| 序号 | 专利名 | 申请号 | 申请日 | 公开（公告）号 | 公开（公告）日 | 发明人 |
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| 1 | 用于细胞色素P450单加氧酶生物催化的全细胞系统 | CN201480044579.X | 2014-06-17 | CN105473730A | 2016-04-06 | A·盖尔巴; F·汉内曼; S·布莱夫; M·克勒塞尔; R·本哈特 |
| 本发明的主题是用于将真核细胞来源的细胞色素P450单加氧酶的底物转化为有价值的生物技术产物的全细胞催化方法。本发明的主题还在于经遗传工程改造从而以高比率实现那些生物转化的微生物以及制备这些微生物菌株的方法。 | ||||||
| 2 | 一种7α，15α双羟化DHEAP450酶基因的克隆及分析 | CN201310570323.X | 2013-11-16 | CN103642763A | 2014-03-19 | 许正宏; 史劲松; 李会; 李恒; 张旦旦; 许鸿瑜; 其他发明人请求不公开姓名 |
| 本发明提供一种来自于Colletotrichum lini ST-1的新型真菌细胞色素P450酶CYP X完整的mRNA和DNA序列的克隆和分析方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，相应的氨基酸序列命名为SEQ ID NO:3。该酶能高效转化DHEA为7α,15α-diOH-DHEA，该基因的获得为其异源表达及产业化生产奠定理论基础，有较大的应用潜力及经济价值，也为细胞色素P450酶的相关研究奠定了理论基础。 | ||||||
| 3 | 类固醇生物化学氧化的方法和用于此方法中的遗传工程方法产生的细胞 | CN89104208.3 | 1989-05-06 | CN1038667A | 1990-01-10 | 荷曼·斯利杰克惠斯; 格拉杜斯·考尼利斯·玛利亚·塞尔坦; 埃利克·巴斯提安·思马尔 |
| 本发明提供了含有新的表达基因盒的遗传工程方法得到的宿主细胞，它能完成类固醇的生物化学氧化作用，尤其是用导入了编码了与胆甾醇转化为氢化可的松的生物途径有关的蛋白质的DNA的细胞来完成氧化作用。合适的宿主细胞有杆菌属(Bacillus)、酵母菌属(Saccharomgces)或Kluyveromyces的菌种。这些新的宿主细胞适合于胆甾醇，导甾烯醇酮、孕酮、17α-孕酮和11-脱氧皮质醇的微生物氧化作用，它们是所述生物途径的中间产物。这些新的表达基因盒在最终产生一个一步完成胆甾醇向氢化可的松转化的多基因系统中也是有用的。 | ||||||
| 4 | 一种产羟基脂肪酸的工程菌株及其制备方法和应用 | CN201710515975.1 | 2017-06-29 | CN107177541A | 2017-09-19 | 万霞; 肖康; 陈文超; 王炼; 徐琳; 龚阳敏; 黄凤洪 |
| 本发明公开了一种产羟基脂肪酸的工程菌株及其制备方法和应用。所述工程菌株包括：P450BM3基因、硫脂酶基因和脂肪酸调控因子fadR，P450BM3基因的序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，硫脂酶基因为序列如序列表中SEQ ID NO.2所示，脂肪酸调控因子fadR的序列如序列表中SEQ ID NO.3所示。所述方法包括：将P450BM3基因和硫脂酶基因分别连接到第一表达载体上，得到第一重组表达载体；将脂肪酸调控因子fadR连接到第二表达载体上，得到第二重组表达载体；将所述第一重组表达载体和所述第二重组表达载体共同转入感受态细胞中，得到重组菌株，即所述工程菌株。该工程菌株可利用微生物发酵的方式合成羟基脂肪酸，使得合成羟基脂肪酸的过程简单，且反应条件温和，属于环境友好的反应条件。 | ||||||
| 5 | 一种提高青蒿中青蒿素含量的方法 | CN201611012728.1 | 2016-11-17 | CN106480088A | 2017-03-08 | 唐克轩; 石璞; 付雪晴; 沈乾; 江伟民; 马亚男; 郝小龙; 孙小芬 |
| 本发明公开了一种提高青蒿中青蒿素含量的方法，将紫穗槐二烯合成酶ADS基因、紫穗槐-4,11-二烯氧化酶CYP71AV1基因、细胞色素P450还原酶CPR基因和乙醛脱氢酶ALDH1基因共转化青蒿。通过高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定青蒿中青蒿素含量，筛选获得青蒿素含量提高的转基因青蒿植株。本发明获得的转基因青蒿中青蒿素的含量显著提高，最高达到非转化对照植株的3.4倍。 | ||||||
| 6 | P450sca-2酶突变体、其制备方法和应用 | CN201210566984.0 | 2012-12-24 | CN103898071A | 2014-07-02 | 林章凛; 巴丽娜; 李盼; 张晖; 段妍 |
| 本发明涉及一种分离的多肽，其是SEQ？ID？NO:1所示的P450sca-2酶的变体或所述变体的生物学活性片段，其中所述多肽在对应于SEQ？IDNO:1所示序列中的G52、F89、P159、D269、T323和E370位置上包括氨基酸取代，而且相对于SEQ？ID？NO:1所示的P450sca-2酶，所述多肽在宿主细胞中表达时赋予所述宿主细胞提高的在含十氢萘环化合物的十氢萘环的6β位引入羟基的能力。本发明还涉及编码上述分离的多肽的多核苷酸，包含所述多核苷酸的重组载体，包含所述多核苷酸或所述重组载体的宿主细胞，以及通过所述宿主细胞转化美伐他汀以制备普伐他汀的方法。本发明的方法可以提高从美伐他汀转化制备普伐他汀的产率。 | ||||||
| 7 | 类固醇多步氧化方法和所用的遗传工程细胞 | CN89108378.2 | 1989-09-23 | CN1042567A | 1990-05-30 | 哈门·斯利克会斯; 格拉杜斯·考那利斯·玛丽·塞尔顿; 埃里克·巴斯廷·斯迈尔 |
| 本发明提供了一种基团工程构建的宿主细胞，该细胞能够同时氧化类固醇，优选同时导入17α-羟基和C21-羟基基团。特别是氧化是用细胞进行的，在该细胞中插入有编码至少两种涉及胆固醇向氢化可的松生化转化的蛋白质。合适的宿主细胞包括杆菌属、酵母属或Kluyreromyces菌珠。该新的宿主细胞适于胆固醇、孕甾烯醇酮、孕甾酮和17α-羟基-孕甾酮的生化氧化，它们都是所说的生化转化的中间产物。该宿主细胞还可用于最终制备多基因系统，该系统能一步将胆固醇转化为氢化可的松。 | ||||||
| 8 | 一种建立CYP2D1基因敲除大鼠模型的方法 | CN201510980660.5 | 2015-12-24 | CN105624191A | 2016-06-01 | 魏渊; 许海淼; 张晓燕 |
| 本发明涉及一种建立CYP2D1基因敲除大鼠模型的方法，属于转基因技术领域；本发明首先确定待敲除基因的靶位点并设计合成其引物序列；插入经酶切好的Cas9-gRNA-Bsal载体中，扩增得到带有T7 启动子序列的靶位点sgRNA；体外转录并纯化后检测活性；将有活性的sgRNA和Cas9 RNA显微注射入大鼠单细胞胚，获得Founder大鼠；筛选出CYP2D1基因敲除大鼠杂合子后交配得到纯合子个体，即CYP2D1基因敲除大鼠；本发明提供用P450基因敲除大鼠模型代替小鼠模型的制备方法，使基因敲除技术真正融入药物的非临床安全评价，有利于候选药物的早期毒性的发现。 | ||||||
| 9 | 一种能提高达玛烯二醇转化效率的融合蛋白质及构建方法及应用 | CN201410735927.X | 2014-12-04 | CN104611303A | 2015-05-13 | 卢文玉; 赵方龙 |
| 本发明公开了一种能提高达玛烯二醇转化效率的融合蛋白质及构建方法及应用,构建步骤为：①将拟南芥中细胞色素-NADPH-还原酶1基因AtCPR1的5’端的前138个碱基切除，得到SEQ ID NO.2所示序列；②将以SEQ ID NO.3所示的人参中原人参二醇合酶基因PPDS的3’端终止密码子TAA去除，与SEQ ID NO.2所示序列的5’端用编码多肽GSTSSGSG的碱基序列连接，构建出融合蛋白质的基因元件；③将融合蛋白质的基因元件与酿酒酵母细胞内源启动子和终止子连接，构建融合蛋白质基因表达盒，并转化进入酿酒酵母细胞表达。本发明的方法构建的融合蛋白质，能使达玛烯二醇到原人参二醇的转化效率提高。 | ||||||
| 10 | CYP119-T213G酶及其纯化方法 | CN201410299535.3 | 2014-06-27 | CN104059893A | 2014-09-24 | 张春; 王钦; 李静; 郭建敏; 杜曦; 何芳 |
| 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及CYP119-T213G酶及其纯化方法。本发明要解决的技术问题是提供一种催化效率更高的CYP119酶。本发明的技术方案是一种CYP119-T213G酶，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明还提供了表达CYP119-T213G酶的载体。本发明还提供了CYP119-T213G酶的纯化方法。本发明提供了一种催化效率更高的CYP119酶，具有广泛的应用前景。 | ||||||
| 11 | 棉花GhMAX2b基因、其编码蛋白及应用 | CN201410088698.7 | 2014-03-11 | CN103923888A | 2014-07-16 | 李学勇; 赵琳琳; 赵金凤; 刘伟娜; 邢进 |
| 本发明涉及棉花GhMAX2b基因及其编码的蛋白，其序列分别如SEQ ID No.2和1所示。通过转化拟南芥max2突变体，发现棉花GhMAX2b基因可以使突变体恢复分枝的表型，因而GhMAX2b基因具有控制植物（拟南芥、棉花等）分枝的功能，有望对棉花各类分枝的形成进行调控，进而对株型定向设计，以提高棉株生产力。 | ||||||
| 12 | Process for the biochemical oxidation of steroids and genetically engineered cells to be used therefor | EP89201173.5 | 1989-05-08 | EP0340878B1 | 2001-05-16 | Slijkhuis, Harmen; Selten, Gerardus Cornelis Maria; Smaal, Erik Bastiaan |
| 13 | CYP-P22 BIOCATALYTIC NANOPARTICLES WITH CYTOCHROME P450 ACTIVITY FOR PRODRUG ACTIVATION | US15577404 | 2016-05-26 | US20180327780A1 | 2018-11-15 | Rafael Vazquez Duhalt; Lorena Paulina Sanchez Sanchez |
| Hybrid proteins with cytochrome P450 activity and which are encapsulated in a nanocapsid (nanoparticles charged with cytochrome P450 activity) are designed and synthesized, these hybrid proteins being immunologically inert and recognized by breast cancer cells. | ||||||
| 14 | Process for oxidation of steroids and genetically engineered cells used therein | US09098877 | 1998-06-17 | US06632633B1 | 2003-10-14 | Herman Slijkhuis; Eric Bastiaan Smaal; Gerardus Cornelis Maria Selten |
| An expression cassette, operable in a recombinant host, comprising a heterologous DNA coding sequence encoding a protein, which is functional, alone or in cooperation with one or more additional proteins of catalyzing an oxidation step in the biological pathway, for conversion of cholesterol into hydrocortisone, which step is selected from the group consisting of: the conversion of cholesterol to pregnenolone; the conversion of pregnenolone to progesterone; the conversion of progesterone to 17&agr;-hydroxyprogesterone; the conversion of 17&agr;-hydroxyprogesterone to cortexolone; the conversion of cortexolone to hydrocortisone, and the corresponding control sequences effective in that host. | ||||||
| 15 | Expression cassette operable in a recombinant host | US418085 | 1995-04-06 | US5869283A | 1999-02-09 | Herman Slijkhuis; Eric Bastiaan Smaal; Gerardus Cornelis Maria Selten |
| An expression cassette, operable in a recombinant host, comprising a heterologous DNA coding sequence encoding a protein, which is functional, alone or in cooperation with one or more additional proteins, of catalyzing an oxidation step in the biological pathway for conversion of cholesterol into hydrocortisone, which step is selected from the group consisting of:the conversion of cholesterol to pregnenolone;the conversion of pregnenolone to progesterone;the conversion of progesterone to 17.alpha.-hydroxy-progesterone;the conversion of 17.alpha.-hydroxyprogesterone to cortexolone;the conversion of cortexolone to hydrocortisone, and thecorresponding control sequences effective in said host. | ||||||
| 16 | Cholesterol disposal fusion enzymes | US75193 | 1993-06-09 | US5547868A | 1996-08-20 | Walter L. Miller; Jennifer A. Harikrishna; Stephen M. Black |
| Fusion enzymes having multiple segments of different biological activity including one segment having P450scc activity and at least one segment having electron-transfer activity for transferring electrons to P450scc are described along with genetic constructs for production of such enzymes and methods for their use. Methods of their use include cholesterol degradation in vitro or in vivo as well as conversion of cholesterol to other useful steroidal products including pregnenolone. | ||||||
| 17 | Targeting the Steroidogenic Pathway For Treating and/or Preventing Allergic Diseases | US15348345 | 2016-11-10 | US20170191063A1 | 2017-07-06 | Erwin W. Gelfand; Meiqin Wang; Yi Jia |
| The present invention relates to methods and compositions for treating and/or preventing allergic diseases or conditions by inhibiting one or more components of the steroidogenic pathway. | ||||||
| 18 | Targeting the steroidogenic pathway for treating and/or preventing allergic diseases | US14160747 | 2014-01-22 | US09534221B2 | 2017-01-03 | Erwin W. Gelfand; Meiqin Wang; Yi Jia |
| The present invention relates to methods and compositions for treating and/or preventing allergic diseases or conditions by inhibiting one or more components of the steroidogenic pathway. | ||||||
| 19 | Yeast strains autonomously producing steroids | US10470673 | 2002-01-29 | US07670829B2 | 2010-03-02 | Roberto Spagnoli; Tilman Achstetter; Gilles Cauet; Eric Degryse; Bruno Dumas; Denis Pompon; Jacques Winter |
| The present invention relates to genetically modified yeast strains autonomously producing, from a simple carbon source, steroids. The invention also relates to a method for producing steroids from such yeast strains. | ||||||
| 20 | Process for oxidation of steroids and genetically engineered cells used therein | US10462128 | 2003-06-16 | US20040067579A1 | 2004-04-08 | Herman Slijkhuis; Eric Bastiaan Smaal; Gerardus Cornelis Maria Selten |
| An expression cassette, operable in a recombinant host, comprising a heterologous DNA coding sequence encoding a protein, which is functional, alone or in cooperation with one or more additional proteins, of catalyzing an oxidation step in the biological pathway for conversion of cholesterol into hydrocortisone, which step is selected from the group consisting of: the conversion of cholesterol to pregnenolone; the conversion of pregnenolone to progesterone; the conversion of progesterone to 17null-hydroxy-progesterone; the conversion of 17null-hydroxyprogesterone to cortexolone; the conversion of cortexolone to hydrocortisone, and the corresponding control sequences effective in said host. | ||||||
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