盐藻培养基、半连续培养方式及藻液中原生动物杀灭方法
专利汇可以提供盐藻培养基、半连续培养方式及藻液中原生动物杀灭方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种盐藻半连续培养方式及藻液中 原生动物 污染的消除方法，涉及海洋微藻养殖领域。盐藻的培养传统上使用f/2培养液配方，生长速度慢，产量低。使用优化培养基培养盐藻生长速度快、β-胡萝卜素含量高、成本低，产量能够提高76％。塑料 薄膜 悬浮吊带培养代替传统的开放 水 泥池培养盐藻，易于操作、不易污染、易于掌控、灵活多样、不易划破、安全可靠，透光性好，成本低，生长快，产量高。按每升藻液加入0.6克(NH4)2CO3的量加入(NH4)2CO3，处理藻液12小时能有效杀灭藻液中的尖鼻虫、游仆虫、纤毛虫、 变形 虫等原生动物，而且操作简便，对盐藻细胞伤害很小。，下面是盐藻培养基、半连续培养方式及藻液中原生动物杀灭方法专利的具体信息内容。
1.一种盐藻培养基，其特征在于该盐藻培养基配方如下：
NH4NO3 40毫克，KH2PO4 1.2毫克，NaHCO3 450毫克，九二0植物生长刺激素(即赤霉素)6国际单位，f/2维生素溶液1毫升，f/2微量元素溶液1毫升，人尿2毫升，海泥抽取液
5毫升，消毒海水1000毫升；其中f/2微量元素溶液配方：ZnSO4·4H2O 23毫克，MnCl2·4H2O
178毫克，CuSO4·5H2O 10毫克，FeC6H5O7·5H2O 3.9克，Na2MoO4·2H2O 7.3毫克，CoCl2·6H2O
12毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f/2维生素溶液配方：维生素B12 0.5毫克，维生素B1 100毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升。
2.如权利要求1所述的盐藻培养基，其特征在于将人尿替换为腐化鱼汁2毫升。
3.如权利要求1所述的盐藻培养基的半连续培养方法，其特征在于包括如下步骤：
采用长度450厘米、周长200厘米的农用聚乙烯透明塑料薄膜袋培养，两头分别用纱布扎口；一端扎入1根充气管，末端连2个散气石，作散气用；塑料袋另一端扎入一根长约20厘米，直径6厘米的聚乙烯硬管，作出气管，此袋即为培养藻的容器；将此袋漂浮在盛有普通海水的水泥池中，水泥池长×宽×深＝600厘米×400厘米×85厘米，塑料袋两端扎好后，用绳吊起，以防袋口沉入水中，向袋中加入0.8-1.4立方米的培养液并接入藻种，即可进行培养。每池吊袋6-8个；饱和卤水取自内陆盐湖，用蒸馏水稀释至盐度120‰，用次氯酸钠消毒法消毒，方法是1立方米海水中加入漂白液200-300mL，使海水中有效氯含量达到10-20mg/L，充气8-12小时后，用硫代硫酸钠中和余氯，硫代硫酸钠量由余氯的多少来确定，直到滴入淀粉碘化钾液不变色为止，按权利要求1所述的培养基配方加入营养盐，选纯种的对数生长期藻种接种，即生长良好、生活力旺盛、色泽鲜艳、无沉淀及无明显附壁现象
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的藻种，镜检无其它杂藻、原生动物等。接种密度3×10-4×10cell/mL，室外培养，自然光照射，温度28±3℃，光强5000-10000lx为最佳，气泵充入空气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可，充气管末端连两个气石。夜间停止充气，白天行间隔充气，即充气1小时，
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停1小时，重复进行。培养4-6天，密度达60×10-120×10cell/mL，采收藻液的1/3，补加相同体积的新鲜培养基，继续培养，48小时后再采收藻液的1/3，补加相同体积的新鲜培养基，继续培养，如此循环进行，5-7个循环周期后即可全部采收。
4.使用如权利要求1所述盐藻培养基的藻液中原生动物杀灭方法，其特征在于：当培养基使用了10天以上时，藻液中会出现很多纤毛虫等原生动物，这时按每升藻液加入0.6克(NH4)2CO3的量加入(NH4)2CO3，连续充气4小时，使之充分溶解并混合均匀，这时藻液中会出现大量沉淀，停止充气，静置8小时，弃去沉淀物，将上清液移入到另一洁净的培养容器中，加入4-5倍体积的新鲜培养液继续培养。
盐藻培养基、半连续培养方式及藻液中原生动物杀灭方法
技术领域
背景技术
我国具有漫长的海岸线和众多的内陆盐湖，具有培养盐藻生产β-胡萝卜素得天独厚的自然条件。
在藻细胞的氮代谢中，氮必须以NH4 的形式与细胞内的碳水化合物衍生的酮酸作用生成氨基酸，再合成蛋白质。已经证实许多藻含有尿素酶，在它的催化作用下，尿素分解出氨被微藻利用，酶功能的差异是造成各种微藻利用尿素能力差异的主要原因。孙凌毅指出微藻对铵盐和尿素的利用强于硝酸盐。张贵杰等研究指出培养牟氏角毛藻以尿素效果最好，硝酸钠次之，氯化铵最差。张青田等认为以尿素为氮源培养隐藻效果强于氯化铵。本人研究证实2-5mL的尿液对盐藻生长有较好促进作用。
HCO3 作为碳源。NaHCO3不仅缩短了盐藻的倍增时间，而且延长了盐藻的生长时间。我的实验表明，添加适量的NaHCO3和海泥抽取液及f/2维生素溶液能大大提高生长速度，盐藻的产量能提高76％。
藻的密度被限制在30×10cell/mL以下(正常密度为70×10-90×10cell/mL)。研究发现，在较低的盐度(60-120‰)下盐藻生长最快，在这种盐度下，污染原生动物的种类和数量更多。因此，在盐藻的规模生产中，如何防治原生动物特别是变形虫造成的污染已成为一个亟待解决的问题。虽然较高浓度的(NH4)2CO3对盐藻和原生动物都有毒害作用，抑制其生长繁殖或直接将其杀死，但我的研究发现，与盐藻相比，原生动物对(NH4)2CO3更敏感，更易被杀死，这正是本发明的理论基础。(NH4)2CO3加入到培养基中发生电离并形成水解平衡[0009] (NH4)2CO3→2NH4++CO32+
我的研究表明，用0.6g/L的(NH4)2CO3处理培养基12小时对杀灭原生动物有极好效果。
发明内容
镜检无其它杂藻、原生动物等。接种密度3×10-4×10cell/mL，室外培养，自然光照射，温度28±3℃，光强5000-10000lx为最佳，气泵充入空气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可，充气管末端连两个气石。夜间停止充气，白天行间隔充气，即充气1小时，停1小
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时，重复进行。培养4-6天，密度达60×10-120×10cell/mL，采收藻液的1/3，补加相同体积的新鲜培养基，继续培养，48小时后再采收藻液的1/3，补加相同体积的新鲜培养基，继续培养，如此循环进行，5-7个循环周期后即可全部采收。
0.6g/L的(NH4)2CO3处理藻液12小时能有效杀灭藻液中的尖鼻虫、游仆虫、纤毛虫等原生动物，而且操作简便，对盐藻细胞伤害很小。
附图说明
具体实施方式
镜检无其它杂藻、原生动物等。接种密度3×10-4×10cell/mL，室外培养，自然光照射，温度28±3℃，光强5000-10000lx为最佳，气泵充入空气，充气量不宜太大，以藻细胞浮起不下沉即可，充气管末端连两个气石。夜间停止充气，白天行间隔充气，即充气1小时，停1小
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时，重复进行。培养4-6天，密度达60×10-120×10cell/mL，采收藻液的1/3，补加相同体积的新鲜培养基，继续培养，48小时后再采收藻液的1/3，补加相同体积的新鲜培养基，继续培养，如此循环进行，5-7个循环周期后即可全部采收。
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