一种金纳米比色法快速检测牛奶中三聚氰胺的方法
专利汇可以提供一种金纳米比色法快速检测牛奶中三聚氰胺的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种金 纳米粒子 比色法快速检测 牛 奶中三聚氰胺的方法，本发明利用了纳米金具有高吸光系数的特点,将纳米金作为显色 信号 元件，属于分析化学技术领域。检测步骤包括金纳米粒子的制备，建立检测三聚氰胺的方法，实际样品检测等步骤。本发明根据金纳米粒子体系的 颜色 变化,可简单、快速、地检测三聚氰胺,并且有很高的灵敏度,从而发展出一种具有成本低、操作简单、方便快捷的特点的比色分析法。为以后的研究、生产、监管等提供了方便。本发明修饰的纳米金比较稳定,抵抗高浓度盐离子的能 力 较强,受到外界因素的干扰小,适宜推广应用。，下面是一种金纳米比色法快速检测牛奶中三聚氰胺的方法专利的具体信息内容。
1.一种金纳米比色法快速检测牛奶中三聚氰胺的方法, 其特征在于：利用修饰在金纳米表面的对氯苯磺酸上的氯与三聚氰胺上氨基的氢产生氢键作用， 使得分散的金纳米粒子聚集, 并且金纳米粒子的特征吸收峰发生红移, 从而实现对三聚氰胺的检测。
2.一种金纳米比色法快速检测牛奶中三聚氰胺的方法,其特征在于:
具体步骤为：
(1)金纳米粒子的制备:
所用的玻璃仪器都经过王水浸泡, 用超纯水清洗后, 置于烘箱干燥后备用， 向洁净的三颈烧瓶中加入10.3µL质量浓度为4g/L的氯金酸, 加入89.7mL超纯水， 置于100℃油浴锅内搅拌加热, 至其沸腾, 加入10mL质量浓度为38.8mM的柠檬酸三钠溶液, 加热搅拌,溶液颜色从淡黄色变成酒红色, 反应持续十五分钟后停止加热， 继续搅拌至室温，用超纯水将溶液定容到100mL，装于100mL容量瓶，4℃下保存，所制得的金纳米粒子平均粒径为
13.08nm；
(2)对氯苯磺酸-金纳米的制备:
金纳米与对氯苯磺酸以体积比为40:1进行修饰，修饰所需时间为0.5小时，将修饰好的溶液用pH=6.8的PBS缓冲溶液以体积比为1:5进行稀释，备用；
(3)利用比色法检测三聚氰胺：
向已制备好的对氯苯磺酸-金纳米中加入不同浓度的三聚氰胺溶液标准品，混匀，由于修饰在金纳米表面的对氯苯磺酸上的氯与三聚氰胺上氨基上的氢产生了氢键作用，使得分散的金纳米粒子聚集, 体系由酒红色变为蓝色，5分钟后检测溶液的紫外可见光谱, 得到不同浓度三聚氰胺对应的紫外可见光谱，使用吸光度比值A650nm/A520nm作为纵坐标, 三聚氰胺浓度为横坐标, 绘制三聚氰胺的标准曲线，根据A650nm/A520nm与三聚氰胺的浓度建立的标准曲线, 三聚氰胺的检出限为2.3nM, 线性范围为6.0×10−7 - 1.5×10−6 mol/L；
(4)实际样品检测:
牛奶的检测：向2.0 g待测液态奶中加入不同浓度的三聚氰胺标样, 再加入到1.5 mL质量浓度为10%的三氯乙酸水溶液和5.0 mL乙腈的混合溶液中, 超声震荡15 min后转移到离心管中, 12000 rpm/min转速下离心15 min, 取上清液, 并通过0.22 µm膜过滤器移去脂肪, 再将滤液的pH调至6.8, 离心后再次通过0.22 µm膜过滤器过滤, 将滤液用二次超纯水稀释至10 mL，取20 µL样品溶液加入到步骤（2）制备的对氯苯磺酸-金纳米复合物中, 对其进行测定，根据所建立的标准曲线与加入的标准样品， 计算出所测得的三聚氰胺浓度， 测定样品回收率=牛奶中三聚氰胺的测定值/三聚氰胺标样加入量×100%；
奶粉的检测：将0.6 g待测奶粉用超纯水2.0 mL溶解后加入不同浓度的三聚氰胺标样,再加入到1.5 mL质量浓度为10%的三氯乙酸水溶液和5.0 mL乙腈的混合溶液中, 超声震荡
15 min后转移到离心管中, 12000 rpm/min转速下离心15 min, 取上清液, 并通过0.22 µm膜过滤器移去脂肪, 再将滤液的pH调至6.8,离心后再次通过0.22 µm膜过滤器过滤, 将滤液用二次超纯水稀释至10 mL，取20 µL样品溶液加入到步骤（2）制备的对氯苯磺酸-金纳米复合物中, 金纳米粒子的聚集程度将随着三聚氰胺浓度的不同而改变， 根据所建立的标准曲线与加入的标准样品，计算出所测得的三聚氰胺浓度， 测定样品回收率=奶粉中三聚氰胺的测定值/三聚氰胺标样加入量×100%。
一种金纳米比色法快速检测牛奶中三聚氰胺的方法
技术领域
背景技术
发明内容
所用的玻璃仪器都经过王水浸泡, 用超纯水清洗后, 置于烘箱干燥后备用， 向洁净的三颈烧瓶中加入10.3 µL质量浓度为4 g/L的氯金酸, 加入89.7 mL超纯水， 置于100℃油浴锅内搅拌加热, 至其沸腾, 加入10 mL质量浓度为38.8 mM的柠檬酸三钠溶液, 加热搅拌,溶液颜色从淡黄色变成酒红色, 反应持续十五分钟后停止加热， 继续搅拌至室温，用超纯水将溶液定容到100 mL， 装于100 mL容量瓶， 4℃下保存， 所制得的金纳米粒子平均粒径为13.08 nm；
(2)对氯苯磺酸-金纳米的制备:
金纳米与对氯苯磺酸以体积比为40:1进行修饰， 修饰所需时间为0.5小时， 将修饰好的溶液用pH=6.8的PBS缓冲溶液以体积比为1:5进行稀释， 备用；
(3)利用比色法检测三聚氰胺：
向已制备好的对氯苯磺酸-金纳米中加入不同浓度的三聚氰胺溶液标准品， 混匀， 由于修饰在金纳米表面的对氯苯磺酸上的氯与三聚氰胺上的氨基产生了氢键作用， 使得分散的金纳米粒子聚集, 体系由酒红色变为蓝色， 5分钟后检测溶液的紫外可见光谱, 得到不同浓度三聚氰胺对应的紫外可见光谱， 使用吸光度比值A650nm/A520nm作为纵坐标, 三聚氰胺浓度为横坐标, 绘制三聚氰胺的标准曲线，根据A650nm/A520nm与三聚氰胺的浓度建立的标准曲线, 三聚氰胺的检出限为2.3 nM, 线性范围为6.0×10−7 - 1.5×10−6 mol/L；
(4)实际样品检测:
牛奶的检测：向2.0g待测液态奶中加入不同浓度的三聚氰胺标样, 再加入到1.5 mL质量浓度为10%的三氯乙酸水溶液和5.0 mL乙腈的混合溶液中, 超声震荡15 min后转移到离心管中, 12000 rpm/min转速下离心15min, 取上清液, 并通过0.22 µm膜过滤器移去脂肪, 再将滤液的pH调至6.8, 离心后再次通过0.22 µm膜过滤器过滤, 将滤液用二次超纯水稀释至10 mL，取20 µL样品溶液加入到步骤（2）制备的对氯苯磺酸-金纳米复合物中, 对其进行测定，根据所建立的标准曲线与加入的标准样品， 计算出所测得的三聚氰胺浓度， 测定样品回收率=牛奶中三聚氰胺的测定值/三聚氰胺标样加入量×100%；
奶粉的检测：将0.6 g待测奶粉用超纯水2.0 mL溶解后加入不同浓度的三聚氰胺标样,再加入到1.5 mL质量浓度为10%的三氯乙酸水溶液和5.0 mL乙腈的混合溶液中, 超声震荡
15 min后转移到离心管中, 12000 rpm/min转速下离心15 min, 取上清液, 并通过0.22 µm膜过滤器移去脂肪, 再将滤液的pH调至6.8,离心后再次通过0.22 µm膜过滤器过滤, 将滤液用二次超纯水稀释至10 mL，取20 µL样品溶液加入到步骤（2）制备的对氯苯磺酸-金纳米复合物中, 金纳米粒子的聚集程度将随着三聚氰胺浓度的不同而改变， 根据所建立的标准曲线与加入的标准样品， 计算出所测得的三聚氰胺浓度， 测定样品回收率=奶粉中三聚氰胺的测定值/三聚氰胺标样加入量×100%。
图3为三聚氰胺的标准曲线。
具体实施方式
(1)金纳米粒子的制备:
所用的玻璃仪器都经过王水浸泡, 用超纯水清洗后, 置于烘箱干燥后备用， 向洁净的三颈烧瓶中加入10.3 µL质量浓度为4 g/L的氯金酸, 加入89.7 mL超纯水， 置于100℃油浴锅内搅拌加热, 至其沸腾, 快速加入10 mL质量浓度为38.8 mM的柠檬酸三钠溶液, 加热搅拌, 溶液颜色从淡黄色变成酒红色, 反应持续十五分钟后停止加热， 继续搅拌至室温， 用超纯水将溶液定容到100 mL， 装于100 mL容量瓶， 4℃下保存， 所制得的金纳米粒子平均粒径为13.08 nm.
(2)对氯苯磺酸-金纳米的制备
金纳米与对氯苯磺酸以体积比为40:1进行修饰， 修饰所需时间为0.5小时， 将修饰好的溶液用pH=6.8的PBS缓冲溶液以体积比为1:5进行稀释， 备用。
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
