技术领域
[0001] 本
发明属于中药技术领域，涉及中药的检测方法，尤其是一种中药制剂小儿金丹的
质量控制方法。
[0002] 背景技术
[0003] 小儿金丹由朱砂、橘红、平贝母、胆南星、前胡、玄参、半夏(清)、大青叶、木通、桔梗、荆芥穗、羌活、西河柳、地黄、枳壳(麸炒)、赤芍、钩藤、葛根、
牛蒡子(炒)、天麻、甘草、防
风、
冰片、
水牛
角浓缩粉、羚羊角、薄荷组成，制备方法：以上二十六味，羚羊角锉研成细粉，水牛角浓缩粉、冰片研成细粉，朱砂水飞成极细粉；其余平贝母等二十二味，
粉碎成细粉，过筛；将羚羊角粉、水牛角浓缩粉、冰片、朱砂细粉与川贝母等粉末配研，过筛，混匀，每100g粉末加炼蜜120～140g制成大蜜丸，即得，主要功能：祛风化痰、清热镇惊，用于小儿感冒发烧、鼻塞流涕、咳嗽气喘、咽喉肿痛、高热惊风。
[0004] 目前国际上虽然尚无
植物类中药的国际标准，但是美国、欧盟、我国及传统出口中药的东南亚地区均有提高中药标准的趋势，在此情况下，需要提出适合我国产品质量的标准以适应国际标准，我国有数千年的中药使用历史，世界各国在制订相应的植物药产品质量标准中多参考我国的中药标准，所以完善、提高中药的质量标准更已经迫在眉睫。 [0005] 发明内容
[0006] 本发明的目的在于克服
现有技术的不足之处，提供一种能够定性、定量检测药物成分的中药制剂小儿金丹的质量控制方法，本方法具有检测手段简单、检测结果准确的特点。
[0007] 本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
[0008] 一种中药制剂小儿金丹的质量控制方法，步骤是：
[0010] (2)以前胡为对照药材，薄层色谱法鉴别小儿金丹
处方中是否含有前胡成分； [0011] (3)以枳壳为对照药材，以柚皮苷为对照品，薄层色谱法鉴别小儿金丹处方中是否含有枳壳成分；
[0012] (4)以葛根为对照药材，以葛根素为对照品，薄层色谱法鉴别小儿金丹处方中是否含有葛根成分；
[0013] (5)以防风为对照药材，5-O-甲基维斯阿米醇苷为对照品，薄层色谱法鉴别小儿金丹处方中是否含有防风成分；
[0014] (6)以柚皮苷为对照品，液相色谱法检测小儿金丹处方中柚皮苷的含量； [0015] (7)采用电位滴定法，测定小儿金丹处方朱砂中硫化汞的含量。
[0016] 而且，所述显微鉴别为将小儿金丹置
显微镜下观察：不规则细小颗粒暗棕红色，有光泽，边缘暗黑色；石细胞黄棕色或无色，类长方形、类圆形或形状不规则，直径约94μm；
草酸钙针晶成束，长100～144μm，存在于黏液细胞中或散在；联结乳管直径14～25μm，含淡黄色颗粒状物；油管含棕黄色分泌物，直径约100μm；草酸钙砂晶存在于薄壁细胞中，有时含晶细胞连接成行；
纤维成束，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；油管含金黄色分泌物，直径约
30μm；不规则碎片灰白色或灰黄色，稍具光泽，表面有灰棕色色素颗粒，并有不规则纵长裂缝。
[0017] 而且，所述薄层色谱法鉴别处方中的前胡成分的方法为：
[0018] (1)供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加
硅藻土3g，研细，加三氯甲烷40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液； [0019] (2)对照药材溶液的制备：取前胡对照药材1g，加三氯甲烷15ml，同上述供试品溶液制备方法制成对照药材溶液；
[0020] (3)薄层条件及结果：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚∶乙酸乙酯＝3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，检视供试品色谱中在与对照药材色谱相应的
位置上是否显示相同
颜色的
荧光斑点，进而确定供试样品中是否含有前胡成分。
[0021] 而且，所述薄层色谱法鉴别处方中的枳壳成分的方法为：
[0022] (1)供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
[0023] (2)对照药材溶液的制备：取枳壳对照药材1g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；
[0024] (3)对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
[0025] (4)薄层条件及结果：薄层色谱试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液10μl、对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯∶丁
酮∶
乙醇＝
12∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％三氯化
铝乙醇溶液，加热，置紫外光灯
254nm下及紫外光灯365nm检视，检视供试品色谱中在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点及荧光斑点，进而确定样品中是否含有枳壳与橘红成分。 [0026] 而且，所述薄层色谱法鉴别处方中的葛根成分的方法为：
[0027] (1)供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
[0028] (2)对照药材溶液的制备：取葛根对照药材1g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；
[0029] (3)对照品溶液的的制备：取葛根素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
[0030] (4)薄层条件及结果：薄层色谱试验，吸取上述供试品溶液、对照药材溶液各10μl，对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝7∶2.5∶0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，检视供试品色谱中在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的荧光斑点。
[0031] 而且，所述薄层色谱法鉴别处方中的防风成分的步骤为：
[0032] (1)供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加
硅藻土3g，研细，加丙酮40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液； [0033] (2)对照药材溶液的制备：取防风对照药材1g，加丙酮10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；
[0034] (3)对照品溶液的制备：取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
[0035] (4)薄层条件及结果：薄层色谱试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇＝4∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视，检视供试品色谱中在与对照药材及对照品色谱相应的位置上是否显相同颜色的斑点，进而确定供试样品中是否含有防风成分。
[0036] 而且，所述以柚皮苷为对照品，液相色谱法检测处方中柚皮苷的含量的方法为： [0037] (1)色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇∶水∶
磷酸＝35∶65∶0.05；柱温：35℃；流速：1ml/min；检测
波长：283nm，理论板数按柚皮苷峰计算不低于3000；
[0038] (2)对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柚皮苷对照品0.1mg的溶液，摇匀，即得，精密吸取10μl，注入液相色谱仪检测； [0039] (3)供试品溶液的制备：取小儿金丹样品适量，剪碎，取2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得，精密吸取10μl，注入液相色谱仪检测； [0040] (4)含量限度的制定
[0041] 小儿金丹样品中，枳壳占处方总量的4.17％，已经炮制，本品为生粉入药，另处方中橘红亦含有少量柚皮苷，综合考虑，枳壳中柚皮苷转移率按100％计算，每1g含柚皮苷不得少于0.72mg，若按照每丸计算，含柚皮苷不得少于1.1mg。
[0042] 而且，所述采用电位滴定法，测定小儿金丹处方朱砂中硫化汞的含量的方法为： [0043] (1)朱砂中硫化汞含量测定
[0044] 取朱砂粉末约0.1g，共6份，精密称定，置100ml锥形瓶中，加
硫酸10ml与
硝酸钾1.5g，加热使溶解，放冷，加水50ml，加1％高锰酸钾溶液至显粉红色，再滴加2％硫酸 亚
铁溶液至红色消失后，用硫氰酸铵滴定液0.1047mol/L滴定，每1ml硫氰酸铵滴定液0.1mol/L相当于11.63mg的硫化汞HgS，含量的平均值为97.48％，RSD为0.92％；
[0045] (2)供试品处理方法的确定：取小儿金丹样品适量，剪碎，取2g，精密称定，置100ml锥形瓶中，加硫酸20ml，硝酸钾2g，加热使成乳白色，放冷，加水40ml，滴加1％高锰酸钾溶液至显粉红色以2分钟内不消失为度，再滴加2％硫酸亚铁溶液至红色消失，用硫氰酸铵滴定液0.1mol/L滴定，每1ml硫氰酸铵滴定液0.1mol/L相当于11.63mg的硫化汞(HgS)；
[0046] (3)含量限度的确定
[0047] 处方中，朱砂占处方总量的4.83％，依据药典对朱砂含硫化汞不得少于96.0％的规定，小儿金丹样品含硫化汞理论量应为46.38mg/g，鉴于本品为大蜜丸，按照±15％上下浮动，小儿金丹样品每1丸含朱砂以硫化汞HgS计，应为60～80mg。
[0048] 本发明的优点和积极效果是：
[0049] 本发明的检测方法在原标准
基础上，增加了处方中朱砂、玄参、半夏、桔梗、羌活、钩藤、葛根、甘草、防风及水牛角浓缩粉的显微鉴别方法；增加了处方中前胡、枳壳、葛根及防风的薄层鉴别方法；以柚皮苷为定量指标，制定了橘红和枳壳的含量测定方法，修订后的质量标准，提高了小儿金丹质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，对促进产品销售、增加产品的市场竞争
力、保证患者用药安全意义重大。
附图说明
[0050] 图1为本发明供试样品中前胡的薄层色谱图在紫外光灯(365nm)检视图，从左至右依次为：样品1(批号：E518001)，样品2(批号：E518002)，样品3(批号：200603)，前胡对照药材(中检所)，阴性样品；
[0051] 图2，图3分别为本发明供试样品中枳壳与橘红检测中的薄层色谱图在紫外灯254nm，365nm的检视图，从左至右依次为：样品1(批号：E518001)，样品2(批号：E518002)，样品3(批号：200603)，柚皮苷对照品(中检所)，阴性样品，枳壳对照药材(中检所)，橘红药材；
[0052] 图4为本发明供试样品中葛根检测在紫外光灯(365nm)下检视图，从左至右依次为：样品1(批号：E518001)，样品2(批号：E518002)，样品3(批号：200603)，葛根对照药材(中检所)，葛根素对照品(中检所)，阴性样品；
[0053] 图5为本发明供试样品中防风检测在紫外光灯(254nm)下检视图，从左至右依次为：样品1(批号：E518001)，样品2(批号：E518002)，样品3(批号：200603)，防风对照药材(中检所)，5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品(中检所)，阴性样品；
[0054] 图6、图7为本发明供试样品中玄参检测的不同展开剂的薄层色谱图，从左至右依次为：样品1(批号：E518001)，样品2(批号：E518002)，样品3(批号：200603)，玄参对照药材(中检所)，阴性样品；
[0055] 图8为本发明柚皮苷对照品色谱图；
[0056] 图9为本发明柚皮苷检测中供试品色谱图；
[0057] 图10为本发明柚皮苷检测中阴性样品色谱图。
具体实施方式
[0058] 下面结合
实施例，对本发明进一步说明，下述实施例是说明性的，不是限定性的，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
[0059] 中药制剂小儿金丹的质量控制方法，其方法的步骤是：
[0060] (1)显微鉴别：
[0061] 取本品，置显微镜下观察：不规则细小颗粒暗棕红色，有光泽，边缘暗黑色；石细胞黄棕色或无色，类长方形、类圆形或形状不规则，直径约94μm；草酸钙针晶成束，长100～144μm，存在于黏液细胞中或散在；联结乳管直径14～25μm，含淡黄色颗粒状物；
油管含棕黄色分泌物，直径约100μm。草酸钙砂晶存在于薄壁细胞中，有时含晶细胞连接成行；纤维成束，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞的壁木化增厚；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维；油管含金黄色分泌物，直径约30μm；不规则碎片灰白色或灰黄色，稍具光泽，表面有灰棕色色素颗粒，并有不规则纵长裂缝。 [0062] (2)采用薄层色谱法，以前胡为对照药材，鉴别处方中的前胡。
[0063] ①供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加硅藻土3g，研细，加三氯甲烷40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。 [0064] ②对照药材溶液的制备：取前胡对照药材1g，加三氯甲烷15ml，同上述供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。
[0065] ③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除前胡外的其他药材，按原药制备工艺制成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
[0066] ④薄层条件及结果：照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液10μl，对照药材溶液4μl，阴性样品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯＝3∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性样品无干扰，结果见图1。
[0067] (3)采用薄层色谱法，以枳壳为对照药材，以柚皮苷为对照品，鉴别处方中的枳壳与橘红。
[0068] 鉴于枳壳与橘红均属芸香科植物，含有部分相同的成分。目前中国药品
生物制品检定所尚未提供橘红对照药材，故参照《中国药典》2005年版一部有关内容，采用薄层色谱法，以枳壳为对照药材，以柚皮苷为对照品，鉴别处方中的枳壳与橘红。
[0069] ①供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
[0070] ②对照药材溶液的制备：取枳壳对照药材1g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过， 滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。
[0071] ③对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
[0072] ④阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除枳壳和橘红外的其他药材，按原药制备工艺制成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
[0073] ⑤薄层条件及结果：照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液及对照药材溶液10μl、对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以乙酸乙酯∶丁酮∶乙醇＝12∶5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％
三氯化铝乙醇溶液，加热，置紫外光灯(254nm)下及紫外光灯(365nm)检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点及荧光斑点，阴性样品无干扰。结果见图2、图3。
[0074] (4)采用薄层色谱法，以葛根为对照药材，以葛根素为对照品，鉴别处方中的葛根。 [0075] ①供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次15ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
[0076] ②对照药材溶液的制备：取葛根对照药材1g，加甲醇15ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。
[0077] ③对照品溶液的的制备：取葛根素对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
[0078] ④阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除葛根外的其他药材，按原药制备工艺制成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
[0079] ⑤薄层条件及结果：照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述供试品溶液、阴性样品溶液及对照药材溶液各10μl，对照品溶液4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝7∶2.5∶0.25为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。阴性样品无干扰，结果见图4。
[0080] (5)采用薄层色谱法，以防风为对照药材，5-O-甲基维斯阿米醇苷为对照品，鉴别处方中的防风。
[0081] ①供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加硅藻土3g，研细，加丙酮40ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。 [0082] ②对照药材溶液的制备：取防风对照药材1g，加丙酮10ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。
[0083] ③对照品溶液的制备：取5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
[0084] ④阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除防风外的其他药材，按原药制备工艺制成 丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
[0085] ⑤薄层条件及结果：照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述四种溶液各10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-甲醇(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性样品无干扰，结果见图4。 [0086] (6)采用薄层色谱法，以玄参为对照药材，鉴别处方中的玄参。
[0087] ①供试品溶液的制备：取小儿金丹样品10g，剪碎，加水40ml，加热使溶解，放冷，滤过，滤液用乙醚振摇提取2次，每次20ml，弃去乙醚液，水液用水饱和的正丁醇40ml振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。
[0088] ②对照药材溶液的制备：取玄参对照药材2.5g，加乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，同法制成对照药材溶液。
[0089] ③阴性样品溶液的制备：按处方配比，取除玄参外的其他药材，按原药制备工艺制成丸剂，再按上述供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。
[0090] ④薄层条件及结果：
[0091] a、照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷∶甲醇＝5∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草
醛硫
酸溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，不显相同的斑点，阴性样品无干扰，结果见图6。
[0092] b、照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述三种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，三氯甲烷∶甲醇∶水＝13∶7∶2在10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，不显相同的斑点，阴性样品无干扰，结果见图7。
[0093] (7)以柚皮苷为对照品，液相色谱法检测处方中柚皮苷的含量
[0094] ①色谱条件：参照《中国药典》2005年版一部有关含量测定方法制定。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇∶水∶磷酸＝35∶65∶0.05；柱温：35℃；流速：1ml/min；检测波长：283nm，理论板数按柚皮苷峰计算不低于3000。
[0095] ②对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柚皮苷对照品0.1mg的溶液，摇匀，即得，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，结果见图8。 [0096] ③供试品溶液的制备：取小儿金丹样品适量，剪碎，取2.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声处理(功率50W，
频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得，精密吸取10μl，注入液相色谱仪，结果见图9。
[0097] ④阴性样品溶液的制备：按处方取除橘红和枳壳的各味药材，按原药制备工艺制得样 品，再按本步骤中“③”供试品溶液制备方法，制得阴性样品溶液。精密吸取10μl，注入液相色谱仪。与柚皮苷对照品色谱峰相对应的保留时间处，无色谱峰出现，阴性样品无干扰。结果见图10。
[0098] ⑤含量限度的制定
[0099] 处方中，枳壳占处方总量的4.17％，已经炮制，鉴于本品为生粉入药，另处方中橘红亦含有少量柚皮苷，综合考虑，枳壳中柚皮苷转移率按100％计算(《中国药典》2005年版一部枳壳项下含量限度计算)，每1g含柚皮苷不得少于0.72mg，若按照每丸计算，含柚皮苷不得少于1.1mg。
[0100] (8)采用电位滴定法，测定小儿金丹处方朱砂中硫化汞的含量。
[0101] ①电位滴定
[0102] 原理：本方法是利用电位的突跃来确定滴定终点，结果判定准确。 [0103] ②朱砂中硫化汞含量测定
[0104] 取朱砂粉末约0.1g，共6份，精密称定，置100ml锥形瓶中，加硫酸10ml与硝酸钾1.5g，加热使溶解，放冷，加水50ml，加1％高锰酸钾溶液至显粉红色，再滴加2％硫酸亚铁溶液至红色消失后，用硫氰酸铵滴定液(0.1047mol/L)滴定。每1ml硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)相当于11.63mg的硫化汞(HgS)，含量的平均值为97.48％，RSD为0.92％，结果见表1。
[0105] ③供试品处理方法的确定：取小儿金丹样品适量，剪碎，取2g，精密称定，置100ml锥形瓶中，加硫酸20ml，硝酸钾2g，加热使成乳白色，放冷，加水40ml，滴加1％高锰酸钾溶液至显粉红色以2分钟内不消失为度，再滴加2％硫酸亚铁溶液至红色消失，用硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硫氰酸铵滴定液(0.1mol/L)相当于11.63mg的硫化汞(HgS)。
[0106] ④空白试验：按“②”方法，不加样品进行测定，结果两份消耗硫氰酸铵滴定液按照0.1mol/L硫氰酸铵计，均为0.02ml。
[0107] ⑤阴性样品试验：按处方的配比，取除朱砂的各药味，按原药制备工艺制得样品，再按本步骤中“③”供试品的处理方法测定，结果消耗0.1mol/L硫氰酸铵滴定液为0.02ml，表明阴性样品对朱砂的定量测定无明显影响。
[0108] ⑥含量限度的确定
[0109] 处方中，朱砂占处方总量(蜜比100/130计)的4.83％，依据药典对朱砂含硫化汞不得少于96.0％的规定，小儿金丹样品含硫化汞理论量应为46.38mg/g，鉴于本品为大蜜丸，按照±15％上下浮动，小儿金丹样品每1丸含朱砂以硫化汞(HgS)计，应为60～80mg。 [0110] 表1朱砂中硫化汞含量测定结果
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