一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法
专利汇可以提供一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及一种具有化学 预防 活性的乌贼墨制剂的制备方法，属于功能性产品制备技术领域；制备方法具体包括 研磨 、超声处理、浸泡离心、酶解、离心、提取、浓缩、沉淀、 喷雾干燥 、压片十个步骤；本发明方法操作方便，成本低；制备的产品含有多种活性成分，具有较高的药用价值。，下面是一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于1-3倍体积冰冷PBS溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡48 72小时，同样在4℃条~
件下，8000-10000rpm离心40-60min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，在50-55℃水浴孵育50-60min；
（5）离心：乌贼墨汁酶解后，进行沸水浴处理20-30min，冷却，再于4℃条件下，8000-
10000rpm 离心40-60min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液，4℃条件下静置
20-30min后，8000-10000rpm离心40-60min，取上层黄色清液；重复2-3次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置40-60min后，5000-
8000rpm离心10-15min，取沉淀物；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：将制备的乌贼墨黏多糖加入其它配方混合均匀后压片得到成品。
2.根据权利要求1所述的一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述的PBS溶液为pH值为 7.2，浓度为0.01M。
3.根据权利要求1所述的一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：步骤（2）所述的超声波次数15-20次，每次间隔5-10s，每次处理时间3-5s。
4.根据权利要求1所述的一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：步骤（4）所述的木瓜蛋白酶添加量为乌贼墨汁的0.10-0.20%。
5.根据权利要求1所述的一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：步骤（6）所述的氯仿与正丁醇混合液指二者体积比1:1。
6.根据权利要求1所述的一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：步骤（10）所述的片剂配方为：乌贼墨黏多糖28-32份、枸橼酸0.4-0.5份、淀粉43-48份、滑石粉3.0-3.2份、干淀粉16-20份、淀粉浆0.1-0.3份。
7.根据权利要求1所述的一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法，其特征在于：步骤（10）所述的制片步骤为：制软材、制粒、干燥、整粒、压片。
一种具有化学预防活性的乌贼墨制剂的制备方法
技术领域
背景技术
发明内容
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于1-3倍体积冰冷PBS溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡48 72小时，同样在4℃条~
件下，8000-10000rpm离心40-60min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，在50-55℃水浴孵育50-60min；
（5）离心：乌贼墨汁酶解后，进行沸水浴处理20-30min，冷却，再于4℃条件下，8000-
10000rpm 离心40-60min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液，4℃条件下静置
20-30min后，8000-10000rpm离心40-60min，取上层黄色清液；重复2-3次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置40-60min后，5000-
8000rpm离心10-15min，取沉淀物；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：将制备的乌贼墨黏多糖加入其它配方混合均匀后压片得到成品。
具体实施方式
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于1倍体积冰冷PBS（pH 7.2，0.01M）溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；超声波次数15次，每次间隔5s，每次处理5s；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡48小时，同样在4℃条件下，8000rpm离心60min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，木瓜蛋白酶添加量为乌贼墨汁的0.10%，在50℃水浴孵育60min；
（5）离心：酶解后，进行沸水浴处理20min，冷却，再于4℃条件下，8000rpm 离心60min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液（v/v=1/1），4℃条件下静置20min后，8000rpm离心60min，取上层黄色清液；重复2次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置40min后，5000rpm离心15min，取沉淀；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：按照配方乌贼墨黏多糖28份，枸橼酸0.4份，淀粉43份，滑石粉3.0份，干淀粉
16份，淀粉浆0.1份混合均匀后，经制软材、制粒、干燥、整粒、压片得到成品。
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于3倍体积冰冷PBS（pH 7.2，0.01M）溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；超声波次数20次，每次间隔
10s，每次处理3s；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡72小时，同样在4℃条件下，10000rpm离心40min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，木瓜蛋白酶添加量为乌贼墨汁的0.20%，在55℃水浴孵育50min；
（5）离心：酶解后，进行沸水浴处理20-30min，冷却，再于4℃条件下，10000rpm 离心
40min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液（v/v=1/1），4℃条件下静置30min后，10000rpm离心40min，取上层黄色清液；重复3次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置60min后，8000rpm离心10min，取沉淀；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：按照配方乌贼墨黏多糖32份，枸橼酸0.5份，淀粉48份，滑石粉3.2份，干淀粉
20份，淀粉浆0.3份混合均匀后，经制软材、制粒、干燥、整粒、压片得到成品。
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于2倍体积冰冷PBS（pH 7.2，0.01M）溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；超声波次数18次，每次间隔8s，每次处理4s；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡60小时，同样在4℃条件下，9000rpm离心50min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，木瓜蛋白酶添加量为乌贼墨汁的0.15%，在50℃水浴孵育55min；
（5）离心：酶解后，进行沸水浴处理25min，冷却，再于4℃条件下，9000rpm 离心50min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液（v/v=1/1），4℃条件下静置25min后，9000rpm离心50min，取上层黄色清液；重复3次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置50min后，6000rpm离心10-15min，取沉淀；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：按照配方乌贼墨黏多糖30份，枸橼酸0.5份，淀粉45份，滑石粉3.1份，干淀粉
18份，淀粉浆0.2份混合均匀后，经制软材、制粒、干燥、整粒、压片得到成品。
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于3倍体积冰冷PBS（pH 7.2，0.01M）溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；超声波次数17次，每次间隔6s，每次处理5s；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡50小时，同样在4℃条件下，8500rpm离心55min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，木瓜蛋白酶添加量为乌贼墨汁的0.10%，在50℃水浴孵育60min；
（5）离心：酶解后，进行沸水浴处理22min，冷却，再于4℃条件下，9000rpm 离心45min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液（v/v=1/1），4℃条件下静置22min后，10000rpm离心50min，取上层黄色清液；重复3次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置45min后，7000rpm离心14min，取沉淀；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：按照配方乌贼墨黏多糖29份，枸橼酸0.5份，淀粉47份，滑石粉3.0份，干淀粉
17份，淀粉浆0.2份混合均匀后，经制软材、制粒、干燥、整粒、压片得到成品。
（1）研磨：取新鲜乌贼墨汁，于4℃冻融后，悬于1倍体积冰冷PBS（pH 7.2，0.01M）溶液中，进行研磨；
（2）超声处理：研磨后的乌贼墨汁反复进行超声波处理；超声波次数18次，每次间隔5s，每次处理4s；
（3）浸泡离心：超声处理后的乌贼墨汁在4℃条件下搅拌浸泡66小时，同样在4℃条件下，9500rpm离心45min，取上清；
（4）酶解：加入木瓜蛋白酶进行酶解，木瓜蛋白酶添加量为乌贼墨汁的0.20%，在55℃水浴孵育60min；
（5）离心：酶解后，进行沸水浴处理24min，冷却，再于4℃条件下，9500rpm 离心50min，取上清液；
（6）提取：步骤（5）得到的上清液加入1/4倍体积氯仿与正丁醇混合液（v/v=1/1），4℃条件下静置28min后，10000rpm离心50min，取上层黄色清液；重复2次，合并黄色清液；
（7）浓缩：将合并的黄色清液旋转蒸发浓缩至1/4体积；
（8）沉淀：浓缩后的溶液加入4倍体积的无水乙醇，4℃环境中静置4min后，5000rpm离心
10min，取沉淀；
（9）喷雾干燥：将步骤（8）得到的沉淀物于120℃喷雾干燥，得到粗粉，粉碎过筛，制成细末，即为乌贼墨黏多糖；
（10）压片：按照配方乌贼墨黏多糖28份，枸橼酸0.4份，淀粉44份，滑石粉3.2份，干淀粉
18份，淀粉浆0.3份混合均匀后，经制软材、制粒、干燥、整粒、压片得到成品。
（1）外观形状：结构完整光洁，色泽均匀，见图1。
表3 乌贼墨片剂崩解时间
表4 乌贼墨片剂干燥所需时间
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