1 |
一种支持细胞分化为内耳毛细胞的方法及应用 |
CN201710624572.0 |
2017-07-27 |
CN107384852A |
2017-11-24 |
刘明录; 金海锋; 强邦明; 万磊; 韩庆梅; 冯建海; 张传鹏; 马洪华 |
本发明公开了一种支持细胞分化为内耳毛细胞的方法,其特征在于:将耳蜗上皮细胞,培养成单细胞,将单细胞加入含有表皮细胞生长因子、成纤维母细胞因子、胰岛素因子-1、糖原激酶抑制剂-3、丙戊酸、2-磷酸-L-抗坏血酸、ALK5抑制剂的扩增培养基,扩增支持细胞,获得Lgr5+细胞,将加入含有LY411575因子与糖原激酶抑制剂-3的诱导培养基,诱导分化培养10天,得到内耳毛细胞,诱导分化的内耳毛细胞进行基因水平和蛋白质水平的检测,确认为内耳毛细胞,该发明首先用含有因子的培养基促进支持细胞的分裂增殖;然后利用诱导培养基诱导支持细胞分化为内耳毛细胞,通过本方法诱导,能够获得高纯度、高比例的内耳毛细胞。 |
2 |
一种新型病毒体外三维培养模型的建立方法 |
CN201710527233.0 |
2017-06-30 |
CN107287148A |
2017-10-24 |
马荣华 |
本发明提供了一种新型病毒体外三维培养模型的建立方法,包括以下操作步骤:(1)微载体混悬液的准备;(2)细胞贴壁阻滞剂制备;(3)准备6孔板,将制备好的细胞贴壁阻滞剂均匀铺在6孔板里,静置风干,再将制备好的细胞以105/ml的浓度接种于6孔板中,再加入制备好的微载体混悬液,细胞液与微载体混悬液的比例为4:1,混匀后,放置于细胞培养箱内,3-4天等细胞三维结构成型后,即可进行病毒接种实验。该方法既能避免动物体内实验带来的高成本,又能最大程度的模拟动物体内生长模式,使所培养的细胞呈现立体生长方式,形成类似体内的组织结构,进而有助于模拟病毒体内的致病过程,该模型方法简便,成本低廉,推广方便。 |
3 |
一种支持HeLa细胞贴壁培养的无血清培养基 |
CN201710484816.X |
2017-06-23 |
CN107236708A |
2017-10-10 |
王晓柯 |
本发明公开了一种支持HeLa细胞贴壁培养的无血清培养基,由氨基酸、维生素、无机盐及其它添加物组成。本发明的支持HeLa细胞贴壁培养的无血清培养基,根据细胞体外生长的营养需求选择不同营养物质以替代动物血清所发挥的作用,并对不同营养物质的比例进行了合理调整。不需要补充血清就可以支持HeLa细胞贴壁生长,使其能够维持正常的细胞形态及正常的细胞生长速度。 |
4 |
一种离子液体诱导的CIK细胞及其应用 |
CN201710444235.3 |
2017-06-13 |
CN107236706A |
2017-10-10 |
胡攀勇; 胡鑫; 黄科 |
本发明公开了一种离子液体诱导的CIK细胞及其应用,所述离子液体为咪唑类离子液体,其阳离子N‑3位连接有6或8个直链式饱和碳原子,其阴离子为溴离子或氯离子。本发明提供了一种咪唑类离子液体用于CIK细胞培养以提高CIK细胞增殖活力和肿瘤杀伤活性,该离子液体与CIK细胞诱导培养后可以显著提高CIK细胞增殖活力和肿瘤杀伤活性。与现有技术相比,本发明技术方案非显而易见,且产生了意料不到的技术效果,具有突出的实质性特点和显著的进步。 |
5 |
一种高营养细胞扩大培养的方法 |
CN201710527029.9 |
2017-06-30 |
CN107217027A |
2017-09-29 |
曹先艳; 王文峰; 施亮 |
本发明提供了一种高营养细胞扩大培养的方法,用移液枪将培养基吸尽,加入3‑5ml PBS洗涤细胞2‑3次,向细胞培养皿中加入1‑2ml 0.38%的胰蛋白酶,于37℃条件下消化3‑5min,加入2‑3ml的新鲜培养基,使用移液枪吹打细胞培养皿底40‑50次;将液体移至细胞离心管中,在1000‑1500g/min条件下离心3‑10min,用移液枪去除上清液,加入2‑3ml新鲜培养基,使用移液枪上下吹打细胞40‑50次;平均加入到3‑8个细胞培养皿中,进行扩大培养。方法合理,易于实现,细胞生长速度快,细胞状态好,边界清晰,镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳,可以有利于生物与健康相关研究。 |
6 |
透细胞质膜的传递 |
CN201580068527.0 |
2015-10-23 |
CN107206015A |
2017-09-26 |
M·马奎尔; S·奥戴 |
有效装载穿过细胞质膜的传递包括提供细胞群,将细胞群与一定体积的水溶液相接触。所述水溶液包括有效装载和浓度大于百分之五的醇类。水溶液的体积可以是细胞群暴露表面积的函数,或者使细胞群中细胞数目的函数。这里还描述了有关的组合物、仪器、系统、技术和物品。 |
7 |
一种Vero细胞培养基 |
CN201710527163.9 |
2017-06-30 |
CN107151652A |
2017-09-12 |
马荣华 |
本发明提供了一种Vero细胞培养基,包括葡萄糖、碳酸氢钠、丙酮酸钠、人血白蛋白、氯化钾、无水硫酸镁、氯化钠、无水磷酸二氢钠、PHA‑植物血球凝集素、叶酸、肌醇、烟酰胺、无水氯化钙、硝酸铁、丁二酸、丁二酸钠、D‑泛酸钙、酒石酸胆碱、核黄素、盐酸硫胺、盐酸吡哆辛、还原谷胱甘肽、胆固醇、抗坏血酸磷酸酯、聚碳酸酯、酚红钠和去离子水。本发明所述的Vero细胞培养基,其组分合理,营养丰富,富含生长因子,可以为Vero细胞培养提供更多的营养物,细胞生长速度快,细胞状态好,边界清晰,镜下观察透亮、分裂相更多、形态及分散度佳,用于Vero细胞的培养以及研究。 |
8 |
一种提高自体脂肪隆胸术中脂肪细胞生存率的装置 |
CN201710466000.4 |
2017-06-19 |
CN107118944A |
2017-09-01 |
方育峰 |
本发明公开了一种提高自体脂肪隆胸术中脂肪细胞生存率的装置,包括:处理容器、进液管、储液桶、进气管、气泵,脂肪细胞生存率促进液由脂肪细胞生存促进剂溶解于DEME培养基水溶液制成,所述脂肪细胞生存促进剂包括以下重量百分比的原料:0.001‑0.01份的碱性成纤维细胞生长因子、0.001‑0.01份的血管内皮生长因子、0.01‑1.0份的谷胱甘肽、0.01‑1.0份的异抗坏血酸、0.1‑1.0份的乙酰辅酶A、0.01‑0.1份的转铁蛋白、100‑5000份的精氨酸、0.1‑1.0份的红景天甙、0.1‑1.0份的丹参酮ⅡA。本发明的一些实施方式中,与直接注射相比,术后两周胸围增加值和术后两周乳房隆起增加值均有显著性提高。而且术后三个月乳房隆起增加值减少较小。 |
9 |
一种培养杜仲细胞生产黄酮的培养基及其制备方法 |
CN201611237596.2 |
2016-12-28 |
CN106755165A |
2017-05-31 |
夏国顺 |
本发明属于植物细胞培养基技术领域,具体涉及一种培养杜仲细胞生产黄酮的培养基及其制备方法。本发明培养基包括基础培养基和添加在所述基础培养基中的添加剂,所述添加剂的成分以终浓度计,包括:甘油30‑50mg/L,烟酸0.05‑0.1mg/L,碘化钾2‑4mg/L,氨基乙酸0.3‑0.8mg/L,硫胺素3‑7mg/L,活性炭0.02‑0.1g/L,谷胱甘肽20‑50μg/L,木犀草素40‑80μg/L,胞嘧啶4‑10mg/L和萘乙酸9‑15mg/L。本发明提供的培养杜仲细胞生产黄酮的培养基,成分明确且价格较低,黄酮含量高,产量质量稳定,有利于日常应用、广泛推广及产业化培养。 |
10 |
一种适用于牙髓干细胞体外培养的培养基及其制备方法 |
CN201611210571.3 |
2016-12-24 |
CN106754678A |
2017-05-31 |
叶宗耀 |
本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种适用于牙髓干细胞体外培养的培养基及其制备方法。本发明适用于牙髓干细胞体外培养的培养基,包括基础培养基和添加在所述基础培养基中的添加剂,所述添加剂的成分以终浓度计,包括:过氧化氢酶3‑5mg/L,辅酶Q10 0.2‑0.4μM,亚麻酸7‑9μM,血小板衍生生长因子1‑3μg/L,葫芦素B0.2‑0.6mg/L,硫辛酸0.12‑0.15mg/L,叶酸12‑15μM,羧甲基壳聚糖0.5‑1g/L,表皮生长因子8‑10μg/L,牛磺酸7‑10mg/L和贴壁材料22‑30μg/L。本发明提供的培养基安全性高,价格较低,能够显著提高牙髓干细胞的扩增速度。 |
11 |
一种诱导长春花细胞分泌长春质碱的合成培养基 |
CN201611028177.8 |
2016-11-15 |
CN106754628A |
2017-05-31 |
夏雪城; 裘先临; 马丹 |
本发明提供了一种诱导长春花细胞分泌长春质碱的合成培养基,该培养基含有MS培养基的成分,同时还含有植物激素2.4‑D 2mg/L,植物激素KT 1mg/L,色氨酸50mg/L,辅酶A 3mg/L,萘普生8.4mg/L、阿司匹林0.3mg/L、布洛芬5.0mg/L。在此基础上,本发明尝试通过添加植物提取的方式以提升培养效果,具体来看,以物理压榨的方式获取玳玳花、灯盏细辛、丁香罗勒、独定子等新鲜中草药中的液体成分,直接加入至上述配方的培养基中,取得了良好的培养效果,细胞生长速度和终密度得到显著提升,同时长春质碱的分泌量也明显增长。本发明以创新性的技术改进实现了良好的技术效果,同时其成本较低、易于实现。 |
12 |
一种干细胞培养基及其制备方法 |
CN201611209708.3 |
2016-12-23 |
CN106635957A |
2017-05-10 |
叶宗耀 |
本发明属于细胞培养基技术领域,具体涉及一种干细胞培养基及其制备方法。本发明提供的干细胞培养基包括基础培养基和添加剂,所述添加剂的成分以终浓度计,包括:人血白蛋白1‑3mg/mL,转铁蛋白8‑13μg/mL,胰高血糖素0.12‑0.15μg/mL,活性炭2.5‑3μg/mL,成纤维细胞生长因子13‑18ng/mL,表皮生长因子7‑11ng/mL,亚油酸3‑6μM,槲皮素5‑9μg/mL,桔梗皂苷D20‑25μg/mL,昆布氨酸2‑5mg/mL,腺苷脱氨酶3‑7μg/mL,肉豆蔻酸1.2‑1.6μM。本发明提供的干细胞培养基能快速扩增干细胞,大大缩短了干细胞培养的时间。 |
13 |
一种成纤维细胞培养基及其制备方法 |
CN201611210539.5 |
2016-12-24 |
CN106520673A |
2017-03-22 |
严志海 |
本发明属于细胞培养技术领域,具体涉及一种成纤维细胞培养基及其制备方法,本发明培养基主要由以下成分及其浓度组成:基础培养基10-20g/L,重组白蛋白1-15g/L,柠檬酸铁铵0.1-5mg/L,环庚三烯酚酮2-15μM,硫酸皮肤素0.1-1mg/L,卵磷脂2-15g/L,黄芪多糖1-20mg/L,胰岛素5-15mg/L,地塞米松0.05-5μg/L,谷氨酰胺3-8mM,亚硒酸钠3-7.5μg/L,维生素E 3-17mg/L。本发明培养基能够促进成纤维细胞生长和贴壁。 |
14 |
马铃薯原生质体的高效分离、转化及再生的方法及其专用培养基 |
CN201611099745.3 |
2016-12-05 |
CN106520666A |
2017-03-22 |
冉毅东; 高崑; 张康 |
本发明公开了一种马铃薯原生质体的高效分离、转化及再生的方法及其专用培养基,以马铃薯试管苗茎段为起始材料,经过诱导及3次继代培养获得生长旺盛、结构疏松的胚性愈伤组织进行悬浮培养,采用纤维素酶、果胶酶和离析酶,对马铃薯悬浮细胞进行消化并利用密度梯度沉降的方法分离原生质体,获得了高纯度的原生质体。通过聚二乙醇介导将目的基因导入马铃薯原生质体基因组中,经液体浅层培养以及后续分化再生,培育出了大量马铃薯转基因植株。 |
15 |
一种无重组生长因子添加的精原干细胞培养体系及应用 |
CN201610976731.9 |
2016-11-07 |
CN106497869A |
2017-03-15 |
吴鑫; 贾媛媛; 薛园媛 |
一种无重组生长因子添加的精原干细胞培养体系及应用,包括成分明确的精原干细胞培养基和过表达生长因子GDNF的滋养层细胞。利用本发明方法,可以长期体外培养精原干细胞,通过移植实验验证其干细胞特性与传统培养方法所培养的精原干细胞无差异。与传统培养方法相比,无需添加任何昂贵的重组生长因子及胎牛血清,培养基成分十分清晰,重复性好。应用本发明方法所培养的精原干细胞具备完整的再生潜能和无限增殖的能力。本发明方法培养简便,经济且高效。 |
16 |
一种诱导黄芪细胞高产黄芪多糖的合成培养基 |
CN201611014541.5 |
2016-11-15 |
CN106479953A |
2017-03-08 |
夏雪城; 裘先临; 马丹 |
本发明提供了一种诱导黄芪细胞高产黄芪多糖的合成培养基,该培养基含有MS培养基的成分,同时还含有植物激素2.4-D 0.5mg/L,植物激素6-BA 1mg/L,水解酪蛋白100~150mg/L,茉莉酸甲酯10~20μmol/L,水杨酸0.1~0.5mg/L,过氧化氢10~50μl/L。在此基础上,本发明尝试通过添加植物提取的方式以提升培养效果,具体来看,以物理压榨的方式获取剪刀草、筋骨草、苦地胆、辣蓼草等新鲜中草药中的液体成分,直接加入至上述配方的培养基中,取得了良好的培养效果,细胞生长速度和终密度得到显著提升,同时黄芪多糖的分泌量也明显增长。本发明以创新性的技术改进实现了良好的技术效果,同时其成本较低、易于实现,因此具有良好的推广前景。 |
17 |
一种促进猪肠道隐窝细胞体外扩增的培养基及其培养方法 |
CN201610826211.X |
2016-09-18 |
CN106367382A |
2017-02-01 |
黎相广; 王修启; 高春起; 严会超; 朱敏; 周加义 |
本发明公开了一种促进猪肠道隐窝细胞体外扩增的培养基,其组成为:Advanced DMEM/F12培养液中含有100~200 ng/mL Wnt3a、1~2% N2、1~2% B27、0.5~1 mmol/L N-乙酰-半胱氨酸、1~2 mmol/L L-谷氨酰胺、5~10 μmol/L SB202190、0.5~1 μmol/L LY2157299、50~100 ng/mL EGF、100~200 ng/mL Noggin和500~1000 ng/mL R-Spondin 1;通过组分的筛选和含量的优化,该培养基能够成功用于猪肠道隐窝单细胞的体外培养,另外通过制备CDX2条件性培养基,优化其在猪肠道隐窝细胞培养中的用量和使用方法,以达到促进猪肠道隐窝细胞体外扩增的目的。 |
18 |
诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化的培养方法 |
CN201610895792.2 |
2016-10-14 |
CN106350483A |
2017-01-25 |
李亚平; 王晶; 谷广其; 邱丽媛; 房芳; 熊开宇; 何辉; 吴志宏; 赵进军; 何文丽 |
本发明涉及一种诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化的培养方法。为解决现有技术分化率低问题。步骤有:1)、脂肪间充质干细胞原代细胞的分离:2)、脂肪间充质干细胞扩增、传代:3)、P5代脂肪干细胞向软骨细胞分化培养:脂肪间充质干细胞在传P5代后加入条件培养基,即脂肪间充质干细胞向软骨分化培养基,进行向软骨细胞分化培养,每三天进行细胞换液,同时观察了细胞的形态学变化,诱导16天后进行阿利新蓝染色鉴定脂肪间充质干细胞成软骨分化情况。阿利新兰染色鉴定是显微镜下可见软骨细胞形成,且阿利新蓝染色呈阳性。具有简单易行,诱导培养基为无血清培养系统,诱导时间短,实验重复性好,成骨细胞分化率高的特点。 |
19 |
一种DC细胞无血清培养基 |
CN201610634236.X |
2016-08-04 |
CN106244544A |
2016-12-21 |
武宁; 谢志明 |
本发明涉及一种DC细胞无血清培养基及其配制方法,该配制方法包括将脂肪酸负载到无脂肪酸白蛋白上后,再将所获得的白蛋白溶液添加到基础培养基中,由此获得的DC细胞无血清培养基成分更稳定,功能一致性更好,不会因白蛋白的种属来源或加工批次的差异有所不同。 |
20 |
一种提高刺葡萄细胞培养物花青素含量的方法 |
CN201610633503.1 |
2016-08-04 |
CN106244515A |
2016-12-21 |
赖呈纯; 范丽华; 黄贤贵; 潘红 |
本发明提供一种提高刺葡萄细胞培养物花青素含量的方法,步骤为:将前代继代培养20天的细胞,选取继代培养过程中稳定显示紫红色的刺葡萄细胞系,挑取表层略带部分里层的细胞作为接种的材料,接种到未添加KT的培养基中培养20天,作为高含量花青素细胞接种的起始材料;再从起始材料中挑取表层略带部分里层的细胞作为接种的材料,接种到高含量花青素诱导的培养基中培养,并于温度25±1℃,先在弱光或黑暗下培养3天,后每天光照12h的条件下继续培养32天,即得高花青素含量的刺葡萄细胞培养物。本发明不仅能够快速获得大量刺葡萄细胞培养物,且所获得的刺葡萄细胞培养物具有高含量花青素,从而为刺葡萄细胞规模化培养生产天然花青素奠定了良好的基础。 |