1.从5-氨基-6-卤代茚满酮制备环戊二烯并喹唑啉的方法，其包括以下步骤：
(a)将5-氨基酰基化；
(b)用氰基置换6-卤代基；
(c)水解步骤(b)中生成的腈基；且
(d)将5-(N-酰基氨基)-6-氨基酰基茚满酮环化以形成环戊二烯并喹唑啉环体系。
2.权利要求1的方法，其中(a)5-氨基的酰基化包括将5-氨基茚满酮化合物与酰基化试剂反应。
3.权利要求2的方法，其中所述酰基化试剂通过将羧酸与偶联试剂反应原位生成。
1 1 1
4.权利要求3的方法，其中所述羧酸为式R’CO2H的羧酸，其中R’选自R 或其被保护
1
的形式，且其中R 独立地选自氢、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、氟C1-4烷基、羟基C1-4烷基或被保护的羟基C1-4烷基。
5.权利要求3或权利要求4的方法，其中所述酰基化试剂为混合磷酸酐，其通过将所述羧酸与氯磷酸酯反应原位生成。
6.权利要求1至5中任一项的方法，其中(b)用氰基置换6-卤代基包括任选在催化剂的存在下用氰化物亲核试剂置换6-卤代基，所述氰化物亲核试剂选自氰化锌、氰化钾、氰化钠和氰化亚铜。
7.权利要求6的方法，其中所述催化剂为络合于三芳基膦或二齿双膦配体的钯或镍催化剂。
0
8.权利要求6的方法，其中所述催化剂为络合于膦的钯 物质，例如四(三苯基膦)合钯。
9.权利要求1至8中任一项的方法，其中(c)水解步骤(b)中生成的腈基包括将氰化步骤中生成的6-腈转化为酰胺。
10.权利要求9的方法，其中水解包括用酸处理。
11.权利要求10的方法，其中水解包括在硫酸镁的存在下用甲酸处理。
12.权利要求9的方法，其中水解包括用过氧化氢处理。
13.权利要求12的方法，其中水解包括在乙醇水溶液中用过氧化氢和碳酸钾处理。
14.权利要求1至13中任一项的方法，其中(d)将5-(N-酰基氨基)-6-氨基酰基茚满酮环化以形成环戊二烯并喹唑啉环体系包括用碱处理所述5-(N-酰基氨基)-6-氨基酰基茚满酮。
15.权利要求14的方法，其中所述碱为碱金属烷氧化物在C1-4烷基醇中的溶液。
16.权利要求15的方法，其中所述碱为碱金属烷氧化物在相应醇中的溶液。
17.权利要求1至13中任一项的方法，其中(d)将5-(N-酰基氨基)-6-氨基酰基茚满酮环化以形成环戊二烯并喹唑啉环体系在步骤(c)水解腈基的过程中同时发生。
18.权利要求17的方法，其中步骤(c)和(d)包括向5-酰基氨基-6-氰基茚满-1-酮在醇的水溶液中的混合物中依次加入过氧化氢和氢氧化钠或氢氧化钾的水溶液，然后将该混合物加温并同时放热，以形成环戊二烯并喹唑啉环体系。
19.权利要求15至18中任一项的方法，其还包括纯化由从异丙醇/己烷混合物中结晶得到的粗产物环戊二烯并喹唑啉。
20.权利要求1至19中任一项的方法，其还包括如下步骤：
(e)还原茚满酮的酮基以得到茚满醇。
21.权利要求18的方法，其中(e)还原茚满酮的酮基以得到茚满醇包括用基于氢化物的还原剂处理茚满酮。
22.权利要求21的方法，其中所述还原剂为硼氢化钠。
23.权利要求20至22中任一项的方法，其还包括如下步骤：
(f)将胺亲核试剂偶合至步骤(e)中得到的茚满-1-醇上。
24.权利要求23的方法，其中偶合包括将茚满醇的羟基转化为离去基团，然后与胺亲核试剂反应。
25.权利要求24的方法，其中转化包括将茚满醇与甲磺酸酐反应，以及用胺亲核试剂处理。
26.权利要求25的方法，其中转化包括在低离子强度的溶剂中将茚满醇、胺亲核试剂和碱混合，并向该混合物中加入甲磺酸酐。
27.权利要求26的方法，其包括在低离子强度的溶剂中将茚满醇、胺亲核试剂和叔胺碱混合，并分4-8等份加入甲磺酸酐，每次加入之间间隔10-30分钟；
其中所述胺亲核试剂的用量为约2.5-3.5摩尔当量，叔胺碱的用量为约4-6摩尔当量，且甲磺酸酐的用量为约2-3摩尔当量；且其中反应温度范围为10-30°C。
28.权利要求23至27中任一项的方法，其中所述胺亲核试剂为通式(XV)的胺：
2
其中R 独立地选自氢、C1-4烷基、C3-4烯基、C3-4炔基、羟基-C2-4烷基、卤代C2-4烷基或氰基C1-4烷基；
Ar独立地选自C5-20亚芳基，其在环上任选被一个或两个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基；且
R’为氢或保护基团。
29.权利要求23至28中任一项的方法，其中产物通过从合适的溶剂中结晶而纯化。
30.权利要求1至29中任一项的方法，其还包括如下步骤：
(g)色谱拆分。
31.权利要求30的方法，其中对步骤(f)偶合的产物进行(g)色谱拆分。
32.权利要求30或权利要求31的方法，其中色谱拆分包括：常规的低压、中压或高压柱色谱，超临界流体色谱，或多级连续柱色谱，例如使用手性树脂作为固定相的模拟移动床(SMB)。
33.权利要求32的方法，其中所述手性固定相选自Pirkle型树脂，例如(S,S)
Whelk-O1、(R,R)Whelk-O1，以及基于直链淀粉或纤维素的手性树脂，例如Chiralpak AD。
34.权利要求30至33中任一项的方法，其中色谱拆分包括用溶剂或溶剂混合物洗脱，所述溶剂选自：直链或环状烃，所述烃选自C6至C8，例如己烷或正庚烷，以及低级醇(甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇)，乙腈/低级醇(甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇)混合物和二氯甲烷/甲基叔丁基醚混合物。
35.权利要求30至34中任一项的方法，其还在色谱拆分之后包括结晶步骤以增加由柱得到的产物的化学纯度，并且如果从色谱得到无定形形式，则将其转化为晶体形式。
36.权利要求35的方法，其中结晶包括从选自异丙醇、异丙醇/庚烷和异丙醇/己烷混合物的溶剂体系中结晶。
37.权利要求1至36中任一项的方法，其还包括保护、脱保护或保护基团置换的至少一个步骤。
1
38.权利要求37的方法，其中保护基团置换包括除去R 上的保护基团并用其他保护基团替代。
39.权利要求37的方法，其中在拆分后，在一个步骤中从N-(2-(保护的)环戊二烯并
1
喹唑啉-4-酮-6-基)氨基芳基羧酸酯6S-(VIIIa)脱除R 上的保护基团和保护基团R'。
40.权利要求39的方法，其中通过在25°C或25°C以下，在合适的有机溶剂中，用非亲核性强酸处理化合物6S-(VIIIa)而脱除所述保护基团。
41.权利要求40的方法，其中所用非亲核性强酸为甲磺酸。
42.权利要求41的方法，其中所述甲磺酸也作为反应溶剂。
43.权利要求40至42中任一项的方法，其中所述甲磺酸在水中的浓度为70重量%，且初始温度范围为20-25°C。
44.权利要求40至43中任一项的方法，其中将完全保护的N-(环戊二烯并喹唑
啉-4-酮-6-基)氨基芳基羧酸(其中R'=H的6S-VIIIa)进行包括以下的分离方法：
将该反应混合物倾倒入冰和/或冷的稀氢氧化钠或氢氧化钾溶液中，使得该混合物的最终pH等于或大于10；
加入稀甲磺酸直到该混悬液的pH稳定在5；
搅拌直到沉淀为粒状；
通过过滤或离心收集产物；
用水洗涤；和
干燥。
45.合成环戊二烯并喹唑啉化合物的方法，其包括将通式(VIIIa)化合物
1 2
其中R’、R、R’和Ar如上文所定义，
色谱拆分为其对映异构体：
46.合成以下通式的胺的方法：
2
其中R、Ar和R’如权利要求27所定义，所述方法包括：
i)将通式H2N-Ar-CO2R’的4-氨基苯甲酸酯三氟乙酰化，得到以下通式的三氟乙酰胺基苯甲酸酯：
F3C-C(=O)-NH-Ar-CO2R’
其中Ar和R’如上文所定义；
(ii)将所述三氟乙酰胺基苯甲酸酯炔丙基化，得到以下通式的(炔丙基-三氟乙酰胺基)苯甲酸酯：
2
其中R 为炔丙基，且Ar和R’如上文所定义；且
(iii)原位水解步骤(iii)的产物，得到以下通式的所需的胺：
2
其中R 为炔丙基，且Ar和R’如上文所定义。
47.权利要求1至45中任一项的方法，其中所述环戊二烯并喹唑啉为通式(VIII)化合物：
1
其中R 独立地选自氢、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、氟C1-4烷基、羟基C1-4烷基或被保护的羟基C1-4烷基；
2
R 独立地选自氢、C1-4烷基、C3-4烯基、C3-4炔基、羟基-C2-4烷基、卤代C2-4烷基或氰基C1-4烷基；
Ar独立地选自C5-20亚芳基，其在环上任选被一个或两个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基；且
R’为氢或保护基团。
48.权利要求1至45中任一项的方法，其中所述环戊二烯并喹唑啉为通式(I)化合物：
1
其中R 独立地选自氢、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、氟C1-4烷基、羟基C1-4烷基或被保护的羟基C1-4烷基；
2
R 独立地选自氢、C1-4烷基、C3-4烯基、C3-4炔基、羟基-C2-4烷基、卤代C2-4烷基或氰基C1-4烷基；
Ar独立地选自C5-20亚芳基，其在环上任选被一个或两个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基；且
3 1 1 1 1
R 为式-NHCH(CO2R’’)-A-Y 的基团，其中A 为C1-6亚烷基，R’’为氢或保护基团，且Y为羧基或其被保护的形式、四唑-5-基、N-[C1-4烷基磺酰基]氨基甲酰基、N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基、四唑-5-基硫基、四唑-5-基亚磺酰基或四唑-5-基磺酰基，其中所述N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基可在苯环上任选具有一个或两个取代基，所述取代基选自卤素、硝基、
1 2 2
C1-4烷基和C1-4烷氧基，或Y 为式-CONH-CH(CO2R’’)-A-Y 的基团，其中α-氨基酸碳原子
2 2
具有D-构型，A 为C1-6亚烷基且Y 为羧基或其被保护的形式，或四唑-5-基，其中R’’为氢或保护基团，
3
或者R 为N-连接的天然氨基酸，其选自L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸和L-苯丙氨酸或其合适的羧基保护形式，
3 3 3 3 3
或者R 为式-NH-A-Y 的基团，其中A 为C1-3亚烷基且Y 为苯基，其可任选具有一个、两个或三个取代基，所述取代基选自卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基。
49.权利要求48的方法，其中：
3 1 1 1 1
R 为式-NHCH(CO2H)-A-Y 的基团，其中A 为C1-6亚烷基且Y 为羧基、四唑-5-基、N-[C1-4烷基磺酰基]氨基甲酰基、N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基、四唑-5-基硫基、四唑-5-基亚磺酰基或四唑-5-基磺酰基，其中所述N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基可在苯环
1
上任选具有一个或两个取代基，所述取代基选自卤素、硝基、C1-4烷基和C1-4烷氧基，或者Y
2 2 2
为式-CONH-CH(CO2H)-A-Y 的基团，其中α-氨基酸碳原子具有D-构型，A 为C1-6亚烷基
2
且Y 为羧基或四唑-5-基，
3
或者R 为N-连接的天然氨基酸，其选自L-丙氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸和L-苯丙氨酸，
3 3 3 3 3
或者R 为式-NH-A-Y 的基团，其中A 为C1-3亚烷基且Y 为苯基，其可任选具有一个、两个或三个取代基，所述取代基选自卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基。
50.权利要求1至45中任一项的方法，其中所述环戊二烯并喹唑啉为通式(VI)化合物：
1
其中R 独立地选自氢、氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、氟C1-4烷基、羟基C1-4烷基或被保护的羟基C1-4烷基；
2
R 独立地选自氢、C1-4烷基、C3-4烯基、C3-4炔基、羟基-C2-4烷基、卤代C2-4烷基或氰基C1-4烷基；
Ar独立地选自C5-20亚芳基，其在环上任选被一个或两个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、氨基、硝基、氰基、三氟甲基、C1-4烷基和C1-4烷氧基；且
3 5 4 5 5
R’为下式的基团：-A-CON(R)CH(Y)Y，其中A 为C1-6亚烷基；R为氢、C1-4烷基、C3-4烯
4
基或C3-4炔基；Y 为羧基或其被保护的形式、四唑-5-基、N-(C1-4烷基磺酰基)氨基甲酰基、N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基，其可在苯环上任选具有一个或两个取代基，所述取代基选自卤素、硝基、C1-4烷基和C1-4烷氧基、四唑-5-基硫基、四唑-5-基亚磺酰基或四唑-5-基磺
5 4 4
酰基；且Y 为天然氨基酸侧链或下式的基团：-A-CO2R’’，其中A 为C1-6亚烷基且R’’为氢或保护基团。
3 5 4 5 5
51.权利要求50的方法，其中R’为下式的基团：-A-CON(R)CH(Y)Y，其中A 为C1-6亚
4
烷基；R为氢、C1-4烷基、C3-4烯基或C3-4炔基；Y 为羧基、四唑-5-基、N-(C1-4烷基磺酰基)氨基甲酰基、N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基，其可在苯环上任选具有一个或两个取代基，所述取代基选自卤素、硝基、C1-4烷基和C1-4烷氧基、四唑-5-基硫基、四唑-5-基亚磺酰基或
5 4 4
四唑-5-基磺酰基；且Y 为天然氨基酸侧链或下式的基团：-A-CO2H，其中A 为C1-6亚烷基。
1
52.权利要求1至51中任一项的方法，其中R 选自任选被保护的羟基C1-4烷基。
1
53.权利要求52的方法，其中R 为羟基甲基或被保护的羟基甲基。
2
54.权利要求1至53中任一项的方法，其中R 独立地为C3-4炔基。
2
55.权利要求54的方法，其中R 独立地为炔丙基。
56.权利要求1至55中任一项的方法，其中Ar为亚苯基，其在环上任选被一个或两个取代基取代，所述取代基选自卤素、硝基、C1-4烷基和C1-4烷氧基。
57.权利要求56的方法，其中Ar为未取代的亚苯基。
3 3 3
58.权利要求1至57中任一项的方法，其中R 为式-NHCH(CO2H)R’的基团，其中R’
5 4 5 5
为下式的基团：-A-CON(R)CH(Y)Y，其中A 为C1-6亚烷基；R为氢、C1-4烷基、C3-4烯基或C3-4
4
炔基；Y 为羧基、四唑-5-基、N-(C1-4烷基磺酰基)氨基甲酰基、N-(苯基磺酰基)氨基甲酰基，其可在苯环上任选具有一个或两个取代基，所述取代基选自卤素、硝基、C1-4烷基和C1-4
5
烷氧基、四唑-5-基硫基、四唑-5-基亚磺酰基或四唑-5-基磺酰基；且Y 为天然氨基酸侧
4 4
链或下式的基团：-A-CO2H，其中A 为C1-6亚烷基。
3
59.权利要求1至58中任一项的方法，其中R’为下式的基团：-CH2CH2C(=O)NHCH(CO2H)CH2CH2CH2CO2H。
60.权利要求1至59中任一项的方法，其中R’为独立选自C1-4烷基、苄基或烯丙基的保护基团。
61.权利要求60的方法，其中R’为C1-4烷基保护基团。
62.权利要求1至61中任一项的方法，其中所述5-氨基-6-卤代茚满酮为以下通式的化合物：
其中X为卤素。
63.权利要求1至45中任一项的方法，其中所述环戊二烯并喹唑啉化合物为
(6RS)-4-(N-(2-(羟基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑
啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基]苯甲酸。
64.权利要求1至45中任一项的方法，其中所述环戊二烯并喹唑啉化合物
为(6S)-4-(N-(2-(羟基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑
啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基]苯甲酸。
65.权利要求1至45中任一项的方法，其中所述环戊二烯并喹唑啉化合物为
N-{N-{4-[N-((6S)-2-羟基甲基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-6H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基]苯甲酰基}-L-γ-谷氨酰基}-D-谷氨酸(ONX-0801)
65.化合物，其用于权利要求1至64的方法中，选自：
5-(叔丁氧基乙酰胺基)-6-溴茚满-1-酮；
5-(苄基氧基乙酰胺基)-6-氰基茚满-1-酮；
5-(叔丁氧基乙酰胺基)-6-氰基茚满-1-酮；
6-氨基羰基-5-(苄基氧基乙酰胺基)茚满-1-酮；
6-氨基羰基-5-(叔丁氧基乙酰胺基)茚满-1-酮；
2-(苄基氧基甲基)-4,6-二氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
2-(羟基甲基)-4,6-二氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
2-(叔丁氧基甲基)-4,6-二氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-4,6-二氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(R,S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-6-羟基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(R)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-6-羟基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(S)-2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-6-羟基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(R,S)-2-(叔丁氧基甲基)-6-羟基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(R)-2-(叔丁氧基甲基)-6-羟基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(S)-2-(叔丁氧基甲基)-6-羟基-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉；
(6RS)-4,N-((2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸叔丁基酯；
(6S)-4,N-((2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸叔丁基酯；
(6R)-4,N-((2-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸叔丁基酯；
(6RS)-4,N-((2-(叔丁氧基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸叔丁基酯；
(6S)-4,N-((2-(叔丁氧基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸叔丁基酯；和
(6R)-4,N-((2-(叔丁氧基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸叔丁基酯。
66.权利要求65的化合物或选自以下的化合物在合成权利要求1至64中任一项限定的环戊二烯并喹唑啉或中间体中的用途：
5-(苄基氧基乙酰胺基)-6-溴茚满-1-酮；
(6S)-4,N-((2-(羟基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑
啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸；
(6R)-4,N-((2-(羟基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑
啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸；和
(6RS)-4,N-((2-(羟基甲基)-4-氧代-3,4,7,8-四氢-3H-环戊二烯并[g]喹唑
啉-6-基)-N-(丙-2-炔基)氨基)苯甲酸。