中，R7是未取代的烃基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的烃基。在一些实施方案中，R7是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的环烃基。在一些实施方案中，R7是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的杂烃基。在一些实施方案中，R7是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R7是未取代的芳基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的芳基。在一些实施方案中，R7是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的杂芳基。在一些实施方案中，R7是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的亚芳基。在一些实施方案中，R7是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R7是一个或多个R8取代基取代的亚杂芳基。
[0183] 在多个实施方案中，R8是卤素、-OH、氰基、未取代或取代的烃基、未取代或取代的烃氧基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、未取代或取代的杂芳基、未取代或取代的亚芳基、或未取代或取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R8是卤素。在一些实施方案中，R8是OH。在一些实施方案中，R8是氰基。在一些实施方案中，R8是未取代的烃基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的烃基。在一些实施方案中，R8是未取代的烃氧基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的烃氧基。在一个实施方案中，R8是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R8是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R8是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R8是未取代的芳基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的芳基。在一些实施方案中，R8是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R8是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，R8是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R8是一个或多个R9基团取代的亚杂芳基。
[0184] 在多个实施方案中，R10是氢、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、或未取代或取代的杂芳基。在一些实施方案中，R10是氢。在一些实施方案中，R10是未取代的烃基。在一些实施方案中，R10是一个或多个R13基团取代的烃基。在一些实施方案中，R10是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R10是一个或多个R13基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R10是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R10是一个或多个R13基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R10是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R10是一个或多个R13基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R10是未取代的芳基。在一些实施方案中，R10是一个或多个R13基团取代的芳基。在一些实施方案中，R10是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R10是一个或多个R13基团取代的杂芳基。
[0185] 在多个实施方案中，R11是氢、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、或未取代或取代的杂芳基。在一些实施方案中，R11是氢。在一些实施方案中，R11是未取代的烃基。在一些实施方案中，R11是一个或多个R13基团取代的烃基。在一些实施方案中，R11是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R11是一个或多个R13基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R11是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R11是一个或多个R13基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R11是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R11是一个或多个R13基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R11是未取代的芳基。在一些实施方案中，R11是一个或多个R13基团取代的芳基。在一些实施方案中，R11是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R11是一个或多个R13基团取代的杂芳基。
[0186] 在多个实施方案中，R12是氢、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、或未取代或取代的杂芳基。在一些实施方案中，R12是氢。在一些实施方案中，R12是未取代的烃基。在一些实施方案中，R12是一个或多个R13基团取代的烃基。在一些实施方案中，R12是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R12是一个或多个R13基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R12是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R12是一个或多个R13基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R12是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R12是一个或多个R13基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R12是未取代的芳基。在一些实施方案中，R12是一个或多个R13基团取代的芳基。在一些实施方案中，R12是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R12是一个或多个R13基团取代的杂芳基。
[0187] 在多个实施方案中，R9是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基。在多个实施方案中，R9是卤素。在多个实施方案中，R9是OH。在多个实施方案中，R9是氰基。在多个实施方案中，R9是烃基。在多个实施方案中，R9是环烃基。在多个实施方案中，R9是杂烃基。在多个实施方案中，R9是杂环烃基。在多个实施方案中，R9是芳基。在多个实施方案中，R9是杂芳基。在多个实施方案中，R9是亚芳基。在多个实施方案中，R9是亚杂芳基。
[0188] 在多个实施方案中，R13是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基。在多个实施方案中，R13是卤素。在多个实施方案中，R13是OH。在多个实施方案中，R13是氰基。在多个实施方案中，R13是烃基。在多个实施方案中，R13是环烃基。在多个实施方案中，R13是杂烃基。在多个实施方案中，R13是环杂烃基。在多个实施方案中，R13是芳基。在多个实施方案中，R13是杂芳基。在多个实施方案中，R13是亚芳基。在多个实施方案中，R13是亚杂芳基。
[0189] 在一些实施方案中，E是能与包含G12C突变的K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白键合的亲电体。在一些实施方案中，亲电体E能够与G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白形成不可逆共价键。在一些情况下，亲电体E与G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的12位的半胱氨酸残基键合。
[0190] 在一些情况下，E具有通式结构
[0191]
[0192] 其中：
[0193] R25是烃基；
[0194] R26是氰基或烃基，或R26与R27接合形成环亚烃基；以及
[0195] R27是烃基，或R27与R26接合形成环亚烃基。
[0196] 一些情况下，E选自：
[0197]
[0198] 在一些实施方案中，E是 在一些实施方案中，E是 在一些实施方案中，E是 在一些实施方案中，E是
[0199] 在一些实施方案中，R6能与K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白可逆相互作用。在一些实施方案中，R6部分对K-Ras、H-Ras或N-Ras具有高亲和力，并且对G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras具有高度特异性。在一些实施方案中，R6能够与K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C疏水相互作用。在一些实施方案中，R6能与G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的多个残基形成氢键。在一些实施方案中，R6与K-Ras G12C的G10、R68、Y71、Y96或Q99残基中一个或多个(图1)相互作用。在一些实施方案中，R6部分与K-Ras G12C的G10残基相互作用。在一些实施方案中，R6与K-Ras G12C的R68残基相互作用。在一些实施方案中，R6与K-Ras G12C的Y71残基相互作用。在一些实施方案中，R6与K-Ras G12C的Y96残基相互作用。在一些实施方案中，R6与K-Ras G12C的Q99残基相互作用。
[0200] 在一些实施方案中，通式II中的 单元对化合物提供了适当的长度和几何结构，以使亲电体E与G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的12位的半胱氨酸残基相互作用。此外在一些实施方案中， 与其它蛋白骨架残基相互作用。
[0201] 在一些实施方案中，本发明提供了如表2所示的通式II的化合物。
[0202] 在一些实施方案中，本发明提供了通式III的化合物
[0203]
[0204] 在多个实施方案中，A是键、O、NH或-(CO)-。在一些实施方案中，A是键。在一些实施方案中，A是O。在一些实施方案中，A是NH。在一些实施方案中A是-C(O)-。
[0205] 在多个实施方案中，n是0或1。在一些情况下，n是0。在一些情况下，n是1。
[0206] 在多个实施方案中，R14是环烃基、杂环烃基、芳基或杂芳基部分。在一些实施方案中，R14是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R14是一个或多个R15基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R14是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R14是一个或多个R15基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R14是未取代的芳基。在一些实施方案中，R14是一个或多个R15基团取代的芳基。在一些实施方案中，R14是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R14是一个或多个R15基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R14是未取代的苯基。在一些实施方案中，R14是一个或多个R15基团取代的苯基。
[0207] 在多个实施方案中，R15是卤素、OR18、NR19R20、氧代、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R3取代基取代。在一些实施方案中，R15是卤素。在一些实施方案中，R15是氰基。在一些实施方案中，R15是NR19R20。在一些实施方案中，R15是氧代。在一些实施方案中，R15是OR18。在一些实施方案中，R15是未取代的烃基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的烃基。在一些实施方案中，R15是未取代的烃氧基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的烃氧基。在一些实施方案中，R15是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R15是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R15是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R15是未取代的芳基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的芳基。在一些实施方案中，R15是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R15是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，R15是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R15是一个或多个R16基团取代的亚杂芳基。
[0208] 在多个实施方案中，R16是卤素、OH、氧代、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基，其各自是未取代的或被一个或多个独立的R17取代基取代。在一些实施方案中，R16是卤素。在一些实施方案中，R16是OH。在一些实施方案中，R16是氰基。在一些实施方案中，R16是未取代的烃基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的烃基。在一些实施方案中，R16是未取代的烃氧基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的烃氧基。在一些实施方案中，R16是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R16是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R16是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R16是未取代的芳基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的芳基。在一些实施方案中，R16是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的杂芳基。在一些实施方案中，R16是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，R16是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，R16是一个或多个R17基团取代的亚杂芳基。
[0209] 在多个实施方案中，R18是氢、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、或未取代或取代的杂芳基。在一些实施方案中，R18是氢。在一些实施方案中，R18是未取代的烃基。在一些实施方案中，R18是一个或多个R21基团取代的烃基。在一些实施方案中，R18是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R18是一个或多个R21基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R18是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R18是一个或多个R21基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R18是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R18是一个或多个R21基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R18是未取代的芳基。在一些实施方案中，R18是一个或多个R21基团取代的芳基。在一些实施方案中，R18是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R18是一个或多个R21基团取代的杂芳基。
[0210] 在多个实施方案中，R19是氢、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、或未取代或取代的杂芳基。在一些实施方案中，R19是氢。在一些实施方案中，R19是未取代的烃基。在一些实施方案中，R19是一个或多个R21基团取代的烃基。在一些实施方案中，R19是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R19是一个或多个R21基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R19是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R19是一个或多个R21基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R19是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R19是一个或多个R21基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R19是未取代的芳基。在一些实施方案中，R19是一个或多个R21基团取代的芳基。在一些实施方案中，R19是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R19是一个或多个R21基团取代的杂芳基。
[0211] 在多个实施方案中，R20是氢、未取代或取代的烃基、未取代或取代的环烃基、未取代或取代的杂烃基、未取代或取代的杂环烃基、未取代或取代的芳基、或未取代或取代的杂芳基。在一些实施方案中，R20是氢。在一些实施方案中，R20是未取代的烃基。在一些实施方案中，R20是一个或多个R21基团取代的烃基。在一些实施方案中，R20是未取代的环烃基。在一些实施方案中，R20是一个或多个R21基团取代的环烃基。在一些实施方案中，R20是未取代的杂烃基。在一些实施方案中，R20是一个或多个R21基团取代的杂烃基。在一些实施方案中，R20是未取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R20是一个或多个R21基团取代的杂环烃基。在一些实施方案中，R20是未取代的芳基。在一些实施方案中，R20是一个或多个R21基团取代的芳基。在一些实施方案中，R20是未取代的杂芳基。在一些实施方案中，R20是一个或多个R21基团取代的杂芳基。
[0212] 在多个实施方案中，R17是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基。在多个实施方案中，R17是卤素。在多个实施方案中，R17是OH。在多个实施方案中，R17是氰基。在多个实施方案中，R17是烃基。在多个实施方案中，R17是环烃基。在多个实施方案中，R17是杂烃基。在多个实施方案中，R17是杂环烃基。在多个实施方案中，R17是芳基。在多个实施方案中，R17是杂芳基。在多个实施方案中，R17亚芳基。在多个实施方案中，R17是亚杂芳基。
[0213] 在多个实施方案中，R21是卤素、OH、氰基、烃基、烃氧基、环烃基、杂烃基、杂环烃基、芳基、杂芳基、亚芳基或亚杂芳基。在多个实施方案中，R21是卤素。在多个实施方案中，R21是OH。在多个实施方案中，R21是氰基。在多个实施方案中，R21是烃基。在多个实施方案中，R21是环烃基。在多个实施方案中，R21是杂烃基。在多个实施方案中，R21是杂环烃基。在多个实施方案中，R21是芳基。在多个实施方案中，R21是杂芳基。在多个实施方案中，R21亚芳基。在多个实施方案中，R21是亚杂芳基。
[0214] 在多个实施方案中，C1是取代或未取代的烃基。在一些实施方案中，C1是取代或未取代的环亚烃基、取代或未取代的亚杂环烃基、取代或未取代的亚芳基、或取代或未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的环亚烃基。在一些实施方案中，C1是未取代的环亚烃基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的亚杂环烃基。在一些实施方案中，C1是未取代的亚杂环烃基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的亚芳基。在一些实施方案中，C1是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，C1是一个或多个R5基团取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C1是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C1选自
[0215] 在一些实施方案中，C1是
[0216] 在一些实施方案中，R5是-OH。在一些实施方案中，R5是-CH2OH。在一些实施方案中，R5是烃基。
[0217] 在多个实施方案中，C2是键、环亚烃基、亚杂环烃基、亚芳基或亚杂芳基。在一些实施方案中，C2是键。在一些实施方案中，C2是未取代的环亚烃基。在一些实施方案中，C2是未取代的亚杂环烃基。在一些实施方案中，C2是未取代的亚芳基。在一些实施方案中，C2是未取代的亚杂芳基。在一些实施方案中，C2选自
[0218] 在一些实施方案中，C1或C2形成稠合的二环或螺二环。在一些实施方案中，-C1-C2-形成稠合的二环。在一些实施方案中，-C1-C2-形成螺二环。在一些实施方案中，-C1-C2-是 在一些实施方案中，-C1-C2-是 在一些实施方
案中，-C1-C2-是
[0219] 在一些实施方案中，E是能够与包含G12C突变的K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白键合的亲电体。在一些实施方案中，亲电体E能与G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白形成不可逆共价键。在一些情况下，E是通用结构
[0220]
[0221] R25是烃基。R26是氰基或烃基。R27是烃基。R26和R27可形成环亚烃基。
[0222] 在一些通式III 的化合物的前述实施方案中，E 选自
[0223] 在一些实施方案中，E是 在一些实施方案中，E是 在一些实施方案中，E是 在一些实施方案中，E是
[0224] 在一些实施方案，R14能与K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变体蛋白可逆相互作用。在一些实施方案中，R14部分对K-Ras、H-Ras或N-Ras具有高亲和力，并且对G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras具有高度特异性。在一些实施方案中，R14能够与K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C疏水相互作用。在一些实施方案中，R14能与G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的多个残基形成氢键。在一些实施方案中，R14与K-Ras G12C的G10、R68、Y71、Y96或Q99残基(图1)中一个或多个相互作用。在一些实施方案中，R14部分与K-Ras G12C中的G10残基相互作用。在一些实施方案中，R14与K-Ras G12C中的R68残基相互作用。在一些实施方案中，R14与K-Ras G12C中的Y71残基相互作用。在一些实施方案中，R14与K-Ras G12C中的Y96残基相互作用。在一些实施方案中，R14与K-Ras G12C中的Q99残基相互作用。
[0225] 在一些实施方案中，通式III中的 单元对化合物提供了适当的长度和几何结构，以使亲电体E与G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的12位的半胱氨酸残基相互作用。在一些实施方案中， 还与其它蛋白骨架残基相互作用。
[0226] 在一些实施方案中，本发明提供了如表3所示的通式III的化合物。
[0227] 在一些实施方案中，本发明提供了如表4所示的化合物。
[0228] 仍然是在其它实施方案中，本发明提供了具有以下结构(V)的化合物：
[0229]
[0230] 或其药物可接受的盐、互变异构体、立体异构体或前药，
[0231] 其中：
[0232] R1是芳基或杂芳基；
[0233] R30a和R30b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、30a 30b
C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；
30a
或R 是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或
30b 31b
氨基羰基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
[0234] R31a和R31b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、31a 31b
C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；
31a
或R 是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或
31b 30b
氨基羰基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
[0235] R32a和R32b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、32a 32b
C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；
32a
或R 是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或
32b 33b
氨基羰基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
[0236] R33a和R33b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、33a 33b
C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；
33a
或R 是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或
33b 32b
氨基羰基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
[0237] L1是羰基、-NHC(＝O)-、亚烃基、亚烯基、亚杂烃基、亚杂环烃基、亚杂芳基、亚烃基羰基、亚烯基羰基、亚杂烃基羰基、亚杂环烃基羰基或亚杂芳基羰基；
[0238] L2是键或亚烃基；
[0239] G1、G2、G3和G4各自独立地为N或CR，其中R为H、氰基、卤素或C1-C6烃基；
[0240] n1、n2、n3和n4各自独立地为1、2或3；以及
[0241] E是能够与K-Ras、H-Ras、或N-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
[0242] 在结构V的化合物的一些实施方案中，L1是羰基、-NHC(＝O)-、亚烃基、亚杂烃基、亚烃基羰基或亚杂烃基羰基；
[0243] 在一些其它实施方案中，化合物具有以下结构(Va)：
[0244]
[0245] 其中：
[0246] L1a是键、-NH-、亚烃基、亚烯基、亚杂烃基、亚杂环烃基或亚杂芳基。
[0247] 在化合物(Va)的其它实施方案中，L1a是键、-NH-、亚烃基或亚杂烃基。
[0248] 在一些更多的实施方案中，化合物具有以下结构(Vb)：
[0249]
[0250] 其中：
[0251] Q是-C(＝O)-、-NR34C(＝O)-、-S(＝O)2-或-NR34S(＝O)2-；
[0252] R34为H、C1-C6烃基或羟烃基；
[0253] 为碳-碳双键或碳-碳三键；以及
[0254] 当 为双键时，R35和R36各自独立地为H、氰基、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基35 36 35 36
烃基或羟烃基，或R 和R 接合形成碳环或杂环；或当 为三键时R 不存在，且R 为H、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基烃基或羟烃基。
[0255] 在一些不同的实施方案中，化合物具有以下结构(Vc)、(Vd)、(Ve)或(Vf)之一：
[0256]
[0257] 仍然是在其它实施方案中，其中化合物具有以下结构(Vg)、(Vh)、(Vi)或(Vj)之一：
[0258]
[0259] 在一些其它方案中，化合物具有以下结构(Vk)、(Vl)、(Vm)、(Vn)、(Vo)或(Vp)之一：
[0260]
[0261]
[0262] 在多个其它实施方案中，R1是芳基。例如，在一些实施方案中，该芳基是二环的，如稠合的二环芳基。在一些更多的实施方案中，该芳基是萘基。
[0263] 在多个其它实施方案中，该芳基是单环的。例如，在一些实施方案中，该芳基是苯基。
[0264] 在前述的一些实施方案中，该芳基是未取代的。在其它前述的实施方案中，该芳基被一个或多个取代基取代。例如，在一些实施方案中，该取代基选自：卤素、羟基、氰基、氨基羰基、甲酰基、C1-C6烃基、C1-C6烃基磺酰基、C1-C6卤代烃基、C3-C8环烃基、C1-C6烃氧基、C1-C6羟烃基、C1-C6烃氧基烃基、C1-C6氨基烃基、脂肪族杂环基、杂芳基和芳基。
[0265] 在其它实施方案中，该芳基取代基选自氟、氯、溴、碘、羟基、氰基、甲基、乙基、异丙基、甲磺酰基、甲氧基、氨基羰基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基、环丁基、环丙基和苯基，其中环丙基和苯基任选地被一个或多个选自C1-C6烃基、卤素、羟基和氰基的取代基取代。
[0266] 在一些不同的实施方案中，该取代基选自氟、氯、溴、碘、羟基、氰基、甲基、乙基、甲磺酰基、甲氧基、氨基羰基、三氟甲基、环丙基和苯基，其中环丙基和苯基任选地被一个或多个选自卤素、羟基和氰基的取代基取代。
[0267] 在其它典型的实施方案中，该芳基取代基选自氟、氯、溴、碘、羟基、甲基、乙基、环丁基和环丙基，其中环丙基任选地被一个或多个选自C1-C6烃基、卤素、羟基和氰基的取代基取代。
[0268] 在一些更多的实施方案中，该取代基选自氟、氯、溴、碘、羟基、甲基、乙基和环丙基，其中环丙基任选地被一个或多个选自卤素、羟基和氰基的取代基取代。
[0269] 仍然是在更多的实施方案中，该取代基选自氟、氯、溴、羟基和环丙基，其中环丙基任选地被一个或多个选自C1-C6烃基、卤素、羟基和氰基的取代基取代。
[0270] 在一些更特定的实施方案中，该取代基选自氟、氯、溴、羟基和环丙基，其中环丙基任选地被一个或多个选自卤素、羟基和氰基的取代基取代。例如，在一些实施方案中该环丙基包含孪位的二氟取代。
[0271] 仍然是在其它实施方案中，R1具有以下结构之一：
[0272]
[0273]
[0274] 仍然是在其它实施方案中，R1具有以下结构之一：
[0275]
[0276]
[0277] 仍然是在一些实施方案中，R1是杂芳基。例如，在一些实施方案中，该杂芳基是二环的，如稠合的二环杂芳基。
[0278] 在一些实施方案中，该杂芳基是单环的。
[0279] 在前述的一些实施方案中，该杂芳基包含氮、硫或其结合。例如，在一些实施方案中，该杂芳基是二氢喹喔啉基、吲哚基、苯并咪唑基、吡啶基或噻唑基。
[0280] 在一些实施方案中，该杂芳基是未取代的。在一些实施方案中，该杂芳基被一个或多个取代基取代。在一些其它实施方案中，该取代基选自C1-C6烃基、卤素和氧代。例如，在一些实施方案中，该取代基选自卤素和氧代。在其它实施方案中，该取代基选自乙基和氯。在一些更特定的实施方案中，该取代基是氯。
[0281] 在前述的结构(V)的化合物的一些实施方案中，R1具有以下结构之一：
[0282]
[0283] 其中R1a每次出现时独立地为H、C1-C6烃基或卤素。
[0284] 在多个其它实施方案中，R1具有以下结构之一：
[0285]
[0286] 其中R1a每次出现时独立地为H或卤素。
[0287] 仍然是在结构(V)的其它实施方案中，R1具有以下结构之一：
[0288]
[0289] 在一些实施方案中，Q是-C(＝O)-。在一些其它实施方案中，Q是-S(＝O)2-。仍然是在其它实施方案中，Q是-NR34C(＝O)-。仍然是在更多其它实施方案中，Q是-NR34S(＝O)2-。
[0290] 在一些更特定的实施方案中，R34是H。例如，在一些实施方案中，R34是羟烃基如2-羟烃基。
[0291] 在其它前述的实施方案中，至少R35或R36之一是H。例如，在一些实施方案中R35和R36各自是H。
[0292] 在多个其它实施方案中，R36是烃基氨基烃基。例如，在一些实施方案中，R36具有以下结构：
[0293]
[0294] 在一些不同的实施方案中，R36是羟烃基，例如2-羟烃基。
[0295] 在多个其它实施方案中，R35和R36接合形成环。在这些实施方案的一些中，该环是环戊烯、环己烷或苯环。
[0296] 在其它前述的实施方案中，E具有以下结构之一：
[0297]
[0298] 在一些实施方案中，E是1
[0299] 在一些更多的前述的实施方案中，L是亚杂烃基。在一些更多的实施方案中，该亚杂烃基是未取代的。在一些不同的实施方案中，该亚杂烃基是取代的。1 1
[0300] 在多个其它实施方案中，L是亚氨基烃基。例如，在一些实施方案中，L是-CH2CH2NH-。
1
[0301] 在前述的其它实施方案中，L是亚杂环烃基或亚杂芳基。在一些实施方案中，该亚杂环烃基或亚杂芳基是未取代的。在其它实施方案中，该亚杂环烃基或亚杂芳基是取代的。1
在一些进一步的实施方案中，L具有以下结构之一：
[0302]
[0303] 在一些不同的实施方案中，L1a是键。
[0304] 在一些实施方案中，L1a是亚烃基、亚烯基、亚杂烃基或亚杂环烃基。在一些其1a 1a
它实施方案中，L 是亚烃基或亚杂烃基。在这些实施方案的一些中，L 是取代的亚烃
1a 1a
基。在多个其它实施方案中，L 是未取代的亚烃基。例如，在一些实施方案中，L 是[0305] 在一些不同的实施方案中，L1a是取代的亚杂烃基。在一些其它实施方案中，L1a是
1a
未取代的亚杂烃基。在前述实施方案的一些中，L 是亚氨基烃基或亚硫代烃基，例如亚氨
1a
基烃基。例如，在一些实施方案中L 具有以下结构之一：
[0306]
[0307] 在其它实施方案中，L1a是
[0308] 在其它实施方案中，L1a是取代的亚烯基。在不同的实施方案中，L1a是未取代的亚1a
烯基。在一些更特定的实施方案中，L 具有以下结构：
[0309]
[0310] 仍然是在其它实施方案中，L1a是取代的亚杂环烃基。在一些其它实施方案中，L1a是未取代的亚杂环烃基。例如，在一些实施方案中，L1a具有以下结构：
[0311]
[0312] 在前述实施方案的一些中，L2是键。
[0313] 在多个其它实施方案中，L2是取代的亚烃基。仍然是在其它实施方案中，L2是未取代的亚烃基。
[0314] 在任何前述的结构(V)的化合物的多个实施方案中：
[0315] R30a和R30b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；
[0316] R31a和R31b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；
[0317] R32a和R32b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；以及
[0318] R33a和R33b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基。
[0319] 在其它实施方案中，R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a和R33b选自：H、C1-C6烃基、羟烃基、氰基、氰基烃基和氨基羰基，例如H、C1-C6烃基、羟烃基、氰基和氨基羰基，或在其它实施方案中H、C1-C6烃基和羟烃基。
[0320] 在前述实施方案的一些中，R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少一个是H。例如，在一些实施方案中R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b各自是H。
[0321] 在前述实施方案的一些其它中，R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少一个是羟烃基。
[0322] 仍然是在其前述实施方案的其它中，R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少一个是氰基。
[0323] 仍然是在前述实施方案的其它中，R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少一个是氨基羰基。
[0324] 在其它实施方案中，R30a、R30b、R31a、R31b、R32a、R32b、R33a或R33b中至少一个是C1-C6烃基。
[0325] 在一些实施方案中，R30a和R30b接合形成碳环或杂环。在不同的实施方案中，R31a和R31b接合形成碳环或杂环。在更多的实施方案中，R32a和R32b接合形成碳环或杂环。仍然是在其它实施方案中，R33a和R33b接合形成碳环或杂环。
[0326] 还是在其它实施方案中，R30a是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基，并且R30b和R31b接合形成碳环或杂环。
[0327] 在更多的实施方案中，R31a是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、31b 30b
羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基，并且R 和R 接合形成碳环或杂环。
[0328] 在其它实施方案中，R32a是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟32b 33b
烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基，并且R 和R 接合形成碳环或杂环。
[0329] 仍然是在更多的实施方案中，R33a是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环33b 32b
烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基，并且R 和R 接合形成碳环或杂环。
[0330] 在一些其它实施方案中，化合物选自表5中的化合物。
[0331] 按照众所周知的或可由本领域技术人员推知的步骤制备结构V的化合物，例如通过类似于以下提供的实施例8、9、18及其它实施例中例示的那些步骤。表5中的各个化合1 + +
物是以该方式制备的，并且经质谱和/或 H NMR分析。发现质谱([M+H]或[M+Na])和/或NMR波谱与表V中的结构相一致。
[0332] 通用反应路线I示出了用于制备结构(V)的化合物的典型步骤。
[0333] 通用反应路线I
[0334]
[0335] 关于通用反应路线I，(V’)和(VI’)是从商用渠道购买和/或根据本领域已知的1 1
步骤容易地制备。除M外，所有(V’)和(V”)上的变量如上所定义。在一些步骤中，M 是NH。简要地说，适当地取代的酸(V’)是活化的，并且在适当的偶合条件下与适当地取代的
2
杂环(V”)反应。L-E部分可能存在于图示的(V”)中，或可能在偶合后连接(install)。
例如可以在偶合之前或之后，通过使用试剂如酰基氯或亚硫酰氯进行酰化(或硫代酰化)
2
来连接L-E。
[0336] 应该注意的是，上述步骤的变化是可能的，其中的一些在实施例中被例证。例如，在一些步骤中(V”)是单环，并且在偶合步骤之后加入第二个环部分。在其它步骤中，酸部1
分存在于环部分上(V”)，并且R被亲核部分适当地取代以使得偶合形成(Va)。
[0337] 对于本领域技术人员，多个其它的选择是可行的，以在结构V的化合物的不同实施方案中加入多个取代基，和/或修饰或重新排列以上所描述的步骤。还应该注意的是，(V’)和/或(V”)上的多个取代基可以存在于偶合步骤(以被保护或未被保护的形式)期间，或可以在(V’)和(V”)偶合之后加入该取代基。这些取代基的包合(inclusion)方法是本领域已知的。
[0338] 可以理解的是，尽管上述提供了用于制备(Va)的典型步骤，但结构(V)的其它化合物可以通过类似的方法制备。例如，(Va)的羰基可以被还原以形成结构(V)的化合物，其1 1
中L不包含羰基。其中L 是亚杂环烃基或亚杂芳基的实施方案，可以由类似的方法制备，例如，通过利用Buchwald化学以包括亚杂环烃基或亚杂芳基部分。结构(V)的不同化合物的其它制备方法是本领域已知的。
[0339] 简要地说，在酰胺偶联条件下，适当取代的酸与适当取代的杂环反应。使用试剂如酰基氯或亚硫酰氯的酰化(或硫代酰化)会产生结构V的化合物。对于本领域技术人员，多个其它选择是可行的，以在结构V的化合物的不同实施方案中加入多个取代基，和/或修饰或重新排列以上所描述的步骤。适当的酸是商购的或按照众所周知的步骤制备。
[0340] 仍然是在其它实施方案中，本发明提供了具有以下结构(VI)的化合物：
[0341]
[0342] 或其药物可接受的盐、互变异构体、立体异构体或前药，其中：37b 38a
[0343] A是CR 、N或NR ；37c 38b
[0344] B是CR 、N、NR 或S；37d 38c
[0345] C是CR 、N、NR 或S；3 4
[0346] G和G 各自独立地为N或CR，其中R是氢、氰基、卤素或C1-C6烃基；1a
[0347] L 是键、-NH-、亚烃基或亚杂烃基；2
[0348] L是键或亚烃基；32a 32b
[0349] R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、32a 32b
C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；
32a
或R 是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或
32b 33b
氨基羰基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
33a 33b
[0350] R 和R 每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、33a 33b
C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；或R 和R 接合形成碳环或杂环；
33a
或R 是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或
33b 32b
氨基羰基，并且R 与R 接合形成碳环或杂环；
37a 37b 37c 37d 37e
[0351] R 、R 、R 、R 和R 各自独立地为H、卤素、氧代、羟基、氰基、氨基羰基、甲酰基、C1-C6烃基、C1-C6烃基磺酰基、C1-C6卤代烃基、C3-C8环烃基、C1-C6烃氧基、C1-C6羟烃基、C1-C6烃氧基烃基、C1-C6氨基烃基、杂环基或芳基；38a 38b 38c
[0352] R 、R 和R 各自独立地为H、C1-C6烃基或芳基；3 4
[0353] n和n 各自独立地为1、2或3；
[0354] m是0或1；
[0355] 是单键或双键，以满足所有的化合价；以及
[0356] E是能够与K-Ras、H-Ras、或N-Ras G12C突变体蛋白的12位的半胱氨酸残基形成共价键的亲电部分。
[0357] 在多个其它实施方案中，化合物具有以下结构(VIa)、(VIb)、(VIc)、(VId)、(VIe)、(VIf)或(VIg)之一：
[0358]
[0359]
[0360] 在一些不同的实施方案中，化合物具有以下结构(VIa’)、(VIb’)、(VIc’)、(VId’)、(VIe’)、(VIf’)或(VIg’)之一：
[0361]
[0362]
[0363] 其中：34 34
[0364] Q是-C(＝O)-、-NR C(＝O)-、-S(＝O)2-或-NR S(＝O)2-；34
[0365] R 为H、C1-C6烃基或羟烃基；
[0366] 为碳-碳双键或碳-碳三键；以及35 36
[0367] 当 为双键时，R 和R 各自独立地为H、氰基、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基35 36 35 36
烃基或羟烃基，或R 和R 接合形成碳环或杂环；或当 为三键时R 不存在，且R 为H、C1-C6烃基、氨基烃基、烃基氨基烃基或羟烃基。
37a
[0368] 在前述的结构(VI)的化合物及其子结构的一些特定实施方案中，R 是卤素、芳35 36
基或杂芳基。在进一步的这些实施方案中，R 和R 各自为H。
[0369] 在多个其它实施方案中，G3是N，并且G4是CR，例如CH。
[0370] 在一些不同的实施方案中，G3是CR，例如CH，并且G4是N。
[0371] 仍然是在其它实施方案中，G3是N，并且G4是N。
[0372] 在多个其它实施方案中，n3是2，并且n4是2。仍然是在其它实施方案中，n3是1，4 3 4
并且n是1。在一些更多的实施方案中，n 是2，并且n 是1。
[0373] 在前述实施方案的其它中，R37a、R37b、R37c、R37d和R37e各自独立地为H、-OH、卤素、氧代、C1-C6烃基、C1-C6烃氧基、杂环基或芳基。
[0374] 仍然是在其它实施方案中，R37a、R37b、R37c、R37d和R37e各自独立地为H、-OH、氟、氯、溴、碘、氧代、甲基、甲氧基、杂芳基或芳基。
[0375] 在一些实施方案中，R37a或R37e是芳基。在一些更特定的实施方案中，R37a是芳基，如苯基。
[0376] 在一些不同的实施方案中，该芳基是未取代的。在一些其它实施方案中，该芳基是取代的。例如，在这些实施方案的一些中，该芳基被一个或多个卤素取代基取代。在这些实施方案中的一些中，卤素取代基选自氟和氯。
[0377] 仍然是在其它实施方案中，R37a是杂芳基。在这些实施方案的一些中，该杂芳基是未取代的。在多个其它实施方案中，该杂芳基是取代的。在一些更多的实施方案中，该杂芳基包含氮、硫、或其组合。
[0378] 在一些更特定的实施方案中，该杂芳基是噻吩基。
[0379] 在前述实施方案的其它中，R37a是卤素。例如，在一些实施方案中卤素是氯、溴或碘。
[0380] 在一些实施方案中，R37a或R37e具有以下结构之一：
[0381]
[0382] 仍然是在其它实施方案中，R37a具有以下结构之一：
[0383]
[0384] 在多个不同的实施方案中中，R38a、R38b和R38c各自独立地为H或芳基。仍然是在其38a 38b 38c
它实施方案中，R 、R 和R 各自独立地为H。
[0385] 在一些其它不同的实施方案中，R38c是芳基。例如，在一些实施方案中，该芳基被一个或多个卤素取代基取代。在这些实施方案的一些中，卤素是氯。
[0386] 在结构(VI)的化合物的一些其它实施方案中，Q是-C(C＝O)-。在一些其它实施34
方案中，Q是-S(S＝O)2-。仍然是在其它实施方案中，Q是-NR C(＝O)-。仍然是在更多
34
的其它实施方案中，Q是-NR S(＝O)2-。
[0387] 在一些更特定的实施方案中，R34是H。例如，在一些实施方案中，R34是羟烃基如2-羟烃基。
[0388] 在前述实施方案的其它中，至少R35或R36之一是H。例如，在一些实施方案中，R3536
和R 各自为H。
[0389] 在多个其它实施方案中，R36是烃基氨基烃基。例如，在一些实施方案中，R36具有以下结构：
[0390]36
[0391] 在一些不同的实施方案中，R 是羟烃基，例如2-羟烃基。35 36
[0392] 在多个其它实施方案中，R 和R 接合形成环。在这些实施方案的一些中，该环是环戊烯、环己烷或苯环。
[0393] 在前述实施方案的其它中，E具有以下结构之一：
[0394]
[0395] 在一些实施方案中，E是
[0396] 在前述实施方案的更多一些中，L1是亚杂烃基。在更多一些的实施方案中，该亚杂烃基是未取代的。在一些不同的实施方案中，该亚杂烃基是取代的。
[0397] 在多个其它实施方案中，L1是亚氨基烃基。例如，在一些实施方案中，L1是-CH2CH2NH--。
[0398] 在一些不同的实施方案中，L1a是键。
[0399] 在一些实施方案中，L1a是亚烃基、亚烯基、亚杂烃基或亚杂环烃基。在一些其它实1a 1a
施方案中，L 是亚烃基或亚杂烃基。在这些实施方案的一些中，L 是取代的亚烃基。在多
1a
个其它实施方案中，L 是未取代的亚烃基。例如，在一些实施方案中
[0400]
[0401] 在一些不同的实施方案中，L1a是取代的亚杂烃基。在一些其它实施方案中，L1a是未取代的亚杂烃基。在前述实施方案的一些中，L1a是亚氨基烃基或亚硫代烃基，例如亚氨基烃基。例如，在一些实施方案中，L1a具有以下结构之一：
[0402]
[0403] 在其它实施方案中，L1a是
[0404] 在其它实施方案中，L1a是取代的亚烯基。在不同的实施方案中，L1a是未取代的亚1a
烯基。在一些更特定的实施方案中，L 具有以下结构：
[0405]
[0406] 仍然是在其它实施方案中，L1a是取代的亚杂环烃基。在一些其它实施方案中，L1a是未取代的亚杂环烃基。例如，在一些实施方案中，L1a具有以下结构：
[0407]
[0408] 在前述实施方案中的一些中，L2是键。
[0409] 在多个其它实施方案中，L2是取代的亚烃基。仍然是在其它实施方案中，L2是未取代的亚烃基。
[0410] 在任何前述结构(VI)的化合物的一些实施方案中：
[0411] R32a和R32b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基；以及
[0412] R33a和R33b每次出现时独立地为H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、氰基烃基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基。
[0413] 在其它实施方案中，R32a、R32b、R33a或R33b选自：H、C1-C5烃基、羟烃基、氰基、氰基烃基和氨基羰基，例如H、羟烃基和氰基。
[0414] 在前述实施方案的其它中，至少R32a、R32b、R33a或R33b之一是H。例如，在一些实施方案中R32a、R32b、R33a或R33b各自是H。
[0415] 在前述实施方案的其它中，至少R32a、R32b、R33a或R33b之一是羟烃基。
[0416] 仍然是在其它实施方案中，至少R32a、R32b、R33a或R33b之一是氰基。
[0417] 在一些其它不同的实施方案中，至少R32a、R32b、R33a或R33b之一是氨基羰基。
[0418] 在一些实施方案中，R32a和R32b接合形成碳环或杂环。在其它实施方案中，R33a和R33b接合形成碳环或杂环。
[0419] 在不同的实施方案中，R32a是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃基、32b 33b
羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基，并且R 和R 接合形成碳环或杂环。
[0420] 仍然是在其它实施方案中，R33a是H、-OH、-NH2、-CO2H、氰基、C1-C6烃基、C3-C8环烃33b 32b
基、羟烃基、氨基烃基、羧基烃基或氨基羰基，并且R 和R 接合形成碳环或杂环。
[0421] 在一些更特定的实施方案中，化合物选自表6中的化合物。
[0422] 按照众所周知的或可由本领域技术人员推知的步骤制备结构VI的化合物，例如通过类似于在下述提供的实施例13、17、19、20、22及其它实施例中例示的那些步骤。表61 +
中的各个化合物是以该方式制备，并且经质谱和/或 H NMR分析。发现质谱([M+H]或+
[M+Na])和/或NMR波谱与表VI中的结构相一致。
[0423] 通用反应路线II示出了制备结构(VI)的化合物的典型步骤。
[0424] 通用反应路线II
[0425]
[0426] 关于通用反应路线II，(VI’)和(VII’)是由商用渠道购买，和/或按照本领域已1 2
知的步骤容易地制备。除M和M 外，所有(VI’)和(VI”)上的变量如上所定义。在一些
1 2 1 2
步骤中，M是NH，且M 不存在。在其它步骤中，M 是N或CH，并且M 是与活化的酸反应的
1a 2 2
L 的前体。例如，在多个步骤中，M 是NH2、氨基烃基或其它杂取代的烃基。其中M包含负
1 1
碳离子(或M是负碳离子)的实施方案也被考虑，以使L 是亚烃基。简要地说，合适地取
2
代的酸(VI’)是活化的，并且在合适的偶合条件下与合适地取代的杂环反应。L-E部分可能存在于如图示的(VI”)中或可在偶合后连接。例如可以使用试剂如酰基氯或亚硫酰氯通
2
过酰化(或硫代酰化)在偶合之前或之后连接L-E。
[0427] 应该注意的是以上步骤的变化是可能的，其中的一些在实施例中例证。例如，在一些步骤中，酸部分存在于(VI’)的环部分，并且(VI’)被亲核部分适当地取代，以使能够形成偶合(VI)。不需要活化酸进行反应的键生成的其它方法，对于所述化合物的制备同样是可行的。还应该注意的是，(VI’)和/或(VI”)上的多个取代可以存在于偶合步骤(以被保护或未被保护的形式)期间，或者可在(VI’)和(VI”)偶合之后加入该取代基。这些取代基的包合方法是本领域已知的。
[0428] 对于本领域技术人员，多个选择是可行的，以在结构VI的化合物的不同实施方案中加入多个取代基，和/或修饰或重新排列以上所描述的步骤。所述的合适的酸是商购的，或按照已知的步骤制备。
[0429] 此外，本领域的那些技术人员可以领会的是，在本文所描述的过程中(例如，通用反应路线I和II，以及以下的实施例)，中间化合物的官能团可能需要被合适的保护基团保护。这样的官能团包括羟基、氨基、巯基和羧酸。用于羟基的合适的保护基团包括三烃基甲硅烷基或二芳基烃基甲硅烷基(例如，叔丁基二甲基甲硅烷基、叔丁基二苯基甲硅烷基或三甲基甲硅烷基)、四氢吡喃基、苄基等。用于氨基、脒基和胍基的合适的保护基团包括叔丁氧羰基、苄氧羰基等。用于巯基的合适的保护基团包括-C(O)-R”(其中R”是烃基、芳基或芳烃基)、对甲氧基苄基、三苯甲基等。用于羧酸的合适的保护基团包括烃基、芳基或芳烃基酯。保护基团可以依照标准技术添加或移除，其对于本领域技术人员是已知的，并且如本文所描述。保护基团的使用详细描述于Green,T.W.和P.G.M.Wutz的Protective Groups in Organic Synthesis(有机合成中的保护基团)(1999)，第3版，Wiley。本领域技术人员可以领会的是，该保护集团还可以是聚合物树脂，例如Wang树脂、Rink树脂或2-氯三苯甲基氯树脂。
[0430] 本领域的那些技术人员可以领会的是，尽管所保护的本发明化合物的衍生物可能不具有所述的药物活性，但是可以将它们给予哺乳动物，并且随后在身体中新陈代谢以形成具有药物活性的本发明化合物。这类衍生物因此可被描述为“前药”。本发明的化合物的所有前药包括于本发明的范围内。
[0431] 此外，可以理解的是，本领域技术人员能够通过相似的方法或通过结合本领域技术人员已知的其它方法来制备该类化合物。进一步可以理解的是，本领域技术人员能够按以下所描述的相似方式，使用合适的起始成分，并且按照需要调整合成参数，制备本发明的以下没有具体说明的其它化合物。一般来说，起始成分可以由以下来源获得，如Sigma Aldrich、Lancaster Synthesis,Inc.、Maybridge、Matrix Scientific、TCI和Fluorochem USA等，或者根据本领域那些技术人员已知的来源获得(参见，例如Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure(高等有机化学：反应、机理和结构)，第5版(Wiley,2000年12月))，或按照本发明所描述的制备。
[0432] 表1
[0433]
[0434]
[0435]
[0436]
[0437]
[0438]
[0439]
[0440]
[0441]
[0442]
[0443]
[0444]
[0445]
[0446]
[0447]
[0448]
[0449]
[0450]
[0451]
[0452]
[0453]
[0454]
[0455]
[0456]
[0457]
[0458]
[0459]
[0460]
[0461]
[0462]
[0463]
[0464]
[0465]
[0466]
[0467]
[0468]
[0469]
[0470]
[0471]
[0472]
[0473]
[0474]
[0475]
[0476]
[0477]
[0478]
[0479]
[0480]
[0481]
[0482]
[0483]
[0484]
[0485]
[0486]
[0487]
[0488]
[0489]
[0490]
[0491]
[0492]
[0493]
[0494]
[0495]
[0496]
[0497]
[0498]
[0499]
[0500]
[0501]
[0502]
[0503]
[0504]
[0505]
[0506]
[0507]
[0508]
[0509]
[0510]
[0511] 表2
[0512]
[0513]
[0514]
[0515] 表3
[0516]
[0517]
[0518]
[0519]
[0520]
[0521]
[0522]
[0523] 表4
[0524]
[0525]
[0526]
[0527] 表5a
[0528] 代表性化合物
[0529]
[0530]
[0531]
[0532]
[0533]
[0534]
[0535]
[0536]
[0537]
[0538]
[0539]
[0540]
[0541]
[0542] 表5b
[0543] 表5中化合物的实验质谱数据
[0544]编号 [M+H+] 编号 [M+H+] 编号 [M+H+] 编号 [M+H+]
V-1 411.30 V-2 425.25 V-3 399.20 V-4 427.30
V-5 449.25* V-6 410.25 V-7 429.35* V-8 407.35
V-9 422.25 V-10 462.25* V-11 519.25 V-12 443.30*
V-13 532.25* V-14 395.30 V-15 399.25 V-16 419.25
V-17 434.25* V-18 457.35 V-19 379.30 V-20 470.35
V-21 450.35 V-22 433.05 V-23 435.25* V-24 386.25*
V-25 351.35 V-26 487.30* V-27 413.30 V-28 479.20*
V-29 353.30 V-30 421.30 V-31 449.25* V-32 393.30
V-33 377.30+ V-34 423.35 V-35 441.30* V-36 445.20
V-37 461.30 V-38 368.30+ V-39 411.20 V-40 447.25+
V-41 463.20 V-42 382.40+ V-43 417.35* V-44 440.30
[0545]编号 [M+H+] 编号 [M+H+] 编号 [M+H+] 编号 [M+H+]
V-45 405.35 V-46 421.30 V-47 404.35 V-48 494.30
V-49 441.30 V-50 421.35 V-51 462.45 V-52 407.40
V-53 433.40 V-54 449.35 V-55 407.30 V-56 455.20
V-57 461.40 V-58 418.40 V-59 447.40 V-60 433.45
V-61 421.25 V-62 416.35 V-63 449.40 V-64 433.35
V-65 451.30 V-66 459.25 V-67 433.20 V-68 433.40
V-69 421.35 V-70 421.35 V-71 428.35 V-72 416.35
V-73 473.90 V-74 392.30 V-75 451.30 V-76 447.85
[0546] *[M+Na]+
[0547] +[M-H]-
[0548] 表6
[0549] 代表性化合物
[0550]
[0551]
[0552]
[0553]
[0554]
[0555]
[0556] *[M+Na]+
[0557] +[M-H]-
[0558] #[M]
[0559] 药物组合物
[0560] 其它实施方案针对药物组合物。该药物组合物包含任意一种(或多种)前述化合物和药物可接受的载体。在一些实施方案中，该药物组合物被配制用于口服给药。在其它实施方案中，该药物组合物被配制用于注射。仍然是在更多实施方案中，该药物组合物包含如本文所公开的化合物和额外的治疗剂(例如，抗癌剂)。这样的治疗剂的非限制性实例如本文以下所描述。
[0561] 合适的给药途径包括，但不限于：口服、静脉、直肠、气雾剂、肠胃外、眼睛、肺部、经粘膜、经皮、阴道、耳部、鼻和局部的给药。此外，仅举例来说，肠胃外递送包括肌内注射、皮下注射、静脉注射、髓内注射以及鞘内注射、心室内直接注射、腹膜内注射、淋巴管内注射和鼻内注射。
[0562] 在某些实施方案中，本文所描述的化合物是以局部的而不是全身的方式给药，例如，通过将所述化合物(通常在储库制剂或缓释剂中)直接注射进入器官。在特定的实施方案中，长效剂是通过灌输(例如皮下或肌内)或通过肌内注射。此外，在其它实施方案中，所述药物在靶向的药物递送系统中进行递送，例如在用组织特异性抗体包被的脂质体中。在这样的实施方案中，脂质体是靶向至所述器官并且被其选择性地吸收。仍是在其它实施方案中，本文所描述的化合物是以速释剂的形式、长期释放剂的形式或中长期释放剂的形式提供的。仍是在其它实施方案中，本文所描述的化合物是局部给药。
[0563] 如本发明所述的化合物在广泛的剂量范围内是有效的。例如，在成人的治疗中，每日0.01至1000mg、0.5至100mg、1至50mg的剂量，以及每日5至40mg是在一些实施方案中使用的剂量实例。典型的剂量是每日10至30mg。精确的剂量将取决于给药途径、其中所述化合物被给予的形式、待治疗的个体、待治疗的个体的身体重量以及主治医师的选择和经验。
[0564] 在一些实施方案中，本发明的化合物是以单次剂量给药。通常地，这样的给药将通过注射如静脉注射以便迅速输入该药剂。然而，其它途径酌情使用。在一些实施方案中，单次剂量的本发明的化合物用是于急性病况的治疗。
[0565] 在一些实施方案中，本发明的化合物是以多剂量给药。在一些实施方案中，剂量约为每日一次、两次、三次、四次、五次、六次，或多于六次。在其它实施方案中，剂量约为一月一次、两周一次、一周一次或每隔一天一次。在另外的实施方案中，本发明的化合物和另外的药剂为约每日一次至约每日6次联合给药。在另外的实施方案中，本发明的化合物和药剂的给药持续约小于7天。仍是在另外的实施方案中，给药持续多于约6、10、14、28天、两个月、六个月或一年。在一些情况下，按照需要长期获得并且保持持续的剂量。
[0566] 本发明所述化合物的给药，可能根据需要长期持续。在一些实施方案中，本发明的化合物的给药多于1、2、3、4、5、6、7、14或28天。在一些实施方案中，本发明的化合物的给药少于28、14、7、6、5、4、3、2或1天。在一些实施方案中，本发明的化合物是在不间断的基础上长期给药，例如用于慢性效果的治疗。
[0567] 在一些实施方案中，本发明的化合物是以剂量给药。本领域已知，由于在化合物的药物动力学上个体之间的可变性，给药方案的个性化是最佳治疗所必需的。对于本发明的化合物的给药，可基于本公开通过常规实验来发现。
[0568] 在一些实施方案中，本文所描述的化合物被配制成药物组合物。在特定的实施方案中，药物组合物是以常规方式配制的，使用一种或多种生理可接受的包含赋形剂和助剂的载体，它们促进将活性化合物加工成可以在药学上使用的制剂。适当的剂型取决于所选择的给药途径。任何药物可接受的技术、载体和赋形剂可用作适于配制本文所描述的药物组合物：Remington：The Science and Practice of Pharmacy(药剂学科学和实践)，第十九版(Easton,Pa.:Mack Publishing Company,1995)；Hoover,John E.,Remington的Pharmaceutical Sciences(药物科学),Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania1975；Liberman,H.A.和 Lachman,L.编辑 的Pharmaceutical Dosage Forms(药 物 剂型),Marcel Decker,New York,N.Y.,1980；以 及 Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(药物剂型和药物递送系统)，Seventh编辑(Lippincott
Williams&Wilkins1999)。
[0569] 本文提供了包含结构(I)的化合物和一种或多种药物可接受的稀释剂、赋形剂或载体的药物组合物。在某些实施方案中，所描述的化合物作为药物组合物给药，其中结构(I)的化合物与其它活性成分混合，作为组合治疗。此处包括下文的组合治疗部分和整个本公开中所列举的所有活性成分的组合。在具体的实施方案中，所述的药物组合物包括一种或多种结构(I)的化合物。
[0570] 本文所使用的药物组合物，是指结构(I)的化合物与其它化学成分，诸如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂和/或赋形剂的混合物。在某些实施方案中，该药物组合物促进化合物给药至有机体。在一些实施方案中，进行本文提供的治疗方法或应用，将本文提供的治疗有效量的结构(I)化合物以药物组合物对患有疾病、疾患或待治疗的医疗状况的哺乳动物给药。在具体的实施方案中，哺乳动物是人类。在某些实施方案中，治疗有效量根据疾病的严重程度、个体的年龄和相对健康、所使用化合物的效力以及其它因素所改变。本文所描述的化合物单独或作为混合物成分与一种或多种治疗剂组合使用。
[0571] 在一个实施方案中，将结构(I)的一种或多种化合物配制于水溶液中。在具体的实施方案中，该水溶液选自，仅举例来说，生理上可相容的缓冲液，例如Hank溶液、Ringer溶液或生理盐水缓冲液。在其它实施方案中，结构(I)的一种或多种化合物被配制用于经粘膜给药。在具体的实施方案中，经粘膜制剂包括适用于待渗透的屏障的渗透剂。仍然是在其它实施方案中，其中本文所描述的化合物被配制用于其它肠胃外注射，适当的制剂包括水溶液或非水溶液。在具体的实施方案中，这样的溶液包括生理上可相容的缓冲液和/或赋形剂。
[0572] 在另外的实施方案中，本文所描述的化合物被配制对于口服给药。本文所描述的化合物通过将活性化合物与例如药物可接受的载体或赋形剂结合配制。在多个实施方案中，本文所描述的化合物被配制成，仅举例来说，包括片剂、粉剂、丸剂、糖衣片、胶囊剂、液体、凝胶剂、糖浆剂、酏剂、药浆、悬浮液等口服剂量形式。
[0573] 在某些实施方案中，用于口服使用的药物制剂是通过将一种或多种固体赋形剂与本文所描述的一种或多种化合物混合，任选地研磨产生的混合物，并且加工颗粒的混合物，加入合适的助剂(如果需要)后，获得片剂或糖衣片芯层。合适的赋形剂具体地是：填充剂如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制品如玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠；或其它如聚乙烯吡咯烷酮(PVP或聚烯吡酮)或磷酸钙。在具体的实施方案中，崩解剂是任选加入的。崩解剂，仅举例来说，包括交联的交联羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或藻酸或其盐，例如藻酸钠。
[0574] 在一个实施方案中，剂型如糖衣片芯层和片剂，配备有一种或多种适当的包衣。在具体的实施方案中，浓缩的糖溶液被用于包衣该剂型。该糖溶液，任选地包含额外的成分，仅举例来说，例如，阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液以及适当的有机溶剂或溶剂混合物。用于鉴别目的染料和/或色素也任选地被添加到包衣中。此外，该染料和/或色素被任选地利用以表征活性化合物剂量的不同组合。
[0575] 在某些实施方案中，治疗有效量的至少一种本文所描述的化合物被配制成其它口服剂量形式。口服剂量形式包括由明胶制成的嵌合式(push-fit)胶囊，以及由明胶和诸如甘油或山梨醇的增塑剂制成的软的密封胶囊。在具体的实施方案中，嵌合式胶囊包含与一种或多种填充剂混合的活性成分。填充剂，仅举例来说，包括乳糖、粘合剂例如淀粉、和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁，以及任选地稳定剂。在其它实施方案中，软胶囊包含溶解或悬浮于适当的液体中的一种或多种活性化合物。适当的液体，仅举例来说，包括一种或多种脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇。此外，稳定剂是任选加入的。
[0576] 在某些实施方案中，治疗有效量的至少一种本文所描述的化合物被配制用于口腔或舌下给药。适合于口腔或舌下给药的制剂，仅举例来说，包括片剂、糖衣片剂或凝胶剂。仍然是在其它实施方案中，本文所描述的化合物被配制用于肠胃外注射，包括适合于弹丸注射或持续输注的制剂。在具体的实施方案中，用于注射的制剂存在于单元剂型形式(例如，在安瓿中)或多剂量容器中。任选地添加防腐剂至注射制剂。仍然是在其它实施方案中，该药物组合物以适合于肠胃外注射的形式被配制为于油性或水性载体中的无菌悬浮液、溶液或乳剂。肠胃外注射制剂任选地包含调配制剂例如悬浮、稳定和/或分散剂。在具体的实施方案中，用于肠胃外给药的药物制剂包括处于水溶性形式的活性化合物的水溶液。在另外的实施方案中，该活性化合物的悬浮液(例如，结构(I)的化合物)被制备成适当的油性注射悬浮液。用于本文所描述的药物组合物的适当的亲脂性溶剂或载体，仅举例来说，包括脂肪油如芝麻油、或合成的脂肪酸酯如油酸乙酯或三酸甘油酯、或脂质体。在某些具体的实施方案中，水性注射悬浮液包含增加该悬浮液粘性的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨醇或葡聚糖。任选地，该悬浮液包含适当的稳定剂或增加该化合物溶解度的药剂，从而允许高浓度溶液的制备。可替代地，在其它实施方案中，该活性成分是以粉末形式用于在使用之前与适当的载体例如无菌无热原的水进行构造(constitution)。
[0577] 仍然是在其它实施方案中，将结构(I)的化合物局部给药。本文所描述的化合物被配制成多种局部给药的组合物，例如溶液、悬浮液、洗剂、凝胶剂、糊剂、药棒、药膏、乳膏剂或软膏剂。这样的药物组合物任选地包含增溶剂、稳定剂、张力增强剂、缓冲液和防腐剂。
[0578] 仍在其它实施方案中，结构(I)的该化合物被配制用于经皮给药。在具体的实施方案中，经皮制剂使用经皮递送装置和经皮递送贴片，并且可以是亲脂性乳剂或缓冲液、水溶液，溶解和/或分散于聚合物或粘合剂中。在多个实施方案中，制备这样的贴片以用于药物试剂的持续、脉动或按需(on-demand)递送。在另外的实施方案中，结构(I)的化合物的经皮递送是通过离子电渗用贴片等方法完成的。在某些实施方案中，经皮贴片提供了结构(I)的化合物的受控递送。在具体的实施方案中，通过采用速度控制薄膜或通过将化合物截留在聚合物基体或凝胶内来降低吸收率。在替代的实施方案中，吸收增强剂被用于增加吸收。吸收增强剂或载体包括协助通过皮肤的可吸收的药物可接受的溶剂。例如，在一个实施方案中，经皮装置是包含支持构件的绷带、包含化合物以及任选地具有载体、任选地速度控制屏障的容器的形式，从而在延长的时间内以受控和预定的速率将化合物递送至主人的皮肤，并且意味着将该装置固定至皮肤。
[0579] 在其它实施方案中，结构(I)的该化合物被配制用于通过吸入给药。适合于通过吸入给药的多个形式包括但不限于：气雾剂、喷雾剂或粉剂。任何结构(I)的化合物的药物组合物借助于适合的推进剂(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适合的气体)，以从来自加压包装的喷雾呈递的气雾剂或喷雾剂的形式可方便地递送。在具体的实施方案中，通过提供阀门以递送经计量的量确定加压气雾剂的剂量单位。在某些实施方案中，配制用于在吸入器或吹药器中使用的例如，仅举例来说，明胶的胶囊和药筒，这些胶囊和药筒包含该化合物的粉末混合物和适合的粉剂基质如乳糖或淀粉。
[0580] 仍然是在其它实施方案中，结构的化合物(I)被配制成包含常规的栓剂基质如可可脂或其它甘油酯，以及合成的聚合物如聚乙烯吡咯烷酮、PEG等的直肠组合物，例如灌肠剂、直肠凝胶剂、直肠泡沫体、直肠气雾剂、栓剂、胶状物栓剂或保留灌肠剂。将低熔点的蜡例如但不限于脂肪酸甘油酯的混合物任选地与可可脂一起首先融化于该组合物的栓剂形式中。
[0581] 在某些实施方案中，药物组合物是以任何常规方式使用一种或多种生理可接受的载体配制的，所述载体包含能促进将活性化合物加工成可以在药学上使用的制剂的赋形剂和助剂。适当的剂型取决于所选择的给药途径。任何药物可接受的技术、载体和赋形剂是任选地用作适合的。包含结构(I)的化合物的药物组合物是以常规方式配制的，例如，仅举例来说，通过常规的混合、溶解、造粒、制糖衣片、磨细、乳化、封装胶囊、包封或压缩过程的方法。
[0582] 药物组合物至少包括一种药物可接受的载体、稀释剂或赋形剂以及至少一种本文所描述的作为活性成分的结构(I)化合物。该活性成分是游离酸或游离碱的形式，或是药物可接受的盐形式。此外，本文所描述的方法和药物组合物包括N-氧化物的使用、晶形(亦称为多晶型物)、以及具有同种活性的这些化合物的活性代谢产物。本文所描述的化合物的所有互变异构体都包括在在本文所提出的化合物的范围内。此外，本文所描述的化合物包括非溶剂化以及溶剂化的形式与药物可接受的溶剂如水、乙醇等。由本文提出的化合物的溶剂化形式也被认为是本文将公开的。此外，该药物组合物任选地包括其它医学或药物试剂、载体、助剂，例如保存剂、稳定剂、保湿剂或乳化剂，溶液助催化剂、用于调节渗透压的盐、缓冲液和/或其它治疗有价值的物质。
[0583] 包含本文所描述的化合物的组合物的制备方法，包括将该化合物与一种或多种惰性的、药物可接受的赋形剂或载体配制，从而形成固体、半固体或液体。固体组合物包括但不限于：粉剂、片剂、可分散的粒剂、胶囊剂、扁囊剂和栓剂。液体成分包括：溶解化合物的溶液、包含化合物的乳剂、或包含脂质体的溶液、胶束、或包含本文公开的化合物的纳米粒子。半固体组合物包括，但不限于，凝胶剂、悬浮液和乳膏剂。本文所描述的药物组合物的形式，包括液体溶液或悬浮液、适用于液体中的溶液或悬浮液的在使用前的固体形式或作为乳化剂。任选地，该组合物包含较小量的无毒的、辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等。
[0584] 在一些实施方案中，包含至少一种结构(I)化合物的药物组合物示例性地采取液体的形式，其中试剂存在于溶液、悬浮液或二者中。通常地，当该组合物作为溶液或悬浮液给药时，该试剂的第一部分存在于溶液中，并且该试剂的第二部分以颗粒形式存在于液体基质的悬浮液中。在一些实施方案中，液体组合物包括凝胶制剂。在其它实施方案中，该液体组合物是含水的。
[0585] 在某些实施方案中，有用的水悬浮液包含一种或多种作为悬浮剂的聚合物。有用的聚合物包括水溶性聚合物如纤维素的聚合物(例如羟丙基甲基纤维素)，以及不溶于水的聚合物如交联的含羧基的聚合物。本文所描述的某些药物组合物包含粘膜粘着剂聚合物，例如选自羧甲基纤维素、卡波姆(丙烯酸聚合物)、聚(异丁烯酸甲脂)、聚丙烯酰胺、聚卡波非、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、海藻酸钠以及葡聚糖。
[0586] 此外，有用的药物组合物任选地包括增溶剂，从而有助于结构(I)的化合物的溶解度。术语“增溶剂”通常包括导致形成试剂的胶束溶液或真溶液的试剂。某些可接受的非离子型表面活性剂，例如聚山梨醇酯80，可用作增溶剂，作为眼睛可接受的乙二醇、聚二醇，例如聚乙二醇400，以及乙二醇醚。
[0587] 此外，有用的药物组合物任选地包括一种或多种pH调节剂或缓冲液，其包括酸诸如醋酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸，碱诸如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、醋酸钠、乳酸钠和3-羟甲基甲胺，以及缓冲液诸如柠檬酸盐/葡萄糖、碳酸氢钠和氯化铵。所包括的这样的酸、碱和缓冲液为维持该组合物的pH在可接受的范围内所需的量。
[0588] 此外，有用的组合物也任选地包括将该组合物的渗透压调整至可接受的范围所需要的量的一种或多种盐。这种盐包括那些具有钠、钾或铵阳离子以及氯化物、柠檬酸盐、抗坏血酸盐、硼酸盐、磷酸盐、碳酸氢盐、硫酸盐、硫代硫酸盐或亚硫酸氢盐阴离子的盐；合适的盐包括氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。
[0589] 其它有用的药物组合物任选地包括一种或多种防腐剂以抑制微生物活性。适合的防腐剂包括含汞物质诸如硼酸苯汞和硫柳汞、稳定化二氧化氯，以及季铵化合物诸如苯扎氯铵、十六烷基三甲基溴化铵和十六烷基吡啶氯化物。
[0590] 其它有用的组合物包括一种或多种表面活性剂以增强物理稳定性或用于其它目的。适合的非离子型表面活性剂包括聚氧乙烯脂肪酸甘油酯和植物油，例如聚氧化乙烯(60)氢化蓖麻油，以及聚氧乙烯烷基醚和烷基苯基醚例如辛苯聚醇10、辛苯聚醇40。
[0591] 其它有用的组合物包括一种或多种抗氧化剂以增强所需要的化学稳定性。适合的抗氧化剂，仅举例来说，包括抗坏血酸和焦亚硫酸钠。
[0592] 在某些实施方案中，水悬浮液组合物是以单剂量的不能重新盖紧的容器包装。可选地，使用多剂量的可重新盖紧的容器，在这样情况下，该组合物中通常包括防腐剂。
[0593] 在替代的实施方案中，使用了用于狂犬病药物化合物的其它递送系统。脂质体和乳化剂是可用于本文的递送媒介物或载体的实例。在某些实施方案中，还使用了有机溶剂诸如N-甲基吡咯烷酮。在另外的实施方案中，本文所描述的化合物使用缓释体系递送，例如含治疗剂的固体狂犬病聚合物的半渗透性基质。多种缓释材料可用于本文。在一些实施方案中，缓释胶囊释放该化合物几周至大于100天。根据治疗试剂的化学性质和生物稳定性，使用其它用于蛋白质稳定化的策略。
[0594] 在某些实施方案中，本文所描述的制剂包含一种或多种抗氧化剂、金属螯合剂、含硫醇化合物和/或其它一般稳定剂。这种稳定剂的实例包括但不限于：(a)约0.5％至约2％w/v甘油、(b)约0.1％至约1％w/v甲硫氨酸、(c)约0.1％至约2％w/v单硫代甘油、(d)约1mM至约10mM EDTA、(e)约0.01％至约2％w/v抗坏血酸、(f)0.003％至约0.02％w/v聚山梨醇酯80、(g)0.001％至约0.05％w/v聚山梨酸酯20、(h)精氨酸、(i)肝素、(j)葡聚糖硫酸酯、(k)环糊精、(l)戊聚糖多硫酸酯以及其它类肝素、(m)二价阳离子如镁和锌，或(n)其组合。
[0595] 在一些实施方案中，本发明药物组合物提供的一种或多种化合物的浓度为：小于100％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％，
13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.4％、0.3％、
0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、
0.009％、0.008％、0.007％、0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、
0.0009％、0.0008％、0.0007％、0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或
0.0001％w/w、w/v或v/v。
[0596] 在一些实施方案中，本发明药物组合物提供的一种或多种化合物的浓度为：大于90％、80％70％、60％、50％、40％、30％、20％、19.75％、19.50％、19.25％、19％、18.75％、
18.50％、18.25％、17.75％、17.50％、17.25％、17％、16.75％、16.50％、16.25％、16％、
15.75％、15.50％、15.25％、15％、14.75％、14.50％、14.25％、14％、13.75％、13.50％、
13.25％、13％、12.75％、12.50％、12.25％、12％、11.75％、11.50％、11.25％、11％、
10.75％、10.50％、10.25％、10％、9.75％、9.50％、9.25％、9％、8.75％、8.50％、8.25％、
8％、7.75％、7.50％、7.25％、7％、6.75％、6.50％、6.25％、6％、5.75％、5.50％、5.25％、
5％、4.75％、4.50％、4.25％、4％、3.75％、3.50％、3.25％、3％、2.75％、2.50％、2.25％、
2％、1.75％、1.50％、1.25％、1％、0.5％、0.4％0.3％、0.2％、0.1％、0.09％、0.08％、
0.07％、0.06％、0.05％、0.04％、0.03％、0.02％、0.01％、0.009％、0.008％、0.007％、
0.006％、0.005％、0.004％、0.003％、0.002％、0.001％、0.0009％、0.0008％、0.0007％、
0.0006％、0.0005％、0.0004％、0.0003％、0.0002％或0.0001％w/w、w/v或v/v。
[0597] 在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的浓度为：大约0.0001％至大约50％、大约0.001％至大约40％、大约0.01％至大约30％、大约0.02％至大约29％、大约
0.03％至大约28％、大约0.04％至大约27％、大约0.05％至大约26％、大约0.06％至大约25％、大约0.07％至大约24％、大约0.08％至大约23％、大约0.09％至大约22％、大约0.1％至大约21％、大约0.2％至大约20％、大约0.3％至大约19％、大约0.4％至大约
18％、大约0.5％至大约17％、大约0.6％至大约16％大约0.7％至大约15％、大约0.8％至大约14％、大约0.9％至大约12％、大约1％至大约10％w/w、w/v或v/v的范围内。
[0598] 在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的浓度为：大约0.001％至大约10％、大约0.01％至大约5％、大约0.02％至大约4.5％、大约0.03％至大约4％、大约0.04％至大约3.5％、大约0.05％至大约3％、大约0.06％至大约2.5％、大约0.07％至大约2％、大约0.08％至大约1.5％、大约0.09％至大约1％、大约0.1％至大约0.9％w/w、w/v或v/v的范围内。
[0599] 在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的量等于或小于10g、9.5g、9.0g、8.5g、8.0g、7.0g、6.5g、6.0g、5.5g、5.0g、4.5g、4.0g、3.5g、3.0g、2.5g、2.0g、1.5g、
1.0g、0.95g、0.9g、0.85g、0.8g、0.75g、0.7g、0.65g、0.6g、0.55g、0.5g、0.45g、0.4g、0.35g、
0.3g、0.25g、0.2g、0.15g、0.1g、0.09g、0.08g、0.07g、0.06g、0.05g、0.04g、0.03g、0.02g、
0.01g、0.009g、0.008g、0.007g、0.006g、0.005g、0.004g、0.003g、0.002g、0.001g、0.0009g、
0.0008g、0.0007g、0.0006g、0.0005g、0.0004g、0.0003g、0.0002g或0.0001g。
[0600] 在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的量大于0.0001g、0.0002g、0.0003g、0.0004g、0.0005g、0.0006、0.0007g、0.0008、0.0009g、0.001g、0.0015g、0.002g、
0.0025g、0.003g、0.0035g、0.004g、0.0045g、0.005g、0.0055g、0.006g、0.0065g、0.007g、
0.0075g、0.008g、0.0085g、0.009g、0.0095g、0.01g、0.015g、0.02g、0.025g、0.03g、0.035g、
0.04g、0.045g、0.05g、0.055g、0.06g、0.065g、0.07g、0.075g、0.08g、0.085g、0.09g、
0.095g、0.1g、0.15g、0.2g、0.25g、0.3g、0.35g、0.4g、g、0.5g、0.55g、0.6g、0.65g、0.7g、
0.75g、0.8g、0.85g、0.9g、0.95g、1g、1.5g、2g、2.5g、3g、3.5g、4g、4.5g、5g、5.5g、6g、6.5g、
7g、7.5g、8g、8.5g、9g、9.5g或10g。
[0601] 在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物的量在0.0001-10g、0.0005-8g、0.005-7g、0.01-6g、0.05-5g、0.1-4g、0.5-4g或1-3g的范围。
[0602] 试剂盒/制品
[0603] 还提供了试剂盒和制品以用于本文所描述的治疗应用。在一些实施方案中，这种试剂盒包含载体、包装或被间隔开以容纳一个或多个容器如小瓶、管等，各容器包含一个拟用于本文所描述的方法的单独成分。适合的容器包括，例如，瓶子、小瓶、注射器和试管。该容器由多种材料如玻璃或塑料制成。
[0604] 本文提供的制品含有包装材料。用于在包装药物产品的包装材料包括在例如，美国专利第5,323,907号、第5,052,558号和第5,033,252号中可参见的那些。药物包装材料的实例包括但不限于：泡制包装、瓶子、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶子和任何适于所选的制剂和指定的给药和治疗方式的包装材料。例如，一个或多个容器任选地包含在组合物中的或与另外的本文公开的试剂结合的一种或多种本文所描述的化合物。一个或多个容器任选地具有无菌入孔(例如该容器是静脉注射溶液袋或具有通过皮下注射针刺破的塞子的小瓶)。这种试剂盒任选地包含具有涉及在本文所描述的方法中使用的识别描述或标签或说明书的化合物。
[0605] 例如，试剂盒通常包括一个或多个额外的容器，各个容器含有一种或多种不同的材料(如任选地为浓缩形式的试剂和/或装置)，所述材料从商业和使用者立场适用于本文所描述的化合物。这种材料的非限定性实例包括但不限于：缓冲剂、稀释剂、过滤器、针、注射器、载体、包装、容器、列示内含物和/或使用说明的小瓶和/或管标签，以及带有使用说明的包装说明书。通常还包括一套说明书。标签任选地在容器上或与容器结合。例如，当构成标签的字母、号码或其它符号粘贴、模制或蚀刻在容器本身时，标签在容器上；当容纳该容器的贮藏器或载体中存在有标签时，例如作为包装说明书，标签与容器结合。此外，标签用于指示拟用于特定治疗应用的内含物。此外，标签指示所述内含物的使用方法，例如在本文所描述的方法中。在某些实施方案，该药物组合物存在于包装或分配器装置中，其中含有本文提供的化合物的一个或多个单位剂型。该包装例如含有金属或塑料薄膜，诸如泡罩包装。或者，该包装或分配器装置带有用于给药的说明书。或者，该包装或分配器带有管控药物的制造、使用或销售的政府机关所规定形式的与容器结合的注意事项，该注意事项反映了所述机构对该药物用于人类或兽医给药的形式的批准。这种注意事项，例如是由美国食品和药物管理局(U.S.Food and Drug Administration)对于处方药物批准的标签或批准的产品说明书。在一些实施方案中，在相容的药物载体中配制的含有本文提供的化合物的组合物，制备后将其放置于适合的容器中，并且加上标签用于指示病况的治疗。
[0606] 方法
[0607] 本发明提供了抑制Ras-介导的细胞信号转导的方法，包括将有效量本文所公开的一种或多种化合物与细胞接触。Ras-介导的信号转导的抑制可以通过本领域已知的多种方法确定和证明。非限制性的实例包括显示出：(a)Ras的GTP酶活性的下降；(b)GTP亲合力的下降或GDP亲和力的增加；(c)GTP的Koff值的增加或GDP的Koff值的下降；(d)Ras通路下游信号转导分子水平的下降，例如pMEK水平的下降；和/或(e)Ras复合物与包括但不限于Raf的下游信号分子的结合力的下降。试剂盒和市售的试样(assays)可用于确定上述的一个或多个。
[0608] 此外，本发明提供了使用本发明的化合物或药物组合物治疗病况的方法，包括但不限于涉及G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变、G12C H-Ras突变和/或G12C N-Ras突变的病况(例如癌症)。
[0609] 在一些实施方案中，提供了用于癌症治疗的方法，该方法包括给予有需要的个体有效量的任何前述的包含结构(I)化合物的药物组合物。在一些实施方案中，癌症由K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变介导。在其它实施方案中，该癌症是胰腺癌、结肠癌、MYH相关性息肉病、结肠直肠癌或肺癌。
[0610] 在一些实施方案中，本发明提供了治疗有需要的个体的疾患的方法，其中所述的方法包括确定所述个体是否具有K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变，以及如果所述个体确定具有K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变，随后给予所述个体治疗有效量的至少一种结构(I)化合物或其药物可接受的盐、酯、前药、互变异构体、溶剂化物、水合物或衍生物。
[0611] 本公开的化合物强烈地抑制非贴壁依赖性细胞生长，并且因此具有抑制肿瘤转移的潜能。因此，在另外的实施方案中，本公开提供了用于抑制肿瘤转移的方法，该方法包含给予有需要的个体有效量的包含任何本公开的化合物的药物组合物和药物可接受的载体。
[0612] 此外，K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变已经在恶性血液肿瘤(例如，影响血液、骨髓和/或淋巴结的癌症)中被鉴别。因此，某些实施方案旨在给予需要治疗恶性血液肿瘤的患者公开的化合物(例如，以药物组合物的形式)。这种恶性肿瘤包括但不限于：白血病和淋巴癌。例如，目前公开的化合物可用于治疗疾病，如急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤(SLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、急性单核细胞性白血病(AMoL)和/或其它白血病。在其它实施方案中，所述化合物用于治疗淋巴癌，如Hodgkins淋巴癌的所有亚型或非Hodgkins淋巴癌。
[0613] 确定是否肿瘤或癌症包含G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变，可以通过如下来实施：确定编码K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白的核苷酸序列，或确定K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白质的氨基酸序列，或确定推定的K-Ras、H-Ras或N-Ras突变体蛋白的特征。野生型人类K-Ras、H-Ras或N-Ras的序列是本领域已知的(例如登录号NP203524)。
[0614] 对于本领域的那些技术人员，测定K-Ras、H-Ras或N-Ras核苷酸序列中的突变的方法是已知的。该方法包括但不限于：聚合酶链式反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)检测法、聚合酶链式反应-单链构型多态性(PCR-SSCP)检测法、实时PCR检测法、PCR测序、突变体等位基因-特异性PCR扩增(MASA)检测法、直接测序、引物延伸反应、电泳、寡聚核苷酸连接检测法、杂交检测法、TaqMan检测法、SNP基因型分型检测法、高分辨率溶解分析和微阵列分析。在一些实施方案中，对于G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变，通过实时PCR评价样本。在实时PCR中，使用对K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C突变具有特异性的荧光探针。当存在突变时，探针结合，并且检测到荧光。在一些实施方案中，使用K-Ras，H-Ras或N-Ras基因中的特定区域(例如，外显子2和/或外显子3)的直接测序方法，鉴定K-Ras，H-Ras或N-Ras G12C突变。该技术能鉴定该区域序列内所有可能的突变。
[0615] 对于本领域的那些技术人员，测定K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白中突变的方法是已知的。该方法包括但不限于：使用对突变体蛋白具有特异性的结合剂(例如抗体)、蛋白质电泳和Western印迹，以及直接肽序列测定来检测K-Ras、H-Ras或N-Ras突变。
[0616] 确定肿瘤或癌症是否包含G12C K-Ras、H-Ras或N-Ras突变的方法可使用多种样本。在一些实施方案中，样本取自患有肿瘤或癌症的个体。在一些实施方案中，样本取自患有癌症或肿瘤的个体。在一些实施方案中，样本是新鲜的肿瘤/癌症样本。在一些实施方案中，样本是冷冻的肿瘤/癌症样本。在一些实施方案中，样本是福尔马林-固定、石蜡-包埋的样本。在一些实施方案中，样本被处理为细胞裂解物。在一些实施方案中，样本被处理为DNA或RNA。
[0617] 本发明还涉及治疗哺乳动物中过度增生性疾患的方法，其包括给予所述哺乳动物治疗有效量的本发明化合物或其药物可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物。在一些实施方案中，该方法涉及癌症的治疗，例如急性骨髓性白血病、青少年癌症、儿童肾上腺皮质癌、AIDS-相关性癌症(例如淋巴瘤和卡波西氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma))、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎样、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干胶质瘤、脑肿瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、非典型畸胎样、胚胎性肿瘤、生殖细胞瘤、原发性淋巴瘤、宫颈癌、儿童期癌、脊索瘤、心脏肿瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性疾患、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、肝外导管原位癌(DCIS)、胚胎性肿瘤、CNS癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、鼻腔神经胶质瘤、尤文氏肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、眼癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞瘤、胰腺神经内分泌肿瘤、肾癌、喉癌、嘴唇和口腔癌、肝癌、小叶原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、隐匿原发性的转移性鳞状颈癌、中线道(midline tract)癌、口腔癌、多发性内分泌瘤综合症、多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、蕈样肉芽肿病、骨髓增生异常综合症、骨髓增生异常综合症/骨髓增殖性肿瘤、多发性骨髓瘤、梅克尔细胞癌、恶性间皮瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤和骨肉瘤、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、非霍金奇淋巴瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、口腔癌、嘴唇和口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰腺癌、乳头瘤病、副神经节瘤、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽喉癌、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、移行细胞癌、成视网膜细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾腺癌、皮肤癌、胃(胃部)癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、咽喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、滋养细胞瘤、儿童期罕见癌、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌或病毒诱发癌。在一些实施方案中，所述的方法涉及非癌性过度增生性疾患，诸如皮肤良性过度增生(例如牛皮癣)、再狭窄或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))的治疗。
[0618] 在某些特殊的实施方案中，本发明涉及用于治疗肺癌的方法，该方法包含给予有需要的个体有效量的任何以上描述的化合物(或包含相同化合物的药物组合物)。在某些实施方案中，肺癌是非小细胞肺癌(NSCLC)，例如腺癌、鳞状细胞肺癌或大细胞肺癌。在其它实施方案中，肺癌是小细胞肺癌。其它可使用本公开的化合物治疗的肺癌包括但不限于：腺肿瘤、类癌瘤和未分化癌。
[0619] 根据本发明的所述的方法，可以使用本发明的化合物或所述化合物的药物可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、互变异构体、水合物或衍生物治疗的个体包括，例如，已经被诊断为患有以下疾病的个体：急性骨髓性白血病、急性骨髓性白血病、青少年癌、儿童期肾上腺皮质癌、AIDS-相关癌(例如淋巴瘤和卡波西氏肉瘤)、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸胎样、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干胶质瘤、脑肿瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、非典型畸胎样、胚胎性肿瘤、生殖细胞瘤、原发性淋巴瘤、宫颈癌、儿童期癌、脊索瘤、心脏肿瘤、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓增生性疾患、结肠癌、结肠直肠癌、颅咽管瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、肝外导管原位癌(DCIS)、胚胎性肿瘤、CNS癌、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、鼻腔神经胶质瘤、尤文氏肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、眼癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌瘤、胃肠道间质瘤(GIST)、生殖细胞瘤、妊娠滋养细胞肿瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞瘤、胰腺神经内分泌肿瘤、肾癌、喉癌、嘴唇和口腔癌、肝癌、小叶原位癌(LCIS)、肺癌、淋巴瘤、隐匿原发性的转移性鳞状颈癌、中线道癌、口腔癌、多发性内分泌瘤综合症、多发性骨髓瘤/浆细胞肿瘤、蕈样肉芽肿病、骨髓增生异常综合症、骨髓增生异常综合症/骨髓增殖性肿瘤、多发性骨髓瘤、梅克尔细胞癌、恶性间皮瘤、骨恶性纤维组织细胞瘤和骨肉瘤、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、非霍金奇淋巴瘤、非小细胞肺癌(NSCLC)、口腔癌、嘴唇和口腔癌、口咽癌、卵巢癌、胰腺癌、乳头瘤病、副神经节瘤、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽喉癌、胸膜肺母细胞瘤、原发性中枢神经系统(CNS)淋巴瘤、前列腺癌、直肠癌、移行细胞癌、成视网膜细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾腺癌、皮肤癌、胃(胃部)癌、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、T细胞淋巴瘤、睾丸癌、咽喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管移行细胞癌、滋养细胞瘤、儿童期罕见癌、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌或病毒诱发癌。在一些实施方案中，使用本发明的化合物治疗的个体包括，已经诊断为患有非癌性过度增生性疾患诸如皮肤良性过度增生(例如牛皮癣)、再狭窄或前列腺(例如良性前列腺肥大(BPH))的个体。
[0620] 本发明进一步提供了通过使有效量的本发明化合物与该蛋白接触来调节G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白活性的方法。调节可以抑制或活化蛋白的活性。在一些实施方案中，本发明提供了通过使G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白与在溶液中的有效量的本发明化合物接触来抑制蛋白活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过接触表达目标蛋白的细胞、组织、器官来抑制G12C突变体K-Ras、H-Ras或N-Ras蛋白活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过给予所述个体有效量的本发明化合物，抑制包括但不限于啮齿动物和哺乳动物(例如人类)的个体中蛋白活性的方法。在一些实施方案中，百分比调节超过25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。在一些实施方案中，抑制的百分比超过25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％。
[0621] 在一些实施方案中，本发明提供了通过使细胞与足以抑制所述细胞中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明化合物接触，抑制所述细胞中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使组织与足以抑制所述组织中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明化合物接触，抑制所述组织中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使有机体与足以抑制所述有机体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物接触，抑制所述有机体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使动物与足以抑制所述动物中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物接触，抑制所述动物中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使哺乳动物与足以抑制所述哺乳动物中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物接触，抑制所述哺乳动物中的K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法。在一些实施方案中，本发明提供了通过使人与足以抑制所述人中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的量的本发明的化合物接触，抑制所述人中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性的方法。本发明提供了治疗由需要这种治疗的个体中K-Ras、H-Ras或N-Ras G12C活性所介导的疾病的方法。
[0622] 本发明还提供了组合治疗的方法，其中将已知调节其它通路、或相同通路的其它成分、或甚至靶标酶的重叠群的药剂与本发明的化合物或其药物可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、互变异构体、水合物或衍生物组合使用。在一方面，这种治疗包括但不限于将一种或多种本发明的化合物与化疗剂、治疗性抗体以及放射疗法组合，从而提供协同的或额外的治疗效果。
[0623] 许多化疗剂是本领域目前已知的，并且可与本发明的化合物组合使用。在一些实施方案中，该化疗剂选自：有丝分裂抑制剂、烷(烃)化剂、抗代谢剂、嵌入抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应修饰剂、抗激素、血管生成抑制剂和抗雄激素。
[0624] 非限制性的实例是化疗剂、细胞毒性剂和非肽小分子如 (甲磺酸伊马替尼)、 (硼替佐米)、Casodex(比卡鲁胺)、 (吉非替尼)和阿霉
素以及众多的化疗剂。化疗剂的非限制性实例包括：烷(烃)化剂，如噻替派和环磷酰胺(CYTOXANTM)；磺酸烷(烃)基酯，如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶类，如苯佐替哌、卡波醌、美妥替哌和乌瑞替哌；亚乙基亚胺类和甲基蜜胺类，包括六甲蜜胺、三乙撑蜜胺、三乙撑磷酰胺、三乙撑硫化磷酰胺和三羟甲蜜胺；氮介，如苯丁酸氮芥、萘氮芥、胆磷酰胺、雌莫司汀、异磷酰胺、氮芥、盐酸氧氮芥、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾醇、泼尼氮芥、三芥环磷酰胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，如阿克拉霉素、放线菌素、安曲霉素、偶氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C、卡里奇霉素、卡拉比星(carabicin)、洋红霉素、嗜癌菌素、CasodexTM、色霉素、更生霉素、柔红霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素、丝裂霉素、霉酚酸、诺拉霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑霉素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢剂，如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双去氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷、雄激素，如卡普睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺素药，如氨格鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；安吖啶；bestrabucil；比生群；依达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺；地吖醌；elfomithine；依利醋铵；
依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；硝氨丙吖啶；喷司他丁；苯来美特；吡柔比星；鬼臼酸；2-乙基酰胼；丙卡巴肼；PSK.RTM；雷佐生；
西佐喃；锗螺胺；替奴佐酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌；2,2’,2”-三氯三乙胺；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；
阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；紫杉烷例如紫杉醇(TAXOLTM,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.) 和 多 西 他 赛 (TAXOTERETM,Rhone-Poulenc Rorer,Antony,France)；视黄酸；埃斯培拉霉素；卡培他滨；以及上述物质的任何药物可接受的盐、酸或衍生物。也包括用作调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，作为适合的化疗细胞调节剂，如抗雌激素类，包括例如他莫昔芬(NolvadexTM)、雷洛昔芬、抑制芳香酶的4(5)-咪唑类、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、那洛昔芬(keoxifen)、LY 117018、奥那司酮和托瑞米芬(法乐通)；以及抗雄激素类，如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-巯基鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物如顺铂和卡铂；长春花碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；诺维本；诺消灵；替尼泊苷；道诺霉素；氨基蝶呤；希罗达；伊班膦酸盐；喜树碱-11(CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)。如需要，可将本发明的化合物或药物组合物与常用的处方抗癌药物组合使用，所述抗癌药物例如
ABVD、
AVICINE、阿巴伏单抗、吖啶甲酰胺、阿德木单抗、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素、阿法拉汀(Alpharadin)、阿伏西地(Alvocidib)、3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲、氨萘非特、蒽二酮、抗-CD22免疫毒素、抗肿瘤剂、抗肿瘤发生药草、阿帕齐醌(Apaziquone)、阿替莫德、咪唑硫嘌呤、贝洛替康、苯达莫司汀、BIBW 2992、比立考达、布罗他辛、苔藓抑素、丁硫氨酸亚砜亚胺、CBV(化学疗法)、花萼海绵诱癌素、细胞周期非特异性抗肿瘤剂、二氯乙酸、圆皮海绵内酯、依沙芦星、依诺他滨、埃博霉素、艾日布林、依维莫司、依喜替康、依昔舒林、弥罗松酚、呋咯地辛、磷雌酚、ICE化疗方案、IT-101、伊美克、咪喹莫特、吲哚并咔唑、伊洛福芬、拉尼喹达、莱龙泰素(Larotaxel)、来那度胺、硫蒽酮、勒托替康、马磷酰胺、米托唑胺、萘福昔定、奈达铂、奥拉帕尼、奥他赛、PAC-1、木瓜素、匹克生琼、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素、瑞喹莫德、鲁比替康、SN-38、沙林斯泊酸胺A、沙帕他滨、斯坦福V、苦马豆素、他拉泊芬、他立喹达(Tariquidar)、喃氟啶-尿嘧啶、替莫唑胺、替司他赛、四硝基三铂、三(2-氯乙基)胺、曲沙他滨、乌拉莫司汀、伐地美生、长春氟宁、ZD6126或唑喹达(Zosuquidar)。
[0625] 本发明进一步涉及将本文提供的化合物或药物组合物与放射治疗组合使用的方法，从而抑制哺乳动物中异常细胞生长或治疗过度增生性疾患。给予放射治疗的技术是本领域已知的，并且这些技术可用于本文所描述的联合治疗。在该联合治疗中，本发明化合物的给药可如本文所描述的确定。
[0626] 放射治疗可通过若干方法中的一种给予，或通过方法的组合给予，该方法包括但不限于：外粒子束治疗、体内辐照治疗、植入物放射疗法、立体定位性放射外科手术、全身放射治疗、放射疗法和持久或暂时的间质近距离放射疗法。本文使用的术语“近距离放射疗法”是指由嵌入到身体中、在肿瘤或其它过度增殖性组织疾病位点处或附近的、在空间上受限的放射性材料所递送的放射治疗。该术语意在包括但不限于，暴露于放射性同位素(例如At-211、I-131、I-125、Y-90、Re-186、Re-188、Sm-153、Bi-212、P-32和Lu的放射性同位素)。适于用作本发明的细胞调节剂的放射源包括固体和液体。作为非限制性实例，所述放射源可为：放射性核素，如I-125、I-131、Yb-169、Ir-192(作为固体源)、I-125(作为固体源)，或发射光子、β粒子、γ射线或其它治疗射线的其它放射性核素。所述放射性材料也可以为，由一种或多种放射性核素的任何溶液制备的流体，例如，I-125或I-131的溶液，或可以使用含固体放射性核素(如Au-198、Y-90)小粒子的适合的流体浆液制备放射性流体。此外，所述的一种或多种放射性核素能够以凝胶或放射性微球体呈现。
[0627] 不束缚于任何理论，本发明的化合物可使得异常细胞对用于杀灭和/或抑制所述细胞生长的放射治疗敏感。因此，本发明还涉及使哺乳动物中的异常细胞对放射治疗敏感的方法，该方法包括给予所述哺乳动物一定量的本发明化合物或其药物可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、水合物或衍生物，所述量有效地使异常细胞对放射治疗敏感。在该方法中所述化合物、盐或溶剂化物的量可以根据本文所描述的确定该化合物的有效量的方法测定。
[0628] 本发明化合物或药物组合物可以与一定量选自以下的一种或多种物质组合使用：抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖酵解抑制剂或自噬抑制剂。
[0629] 抗血管生成剂如MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂、MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂和COX-11(环氧合酶11)抑制剂，可以与本文所描述的本发明化合物和药物组合物组合使用。抗血管生成剂包括，例如，雷帕霉素、西罗莫司(CCI-779)、依维莫司(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼和贝伐单抗。有用的COX-II抑制剂的实例包括CELEBREXTM(塞来昔布(alecoxib))、伐地昔布和罗非昔布。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于：WO96/33172(1996年10月24日公开)、W096/27583(1996年3月7日公开)、第
97304971.1号欧洲专利申请(1997年7月8日提交)、第99308617.2号欧洲专利申请
(1999年10月29日提交)、WO98/07697(1998年2月26公开)、WO98/03516(1998年1
月29日公开)、WO98/34918(1998年8月13日公开)、WO98/34915(1998年8月13日公
开)、WO98/33768(1998年8月6日公开)、WO98/30566(1998年7月16日公开)、欧洲
专利公开606,046(1994年7月13日公开)、欧洲专利公开931,788(1999年7月28日
公开)、WO90/05719(1990年5月31日公开)、WO99/52910(1999年10月21日公开)、
WO99/52889(1999年10月21日公开)、WO99/29667(1999年6月17日公开)、第PCT/
IB98/01113号PCT国际申请(1998年7月21日提交)、第99302232.1号欧洲专利申请(1999年3月25日提交)、第9912961.1号英国专利申请案(1999年6月3日提交)、第60/148,464号美国临时申请(1999年8月12日提交)、美国专利5,863,949(1999年1月26日授权)、美国专利5,861,510(1999年1月19日授权)和欧洲专利公开780,386(1997年6月25公
开)，将其全部内容以引用方式并入本文。优选的MMP-2和MMP-9抑制剂是对抑制MMP-1具有极低活性或无活性的那些。更优选地是相对于其它基质金属蛋白酶(即，MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)，选择性抑制MMP-2和/或AMP-9的那些。可用于本发明的MMP抑制剂的一些具体实例为AG-3340、RO32-3555和RS13-0830。
[0630] 自噬抑制剂包括但不限于：氯喹、3-甲基腺嘌呤、羟氯喹(PlaquenilTM)、巴伐洛霉素A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核苷(AICAR)、冈田酸、抑制2A型或1型蛋白磷酸酶的自噬抑制性藻毒素、cAMP类似物和升高cAMP水平的药物，如腺苷、LY204002、N6-巯基嘌呤核苷和长春花碱。此外，还可以使用抑制蛋白质表达的反义或SiRNA，包括但不限于ATG5(其牵涉在自噬中)。
[0631] 本发明还涉及用于治疗哺乳动物心血管疾病的方法和/或药物组合物，所述组合物包含一定量的本发明化合物或其药物可接受的盐、酯、前药、溶剂化物、互变异构体、水合物或衍生物，以及一定量的用于治疗心血管疾病的一种或多种治疗剂。
[0632] 用于心血管疾病应用的示例性药剂为抗血栓剂，例如前列环素和水杨酸盐；血栓溶解剂，例如链激酶、尿激酶、组织纤溶酶原激活物(TPA)和茴香酰化的纤溶酶原-链激酶激活剂复合物(APSAC)；抗血小板剂，例如乙酰水杨酸(ASA)和氯吡格雷；血管扩张剂，例如硝酸盐、钙通道阻断药物；抗增生剂，例如秋水仙碱；以及烷(烃)化剂；插入剂；生长调节因子，如白介素；转化生长因子-β和血小板源性生长因子同源物；针对生长因子的单克隆抗体；甾体和非甾体抗炎剂；以及可以调节血管张力、功能、动脉硬化和对血管或器官损伤介入后的愈合反应的其它药剂。还可以将抗生素包括在本发明包含的组合或包衣中。此外，包衣可以用于实现血管壁内的局灶性治疗剂的递送。通过将活性剂掺入可膨胀的聚合物中，活性剂可以在聚合物膨胀时释放。
[0633] 在一些实施方案中，本文所描述的化合物可以与液体或固体组织屏障(也称为润滑剂)联合配制或给予。组织屏障的实例包括但不限于：多糖、蛋白多糖、生物膜、防粘连膜(interceed)和透明质酸。
[0634] 在一些实施方案中，可以与本文所描述的化合物联合给予的药物包括适用于通过吸入递送的任何适合的药物，例如镇痛药，如可待因、二氢吗啡、麦角胺、芬太尼或吗啡；心绞痛制剂，例如地尔硫卓；抗过敏药，例如色甘酸盐、酮替芬或奈多罗米；抗感染药，例如头孢菌素、盘尼西林、链霉素、磺胺类药物、四环素或戊烷脒；抗组胺药，例如美沙吡林；抗炎药，例如，倍氯米松、氟尼缩松、布地奈德、替泼尼旦、曲安奈德或氟替卡松；止咳药，例如诺司卡品；支气管扩张药，例如麻黄素、肾上腺素、非诺特罗、福莫特罗、异丙肾上腺素、奥西那林、苯肾上腺素、苯丙醇胺、吡布特罗、瑞普特罗、利米特罗、沙丁胺醇、沙美特罗、特布他林、新异丙肾上腺素、妥布特罗、奥西那林或(-)-4-氨基-3,5-二氯-α-[[[6-[2-(2-吡啶基)乙氧基]己基]-氨基]甲基]苯甲醇；利尿剂，例如阿米洛利；抗胆碱能药物，例如异丙托铵、阿托品或氧托溴铵；激素，例如可的松、氢化可的松或泼尼松龙；黄嘌呤，例如氨茶碱、胆茶碱、赖氨酸茶碱或茶碱；以及治疗性蛋白质和肽，例如胰岛素或胰高血糖素。本领域技术人员应明确，适合时，药物可以以盐的形式(例如，作为碱金属或胺盐或作为酸加成盐)或酯的形式(例如，低级烷基酯)或溶剂化物的形式使用，以优化药物的活性和/或稳定性。
[0635] 用于组合治疗的其它示例性治疗剂包括但不限于，如上所述的药剂、放射疗法、激素拮抗剂、激素及其释放因子、甲状腺和抗甲状腺药物、雌激素和孕激素、雄激素、促肾上腺皮质激素；肾上腺皮质类固醇及其合成类似物；肾上腺皮质激素合成和作用的抑制剂、胰岛素、口服降血糖剂和内分泌胰腺的药理、影响钙化和骨转换的药剂：钙、磷酸盐、甲状旁腺素、维生素D、降钙素、维生素(如水溶性维生素、复合维生素B、抗坏血酸、脂溶性维生素、维生素A、K和E)、生长因子、细胞因子、趋化因子、毒蕈碱受体激动剂和拮抗剂；抗胆碱酯酶剂；作用于神经肌肉接头和/或自主神经节的药剂；儿茶酚胺、拟交感神经药和肾上腺素能受体激动剂或拮抗剂；和5-羟色胺(5-HT、血清素)受体激动剂和拮抗剂。
[0636] 治疗剂还可以包括用于疼痛和炎症的药剂，如组胺和组胺拮抗剂、缓激肽和缓激肽拮抗剂、5-羟色胺(血清素)、由膜磷脂的选择性水解产物进行生物转化生成的脂质物质、类花生酸、前列腺素、血栓素、白三烯、阿司匹林、非甾体抗炎剂、镇痛退热剂、抑制前列腺素和血栓素合成的药剂、诱导性环氧酶的选择性抑制剂、诱导性环氧酶-2的选择性抑制剂、内分泌物、旁分泌激素、生长抑素、胃泌素、介导体液和细胞免疫应答中涉及的相互作用的细胞因子、源自脂质的内分泌物、类花生酸、β-肾上腺素能激动剂、异丙托铵、糖皮质激素、甲基黄嘌呤、钠通道阻断剂、阿片受体激动剂、钙通道阻断剂、膜稳定剂和白三烯抑制剂。
[0637] 本文所考虑的额外的治疗剂包括利尿剂、加压素、影响肾的水保持的药剂、凝乳酶、血管紧张素、用于治疗心肌缺血的药剂、抗高血压剂、血管紧张素转化酶抑制剂、β-肾上腺素受体拮抗剂、用于治疗高胆固醇血症的药剂和用于治疗血脂异常的药剂。
[0638] 本文所考虑的其它治疗剂包括用于控制胃酸度的药物、用于治疗消化性溃疡的药剂、用于治疗胃食管返流病的药剂、促动力药剂、止吐药、用于肠易激综合征的药剂、用于腹泻的药剂、用于便秘的药剂、用于炎性肠疾病的药剂、用于胆疾病的药剂、用于胰腺疾病的药剂。用于治疗原虫感染的治疗剂，用于治疗疟疾、阿米巴病、贾第虫病、滴虫病、锥体虫病和/或利什曼病的药物，和/或用于蠕虫病的化学治疗中的药物。其它治疗剂包括抗微生物剂、磺胺类药物、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑喹诺酮，以及用于尿路感染的药剂、青霉素、头孢菌素以及其它；β-内酰胺抗生素；含有氨基糖苷的药剂；蛋白合成抑制剂；用于结核病、鸟型结核分支杆菌复合体疾病和麻风病的化学治疗的药物；抗真菌剂；抗病毒剂，包括非逆转录病毒剂和抗逆转录病毒剂。
[0639] 可以与本发明化合物组合的治疗性抗体的实例包括但不限于：抗受体酪氨酸激酶抗体(西妥昔单抗、帕尼单抗、曲妥珠单抗)；抗-CD20抗体(利妥昔单抗、托西莫单抗)和其它抗体，如阿仑单抗、贝伐单抗和吉妥珠单抗。
[0640] 此外，本文的方法考虑了用于免疫调节的治疗剂，如免疫调节剂、免疫抑制剂、耐受原和免疫刺激剂。此外，作用于血液和造血器官的治疗剂、造血剂、生长因子、矿物质和维生素、抗凝剂、溶血栓剂和抗血小板药物。
[0641] 对于治疗肾癌，可以将本发明的化合物与索拉非尼和/或阿伐斯汀组合。对于治疗子宫内膜疾患，可以将本发明的化合物与多柔比星、泰素帝(紫杉醇)和/或顺铂(卡铂)组合。对于治疗卵巢癌，可以将本发明的化合物与顺铂(卡铂)、泰素帝、多柔比星、拓扑替康、和/或他莫昔芬组合。对于治疗乳腺癌，可以将本发明的化合物与泰素帝(紫杉醇)、吉西他滨(卡培他滨)、他莫昔芬、来曲唑、特罗凯(tarceva)、拉帕替尼、PD0325901、阿伐斯汀、赫塞汀、OSI-906和/或OSI-930组合。对于治疗肺癌，可以将本发明的化合物与泰素帝(紫杉醇)、吉西他滨、顺铂、培美曲塞、特罗凯、PD0325901和/或阿伐斯汀组合。
[0642] 可与本发明化合物组合的其他治疗剂可参见Goodman和Gilman的“ThePharmacological Basis of Therapeutics(治疗学的药理学基础)”第10版，Hardman、Limbird和Gilman编辑或the Physician’s Desk Reference，将两者的全部内容以引用方式并入本文。
[0643] 可以根据所治疗的病况将本文所描述的化合物与本文公开的药剂或其它适合的药剂组合使用。因此，在一些实施方案中，本发明的一种或多种化合物将与如上所述的其它药剂联合给药。当在组合治疗中使用时，本文所描述的化合物与第二药剂同时或单独给药。该组合给药可以包括将两种药剂以相同剂型同时给药、以分别的剂型同时给药和单独给药。即，本文所描述的化合物和任意上述药剂可以以相同的剂型一起配制并同时给药。供选择地，本发明的化合物和任意上述药剂可以同时给药，其中两种药剂均存在于单独的制剂中。在另一个替代的方案中，本发明的化合物可以紧接着任何上述药剂给药，反之亦然。在单独给药方案的一些实施方案中，本发明的化合物和任意上述药剂可以间隔数分钟、数小时或数日给药。
[0644] 以下提供的实施例和制备进一步说明并例示了本发明的化合物和制备该类化合物的方法。应理解，本申请的范围不以任何方式被以下的实施例和制备的范围所限制。在以下实施例，以及全部说明书和权利要求中，除非另有注释，具有单一手性中心的分子作为外消旋混合物存在。除非另有注释，那些具有两个或多个手性中心的分子作为非对映异构体的外消旋混合物存在。单一对映异构体/非对映异构体可由本领域技术人员已知的方法获得。实施例
[0645] 实施例1
[0646]
[0647] 5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)甲醇
[0648] 在0℃下，向5-溴-4-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(1.0g,3.6mmol)的干燥THF(10mL)溶液中加入超氢化物(1.0M,10mL)，并且将产生的混合物在室温下搅拌过夜。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的产物。该粗产物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0649] 5-溴-4-氯-2-甲氧基苯甲醛
[0650] 向5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)甲醇的干燥DCM(5mL)溶液中加入Dess-Martin试剂(607mg)，并将产生的混合物在室温下搅拌过夜。将该混合物在DCM和水中分层。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过Isolera One(硅胶柱，0-60％乙酸乙
1
酯/己烷)纯化，以提供期望的产物(200mg,56％收率)。H NMR(300MHz,CDCl3)δ:10.33(s,1H),8.04(s,1H),7.12(s,1H),3.39(s,3H)。
[0651] N-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)-1-(2,4-二甲氧基苯基)甲胺
[0652] 将5-溴-4-氯-2-甲氧基苯甲醛(300mg,1.2mmol)和2,4-二甲氧基苄胺(167mg,1.2mmol)的MeOH/DCM(4:1,10mL)溶液在室温下搅拌5h。向该混合物中分两次加入NaBH4(100mg,13mmol)。将该混合物搅拌1h，并且随后在DCM和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩，以提供期望的产物。该粗产物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0653] 4-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)(2,4-二甲氧基苄基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
[0654] 将在DMF(5mL)中的N-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)-1-(2,4-二甲氧基苯基)甲胺(190mg,0.47mmol)、1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-羧酸(109mg,0.47mmol)、
HATU(180mg,0.47mmol)和Et3N(101mg,1mmol)的混合物在室温下搅拌4h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩，以提供期望的产物。该粗产物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0655] N-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺
[0656] 将粗的4-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)(2,4-二甲氧基苄基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯溶解在50％TFA的DCM(10mL)中，并且将产生的混合物在室温下搅拌2h。
该混合物在真空下浓缩，并且该剩余物在DCM和饱和NaHCO3水溶液中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的产物。
[0657] 1-丙烯酰基-N-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺
[0658] 在0℃下，向从以上步骤获得的N-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺的DCM(10mL)溶液中，按顺序加入Et3N(0.2mL,1.43mmol)和丙烯酰氯(36.2mg,0.4mmol)，并且将混合物在室温下搅拌1h。该混合物在DCM和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过Isolera One(硅胶柱，0-3％
1
MeOH/DCM)纯化，以提供期望的产物(13mg)。H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:8.27(t,J
＝ 5.6Hz,1H),7.37(s,1H),7.26(s,1H),6.81(dd,J ＝ 10.4,18.8Hz,1H),6.08(dd,J ＝
2.4,16.7Hz,1H),5.66(dd,J ＝ 2.4,10.4Hz,1H),4.40(d,J ＝ 12.8Hz,1H),4.17(d,J ＝
5.8Hz,2H),4.07(d,J ＝ 13.1Hz,1H),3.83(s,3H),3.07(t,J ＝ 12.0Hz,1H),2.68(t,J ＝
12.7Hz,1H),2.48-2.50(m,1H),1.75(d,J ＝ 10.8Hz,2H),1.47-1.51(m,2H)。ESI-MS m/+
z:417.05[M+H]。
[0659] 实施例2
[0660]
[0661] 3-(5-溴-4-甲基-2-氧代吡啶-1(2H)-基)丙酸甲酯
[0662] 在80℃下，向5-溴-4-甲基吡啶-2(1H)-酮(1.0g,5.3mmol)的DMF(10mL)溶液中加入K2CO3(1.5g,10.6mmol)，随后加入丙烯酸甲酯(0.91g,10.6mmol)。将该混合物在80℃下搅拌1h。允许该混合物冷却至室温，并且随后将该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩。剩余物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0663] 3-(5-溴-4-甲基-2-氧代吡啶-1(2H)-基)丙酸
[0664] 向由上一步骤的粗产物的MeOH(20mL)溶液中加入KOH(2M,5mL)的水溶液，并且将产生的混合物在室温下搅拌过夜。该混合物用浓盐酸酸化，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。该粗产物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0665] 1-(3-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-3-氧代丙基)-5-溴-4-甲基吡啶-2(1H)-酮
[0666] 将3-(5-溴-4-甲 基-2-氧 代 吡啶-1(2H)-基 )丙酸 (112mg,0.43mmol)、1-( 哌 嗪 -1- 基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮 (80mg,0.43mmol)、HATU(163mg,0.43mmol) 和Et3N(0.2mL,1.43mmol)于DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌2h。该混合物在乙酸乙
酯和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩。该剩余物通过Isolera One(硅胶柱，0-6％MeOH/DCM)纯化，以提供期望的产物(22.8mg,14
1
收 率 )。H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.73(s,1H),6.55(dd,J ＝ 10.5,16.7Hz,1H),6.
46(s,1H),6.32(dd,J ＝ 1.8,16.8Hz,1H),5.75(dd,J ＝ 1.8,10.5Hz,1H),4.20(t,J＝ 6.0Hz,2H),3.4-3.6(m,8H),2.86(t,J ＝ 6.0Hz,2H),2.22(s,3H)。ESI-MS m/
+
z:382.05[M+H]。
[0667] 实施例3
[0668]
[0669] 5-(乙烯磺酰基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯
[0670] 在0℃下，向搅拌的六氢吡咯并 [3,4-c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(1.0g,4.71mmol)的DCM(20mL)混合液中加入Et3N(1.43g,14.1mmol)。将该混合物在0℃搅拌5min，并且随后向其中逐滴加入2-氯乙基磺酰氯(0.77g,4.71mmol)的DCM(5mL)溶液。
将产生的混合物在室温下搅拌0.5h。将该反应混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(30mL x
3)萃取。混合的有机层用盐水(15mL x 3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(10-50％乙酸乙酯/石油醚)纯化，以提供呈固体的期望的产物(0.5g,35％收率)。
[0671] 2-(乙烯磺酰基)八氢吡咯并[3,4-c]吡咯
[0672] 将5-(乙 烯磺 酰基 )六氢 吡咯 并[3,4-c]吡 咯-2(1H)-羧 酸叔 丁 酯(150mg,0.50mmol)于HCl/MeOH(20mL,2.86M)中的混合物在室温下搅拌1h。该混合物在真空下浓缩。以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的呈固体的粗产物(110mg)。
[0673] 4,5-二氯-2-硝基苯酚
[0674] 在-15℃下，向3,4-二氯苯酚(30g,185mmol)的DCM(300mL)溶液中加入硫酸(24g,278mmol)。向该混合物中逐滴加入硝酸(19g,194mmol)(历时20min)，并且将控制温度在-15℃至-5℃。将产生的混合物在0℃下搅拌1h。将混合物倒入冰中，并用乙酸乙酯萃取。混合的有机层用水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且随后在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝100:1)纯化，以提供呈固体的期望的产物(16g,42％收率)。
[0675] 2-氨基-4,5-二氯苯酚
[0676] 向搅拌的4,5-二氯-2-硝基苯酚(15g,72mmol)的乙酸(150mL)和水(450mL)溶液中分批加入铁粉(16g,285mmol)。将产生的混合物在50℃下搅拌2h。允许该混合物冷却至室温，过滤并用乙酸乙酯洗涤块状物。滤液用乙酸乙酯萃取。有机层用水、NaHCO3(水溶液)和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩，以提供期望的产物(10g,78％)。
[0677] 2-((4,5-二氯-2-羟基苯基)氨基)乙酸乙酯
[0678] 在室温下，向2-氨基-4,5-二氯苯酚(2.0g,11.3mmol)和2-氧代乙酸乙酯的DCM(50mL)溶液中加入AcOH(1mL)，并且将产生的混合物搅拌1h。向该混合物中加入NaBH(OAc)3(7.2g,33.9mmol)，并且随后搅拌16h。在真空下浓缩该混合物，并且将剩余物在DCM中悬浮。混合物通过硅藻土垫过滤，并且用盐水洗涤滤液。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下干燥。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，以提供呈固体的期望的产物(2.4g,81％收率)。
[0679] 2-((4,5-二氯-2-羟基苯基)氨基)乙酸
[0680] 在室温下，向2-((4,5-二氯-2-羟基苯基)氨基)乙酸乙酯(2g,7.6mmol)于4:1的四氢呋喃和水(30mL)中的混合物溶液，加入LiOH.H2O(3.2g,76mmol)，将产生的混合物搅拌30min，并且随后使用HCl(1N)水溶液酸化以调整pH为3至5。该混合物用乙酸乙酯(40mL x 3)萃取。混合的有机层用盐水(40mL x 3)洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物(2g)。
[0681] 2-((4,5-二氯-2-羟基苯基)氨基)-1-(5-(乙烯磺酰基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)乙酮
[0682] 在室温下，向搅拌的 2-((4,5-二氯 -2-羟基苯基 )氨基 )乙酸(90mg,0.385mmol)的DMF(15mL)溶液中，加入2-(乙烯磺酰基)八氢吡咯并[3,4-c]吡咯(110mg,0.46mmol)，随后加入HOBt(78.05mg,0.58mmol)、EDCI.HCl(110.7mg,0.46mmol)和Et3N(116.7mg,1.2mmol)。将该反应混合液在室温下搅拌1h。该反应混合物在乙酸乙酯和盐水中分层。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(10-50％乙酸乙酯/二氯乙烷)纯化，以提供期望的产物(20mg,10％收率)为固体。
1
H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.17(s,1H),6.91(dd,J ＝ 10.0,16.4Hz,1H),6.79(s,1H),6.62(s,1H),6.17-6.10(m,2H),5.25(t,J＝ 4.0Hz,1H),3.85-3.82(m,2H),3.71-3.66(m,1H),3.61-3.56(m,1H),3.45-3.39(m,3H),3.29-3.25(m,1H),3.09-3.00(m,3H),2.92-2.89(m,+
1H)。ESI-MS m/z:420.1[M+H]。
[0683] 实施例4
[0684]
[0685] 5-氯-2-硝基苯酚
[0686] 向2,4- 二 氯 -1-硝 基 苯 (100g,0.52mol)的 DMSO(200mL)溶 液 中，加 入NaOH(41.6g,1.04mol)的水(42mL)溶液，并且将产生的混合物在60℃下搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，将其倒入冰水中，并且随后用HCl(1M)的水溶液酸化以调节pH为3至4。混合物用乙酸乙酯萃取。混合的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物直接用于下一步骤(80g,88％收率)。
[0687] 4-氯-2-甲氧基-1-硝基苯
[0688] 向 5- 氯 -2- 硝 基 苯 酚 (40g,0.23mol) 的 DMF(200mL) 溶 液 中，加 入K2CO3(47.6g,0.345mol)和碘甲烷(49g,0.345mol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚)纯化，以提供期望的产物(30g,70％收率)。
[0689] 1-氯-2-碘-5-甲氧基-4-硝基苯
[0690] 向H2SO4(600mL,90％)溶液中加入三氟甲烷磺酸酐(11.3g,0.04mol)和NIS(49.68g,0.22mol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。向该混合物中迅速加入4-氯-2-甲氧基-1-硝基苯(69g,0.368mol)。将该混合物搅拌1h，并且随后将
NIS(33.12g,0.148mol)缓慢加入到混合物中。将混合物在室温下搅拌1h，并且随后倒入冰水中。经过滤收集沉淀物，用水、NaSO3水溶液和NaHCO3溶液洗涤，并且随后在真空下干燥以提供期望的产物(113g,98％收率)。
[0691] 4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺
[0692] 在50℃下，向1-氯-2-碘-5-甲氧基-4-硝基苯(113g,0.361mol)的乙酸(1L)和水(50mL)溶液中加入Fe(50.5g,0.903mol)，并且将产生的混合物在50℃下搅拌2h。允许该混合物冷却至室温，并且将其倒入冰水中。经过滤收集沉淀物，并且用水洗涤。将该粗产物用乙酸乙酯(1L)溶解并且过滤。滤液用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤并且在真空下浓缩，以提供期望的产物(87g,85％收率)。
[0693] 2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸乙酯
[0694] 在室温下，向4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(6g,21.2mmol)的MeOH(50mL)的溶液中加入AcOH(3滴)和乙醛酸乙酯(5.6g,27.5mmol,50％在甲苯中)。将该混合物在室温下搅拌2h，并且随后向混合物中加入氰基硼氢化钠(5.32g,84.8mmol)。将产生的混合物在50℃下搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，并在乙酸乙酯和水中分层。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空中浓缩，以提供粗产物(8.6g)。
[0695] 2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸
[0696] 向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸乙酯(8.6g,22.9mmol)的THF(50mL)和水(50mL)溶液中，加入LiOH.H2O(1.96g,45.9mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌2h。混合物用20％乙酸乙酯/石油醚洗涤。水层用HCl(1M)酸化以调节PH为3至4，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的产物(5g,64％收率)。
[0697] 4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0698] 在室温下，向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸(280mg,0.83mmol)和哌嗪-1-羧酸叔丁酯(185mg,0.99mmol)的DMF(10mL)溶液中，加入BOP(550mg,1.25mmol)和DIEA(321mg,2.49mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝3:1)纯化，以提供期望的产物(350mg,68.7％收率)。ESI-MS +m/z:510.3[M+1]。
[0699] 4-(2-(5-(2-氯苯基)-4-氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯[0700] 向4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.4mmol)和2-氯苯硼酸(69mg,0.44mmol)的1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)溶液中，加入Pd(PPh3)4(40mg,0.035mmol)和Na2CO3(212mg,2mmol)。将该混合物在80℃下搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)纯化，以提供期望的产物(150mg,76％收率)。
[0701] 2-(5-(2-氯苯基)-4-氯-2-甲氧基苯基氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮
[0702] 向4-(2-(5-(2-氯苯基)-4-氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(150mg,0.304mmol)的DCM(2mL)溶液中，加入HCl的MeOH(10mL,29mmol)的溶液。将该混合物在室温下搅拌1h，并且随后在真空下浓缩，以提供其无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物。
[0703] 1-(4-(2-(4-氯-5-(2-氯苯基)-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0704] 在0℃下，向粗的2-(5-(2-氯苯基)-4-氯-2-甲氧基苯基氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮(0.304mmol)和Et3N的DCM(5mL)的溶液中，缓慢加入丙烯酰氯(27.5mg,0.304mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。使用饱和NaHCO3猝灭该混合物，并且用DCM萃取。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法纯
1
化，以提供期望的产物(80mg,58.7％收率，2步骤)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.55-7.
52(m,1H),7.45-7.39(m,2H),7.32-7.29(m,1H),6.97(s,1H),6.80(dd,J＝ 10.4,16.4Hz,1H),6.54(s,1H),6.12(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),5.70(dd,J＝2.0,10.4Hz,1H),5.35(bs.,1+
H),3.93(d,J＝4.0Hz,2H),3.89(s,1H),3.55-3.49(m,8H)。ESI-MS m/z:448.2[M+H]。
[0705] 实施例5
[0706]
[0707] 1-(4-(2-(4-氯-2-羟基-5-(2-氯苯基)苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0708] 氩气下，在-78℃，向1-(4-(2-(4-氯-5-(2-氯苯)-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(70mg,0.147mmol)的DCM(15mL)的溶液中，加入
BBr3(187mg,0.754mmol)。将该混合物在室温下搅拌1h。将混合物倒入冰水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝40:1)纯化，
[0709] 以提供期望的产物(15mg,24％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.08(s,1H),7.53-7.51(m,1H),7.41-7.37(m,2H),7.30-7.28(m,1H),6.84-6.77(m,2H),6.4
8(s,1H),6.12(dd,J ＝ 2.4,16.4Hz,1H),5.70(dd,J ＝ 2.0,10.4Hz,1H),5.24(t,J ＝+
4.0Hz,1H),3.90(d,J＝4.4Hz,2H),3.56-3.49(m,8H)。ESI-MS m/z:434.2[M+H]。
[0710] 实施例6
[0711]
[0712] 4,5-二氯-2-乙烯基苯胺
[0713] 氩气下，将4,5-二氯-2-碘苯胺(6g,20.8mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(6.6g,20.8mmol)、Pd(PPh3)4(2.4g,2.1mmol)于甲苯(60mL)中的混合物搅拌回流6h。允许该混合物冷却至室温，用KF水溶液猝灭，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)纯化，以提供呈无色油状的期望的产物(3.0g,76.7％收率)。
[0714] 4,5-二氯-2-乙基苯胺
[0715] H2(1atm) 环 境 下，将 4,5-二 氯 -2-乙 烯 基 苯 胺 (3.0g,15.95mmol)、Pd/C(3.3g,10％)于MeOH(20mL)中的混合物在室温下搅拌4h。过滤该混合物，并将滤液在真空下浓缩，以提供期望的产物(2.4g,80％收率)。
[0716] 2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酸乙酯
[0717] 在0℃下，向搅拌的4,5-二氯-2-乙基苯胺(600mg,3.15mmol)的DMF溶液中，分批加入NaH(150mg,3.78mmol)。搅拌30min后，向混合物中加入2-溴乙酸乙酯
(789mg,4.74mmol)。将产生的混合物在120℃下搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，倒入冰水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)纯化，以提供呈黄色固体的期望的产物(380mg,44.7％收率)。
[0718] 2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酸
[0719] 将2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酸乙酯(390mg,1.41mmol)和LiOH.H2O(592mg,14.1mmol)于THF(8mL)和水(2mL)中的混合物在室温下搅拌2h。将该混合物在真空下浓缩，并且将剩余物溶解在H2O中并用乙酸乙酯稀释。混合物用HCl(10％)的水溶液酸化以调节pH为3至4，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下-
浓缩，以提供呈黄色固体的期望的产物(300mg,85.75％收率)。ESI-MS m/z:246.2[M-H]。
[0720] 4-(2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0721] 在0℃下，向搅拌的2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酸(100mg,0.403mmol)、Et3N(122mg,1.21mmol)于DCM(3mL)中的混合物，加入EDCI.HCl(123mg,0.604mmol)和HOBt(82mg,0.604mmol)。将产生的混合物在0℃下搅拌30min，并且随后加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(90mg,0.483mmol)。将混合在室温下搅拌16h，并且在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)纯化，以提供呈灰白色固体的期望的产物(120mg,71.5％收率)。ESI-MS -m/z:414.3[M-H]。
[0722] 2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐
[0723] 将4-(2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg,0.288mmol)于HCl/MeOH(2.86M,10mL)中的混合物在室温下搅拌1h。将该混合物在真空下浓缩，以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的呈黄色固体的粗产物(82mg)。
[0724] 1-(4-(2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0725] 在0℃下，向上述的粗的2-(4,5-二氯-2-乙基苯基氨基)-1-(哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(82mg)和Et3N(69mg,0.686mmol)于DCM(3mL)中的混合物，加入丙烯酰氯
(23mg,0.251mmol)的DCM(1mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌1h，并且随后用饱和NaHCO3溶液猝灭。混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提
1
供呈灰白色固体的期望的产物(20mg,18.76％收率,2步骤)。H NMR(400MHz,CDCl3)
δ:7.11(s,1H),6.58(dd,J ＝ 10.4,16.4Hz,1H),6.54(s,1H),6.36(dd,J ＝
1.6,16.4Hz,1H),5.79(dd,J＝ 1.6,10.4Hz,1H),5.08(bs.,1H),3.89-3.52(m,10H),2.52(+
q,J＝7.2Hz,2H),1.29-1.26(t,J＝7.6Hz,3H)。ESI-MS m/z:370.2[M+H]。
[0726] 实施例7
[0727]
[0728] 2-(4-氯吡啶-2-基氧代)-4,5-二氯苯胺
[0729] 在0℃下，向2-氨基-4,5-二氯苯酚(1.5g,8.47mmol)的THF溶液中，加入NaH(60％分散在油中，373mg,9.33mmol)，并且将产生的混合物搅拌20min。向该混合物中加入4-氯-2-氟吡啶(1.67g,12.7mmol)，并且将产生的混合在氩气下搅拌回流15h。允许该混合物冷却至室温，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1至10:1)纯化，已提供期望的产物(1.1g,45％收率)。ESI-MS m/z:287.0[M-H]-。
[0730] 2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)-4-氯吡啶
[0731] 将2-(4-氯吡啶-2-基氧代)-4,5-二氯苯胺(1.0g,3.47mmol)于浓HCl(5mL)和H2O(15mL)中的混合物冷却到-10℃至0℃，加入NaNO2(0.359g,5.21mmol)，并且
将产生的混合物在该温度下搅拌50min。向该混合物逐滴加入KI(10g,60.2mmol)、
CuI(330mg,1.73mmol)于H2O(40mL)中的混合物，并且随后在室温下搅拌15h。将该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝30:1)纯化，以提供期望的产物(900mg,65％收率)。ESI-MS m/z:399.9[M+H]+。
[0732] 2-(2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)吡啶-4-基氧)乙醇
[0733] 将2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)-4-氯吡啶(0.45g,1.128mmol)、乙烷-1,2-二醇(4mL,71.89mmol)、K2CO3(0.45mg,3.26mmol)于丙酮(6mL)中的混合物在120℃下搅拌5h。将该混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1至4:1)纯化，以提供期望的产物(160mg,33％收率)。ESI-MS m/z:426.0[M+H]+。
[0734] 2-(2-(2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)吡啶-4-基氧)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0735] 在0 ℃ 下，向2-(2-(4,5- 二 氯 -2-碘 苯 氧 基 )吡 啶-4-基 氧 )乙 醇(130mg,0.31mmol)、异吲哚啉-1,3-二酮(54mg,0.37mmol)、PPh3(160mg,0.61mmol)于THF(5mL)中的混合物，加入DIAD(123mg,0.61mmol)。允许将产生的混合物保温至室温，并且搅拌15h。将该混合物在真空下浓缩，并且将剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1至5:1)纯化，以提供期望的产物(120mg,71％收率)。ESI-MS m/+
z:555.0[M+H]。
[0736] 2-(2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)吡啶-4-基氧)乙胺
[0737] 将2-(2-(2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)吡啶-4-基氧)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(120mg,0.22mmol)、N2H4.H2O(106mg,1.80mmol)和EtOH(5mL)的混合物搅拌回流1h。允许该混合物冷却至室温，并且随后在真空下浓缩。剩余物在DCM(5mL)和MeOH(1mL)中悬浮。
通过过滤移除沉淀物，并且将滤液在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝10:1)纯化，以提供期望的产物(35mg,38％收率)。
[0738] N-(2-(2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)吡啶-4-基氧)乙基)乙烯基磺酰胺
[0739] 向2-(2-(4,5-二氯-2-碘苯氧基)吡啶-4-基氧)乙胺(30mg,0.07mmol)、Et3N(35.7mg,0.35mmol) 于 DCM(5mL) 中 的 混 合 物，加 入 2- 氯 乙 烷 磺 酰 氯(11.5mg,0.07mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。随后减压下移除溶剂。将剩余物溶解在THF(2mL)和H2O(2mL)中，随后加入K2CO3(100mg)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。将混合物在DCM和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/乙酸乙酯＝5:1)纯化，以提供期望的产物(56mg,56％收率)。
1
H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.98(d,J＝5.6Hz,1H),7.92(s,1H),7.25(s,1H),6.61-6.57(m,
2H),6.47(d,J＝2.0Hz,1H),6.32(d,J＝16.4Hz,1H),6.00(d,J＝10.0Hz,1H),4.77(t,J+
＝5.2Hz,1H),4.18(t,J＝5.2Hz,2H),3.51-3.47(m,2H)。ESI-MS m/z:515.0[M+H]。
[0740] 实施例8
[0741]
[0742] 3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0743] 将2-(4,5- 二 氯 -2- 羟 基 苯 基 氨 基) 乙 酸 (500mg,2.12mmol)、3-( 哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(565mg,2.34mmol)、EDCI.HCl(488mg,2.54mmol)、HOBt(343mg,2.54mmol)、Et3N(428mg,4.24mmol)于DMF(20mL)中的混合物在室温下搅拌15h。将该混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提供期望的产物(300mg,31％收率)。ESI-MS m/z:457.4[M-H]-。
[0744] 2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)-1-(4-(氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐
[0745] 将3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(150mg,0.33mmol)于HCl-MeOH(20mL,57mmol)中的混合物在室温下
搅拌1h。将该混合物在真空下浓缩，以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物(130mg)。
[0746] 1-(3-(4-(2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0747] 将2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)-1-(4-(氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)乙酮盐酸盐(120mg,0.30mmol)加入到Et3N(0.2mL,1.44mmol)于DCM(10mL)中的混合物，随后加入DMF(1滴)。将该混合物搅拌5min，并且随后加入丙烯酰氯(27mg,0.30mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌1h，倒入水中并且随后用MeOH/DCM萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH/NH3.H2O＝50:1:0.1
1
至20:1:0.2)纯化，以提供期望的产物(30mg,24％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:
10.17(s,1H),6.78(s,1H),6.71(s,1H),6.30(dd,J ＝ 10.4,17.2Hz,1H),6.09(dd,J ＝
2.0,17.2Hz,1H),5.67(dd,J＝2.4,10.4Hz,1H),5.32(t,J＝4.4Hz,1H),4.26-4.22(m,1H),4.11-4.04(m,1H),3.93-3.91(m,3H),3.79-3.75(m,3H),3.52-3.51(m,4H),3.19-3.16(m,1-
H),2.36-2.30(m,4H)。ESI-MS m/z:411.2[M-H]。
[0748] 实施例9
[0749]
[0750] 3-(3-(丙烯酰胺基)氮杂环丁-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0751] 向N-(氮杂环丁-3-基)丙烯酰胺盐酸盐(500mg,3.40mmol)、3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(684mg,4.0mmol)、Et3N(343mg,3.40mmol)和AcOH(100mg,0.167mmol)于DCM(20mL)中的混合物，加入NaBH(OAc)3(2.16g,10.2mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌16h。将该混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝100:1至20:1)纯化，以提供期望的产物(300mg,31％收率)。
[0752] N-(1-(氮杂环丁-3-基)氮杂环丁-3-基)丙烯酰胺盐酸盐
[0753] 将3-(3-(丙烯酰胺基)氮杂环丁-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(300mg,1.07mmol)于HCl-MeOH(30mL,86mmol)中的混合物在室温下搅拌1h。将该混合物在真空下浓缩，以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物(250mg)。
[0754] N-(1-(1-(2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)乙酰基)氮杂环丁-3-基)氮杂环丁-3-基)丙烯酰胺
[0755] 将2-(4,5- 二 氯 -2- 羟 基 苯 基 氨 基 ) 乙 酸 (120mg,0.51mmol)、EDCI.HCl(147mg,0.77mmol)、HOBt(83mg,0.61mmol)、Et3N(154mg,1.53mmol) 于 DMF(20mL) 中的混合物在室温下搅拌5min，并且随后加入N-(1-(氮杂环丁-3-基)氮杂环丁-3-基)丙烯酰胺盐酸盐(150mg,0.69mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌15h。将该混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH/NH3.H2O＝100:10:1.5)纯化，以
1
提供期望的产物(6mg,3％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.19(s,1H),8.59(d,J＝ 8.0Hz,1H),6.79(s,1H),6.55(s,1H),6.20(dd,J ＝ 10.0,16.8Hz,1H),6.09(dd,J ＝
2.0,16.8Hz,1H),5.62(dd,J＝2.0,9.6Hz,1H),5.20(t,J＝4.0Hz,1H),4.40-4.35(m,1H),4.19-4.15(m,1H),3.96-3.88(m,2H),3.73-3.69(m,3H),3.53-3.45(m,3H),3.00-2.96(m,+
2H)。ESI-MS m/z:399.2[M+H]。
[0756] 实施例10
[0757]
[0758] 2,6-二氮杂-螺[3.4]辛烷-6-丙烯酰基-2-羧酸叔丁酯
[0759] 向 2,6- 二 氮 杂 - 螺 [3.4] 辛 烷 -2- 羧 酸 叔 丁 酯 (80mg,0.38mmol)、Et3N(0.2mL,1.44mmol)于DCM(20mL)中的混合物，加入丙烯酰氯(34mg,0.38mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。将该混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝40:1)纯化，以提供期望的产物(50mg,50％收率)。ESI-MS m/+
z:289.2[M+Na]。
[0760] 1-(2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-6-基)丙-2-烯-1-酮
[0761] 将2,6-二氮杂-螺[3.4]辛烷-6-丙烯酰基-2-羧酸叔丁酯(50mg,0.19mmol)的HCl/MeOH(10mL,29mmol)混合物在室温下搅拌1h。将该混合物在真空下浓缩，以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物(40mg)。
[0762] 1-(2-((4,5-二氯-2-羟基苯基)氨基乙酰基)-2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-6-基)丙-2-烯-1-酮
[0763] 将2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)乙酸(47mg,0.2mmol)、1-(2,6-二氮杂螺[3.4]辛 烷-6- 基) 丙-2-烯 -1-酮 (40mg,0.2mmol)、EDCI.HCl(46mg,0.24mmol)、HOBt(32mg,0.24mmol)和Et3N(0.61mg,0.6mmol)于DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌
2h。将混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提
1
供期望的产物(13mg,17％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.17(s,1H),6.78(s,1H),6.60-6.50(m,2H),6.13(dt,J＝2.4,16.4Hz,1H),5.67(dd,J＝2.4,10.4Hz,1H),5.19(dd,J＝5.2,10.0Hz,1H),4.16-4.07(m,2H),3.90-3.83(m,2H),3.75-3.72(m,3H),3.61-3.52(m,-
2H),3.42-3.39(m,1H),2.16-2.13(m,1H),2.06-2.03(m,1H)。ESI-MS m/z:382.3[M-H]。
[0764] 实施例11
[0765]
[0766] 3-(4,5-二氯-2-碘苯基)苯酚
[0767] 氩 气 下，将1,2- 二 氯 -4,5-二 碘 苯(1.5g,3.76mmol)、3- 羟 基 苯 硼 酸(0.52g,3.76mmol)、Na2CO3(1.99g,18.8mmol)和Pd(PPh3)4(0.35g,0.30mmol)于1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌回流16h。允许该化合物冷却至室温，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1)纯化，以提供期望的-产物(300mg,22％收率)。ESI-MS m/z:362.9[M-H]。
[0768] 2-[3-(4,5-二氯-2-碘)苯氧基]乙醇
[0769] 氮气下，将3-(4,5-二氯-2-碘苯基)苯酚(0.3g,0.82mmol)、2-溴乙 醇(0.20g,1.65mmol)、K2CO3(0.57g,4.12mmol)于DMF(5mL)中的混合物在100℃下搅拌16h。
允许该混合物冷却至室温，并且在乙酸乙酯和盐水中分层。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)纯化，以提供期望的产物(150mg,45％收率)。
[0770] N-(2-((4’,5’-二氯-2’-碘-[1,1’-联苯]-3-基)氧)乙基)乙烯磺酰胺
[0771] 按照实施例28中所描述的步骤，由2-[3-(4,5-二氯-2-碘)苯氧基]乙醇1
以3个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.01(s,1H),7.37-7.33(m,
2H),6.94-6.91(m,2H),6.81-6.80(m,1H),6.57(dd,J ＝ 10.0,16.8Hz,1H),6.30(d,J＝ 16.4Hz,1H),5.97(d,J ＝ 10.0Hz,1H),4.77(t,J ＝ 6.0Hz,1H),4.14(t,J ＝
-
5.2Hz,2H),3.49-3.45(m,2H)。ESI-MS m/z:496.0[M-H]。
[0772] 实施例12
[0773]
[0774] 5-溴-4-氯-2-碘苯胺
[0775] 向3-溴-4-氯苯胺(10.0g,48.5mmol)的CH3COOH(50mL)溶液中分批加入NIS(10.9g,48.5mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌16h。将该混合物在真空下浓缩。
将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝50:1)纯化，以提供期望的产物-
(2.5g,15.5％收率)。ESI-MS m/z:329.9[M-H]。
[0776] 5-溴-4-氯-2-乙烯基苯胺
[0777] 氩气下，将5-溴-4-氯-2-碘苯胺(2.5g,7.51mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(2.4g,7.51mmol)、Pd(PPh3)4(867mg,0.75mmol)于甲苯(25mL)中的混合物搅拌回流16h。
允许该反应混合物冷却至室温，并且用KF水溶液猝灭。该反应混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙+
酸乙酯＝20:1)纯化，以提供期望的产物(1.0g,57.4％收率)。ESI-MS m/z:232.2[M+H]。
[0778] 2’,6-二氯-4-乙烯基-[1,1’-联苯]-3-胺
[0779] 氩气下，将5- 溴-4-氯-2-乙烯基苯 胺(600mg,2.6mmol)、2-氯苯硼 酸(1.25g,12.9mmol)、Pd(PPh3)4(300mg,0.26mmol)、Na2CO3(1.4g,13.0mmol)于1,4-二氧六环(20mL)和水(5mL)中的混合物搅拌回流16h。允许该混合物冷却至室温，并且随后在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝30:1)纯化，以提供期望的+
产物(500mg,73.1％收率)。ESI-MS m/z:263.1[M+H]。
[0780] 2’,6-二氯-4-乙基-[1,1’-联苯]-3-胺
[0781] 在0℃下，向2’,6-二氯-4-乙烯基-[1,1’-联苯]-3-胺(500mg,1.9mmol)、CuCl(225mg,2.28mmol)于MeOH(10mL)中的混合物分批加入NaBH4(722mg,19mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌20min。用水猝灭该反应，并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝+30:1)纯化，以提供期望的产物(300mg,59.4％收率)。ESI-MS m/z:266.0[M+H]。
[0782] 1-(4-(2-((2’,6-二氯-4-乙基-[1,1’-联苯]-3-基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0783] 按照实施例20所描述的步骤和以下用于酰胺形成的步骤，由2’,6-二氯-4-乙基-[1,1’-联苯]-3-氨基以3个步骤制备标题化合物。
[0784] 在0℃下，向2-((2’,6-二氯-4-乙基-[1,1’-联苯]-3-基)氨 基)乙酸 (150mg,0.466mmol) 和 Et3N(235mg,2.33mmol) 的 DMF(5mL) 溶 液 中 加 入 EDCI.HCl(178mg,0.932mmol)和HOBt(126mg,0.932mmol)，并且将产生的混合物在0℃搅拌
30min。向该混合物中加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(123mg,0.698mmol)，并且随后在室温下搅拌16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层使用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝50:1)纯化，以提供期望的产物
1
(45mg,21.7％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.56-7.54(m,1H),7.43-7.41(m,2H),7.32-7.30(m,1H),7.14(s,1H),6.81(dd,J ＝ 10.4,16.4Hz,1H),6.54(s,1H),6.13(dd,J ＝
2.4,16.8Hz,1H),5.71(dd,J＝2.0,10.4Hz,1H),5.25(bs.,1H),3.96(d,J＝4.4Hz,2H),3.-
56-3.52(m,8H),2.54(q,J＝7.2Hz,2H),1.23(t,J＝7.2Hz,3H)。ESI-MS m/z:444.3[M-H]。
[0785] 实施例13
[0786]
[0787] 2-氨基-5-溴-3-甲氧基苯甲酸
[0788] 在-5℃下，向2-氨基-3-甲氧基苯甲酸(5g,29.9mmol)的MeOH(35mL)溶液中加入NBS(5.59g,31.4mmol)，并且将产生的混合物在0℃下搅拌16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供粗产物(4g,54％-收率)。ESI-MS m/z:244.2[M-H]。
[0789] 3-溴-5-甲氧基苯甲酸
[0790] 在0℃下，向2-氨基-5-溴-3-甲氧基苯甲酸(4g,16.3mmol)的水(20mL)溶液中加入浓HCl(7.5mL,90mmol)和THF(20mL)。将混合物搅拌30min，并且随后加
入NaNO2(3.16g,45.8mmol)。将产生的混合物搅拌2h，并且随后向反应中加入次磷酸(5.1g,76mmol,50％在H2O中)。将反应混合物在室温下搅拌16h。通过过滤收集沉淀物，用-
水洗涤并在真空下干燥，以提供期望的产物(3.2g,85％收率)。ESI-MS m/z:229.2[M-H]。
[0791] 3-(2-氯苯基)-5-甲氧基苯甲酸
[0792] 向3-溴-5-甲氧基苯甲酸(1g,4.06mmol)和2-氯苯硼酸(1.27g,8.13mmol)于1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中的溶液加入Pd(PPh3)4(468mg,0.40mmol)和
Na2CO3(2.15g,20.3mmol)，并且将产生的混合物在80℃下搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，并使用HCl(1.0M)水溶液酸化以调节pH为3至4。用乙酸乙酯萃取该混合物。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的无需进一步纯化的产物(800mg,75％收-
率)。ESI-MS m/z:361.2[M-H]。
[0793] 1-(4-(2’-氯-5-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0794] 向4-丙烯酰基哌啶-1- 羧酸叔丁酯的DCM(2mL)溶液中加入 HCl的MeOH(10mL,28.6mmol)溶液，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。将该混合物在
真空下浓缩。将剩余物加入3-(2-氯苯基)-5-甲氧基苯甲酸(280mg,1.07mmol)、
HOBt(290mg,2.17mmol)、EDCI.HCl(410mg,2.17mmol) 和 Et3N(324mg,3.21mmol) 的DMF(10mL)溶液中。将产生的混合物在室温下搅拌16h，并在DCM和饱和NaHCO3溶液中分层。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲+
烷/甲醇＝50:1)纯化以提供期望的产物(200mg,52％收率)。ESI-MS m/z:385.2[M+H]。
[0795] 1-(4-(2’-氯-5-羟基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-25)
[0796] 在-78℃下，向1-(4-(2’-氯-5-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(100mg,0.26mmol)的DCM(15mL)溶液中加入BBr3(650mg,2.6mmol)，并将产生的混合物在室温下搅拌1h。将该混合物倒入冰水中，使用饱和NaHCO3水溶液碱化以调节pH为7-8，并使用乙酸乙酯萃取。用MgSO4干燥有机层，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(25mg,26％收率)。1
H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.96(s,1H),7.58-7.56(m,1H),7.42-7.40(m,3H),6.89-6.75(m,4H),6.14(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),5.71(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),3.68-3.44(m,8H)。
+
ESI-MS m/z:371.2[M+H]。
[0797] 实施例14
[0798]
[0799] 4-(2-丙烯酰胺基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
[0800] 在0℃下，向搅拌的4-(2-氨基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.0g,4.38mmol)于DCM(20mL)中的混合物加入Et3N(1.33g,13.14mmol)，并且将产生的混合物在0℃下搅拌5min。向该混合物中逐滴加入丙烯酰氯(0.39g,4.38mmol)的DCM(5mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌30min。将该反应混合物倒入水(20mL)中，并用DCM(30mL x 3)萃取。混合的有机层用盐水(15mL x 3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(10-50％乙酸乙酯/二氯乙烷)纯化，以提供期望的产物(0.6g,50％收率)为固体。
[0801] N-(2-(哌啶-4-基)乙基)丙烯酰胺
[0802] 将4-(2-丙烯酰胺基乙基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(600mg,2.13mmol)于HCl/MeOH(60mL,2.86M)中的混合物在室温下搅拌1h。在真空下浓缩该混合物，以产生无需进一步纯化直接用于下一步骤的呈固体的粗产物(550mg)。
[0803] N-(2-(1-(2-((4,5-二氯-2-羟基苯基)氨基)乙酰基)哌啶-4-基)乙基)丙烯酰胺
[0804] 在室温下，向搅拌的 2-((4,5-二氯 -2-羟基苯基 )氨基 )乙酸(200mg,0.85mmol)的DMF(30mL)溶液中，加入N-(2-(哌啶-4-基)乙基)丙烯酰胺
(222.8mg,1.02mmol)，随后加入HOBt(172.9mg,1.28mmol)、EDCI.HCl(244.7mg,1.28mmol)和Et3N(257.9mg,2.55mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h，并且随后在乙酸乙酯和盐水中分层。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(1-3％甲醇/二氯乙烷)纯化，以提供呈固体的期望的产物(120mg,29％收
1
率 )。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.15(s,1H),8.07(t,J ＝ 5.2Hz,1H),6.78(s,1H),6.
72(s,1H),6.18(dd,J ＝ 10.0,17.2Hz,1H),6.06(dd,J ＝ 2.4,17.2Hz,1H),5.56(dd,J ＝
2.4,10.4Hz,1H),5.34(t,J＝4.0Hz,1H),4.36(d,J＝12.8Hz,1H),3.94-3.87(m,3H),3.20-3.15(m,2H),2.98-2.92(m,1H),2.63-2.57(m,1H),1.74-1.69(m,2H),1.57-1.52(m,1H),1.+
41-1.35(m,2H),1.12-0.95(m,2H)。ESI-MS m/z:400.4[M+H]。
[0805] 实施例15
[0806]
[0807] 2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-胺
[0808] 氩气下，在80℃，将4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(4.1g,14.5mmol)、2,5-二氯苯硼酸(3.3g,17.4mmol)、Pd(PPh3)4(500mg,1.45mmol)和Na2CO3(4.7g,43.5mmol)于1,4-二氧六环(150mL)和水(15mL)中的混合物搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1)纯化，以提供呈灰白色固体的期望的产物(3.3g,75.8％收率)。
[0809] 2,2’,5’-三氯-5-碘-4-甲氧基-1,1’-联苯
[0810] 在0℃下，向2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-胺(1.0g,3.3mmol)于浓HCl(10mL)和水(10mL)中的混合物分批加入NaNO2(350mg,5mmol)，并将产生的溶液在-5℃至0℃下搅拌30min。向该混合物中缓慢加入KI(2.2g,13.2mmol)的H2O(10mL)溶液和CuI(630mg,3.3mmol)。将产生的溶液在室温下搅拌45min，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1)纯化，以提供呈黑色油状的期望的产物(1.17g,87％收率)。
[0811] 2,2’,5’-三氯-4-甲氧基-5-乙烯基-1,1’-联苯
[0812] 氩气下，将2,2’,5’-三氯-5-碘-4-甲氧基-1,1’-联苯(1.17g,2.9mmol)、三丁基(乙烯基)锡烷(1.1g,3.5mmol)、Pd(PPh3)4(670mg,0.6mmol)于甲苯(30mL)中的混合物搅拌回流6h。该反应混合物用KF水溶液猝灭，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/DCM＝100:1)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(310mg,35％收率)。
[0813] 2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)乙醇
[0814] 氮气下，在室温下向搅拌的2,2’,5’-三氯-4-甲氧基-5-乙烯基-1,1’-联苯(310mg,1mmol)的THF(15mL)溶液中加入BH3(2mL,1N)。搅拌8h后，加入NaOH(160mg,4mmol)于水(3mL)中的混合物和H2O2(30％在H2O中,0.3g,4mmol)，并且将产生的混合物搅拌6h。该反应用NaHCO3水溶液猝灭，并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝4:1)纯化，以提供呈无色油状的期望的产物(180mg,54％收率)。
[0815] 2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)乙酸
[0816] 在0℃下，向2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)乙醇的CH3CN(20mL)溶液中，加入H5IO5\CrO3(3.7mL,1.63mmol,0.44M在水中)，并且将产生的混合物在0℃下搅拌1h。该反应用Na2HPO4猝灭，并且用乙酸乙酯稀释。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，以提供呈无色油状的该产物(110mg,59％收率)。ESI-MS m/-
z:343.1[M-H]。
[0817] 1-(4-(2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0818] 在0℃下，向2-(2’,5’,6三 氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)乙 酸(110mg,0.318mmol)、Et3N(96mg,0.954mmol) 于DMF(3mL) 中 的 混 合 物，加 入 EDCI.HCl(92mg,0.477mmol)和HOBt(65mg,0.477mmol)，并且将产生的混合物在0℃下搅拌
30min。向该混合物中加入1-(哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(67mg,0.382mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌16h，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提供呈
1
灰白色固体的期望的产物(37mg,24.97％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.61(d,J＝
8.4Hz,1H),7.52(dd,J＝2.4,8.8Hz,1H),7.40(d,J＝2.4Hz,1H),7.20(s,1H),7.10(s,1H),6.81(dd,J＝10.8,15.2Hz,1H),6.13(dd,J＝2.4,16.8Hz,1H),5.71(dd,J＝2.0,10.4Hz+
,1H),3.84(s,3H),3.67(s,2H),3.54-3.41(m,8H)。ESI-MS m/z:467.1[M+H]。
[0819] 实施例16
[0820]
[0821] 2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸甲酯
[0822] 将2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸叔丁酯(3.0g,8.7mmol)、SOCl2(3mL)于MeOH(20mL)中的混合物搅拌回流2h。将该混合物在真空下浓缩，以产生呈黄色固体的粗产物(3.1g)。
[0823] 2-((2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)氨基)乙酸
[0824] 在氩气下，将 2-(4-氯 -5- 碘-2- 甲氧基苯基氨基 ) 乙酸甲酯(5.0g,14.08mmol)、2,5-二氯苯硼酸(4.03g,21.12mmol)、Pd(PPh3)4(1.626g,1.04mmol)、Na2CO3(4.477g,42.24mmol)于1,4-二氧六环(100mL)和水(20mL)中的混合物搅拌回流6h。
允许该反应混合物冷却至室温，用水猝灭，并且使用HCl(10％在水中)酸化以调节pH为3至4。该混合物用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(50％石油醚/乙酸乙酯)纯化，以提供呈灰白色固体的期望的产物(3g,59％收率)。ESI-MS m/z:360.2[M-H]-。
[0825] 1,4-二(叔丁氧羰基)哌嗪-2-羧酸
[0826] 在0℃下，向哌嗪-2-羧酸(21.2g,0.16mol)的1,4-二氧六环溶液中，缓慢加入NaOH(80mL,400mmol)(历时15min)，随后加入(Boc)2O(71g,33mol)，并将产生的混合物在室温下搅拌16h。在真空下浓缩该混合物。将剩余物溶解在水(100mL)中，0℃下使用浓HCl酸化以调节pH为2至3，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，以提供呈灰白色固体的产物(44.2g,83.7％收率)。
[0827] 2-氨基甲酰基哌嗪-1,4-二羧酸二叔丁酯
[0828] 在0℃下，向溶解在THF(50mL)和Et3N(20mL)的1,4-二(叔丁氧羰基)哌嗪-2-羧酸(8.21g,24.85mmol)溶液中，逐滴加入氯甲酸乙酯(2.8g,26.1mmol)。在-5至0℃下搅拌1h后，加入NH4OH(20mL)，并且随后将产生的溶液在室温下搅拌1h。将该混合物倒入水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用1N NaOH和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，以产生呈灰白色固体的产物(7.5g,91.7％收率)。
[0829] 哌嗪-2-甲酰胺二盐酸盐
[0830] 将2-氨甲酰基 哌嗪-1,4-二羧 酸二叔丁酯(7.5g,22.79mmol) 于HCl/MeOH(75mL,2.86N)中的混合物在室温下搅拌16h。在真空下浓缩该混合物，以产生呈黄色固体的产物(4.58g,100％收率)。
[0831] 3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0832] 在0℃下，向哌嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(2.02g,10mmol)和Et3N(3.03g,30mmol)的DCM(40mL)溶液中，逐滴加入(Boc)2O(2.18g,10mmol)(历时1h)。将产生的溶液在室温下搅拌16h，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提供期望的产物(1.1g,48.0％收率)。
[0833] 4-丙烯酰基-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0834] 在0℃下，向3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(300mg,1.31mmol)和Et3N(396mg,3.93mmol)的DCM(5mL)溶液中，加入丙烯酰氯(130mg,1.44mmol)的DCM(1mL)溶液，并且将产生的混合物在室温下搅拌1.5h。该混合物在DCM和饱和NaHCO3水溶液中分层。有机层用饱和NaHCO3和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提供呈灰白色固体的期望的产物(200mg,53.9％收率)。
[0835] 1-丙烯酰基哌嗪-2-甲酰胺盐酸盐
[0836] 将4-丙烯酰基-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.706mmol)于HCl/MeOH(20mL,2.86N)中的混合物在室温下搅拌1h。在真空下浓缩该混合物，以产生无需进一步纯化直接用于下一步骤的呈黄色固体的粗产物(160mg)。
[0837] 1-丙烯酰基-4-(2-((2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)氨基)乙酰基)哌嗪-2-甲酰胺
[0838] 在0℃下，向2-((2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)氨基)乙酸(231mg,0.641mmol)和Et3N(592mg,2.564mmol)的DMF(3mL)溶液中，加入EDCI.
HCl(184mg,0.961mmol)和HOBt(134mg,0.961mmol)，并且将产生的混合物在0℃下搅拌
30min。向该混合物中加入上述的1-丙烯酰基哌嗪-2-甲酰胺盐酸盐(160mg)，并且在室温下搅拌16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(DCM/MeOH＝30:1)纯化，以提供呈灰白色固体
1
的期望的产物(10mg,2.97％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.60-7.38(m,3H),6.70-
6.99(m,1H),6.86-6.78(m,1H),6.54-6.49(m,1H),6.16-6.10(m,1H),5.76-5.69(m,1H),5.
32-5.31(m,1H),4.93-4.84(m,1H),4.93-4.84(m,1H),4.70-4.62(m,1H),4.35-4.32(m,1H)+
,4.04-3.96(m,2H),3.89-3.63(m,1H),2.90-2.86(m,1H)。ESI-MS m/z:525.2[M+H]。
[0839] 实施例17
[0840]
[0841] 1-(4-(2’,6-二 氯-4- 甲 氧 基-[1,1’- 联 苯 ]-3-羰 基) 哌 嗪 -1-基 )丙-2-烯-1-酮
[0842] 将4-(2’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.43mmol)在HCl于MeOH(2.86M,10mL)的溶液中搅拌1h。在真空下浓缩该混合物以产生粗产物。剩余物在DCM(15mL)中溶解，向该混合物中加入三乙胺(0.5mL)、丙烯酰氯(40mg,0.43mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30min，倒入水中，并且用DCM萃取。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(16mg,10％收率)。ESI-MS m/+
z:419.2[M+H]。
[0843] 1-(4-(2’,6-二氯-4-羟基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-3)
[0844] 在-60℃下，向1-(4-(2’,6-二氯-4-甲氧 基-[1,1’-联苯]-3-羰 基)哌 嗪-1-基 )丙-2-烯 -1-酮(200mg,0.48mmol) 的DCM(15mL)溶 液 中 逐 滴 加 入BBr3(0.6g,2.4mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。将混合物倒入冰水中，用饱和NaHCO3溶液碱化以调节pH为8至9，并且用DCM萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，过滤并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝20:1)纯化，以提供
1
期望的产物(10mg,5％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.6(s,1H),7.57-7.33(m,5H),7.12(s,1H),7.05(s,1H),6.80(m,1H),6.15-6.11(dd,J＝ 2,16.8Hz,1H),5.72-5.70(m,1+
H),3.6(m,8H)。ESI-MS m/z:405.3[M+H]。
[0845] 实施例18
[0846]
[0847] 4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸
[0848] 将4-氯-2-甲氧基苯甲酸(10g,53.6mmol)和NCS(35g,19.2mmol)于乙腈(200mL)中的混合物在室温下搅拌48h。将混合物倒入水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩以获得粗产物(23.3g)。
[0849] 4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯
[0850] 向4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸(8.2g,37mmol)和K2CO3(11.8g,111mmol)于DMF(100mL)中的混合物，逐滴加入CH3I(6.3g,44mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌
16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，以提供期望的产物。
[0851] (4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲醇
[0852] 氩气下，在-40℃，向LiAlH4(2.42g,64mmol)于THF(40mL)中的混合物，逐滴加入4,5-二氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯(6g,26mmol)的THF(50mL)溶液。将反应混合物在-5℃至5℃下搅拌1h。将该混合物冷却至-20℃，并且随后加入水(2mL)和NaOH(15％)水溶液。将产生的混合物搅拌15min。固体经过滤，并且用乙酸乙酯洗涤块状物。混合的滤液用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩以提供粗产物(4.6g)。
[0853] 2-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基)异吲哚啉-1,3-二酮
[0854] 室温下，向4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲醇(4.5g,22mmol)、异吲哚啉-1,3-二酮(9.6g,65mmol)和PPh3(17g,65mmol)于THF(100mL)中的混合物加入DIAD(13g,65mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌16h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，以提供期望的产物。
[0855] (4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲胺
[0856] 向2-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.8g,5mmol)的EtOH(5mL)溶液中加入水合肼(1.34g,27mmol)，并且将产生的混合物搅拌回流1h。在真空下浓缩该混合物，并且将剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝20:1)纯化，以提供期望的产物(0.8g,78％收率)。
[0857] 4-((4,5-二氯-2-甲氧基苄基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
[0858] 将(4,5-二氯-2-甲氧基苯基)甲胺(0.8g,3.90mmol)、1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(0.88g,3.84mmol)、BOP(2g,1.16mmol)和DIEA(1.6g,2.91mmol)于DMF(20mL)中的混合物在室温下搅拌1h。将混合物倒入水中，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲-
醇＝100:1)纯化，以提供期望的产物(0.987g,62％收率)。ESI-MS m/z:415.4[M-H]。
[0859] N-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺
[0860] 将4-((4,5-二氯 -2-甲氧基苄基)氨基甲酰基)哌啶-1-羧酸酯(987mg,2.37mmol)于HCl/MeOH(20mL,57.2mmol)中的混合物在室温下搅拌1h。随
后将溶剂在真空下蒸发，并且将剩余物用二氯甲烷(5mL)溶解。向混合物中加入
NaH(85mg,3.55mmol)。随后将产生的混合物在室温下搅拌30min。减压下移除溶剂以产生粗产物(800mg)。
[0861] 3-(4-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基氨基甲酰基)哌啶-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0862] 将N-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺(750mg,2.37mmol)、3-氧代氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(607mg,3.55mmol)、AcOH(1mL)和MeOH(5mL)的混合物搅拌回流2h。向该混合物中加入NaBH3(CN)(0.74g,11.85mmol)，并且将产生的混合物在60℃下搅拌
16h。允许该混合物冷却至室温，并在NH4Cl水溶液和乙酸乙酯中分层。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝+
50:1)纯化，以提供期望的产物(220mg,18％收率)。ESI-MS m/z:472.3[M+H]。
[0863] 1-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-N-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺
[0864] 室温下，将3-(4-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基氨基甲酰基)哌啶-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(210mg,0.44mmol)于HCl/MeOH(10mL,2.86M)中的混合物搅拌1h。在真空下浓缩该混合物，以产生粗的剩余物。将剩余物溶解在DCM(5mL)中，加入三乙胺(0.5mL)和丙烯酰氯(40mg,0.43mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30min，并且随后在DCM和水中分层。有机层用水和盐水洗涤，Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(150mg,82％收率)。
[0865] N-(4,5-二氯-2-羟基苄基)-1-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌啶-4-甲酰胺
[0866] 在-60℃下，向1-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-N-(4,5-二氯-2-甲氧基苄基)哌啶-4-甲酰胺(150mg,0.35mmol)的DCM(15mL)溶液中，逐滴加入BBr3(0.6g,2.4mmol)。允许产生的混合物保温至室温，并且搅拌1h。将混合物倒入冰水中，用饱和NaHCO3溶液碱化以调节pH为8至9，并且用DCM萃取。有机层用无水硫酸钠干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝20:1)纯化，以提供期望的产物(34mg,24％
1
收 率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.34(s,1H),8.2-8.25(m,1H),7.2(s,1H),7.0(s,1H),6.91(s,1H),6.33-6.27(m,1H),6.12-6.07(dd,J ＝ 2.4,12.4Hz,1H),5.68-5.65(dd,J＝ 2.4,10.4Hz,1H),4.24-4.20(m,1H),4.17-4.14(m,2H),4.14-3.99(m,1H),3.94-3
.90(m,1H),3.73-3.70(m,1H),3.10(s,1H),2.84-2.80(m,2H),2.22(m,1H),1.80(s,
+
2H),1.73-1.71(m,2H),1.63-1.57(m,2H)。ESI-MS m/z:412.2[M+H]。
[0867] 实施例19
[0868]
[0869] 4-氯-5-碘-2-甲氧基苯甲酸甲酯
[0870] 将4-氯-5-碘-2-甲氧基苯甲酸(2g,6.41mmol)、浓硫酸(1.5mL)于MeOH(50mL)中的混合物搅拌回流16h。允许该混合物冷却至室温，并且在水和乙酸乙酯中分层。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩，以提供呈黄色油状的期望的产物(1.85g,85％收率)。
[0871] 2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羧酸甲酯
[0872] 氩气下，将4-氯-5-碘-2-甲氧基苯甲酸甲酯(1.8g,5.51mmol)、(2,5-二氯苯基)苯硼酸(2.1g,11.03mmol)、Pd(PPh3)4(403mg,0.55mmol)、Na2CO3(1.75g,16.54mmol)于1,4-二氧六环(50mL)和水(5mL)中的混合物中搅拌回流16h。过滤该混合物，并且在真空下浓缩滤液。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1)纯化，以提供期望的产物(1.6g,85％收率)。
[0873] 1-(3-(羟甲基)-4-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-7)
[0874] 按照实施例20，由2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羧酸甲酯以3个步骤制备标题化合物。
[0875] 将3-(羟甲基)-4-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(420mg,0.79mmol)在HCl的MeOH(2.85N)溶液中搅拌。减压下移
除溶剂以产生粗的剩余物，将其在DMF(20mL)中溶解，加入丙烯酸(57mg,0.79mmol)、BOP(421mg,0.95mmol)和DIEA(409mg,3.17mmol)。将反应在室温下搅拌1h。将产生的混合物倒入水中，用乙酸乙酯萃取，并且用水和盐水洗涤。混合的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝60:1)纯化，以提供期望的产物
1
(92mg,24％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.64-7.20(m,5H),6.83-6.70(m,1H),6.1
6-6.11(d,1H),5.74-5.71(d,1H),6.91(s,1H),5.08-4.01(m,3H),3.90-3.86(d,3H),3.49--
3.22(m,2H),2.93-2.74(m,2H),2.89-2.67(m,2H)。ESI-MS m/z:451.2[M-H]。
[0876] 实施例20
[0877]
[0878] 4-(4-溴-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0879] 向 4- 溴 -1H- 吡 咯 -2- 羧 酸 (800mg,4.21mmol)、 哌 嗪 -1- 羧 酸叔 丁 酯 (822mg,4.42mmol)、BOP(2.2g,5.05mmol) 的 DMF(5mL) 溶 液 中 加 入
DIEA(1.63g,12.63mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。将混合物倒入水中，并用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水萃取，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以提供无需纯化直接用于下一步骤的粗产物(920mg,61％收率)。
[0880] 4-(4-(2,4-二氯苯基)-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0881] 氩 气 下，将 4-(4- 溴 -1H-吡 咯 -2- 羰 基 ) 哌 嗪 -1- 羧 酸 叔 丁 酯(350mg,0.98mmol)、(2,4-二氯苯基)硼酸(280mg,1.47mmol)、Pd(PPh3)4(116mg,0.1mmol)、Na2CO3(312mg,2.94mmol)于1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌回流16h。允许该混合物冷却至室温，并且在真空下浓缩。剩余物通过硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝30:1)纯化，以提供期望的产物(273mg,59％收率)。
[0882] 1-(4-(4-(2,4-二氯苯基)-1H-吡咯-2-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-32)
[0883] 将4-(4-(2,4-二 氯 苯 基 )-1H-吡 咯-2-羰 基 )哌 嗪-1-羧 酸 叔 丁 酯(270mg,0.64mmol)于HCl/MeOH(20mL,57.2mmol)中的混合物搅拌1h。在真空下浓缩该混合物，并且将剩余物溶解在DMF(5mL)中。向该混合物中加入丙烯酸(50mg,0.7mmol)、BOP(437mg,0.72mmol)和DIEA(248mg,1.92mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝60:1)纯化，以提供呈白色固体的期1
望 的 产 物(40mg,27 ％ 收 率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.88(s,1H),7.66-7.63(m,2H),7.43(m,1H),7.38(s,1H),6.91(s,1H),6.85-6.78(m,1H),6.18-6.13(dd,J ＝
2.4,12.4Hz,1H),5.74-5.71(dd,J ＝ 2.4,10.4Hz,1H),3.76(s,4H),3.68-3.63(m,4H)。
-
ESI-MS m/z:377.3[M-H]。
[0884] 实施例21
[0885]
[0886] 2,2’,5’-三氯-4-甲氧基-5-乙烯基联苯
[0887] 室温下，向搅拌的2,2’,5’-三氯-5-碘-4-甲氧基联苯(3.4g,8.3mmol)的甲苯(100mL)溶液中加入三丁基(乙烯基)锡烷(3.1g,9.9mmol)，随后加入
Pd(PPh3)4(2g,1.7mmol)。将反应混合物脱气，并回填入氮气(若干循环)，并且随后搅拌回流16h。允许该混合物冷却至室温，加入KF(1.72g,29.7mmol)的H2O(10mL)溶液，并且随后搅拌1h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。
剩余物通过快速硅胶柱色谱法(1-2％乙酸乙酯/石油醚)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(2.4g,92％收率)。
[0888] 2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基联苯-3-基)乙醛
[0889] 向2,2’,5’-三氯-4-甲氧基-5-乙烯基联苯(1.0g,3.2mmol)于无水DMF(10mL)中的混合物加入PdCl2(1.14g,6.4mmol)，并且在氩气下将产生的混合物室温搅拌16h。向该混合物中加入水(0.5mL)，并且将该产生的混合物在室温下搅拌另外6h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(1-3％乙酸乙酯/石油醚)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(300mg,29％收率)。
[0890] 4-(2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基联苯-3-基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0891] 室 温 下，向 搅 拌 的 2-(2’,5’,6-三 氯 -4-甲 氧 基 联 苯 -3-基 ) 乙醛 (300mg,0.92mmol) 的 DCM(20mL) 溶 液 中，加 入 哌 嗪 -1- 羧 酸 叔 丁 酯(205mg,1.1mmol)，随后加入数滴AcOH。将反应混合物在室温下搅拌1h，并且随后加入NaBH(OAc)3(1.95g,9.2mmol)。将产生的混合物搅拌回流16h。允许该混合物冷却至室温，用水溶解并且用DCM萃取。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(1-33％乙酸乙酯/石油醚)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(350mg,77％收率)。
[0892] 1-(4-(2-(2’,5’,6-三氯-4-羟基联苯-3-基)乙基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮[0893] 按照实施例18所描述的步骤，由4-(2-(2’,5’,6-三氯-4-甲氧基联苯-3-基)1
乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)
δ:10.96(bs.,1H),7.54-7.59(d,J ＝ 8.6Hz,1H),7.47-7.50(m,1H),7.39-7.4
0(d,J ＝ 2.6Hz,1H),7.08(s,1H),6.94(s,1H),6.77-6.84(m,1H),6.09(dd,J ＝
2.1,17.0Hz,1H),5.65(dd,J＝ 2.6,10.7Hz,1H),3.50(m,4H),2.72-2.76(m,2H),2.54-2.5+
7(m,2H),2.47-2.50(m,4H)。ESI-MS m/z:439.1[M+H]。
[0894] 实施例22
[0895]
[0896] 4-(2’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0897] 室 温 下，向 搅 拌 的 2’,6-二 氯-4- 甲 氧 基 -[1,1’-联 苯]-3- 羧 酸(500mg,1.68mmol)的DMF(10mL)溶液中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(345mg,1.85mmol)、BOP(892mg,2.02mmol)和DIEA(542mg,4.2mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，并且用盐水洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物+(550mg,70％收率)。ESI-MS m/z:465.4[M+H]。
[0898] (E)-1-(4-(2’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯-1-酮
[0899] 将4-(2’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(550mg,1.18mmol)于HCl/MeOH(20mL,57.2mmol)中的混合物在室温下搅拌1h。减压下移除溶剂以产生粗产物。用DMF(10mL)溶解该粗的剩余物，加入4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(215mg,0.47mmol)、BOP(627mg,1.42mmol)和DIEA(610mg,4.73mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌2h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，并且用盐水洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，+
以提供期望的产物(450mg,80％收率,2步骤)。ESI-MS m/z:476.4[M+H]。
[0900] (E)-1-(4-(2’,6-二氯-4-羟基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯-1-酮(VI-24)
[0901] 在-78℃下，向(E)-1-(4-(2’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-1-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯-1-酮(270mg,0.57mmol)的DCM(5mL)溶液中逐滴加入BBr3(1.43g,5.7mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌2h。将混合物倒入冰水中，并使用NaHCO3水溶液碱化以调节pH至7，并且随后用DCM(3x 20mL)萃取。有机层用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提
1
供期望的产物(150mg,57％收率)。HNMR■(400MHz,DMSO-d6)δ:13.12(s,1H),8.02(s,1H),7.81(s,1H),6.81(m,1H),6.13(dd,J＝2.8,16.8Hz,1H),5.71(dd,J＝2.0,10.4Hz,1H)+
,4.10(s,2H),3.50-3.60(m,8H)。ESI-MS m/z:462.4[M+H]。
[0902] 实施例23
[0903]
[0904] 4,5-二氯-2-硝基苯甲醛
[0905] 在 140 ℃ 下，将 1,2- 二 氯 -4- 甲 基 -5- 硝 基 苯 (2g,9.71mmol) 和DMF-DMA(3g,25.2mmol)于DMF(50mL)中的混合物搅拌14h。将黑色的溶液冷却至0℃，并且随后向其中加入NaIO4(10.8g,50.5mmol)的DMF/水(1:4,25mL)的溶液。室温下搅拌8h后，过滤混合物并且用乙酸乙酯冲洗块状物。滤液用乙酸乙酯稀释，并用盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过硅胶柱色谱(乙酸乙酯/石油醚＝1:20)纯化，以提供期望的产物(480mg,23％收率,2步骤)。
[0906] 2-(5,6-二氯-1H-吲唑-3-基)乙酸
[0907] 在40℃下，向搅拌的4,5-二氯-2-硝基苯甲醛(1.1g,5.00mmol)和丙二酸(676mg,6.5mmol)于甲酸(3mL)中的混合物，加入甲酸铵(768mg,12.5mmol)。将产生的混合物在65℃下搅拌1h，并且随后在95℃下搅拌4h。向该混合物中加入浓HCl(2.5mL)，并且随后在95℃搅拌1h。允许该混合物冷却至室温，用水(5mL)猝灭，并且用异丁酮萃取。使用KOH(50％)调节水层的pH至4，并且过滤以提供粗的固体(500mg)。将固体溶解在NaOH水溶液(8mL,5％)和N2H4.H2O(90mg,1.79mmol)的混合物中并加热至85℃。向该混合物中加入雷尼镍(Raney-Ni)并将产生的混合物在85℃下搅拌30min。允许该混合物冷却至室温并过滤。水层用HCl(6M)水溶液酸化以调节pH至2。通过过滤收集沉淀物，并在真空下干燥，以提供期望的产物(250mg,收率22％,2步骤)。
[0908] 1-(4-(2-(5,6-二氯-1H-吲唑-3-基)乙酰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0909] 按照实施例40所述的步骤，由2-(5,6-二氯-1H-吲唑-3-基)乙酸以3个步骤1
制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.56(m,1H),7.33-7.45(m,3H),7.12(s,1H),+
7.07(s,1H),6.62(s,2H),3.60(m,8H),3.10(s,2H),2.20(s,6H)。ESI-MS m/z:367.2[M+H]。
[0910] 实施例24
[0911]
[0912] 4-(2-溴乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0913] 氩气下，在30℃，将哌嗪-1-羧酸叔丁酯(5.0g,26.9mmol)、1,2-二溴乙烷(25mL)、DIPEA(3.5g,26.9mmol)的混合物搅拌72h。减压下移除溶剂，并且将剩余物通过硅胶柱色谱(1-2％甲醇/二氯乙烷)纯化，以提供呈固体的期望的产物(2.8g,36％收率)。
+
ESI-MS m/z:293.1[M+1]。
[0914] 4-(2-((4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基)氨基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0915] 在0℃下，向搅拌的4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(968mg,3.42mmol)的无水THF(20mL)溶液中，加入NaH(60％在矿物油中,205.2mg,5.13mmol)，并且将产生的混合物在氮气下搅拌回流1h。向该混合物中加入4-(2-溴乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
(500mg,1.71mmol)，并将产生的混合物在室温下搅拌15h。在真空下浓缩该混合物，并且将剩余物在乙酸乙酯和盐水中分层。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(10-30％乙酸乙酯/石油醚)纯化，以提供呈固体的期望的产物(180mg,21％收率)。
[0916] 4-(2-((2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-基)氨基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0917] 氩气下，在90℃，将4-(2-((4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基)氨基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(180mg,0.36mmol)、(2,5-二氯苯基)硼酸(138.9mg,0.72mmol)、
Na2CO3(114.5mg,1.08mmol)、Pd(PPh3)4(42mg,0.036mmol)于1,4-二氧六环(20mL)和水(5mL)中的混合物搅拌16h。允许混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。剩余物通过硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)纯化，以提供期望的产物(135mg,73％收率)为固体。
+
ESI-MS m/z:514.3[M+H]。
[0918] 1-(4-(2-((2’,5’,6-三氯-4-羟基-[1,1’-联苯]-3-基)氨基)乙基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮
[0919] 按照实施例18所述的步骤，由4-(2-((2’,5’,6-三氯-4-甲氧基-[1,1’-联1
苯]-3-基)氨基)乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化合物。H
NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.04(s,1H),7.56(d,J＝ 8.4Hz,1H),7.48-7.45(m,1H),7.37(d,J＝2.8Hz,1H),6.79(dd,J＝10.4,16.8Hz,1H),6.77(s,1H),6.40(s,1H),6.09(dd,J ＝
2.4,16.4Hz,1H),5.67(dd,J＝ 2.4,10.4Hz,1H),4.88(bs.,1H),3.54-3.51(m,4H),3.11(d+
,J＝4.8Hz,2H),2.55(t,J＝6.0Hz,2H),2.39-2.38(m,4H)。ESI-MS m/z:454.1[M+H]。
[0920] 实施例25
[0921]
[0922] 5-(3,4-二氯苯甲酰基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯
[0923] 向3,4-二氯苯甲酸(0.45g,2.36mmol)、六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(0.5g,2.36mmol)和HOBt(0.4g,2.83mmol)的DMF(15mL)溶液中，加入EDCI.
HCl(0.54g,2.83mmol)和DIEA(1.5g,11.5mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供直接用于下一步骤的粗产物。
[0924] (3,4-二氯苯基)(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲酮
[0925] 将5-(3,4-二氯苯甲酰)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-羧酸叔丁酯(以上步骤的粗产物)溶解在50％TFA的DCM(10mL)溶液中，并将产生的混合物在室温下搅拌3h。在真空下浓缩混合物。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供粗产物。该粗产物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[0926] (3,4-二氯苯基)(5-(乙烯磺酰基)六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲酮
[0927] 0℃下，向(3,4-二氯苯基)(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)甲酮(100mg,0.35mmol)的DCM(10mL)溶液中加入Et3N(106mg,1mmol)，随后加入磺酰氯
(60mg,0.37mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌过夜。混合物在DCM和水中分层。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过Isolera One(硅胶柱,10-100％乙酸
1
乙酯/己烷)纯化，以提供期望的产物(14mg,11％)。H NMR(300MHz,CDCl3)δ:7.60(d,J＝ 2.0Hz,1H),7.51(d,J ＝ 8.2Hz,1H),7.35(dd,J ＝ 2.0,8.2Hz,1H),6.50(dd,J ＝
9.9,16.5Hz,1H),6.30(d,J ＝ 16.6Hz,1H),6.09(d,J ＝ 9.9Hz,1H),2.90-4.10(m,10H)。
+
ESI-MS m/z:375.0[M+H]。
[0928] 实施例26
[0929]
[0930] 实施例27
[0931]
[0932] 实施例28
[0933]
[0934] 实施例29
[0935]
[0936] 实施例30
[0937]
[0938] 实施例31
[0939]
[0940] 实施例32
[0941]
[0942] 实施例33
[0943]
[0944] 实施例34
[0945]
[0946] 实施例35
[0947]
[0948] 实施例36
[0949]
[0950] 3-(4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0951] 0℃下，向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酸(2.0g,5.88mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.84g,7.64mmol)、EDCI.HCl(2.26g,11.76mmol)和HOBt(1.59g,11.76mmol)的DMF(3mL)溶液中，加入Et3N(3.28mL,23.52mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌16h，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过乙酸乙酯/石油醚＝1:5的混合物洗涤，以提供呈白色+固体的期望的产物(2.24g,67％收率)。ESI-MS m/z:565.4[M+H]。
[0952] 3-(4-(2-(4-氯-5-环丁基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0953] 氩 气 下，在65 ℃，将3-(4-(2-(4-氯 -5-碘-2-甲 氧 基 苯 基 氨 基) 乙酰基 )哌嗪 -1-基)氮 杂 环丁 烷-1-羧 酸 叔 丁酯(697mg,1.24mmol)、环 丁 基溴 化 锌 (4.46mL,2.23mmol,0.5M 在 THF 中 )、Pd(OAc)2(56mg,0.248mmol) 和
S-Phos(102mg,0.248mmol)于THF(15mL)中的混合物搅拌16h。允许混合物冷却至室温，用饱和NH4Cl水溶液猝灭，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(甲醇/二氯甲烷＝1:30)纯化，以提供呈棕+
色固体的期望的产物(596mg,98％收率)。ESI-MS m/z:493.5[M+H]。
[0954] 1-(3-(4-(2-(4-氯-5-环丁基-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-53)
[0955] 按照实施例17所述的步骤，由3-(4-(2-(4-氯-5-环丁基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯用3个步骤制备标题化合
1
物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.66(s,1H),6.63(s,1H),6.52(s,1H),6.31(dd,J ＝
10.2,16.9Hz,1H),6.10(dd,J＝2.1,16.8Hz,1H),5.68(dd,J＝2.1,10.2Hz,1H),5.16(t,J＝4.4Hz,1H),4.27-4.23(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.97-3.93(m,3H),3.80-3.76(m,1H),3.65-3.59(m,1H),3.56-3.54(m,4H),3.20-3.14(m,1H),2.40-2.25(m,4H),2.20-2.15(m,2H+
),2.09-2.05(m,2H),1.97-1.90(m,1H),1.80-1.74(m,1H)。ESI-MS m/z:433.4[M+H]。
[0956] 实施例37
[0957]
[0958] 2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)丙酸甲酯
[0959] 在100℃下，将叔丁基4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(2g,7.07mmol)、2-溴丙酸甲酯(1.17g,7.07mmol)、K2CO3(1.94g,14.14mmol)和KI(0.235g,1.414mmol)于DMF(25mL)中的混合物搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，用NaHCO3水溶液猝灭，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干躁，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝1:20)纯化，以提供呈黄色固体的期望的产物(1.12g,43％收率)。+
ESI-MS m/z:370.1[M+H]。
[0960] 2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)丙酸
[0961] 室温下，向在四氢呋喃(20mL)和水(10mL)的混合物中的2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)丙酸甲酯(1.12g,3.04mmol)溶液，加入LiOH.H2O(0.51g,12.16mmol)，并且将产生的混合物搅拌1h。水相用TBME洗涤，并且随后用HCl(1N)水溶液酸化以调节pH至5。混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩，+
以提供无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物(760mg)。ESI-MS m/z:356.1[M+H]。
[0962] 3-(4-(2-((4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0963] 在0℃下，向2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)丙酸(760mg,2.13mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(669mg,2.78mmol)、EDCI.HCl(818mg,4.26mmol)、HOBt(575mg,4.26mmol)的DMF(8mL)溶液中，加入Et3N(861mg,8.52mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌16h，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝+1:1)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(673mg,55％收率)。ESI-MS m/z:579.4[M+H]。
[0964] 3-(4-(2-((4-氯-5-环丁基-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0965] 氩气下，在65℃，将3-(4-(2-((4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(673mg,1.162mmol)、环丁基溴化锌
(5.11mL,2.556mmol,0.5M在THF中)、Pd(Oac)2(52mg,0.23mmol)、S-Phos(95mg,0.23mmol)于THF(10mL)中的混合物搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，用NH4Cl水溶液猝灭，并使用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝1:1)纯化，以提供呈浅黄色固体的期望的产物+
(565mg,96％收率)。ESI-MS m/z:507.6[M+H]。
[0966] 1-(3-(4-(2-((4-氯-5-环丁基-2-羟基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-59)
[0967] 按照实施例17所描述的步骤，由3-(4-(2-((4-氯-5-环丁基-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化
1
合 物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.63(s,1H),6.62(s,1H),6.49(s,1H),6.30(dd,J ＝
10.1,16.8Hz,1H),6.10(d,J＝18.7Hz,1H),5.68(d,J＝10.4Hz,1H),4.86(d,J＝9.2Hz,1H),4.69-4.63(m,1H),4.27-4.23(m,1H),4.07-4.03(m,1H),3.97-3.62(m,1H),3.82-3.76(m,2H),3.64-3.55(m,3H),3.77-3.11(m,1H),2.44-2.15(m,6H),2.08-1.90(m,4H),1.80-1.+
72(m,2H),1.97-1.90(m,1H),1.24(d,J＝6.4Hz,3H)。ESI-MS m/z:447.4[M+H]。
[0968] 实施例38
[0969]
[0970] 1-二苯甲基氮杂环丁-3-基甲磺酸酯
[0971] 在 0 ℃ 下，向 1- 二 苯 甲 基 氮 杂 环 丁 -3- 醇 (20.0g,83.68mmol)和 Et3N(12.68g,125.52mmol) 于 DCM(200mL) 中 的 混 合 物 分 批 加 入MsCl(11.447mg,100.41mmol)，并将产生的溶液在室温下搅拌1h。反应混合物用乙酸乙酯稀释，并且用盐水洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的产物(26.526g,100％收率)。
[0972] 4-(1-二苯甲基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0973] 在80℃下，将1-二苯甲基氮杂环丁-3-基甲磺酸酯(26.53g,83.68mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(18.68g,100.41mmol)和K2CO3(23.09g,163.36mmol)于CH3CN(200mL)中的混合物搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，并且用盐水洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(25.5g,80％收率)。
[0974] 4-(氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0975] H2氛围下，在50℃，将4-(1-二苯甲基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(10.0g,24.57mmol)和10％Pd\C(2.5g)于MeOH(100mL)中的混合物搅拌48h。将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液稀释，在真空下浓缩，以提供呈无色油状的期望的粗产物(6.7g)。
[0976] 4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[0977] 在0℃下，向4-(氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(6.7g,27.80mmol)和Et3N(8.43g,83.40mmol)于DCM(100mL)中的混合物分批加入丙烯酰氯(3.77g,41.7mmol)，并且将产生的溶液在室温下搅拌1h。混合物用DCM稀释，并用盐水洗涤。有机层用
无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过硅胶柱色谱(二氯甲烷/甲醇＝
1
50:1)纯化，以提供期望的产物(3.6g,49.66％收率,2步骤)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:6.30(dd,J ＝ 10.4,16.8Hz,1H),6.09(dd,J ＝ 2.4,17.2Hz,1H),5.67(dd,J ＝
2.4,10.4Hz,1H),4.22(t,J＝ 8,1H),4.03-4.00(m,1H),3.94-3.90(m,1H),3.75-3.70(m,1H),3.32(t,J＝8.8Hz,4H),3.10-3.18(m,1H),2.22-2.30(m,1H),1.40(s,9H)。
[0978] 实施例39
[0979]
[0980] 哌嗪-2-甲腈
[0981] 向3-氰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.95mmol)于二氯甲烷(10mL)中的混合物加入CF3COOH(2mL)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。在真空下将该混合物浓缩以提供粗产物。
[0982] 4-(4’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-2-甲腈
[0983] 在0℃下，向4’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羧酸(309mg,1.04mmol)、EDCI(272mg,1.43mmol)、HOBt(195mg,1.43mmol)、Et3N(288mg,2.85mmol) 于 二 氯 甲 烷(10mL)中的混合物加入哌嗪-2-甲腈，并且将产生的混合物在室温下搅拌8h。混合物在二氯甲烷和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(225mg,61％收率)。+
ESI-MS m/z:444.3[M+H]。
[0984] 1-丙烯酰基-4-(4’,6-二氯-4-羟基-[1,1’-联苯]-3-羰基)哌嗪-2-甲腈(VI-37)
[0985] 按照实施例17所述的步骤，由4-(4’,6-二氯-4-甲氧基-[1,1’-联苯]-3-羰1
基)哌嗪-2-甲腈以2个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,CDCl3)δ:9.24(s,1H),7.
44-7.33(m,5H),7.20(s,1H),6.57-6.45(m,2H),6.79(s,1H),5.94-5.91(m,1H),5.75(s,1H),4.62-4.61(m,1H),4.50-4.46(m,1H),4.06(s,1H),3.61(s,1H),3.36-3.33(m,1H),3.16-+
3.10(m,1H)。ESI-MS m/z:428.4[M+H]。
[0986] 实施例40
[0987]
[0988] 5-溴-4-氯-2-甲氧基苯胺
[0989] 按照实施例4所描述的步骤，由4-氯-2-甲氧基-1-硝基苯以2个步骤制备标题化合物。
[0990] 1-溴-2-氯-5-碘-4-甲氧基苯
[0991] 在0℃下，向5-溴-4-氯-2-甲氧基苯胺(3g,12.7mmol)于6N HCl(60mL,360mmol)中的混合物，逐滴加入NaNO2(963mg,13.9mmol)的水(20mL)溶液，同时保持内部温度大约为0℃。将KI(10.5g,63.4mmol)和CuI(4.8g,25.4mmol)溶解在水(20mL)中，并将其加入到搅拌的反应混合物中。将反应保持5℃2h。反应混合物用乙酸乙酯萃取。混合的有机层用水、Na2SO3(水溶液,10％)和盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝1:100)纯化，以提供期望的产物(3.2g,73％收率)。
[0992] 3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙醛
[0993] 氩 气 下，在60 ℃ 将1- 溴-2- 氯-5-碘 -4-甲 氧 基 苯 (3.2g,9.2mmol)、丙 -2- 烯 -1- 醇 (1.3g,23.0mmol)、Pd(OAc)2(206mg,0.9mmol)、TBAC(2.56g,9.2mmol)、NaHCO3(2.3g,27.6mmol)于DMF(50mL)中的混合物搅拌16h。允许混合物冷却至室温，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。混合的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝1:20)纯化，以提供期望的产物(860mg,34％收率)。
[0994] 3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙酸
[0995] 向搅 拌的Jones试 剂(3mL,5.4mmol,2.8M)的丙 酮(20mL)溶液 中，加 入3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙醛(860mg,3.1mmol)。将该反应在室温下搅拌12h，使用异丙醇淬灭，并且随后搅拌10min。将产生的混合物用水稀释，使用乙酸乙酯萃取。混合的有机层使用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶色谱(乙酸乙酯-
/石油醚＝1:1)纯化，以提供期望的产物(358mg,38％收率)。ESI-MS m/z:291.1[M+H]。
[0996] 3-(4-(3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0997] 室温下，向搅拌的3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙酸(350mg,1.2mmol)的DMF(30mL)溶液中，加入3-(哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(317mg,1.3mmol)、BOP(731mg,1.4mmol)和DIEA(461mg,3.6mmol)，并且将混合物室温下搅拌1h。反应混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，并用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(285mg,46％收率)。
[0998] 3-(4-(3-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[0999] 氩气下，将3-(4-(3-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(280mg,0.54mmol)、环丙基硼 酸(185mg,2.2mmol)、
K3PO4.3H2O(444mg,1.9mmol)、三环己基膦(30mg,0.1mmol)、Pd(OAc)2(24mg,0.11mmol)于甲苯(10mL)和水(1mL)中的混合物搅拌回流16h。将混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝60:1)纯化，以提供期望的产物+
(194mg,75％收率)。ESI-MS m/z:477.3[M+H]。
[1000] 1-(3-(4-(3-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-58)
[1001] 按照实施例17所描述的步骤，由3-(4-(3-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)1
丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化合物。H
NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.68(s,1H),6.79(s,1H),6.74(s,1H),6.33-6.26(m,1H),6.12-6.07(dd,J＝1.9,17.2Hz,1H),5.68-5.65(dd,J＝2.0,10.2Hz,1H),4.24-4.20(m,1H),4.05-4.01(m,1H),3.94-3.90(m,1H),3.76-3.72(m,1H),3.45-3.42(m,4H),3.13-3.11(m,1H),2.69-2.65(m,2H),2.53-2.51(m,2H),2.25-2.23(bs,4H),1.97-1.93(m,1H),0.90-0.86(m,1+
H),0.60-0.55(m,1H)。ESI-MS m/z:418.4[M+H]。
[1002] 实施例41
[1003]
[1004] 5-乙酰胺基-2-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯
[1005] 室 温 下，向5- 氨 基-2- 氯-4-甲 氧 基 苯 甲 酸 甲 酯 (3.6g,16.7mmol)、Et3N(6.7g,66.8mmol)和DCM(100mL)的混合物中逐滴加入乙酰氯(1.57g,20.1mmol)，并且将产生的混合物搅拌12h。反应混合物在二氯甲烷和水中分层。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝1:1)纯化，以提供期望的产物(2.7g,63％收率)。
[1006] N-(4-氯-5-(2-羟基丙-2-基)-2-甲氧基苯基)乙酰胺
[1007] 氩气下，在-40℃，向5-乙酰胺基-2-氯-4-甲氧基苯甲酸甲酯(2.7g,11.1mmol)的THF(40mL)溶液中，逐滴加入甲基溴化镁(21mL,21mmol,1M在乙醚中)，将内部温度维持在-40℃。随后允许该混合物保温至室温，并搅拌2h。将该反应混合物倒入冰冷的NH4Cl(10％)溶液中，并且使用乙酸乙酯萃取。混合的有机层使用水和盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以提供期望的产物(2.3g,80％收率)。
[1008] N-(4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯基)乙酰胺
[1009] -5℃ 下，向N-(4-氯-5-(2-羟 基 丙-2-基)-2-甲 氧 基苯 基)乙 酰 胺(3.2g,12.4mmol)的DCM(20mL)溶液中，逐滴加入SOCl2(3.7g,37.25mmol)。将混合物保温至室温，并且随后搅拌回流2h。浓缩反应混合物，并将剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝3:1)纯化，以提供期望的产物(1.9g,64％收率)。
[1010] N-(4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)乙酰胺
[1011] 在0 ℃ 下，向N-(4-氯-2-甲 氧 基-5-(丙-1- 烯-2-基)苯 基 )乙酰 胺 (1.0g,4.17mmol) 的 甲 苯 (20mL) 溶 液 中，加 入 CH2I2(5.6g,20.86mmol) 和Et2Zn(41.7mL,41.7mmol,1.0M在己烷中)。将混合物在0℃保持30min，并且随后室温下搅拌16h。反应混合物用饱和NH4Cl溶液猝灭，并且搅拌15min。在真空下浓缩该混合物以移除甲苯，并且用二氯甲烷萃取产生的混合物。混合的有机层用水和盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，浓缩以提供期望的产物(820mg,77％收率)。
[1012] 4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯胺
[1013] 将N-(4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)乙酰胺(820mg,3.23mmol)、KOH(1.8g,32.3mmol)、乙醇(40mL)和水(20mL)的混合物搅拌回流12h。用乙酸乙酯萃取反应混合物。混合的有机层用水和盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并过滤。滤液在真空下浓缩，并将剩余物通过快速硅胶柱色谱法(乙酸乙酯/石油醚＝20:1)纯化，以提供期望的产+
物(460mg,67％收率)。ESI-MS m/z:212.4[M+H]。
[1014] 2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酸乙酯
[1015] 室温下，向4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯胺(450mg,2.13mmol)的MeOH(20mL)溶液中，加入AcOH(3滴)和乙醛酸乙酯(326mg,3.19mmol,50％在甲苯中)。
将混合物在室温下搅拌12h，并且随后向混合物中加入氰基硼氢化钠(403mg,6.39mmol)。
将产生的混合物在50℃下搅拌16h。允许该混合物冷却至室温，并在乙酸乙酯和水中分层。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供粗产物(636mg)。ESI-MS m/+
z:298.2[M+H]。
[1016] 2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酸
[1017] 向2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酸 乙酯(630mg,2.12mmol)于THF(15mL)和水(5mL)的溶液中加入LiOH.H2O(889mg,21.2mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌2h。混合物用20％乙酸乙酯/石油醚洗涤。水层用HCl(1N)水溶液酸化以调节pH为3至4，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的产物(200mg,33％收率)。
[1018] 3-(4-(2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1019] 室温下，向2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酸(110mg,0.41mmol)和3-(哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(118mg,0.49mmol)的
DMF(15mL)溶液中，加入BOP(217mg,0.49mmol)和DIEA(159mg,1.23mmol)，并将产生的混合物在室温下搅拌1h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩，以提供期望的产物(192mg,95％收率)。
[1020] 1-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-64)
[1021] 按照实施例17所描述的步骤，由3-(4-(2-((4-氯-2-甲氧基-5-(1-甲基环丙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题1
化合物。H NMR■(400MHz,DMSO-d6)δ:9.70(s,1H),6.64(s,1H),6.51(s,1H),6.35-6.28(m,1H),6.13-6.08(dd,J＝1.9,17.9Hz,1H),5.69-5.66(dd,J＝2.1,10.1Hz,1H),5.13-5.
11(m,1H),4.25-4.23(m,1H),4.08-4.05(m,1H),3.95-3.91(m,3H),3.80-3.76(m,1H),3.53(bs,4H),3.18-3.16(m,1H),2.38-2.31(m,4H),1.26(s,3H),0.72-0.64(m,4H)。ESI-MS m/+
z:434.4[M+H]。
[1022] 实施例42
[1023]
[1024] 5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲酸
[1025] 0℃下，向搅拌的4-氨基-5-氯-2-甲氧基苯甲酸(5g,24.8mmol)的水(10mL)溶液中加入浓硫酸(50mL)。随后逐滴加入NaNO2(1.9g,27.3mmol)的水(10mL)溶液，同时保持内部温度约0℃。将KI(4.5g,27.3mmol)和I2(3.5g,13.64mmol)溶解在水中，并逐滴加入到搅拌的反应混合物中。将混合物在5℃下搅拌2h，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用水、Na2SO3(水溶液,10％)和盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以提供期望+的产物(1.55g,19％收率)。ESI-MS m/z:311.1[M+H]。
[1026] 4-(5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1027] 室温下，向搅 拌的5-氯-4-碘-2- 甲氧基 苯甲酸(1.55g,4.9mmol) 的DMF(30mL)溶液中，加入哌嗪-1-羧酸叔丁酯(1.02g,5.5mmol)、BOP(2.63g,25.9mmol)和DIEA(1.92g,14.9mmol)，并将产生的混合物在室温下搅拌1h。反应混合物用乙酸乙酯萃取，并用盐水洗涤。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(1.96g,76％收率)。
[1028] 4-(2-氯-5-甲氧基-[1,1’-联苯]-4-羰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1029] 氩气下，将4-(5-氯-4-碘-2-甲氧基苯甲酰基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯 (300mg,0.56mmol)、 苯 硼 酸 (82mg,0.67mmol)、Pd(PPh3)4(129mg,0.1mmol)、Na2CO3(180mg,1.68mmol)于1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌回流16h。
允许混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝30:1)纯化，以提供期望的产物(219mg,80％收率)。
[1030] 1-(4-(2-氯-5-羟基-[1,1’-联苯]-4-羰基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(VI-42)
[1031] 按照实施例17所述的步骤，由4-(2-氯-5-甲氧基-[1,1’-联苯]-4-羰基)哌1
嗪-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.40(s,1H),7.50-7.41(m,5H),7.35(s,1H),6.89(s,1H),6.84(m,1H),6.17-6.13(d,1H),5.73-5.71(m,+
1H),3.63(s,6H),3.30(s,2H)。ESI-MS m/z:371.2[M+H]。
[1032] 实施例43
[1033]
[1034] 4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯胺
[1035] 氩 气 下，将4-氯 -5-碘 -2-甲 氧 基 苯 胺(1.0g,3.53mmol)、4,4,5,5- 四甲 基 -2-( 丙 -1- 烯 -2- 基 )-1,3,2- 二 氧 杂 环 戊 硼 烷 (889mg,5.29mmol)、Pd(PPh3)4(363mg,0.353mmol)、Na2CO3(1.12g,10.6mmol)于DME(10mL)和水(3mL)中的混合物搅拌回流6h。允许反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(5％石油醚/乙酸乙酯)纯+化，以提供呈灰白色固体的期望的产物(173mg,25％收率)。ESI-MS m/z:198.5[M+H]。
[1036] 4-氯-5-异丙基-2-甲氧基苯胺
[1037] H2(1atm)氛围下，在室温下将4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯胺(160mg,0.81mmol)、雷尼镍(20mg)于MeOH(5mL)中的混合物搅拌8h。过滤混合物并将滤液在真空下浓缩，以提供期望的产物(150mg,93％收率)。
[1038] 3-(4-(2-(4-氯-5-异丙基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1039] 按照实施例42所描述的步骤，由4-氯-5-异丙基-2-甲氧基苯胺以3个步骤制备标题化合物。
[1040] 1-(3-(4-(2-(4-氯-5-异丙基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮
[1041] 室温下，将3-(4-(2-(4-氯-5-异丙基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(102mg,0.212mmol)于HCl/MeOH(2.86M,5mL)中的混合物搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以提供粗产物，室温下将粗产物溶解在DMF(5mL)中，加入丙烯酸(17mg,0.233mmol)、BOP(113mg,0.254mmol)和DIEA(82mg,0.636mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以+
提供期望的产物(77mg,85％收率,2步骤)。ESI-MS m/z:435.4[M+H]。
[1042] 1-(3-(4-(2-(4-氯-2-羟基-5-异丙基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-50)
[1043] 在-60℃下，向1-(3-(4-(2-(4-氯-5-异丙基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(77mg,0.18mmol)的DCM(15mL)溶液
中，逐滴加入BBr3(443mg,1.8mmol)，并且将产生的混合在室温下搅拌1h。将混合物冷却至-60℃，逐滴加入MeOH，并且随后使用Et3N碱化以调节pH为8至9。将混合物倒入水中，并且用二氯甲烷萃取。有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速
1
硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(25mg,33％收率)。H NMR■ (400MHz,DMSO-d6)δ:9.50(bs,1H),6.62(s,1H),6.470(s,1H),6.30(m,1H),6.10(dd,J＝2.4,17.2Hz,1H),5.68(dd,J＝2.0，10.4Hz,1H),5.14(m,1H),4.25(m,1H),4.06(m,
1H),3.96(m,1H),3.91(m,2H),3.78(m,1H),3.54(m,4H),3.17(m,2H),2.35(m,4H),1.21(m,+
6H)。ESI-MS m/z:421.4[M+H]。
[1044] 实施例44
[1045]
[1046] 2-氨基-5-氯-4-环丙基苯酚
[1047] 氩气下，在室温下向2-氨基-5-氯-4-碘苯酚(500mg,1.9mmol)、PdCl2(dppf)(136mg,0.19mmol)于THF(10mL)中的混合物，加入环丙基溴化镁(16mL,11.4mmol,0.7M在THF中)，并且将混合物搅拌回流15h。允许混合物冷却至室温，并且在乙酸乙酯和水中分层，有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法1
(10-20％乙酸乙酯/己烷)纯化，以提供呈棕色固体的期望的产物(220mg,63％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.27(s,1H),6.62(s,1H),6.22(s,1H),4.53(s,2H),1.89-1.93(m,1H),0.83-0.87(m,2H),0.46-0.49(m,2H)。
[1048] 2-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基氨基)乙酸乙酯
[1049] 室温下，向2-氨基-5-氯-4-环丙基苯酚(200mg,1.01mmol)的MeOH(20mL)溶液中，加入AcOH(3滴)和乙醛酸乙酯(416mg,2.02mmol,50％在甲苯中)。将混合物在室温下搅拌2h，并且随后向混合物中加入氰基硼氢化钠(190mg,3.03mmol)。将产生的混合物在40℃下搅拌15h。允许混合物冷却至室温，并且在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(10-20％甲醇/二氯甲烷)纯1
化，以提供呈固体的期望的产物(290mg,100％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.63(s,1H),6.66(s,1H),5.93(s,1H),5.07(t,J＝6.4Hz,1H),4.12(q,J＝7.2Hz,2H),3.91(d,J＝6.4Hz,2H),1.92-1.97(m,1H),1.20(t,J＝6.8Hz,2H),0.84-0.87(m,2H),0.51-0.55(m,
2H)。
[1050] 2-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基氨基)乙酸
[1051] 室温下，向在4:1的四氢呋喃和水(30mL)的混合物中的2-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基氨基)乙酸乙酯(290mg,0.89mmol)溶液中，加入LiOH.H2O(226mg,5.34mmol)，并且将产生的混合物在60℃下搅拌2h。将混合物用HCl(1N)水溶液酸化以调节pH为3至5，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤、用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提1
供产物(100mg,47％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.64(s,1H),6.66(s,1H),5.96(s,1H),3.81(s,2H),1.89-1.96(m,1H),0.84-0.87(m,2H),0.54-0.56(m,2H)。
[1052] 4-(1-二苯甲基氮杂环丁-3-基)-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1053] 将 1- 二 苯 甲 基 氮 杂 环 丁 -3- 基 甲 磺 酸 酯 (2.69g,8.5mmol)、K2CO3(1.76g,12.8mmol)、3-氨基甲酰基 哌嗪-1-羧酸叔丁酯 (1.95g,8.5mmol)于CH3CN(40mL)中的混合物搅拌回流16h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(2.08g,54％收率)。
[1054] 4-(氮杂环丁-3-基)-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1055] H2(1atm)氛围下，在50℃，将4-氯-2-甲氧基-5-(丙-1-烯-2-基)苯胺(1g,2.22mmol)、Pd/C(300mg)于MeOH(25mL)中的混合物搅拌12h。将混合物冷却并过滤。
滤液在真空下浓缩，以提供期望的产物(640mg,100％收率)。
[1056] 4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1057] 在0℃下，向4-(氮杂环丁-3-基)-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(640mg,2.22mmol)和Et3N(463mg,4.58mmol)的DCM(10mL)溶液中，逐滴加入丙烯酰氯(248mg,2.74mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌1.5h。混合物在二氯甲烷和饱和的NaHCO3溶液中分层。有机层用饱和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(350mg,47％收率)。
[1058] 1-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-4-(2-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-2-甲酰胺(V-51)
[1059] 将4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-3-氨基甲酰基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(120mg,0.35mmol)于HCl/MeOH(2.86M,10mL)中的混合物在室温下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩以提供粗的剩余物。0℃下，将其溶解在DMF(5mL)中，加入2-(4-氯-5-环丙 基 -2- 羟 基 苯 基 氨 基 ) 乙 酸 (31mg,0.427mmol)、BOP(206mg,0.466mmol) 和K2CO3(150mg,1.164mmol)，并将产生的混合物在室温下搅拌1h。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色
1
谱法(二氯甲烷/甲醇＝20:1)纯化，以提供期望的产物(126mg,75％收率,2步骤)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.63(bs,1H),7.53(d,1H),7.26-6.94(m,2H),6.67(s,1H),6.34-
6.27(m,1H),6.10(m,2H),5.68(d,J＝ 10.4,1H),5.08(m,1H),4.30(m,2H),3.93(m,6H),3.
52(m,2H),3.29(m,1H),3.15(m,1H),3.06(m,1H),2.47(m,1H),1.98(m,1H),0.87(m,2H),0.6+
4(m,2H)。ESI-MS m/z:462.5[M+H]。
[1060] 实施例45
[1061]
[1062] 4-(2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-2-甲腈
[1063] 0℃下，向2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酸(260mg,1.04mmol)、EDCI(273mg,1.43mmol)、HOBt(194mg,1.43mmol)和Et3N(288mg 2.85mmol)于DCM(10mL)中的混合物加入哌嗪-2-甲腈。将产生的混合物在室温下搅拌8h。混合物在二氯甲烷和水中分层。有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝50:1)纯化，以提供期望的产物(108mg,30％收率)。
[1064] 1-丙烯酰基-4-(2-(4,5-二氯-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-2-甲腈(VI-39)[1065] 按照实施例17所描述的步骤，由4-(2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)1
哌嗪-2-甲腈以2个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.3(s,1H),6.90(m,1H),6.87(s,1H),6.73(s,1H),6.28(d,J＝16.4Hz,1H),5.88(d,J＝10.4Hz,1H),5.68(m,1H),5.33(m,1H),4.66(m,1H),4.40(m,1H),4.02(m,2H),3.22(m,1H),3.04(m,1H),2.91(m+
,1H)。ESI-MS m/z:383.2[M+H]。
[1066] 实施例46
[1067]
[1068] 1-叔丁基3-甲基4-(1-二苯甲基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1,3-二羧酸酯
[1069] 将1-二苯甲基氮杂环丁-3-基甲磺酸酯(2.4g,7.56mmol)、叔丁基甲基哌嗪-1,3-二羧酸酯(1.85g,7.56mmol)、K2CO3(1.6g,11.34mmol)于CH3CN(40mL)中的混合物搅拌回流16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层使用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(10％石油醚/乙酸乙酯)纯化，以提供期望的产物(1.85g,51％收率)。
[1070] 4-(1-二苯甲基氮杂环丁-3-基)-3-(羟基甲基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1071] 在-40℃下，向LiAlH4(500mg,13.5mmol)于THF(40mL)中的混合物，逐滴加入1-叔丁基3-甲基4-(1-二苯甲基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1,3-二羧酸酯(1.8g,3.87mmol)的THF(10mL)溶液。将反应混合物在-5℃至5℃下搅拌1h，并冷却至-20℃。随后加入水(2mL)和NaOH(15％)水溶液。将产生的混合物搅拌15min。过滤固体，并用乙酸乙酯洗涤块状物。
混合的滤液用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩以提供产物(1.6g,94％收率)。
[1072] 1-(3-(4-(2-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基氨基)乙酰基)-2-(羟基甲基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-54)
[1073] 按照实施例44所描述的步骤，由4-(2-(4,5-二氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)1
哌嗪-2-甲腈以4个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.68(bs,1H),6.6
7(s,1H),6.35-6.27(m,1H),6.12-6.05(m,2H),5.67(dd,J＝ 1.6,10.4Hz,1H),5.11(m,1H),4.82-4.63(m,1H),4.24(m,1H),4.13(m,1H),3.95(m,1H),3.88(m,2H),3.85(m,1H),3.77-
3.67(m,2H),3.20(m,1H),3.15(m,1H),2.76-2.60(m,2H),2.40(m,1H),1.95(m,1H),0.87(m+
,2H),0.62(m,2H)。ESI-MS m/z:449.4[M+H]。
[1074] 实施例47
[1075]
[1076] 2-(5，6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酸乙酯
[1077] 室温下，向5,6-二氯-1H-吲哚(1.0g,5.37mmol)、Cu(OTf)2(194mg,0.537mmol)于DCM(15mL)中的混合物，逐滴加入2-重氮基乙酸乙酯(918mg,8.05mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌16h，用水猝灭，并且随后用二氯甲烷萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过Prep-HPLC纯化，以提供呈浅黄色固体的期望的产物(120mg,8.2％+收率)。ESI-MS m/z:272.1[M+H]。
[1078] 2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酸
[1079] 将 2-(5,6- 二 氯 -1H- 吲 哚 -3- 基 ) 乙 酸 乙 酯 (120mg,0.44mmol)、LiOH(90mg,2.20mmol)于THF(3mL)和H2O(1mL)中的混合物在室温下搅拌16h。将溶液倒入水中，用1N HCl调节pH为3至4，并且用乙酸乙酯萃取。有机层用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，以提供呈黄色固体的期望的产物(90mg,84.5％收率)。
[1080] 1-(3-(4-(2-(5,6-二氯-1H-吲哚-3-基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-61)
[1081] 在0 ℃ 下，向 2-(5,6-二 氯 -1H-吲 哚 -3-基 )乙 酸 (90mg,0.372mmol)、1-(3-(哌 嗪-1-基)氮 杂 环 丁-1-基) 丙-2-烯-1-酮 (87mg,0.446mmol)、EDCI.
HCl(107mg,0.558mmol)、HOBt(75mg,0.558mmol) 于 DMF(3mL) 中 的 混 合 物 加 入Et3N(112mg,1.11mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌16h。将混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并且在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇＝30:1)纯化，以提供呈灰白色固体的期望的产物(12mg,7.66％收
1
率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.19(bs,1H),7.79(s,1H),7.59(s,1H),7.35(d,1H),6.28(dd，J＝9.6,16.8Hz,1H),6.09(dd，J＝2.4,17.2Hz,1H),5.66(dd,J＝2.4,10.4Hz,1H),4.21-4.18(m,1H),4.02-3.98(m,1H),3.93-3.88(m,1H),3.78(s,2H),3.74-3.70(m,1H),+
3.53-3.47(m,4H),3.10-3.07(m,1H),2.25-2.19(m,4H)。ESI-MS m/z:423.3[M+1]。
[1082] 实施例48
[1083]
[1084] 3-(4-(2-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1085] 按照实施例4所描述的步骤，由4-溴-5-氯-2-甲氧基苯胺以3个步骤制备标题化合物。
[1086] 3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1087] 室温下，向3-(4-(2-(4-溴-5-氯-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(100mg,0.193mmol)、Pd(dppf)2Cl2(29mg,0.04mmol)和
K2CO3(55mg,0.386mmol)于DMF(10mL)中的混合物加入Et2Zn(0.8mL,0.8mmol,1.0M在己烷中)。将产生的混合物在80℃下搅拌16h。该混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇+
＝50:1)纯化，以提供粗产物(100mg)。ESI-MS m/z:467.5[M+1]。
[1088] 1-(3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-52)
[1089] 按照实施例17所描述的步骤，由3-(4-(2-(5-氯-4-乙基-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化
1
合 物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.6(s,1H),6.6(s,1H),6.5(s,1H),6.3(dd,J ＝
10.4,17.2Hz,1H),6.1(dd,J ＝ 2.4,17.2Hz,1H),5.7(dd,J ＝ 2.4,10.4Hz,1H),5.1(t,J＝ 4.4Hz,1H),4.2(t,J ＝ 8Hz,1H),4.1(dd,J ＝ 4.8,8.8Hz,1H),3.95(dd,J ＝
7.2,10.0Hz,1H),3.9(d,J ＝ 4.4Hz,2H),3.8(dd,J ＝ 4.8,10.4Hz,1H),3.6-3.5(m,4H),3.2-3.1(m,1H),3.1-3.0(m,1H),2.5-2.3(m,4H),1.1(t,J ＝ 7.2Hz,3H)。ESI-MS m/+
z:407.4[M+H]。
[1090] 实施例49
[1091]
[1092] 3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1093] 按照实施例50所述的步骤，由3-(4-(2-(4-氯-5-碘-2-甲氧基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以1个步骤制备标题化合物。
[1094] 1-(3-(4-(2-(4-氯-5-乙基-2-羟基苯基氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-55)
[1095] 按照实施例17所描述的步骤，由3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化合
1
物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.67(s,1H),6.66(s,1H),6.47(s,1H),6.30(dd,J ＝
10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),5.69(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),5.1(m,1H),4.26(m,1H),4.07(m,1H),3.96(m,1H),3.88(d,J＝ 4.4,2H),3.78(m,1H),3.53(m,4H),3+
.17(m,1H),2.54(m,2H),2.37(m,4H),1.14(m,3H)。ESI-MS m/z:407.3[M+H]。
[1096] 实施例50
[1097]
[1098] (2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯基)甲醇
[1099] 在0℃下，向2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯甲醛(6.0g,29mmol)的MeOH(50mL)溶液中，分批加入硼氢化钠(4.45g,117mmol)，并且将产生的混合物在室温下搅拌30min。在真空下浓缩混合物。将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，以提供期望的产物(5.0g,78.4％收率)。
[1100] 1-(溴甲基)-2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯
[1101] 在0℃下，向(2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯基)甲醇(5.0g,23mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中，分批加入三溴化磷(3.08g,11.5mmol)，并将产生的混合物在室温下搅拌
2h。将混合物倒入冰水中，并用二氯甲烷萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，以提供期望的产物(3.5g,54.2％收率)。
[1102] 1-氯-5-甲氧基-4-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)苯
[1103] 氩气下，在80℃，将(2-氯-4-甲氧基-5-硝基苯基)甲醇(3.5g,12.5mmol)、2,2-二氟-2-(磺酰氟)乙酸甲酯(4.8g,25mmol)、碘化铜(617mg,3.25mmol)于NMP(20mL)中的混合物搅拌24h。冷却至室温后，将反应混合物溶解在乙酸乙酯中，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝100:1)
1
纯化，以提供期望的产物(1.2g,36.4％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:8.15(s,1H),7.60(s,1H),3.98(s,3H),3.89(dd,J＝1.7,11.2Hz,2H)。
[1104] 4-氯-2-甲氧基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯胺
[1105] 将1-氯-5-甲氧基-4-硝基-2-(2,2,2-三氟乙基)苯(1.2g,4.51mmol)、无水氯化亚锡(II)(tin(II)chloride dehydrate)(5.0g,22.5mmol)于EtOH(20mL)中的混合物搅拌回流2h。冷却至室温后，向反应混合物中加入饱和NaHCO3溶液以调节pH为7至8，并且随后用乙酸乙酯萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以提供期望的产1
物(900mg,85％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.29(s,1H),7.11(s,1H),5.41(s,2H),4.21(s,3H),3.99(dd,J＝1.7,11.2Hz,2H)。
[1106] 1-(3-(4-(2-((4-氯-2-羟基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-57)
[1107] 按照实施例41所描述的步骤，由4-氯-2-甲氧基-5-(2,2,2-三氟乙基)苯1
胺以6个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.08(s,1H),6.74(s,1H),
6.59(s,1H),6.34(dd,J ＝ 10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J ＝ 1.7,16.7Hz,1H),5.69(dd,J＝ 1.7,16.7Hz,1H),5.22(m,1H),4.24(m,1H),4.04(m,1H),3.94(m,1H),3.88(d,J ＝
4.4Hz,2H),3.78(m,1H),3.57(m,2H),3.54(m,4H),3.18(m,1H),2.37(m,4H)。ESI-MS m/+
z:461.2[M+H]。
[1108] 实施例51
[1109]
[1110] 4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯胺
[1111] 氩气下，在80℃，将4-氯-5-碘-2-甲氧基苯胺(5.0g,17.6mmol)、环丙基硼 酸(1.8g,21.1mmol)、Pd(OAc)2(314mg,1.4mmol)、三 环 己 基 膦 (500mg,17.6mmol)、K3PO4.3H2O(16.4g,61.6mmol)于甲苯(62.5mL)和H2O(3mL)中的混合物搅拌16h。允许混合物冷却至室温，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10:1)纯化，以提供期望+
的产物(3.1g,88.5％收率)。ESI-MS m/z:198.2[M+H]。
[1112] 1-氯-2-环丙基-4-碘-5-甲氧基苯
[1113] 在0℃下，向4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯胺(2.2g,11.05mmol)、浓HCl(12mL)和水(12mL)的混合物中，逐滴加入硝酸钠(762.8mg,11.05mmol)的水(2.5mL)溶液。在0℃下搅拌15min后，逐滴加入KI(1.83g,11.05mmol)的水(5mL)溶液。将产生的混合物在室温下搅拌4h，倒入水(20mL)中并且随后用二氯甲烷萃取。有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(0-10％乙酸乙酯/石油醚)纯1
化，以提供呈固体的期望的产物(680mg,20％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.37(s,
1H),7.08(s,1H),3.84(s,3H),2.00(m,1H),0.89(m,2H),0.65(m,1H)。
[1114] (E)-1-(4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮
[1115] 将1-氯-2-环丙基-4-碘-5-甲氧基苯(300mg,0.974mmol)、3-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(431mg,1.46mmol)、Pd(OAc)2(54.6mg,0.243mmol)、醋酸钠(239mg,2.92mmol)、四丁基氯化铵(539mg,1.95mmol)于DMF(7mL)中的混合物在100℃下搅拌24h。将混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤、用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以通过硅胶(二氯甲烷/甲醇＝40:1)纯化，以提供期望的产物+
(350mg,84％收率)。ESI-MS m/z:476.2[M+H]。
[1116] (E)-1-(4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)丙-2-烯-1-酮(V-62)
[1117] 按照实施例17所描述的步骤，由(E)-1-(4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-3-(4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮以3个步骤制备标题
1
化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.3(s,1H),7.71(m,1H),7.30(s,1H),7.22(m,1H),6.93(s,1H),6.34(dd,J ＝ 10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J ＝ 1.7,16.7Hz,1H),5.66(dd,J＝ 1.7,16.7Hz,1H),4.26(m,1H),4.08(m,1H),3.94(m,1H),3.79(m,1H),3.69(m,2H),3.58(m,2H),3.18(m,1H),2.33(m,4H),1.99(m,1H),0.92(m,2H),0.73(m,2H)。ESI-MS m/+
z:416[M+H]。
[1118] 实施例52
[1119]
[1120] 2-((4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基)硫代)乙酸甲酯
[1121] 氩 气 下，将 1-氯 -2-环 丙 基-4- 碘-5- 甲 氧 基 苯 (380mg,1.23mmol)、Pd2(dba)3(56mg,0.061mmol)、2-巯基乙酸甲酯(196mg,1.85mmol)、1,1’-二(二苯基膦)二茂铁(136mg,0.246mmol)、Et3N(372mg,3.69mmol)于NMP(8mL)中的混合物在80℃下搅拌24h。冷却至室温后，用乙酸乙酯萃取反应混合物。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝20:1)纯化，以提供期
1
望的产物(340mg,92％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.05(s,1H),6.81(s,1H),3.84(s,2H),3.82(s,3H),3.62(s,3H),2.00(m,1H),0.94(m,2H),0.64(m,2H)。
[1122] 1-(3-(4-(2-(4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基硫代)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-65)
[1123] 按照实施例40所描述的步骤，由2-((4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基)硫代)乙1
酸甲酯以4个步骤制备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.03(s,1H),6.93(s,1H),6.31(dd,J＝10.5,16.9Hz,1H),6.11(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),5.68(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),4.25(m,1H),4.04(m,1H),3.88(s,2H)3.81(s,3H),3.75(m,1H),3.52(m,4H),3.16(m,1+
H),2.36-2.25(m,4H),2.02(m,1H),0.93(m,2H),0.66(m,2H)。ESI-MS m/z:450[M+H]。
[1124] 实施例53
[1125]
[1126] (S)-2-(5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基氨基)丙酸
[1127] 氩气下，在80℃，将-1-溴-2-氯-5-碘-4-甲氧基苯(3g,8.64mmol)、(S)-2-氨基丙酸(769mg,8.64mmol)、CuI(164mg,0.864mmol)、2-羟基苯甲醛苯腙(366mg,1.73mmol)、K3PO4.3H2O(4.6g,17.28mmol)于DMF(10mL)中的混合物搅拌16h。允许混合物冷却至室温，向溶液中加入H2O和Et2O。产生的溶液分层为两相，将水相分离，并且有机层用5％NaOH萃取。混合的水相用20％HCl酸化至pH4，并且随后用Et2O萃取。产生的有机层用MgSO4干-燥，并在真空下浓缩，以提供期望的产物(1.7g,64％收率)。ESI-MS m/z:306.1[M+H]。
[1128] (S)-3-(4-(2-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1129] 在 0 ℃ 下，向 (S)-2-(5- 溴 -4- 氯 -2- 甲 氧 基 苯 基 氨 基 ) 丙 酸(1.6g,5.21mmol)、3-(哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.88g,7.82mmol)、EDCI.HCl(2.0g,10.42mmol)、HOBt(1.41g,10.42mmol) 的 DMF(20mL) 溶 液 中，加 入Et3N(1.58g,15.63mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌16h，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(甲醇/二氯乙烷＝1:50)纯化，以提供期望的产物(2.1g,76％收率)。ESI-MS m/+
z:531.3[M+H]。
[1130] ((S)-3-(4-(2-((4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1131] 氩气下，在80℃，将(S)-3-(4-(2-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(700mg,1.32mmol)、环丙基硼
酸(114mg,1.32mmol)、Pd(OAc)2(15mg,0.066mmol)、三 环 己 基 膦 (37mg,0.132mmol)、K3PO4.3H2O(974mg,4.62mmol)于DMF(10mL)和H2O(0.5mL)中的混合物中搅拌16h。允许混合物冷却至室温，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空中浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(甲醇/二氯乙烷＝1:100)纯化，以提供期望+
的产物(400mg,62％)。ESI-MS m/z:493.2[M+H]。
[1132] (S)-1-(3-(4-(2-((4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-67)
[1133] 按照实施例17所描述的步骤，由((S)-3-(4-(2-((4-氯-5-环丙基-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制
1
备标题化合物。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.69(s,1H),6.66(s,1H),6.29(dd,J ＝
10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),6.05(s,1H),5.68(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),4.84(m,1H),4.61(m,1H),4.24(m,1H),4.06(m,1H),3.94(m,1H),3.78(m,4H),3.55(m,1H+
),2.43-2.17(m,4H),1.97(m,1H),0.88(m,2H),0.63(m,2H)。ESI-MS m/z:433.3[M+H]。
[1134] 实施例54
[1135]
[1136] (S)-3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1137] 室温下，向(S)-3-(4-(2-((5-溴-4-氯-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(400mg,0.75mmol)、PdCl2(dppf)(95mg,0.13mmol)的THF(20mL)溶液中，加入Et2Zn(2.86mL,2.86mmol,1.0M在己烷中)。氩气下，将产生的混合物在80℃搅拌4h，并且随后在乙酸乙酯和水中分层。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并在真空下浓缩。剩余物通过硅胶柱色谱(甲醇/二氯乙烷＝1:80)纯化，以提供期望的产物(250mg,69％收率)。ESI-MS m/z:481.2[M+H]+。
[1138] (S)-1-(3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-羟基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-69)
[1139] 按照实施例17所描述的步骤，由(S)-3-(4-(2-((4-氯-5-乙基-2-甲氧基苯基)氨基)丙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化
合 物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.61(s,1H),6.64(s,1H),6.48(s,1H),6.29(dd,J ＝
10.5,16.9Hz,1H),6.12(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),5.68(dd,J＝1.7,16.7Hz,1H),4.89(m,1H),4.61(m,1H),4.25(m,1H),4.06(m,1H),3.94(m,1H),3.72-3.53(m,4H),3.16(m,1H),2.5(m,2H),2.43-2.17(m,4H),1.21(dd,3H),1.15(m,3H)。ESI-MS m/z:406.2[M+H]+。
[1140] 实施例55
[1141]
[1142] 4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯
[1143] 按照实施例38所描述的步骤，由3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯以3个步骤制备标题化合物。
[1144] 1-(3-(2-甲基哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮盐酸盐
[1145] 将4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)-3-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯(62mg,0.199mmol)于MeOH/HCl(20mL,2.9M)中的混合物，在室温下搅拌1h。将混合物在真空下浓缩，以提供粗产物(59mg)。该粗产物无需进一步纯化直接用于下一步骤。
[1146] 1-(3-(4-(2-((4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)氨基)乙酰基)-2-甲基哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-60)
[1147] 在-10℃下，向2-((4-氯-5-环丙基-2-羟基苯基)氨基)乙酸(30mg,0.124mmol)和NMM(50mg,0.496mmol)于THF(30mL)中的混合物，加入氯甲酸乙酯(15mg,0.136mmol)，并且将产生的混合物在-10℃下搅拌45min。随后加入1-(3-(2-甲基哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮盐酸盐(37mg,0.149mmol)、Et3N(50mg,0.496mmol)和二氯甲烷(3mL)的混合物。将产生的混合物在室温下搅拌30min。混合物在乙酸乙酯和水中分层。有机层用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物使用硅胶柱色谱(二氯甲烷/甲醇＝40:1)纯化，以提供呈白色固体的期望的产物(10mg,18.6％1
收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:9.65(s,1H),6.66(s,1H),6.34-6.27(m,1H),6.10-6.
07(m,2H),5.68-5.65(d,J＝ 10.4Hz,1H),5.12(m,1H),4.29-4.19(m,1H),4.12-4.10(m,1H),4.08-3.81(m,4H),3.78(s,4H),2.63(m,2H),2.25(m,1H),1.96(m,1H),1.24(s,1H),0.96+
-0.87(m,5H),0.63(m,2H)。ESI-MS m/z:433.5[M+H]。
[1148] 实施例56
[1149]
[1150] 4-溴-5-氯-2-硝基苯甲酰胺
[1151] 0℃下，向4-溴-5-氯-2-硝基苯甲酸(1.3g,4.63mmol)、Et3N(1.4g,13.9mmol)于THF(20mL)中的混合物，加入氯甲酸乙酯(1.5g,13.9mmol)。将产生的混合物在0℃下搅拌1h。随后加入NH3.H2O(4mL)，并搅拌0.5h。用乙酸乙酯萃取混合物。有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩以提供粗产物(900mg)。
[1152] 2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酰胺
[1153] 70℃下，向4-溴-5-氯-2-硝基苯甲酰胺(900mg,3.2mmol)于AcOH(20mL)和水(5mL)中的溶液，加入Fe粉(900mg,16.1mmol)，并且将产生的混合物在70℃下搅拌1h。允许混合物冷却至室温并倒入冰水中。通过过滤收集沉淀，并用水洗涤。该粗产物用乙酸乙酯溶解并过滤。滤液用饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤并在真空+下浓缩，以提供期望的产物(770mg,97％收率)。ESI-MS m/z:250.1[M+H]。
[1154] 3-(4-(2-((5-溴-2-氨基甲酰基-4-氯苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1155] 按照实施例41所描述的步骤，由2-氨基-4-溴-5-氯苯甲酰胺以3个步骤制备+标题化合物。ESI-MS m/z:532.5[M+H]。
[1156] 3-(4-(2-((2-氨基甲酰基-4-氯-5-环丙基苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
[1157] 向3-(4-(2-((5-溴-2-氨基甲酰基-4-氯苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(350mg,0.66mmol)和环丙基硼酸(226mg,2.64mmol)于甲苯(10mL)和水(2mL)中的混合物，加入Pd(OAc)2(15mg,0.07mmol)、PCy3(37mg,0.132mmol)和K3PO4(487mg,2.31mmol)。将混合物在80℃下搅拌16h。允许混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(1-5％甲醇/二氯乙烷)纯化，以提供呈固体的期望的产物(150mg,46％收率)。
[1158] 2-((2-(4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5-氯-4-环丙基苯甲酰胺
[1159] 按照实施例17所描述的步骤，由3-(4-(2-((2-氨基甲酰基-4-氯-5-环丙基苯基)氨基)乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯以2个步骤制备标题化合物。+
ESI-MS m/z:446.4[M+H]。
[1160] 2-((2-(4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5-氯-4-环丙基苄腈(V-71)
[1161] 室温下，向2-((2-(4-(1-丙烯酰基氮杂环丁-3-基)哌嗪-1-基)-2-氧代乙基)氨基)-5-氯-4-环丙基苯甲酰胺(30mg,0.067mmol)和Et3N(41mg,0.404mmol)于
DCM(10mL)中的混合物，加入三氟乙酸酐(56mg,0.268mmol)。将产生的混合物在室温下搅拌0.5h，倒入水中并且随后用二氯甲烷萃取。有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，并在真空下浓缩。剩余物通过快速硅胶柱色谱法(1-4％甲醇/二氯乙烷)纯化，以提供期望的产
1
物(20mg,72％收率)。H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.60(s,1H),6.34-6.30(m,1H),6.27(s,1H),6.12-6.07(m,1H),6.01-5.99(t,J＝ 4Hz,1H),5.69-5.65(m,1H),4.26-4.22(m,1H),
4.07-4.04(m,3H),3.96-3.92(m,1H),3.80-3.76(m,1H),3.53-3.51(m,4H),3.19-3.13(m,1H),2.45-2.30(m,4H),2.16-2.09(m,1H),1.08-1.03(m,2H),0.87-0.80(m,2H)。ESI-MS m/+
z:428.4[M+H]。
[1162] 实施例57
[1163]
[1164] 2-氯-4-甲氧基-1-乙烯基苯
[1165] 向鏻盐(2.05g,5mmol)的THF(50mL)悬浮液中加入t-BuOK(0.84g,7.5mmol)。混合物变成黄色，并且将混合物在室温下保持搅拌1h。向混合物中加入2-氯-4-甲氧基苯甲醛(0.85g,5mmol)。将混合物搅拌24h，用饱和NaHCO3稀释，并且随后使用己烷萃取。有机层用Na2SO4干燥，过滤并在真空下浓缩。剩余物通过Isolera One(100％己烷)纯化，以提供期望的产物(0.45g,53％收率)。1H NMR(CDCl3,δ):7.49(d,J＝6.8Hz,1H),7.03(dd,J＝ 8.8,14.0Hz,1H),6.90(d,J ＝ 2.0,1H),6.79(dd,J ＝ 2.0,6.8Hz,1H),5.62(d,J ＝14.0Hz,1H),5.26(d,J＝8.8Hz,1H),3.80(s,3H)。
[1166] 2-氯-1-(2,2-二氟环丙基)-4-甲氧基苯
[1167] 将2-氯-4-甲氧基-1-乙烯基苯(290mg,1.72mmol)的干燥THF(4mL)溶液脱气，并且随后加入TMS-CF3和NaI。将混合物在80℃下搅拌过夜。TLC(100％己烷)显示反应完毕。混合物用己烷(20mL)稀释。通过过滤移除无机盐。滤液在真空下浓缩。剩余物通过Isolera One(己烷＝100％)纯化。
[1168] 1-氯-2-(2,2-二氟环丙基)-5-甲氧基-4-硝基苯
[1169] 0℃下，向2-氯-1-(2,2-二氟环丙基)-4-甲氧基苯(328mg,1.5mmol)的Ac2O(2mL)溶液中加入HNO3(10滴)。将混合物从0℃搅拌至室温。真空下移除Ac2O。剩余物用DCM和水稀释。有机层用Na2SO4干燥。真空下移除溶剂。剩余物通过Isolera One(EtOAc/己烷＝0至15％)纯化，以提供期望的产物。1H NMR(CDCl3,δ):7.77(s,1H),7.16(s,1H),3.98(s,3H),2.78-2.90(m,1H),1.90-1.98(m,1H),1.60-1.68(m,1H)。ESI-MS m/z:264.1[M+H]+。
[1170] 4-氯-5-(2,2-二氟环丙基)-2-甲氧基苯胺
[1171] 将以上获得的1-氯-2-(2,2-二氟环丙基)-5-甲氧基-4-硝基苯溶解在10mL的AcOH/i-PrOH(1:5)共溶剂中。向混合物中加入Zn粉。将混合物在60℃下搅拌30min。真空下移除溶剂。剩余物用DCM稀释，并且通过过滤移除无机盐。滤液在真空下浓缩，以得到无需进一步纯化直接用于下一步骤的粗产物。
[1172] 1-(3-(4-((4-氯-5-(2,2-二氟环丙基)-2-羟基苯基)氨基乙酰基)哌嗪-1-基)氮杂环丁-1-基)丙-2-烯-1-酮(V-56)
[1173] 按照实施例41所描述的步骤，由4-氯-5-(2,2-二氟环丙基)-2-甲氧基苯胺以6个步骤制备标题化合物。
[1174] 1H NMR(CDCl3,δ):9.90(s,1H),6.73(s,1H),6.40(s,1H),6.30(dd,J ＝8.4,13.6Hz,1H),6.10(dd,J＝1.6,12.0Hz,1H),5.66(dd,J＝1.6,8.4Hz,1H),5.18(t,J＝
3.2,3.6Hz,1H),4.24(t,J＝ 6.0,6.8Hz,1H),4.03-4.08(m,1H),3.86-3.97(m,3H),3.74-3.80(m,1H),3.52(br.s,4H),3.13-3.20(m,1H),2.77-2.87(m,1H),2.25-2.43(m,4H),1.87-
1.97(m,2H)。ESI-MS m/z:455.2[M+H]+。
[1175] 实施例58
[1176] 化合物的生物化学测定
[1177] 在DMSO(Fisher cat#BP-231-100)中将测试化合物制备成10mM的储备溶液。将KRAS G12C 1-169、组氨酸标记的蛋白、负载的GDP在缓冲剂(20mM Hepes,150mM NaCl,1mM MgCl2)中稀释至2μm。按照如下测定化合物的活性：
[1178] 在96孔存储板中将化合物用DMSO稀释至50X最终测试浓度。使用前将化合物的储备溶液涡旋，并且仔细观察任何沉淀物的迹象。按照如下稀释：
[1179] ·对于100μM最终化合物浓度，将化合物稀释至5000μM(5μl 10mM化合物储备液+5μl DMSO)，并且通过移液(pipetting)混合均匀。
[1180] ·对于30μM最终化合物浓度，将化合物稀释至1500μM(3μl 10mM化合物储备液+17μl DMSO)，并且通过移液混合均匀。
[1181] ·对于10μM最终化合物浓度，将化合物稀释至500μM(2μl 10mM化合物储备液+38μl DMSO)，并且通过移液混合均匀。
[1182] 将49μl储备蛋白溶液加入到96-孔PCR板(Fisher cat#1423027)的每个孔中。使用12-孔道移液器将1μl的稀释至50X的化合物加至PCR板中相应的孔中。使用200μl多孔道移液器，通过上/下移液将反应仔细并完全混合。将所述板用铝板封条密封好，并于室温在抽屉中存储2hrs或24hrs。随后向将每个孔中加入5μl于DI H2O中的2％甲酸(Fisher cat#A117)，随后用移液管混合。然后将所述板用铝板封条重新密封，并且在干冰上存储，直到以下所描述的分析。
[1183] 以上所述的测定是按照以下步骤由质谱分析法分析：
[1184] 将MS仪器设置为正极，2GHz分辨率和低质量(1700)模式，并且允许平衡30分钟。随后校准仪器，转换至捕获模式，并加载相应的方法。
[1185] 另外30分钟的平衡时间后，运行空白批次(blank batch)(即缓冲液)以保证设备正常运作。将样本在37℃解冻10分钟，短暂离心，并且随后转移至该台式仪器(bench top)。向孔A1和H12中加入1uL 500uM的内标肽，并且将该板在2000x g离心5分钟。随后运行该方法，并记录各个独立孔的质量。
[1186] 将各个孔的质量(集成数据所需要的)经分析后粘贴成板分布图(platemap)并输出。同时也输出内标肽的质量。在50ppm的数据是针对+19电荷状态提取的，并且使用内标峰指定孔A1的识别并积分。峰数据输出为TOF列表，并且针对+20、21、22、23、24和25电荷状态，独立重复上述步骤。
[1187] 其它体外分析如下：
[1188] 细胞生长的抑制：
[1189] 个体化合物抑制Ras-介导的细胞生长的能力按照下述评估并证明。将表达野生型或突变型Ras的细胞以每孔5,000细胞的密度接种在具有白色透明底部的96板孔。接种后在本文公开的化合物加入之前，允许细胞附着约2小时。几个小时(例如细胞生长24小时、48小时或72小时)之后，按照制造商的说明书使用Cell Titer Glo试剂(Promega)通过测量总的ATP含量来检测细胞增殖。通过分析在从100μM下降的半对数间隔的8个点的化合物剂量应答来测定增殖EC50。
[1190] Ras-介导的信号转导的抑制：
[1191] 本文公开的化合物抑制Ras-介导的信号的能力，按照下述来评估并证明。将表达野生型或突变型Ras(如G12C、G12V或G12A)的细胞用或不用(对照细胞)个体化合物处理。通过如下来证明一个或多个个体化合物对Ras信号的抑制：与对照细胞相比较，磷酸化的MEK和/或在用一种或多种个体化合物处理的细胞中的Raf结合的稳态水平的下降。
[1192] Ras-介导的信号转导的抑制：
[1193] 本文公开的化合物抑制Ras-介导的信号的能力，按照下述来评估并证明。将表达野生型或突变型Ras(如G12C、G12V或G12A)的细胞用或不用(对照细胞)个体化合物治疗。通过如下来证明一个或多个个体化合物对Ras信号的抑制：与对照细胞相比较，化合物与用一种或多种个体化合物处理的细胞中G12C突变的Ras蛋白的结合百分比。
[1194] Ras-介导的信号转导的抑制：
[1195] 本文公开的化合物抑制Ras-介导的信号的能力，按照下述来评估并证明。将表达野生型或突变型Ras(如G12C、G12V或G12A)的细胞用或不用(对照细胞)个体化合物处理。通过如下来证明一个或多个个体化合物对Ras信号的抑制：与对照细胞相比较，用一种或多种个体化合物处理的细胞中Ras复合物与下游信号转导分子(例如Raf)的结合下降。
[1196] 将表1-6中的化合物按照上述步骤测试。表5和6的化合物的结果提供如下。发现表5和6中每个化合物与KRAS G12C共价结合的程度至少约5％(即，发现存在于孔中的至少约5％蛋白与测试化合物共价结合)。
[1197] 表7a
[1198] 代表性化合物的活性*
[1199]
[1200] *结合活性在24hrs测定。
[1201] +表示结合活性由5％至15％
[1202] ++表示结合活性大于15％并高至25％
[1203] +++表示结合活性大于25％并高至50％
[1204] ++++表示结合活性大于50％
[1205] 表7b
[1206] 代表性化合物的活性*
[1207]
[1208]
[1209] *结合活性在2hrs测定。
[1210] +表示结合活性由5％至20％
[1211] ++表示结合活性大于20％
[1212] 表8a
[1213] 代表性化合物的活性*
[1214]
[1215] *结合活性在24hrs测定。
[1216] +表示结合活性从5％至10％
[1217] ++表示结合活性大于10％并高至20％
[1218] +++表示结合活性大于20％并高至30％
[1219] ++++表示结合活性大于30％
[1220] 表8b
[1221] 代表性化合物的活性*
[1222]
[1223] *结合活性在2hrs测定。
[1224] +表示结合活性由5％至20％
[1225] ++表示结合活性大于20％
[1226] 实施例59
[1227] 评估化合物I-189对细胞增殖的抑制
[1228] 两个癌细胞系，NCI H441(包含G12V突变的人肺腺癌细胞)和MIA paca-2(包含G12C突变的人胰腺癌)用于该实验。两个细胞系均使用100μM、30μM、10μM和3μM浓度的化合物I-189处理，并且按照实施例1所描述的测量细胞效价。该实验的结果如图4所示。
[1229] 实施例60
[1230] 化合物I-189、I-92和I-94的细胞增殖抑制的比较
[1231] 该SAR研究的结果如图5所示。两个癌细胞系，NCI H441(包含G12V突变的人肺腺癌细胞)和MIA paca-2(包含G12C突变的人胰腺癌)用于该实验。两个细胞系均使用100μM、30μM、10μM和3μM浓度的化合物I-189处理，并且测量细胞效价。使用化合物I-192和I-94完成类似的实验。
[1232] 实施例61
[1233] 化合物I-92和I-95的细胞增殖抑制的比较
[1234] 该研究的结果如图6所示。两个癌细胞系，NCI H441(包含G12V突变的人肺腺癌细胞)和MIA paca-2(包含G12C突变的人胰腺癌)用于该实验。两个细胞系均使用100μM、30μM、10μM和3μM浓度的化合物I-192处理并且测量细胞效价。使用化合物I-95完成类似的实验。
[1235] 实施例62
[1236] 化合物I-66、I-45和I-91的细胞增殖抑制的比较
[1237] 该研究的结果如图7所示。两个癌细胞系，NCI H441(包含G12V突变的人肺腺癌细胞)和MIA paca-2(包含G12C突变的人胰腺癌)用于该实验。两个细胞系均使用100μM、30μM、10μM和3μM浓度的化合物I-66处理，并且测量细胞效价。使用化合物I-45和I-91完成类似的实验。
[1238] 实施例63
[1239] 化合物I-47、I-42和I-60的细胞增殖抑制的比较
[1240] 该研究的结果如图8所示。三个细胞系，NCI H441(包含G12V突变的人肺腺癌细胞)、NCI 1568(肺腺癌细胞)和MIA paca-2(包含G12C突变的人胰腺癌)用于该实验。细胞系均使用100μM、30μM、10μM和3μM浓度的化合物I-66处理，并且测量细胞效价。
使用化合物I-47、I-42和I-60完成类似的实验。
[1241] 如上所描述的多个实施方案可以被组合以提供进一步的实施方案。所有在本说明书和/或所附的申请数据表中提及的美国专利、美国专利申请出版物、美国专利申请、国外专利、国外专利申请和非专利出版物通过引用以与本描述不相抵触的程度整体并入本文。可以改进所述的实施方案的多个方面，必要时可使用各种专利、申请和出版物的概念从而提供进一步的实施方案。
[1242] 2013年3月15日提交的序列号为61/852,123和2013年10月10日提交的序列号为61/889,480的美国临时专利申请，通过引用以其整体并入本文。
[1243] 从前述中可以领会的是，尽管出于说明目的已经在本文中描述了本发明的具体实施方案，在不背离本发明的精神和范围下可以进行各种修改。因此，本发明不受除了所附权利要求之外的限制。
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