本发明涉及具有选择性血清素再摄取抑制活性和5-HT2C拮抗、 部分激动或反向激动活性的一些化合物和化合物的组合物在治疗抑郁 症和其它情感性精神病中的应用。组合的血清素再摄取抑制作用和5- HT2C拮抗、部分激动或反向激动作用可存在于同一化学实体或两个单 独的化学实体中。

                      发明背景

选择性血清素再摄取抑制剂(下文中称为SSRIs)已成为了治疗抑 郁症、一些形式的焦虑症和社交恐怖症的首选药物，因为与经典的三 环类抗抑制药相比，它们是有效的，良好地耐受，并具有良好的安全 性。

然而，对抑郁症的临床研究表明，有大量抑郁症患者对SSRIs不 起作用，最高达30％。在抑郁症治疗中经常被忽视的另一因素是配合 性，这对患者继续接受药物疗法的促动性有相当大的影响。

首先，SSRIs的疗效有延迟。在治疗的最初几周内，有时症状甚 至会加重。其次，性功能障碍是所有SSRIs共有的副作用。在没有解 决这些问题的情况下，在抑郁症和焦虑症的药物疗法中不能取得实际 进展。

为了应对非反应问题，精神病学家有时采用加强策略。加强抗抑 郁药物治疗可通过联合施用情绪稳定剂例如碳酸锂或三碘甲腺原氨酸 或者通过使用电击疗法来实现。

已经在几个实验中评价了联合施用抑制血清素再摄取的化合物与 5-HT1A受体拮抗剂的作用(Innis，R.B.等人Eur.J.Pharmacol.1987， 143，p.1095-204和Gartside，S.E.Br.J.Pharmacol.1995，115，p 1064-1070，Blier，P.等人Trends in Pharmacol.Science 1994，15， 220)。在这些实验中发现，5-HT1A受体拮抗剂消除了开始由血清素再 摄取抑制剂引起的对5-HT神经传递的阻断作用，并因此即时提高了 5-HT传递以及迅速开始治疗作用。

已经提交了涉及5-HT1A受体拮抗剂与血清素再摄取抑制剂的组 合在治疗抑郁症中的应用的几个专利申请(参见例如EP-A2-687 472和 EP-A2-714663)。

增加末端5-HT的另一方法是阻断5-HT1B自身受体。在大鼠中进 行的微透析实验表明，通过西酞普兰增加海马5-HT的作用被GMC 2-29—一种实验5-HT1B受体拮抗剂加强了。

还已经提交了涉及SSRI与5-HT1B拮抗剂或部分激动剂的组合的 几个专利申请(WO 97/28141、WO 96/03400、EP-A-701819和WO 99/13877)。

已经证实了5-HT2C配体可影响大鼠额皮层中多巴胺(DA)和去甲 肾上腺素(NE)的释放。因此，5-HT2C激动剂Ro 60-0175和选择性5-HT2C 拮抗剂SB-242084分别抑制和增加DA与NE的水平，同时没有改变 血清素(5-HT)的水平(Millan，M.J.等人Neuropharmacology 1998， 37，p 953-955)。使用选择性5-HT2B/2C拮抗剂SB-206553观察到了类 似结果(Gobert，A.等人Neuropharmacology 1999，38，p 315-317)。 用选择性激动剂MK-212激活5-HT2C受体抑制了大鼠听神经核中吗 啡引起的DA释放(Willins，D.L.等人Brain Res.1998 781，p 291- 299)。以前的报道证实了利坦色林拮抗了大鼠海马中喹哌嗪引起的NE 释放下降(Done，C.J.等人Br J Pharmacol.1992，107，p 240-245)。 因此，5-HT2C受体似乎影响NE和DA的释放，但是不影响5-HT的 释放。在Milan等人(1998，1999)的研究中，单独注射了5-HT2C配体， 但是发现对5-HT释放没有任何影响。

已知西酞普兰和氟西汀对5-HT2C受体有中间介导的亲和力 (Palvimaki，E.P.Psychopharmacology(Berl.)1996，126，p 234-240)。 此外，据报道长期施用西酞普兰、氟西汀和帕罗西丁导致5-HT2C受 体功能性失敏(Kennett，G.A.等人Neuropharmacology 1994，33，p 1581-1588，Maj J.等人Psychopharmacology(Berl)1996，127，p 73-82，和Quested，D.J.Psychopharmacology(Berl.)1997，133， 305-308)。还已经有人提出，该变化可有助于对抑郁症、焦虑症和OCD (强迫观念与行为障碍)产生疗效。

在最近的临床实验中发现，吲哚洛尔和米安色林增强了氟西汀治 疗抗治疗患者的疗效，并且当与氟西汀联合使用时，米安色林可缩短 抗抑郁作用开始的潜伏期。米安色林在该实验中的作用可通过涉及米 安色林对去甲肾上腺素转换的作用、α2-受体阻断作用及其对5-HT2A/2C 受体的拮抗作用的至少4种不同机制来解释(Maes，M.等人J.Clin. Psychopharmacol，1999，19，2，p 177-182)。

然而，还据报道，在小鼠强迫游泳测试中，事先施用选择性5- HT2A/2C拮抗剂利坦色林(4mg/kg i.p.)或酮舍林(8mg/kg i.p.)增强了丙 咪嗪(mg/kg i.p.)和地昔帕明(16mg/kg i.p.)的作用，而没有增强氟西 汀(16mg/kg i.p.)、西酞普兰(16mg/kg i.p.)或氟伏沙明(8mg/kg i.p.)的 作用(Redrobe，J.P.等人Eur J Pharmacol.1997，325，129-135)。

现在已经发现，血清素再摄取抑制剂与具有5-HT2C拮抗或反向 激动作用的化合物(对5-HT2C受体具有负性效力的化合物)的组合显著 提高了如在微透析实验中测定的末端区域中的5-HT水平。

特别是已经发现，与SSRIs联合使用的酮舍林、利坦色林、RS 102221、((+)-反式-1-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1-二氢茚基)-4-(2-(3-异丙基-2- 咪唑烷酮-1-基)乙基)哌嗪和2，5-二甲基-3-(4-氟苯基)-1-[1-[2-(咪唑烷-2- 酮-1-基)乙基]哌啶-4-基]-1H-吲哚协同作用提高了细胞外血清素水平。 在给人施用时，这意味着在临床上缩短了抗抑郁作用开始所需的时 间，以及加强或增强血清素再摄取抑制剂(SRI)的疗效。

                        本发明

因此本发明提供了：

5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂在制备用于和血清 素再摄取抑制剂联合使用的药物组合物中的应用。

本发明特别涉及5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂 在制备用于增强和/或提供加快开始的血清素再摄取抑制剂的效力的药 物组合物中的应用。

在优选的实施方案中，本发明涉及上述应用，其中血清素再摄取 抑制剂是用于治疗抑郁症，焦虑症，和其它情感性精神病，包括泛化 性焦虑症、恐慌性焦虑症、强迫观念与行为障碍、急性紧张症、创伤 后紧张症或社交焦虑症，饮食障碍例如食欲过盛、厌食和肥胖症，恐 怖症、精神抑郁症、月经前综合征、认知障碍、冲动控制障碍、注意 力不足活动过强病症、药物滥用和对SRI起反应的任何其它病症。

在另一个实施方案中，本发明涉及 a)是血清素再摄取抑制剂和5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分 激动剂的化合物，或 b)是血清素再摄取抑制剂的化合物与是5-HT2C受体拮抗剂、反向激 动剂或部分激动剂的化合物的组合 在制备用于治疗下列病症的药物组合物或药盒中的应用：抑郁症，焦 虑症，和其它情感性精神病，例如泛化性焦虑症、恐慌性焦虑症、强 迫观念与行为障碍、急性紧张症、创伤后紧张症和社交焦虑症，饮食 障碍例如食欲过盛、厌食和肥胖症，恐怖症、精神抑郁症、月经前综 合征、认知障碍、冲动控制障碍、注意力不足活动过强病症、药物滥 用或对血清素再摄取抑制剂起反应的任何其它病症。

在另一实施方案中，本发明涉及药物组合物或药盒，其中包含： a)是血清素再摄取抑制剂、和5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部 分激动剂的化合物，或 b)是血清素再摄取抑制剂的化合物与是5-HT2C受体拮抗剂、反向激 动剂或部分激动剂的另一化合物的组合， 和任选含有的可药用载体或稀释剂。

在另一实施方案中，本发明涉及治疗下列病症的方法：抑郁症， 焦虑症，和其它情感性精神病，例如泛化性焦虑症、恐慌性焦虑症、 强迫观念与行为障碍、急性紧张症、创伤后紧张症和社交焦虑症，饮 食障碍例如食欲过盛、厌食和肥胖症，恐怖症、精神抑郁症、月经前 综合征、认知障碍、冲动控制障碍、注意力不足活动过强病症、药物 滥用或对血清素再摄取抑制剂起反应的任何其它病症，包括给需要治 疗的人施用治疗有效量的 a)是血清素再摄取抑制剂、和5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部 分激动剂的化合物，或 b)是血清素再摄取抑制剂的化合物与是5-HT2C受体拮抗剂、反向激 动剂或部分激动剂的化合物的组合。

在一个特别的实施方案中，依据本发明使用选择性血清素再摄取 抑制剂。

在另一个特别的实施方案中，依据本发明使用对5-HT2C受体有 选择性的化合物。

在另一实施方案中，依据本发明使用是5-HT2C受体拮抗剂、反 向激动剂的化合物。

可使本发明药物组合物或药盒适于同时施用活性组分，或者可使 其适于顺序施用活性组分。

当使药物组合物适于同时施用时，活性组分可包含在同一单位剂 型中。

当使药物组合物或药盒适于顺序施用时，活性组分包含在不连续 的剂型中，这些剂型任选包含在同一容器或包装中。

本发明特别涉及下列组合的应用和包含下列组合的药物组合物或 药盒： 酮舍林与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西丁、 氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀和氯 米帕明的SRI组合， SB 242084与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， SB 206553与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， SB 243213与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， SB 228356与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， 利坦色林与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， 德伦环烷与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， 米氮平与选自西酞普兰、escitalopram、氟伏沙明、达泊西汀、萘发 扎酮、丙咪嗪、非莫西汀和氯米帕明的SRI组合， 米塞林与选自西酞普兰、escitalopram、舍曲林、帕罗西丁、氟伏沙 明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、非莫西汀和氯米帕明的SRI组 合， 舍吲哚与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西丁、 氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀和氯 米帕明的SRI组合， YM 35 992与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗 西丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西 汀和氯米帕明的SRI组合， Ro 60-0795与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗 西丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西 汀和氯米帕明的SRI组合， Org 38457与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， Org 12962与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合， EGIS 8465与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗 西丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西 汀和氯米帕明的SRI组合，和 RS 102221与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗西 丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西汀 和氯米帕明的SRI组合。 (+)-反式-1-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1-二氢茚基)-4-(2-(3-异丙基-2-咪唑烷酮- 1-基)乙基)-哌嗪与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕 罗西丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫 西汀和氯米帕明的SRI组合。 2，5-二甲基-3-(4-氟苯基)-1-[1-[2-(咪唑烷-2-酮-1-基)乙基]-哌啶-4- 基]1H-吲哚与选自西酞普兰、escitalopram、氟西汀、舍曲林、帕罗 西丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、非莫西 汀和氯米帕明的SRI组合。

在另一实施方案中，本发明涉及鉴定可用于治疗下列病症的化合 物的方法：抑郁症，焦虑症，和其它情感性精神病，例如泛化性焦虑 症、恐慌性焦虑症、强迫观念与行为障碍、急性紧张症、创伤后紧张 症和社交焦虑症，饮食障碍例如食欲过盛、厌食和肥胖症，恐怖症、 精神抑郁症、月经前综合征、认知障碍、冲动控制障碍、注意力不足 活动过强病症、药物滥用或对血清素再摄取抑制剂起反应的任何其它 病症，包括以任意顺序 (a)测定测试化合物抑制血清素再摄取的能力，并选择IC50值低于20 nM的化合物； (b)测定测试化合物对5-HT2C受体的亲和力，并选择Ki值低于30nM 的化合物； 然后测定所选的化合物对5-HT2C受体的效力，并选择是该受体的拮 抗剂、反向激动剂的化合物。

本发明还涉及依据该方法鉴定的化合物。

依据本发明，已经发现，与仅施用血清素再摄取抑制剂相比，联 合施用5-HT2C受体拮抗剂或反向激动剂和血清素再摄取抑制剂显著 提高了如在微透析实验中测定的末端区域中的血清素水平。

单独施用RS 102221、(+)-反式-1-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1-二氢茚基)- 4-(2-(3-异丙基-2-咪唑烷酮-1-基)乙基)-哌嗪、2，5-二甲基-3-(4-氟苯基)- 1-[1-[2-(咪唑烷-2-酮-1-基)乙基]-哌啶-4-基]-1H-吲哚和酮舍林不能引起 如在微透析实验中测定的血清素水平的任何提高。

依据本发明，动物实验已经发现，5-HT2C受体拮抗剂或反向激动 剂可使血清素再摄取抑制剂的疗效更快地开始，并增强血清素再摄取 抑制剂的抗焦虑能力。

使用5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂与血清素再 摄取抑制剂的组合可大大地降低治疗抑郁症和其它情感性精神病所需 的血清素再摄取抑制剂的量，并因此可减小由血清素再摄取抑制剂引 起的副作用。特别是，减少量的SRI与5-HT2C受体拮抗剂、反向激 动剂或部分激动剂的组合可减小SSRI引起性功能障碍和睡眠失调的 危险性。

联合施用5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂和血清 素再摄取抑制剂还可用于治疗顽固性抑郁症，即不能通过仅施用血清 素再摄取抑制剂而适当治疗的抑郁症。一般情况下，在其中用SRI治 疗的最初6周内不能使症状减轻40-60％的患者当中，5-HT2C受体 拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂可用作追加治疗来增强对SRIs的 反应。

既是血清素再摄取抑制剂又是5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂 或部分激动剂的化合物可具有与血清素再摄取抑制剂和5-HT2C受体 拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂的组合相同的药理优点，即减小副 作用、迅速开始疗效、和治疗抗治疗患者。

文献中已经描述了很多具有血清素再摄取抑制作用的抗抑郁剂。 主要或部分通过抑制CNS中血清素再摄取来产生疗效的任何药理活 性化合物都可有益用5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂 增强其作用。

下面列出其作用可用5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激 动剂有益地增强的多种血清素再摄取抑制剂：西酞普兰、 escitalopram、氟西汀、R-氟西汀、舍曲林帕罗西丁、氟伏沙明、文 拉法辛、度洛西汀、达泊西汀、萘发扎酮、丙咪嗪、丙咪嗪N-氧化物、 地昔帕明、吡喃茚胺、氮卓尼尔、奈福泮、苯呋苄哌嗪、非唑拉明、 非莫西汀、氯米帕明、氰丙咪嗪、利托西汀、西克拉明、塞罗西汀、 WY 27587、WY 27866、imeldine、伊福西汀、替氟卡宾、维喹啉、 米那普仑、巴嗪普令、YM 922、S 33005、F 98214-TA、OPC 14523、 丙氨苯丙酯、cyanodothepine、曲米帕明、奎纽帕明、度硫平、阿莫 沙平、nitroxazepine、McN 5652、McN 5707、VN 2222、L 792339、 罗克吲哚、YM 35992、Ol 77、Org 6582、Org 6997、Org 6906、阿 米替林、阿米替林N-氧化物、去甲替林、CL 255.663、吡吲哚、茚达 曲林、LY 113.821、LY 214.281、CGP 6085 A、RU 25.591、奈帕咪唑、 diclofensine、曲唑酮、EMD 68.843、BMY 42.569、NS 2389、 sercloremine、nitroquipazine、腺苷蛋氨酸、西布茶明、氟伏草胺。 上述化合物可以以碱或其可药用酸加成盐的形式使用。

其作用可用5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂有益 地增强的其它治疗化合物包括虽然不是血清素再摄取抑制剂、但是能 引起突触裂口中细胞外5-HT水平增加的化合物。一种这样的化合物 是噻萘普汀。

因此，在如本文所述的本发明的每一个方面中，可使用引起细胞 外血清素水平提高的不是SRIs的化合物来代替SRIs。

上面列举的血清素再摄取抑制剂和引起细胞外血清素水平提高的 其它化合物不应理解为限制性的。

根据本发明特别优选的SRIs包括西酞普兰、escitalopram、氟西 汀、舍曲林、帕罗西丁、氟伏沙明、文拉法辛、达泊西汀、萘发扎酮、 丙咪嗪、非莫西汀和氯米帕明。

术语选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)是指对血清素转运蛋白的 抑制作用比对多巴胺和去甲肾上腺素转运蛋白的抑制作用强的一元胺 转运蛋白的抑制剂。根据本发明特别优选的SSRIs是西酞普兰、 escitalopram、氟西汀、氟伏沙明、舍曲林和帕罗西丁。

下面列出可依据本发明使用的多种5-HT2C拮抗剂、部分激动剂 或反向激动剂：酮舍林、利坦色林、RS 102221、SB 242084、SB 206553、 SB 200646A、SB 221284、SB 204741、SB 228357、SB 243213、SB 200646、azamianserine、(+)-反式-1-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1-二氢茚基)- 4-(2-(3-异丙基-2-咪唑烷酮-1-基)乙基)-哌嗪和2，5-二甲基-3(4-氟苯基)- 1-[1-[2-(咪唑烷-2-酮-1-基)乙基]-哌啶-4-基]-1H-吲哚、氟西汀、德伦环 烷、米氮平、米塞林、萘发扎酮、曲唑酮、YM 35992、Ro 60-0759、 Org 38457、Org 12962、EGIS 8465、EGIS-9933、在5-HT2C受体产 生作用的抗精神病药物例如舍吲哚、奥氮平和利哌酮、LY 53857甲 麦角林、哌仑哌隆、spiroperone、氯氮平、达泊西汀、二甲麦角新碱、 舍氮平、Ro 600491、S16924、氰甲丙嗪、SDZ NVI-085。

在优选的实施方案中，依据本发明使用选自下列的5-HT2C受体 配体：酮舍林、SB 242084、SB 206553、SB 243213、SB 228356、利 坦色林、德伦环烷、米氮平、米塞林、舍吲哚、YM 35 992、Ro 60-0795、 Org 38457、Org 12962、EGIS 8465和RS 102221。

某些上面列出的化合物对于5-HT2C受体的Ki值如下表所示：     化合物     Ki(nM)     酮舍林     14     茚达酮     19     Lu 29066     6.9     Lu 27121M     5.1     氟西汀     80     萘发扎酮     33     RS 102221     0.56     利坦色林     0.19     米安色林     1.1

在上表中给出的Ki值是用在实验部分中描述的5-HT2C结合分析 测定的。应当指出，其它测试、改变的测试或由其它工作组进行的测 试可获得与上表给出的数据多少有几分不同的数据。

本文所用术语对5-HT2C受体有选择性是指化合物对5-HT2C受体 的亲和力高于对其它血清素受体的亲和力。

其它5-HT2C受体拮抗剂或反向激动剂描述在例如下列文件中： WO 97/39001，WO 97/37989，WO 97/08167，W096/39382，WO 96/23769，WO 96/11930，WO 95/01976，WO 94/14801，WO 94/04533， Bromidge等人，J.Med.Chem.，2000，43，1123-113和Bges等人 Schizophrenia 1995，Alfred Benzon Symposium 38，pp 361-374。

上文列出的5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂和部分激动剂不可 以理解为限制性的。

在特别的本发明实施方案中，依据本发明使用对5-HT2C受体的 Ki值低于30nM，对血清素转运蛋白的IC50值低于20nM的化合物。

当依据本发明使用组合的血清素再摄取抑制剂与5-HT2C拮抗剂、 反向激动剂或部分激动剂时，化合物优选对多巴胺受体没有亲和力， 即对多巴胺受体的IC50值超过100nM。

本发明活性组分可以以游离碱形式或其可药用酸加成盐的形式使 用，可药用酸加成盐可通过将游离碱与适当的酸反应而获得。本发明 有机酸加成盐的实例是与下列酸形成的盐：马来酸、富马酸、苯甲酸、 抗坏血酸、琥珀酸、草酸、二亚甲基水杨酸、甲磺酸、乙二磺酸、丙 酸、酒石酸、水杨酸、柠檬酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、扁桃酸、肉 桂酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、衣康酸、乙醇酸、对氨 基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、和茶碱乙酸，以及8-卤代茶碱例如8-溴 茶碱。本发明无机酸加成盐的实例是与盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺 酸、磷酸、和硝酸形成的盐。

本文所用的上述术语加成盐还包括活性组分能够形成的溶剂化 物。所述溶剂化物包括在本发明范围内。这样的溶剂化物的实例有例 如水合物、醇化物等。

西酞普兰优选以氢溴酸盐或碱的形式使用，escitalopram优选以 草酸盐的形式使用，氟西汀、舍曲林和帕罗西丁优选以盐酸盐的形式 使用，氟伏沙明优选以马来酸盐的形式使用。

在联合治疗中，5-HT2C拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂的用量 可以为约0.1-约150mg/天、特别是约0.1-约100mg/天、更特别是 约0.5-约50mg/天、甚至更特别是约1-约5mg/天。

血清素再摄取抑制剂，包括上文具体提及的SSRIs在分子量与活 性方面都不同。因此，在联合治疗中血清素再摄取抑制剂的用量取决 于所述血清素再摄取抑制剂的性质。市售SRIs的标准剂量范围是众 所周知的。在一个本发明市售方案中，血清素再摄取抑制剂或引起5- HT细胞外水平提高的化合物以低于单独使用所需的剂量使用。在另 一个实施方案中，血清素再摄取抑制剂或引起5-HT细胞外水平提高 的化合物以标准剂量使用。

为了制备本发明药物组合物，将酸或碱加成盐或碱形式的活性组 分与可药用载体充分混合，根据给药所需的剂型，可药用载体可呈多 种形式。有利起见，这些药物组合物可制成适于经口、经鼻、直肠、 经皮或通过非胃肠道注射施用的单位剂型。例如，在制备口服剂型的 药物组合物时，可使用任何常用的药物介质，例如当剂型是口服液体 制剂如悬浮液、糖浆剂、酏剂和溶液时，可使用水、二醇、油、醇等； 对于粉剂、烷基、胶囊和片剂，可使用固体载体例如淀粉、糖、高龄 土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。由于便于给药，片剂和胶囊是最合 适的口服单位剂型，在这种情况下很明显要使用固体药物载体。对于 非胃肠道施用的组合物，载体通常包含无菌水、至少大部分是无菌水， 虽然可以包括其它组分，例如促进溶解的组分。

为了便于给药和使剂量一致，将上述药物组合物制成单位剂型是 特别有利的。在本说明书和权利要求书中使用的单位剂型是指适于用 作单位剂量的物理不连续单位，每个单位含有经计算能产生所需疗效 的预定量的活性组分和所需的药物载体。单位剂型的实例有片剂(包括 刻痕片剂或包衣片剂)、胶囊、烷基、粉剂小包、纸囊剂、注射溶液或 悬浮液、一茶匙容量的制剂、一餐匙容量的制剂等、和其隔离的复合 形式。

5-HT2C拮抗剂、部分激动剂或反向激动剂可在施用血清素再摄取 抑制剂之前、期间或之后施用，只要5-HT2C拮抗剂、反向激动剂或 部分激动剂给药与血清素再摄取抑制剂给药之间的时间间隔使得活性 组分能协同作用于CNS即可。

当5-HT2C拮抗剂、部分激动剂或反向激动剂与血清素再摄取抑 制剂同时施用时，既含有血清素再摄取抑制剂又含有5-HT2C拮抗剂、 部分激动剂或反向激动剂的组合物是特别适宜的。这样的组合物可如 上所述制得。

同时给药还可以通过施用在两个分隔的单位剂型中的活性组分来 完成。

当顺序施用5-HT2C受体拮抗剂、反向激动剂或部分激动剂时， 药物组合物可由例如药盒构成，其中药盒包括含有5-HT2C拮抗剂、 部分激动剂或反向激动剂的不连续单位剂型和含有血清素再摄取抑制 剂的不连续单位剂型，所有剂型都包含在同一容器或包装例如压泡包 装内。 实验部分 5-HT2C结合

依据下述方法通过测试化合物来测定在5-HT2C的Ki值：将SR- 3T3细胞(ATCC CRL 9651)生长至铺满，然后在TBS(50mM Tris，pH 7.7，125mM NaCl)中破碎。将该细胞悬浮液离心，将离心团重悬在50 mM Tris，HCl，pH 7.7中，并于-80℃贮存。对于实验使用，将冷冻 的细胞离心团融化，并用Ultra Turrax均化10-15秒。将1.5mg细 胞制备物与0.5nM 3H-Mesulergine于37℃培养60分钟。通过经由 Filtermat B滤器快速过滤来终止培养，并在Tricarb闪烁计数器中测 定结合的放射性。 5-HTT抑制

如下面的测试所述测定血清素再摄取抑制的IC50值：将雄性大鼠 (125-225g)斩首处死，切开脑，并转移到0℃的0.9％NaCl中。称重 脑，并在玻璃/塔夫纶均化器内在含有1nM尼阿拉米的40体积的0.32 蔗糖中于0℃均化。将均化物以600g于4℃离心10分钟。将上清液/S1 以20000g于4℃离心55分钟。将上清液/S2弃去，并将离心团重悬 在360体积的改性Krebs Ringer磷酸盐缓冲液，pH 7.4(充氧10分钟) 中。将悬浮液保持在冰上。在Krebs Ringer缓冲液中将组织与3H-5- HT于37℃培养15分钟。将样本经由0.1％PEI浸泡过的Filtermat C 滤器过滤以洗掉溶液中的3H-5-HT。在样本过滤前和过滤后用10μM 5-HT洗涤滤器。在Tricarb闪烁计数器中计数突触小体捕获的放射 性。 测试人5-HT2C受体的PI测定： 方法：在实验当天将细胞接种在96孔平板中，使密度为7×104个细 胞/孔(200 l培养基)。在进行实验前24小时，向细胞中加入含有PT6- 271稳定剂(amersham pharmacia biotech)的4μCi myo-[2-3H]肌醇(每 个孔)。 柱制备：用1mL 1.0M KHCO3将具有SAX Quartenary胺RPN.1908 的Amiprep微型柱活化。通过用1mL水经由柱洗涤2次来除去过量 的KHCO3，向准备加入200μL样本的每个柱中加入0.9mL水。 细胞平板操作：用200μl KRH-缓冲液(KCl(5mM)，NaCl(124mM)， 葡萄糖(8mM)BSA(0.5g/升)，MgSO4.7H2O(1.25mM)，HEPES(25 mM)，KH2PO4(1.25mM)，CaCl2(1.45mM))将细胞洗涤3次。将 细胞在200μl KRH-LiCl-缓冲液(KRH-缓冲液10mM LiCl)中于37℃ 培养30分钟。 1.为了测试激动剂，用激动剂(200μl在KRH-LiCl缓冲液中稀释的 激动剂)代替缓冲液，并在37℃培养10分钟。进入步骤#6。 2.为了测试反向激动剂，用反向激动剂(200μl在KRH-LiCl缓冲液 中稀释的反向激动剂)代替缓冲液，并在37℃培养30分钟。进入步骤 #6。 3.为了测试拮抗剂，用拮抗剂(200μl在KRH-LiCl缓冲液中稀释的 拮抗剂)代替缓冲液，并在37℃培养10分钟。然后向除了用于限定基 底活性的孔之外的每个孔中加入激动剂，并在37℃培养10分钟。 4.将溶液从各个孔中抽吸出来，并加入200μL冷的PCA(4％ HClO4)。 5.在4℃培养15-30分钟以使得细胞释放肌醇磷酸。 6.加入46μL KOH-HEPES缓冲液(1.5mM KOH-60mM HEPES缓 冲液，pH～7.5)，并在4℃培养10分钟。 7.将200μL各个孔的中和的肌醇磷酸加到制备的柱中，并经由柱洗 涤。 8.用1μL水洗涤柱。 9.加入1mL 0.05M KHCO3，并收集在闪烁管中。 -加入4mL闪烁计数液体(得自Packard的Ultima GoldTM闪烁计数 液) 10.在Packard Tri-carb 2100TR液体闪烁分析器(Program 4)上计数5 分钟。总活性-由10nM 5-HT限定。基底活性-由缓冲液限定。

在鉴定可用于治疗对血清素再摄取抑制剂起反应的疾病或病症的 化合物的本发明方法中可使用上述3种方法。然而，也可以使用其它 方法和这些方法的变型。 微透析实验

在实验中使用源自Wistar种的雄性大白鼠(285-320g；Harlan， Zeist，The Netherlands)。将大鼠在塑料笼子(35×35×40 cm)中饲养， 让它们自由摄取食物和水。实验符合赫尔辛基宣告的规定，并得到了 Animal Care Committee of the Faculty of Mathematics and Natural Science of the University of Groningen的批准。

使用下列药物：西酞普兰氢溴酸盐和内标(Lundbeck (Copenhagen，Denmark)友情赠送，感谢Dr.Sanchez)，利坦色林和 酮舍林酒石酸盐(RBI，Natick，USA)。将西酞普兰和酮舍林溶解在盐 水中，将利坦色林溶解在30％solutol/盐水中。酮舍林和西酞普兰皮 下注射(联合给药期间在不同位置注射)，利坦色林腹膜内注射。所有 药物都是以1mL/kg的体积施用。

使用国产I-型探针进行微透析实验，所述探针是用聚丙烯腈/甲基 磺酸钠共聚物渗析纤维制成的(i.d.220μm，o.d.0.31μm，AN 69， Hospal，Italy)。暴露出的膜长度为4mm。在手术前，通过腹膜内注 射400mg/kg水合氯醛(利坦色林实验)或腹膜内注射氯胺酮/赛拉嗪、 并用咪达唑仑作为术前用药(酮舍林实验)将大鼠麻醉。使用盐酸利多 卡因10％(m/v)进行局部麻醉。将大鼠置于趋实体框架(Kopf，USA)上， 将探针插到前侧海马内(坐标：IA：+3.7mm，外侧：+4.8mm，前侧：- 8.0mm，从硬脑脊膜计起，Paxinos and Watson，1982)，并用牙科粘 固粉固定。

在药动学实验中，经由用硅管制成的插管取血，其中该插管是插 到右颈静脉内3.8cm深处。将插管皮下转移到大鼠的尾橹上，并将不 锈钢进口与插管相连。用牙科粘固粉和手术螺钉将进口固定在头部 上。吹入后，用PVP在盐水中的溶液(55％聚乙烯吡咯烷酮溶液，含 有500IE/mL肝素)填充插管以防止血液凝固。 药动学实验：让大鼠复原至少24小时。在注射西酞普兰或酮舍林后 的第0、15、30、60、120、240和360分钟采集血样(0.30mL)。将血 样转移到含有5μL肝素(500IE/mL盐水)的1.5mL eppendorf小瓶 中，混合，并立即转移到冷却的离心机(MSE，England)中，以3,000rpm 离心15分钟。 微透析实验：让大鼠复原至少24小时。用含有147mM NaCl、3.0mM KCl、1.2mM CaCl2和1.2mM MgCl2的人造CSF以1.5μL/分钟的流 速(Harvard装置，South Natick，Ma.，USA)灌注探针。在20μL套 圈中在线采集样本，并且每15分钟自动注射到柱上。 血清素分析：使用具有电化学检测的HPLC分析5-HT。将HPLC泵 (Shimadzu LC-10 AD液相色谱)依次与反相柱(phenomenex hypersil 3： 3μrn，100×2.0mm，C18，Bester，Amstelveen，the Netherlands) 和电化学检测器(Antec Leyden，Leiden，the Netherlands)相连，该电 化学检测器以500mV的电位运转，使用Ag/AgCl作为参照。流动相 由5g/L硫酸二铵、500mg/L乙二胺四乙酸(EDTA)、50mg/L庚烷磺 酸和30μl/L三乙胺，pH 4.65以及4.5％(w/w)甲醇和水组成。流动相 的流速为0.4ml/分钟。检测限为0.5fmol 5-HT/20μL样本(信噪比为 3)。 西酞普兰分析：西酞普兰是依据作了稍许改动的yehaug等人(1982)的 方法测定的。简言之，向150μL血样中加入75μL内标LU 10-202(2 μM)和30μL 0.1N NaOH。通过与3mL乙醚机械振摇3分钟将样本 提取2次。然后将乙醚层转移到10mL蒸发管中，并加入150μL 0.1N HCl。在40℃的水浴中于氮气流下将乙醚蒸发。用0.5mL乙醚将HCl层洗涤一次。将50μL样本注射到柱上。对于经由vacutainer获得5mL 血浆的实验，使用类似方案，但是血样用10mL乙醚提取3次。使用 与荧光检测器(470扫描荧光检测器，Waters，England)联用的HPLC/ 自动注射器(1084B Liquid Chromatograph，Hewlett-Packard)，其中 荧光检测器在240nm的吸收波收、296nm的发射波长、和12nm的 狭缝宽度的设置下运转。使用Supelcosil HPLC柱(5μm，C18，250 ×46mm，Supelco，the Netherlands)于室温下进行分离。流动相由46 ％v/v乙腈、54％v/v磷酸二氢钾缓冲液(4.3g/L)、和30μL/L三乙胺 组成，pH值为3.0。该系统的流速为0.75mL/分钟。该测定的检测限 为8nM(信噪比＝2)。加入已知浓度的西酞普兰的样本提取表明，该 提取方法的回收率为99％。 酮舍林分析：酮舍林是使用液-液提取、然后通过与荧光检测联用的反 相色谱法来测定的。简言之，向150μL血样中加入30μL 0.1N NaOH。 通过与3mL乙醚机械振摇3分钟将样本提取2次。然后将乙醚层转 移到10mL蒸发管中，并加入150μL 0.1N HCl。在40℃的水浴中于 氮气流下将乙醚蒸发。用0.5mL乙醚将HCl层洗涤一次。将50μL 样本注射到柱上。使用与荧光检测器(470扫描荧光检测器，Waters， England)联用的HPLC/自动注射器(1084B Liquid Chromatograph， Hewlett-Packard)，其中荧光检测器在240nm的吸收波长、370nm 的发射波长、和12nm的狭缝宽度的设置下运转。使用Supelcosil HPLC 柱(5μm，C18，250×46mm，Supelco，the Netherlands)于室温下进 行分离。流动相由35％v/v乙腈、65％v/v磷酸二氢钾缓冲液(4.3g/L)、 和30μL/L三乙胺组成，pH值为3.0。该系统的流速为1.0mL/分钟。 该测定的检测限为6nM(信噪比＝2)。加入已知浓度的西酞普兰的样 本提取表明，该提取方法的回收率为93％。 数据表示和统计学：使用差异低于20％的4个连续微透析样本作为对 照，并设定为100％。数据以占对照水平的百分比表示(平均值± SEM)。使用关于窗口的Sigmastat(Jandel Corporation)进行统计学分 析。使用用于比较重复测定的双向ANOVA、然后进行Dunnett′s检 验来比较治疗效果。显著性水平设定为p＜0.05。使用Multifit(版权 Dr.J.H.Proost，Dept.of pharmacokinetics and drug delivery， University of Groningen，the Netherlands)将药动学数据拟合。 结果： 利坦色林联合施用：

腹膜内施用10μmo/kg利坦色林对大鼠前海马中的5-HT水平没 有任何影响。与盐水注射相比，皮下施用10μmol/kg西酞普兰显著提 高了5-HT水平(F(1，131)＝18.8，p＜0.05)。后-hoc分析表明，显著效 果在t＝45-150分钟之间。在皮下注射10μmol/kg西酞普兰之前60 分钟施用的10μmol/kg利坦色林显著增强了西酞普兰的作用(F(1，105) ＝8.90，p＜0.05)。后-hoc分析表明，显著效果在t＝60-t＝150分钟之 间。 酮舍林联合施用： 前海马：皮下施用100μmol/kg酮舍林对前海马中的5-HT水平没有 任何影响。与盐水注射相比，皮下施用10μmol/kg西酞普兰显著提高 了5-HT水平(F(1，143)＝13.5，p＜0.05)。后-hoc分析表明，显著效果 在t＝30-150分钟之间。同时施用10μmol/kg西酞普兰和不同剂量的 酮舍林表明了酮舍林的SSRI引起的5-HT水平增加效果有剂量依赖 性增强。联合施用1nmol/kg酮舍林不能增强西酞普兰的作用(F(1，118) ＝0.574)，而联合施用10和100nmol/kg酮舍林显著增强了西酞普兰 的作用(分别是F(1，117)＝6.95，p＜0.05，F(1，120)＝5.66，p＜0.05)。 对于10nmol/kg酮舍林联合给药，后-hoc分析表明显著效果在t＝45 -150分钟之间，对于100nmol/kg酮舍林联合给药，显著效果在t＝45 -150分钟之间(不包括90和105)。 额前皮层：施用酮舍林对于额前皮层5-HT水平没有任何影响。与盐 水注射相比，皮下施用10μmol/kg西酞普兰显著提高了5-HT水平 (F(1，159)＝9.77，p＜0.05)。后-hoc分析表明显著效果在t＝45-150分 钟之间。联合施用1nmol/kg酮舍林不能增强西酞普兰引起的皮层5- HT水平提高(F(1，117)＝0.2781，p＞0.05)。联合施用10nmol/kg酮舍 林短暂地增强了西酞普兰的作用。然而，该作用没有达到显著性 (F(1，127)＝1.047，p＞0.05)。同时施用西酞普兰和100nmol/kg酮舍 林显著地增强了西酞普兰的作用(F(1，127)＝2.90，p＜0.05)。然而，后 -hoc分析没有显示在不同时间点当中有任何显著差异。 药动学实验： 西酞普兰给药

皮下施用10μmol/kg西酞普兰后，初始血浆水平约为0.7μM， 之后水平下降，明显的半衰期约为2小时。 酮舍林给药

皮下施用100nmol/kg酮舍林后，30分钟后达到了约0.2μM的 初始血浆水平。水平下降的明显半衰期约为1.5小时。

如上所述测试下列化合物组合： 西酞普兰与RS 102221的组合，西酞普兰与(+)-反式-1-(5-氯-3-(4-氟苯 基)-1-二氢茚基)-4-(2-(3-异丙基-2-咪唑烷酮-1-基)乙基)-哌嗪的组合， 西酞普兰与2，5二甲基-3-(4-氟苯基)-l-[1-[2-(咪唑烷-2-酮-1-基)乙基]- 哌啶-4-基]-1H-吲哚的组合，和氟西汀与酮舍林的组合。 结果：

皮下施用1μmol/kg RS 102221对大鼠前海马5-HT水平没有任 何影响。与对照相比，皮下施用10μmol/kg西酞普兰显著提高了5-HT 水平。同时施用10μmol/kg西酞普兰和1μmol/kg RS 102221显著增 强了西酞普兰的作用，F(1，119)＝3.34。

皮下施用1μmol/kg(+)-反式-1-(5-氯-3-(4-氟苯基)-1-二氢茚基)-4- (2-(3-异丙基-2-咪唑烷酮-1-基)乙基)-哌嗪对大鼠前海马5-HT水平没 有任何影响。与对照相比，皮下施用10μmol/kg西酞普兰显著提高了 5-HT水平。同时施用10μmol/kg西酞普兰和1μmol/kg Lu 27121显 著增强了西酞普兰的作用，F(1，120)＝4.25。

皮下施用1μmol/kg 2，5-二甲基-3-(4-氟苯基)-1-[1-[2(咪唑烷-2-酮- 1-基)乙基]-哌啶-4-基]-1H-吲哚对大鼠前海马5-HT水平没有任何影 响。与对照相比，皮下施用10μmol/kg西酞普兰显著提高了5-HT水 平。同时施用10μmol/kg西酞普兰和1μmol/kg Lu 29066显著增强了 西酞普兰的作用，F(1，120)＝7.29。

皮下施用100nmol/kg酮舍林对大鼠前海马5-HT水平没有任何 影响。同时施用5mg/kg氟西汀和100nmol/kg酮舍林显著增强了氟 西汀的作用，F(1，69)＝2.28。