含杂环取代苯基的磺酰胺广谱HIV蛋白酶抑制剂

本发明涉及含杂环取代苯基的磺酰胺、其作为天冬氨酸蛋白酶抑 制剂的用途，特别是作为广谱HIV蛋白酶抑制剂的用途、其制法及含 其之医药组合物与诊断药盒。本发明也涉及该含取代苯基的磺酰胺与 另一种抗反转录病毒剂的组合。本发明进一步涉及其在分析法中作为 参考化合物或试剂的用途。

引起后天免疫缺乏症候群(AIDS)的病毒有多种不同名称，包括 T-淋巴细胞病毒III(HTLV-III)或淋巴结病结合病毒(LAV)或AIDS- 相关病毒(ARV)或人类免疫缺乏症病毒(HIV)。现已判别出不同族 群，如：HIV-1与HIV-2。下文中，一律采用HIV代表此等病毒。

反转录病毒生命循环中重要途径之一为由天冬氨酸蛋白酶处理聚 蛋白质前体。以HIV病毒为例，gag-pol蛋白质被HIV蛋白酶处理。 感染性病毒粒子的组合需要天冬氨酸蛋白酶处理聚蛋白质前体的正确 过程，因此使得天冬氨酸蛋白酶成为抗病毒疗法中值得注意的目标。 特别地，在HIV处理法中，HIV蛋白酶即为值得注意的目标。

HIV蛋白酶抑制剂(PIs)通常用于与共他抗HIV化合物(如，例 如：核苷逆转录酶抑制剂(NRTIs)、非核苷逆转录酶抑制剂(NNRTIs)、 核苷酸逆转录酶抑制剂(NtRTIs)或其他蛋白酶抑制剂)组合投与AIDS 患者。尽管此等抗反转录病毒剂非常有用，但其仍有限制，亦即HIV 病毒中的目标酶素可以突变，以致已知药物效果降低，或甚至对此等 突变的HIV病毒无效。或者，换言之，HIV病毒对此等可使用的药物产 生更高的抗药性。

反转录病毒，特别是HIV病毒，对抑制剂产生抗药性为疗法失败 的主要原因。例如：在接受抗-HIV组合疗法的患者中，有半数对治疗 没有完全反应，主要原因在于病毒对所使用的一种或多种药物产生抗 药性。此外，已发现有抗药性的病毒会带到新感染的个体中，以致严 重限制此等原来对药物无抗药性的患者对疗法的选择性。因此，相关 技艺需要一种用于反转录病毒疗法，特别是AIDS疗法的新颖化合物。 相关技艺特别急需不仅对野生型HIV病毒，而且对抗药性日渐提高的 HIV病毒也有活性的化合物。

常在组合疗法中投药的已知抗反转录病毒剂最后均会引起如上述 抗药性。此点经常会迫使医师追加活性药物在血浆中的浓度，以使该 抗反转录病毒剂再度恢复对抗突变的HIV病毒的效力。追加血浆浓度 可能亦提高无法适应该疗法的危险性。其结果即为在不期望下需增加 服用药丸的负担。因此其重要性不仅在于有一种对许多种HIV突变株 展现活性的化合物，而且其在许多种HIV突变株之中，对抗HIV突变 株病毒的活性及对抗野生型HIV病毒的活性之间之比例(亦称为抗药 性倍数或FR)必需很小或没有变化。因此，患者可以保持相同的组合 疗法一段更长时间，因为突变的HIV病毒对活性成份敏感机会提高。

寻求一种对野生型及对多种突变株均具高效力的化合物也很重 要，因为若医疗用药浓度能保持在最低程度时，将可降低服用药丸的 负担。降低服用药丸负担的一种方法为寻求一种具有良好生物可利用 率的抗HIV化合物，亦即有利的药物动力学及代谢图形，因此可使每 日剂量降至最低，结果也可减少服用药丸的数量。

良好抗-HIV化合物的另一项重要特性为抑制剂的血浆蛋白质结合 性对其效力的影响必需最低或甚至没有。

因此，医学上极需一种可以在抗药性倍数变异很小下广泛对抗多 种HIV病毒突变株，具有良好生物可利用率且其效力受到血浆蛋白质 结合性影响的程度很低或没有的蛋白酶抑制剂。此外，仍旧需要具有 医疗指数改善的化合物。

迄今市面上已出现或已发展出数种蛋白酶抑制剂。其中一种特别 的核心结构式(如下所示)已公开于多种参考文献中，如：WO 95/06030、WO96/22287、WO 96/28418、WO 96/28463、WO 96/28464、 WO 96/28465及WO 97/18205。其中所公开的化合物均说明为反转录 病毒蛋白酶抑制剂。

WO 99/67254公开的4-取代苯基磺酰胺可以抑制多重药物抗性反 转录病毒蛋白酶。

JP 9124630和WO 96/33184也公开了一种取代苯基磺酰胺为HIV 蛋白酶抑制剂。

现已惊人地发现，本发明含有杂环取代苯基的磺酰胺具有有利的 药理与药物动力学图形。不仅有活性为对抗野生型HIV病毒，而且也 对多种已对已知蛋白酶抑制剂产生抗药性的不同HIV病毒突变株展现 广泛的活性范围。

本发明涉及一种如下式含杂环取代苯基的HIV蛋白酶抑制剂，

其N-氧化物、盐、立体异构体、外消旋混合物、前药、酯或代谢物，

其中

R1和R8独立为氢、C1-6烷基、C2-6烷基、芳基C1-6烷基、C3-7环烷基、 C3-7环烷基C1-6烷基、芳基、Het1、Het1C1-6烷基、Het2、Het2C1-6烷基；

R1也可为如下式基团

其中

R9、R10a和R10b独立为氢、C1-4烷氧羰基、羧基、氨基羰基、单-或 二(C1-4烷基)氨基羰基、C3-7环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-4烷基， 其可任意地被下列基团取代：芳基、Het1、Het2、C3-7环烷基、C1-4烷氧 羰基、羧基、氨基羰基、单-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基磺酰基、 C1-4烷基S(O)t、羟基、氰基、卤素或氨基，其可任意地被单或二取代， 其中取代基选自：C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环 烷基C1-4烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；其中R9、R10a 与其所附接的碳原子也可形成C3-7环烷基；

R11为氢、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7环烷基、芳基、可任意地被单或 二取代的氨基羰基、可任意地被单或二取代的氨基C1-4烷基羰氧基、C1-4 烷氧羰基、芳氧羰基、Het1氧羰基、Het2氧羰基、芳氧羰基C1-4烷基、 芳基C1-4烷氧羰基、C1-4烷羰基、C3-7环烷基羰基、C3-7环烷基C1-4烷氧 羰基、C3-7环烷基羰氧基、羧基C1-4烷羰氧基、C1-4烷羰氧基、芳基C1-4 烷羰氧基、芳羰氧基、芳氧羰氧基、Het1羰基、Het1羰氧基、Het1C1-4 烷氧羰基、Het2羰氧基、Het2C1-4烷羰氧基、Het2C1-4烷氧羰氧基或C1-4 烷基，其可任意地被芳基、芳氧基、Het2或羟基取代；其中氨基上的 取代基独立选自：C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环 烷基C1-4烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；

R11b为氢、C3-7环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、Het1、Het2或 C1-4烷基，其可任意地被下列基团取代：卤素、羟基、C1-4烷基S(＝O)t、 芳基、C3-7环烷基、Het1、Het2、氨基，其可任意地被单或二取代，其 中取代基选自：C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷 基C1-4烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；

其中R11b可通过磺酰基连接分子的其余部分；

R2为氢或C1-6烷基；

L为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-NR8-C(＝O)-、-O-C1-6烷二基-C(＝O)-、 -NR8-C1-6烷二基-C(＝O)-、-S(＝O)2-、-O-S(＝O)2-、-NR8-S(＝O)2，其中 C(＝O)基团或S(＝O)2基团与NR2部分相连；

R3为C1-6烷基、芳基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基或芳基C1-4 烷基；

R4为氢、C1-4烷氧羰基、羧基、任意单或二取代的氨基羰基、C3-7 环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-6烷基，其中C3-7环烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基与C1-6烷基可任意地被选自下列的取代基取代：芳基、Het1、 Het2、C3-7环烷基、C1-4烷氧羰基、羧基、任意单或二取代的氨羰基、任 意单或二取代的氨磺酰基、C1-4烷基S(＝O)t、羟基、氰基、任意单或二 取代的氨基和卤素，其中任何氨基官能基上存在的任意取代基独立选 自C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基、 Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；t为零、1或2；

各t独立选自零、1或2；

Haryl为含有3至14个环原子的芳香系单环、双环或三环系杂环， 其包含一个或多个选自氮、氧与硫中的杂环原子，且可任意地在(i)一 个或多个碳原子上被下列基团取代；C1-6烷基、卤素、羟基、任意单或 二取代的氨基、硝基、氰基、卤C1-6烷基、羧基、C3-7环烷基、任意单 或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰基、芳基、-(R7a)n-M-R7b、Het1 和Het2；其中任何氨基官能基上存在的任意取代基独立选自R5和-A- R6；及(ii)若出现氮原子时，则在氮原子上被羟基或-A-R6取代；

A为C1-6烷二基、-C(＝O)-、-C(＝S)-、-S(＝O)2-、C1-6烷二基- C(＝O)-、C1-6烷二基-C(＝S)-或C1-6烷二基-S(＝O)2-；其中这些含C1-6 烷二基部分的基团中，C1-6烷二基部分与氨基相连；

R5为羟基、C1-6烷基、Het1C1-6烷基、Het2C1-6烷基、氨基C1-6烷基， 其中氨基可任意地被C1-4烷基单或二取代；

R6为氢、C1-6烷氧基、Het1、Het1氧、Het2、Het2氧、芳基、芳氧 基或氨基；

且若-A-不为C1-6烷二基时，则R6也可为C1-6烷基、Het1C1-4烷基、 Het1氧C1-4烷基、Het2C1-4烷基、Het2氧C1-4烷基、芳基C1-4烷基、芳氧 基C1-4烷基或氨基C1-4烷基；其中R6定义中的各氨基可任意地被一或二 个选自下列的取代基取代：C1-4烷基、C1-4烷羰基、C1-4烷氧羰基、芳基、 芳羰基、芳氧羰基、Het1、Het2、芳基C1-4烷基、Het1C1-4烷基或Het2C1-4 烷基；

R7a为C1-8烷二基，其可任意地被一个或多个选自下列的取代基取 代：卤素、C1-4烷羰基、C1-4烷氧羰基、芳基、芳羰基、芳氧羰基、Het1 或Het2；

R7b为C1-8烷基，其任意地被一个或多个选自下列的取代基取代： 卤素、C1-4烷羰基、C1-4烷氧羰基、芳基、芳羰基、芳氧羰基、Het1或 Het2；

M为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O、-CH2-CHOH-、-CHOH-CH2、 -NR8-C(＝O)-、-(C＝O)-NR8-、-S(＝O)2-、-O-、-S-、-O-S(＝O)2-、- S(＝O)2-O-、-NR8S(＝O)2或-S(＝O)2-NR8-；

n为零或1。

本发明也包括本化合物的氮原子的季铵化反应。碱性氮可经本领 域普遍技术人员公知的任何试剂季铵化，包括例如：低级烷基卤化物、 二烷基硫酸酯、长链卤化物及芳烷基卤化物。

若式(I)化合物定义中使用术语“被取代”时，是指以“被取代” 一词表示的原子上一个或多个氢被选自所指定基团中的取代基取代， 但其限制条件为不可超过所指定基团的正常价数，且取代后需产生化 学上稳定的化合物，亦即其稳定性足以在反应混合物中耐受分离过程 至达到有用的纯化程度，并调配成治疗剂。

本文在基团或基团的一部分中所使用的术语“卤”或“卤素”通 指氟、氯、溴或碘。

作为基团或基团一部分的术语“C1-4烷基”是指含有1至4个碳原 子的直链与支链饱和烃基，例如：甲基、乙基、丙基、丁基、2-甲基 丙基等。

作为基团或基团一部分的术语“C1-6烷基”为含有1至6个碳原子 的直链与支链饱和烃基，如：C1-4烷基所定义的基团及戊基、己基、2- 甲基丁基、3-甲基戊基等。

作为基团或基团一部分的术语“C1-4烷基”为含有1至8个碳原子 的直链与支链饱和烃基，如：C1-6烷基所定义的基团及庚基、辛基、2- 甲基-庚基、3-乙基己基等。

作为基协和或基团一部分的术语“C1-6烷二基”为含有1至6个碳 原子的二价直链与支链饱和烃基，例如：亚甲基、乙烷-1，2-二基、丙 烷-1，3-二基、丙烷-1，2-二基、丁烷-1，4-二基、戊烷-1，5-二基、己 烷-1，6-二基、2-甲基丁烷-1，4-二基、3-甲基戊烷-1，5-二基等等。

作为基协和或基团一部分的术语“C1-8烷二基”为含有1至8个碳 原子的二价直链与支链饱和烃基，如：C1-6烷二基所定义的基团及2- 乙基-己烷-1，6-二基、3-甲基-庚烷-1，7-二基等。

作为基团或基团一部分的术语“C2-6烯基”为含有2至6个碳原子 与至少一个双键的直链与支链烃基，例如：乙烯基、丙烯基、丁烯基、 戊烯基、己烯基等。

作为基团或基团一部分的术语“C2-6炔基”为含有2至6个碳原子 与至少一个叁键的直链与支链烃基，例如：乙炔基、丙炔基、丁炔基、 戊炔基、己炔基等。

为作基团或基团一部分的术语“C3-7环烷基”通指环丙基、环丁基、 环戊基、环己基或环庚基。

作为基团或基团一部分的术语“芳基”包括单环、双环与三环芳 香系碳环，如：苯基与萘基，其均可任意地被一个或多个独立选自下 列的取代基取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、任意单或二取 代的氨基、硝基、氰基、羟基C1-6烷基、卤C1-6烷基、羧基、C1-6烷氧 羰基、C3-7环烷基、Het1、任意单或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰 基，及苯基，其可任意地被一个或多个选自下列的取代基取代：C1-6烷 基、C1-6烷氧基、卤素、羟在、任意单或二取代的氨基、硝基、氰基、 卤C1-6烷基、羧基、C1-6烷氧羰基、C3-7环烷基、Het1、任意单或二取肛 的氨羰基、甲硫基与甲磺酰基；其中任何氨基官能基上存在的任意取 代基独立选自：C1-6烷基、C1-6烷氧基-A-、Het1-A-、Het1C1-6烷基、Het1C1-6 烷基-A-、Het1氧-A-、Het1氧C1-4烷基-A-、苯基-A-、苯基-氧-A-、 苯基氧C1-4烷基-A-、苯基C1-6烷基-A-、C1-6烷基氧羰氨基-A-、氨基- A-、氨基C1-6烷基与氨基C1-6烷基-A-，其中各氨基可任意地被C1-4烷基 单取代，或若可能时，可被二取代，其中A如上述定义。作为基团或 基团之一部分的“芳基”值得注意的副族群包括单环、双环与三环芳 香系碳环，如：苯基与萘基，其均可任意地被一个或多个独立选自下 列的取代基取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、任意单或二取 代的氨基、硝基、氰基、卤C1-6烷基、羧基、C1-6烷氧羰基、C3-7环烷基、 Het1、任意单或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰基、及苯基，其可任 意地被一个或多个选自下列的取代基取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤 素、羟基、任意单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤C1-6烷基、羧基、 C1-6烷氧羰基、C3-7环烷基、Het1、任意单或二取代的氨羰基、甲硫基与 甲磺酰基；其中任何氨基官能基上存在的任意取代基独立选自：C1-6烷 基、C1-6烷氧基-A-、Het1-A-、Het1C1-6烷基、Het1C1-6烷基-A-、Het1 氧-A-、Het1氧C1-4烷基-A-、苯基-A-、苯基-氧-A-、苯基氧C1-4烷基 -A-、苯基C1-6烷基-A-、C1-6烷基氧羰氨基-A-、氨基-A-、氨基C1-6烷 基与氨基C1-6烷基-A-，其中各氨基可任意地被C1-4烷基单取代，或若 可能时，可被二取代，其中A如上述定义。

作为基团或基团一部分的术语“卤C1-6烷基”为被一个或多个卤原 子(优选为氯或氟原子，更优选为氟原子)取代的C1-6烷基。优选的卤 C1-6烷基包括例如：三氟甲基与二氟甲基。

作为基团或基团一部分的术语“羟基C1-6烷基”为被一个或多个羟 原子取代的C1-6烷基。

作为基团或基协和一部分的术语“Het1”为最好含有3至14个环 原子(优选为5至10个环原子，更优选为5至8个环原子)的饱和或 总值发不饱和单环、双环或三环系杂环，其包含一个或多个选自氮、 氧或硫中的杂环原子，且可在一个或多个碳原子上任意地被下列基团 取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、氧代基、任意被单或二取 代的氨基、硝基、氰基、羟基C1-6烷基、卤C1-6烷基、羧基、C1-6烷氧 羰基、C3-7环烷基、任意被单或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰基、 芳基与含有3至14个环原子的饱和或部分不饱和单环、双环或三环系 杂环，其包含一个或多个选自氮、氧或硫中的杂环原子，其中任何氨 基官能基上存在的任意取代基独立选自：C1-6烷基、C1-6烷氧基-A-、 Het2-A-、Het2C1-6烷基、Het2C1-6烷基-A-、Het2氧-A-、Het2氧C1-4烷 基-A-、芳基-A-、芳氧基-A-、芳氧基-C1-4烷基-A-、芳基C1-6烷基-A-、 C1-6烷氧羰基氨基-A-、氨基-A-、氨基C1-6烷基与氨基C1-6烷基-A-，其 中各氨基可任意地被C1-4烷基单取代，或若可能时，可被二取代，其中 A如上述定义。作为基团或基团一部分的“Het1”的值得注意的副族群 包括最好含有3至14个环原子(优选为5至10个环原子，更优选为5 至8个环原子)的饱和或部分不饱和单环、双环或三环系杂环，其包 含一个或多个选自氮、氧或硫中的杂环原子，且可在一个或多个碳原 子上任意地被下列基团取代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、氧代 基、任意被单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤C1-6烷基、羧基、C1-6 烷氧羰基、C3-7环烷基、任意被单或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰 基、芳基与含有3至14个环原子的饱和或部分不饱和单环、双环或三 环系杂环，其包含一个或多个选自氮、氧或硫中的杂环原子，其中任 何氨基官能基上存在的任意取代基独立选自：C1-6烷基、C1-6烷氧基- A-、Het2-A-、Het2C1-6烷基、Het2C1-6烷基-A-、Het2氧-A-、Het2氧C1-4 烷基-A-、芳基-A-、芳氧基-A-、芳氧基-C1-4烷基-A-、芳基C1-6烷基 -A-、C1-6烷氧羰基氨基-A-、氨基-A-、氨基C1-6烷基与氨基C1-6烷基- A-，其中各氨基可任意地被C1-4烷基单取代，或若可能时，可被二取代， 其中A如上述定义。

作为基团或基团一部分的术语“Het2”为最好含有3至14个环原 子(优选为5至10个环原子，更优选为5至6个环原子)之芳香系单 环、双环或三环系杂环，其包含一个或多个选自氮、氧或硫中的杂环 原子，且可在一个或多个碳原子上任意地被下列基团取代：C1-6烷基、 C1-6烷氧基、卤素、羟基、任意被单或二取代的氨基、硝基、氰基、羟 基C1-6烷基、卤C1-6烷基、羧基、C1-6烷氧羰基、C3-7环烷基、任意地被 单或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰基、芳基、Het1与含有3至14 个环原子之芳香系单环、双环或三环系杂环；其中任何氨基官能基上 存在的任意取代基独立选自：C1-6烷基、C1-6烷氧基-A-、Het1-A-、Het1C1-6 烷基、Het1C1-6烷基-A-、Het1氧-A-、Het1氧C1-4烷基-A-、芳基-A-、 芳氧基-A-、芳氧基-C1-4烷基-A-、芳基C1-6烷基-A-、C1-6烷氧羰氨基 -A-、氨基-A-、氨基C1-6烷基与氨基C1-6烷基-A-，其中各氨基可任意 地被C1-4烷基单取代，或若可能时，可被二取代，其中A如上述定义。 作为基团或基团一部分“Het2”的值得注意的副族群包括最好含有3 至14个环原子(优选为5至10个环原子，更优选为5至6个环原子) 的芳香系单环、双环或三环系杂环，其包含一个或多个选自氮、氧或 硫中的杂环原子，且可在一个或多个碳原子上任意地被下列基团取 代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟基、任意被单或二取代的氨基、 硝基、氰基、卤C1-6烷基、羧基、C1-6烷氧羰基、C3-7环烷基、任意地被 单或二取代的氨羰基、甲硫基、甲磺酰基、芳基、Het1与含有3至14 个环组员之芳香系单环、双环或三环系杂环，其中任何氨基官能基上 存在的任意取代基独立选自：C1-6烷基、C1-6烷氧基-A-、Het1-A-、Het1C1-6 烷基、Het1C1-6烷基-A-、Het1氧-A-、Het1氧C1-4烷基-A-、芳基-A-、 芳氧基-A-、芳氧基-C1-4烷基-A-、芳基C1-6烷基-A-、C1-6烷氧羰氨基 -A-、氨基-A-、氨基C1-6烷基与氨基C1-6烷基-A-，其中各氨基任意地 被C1-4烷基单取代，或若可能时，可被二取代，其中A如上述定义。

本文所使用(＝O)术语与其所附接的碳原子形成羰基部分基团。(＝O) 术语与其所附接的硫原子形成亚砜部分基团。(＝O)2术语与其所附接的 硫原子形成磺酰基部分基团。

本文所使用(＝S)术语与其所附接的碳原子形成硫羰基部分基团。

本文所使用“一个或多个”术语涵括了在适当情况下所有可被取 代之C-原子可能性，优选为一、二或三个。

当任何组成中任何代号(例如：卤素或C1-4烷基)出现一次以上时， 各定义彼此独立。

本文所使用术语“前药”是指可药用衍生物如：酯类、酰胺类与 磷酸酯类，以使该衍生物在活体内的生物转形产物如式(I)化合物所 定义的活性药物。说明前药之参考文献：Goodman与Gilman之“The Pharmacological Basis of Therapeutics”，第8版，McCTraw- Hill，Int，Ed，1992，“biotransformation of Drugs”，p13-15”， 其内容已以引用方式并入本文中。本发明化合物的前药制法为修饰化 合物中的官能基，使所修饰之基团可在例行操作法或在活体内裂解成 母化合物。前药包括本发明化合物中，其羟基，例如：不对称碳原子 上的羟基，或氨基所键结的任何基团可使前药投与患者时，分别裂解 形成游离羟基或游离氨基。

前药的典型实例说明于例如：WO 99/33795、WO 99/33815、WO 99/33793与WO 99/33792，其内容已以引用方式并入本文中。

前药的特征为水溶性极佳、生物可利用率提高及容易于活体内代 谢成活性抑制剂。

医疗用式(I)化合物的盐类为那些其中抗衡离子为医药上或生理 上可接受者。然而，具有医药上不可接受的抗衡离子的盐类也可用于 例如：制备或纯化医药上可接受的式(I)化合物。所有盐类，不论是 否医药上可接受，均包括在本发明范围内。

本发明化合物所形成的医药上可接受或生理上可耐受的加成盐型 很容易采用适当酸制备，例如：无机酸类，如：氢卤酸，例如：盐酸 或氢溴酸；硫酸；硝酸；磷酸等；或有机酸类，例如：乙酸、丙酸、 羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、 苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、 环己胺磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、双羟萘酸等。

反之，该酸加成盐型可经适当碱处理，转化成游离碱型。

含酸性质子的式(I)化合物也可经适当有机与无机碱处理，转化 成其无毒性金属或胺加成盐型。适当的碱盐型包括例如：铵盐；碱金 属与碱土金属盐，例如：锂、钠、钾、镁、钙盐等；与有机碱形成之 盐类，例如：双苄基乙二胺、N-甲基-D-葡萄胺、哈胺青微素盐类；以 及与氨基酸形成之盐类，例如：精氨酸、离氨酸等。

反之，该碱加成盐型可经适当酸处理，转化成游离酸型。

术语“盐类”也包括本发明化合物可形成的水合物与溶剂加成型。 这类型式实例包括例如：水合物、醇盐等。

本发明化合物的N-氧化物型包括式(I)中一个或数个氮原子被氧 化成所谓的N-氧化物化合物。

本发明化合物也出现其互变异构型。这类型式虽然未以上述化学 式表示，但仍包括在本发明范围内。

如上文所使用的本发明化合物立体化学异构型一词定义为由本发 明化合物的相同原子依相同键结顺序键结组成，但具有无法交换的不 同立体结构的所有可能化合物。除非另有说明，否则化合物的化学式 包括该化合物可能拥有的所有可能立体化学异构型的混合物。该混合 物可包含该化合物的基本分子结构的所有非对映异构物与/或对映异 构物。本发明化合物的所有立体化学异构型(包括纯型或其混合物) 均包括在本发明范围内。

本文所说明的化合物与中间物的纯立体异构型的定义为实质上不 含该化合物或中间物的相同基本分子结构的其他对映异构型或非对映 异构型的异构物。特定而言，术语“纯立体异构性”是指该化合物或 中间物的立体异构性超量为至少80％(亦即其中一种异构物至少占 90％，另一种可能出现的异构物则最多占10％)至立体异构性超量为 100％(亦即其中一种异构物占100％，且不含另一种异构物)；更特定 而言，化合物或中间物的立体异构性超量为90％至100％，甚至更特定 而言，立体异构性超量为94％至100％，最特定而言，立体异构性超量 为97％至100％。依类似方式即可了解“纯对映异构性”与“纯对非映 异构性”，但其分别指混合物中对映异构性超量与非对映异构性超量。

本发明化合物与中间物的纯立体异构型可采用相关技艺已知的方 法制得。例如：对映异构物的分离法为使用光学活性酸与其非对映异 构性盐类进行选择性结晶法而分离。或者，对映异构物可使用对称性 固相进行层析技术离分。该纯立体化学异构型亦可衍生自适当起始物 的相应纯立体化学异构型，但其限制条件为该反应需为立体专一性反 应。优选地，若需要一种专一性立体异构物时，可利用立体专一性制 法合成该化合物。这类方法应使用纯对映异构性起始物进行。

式(I)非对映异构性消旋物可依传统方法分别制得。适当采用的 物理分离法为例如：选择性结晶法及层析法，例如管柱层析法。

正如本领域技术人员所了解，式(I)化合物含有至少一个不对称 中心，因此可能出现不同立体异构型。下图中，以星号(*)代表此不 对称中心。

可能出现在式(I)化合物中的各不对称中心的绝对组态可利用立 体化学表示法R与S代表，此R与S表示法相当于Pure Appl.Chem.1976，45，11-30中说明的规则。以星号(*)表示的碳原子 最好呈R组态。

本发明也包括所有出现在本化合物上的原子同位素。同位素包括 那些具有相同原子数，但不同原子量的原子。氢的同位素一般实例(但 不限于)包括氚与氘。碳的同位素包括C-13与C-14。

下文中所使用的“式(I)化合物”或“本化合物”或类似名词包 括通式(I)化合物、其N-氧化物、盐类、立体异构型、消旋混合物、 前药、酯类、与代谢物，及其季铵化氮类似物。

该类化合物的特别次族群为那些式(I)化合物与其N-氧化物、盐 类、立体异构型、消旋混合物、前药、酯类、与代谢物，其中

R1与R8各自独立为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、芳基C1-6烷基、C3-7环 烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、芳基、Het1、Het1C1-6烷基、Het2C1-6烷基；

R1也可为如下式基团

其中

R9、R10a和R10b各自独立为氢、C1-4烷氧羰基、羧基、氨基羰基、单 -或二(C1-4烷基)氨羰基、C3-7环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-4烷基， 其可任意地被下列基团取代：芳基、Het1、Het2、C3-7环烷基、C1-4烷氧 羰基、羧基、氨羰基、单-或二(C1-4烷基)氨羰基、氨磺酰基、C1-4烷 基S(O)t、羟基、氰基、卤素或氨基，其可任意地被单或二取代，其中 取代基选自：C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基 C1-4烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基与Het2C1-4烷基；其中R9、R10a与其 所附接的碳原子也可形成C3-7环烷基；

R11a为氢、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7环烷基、芳基、任意地被单或 二取代的氨基羰基、任意被单或二取代的氨基C1-4烷基羰氧基、C1-4烷 氧羰基、芳氧羰基、Het1氧羰基、Het2氧羰基、芳氧羰基C1-4烷基、芳 基C1-4烷氧羰基、C1-4烷羰基、C3-7环烷基羰基、C3-7环烷基C1-4烷氧羰 基、C3-7环烷基羰氧基、羧基C1-4烷羰氧基、C1-4烷羰氧基、芳基C1-4烷 羰氧基、芳羰氧基、芳氧羰氧基、Het1羰基、Het1羰氧基、Het1C1-4烷 氧羰基、Het2羰氧基、Het2C1-4烷羰氧基、Het2C1-4烷氧羰氧基或C1-4烷 基，其可任意地被芳基、芳氧基、Het2或羟基取代；其中氨基上的取 代基独立选自：C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷 基C1-4烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；

R11b为氢、C3-7环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、芳基、Het1、Het2或 C1-4烷基，其可任意地被下列基团取代：卤素、羟基、C1-4烷基S(＝O)t、 芳基、C3-7环烷基、Het1、Het2、氨基，其可任意地被单或二取代，其 中取代基选自：C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷 基C1-4烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；

其中R11b可通过磺酰基连接分子的其余部分；

R2为氢或C1-6烷基；

L为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-NR8-C(＝O)-、-O-C1-6烷二基-C(＝O)-、 -NR8-C1-6烷二基-C(＝O)-、-S(＝O)2-、-O-S(＝O)2-、-NR8-S(＝O)2，其中 C(＝O)基团或S(＝O)2基团与NR2部分基团；

R3为C1-6烷基、芳基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4烷基或芳基C1-4 烷基；

R4为氢、C1-4烷氧羰基、羧基、任意被单或二取代的氨基羰基、C3-7 环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-6烷基，其中C3-7环烷基、C2-6烯基、 C2-6炔基与C1-6烷基可任意地被选自下列的取代基取代：芳基、Het1、 Het2、C3-7环烷基、C1-4烷氧羰基、羧基、任意被单或二取代的氨羰基、 任意被单或二取代的氨磺酰基、C1-4烷基S(＝O)1、羟基、氰基、任意被 单或二取代的氨基和卤素，其中任何氨基官能基上存在的任意取代基 独立选自C1-4烷基、芳基、芳基C1-4烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-4 烷基、Het1、Het2、Het1C1-4烷基和Het2C1-4烷基；t为零、1或2；

各t独立选自零、1或2；

Haryl为含有3至14个环原子之芳香系单环、双环或三环系离环， 其包含一个或多个选自氮、氧与硫中的杂环原子，且可任意地在(i)一 个或多个碳原子上被下列基团取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、羟 基、任意被单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤C1-6烷基、羟基、C1-6 烷基羰基、C1-6烷羰氧基、C3-7环烷基、任意地被单或二取代的氨羰基、 甲硫基、甲磺酰基、芳基、-(R7a)n-M-R7b、Het1与Het2；其中任何氨基 官能基上存在的任意取代基独立选自R5与-A-R6；及(ii)任意地在氮原 子上被羟基或-A-R6取代；及

A为C1-6烷二基、-C(＝O)-、-C(＝S)-、-S(＝O)2-、C1-6烷二基- C(＝O)-、C1-6烷二基-C(＝S)-或C1-6烷二基-S(＝O)2-；其中那些含C1-6 烷二基部分的基团中，C1-6烷二基部分附接氨基；

R5为羟基、C1-6烷基、Het1C1-6烷基、Het2C1-6烷基、氨基C1-6烷基， 其中氨基任意地被C1-4烷基单或二取代；

R6为氢、C1-6烷氧基、Het1、Het1氧、Het2、Het2氧、芳基、芳氧 基或氨基；

且若-A-不为C1-6烷二基时，则R6也可为C1-6烷基、Het1C1-4烷基、 Het1氧C1-4烷基、Het2C1-4烷基、Het2氧C1-4烷基、芳基C1-4烷基、芳氧 基C1-4烷基或氨基C1-4烷基；其中R6定义中的各氨基可任意地被一或二 个选自下列的取代基取代：C1-4烷基、C1-4烷羰基、C1-4烷氧羰基、芳基、 芳羰基、芳氧羰基、Het1、Het2、芳基C1-4烷基、Het1C1-4烷基或Het2C1-4 烷基；

R7a为C1-8烷二基，其可任意地被一个或多个选自下列的取代基取 代：卤素、C1-4烷羰基、C1-4烷氧羰基、芳基、芳羰基、芳氧羰基、Het1 或Het2；

R7b为C1-8烷基，其可任意地被一个或多个选自下列的取代基取代： 卤素、C1-4烷羰基、C1-4烷氧羰基、芳基、芳羰基、芳氧羰基、Het1或 Het2；

M为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-C(＝O)-O、-CH2-CHOH-、-CHOH-CH2、 -NR8-C(＝O)-、-(C＝O)-NR8-、-S(＝O)2-、-O-、-S-、-O-S(＝O)2-、- S(＝O)2-O-、-NR8S(＝O)2或-S(＝O)2-NR8-；

n为零或1。

一组特别化合物为那些式(I)化合物，其中适用下列一项或多项 限制条件：

R1为氢、Het1、Het2、芳基、Het1C1-6烷基、Het2C1-6烷基、芳基C1-6 烷基，更特别地，R1为氢、含有5至8个环原子的饱和或部分不饱和 单环或双环系杂环(其包含一个或多个选自氮、氧或硫中的杂环原子， 且可任意被取代)、任意地被一个或多个取代基取代的苯基、含有5 至6个环原子的芳香单环系杂环(其包含一个或多个选自氮、氧或硫 中的杂环原子，且可任意地在一个或多个碳原子上被取代)、或被含 有5至6个环原子的芳香单环系杂环(其包含一个或多个选自氮、氧 或硫中的杂环原子，且可任意地在一个或多个碳原子上被取代)取代 的C1-6烷基；

R2为氢；

L为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-O-C1-6烷二基-C(＝O)-、更特别地，L 为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-O-CH2-C(＝O)-，其中各C(＝O)基团系附接NR2 部分基团；

R3为芳基C1-4烷基、特别为芳基甲基，更特别为苯基甲基；

R4为任意被取代的C1-6烷基、特别为任意地被下列基团取代的C1-6 烷基：芳基、Het1、Het2、C3-7环烷基或氨基，其任意地被单或二取代， 其中取代基选自：C1-4烷基、芳基、Het1与Het2；

A为C1-6烷二基、-C(＝O)-或C1-6烷二基-C(＝O)-，特别地，A为亚 甲基、1，2-乙烷二基、1，3-丙烷二基、-C(＝O)-或-CH2-C(＝O)-；

R5为氢、C1-6烷基、Het1C1-6烷基、氨基C1-6烷基，其中氨基任意地 被C1-4烷基单或二取代；

R6为C1-6烷氧基、Het1、芳基、氨基，且若-A-不为C1-6烷二基时， 则R6也可为C1-6烷基、Het1C1-4烷基、芳氧基C1-4烷基或氨基C1-4烷基； 其中各氨基任意地被取代；或

R5及-A-R6与其所附接的氮原子也可共同形成Het1；

Haryl为含有3至8个环原子的芳香系单环或双环系杂环，其包含 一个或多个选自氮、氧或硫中的杂环原子，且(i)该Haryl任意地在一 个或多个碳原子上被下列基协和取代：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、 羟基、任意被单或二取代的氨基、硝基、氰基、卤C1-6烷基、羟基、C1-6 烷基羰基、C1-6烷羰氧基、C3-7环烷基、任意被单或二取代的氨羰基、 甲硫基、甲磺酰基、芳基、-(R7a)n-M-R7b、Het1与Het2；其中任何氨基 官能基上存在的任意取代基独立选自R5与-A-R6；及(ii)该Haryl任意 地在氮原子上被羟基或-A-R6取代；

一组特别化合物为那些式(I)化合物中，R1为Het1、芳基、Het2C1-6 烷基；R2为氢；L为-C(＝O)-、-O-C(＝O)-、-O-CH2-C(＝O)-，其中各C(＝O) 基团分别附接NR2部分基团；R3为苯基甲基；且R4为C1-6烷基。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，R1为氢、C1-6 烷基、C2-6烯基、芳基C1-6烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基C1-6烷基、芳 基、Het1、Het1C1-6烷基、Het2、Het2C1-6烷基；其中Het1为含有5或6 个环原子的饱和或部分不饱和单环系杂环，其包含一个或多个选自 氮、氧或硫中的杂环原子，且任意地在一个或多个碳原子上被取代。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，R1为芳基C1-6 烷基、Het1C1-6烷基、Het2C1-6烷基或含有至少5个碳原子之Het1。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，L为-O-C1-6烷 二基-C(＝O)-。

一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，取代在苯基上的 Haryl取代基系与磺酰胺部分基团呈对位。

一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，Haryl取代基包 含至少一个氮原子，优选地，该Haryl取代基在相对于Haryl-苯基键 之α-位置包含至少一个氮原子。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，R1为选自：二 取代芳基、三取代芳基、Het2C1-6烷基或Het1基团；Haryl为单取代或 二取代；其中若Haryl被二取代时，则其中至少一个取代基选自：甲 基、卤素或氨基。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，Haryl部分基 团系选自：噻唑基、咪唑基、噁唑基、噁二唑基、吡唑基、吡嗪基、咪 唑啉酮基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、嗒嗪基、吡啶基、吡咯基、 吡喃基、嘧啶基、呋喃基、三唑基、四唑基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、 异噁唑基、异噻唑基、噻二唑基、苯硫基、四氢呋喃并呋喃基、四氢吡 喃并呋喃基、苯并苯硫基、咔唑基、咪唑酮基、噁唑酮基、吲哚嗪基、 三嗪基或喹噁啉基；其中Haryl部分基团可任意地再在一个或多个环 原子上被取代；Haryl部分基团优选选自：噻唑基、咪唑基、噁唑基、 噁二唑基、吡唑基或吡啶基，其中一个或多个环原子上任意地被取代。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，Haryl部分基 团为任意地被单取代或二取代的氨基取代之噻唑基；优选地，该氨基 为未取代或单取代。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，Haryl部分基 协和为氮原子被取代的吡唑基。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，Haryl部分基 团为被甲基或氨基取代的噁唑基，优选地，该取代基是位于噁唑基部分 基团的2-位置上。

另一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物中，Haryl部分基 团为噁二唑基部分基团的5-位置上被取代的噁二唑基。

一组合适的化合物为那些呈盐型的式(I)化合物，其中该盐系选 自三氟乙酸盐、富马酸盐、氯乙酸盐与甲磺酸盐。

一组值得注意的化合物为那些式(I)化合物，其依据本文所说明 测定抗药性倍数方法，在对抗其中HIV蛋白酶中至少有一处突变的HIV 菌株(其相较于野生型序列(例如：基因银行登录号M38432、K0345S、 gi 327742)，于选自10、71与84位置中至少一个位置上突变，特别 地于选自10、71与84位置中至少二个位置上突变)的抗药性倍数在 0.01至100范围内；特别地，该化合物的抗药性倍数在0.1至100范 围内，更特别地在0.1至50范围内。一组值得注意的化合物为本发明 所揭示的第1-6、24、32-33、35、23-24、38-40、42-44、46、48- 52与57号化合物。

一组合适的化合物为本发明所揭示的第1-6、24、32、35、23-24、 38与40号化合物。

其一方面，R5可为C2-6烯基，如：-CH2-CH＝CH2；芳基，如：苯基 或Het2，如吡啶。

其一方面，Haryl部分基团也可被C1-6烷基羧酸取代，如：-CH2- CH2-COOH；

本发明还涉及一种由固态分散物组成的医药组合物，其包含(a) 式(I)化合物，(b)一种或多种医药上可接受的水溶性聚合物。特 别地，该化合物选自化合物第1-6、24、32-33、35、23-24、38-40、 42-44、46、48-52与57号。该水溶性聚合物宜包括羟丙基甲基纤维 素、聚乙烯吡咯烷酮与乙酸乙烯酯的共聚物(PVP-VA)。本发明还涉 及一种制造包含至少一种式(I)化合物或表1至6所例举化合物的组 合物的方法。

本发明进一步涉及式(I)化合物或表1至6所例举化合物，其特 征在于该化合物依据反应流程1至6中任一种方法合成。本发明进一 步涉及本发明在合成式(I)化合物时所述的中间物。值得注意的中间 物包括那些式B-1、B-2或K化合物。

本发明进一步涉及将式(I)化合物或表1至6所例举化合物用于 制造医药，供治疗、预防或对抗哺乳动物(优选人类)和反转录病毒 感染有关的传染病或疾病。

具有有利药物动力学性质的化合物为那些式(I)中含有至少一个 独立选自：噻唑基、咪唑基与吡啶基的取代基的化合物。

式(I)化合物通常可利用描述在WO 95/060630、WO 96/22287、 WO 96/28418、WO 96/28463、WO 96/28464、WO 96/28465与WO 97/18205 中的类似方法制备。

制备本发明化合物的特殊反应方法说明如下。在下述制法中，可 从反应介质中分离出反应产物，且若需要时，可再依据相关技艺公知 的一般方法纯化，例如：萃取法、结晶法、研磨法与层析法。

反应流程1

由α-取代的-α-溴乙酰苯与硫脲或被取代的硫脲，于加温下反应， 可产生中间物G1。此反应宜在回流条件下，于存在DMF(二甲基甲酰 胺)下进行。此中间物(G1)可与氯磺酸反应，产生磺酰氯B-1。例如： 2-溴丙酰苯可与硫脲反应，产生2-氨基-5-甲基-4-苯基噻唑，其可再 转形成4-(2-氨基-5-甲基噻唑-4-基)苯磺酰氯。

当使用苯乙酰溴产生中间物G1时，后者可先使用本领域公知的技 术溴化，然后与氯磺酸反应，产生例如：4-(2-氨基-5-溴噻唑-4-基) 苯磺酰氯。Ra、Rb与Rc独立为Haryl取代基。

反应流程2

中间物C的制法可于低温下，由中间物A(依据专利WO 97/18205 所述方法制备)与中间物B于反应惰性溶剂中，在存在碱下反应。例 如：该反应可于约0℃下，在二氯甲烷中，于存在三乙胺(Et3N)下进 行。

中间物中的氨基末端保护基可为本领域公知的保护基(PG)，如： 叔丁氧羰基。此保护基很容易被另一种合适保护基置换，如：酞酰亚 氨基、二苯甲基或苯甲氧羰基。中间物C可使用酸(如：三氟乙酸)， 于合适溶剂(如：二氯甲烷)中脱除保护基，产生中间物D。例如，在 一实施方案中，4-(2-取代氨基-5-溴噻唑-4-基)苯磺酰胺衍生物C可 在脱除保护基前，经催化氢化反应脱除溴。中间物D的氨基末端随后 可依本领域公知的方法被取代，产生E。或者，中间物可于合适溶剂中 (如：乙醇与二噁烷的混合物)，经强酸(如：盐酸异丙醇溶液)脱除 保护基。在优选的实施方案中，保护基可选自Fmoc、乙酰基、叔丁氧 羰基、苯甲氧羰基与二苯甲基。

反应流程3

中间物A可依合成反应流程的2说明制成。A可与4-乙酰基-苯磺 酰氯反应，产生H。适合此反应的条件包括极性非质子性溶剂，如：二 氯甲烷，有使用碱，如：Et3N。保护基可以脱除，及与另一个保护基交 换，使用本领域公知的卤化技术(如：Br2)卤化苯环中的乙酰基部分 基团。交换保护基可能改善溴化反应。苯基部分基团上的杂环可使用 合成反应流程1所说明的反应引进。引进该杂环后，氨基末端基团可 于本领域公知的条件下脱除保护基，游离的氨基部分基团随后再采用 本领域技术人员公知之的法经取代。

合成反应流程3.1

此反应的实例包括苯基取代噻唑。硫脲或任意被取代的硫脲可与 中间物K反应，产生2-氨基取代噻唑衍生物。此反应可于有机溶剂中， 于加温下进行。例如：反应条件可包括于回汉条件下的乙醇中。Ra与Rb 独立为Haryl取代基。在另一实例中，由硫酰胺与K反应，产生2-取 代噻唑。

合成反应流程32

噁唑的制法为由K为起始物，与尿素或取代尿素分子反应，产生 2-氨基取代噁唑。此反应可于有机溶剂中，于加温下进行。例如：反 应条件可包括于回流条件下的乙醇中。Ra与Rb独立为Haryl取代基。 2-烷基取代噁唑的制法为由K与式R-C(＝O)-NH2酰胺反应，其中R为 Haryl取代基。

合成反应流程3.3

咪唑的制法可由胍基衍生物与中间物K反应。此反应产生2-氨基 取代咪唑衍生物。另一种方法中，K可与脒反应，产生2-取代咪唑。 此反应可于有机溶剂中，于加温下进行，例如：于回流条件下的THF (四氢呋喃)中进行。

在一实施方案中，胍衍生物的亚氨官能基可引进环中，如：2-氨 基噻唑。此反应产生例如：咪唑并[2，1-b]噻唑。在一实施方案中，中 间物K可与烷基羧酸的盐类反应，产生乙酰基氧羰基取代基。此反应 可于有机溶剂中，于加温下进行，例如：于约60℃下，于DMF(二甲 基甲酰胺)中进行。所得中间物可再与氨乙酸盐反应，产生2-取代咪 唑。R、Ra与Rb独立为Haryl取代基。

合成反应流程3.4

中间物H可与N，N-二甲基甲酰胺二甲基缩醛，于有机溶剂中(如： 甲苯)反应。此反应可于加温下进行，产生之中间物为顺式与反式异 构物的混合物。后者中间物可再与肼或取代肼反应。该反应可于加温 下，于有机溶剂中，在存在碱的条件下进行。例如：该反应可于如： 碳酸钾的碱存在下，使用乙醇作为溶剂，于回流条件下进行。所得产 物为异构物混合物，R为Haryl取代基。

合成反应流程4

A可与4-氰基-苯基磺酰氯反应，产生中间物K-5。此反应可在较 低温下，于有机溶剂中，在碱性条件下进行。例如：试剂可于约0℃下， 于二氯甲烷(DCM)中，于存在三乙胺下混合。然后提高温度至约室温。 中间物K-5可再与羟基胺反应，产生中间物L。例如：中间物K-5可与 羟胺于乙醇中，于碱如碳酸钾的存在下，于加温下反应。可采用回流 条件。

中间物L与式RC(＝O)Cl酰氯反应后，可得到(5-R-噁二唑-3- 基)苯基磺酰胺衍生物。在一实施方案中，后项反应可使用吡啶作为 溶剂，于加温下进行，例如：于约110℃下进行。R为Haryl取代基。

产生杂环-苯基部分基团后，可采用本领域公知的条件脱除氨基保 护基。然后，使用本领域公知的条件，以其他基团取代氨基部分基团。 优选的氨基取代基可为双-THF酯部分基团。

合成反应流程5

中间物A可与4-溴-苯磺酰氯反应，产生中间物M。此反应可于较 低温下，于有机溶剂中，于碱性条件下进行。例如：试剂可于约0℃下， 于二氯甲烷中，于存在三乙胺下混合。然后提高温度至约室温。中间 物M的保护基可再与另一个保护基交换。例如：PG1为boc基协和，且 PG2为双-四氢呋喃基。中间物M可再与式RSn(nBu)3三丁基锡衍生物， 于有机溶剂中，于存在碱及触媒下，于加温下反应。例如：该反应可 于二噁烷中，例如：三乙胺的碱，及存在于如：[1，1’-双(二苯基膦基) 二茂络铁]钯(II)二氯甲烷加合物的触媒下，于约85℃下进行。R为 如上述定义任意取代Haryl。

在一实施方案中，在与三丁锡衍生物反应之前，保护基可被另一 个保护基置换，优选双THF酯。

合成反应流程6

中间物A的制法可由化合物F与胺，于合适溶剂(如：异丙醇)中反 应.由反应流程6可见，中间物F的立体化学性决定中间物A的立体化 学性。

式(I)化合物可依本领域公知的转化三价氮形成其N-氧化物的方 法转化成相应的N-氧化物型。该N-氧化反应通常可由式(I)起始物 与适当有机或无机过氧化物反应。适当无机过氧化物包括例如：过氧 化氢，碱金属或碱土金属过氧化物，例如：过氧化钠、过氧化钾。适 当有机过氧化物可包括过氧酸类，如：苯甲过氧酸或卤基取代的苯甲 过氧酸，例如：3-氯-苯甲过氧酸；过氧烷酸类，如：过氧乙酸；烷基 过氧化氢类，如：叔丁基过氧化氢。合适的溶剂为例如：水；低碳数 烷醇类，如：乙醇等；烃类，如：甲苯；酮类，如：2-丁酮；卤化烃 类，如：二氯甲烷，以及这些溶剂的混合物。

因此，本化合物可用于动物，优选哺乳动物，特别是人类，其本 身可以是以与另一药物混合或以医药制剂形式存在的药物。

此外，本发明涉及医药制剂，其中除了常用的无毒性医药用赋形 剂与辅剂外，尚包含至少一种有效剂量的式(I)化合物作为活性成份。 医药制剂通常包含0.1至90重量％式(I)化合物。医药制剂可依本领 域技术人员公知的方式制备。因此，可将至少一种式(I)化合物与一 种或多种固态或液态医药用赋形剂与/或辅剂，及若需要时使用的其它 医药活性化合物共同形成合适的给药型式或剂型，其可用作人类医学 或兽医学的医药。

含有本发明化合物的医药可经口、非经肠式(例如：经静脉内)、 经直肠、吸入或局部给药，优选的给药法取决于个人情况，例如：待 治疗疾病的特定过程。优选经口给药。

本领域技术人员依据其专业即可了解适用于所需医药调配物的辅 剂。除了溶剂外，亦可使用凝胶形成剂、栓剂基质、锭剂辅剂与其他 活性化合物载剂、抗氧化剂、匀散剂、乳化剂、消泡剂、调味剂、防 腐剂、溶解剂、可达成储积效果的制剂、缓释剂或著色剂。

由于本发明化合物具有有利的医药性质，特别是其对抗多重药物 抗性HIV蛋白酶酵素的活性，因此本发明化合物适用于治疗感染HIV 的个体及预防这类感染。通常，本发明化合物可用于治疗感染病毒的 热血动物，这类病毒的存在则受蛋白酶酵素媒介或依赖蛋白酶酵 素。可使用本发明化合物预防或治疗病症，尤指与HIV及其他病原 性反转录病毒有关的病症，包括AIDS、AIDS相关综合症(ARC)、 渐进性综合淋巴结病变(PGL)、卡波西氏症候群、血小板减少性紫斑 症、及因反转录病毒引起的慢性CNS疾病，如：HIV所媒介的痴呆症及 多发性硬化。本发明化合物亦适用于真正或可能曝露到HIV的情况、 热带性轻瘫，及抗HIV抗体阳性与HIV-阳性病症，包括这类无症状患 者。

本发明化合物或其任何次族群因此可用为对抗上述病症的医药。 该作为医药的用途或治疗方法包括使可有效对抗与HIV及其他病原性 反转录病毒(如：HIV-1)有关病症的用量经全身投与感染HIV患者。 因此，本发明化合物可用于制造医药，适用于治疗与HIV及其他病原 性反转录病毒有关的病症，特别地，此医药达用于治疗感染多重药物 抗性HIV病毒的患者。

本发明化合物可用于以一般方式处理病毒，如：生命循环中必须 依赖天冬胺酰基蛋白酶的HIV与HTLV。虽然本发明著重于本文所揭示 化合物于预防及治疗HIV感染上的用途，但本发明化合物也可用为生 命循环中必须依赖天冬胺酰基蛋白酶的其他类似病毒抑制剂。这类病 毒包括其他因反转录病毒，如人猿免疫缺乏症病毒HTLV-I与HTLV-II 引起的类似AIDS疾病。此外，本发明化合物也可用于抑制其他天冬胺 酰基蛋白酶，特别是其他人类天冬胺酰基蛋白酶，包括肾活素与处理 内皮肽前体的天冬胺酰基蛋白酶。

在一实施方案中，本发明涉及以式(I)化合物或其任何次族群于 制造医药，供治疗、预防或对抗哺乳动物的多重药物抗性反转录病毒 感染(如：HIV-1感染)或与这类感染有关的疾病中的用途。因此， 本发明还涉及一种治疗反转录病毒感染或与多重药物抗性反转录病毒 感染有关的疾病的方法，其包括对有此需要的哺乳动物投与有效量式 (I)化合物或其次族群。预防或预防法是包括预防HIV感染及预防 HIV感染发展成AIDS。

在另一实施方案中，本发明涉及以式(I)化合物或其任何次族群 于制造医药，供抑制感染多重药物抗性反转录病毒(特别是HIV-1反 转录病毒)的哺乳运物中该反转录病毒蛋白酶的用途。

在另一实施方案中，本发明涉及以式(I)化合物或其任何次族群 于制造医药，供抑制多重药物抗性反转录病毒复制(特别是HIV-1复 制)的用途。

本发明化合物也可用于活体外抑制含有HIV或可能曝露到HIV的 样本，因此，本发明化合物可用于抑制含有HIV或疑似含有HIV或可 能曝露到HIV的体液样本中的HIV。

此外，可使用抗反转录病毒化合物与本发明化合物的组合作为医 药。因此，本发明还涉及一种产品，其包含(a)本发明化合物与(b) 另一种抗反转录病毒化合物，其可呈同时、分开或顺序投药用的组合 制剂供预防或治疗反转录病毒感染，特别是治疗多重药物抗性反转录 病毒感染。因此用于对抗、预防或治疗HIV感染或与HIV感染有关的 传染病与疾病，如：后天免疫缺乏症候群(AIDS)或AIDS相关复合 症(ARC)时，本发明化合物可与下列药物共同组合投药，例如：结 合性抑制剂，如葡聚糖硫酸盐、苏拉明(suramine)、聚阴离子化合 物(polyanions)、可溶性CD4、PRO-532、BMS-806；融合抑制剂， 如T20、T1249、RPR 103611、YK-FH312、IC 9564、5-螺旋(5-helix)、 D-肽ADS-J1；共同受体结合性抑制剂，如AMD 3100、AMD-3465、 AMD7049、AMD3451(双环素(Bicyclams))、TAK 779、T-22、 ALX40-4C；SHC-C(SCH351125)、SHC-D、PRO-140、RPR 103611； RT抑制剂，如法克尼(foscarnet)与前药；核苷RTIs，如AZT、3TC、 DDC、DDI、D4T、阿巴卡非(Abacavir)、FTC、DAPD(安朵索非 (Amdoxovir))、dOTC(BCH-10652)、弗奇定(fozivudine)、DPC 817； 核苷酸RTIs，如PMEA、PMPA(丹诺非(tenofovir))；NNRTIs，如 尼拉平(nevirapine)、狄拉定(delavirdine)、伊发忍兹(efavirenz)、8 与9-Cl TIBO(狄拉平(tivirapine))、洛里得(loviride)、TMC-125、达 非灵(dapivirine)、MKC-442、UC 781、UC 782、卡非灵(Capravirine)、 QM96521、GW420867X、DPC961、DPC963、DPC082、DPC083、 TMC-125、卡诺莱德A(calanolide A)、SJ-3366、TSAO、4”-脱胺化 TSAO、MV150、MV026048、PNU-142721；RNAse H抑制剂，如 SP1093V、PD126338；TAT抑制剂，如RO-5-3335、K12、K37；整合 酶抑制剂，如L 708906、L 731988、S-1360；蛋白酶抑制剂，如安普非 (amprenavir)与前药GW908(福散普菲(fosamprenavir))、理妥纳 菲(ritonavir)、尼纳菲(nelfinavir)、散克菲(saquinavir)、引得 菲(indinavir)、洛平菲(lopinavir)、帕理菲(palinavir)、BMS 186316、 阿其菲(atazanavir)、DPC 681、DPC 684、狄普纳菲(tipranavir)、 AG1776、莫其菲(mozenavir)、DMP-323、GS3333、KNI-413、KNI-272、 L754394、L756425、LG-71350、PD161374、PD173606、PD177298、 PD178390、PD178392、PNU 140135、TMC-114、马林酸(maslinic acid)、U-140690；糖基化作用抑制剂，如卡斯诺精胺 (castanosperimine)、去氧诺里微素(deoxynojirimycine)；侵入抑 制剂CGP64222。

本发明化合物可呈单一制剂投与或与其他制剂组合投与。组合疗 法可能对抑制HIV复制作用呈现加成或增效效应，因为组合中各化合 物可作用在HIV的不同复制位置或可以作用在目标蛋白质的不同位置 上。这类组合疗法的优点还在于其剂量可低于单一疗法中所投与一般 抗反转录病毒剂在达到所需医疗或预防效果时原本所需的剂量。这类 组合疗法可降低或免除一般单一抗反转录病毒剂疗法的副作用，同时 不会干扰彼等药剂的抗反转录病毒活性。这类组合可降低对单一药剂 疗法产生抗性的可能性，同时使任何相关毒性降至最低。这类组合也 可提高一般常用药剂的效力，但不会提高相关毒性。其组合实例包括 含2至6种药剂的多重组合。在一实施方案中，该组合可提供增效效 应，可防止、大幅降低或完全消除病毒感染力与其相关症状。各组合 的组合指数(CI)可依据Chou与Talalay说明的方法测定(Adv.Enzyme Regul，22：27-55，1984)。CI值约0.8至约1.2时，表示该组合的化合 物具有加成抑制性，数值低于0.8表示两种分子之间有增效性，而数值 高于1.2则表示具有拮抗性。

本发明化合物也可与下列物质组合：免疫调节剂(例如：布比明 (bropirimine)、抗人类α-干扰素抗体、IL-2、甲硫胺酸脑啡肽、α-干扰 素、HE-2000与纳特松(naltrexone))、抗体(例如：单株抗体Hu-5A8)、 疫苗(例如：AG-1661、艾斯菲(Aidsvax)B/B)、抗生素(例如：异硫 代酸五脒)、细胞素(例如：Th2)、细胞素、化学激动素或其受体(例 如：CCR5)调节剂或激素(例如：生长激素、芬格斯定(filgrastim))， 以减轻、对抗或消除HIV感染及其症状。这类呈不同调配物的组合疗 法可以同时、分开或顺序投与。或者，这类组合可以呈单一调配物投 药，且活性成份可同时或分开从调配物中释出。

当对个体投与药物后，本发明化合物也可与代谢作用的调节剂组 合投药。这类调节剂包括干扰细胞色素(例如：细胞色素P450)位置 的代谢作用化合物。有些调节剂抑制细胞色素P450。已知细胞色素 P450含有数种同功酶，其中一种为细胞色素P4503A4。里妥纳菲 (ritonavir)为一种针对透过细胞色素P450的代谢作用的调节剂实 例。细胞色素P450的其他适用抑制剂包括奇康唑(ketoconazole)、 希美啶(cimetidine)或柏加啶(bergamottin)。另一种细胞色素P450抑 制剂包括抑康唑(itraconazole)、克里微素(clarithromycine)、红微素 (erythromycine)、尼发松酮(nefazodone)、狄拉定(delavirdine)或妥林微 素(troleandomycine)。该调节剂也可为HIV蛋白酶抑制剂，其实例选 自：引得菲(indinavir)、尼纳菲(nelfinavir)、散克菲(saquinavir)、安普 菲(amprenavir)、洛平菲(lopinavir)、拉辛菲(lasinavir)、帕理菲 (palinavir)、得里菲(telinavir)、狄普纳菲(tipranavir)、莫其菲 (mozenavir)、阿其菲(atazanavir)。这类呈不同调配物的组合疗法可同 时、分开或顺序投药。或者，这类组合可以呈单一调配物投药，且活 性成份可同时或分开从调配物中释出。

这类调节剂的投药比例可与本发明化合物相同或不同。优选地， 此调节剂与本发明化合物的投药比例(调节剂：本发明化合物)为1∶1 或更低，更优选比例为1∶3或更低，合适的比例为1∶10或更低，更合 适的比例为1∶30或更低。

经口投药剂型中的本发明化合物可与合适添加剂混合，如：赋形 剂、安定剂或惰性稀释剂，并采用一般方法形成合适的投药剂型，如： 锭剂、包衣锭剂、硬性胶囊、水性、醇性或油性溶液。合适惰性载剂 实例为阿拉伯胶、氧化镁、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖、或淀粉， 特别是玉米淀粉。此时的制剂可为干性或湿性粒剂。合适的油性赋形 剂或溶剂为植物性或动物性油，如葵花油或鱼肝油。适合水性或醇性 溶液的溶剂为水、乙醇、糖溶液或其混合物。聚乙二醇或聚丙二醇也 适用为其他投药型式的辅剂。

经皮下或静脉内投药时，活性化合物若需要时，可与其常用物质 (如溶解剂、乳化剂或其他辅剂)共同形成溶液、悬浮液或乳液。式 (I)化合物也可经冷冻干燥，所得冷冻干燥物可用于如制造注射用或 输液用制剂。合适溶剂为例如：水、生理食盐溶液或醇类，如乙醇、 丙醇、甘油，及糖溶液，如葡萄糖或甘露糖醇溶液，或者上述不同溶 剂的混合物。

适合呈气雾剂或喷液型式投药的医药调配物为式(I)化合物或其 生理上可耐受的盐在医药上可接受的溶剂(如：乙醇或水)中形成， 如溶液、悬浮液或乳液。若需要时，调配物可再包含其他医药辅剂， 如界面活性剂、乳化剂与安定剂及推进剂。这种制剂通常包含的活性 化合物浓度为约0.1至50重量％，特别是约0.3至3重量％。

为了加强式(I)化合物在医药组合物中的溶解度与/或安定性，宜 使用α-、β-或γ-环糊精或其衍生物。也可使用共溶剂(如醇类)来改善 式(I)化合物在医药组合物中的溶解度与/或安定性。制备水性组合物 时，添加盐可提高溶水性，因此更合适。

适当环糊精为α-、β-或γ-环糊精(CDs)或醚类与其混合醚类，其 中环糊精中无水葡萄糖单位的一个或多个羟基被下列基团取代：C1-6 烷基，特别是被甲基、乙基或异丙基取代，如随机甲基化β-CD；羟基 C1-6烷基，特别是羟乙基、羟丙基或羟丁基；羧基C1-6烷基，特别是羧 甲基或羧乙基；或C1-6烷基羰基；特别是乙酰基；C1-6烷氧羰基C1-6 烷基或羧基C1-6烷氧基C1-6烷基，特别是羧甲氧丙基或羧乙氧丙基； C1-6烷羰氧基C1-6烷基，特别是2-乙酰氧丙基。尤指作为复合物与/或 溶解剂的β-CD、随机甲基化β-CD、2，6-二甲基-β-CD、2-羟乙基-β-CD、 2-羟乙基-γ-CD、2-羟丙基-γ-CD与(2-羧甲氧基)丙基-β-CD，及特别是2- 羟丙基-β-CD(2-HP-β-CD)。

术语混合醚类是指环糊精衍生物，其中至少两个环糊精羟基被不 同基团醚化，如羟丙基与羟乙基。

另一种调配本发明化合物与环糊精或其衍生物的组合方式说明在 EP-A-721,331中。虽然其中所说明的调配物含有抗真菌活性成份，但 其同样有利于调配本发明化合物。其中所说明的调配物特别适用于经 口投药，且包含作为活性成份的抗真菌剂、作为溶解剂的足量环糊精 或其衍生物、作为填充液态载剂的水性酸性介质及可以大幅简化组合 物制法的醇性共溶剂。该调配物也可藉由添加医药上可接受的甜味剂 与/或香料而更适口。

其他适合加强本发明化合物在医药组合物中溶解性的方法说明在 WO-94/05263、PCT申请案No.PCT/EP98/01773、EP-A-499,299与WO 97/44014中，其内容已以引用方式并入本文中。

更特别地，本发明化合物可调配成包含医疗有效量由固态匀散物 组成的粒子的医药组合物，其中包含(a)式(I)化合物，及(b)一种或多种 医药上可接受的水溶性聚合物。

术语“固态匀散物”定义为包含至少两种成份的固态系统(相对 于液态或气态)，其中一种成份或多或少匀散在另一种或其他多种成 份中。当该成份的匀散物为化学上或物理上均匀或均质的系统或由热 动力学所定义的单一相组成的系统时，此固态匀散物则称为“固态溶 液”。固态溶液为优选的物理系统，因为其中的成份通常很容易被接 受投药的生物体利用。

术语“固态匀散物”定义也包括均质性比固态溶液差的匀散物。 此匀散物在化学上或物理上不均匀或包含一相以上。

当粒子中的水溶性聚合物在20℃溶液中形成2％水溶液时，其合宜 的表观粘度为1至100mpa.s的聚合物。

优选的水溶性聚合物为羟丙基甲基纤维素或HPMC。甲氧基取代 度为约0.8至约2.5且羟丙基摩尔取代度为约0.05至约3.0的HPMC通 常可溶于水。甲氧基取代度指纤维素分子中每个无水葡萄糖单位所含 的甲基醚基团平均数。羟丙基摩尔取代度指与纤维素分子中各无水葡 萄糖单位反应的氧化丙烯平均摩尔数。

上文所定义的粒子制法为先由组成份制备固态匀散物，然后可任 意地研磨或碾磨该匀散物。制备固态匀散物的各种不同技术包括熔融 挤压法、喷雾干燥法与溶液蒸发法，以熔融挤压法优选。

也宜调配本发明化合物形成纳米粒子，其表面上吸附足以维持有 效平均粒子大小在1000nm以下的表面修饰剂。适用的表面修饰剂包 括那些可物理性吸附在抗反转录病毒剂表面上，但不会与抗反转录病 毒剂进行化学键结的修饰剂。

合适的表面修饰剂最好先自己知的有机与无机医药用赋形剂。此 赋形剂包括各种不同聚合物、低分子量寡聚物、天然产物与界面活性 剂。优选的表面修饰剂包括非离子性与阴离子性界面活性剂。

另一种调配本发明化合物的方法包括一种医药组合物，其中使本 发明化合物含在亲水性聚合物中，将此混合物涂覆在许多小珠上形成 包及膜层，因此产生具有良好生物利用率的组合物，此组合物方便制 造且适合制备经口投药用医药剂型。

该小珠包含(a)圆形或球形核心，(b)亲水性聚合物与抗反转录病毒 剂的包衣膜层，及(c)密封聚合物包衣层。

适用为小珠核心的材料有很多种，但该材料需为医药上可接受且 具有适当大小与坚实度。此材料实例为聚合物、无机物质、有机物质 及醣类及其衍生物。

本发明另一方面涉及一种包含式(I)化合物的套组或容器，其含量 可有效用在测定某有潜力的医药于抑制HIV蛋白酶、HIV生长或此二 者之能力的试验或分析法中，作为标准物或试剂。本发明此方面为其 在医药研究计划中的用途。

本发明化合物可用于表型抗性追踪分析法，如：已知的重组分析 法，用于临床上处理发展成抗性的疾病，如：HIV。特别适用的抗性追 踪系统为已知为AntivirogramTM的重组分析法。AntivirogramTM为一 种高度自动化、高物料通过量的第二代重组分析法，其可测定对本发 明化合物的感受性，尤指病毒感受性。(Hertogs K，de Bethune MP， Miller V et al.Antimicrob Agents Chemother，1998；42(2)：269-276，其 内容已以引用方式并入本文中)。

值得注意的是，本发明化合物可包含可与定域位置形成共价键的 化学反应性部份基团，因此该化合物可具有延长的组织滞留性与半衰 期。本文所使用“化学反应性基团”是指可形成共价键的化学基团。 反应性基团通常适合于水性环境，且通常为羧基、磷酰基或合宜的酰 基，其可为酯或混合酸酐，或为亚胺酸酯，或马来酰亚胺酸酯，以便 与例如：血液成份(如：白蛋白)上目标位置之如：氨基、羟基或硫 醇的官能基形成共价键。本发明化合物可连接马来酰亚胺或其衍生 物，形成共轭物。

本发明化合物或其生理上可耐受的盐(类)的投药剂量取决于个 别情况，且通常需配合个别情况要达成最佳效果的条件。因此其当然 依据投药频率及各疗法或预防法所采用化合物的药效与作用期而定， 此外也取决于感染与症状的性质与严重性，及取决于所处理人类或动 物的性别、年龄、体重与个体反应及该疗法是否为急性或预防性等因 素而定。通常，对于体重约75公斤的患者，式(I)化合物每日投药剂 量为1毫克至1克，优选为3毫克至0.5克。该剂量可呈个别剂量形式 投药，或分成数个小剂量投药，例如：2、3或4个小剂量。

下表出示根据上述一种反应流程制备的式(I)化合物。

实验部分

1.式(B)化合物与其中间物的制法

实施例1

取含2g 2-溴丙酰苯与0.71g硫脲之50mL乙醇的混合物回流一 夜。蒸发溶剂后，残质再溶于50mL乙酸乙酯中，以50mL 2％碳酸钠 水溶液处理。有机层脱水及蒸发，产生1.77g(99％)中间物G 5-甲基- 4-苯基-2-噻唑胺。质谱数据：m/z＝191(M+H)。

添加2.11g氯磺酸至含0.77g中间物G的20mL DCM(二氯甲烷) 中。混合物于1小时内加热至约50℃。冷却至室温后，混合物倒至冰 上，以乙酸乙酯萃取。分离有机层。经MgSO4脱水与蒸发，产生0.74 g(63％)化合物B 4-(2-氯基-5-甲基噻唑-4-基)苯磺酰氯。质谱数据： m/z＝289(M+H)。

实施例2

取含2g苯酰甲基溴与0.76g硫脲的50mL乙醇的混合物回流一 夜。蒸发溶剂后，残质再溶于50mL DCM中，以50mL 2％碳酸钠水 溶液处理。有机层脱水及蒸发，产生1.45g(82％)4-苯基-2-噻唑胺(中 间物G)。质谱数据：m/z＝177(M+H)。

在0℃下，添加0.71g Br2至含0.77g中间物G的10mL DCM中。 使反应混合物回升至室温并搅拌30分钟。添加2％Na2CO3水溶液。分 离有机层，经MgSO4脱水，及蒸发，产生1.07g(95％)中间物N 5-溴- 4-苯基-2-噻唑胺。质谱数据：m/z＝255(M+H)。

添加1.2mL氯磺酸至含0.75g中间物N的5mL DCM中。反应混 合物在2小时内加热至约50℃。冷却至室温后，混合物倒至冰上，以 乙酸乙酯萃取。排除有机相后，添加饱和Na2CO3水溶液至水相中，以 乙酸乙酯萃取。分离有机相，经MgSO4脱水及蒸发，产生0.67g中间 物O 4-(2-氨基-5-溴噻唑-4-基)苯磺酰氯。质谱数据：m/z＝394(M+H)。

2.式(C)化合物与其中间物的制法

取含0.48g中间物A[2R-羟基-3-[(2-甲基丙基)氨基]-1S-(苯甲基)丙 基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯(PG＝Boc)与0.36g三乙胺的25ml二氯甲 烷的混合物于约0℃下搅拌。然后添加0.67g中间物O，反应混合物于 室温下搅拌2小时。以水洗涤后，分离有机相，经MgSO4脱水，蒸发 溶剂，产生1.06g(100％)中间物P[(1S，2R)-3-[N-[4-(2-氨基-5-溴噻唑-4- 基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸， 1，1-二甲基乙酯。质谱数据：m/z＝653(M+H)。

添加Pd/C与氢至含1.06g中间物P的25mL甲醇混合物中。搅拌 反应混合物一夜后，经寅式盐过滤及蒸发，产生0.94g化合物 C[(1S，2R)-3-[N-[4-(2-氨基-噻唑-4-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]- 2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙酯。质谱数据：m/z＝575 (M+H)。

实施例3：式(K-1)化合物与其中间物的制法

取含20g中间物A(PG＝Boc)与6.61g三乙胺的500ml二氯甲烷 的混合物于约0℃下搅拌。然后添加13.6g4-乙酰基苯磺酰氯，反应混 合物于室温下搅拌3小时。以水洗涤后，分离有机相，经MgSO4脱水， 蒸发溶剂，产生30.9g(100％)中间物H[(1S，2R)-3-[N-(4-乙酰基苯磺酰 基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸1，1-二甲基 乙酯。质谱数据：m/z＝519(M+H)。

添加100ml HCl(5至6N的异丙醇溶液)至含30.9g中间物H的 400ml二氯甲烷中。反应于室温下搅拌4小时。蒸发溶剂后，得到中 间物I的HCl盐，为N-[(2R，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙 基)-4-乙酰基苯磺酰胺盐酸盐(26.9g，99％)(I)。质谱数据：m/z＝419 (M+H)。

添加2.85g氯甲酸9-芴基甲酯Fmoc-Cl与2.23g三乙胺至含5g 中间物L的150mL二氯甲烷中。反应混合物于室温下搅拌一夜后，以 水洗涤，经MgSO4脱水与蒸发，产生7.2g中间物J-1[(1S，2R)-3-[N-(4- 乙酰基苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]-氨基甲 酸9-芴基甲酯。质谱数据：m/z＝641(M+H)。

添加2.11g溴至含6.5g中间物J-1的200mL二氯甲烷中。反应混 合物于室温下搅拌1小时后，以饱和NaHCO3水溶液洗涤，经MgSO4 脱水及蒸发。粗产物经硅胶使用20％乙酸乙酯的己烷溶液溶离纯化， 产生3.6g(50％)中间物K-1[(1S，2R)-3-[N-[(4-溴乙酰基苯基)磺酰基]-N- (2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸9-芴基甲酯。质谱 数据：m/z＝719(M+H)。

实施例4：式(K-2)化合物与其中间物的制法

添加3.33g三乙胺至含5g中间物I的100mL二氯甲烷中。冷却 至约0℃后，添加0.94g乙酰氯。反应混合物于室温下搅拌一夜后，以 水洗涤，经MgSO4脱水，及蒸发，产生5g(99％)中间物J-2[(1S，2R)- 3-[N-(4-乙酰基苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基] 乙酰胺。质谱数据：m/z＝461(M+H)。

于1小时内，在含10g中间物J-2的250mL二氯甲烷中滴加溴溶 液(3.78g的20mL二氯甲烷溶液)。于室温下搅拌一夜后，添加1mL 12N HCl。反应混合物搅拌3天后，以饱和NaHCO3水溶液洗涤，经 MgSO4脱水及蒸发。粗产物经硅胶使用60％乙酸乙酯的己烷溶液溶离 纯化，产生5.9g(50％)中间物K-2[(1S，2R)-3-[N-[4-(溴乙酰基)苯磺酰 基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基]-(苯甲基)丙基]乙酰胺。质谱数据： m/z＝539(M+H)。

实施例5：式(K-3)化合物与其中间物的制法

取含8.3g中间物A(PG＝二苯甲基)、[(1R，2S)-2-[双(苯甲基)氨基]- 1-[(2-甲基丙基)氨基]甲基]苯丙醇与2.12g三乙胺的200ml二氯甲烷 (DCM)的混合物于0℃下搅拌。然后滴加4.5g 4-乙酰基苯磺酰氯的100 mL DCM溶液，反应混合物于室温下搅拌一夜。以水洗涤后，分离有 机层，经MgSO4脱水，蒸发溶剂，产生12.07g(100％)中间物H N- [(2R，3S)-3-(N′，N′-二苯甲基)氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙基)-4- 乙酰基苯磺酰胺，质谱数据：m/z＝599(M+H)。

添加2.40g溴与0.6g乙酸至含5g中间物H的100mL二氯甲烷 中。反应混合物于室温下搅拌6小时后，添加0.25mL溴，混合物搅拌 1小时。混合物随后经饱和NaHCO3水溶液洗涤，经MgSO4脱水与蒸 发。粗产物经硅胶使用20％己烷的DCM溶液溶离纯化，产生2.25 g(40％)中间物K-3N-[(2R，3S)-3-(N′，N′-二苯甲基)氨基-2-羟基-4-苯丁 基]-N-(2-甲基丙基)-4-溴乙酰基苯磺酰胺，质谱数据：m/z＝679(M+H)。

实施例6：式(K-4)化合物与其中间物的制法

添加2.67g三乙胺、2.38g(2，6-二甲基苯氧基)-乙酸、1.78g 1-羟基 苯并三唑与2.77g 1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐至含6 g中间物I的200mL二氯甲烷中。混合物搅拌一夜，以水洗涤，经MgSO4 脱水及浓缩，产物7.67g(100％)所需中间物H-4[(1S，2R)-3-[N-(4-乙 酰基苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]-(2，6-二甲 基苯氧基)乙酰胺。质谱数据：m/z＝581(M+H)。

于15分钟内，在含4g前述中间物的100mL二氯甲烷的混合物中 滴加溴溶液(1.66g含于20mL二氯甲烷中)。反应混合物搅拌2.5小 时后，以饱和NaHCO3水溶液洗涤，经MgSO4脱水与蒸发。粗产物经 硅胶使用3％乙酸乙酯的DCM溶液溶离纯化，产生2g(45％)中间物 K-4[(1S，2R)-3-[N-(4-溴乙酰基苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基- 1-(苯甲基)丙基]-(2，6-二甲基苯氧基)乙酰胺。质谱数据：m/z＝659 (M+H)。

实施例7：吡唑之合成法-化合物24的制法

在含2g中间物H-4的100mL甲苯中添加0.45g N，N-二甲基甲酰 胺二甲基缩醛。混合物回流一夜后，再添加0.2g N，N-二甲基甲酰胺二 甲基缩醛。于回流下搅拌一夜后，重覆相同制程(0.2g反应物及回流 一夜)。混合物浓缩，粗产物经硅胶使用40％乙酸乙酯的己烷溶液溶 离纯化。收集含有所需化合物的溶离份及蒸发。残质溶于100mL含1.43 g碳酸钾的甲醇中。混合物于室温下搅拌1小时，最后蒸发，产生1.74 g中间物I-4，为[(1S，2R)-3-[N-[4-(3-(二甲基氨基)-1-氧代-2-丙烯基)苯磺 酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]-(2，6-二甲基苯氧基) 乙酰胺的顺式与反式两种异构物混合物。质谱数据：m/z＝636(M+H)。

在含95mg中间物I-4的5mL乙醇中添加62mg碳酸钾与10mg 肼盐酸盐。混合物回流18小时，及蒸发。粗混合物经制备性HPLC纯 化，产生21mg(23％)所需的吡唑[(1S，2R)-2-羟基-3-[N-(2-甲基丙基)-N- (4-吡唑-3(5)-基苯磺酰基)-氨基]-1-(苯甲基)丙基]-(2，6-二甲基苯氧基)乙 酰胺。质谱数据：m/z＝605(M+H)。

实施例8：噻唑的合成法-式(L-1)化合物的制法

在含0.5g中间物K-1的40mL乙醇中添加0.063g甲基硫脲。反 应混合物加热至回流1小时，蒸发，产生0.55g中间物L-1[(1S，2R)-2- 羟基-3-[N-[4-(2-甲氨基噻唑-4-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-1-(苯 甲基)丙基]氨基甲酸9-芴基甲酯。质谱数据：m/z＝645(M+H)。

实施例9：式(M-1)化合物的制法-化合物9的制法

在含0.49g中间物L-1的40mL DMF中添加0.59g哌啶。反应混 合物于室温下搅拌2小时。蒸发溶剂后，粗化合物经硅胶使用2％甲醇 的二氯甲烷溶液至4％甲醇溶液溶离纯化，产生0.21g(62％)中间物 M-1N-[(2R，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙基)][4-(2-甲氨基 噻唑-4-基)苯基]磺酰胺。质谱数据：m/z 489(M+H)。

在含0.74mL苯甲酰基异硫代氰酸酯的30mL四氢呋喃中添加 0.64mL N，N-二甲基氨基丙胺。混合物于室温下搅拌一夜。添加0.6mL 50％氢氧化钠的水溶液，混合物加热至回流一夜。反应混合物过滤， 滤液蒸发。所得残质再溶于30mL DCM中，以饱和碳酸氢钠水溶液洗 涤，经MgSO4脱水及蒸发，产生0.46g(57％)硫脲中间物(3-二甲氨基 丙基)硫脲。质谱数据：m/z＝162(M+H)。

在含0.14g中间物K-1的40mL乙醇中添加0.063g前述硫脲中间 物。反应混合物加热至回流一夜，蒸发。经制备性HPLC纯化后，得 到0.06g(56％)中间物L-1N-[(2R，3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲 基丙基)-[4-[2-(3-二甲氨基丙氨基)噻唑-4-基]苯基]磺酰胺。质谱数据： m/z＝560(M+H)。

在含0.1g中间物K-4的2mL乙醇中添加13.7mg甲基硫脲。反应 混合物加热至回流1小时，蒸发。粗化合物经制备性HPLC纯化，产 生50mg最终化合物[(1S，2R)-2-羟基-3-[N-[4-[2-(甲氨基)噻唑-4-基]苯磺 酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-1-(苯甲基)丙基]-(2，6-二甲基苯氧基)乙酰 胺。质谱数据：m/z＝651(M+H)。

实施例10：噁唑的合成法-式(L-2)化合物的制法

在含0.2g中间物K-2的10mL二甲基甲酰胺中添加0.26g乙酰 胺。反应混合物加热至140℃2小时。蒸发溶剂后，粗化合物经硅胶 使用5％甲醇的二氯甲烷溶液溶离纯化，产生0.09g(45％)中间物L- 2[(1S，2R)-2-羟基-3-[N-[4-(2-甲基噁唑-4-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基) 氨基]-1-(苯甲基)丙基]乙酰胺。质谱数据：m/z＝500(M+H)。

实施例11：式(M-2)化合物的制法

取0.09g中间物-L-2溶于10mL 5N HCl的异丙醇溶液中。反应混 合物于70℃下加热一夜。蒸发溶剂后，残质再溶于20mL DCM中， 以2％碳酸钠水溶液洗涤。有机层经MgSO4脱水，与蒸发，产生0.05g (62％)中间物M-2N-[(2R，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙基)- [4-(2-甲基噁唑-4-基)苯基]磺酰胺。质谱数据：m/z＝458(M+H)。

实施例12：咪唑的合成法-式(L-1)化合物的制法

在含0.100g中间物K-1的5mL DMF中添加0.015g乙酸钾。混 合物于60℃下加热2天后，蒸发，产生98mg(94％)所需中间物 [(1S，2R)-3-[N-[4-(乙酰氧基乙酰基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-2- 羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸9-芴基甲酯。质谱数据： m/z＝699(M+H)。

在含0.098g前述中间物的5mL乙酸中添加0.043g乙酸铵。混合 物于95℃下加热一夜，蒸发，经制备性HPLC纯化，产生0.015g中间 物L-3[(1S，2R)-2-羟基-3-[N-[4-(2-甲基咪唑-4-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基 丙基)氨基]-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸9-芴基甲酯。质谱数据： m/z＝679(M+H)。

在含0.215g中间物K-1的20mL乙醇中添加0.040g2-氨基噻唑。 混合物于90℃下加热一夜后，蒸发，产生216mg(100％)所需中间物 [(1S，2R)-3-[N-[4-(咪唑并[2，1-b]噻唑-6-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨 基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸9-芴基甲酯。质谱数据： m/z＝721(M+H)。

实施例13：式(L-3)化合物的制法

在含0.5g中间物K-3的50mL THF中添加0.075g乙酰基胍。回 流加热一夜后，添加0.15g乙酰基胍，续回流3小时。蒸发溶剂，残 质溶于DCM中，以水洗涤，经MgSO4脱水，蒸发。粗化合物经硅胶 使用20％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液溶离纯化，产生0.2g(45％)中间 物L-3N-[(2R，3S)-3-(N′，N′-二苯甲基)氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基 丙基)-4-[2-(乙酰氨基)咪唑-4-基]-苯磺酰胺。质谱数据： m/z＝680(M+H)。

实施例14：式(M-3)化合物的制法

在含0.2g中间物L-3的MeOH与乙酸钾的混合物中添加0.1g Pd/C 10％。混合物与H2搅拌一夜后，再添加0.1g Pd/C 10％。与H2 搅拌一夜后，混合物经寅式盐过滤及蒸发。残质再溶于DCM中，以水 洗涤，经MgSO4脱水及蒸发，产生0.05g(33％)中间物N-3N-[(2R，3S)- 3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙基)-[4-(2-乙酰氨基咪唑-4-基)-苯 基]磺酰胺。质谱数据：m/z＝500(M+H)。

实施例15：式(E)化合物的制法-化合物1与化合物36的制法

在含0.21g中间物M-1的25mL DCM混合物中添加0.248g 1- [[(3R，3aS，6aR)-六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基]氧羰基氧]-2，5-吡咯啶二酮 (类似WO 9967417所述方法制备)与0.048g三乙胺。反应混合物于 室温下搅拌一夜及蒸发。粗化合物经硅胶使用2％甲醇的二氯甲烷溶液 溶离纯化，产生0.19g(68％)所需最终化合物[(1S，2R)-2-羟基-3-[N-[4-(2- 甲氨基噻唑-4-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-1-(苯甲基)丙基]氨基 甲酸[(3R，3aR，6aR)六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基]酯。质谱数据： m/z＝645(M+H)。

在含0.015g 5-羟甲基噻唑的5mL DCM混合物中添加0.034g二 琥珀烯亚氨基碳酸酯与0.018mL三乙胺。混合物于室温下搅拌2小时 后，添加0.050g中间物M-2，混合物搅拌一夜。混合物经5mL DCM 稀释，以2％碳酸钠水溶液及盐水依序洗涤，经MgSO4脱水及蒸发。 粗化合物经硅胶使用5％甲醇的二氯甲烷溶液溶离纯化，产生0.026g (36％)所需最终化合物[(1S，2R)-2-羟基-3-[N-[4-(2-甲基噁唑-4-基)苯磺 酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸(噻唑-5-基甲基) 酯。质谱数据：m/z＝599(M+H)。

实施例16：化合物38的合成法

在含13.44g中间物A(PG：Boc)的400mL DCM混合物中添加 8.08g三乙胺。混合物冷却至0℃，滴加含8.87g 4-氰基苯磺酰氯的100 mL DCM溶液。然后使混合物升温至室温，搅拌一夜，以水洗涤。有 机层经MgSO4脱水，浓缩，产生19.4g(96％)所需磺酰胺[(1S，2R)-3- [N-(4-氰基苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基 甲酸1，1二甲基乙酯。

于0℃下，在含9g前述中间物的100mL DCM混合物中滴加20.5 g三氟乙酸。混合物于室温下搅拌一夜，以饱和碳酸钠溶液与盐水依序 洗涤，经MgSO4脱水及浓缩，产生6.4g(88％)所需胺N-[(2R，3S)-3-氨 基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙基)-4-氰基苯磺酰胺(K-5)。

在含6.4g前述中间物的100mL DCM混合物中添加4.75g 1- [[[(3R，3aS，6aR)-六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基]氧]羰基]氧]-2，5-吡咯啶二 酮(类似WO 9967417所述方法制备)与1.77g三乙胺。反应混合物于 室温下搅拌一夜及蒸发。粗化合物经硅胶使用30％乙酸乙酯的二氯甲 烷溶液溶离纯化，产生4.86g(55％)所需化合物[(1S，2R)-3-[N-(4-氰基苯 磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基)氨基甲酸 [(3R，3aS，6aR)六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基]酯。

在含4.8g前述中间物的100mL乙醇混合物中添加7.12g碳酸钾 与2.98g羟胺盐酸盐。混合物回流一夜及浓缩。残质溶于乙酸乙酯中， 以水洗涤，经MgSO4脱水，及浓缩，产生4.88g(96％)所需化合物 [(1S，2R)-2-羟基-3-[N-(4-[(羟亚氨基)氨甲基]苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基) 氨基)-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸[(3R，3aS，6aR)六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3- 基]酯。

在含0.5g前述中间物的10mL吡啶混合物中添加0.11g 2-呋喃酰 基氯。混合物回流4小时，浓缩。残质溶于乙酸乙酯中，以水洗涤， 经MgSO4脱水，浓缩，产生0.28g(49％)所需噁二唑衍生物[(1S，2R)- 3-[N-[4-(5-(呋喃-2-基)噁二唑-3-基)苯磺酰基]-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟 基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸[(3R，3aS，6aR)-六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基] 酯。质谱数据：m/z 667(M+H)。

实施例17：化合物56的合成法

于0℃下，在含12g中间物A(PG：Boc)的300mL DCM混合 物中添加6mL三乙胺与9.6g4-溴苯磺酰氯。混合物搅拌3小时，以水 洗涤，经MgSO4脱水，浓缩，产生20g(100％)所需中间物[(1S，2R)-3- [N-(4-溴苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]-2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲 酸1，1-二甲基乙酯。质谱数据：m/z 556(M+H)。

于0℃下，在含10g前述中间物的150mL DCM混合物中添加13.9 mL三氟乙酸。混合物搅拌一夜，浓缩。残质经DCM与饱和碳酸钠水 溶液处理。分离有机层，经MgSO4脱水及浓缩，产生6.8g(85％)脱除 保护基的化合物N-[(2R，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯丁基]-N-(2-甲基丙基)- 4-溴苯磺酰胺。质谱数据：m/z＝456(M+H)。

在含6.8g前述中间物的300mL DCM混合物中添加4g 1- [[[[(3R，3aS，6aR)-六氢呋喃并[2，3-b ]呋喃-3-基]氧]羰基]氧]-2，5-吡咯啶 二酮(类似WO 9967417所述方法制备)与2.7mL三乙胺。反应混合物 于室温下搅拌一夜，经饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，经MgSO4脱水，及 蒸发。粗化合物经硅胶使用2％甲醇的二氯甲烷溶液溶离纯化，产生6 g(65％)所需化合物[(1S，2R)-3-[N-(4溴苯磺酰基)-N-(2-甲基丙基)氨基]- 2-羟基-1-(苯甲基)丙基]氨基甲酸[(3R，3aS，6aR)六氢呋喃并[2，3-b]呋喃- 3-基]酯。质谱数据：m/z 612(M+H)。

在含61mg前述中间物的5mL二噁烷混合物中添加41mg 2-吡嗪 基三丁基锡、10mg三乙胺与7mg PdCl2(dppf)CH2Cl2二氯[1，1′-双(二 苯膦基)二茂络铁]钯(II)二氯甲烷加合物。反应混合物于85℃下搅拌一 夜及蒸发。粗混合物经制备性HPLC纯化，产生4mg所需化合物 [(1S，2R)-2-羟基-3-[N-(2-甲基丙基)-N-[4-(吡啶-2-基)苯磺酰基]氨基]-1- (苯甲基)丙基]氨基甲酸[(3R，3aR，6aR)-六氢呋喃并[2，3-b]呋喃-3-基] 酯。质谱数据：m/z 611(M+H)。

下表中化合物是根据上述一种方法制备。下表(表1-6)中，“合 成法”一栏代表可制备该化合物的一般途径。

表1

表2：

表3：

表4：

表5：

表6：

抗病毒分析法

以细胞分析法检测本发明化合物的抗病毒活性。该分析法证实此 化合物对野生型实施室HIV菌株(HIV-1菌株LAI)具有强力抗HIV 活性。依据下列方法进行细胞分析法。

细胞分析法实施过程

取感染HIV或伪感染MT4细胞于不同浓度抑制剂的存在下培养5 天。培养期结束时，所有感染HIV细胞均被于没有任何抑制剂的对照 组培养物中所复制的病毒杀死。测量MTT浓度来测定细胞活力，MTT 为一种黄色水溶性四唑鎓盐染料，仅可于活细胞粒线体中转化成紫色 的水不可溶性甲。当以异丙醇溶解所产生的甲晶体时，可追踪从溶 液于540nm下的吸光度。当5天培养期结束后，该数值与培养物中残 留的活细胞数成直接相关性。于感染病毒的细胞上追踪化合物抑制活 性，以EC50与EC90表示。此数值分别代表使细胞免于受到病毒的细胞 致病性效应达到50％及90％保护程度时所需的化合物用量。化合物毒 性是在伪感染细胞上测定，且以CC50表示，其代表抑制细胞生长达50％ 时，所需的化合物浓度。选择性指数(SI)(CC50/EC50比例)为抑制 剂的抗-HIV活性的选择性。以例如：pEC50或pCC50数值表示的结果 分别为以EC50或CC50表示的结果的负对数值。

抗病毒范围

由于出现药物抗性的HIV菌株日益增加，因此测试本发明化合物 对临床上所单离的含有数种突变(表7与8)HIV菌株的效力。此突变 与针对蛋白酶抑制剂产生抗性有关，以致病毒对目前可使用的药物(如 散克菲(saquinavir)、理妥纳菲(ritonavir)、尼纳菲(nelfinavir)、引得菲 (indinavir)与安普菲(amprenavir))展现程度不等的表型交叉抗性。

表7在所使用HIV菌株(A至F)的蛋白酶基因中的突变列表

  A   V003I，L010I，V032T，L033M，E035D，S037Y，S037D，M046I，R057R/K，Q058E，L063P，   K070T，A071V，I072V，I084V，L089V   B   V003I，L010I，K020R，E035D，M036I，S037N，Q058E，I062V，L063P，A071V，I072M，   G073S，V077I，I084V，I085V，L090M   C   V003I，L010I，I015V，L019I，K020M，S037N，R041K，I054V，Q058E，L063P，A071V，   I084V，L090M，I093L   D   V003I，L010L/I，I013V，L033I，E035D，M036I，M046L，K055R，R057K，L063P，I066F，   A071V，I084V，N088D，L090M   E   V003I，L010I，V011I，A022V，L024I，E035D，M036I，S037T，R041K，I054V，I062V，   L063P，A071V，I084V   F   L010F，M046I，M071V，I084V

结果

测定本发明化合物的广谱活性时，测定抗性倍数(FR)，其定义为 FR＝EC50(突变株)/EC50(HIV-1菌株LAI)。表8显示以抗性倍数测定的 抗病毒结果。由此表可见，本发明化合物可有效抑制相当多种突变株： A栏：针对突变株A的FR值；B栏：针对突变株B的FR值；C栏： 针对突变株C的FR值；D栏：针对突变株D的FR值；E栏：针对突 变株E的FR值；F栏：针对突变株F的FR值。毒性(Tox)是以伪转感 染细胞测定的pCC50值表示。WT栏代表对抗野生型HIV-LAI菌株的 pEC50值。

表8毒性试验及对A至F菌株的抗性试验结果(以FR表示)。NA表 示未取得结果

  No   A   B   C   D   E   F   Tox   WT   1   5.4   2.1   1.2   7.9   5.0   42   4.19   8.5   2   26   10.0   3.0   9.3   8.9   91   4.07   8.5   3   39   8.9   7.4   26   17   151   4.11   8.3   5   22.3   6.3   3.0   NA   13.5   NA   4.95   7.6   6   6.2   4.7   1.2   3.8   6.6   79   4.69   7.5

  24   1.1   NA   NA   NA   3.1   NA   4.2   7.1   32   1.3   1.0   0.33   NA   0.95   7.2   ＜4.0   7.7   33   0.71   0.66   0.2   NA   0.19   2.6   ＜4.0   6.7   35   11   10.5   8.3   6.2   8.3   42   ＜4.0   8.4   38   30   23   6.8   14.8   9.5   44.7   ＜4.49   8.4   39   36   NA   NA   NA   52   NA   ＜4.0   8.1   40   5.0   NA   4.1   12.9   41   219   ＜4.49   8.5   42   6.2   7.8   1.7   6.2   6.2   30   ＜4.0   7.7   43   54   23   9.1   10.2   6.6   NA   ＜4.0   7.9   44   39   14   8.1   15   13   77   ＜4.49   8.0   46   182   32   9.1   32   9.8   NA   ＜4.49   8.4   48   89   25   5.8   17   6.9   NA   ＜4.0   8.3   49   NA   21   4.4   NA   10   NA   ＜4.49   8.1   50   NA   14   4.3   13   NA   NA   ＜4.49   8.0   51   NA   NA   4.8   12   4.8   NA   ＜4.49   7.5   52   NA   17   6.2   16   11   NA   ＜4.49   8.1   57   49   23   5.6   27   8.3   NA   4.83   7.7

生物可利用率

本发明化合物的生物可利用率是使用大鼠测定的。化合物经口或 经腹膜内投药。在投药后不同时间点杀死动物，收集全血，依标准方 法制备血清。依据上述方法，滴定样本中所含抗HIV活性，决定血清 中化合物浓度。也可以HPLC-MS法测定血清中浓度。

蛋白质结合性分析法

已知似人类血清蛋白质白蛋白(HSA)或α-1酸醣蛋白(AAG)会 与多种药物结合，可能造成该化合物有效性下降。为了测定本发明化 合物是否受到此结合作用的负面影响，于人类血清的存在下测定化合 物抗HIV活性，以便分析蛋白酶抑制剂与彼等蛋白质的结合性影响。

调配物

取活性成份，亦即式(I)化合物溶于有机溶剂中(如：乙醇、甲 醇或二氯甲烷，优选为乙醇与二氯甲烷的混合物)。取聚合物(如： 聚乙烯吡咯烷酮与乙酸乙烯酯共聚物(PVP-VA)或羟丙基甲基纤维素 (HPMC)，典型为5mpa.s)溶于有机溶剂中，如乙醇、甲醇、二氯甲 烷。聚合物适合溶于乙醇中。聚合物与化合物溶液混合后，喷雾干燥。 化合物/聚合物的比例选自1/1至1/6。中间值范围为1/1.5至1/3。适合 的比例为1/6。随后将喷雾干燥粉末(是固态匀散物)填入投药用的胶 囊中。一粒胶囊中的药物填充量范围在50与100mg之间，取决于所 使用的胶囊规格。

包膜衣锭剂

锭剂核心的制法

取含100g活性成份(亦即式(I)化合物)、570g乳糖与200g淀 粉均匀混合，然后使用含5g十二碳烷基硫酸钠及10g聚乙烯吡咯烷 酮的约200ml水溶液湿化。湿粉末混合物过筛，干燥后，再过筛一次。 然后添加100g微晶纤维素与15g氢化植物油。全部均匀混合，压缩 成锭剂，共产生10,000片锭剂，各包含10mg活性成分。

包衣

在含10g甲基纤维素的75ml变性乙醇溶液中添加含5g乙基纤维 素的150ml二氯甲烷溶液。添加75ml二氯甲烷与2.5ml 1，2，3，-丙三 醇。熔化10g丙二醇，溶于75ml二氯甲烷中。后项溶液加至前项溶 液中后，添加2.5g十八碳烷酸镁、5g聚乙烯吡咯烷酮与30ml浓缩的 色素悬浮液，全部均质化。于包覆设备中，使用所得混合物包覆锭剂 核心。