技术领域
[0001] 本
发明涉及中兽药领域，具体涉及一种提高动物抵抗力的组合物、应用及其制备方法。
背景技术
[0002] 免疫抑制是临床多见的病理现象，对养殖业危害严重，是动物
机体在单一或多种对机体不利因素的作用下，免疫系统受损，导致机体免疫应答功能暂时性或持久性紊乱，易感染
疾病，常被称为免疫抑制综合征。免疫抑制疾病多由免疫抑制性病毒引起，有
猪瘟病毒、猪
圆环病毒-2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒等，这些病毒均能引起免疫系统的破坏，导致免疫抑制；此外，许多化学药物、细胞毒素及某些抗生素对免疫功能都有抑制作用。
[0003] 目前对免疫抑制性综合症的
治疗一般采用提前接种
疫苗的方法，使动物机体获得抵御某种疾病的抵抗力，从而减少发病；但是，疫苗的使用不但成本高，不方便使用，而且一些疫苗佐剂或弱毒疫苗也会对动物造成几周的免疫抑制；此外，一种疫苗只能刺激动物机体获得对一种疾病的体抗力，对动物的多种免疫抑制性疾病匹配度不高。所以研制出从提高动物自身抵抗力出发，增强动物对免疫抑制性疾病的抵抗力的药物是非常关键的。
发明内容
[0004] 有鉴于此，本
申请提供一种提高动物抵抗力的中兽药组合物、应用及其制备方法。按照益气养阴的指导原则，选用黄芪、女贞子、杜仲配伍，达到从整体上提高动物抵抗力的效果，以治疗动物的免疫抑制性疾病。
[0005] 为解决以上技术问题，本发明提供以下四个方面的技术方案：
[0006] 第一方面，提供一种提高动物抵抗力的中兽药组合物，
原料药材由黄芪、女贞子、杜仲组成，原料药材按重量份数计为：黄芪9—18份，女贞子9—18份，杜仲9—18份。
[0007] 优选的，原料药材按重量份数计为：黄芪18份，女贞子9份，杜仲9份。
[0008] 优选的，所述原料药材中，黄芪的粒径范围为500—800目。
[0009] 第二方面，提供一种提高动物抵抗力的中兽药组合物在制备治疗免疫抑制性疾病的药物中的应用。
[0011] 优选的，所述免疫抑制性疾病为
猪圆环病毒-2型感染。
[0012] 第三方面，提供一种提高动物抵抗力的中兽药组合物的制备方法，包括如下工艺流程：
[0013] (1)取黄芪、女贞子、杜仲药材适量，分别使用万能
粉碎机粉碎至80目，烘干，使各粗粉药材的
水分控制在6％—8％；
[0014] (2)使用低温
超微粉碎机，在
温度为-10℃—-20℃条件下，将步骤(1)中的黄芪粗粉粉碎至粒度为100—800目粒度的超微粉；
[0015] (3)取适量步骤(1)中的女贞子和杜仲粗粉混合，用20倍量水煎煮两次，过滤，混合滤液浓缩至2g/mL(按原生药计)，最后将浓缩液和黄芪超微粉以一定比例混合，制粒后烘干，过80目筛，即得。
[0016] 优选的，步骤(2)中将黄芪粗粉粉碎至粒度为500—800目粒度的超微粉。
[0017] 第四方面，提供一种提高动物抵抗力的中兽药组合物的散剂，其是由黄芪、女贞子、杜仲三种药材以一定比例混合后经超微粉碎后制得。
[0018] 本申请还提供一种提高动物抵抗力的中兽药组合物的颗粒剂，其是由黄芪、女贞子、杜仲三种药材经提取后制得，具体方法是：取黄芪、女贞子、杜仲混合药材适量，使用70％的
乙醇回流提取1h，过滤，药渣用10倍量水提取3次，每次1h，混合醇提取液和水提取液，用
旋转蒸发仪浓缩至稠膏，按照稠膏乳糖(1：3)混合，50℃干燥即得本申请组合物颗粒剂。
[0019] 本申请与
现有技术相比，其详细说明如下：黄芪有增强机体免疫功能、抗应激和较广泛的抗菌作用；杜仲具有清除体内垃圾，广谱抗菌，免疫促进功能，有细胞免疫的双向调整作用；女贞子具有滋补肝肾、益阴养血、免疫增强的功效，对淋巴细胞产生白介素-2的影响具有双向调节作用。本申请根据中医学理论，按照益气养阴的指导原则，将以上三种药材配伍，能互补药性和药效，大大增强动物抵抗力，消除免疫抑制因素，以达到治疗免疫抑制综合症的效果；此外，使用超微粉碎和提取技术的结合，增加有效成分的溶出，减少药材用量；同时有利于兽医临床的饮水
给药，生产方法简单，对环境友好，药效
质量可靠。
具体实施方式
[0020] 为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合具体
实施例对本发明作进一步的详细说明。
[0021] 实施例一
[0022] 本申请组合物原料药材选择、配比优选实验
[0023] 一、药物制备
[0024] 取黄芪、女贞子、杜仲药材适量，分别使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使各粗粉药材的水分控制在6％—8％；使用低温超微粉碎机，在温度为-10℃—-20℃条件下，将黄芪粗粉粉碎至粒度为500目粒度的超微粉；取适量女贞子和杜仲粗粉混合，用20倍量水煎煮两次，过滤，混合滤液浓缩至2g/mL(按原生药计)，最后将浓缩液和黄芪超微粉以一定比例混合，制粒后烘干，过80目筛，即得。
[0025] 按上述方法制备以下不同原料药材重量份数的组合物并编号：
[0026] A：黄芪9份、女贞子9份、杜仲9份；
[0027] B：黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份；
[0028] C：黄芪18份、女贞子18份、杜仲9份；
[0029] D：黄芪9份、女贞子18份、杜仲9份；
[0030] E：黄芪9份、女贞子18份、杜仲18份。
[0031] 分别取黄芪9份，18份，分别使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使粗粉的水分控制在6％—8％；使用低温超微粉碎机，在温度为-10℃—-20℃条件下，将黄芪粗粉粉碎至粒度为500目粒度的超微粉；将所制得的黄芪超微粉分别编号为F、G。
[0032] 分别取女贞子、杜仲各9份，18份，分别使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使粗粉的水分控制在6％—8％；分别用20倍量水煎煮两次，过滤，混合滤液浓缩至2g/mL(按原生药计)即得。将所制药材浓缩液分别编号为H、I、J、K。
[0033] 二、动物实验
[0034] (1)取预备饲养的小鼠260只，随机平均分为13组，即1组对照组、1组模型组、11组实验组(A—K)；
[0035] (2)模型组和各实验组用环磷酰胺150mg/kg.W
腹腔注射连续两天造模，实验组于造模首日开始灌服给药，按照总药量3g/kg.W给药，对照组每只灌服生理盐水0.4mL。实验过程中保持适宜的温度和光照；
[0036] 其中，mg/kg表示毫克环磷酰胺/千克动物体重，g/kg表示克总药量/千克动物体重。
[0037] (3)各组于给药7天后分别测定小鼠的体重、脾指数、胸腺指数、外周血白细胞总数、
碳粒的廓清率以及白介素-2的量。
[0038] 表1 实施例一动物实验结果
[0039]
[0040]
[0041] 注：*与模型组比较差异显著P<0.05
[0042] 实验结果表明，环磷酰胺对小鼠免疫系统的抑制作用很明显，各实验组均能在不同程度上恢复和改善小鼠受到环磷酰胺抑制的免疫系统功能，从上表各数据指标来看，黄芪、女贞子、杜仲三种药材的组合物，其恢复免疫系统各指标的效果比单一的黄芪、女贞子、杜仲药材要好的多，这说明黄芪、女贞子、杜仲的配伍能够达到互补药效，增强抵抗力的效果。而比较不同配比的三种药材组合物，可以发现，B组，也即黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份的效果最好，能将小鼠受到环磷酰胺抑制的免疫系统各指标恢复到接近正常水平。也即，本申请在药材选择和配比上的优选方案为三种药材的组合物，其中黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份。
[0043] 实施例二
[0044] 本申请组合物的原料药材中黄芪的粒度范围的优选实验
[0045] 一、组合物制备
[0046] 取黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份，分别使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使各粗粉药材的水分控制在6％—8％；使用低温超微粉碎机，在温度为-10℃—-20℃条件下，将黄芪粗粉粉碎至粒度为100—800目粒度的超微粉；取女贞子和杜仲粗粉混合，用20倍量水煎煮两次，过滤，混合滤液浓缩至2g/mL(按原生药计)，最后将浓缩液和黄芪超微粉以一定比例混合，制粒后烘干，过80目筛，即得。
[0047] 按上述方法分别制备含有不同黄芪粒度范围的超微粉的组合物，其中黄芪粒度范围分别为100—300目、300—500目、500—800目，将三种组合物分别编号为A、B、C。
[0048] 二、动物实验
[0049] (1)取预备饲养的小鼠100只，随机平均分为5组，即1组对照组、1组模型组、3组实验组(A、B、C)；
[0050] (2)模型组和各实验组用环磷酰胺50mg/kg腹腔注射连续两天造模，实验组于造模首日开始灌服给药，按照总药量3g/kg给药，对照组每只灌服生理盐水0.4mL。实验过程中保持适宜的温度和光照；
[0051] 其中，mg/kg表示毫克环磷酰胺/千克动物体重，g/kg表示克总药量/千克动物体重。
[0052] (3)各组于给药7天后分别测定小鼠的体重、脾指数、胸腺指数、外周血白细胞总数、碳粒的廓清率以及白介素-2的量。
[0053] 表2 实施例二动物实验结果
[0054]
[0055]
[0056] 注：*与模型组比较差异显著P<0.05
[0057] 实验数据表明，A、B、C三个实验组的组合物均能在不同程度上恢复小鼠受到环磷酰胺抑制的免疫系统的各个指标，比较各组数据，可以看出，C组组合物，即含有黄芪500—800目超微粉的组合物，其恢复各项指标的效果是最好的，与正常组比较，各项指标相差很小。这说明黄芪通过超微粉碎处理，能发挥其最好的药效，而粒度越细小，其与女贞子和杜仲的浓缩液融合越好，三种药材互补药效，能发挥本方最好的效果。
[0058] 实施例三
[0059] 本申请组合物对猪圆环病毒-2型感染的防治疗效实验
[0060] 一、药物制备
[0061] 根据实施例一所述的组合物的制备方法，其中黄芪18份、女贞子9份、杜仲9份，其中黄芪超微粉粒度范围为500—800目，将制得的组合物编号为A。
[0062] 取黄芪18份，使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使粗粉的水分控制在6％—8％；使用低温超微粉碎机，在温度为-10℃—-20℃条件下，将黄芪粗粉粉碎至粒度为500—800目粒度的超微粉；将所制得的黄芪超微粉编号为B。
[0063] 分别取女贞子9份、杜仲9份，分别使用万能粉碎机粉碎至80目，烘干，使粗粉的水分控制在6％—8％；分别用20倍量水煎煮两次，过滤，混合滤液浓缩至2g/mL(按原生药计)即得。将所制药材浓缩液分别编号为C、D。
[0064] 二、动物实验
[0065] 于崇州中型猪场实验，该场存在
硬件设备较差，专业技术人员配置不齐全，免疫程序混乱，保健药物投喂不合理等情况，其断奶仔猪长期处于发病状态，生长状况较差。发病的断奶仔猪主要表现为生长迟缓，精神欠佳，全身被毛粗乱，消瘦，
皮肤苍白，气喘，呼吸困难，部分猪出现腹泻，部分猪腹部皮下有陈旧性出血点。无菌采取病死猪
肺脏、淋巴结等组织样品，
研磨后进行实验室检测。综合临床症状和实验室结果，诊断为猪圆环病毒-2型感染。
[0066] 1、本申请组合物给药用量对猪圆环病毒-2型感染的防治疗效的影响实验[0067] 将组合物平均分为3组，分别编号为A1、A2、A3，装袋备用。
[0068] 随机选取体重相近的发病猪75头，分为5组，分别为对照组、黄芪多糖组、A1组、A2组、A3组。分组后，称定平均体重，分开饲养，A1组、A2组、A3组分别按照
饲料重量的1％、2％、3％拌料给药，连续一周，逐日记录腹泻和死亡情况。给药结束后，称定平均体重，并采取颈静脉血，分离血清测定干扰素-γ(IFN-γ)和猪瘟
抗体的效价。
[0069]
[0070] 注：*与对照组比较差异显著P<0.05
[0071] 2、本申请组合物药材选择与配比对猪圆环病毒-2型感染的防治疗效影响实验[0072] 随机选取体重相近的发病猪90头，分为6组，分别为对照组、黄芪多糖组、A—D组。分组后，称定平均体重，分开饲养，药物按照饲料重量2％拌料给药，连续一周，逐日记录腹泻和死亡情况。给药结束后，称定平均体重，并采取颈静脉血，分离血清测定干扰素-γ(IFN-γ)和猪瘟抗体的效价。
[0073] 其中黄芪多糖来源于市售某厂家的黄芪多糖散，是黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的
水溶性杂多糖，是黄芪发挥作用的主要成分。
[0074] 表3 实施例三动物实验结果
[0075]
