1.经改造构建体，其包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含：
(a)编码至少1个导引RNA(gRNA)的核苷酸序列；以及
(b)选自以下的一个或更多个核苷酸序列：(i)编码目的蛋白质的核苷酸序列和(ii)编码RNA干扰分子的核苷酸序列。
2.权利要求1所述的经改造构建体，其中所述启动子为RNA聚合酶II依赖性(RNA pol II)启动子。
3.权利要求1或2所述的经改造构建体，其中所述至少1个gRNA的侧翼为编码核糖核酸酶识别位点的核苷酸序列。
4.权利要求3所述的经改造构建体，其中所述核糖核酸酶识别位点为Csy4核糖核酸酶识别位点。
5.权利要求1或2所述的经改造构建体，其中所述至少1个gRNA的侧翼为编码核酶的核苷酸序列。
6.权利要求5所述的经改造构建体，其中所述核酶选自锤头状核酶和丁型肝炎病毒核酶。
7.权利要求1至6中任一项所述的经改造构建体，其中(a)所述的核苷酸序列侧翼为同源内含子剪接位点。
8.经改造构建体，其包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含编码至少1个导引RNA(gRNA)的第一核苷酸序列，所述gRNA侧翼为核糖核酸酶识别位点。
9.权利要求8所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列的侧翼为同源内含子剪接位点。
10.权利要求8或9所述的经改造构建体，其中所述核酸还包含编码目的蛋白质的第二核苷酸序列，其中所述第一核苷酸序列在所述第二核苷酸序列内。
11.权利要求8至10中任一项所述的经改造构建体，其中所述核酸还包含编码目的蛋白质的第二核苷酸序列，其中所述第二核苷酸序列在所述第一核苷酸序列的上游。
12.权利要求8至11中任一项所述的经改造构建体，其中所述经改造构建体还包含编码至少1个微小RNA的核苷酸序列。
13.权利要求12所述的经改造构建体，其中在所述目的蛋白质内编码所述至少一个微小RNA。
14.权利要求10至13中任一项所述的经改造构建体，其中所述核酸还包含编码三螺旋结构的第三核苷酸序列，其中所述第三核苷酸序列在所述第二核苷酸序列与所述第一核苷酸序列之间。
15.权利要求8至14中任一项所述的经改造构建体，其中所述启动子为RNA聚合酶II依赖性(RNA pol II)启动子。
16.权利要求15所述的经改造构建体，其中所述RNA pol II启动子为人巨细胞病毒启动子、人泛素启动子、人组蛋白H2A1启动子或人炎性趋化因子CXCL1启动子。
17.权利要求8至16中任一项所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少
2个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
18.权利要求17所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少3个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
19.权利要求18所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少4个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
20.权利要求19所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少5个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
21.权利要求8至20中任一项所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少
2个侧翼为核糖核酸酶识别位点的gRNA，并且其中所述gRNA彼此不同。
22.权利要求8至21中任一项所述的经改造构建体，其中所述核糖核酸酶识别位点为Csy4核糖核酸酶识别位点。
23.权利要求22所述的经改造构建体，其中每个所述Csy4核糖核酸酶识别位点的长度为28个核苷酸。
24.权利要求22或23所述的经改造构建体，其中所述Csy4核糖核酸酶识别位点来自于铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。
25.权利要求14至24中任一项所述的经改造构建体，其中所述三螺旋结构由来自于MALAT1基因座的3’末端或MENβ基因座的3’末端的核苷酸序列编码。
26.经改造构建体，其包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含：
编码目的蛋白质的第一核苷酸序列；以及
编码至少1个侧翼为核糖核酸酶识别位点的导引RNA(gRNA)的第二核苷酸序列，其中所述第二核苷酸序列的侧翼为编码同源内含子剪接位点的核苷酸序列并且位于所述第一核苷酸序列内。
27.权利要求26所述的经改造构建体，其中所述经改造构建体还包含编码至少1个微小RNA的核苷酸序列。
28.权利要求27所述的经改造构建体，其中在所述目的蛋白质内编码所述至少1个微小RNA。
29.权利要求26至28中任一项所述的经改造构建体，其中所述核酸还包含：
编码三螺旋结构的第三核苷酸序列；以及
编码至少1个侧翼为核糖核酸酶识别位点的gRNA的第四核苷酸序列，其中所述第三核苷酸序列在所述第一核苷酸序列的下游，并且在所述第四核苷酸序列的上游。
30.权利要求26至29中任一项所述的经改造构建体，其中所述启动子为RNA聚合酶II依赖性(RNA pol II)启动子。
31.权利要求30所述的经改造构建体，其中所述RNA pol II启动子为人巨细胞病毒启动子、人泛素启动子、人组蛋白H2A1启动子或人炎性趋化因子CXCL1启动子。
32.权利要求26至31中任一项所述的经改造构建体，其中所述第二核苷酸序列编码至少2个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
33.权利要求32所述的经改造构建体，其中所述第二核苷酸序列编码至少3个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
34.权利要求33所述的经改造构建体，其中所述第二核苷酸序列编码至少4个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
35.权利要求34所述的经改造构建体，其中所述第二核苷酸序列编码至少5个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
36.权利要求26至35中任一项所述的经改造构建体，其中所述第二核苷酸序列编码至少2个侧翼为核糖核酸酶识别位点的gRNA，并且其中所述gRNA彼此不同。
37.权利要求26至36中任一项所述的经改造构建体，其中所述核糖核酸酶识别位点为Csy4核糖核酸酶识别位点。
38.权利要求37所述的经改造构建体，其中每个所述Csy4核糖核酸酶识别位点的长度为28个核苷酸。
39.权利要求37或38所述的经改造构建体，其中所述Csy4核糖核酸酶识别位点来自于铜绿假单胞菌。
40.权利要求26至39中任一项所述的经改造构建体，其中所述同源内含子剪接位点来自于共有内含子。
41.权利要求26至39中任一项所述的经改造构建体，其中所述同源内含子剪接位点来自于HSV1潜伏相关内含子。
42.权利要求26至39中任一项所述的经改造核酸，其中所述同源内含子剪接位点来自于sno-IncRNA2内含子。
43.权利要求29至42中任一项所述的经改造核酸，其中所述三螺旋结构由来自于MALAT1基因座的3’末端或MENβ基因座的3’末端的核苷酸序列编码。
44.权利要求29至43中任一项所述的经改造构建体，其中所述第四核苷酸序列编码至少2个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
45.权利要求44所述的经改造构建体，其中所述第四核苷酸序列编码至少3个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
46.权利要求45所述的经改造构建体，其中所述第四核苷酸序列编码至少4个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
47.权利要求46所述的经改造构建体，其中所述第四核苷酸序列编码至少5个gRNA，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
48.权利要求29至47中任一项所述的经改造构建体，其中所述第四核苷酸序列编码至少2个侧翼为核糖核酸酶识别位点的gRNA，并且其中所述gRNA彼此不同。
49.经改造构建体，其包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含编码至少1个侧翼为核酶的导引RNA(gRNA)的第一核苷酸序列。
50.权利要求49所述的经改造构建体，其中所述核酸还包含编码目的蛋白质的第二核苷酸序列，其中所述第二核苷酸序列在所述第一核苷酸序列的上游。
51.权利要求49或50所述的经改造构建体，其中所述经改造构建体还包含编码至少1个微小RNA的核苷酸序列。
52.权利要求51所述的经改造构建体，其中在所述目的蛋白质内编码所述至少1个微小RNA。
53.权利要求50至52中任一项所述的经改造构建体，其中所述核酸还包含编码三螺旋结构的第三核苷酸序列，其中所述第三核苷酸序列在所述第二核苷酸序列与所述第一核苷酸序列之间。
54.权利要求49至53中任一项所述的经改造构建体，其中所述启动子为RNA聚合酶II依赖性(RNA pol II)启动子。
55.权利要求54所述的经改造构建体，其中所述RNA pol II启动子为人巨细胞病毒启动子、人泛素启动子、人组蛋白H2A1启动子或人炎性趋化因子CXCL1启动子。
56.权利要求49至55中任一项所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少2个gRNA，每个gRNA的侧翼为核酶。
57.权利要求56所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少3个gRNA，每个gRNA的侧翼为核酶。
58.权利要求57所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少4个gRNA，每个gRNA的侧翼为核酶。
59.权利要求58所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少5个gRNA，每个gRNA的侧翼为核酶。
60.权利要求49至59中任一项所述的经改造构建体，其中所述第一核苷酸序列编码至少2个侧翼为核酶的gRNA，并且其中所述gRNA彼此不同。
61.权利要求49至60中任一项所述的经改造构建体，其中所述核酶为顺式作用核酶。
62.权利要求61所述的经改造构建体，其中至少1个所述顺式作用核酶为锤头状核酶。
63.权利要求62所述的经改造构建体，其中所述锤头状核酶位于所述至少1个gRNA的5’末端。
64.权利要求61所述的经改造构建体，其中至少1个所述顺式作用核酶为丁型肝炎病毒核酶。
65.权利要求64所述的经改造构建体，其中所述丁型肝炎病毒核酶位于所述至少1个gRNA的3’末端。
66.权利要求53至65中任一项所述的经改造构建体，其中所述三螺旋结构由来自于MALAT1基因座的3’末端或MENβ基因座的3’末端的核苷酸序列编码。
67.经改造构建体，其包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含：
编码目的蛋白质内的至少1个RNA干扰分子的第一核苷酸序列；
编码至少1个侧翼为核糖核酸酶识别位点的导引RNA的第二核苷酸序列；以及编码三螺旋结构的第三核苷酸序列，其中所述第三核苷酸序列在所述第一核苷酸序列与第二核苷酸序列之间。
68.经改造构建体，其包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含：
编码目的蛋白质内的至少1个RNA干扰分子的第一核苷酸序列；
编码至少1个侧翼为核酶的导引RNA的第二核苷酸序列；以及
编码三螺旋结构的第三核苷酸序列，其中所述第三核苷酸序列在所述第一核苷酸序列与第二核苷酸序列之间。
69.权利要求67或68所述的经改造构建体，其中所述至少1个RNA干扰分子选自微小RNA(miRNA)和小干扰RNA(siRNA)。
70.权利要求69所述的经改造构建体，其中所述至少1个RNA干扰分子包含至少1个miRNA。
71.载体，其包含权利要求1至70中任一项所述的经改造构建体。
72.细胞，其包含权利要求1至70中任一项所述的经改造构建体或权利要求71所述的载体。
73.细胞，其包含至少2个权利要求1至70中任一项所述的经改造构建体或至少2个权利要求71所述的载体。
74.权利要求72或73所述的细胞，其中所述细胞被修饰以稳定表达核糖核酸酶。
75.权利要求74所述的细胞，其中所述核糖核酸酶为Csy4核糖核酸酶。
76.权利要求72至75中任一项所述的细胞，其中所述细胞被修饰以稳定表达Cas蛋白。
77.权利要求76所述的细胞，其中所述Cas蛋白为Cas核酸酶。
78.权利要求76所述的细胞，其中所述Cas核酸酶为Cas9核酸酶。
79.权利要求76所述的细胞，其中所述Cas蛋白为具有转录活性的Cas蛋白。
80.权利要求79所述的细胞，其中所述具有转录活性的Cas蛋白为具有转录活性的Cas9蛋白。
81.-权利要求72至80中任一项所述的细胞，其中所述细胞还包含经改造核酸，所述核酸包含与编码核糖核酸酶的核苷酸序列有效相连的启动子。
82.权利要求81所述的细胞，其中所述核糖核酸酶为Csy4核糖核酸酶。
83.权利要求72至82中任一项所述的细胞，其中所述细胞还包含经改造核酸，所述核酸包含与编码Cas蛋白的核苷酸序列有效相连的启动子。
84.权利要求83所述的细胞，其中所述Cas蛋白为Cas核酸酶。
85.权利要求84所述的细胞，其中所述Cas核酸酶为Cas9核酸酶。
86.权利要求83所述的细胞，其中所述Cas蛋白为具有转录活性的Cas蛋白。
87.权利要求86所述的细胞，其中所述具有转录活性的Cas蛋白为具有转录活性的Cas9蛋白。
88.权利要求72至87中任一项所述的细胞，其中所述细胞还包含至少1个额外的经改造核酸，所述核酸包含与编码目的蛋白质的核苷酸序列有效相连的启动子。
89.权利要求88所述的细胞，其中所述至少1个额外的经改造核酸的目的蛋白质与所述细胞中的任何其他目的蛋白质不同。
90.权利要求72至89中任一项所述的细胞，其中所述细胞为细菌细胞。
91.权利要求72至89中任一项所述的细胞，其中所述细胞为人细胞。
92.方法，其包括培养权利要求72至91中任一项所述的细胞。
93.权利要求92所述的方法，其包括在允许核酸表达的条件下培养所述细胞。
94.产生、修饰或重接细胞遗传线路的方法，其包括：
在细胞中表达第一经改造构建体，所述构建体选自权利要求1至70中任一项所述的经改造构建体；以及
在细胞中表达第二经改造构建体，所述构建体选自权利要求1至70中任一项所述的经改造构建体，其中所述第一经改造构建体的至少1个gRNA与所述第二经改造构建体的启动子的区域或者内源启动子的区域互补并结合。
95.权利要求94所述的方法，其还包括表达第三经改造构建体，所述构建体选自权利要求1至70中任一项所述的经改造构建体，其中所述第二经改造构建体的至少1个gRNA与所述第三经改造构建体的启动子的区域或者内源启动子的区域互补并结合。
96.权利要求95所述的方法，其还包括表达至少1个额外的经改造核酸，所述核酸选自权利要求1至70中任一项所述的经改造核酸，其中所述至少1个额外的经改造核酸的至少1个gRNA与所述细胞的任一个所述经改造核酸的启动子的区域或者至少1个内源启动子的区域互补并结合。
97.权利要求94至96中任一项所述的方法，其中所述细胞被修饰以稳定表达Cas蛋白。
98.权利要求97所述的方法，其中所述Cas蛋白为Cas核酸酶。
99.权利要求98所述的方法，其中所述Cas核酸酶为Cas9核酸酶。
100.权利要求97所述的方法，其中所述Cas蛋白为具有转录活性的Cas蛋白。
101.权利要求100所述的方法，其中所述具有转录活性的Cas蛋白为具有转录活性的Cas9蛋白。
102.权利要求94至101中任一项所述的方法，其中所述细胞还包含经改造核酸，所述核酸包含与编码核糖核酸酶的核苷酸序列有效相连的启动子。
103.权利要求102所述的方法，其中所述核糖核酸酶为Csy4核糖核酸酶。
104.权利要求94至103中任一项所述的方法，其中所述细胞还包含经改造核酸，所述核酸包含与编码Cas蛋白的核苷酸序列有效相连的启动子。
105.权利要求104所述的方法，其中所述Cas蛋白为Cas核酸酶。
106.权利要求105所述的方法，其中所述Cas核酸酶为Cas9核酸酶。
107.权利要求104所述的方法，其中所述Cas蛋白为具有转录活性的Cas蛋白。
108.权利要求107所述的方法，其中所述具有转录活性的Cas蛋白为具有转录活性的Cas9蛋白。
109.权利要求94至108中任一项所述的方法，其还包括培养所述细胞。
110.多重细胞表达导引核糖核酸(gRNA)的方法，其包括在细胞中表达经改造构建体，所述构建体包含与核酸有效相连的启动子，所述核酸包含编码至少2个gRNA的第一核苷酸序列，每个gRNA的侧翼为核糖核酸酶识别位点。
111.权利要求110所述的方法，其中所述核酸还包含编码目的蛋白质的第二核苷酸序列，其中所述第二核苷酸序列在所述第一核苷酸序列的上游。
112.权利要求111所述的方法，其中所述经改造构建体还包含编码至少1个微小RNA的核苷酸序列。
113.权利要求112所述的经改造构建体，其中在所述目的蛋白质内编码所述至少1个微小RNA。
114.权利要求111至113中任一项所述的方法，其中所述核酸还包含编码三螺旋结构的第三核苷酸序列，其中所述第三核苷酸序列在所述第二核苷酸序列与所述第一核苷酸序列之间。
115.权利要求110至114中任一项所述的方法，其中所述细胞被修饰以稳定表达Cas蛋白。
116.权利要求115所述的方法，其中所述Cas蛋白为Cas核酸酶。
117.权利要求116所述的方法，其中所述Cas核酸酶为Cas9核酸酶。
118.权利要求115所述的方法，其中所述Cas蛋白为具有转录活性的Cas蛋白。
119.权利要求118所述的方法，其中所述具有转录活性的Cas蛋白为具有转录活性的Cas9蛋白。
120.权利要求110至119中任一项所述的方法，其中所述细胞还包含经改造核酸，所述核酸包含与编码核糖核酸酶的核苷酸序列有效相连的启动子。
121.权利要求120所述的方法，其中所述核糖核酸酶为Csy4核糖核酸酶。
122.权利要求110至121中任一项所述的方法，其中所述细胞还包含经改造核酸，所述核酸包含与编码Cas蛋白的核苷酸序列有效相连的启动子。
123.权利要求122所述的方法，其中所述Cas蛋白为Cas核酸酶。
124.权利要求123所述的方法，其中所述Cas核酸酶为Cas9核酸酶。
125.权利要求122所述的方法，其中所述Cas蛋白为具有转录活性的Cas蛋白。
126.权利要求125所述的方法，其中所述具有转录活性的Cas蛋白为具有转录活性的Cas9蛋白。
127.权利要求110至126中任一项所述的方法，其还包括培养所述细胞。