技术领域
[0001] 本
发明涉及一种人类松弛素-2的药物制剂，特别涉及一种人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂。
背景技术
[0002] 人类松弛素-2，通常简称为RLN2，药物名称也被命名为Relaxin，即松弛肽，是在人体内发现的一种多肽
激素。人类松弛素-2由两条链组成，A链含24个
氨基酸且存在链内二硫键，B链含29个氨基酸，A链与B链通过两个二硫键相连，其结构式如下所示：
[0003]
[0004] 其中pGlu为焦谷氨酸，Tyr为酪氨酸，Ser为丝氨酸，Asn为天冬酰胺，Cys为半胱氨酸，His为组氨酸，Val为缬氨酸，Gly为甘氨酸，Thr为苏氨酸，Lys为赖氨酸，Arg为精氨酸，Leu为亮氨酸，Phe为苯丙氨酸，Asp为天冬氨酸，Trp为
色氨酸，Met为蛋氨酸，Glu为谷氨酸，Ile为异亮氨酸，Ala为丙氨酸，Gln为谷酰胺。
[0005] 近年来的一系列研究发现，人类松弛素-2对心
力衰竭等心
血管疾病具有显著的
治疗作用，能够扩张体循环血管、扩张肾脏血管并增加动脉
顺应性。美国
专利US5166191已公开了人类松弛素用于治疗心
血管疾病尤其是急性和慢性心力衰竭的方法专利，中国专利文献CN1052655C(
申请号89100947.7，申请日1989.02.25，
优先权日1988年2月26日)公开了一种用于调节
哺乳动物生殖生理的含人类松弛素的液体制剂。但该药物制剂均未得到应用。
[0006] 作为多肽类药物，人类松弛素-2具有该类药物普遍的特点，即口服
生物利用度低，易被体内各种酶类降解破坏，并且
稳定性低，易降解和变性。因此，与其他
蛋白质多肽类药物相似，人类松弛素-2不适于口服
给药，而人类松弛素-2分子量较大，氨基酸残基个数多于胰岛素，且存在三个二硫键，其结构复杂程度远大于已上市的多肽药物，其稳定性也较低，对光、热、湿、
氧化剂、强酸、强
碱敏感，普通注射制剂的稳定性较差。
[0007] 注射用冻干粉可在一定程度上提高多肽药物的稳定性，但是1996年药学科学杂志(Journal of Pharmaceutical Science)公开的文献(Effects of reducing sugars on the chemical stability of human relaxin in the lyophilized state.1996年第85卷第8期第873-877页)表明，人类松弛素-2本身易与多种常用冻干保护剂发生反应，导致氨基酸残基发生变化或使肽链从特定肽键断裂。使得其一级结构发生改变，化学稳定性降低，从而影响其生物活性。冻干过程中人类松弛素-2的构象也会遭到破坏，而构象的破坏会导致人类松弛素-2空间结构生物活性完全丧失。另外，人类松弛素-2冻干粉制剂冻干品外观不饱满易于塌陷，溶解后往往短时间内就出现乳光现象。因此，目前并没有一种行之有效的能够提高人类松弛素-2稳定性和生物利用度的技术。
发明内容
[0008] 针对上述
现有技术，本发明的目是提供一种能够提高人类松弛素-2的稳定高的药物制剂，即：人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂。
[0009] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
[0010] 一种人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂，由人类松弛素-2和医学上可接受的药用辅料组成，其中，医学上可接受的药用辅料与人类松弛素-2的
质量比为(0.2-1.5)∶1；所述医学上可接受的药用辅料选自甘露醇、海藻糖、聚乙烯吡咯烷
酮、十二烷基-β-D-麦芽糖苷、羟丙基-β-环糊精、
磷酸钙、
碳酸锌中的一种或多种。
[0011] 所述医学上可接受的药用辅料与人类松弛素-2的质量比优选的为(0.3-0.8)∶1。
[0012] 所述医学上可接受的药用辅料优选为海藻糖和磷酸钙，其中海藻糖和磷酸钙的质量比为3∶(0.7-1.2)。
[0013] 所述医学上可接受的药用辅料优选为甘露醇、十二烷基-β-D-麦芽糖苷和碳酸锌，其中甘露醇、十二烷基-β-D-麦芽糖苷和碳酸锌的质量比为5∶(0.3-1.0)∶(0.7-1.5)。
[0014] 所述的人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂的制备方法，步骤为：
[0015] 1)配液：将人类松弛素-2与辅料混合，加入注射用
水，室温下搅拌溶解，用pH调节剂调节pH值至4.0-6.0，其中注射用水的用量为每克人类松弛素-2用注射用水200ml；
[0016] 2)脱色：按每100ml溶液加入0.03g针用活性碳的比例向步骤1)配制的溶液加入针用活性碳，室温下搅拌10～20分钟脱色，过滤除碳，测pH值或进一步地调节pH值，保证其在4.0-6.0，补加注射用水至规定量，然后用0.22μm微孔滤
膜过滤，分装于西林瓶，半压塞；
[0017] 3)冻干：
[0018] a、预冻：将分装于西林瓶的溶液迅速冷冻至-40℃，维持冷冻5小时；
[0019] b、一次干燥：抽
真空至10Pa-60Pa，然后以10℃/小时的升温速度升温至-10℃，恒温干燥6小时；
[0020] c、二次干燥：一次干燥后，以10℃/小时的升温速度升温至40℃；恒温干燥5小时，即得。
[0021] 上述制备方法中，所述步骤1)中，pH调节剂为常规的
磷酸盐缓冲液，所述步骤2)中，注射用水规定量为每1g人类松弛素-2用300ml注射用水。
[0022] 本发明的
发明人进行了大量制剂学及动物实验，研究表明，本发明的人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂稳定性良好，外观饱满，
加速试验条件不发生降解、聚集及构象改变，且体内安全性良好。本发明所采用吃的制备方法，预冻
温度、冻结时间、升温速度、干燥温度等搭配合理，工艺条件易控制，适于大规模工业化生产，并易于得到质量稳定的产品，批间差异小，便于质量控制。
具体实施方式
[0023] 下面结合
实施例对本发明作进一步的解释。应当理解的是，以下实施例仅用于解释本发明，而不是限制本发明的保护范围。
[0024] 实施例1制备人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂
[0025] 配方如下：
[0026] 人类松弛素-2 5g
[0027] 海藻糖 3g
[0028] 磷酸钙 0.9g
[0029] 制备方法如下：
[0030] 1)配液：将人类松弛素-2与辅料混合，加入注射用水1000ml，室温下搅拌溶解，用磷酸盐缓冲液调节pH值至4.0-6.0；
[0031] 2)脱色：按每100ml溶液加入0.03g针用活性碳的比例向步骤1)配制的溶液加入针用活性碳，室温下搅拌20分钟脱色，过滤除碳，测pH值或进一步地调节pH值，保证其在4.0-6.0，补加注射用水至1500ml，然后用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于西林瓶，半压塞；
[0032] 3)冻干：
[0033] a、预冻：将分装于西林瓶的溶液迅速冷冻至-40℃，维持冷冻5小时；
[0034] b、一次干燥：抽真空至20Pa，然后以10℃/小时的升温速度升温至-10℃，恒温干燥6小时；
[0035] c、二次干燥：一次干燥后，以10℃/小时的升温速度升温至40℃；恒温干燥5小时，即得。
[0036] 实施例2制备人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂
[0037] 配方如下：
[0038]
[0039] 制备方法如下：
[0040] 1)配液：将人类松弛素-2与辅料混合，加入注射用水1000ml，室温下搅拌溶解，用磷酸盐缓冲液调节pH值至4.0-6.0；
[0041] 2)脱色：按每100ml溶液加入0.03g针用活性碳的比例向步骤1)配制的溶液加入针用活性碳，室温下搅拌15分钟脱色，过滤除碳，测pH值或进一步地调节pH值，保证其在4.0-6.0，补加注射用水至1500ml，然后用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于西林瓶，半压塞；
[0042] 3)冻干：
[0043] a、预冻：将分装于西林瓶的溶液迅速冷冻至-40℃，维持冷冻5小时；
[0044] b、一次干燥：抽真空至50Pa，然后以10℃/小时的升温速度升温至-10℃，恒温干燥6小时；
[0045] c、二次干燥：一次干燥后，以10℃/小时的升温速度升温至40℃；恒温干燥5小时，即得。
[0046] 实施例3制备人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂
[0047] 配方如下：
[0048] 人类松弛素-2 5g
[0049] 海藻糖 3g
[0050] 磷酸钙 1.5g
[0051] 制备方法如下：
[0052] 1)配液：将人类松弛素-2与辅料混合，加入注射用水1000ml，室温下搅拌溶解，用磷酸盐缓冲液调节pH值至4.0-6.0；
[0053] 2)脱色：按每100ml溶液加入0.03g针用活性碳的比例向步骤1)配制的溶液加入针用活性碳，室温下搅拌20分钟脱色，过滤除碳，测pH值或进一步地调节pH值，保证其在4.0-6.0，补加注射用水至1500ml，然后用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于西林瓶，半压塞；
[0054] 3)冻干：
[0055] a、预冻：将分装于西林瓶的溶液迅速冷冻至-40℃，维持冷冻5小时；
[0056] b、一次干燥：抽真空至10Pa，然后以10℃/小时的升温速度升温至-10℃，恒温干燥6小时；
[0057] c、二次干燥：一次干燥后，以10℃/小时的升温速度升温至40℃；恒温干燥5小时，即得。
[0058] 实施例4制备人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂
[0059] 配方如下：
[0060]
[0061] 制备方法如下：
[0062] 1)配液：将人类松弛素-2与辅料混合，加入注射用水1000ml，室温下搅拌溶解，用磷酸盐缓冲液调节pH值至4.0-6.0；
[0063] 2)脱色：按每100ml溶液加入0.03g针用活性碳的比例向步骤1)配制的溶液加入针用活性碳，室温下搅拌20分钟脱色，过滤除碳，测pH值或进一步地调节pH值，保证其在4.0-6.0，补加注射用水至1500ml，然后用0.22μm微孔滤膜过滤，分装于西林瓶，半压塞；
[0064] 3)冻干：
[0065] a、预冻：将分装于西林瓶的溶液迅速冷冻至-40℃，维持冷冻5小时；
[0066] b、一次干燥：抽真空至30Pa，然后以10℃/小时的升温速度升温至-10℃，恒温干燥6小时；
[0067] c、二次干燥：一次干燥后，以10℃/小时的升温速度升温至40℃；恒温干燥5小时，即得。
[0068] 实施例5制备人类松弛素-2的注射用冻干粉制剂
