本发明涉及糖原磷酸化酶抑制剂、含此类抑制剂的药物组合 物以及将此类抑制剂用于治疗哺乳动物的糠尿病、高血糖、血胆甾 醇过多、高血压、高胰岛素血、高脂血、动脉粥样硬化和心肌缺血。

尽管早期发现了胰岛素及其后来在治疗糖尿糖的广泛用途， 而且近来又发现并使用作为口服降血糖剂的磺酰脲类(例如 ChlorpropamideTM(Pfizer)、TolbutamideTM(Upjohn)、 AcetohexamideTM(E.I.Lilly)、TolazamideTM(Upjohn))和缩二胍类 (例如PhenforminTM(Ciba Geigy)、MetforminTM(G.D.Searle))， 但是它们在治疗糖尿病方面还是不能令人满意。大约有10％的糖 尿病患者对合成的降血糖剂没有效果(I型糖尿病，胰岛素依赖型 糖尿病)，胰岛素的使用需要多日剂量，一般通过自注射给药。确 定合适的胰岛素剂量需要频繁地测定尿或血中的糖含量。超剂量的 胰岛素给药会导致高血糖，其作用范围可从血液中葡萄糖的轻度异 常到昏迷，或甚至导致死亡。非胰岛素依赖型糖尿病(II型糖尿 病，NIDDM)的治疗通常包括饮食、锻炼、口服药剂如磺酰脲类 的结合，以及在更严重情况下服用胰岛素。然而，可用于临床的降 血糖药物还有其它副作用，因此使用受到了限制。无论在何种情况 下，其中一种药物对某种情况可能是失败的，而其它却是成功的。 降血糖剂的下一要求也是十分明显的，即糖少的副作用而且其它药 物是失败时，该药物则是成功的。

在美国和西欧，动脉疾病-动脉粥样硬化被认为是导致死亡 的主要原因。导致动脉粥样硬化和闭合性心脏疾病的病理学过程是 众所周知的。此过程的早期阶段是在颈动脉、冠状和大脑动脉以及 在主动脉中形成了“脂肪条纹”。这种损伤是黄色的，理由是由于 存在着主要在平滑肌细胞内和在动脉和主动脉的内膜层的巨噬细 胞中发现的脂质沉积。进而可推断出在脂肪条纹中存在着大量胆固 醇，接着促进了“纤维斑”的发展，该纤维斑包含充满脂质的积累 的内膜平滑肌细胞并且该细胞被细胞外脂质、胶原蛋白、弹性硬蛋 白和粘蛋白包围着。细胞与基质形成了一个纤维帽，覆盖着较厚的 细胞碎片沉积和更多的细胞外脂质。脂质主要是游离的酯化胆固 醇。纤维斑慢慢地形成了，并可能及时地钙化和坏死，发展成“复 杂损伤”，导致动脉闭合并在腔壁形成血栓和动脉肌肉痉挛，这是 形成动脉粥样硬化的特征。

流行病学已经充分地证明：由于动脉粥样硬化，高脂血是形 成心血管疾病(CVD)的主要危险因子。近些年来，作为预防CVD 的重要步骤，医学领域的领头人们重新将重点放在降低血浆胆固醇 水平上，特别是降低低密度脂蛋白胆固醇。“正常”的上限已知大 大低于从前的水平。因此，大部分西方人已被认为处于特别高的危 险状态中。这些独立的危险因子包括：不耐葡糖、左心室肥大，高 血压以及作为男性。心血管疾病在糖尿病患者中特别流行，至少是 在一部分患者中流行，原因是在这些人中存在着多个独立的危险因 子。一般人特别是糖尿病患者的高脂血的成功治疗因此格外地成为 医学重点。

高血压是一种作为其它许多疾病如肾动脉狭窄、嗜铬细胞瘤 或内分泌疾病的第二症状存在于人类的疾病。但是，也在许多成因 试剂或疾病是未知的患者中可见到高血压。这些“自发的”高血压 通常与肥胖、糖尿病和高甘油三脂血等疾病相关，这些疾病间的关 系还未阐明。另外，许多患者表现出高血压的症状时却完全没有任 何其它疾病或不适的症状。

众所周知，高血压可直接导致心力衰竭、肾衰竭和中风(脑 出血)。这些疾病可能使病人在短期内死亡。高血压还有助于动脉 粥样硬化和冠状疾病的发展。这些疾病会渐渐地削弱患者并导致在 长时期内死亡。

自发性高血压的确切原因仍然未知，尽管有人认为很多因子 有助于该疾病的产生。这些因子是应激反应、未受控制的情绪、 不规则的激素释放(高血压蛋白原酶、血管紧张素、醛甾酮系)、 由于肾机能障碍形成的过多盐和水、在收缩的血管中形成的脉管系 统壁加厚和肥大以及遗传因子。

在治疗自发性高血压时应当牢记上述因子。这样，已经研制 出了广泛的能转化酶抑制剂的β-阻滞剂、血管收缩剂、血管紧张 素，并以抗高血压药市售。利用这些化合物治疗高血压已被证明在 预防短期死亡如心力衰竭、肾衰竭和脑出血方面是有效的。但是， 由于高血压引起的动脉粥样硬化或心脏疾病在长一段时期内仍是 一大问题。这就表明尽管血压降低，但形成自发性高血压的内在原 因与这种治疗不一致。

高血压与升高了的血胰岛素水平有关，这种疾病公知为高胰 岛素血。胰岛素是一种肽激素，其主要作用是促进葡萄糖利用、蛋 白质合成和中性脂质的形成以及贮存，也能促进血管细胞生长，增 加肾中钠的停留。后面的这些功能可在不影响葡萄糖水平的条件下 完成，也是已知的高血压原因。例如，外周脉管系统的生长会造成 外周毛细管的收缩，而钠的停留增加了血液体积。因此，高胰岛素 血中胰岛素的降低能预防由高胰岛素水平引起的不正常血管生长 和肾中钠的停留，从而减轻高血压。

心脏肥大是突然死亡，心肌梗塞和充血性心力衰竭的发展中 的一个重要的危险因子，这些心脏疾病至少部分地由于对局部缺血 和再充满之后的心肌损伤敏感性的增加，所述局部缺血和再充满可 能发生在门诊病人以及perioperative背景。为了预防或减少有害的 心肌perioperative结果，特别是perioperative心肌梗塞，需要这 种不合适的医疗手段。非心脏手术和心脏手术都与心肌梗塞或死亡 的实质性危险联系在一起。大约7百万经历非心脏手术的患者被认 为处于危险状态，perioperative死亡和严重心肮并发症的发生率 有时会高达20-25％。另外，在每年进行冠状分流术的400,000 患者中，perioperative心肌梗塞的发生率估计为5％，死亡1-2 ％。目前，在该领域还没有药物治疗能够降低心肌组织的 perioperative心肌缺血的损伤或提高缺血发作的心肌阻力。进行这 种治疗是一种生命补偿以及减少住院期、提高生命质量和降低高危 病人的总体医疗保健成本。

生成肝葡萄糖是NIDDM治疗的重要目标。在后吸收(禁食 的)状态，肝是血浆葡萄糖水平的重要调节器官；与正常人相比， NIDDM患者的肝葡萄糖生成速度大大地加大了。与此类似，在饭 后(进食)状态，NIDDM患者的肝在总血浆葡萄糖供给中的作用 成倍地下降，而肝葡萄糖生成却异常高。

糖原分解是中断肝葡萄糖生成的重要目标。肝通过糖原分解 (葡萄糖聚合物糖原的裂解)和糖异生(由2-和3-碳前体合成 葡萄糖)产生葡萄糖。几条明显的路径表明糖原分解对NIDDM的 肝葡萄糖输出起了重要作用。首先，在正常后吸收男人中，高达75 ％的肝葡萄糖生成估计是由糖原分解生成的；其次，具有肝糖原贮 存疾病的患者包括Hers’疾病(糖原磷酸化酶缺乏)的患者表现出 发作性高血糖。这些观察结果表明糖原分解可能是肝葡萄糖生成的 一个重要过程。

糖原分解在肝、肌肉和脑中通过糖原磷酸化酶的特殊组织异 构形式催化进行。这种酶使糖原大分子裂解，释放葡萄糖-1-磷 酸盐以及新的缩短了的糖原大分子。至今已公开了两种类型的糖原 磷酸化酶抑制剂：葡萄糖和葡萄糖类似物〔Martin J.L.等人， Biochemistry 1991，30，10101〕以及咖啡因和其它嘌呤类似物 〔Kasvinsky，P.J.等人，J.Biol.Chem.1978，253，3343-3352和 9102-9106〕。这些化合物以及糖原磷酸化酶抑制剂通常可通过降 低肝葡萄糖生成和降低血糖而潜在地用于治疗NIDDM。 〔Blundell，T.B.等人，Diabetologia 1992，35，Suppl.2，569-576 和Martin等人，Biochemistry 1991，30，10101〕。

至今还未完全理解局部缺血和再充满后观察到的心肌损伤的 机理。有报道(M.F.Allard等人，Am.J.Physiol.267，H66-H74， 1994)称：“在肥大的鼠心脏中，局部缺血前糖原降低……与改善 了的局部缺血后左心室功能恢复有关”。

因此，尽管有许多治疗高血糖、血胆甾醇过多、高血压、高 胰岛素血、高脂血、动脉粥样硬化和心肌缺血的方法，但仍不断地 需要、不断地探索该领域的另外的治疗方法。

本发明涉及用于治疗糖尿病、高血糖、血胆甾醇过多、高胰岛 素血、高血压、高脂血、动脉粥样硬化和心肌缺血的式I的糖原磷 酸化酶抑制剂化合物。

具有式I的本发明化合物： 式I 及其可药用盐和前体药物， 式中

虚线(…)为可选择的键；

当虚线(…)为键时，A为-C(H)＝、-C((C1- C4)烷基)＝、-C(卤素)＝或-N＝，或当虚线(…)不为 键时，A为亚甲基或-CH((C1-C4)烷基)-；

R1、R10或R11各自独立地为H、卤素、氰基、4-、6-或7- 硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、氟代甲基、二氟 甲基或三氟甲基；

R2为H；

R3为H或(C1-C5)烷基；

R4为H、甲基、乙基、正丙基、羟基(C1-C3)烷基、(C1- C3)烷氧基(C1-C3)烷基、苯基(C1-C4)烷基、苯基羟基 (C1-C4)烷基、(苯基)((C1-C4)烷氧基)(C1-C4) 烷基、噻吩-2-或-3-基(C1-C4)烷基或呋喃-2-或-3-基(C1-C4) 烷基，其中R4环独立地在碳上由H、卤素、(C1-C4)烷基、 (C1-C4)烷氧基、三氟甲基、羟基、氨基、氰基或4，5-二氢 -1H-咪唑-2-基单、双或三取代；或

R4为吡啶-2-、-3-或-4-基(C1-C4)烷基、噻唑-2-、-4-或-5- 基(C1-C4)烷基、咪唑-2-、-4-或-5-基(C1-C4)烷基、吡咯 -2-或-3-基(C1-C4)烷基、噁唑-2-、-4-或-5-基(C1-C4)烷 基、吡唑-3-、-4-或-5-基(C1-C4)烷基、异噁唑-3-、-4-或-5-基 (C1-C4)烷基、异噻唑-3-、-4-或-5-基(C1-C4) 烷基、哒嗪-3-或-4-基(C1-C4)烷基、嘧啶-2-、-4-、-5-或-6-基 (C1-C4)烷基、吡嗪-2-或-3-基(C1-C4)烷基、1，3，5-三嗪 -2-基(C1-C4)烷基或吲哚-2-基(C1-C4)烷基，其中所述的 上述R4杂环独立地由卤素、三氟甲基、(C1-C4)烷基、(C1- C4)烷氧基、氨基、羟基或氰基可选择地单或双取代，且所述的取 代基与碳键合；或

R4为R15-羰氧甲基，其中所述的R15为苯基、噻唑基、咪唑 基、1H-吲哚基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、吡唑基、异噁唑基、 异噻唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基或1，3，5-三嗪基，且 其中所述的上述R15环独立地由卤素、氨基、羟基、(C1-C4) 烷基、(C1-C4)烷氧基或三氟甲基可选择地单或双取代，所述 的单或双取代基与碳键合；

R5为H、甲基、乙基、正丙基、羟甲基或羟乙基；

R6为羧基、(C1-C8)烷氧基羰基、苄氧基羰基、C(O)NR8R9或C(O)R12， 其中

R8为H、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基、(C3- C6)环烷基(C1-C5)烷基、羟基或(C1-C8)烷氧基；以及

R9为H、(C3-C8)环烷基、(C3-C8)环烷基(C1- C5)烷基、(C4-C7)环烯基、(C3-C7)环烷基(C1-C5) 烷氧基、(C3-C7)环烷氧基、羟基、亚甲基全氟化(C1-C8) 烷基、苯基或杂环，其中所述的杂环为吡啶基、呋喃基、吡咯基、 吡咯烷基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷 基、异噁唑基、异噻唑基、吡喃基、吡啶烷基(pyridinyl)、哌 啶基、吗啉基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、1，3，5-三嗪基、 苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、二氢苯并噻喃基或四氢苯 并噻唑基，其中所述的杂环为C-N相连；或

R9为(C1-C6)烷基或(C1-C8)烷氧基，其中所述的 (C1-C6)烷基或(C1-C8)烷氧基可由(C4-C7)环烯-1- 基、苯基、噻吩基、吡啶基、呋喃基、吡咯基、吡咯烷基、噁唑基、 噻唑基、咪唑基、吡唑基、吡唑啉基、吡唑烷基、异噁唑基、异噻 唑基、吡喃基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、1-氧代硫代吗啉基、 1，1-二氧代硫代吗啉基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、哌嗪基、1，3，5- 三嗪基或吲哚基可选择地单取代，以及其中所述的(C1-C6)烷 基或(C1-C8)烷氧基还可独立地由卤素、羟基、(C1-C5) 烷氧基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基氨基、氰基、羧 基或(C1-C4)烷氧羰基可选择地单或双取代；以及

其中R9环独立地在碳上由卤素、(C1-C4)烷基、(C1- C4)烷氧基、羟基、羟基(C1-C4)烷基、氨基(C1-C4)烷 基、一-N-或二-N，N-(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基、(C1 -C4)烷氧基(C1-C4)烷基、氨基、一-N-或二-N，N -(C1-C4)烷基氨基、氰基、羧基、(C1-C5)烷氧基羰基、 氨基甲酰基、甲酰基或三氟甲基可选择地单或双取代，且所述R9 环还可独立地由(C1-C5)烷基或卤素可选择地单或双取代；

条件是：任何R9杂环上均不包含季铵化氮；

R12为吗啉代、硫代吗啉代、1-氧代硫代吗啉代、1，1-二氧代 硫代吗啉代、噻唑烷-3-基、1-氧代噻唑烷-3-基、1，1-二氧代噻唑 烷-3-基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、哌嗪-4-基、氮杂环 丁烷-1-基、1，2-噁嗪烷-2-基、吡唑烷-1-基、异噁唑烷-2-基、异噻 唑烷-2-基、1，2-氧氮杂环丁烷-2-基、噁唑烷-3-基、3，4-二氢异喹 啉-2-基、1，3-二氢异吲哚-2-基、3，4-二氢-2H-喹啉-1-基、2，3-二 氢苯并[1，4]噁嗪-4-基、2，3-二氢苯并[1，4]噻嗪-4-基、3，4-二氢- 2H-喹喔啉-1-基、3，4-二氢苯并[c][1，2]噁嗪-1-基、1，4-二氢苯并 [d][1，2]噁嗪-3-基、3，4-二氢苯并[e][1，2]噁嗪-2-基、3H-苯并[d]异 噁唑-2-基、3H-苯并[c]异噁唑-1-基或azepan-1-yl。

其中所述的R12环可独立地由卤素、(C1-C5)烷基、(C1- C5)烷氧基、羟基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基氨基、 甲酰基、羧基、氨基甲酰基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基 氨基甲酰基、(C1-C6)烷氧基(C1-C3)烷氧基、(C1- C5)烷氧基羰基、苄氧基羰基、(C1-C5)烷氧基羰基(C1- C5)烷基、(C1-C4)烷氧基羰基氨基、羧基(C1-C5)烷基、 氨基甲酰基(C1-C5)烷基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷 基氨基甲酰基(C1-C5)烷基、羟基(C1-C5)烷基、(C1- C4)烷氧基(C1-C4)烷基、氨基(C1-C4)烷基、一-N-或 二-N，N-(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基、氧基、肟基或(C1- C6)烷氧基亚氨基可选择地单、双或三取代，其中选自氧基、肟基 或(C1-C6)烷氧基亚氨基的取代基不多于两个且氧基、肟基或 (C1-C6)烷氧基亚氨基均在非芳族碳上；以及

其中所述R12环还可独立地由(C1-C5)烷基或卤素可选择 地单或双取代；

条件是：当R6为(C1-C5)烷氧基羰基或苄氧基羰基时， R1为5-卤代、5-(C1-C4)烷基或5-氰基且R4为(苯基) (羟基)(C1-C4)烷基、(苯基)(C1-C4)烷氧基(C1- C4)烷基、羟甲基或Ar(C1-C2)烷基，其中Ar为噻吩-2-或 -3-基、呋喃-2-或-3-基或苯基，其中Ar可独立地由卤素可选择地单 或双取代；条件是：当R4为苄基和R5为甲基时，R12不是4-羟 基哌啶-1-基，或当R4为苄基和R5为甲基时，R6不是 C(O)N(CH3)2；

条件是：当R1、R10和R11为H时，R4不是咪唑-4-基甲基、 2-苯基乙基或2-羟基-2-苯基乙基；

条件是：当R8和R9均为正戊基时，R1均不是5-氯代、5 -溴代、5-氰基、5-(C1-C5)烷基、5-(C1-C5)烷 氧基或三氟甲基；

条件是：当R12为3，4-二氢异喹啉-2-基时，所述3，4-二氢异喹 啉-2-基不是由羧基(C1-C4)烷基取代的；

条件是：当R8为H和R9为(C1-C6)烷基时，R9不是由 与NHR9中的N原子相连的碳上的羧基或(C1-C4)烷氧基羰基 取代的；

条件是：当R6为羧基和R1、R10、R11和R5均为H时，R4 不是苄基、H、(苯基)(羟基)甲基、甲基、乙基或正丙基。

第一组优选的式I化合物是这样一些化合物，其中：

R1为5-H、5-卤代、5-甲基、5-氰基或5-三氟甲 基；

R10和R11各自独立地为H和卤素；

A为-C(H)＝；

R2和R3为H；

R4为H、甲基、苯基(C1-C2)烷基，其中所述的苯基可 独立地由H、卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、三 氟甲基、羟基、氨基或氰基单或双取代，以及所述的R4基团还可 由卤素可选择地单取代；或

R4为噻吩-2-或-3-基(C1-C2)烷基、吡啶-2-、-3-或-4-基 (C1-C2)烷基、噻唑-2-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、咪唑- 2-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、呋喃-2-或-3-基(C1-C2)烷基、 吡咯-2-或-3-基(C1-C2)烷基、噁唑-2-、-4-或-5-基(C1-C2) 烷基、吡唑-3-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、异噁唑-3-、-4-或-5- 基(C1-C2)烷基、异噻唑-3-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、哒 嗪-3-或-4-基(C1-C2)烷基、嘧啶-2-、-4-、-5-或-6-基(C1- C2)烷基、吡嗪-2-或-3-基(C1-C2)烷基或1，3，5-三嗪-2-基(C1- C2)烷基，其中所述的上述R4杂环可独立地由卤素、三氟甲基、 (C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、氨基或羟基可选择地单 或双取代，且所述的单或双取代基与碳键合；

R5为H；和

R6为C(O)NR8R9或C(O)R12。

在上述第一组优选的式I化合物中的特别优选的第一组化合物 中，

R4为H、苯基(C1-C2)烷基、噻吩-2-或-3-基(C1-C2) 烷基、呋喃-2-或-3-基(C1-C2)烷基，其中所述的R4环可独立 地由H或氟单或双取代；

R6为C(O)R12；和

R12为吗啉代、硫代吗啉代、1-氧代硫代吗啉代、1，1-二氧代硫 代吗啉代、噻唑烷-3-基、1-氧代噻唑烷-3-基、1，1-二氧代噻唑烷- 3-基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、哌嗪-4-基、氮杂环丁 烷-1-基、1，2-噁嗪烷-2-基、异噁唑烷-2-基、异噻唑烷-2-基、1，2- 氧氮杂环丁烷-2-基、噁唑烷-3-基、1，3-二氢异吲哚-2-基或 azepan-1-yl。

其中所述的R12环可独立地由卤素、(C1-C5)烷基、(C1- C5)烷氧基、羟基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基氨基、 甲酰基、羧基、氨基甲酰基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基 氨基甲酰基、(C1-C5)烷氧基羰基、羟基(C1-C5)烷基、 氨基(C1-C4)烷基、一-N-或二-N，N-(C1-C4)烷基氨基 (C1-C4)烷基、氧基、肟基或(C1-C6)烷氧基亚氨基可选 择地单或双取代，条件是：只有R12杂环噻唑烷-3-基、吡咯烷-1- 基、哌啶-1-基、哌嗪-1-基、哌嗪-4-基、氮杂环丁烷-1-基、1，2-噁 嗪烷-2-基、异噁唑烷-2-基或噁唑烷-3-基可由氧基、肟基或(C1- C6)烷氧基亚氨基可选择地单或双取代；和

其中所述R12环还可独立地由(C1-C5)烷基可选择地单或 双取代；

上述特别优选的化合物有：

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3- 肟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-(顺式-3，4-二羟基吡 咯烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-((3S，4S)-二羟基吡 咯烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(顺式 -3，4-二羟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-(1，1-二氧代噻唑烷-3- 基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2-氧代-2-噻唑烷-3-基 乙基)酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-(4-氟苄基)-2 -(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-((3RS) -羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-氧代-2-((1RS)- 氧代-1-噻唑烷-3-基)乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-(2-氟苄基)-2 -(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2- ((3S，4S)-二羟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3- 羟基氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3- 肟基氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺，或

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(4- 肟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺。

在上述特别优选的化合物中的第-组特别优选的化合物中，

R4为H；和

R12为噻唑烷-3-基、1-氧代噻唑烷-3-基、1，1-二氧代噻唑 烷-3-基或噁唑烷-3-基或所述的R12取代基可独立地由羧基、(C1- C5)烷氧基羰基、羟基(C1-C3)烷基、氨基(C1-C3)烷基、 一-N-或二-N，N-(C1-C3)烷基氨基(C1-C3)烷基可选择 地单或双取代，或

R12为单或双取代的吡咯烷-1-基，其中所述的取代基独立地为 羧基、(C1-C5)烷氧基羰基、(C1-C5)烷氧基、羟基、羟 基(C1-C3)烷基、氨基、氨基(C1-C3)烷基、一-N-或二 -N，N-(C1-C3)烷基氨基(C1-C3)烷基或一-N-或二-N，N- (C1-C4)烷基氨基；和

R12环还可独立地由(Cl-C5)烷基可选择地双取代。

在特别优选的上述最接近的一组化合物中的优选化合物是这 样一些化合物，其中： a.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；和

R12为顺式-3，4-二羟基吡咯烷-1-基； b.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；和

R12为(3S，4S)-二羟基吡咯烷-1-基； c.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；和

R12为1，1-二氧代噻唑烷-3-基； d.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；和

R12为噻唑烷-3-基；和 e.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；和

R12为1-氧代噻唑烷-3-基。

在上述特别优选的化合物中的第二组特别优选化合物中，

R4为苯基甲基、噻吩-2-或-3-基甲基，其中所述的R4环可由氟 可选择地单或双取代；和

R12为噻唑烷-3-基、1-氧代噻唑烷-3-基、1，1-二氧代噻唑 烷-3-基或噁唑烷-3-基或所述的R12取代基可独立地由羧基、(C1- C5)烷氧基羰基、羟基(C1-C3)烷基、氨基(C1-C3)烷基 或一-N-或二-N，N-(C1-C3)烷基氨基(C1-C3)烷基可选 择地单或双取代，或

R12为单或双取代的氮杂环丁烷-1-基或单或双取代的吡咯烷- 1-基或单或双取代的哌啶-1-基，其中所述的取代基独立地为羧基、 (C1-C5)烷氧基羰基、羟基(C1-C3)烷基、氨基(C1- C3)烷基、一-N-或二-N，N-(C1-C3)烷基氨基(C1-C3) 烷基、羟基、(C1-C5)烷氧基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1- C5)烷基氨基、氧基、肟基或(C1-C5)烷氧基亚氨基；和

R12环还可独立地由(C1-C5)烷基可选择地单或双取代。

在特别优选的上述最接近的一组化合物中的优选化合物为这 样一些化合物，其中： a.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为4-氟苄基；

R12为4-羟基哌啶-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； b.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为3-羟基哌啶-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； c.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为顺式-3，4-二羟基吡咯烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； d.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为3-肟基吡咯烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； e.  R1为5-氯代；

Rl0和R11为H；

R4为2-氟苄基；

R12为4-羟基哌啶-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； f.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为(3S，4S)-二羟基吡咯烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； g.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为3-羟基氮杂环丁烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； h.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为3-肟基氮杂环丁烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)；和 i.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R12为4-肟基哌啶-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)。

在上述第一组优选的化合物中的第二组特别优选化合物是这 样一些化合物，其中：

R4为H、苯基(C1-C2)烷基、噻吩-2-或-3-基(C1-C2) 烷基、呋喃-2-或-3-基(C1-C2)烷基，其中所述的R4环可独立 地由H或氟单或双取代；

R6为C(O)NR8R9；和

R8为H、(C1-C5)烷基、羟基或(C1-C4)烷氧基；和

R9为H、(C4-C6)环烷基、(C3-C6)环烷基(C1- C5)烷基、亚甲基全氟化(C1-C3)烷基、吡啶基、吡咯烷基、 噁唑基、噻唑基、咪唑基、哌啶基、苯并噻唑基或二氢苯并噻喃基； 或

R9为(C1-C5)烷基，其中所述的(C1-C5)烷基可由 (C4-C6)环烯基、苯基、噻吩基、吡啶基、吡咯烷基、噁唑基、 噻唑基、咪唑基、吡唑基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、1-氧代 硫代吗啉基或1，1-二氧代硫代吗啉基可选择地取代，以及其中所述 的(C1-C5)烷基或(C1-C4)烷氧基还可独立地由卤素、羟 基、(C1-C5)烷氧基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷 基氨基、氰基、羧基或(C1-C4)烷氧羰基可选择地单或双取代； 以及

其中R9环独立地在碳上由卤素、(C1-C4)烷基、(C1- C4)烷氧基、羟基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C4)烷基氨基、 氨基甲酰基、(C1-C5)烷氧基羰基或氨基甲酰基可选择地单或 双取代。

在特别优选的上述最接近的第二组化合物中的优选化合物是 这样一些化合物，其中： a.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R8为甲基；和

R9为3-(二甲基氨基)丙基； b.  碳(a)的立体化学为(S)；

R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R8为甲基；和

R9为3-吡啶基； c.  碳(a)的立体化学为(S)；

R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R8为甲基；和

R9为2-羟基乙基；和 d.  碳(a)的立体化学为(S)；

R1为5-氟代；

R10和R11为H；

R4为4-氟苯基甲基；

R8为甲基；和

R9为2-吗啉代乙基。

在上述第一组优选的化合物中的第三组特别优选化合物是这 样一些化合物，其中：

R4为H、苯基(C1-C2)烷基、噻吩-2-或-3-基(C1-C2) 烷基、呋喃-2-或-3-基(C1-C2)烷基，其中所述的R4环可独立 地由H或氟单或双取代；

R6为C(O)NR8R9；和

R8为H、(C1-C5)烷基、羟基或(C1-C4)烷氧基；和

R9为(C1-C4)烷氧基，其中所述的(C1-C4)烷氧基可 由(C4-C6)环烯基、苯基、噻吩基、吡啶基、吡咯烷基、噁唑 基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、1- 氧代硫代吗啉基或1，1-二氧代硫代吗啉基可选择地取代，以及其中 所述的(C1-C5)烷基或(C1-C4)烷氧基还可独立地由卤素、 羟基、(C1-C5)烷氧基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C5) 烷基氨基、氰基、羧基或(C1-C4)烷氧羰基可选择地单或双取 代；以及

其中R9环独立地在碳上由卤素、(C1-C4)烷基、(C1- C4)烷氧基、羟基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C4)烷基氨基、 氨基甲酰基、(C1-C5)烷氧基羰基或氨基甲酰基可选择地单或 双取代。

在特别优选的上述最接近的第三组化合物中的优选化合物是 这样一些化合物，其中： a.  R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R8为甲基；和

R9为2-羟基乙氧基； b.  碳(a)的立体化学为(S)；

R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为4-氟苯基甲基；

R8为甲基；和

R9为甲氧基； c.  碳(a)的立体化学为(S)；

R1为5-氯代；

R10和R11为H；

R4为苄基；

R8为甲基；和

R9为甲氧基。

第二组优选的式I化合物是这样一些化合物，其中：

R1为5-卤素、5-甲基、5-氰基或三氟甲基；

R10和R11各自独立地为H或卤素；

A为-C(H)＝；

R2和R3为H；

R4为H、苯基(C1-C2)烷基、噻吩-2-或-3-基(C1-C2) 烷基、呋喃-2-或-3-基(C1-C2)烷基，其中所述的环可独立地由 H或氟单或双取代；

R5为H；和

R6为(C1-C5)烷氧基羰基。

第三组优选的式I化合物是这样一些化合物，其中：

R1为5-卤素、5-甲基、5-氰基或三氟甲基；

R10和R11各自独立地为H或卤素；

A为-C(H)＝；

R2和R3为H；

R4为H、甲基或苯基(C1-C2)烷基，其中所述的苯基可 独立地由H、卤素、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、三 氟甲基、羟基、氨基或氰基单或双取代，以及所述的苯基还可独立 地由H或卤素单或双取代；或

R4为噻吩-2-或-3-基(C1-C2)烷基、吡啶-2-、-3-或-4-基 (C1-C2)烷基、噻唑-2-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、咪唑- 2-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、呋喃-2-或-3-基(C1-C2)烷基、 吡咯-2-或-3-基(C1-C2)烷基、噁唑-2-、-4-或-5-基(C1-C2) 烷基、吡唑-3-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、异噁唑-3-、-4-或-5- 基(C1-C2)烷基、异噻唑-3-、-4-或-5-基(C1-C2)烷基、哒 嗪-3-或-4-基(C1-C2)烷基、嘧啶-2-、-4-、-5-或-6-基(C1- C2)烷基、吡嗪-2-或-3-基(C1-C2)烷基或1，3，5-三嗪-2-基(C1- C2)烷基，其中所述的上述R4杂环可独立地由卤素、三氟甲基、 (C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、氨基或羟基可选择地单 或双取代，且所述的单或双取代基与碳键合；

R5为H；和

R6为羧基。

在第三组优选化合物中的第一组特别优选的化合物是这样一 些化合物，其中：

R10和R11为H；和

R4为H。

在最接近的上述特别优选化合物中的特别优选化合物是R1为 5-氯代的化合物。

本发明的另一方面涉及用于生产一些式I化合物的中间体。该 中间体具有式QZ：

式中，

R5为H；

R4为H、苯基甲基、噻吩-2-或-3-基甲基、呋喃-2-或-3-基甲基， 其中所述环可由氟可选择地单或双取代；和

R12为噻唑烷-3-基、1-氧代噻唑烷-3-基、1，1-二氧代噻唑烷-3- 基、吡咯烷-1-基、哌啶-1-基、氮杂环丁烷-1-基、1，2-噁嗪烷-2-基、 异噁唑烷-2-基、异噻唑烷-2-基、1，2-氧氮杂环丁烷-2-基或噁唑烷- 3-基，

其中所述的R12环可独立地由卤素、(C1-C5)烷基、(C1- C5)烷氧基、羟基、氨基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基氨基、 甲酰基、羧基、氨基甲酰基、一-N-或二-N，N-(C1-C5)烷基 氨基甲酰基、(C1-C5)烷氧基羰基、羟基(C1-C5)烷基、 氨基(C1-C4)烷基、一-N-或二-N，N-(C1-C4)烷基氨基 (C1-C4)烷基、氧基、肟基或(C1-C6)烷氧基亚氨基可选 择地单或双取代，条件是只有R12杂环噻唑烷-3-基、吡咯烷-1-基、 哌啶-1-基、氮杂环丁烷-1-基、1，2-噁嗪烷-2-基、异噁唑烷-2-基或 噁唑烷-3-基可独立地由氧基、肟基或(C1-C6)烷氧基亚氨基可 选择地单或双取代；以及

所述R12环还可独立地由(C1-C5)烷基可选择地单或双取 代；和

条件是：R12不是2-羧基-4-羟基吡咯烷-1-基、2- ((C1-C5)烷氧基羰基)-4-羟基吡咯烷-1-基、2-羧基哌 啶-1-基或2-((C1-C5)烷氧基羰基)哌啶-1-基。

在上述中间体中的特别优选化合物是这样一些化合物，其中： a.  R4为H；和

R12为噻唑烷-3-基； b.  R4为H；和

R12为1，1-二氧代噻唑烷-3-基；和 c.  R4为H；和

R12为1-氧代噻唑烷-3-基。

式QZ的第一组优选化合物是这样一些化合物，其中：

R4为苯基甲基，所述苯基可由氟可选择地单或双取代；和

R12为3-单取代的氮杂环丁烷-1-基、3-单或3，4-双取代 的吡咯烷-1-基、3-、4-或5-单或双取代的哌啶-3-基、噻唑 烷-3-基、1-氧代噻唑烷-3-基或1，1-二氧代噻唑烷-3-基，所述的 吡咯烷-1-基或哌啶-1-基可独立地由羟基、氧基、肟基、氨基、一 -N-或二-N，N-(C1-C4)烷基氨基、(C1-C5)烷氧基 羰基或羧基单或双取代

以及所述的R12环还可独立地由(C1-C4)烷基可选择地单 或双取代。

在最接近的上述的优选化合物中特别优选化合物是这样一些 化合物，其中： a.  R4为苄基；

R12为3-羟基吡咯烷-3-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； b.  R4为苄基；

R12为3-羟基氮杂环丁烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； c.  R4为苄基；

R12为3，4-二羟基吡咯烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； d.  R4为苄基；

R12为4-羟基哌啶-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； e.  R4为4-氟苯基甲基；

R12为4-羟基哌啶-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)； f.  R4为苄基；

R12为4-肟基氮杂环丁烷-1-基；和

碳(a)的立体化学为(S)。

本发明的还一方面涉及治疗哺乳动物与糖原磷酸化酶有关的 疾病或症状的方法，该方法包括对患有与糖原磷酸化酶有关的疾病 或症状的哺乳动物施用治疗与糖原磷酸化酶有关的疾病或症状剂 量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物高血糖的方法，该方法包 括对患有高血糖的哺乳动物施用治疗高血糖剂量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物糖尿病的方法，该方法包 括对患有糖尿病的哺乳动物施用治疗糖尿病剂量的式I化合物。治 疗糖尿病包括预防或缓解长期并发症如神经病、肾病、视网膜病或 白内障。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物血胆甾醇过多的方法，该 方法包括对患有血胆甾醇过多的哺乳动物施用治疗血胆甾醇过多 剂量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物动脉粥样硬化的方法，该 方法包括对患有动脉粥样硬化的哺乳动物施用治疗动脉粥样硬化 剂量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物高胰岛素血的方法，该方 法包括对患有高胰岛素血的哺乳动物施用治疗高胰岛素血剂量的 式I化合物。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物高血压的方法，该方法包 括对患有高血压的哺乳动物施用治疗高血压剂量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及治疗哺乳动物高脂血的方法，该方法包 括对患有高脂血的哺乳动物施用治疗高脂血剂量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及预防哺乳动物心肌缺血损伤的方法，该 方法包括对处于perioperative心肌缺血损伤危险期的哺乳动物施 用预防perioperative心肌缺血损伤剂量的式I化合物。

本发明的另一方面涉及预防哺乳动物心肌缺血损伤的方法，该 方法包括对处于perioperative心肌缺血损伤危险期的哺乳动物施 用预防perioperative心肌缺血损伤剂量的糖原磷酸化酶抑制剂。

本发明还涉及包含治疗有效剂量的式I化合物及可药用载体的 药物组合物。

优选的组合物包括用于治疗哺乳动物与糖原磷酸化酶有关的 疾病或症状的药物组合物，该组合物包含治疗与糖原磷酸化酶有关 疾病或症状剂量的式I化合物及可药用载体。

本发明的另一方面涉及用于治疗糖尿病的药物组合物，该组合 物包含治疗有效剂量的糖元磷酸化酶抑制剂；

一种或多种抗糖尿病剂如胰岛素及其类似物(例如LysPro胰 岛素)；GLP-1(7-37)(胰岛素调理素)和GLP-1(7-36)-NH2；磺 酰脲类及其类似物：氯磺丙脲、格利苯脲、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、 醋磺己脲、glypizide、格列美脲、repaglinide、meglitinide；缩 二胍：二甲双胍、苯乙双胍、丁双胍；α2-拮抗药和咪唑啉类： 咪格列唑、isaglidole、deriglidole、咪唑克生、efaroxan、 fluparoxan；其它胰岛素促分泌素：利诺格列、A-4166； Glitazones：环格列酮、pioglitazone、englitazone、troglitazone、 darglitazone、BRL49653；脂肪酸氧化抑制剂：氯莫克舍、乙莫克 舍；α-葡糖苷酶抑制剂：阿卡波糖、米格列醇、乙格列酯、 voglibose、MDL-25，637、camiglibose、MD-73，945；β-激动 剂：BRL35135、BRL37344、Ro 16-8714、ICI D7114， CL316，243；磷酸二酯酶抑制剂：L-386，398；降脂剂： 苯氟雷司；抗肥胖剂：芬氟拉明；钒酸盐和钒配合物(如naglivan) 以及过氧化钒配合物；支链淀粉拮抗药；高血糖素拮抗药；糖异生 抑制剂，生长抑素类似物；抗类脂剂：烟酸、阿西莫司、WAG994； 以及

可选择的可药用载体。

优选的上述药物组合物是其中糖原磷酸化酶为式I化合物的 药物组合物。

本发明的另一方面是利用上述组合的组合物治疗糖尿病的方 法。

与糖原磷酸化酶有关的疾病是指整体或部分地通过糖原磷酸 化酶裂解糖原大分子、释放葡萄糖-1-磷酸盐和新的缩短了的糖原分 子而传媒、引起或维持的疾病。这些疾病是通过降低糖原磷酸化酶 的活性得到改善或以糖原磷酸化酶活性的升高为特征。疾病的实例 包括糖尿病、高血糖、血胆甾醇过多、高血压、高胰岛素血、高脂 血、动脉粥样硬化和心肌缺血。

术语糖原磷酸化酶抑制剂是指能降低、阻止或消除糖原磷酸化 酶的酶催作用的任何物质或试剂或任何物质和/或试剂的组合。目 前所知道的糖原磷酸化酶的酶催作用是指通过糖原大分子和无机 磷酸盐的可逆反应的催化将糖原降解成葡萄糖-1-磷酸盐和糖原大 分子，后一个糖原大分子是比原始糖原大分子短的一个葡糖残基 (正向糖原分解)。

这里使用的术语“治疗”包括预防性(如预防剂)治疗和缓轻 性治疗。

卤素是指氯、溴、碘或氟。

烷基是指直链或支链饱和烃。这类烷基的实例(假设指定长度 包含特定的实施例)有甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、 叔丁基、戊基、异戊基、己基和异己基。

烷氧基是指与氧基键合的直链或支链饱和烷基。这类烷氧基的 实例(假定指定长度包含特定的实施例)有甲氧基、乙氧基、丙氧 基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、异戊氧基、 己氧基和异己氧基。

术语“可药用阴离子盐”是指含阴离子如(但不局限于)氯、 溴、碘、硫酸根、硫酸氢根、磷酸根、乙酸根、马来酸根、富马酸 根、草酸根、乳酸根、酒石酸根、柠檬酸根、葡糖酸根、甲磺酸根 和4-甲苯磺酸根的无毒性阴离子盐。

术语“可药用阳离子盐”是指无毒性阳离子盐如(但不局限于) 钠、钾、钙、镁、铵或质子化苄星(N，N’-二苄基乙二胺)、胆 碱、乙醇胺、二乙醇胺、乙二胺、meglamine(N-甲基-葡糖 胺)、benethamine(N-苄基苯乙胺)、哌嗪或tromethamine (2-氨基-2-羟基甲基-1，3-丙二醇)。

术语“前体药物”是指药物前体化合物，该化合物给药后在体 内通过化学或生理过程释放药物(例如前体药物在生理pH中转变 成所需的药物形式)。一些实例性前体药物裂解时释放出了相应的 游离酸，且本发明化合物的形成可水解酯的残基包括但不局限于羧 酸取代基(如R6为羧基或者R8、R9或R12含羧基)，其中游离氢 被下述基团取代：(C1-C4)烷基、(C2-C12)链烷酰氧基甲 基、含4至9个碳原子的1-(链烷酰氧基)乙基、含5至10个 碳原子的1-甲基-(链烷酰氧基)乙基、含3至6个碳原子的烷 氧基羰氧基甲基、含4至7个碳原子的1-(烷氧基羰氧基)乙基、 含5至8个碳原子的1-甲基-(烷氧基羰氧基)乙基、含3至9 个碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、含4至10个碳原子的 1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-苯并[c]呋喃酮基、4 -crotonolactonyl、γ-丁内酯-4-基、二-N，N-(C1-C2)烷 基氨基(C2-C3)烷基(如β-二甲基氨基乙基)、氨基甲酰基 (C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)烷基氨基甲酰基(C1 -C2)烷基和哌啶基、吡咯烷基或吗啉代(C2-C3)烷基。

其它实例性前体药物释放式I醇，其中羟基取代基(如R8、 R9或R12含羟基)中的游离氢由下述基团取代：(C1-C6)链烷 酰氧基甲基、1-((C1-C6)链烷酰氧基)乙基、1-甲基- 1-((C1-C6)链烷酰氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基羰氧 基甲基、N-(C1-C6)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C1 -C6)链烷酰基、α-氨基(C1-C4)链烷酰基、芳酰基和α- 氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中α-氨基酰基部分 独立地为任何在蛋白质、P(O)(OH)2、-P(O)(O(C1-C6)烷基)2或 糖基(由除去糖类半缩醛的羟基形成的基团)中发现的天然存在的 L-氨基酸。

其它实例性前体药物包括但不局限于式I的衍生物，其中R2 为由下述基团取代的游离氢：R-羰基、RO-羰基、NRR’- 羰基，其中R和R’各自独立地为(C1-C10)烷基、(C3-C7) 环烷基、苄基，或者R-羰基为天然α-氨基酰基或天然α-氨基 酰基-天然α-氨基酰基、-C(OH)C(O)OY(其中Y为H、(C1 -C6)烷基或苄基)、-C(OY0)Y1(其中Y0为(C1-C4)烷基 和Y1为((C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4) 烷基或一-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基)、-C(Y2)Y3(其中Y2为H或甲基和Y3为一-N-或二-N，N-(C1-C6) 烷基氨基)、吗啉代、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基。

其它实例性前体药物包括但不局限于在R3处带有可水解部分 的式I衍生物，它们释放出R3在水解时为游离氢的式I化合物。这 类R3处的可水解部分为/包括1-羟基(C1-C6)烷基或1-羟 基-1-苯基甲基。

其它实例性前体药物包括环状结构，如R2和R3为普通碳原子 的式I化合物，从而形成了一个五元环。连接的碳原子可独立地由 H、(C1-C6)烷基、(C3-C6)环烷基或苯基单或双取代。

这里使用的术语“反应惰性溶剂”和“惰性溶剂”是指不与起 始原料、试剂、中间体或产物以不利地影响所需产物的产率的方式 反应的溶剂。

本领域的普通化学专家会认识到：本发明的某些化合物可含有 一个或多个处于特定的立体化学构型或几何构型的原子，从而得到 立体异构体和构型异构体。所有这些异构体及其混合物都包括在本 发明之内。本发明化合物的水合物也包含在本发明内。

本领域的普通化学专家会认识到：本发明所列的含杂原子的取 代基的一些组合使得化合物在生理条件下不太稳定(如那些含乙缩 醛或氨基键的化合物)。因此这些化合物不是很优选。

相对于环上的取代，这里使用的其中x为整数的术语“Rx环” 如“R9环”、“R12环”或“R4环”是指Rx为环的部分及Rx中 含有环的部分。

这里使用的术语一-N-或二-N，N-(C1-Cx)烷基… 是指：当其为二-N，N-(C1-Cx)烷基…(x为整数)时，(C1 -Cx)烷基部分是独立的。

其它特征和优点将描述在本发明的说明书和权利要求书中。

通常可按化学领域中已知的方法，特别是按本文所描述的方法 来制备式I化合物。本发明进一步的特征是提供制备式I化合物的 某些方法并通过下文的反应流程式来说明。

反应流程式I 反应流程式II 反应流程式III 反应流程式IV 反应流程式V 反应流程式VI

根据反应流程式I，可按两种常规方法中的任一种来制备式I 化合物，其中R1，R10，R11，A，R2，R3，R4，R5和R6如上 文所定义。在第一种方法中，可通过将适当的式II吲哚-2-羧 酸，二氢吲哚-2-羧酸或苯并咪唑-2-羧酸与适当的式III胺 (即将胺酰化)偶合来制备所要的式I化合物。在第二种方法中， 可通过将适当的式IV化合物(即式I化合物，其中R6为羧基)与 适当的醇或式R8R9NH或R12H胺偶合来制备所要的式I化合物， 其中R8，R9和R12如上文所定义(即将胺或醇酰化)。典型地， 在R4不是H并且R5是H时，第一种方法(将式II化合物与式III 化合物偶合)是优选的。

典型地，在适宜的偶合剂存在下，将式II化合物与式III化合 物或醇结合(或将式IV化合物与适宜的胺(例如R12H或R8R9NH结合))。适宜的偶合剂是能够将羧酸转化成活性组分的试剂，其 中当所述活性组分与胺或醇反应时可分别形成酰胺或酯键。

偶合剂可以是在罐法中，当与羧酸和胺或醇混合时进行缩合 作用的试剂。如果酸与醇缩合，优选使用大量过量的醇作反应溶 剂，加或不加1.0-1.5当量的二甲基氨基吡啶。偶合剂的实例为1 -(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐-羟基苯 并三唑(DEC/HBT)，羰基二咪唑(carbonyldiimidazole)，二 环己基碳化二亚胺/羟基苯并三唑(HBT)，2-乙氧基-1-乙 氧基羰基-1，2-二氢喹啉(EEDQ)，羰基二咪唑/HBT，丙 烷膦酸酐(丙膦酸酐，PPA)和二乙基磷酰基氰化物。在叔胺碱 如三乙胺存在或不存在下，在惰性溶剂，优选非质子传递溶剂中， 在温度大约为-20℃至50℃下偶合约1-48小时。溶剂的实例 包括乙腈，二氯甲烷，乙酸乙酯，二甲基甲酰胺和氯仿或其混合物。 适宜的偶合方法的实例为包含在本文中的方法A(在实施例前)。

偶合剂也可以是将羧酸转化为活化中间体的试剂，所述中间体 在第一步中分离和/或形成并在第二步中与胺或醇反应。该偶合剂 和活化中间体的实例为形成酰基氯的亚硫酰氯或草酰氯，形成酰基 氟的氰尿酰氟或形成混合羧酸酐的氯甲酸烷基酯如氯甲酸异丁酯 或异丙烯酯(具有叔胺碱)。如果偶合剂为草酰氨，用少量二甲基 甲酰胺作为助溶剂与另一种溶剂(如二氯甲烷)来催化酰基氯的形 成是有效的。该酰基氯可通过在适宜的溶剂和适宜的碱中与式III 中间体混合来偶合。例如适宜的溶剂/碱组合为在叔胺碱例如三乙 胺存在下的二氯甲烷，二甲基甲酰胺或乙腈或其混合物。其它适宜 的溶剂/碱组合包括水或(C1-C5)醇或其混合物与助溶剂如二氯 甲烷、四氢呋喃或二噁烷，和足够消耗反应中释放酸量的碱如碳酸 钠或钾，氢氧化钠，钾或锂或碳酸氢钠。当使用仅部分混溶助溶剂 的混合物(如二氯甲烷-水或二氯甲烷-甲醇)时，用相转移催化 剂(典型地为1-10摩尔％)如季铵卤化物(例如溴化四丁铵或 氯化甲基三辛铵)是有效的。偶合剂的使用和适当地选择溶剂和温 度是本领域技术人员公知的或者可以容易地从文献中查到。在 Houben-Weyl，Vol XV，Part II，E.Wunsch，Ed.，G.Theime Verlag，1974，Stuttgart，and M.Bodansky，Principles of Peptide Synthesis，Springer-Verlag Berlin 1984和The Peptides.Analysis， Synthesis and Biology(ed.E.Gross and J.Meienhofer)，Vols 1-5 (Academic Press NY 1979-1983)中，描述了这些和其它用于偶合羧 酸的例举条件。

通过在大约-20℃-100℃温度下，典型地在约20℃下，用 含水碱水解大约30分钟-24小时，可以从相应的式V酯(即式I 化合物，其中R6为(C1-C5)烷氧基羰基或苄氧基羰基)来制 备式IV化合物，其中R1，R10，R11，A，R2，R3，R4和R5 如上文定义。

或者，通过在含适宜碱的适宜溶剂中，用提供与式III化合物 (其中R3，R4和R5如上文所述并且R6为羧基)反应的活化中间 体(如酰基氯，酰基氟或混合的酸酐)的偶合剂(如上文所述)活 化式II吲哚羧酸来制备式IV化合物。适宜的溶剂包括水或甲醇或 其混合物与助溶剂如二氯甲烷，四氢呋喃，二噁烷的混合溶剂。适 宜的碱包括足够消耗反应中释放酸量(通常为足够维持反应的PH 大于8的量)的氢氧化钠，钾或锂，碳酸氢钠或钾，碳酸钠或钾， 或碳酸钾与溴化四丁铵(1当量)的混合碱。可逐渐加入碱和活化 中间体，以适当控制反应的PH。通常在-20℃至50℃之间进行 反应。为除去杂质，本领域技术人员制定了分离方法，但典型地包 括蒸发除去水溶混性助溶剂，在高PH下用有机溶剂提取杂质，酸 化至低PH(1-2)并过滤，或用适宜的溶剂如乙酸乙酯或二氯 甲烷萃取所要产品。

用上述类似的方法(例如方法A)，通过将适宜的式III化合 物(其中R6为烷氧基羰基)和适宜的式II化合物偶合，可以制备 式V化合物。

或者，通过在约0℃-25℃温度下，用适宜的氧化剂，如在二 氯甲烷中的间氯过氧苯甲酸(转化为亚砜氧化状态用约1-1.3当 量，转化为砜氧化状态用大于约2当量)处理约1-48小时可以 从相应的含未氧化形式的硫原子的式I化合物制备含亚砜或砜氧化 状态的硫原子的式I化合物。

本文所述的某些制备方法需要保护间接官能团(即在式I前体 中的伯胺，仲胺，羧基)。这种保护的要求将依赖于间接官能团的 性质和制备方法的条件而改变。本领域技术人员很容易确定需要保 护的程度。使用保护/脱保护方法也属于本领域技术。就通常所述 的保护基及其应用而言，见T.W.Green，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley & Sons，New York，1991。

例如，在反应流程式I中，如果式III中间体或R12H或R8R9NH胺未保护，那么某些式I化合物在由可干扰反应流程式I偶合反应 的R6所定义的分子部分含有伯胺，仲胺或羧酸官能团。因此，当 伯胺，仲胺或羧酸官能团存在于式III中间体、R8R9NH或R12H胺的R6部分中时，可在反应流程式I的偶合反应中，由适宜的保 护基保护这些官能团。在这种情况下偶合反应的产物是含保护基的 式I化合物。在接下来的步骤中除去该保护基提供式I化合物。用 来保护胺和羧酸的适宜的保护基包括那些在肽合成中通常使用的 保护基(如N-叔丁氧基羰基，N-苄氧基羰基(carbobenzyloxy) 和9-芴基亚甲基氧羰基用于保护胺，低级烷基或苄基酯用于保护 羧酸)，所述保护基在上述(和在本文实施例前的方法A)偶合条 件下，化学性质是不活泼的并且不用化学方法改变式I化合物中的 其它官能团即可除去。

当反应流程式I中所使用的起始物吲哚-2-羧酸和二氢吲哚 -2-羧酸不能通过商业渠道购得或在先前领域中(该领域是广泛 公开的)是未知的时，可通过常规合成方法得到。例如，按照反应 流程式II，通过Fischer吲哚合成法(见The Fischer Indole  Synthesis Robinson，B.(Wiley，New York，1982))，可以从式VI 化合物(其中除N外，选择Q来获得需要的上文所定义的A)制 备式VII吲哚酯(其中A不是N)，然后通过将得到的式VII吲 哚酯皂化得到相应的式VIII酸。通过将容易得到的肼与适宜的羰 基衍生物的缩合或通过Japp-Klingeman反应(见Organic Reactions，Phillips，R.R.，1959，10，143)可以制备起始物芳基腙。

或者，通过将式IX邻甲基硝基化合物与草酸酯缩合得到式X 吲哚酯，然后还原硝基并随后进行水解可制备式VIIIA吲哚2-羧 酸。

该三步法是已知的Reissert吲哚合成法(Reissert，Chemische Berichte 1897，30，1030)。在文献(Kermack等人，J.Chem.Soc. 1921，119，1602；Cannon等人，J.Med.Chem.1981，24，238； Julian等人在Heterocyclic Compounds，Vol 3(Wiley，New York， NY，1962，R.C.Elderfield，ed.)P18)中描述了实现该结果的条件 及其参考。具体完成该结果的实例为本文实施例10A-10C。

也可以通过将5-氯-1H-吲哚-2-羧酸卤化来制备3- 卤代-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸。

按照反应流程式III，通过将式XIII邻二氨基化合物与羟基乙 酸缩合，并将得到的式XII苯并咪唑-2-甲醇氧化(Bistrzycki， A.和Przeworski，G.Ber.1912，45，3483)来制备式XI苯并咪唑 -2-羧酸中间体。

或者(按照反应流程式II)，通过在约25℃-65℃温度下， 用还原剂如镁/甲醇将相应的式XV吲哚还原约1-48小时(反应 流程式III)，可制备式XIV取代的二氢吲哚。

通过将相应的式XVII酯皂化(反应流程式III)来制备式XVI 二氢吲哚羧酸。通过用还原剂如上文将式XV化合物转化为式XIV 化合物中所述的镁/甲醇还原相应的式VII吲哚酯来制备式XVII 酯。

下文描述制备上文反应流程式中所使用的各种胺的方法。

按照反应流程式IV，可以用适宜的保护基(Pt)(例如：t- Boc)来保护式XXIIIα-氨基酸上的氮形成式XXIV化合物。 本领域技术人员可以很容易地选择适宜的保护基及其引入方法。例 如，两种常见的保护基为t-Boc(通过在高PH下，在优选的适宜 的质子溶剂或溶剂混合物中，用碳酸氢二叔丁酯处理氨基酸而引 入)和CBZ(通过在适宜的，优选的质子溶剂或溶剂混合物和碱 中，用氯甲酸苄酯处理氨基酸来引入)。将式XXIV化合物与适宜 的R8R9NH或HR12胺偶合(用与反应流程式I所述偶合方法类似 的方法)形成式XXV化合物，然后脱保护得到式IIIb化合物(即 式III化合物，其中R6为C(O)R12或C(O)NR8R9)。如 果保护基是t-Boc，通过在适宜的，优选非质子传递溶剂中，用酸 处理式XXV化合物来脱保护。用于脱保护的酸包括HCl， MeSO3H或三氟乙酸。

按照反应流程式V，通过N-保护(产生式XXXIII保护氨基 酸)，然后酯化，可以从相应的式XXX未保护氨基酸制备式XXXI 化合物(N保护的式III胺，其中R6为(C1-C8)烷氧基羰基或 苄氧基羰基)。例如，可以用适宜的醇和酸催化剂如氯化氢或亚硫 酰氯将式XXXIII化合物酯化，或者就叔丁醇来说，用异丁烯和酸 催化剂如浓硫酸来处理氨基酸或用烷基卤(例如甲基碘)和碱(例 如碳酸钾)来处理。或者，可以在保护步骤前进行酯化作用。

按照反应流程式VI，可按如下制备反应流程式V中所用的式 XXX化合物，其中R3不是H。可以通过用适宜的碱和烷基化试剂 处理，将式XL保护(PT)氨基酸N-烷基化来制备式XLI氨基 酸。Benoiton，Can.J.Chem 1977，55，906-910和Hansen，J.Org. Chem.1985，50945-950描述了用于进行该烷基化作用的具体方 法。例如，当R3是甲基并且PT为Boc时，用氢化钠和甲基碘的四 氢呋喃溶液。将式XLI化合物脱保护得到需要的式XXX化合物。

或者，可以通过三步骤将式XLII氨基酸N-烷基化，它包括 还原性苄基化作用(如用苯甲醛，Pd/C催化的氢化)得到单-N -苄基衍生物和用适宜的羰基化合物进行还原性胺化作用(例如用 甲醛和氰基硼氢化钠引入R3甲基)得到N-苄基，N-R3-取代 氨基酸。通过方便的方法除去N-苄基保护基(例如通过用适宜的 催化剂氢化)得到式XXX化合物。Reinhold等人，在J.Med.Chem. 1968，11，258-260中描述了该三步烷基化方法的具体条件。

以上制备也可以用来将R3部分引入式IIIa中间体(即，式III 中间体，其中R3为H)。

本文流程式中使用的氨基酸(例如XL，XLII)如果不能通 过商业渠道购得或未在文献中报道，可以通过本领域技术人员公知 的各种方法制备。例如，可以使用Strecker合成法或其变化后的方 法。因此，醛(R4CHO)，氰化钠或钾和氯化铵反应形成相应的 氨基腈。用无机酸水解氨基腈得到需要的式XLIIR4C(NH2) COOH氨基酸。或者，可以使用Bucherer-Berg法，其中通过 将醛(R4CHO)与碳酸铵和氰化钾一起加热得到乙内酰脲，然后 用酸或碱水解(例如用在回流二噁烷中的氢氧化钡)得到需要的式 XLIIR4C(NH2)COOH氨基酸。

在指导本领域技术人员制备合成式I化合物必需的式XLII  R4C(NH2)COOH中间体的文献中，也报道了合成α-氨基酸的其 它方法。

在Duthaler(Tetrahedron 1994，50，1539-1650)或Williams(R. M.Williams，Synthesis of optically active amino acids.Pergamon： Oxford，U.K.，1989)的报道中可以看到合成和/或分开式XLII化合 物的适宜的方法。

从相应的R4X(X＝Cl，Br或I)中间体来合成式XLII中间 体任一对映体形式的特定方法为Pirrung和Krishnamurthy(J. Org.Chem.1993，58，957-958)法，或O’Donnell等人(J.Am.Chem. Soc.1989，111，2353-2355)的方法。用本领域熟练化学工作者所熟 悉的很多方法，可以很容易地制备需要的R4X中间体。例如，通 过化合物ArCH3的游离基卤化或通过将芳烃Ar-H甲酰化并将醇转 化为溴化物可以制备当R4X为ArCH2X时的那些化合物。

另一种合成式XLII中间体任一对映体形式的特定方法是 Corey和Link法(J.Am.Chem.Soc.1992，114，1906-1908)。 因此，将式R4COCCl3中间体对映特异性地还原成中间体 R4CH(OH)CCl3，并通过用叠氮化合物和碱处理将 R4CH(OH)CCl3转化为中间体R4CH(N3)COOH，再通过催化氢化将 R4CH(N3)COOH还原得到需要的式XLII化合物。通过将醛R4CHO与三氯甲基化物阴离子反应，然后氧化(Gallina和Giordano， Synthesis 1989，466-468)得到需要的三氯甲酮R4COCCl3。

在适宜的还原性胺化条件下，用对应于R8或R9的羰基化合物 分别将式R8NH2或R9NH2化合物单烷基化，得到式R8R9NH胺。 为了避免二烷基化，优选用适宜的保护基PT保护胺(R8NH2或 R9NH2)得到R8(PT)NH或R9(PT)NH，例如通过与苯甲 醛和还原剂反应来保护。在适宜的还原性胺化条件下，用对应于R9 或R8的羰基化合物，分别将保护的胺单烷基化，得到 R8R9N(PT)。除去保护基(PT)(例如当PT为苄基时，通过消耗性催 化氢化)得到式R8R9NH化合物。适宜的还原性胺化条件可以从本 领域技术人员公知的文献中获得。这些条件包括Borch等人(J.Am. Chem.Soc.1971，2897-2904)报道的条件和Emerson(Organic Reactions，Wiley：New York，1948(14)，174)，Hutchins等人(Org. Prep.Proced.Int 1979(11)，20)和Lane等人(Synthesis 1975，135) 报道的条件。有助于N-单烷基化的还原性胺化条件包括Morales 等人(Synthetic Communications 1984，1213-1220)和Verardo 等人(Synthesis 1992 121-125)报道的条件。也可以分别用R9X或 R8X将R8NH2或R9NH2胺单烷基化，其中X为氯，溴，甲苯磺酸 酯或甲磺酸酯。或者可以用R9X或R8X将式R8(PT)NH或 R9(PT)NH中间体烷基化，并除去保护基，得到式R8R9NH化合 物。

也可以用其它方法来制备式R8R9NH胺，其中R8-NH或 R9-NH为氧-氮连接。因此，通过用碱和过量适宜的烷基化试剂(R -X)处理，可以将容易得到的式(C1-C4)烷氧基羰基-NHOH或NH2CONHOH的化合物在氮和氧上二烷基化，得到相应的(C1 -C4)烷氧基羰基-N(R)OR，将其水解得到式R8R9NH化 合物(其中R8＝R9＝R)。适宜的条件，碱和烷基化试剂包括 Goel和Krolls(Org.Prep.Proced.Int.1987，19，75-78)和Major 和Fleck(J.Am.Chem.Soc.1928，50，1479)所述的那些。或者通 过在适宜的碱存在下，分别用烷基化试剂R’X和R”X相继处 理，可以将N-羟基脲(NH2CONH(OH))顺序烷基化，先 在氧上烷基化得到NH2CONH(OR’)，然后在氮上烷基化得 到NH2CON(R”)(OR’)。适宜的碱和烷基化试剂包括 Kreutzkamp和Mssinger(Chem.Ber.100，3463-3465(1967))和 Danen等人(J.Am.Chem.Soc.1973，95，5716-5724)所述的那些。 将这些烷基化的羟基脲衍生物水解得到胺R’ONH2和 R’ONHR”，它们对应于某些式R8R9NH胺。本领域熟练的化学工 作者可利用本文所述的方法和其它烷基化试剂R，R’和R”- X来制备其它式R8R9NH胺，其中R8-N或R9-N为氧-氮连 接。Uno等人(Synlett 1991，559-560)描述了在BF3-催化下将有机 金属试剂R-Li加成到式R’CH＝N-OR”的O-烷基肟 上，得到式R’RCH-NH(OR”)化合物。该途径也可以用 来得到式R8R9NH化合物，其中R8-NH或R9-NH之一为氧- 氮连接。

在碱如碳酸钾存在下，在惰性溶剂如二甲基甲酰胺中，在温度 约为0-100℃下，通过将羧酸与适宜的烷基卤混合约1-24小 时，可以制备本发明前体药物，其中用酯代替式I羧酸中的羧基。 或者在催化量的酸如浓硫酸存在下，在温度约为20-120℃，优 选在回流下，将酸与适宜的醇溶剂混合约1-24小时。另一种方 法是在催化量的酸存在下，在惰性溶剂如四氢呋喃中，让酸与化学 计算量的醇反应并伴随用物理(例如Dean-Stark阱)或化学(例 如分子筛)方法除去产生的水。

在碱如碳酸钾存在下，在惰性溶剂如二甲基甲酰胺中，在温度 约为0-100℃下，通过将醇与适宜的烷基溴或烷基碘混合约1- 24小时，可以制备本发明前体药物，其中醇功能已衍生为醚。按 照US 4,997,984中所述的方法，在催化量的酸存在下，在惰 性溶剂如四氢呋喃中，通过让醇与双(链烷酰基氨基)甲烷反应可 以得到链烷酰基氨基甲基醚。或者，通过Hoffman等人在J.Org. Chem.1990，59，3530中所述的方法，可以制备这些化合物。

在碱存在下，在惰性溶剂如四氢呋喃中，通过将醇与氯磷酸二 烷基酯反应，可以制备二烷基磷酸酯。通过让醇与氯磷酸二芳基酯 或二苄基酯按如上所述反应，然后在贵金属催化剂存在下分别进行 水解或氢化可以制备二氢磷酸酯。

在惰性溶剂如甲苯中，在酸存在下，通过让醇与糖类反应，可 以制备苷。典型地如上所述除去反应中产生的水。另一种方法是在 碱存在下，让醇与适宜的保护糖基卤反应，然后脱保护。

在中性或碱性条件下(例如乙醇钠的乙醇溶液)，在温度为25 -70℃下，通过让母体酰胺或吲哚与适宜的醛反应，可以制备N -(1-羟基烷基)酰胺，N-(1-羟基-1-(烷氧基羰基) 甲基)酰胺或其中R2由C(OH)C(O)OY代替的化合物。 也可以在碱存在下，在惰性溶剂中，通过N-未取代的吲哚与必需 的烷基卤反应，得到N-烷氧基甲基吲哚或N-1-(烷氧基) 烷基吲哚。在醇溶剂中，在25-70℃下，通过让母体N-H化 合物与适宜的醛和胺反应可以制备1-(N，N-二烷基氨基甲 基)吲哚，1-(1-(N，N-二烷基氨基)乙基)吲哚和N，N-二 烷基氨基甲基酰胺(例如R3＝CH2N(CH3)2)。

在惰性溶剂中，在催化量的酸存在下，通过让母体化合物(药 物)与苯甲醛或酮或其二甲基缩醛反应并随后除去水或甲醇，可制 备本发明前体药物，其中R2和R3是普通的碳。

上述反应流程式中的起始物质和试剂(例如胺，取代的吲哚羧 酸，取代的二氢吲哚羧酸，氨基酸)也是容易得到的或者可由本领 域技术人员使用常规有机合成方法很容易地合成，尽管以上描述了 大多数起始物质和试剂的制备。例如，本文用于制备式I化合物的 很多中间体是天然存在的氨基酸，与天然存在的氨基酸有关或由天 然存在的氨基酸衍生，天然存在的氨基酸具有重大的科学价值和商 业需求，因此，很多这样的中间体可以通过商业渠道购得或在文献 中报道或通过文献中报道的方法从其它通常易得到的物质很容易 制备。例如，这种中间体包括式XXX，式XLII，式XXXII和式 XXXIII化合物。

某些式I化合物具有不对称碳原子并因此是对映体或非对映异 构体。根据理化性质的差异，通过本领域已知的方法，例如通过色 谱法和/或分级结晶法，可以将非对映异构体混合物分成其单独的 非对映异构体。通过与适宜的光学活性化合物(例如醇)反应，将 对映体混合物转化成非对映异构体混合物，分开非对映异构体并将 各个非对映异构体转化(例如，水解)为相应的纯对映体，可以分 开对映体(例如式III，VIII或IX的对映体)。所有这些异构体， 包括非对映异构体，对映体及其混合物都属于本发明的一部分。

尽管很多本发明化合物在生理条件下不能电离，但某些本发明 化合物在生理条件下是可以电离的。因此，例如，某些本发明化合 物是酸性的并且它们可以与可药用阳离子形成盐。所有这些盐都属 于本发明范围并且它们可以用常规方法制备。例如，通常以化学计 算量比率，在含水，非水或部分含水的任一适宜溶媒中，可简单地 通过将酸与碱接触来制备盐。通过过滤，用非溶剂沉淀后过滤，蒸 发溶剂，或冷冻干燥水溶液任一适宜的方法回收盐。

另外，某些本发明化合物是碱性的并且它们与可药用的阴离子 形成盐。所有这些盐都属于本发明范围并且可以用常规方法来制 备。例如，通常以化学计算量比率，在含水，非水或部分含水的任 一适宜溶媒中，可简单地通过将酸与碱接触来制备盐。通过过滤， 用非溶剂沉淀后过滤，蒸发溶剂，或冷冻干燥水溶液任一适宜的方 法回收盐。另外，当本发明化合物形成水合物或溶剂化物时，它 们也属于本发明范围。

在下文所述的常规分析和体外和体内分析中，通过本发明化合 物活性证明了本发明化合物作为药物在治疗哺乳动物(例如人)代 谢性疾病(如本文详述)的效果。这些分析也提供一种方法，通过 该方法可以比较本发明化合物的活性和其它已知化合物的活性。比 较结果用于确定治疗哺乳动物包括人疾病的剂量水平。

通过下列方法，可得到纯的人肝糖原磷酸化酶(HLGPa)。

表达和发酵：

由大肠杆菌菌株XL-1 Blue(Stratagene Cloning Systems， LaJolla，CA)的质粒pKK 233-2(Pharmacia Biotech.Inc.， Piscataway，New Jersey)来表达HLGP cDNA。将菌株接种在LB 介质中(由10g胰胨、5g酵母抽提物、5g NaCl和1ml 1N NaOH/ 升组成)，加100mg/L α-氨基苄青霉素，100mg/L吡哆素和 600mg/L MnCl2并在37℃温度下生长到细胞密度为OD550＝1.0。 此时用1mM异丙基-1-硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱 导细胞。诱导3小时后，经离心收集细胞并将细胞团在-70℃温 度下冷冻，直到纯化前。

糖原磷酸化酶的纯化：

将上述细胞团重新悬浮在含0.2mM DTT，1mM MgCl2的 25mM β-甘油磷酸盐(PH7.0)中，加入下列蛋白酶抑制剂：

0.7μg/ml            胃酶抑素A

0.5μg/ml            亮肽素

0.2mM                苯基甲磺酰氟(PMSF)，和

0.5mM                EDTA，

它是通过用200μg/ml溶菌酶和3μg/ml DNA酶预处理，再 用Branson Model 450超声细胞碎裂仪(Branson Sonic Power Co.， Danbury CT)以每批250ml超声5×1.5分钟来溶解的。通过在 35,000xg下离心1小时再经0.45μm过滤器过滤来洗涤溶解 物。通过检测来自一系列下文详述的色谱步骤的酶活性(如下文 HLGPa活性测定中所述)来纯化溶解物可溶部分中的HLGP(估 计少于1％总蛋白)。

固定的金属亲合色谱(IMAC)：

该步骤基于Luong等的方法(Luong等，Journal of Chromatography(1992)584，77-84)。将500ml细胞溶解物的过 滤可溶部分(由约160g原细胞团制备)装在130ml IMAC螯合的 琼脂糖柱(Pharmacia LKB Biotechnology，Piseataway，New Jersey)上，该琼脂糖已用含50mM CuCl2和25mM β-甘油磷 酸盐，250mM NaCl和1mM咪唑的pH7的平衡缓冲液装填。用 平衡缓冲液洗涤该柱直到A280回到基线。然后用含100mM咪唑的 相同缓冲液从柱中洗脱样品来移出结合的HLGP和其它结合的蛋 白质。收集含HLGP活性的级分(约600ml)，并加入乙二胺四 乙酸(EDTA)，DL-二硫苏糖醇(DTT)，苯甲磺酰氟 (PMSF)，亮肽素和胃酶抑素A以分别获得0.3mM、0.2mM、 0.2mM、0.5μg/ml和0.7μg/ml的浓度。将收集的HLGP在用 25mM Tris-HCl(PH 7.3)、3mM DTT缓冲液(缓冲液A)平衡 的Sephadex G-25柱上脱盐，除去咪唑并在冰上贮存直到第二个色 谱步骤。

5’-AMP-琼脂糖色谱：

将脱盐的收集的HLGP样品(约600ml)再与70ml的5’- AMP琼脂糖(Pharmacia LKB Biotechnology，Piscataway，New Jersey)混合，该琼脂糖已用缓冲液A(见上文)平衡。在22℃温 度下，将混合物轻轻搅动1小时，然后装在柱中并用缓冲液A洗涤 直到A280回到基线。用PH为7.3的25mM Tris-HCl、0.2mM DTT 和10mM 5’-磷酸腺苷(AMP)(缓冲液B)从柱中洗脱HLGP 和其它蛋白质。通过测定酶(下文所述)活性并通过十二烷基硫酸 钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)然后银染色(2D-银 染色II“Daiichi Kit”，Daiichi Pure Chemicals Co.，LTD.， Tokyo，Japan)来使Mr约97Kdal HLGP蛋白质带显色来鉴定后 收集含HLGP级分。将收集的HLGP在25mM β-甘油磷酸盐、 0.2mM DTT、0.3mM EDTA、200mM NaCl，pH 7.0缓冲液(缓 冲液C)中渗析并在冰上贮存备用。

测定HLGP的酶活性：

A)HLGP的活化：HLGPb转化为HLGPa

在测定HLGP酶活性之前，通过使用磷酸化酶激酶按如下使 HLGP磷酸化来将酶由大肠杆菌菌株XL-1 Blue表达的未激活形 式(定为HLGPb)(Stragene Cloning Systems，La Jolla， California)转化为活化形式(定为HLGPa)。

HLGPb与固定的磷酸化酶激酶反应

按厂家指示，将磷酸化酶激酶(Sigma Chemical Company，St. Louis，MO)固定在Affi-Gel 10(BioRad Corp.，Melvile，NY) 上。简而言之，在4℃温度下，用洗涤的Affi-Gel珠(1ml)在 PH为7.4的2.5mL 100mM HEPES和80mM CaCl2中保温培养磷 酸化酶激酶(10mg)4小时。然后用相同的缓冲液将Affi-Gel珠 洗涤一次，在室温下用PH8.0的50mM HEPES和1M甘氨酸甲酯 抑制1小时。除去抑制性缓冲液并用50mM HEPES(PH7.4)、 1mM β-巯基乙醇和0.2％NaN3取代以便贮存。在用于将HLGPb 转化为HLGPa之前，在用于进行激酶反应的缓冲液中洗涤来使 Affi-Gel固定的磷酸化酶激酶珠平衡，用于进行激酶反应的缓冲液 由25mM β-甘油磷酸盐、0.3mM DTT和0.3mM EDTA， PH7.8组成(激酶测定缓冲液)。

用激酶测定缓冲液以1∶10稀释由上文5’-AMP-琼脂糖 色谱获得的部分纯化的未激活的HLGPb，然后与固定在Affi-Gel 珠上的上述磷酸化酶激酶混合。将NaATP加到5mM并将MgCl2 加到6mM。将所得混合物在25℃轻轻混合30到60分钟。从珠中 移出样品并通过在3.3mM AMP存在下和不存在下测定HLGP酶 的活性来估计HLGPb转化为HLGPa的激活百分数。然后按下式 计算HLGPa酶活性(独立于AMP)占总HLGP酶活性的百分值：

B)HLGPa活性测定：

通过用两种方法之一来评价本发明化合物对激活形式的糖原 磷酸化酶(GPa)活性的影响可间接测定本发明化合物的降血糖 活性(以及本文所述的其它治疗/预防疾病的活性)；在正反应中， 通过监测由糖原产生的葡糖-1-磷酸酯，或在下列逆反应中，测 定通过无机磷酸盐的释放由葡糖-1-磷酸酯合成糖原来测定糖 原磷酸化酶a的活性。所有反应在96孔微量滴定板中重复三次并 且用与Titertech Microplate Stacker(ICN Biomedical Co， Huntsville，Alabama)连接的MCC/340 MKII Elisa Reader (Lab Systems，Finland)，在下文特定波长处测定由反应产物形成引起的 吸收度变化。

为了测定正反应中HLGPa酶活性，通过如下改变的Pesce等 人〔Pesce，M.A.，Bodourian，S.H.Harris，R.C.and Nicholson， J.F.(1977)Clinical Chemistry 23，1711-1717〕的多酶偶合一般方 法来监测由糖原产生的葡糖-1-磷酸酯：用缓冲液A(下文描述) 将1-100μg磷酸化酶a，10单位磷酸葡糖变位酶和15单位葡糖 -6-磷酸酯脱氢酶(Boehringer Mannheim Biochemicals Indianapolis，IN)稀释至1mL。缓冲液A为PH7.2并且含50mM HEPES，100mM KCl，2.5mM乙二醇四乙酸(EGTA)2.5mM MgCl2，3.5mM KH2PO4和0.5mM二硫苏糖醇。将20μl该贮备 液加到80μl含0.47mg/ml糖原，9.4mM葡萄糖，0.63mM氧化 态烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸酯(NADP+)的缓冲液A中。在加 入酶之前，加入5μL试验化合物在14％二甲基亚砜(DMSO) 中的溶液。通过加入5μL 14％DMSO，测定无抑制剂时HLGPa 酶活性的基率并且通过加入20μL 50mM阳性对照试验物咖啡因 得到HLGPa酶活性的完全抑制率。反应后，在室温下，在340nm 处测定氧化态NADP+向还原态NADPH的转化。

为了测定逆反应中HLGPa酶活性，用如下改变的由Engers 等人〔Engers，H.D.，Shechosky，S.and Madsen，N.B.(1970)Can. J.Biochem.48，746-754〕描述的一般方法来测定葡糖-1-磷酸 酯转化为糖原加无机磷酸盐：用缓冲液B(下文描述)将1-100 μg HLGPa稀释至1mL。缓冲液B为PH7.2并且含50mM HEPES， 100mM KCl，2.5mM EGTA，2.5mM MgCl2和0.5mM二硫苏糖 醇。将20μL该贮备液加到80μL含1.25mg/mL糖原，9.4mM 葡萄糖和0.63mM葡糖-1-磷酸酯的缓冲液B中。在加入酶之 前，加入5μL试验化合物在14％DMSO中的溶液。通过加入5 μL 14％DMSO测定不含抑制剂时HLGPa酶活性的基率并且通 过加入20μL 50mM咖啡因得到HLGPa酶活性的完全抑制率。 在室温下，将该混合物温育1小时并且通过如下改变的Lanzetta 等人〔Lanzetta，P.A.，Alvarez，L.J.，Reinach，P.S.and Candia， O.A.(1979)Anal.Biochem.100，95-97〕的一般方法测定葡糖-1 -磷酸酯释放的无机磷酸盐：将150μL 10mg/mL钼酸铵， 0.38mg/ml孔雀绿在1N盐酸中的溶液加到100μL酶混合物中。 在室温下温育20分钟后，在620nm测定吸收度。

本发明化合物可作为降血糖剂用于临床。通过与不含试验化合 物的载体相比，由试验化合物降低雄性ob/ob鼠葡萄糖水平的量可 测定本发明化合物的降血糖活性。该试验也可用于测定该试验化合 物在该鼠体内降低血浆葡萄糖浓度的近似最小有效剂量(MED) 值。

由于血中葡萄糖的浓度与糖尿病的发生紧密相关，所以这些化 合物借助其降血糖作用，预防，抑制和/或治疗糖尿病。

按照标准的动物管理惯例，每个笼子关5只5-8周大的雄性 C57BL/6J-ob/ob鼠(购于Jackson Laboratory，Bar Harbor， ME)。一周的适应期后，称重并在任何治疗之前，从眶后窦采25 μl血。立即用含0.025％肝素钠的盐水将血样稀释为1∶5，并放 在冰上进行代谢物分析。将动物分成治疗组，使得每组具有类似的 血浆葡萄糖浓度平均值。分组后，每天口服给予动物含下列任一组 分的载体，共4天：1)未调节PH的0.25％W/V甲基纤维素的水 溶液；或2)未调节PH的0.1％Pluronic P105嵌段共聚物表面活 性剂(BASF Corporation，Parasippany，NJ)在0.1％盐水中的 溶液。在第5天，再次称重并且随后口服给予试验化合物或只给予 载体。所有的药物都在含下列任一组分的载体中给予：1)未调节 PH的0.25％W/V甲基纤维素的水溶液；或2)未调节PH的10 ％DMSO/0.1％Pluronic P105(BASF Corporation， Parsippany，NJ)在0.1％盐水中的溶液。从动物的眶后窦采血， 三小时后测定血代谢物水平。在室温下，将新采集的血样在10000xg 下离心2分钟。用上清液来分析葡萄糖，例如，通过Abbott VPTM(Abbott Laboratories，Diagnostics Division，Irving，TX)和VP  Super System自动分析仪(Abbott Laboratories，Irving，TX)，利 用A-GentTM葡萄糖-紫外试验试剂系统(Abbott Laborateries， Irving，TX)(变更的Richterich和Dauwalder法，Schweizerische Medizinische Wochenschrift，101，860(1971))(己糖激酶法)，用 100mg/dl标准液。通过下列等式计算血浆葡萄糖：血浆葡萄糖 (mg/dl)＝样品值×5×1.784＝8.92×样品值。

其中5为稀释因子并且1.784为血浆血细胞比容的调节(假定 血细胞比容为44％)。

给予载体的动物基本保持不变的高血糖葡萄糖水平(例如大于 或等于250mg/dl)，以适宜剂量的试验化合物治疗的动物明显降 低葡萄糖水平。通过对第5天试验化合物组和载体治疗组之间平均 血浆葡萄糖浓度的统计学分析(未配对t-检验)测定试验化合物的 降血糖活性。用一定剂量范围的试验化合物进行的上述分析可用来 测定体内减小血浆葡萄糖浓度的近似最小有效剂量(MED)值。

本发明化合物可作为高胰岛素血逆转剂，甘油三酯降低剂和胆 固醇降低剂用于临床。可通过与不含试验化合物的对照载体相比， 由减小雄性ob/ob鼠胰岛素，甘油三酯或胆固醇水平的试验化合物 量来测定该活性。

由于血中胆固醇浓度与心血管，脑血管或外周血管病的发生密 切相关，所以本发明化合物借助其降低胆固醇的作用预防，抑制和 /或治疗动脉粥样硬化。

由于血中胰岛素浓度与促进血管细胞增长和增加肾钠停留相 关，(除其它作用，例如促进葡萄糖利用之外)并且已知这些功能 引起高血压，所以，本发明化合物借助其降低胰岛素作用预防，抑 制和/或治疗高血压。

由于血中甘油三酯浓度是血脂总水平的体现，所以，本发明化 合物借助其降低甘油三酯的活性预防，抑制和/或治疗高脂血。

按照标准动物管理惯例，每个笼子关5只5-8周大的雄性 C57BL/6J-ob/ob鼠(购于Jackson Laboratory，Bar Harbor，ME) 并随意饲喂标准的啮齿动物饮食。一周的适应期后，称重并且在进 行任何治疗前，从眶后窦采血25μl。立即用含0.025％肝素钠的 盐水将血样稀释成1∶5，并放在冰上进行血浆葡萄糖分析。将动 物分成治疗组，使得每组具有类似的血浆葡萄糖浓度平均值。通过 管饲法口服给予在1)未调节PH的10％DMSO/0.1％Pluronic P105嵌段共聚物表面活性剂(BASF Corporation，Parsippany， NJ)在0.1％盐水中的溶液或2)未调节PH的0.25％W/V甲基纤维 素的水溶液中的约0.02％-2.0％的试验化合物的溶液(重量/体积 (W/V))。每天一次给药(s.i.d.)或每天两次给药(b.i.d.)维持 1-15天。对照鼠只给予未调节PH的10％DMSO/0.1％Pluronic P105在0.1％盐水中的溶液或未调节PH的0.25％W/V甲基纤维 素的水溶液。

末次剂量给予后三小时，断头法处死动物并且将躯干血收集到 含3.6mg 1∶1 W/W氟化钠∶草酸钾混合物的0.5mL血清分离管中。 在室温下，将新收集到的血样在10,000xg下离心2分钟，分出血 清上清液并用未调节PH的1TIU/mL抑肽酶在0.1％盐水中的溶液 来稀释(1∶1 V/V)。

将稀释后的血清样品在-80℃下一直贮存到分析时。用融化， 稀释的血清样品来分析胰岛素，甘油三酯和胆固醇水平。用购于 Binax，South Portland，ME的Equate RIA INSULIN药包(双抗 体法，由生产者指定的)来测定血清胰岛素浓度。分析间的变异系 数≤10％。用Abbott VPTM和VP Super System自动分析仪 (Abbott Laboratories，Irving，TX)，使用A-GentTM甘油三 酯试验试剂系统(Abbott Laboratories，Diagnostics Division，Irving， TX)(偶合脂酶的酶方法；改变的Sampson等人的方法，Clinical Chemistry 21，1983(1975))来测定血清甘油三酯。用Abbott VpTM 和VP Super System自动分析仪(Abbott Laboratories，Irving， TX)和A-GentTM胆固醇试验试剂系统(偶合胆固醇酯酶的酶 方法；改变的Allain等人的方法，Clinical Chemistry 20，470 (1974))，用100和300mg/dl的标准液来测定血清总胆固醇水平。 然后用下列等式计算血清胰岛素，甘油三酯和总胆固醇水平。

血清胰岛素(μU/mL)＝样品值×2

血清甘油三酯(mg/dL)＝样品值×2

血清总胆固醇(mg/dL)＝样品值×2

其中2为稀释因子。

给予载体的动物保持基本不变的，升高的血清胰岛素(例如225 μU/mL)，血清甘油三酯(例如225mg/dL)和血清总胆固醇(例 如160mg/dL)水平，而用本发明试验化合物治疗的动物通常表现 出减小的血清胰岛素，甘油三酯和总胆固醇水平。通过试验化合物 组和载体治疗对照组之间血清胰岛素，甘油三酯或总胆固醇浓度平 均值的统计学分析(未配对的t-检验)，测定试验化合物降低血清 胰岛素，甘油三酯和总胆固醇的活性。

按照Butwell等人在Am.J.Physiol.264，H 1884-H 1889，1993 和Allard等人在Am.J.Physio.，1994，267，H66-H74中提出的方 法，可在体外证明本发明化合物具有保护心脏组织避免受损的活 性。按上述参考文献中基本相同的方法，用等容离析的鼠心脏制剂 进行实验。将正常雄性Sprague-Dawley鼠，经主动脉结扎手术使 之患有心脏肥大病的雄性Sprague-Dawley鼠，急性糖尿病雄性 BB/W鼠或非糖尿病BB/W年龄匹配的对照鼠预先用肝素(1000 μ，i.p.)，再用戊巴比妥(65mg/kg，i.p.)处理。当通过无足反射 存在确定达到深度麻醉后，立即切除心脏并放到冰盐水中。在2分 钟内，通过主动脉逆行灌注心脏。在具有连接到压力换能器上的高 压管的左室，用乳胶球测定心率和心室压。用含NaCl 118，KCl 4.7， CaCl2 1.2，MgCl2 1.2，NaHCO3 25，葡萄糖11(mM)的灌注液 灌注心脏。使用供灌注液和夹在灌注管周围的水使用的加热浴来严 格控制灌注装置的温度，以便保持心脏的温度在37℃。通过紧接 心脏的儿科空心丝充氧器(Capiax，Terumo Corp.，Tokyo，Japan) 使灌注液氧合。将心脏暴露在灌注液±试验化合物中约10分钟或 更长时间，接着经历20分钟局部缺血和60分钟在不含试验化合物 的情况下再灌注。在局部缺血后的期间，比较对照组和试验化合物 治疗组心脏的心跳。在局部缺血后的期间，比较对照组和试验化合 物治疗组心脏的左心室压。在实验结束时，也将心脏灌注并染色来 按下文所述测定梗塞面积与危险面积的比率(％IA/AAR)。

特别如本文所述，按照Liu等人在Circulation，Vol.84，No.1， (July 1991)中提到的方法，在体内也可证明本发明化合物预防心脏 组织受损，避免引起局部缺血性损害的治疗作用。体内分析是用来 检验与给予盐水载体的对照组相比，试验化合物的心脏保护作用。 从背景资料中可注意到，进行冠状动脉再灌注后的短暂的心肌局部 缺血保护心脏避免更严重的心肌局部缺血(Murry等人， Circulation 74：1124-1136，1986)。在作为局部缺血预处理模型原位 研究的未受损、麻醉兔子中，静脉给予腺苷受体激动剂，通过药理 学作用可产生作为减小心肌梗塞发生指征的心脏保护作用(Liu等 人，Circulation 84：350-356，1991)。体内分析可用来检验当肠胃 外给予未受损、麻醉兔子化合物时，该化合物是否能通过药理学作 用引起心脏保护作用，即减小心肌梗塞面积。与用A1腺苷激动剂， N6-1-(苯基-2R-异丙基)腺苷(PIA)进行心肌缺血预处 理的作用相比表明：本发明化合物通过药理学作用引起原位研究的 未受损麻醉兔子的心脏保护作用(Liu等人.，Cirulation 84：350- 356，1991)。下文描述确切的方法学。 外科手术：用戊巴比妥钠(30mg/kg，i.v.)将雄性新西兰白兔(3 -4kg)麻醉。经过腹中线颈部切口进行气管切开术，并且用正压 通风器给白兔通100％氧气。将导管放在左颈静脉供给药并放在左 颈动脉供血压测定。然后经左胸廓切开术暴露心脏并将圈套(00 丝线)放在左冠状动脉突出分枝周围。通过拉紧圈套并在适当位置 夹住来诱导缺血。放松圈套使受影响区域再灌注。通过区域发绀证 明心肌缺血；通过反应性充血证明再灌注。 操作方法：一旦动脉压和心率稳定至少30分钟，就开始实验。通 过两次闭塞冠状动脉5分钟然后再灌注10分钟来诱导局部缺血的 预处理。通过两次注入试验化合物(如在5分钟内)并在进一步实 验前允许间隔10分钟或通过注入腺苷激动剂PIA(0.25mg/kg)来诱 导药理学预处理。继局部缺血预处理、药理学预处理或不处理(未 处理，赋形剂对照)之后，将动脉闭塞30分钟，然后再灌注两小 时来诱导心肌梗塞。将试验化合物和PIA溶解在盐水或其它合适的 载体中并分别给予1到5ml/kg。 染色(Liu等，Circulation 84：350-356，1991)：在2小时再灌 注期结束时，将心脏快速移出，悬在Langendorff装置上，并用加 热到体温(38℃)的生理盐水冲洗1分钟。然后将用作圈套的丝 线紧紧系上来重新闭塞动脉并用灌注液灌注0.5％荧光颗柱(1- 10μm)悬浮液来使除危险区(非荧光室)之外的全部心肌染色。 然后将心脏快速冷冻并在-20℃温度下贮存过夜。第二天，将心 脏切成2mm切片并用1％氯化三苯四唑鎓(TTC)染色。因为 TTC与活组织反应，因此该染色区分活(染成红色)组织和死组 织(未染色的梗死织)。采用预先校准的图象分析仪来计算左室 每一切片的梗死区(未染色)和危险区(非荧光颗粒)。为了使心 脏间危险区局部缺血损伤的区别标准化，按梗死区与危险区之比 (％IA/AAR)来表示数据。所有数据都表示成平均值±SEM并 采用单因子ANOVA或非配对的t-试验来进行统计比较。以 P＜0.05来考虑显著性。

可通过任何方法给予本发明的化合物，该方法优先使本发明化 合物释放到肝和/或心组织。这些方法包括口服途径，肠胃外途径， 十二指肠内途径等。总之，本发明化合物按单剂量(如一天一次) 或多剂量给药。

然而，给予化合物的量和时间当然将会取决于被治疗的特定疾 病，被治疗的对象，取决于受折磨的严重程度，给药的方式和开方 医生的判断。因此，由于病人与病人的不同，下文给出的剂量是指 导性的并且医生可以确定适于病人达到活性(如降低葡萄糖活性) 的药物剂量。在考虑所需活性的程度时，医生必须平衡各种因素如 开始水平，其它危险(心血管)因素，以前存在疾病的情况和病人 的年龄和病人的动力。

一般地，达到本发明活性(例如，本发明化合物血糖、甘油三 酯和胆固醇降低活性和血胰岛素过多逆转活性)的有效剂量范围为 0.005到50mg/kg/天，优选0.01到25mg/kg/天且最优选0.1到 15mg/kg/天。

通常，口服给予本发明化合物，但可采用胃肠外给药(如静 脉，肌内，皮下或髓内)，例如，口服给药不适于直接到达靶位时 或病人不能摄入药物时。也可局部给药，例如，病人患有胃肠道疾 病时或根据护理医生决定，药物最好用在组织或器官的表面时。

本发明化合物通常以药物组合物的形式给药，该组合物含有 至少一种本发明化合物和药用可接受的载体或稀释剂。因此，可以 任何常规的口服、胃肠外或经皮剂量形式分别或一起给予本发明化 合物。

为了口服给药，可将药物组合物制成溶液，悬浮液，片，丸， 胶囊，粉剂等形式。使用含有各种赋形剂(如柠檬酸钠、碳酸钙和 磷酸钙)和各种崩解剂(如淀粉且优选马铃薯或木薯淀粉和某些复 合的硅酸盐)以及粘合剂如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯 胶的片剂。另外，对于制片来说，润滑剂如硬脂酸镁、十二烷基硫 酸钠及滑石粉通常是非常有用的。也可使用类似类型的固体组合物 作为软和硬填充明胶胶囊的填充剂；在这方面优选的材料也包括乳 糖或奶糖以及高分子量的聚乙二醇。当需要口服给予水性悬浮液和 /或酏剂时，可将本发明化合物与各种甜味剂、香味剂、着色剂、 乳化剂和/或悬浮剂以及稀释剂(如水、乙醇、丙二醇、甘油及其 各种组合)相混合。

为了胃肠外给药的目的，可采用溶于芝麻或花生油或溶于水 性丙二醇的溶液，以及相应水溶性盐的无菌水溶液。如果需要，可 适当缓冲此水溶液且该液体稀释剂首先用足量的盐水或葡萄糖进 行等渗处理。这些水溶液特别适于静脉、肌内、皮下和腹膜内注射。 在这方面，所采用的无菌水介质通过本领域技术人员公知的标准技 术是容易获得的。

为了经皮(如局部)给药的目的，制备稀的无菌的水性或部 分水性的溶液(通常浓度约为0.1％到5％)，以及与上文胃肠外 溶液类似的溶液。

制备具有一定量活性组分的各种药用组合物的方法是已知 的，或根据该公开，对本领域技术人员来说会是显而易见的。例如， 参见Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easter，Pa.，第l5版(1975)。

本发明的药物组合物可含有0.1％-95％的本发明化合 物，优选1％-70％。在任何情况下，待给药的组合物或制剂将 含有对治疗被治疗对象的疾病(即糖原磷酸化酶依赖性疾病)有效 量的本发明化合物。

实施例1-99和166-l72的总实验方法

在约23℃温度下，在Varian XL 300(Varian Co.，Palo Alto，California)或Bruker AM-30O分光计(Bruker Co.， Billerica，Massachusetts)记录质子300MHz和碳核75.4MHz 处的NMR谱。用从三甲基硅烷到低磁场的百万分之份来表示化学 位移。在单独的NMR实验(其中将样品与相同溶剂中几滴D2O 振摇)中，不显示称作可交换的共振。在VG 70-2505分 光计(V4 analytical LTD.，Wythanshaw，Manchester，U.K.) 上，使用由3∶1二硫苏糖醇/二硫赤藓糖醇组成的液体材料来获 得FAB-MS谱。在Fisons Trio-1000分光计(Fisons Co.， Valencia，California)上使用氨离子化来获得热喷射MS(TSP MS)。在Hewlett-Packard 5989仪(Hewlett-Packard Co.，Palo  Alto，California)上获得化学离子化质谱(氨离子化，PBMS)。 在描述含氯或溴离子的强度时，观察了预期的强度比(含35Cl/37Cl离子约3∶1和含79Br/81Br离子约1∶1)且仅给出了较低质量 离子的强度。

以241nM检测，在250×4.6mm Rainin Microsorb C-18柱(RaininCo.，Woburn，Massachusetts)上进行HPLC， 采用指定的乙腈和含水pH2.1(具有H3PO4)0.1M KH2PO4的混合物的两泵/混合系统，分别以1.5ml/min的速度进行常液洗 脱。注射在1∶1乙腈和pH7.0磷酸缓冲液(0.025M，各自为 Na2HPO4和KH2PO4)混合物中的样品。百分纯度指在10到15 分钟的通常运行期内总积分面积的百分数。熔点是未校正的且在B uchi 510熔点装置(Buchi Laboratorums-Technik Ag.，Flawil， Switzerland)上测定，在该装置上，苯甲酸的熔点为120.5-122℃ 而对氯苯甲酸为237.5-240.5℃(Aldrich 99+％级)。在低氮压下， 在玻璃柱中用Amicon硅胶(30μM，60A孔径大小)(Amicon D Vision，W.R.Grace & Co.，Beverly.Mass.)进行柱色谱分析。 除非另有具体说明，通常使用从商业渠道获得的试剂。用作反应溶 剂的二甲基甲酰胺、2-丙醇、四氢呋喃和二氯甲烷都是由Aldrich Chemical Company(Milwaukee，Wisconsin)供应的无水级。用 Schwarzkopf Microanalytical Laboratory，Woodside，NY进行微量 分析。术语“浓缩”和共蒸发指在水吸气压下在旋转蒸发仪上用低 于45℃的浴温除去溶剂。在“0-20℃”或“0-25℃”下 进行反应是用在保温水浴中开始冷却的容器进行的，它允许在几个 小时内温热到室温。缩写“min”和“h”分别指“分钟”和“小 时”。

方法A(采用DEC使肽偶合)

在25℃温度下，用0.95到1.2当量的指定羧酸、1.2到1.8 当量水合羟基苯并三唑(通常相对于羧酸为1.5当量)和0.95-1.2 当量(以摩尔比相对应于羧酸)1-(3-二甲基氨基丙基)-3 -乙基碳化二亚胺盐酸盐(DEC)顺序处理0.1-0.7M的在二氯 甲烷(除非另有说明的溶剂)中的伯胺溶液(1.0当量或盐酸伯胺 和每当量HCl 1.0到1.3当量的三乙胺)并将混合物搅拌14到 20小时(参见下文注释1)。用乙酸乙酯稀释混合物，用1或2 N NaOH洗涤2到3次，用1或2N HCl洗涤2到3次(注释 2)，用MgSO4干燥有机层，并浓缩得粗产品，将粗产品通过硅 胶色谱、研制或采用所描述的溶剂重结晶来纯化。用RP-HPL C分析纯化产品并发现除有注释外其纯度大于95％。在0到25 ℃温度下进行的反应是用在保温冰浴中起始冷却容器进行的，它允 许在几小时内温热到室温。 注释1：在较大规模偶合(＞50ml溶剂)时，此时浓缩混合物并 将剩余物溶于乙酸乙酯中。 注释2：如果产品含有可离子化的胺官能团，省去酸洗。紧跟在所 述的方法A之后，通常在圆括号中分别注释了使用方法A的例外 (这一点适用于下文)。

实施例1 (2 S)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基 -丙酸甲酯

按照方法A(0-25℃)，将L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐 (77.0mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(77mmol) 偶合并且通过以10和20％乙酸乙酯-己烷进行硅胶色谱法来 纯化产品，得到标题物质，灰白色固体(22.12g，81％)：mp 156-157℃；HPLC(60/40)9.5分钟(98％)；PBMS 3 57/359(MH+，100％)。 1H NMR(CDCl3)δ9.40(br，1H)，7.60(d，1H，J＝约1Hz)，7.35(d，1H，J＝8.9Hz)， 7.3-7.2(m，4H)，7.13(m，2H)，6.74(d，1H，J＝1.7Hz)，6.62(d，1H，J＝7.5Hz)，5.11 (m，1H)，3.77(s，3H)，3.26(m，2H)； C19H17ClN2O3的元素分析计算值：C，63.96；H，4.80；N，7.85。 实测值：C，64.24；H，4.84；N，8.02。

实施例2 2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基-丙酸

在0-5℃下，将2M LiOH的水溶液(33.10ml)加到 (2S)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基 丙酸甲酯(21.47g，60mmol)在THF(140ml)的溶液中。 在0.5小时后，将混合物部分浓缩，用6NHCl调至pH 1-2， 浓缩至干，并且用水，然后用乙醚洗涤固体，得到无色固体 (18.78g，91％)：mp 248-255℃；HPLC(60/40)5.21分 钟(98％)；TS PMS 343/345(MH+，100％)。 1H NMR(DMSO-d6)δ12.85(br，1H)，11.75(d，1H，J＝＜1Hz)，8.84(d，1H，J＝8.4 Hz)，7.35-7.14(m，7H)，4.65(m，1H)，3.20(AB的A，1H，J＝4.5，13.9Hz)，3.07(AB的 B，1H，J＝10.8，13.8Hz)； C18H15ClN2O3的元素分析计算值：C，63.07；H，4.41；N，8.17。 实测值：C，62.90；H，4.60；N，8.04。

实施例3 [(5-氯-1 H-吲哚-2-羰基)氨基]乙酸甲酯

按照方法A，通过下列替换操作：将反应混合物在乙酸乙酯 (250ml)，己烷(50ml)和]N NaOH(50ml)中搅拌并 将悬浮液过滤，将甘氨酸甲酯盐酸盐(50mmol)和5-氯-1H -吲哚-2-羧酸(50mmol)偶合。用1N NaOH，1N HCl，水，乙酸乙酯洗涤固体，并干燥：产率11.5g，86％；mp 252- 254℃，分解； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.87(br，1H)，9.05(t，1H，J＝6.0Hz)，7.72(d，1H，J＝2.0Hz)， 7.45(d，1H，J＝8.7Hz)，7.19(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，4.05(d，2H，J＝6.0Hz)，3.91 (s，3H)； C12H11ClN2O3的元素分析计算值：C，54.05；H，4.16；N，10.50。 实测值：C，54.11；H，4.23；N，10.56。

实施例4 [(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]乙酸

将1N NaOH(35ml)加到[(5-氯-1H-吲哚- 2-羰基)氨基]乙酸甲酯(8.0g，30mmol)在THF(100ml) 的悬浮液中并且在25℃下，将得到的混合物搅拌18小时。用6 N HCl(7ml)将溶液酸化，将混合物浓缩，将固体悬浮在水 中，过滤，并且用水洗涤(7.42g，98％)：HPLC(60/40)2.89 分钟(100％)； 1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ12.68(br，1H)，11.85(br，1H)，8.95(t，1H，J＝5.9Hz)， 7.72(d，1H，J＝2.0Hz)，7.44(d，1H，J＝8.7Hz)，7.19(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.14 (d，1H，J＝＜2Hz)，3.96(d，2H，J＝5.9Hz) C11H9N2O3Cl的元素分析计算值：C，52.29；H，3.59；N，11.09。 实测值：C，52.26；H，3.73；N，11.20。

实施例5 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-((3RS)-羟基吡咯烷-1- 基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A将3-吡咯烷醇(Pyrrolidinol) (1.25mmol)和〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕乙 酸(1.19mmol)偶合：用乙酸乙酯和2N HCl稀释反应混合物， 搅拌1小时，过滤混合物，相继用2N HCl，2N NaOH，2N HCl洗涤得到的固体，干燥，用1∶1乙醚/己烷研制并干燥，得到灰 白色固体：产率280mg，73％；HPLC(60/40)4.66分钟(96％)； PBMS 322/324(MH+，100％)。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.87(br，1H)，8.71(q，1H)，7.71(d，1H，J＝2.1Hz)，7.45(d， 1H，J＝8.8Hz)，7.19(dd，1H.J＝3.1，8.8Hz)，7.16(s，1H)，5.07(d，0.5H，J＝3.6Hz)， 4.97(d，0.5H，J＝3.1Hz)，4.35(m，1H)，4.27(m，1H)，4.10(t，1H)，4.03(d，1H)，3.59 (m，1H)，3.49-3.27(m，2H)，2.04-1.79(m，2H).

实施例6 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(顺式-3，4-二羟基吡 咯烷-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A(1∶1 CH2Cl2/DMF反应溶剂) 将(3R，4S)-3，4-二羟基吡咯烷盐酸盐(顺式或内消旋异 构体，1.79mmol)和〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕 乙酸(0.85mmol)偶合：将反应混合物浓缩，将剩余物悬浮在10ml EtOAc和10ml 2N NaOH中，将固体过滤并相继用1N NaOH水溶 液，EtOAc，1N HCl水溶液和乙醚洗涤。重复该洗涤顺序并用 EtOAc将得到的固体悬浮，搅拌1小时，过滤并干燥：产率252mg， 88％；HPLC(60/40)2.33分钟(93％)；TSPMS 338/340(MH +，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.82(s，1H)，8.72(t，1H)，7.73(d，1H)，7.45(d，1H)，7.20(dd， 1H)，7.15(s，1H)，5.05(d，1H)，4.98(d，1H)，4.10(m，1H)，4.03(m，3H)，3.68(dd，1H)， 3.42(dd，1H)，3.33(dd，1H)，3.23(dd，1H).

实施例7 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(4-羟基哌啶-1-基) -2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A(反应溶剂为二甲基甲酰胺-二 氯甲烷)将4-羟基哌啶(0.83mmol)和〔(5-氯-1H-吲 哚-2-羰基)氨基〕乙酸(0.8mmol)偶合：将反应混合物与乙酸 乙酯和2N HCl水溶液一起搅拌，将得到的悬浮液过滤并相继用2N HCl水溶液，2N NaOH水溶液和乙醚洗涤收集到的固体并干燥： 产率180mg，68％；TSPMS 336/338(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.84(br，1H)，8.68(br，1H)，7.71(d，1H)，.7.43(d，1H)，7.17(dd， 1H)，7.14(s，1H)，4.80(br，1H)，4.15(m，2H)，3.91(m，1H)，3.72(m， 2H)，3.20(m，1H)， 3.05(m，1H)，1.75(m，2H)，1.48(m，1H)，1.38(m，1H).

实施例8 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-苄基-2-(3-羟基吡咯 烷-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)将外 消旋3-吡咯烷醇(2.0mmol)和2-〔(5-氯-1H-吲哚- 2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(1mmol)偶合，通过硅胶柱色 谱法，用0.5-16％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱，将产品纯化，得到无 色泡沫体：产率260mg，63％；HPLC(60/40)100％，3.86分钟； PBMS 412/414(MH+，100％)； C22H22ClN3O3＋0.2H2O的元素分析计算值：C，63.60；H，5.43； N，10.11。 实测值：C，63.90；H，5.93；N，10.11。

实施例9 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-二乙基氨基甲酰基-2-苯 基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃5天)，通过下列替换操作，将二乙 胺(1.2mmol)和2-〔(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕- 3-苯基丙酸(0.6mmol)偶合：将粗产品悬浮在1∶1氯仿/二氯甲 烷中，超声处理，过滤除去固体，浓缩并通过硅胶柱色谱法用10， 20和30％的乙酸乙酯的己烷溶液来纯化剩余物：产率14mg，6％； HPLC(60/40)8.88分钟(98％)；PBMS 398/400(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.31(br，1H)，7.61(d，1H)，7.32(d，1H，J＝8.7Hz)，7.28-7.18(m， 7H)，6.87(d，1H，J＝1.4Hz)，5.26(m，1H)，3.6(m，1-1.5H)，3.2-2.9(m，4.5-5H)，1.07 (t，3H，J＝7.2Hz)，1.02(t，3H，J＝7.2Hz). C22H24ClN3O2＋0.25H2O的元素分析计算值：C，65.66；H，6.14； N，10.44。 实测值：C，65.61；H，6.20；N，10.11。

实施例10 4-{2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基 丙酰基}-哌嗪-1-羧酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，反应时间4天，先用酸再 用碱萃取)，将1-哌嗪羧酸叔丁酯(1.2mmol)和2-〔(5 -氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(0.6mmol) 偶合，并通过硅胶柱色谱法，用30％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱， 将粗产品纯化，得到无色泡沫体：产率290mg，95％；HPLC(70/30) 6.23分钟(99％)；PBMS 512/514(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.32(br，1H)，7.60(d，1H，J＝1.9Hz)，7.32(d，1H，J＝8.7Hz)， 7.3-7.15(m，约7H)，6.87(d，1H，J＝1.5Hz)，5.33(m，1H)，3.65-2.9(重叠的m， 9H)，2.70(m，1H)，1.43(s，9H). C27H31ClN4O4的元素分析计算值：C，63.46；H，6.11；N，10.96。 实测：C63.33；H，5.97；N，10.97。

实施例11  5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-苄基-2-(4-甲氨基哌 啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

在0℃下，将二乙胺盐酸盐(1.1mmol)，醋酸钠(2.1mmol)， 活化的3分子筛和氰基硼氢化钠(0.25mmol)以该顺序加到5 -氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-苄基-2-氧代-2-(4- 氧代哌啶-1-基)乙基〕酰胺(0.21mmol)的甲醇(2mL)溶液中。 18小时后，将混合物浓缩，将剩余物溶解在乙酸乙酯中，用2N NaOH和盐水洗涤所得溶液，用Na2SO4干燥并浓缩。通过硅胶柱 色谱法，用1-8％乙醇的含0.5％NH4OH的二氯甲烷溶液洗脱； 将产品纯化，然后用乙醚研制：产率82％；HPLC(60/40)2.79 分钟(98％)；PBMS439/441(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(br，1H)，8.94(d，0.5H，J＝8.8Hz)，8.90(d，0.5H)，7.71 (d，1H，J＝1.8Hz)，7.40(d，1H，J＝8.7Hz)，7.31-7.20(m，6-7H)，7.17(dd，1H，J＝ 2.1，8.7Hz)，5.15(m，1H)，4.22(m，0.5H)，4.08(m，0.5H)，3.96(m，0.5H)，3.85(m， 0.5H)，3.2-2.9(m，4H)，2.78(m，0.5H)，2.72(m，0.5H)，2.25(s，1.5H)，2.24(s，1.5H)， 1.75(m，2H)，1.3-0.8(m，2H). C24H27ClN4O2＋1.0H2O的元素分析计算值：C，63.08；H，6.40； N，12.26。 实测值：C，63.18；H，6.16；N，12.46。

实施例12 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-吗啉-4-基-2 -氧代乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，48小时反应时间)，将吗 啉(0.33mmol)和2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨 基〕-3-苯基丙酸(0.30mmol)偶合。将粗产品经硅胶色谱法 处理，用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脱，将需要的级分浓缩，将剩余 物溶解在氯仿和甲醇中并将得到的溶液与约128mg二甲基氨基吡 啶-聚苯乙烯树脂(Fluka Chemical Co.)搅拌18小时。将溶液 过滤，浓缩并用乙醚将剩余物研制：产率，51％；HPLC (60/40)5.92分钟(98％)；PBMS 412/414(MH+，100 ％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(br，1H)，8.95(d，1H)，7.72(d，1H)，7.39(d，1H，J＝ 8.7Hz)，7.35-7.15(m，7H).5.13(m，1H)，3.65-3.10(m，8H)，3.05(m，2H). C22H22ClN3O3＋0.33H2O的元素分析计算值：C，63.23；H，5.47； N，10.06。 实测值：C，63.28；H，5.32；N，10.10。

实施例13 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-丁基氨基甲酰基-2-苯基 乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，将正丁胺(0.66mmol) 和2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙 酸(0.60mmol)偶合。将粗产品溶解在氯仿和甲醇中并将得到的溶液 与50mg二甲基氨基吡啶-聚苯乙烯树脂(Fluka Chemical Co.) 一起搅拌18小时，将溶液过滤，浓缩并用乙醚将固体研制：产率 83％；HPLC(60/40)8.88分钟(92％)；mp192-193℃； TSPMS 398/400(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.71(br，1H)，8.70(d，1H，J＝8.3Hz)，8.10(t，1H)，7.72(d， 1H，J＝2.0 Hz)，7.39(d，1H，J＝8.7 Hz)，7.35-7.15(m，7H)，4.70(m，1H)，3.13-2.93 (m，4H)，1.38(m，2H)，1.25(m，2H)，0.86(t，3H，J＝7.2Hz)； C22H24ClN3O2的元素分析计算值：C，66.41；H，6.08；N，10.56。 实测值：C，66.15；H，6.04；N，10.52。

实施例14 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-苄基-2-氧代-2-(4 -氧代哌啶-1-基)乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，通过下列替换操作将4 -哌啶酮-水化物(2.0mmol)和2-〔(5-氯-1H-吲哚-2 -羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(1.0mmol)偶合：用乙酸乙酯稀释 反应混合物，用2N NaOH和2N HCl洗涤得到的溶液，将悬浮液 过滤并将固体干燥：产率111mg，26％；HPLC(60/40)8.88分钟(92 ％)；PBMS 424/426(MH+，100％)；mp 258-261℃；PBMS 424/426 (MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(br，1H)，9.03(d，1H，J＝8.1Hz)，7.72(d，1H，J＝1.9 Hz)，7.39(d，1H，J＝8.7Hz)，7.4-7.15(m，7H)，5.20(m，1H，J＝8.2Hz)，3.88(m， 1H)，3.73(m，3H)，3.1(m，3H)，2.5-2.22(m，3H)，2.05(m，1H). C23H22ClN3O3＋0.75H2O的元素分析计算值：C，63.16；H，5.42； N，9.61。 实测值：C，63.11；H，5.15；N，9.53。

实施例15 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-氧代-2-吡咯 烷-1-基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，140小时反应时间)，将 吡咯烷(0.35mmol)和2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨 基〕-3-苯基丙酸(0.31mmol)偶合，并用乙醚将粗产品研制： 产率89mg，71％；HPLC(70/30)7.57分钟(98％)；PBMS 396/398(MH+，100/80％)； C22H22ClN3O3＋0.33H2O的元素分析计算值：C，65.75；H，5.68； N，10.48。 实测值：C，65.56；H，5.81；N，10.44。

实施例16 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸{1-〔(3-二甲基氨基丙基)甲 基氨基甲酰基〕-2-苯基乙基}酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，120小时反应时间)将N， N，N’-三甲基-1，3-二氨基丙烷(0.31mmol)和2-〔(5 -氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(0.28mmol) 偶合并通过硅胶色谱法，用1-8％乙醇的含0.5％氢氧化铵的二 氯甲烷溶液洗脱来纯化产品：产率86mg，69％；HPLC(40/60)7.57 分钟(＞99％)；mp 187-190.5℃；TSPMS 441/443(MH+，100 ％)； C24H29ClN4O2＋0.25H2O的元素分析计算值：C，64.71；H，6.68； N，12.58。 实测值：C，64.73；H，6.94；N，12.86。

实施例17 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-(3-吗啉-4-基丙基氨 基甲酰基)-2-苯基乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)通过下列替换操作将4- (3-氨基丙基)吗啉(0.34mmol)和2-〔(5-氯-1H- 吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(0.30mmol)偶合：用乙酸 乙酯将反应物稀释，将得到的溶液用2N NaOH洗涤三次并用盐水 洗涤一次，用Na2SO4干燥并浓缩。在乙醚中将剩余物搅拌1小时， 将固体过滤并干燥：产率125mg，87％；HPLC(60/40)2.85分钟 (98％)；PBMS 469/471(MH+，100/90％)； C25H29ClN4O3＋0.25H2O的元素分析计算值：C，63，42；H，6.28； N，11.83。 实测值：C，63.31；H，6.57；N，12.04。

实施例18 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-二甲基氨基甲酰基-2-苯 基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，60小时反应时间，先用酸 再用碱洗涤)，将二甲胺盐酸盐(0.96mmol)和2-〔(5-氯 -1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(0.90mmol) 偶合，并用乙醚将得到的固体研制：产率320mg，99％；HPLC(60/40) 5.87分钟(100％)；mp 224-225℃；PBMS370/372(MH+， 100％)。

将样品从热的乙酸乙酯中重结晶并分析(mp 224-225℃)。 C20H20ClN3O2＋0.5C4H8O2的元素分析计算值：C，63.80；H，5.84； N，10.15。 实测值：C，63.81；H，5.80；N，10.21。

实施例19 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-((3R，4R)-二羟基吡咯烷 -1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(二甲基甲酰胺反应溶剂)，通过下列替换操作将 (3R，4R)-3，4-二羟基吡咯烷(通过美国专利4634775 所述的方法从非天然酒石酸得到，1.0mmol)和〔(5-氯-1H -吲哚-2-羰基)氨基〕乙酸(1.1mmol)偶合：将反应混合物浓 缩，用20mL乙酸乙酯和20mL 2N NaOH稀释，将悬浮液搅拌0.5 小时，过滤并相继用2N NaOH，水，1N HCl和乙酸乙酯洗涤得 到的固体：产率77％；HPLC(40/60)10.7分钟(99％)； TSPMS338/340(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.84(br，1H，互换)，8.72(t，1H，互换)，7.72(d，1H， J＝1.9Hz)，7.44(d，1H，J＝8.7Hz)，7.19(dd，1H，J＝2.1，8.8Hz)，7.16(s，1H)，5.26 (d，1H，J＝4.4Hz，互换)，5.17(d，1H，J＝3.2Hz，互换)，4.04(m，3H)， 3.92(m，1H)，3.66(dd，1H，J＝4.0，10.8Hz)，3.42-3.28(m，3H)； C15H16ClN3O4＋0.25H2O的元素分析计算值：C，52.64；H，4.86； N，12.28。 实测值：C，52.61；H，4.85；N，12.23。

实施例20 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-((3S，4S)-二羟基吡咯烷 -1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(二甲基甲酰胺反应溶剂)，通过下列替换操作将 (3S，4S)-3，4-二羟基吡咯烷(通过美国专利4634775中 所述的方法，从天然存在的酒石酸得到，1.0mmol)和〔(5- 氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕乙酸(1.0mmol)偶合：将反应物 用乙酸乙酯和2N NaOH稀释，将得到的悬浮液过滤，用乙酸乙酯， 水洗涤固体并干燥：产率135mg，40％；HPLC(40/60)7.29分钟 (98％)；TSPMS 338/340(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ12.1(br，1H)，8.86(br，1H)，7.71(d，1H，J＝2Hz)，7.43(d，1H， J＝8.8Hz)，7.17(dd，1H，J＝2，8.8Hz)，7.13(s，1H)，5.35(br，1H，与D2O互换    )，5.28(br，1H，与D2O互换)，4.03(m，3H)，3.92(s，1H)，3.66(dd，1H，J＝ 4，11Hz)，3.4-3.2(m，3H). C15H16ClN3O4＋1.5H2O的元素分析计算值：C，49.39；H，5.25； N，11.52。 实测值：C，49.50；H，5.04；N，11.27。

实施例21 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-苄基-2-(4-甲氧基甲 氧基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将4-甲氧基甲氧基哌啶(1.0mmol)和2-〔(5 -氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(1.0mmol) 偶合并通过硅胶色谱法，用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脱来纯化产品： 产率241mg，50％；HPLC(60/40)7.67分钟(94％)；PBMS 470/472(MH+，100％)； C25H28ClN3O4的元素分析计算值：C，63.89；H，6.01；N，8.94。 实测值：C，63.91；H，6.00；N，8.95。

实施例22 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-苯基-1-(2，2、6，6 -四甲基哌啶-4-基氨基甲酰基)乙基〕酰胺

按照方法A，将2，2，6，6-四甲基哌啶(1.0mmol) 和2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙 酸(1.0mmol)偶合。将得到的黄色泡沫体用乙醚，1∶5二氯甲烷 -乙醚研制。将得到的固体溶解在二氨甲烷中并将得到的溶液用 0.2mL 4N HCl/二噁烷处理。将形成的沉淀过滤，用二氯甲烷洗涤 并干燥：产率220mg，42％；HPLC(60/40)3.19分钟(96％)； PBMS481/483(MH+，100％)； C27H33ClN4O2＋HCl＋1.5H2O的元素分析计算值：C，59.56； H，6.85；N，10.29。 实测值：C，59.30；H，6.90；N，10.22。

实施例23 (1-{2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯 基丙酰基}吡咯烷-(3RS)-基)氨基甲酸叔丁酯

按照方法A，将外消旋吡咯烷-3-氨基甲酸叔丁酯(1.0mmol) 和2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙 酸(1.0mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用1∶1乙酸乙酯/己烷 洗脱来纯化产品：产率302mg，59％；PBMS 511/513(MH+， 100％)； C27H31ClN4O4的元素分析计算值：C，63.46；H，6.11；N，10.96。 实测值：C，63.32；H，6.26；N，10.89。

实施例24 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2-吗啉-4-基-2-氧代乙 基)酰胺

按照方法A，将吗啉(1.0mmol)和〔(5-氯-1H-吲哚 -2-羰基)氨基〕乙酸(1.0mmol)偶合。将得到的固体悬浮在乙 醚中，过滤并干燥，得到米色固体：产率264mg，71％；HPLC (60/40)3.28分钟(100％)；TSPMS 322/324(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.85(s，1H)，8.68(t，1H)，7.72(d，1H，J＝2.0Hz)，7.43(d，1H， J＝8.8Hz)，7.19(dd，1H，J＝2.1，8.8Hz)，7.16(s，1H)，4.17(d，2H，J＝5.7Hz)， 3.65-3.45(m，8H). C15H16ClN3O3＋0.25H2O的元素分析计算值：C，55.22；H，5.10； N，12.88。 实测值：C，55.22；H，5.08；N，12.82。

实施例25 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(甲氧基甲基氨基甲酰基)甲基〕 酰胺

按照方法A，将甲氧基甲胺盐酸盐(1.0mmol)和〔(5-氯- 1H-吲哚-2-羰基)氨基〕乙酸(1.0mmol)偶合。将得到的固体 悬浮在乙醚中，过滤并干燥：产率158mg，53％；PBMS296/298 (MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.82(s，1H)，8.77(t，1H，J＝6Hz)，7.73(d，1H，J＝2.0Hz)， 7.43(d，1H，J＝8.7Hz)，7.19(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.16(s，1H)，4.22(d，2H，J＝ 5.7Hz)，3.76(s，3H)，3.14(s，3H). C13H14ClN3O3的元素分析计算值：C，52.80；H，4.77；N，14.21。 实测值：C，52.51；H，4.82；N，14.01。

实施例26 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔1-苄基-2-(4-二甲基氨 基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将二甲基氨基哌啶(1.0mmol)和2-〔(5-氯 -1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(1.0mmol)偶合。 将剩余物通过硅胶色谱法，用5-30％乙醇的含0.5％氢氧化铵的 二氯甲烷溶液洗脱来纯化，再用乙醚来研制：产率21mg，5％； PBMS 453/455(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6，部分的)δ11.75(br，1H)，8.94(m，1H)，7.72(d，1H，J＝2Hz)，7.45- 7.10(m，8H)，5.17(m，1H)，4.63(m)，4.38(m)，4.03(m)，3.50(m)，3.15-2.8(m)，2.51 (s，3H)，2.50(s，3H).

实施例27 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-氧代-2-哌嗪 -1-基乙基)酰胺

在0℃下，将三氟乙酸(4ml)加到4-{2-〔(5-氯- 1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酰基}哌嗪-1-羧酸 叔丁酯(0.6mmol)中并将得到的溶液搅拌0.3小时，浓缩。将剩余 物在乙酸乙酯和2N NaOH之间分配，分离有机层并用盐水洗涤， 用Na2SO4干燥，浓缩并用乙醚将得到的固体研制：产率189mg， 77％；HPLC(60/40)2.63分钟(99％)；mp 166.5-168℃；TSPMS 411/313(MH+，100％)； C22H23ClN4O2＋0.5H2O的元素分析计算值：C， 62.93；H，5.76；N，13.34。 实测值：C，62.64；H，5.52；N，13.34。

实施例28 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-((3RS)-氨基吡咯烷-1- 基)-1-苄基-2-氧代乙基〕酰胺

将4N HCl/1，4-二噁烷(5ml)加入(1-{2-〔(5-氯- 1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酰基}吡咯烷-(3RS -基)氨基甲酸叔丁酯(0.5mmol)中。在25℃下，将得到的溶 液搅拌0.5小时，浓缩并用乙醚将剩余物研制：产率190mg，85％； HPLC(60/40)2.62分钟(98％)；PBMS 411/413(MH+，100％)； C22H23ClN4O2＋HCl＋1.7H2O的元素分析计算值：C，55.28； H，5.78；N，11.72。 实测值：C，55.14；H，5.86；N，11.45。

实施例29 1-{(2RS)-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3 -苯基丙酰基}吡咯烷-(2S)-羧酸

在25℃下，将三氟乙酸加到1-{2(RS)-〔(5-氯- 1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酰基}吡咯烷-(2S) -羧酸叔丁酯(1.0mmol)中。1.5小时后，将反应物浓缩并将剩余 物先用乙醚再用乙醚和己烷的混合物研制。产率360mg，82％； HPLC(60/40)4.84分钟(99％)；PBMS 440/442(MH+，40％)， 396/398(MH-44，100％)； C23H22ClN3O4＋0.8H2O的元素分析计算值：C，60.81；H，5.24； N，9.25。 实测值：C，60.74；H，5.42；N，8.96。

实施例29a 1-{2(R，S)-〔(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕 -3-苯基丙酰基}吡咯烷-(2S)-羧酸叔丁酯

按照方法A，将L-脯氨酸叔丁酯(2.0mmol)和2-〔(5- 氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-苯基丙酸(2.0mmol)偶合， 并通过硅胶色谱法，用1∶2乙酸乙酯/己烷洗脱来纯化粗产品： 产率611mg，62％；HPLC(60/40)13.45分钟(57％)和14.46分 钟(41％)。

实施例30 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-甲基氨基甲酰基-2- 噻唑-4-基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，反应溶剂为二甲基甲酰胺)， 将(S)-2-氨基-N-甲基-3-噻唑-4-基丙酰胺盐酸盐 (0.6mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.51mmol)偶合。 在乙醚中将粗产品搅拌0.5小时，过滤，得到米色固体：182mg， 98％；HPLC(60/40)3.41分钟(98％)；mp＞260℃(分 解)；TSPMS 363/365(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.82(br，1H)，9.0(d，1H)，8.82(br，1H)，8.10(br，1H)，7.70(m， 1H)，7.44-7.38(m，2H)，7.21-7.15(m，2H)，4.80(m，1H)，3.24(m，1H)，3.05(m，1H)， 2.60(d，3H).

实施例30a (S)-2-氨基-N-甲基-3-噻唑-4-基丙酰胺盐酸盐

在0℃下，将(S)-(1-甲基氨基甲酰基-2-噻唑-4 -基乙基)氨基甲酸叔丁酯(248mg，0.87mmol)溶解在4MHCl-二噁烷中。在25℃下，将得到的混合物搅拌1小时，浓缩并用 乙醚将剩余物研制：产率202g，102％；HPLC(70/30)2.41分钟(96 ％)；

实施例30b (S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-N-甲基-3-噻唑 -4-基丙酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，省略酸洗)将甲胺盐酸盐 (1.2mmol)和Boc-L-3-(4-噻唑基)丙氨酸(1.0mmol)偶合， 并且无需进一步纯化即可使用产品。产率250mg，88％。

实施例31 (±)-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3-羟基 丙酸甲酯

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用饱和NaHCO3洗涤)，将D，L-丝氨酸甲酯盐酸盐(2.1mmol)和5-氯- 1H-吲哚-2-羧酸(2.0mmol)偶合，并通过硅胶色谱法，用 10，20，40和60％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品：产率565mg， 95％；HPLC(60/40)3.46分钟(98％)；mp 153-155℃；TSPMS 297/299(MH+，100/40％)； C13H13ClN2O4的元素分析计算值：C，52.62；H，4.42；N，9.44。 实测值：C，52.62；H，4.54；N，9.53。

实施例32 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-噻 唑-4-基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，将(S)-2-氨基- N，N-二甲基-3-噻唑-4-基丙酰胺盐酸盐(0.43mmol)和5 -氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.40mmol)偶合，并将粗产品先用1∶ 1乙醚/己烷，再用己烷研制。产率115mg，75％；HPLC(60/40) 3.72分钟(99％)；mp 198-202℃(在192℃下插入时收缩)； PBMS 377/379(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(s，1H)，9.02(d，1H，J＝2Hz)，8.9(d，1H，J＝8.2Hz)， 7.7(d，1H，J＝1.8Hz)，7.41(d，1H，J＝6.7Hz)，7.39(s，1H)，7.22 (s，1H)，7.17(dd， 1H，J＝2.2，8.7Hz)，5.30(m，1H)，3.24(dd，AB的A，1H，J＝7，13Hz)，3.16(dd，AB的 B，1H，J＝8.5，16Hz)，3.07(s，3H)，2.84(s，3H). C17H17ClN4O2S＋0.125H2O的元素分析计算值：C，53.86；H，4.59； N，14.78。 实测值：C，53.92；H，4.47；N，14.42。

实施例32a (S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-噻唑-4-基丙酰胺 盐酸盐

在0℃下，将(S)-(1-二甲基氨基酰基-2-噻唑-4 -基乙基)氨基甲酸叔丁酯溶解在4M HCl-二噁烷中并在25℃ 下搅拌2小时。将混合物浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率， 3.06g，105％；HPLC(70/30)2.12分钟(97％)；PBMS200 (MH+，100％)。

实施例32b (S)-(1-二甲基氨基甲酰基-2-噻唑-4-基乙基)氨基 甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度)，将二甲胺盐酸盐 (1.2mmol)和Boc-L-3-(4-噻唑基)丙氨酸(1.0mmol)偶 合并通过硅胶色谱法，用1-16％乙醇的含0.5％氢氧化铵的二氯 甲烷溶液洗脱来纯化产品。产率124mg，41％。

实施例33 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-((3R，4S)- 二羟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将(3R，4S)-二羟基吡咯烷盐酸盐(0.5mmol) 和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.5mmol)偶合并通过硅胶色谱 法，用2-10％乙醇的二氨甲烷溶液洗脱来纯化产品。产率180mg， 86％；HPLC(60/40)3.14分钟(98％)；TSPMS 428/430 (MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ 11.75(br，1H)，8.94(d，1H，J＝8Hz)，7.72(s，1H)，7.4-7.1(m， 8H)，5.03(d，0.5H，J＝5Hz)，4.95(d，0.5H，J＝5Hz)，4.90(d，1H，J＝5Hz)，4.87(m， 1H)，4.08(m，0.5H)，4.00(m，0.5H)，3.88(m，1.5H)，3.5-3.3(m，2.5H)，3.2(m，0.5H)， 3.0(m，2H). C22H22ClN3O4＋0.25H2O的元素分析计算值：C，61.11；H，5.25； N，9.72。 实测值：C，60.91；H，5.46；N，9.43。

实施例33a (顺式-3，4-)-二羟基吡咯烷盐酸盐

在5℃下，将顺式-3，4-二羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁 酯(1.99g，9.8mmol)溶解在4M HCl-二噁烷中并在25℃下，将 得到的悬浮液搅拌1小时。将混合物浓缩并用乙醚将剩余物研制， 得到淡紫色粉末(1.30g，95％)。

实施例33b 顺式-3，4-二羟基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

在25℃下，相继用四氧化锇(2.5％的叔丁醇溶液，6mL) 和N-甲基吗啉-N-氧化物处理粗产品2，5-二氢吡咯-1- 羧酸叔丁酯(10.5g，62.1mmol)的四氢呋喃(300ml)溶液。48 小时后，加入10％硫代硫酸钠水溶液并将混合物搅拌30分钟，部 分浓缩除去四氢呋喃，并用乙醚将得到的混合物水溶液萃取两次。 将乙醚萃取物用10％硫代硫酸钠，0.1N HCl洗涤，干燥并浓缩， 得到深橙色油，将其通过硅胶色谱法，用1％，2％，4％，8％ 和10％乙醇-二氯甲烷洗脱，得到琥珀色糖浆(4.09g)。

实施例33c 2，5-二氢吡咯-1-羧酸叔丁酯

在0℃下，将碳酸氢二叔丁酯(83g，380mmol)加到3-吡咯啉 的四氢呋喃(500mL)溶液(含35％吡咯啉，25g，362mmol) 中。在25℃下，将混合物搅拌1小时并浓缩，得到76.2g无需纯 化即可使用的黄色油状物。

实施例34 (3S)-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-4-(4 -羟基哌啶-1-基)-4-氧代丁酸叔丁酯

按照方法A，将(S)-3-氨基-4-(4-羟基哌啶-1 -基)-4-氧代丁酸叔丁酯(0.8mmol)和5-氯-1H-吲哚 -2-羧酸(0.8mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用25，40， 50，75和100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。产率330mg， 94％；HPLC(60/40)4.18分钟(97％)； TSPMS450/452(MH+，100％)。

实施例34a (S)-3-氨基-4-(4-羟基哌啶-1-基)-4-氧代丁 酸叔丁酯

在25℃下，将二乙胺(1.0mmol)加到(S)-3-(9H -芴-9-基甲氧基羰基氨基-4-(4-羟基哌啶-1-基)- 4-氧代丁酸叔丁酯的二甲基甲酰胺(5ml)溶液中。1小时后， 将反应混合物浓缩，将剩余物悬浮在1∶1乙醚/二氯甲烷中，过 滤并浓缩。将剩余物通过硅胶色谱法，用1-50％乙醇的含0.5％ 氢氧化铵的二氯甲烷溶液洗脱来纯化。产率217mg，80％。

实施例34b (S)-3-(9H-芴-9-基甲氧基氨基甲酰基氨基)-4- (4-羟基哌啶-1-基)-4-氧代丁酸

按照方法A(96小时反应时间，只用酸洗涤)，将4-羟基 哌啶(2.1mmol)和N-FMOC-L-天冬氨酸-β-叔丁酯 (2.0mmol)偶合，并通过硅胶色谱法，用1-4％乙醇的二氯甲烷 溶液洗脱来纯化产品。产率516mg，52％；HPLC(60/40)5.33分钟 (93％)。

实施例35  5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1R)-苄基-2-(4-羟基 哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，60小时反应时间)，将 (R)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙 -1-酮盐酸盐(3.1mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (3.4mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用50，75和100％乙酸乙酯 的己烷溶液洗脱将产品纯化，然后用1∶1乙醚-己烷研制，产率 1.1g，84％；HPLC(60/40)4.06分钟(99％)；PBMS 426/428 (MH+，100％)； C23H24ClN3O3＋0.25H2O的元素分析计算值：C，64.18；H，5.74； N，9.76。 实测值：C，64.28；H，5.94；N，9.41。

实施例35a (R)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙 -1-酮盐酸盐

在0℃下，将(R)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1 -(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙-1-酮(12.5mmol) 溶解在4M HCl-二噁烷中并在25℃下将得到的悬浮液搅拌1小 时。将混合物浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率，3.44g，97％。

实施例35b (R)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-(4-羟基哌啶 -1-基)-3-苯基丙-1-酮

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将 (R)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-3-苯基丙-1-酮 (14mmol)和4-羟基哌啶(21.5mmol)偶合并无需进一步纯 化即可使用产品。产率4.7g，94％；HPLC(60/40)3.52分钟 (98％)。

实施例36 1H-吲哚-2-羧酸〔2-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3 -基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度，60小时 反应时间)，将2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷- 3-基)乙酮盐酸盐(1.0mmol)和1H-吲哚-2-羧酸 (1.0mmol)偶合：用乙酸乙酯和2N NaOH将反应混合物稀释， 收集得到的沉淀并用2N NaOH，1N HCl和水洗涤。产率135mg， 42％；HPLC(60/40)2.97分钟(97％)；PBMS322(MH+， 100％)； C14H15N3O4S＋0.25H2O的元素分析计算值：C，51.60；H，4.79； N，12.90。 实测值：C，51.31；H，4.66；N，12.88。

实施例36a 2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基)乙酮盐 酸盐

在0℃下，将〔2-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基) -2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(11mmol)溶解在4M HCl- 二噁烷中并在25℃下，将得到的悬浮液搅拌1小时。将混合物浓 缩并用乙醚将剩余物研制。产率2.3g，100％。

实施例36b 〔2-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕 氨基甲酸叔丁酯

在0℃下，将间氯过苯甲酸(35mmol)缓慢加到(2-氧代 -2-噻唑烷-3-基乙基)氨基甲酸叔丁酯(14mmol)的二氯 甲烷(35ml)中。在泡沫发生平息后，在25℃下将混合物再搅拌 2.5小时。将混合物用乙酸乙酯稀释，将得到的溶液用饱和NaHCO3水溶液和10％Na2S2O3水溶液的1∶1混合物洗涤三次，用饱和 NaHCO3洗涤一次，干燥，浓缩并将剩余物用1∶1乙醚/己烷研 制。产率3.6g，92％。

实施例36c (2-氧代-2-噻唑烷-3-基乙基)氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，60小时反应时间)，将 噻唑烷(85mmol)和Boc-甘氨酸(57mmol)偶合并且产品无需纯化即 可使用。产率12.7g，90％。

实施例37 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(4-羟基 哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，将(S)-2-氨基- 1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙-1-酮盐酸盐 (0.65mmol)和5-氟-1H-吲哚-2-羧酸(0.73mmol)偶合 并通过硅胶色谱法，用20，30，40，50，75和100％乙酸乙 酯的己烷溶液洗脱，将产品纯化。产率228mg，84％；HPLC (60/40)3.57分钟(98％)；PBMS410(MH+，100％)； C23H24FN3O3＋0.25H2O的元素分析计算值：C，66.73；H，5.97； N，10.15。 实测值：C，66.68；H，6.19；N，9.94。

实施例38 1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(4-羟基哌啶-1 -基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，48小时反应时间)，将 (S)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙 -1-酮盐酸盐(3.4mmol)和1H-吲哚-2-羧酸(3.7mmol) 偶合。将产品通过硅胶色谱法，用50，75和100％乙酸乙酯的己 烷溶液洗脱来纯化，并用1∶1乙醚-己烷研制。产率1.14g，86％； HPLC(60/40)3.52分钟(98％)；PBMS 392(MH+，100 ％)； C23H25N3O3＋0.25H2O的元素分析计算值：C，69.77；H，6.49； N，10.61。 实测值：C，69.99；H，6.72；N，10.47。

实施例39 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(4-氟苄基)-2- 吗啉-4-基-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，48小时反应时间，先用 酸再用碱洗涤)，将(S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1 -吗啉-4-基丙-1-酮盐酸盐(0.48mmol)和5-氟-1H-吲 哚-2-羧酸(0.48mmol)偶合并将产品通过硅胶色谱法，用20， 30，40，50和75％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化。产率189mg， 95％；HPLC(60/40)4.76分钟(97％)；PBMS414(MH+， 100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.23(br，1H)，7.4-7.1(m，5H)，7.1-6.94(m，3H)，6.9(d，1H，J＝ 2 Hz)，5.30(m，1H)，3.72-3.48(m，5H)，3.42(m，1H)，3.03(m，4H).     C22H21F2N3O3的元素分析计算值：C，63.92；H，5.12；N，10.16。 实测值：C，64.30；H，5.34；N，9.82。

实施例39a (S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-吗啉-4-基丙- 1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-3 -(4-氟苯基)-1-吗啉-4-基丙-1-酮(3.1mmol)溶解 在4MHCl-二噁烷中并在25℃下将得到的悬浮液搅拌1小时。将 混合物浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率776mg，88％；HPLC (60/40)2.31分钟(99％)。

实施例39b (S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-3-(4-氟苯基)- 1-吗啉-4-基丙-1-酮

按照方法A(0-25℃反应温度，60小时反应时间，先用 酸再用碱洗涤)将吗啉(3.7mmol)和(S)-Boc-4-氟苯基丙氨 酸(3.5mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用20，30和40％乙酸乙酯 的己烷溶液洗脱来纯化产品。产率1.08g油状物，87％。

实施例40 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(1，1- 二氧代-1-噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，反应时间48小时，先用 酸再用碱洗涤)，将(S)-2-氨基-1-(1，1-二氧代- 1-噻唑烷-3-基)-3-苯基丙-1-酮盐酸盐(1.0mmol)和5 -氟-1H-吲哚-2-羧酸(1.0mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用 20，30，40和50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。产率 404mg，94％；HPLC(60/40)4.74分钟(98％)；PBMS 430(MH +，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.53(br，0.5H)，9.44(br，0.5H)，7.44(d，0.5H，J＝9Hz)，7.4-7.1(m， 7H)，7.02(M，1H)，6.84(s，0.5H)，6.81(s，0.5H)，5.20(m，0.5H)，4.96(m，0.5H)，4.68(d， 0.5H，J＝11Hz)，4.52(d，AB的A，0.5H，J＝11.5Hz)，4.37(d，AB的B，0.5H，J＝11.5 Hz)，4.20(m，0.5H)，4.03(m，0.5H)，3.80(m，0.5H)，3.50(d，0.5H，J＝11Hz)，3.3-3.0 (m，4H)，2.69(m，0.5H).

实施例40a (S)-2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基) -3-苯基丙-1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1 -(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基)-3-苯基丙-1- 酮溶解在4M HCl-二噁烷中。在25℃下将溶液搅拌1小时，浓 缩并用乙醚将剩余物研制。产率866mg，84％。

实施例40b (S)-2-(N-叔丁氧基羰基氨基)-1-(1，1-二氧代 -1-噻唑烷-3-基)-3-苯基丙-1-酮

将间氯过苯甲酸(9mmol)和(S)-(1-苄基-2-氧代 -2-噻唑烷-3-基乙基)氨基甲酸叔丁酯(3mmol)在二氯甲烷 (9ml)中的溶液加热回流6小时。用乙酸乙酯将混合物稀释，将得 到的溶液用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3水溶液的1∶1 混合物洗涤三次，干燥并浓缩。通过硅胶色谱法，用20，30和40 ％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化得到的泡沫体，得到无色泡沫体 (979mg，89％产率)。

实施例40c (S)-(1-苄基-2-氧代-2-噻唑烷-3-基乙基)氨基 甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将 噻唑烷(38mmol)和Boc-L-苯丙氨酸(19mmol)偶合并且产品无需 进-步纯化即可用。产率5.5g，86％。

实施例41 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(1.1-二氧代-1-噻 唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度，48小时 反应时间)，将2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷- 3-基)乙酮盐酸盐(1.0mmol)和5-氟-1H-吲哚-2-羧 酸(1.0mmol)偶合。将反应混合物用乙酸乙酯和1N HCl稀释，将得 到的悬浮液过滤，并用2N HCl，2N NaOH和水洗涤收集到的固 体。在丙酮中将过滤的固体煮沸，过滤并干燥。产率134mg，40％； HPLC(60/40)3.06分钟(97％)；mp 239-241℃(褪色)；PBMS 340(MH+，70％)，3.57(100％) 1H NMR(DMSO-d6)δ11.74(s，1H)，8.82(m，1H)，7.43(m，2H)，7.17(s，1H)，7.05(dt， 1H，J＝3，9Hz)，4.86(s，1.2H)，4.52(s，0.8H)，4.27(d，0.8H，J＝5.5Hz)，4.13(d， 1.2H，J＝6Hz，在m上叠加，1.2H)，3.86(t，1.2H，J＝7.4Hz)，3.58(t，0.8H，J ＝7Hz)，3.46(t，1.2H，J＝7.2Hz). C14H14FN3O4S＋0.6H2O的元素分析计算值：C，48.02；H，4.38； N，12.00。 实测值：C，47.99；H，4.04；N，12.00。

实施例42 5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-苄基-2-氧代-2-噻 唑烷-3-基乙基)酰胺

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度，48小时 反应时间)，将(S)-2-氨基-3-苯基-1-噻唑烷-3- 基丙-1-酮盐酸盐(4.0mmol)和5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸 (4.0mmol)偶合：将反应混合物用乙酸乙酯和2N HCl稀释，过滤收 集得到的沉淀，用2N HCl和2N NaOH洗涤。通过硅胶色谱法， 用30，40和50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化粗产品。产率 1.22g，75％；HPLC(60/40)4.74分钟(97％)；PBMS 405(MH +，100％)； C22H20N4O2S＋0.5H2O的元素分析计算值：C，63.90；H，5.12； N，13.55。 实测值：C，64.18；H，5.04；N，13.47。

实施例42a (S)-2-氨基-3-苯基-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮盐 酸盐

在0℃下，将(S)-(1-苄基-2-氧代-2-噻唑烷- 3-基乙基)氨基甲酸叔丁酯(16mmol)溶解在4M HCl-二噁烷 中，在25℃下将溶液搅拌1小时，将反应物浓缩并用乙醚将剩余 物研制。产率4.2g，95％。

实施例42b 5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸

将5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(1.71g，8.0mmol)加 到乙醇(10mL)和氢氧化钾(2g)的溶液中并将得到的混合物加热 回流1小时。加水溶解沉淀，并加入6N HCl调PH至1。得到沉 淀。在冰浴中将混合物冷却，过滤，并用冷水洗涤得到的无色固体， 干燥(1.51g)。将部分(1.4g)悬浮在热乙酸(40mL)中并冷却，得 到固体，过滤，用冷乙酸乙酯洗涤并干燥：产率980mg(70％)；HPLC (60/40)3.09分钟(97％)。

实施例43 1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(1，1-二氧代- 1-噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，将(S)-2-氨基- 1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基)-3-苯基丙-1 -酮盐酸盐(0.56mmol)和1H-吲哚-2-羧酸(0.56mmol)偶合并 用1∶1乙醚-己烷将产品研制。产率213mg，92％；HPLC (60/40)4.15分钟(99％)；PBMS 412(MH+，100％)； C21H21N3O4S＋0.5H2O的元素分析计算值：C，59.99；H，5.27； N，9.99。 实测值：C，60.25；H，5.27；N，9.98、

实施例44  5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(1，1-二氧代-1-噻 唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度，120小时 反应时间)，将2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷- 3-基)乙酮盐酸盐(0.6mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (0.6mmol)偶合：将反应混合物用乙酸乙酯和2N HCl稀释，过滤收 集得到的沉淀，然后用2N HCl，2N NaOH，水和乙醚洗涤。产 率110mg，52％；HPLC(60/40)3.37分钟(99％)；mp 236-239 ℃(分解)；PBMS 356/358(MH+，100％)； 1H NMR(丙酮-d6)δ11.0(br，1H)，8.0(br，1H)，7.66(d，1H，J＝2Hz)，7.55(d，1H， J＝8.7Hz)，7.21(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.15(d，1H，J＝2Hz)，4.77(s，1.1H)，4.49 (s，0.9H)，4.37(d，0.9H，J＝5.3Hz)，4.27(d，约1H，J＝5.3Hz，在m上叠加     约1H)，4.04(t，1.1H，J＝7Hz)，3.54(t，0.9H，J＝7Hz)，3.40(t，1.1H，J＝7Hz). C14H14ClN3O4S＋1.6H2O的元素分析计算值：C，43.72；H，4.51； N，10.93。 实测值：C，44.05；H，3.88；N，10.99。

实施例45 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2-氧代-2-噻唑烷-3-基 乙基)酰胺

按照具有下列操作的方法A(0-25℃，12小时反应时 间)，将2-氨基-1-噻唑烷-3-基乙酮盐酸盐(3.1mmol)和5 -氯-1H-吲哚-2-羧酸(3.4mmol)偶合：将反应混合物与乙酸 乙酯和2N HCl一起搅拌，过滤并用2N HCl，2N NaOH和乙醚 洗涤过滤的固体。产率988mg，98％；HPLC(70/30)3.25分钟(99 ％)；mp 253-255℃(分解，在243℃变黑)；PBMS 324/326 (MH+，100％)； 1H NMR(丙酮-d6)δ11.03(br，1H)，7.88(br，1H)，7.66(d，1H，J＝2Hz)，7.54(d， 1H，J＝8.3Hz)，7.21(dd，1H，J＝2，8.3Hz)，4.67(s，0.8H)，4.53(s，1.2H)，4.24(m， 2H)，3.87(t，1.2H，J＝7Hz)，3.78(t，0.8H，J＝7Hz)，3.18(t，1.2H，J＝7Hz)，3.05(t， 0.8H，J＝7Hz).

将样品从乙酸中重结晶后分析(mp 262-264℃)： C14H14ClN3O2S的元素分析计算值：C，51.93；H，4.36；N，12.98。 实测值：C，51.78；H，4.38；N，12.95。

实施例45a 2-氨基-1-噻唑烷-3-基乙酮盐酸盐

在0℃下，将(2-氧代-2-噻唑烷-3-基乙基)氨基甲 酸叔丁酯(5.41g，22mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(80mL) 中。在25℃下，将得到的溶液搅拌2小时，浓缩并用乙醚将剩余 物研制。产率3.9g，97％。

实施例46 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(4-羟基 哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，48小时反应时间)，将 (S)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙 -1-酮盐酸盐(0.8mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (0.9mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用50，75和100％乙酸乙 酯的己烷溶液洗脱来纯化产品，然后用1∶1乙醚-己烷研制。产 率266mg，76％；HPLC(60/40)4.09分钟(99％)；PBMS 426/428 (MH+，100％)； C23H24ClN3O3＋0.33H2O的元素分析计算值：C，63.96；H，5.76； N，9.73。 实测值：C，63.90；H，5.74；N，9.58。

实施例46a (S)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙 -1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔1-苄基-2-(4-羟基哌啶-1 -基)-2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(3.66g，10.5mmol)溶解在 4M HCl-二噁烷(39mL)中。在25℃下将反应混合物搅拌1小时， 浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率3.06g，102％。

实施例46b (S)-〔1-苄基-2-(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代 乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，144小时反应时间)，将 4-羟基哌啶(75mmol)和Boc-L-苯丙氨酸(38mmol)偶合并 且产品无需进一步纯化即可使用。产率12.2g，96％； HPLC(60/40)3.45分钟(97％)。

实施例47 5-溴代-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(1，1 -二氧代-1-噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将 (S)-2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基) -3-苯基丙-1-酮盐酸盐(0.3mmol)和5-溴代-1H-吲哚- 2-羧酸(0.3mmol)偶合，并通过硅胶色谱法用30，40和50％乙 酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。收集灰白色泡沫体并用1∶1 乙醚-己烷研制，得到产品107mg，73％；HPLC(60/40)6.21 分钟(99％)；PBMS 490/492(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.53(br，0.5H)，9.44(br，0.5H)，7.78(d，0.5H，J＝2Hz)，7.76(d， 0.5H，J＝2Hz)，7.4-7.2(m，7H)，7.10(d，0.5H，J＝9Hz)，7.02(d，0.5H，J＝9Hz)， 6.86(s，0.5H)，6.81(s，0.5H)，5.21 (m，0.5H)，4.95(m，0.5H)，4.62(d，0.5H，J＝11Hz)， 4.47(d，AB的A，0.5H，J＝13Hz)，4.38(d，AB的B，0.5H，J＝13Hz)，4.20(m，0.5H)， 4.03(m，0.5H)，3.82(m，0.5H)，3.44(d，0.5H，J＝11Hz)，3.33-3.0(m，4H)，2.70(m， 0.5H).     C21H20BrN3O4S＋0.2H2O的元素分析计算值：C，51.06；H，4.16； N，8.51。 实测值：C，51.44；H，4.36；N，7.93。

实施例48 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-氧代-2- (3-氧代吡咯烷-1-基)乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将 (S)-1-(2-氨基-3-苯基丙酰基)吡咯烷-3-酮盐酸 盐(0.6mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.6mmol)偶合，并 通过硅胶色谱法，用40和50％的乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化 产品，然后用乙醚将得到的泡沫体研制。产率112mg，45％；HPLC (60/40)5.13分钟(＞99％)；PBMS 410/412(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.19(m，1H)，7.60(m，1H)，7.3-7.15(m，8H)，6.86(m，1H)，4.23(m， 0.5H)，4.95(m，0.5H)，4.0-3.7(m，3H)，3.27(m，1H)，3.15(m，1H)，3.05(m，0.5H)，2.85 (d，0.5H，J＝28Hz)，2.45(m，1.5H)，2.15(m，0.5H). C22H20ClN3O3＋0.55H2O的元素分析计算值：C，62.95；H，5.07； N，10.01。 实测值：C，63.31；H，5.09；N，9.61。

实施例48a (S)-1-(2-氨基-3-苯基丙酰基)吡咯烷-3-酮盐酸 盐

在0℃下，将(S)-〔1-苄基-2-氧代-2-(3-氧 代吡咯烷-1-基)乙基〕氨基甲酸叔丁酯(552mg，1.7mmol)溶解 在4M HCl-二噁烷(6.2mL)中。在25℃下将混合物搅拌1小时， 浓缩并用乙醚将剩余物研制，得到淡棕色固体。产率，482mg， 108％。

实施例48b (S)-〔1-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡咯烷-1-基) 乙基〕氨基甲酸叔丁酯

在-78℃下，将二甲基亚砜(4.07g，52mmol)和草酰氯(3.61g， 28mmol)的溶液缓慢顺序加到二氯甲烷(50ml)中。经套管将 (S)-〔1-苄基-2-(3-羟基吡咯烷-1-基)-2-氧 代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(24mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液加到上述 溶液中，反应温度恢复到-30℃0.5小时，然后降低到-78℃， 再加入三乙胺(118mmol)。将反应升温至25℃，用乙酸乙酯稀释， 用1∶1饱和NaHCO3/盐水洗涤三次，有机层用MgSO4干燥并浓 缩。通过硅胶色谱法，用30，40和50％乙酸乙酯的己烷溶液洗 脱来纯化得到的泡沫体，得到淡黄色泡沫体(7.5g，95％产率)。

实施例48c (S)-〔1-苄基-2-(3RS)-羟基吡咯烷-1-基)-2-氧 代乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将 (±)-3-吡咯烷醇(75mmol)和Boc-L-苯丙氨酸(38mmol)偶 合并且产品无需进一步纯化即可使用。产率12.2g，96％；HPLC (60/40)3.45分钟(96％)。

实施例49 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-苄基-2-氧代-2- 噻唑烷-3-基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，96小时反应时间，先用 酸再用碱洗涤)，将(S)-2-氨基-3-苯基-1-噻唑烷- 3-基丙-1-酮盐酸盐(2.6mmol)和5-氯-1H-吲哚2-羧酸 (2.6mmol)偶合。将粗产品且1∶1乙醚-己烷研制并干燥。产率 966mg，91％；HPLC(60/40)7.99分钟(97％)；PBMS 414/416 (MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.26(br，1H)，7.59(m，1H)，7.35-7.20(m，8H)，6.84(m，1H)，5.14 (m，1H)，4.61(d，AB的A，0.6H，J＝10.3Hz)，4.52(d，0.4H，J＝11.6Hz)，4.42(d，AB 的B，0.6H，J＝10.3Hz)，3.88(m，0.4H)，3.80-3.65(m，约1.5H)，3.2(m，约2.5H)， 3.04(m，0.4H)，2.95-2.8(m，1.2H)，2.63(m，0.6H). C21H20ClN3O2S＋0.6H2O的元素分析计算值：C，59.39；H，5.03； N，9.89。 实测值：C，59.39；H，4.96；N，9.52。

实施例50 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-苄基-2-氧代-2-硫代 吗啉-4-基乙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将 (S)-2-氨基-3-苯基-1-硫代吗啉-4-基丙-1-酮 盐酸盐(2.6mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2.6mmol)偶 合。然后将粗产品用1∶1乙醚-己烷研制，并干燥。产率1.03g，94％； HPLC(60/40)8.74分钟(99％)；PBMS 428/430(MH+，100％)； C22H22ClN3O2S的元素分析计算值：C，61.75；H，5.18；N，9.82。 实测值：C，62.04；H，5.58；N，9.72。

实施例50a (S)-2-氨基-3-苯基-1-硫代吗啉-4-基丙-1-酮 盐酸盐

在0℃下，将(S)-(1-苄基-2-氧代-2-硫代吗啉 -4-基乙基)氨基甲酸叔丁酯(17.8mmol)溶解在4M HCl-二 噁烷(67mL)中，在25℃下将溶液搅拌1小时，将反应物浓缩并用乙 醚将剩余物研制。产率5.0g，98％；PBMS 251(MH+，100 ％)。

实施例50b (S)-(1-苄基-2-氧代-2-硫代吗啉-4-基乙基)氨 基甲酸叔丁酯

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度)，将硫代 吗啉(38mmol)和Boc-L-苯丙氨酸(19mmol)偶合：将反应混 合物浓缩，用乙酸乙酯稀释，然后先用1N HCl洗涤三次，再用2N NaOH洗涤，将有机层用MgSO4干燥并浓缩。得到的泡沫体无需 进一步纯化即可使用。产率6.3g，95％。

实施例51 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-苄基-2-(1，1- 二氧代-1-噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基〕酰胺 按照方法A(0-25℃反应温度，先用酸再用碱洗涤)，将(S) -2-氨基-1-(1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基)-3 -苯基丙-1-酮盐酸盐(0.8mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧 酸(0.8mmol)偶合。通过硅胶色谱法，用30，40和50％乙酸乙酯 的己烷溶液洗脱来纯化产品，然后用1∶1乙醚-己烷研制。产率 266mg，75％；HPLC(60/40)5.52分钟(＞99％)；PBMS 446/448(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.21(br，0.5H)，9.15(br，0.5H)，7.62(br，0.5H，J＝2Hz)，7.60(d， 0.5H，J＝2Hz)，7.35-7.20(m，7H)，7.10(d，0.5H，J＝8.5Hz)，7.02(d，0.5H，J＝8.5 Hz)，6.84(d，0.5H，J＝2Hz)，6.81(d，0.5H，J＝2Hz)，5.21(m，0.5H)，4.93(m，0.5H)， 4.62(d，0.5H，J＝11Hz)，4.47(d，AB的A，0.5H，J＝13Hz)，4.39(d，AB的B，0.5H， J＝13Hz)，4.22(m，0.5H)，4.03(m，0.5H)，3.83(m，0.5H)，3.44(d，0.5H，J＝11Hz)， 3.3-3.0(m，4H)，2，67(m，0.5H).

实施例52 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(4-氯苄基)-2- (4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将(S)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1 -(4-羟基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐(0.98mmol)和5- 氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.92mmol)偶合，并通过硅胶柱色谱 法，用50，75和100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。产 率362mg，86％；HPLC(60/40)5.06分钟(97％)；mp 227-229 ℃；TSPMS 460/462(MH+，100％)； C23H23Cl2N3O3的元素分析计算值：C，60.01；H，5.04；N，9.13。 实测值：C，59.83；H，5.18；N，9.16。

实施例52a (S)-2-氨基-3-(4-氯苯基)-1-(4-羟基哌啶- 1-基)丙-1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔1-(4-氯苄基)-2-(4-羟 基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(475mg， 1.2mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(5mL)中。在25℃下将混合物 搅拌1.5小时，浓缩并用乙醚将剩余物研制，产率，422mg，105％； TSPMS 283(MH+，100％)。

实施例52b (S)-〔1-(4-氯苄基)-2-(4-羟基哌啶-1-基) -2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A，将4-羟基哌啶(2.6mmol)和Boc-L-对氯苯丙氨 酸(2.5mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用1∶1和3∶1乙酸乙酯/ 己烷洗脱来纯化产品。产率662mg，69％。

实施例53 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(4-羟基哌啶-1-基) -(1S)-(1H-咪唑-4-基甲基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(120小时反应时间，省略酸洗涤)，将(S) -2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-(1H-咪唑 -4-基)丙-1-酮盐酸盐(0.7mmol)和5-氯-1H-吲哚-2 -羧酸(0.7mmol)偶合。将粗产品用乙醚，1∶1乙醚-己烷研制 两次，并通过硅胶色谱法，用5-20％乙醇的含0.5％氢氧化铵的 二氯甲烷溶液洗脱来纯化剩余物。产率232mg，81％；HPLC(40/60) 2.57分钟(98％)；PBM〔S416/418(MH+，100％)； C20H22ClN5O3＋0.55H2O的元素分析计算值：C，56.42；H，5.47； N，16.45。 实测值：C，56.07；H，5.65；N，16.08。

实施例53a (S)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-(1H -咪唑-4-基)丙-1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-{2-(4-羟基哌啶-1-基)-2- 氧代-1-〔1-(甲苯-4-磺酰基)-1H-咪唑-4-基甲 基〕乙基}氨基甲酸叔丁酯(512mg，1.0mmol)溶解在4M HCl-二噁 烷(3ml)中。在25℃下，将混合物搅拌1.5小时，浓缩并用乙 醚将剩余物研制。产率422mg，105％；TSPMS 283(MH+，100％)。

实施例53b (S)-{2-(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代-1-〔1 -(甲苯-4-磺酰基)-1H-咪唑-4-基甲基〕乙基}基甲 酸叔丁酯

在25℃下，将4-羟基哌啶(303mg，3.0mmol)，三乙胺 (394mg，3.9mmol)和氰基膦酸二乙酯(636mg，3.9mmol)顺序加到 Boc-Nim-甲苯磺酰基-L-组氨酸(J.Med.Chem.30 536(1987)； 1.32g，3.9mmol)的二氯甲烷(10ml)中。12小时后，将溶液用乙酸 乙酯稀释，用饱和NaHCO3洗涤两次，干燥并浓缩。通过硅胶色谱 法，用1-8％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱来纯化剩余物。产率517mg， 35％；HPLC(50/50)4.75分钟(97％)。

实施例54 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2S)-〔(5-氯-1H-吲哚 -2-羰基)氨基〕-3-(4-羟基哌啶-1-基)-3-氧代 丙酯

按照方法A，将(S)-2-氨基-3-羟基-1-(4-羟 基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐(0.89mmol)和5-氯-1H- 吲哚-2-羧酸(0.85mmol)偶合，在硅胶上用极性较大的丝氨酸类 似物(40％)由色谱法分离产品，用1-16％乙醇的二氯甲烷溶液洗 脱。产率51mg，16％；HPLC(60/40)7.06分钟(96％)；PBMS 348/350(100％)，543/545(MH+，＜5％)。 C26H24Cl2N4O5＋0.57H2O的元素分析计算值：C，56.40；H，4.58； N，10.12。 实测值：C，56.79；H，4.90；N，9.65。

实施例54a (S)-2-氨基-3-羟基-1-(4-羟基哌啶-1-基)丙 -1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔1-羟甲基-2-(4-羟基哌啶- 1-基)-2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(595mg，2.0mmol)溶于 4M HCl-二噁烷(2mL)中。在25℃下搅拌混合物1小时，浓缩并 用乙醚研制剩余物。产率，506mg，105％；MS 189(MH+，100％)。

实施例54b (S)-〔1-羟甲基-2-(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧 代乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按具有下列操作的方法A(反应时间为60小时)将4-羟基 哌啶(6.7mmol)和Boc-L-丝氨酸(6.4mmol)偶合：浓缩反应混合 物，将剩余物溶于氯仿和1N NaOH(6mL)中，并用氯仿反复萃取所 得溶液(十次或更多次)。浓缩氯仿萃取液，并用硅胶色谱纯化剩 余物，洗脱液为1-16％乙醇的二氯甲烷溶液。产率：751mg，41％； HPLC(40/60)2.72分钟(96％)。

实施例55 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(4-羟基苄基)-2 -(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度)，将(S) -2-氨基-3-(4-羟基苯基)-1-(4-羟基哌啶-1- 基)丙-1-酮盐酸盐(0.68mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧 酸(0.65mmol)偶合：将反应混合物用乙酸乙酯稀释，将得到的溶液 用1N NaOH(2ml)洗涤，将水层用乙酸乙酯萃取三次，将合并的有 机萃取液用1N HCl洗涤，干燥并浓缩。通过硅胶色谱法，用1- 16％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱来纯化剩余物。产率，150mg，52％； HPLC(60/40)3.53分钟(99％)；PBMS 442/444(MH+， 100％)； C23H24ClN3O4＋0.5H2O的元素分析计算值：C，61.26；H，5.59； N，9.32。 实测值：C，61.52；H，5.89；N，8.98。

实施例55a (S)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)-1-(4-羟基哌啶 -1-基)丙-1-酮盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔1-(4-羟基苄基)-2-(4 -羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(450mg， 1.2mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(2mL)中。在25℃下，将混 合物搅拌1小时，浓缩并将剩余物用乙醚研制。产率，400mg，107％； MS 265(MH+，100％)。

实施例55b (S)-〔1-(4-羟基苄基)-2-(4-羟基哌啶-1-基) -2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照具有下列操作的方法A(0-25℃反应温度，60小时 反应时间)，将4-羟基哌啶(3.9mmol)和Boc-L-酪氨酸(3.7mmol) 偶合：将反应混合物用乙酸乙酯稀释并用碱洗涤一次，将碱层用 2N HCl酸化并用氯仿萃取三次，将氯仿萃取物浓缩。通过硅胶色 谱法，用1-8％乙醇的含0.5％NH4OH的二氯甲烷溶液洗脱来纯 化得到的泡沫体。产率550mg，41％；HPLC(40/60)5.02分钟(87 ％)。

实施例56 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(4-羟基哌啶-1-基) -2-氧代-(1S)-吡啶-3-基甲基乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，将(S)-2-氨基- 1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-吡啶-3-基丙-1-酮二 盐酸盐(0.8mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.7mmol)偶合 并通过硅胶色谱法，用1-16％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱来纯化 产品。产率26mg，8％；HPLC(50/50)5.02分钟(99％)； PBMS427/429(MH+，100％)； C22H23ClN4O3＋0.5H2O的元素分析计算值：C，60.62；H，5.55； N，12.85。 实测值：C，60.57；H，5.74；N，12.53。

实施例56a (S)-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-吡啶- 3-基丙-1-酮二盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔2-(4-羟基哌啶-1-基)- 2-氧代-1-吡啶-3-基甲基乙基〕氨基甲酸叔丁酯(367mg， 1.05mmol)溶解在4M HCl-二噁烷中。在25℃下将得到的悬浮液 搅拌1.5小时，浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率，450mg，100％。

实施例56b (S)-〔2-(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代-1-吡啶 -3-基甲基乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，96小时反应时间，省略 酸洗涤)，将4-羟基哌啶(2.9mmol)和N-t-Boc-L-3-(3 -吡啶基)丙氨酸(2.8mmol)偶合，并通过硅胶色谱法，用1-8 ％乙醇的二氟甲烷溶液洗脱来纯化产品。产率454mg，46％；MS 350(MH+，100％)。

实施例57 1H-吲哚-2-羧酸〔(1R)-(4-氟苄基)-2-(4-羟 基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度)，将(R)-2-氨基 -3-(4-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶-1-基)丙-1- 酮盐酸盐(0.5mmol)和1H-吲哚-2-羧酸(0.5mmol)偶合并通过 硅胶色谱法，用25，30，50，75和80％乙酸乙酯的己烷溶液 洗脱来纯化产品。产率150mg，60％；HPLC(60/40)3.66分钟(97％)； mp 204-207℃；PBMS 410(MH+，100％)； C23H24FN3O3的元素分析计算值：C，67.47；H，5.91；N，10.26。 实测值：C，67.18；H，6.03；N，10.21。

实施例57a (R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶- 1-基)丙-1-酮盐酸盐

在0℃下，将(R)-〔1-(4-氟苄基)-2-(4- 羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(2.6mmol) 溶解在4M HCl-二噁烷(2mL)中。在25℃下，将溶液搅拌2小时， 浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率，920mg，124％；HPLC(60/40) 2.23分钟(98％)。

实施例57b (R)-〔1-(4-氟苄基)-2-(4-羟基哌啶-1-基) -2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A，将4-羟基哌啶(3.7mmol)和(R)-N-t- Boc-对氟苯丙氨酸(3.5mmol)偶合，得到无需进-步纯化即可使用 的泡沫体。产率940mg，73％；HPLC(60/40)3.64分钟(95％)； MS 367(MH+，100％)。

实施例58 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1R)-(4-氟苄基)-2 -(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将(R)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1 -(4-羟基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐(0.6mmol)和5- 氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.6mmol)偶合并通过硅胶色谱法，用 50，75和100％乙酸乙酯的己烷溶液来纯化产品。产率171mg， 765％；HPLC(60/40)4.23分钟(97％)；MS 444/446 (MH+，100％)；TSPMS 444/446(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.20(br，1H)，7.57(d，1H，J＝2Hz)，7.33(d，1H，J＝8Hz)， 7.3-7.2 (m，2H)，7.14(m，2H)，6.97(m，2H)，6.85(m，1H)，5.34(m，1H)，4.05-3.80(m，2H)，3.7 -3.3(m，1.5H)，3.25(m，1H)，3.10(m，2H)，2.93(m，0.5H)，1.9-1.7(m，2.5H)，1.45(m， 2H)，1.15(m，0.5H). C23H23ClFN3O3＋0.05H2O的元素分析计算值：C，62.11；H，5.23； N，9.45。 实测值：C，62.51；H，5.66；N，9.19。

实施例59 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(4-氟苄基)-2- (4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将(S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)-1 -(4-羟基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐(0.5mmol)和5- 氟-1H-吲哚-2-羧酸(0.5mmol)偶合。将粗产品用1∶1乙醚 -己烷研制一次，用己烷研制一次。将得到的固体在乙酸乙酯中 煮沸。将得到的悬浮液过滤，并将收集到的固体干燥。产率，103mg， 48％；HPLC(60/40)3.69分钟(95％)；PBMS 428(MH+，100％)； C23H23F2N3O3＋0.25H2O的元素分析计算值：C，63.95；H，5.48； N，9.73。 实测值：C，63.93；H，5.66；N，9.87。

实施例59a (S)-2-3-(4-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶-1 -基)丙-1-酮盐酸盐

在25℃下，将〔(S)-1-(4-氟苄基)-2-(4- 羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯(20.2mg， 55mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(25ml)中。3小时后，浓稠的 糖浆沉淀，再加入4M HCl-二噁烷(10ml)。将混合物搅拌2小 时，浓缩并将固体剩余物悬浮在4M HCl-二噁烷中。在25℃下2 小时后，将混合物浓缩并用乙醚将剩余物共蒸发两次。在25℃下， 在乙醚(75ml)和己烷(10ml)的混合物中将得到的固体搅拌18小 时，将混合物过滤，并用1∶1乙醚-己烷将过滤的固体洗涤，干 燥，得到吸湿性固体(16.3g，97％)。

实施例59b 〔(S)-1-(4-氟苄基)-2-(4-羟基哌啶-1-基) -2-氧代乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A，将4-羟基哌啶(0.29mmol)和(S)-N-t- Boc-对氟苯丙氨酸(0.28mol)偶合，得到产率为84％的泡沫体粗 产品。将部分该物质(81.6g)溶解在热的乙酸乙酯(400mL)中并将己 烷(25℃)加到得到的溶液中直至出现轻度混浊。将混合物加热至沸 腾并将得到的澄清溶液冷却至25℃过夜。将得到的悬浮液过滤， 并用乙酸乙酯-己烷洗涤收集到的固体，干燥(68.1g，67％)。

实施例60 1-{(2S)-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕-3 -苯基丙酰基}-(4R)-羟基吡咯烷-(2S)-羧酸苄酯

按照方法A(0-25℃反应温度，60小时反应时间)将1 -((2S)-氨基-3-苯基丙酰基)-(4R)-羟基吡咯烷(2S) -羧酸苄酯盐酸盐(0.56mmol)和5-氯-1H-嘴哚-2-羧酸 (0.53mmol)偶合，并通过硅胶色谱法，用20，30和50％乙酸乙 酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。产率，26mg，8％；HPLC(60/40) 8.14分钟(98％)；PBMS 546/548(MH+，100％)； C30H28ClN3O5的元素分析计算值：C，65.99；H，5.17；N，7.70。 实测值：C，66.14；H，5.37；N，7.60。

实施例60a 1-((2S)-氨基-3-苯基丙酰基)-(4R)-羟基吡咯烷-(2S) -羧酸苄酯盐酸盐

在0℃下，将1-((2S)-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰 基)-(4R)-羟基吡咯烷-(2S)-羧酸苄酯(3.0mmol)溶解 在4M HCl-二噁烷中。在25℃下将混合物搅拌1小时，浓缩并用 乙醚将剩余物研制。产率1.16g，96％。

实施例60b 1-((2S)-叔丁氧基羰基氨基-3-苯基丙酰基)-(4R)-羟 基吡咯烷-(2S)-羧酸苄酯

按照方法A(0-25℃反应温度，1∶1二氯甲烷/二甲基 甲酰胺)将反式-L-羟基脯氨酸苄酯(3.15mmol)和L-Boc- 苯丙氨酸(3.0mmol)偶合，并且产品无需进一步纯化即可使用。产 率1.31g，99％；HPLC(60/40)6.1分钟(95％)。

实施例61 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(4-氟苄基)-2- (4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基〕酰胺

按照方法A，将(S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)- 1-(4-羟基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐(0.051mol)和5 -氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.051mol)偶合，并通过硅胶色谱法， 用50％，75％，80％和100％乙酸乙酯-己烷洗脱来纯化产品， 得到泡沫体(产率78％)，HPLC(60/40)4.21分钟(99％)。通过溶 解在热的乙酸乙酯(大约5-7ml/g)中，将部分该物质重结晶， 并加入大约等体积的己烷进行回流，然后将溶液缓慢冷却至25 ℃。将固体过滤并用1∶4乙酸乙酯/己烷洗涤，干燥(回收率70 -90％)：mp 175-177℃； 1H NMR(CDCl3)δ9.41(m，0.5H)，9.36(m，0.5H)，7.59(d，1H，J＝2Hz)，7.37(d，1H， J＝8Hz)，7.29(dd，1H，J＝2，9Hz)，7.20(dd，1H，J＝2.0，8.9Hz)，7.14(m，2H)，6.95 (m，2H)，6.86(m，1H)，5.34(m，1H)，4.05(m，0.5H)，3.90(m，1.5H)，3.65(m，0.5H，3.45 (m，1H)，3.25(m，1H)，3.10(m，2H)，2.93(m，0.5H)，1.88(br，1H，与D2O互换)， 1.80(m，1.5H)，1.45(m，2H)，1.12(m，0.5H). PBMS 444/446(MH+，100％)； C23H23ClFN3O3＋0.2H2O的元素分析计算值：C，61.73；H，5.27； N，9.39。 实测值：C，61.40；H，5.37；N，9.11。

实施例62 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰 基)-2-吡啶-3-基乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，1∶1二氯甲烷/DMF反 应溶剂)，将(2S)-氨基-N-甲氧基-N-甲基-3-吡啶 -3-基丙酰胺二盐酸盐(1.3mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧 酸(1.25mmol)偶合，并通过硅胶色谱法，用乙酸乙酯洗脱来纯化产 品。产率313mg，65％；HPLC(60/40)2.84分钟(99％)；TSPMS 387/389(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.1(br，1H)，8.48(dd，1H)，8.43(m，1H)，7.60(d，1H)，7.50(m，1H， J＝约8Hz)，7.37(d，1H，J＝约8Hz)，7.23(d，1H)，7.18(dd，1H，J＝约8Hz)， 7.10(d，1H，J＝约8Hz)，6.82(d，1H)，5.42(m，1H)，3.78(s，3H)，3.25(s，3H)，3.32 (dd，AB的A，1H，J＝约7，14Hz)，3.10(dd，AB的B，1H，J＝约7，14Hz). C19H19ClN4O3＋0.4H2O的元素分析计算值：C，57.91；H，5.07； N，14.22。 实测值：C，58.19；H，5.23；N，13.82。

实施例62a (2S)-氨基-N-甲氧基-N-甲基-3-吡啶-3-基丙酰 胺二盐酸盐

在0℃下，将〔(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰基)-2 -吡啶-3-基乙基〕氨基甲酸叔丁酯(1.5mmol)溶解在4M HCl- 二噁烷中。在25℃下将得到的溶液搅拌2小时，浓缩并用乙醚将 剩余物研制。产率，390mg，95％。

实施例62b (S)-〔1-(甲氧基甲基氨基甲酰基)-2-吡啶-3-基乙 基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，2∶1二氯甲烷/二甲基 甲酰胺反应溶剂，省略酸洗涤，用Na2SO4干燥)，将N，O-二 甲基羟胺盐酸盐(1.7mmol)和Boc-3-吡啶基-L-丙氨酸(1.6mmol) 偶合。用乙醚将剩余物研制，得到428mg(86％产率)黄色固体。

实施例63 (R，S)-2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基〕- 3-(3-氟苯基)丙酸甲酯

按照方法A(0-25℃反应温度，1∶1二氯甲烷/DMF反 应溶剂)，将(R，S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙酸甲 酯(2.05mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2.03mmol)偶合， 并通过硅胶色谱法，用10，20和40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱 来纯化产品。将剩余物用1∶1乙醚-己烷和己烷研制，得到灰白 色固体(484mg，63％)；HPLC(60/40)8.13分钟(95％)；TSPMS  375/377(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.26(br，1H)，7.60(d，1H，J＝约1Hz)，7.35(d，1H，J＝8.7Hz)， 7.25(m，2H)，6.95(m，1H)，6.91(m，1H)，6.84(m，1H)，6.77(d，1H，J＝1.5Hz)，6.63 (d，1H，J＝7.7Hz)，5.08(m，1H)，3.78(s，3H)，3.28(dd，1H，AB的A，J＝5.7，14Hz)， 3.21(dd，1H，AB的B，J＝5.5，14Hz). C19H16ClFN2O3的元素分析计算值：C，60.89；H，4.30；N，7.47。 实测值：C，60.79；H，4.58；N，7.18。

实施例63a (R，S)-2-氨基-3-(3-氟苯基)丙酸甲酯盐酸盐

在25℃下，将三甲基甲硅烷基氯(1.07g，9.9mmol)加到间氟- DL-苯丙氨酸(0.404g，2.2mmol)的甲醇(4mL)溶液中。将得到的溶 液回流1小时，冷却并浓缩。用乙醚将剩余物研制。产率，515mg， 100％；HPLC(60/40)2.31分钟(95％)。

实施例64 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰 基)-2-硫代苯-2-基乙基〕酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，2∶1二氯甲烷/二甲基甲 酰胺反应溶剂)，将(S)-2-氨基-N-甲氧基-N-甲基 -3-硫代苯-2-基丙酰胺盐酸盐(1.2mmol)和5-氟-1H-吲 哚-2-羧酸(1.2mmol)偶合。通过硅胶色谱法，用10，20，30 和40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化粗产品。产率375mg，80％； HPLC(60/40)6.36分钟(99％)；PBMS 392/394(MH+， 100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.33(br，1H)，7.60(d，1H，J＝约1Hz)，7.30(d，1H，J＝8.8Hz)， 7.20(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.15(dd，1H，J＝1，5.0Hz)，6.91(dd，1H，J＝3.4，5.1 Hz)，6.86(d，1H，J＝1.6Hz)，6.84(d，1H，J＝约2Hz)，5.40(m，1H)，3.77(s，3H)，3.46 (dd，1H，AB的A，J＝6.2，约14Hz)，3.37(dd，1H，AB的B，J＝6.2，约14.2Hz)，3.25 (s，3H). C18H18ClN3O3S＋0.25C4H8O2的元素分析计算值：C，55.14； H，4.87；N，10.15。 实测值：C，55.41；H，4.79；N，10.17。

实施例64a (S)-2-氨基-N-甲氧基-N-甲基-3-硫代苯-2- 基丙酰胺盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔1-(甲氧基甲基氨基甲酰基)-2 -硫代苯-2-基乙基〕氨基甲酸叔丁酯(1.3mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(1mL)中，并在25℃下将得到的溶液搅拌2小时。将 混合物浓缩并用乙醚将剩余物研制，得到黄色固体(321mg，96％； HPLC(60/40)2.24分钟(98％)；MS 215(MH+，100％)。

实施例64b (S)-〔1-(甲氧基甲基氨基甲酰基)-2-硫代苯-2-基 乙基〕氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度)，将N，O-二甲基羟 胺盐酸盐(1.4mmol)和Boc-(2-噻吩基)-L-丙氨酸(1.3mmol) 偶合，得到无需进一步纯化即可使用的产品。产率426mg，104％。

实施例65 (RS)-2-〔(5-氯-1H-吲哚-2-氨基甲酰基)氨基〕 -3-(4-氟苯基)丙酸甲酯

按照方法A(0-25％反应温度，3∶2二氯甲烷/二甲基甲 酰胺反应溶剂)，将(R，S)-2-氨基-3-(3-氟苯基) 丙酸甲酯(3.0mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2.9mmol)偶 合，并用1∶1乙醚/己烷将得到的粗产品研制。产率1.03g，92％； HPLC(60/40)7.95分钟(96％)；PBMS 375/377(MH+，10％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.30(br，1H)，7.60(d，1H，J＝约1Hz)，7.35(d，1H，J＝8.8Hz)， 7.25(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.10(m，2H)，6.97(m，2H)，6.77(d，1H，J＝2 Hz)，6.62 (d，1H，J＝7.8Hz)，5.06(m，1H)，3.78(s，3H)，3.27(dd，1H，AB的A，J＝7，14Hz)， 3.19(dd，1H，AB的B，J＝7，14Hz). C19H16ClFN2O3的元素分析计算值：C，60，89；H，4.30；N，7.47。 实测值：C，60.74；H，4.36；N，7.55。

实施例66 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸〔2-(4-氨基苯基)-(1S) -二甲基氨基甲酰基乙基〕酰胺盐酸盐

按照方法A(0-25℃反应温度，3∶1二氯甲烷/DMF反 应溶剂，只用碱洗涤)，将(S)-2-氨基-3-(4-氨基苯 基)-N，N-二甲基丙酰胺二盐酸盐(0.7mmol)和5-氯- 1H-吲哚-2-羧酸(0.7mmol)偶合，并通过硅胶色谱法，用1- 16％乙醇的含0.5％NH4OH的二氯甲烷溶液洗脱来纯化产品。将 合并级分浓缩，在0℃下溶解在甲醇中，将得到的溶液用1.01N HCl(1.05eq)处理。5分钟后，将反应混合物浓缩并将剩余物用乙醚研 制，得到橙色固体(79mg，29％产率)：TSPMS 385/387(MH+， 100％)； C20H21ClN4O2＋1.5HCl的元素分析计算值：C，54.65；H，5.16； N，12.75。 实测值：C，54.96；H，5.53；N，12.53。

实施例66a (S)-2-氨基-3-(4-氨基苯基)-N，N-二甲基丙 酰胺二盐酸盐

在0℃下，将(S)-〔2-(4-氨基苯基)-N，N- 二甲基氨基甲酰基乙基〕氨基甲酸叔丁酯(214mg，0.7mmol)溶解在 4M HCl-二噁烷(2mL)中，并在25℃将溶液搅拌2小时。将混合 物浓缩并用乙醚将剩余物研制。产率294mg，102％；PBMS 208(MH+，100％)。

实施例66b (S)-〔2-(4-氨基苯基)-1-二甲基氨基甲酰基乙基〕 氨基甲酸叔丁酯

按照方法A(0-25℃反应温度，4∶1二氯甲烷/二甲基 甲酰胺反应溶剂，只用碱洗涤)，将二甲胺盐酸盐(2.04mmol) 和Boc-对氨基-L-苯丙氨酸(1.7mmol)偶合。通过硅胶色谱法， 用50，60，70和100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。 产率226mg，42％；HPLC(70/30)2.45分钟(100％)。

实施例67 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-二甲基氨基甲酰基-3-苯 基丙基)酰胺

按照方法A(0-25℃反应温度，3∶1二氯甲烷/DMF反 应溶剂)，将(S)-2-氨基-N，N-二甲基-4-苯基丁 酰胺盐酸盐(0.76mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.76mmol) 偶合，通过硅胶色谱法，用10，20，30，40，50和60％乙酸 乙酯的己烷溶液洗脱来纯化产品。产率，263mg，90％；HPLC (60/40)7.12分钟(99％)；TSPMS 384/386(MH+，100％)； C21H22ClN3O2的元素分析计算值：C，65.71；H，5.78；N，10.95。 实测值：C，65.34；H，5.93；N，10.91。

实施例67a (S)-2-氨基-N，N-二甲基-4-苯基丁酰胺盐酸盐

在0℃下，将(S)-(1-二甲基氨基甲酰基-3-苯基丙 基)氨基甲酸叔丁酯(235mg，0.8mmol)溶解在4M HCl-二噁烷 (2ml)中。在25℃下将混合物搅拌1.5小时，浓缩并用乙醚将剩余 物研制。产率187mg，100％；HPLC(60/40)2.31分钟(99％)。

实施例67b (S)-(1-二甲基氨基甲酰基-3-苯基丙基)氨基甲酸叔丁 酯

按照方法A(0-25℃反应温度，3∶1二氯甲烷/DMF反 应溶剂)，将二甲胺盐酸盐(1.0mmol)和(S)-N-叔丁氧基羰 基-2-氨基-4-苯基丁酸(0.84mmol)偶合，得到的产品无需进 一步纯化即可使用。产率，238mg，93％；HPLC(60/40)5.98分钟 (97％)。

实施例68

       5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 [(1S)-二甲基氨基甲酰基-2-(4-羟基苯基)乙基]酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃，反应溶剂为二氯甲烷 /DMF2∶1，只用酸洗)，偶合(S)-2-氨基-3-(4-羟基苯基) -N，N-二甲基丙酰胺盐酸盐(1.05mmol)和5-氯-1H-吲 哚-2-羧酸(1.0mmol)；用硅胶色谱纯化产物，用20％、40 ％、50％和75％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，然后用乙醚研制。产 量400mg，产率104％；HPLC(60/40)3.93分钟(98％)； mp 228-231℃(分解，210℃时变黄)；TSPMS 386/388(MH +，100％)； C20H20ClN3O3＋0.9H2O的元素分析计算值：C，59.75；H， 5.47；N，10.45。 实测值：C，61.05；H，5.79；N，10.08。

实施例68a (S)-2-氨基-3-(4-羟基苯基)-N，N-二甲基丙酰胺盐 酸盐

在0℃下，将(S)-[1-二甲基氨基甲酰基-2-(羟基苯基) 乙基]氨基甲酸叔丁酯(5.7g，18.5mmol)溶解在4M HCl-二 噁烷(7ml)中。25℃搅拌混合物3小时，浓缩并用乙醚研制剩 余物。产量：5.23g；HPLC(60/40)3.32分钟(98％)。

实施例68b (S)-[1-二甲基氨基甲酰基-2-(4-羟基苯基)乙基]氨基甲 酸叔丁酯

根据方法A(反应温度0-25℃，反应溶剂二氯甲烷/DMF12∶1， 反应时间60小时)，偶合二甲胺盐酸盐(79mmol)和BOC-L- 酪氨酸(66mmol)，用硅胶色谱纯化产物，用10％、20％、30 ％、50％和70％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱。产量20.6g，产率102 ％；HPLC(60/40)3.21分钟(96％)

实施例69

      5-氯-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-甲氧基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A，偶合(2S)-氨基-N-甲氧基-3-苯基丙酰胺 盐酸盐(1.02mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1.02mmol)。 用乙醚研制剩余物得到亮黄色固体。产量160mg，产率36％； mp 210-213℃(分解)；PBMS 372/374(MH+，100％)； C19H18ClN3O3＋1.75H2O的元素分析计算值：C，56.58；H， 5.37；N，10.42。 实测值：C，56.88；H，5.09；N，10.03。

实施例69a

  (2S)-氨基-N-甲氧基-3-苯基丙酰胺盐酸盐

在0℃，将[(1S)-(甲氧基氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨 基甲酸叔丁酯(200mg，0.68mmol)溶解在4M HCl-二噁烷中， 25℃下搅拌混合物。半小时后，浓缩混合物，用乙醚研制剩余物。

实施例69b [(1S)-(甲氧基氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁酯

根据方法A，偶合甲氧胺盐酸盐(83.5mmol)和Boc-L -苯丙氨酸(20mmol)，硅胶色谱纯化产物，用1∶1和2∶1 乙酸乙酯/己烷洗脱，然后用乙醚研制。产量：1.80g，产率：31 ％。

实施例70

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸

((1R)-甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合(R)-2-氨基-N -甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐(0.84mmol)和5-氯-1H- 吲哚-2-羧酸(0.84mmol)。用二氯甲烷研制粗产物，然后再 用乙醚研制，干燥。产量236lmg，产率79％；HPLC(60/40) 4.63分钟(97％)；PBMS 356/358(MH+，100％)； C19H18ClN3O2＋0.25H2O的元素分析计算值：C，63.33；H， 5.18；N，11.66。 实测值：C，63.37；H，5.50；N，12.06。

实施例70a

  (R)-2-氨基-N-甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐

在0℃，将(R)-(1-甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)氨 基甲酸叔丁酯(722mg，2.6mmol)溶解在4M HCl-二噁烷 (10ml)中，25℃搅拌混合物1小时，浓缩并用乙醚研制剩余物。 产量：517mg，产率：93％。

实施例70b (R)-(1-甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁酯

根据方法A(反应温度0-25℃，反应时间144小时，先用 酸洗，再用碱洗)，偶合甲基胺盐酸盐(3.1mmol)和Boc-D- 苯丙氨酸(2.8mmol)，得到使用时无需进一步纯化的产物。产 量：760mg，产率：96％。

实施例71

     5，6-二氯-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃，反应时间96小时)，偶合 (S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐 (0.06mmol)和5，6-二氯-1H-2-羧酸(0.06mmol)。用 1∶1乙醚-己烷研制粗产物并干燥。产量24mg，产率96％； HPLC(60/40)8.05分钟(97％)；PBMS 405/407(MH+， 100％)； C20H19Cl2N3O2＋0.25H2O的元素分析计算值：C，58.76；H， 4.81；N，10.28。 实测值：C，58.95；H，4.89；N，9.90。

实施例71a

(S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐

在0℃下，将(1-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)氨基 甲酸叔丁酯(8.6g，29mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(110ml)中， 25℃搅拌混合物1小时。浓缩混合物并用乙醚研制固体。产量： 6.2g，产率：92％；PBMS 193(MH+，100％)。

实施例71b

          5，6-二氯-1H-2-羧酸

将锌粉(3.52g，54mmol)慢慢加入到3，4-二氯-5-硝基苯 基丙酮酸(1.5g，5.4mmol)的乙酸(15ml)热溶液中。几分钟 后即发生剧烈反应(放热)。所得溶液加热到80℃，反应完成 (TLC)。过滤混合物，用乙酸清洗过滤的固体，浓缩滤液。剩 余物溶解在2N NaOH中，用乙醚(3×)、二氯甲烷(2×)清 洗，用6N HCl酸化至pH为1，用乙酸乙酯萃取。干燥萃取液并 浓缩得到亮褐色固体(458mg，34％)：HPLC(60/40)5.31(93 ％)。

实施例71c

       3，4-二氯-5-硝基苯基丙酮酸

在3-15℃下，将无水乙醇(25ml)加入到搅拌着的钾金属 (2.67mg，68mmol)的乙醚(100ml)混合物中。在3℃下， 用草酸二乙酯(10.0g，62mmol)溶液处理所得溶液5-10分钟 内；在3℃搅拌所得溶液30分钟，25℃搅拌18小时。过滤混合 物，用乙醚清洗所得固体并干燥(13.7g)。将该物质(12.7g) 溶解在400ml热水中，冷却溶液并用乙醚萃取。用浓HCl酸化所 得水相至pH为2，分离乙醚层，干燥并浓缩得到7.5g固体，再用 己烷研制得到黄色固体标题物质(7.01g，41％)。

实施例72

      5-溴-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合(S)-2-氨基- N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐(1.0mmol)和5-溴- 1H-吲哚-2-羧酸(1.0mmol)，用1∶1乙醚/己烷研制所得 泡沫状物并干燥。产量：374mg，产率：90％；HPLC(60/40)； 6.17分钟(98％)；mp 199-201℃；PBMS：414/416(MH+，100％)； C20H20BrN3O2的元素分析计算值：C，57.98；H，4.82；N，10.14； 实测值：C，58.07；H，5.12；N，10.08。

实施例73

     5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合(S)-2-氨基- N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐(1.0mmol)和5-甲基 -1H-吲哚-2-羧酸(1.0mmol)，用1∶1乙醚/己烷研制 粗产物并干燥。产量：302mg，产率：87％；HPLC(60/40)：5.46 分钟(99％)；mp 198.5-200℃；PBMS 350(MH+，100 ％)； C21H23N3O2的元素分析计算值：C，72.18；H，6.63；N，12.04。 实测值：C，72.14；H，6.90；N，12.11。

实施例74

     5-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃，反应时间60小时)，偶合 (S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐 (1.0mmol)和5-甲氧基-1H-吲哚-2-羧酸(1.0mmol)， 用乙醚研制所得泡沫状物。产量：329mg，产率：90％； HPLC(60/40)：4.27分钟(99％)；PBMS：366(MH+，100 ％)； C21H23N3O3＋0.125H2O的元素分析计算值：C，68.60；H，6.37； N，11.43。 实测值：C，68.50；H，6.34；N，11.45。

实施例75

     5-氟-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃，反应时间60小时)，偶合 (S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐 (1.0mmol)和5-氟-1H-吲哚-2-羧酸(1.0mmol)，用 乙醚研制所得固体。产量：320mg，产率：91％；HPLC(60/40) 4.74分钟(100％)；mp 229.5-232℃；PBMS 354(MH+， 100％)； C20H20FN3O2的元素分析计算值：C，67.97；H，5.70；N，11.89； 实测值：C，67.88；H，5.74；N，11.71。

实施例76

     5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合(S)-2-氨基- N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐(0.16mmol)和5-氰基 -1H-吲哚-2-羧酸(0.16mmol)，用硅胶色谱纯化产物， 用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脱。产量：38mg，产率：66％； HPLC(60/40)4.08分钟(97％)；PBMS 361(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ12.1(br，1H)，9.04(d，1H，J＝8.1Hz)，8.27(s，1H)，7.52(m， 2H)，7.43(m，1H)，7.33(m，2H)，7.25(m，2H)，7.18(m，1H)，5.10(m，1H)，3.03(m，2H)， 3.00(s，3H)，2.83(s，3H). C21H20N4O2＋0.5H2O的元素分析计算值：C，68.28；H，5.73； N，15.17。 实测值：C，68.51；H，5.66；N，14.85。

实施例76a

        5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸

将5-氟基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(1.71g，8.0mmol) 加入到乙醇(10ml)和KOH(2g)的溶液中，回流加热所得混 合物1小时。加水溶解沉淀物，加入6N HCl调节pH至1。在冰 浴中冷却混合物，过滤，用冷水清洗所得无色固体并干燥 (1.51g)。部分(1.4g)悬浮在热乙酸(40ml)中，冷却得到 固体，过滤，用冷乙酸乙酯清洗并干燥。产量：980mg，70％； HPLC(60/40)3.09分钟(97％)。

实施例76b

       5-氰基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯

将锌粉(57.8g，887mmol)以维持回流的速度加入到3-氰 基-硝基苯基丙酮酸乙酯(23.2g，88mmol)的乙酸(225ml)和 水(225ml，小心！剧烈的放热反应)热悬浮液中，反应维持回流 半小时。过滤混合物，用热乙酸(150ml)清洗过滤的盐，滤液冷 却过夜得到晶体；过滤，用1∶1乙酸-水、水清洗，干燥(10.11g， 53％)。浓缩滤液，剩余物溶解在乙酸乙酯中，用饱和碳酸氢钠水 溶液、盐水清洗所得溶液，干燥并浓缩得到第二批产物(5.05g)。 大部分产物用于下列的转换反应中。

实施例76c

         3-氰基-5-硝基苯基丙酮酸乙酯

在0℃下，将乙氧化钠的乙醇(2.2g，400mmol钠金属的400ml 乙醇)溶液加入到蒸馏的草酸二乙酯(120g，821mmol)和3-甲 基-4-硝基苄腈(32g，197mmol)的混合物中。在40℃加热所 得红色溶液18小时。用水(600ml)稀释冷却的混合物，并用浓 HCl酸化至pH为2.1。通过过滤13℃时的混合物收集生成的沉 淀，干燥，用硅胶色谱纯化，用15％、30％和50％的丙酮-己烷 洗脱，得到橙色固体(23.6g，31％)，该固体无需纯化。为表征 鉴定，用乙酸乙酯重结晶样品。

实施例77

          1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合(S)-2-氨基- N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐(1.0mmol)和1H-吲哚 -2-羧酸(1.0mmol)。用己烷研制所得固体，再用乙醚研制。 产量：272mg，81％；HPLC(70/30)3.49分钟(99％)；mp 199-200℃；PBMS 366(MH+，100％)； C20H21N3O2的元素分析计算值：C，71.62；H，6.31；N，12.53。 实测值：C，71.45；H，6.39；N，12.50。

实施例78

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基- 2-((3S，4S)-二羟基吡啶烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

根据方法A(反应时间170小时)，偶合(3S，4S)-2-氨基 -1-(3，4-二羟基吡咯烷-1-基)-3-苯基丙-1-酮盐酸盐 (0.94mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1.03mmol)， 用硅胶柱色谱纯化粗产物，乙酸乙酯洗脱。产量：150mg，37％； HPLC(60/40)3.08分钟(96％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.73(s，1H)，8.90(d，1H，J＝8.5Hz)，7.72(d，1H，J＝1.5Hz)， 7.39(d，1H，J＝8.7Hz)，7.30(m，2H)，7.30-7.1(m，5H)，5.22(m，1H)，5.13(m，1H)， 4.91(m，1H)，3.97(m，1H)，3.91(m，1H)，3.60(m，2H)，3.5-3.2(m，2H)3.00(m，2H). C22H22ClN3O4的元素分析计算值：C，61.75；H，5.18；N，9.82。 实测值：C，61.65；H，5.45；N，9.17。

实施例78a (3S，4S)-2-氨基-1-(3，4-二羟基吡咯烷-1-基)-3-苯基 丙-1-酮盐酸盐

在25℃、3小时内，将(3S，4S)-[1-苄基-2-(3，4-二 羟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(360mg， 1.00mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(4ml)中。浓缩混合物，用乙醚 研制所得黄色固体并干燥。产量：304mg，产率103％。

实施例78b [1-苄基-2-(3，4-二羟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]氨 基甲酸叔丁酯

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合BOC-L-苯丙氨酸 (2.2mmol)和(3S，4S)-二羟基吡咯烷(US专利463475，实施例 1C，206mg，2.0mmol)，得到无需进一步纯化的无色固体。产量： 431mg，产率：61％。

实施例79

    5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-

2-((3RS)-羟基哌啶烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

根据方法A(溶剂5∶2二氯甲烷-二甲基甲酰胺)，偶合(2S) -氨基-1-((3RS)-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙-1-酮盐 酸盐(570mg，2.0mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (429mg，2.2mmol)，用1∶1乙醚-己烷研制粗产物。用硅胶柱 色谱纯化所得固体，用3∶2和2∶1乙酸乙酯/己烷洗脱，再用1∶ 1乙醚/己烷研制。产量：430mg，51％；HPLC(60/40)3.45分钟 (95％)； C23H24ClN3O3＋0.125C6H14的元素分析计算值：C，65.32； H，5.94；N，9.62。 实测值：C，65.01；H，6.19；N，9.22。

实施例79a (2S)-氨基-1-((3RS)-羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙-1- 酮盐酸盐

在25℃、3小时内，将[(1S)-苄基-2-((3RS)-羟基 哌啶-1-基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(7.13g，20mmol) 溶解在4M HCl-二噁烷(40ml)中。浓缩混合物，用乙醚搅拌所得油 状物72小时。过滤所得悬浮液，用乙醚清洗固体并干燥。产量： 5.64g，产率99％。

实施例79b [(1S)-苄基-2-((3RS)-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基] 氨基甲酸叔丁酯

根据方法A，偶合BOC-L-苯丙氨酸(8.17g，30.8mmol)和 3-羟基哌啶盐酸盐(4.24mg，30.8mmol)，得到无需进一步纯 化的油状标题化合物。产量：7.79g，产率：73％。

实施例80

     5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-

苄基-2-氧代-2-(3-氧代哌嗪-1-基)乙基]酰胺

根据方法A，偶合4-((2S)-氨基-3-苯基丙酰)哌嗪-2- 酮盐酸盐(140mg，0.5mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (98mg，0.5mmol)，用硅胶拄色谱纯化所得粗产物，用乙酸乙酯 和2％乙醇的乙酸乙酯溶液洗脱，再用乙醚研制。产量：71mg， 33％；HPLC(60/40)3.53分钟(100％)；PBMS 425/427 (MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.78(br，0.5H)，11.76(br，0.5H)，9.03(m，0.5H)，9.02(m，0.5H)， 8.06(m，0.5H)，8.04(m，0.5H)，7.73(d，1H，J＝2Hz)，7.38(d，1H，J＝8.7Hz)，7.32 (m，2H)，7.20(m，2H)，7.2-7.1(m，2H)，5.15(m，0.5H)，5.05(m，0.5H)，4.20(d，0.5H， J＝17Hz)，4.08(d，0.5H，J＝17Hz)，3.85(d，0.5H，J＝17Hz)，3.9(m，0.5H)，3.6(m， 2H)，3.2-2.9(m，4H).

实施例80a 4-((2S)-氨基-3-苯基丙酰)哌嗪-2-酮盐酸盐

在25℃、半小时内，将[(1S)-苄基-2-氧代-2-(3- 氧代哌嗪-1-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.2mmol)溶 解在4M HCl-二噁烷(10ml)中。浓缩混合物，用二氯甲烷共蒸发剩 余物，用乙醚研制并干燥。产量：340mg，产率103％。

实施例80b [(1S)-苄基-2-氧代-2-(3-氧代哌嗪-1-基)乙基)氨基甲 酸叔丁酯

根据方法A(反应溶剂2∶1二氯甲烷/二甲基甲酰胺，酸洗 后用1N NaOH清洗)，偶合BOC-L-苯丙氨酸(530mg，2mmol) 和哌嗪-2-酮(J.Am.Chem.Soc.，62 1202(1940)，200mg， 2mmol)，得到使用时无需进一步纯化的产物。产量：404mg， 产率：58％。

实施例81

    5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 ((1S)-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代乙基)酰胺

根据方法A(酸洗后用1N NaOH清洗)，偶合(2S)-氨基- 1-吗啉-4-基丙-1-酮盐酸盐(195mg，1.0mmol)和5-氯-1H- 吲哚-2-羧酸(195mg，1.0mmol)，得到粗产物，用乙醚研制 并干燥。产量：150mg，45％；HPLC(60/40)3.61分钟(100 ％)；PBMS336/338(MH+，100％)； C16H18ClN3O3的元素分析计算值：C，57.23；H，5.40；N，12.51。 实测值：C，57.01；H，5.49；N，12.24。

实施例81a

      (2S)-氨基-1-吗啉-4-基丙-1-酮盐酸盐

在25℃、1.25小时内，将((1S)-甲基-2-吗啉-4-基-2 -氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.88g，15mmol)溶解在4M HCl- 二噁烷(20ml)中。浓缩混合物，用乙醚研制所得剩余物并干燥。产 量：2.51g，产率86％。

实施例81b ((1S)-甲基-2-吗啉-4-基-2-氧代乙基)氨基甲酸叔丁酯

根据方法A(酸洗后用1N NaOH清洗)，偶合BOC-L-丙氨 酸(3.50mg，20mmol)和吗啉(1.74g，20mmol)，得到无需进 一步纯化的无色油状物。产量：3.94g，产率：76％。

实施例82

      5-氯-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A，偶合(2S)-氨基-N-甲基-3-苯基丙酰胺盐 酸盐(214mg，1.0mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (195mg，1.0mmol)，得到粗产物，用乙醚研制并干燥。产量： 160mg，45％；HPLC(60/40)4.60分钟(100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.70(br，1H)，8.73(d，1H，J＝8.5Hz)，8.08(q，1H，J＝4.8 Hz)，7.72(d，1H，J＝1.9Hz)，7.39(d，1H，J＝8.8Hz)，7.32(m，2H)，7.25-7.10(m， 5H)，4.68(m，1H)，3.10(dd，AB的A，1H，J＝4.2，13Hz)，2.96(dd，1H，J＝10.7，13 Hz)，2.62(d，3H，J＝4.6Hz).

实施例82a

   (2S)-氨基-N-甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐

在25℃、2小时内，将((1S)-甲基氨基甲酰基-2-苯基乙 基)氨基甲酸叔丁酯(2.35g，8.45mmol)溶解在4M HCl-二噁 烷(20ml)中。浓缩混合物，用乙醚研制所得剩余物并干燥。产量： 170g，产率94％。

实施例82b

((1S)-甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁酯

根据方法A(酸洗后用1N NaOH清洗)，偶合BOC-L-苯丙 氨酸(2.65g，10mmol)和甲胺盐酸盐(675mg，10mmol)，得 到无需进一步纯化的无色固体标题化合物。产量：2.41g，产率： 87％；HPLC(60/40)3.83分钟(100％)。

实施例83

     5-氯-1H-吲哚-2-羧酸

[(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰基)乙基]酰胺

根据方法A(酸洗后用1N NaOH清洗)，偶合(2S)-氨基- N-甲氧基-N-甲基丙酰胺盐酸盐(169mg，1.0mmol)和5- 氯-1H-吲哚-2-羧酸(195mg，1.0mmol)，得到产物 (290mg，94％)。HPLC(60/40)4.03分钟(94％)；PBMS 310/312(MH+，100％)； C14H16ClN3O3的元素分析计算值：C，54.29；H，5.21；N，13.57。 实测值：C，54.17；H，5.26；N，13.31。

实施例83a

(2S)-氨基-N-甲氧基-N-甲基丙酰胺盐酸盐

在25℃、0.75小时内，将[(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰基) 乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.55g，15.3mmol)溶解在4M HCl-二噁 烷(20ml)中。浓缩混合物，用乙醚和二氯甲烷共蒸发剩余物并干 燥。产量：2.2g(86％)。

实施例83b

[(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰基)乙基]氨基甲酸叔丁酯

根据步骤A(酸洗后用1N NaOH清洗)，偶合L-BOC-丙氨 酸(3.50mg，20mmol)和O，N-二甲基羟胺盐酸盐(1.94g， 20mmol)，得到无需进一步纯化的无色固体。产量：3.71g(80 ％)。

实施例84

    5-溴-1H-吲哚-2-羧酸

((1S)-氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(反应混合物用乙酸乙酯和2N NaOH稀释)，偶 合L-苯基丙氨酰胺盐酸盐(835mg，4.17mmol)和5-溴-1H -吲哚-2-羧酸(1.0g，4.17mmol)。过滤所得悬浮液，用乙酸 乙酯、2N NaOH、2N HCl、乙醚清洗收集的固体并干燥。产量： 890mg；PBMS 386/388(MH+，100％)； C18H16BrN3O2的元素分析计算值：C，55.97；H，4.18；N，10.88。 实测值：C，55.69；H，4.48；N，10.48。

实施例85

     5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-

   (甲氧基甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基)酰胺

根据方法A(0-25℃，先酸洗，再碱洗)，偶合(2S)-氨 基-N-甲氧基-N-甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐 (317mg，1.3mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (253mg，1.3mmol)，用硅胶柱色谱纯化粗产物，用30％和40 ％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱。用异丙醚研制得到的泡沫状物，得到 灰白色固体(356mg，71％)：HPLC(60/40)8.28分钟(98 ％)； C20H20ClN3O3的元素分析计算值：C，62.26；H，5.22；N，10.89。 实测值：C，62.22；H，5.60；N，10.73。

实施例85a (2S)-氨基-N-甲氧基-N-甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐

在0℃，将[(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基] 氨基甲酸叔丁酯(2.97g，9.6mmol)溶解在4M HCl-二噁烷(36ml) 中。在25℃下搅拌所得混合物1小时，浓缩并用乙醚研制剩余物 并干燥。产量：2.27g(96％)。

实施例85b [(1S)-(甲氧基甲基氨基甲酰基)-2-苯基乙基]氨基甲酸叔丁 酯

根据方法A(0-25℃，酸洗后用碱清洗)，偶合BOC-L- 苯丙氨酸(4.0g，15.1mmol)和N，O-二甲基羟胺盐酸盐(3.82g， 15.1mmol)，得到无需进一步纯化的无色油状物(3.22g，69％)。

实施例86

(2RS)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-

       2-甲基-3-苯基丙酸甲酯

根据方法A(2∶1二氯甲烷/二甲基甲酰胺溶剂)，偶合外 消旋的2-氨基-甲基-3-苯基丙酸甲酯(200mg，0.87mmol) 和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(170mg，0.87mmol)，用硅胶 柱色谱纯化粗产物，用10％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱。产量： 286mg，89％；HPLC(60/40)9.63分钟(85％)；TSPMS 371/373 (MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.31(s，1H)，7.57(d，1H，J＝＜1Hz)，7.37(d，1H，J＝8.8Hz)，7.20 (m，4H)，7.04(m，2H)，6.84(s，1H)，6.66(s，1H)，3.81(s，3H)，3.67(AB的A，1H，J＝ 13.5Hz)，3.28(AB的B，1H，J＝13.5Hz)，1.80(s，3H).

实施例87 (2RS)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-

    2-甲基-3-苯基丙酸

在25℃，将2N LiOH(0.10ml，0.50mmol)水溶液加 入到(2RS)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-2- 甲基-3-苯基丙酸甲酯(132mg，0.36mmol)的四氢呋喃 (8ml)溶液中。搅拌所得溶液1小时，浓缩并将剩余物溶解 在乙酸乙酯和水(15ml)中。在0℃用2N HCl调节pH至1。 分离有机相，用水、盐水清洗，干燥得到使用时无需进一步纯 化的泡沫状物(129mg，102％)：HPLC(60/40)4.42 分钟(99％)；TSPMS 357/359(MH+，100％)； 1H NMR(CDCl3)δ9.88(s，1H)，7.57(s，1H)，7.35(d，1H，J＝8.8Hz)，7.3-7.2(m，5H)， 7.16(m，2H)，6.75(m，1H)，6.67(m，1H)，3.57(AB的A，1H，J＝13.7Hz)，3.42(AB的 B，1H，J＝13.7Hz)，1.80(s，3H).

C19H17ClN2O3＋0.3H2O的元素分析计算值：C，63.00；H，4.90；

N，7.73。

实测值：C，63.38；H，5.31；N，7.42。

实施例88

5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基- 2-氧代-2-(1-氧代-1-硫代吗啉-4-基)乙基]酰胺

在25℃，将m-氯过氧苯甲酸(50％80mg，0.23mmol)加 入到5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-苄基-2-氧代 -2-硫代吗啉-4-基乙基)酰胺(100mg，0.23mmol)的二氯甲 烷(2ml)溶液中。1小时后，用乙酸乙酯稀释混合物，用饱和碳 酸氢钠水溶液和10％硫代硫酸钠水溶液的50/50混合物清洗3次， 用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水清洗1次，干燥。用硅胶柱色谱纯化 粗产物，用0.5-8％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物。 产率：76％；HPLC(60/40)3.97分钟(97％)；mp 230-234℃； TSPMS 444/446(MH+，100％)； C22H22ClN3O3S＋0.5H2O的元素分析值：C，58.34；H，5.12； N，9.28。 实测值：C，58.41；H，5.37；N，8.90。

实施例89

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-

(1，1-二氧代-1-硫代吗啉-4-基)-2-氧代乙基]酰胺

在25℃，将m-氯过氧苯甲酸(50％202mg，0.58mmol) 加入到5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-苄基-2-氧 代-2-硫代吗啉-4-基乙基)酰胺(100mg，0.23mmol)的二氯 甲烷(2ml)溶液中。1小时后，用乙酸乙酯稀释混合物，用饱和 碳酸氢钠水溶液和10％硫代硫酸钠水溶液的50/50混合物清洗3 次，用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水清洗1次，干燥。用硅胶柱色谱 纯化粗产物，用30％、40％和50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱， 得到标题化合物。产率：60％；HPLC(60/40)5.69分钟(98％)； PBMS 460/462(MH+，100％)； C22H22ClN3O4S＋0.4H2O的元素分析计算值：C，56.56；H，4.92； N，8.99。 实测值：C，56.77；H，5.15；N，8.60。

实施例90

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-   2-氧代-2-(1-氧代-1-噻唑烷-3-基)乙基]酰胺

在25℃，将m-氯过氧苯甲酸(50％167mg，0.48mmol) 加入到5-氯-1H-吲哚-2-羧酸((1S)-苄基-2-氧 代-2-噻唑烷-3-基乙基)酰胺(200mg，0.48mmol)的二氯甲 烷(4ml)溶液中。半小时后，用乙酸乙酯稀释混合物，用饱和碳 酸氢钠水溶液和10％硫代硫酸钠水溶液的50/50混合物清洗3次， 用饱和碳酸氢钠水溶液、盐水清洗1次，干燥。用硅胶柱色谱纯化 粗产物，用1-8％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱，乙醚研制得到标题 化合物。产量：151mg(73％)；HPLC(60/40)3.64分钟(98％)； PBMS 430/432(MH+，100％)； C21H20ClN3O3S＋0.6H2O的元素分析计算值：C，57.23；H，4.85； N，9.53。 实测值：C，57.00；H，4.85；N，9.25。

实施例91

5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-

   (3-肟基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

在25℃，将羟胺盐酸盐(60mg，0.82mmol)和碳酸钾 (136mg，0.98mmol)加入到5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 [(1S)-苄基-2-氧代-2-(3-氧代吡咯烷-1-基)乙基] 酰胺的乙醇(5ml)和水(1ml)溶液中。48小时后，浓缩反应 混合物，剩余物溶解在乙酸乙酯中。用水清洗所得溶液2次，用盐 水清洗1次，在Na2SO4上干燥并浓缩。用硅胶色谱纯化，用2.5 ％、5％和10％乙醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到顺式/反式肟异构 体两种物质。

实施例91(i)

对于低极性异构体： 产量：48mg(14％)；HPLC(60/40)4.69分钟(97％)；mp 216-220℃ (在210℃时变黑)；PBMS 425/427(MH+，100％)。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(br，1H)，10.87(s，0.5H)，10.86(s，0.5H)，9.02 (m，1H)， 7.72(d，1H，J＝2.0Hz)，7.4-7.1(m，8H)，4.95(m，0.5H)，4.85(m，0.5H)，4.40(d，0.5H， J＝15Hz)，4.0(m，1.5H)，3.9(m，0.5H)，3.61(m，1H)，3.5(m，0.5H)，3.10(m，2H)，2.8- 2.5(m，2H)； C22H21ClN4O3的元素分析计算值：C，62.19；H，4.98；N，13.19。 实测值：C，61.82；H，5.07；N，12.95。

实施例91(ii)

对于高极性异构体： 产量：69mg(20％)；HPLC(60/40)6.78分钟(＞99％)；mp 223-224 ℃(分解，焦油)；PBMS 425/427(MH+，100％)。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.74(br，1H)，10.87(s，1H)，10.84(s，1H)，9.05(d，0.5H，J＝ 8.1Hz)，8.99(d，1H，J＝8.0Hz)，7.73(d，1H，J＝2Hz)，7.4-7.1(m，8H)，4.97(m， 1H)，4.85(m，1H)，4.47(d，0.5H，J＝17Hz)，3.95(m，1.5H)，3.87(m，0.5H)，3.65-3.4 (m，1.5H)，3.10(m，2H)，2.7-2.5(m，2H). C22H21ClN4O3的元素分析计算值：C，62.19；H，4.98；N，13.19。 实测值：C，61.85；H，5.17；N，13.16。

实施例92 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-氧代-

     2-哌啶-1-基乙基)酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合哌啶盐酸盐 (0.34mmol)和2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基] -3-苯基丙酸(0.30mmol)。用硅胶柱色谱纯化粗产物，用20 ％、30％、40％、50％、75％和100％乙酸乙酯的己烷溶液 洗脱，得到部分分离物。纯的级分置于沉淀池中得到31mg(25 ％)标题物质：HPLC(60/40)9.38分钟(94％)；PBMS 410/412 (MH+，100％)； C213H24N3O2Cl＋0.5H2O的元素分析计算值：C，65.94；H，6.02； N，10.03。 实测值：C，65.70；H，6.19；N，9.66。

实施例93

  5-氯-1H-吲哚-2-羧酸氨基甲酰基甲基酰胺

在25℃，将[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]乙酸甲 酯(100mg，0.40mmol)加入到氨的甲醇(约3ml)饱和溶液中。 声波震动悬浮液1小时，浓缩所得溶液。用乙醚/己烷研制剩余物 并干燥。产量：77mg，77％；HPLC(60/40)2.78分钟(98％)； PBMS 252/254(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.82(br，1H)，8.80(t，1H)，7.71(d，1H，J＝约1Hz)，7.43(d， 1H，J＝7-8Hz)，7.42(br，1H)，7.18(dd，1H，J＝7-8，约2Hz)，7.14(s，1H)，7.08 (br，1H)，3.82(m，2H). C11H10ClN3O2＋0.125H2O的元素分析计算值：C，52.03；H，4.07； N，16.55。 实测值：C，52.05；H，4.08；N，16.63。

实施例94

1-{(2S)-[(5-溴-1H-吲哚-2-羰基)氨基]

     -3-苯基丙酰}吡咯烷-(2S)-羧酸

在0℃，将三氟乙酸加入到1-{(2S)-[(5-溴-1H- 吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酰}吡咯烷-(2S)-羧酸 叔丁酯(345mg，0.64mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中。25 ℃1小时后，浓缩反应混合物，用乙醚研制并干燥得到黄色固体。 产量：273mg，88％；HPLC(70/30)4.75分钟(98％)；TSPMS 484/486(MH+，100％)； C23H22BrN3O4＋0.25H2O的元素分析计算值：C，56.51；H，4.64； N，8.60。 实测值：C，56.28；H，4.78；N，8.26。

实施例94a 1-{(2S)-[(5-溴-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯

   基丙酰}吡咯烷-(2S)-羧酸叔丁酯

根据方法A(反应时间72小时)，偶合L-苯丙氨酸-L-脯 氨酸叔丁酯(333mg，1.0mmol)和5-溴-1H-吲哚-2- 羧酸。硅胶柱色谱纯化产物，用15％、20％和30％乙酸乙酯洗 脱，得到浅黄色泡沫状物。产量：428mg(79％)；HPLC (70/30)5.84分钟(81％)。

实施例95 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-氧代-2-(1RS)-氧代

     -1-噻唑烷-3-基乙基]酰胺

在25℃，将m-氯过氧苯甲酸(50％426mg，1.2mmol)加 入到5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2-氧代-2-噻唑烷-3-基 乙基)酰胺(400mg，1.2mmol)的二氯甲烷(8ml)溶液中。 1小时后，用乙酸乙酯(大约80ml)稀释混合物，用饱和碳酸氢 钠水溶液和10％硫代硫酸钠水溶液的1∶1混合物、饱和碳酸氢 钠水溶液和盐水清洗3次。过滤所得悬浮液，用水清洗过滤的固体 并干燥得到晶体状固体。HPLC(60/40)2.52分钟(98.5％)；TSPMS 340/342(MH+，70％)，357(100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.82(br，1H)，8.84(m，1H)，7.73(d，1H，J＝2.0Hz)，7.43(d， 1H，J＝8.7Hz)，7.19(dd，1H，J＝2.0，8.7Hz)，7.18(s，1H)，4.92(dd，0.5H，J＝12.1 Hz)，4.71(dd，0.5H，J＝2.2，13Hz)，4.47(d，1H，J＝12.1Hz)，4.4-3.9(m，4.5H)，3.3 (m，0.5H)，3.13(m，1H)，3.0(m，0.5H). C14H14ClN3O3S＋0.8H2O的元素分析计算值：C，47.47；H，4.44； N，11.86。 实测值：C，47.46；H，4.07；N，11.83。

实施例96

1-{(2S)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]

-3-苯基丙酰}-(4R)-羟基吡咯烷-(2S)-羧酸

在25℃，将过量的2M LiOH水溶液加入到1-{(2S)-[(5 -氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酰}-(4R) -羟基吡咯烷-(2S)-羧酸苄基酯(215mg，0.40mmol)的 四氢呋喃溶液中。2小时后，用乙酸乙酯和冰稀释混合物，用6N HCl酸化混合物至pH1-2。用乙酸乙酯萃取酸相3次，混合有 机相并干燥。用乙醚研制剩余物，干燥得到无色固体(190mg， 106％)：HPLC(60/40)3.43分钟(94％)；TSPMS 456/458 (MH+，100％)； C23H22ClN3O5＋0.5C4H8O2的元素分析计算值：C，60.06；H，5.24； N，8.40。 实测值：C，60.27；H，5.33；N，8.13。

实施例97

(S)-2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]

    -3-(1H-吲哚-3-基)丙酸甲酯

根据方法A(0-25℃，反应溶剂为二甲基甲酰胺)，偶合 L-色氨酸甲酯盐酸盐(1.05mmol)和5-氯-1H-吲哚-2- 羧酸(1.0mmol)。硅胶柱色谱纯化产物，用10％、20％、30 ％、40％、50％和60％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到黄色泡沫状物。 产率：79％；HPLC(60/40)7.43分钟(96％)； 1H NMR(CDCl3)δ11.78(br，1H)，10.85(br，1H)，8.93(d，1H，J＝7.7Hz)，7.73(d，1H， J＝1.9Hz)，7.57(d，1H，J＝7.7Hz)，7.41(d，1H，J＝8.7Hz)，7.32(d，1H，J＝ 8.0Hz)，7.22(m，2H)，7.18(dd，1H，J＝2.1，8.8Hz)，7.06(m，1H)，6.99(m，1H)，4.74 (m，1H)，3.65(s，3H)，3.35-3.2(m，2H).

实施例98

(±)-3-{[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)

     氨基]乙酰}噻唑烷-2-羧酸甲酯 根据方法A(1∶1二氯甲烷-二甲基甲酰胺溶剂)，偶合(±) -噻唑烷-2-羧酸甲酯盐酸盐(1.02mmol)和[(5-氯-1H -吲哚-2-羰基)氨基]乙酸(1.02mmol)。用1∶1乙醚-己 烷研制粗产物得到亮黄色固体。产率：79％；HPLC(60/40)4.47 分钟(95％)；TSPMS 382/384(MH+，100％)。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.82(s，1H)，8.85(t，1H，J＝7Hz)，7.73(d，1H，J＝2Hz)，7.43 (d，1H，J＝8.8Hz)，7.18(dd，1H，J＝8.8，2Hz)，7.17(s，1H)，5.44(s，1H)，4.25(m， 1H)，4.1(m，1H)，3.95(m，1H)，3.34(s，3H)，3.3(m，2H). C16H16ClN3O4S的元素分析计算值：C，50.33；H，4.22；N，11.00。 实测值：C，50.56；H，4.46；N，10.89。

实施例99

(±)-3-{[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)

      氨基]乙酰}噻唑烷-2-羧酸

在25℃，用1N NaOH(0.5ml)水溶液处理3-{[(5-氯 -1H-吲哚-2-羰基)氨基]乙酰}噻唑烷-2-羧酸甲酯 (196mg，0.5mmol)的甲醇(10ml)溶液。3小时后，再加入 1N NaOH(0.25ml)。25℃搅拌混合物过夜，浓缩，用乙酸乙 酯(30ml)和1N NaOH(5ml)搅拌剩余物，用6N HCl水溶液酸化 所得混合物至pH为1.8。分离水相，用乙酸乙酯萃取。混合有机 相，干燥并浓缩得到固体，用1∶1乙醚-己烷研制，干燥。产量： 186mg，99％；HPLC(60/40)3.13分钟(98％)；TSPMS 368/370 (MH+，70％)，339(100％)。 1H NMR(DMSO-d6)δ11.80(s，1H)，8.84(br，1H)，7.23(s，1H)，7.44(d，1H，J＝8.8 Hz)，7.18(dd，1H)，7.17(s，1H)，4.32(s，1H)，4.25(m，2H)，4.0(m，2H)，3.3(m，2H).

实施例99a

(±)-噻唑烷-2-羧酸甲酯

将(±)-噻唑烷-2-羧酸(1.58g，11.9mmol)和氯代三 甲基硅烷(5.1g，47mmol)的甲醇(22ml)混合物回流加热5 小时，冷却，浓缩得到固体(2.19g，100％)。

实施例100 2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酸S

           -叔丁酯

方法B

向5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.50g，2.6mmol)、苯 丙氨酸叔丁酯盐酸盐(0.66g，2.6mmol)、三乙胺(0.36ml， 2.6mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.16g，1.3mmol)的二氯甲 烷(20ml)溶液中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基 碳化二亚胺(0.73g，3.8mmol)。室温搅拌混合物过夜，用氯仿 稀释，用2N HCl、水和盐水清洗，在硫酸镁上干燥并浓缩。用快 速色谱纯化(30％丙酮的己烷溶液)产物，得到浅黄色泡沫状物 (0.86g，85％)。 元素分析计算：C，66.25；H，5.81；N，7.03； 实测值：C，66.57；H，6.11；N，6.86。

下述实施例(101至122)是通过与方法B类似的方法制备 的。

实施例101 2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酸R -甲酯

由5-氟-1H-吲哚-2-羧酸和D-苯丙氨酸甲酯制备。 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.22(m，2H)，3.80(s，3H)，5.10(m，1H)，6.62(d，6Hz， 1H)，6.75(d，2Hz，1H)，7.05(dt，2Hz，8Hz，1H)，7.10-7.15(m，2H)，7.25-7.40(m，4H)， 7.73(d，2.1Hz，1H)，9.50(br，1H).

实施例102 2-[(5，7-二氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酸 R-甲酯

由5，7-二氯-1H-吲哚-2-羧酸和D-苯丙氨酸甲酯制 备。 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.25(m，2H)，3.80/3.95(s，3H)，5.10(m，1H)，6.62(d，6 Hz，1H)，6.69(d，2Hz，1H)，7.10-7.15(m，2H)，7.25-7.35(m，3H)，7.50-7.56(s，1H)， 9.35(br，1H).

实施例102a

5，7-二氯-1H-吲哚-2-羧酸 A.2-氧代丙酸乙酯2，4-二氯苯腙

将2，4-二氯苯肼(1.0g，4.7mmol)、丙酮酸乙酯 (0.53ml，4.7mmol)、三乙胺(0.65ml，4.7mmol)和乙醇 (5ml)的混合物回流加热过夜。蒸发溶剂，剩余物溶解在氯仿中。 用水和盐水清洗溶液，在硫酸镁上干燥，浓缩，剩下油状物(1.1g， 98％)。 B.5，7-二氯-1H-吲哚-2-羧酸乙酯

将2-氧代丙酸乙酯2，4-二氯苯腙(1.1g，4.6mmol)和 无水氯化锌(10g，74mmol)的冰醋酸(12ml)溶液回流加热 半小时。反应混合物注入水中，用乙醚萃取2次。用水和盐水清洗 混合的有机相，在硫酸镁上干燥，浓缩。用快速色谱纯化(30％ 乙酸乙酯的己烷溶液)产物，得到油状物(0.80g，67％)。 C.5，7-二氯-1H-吲哚-2-羧酸

将5，7-二氯-1H-吲哚-2-羧酸乙酯(0.80g， 3.1mmol)的1N NaOH(40ml)和甲醇(50ml)溶液回流加热 3小时。真空除去甲醇，用1N HCl酸化水相剩余物，用氯仿萃取2 次。用水和盐水清洗混合的有机相，在硫酸镁上干燥并浓缩得到固 体(0.58g，76％)。

下列吲哚羧酸是通过相同的顺序制备的：由3-氯-4-氟苯 肼制备4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸和6-氯-5-氟 -1H-吲哚-2-羧酸(以混合物形式)。由2，4-二氟苯肼制 备5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸。

实施例103 2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酸(±) -乙酯

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和DL-苯丙氨酸乙酯制备。 mp 146-147℃。 元素分析计算值：C，64.61；H，5.42；N，7.54； 实测值：C，64.73，H，5.26，N，7.57。

实施例104 S-3-溴-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-二甲基氨基甲

       酰基-2-苯基乙基)酰胺

由3-溴-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基- N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺制备。 元素分析计算值：C，53.53；H，4.27；N，9.36； 实测值：C，53.51；H，4.46；N，9.38。

实施例104a

3-溴-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸

向5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(2.0g，10.2mmol)的乙 酸(24ml)溶液中加入溴(0.53ml，10.2mmol)的乙酸(16ml) 溶液。20分钟后，将混合物注入到水中，用氯仿萃取2次。用水 (2次)和盐水清洗混合的萃取液，在硫酸镁上干燥并浓缩。得到 固体产物(2.5g，89％)。

实施例104b

(S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐 A.(S)-(1-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔丁 酯

向叔-Boc-苯丙氨酸(10g，38mmol)、二甲胺盐酸盐 (3.4g，41mmol)、三乙胺(5.8ml，42mmol)和羟基苯并三 唑(6.6g，49mmol)的二氯甲烷(300ml)溶液中加入1-(3 -二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(9.4g，49mmol)。 搅拌混合物过夜，用2N HCl骤冷并浓缩。剩余物溶解在乙酸乙酯 中，用水和盐水清洗此溶液，在硫酸镁上干燥并浓缩。剩余物在氯 仿中研制，过滤固体并浓缩滤液得到油状物(11g，100％)。 B.(S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐

将(S)-(1-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)氨基甲酸叔 丁酯(11.0g，38mmol)溶解在乙酸乙酯(125ml)中，将HCl吹入溶液10分钟。室温搅拌溶液1小时，然后浓缩。剩余物在乙 醚中研制，过滤固体并高真空干燥(8.6g，100％)。

实施例105 S-5-氯-4-硝基-1H-吲哚-2-羧酸( 1-二甲基氨基

     甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

由4-硝基-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基 -N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺制备。 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.75(s，3H)，2.97(s，3H)，3.20(m，2H)，5.30(m，1H)，7.07 (d，2Hz，1H)，7.24-7.32(m，5H)，7.40(d，7Hz，1H)，8.12(br d，7Hz，1H)，9.85(br， 1H).

实施例105a

     4-硝基-5-1H-吲哚-2-羧酸 A.  2-[(4-氯-3-硝基苯基)亚肼基]丙酸乙酯

在0℃，向亚硝酸钠(2.17g，31mmol)的水(60ml)溶 液和浓HCl(12ml)中加入4-氯-3-硝基苯胺(5.0g， 29mmol)。5分钟后，加入甲基乙酰乙酸乙酯(4.5ml，29mmol) 的水(60ml)溶液、乙醇(30ml)和50％氢氧化钾(10ml)， 搅拌反应混合物过夜。收集沉淀(7.0g，91％)。 B.  5-氯-4-硝基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯

将2-[(4-氯-3-硝基苯基)亚肼基]丙酸乙酯(2.0g， 6.7mmol)和多磷酸(7g)的混合物加热到90-110℃2小时。 冷却混合物，注入到冰/水混合物中，收集固体。用快速色谱纯化 (1％甲醇的氯仿溶液)得到标题化合物(0.58g，32％)和5- 氯-6-硝基-1H-吲哚-2-羧酸盐(0.31g，17％)。 C.  4-硝基-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸

如5，7-二氯-1H-吲哚-2-羧酸的制备中描述的一样， 水解5-氯-4-硝基-1H-吲哚-2-羧酸乙酯制备标题化合 物。

实施例106 S-7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸(1-二甲基氨基甲酰基-2 -苯基乙基)酰胺

由7-硝基-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基-N，N- 二甲基-3-苯基苯丙酰胺制备。 1H NMRδ2.8(s，3H)，3.0(s，3H)，3.1-3.3(m，2H)，5.35(q，7Hz，1H)，6.95(s，1H)，7.15 -7.3(m，6H)，7.9(d，8Hz，1H)，8.2(d，8Hz，1H)，10.3(br，1H).

实施例107 2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丁酸(±) -乙酯

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和DL-β-甲基苯丙氨酸 甲酯制备。 mp 135-136℃。 元素分析计算值：C，64.78；H，5.17；N，7.56； 实测值：C，64.76；H，5.26；N，7.64。

实施例108 (±)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(2-氟苄基)-2-氧

    代-2-噻唑烷-3-基乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-3-(2 -氟苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 216-217℃。 元素分析计算值：C，58.40，H，4.43；N，9.73； 实测值：C，58.45；H，4.53；N，9.71。

实施例108a (±)-2-氨基-3-(2-氟苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮盐

               酸盐 A.  (±)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(2-氟苯基)丙酸

向DL-3-氟苯丙氨酸(1.0g，5.5mmol)和三乙胺 (1.14ml，8.2mmol)的二氯甲烷(20ml)混合物中加入碳酸 氢二叔丁酯(1.4g，6.55mmol)。室温搅拌混合物过夜，然后注 入到水中，用1N HCl酸化，用氯仿萃取。用水和盐水清洗混合的 萃取液，在硫酸镁上干燥并浓缩。用快速色谱纯化(氨仿/甲醇/乙 酸，89∶10∶1)产物，得到固体(1.28g，83％，mp 118-119 ℃)。 B.  (±)-[1-(2-氟苄基)-2-氧代-2-噻唑烷-3-基乙基] 氨基甲酸叔丁酯

向2-叔丁氧基羰基氨基-3-(2-氟苯基)丙酸(0.50g， 1.77mmol)、噻唑烷(0.15ml，1.94mmol)和4-二甲基氨基 吡啶(0.21g，1.77mmol)的二氯甲烷(15ml)的混合物中加入 EDC(0.44g，2.31mmol)。室温搅拌反应混合物过夜，用氯仿 稀释，用2N HCl、水和盐水清洗，在硫酸镁上干燥。用快速色谱 纯化(30％丙酮的己烷溶液)产物，得到无色固体(0.39g， 62％，mp 133-134℃)。 C.  (±)-2-氨基-3-(2-氟苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1- 酮盐酸盐

将HCl吹入[1-(2-氟苄基)-2-氧代-2-噻唑烷-3- 基乙基]氨基甲酸叔丁酯(0.39g，1.1mmol)的乙酸乙酯 (15ml)溶液中。浓缩溶液，剩余物在乙醚中研制，过滤固体并 干燥(0.27g，84％，mp 217-2l8℃)。

下述胺是以相同顺序的类似方法制备的： 由DL-2-氯苯丙氨酸制备(±)-2-氨基-3-(2-氯-苯 基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮 由DL-3-氰基苯丙氨酸制备(±)-2-氨基-3-(3-氰基苯 基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮 由DL-3-氯苯丙氨酸制备(±)-2-氨基-3-(3-氯苯基) -1-噻唑烷-3-基丙-1-酮 由DL-3-三氟甲基苯丙氨酸制备(±)-2-氨基-3-(3-三 氟甲基苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮 由L-4-甲氧基苯丙氨酸制备(S)-2-氨基-1-(4-羟基 哌啶-1-基)-3-(4-甲氧基苯基)丙-1-酮

实施例109 (±)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(2-氯苄基)-2-氧

       代-2-噻唑烷-3-基乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-3-(2 -氯苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 214-216℃。 元素分析计算值：C，56.26；H，4.58；N，9.37。 实测值：C，56.27；H，4.54；N，9.36。

实施例110 (±)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-(3-氰基苯基)-1-

       (噻唑烷-3-羰基)乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-3-(3 -氰基苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 183-184℃。 元素分析计算值：C，60.20；H，4.36；N，12.77。 实测值：C，60.11；H，4.84；N，12.43。

实施例111 (±)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(3-氯苄基)-2-氧

       代-2-噻唑烷-3-基乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-3-(3 -氯苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 188-190℃。 元素分析计算值：C，56.26；H，4.27；N，9.37； 实测值：C，56.38；H，5.04；N，9.04。

实施例112 (±)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-氧代-2-噻唑烷-3-基-

      1-(3-三氟甲基苄基)乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-3-(3 -三氟甲基苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 205-207℃。 元素分析计算值：C，54.83；H，3.97；N，8.72。 实测值：C，54.44，H，4.14；N，8.88。

实施例113 S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(4-甲氧基苄基)-2

    -氧代-2-噻唑烷-3-基乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基-3-(4 -甲氧基苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 元素分析计算值：C，59.52；H，5.00；N，9.47； 实测值：C，60.00；H，5.55；N，8.9O； 质谱：m/e 444(M+＋1)。

实施例114 (±)-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(3-氯苄基)-2-(4

     -羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-1-(4 -羟基哌啶-1-基)-3-(3-氯苯基)丙-1-酮制备。 mp 98℃，分解。

实施例115 S-5-氯-4-氟-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-氧 代-2-噻唑烷-3-基乙基)酰胺和S-6-氯-4-氟-1H-吲 哚-2-羧酸(1-苄基-2-氧代-2-噻唑烷-3-基乙基)酰胺

由5-氯-4-氟-1H-吲哚-2-羧酸和6-氯-4-氟 -1H-吲哚-2-羧酸的混合物和S-2-氨基-3-苯基-1 -噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 105-125℃，分解。 元素分析计算值：C，58.40；H，4.43；N，9.73。 实测值：C，58.54；H，4.59；N，9.58。

实施例116 (+)-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]丙酸甲酯

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和DL-丙氨酸甲酯盐酸盐制 备。 mp 199-201℃。 元素分析计算值：C55.63；H，4.67；N，9.98。 实测值：C，55.70；H，4.75；N，10.06。

实施例117 (±)-2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-[4-(4，5

    -二氢-1H-咪唑-2-基)苯基]丙酸甲酯

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-2-氨基-3-[4- (4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)苯基]丙酸甲酯制备。 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ3.1-3.3(m，2H)，3.70(s，3H)，3.95(s，4H)，4.85(m，1H)， 7.15(s，1H)，7.17(d，8Hz，1H)，7.40(d，8Hz，1H)，7.65(d，7Hz，1H)，7.75(s，1H)，7.88 (d，8Hz，1H)，9.10(br d，9Hz，1H)，10.5(s，1H)，11.8(br s，1H).

实施例117a (±)-2-氨基-2-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)苯基] 丙酸甲酯 A.  2-乙酰基氨基-2-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基) 苄基]丙二酸二乙酯

在60℃下，将2-乙酰基氨基-2-[4-(4-甲氧基碳化 亚胺基)苄基]丙二酸二乙酯(G.Wagner等人Pharmazle 1974，29，12)(5.3g，13mmol)和亚乙基二胺(4.8g，80mmol) 的乙醇(100ml)溶液搅拌5小时。冷却后蒸发溶剂，在剩余物中 加入水，过滤固体并溶解在热1N HCl中。冷却后过滤沉淀并干燥 (3.1g)。 B.  (±)-2-氨基-3-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)苯 基]丙酸二盐酸盐

向2-乙酰基氨基-2-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基) 苄基]丙二酸二乙酯(3.0g，7.3mmol)中加入冰醋酸(50ml) 和3N HCl(100ml)。回流加热溶液3小时，冷却，浓缩得到白 色固体，用甲醇/乙醚重结晶(2.0g，mp 270-272℃，分解)。 C.  (±)-2-氨基-2-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)苯 基]丙酸甲酯

将(±)-2-氨基-3-[4-(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基) 苯基]丙酸二盐酸盐(0.50g，1.6mmol)置于亚硫酰氯(1ml) 和甲醇(25ml)中。回流加热混合物30分钟，此时再加入亚硫酰 氯(3ml)和甲醇(75ml)。回流3小时后浓缩溶液，剩余物溶 解在少量甲醇中，加入乙酸乙酯以诱导沉淀。收集固体并干燥 (0.40g，mp 230℃，分解)。

实施例118 (S)-5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-苄基-2-(4-羟

        基哌啶-1-基)-2-氧代乙基)酰胺

由5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸和(S)-2-氨基-1- (羟基哌啶-1-基)-3-苯基丙-1-酮制备。 mp 95-110℃。

实施例119 S-4-氯-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸(1-二甲基氨基甲 酰基-2-苯基乙基)酰胺和S-6-氯-5-氟-1H-吲哚-

2-羧酸(1-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

由5-氯-4-氟-1H-吲哚-2-羧酸和6-氯-4-氟 -1H-吲哚-2-羧酸的混合物和(S)-2-氨基-N，N-二甲基 -3-苯基丙酰胺制备。 mp 200-210℃。 元素分析计算值：C，61.94；H，4.94；；N，10.83。 实测值：C，62.21；H，4.99，N，10.84。

实施例120 (S)-5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2

           -噻唑烷-3-基乙基)酰胺

由5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸和(S)-2-氨基-3- 苯基-1-噻唑烷-3-基)丙-1-酮制备。 mp 175-185℃。 元素分析计算值：C，60.71；H，4.61；N，10.11； 实测值：C，60.79；H，4.66；N，9.93。

实施例121 (S)-5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-苄基-2-(1，1-

  二氧代-1-噻唑烷-3-基)-2-氧代乙基]酰胺

由5，7-二氟-1H-吲哚-2-羧酸和(S)-2-氨基-1- (1，1-二氧代-1-噻唑烷-3-基)-3-苯基丙-1-酮盐酸盐制 备。 mp 95-110℃。 MS 448(MH+)。

实施例122 S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(2-氟苄基)-2-(4

   -羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

方法C

向5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.49g，2.5mmol)、S -2-氨基-3-(2-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶-1-基)丙 -1-酮(0.76g，2.5mmol)、三乙胺(0.35ml，2.5mmol)和羟基 苯并三唑(0.34g，2.5mmol)的二氯甲烷(6ml)溶液中加入1 -(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(0.53g， 2.8mmol)。室温搅拌混合物过夜，用二氯甲烷稀释，用水、1N HCl和饱和碳酸氢钠清洗，在硫酸镁上干燥并浓缩。用快速色谱纯化(氯 仿/甲醇，8∶1)，得到灰白色固体(0.82g，73％)。 mp 120-122℃。

实施例122a (S)-2-氨基-3-(2-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶-1-基)

          丙-1-酮盐酸盐 A.  (S)-2-叔丁氧基羰基氨基-3-(2-氟苯基)-1-噻唑 烷-3-基丙-1-酮

通过类似于方法C的方法，由L-Boc-2-氟苯丙氨酸和4 -羟基哌啶制备。 B.  (S)-2-氨基-3-(2-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶- 1-基)丙-1-酮盐酸盐

根据实施例108a、步骤C中描述的类似方法，将L-叔丁氧基 羰基氨基-3-(2-氟苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮与HCl反应，制备标题化合物。

下述胺是以相同顺序的类似方法制备的： S-2-氨基-3-(4-甲氧基苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1- 酮 S-2-氨基-3-(2-氟苯基)-1-(4-羟基哌啶-1-基) 丙-1-酮 S-2-氨基-1-(4-羟基哌啶-1-基)-3-(4-甲氧基苯 基)丙-1-酮 S-2-氨基-3-(2-氯苯基)-1-(4-羟基哌啶-1-基) 丙-1-酮 S-2-氨基-3-(4-甲氧基苯基)-1-吗啉-4-基丙-1-酮 S-2-氨基-3-(4-甲氧基苯基)-1-(4-乙酰基哌嗪 基)丙-1-酮

通过类似于方法C的方法制备下述实施例(122-138)。

实施例123 (2SR)，(3RS)-2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)

    氨基]-3-羟基-3-苯基丙酸甲酯

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和(±)-苏b-苯基丝氨酸 甲酯制备。 mp 196-197℃。

实施例124 S-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-(4-甲氧基苄基)-2

    -氧代-2-噻唑烷-3-基乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基-3-(4 -甲氧基苯基)-1-噻唑烷-3-基丙-1-酮制备。 mp 90-115℃。 元素分析计算值：C，61.81；H，5.19；N，9.83。 实测值：C，60.94；H，5.33，N，10.01。

实施例125 S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(2-氯苄基)-2-(4

   -羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基-3-(2 -氯苯基)-1-(4-羟基哌啶-1-基)丙-1-酮制备。 mp 127-129℃。

实施例126 S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-(4-甲氧基苄基)-2

       -吗啉-4-基-2-氧代乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基-3-(4 -甲氧基苯基)-1-吗啉-4-基丙-1-酮制备。 mp 95-105℃。 元素分析计算值：C，62.51；H，5.47；N，9.51。 实测值：C，61.82；H，6.05；N，8.97。

实施例127 S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)

-1-(4-甲氧基苄基)-2-氧代乙基]酰胺

由5-氯-1H-吲哚-2-羧酸和S-2-氨基-3-(4 -甲氧基苯基)-1-(4-乙酰基哌嗪基)丙-1-酮制备。 mp 120-135℃。 元素分析计算值：C，62.17；H，5.64；N，11.60； 实测值：C，62.76；H，6.20；N，10.44。

实施例128 S-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-(苯并噻唑-2-基氨基甲酰

      基)-2-苯基乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和2-氨基-1，3-苯并噻唑制备。 mp 139-141℃。

实施例129 S-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-吗啉-4-基- 2-氧代乙基)酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和吗啉制备。 mp 234-236℃。

实施例130 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1S-苄基-2-氧代-2-

(3，3，5RS-三甲基-azepan-1-yl)乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和(±)-3，3，5-三甲基azepane制备。 mp 125-127℃。 元素分析计算值：C，72.14；H，7.18 N，9.35。 实测值：C，72.00；H，7.58；N，9.10。

实施例131 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1S-苄基-2-(3RS-氨基甲

   酰基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和3-氨基甲酰基哌啶制备。 mp 234-236℃。

实施例132 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[2-苯基-1S-(二氢苯并噻喃-

     4RS-基氨基甲酰基)乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和(±)-二氢苯并噻喃-4-基胺制备。 mp 225-226℃。 元素分析计算值：C，68.48；H，5.11；N，8.88； 实测值：C，68.40；H，5.64；N，8.61。

实施例133 S-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-(5-甲基异噁唑-3-基氨

     基甲酰基)-2-苯基乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和5-甲基异噁唑-3-基胺制备。 mp 219-221℃。

实施例134 S-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[2-苯基-1-(4，5，6，7-四

   氢苯并噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和4，5，6，7-四氢苯并噻唑-2-基胺制备。 mp 162-165℃。

实施例135 S-5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-(5-甲基噻唑-2-基氨基

     甲酰基)-2-苯基乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和4-甲基噻唑-2-基胺制备。 mp 211-213℃。

实施例136 S-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸[1-(5-甲基异噁唑-3-基

     氨基甲酰基)-2-苯基乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和5-甲基异噁唑-3-基胺制备。 mp 243-245℃。 元素分析计算值：C，68.64；H，5.51；N，13.93； 实测值：C，68.29；H，5.81；N，14.05。

实施例137 S-5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸[2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)

     -1-苄基-2-氧代乙基]酰胺

由S-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3- 苯基丙酸和1-哌嗪-1-基乙酮制备。 mp 221-223℃。

实施例138 S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-氨基甲酰基-2-苯基

          乙基)酰胺

由5-氯-1H-吲哚羧酸和S-2-氨基-3-苯基丙酰胺 制备。 mp 257-258℃。

实施例139和140 (2RS)-2，3-二氢-1H-吲哚-2-羧酸(R-1-二甲基

      氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

向DL-二氢吲哚-2-羧酸(0.38g，2.3mmol)、(R)-2 -氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙酰胺盐酸盐(0.53g， 2.3mmol)、羟基苯并三唑(0.66g，4.2mmol)和三乙胺 (0.32ml，2.3mmol)的二氯甲烷(5ml)混合物中加入EDC (0.64g，2.7mmol)。搅拌溶液过夜，用二氯甲烷稀释，用水和 盐水清洗，在硫酸镁上干燥并浓缩。通过快速色谱纯化(EtOAc， 然后EtOAc/MeOH，20∶1)分离得到两种异构体产物。

实施例139

低极性异构体(油状物，0.23g，30％)： 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.68(s，3H)，2.87(s，3H)，3.02-3.09(m，3H)，3.55(dd，J ＝10Hz，6Hz，1H)，4.61(m，1H)，5.10(q，J＝8Hz，1H)，6.95(d，J＝8Hz，1H)，7.11- 7.30(m，8H)，8.12(br，1H). MS(Cl，NH3)394(M+＋17).

实施例140

高极性异构体(0.11g，14％)：mp 136-140℃。

实施例141和142 (2RS)-5-氯-2，3-二氢-1H-吲哚-2-羧酸(1-S

  -二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

向S-5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1-二甲基氨基甲酰 基-2-苯基乙基)酰胺(2.60g，7.0mmol)的THF(20ml) 和甲醇(20ml)溶液中分批加入镁(1.75g，73mmol)，加入 速度以反应进行过程中不产生过量的热量为准。反应停止后，浓缩 反应混合物至低体积，将剩余物分配在1N HCl和乙酸乙酯之间， 用水和盐水清洗混合的乙酸乙酯层，在硫酸镁上干燥并浓缩。用快 速色谱纯化(1％甲醇的氯仿溶液)分离得到产物。

实施例141

低极性异构体： 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.61(s，3H)，2.83(s，3H)，3.00-3.02(m，3H)，3.47(dd， J＝9.9Hz，6.4Hz，1H)，4.43(m，1H)，5.10(q，J＝7.5Hz，1H)，6.64(d，J＝8.8Hz， 1H)，7.00(s，1H)7.16-7.29(m，7H)，7.70(br，1H). MS(Cl，NH3)372(M+＋1).

实施例142

高极性异构体：mp 125℃，分解。

实施例143和144 (2RS)-5-氯-2，3-二氢-1H-吲哚-2-羧酸(1R-

  二甲基氯基甲酰基-2-苯基乙基)酰胺

通过与实施例141和142类似的方法，利用R-5-氯-1H -吲哚-2-羧酸(1-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基)酰 胺，制备两种异构体。

实施例143

低极性异构体：mp 122-124℃。

实施例144

高极性异构体： 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.70(s，3H)，2.83(s，3H)，2.77-2.97(m，3H)，3.40(dd，J ＝16.6Hz，10.8Hz，1H)，4.28(m，1H)，4.40(d，J＝5.2Hz，1H)，5.12(q，J＝7.8Hz， 1H)，6.56(d，J＝9.0Hz，1H)，6.96(d，J＝7.8Hz，1H)，6.99(s，1H)7.03-7.07(m，2H)， 7.11-7.18(m，3H)，7.74(d，J＝8.8Hz，1H).

实施例145 3-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1R-二甲基氨基甲酰基-2-苯 基乙基)酰胺

向2，3-二氢-1H-吲哚-2-羧酸(1R-二甲基氨基甲 酰基-2-苯基乙基)酰胺(低极性异构体，0.50g，1.42mmol) 的DMF(7.5ml)溶液中加入N-氯琥珀酰亚胺(0.55g， 1.42mmol)。搅拌过夜后，蒸发溶剂，用快速色谱纯化(己烷/乙 酸乙酯，1∶1)产物。 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.55(s，3H)，2.80(s，3H)，3.05-3.20(m，2H)，5.32(m，1H)， 7.10-7.25(m，6H)，7.30(d，7 Hz，1H)，7.58(d，7 Hz，1H)，8.11(br d，7Hz，1H)，10.20 (br，1H).MS m/e 370(M+＋1).

实施例146 3-氯-1H-吲哚-2-羧酸(1S-二甲基氨基甲酰基-2-苯

           基乙基)酰胺

通过与实施例145类似的方法，由高极性异构体2，3-二氢- 1H-吲哚-2-羧酸(1R-二甲基氨基甲酰基-2-苯基乙基) 酰胺制备标题化合物。 1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.55(s，3H).2.85(s，3H)，3.05-3.20(m，2H)，5.32(m， 1H)，7.10-7.25(m，6H)，7.35(d，7Hz，1H)，7.58(d，7Hz，1H)，8.11(br d，7Hz，1H)， 10.30(br，1H).MS m/e 370(M++1).

实施例147-165的HPLC条件：检测器波长215m，HPLC 保留时间(单位为分钟)来自Waters Novapac C18 3.9×150mm 柱。洗脱液A＝50mM KH2PO3，pH3；洗脱液B＝乙腈；流速 1.5毫升/分钟；梯度为90％A/10％B(5分钟)至40％A/60％B(保 持5分钟)。HPLC保留时间(RT)以分钟计。给出的百分数值 是特定峰的总积分百分数。 通过HPLC，除非另外指明，存在的起始酸的量小于总积分的5 ％。

实施例147 (S)-2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙 酸

向5-氟吲哚-2-羧酸(5.0g，28mmol)和二氯甲烷 (250ml)的溶液中加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳 化二亚胺盐酸盐(5.53g，27.9mmol)、L-苯丙氨酸叔丁酯盐酸 盐(6.54g，27.9mmol)和三乙胺(7.1ml，5.13g，51mmol)。 室温搅拌40小时后，先用等体积水再用等体积1N HCl清洗反应 混合物。用二氯甲烷萃取水相酸，接着顺次用等体积水(2次)和 盐水清洗混合的有机相。(MgSO4)干燥有机溶液，过滤并浓缩 得到2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙 酸S-叔丁酯(2.97g，31％)。然后用二氯甲烷(75ml)稀释 该产物并冷却至0℃。加入三氟乙酸(8ml)，室温搅拌反应2天， 然后回流加热6.5小时。反应在室温过夜后，浓缩溶液至干得到褐 色固体。再将此固体溶解在少量的乙醚和戊烷中，过滤除去颗粒状 物并浓缩得到褐色泡沫状标题化合物(2.65g，定量得率)： mp125-127℃；HPLC RT 5.72；TSPMS离子(预期值)327 (326)； 1H NMR(CDCl3)δ9.0(br s，2H)，7.4-7.2(m，6H)，7.02(dt，J＝2.4，9.1Hz，1H)，6.80 (d，J＝7.7Hz，1 H)，6.75(d，J＝1.6Hz，1H)，5.09(q，J＝7.6Hz，1H)，3.35(dd，J＝ 5.8，7.6Hz，1H)，3.26(dd，J＝5.8，7.6Hz，1H).

实施例148 (S)-2-[(5-甲基-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基 丙酸

用5-甲基吲哚-2-羧酸(3.0g，17mmol)、二氯甲烷 (185ml)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺 盐酸盐(3.28g，17.1mmol)、L-苯丙氨酸叔丁酯盐酸盐 (4.01g，15.6mmol)和三乙胺(4.5ml，3.31g，32.7mmol) 重复上述方法，得到类似的叔丁酯(2.42g，41％)。用二氯甲烷 (60ml)和三氟乙酸(6.6ml)稀释后，回流加热反应3小时， 反应在室温过夜并浓缩。粗产物在乙酸乙酯中淤浆化，过滤除去不 溶物并浓缩(两次)得到褐色泡沫状标题化合物(2.54g，定量得 率)。HPLC RT 5.98；TSPMS离子(预期值)323(322)； 1H NMR(CDCl3)δ9.9(br s，1H)，8.5(br s，2H)，7.38(s，1H)，7.3-7.1(m，6H)，6.77(m， 2H)，5.09(q，J＝7.6Hz，1H)，3.35(dd，J＝5.6，7.6Hz，1H)，3.26(dd，J＝5.6，7.6Hz， 1H)，2.43(s，3H).

实施例149 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸{1-[2-(5-甲氧基-1H-吲

 哚-3-基)乙基氨基甲酰基]-2-苯基乙基}酰胺

向5.0μmol的2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基] -3-苯基丙酸(50μl的0.1mM二甲基甲酰胺溶液)加入1-(3 -二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(50μl的0.11mM DMF溶液，5.5μmol)，接着加入5-甲氧基色胺(50μl的0.11mM DMF溶液，5.5μmol)。搅拌反应3天，然后浓缩至干。粗产物 分配在氯仿(0.5ml)和水(0.25ml)之间，浓缩有机层得到标 题化合物。 TSPMS离子(预期值)499(499)；HPLC RT 6.78(25％)。

对于下述实施例，制备方法与实施例149类似，实施例150- 156使用2-[(5-氟-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3丙酸， 实施例157-163使用2-[(5-甲基-1H-吲哚-2-羰基) -氨基]-3-苯基丙酸。

实施例150 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸{1-[2-(1H-吲哚-3-基)-1

  -甲基乙基氨基甲酰基]-2-苯基乙基}酰胺 TSPMS离子(预期值)482(483)；HPLC RT未知，出现几 个小峰；估计纯度＜10％；％SM(HPLC)未测出(ND)。

实施例151 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-苄基-2-(2-乙基哌啶-1-

        基)-2-氧代乙基]酰胺 TSPMS离子(预期值)420(421)；HPLC RT 6.61(40％)。

实施例152 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸(1-环己基氨基甲酰基-2-苯

             基)酰胺 TSPMS离子(预期值)408(407)；HPLC RT 6.60/7.11(两 个最大峰浓度几乎相等)；估计纯度(25％)。

实施例153 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸{2-苯基-1-[(硫代苯-2-基甲

        基)氨基甲酰基]乙基}酰胺 TSPMS离子(预期值)422(421)；HPLC RT 7.50(50％)。

实施例154 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-苄基-2-(3，4-二氢-1H

    -异喹啉-2-基)-2-氧代乙基]酰胺 TSPMS离子(预期值)442(441)；HPLC RT 6.78(35％)， 5％SM。

实施例155 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-(2-环己烯-1-基乙基氨基甲

        酰基)-2-苯基乙基]酰胺 TSPMS离子(预期值)434(433)；HPLC RT 6.27/6.60(两 个最大峰浓度几乎相等)；估计纯度(35％)，5％SM。

实施例156 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[1-(5-氰基戊基氨基甲酰基)

-2-苯基乙基]酰胺 TSPMS离子(预期值)421(420)；HPLC RT 6.61/7.71(两 个最大峰浓度几乎相等。)(40％)。

实施例157 5-氟-1H-吲哚-2-羧酸[2-苯基-1-(二氢苯并噻喃-4-

       基氨基甲酰基)乙基]酰胺 TSPMS离子(预期值)470(470)。

实施例158 5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(1-环己基氨基甲酰基-2-

           苯基乙基)酰胺 TSPMS离子(预期值)404(404)；HPLC RT 6.21(70％)。

实施例159 5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-吗啉-4-基-2

           -氧代乙基)酰胺 TSPMS离子(预期值)392(391)；HPLC RT 6.86(50％)。

实施例160 5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(1-苄基-2-氧代-2-吡

          咯烷-1-基乙基)酰胺 TSPMS离子(预期值)376(375)；HPLC RT 6.50(40％)。

实施例161 5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸{2-苯基-1-[(硫代苯-2-基甲

        基)氨基甲酰基]乙基}酰胺 TSPMS离子(预期值)418(417)；HPLC RT 7.89(70％)。

实施例162 5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸[1-(5-氰基戊基氨基甲酰基)

          -2-苯基乙基]酰胺 TSPMS离子(预期值)417(417)；HPLC RT 6.49/6.88(两 个最大峰浓度几乎相等)；(40％)。

实施例163 5-甲基-1H-吲哚-2-羧酸(1-环戊基氨基甲酰基-2-

           苯基乙基)酰胺 TSPMS离子(预期值)390(389)；HPLC RT 6.96(55％)。

实施例164 {2-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙酰氨

            基}乙酸甲酯

向5.0mmol的5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(50ml的0.1M 乙腈溶液)中加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二 亚胺盐酸盐(50ml的0.10M乙腈溶液，5.0mmol)、1-羟基苯 并三唑(50ml的0.10M乙腈溶液，5.0mmol)，再加入(2-氨 基-3-苯基丙酰氨基)乙酸甲酯(50ml的0.10M乙腈溶液， 5.0mmol)。80℃搅拌反应过夜，然后浓缩至干，得到标题化合 物。 HPLC RT 8.15(65％)。

实施例165 2-(S)-[(5-氯-1H-吲哚-2-羰基)氨基]-3-苯基丙

            酸苄基酯

通过与实施例164类似的方法制备标题化合物，只是使用L- 苯丙氨酸苄基酯替代(2-氨基-3-苯基丙酰氨基)乙酸甲酯。 HPLC RT 8.13(40％)。

实施例166 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3-羟基

   氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

根据方法A(反应溶剂为4∶1二氯甲烷-二甲基甲酰胺)，偶 合2-氨基-1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-3-苯基丙-1- 酮盐酸盐(1.18mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸 (1.18mmol)，用硅胶色谱纯化产物，用25％、50％、75％和 100％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到无色泡沫状标题物质(104mg， 22％)。低极性产物的混合物(180mg)也被分离出。标题物质： HPLC(60/40)4.18分钟(97％)；TSPMS 398/400(MH +，100％)。

实施例166a (2S)-氨基-1-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-3-苯基丙-1-

               酮盐酸盐

将[(1S)-苄基-2-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代 乙基]氨基甲酸叔丁酯(515mg，1.6mmol)溶解在冷的4N HCl- 二噁烷中，25℃搅拌混合物2小时，浓缩，用乙醚共蒸发剩余物 得到无色固体(415mg，100％)。

实施例167 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3-肟基

   氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

将5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3-氧 代氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺(实施例170的产物， 50mg，0.13mmol)、乙酸钠三水合物(43mg，0.32mmol)和 羟胺盐酸盐(18mg，0.25mmol)的甲醇(2ml)溶液回流加热 8小时并浓缩。剩余物分配在二氯甲烷和饱和NaHCO3水溶液之 间。分离有机层并干燥得到无色固体，用乙醚-己烷研制并干燥(产 量36mg，69％)：HPLC(50/50)6.74分钟(99％)；TSPMS 411/413(MH+，10％)，180(100％)；1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(br，1H)，11.10(s， 0.5H)，11.08(s，0.5H)，8.99(d，1H，J＝9Hz)，7.73(d，1H，J＝2Hz)，7.4-7.1(m， 8H)，5.0(m，1H)，4.8-4.5(m，4H)，3.1(m.2H).

实施例168 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(4-肟基

    哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

在25℃下，将5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1(S)-苄基-2 -氧代-2-(4-氧代哌啶-1-基)乙基]酰胺(406mg， 0.96mmol)、羟胺盐酸盐(80mg，1.15mmol)和碳酸钾 (159mg，1.15mmol)的乙醇(6ml)和水(1ml)混合物搅 拌18小时并浓缩。剩余物溶解在乙酸乙酯中，用水清洗所得溶液 并干燥(411mg，98％)：HPLC(60/40)5.13分钟(97％)； TSPMS 439/441(MH+，100％)； 1H NMR(DMSO-d6)δ11.75(br，1H)，10.45(s，0.5H)，10.44(s，0.5H)，9.00(m，1H)， 7.72(d，1H，J＝2Hz)，7.40(d，1H，J＝8.8Hz)，7.35-7.15(m，7H)，5.17(m，1H)， 3.8-3.5(m，4H)，3.1(m，2H)，2.45(m，2H)，2.25(m，2H).

实施例168a 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-氧代-2-

     (4-氧代哌啶-1-基)乙基]酰胺

在0℃下，将5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2 -(4-羟基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]酰胺(实施例46， 669mg)部分地加入到1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳 化二亚胺盐酸盐(DEC，1.80g，9.4mmol)和二氯乙酸 (307mg，1.5mmol)的无水甲苯(eml)和无水二甲基亚砜(e ml)的混合物中。在0-20℃搅拌混合物2小时，用乙酸乙酯稀 释，所得溶液用1N HCl清洗2次、用饱和NaHCO3水溶液清洗2 次，干燥，浓缩，用硅胶色谱纯化剩余物，用25％、50％和75 ％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到泡沫状物(424mg，64％)。

实施例169 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(1，3-二氢

    异吲哚-2-基)-2-氧代乙基]酰胺

根据方法A，偶合2-氨基-1-(1，3-二氢异吲哚-2-基) -3-苯基丙-1-酮盐酸盐(0.20mmol)和5-氯-1H-吲哚- 2-羧酸(0.20mmol)，用硅胶色谱纯化产物，用5％、10％、 20％和50％乙酸乙酯-己烷洗脱(55mg，62％产率)：HPLC (70/30)6.58分钟(90％)；TSPMS 444/446(MH+，50％)， 180(100％)。 1H NMR(CDCl3)δ9.25(br，1H)，7.60(s，1H)，7.45(m，约1H)，7.3-7.1(m，约11H)， 6.90(5.25(m，1H)，5.0(d，1H，约16Hz)，4.85(d，1H，J＝约16Hz)，4.70(d，1H，J ＝约16Hz)，4.20(d，1H，J＝16Hz).

实施例169a (2S)-氨基-1-(1，3-二氢异吲哚-2-基)-3-苯基丙-1-酮盐酸

                    盐

将[(1S)-苄基-2-(1，3-二氢异吲哚-2-基)-2-氧代乙 基]氨基甲酸叔丁酯(88mg)溶解在冷的4N HCl-二噁烷 (1.5ml)中，在25℃搅拌2小时，浓缩混合物。用乙醚研制剩 余物并干燥(65mg，91％)。TSPMS267(MH+，100％)。

实施例169b [(1S)-苄基-2-(1，3-二氢异吲哚-2-基)-2-氧代乙基]氨

              基甲酸叔丁酯

根据方法A，偶合N-叔-Boc-L-苯丙氨酸(1mmol)和异 二氢吲哚(J.Org.Chem.1988，53，p5382，纯度70-80％， 1mmol)，用硅胶色谱纯化产物，用20％和50％乙酸乙酯-己烷 洗脱，得到琥珀油(88mg，23％)：TSPMS 367(MH+，100％)。

实施例170 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[(1S)-苄基-2-(3-氧代

   氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]酰胺

根据方法A(反应温度0-25℃)，偶合1-((2S)-氨基 -3-苯基丙酰)氮杂环丁烷-3-酮盐酸盐(3.2mmol)和5-氯 -1H-吲哚-2-羧酸(3.2mmol)，用硅胶色谱纯化所得的黄 色泡沫状物，用20％、30％、40％和50％乙酸乙酯-己烷洗脱 得到无色泡沫状标题物质(600mg，47％)：HPLC(60/40) 5.09分钟(98％)；TSP-MS 396(MH+，100％)；1H NMR(CDCl3)δ9.14(br，1H)， 7.62(d，1H，J＝3Hz)，7.4-7.2(m，7H)，7.11(d，1H，J＝8.0Hz)，6.85(m，1H)，4.90 (m，1H)，4.78(m，2H)，4.63(m，1H)，3.65(m，1H)，3.25(dd，1H，AB的A，J＝5.1， 12.9Hz)，3.10(dd，1H，AB的B，J＝10，12.9Hz).

实施例170A 1-((2S)-氨基-3-苯基丙酰)氮杂环丁烷-3-酮盐酸盐

将[(1S)-苄基-2-氧代-2-(3-氧代氮杂环丁烷-1-基) 乙基]氨基甲酸叔丁酯(297mg，0.9mmol)溶解在4N HCl-二噁 烷(3ml)中。25℃搅拌所得溶液2小时，浓缩，在乙醚中研制 剩余物并干燥(196mg，82％)。

实施例170B [(1S)-苄基-2-氧代-2-(3-氧代氮杂环丁烷-1-基)乙基]

              氨基甲酸叔丁酯

将[(1S)-苄基-2-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代 乙基]氨基甲酸叔丁酯(320mg，1mmol)部分地加入到1-(3 -二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(DEC， 575mg，3mmol)和二氯乙酸(192mg，1.5mmol)的无水甲苯 (2ml)和无水二甲基亚砜(2ml)的混合物中。在0-20℃搅 拌混合物1小时，用乙酸乙酯稀释，所得溶液用1N HCl清洗2次、 用饱和NaHCO3水溶液清洗2次，干燥并浓缩得到无色固体 (304mg，96％)。

实施例170C [(1S)-苄基-2-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-2-氧代乙基]

            氨基甲酸叔丁酯

根据方法A，偶合3-羟基氮杂环丁烷盐酸盐(J.Chem，Soc.， Chem.Commun.1968，p93，27mmol)和N-叔-Boc-L-苯丙 氨酸(27mmol)，得到无色泡沫状标题物质(8.15g，93％)。

实施例171 5-氯-1H-苯并咪唑-2-羧酸(1-二甲基氨基甲酰基-2

          -苯基乙基)酰胺

根据方法A，偶合(S)-2-氨基-N，N-二甲基-3-苯基丙 酰胺盐酸盐(2.0mmol)和5-氯-1H-苯并咪唑-2-羧酸 (Crowther等人，J.Chem.Soc.1949，p.1268，2.0mmol)， 用硅胶色谱纯化产物，用1∶1乙酸乙酯-己烷洗脱(235mg， 63％)：HPLC(60/40)4.92分钟(91％)；PBMS 371/373(MH+，100％)；1H NMR(CDCl3) δ11.25(br，0.6H)，10.9(br，0.4H)，8.36(m，1H)，7.78(d，0.4H，J＝7.72(d，0.6H，J ＝8.8Hz)，7.52(d，0.6H，J＝2Hz)，7.41(d，0.4H，J＝8.4Hz)，7.35-7.1(m，6H)，7.35 (m，1H)，3.16(m，2H)，2.90(s，3H)，2.68(s，约2H)，2.67(s，约1H).

实施例172 5-氯-1H-吲哚-2-羧酸[1-苄基-2-氧代-2-( 2-

        氧代噁唑烷-3-基)乙基]酰胺

根据方法A(反应溶剂为3∶1二甲基甲酰胺-二氯甲烷)，偶 合3-((2S)-氨基-3-苯基丙酰)噁唑烷-2-酮盐酸盐 (0.50mmol)和5-氯-1H-吲哚-2-羧酸(0.50mmol)， 产物在2∶1乙醚-己烷中研制并干燥(130mg，63％)：HPLC (60/40) 6.22分钟(95％)；TSPMS 429/431(45％，MH＋NH3)，412/414(30％。MH+)， 325/327(100％)，1H NMR(DMSO-d6)δ11.68(br，1H)，8.92(d，1H，J＝8.5Hz)， 7.75(s，1H)，7.42(m，3H)，7.26(m，3H)，7.1 8(m，2H)，5.83(m，1H)，4.50(m，2H)， 4.0(m，1H)，3.25(m，1H)，2.95(m，1H).

实施例172a

3-((2S)-氨基-3-苯基丙酰)噁唑烷-2-酮盐酸盐

在0℃下，将[(1S)-苄基-2-氧代-2-(2-氧代噁唑烷 -3-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.29g，6.68mmol)溶解在4N HCl- 二噁烷(10ml)中。在25℃，将所得溶液搅拌2小时，在乙醚中 研制剩余物并干燥(1.98g，107％)。

实施例172b [(1S)-苄基-2-氧代-2-(2-氧代噁唑烷-3-基)乙基]氨基

               甲酸叔丁酯

在-78℃下，将N-丁基锂(2.35M己烷溶液，11.5ml)加 入到2-噁唑烷酮(2.04g，23.4mmol)的四氢呋喃(25ml)溶 液中。在-78℃30分钟后，用N-叔-Boc-L-苯丙氨酸N-羟基琥珀 酰亚胺酯(9.31g，25.7mmol)的四氢呋喃(10ml)溶液处理该 溶液，将混合物温热至25℃搅拌过夜。加入水(10ml)，浓缩所 得的混合物，剩余物溶解在乙酸乙酯中，用1N NaOH清洗所得溶 液2次、用水清洗1次、用盐水清洗1次，干燥并浓缩。用硅胶色 谱纯化剩余物，用25％和50％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到无色固 体(3.42g，44％)。

应当理解，本发明不局限在这里描述的特定实施例，在不背离 下述权利要求限定的新概念的精神和范围的情况下，可以进行各种 变化和修正。