精神障碍，尤其是精神分裂症是对日常生活造成极大损害的严重 精神病。可以将精神病的症状分成两部分。在急性期，以幻觉和妄想 占优势，称为阳性症状。当激越期减轻时，所谓的阴性症状变得明显 起来。它们包括认知缺陷、社交恐怖、警觉性降低(reduced vigilance)、 言语学习和记忆、言语流畅和运动功能淡漠和缺乏。
尽管一直以来可获得若干抗精神病药，但是现有的精神病疗法仍 无法令人满意。对多巴胺D2受体具有高亲和力的经典抗精神病药(例 如氟哌啶醇)，显示出极端副作用如锥体外系症状(extrapyramidal symptoms，EPS)，并且无法改善精神分裂症的阴性症状，因此不能使 患者回复到日常生活中。
氯氮平，是作为改善精神分裂症的阳性、阴性和认知症状并且全 无EPS的基准治疗药物而出现的，其主要的潜在致命性副作用是引起 粒细胞缺乏症(Capuano等，2002)。此外，还存在大量治疗抗性的病 例(Lindenmayer等，2002)。
总之，仍然需要开发改善精神病的阳性、阴性和认知症状并且具 有较理想副作用谱的新的抗精神病药。
尚不清楚精神病的确切病理机理。已经证实若干神经递质系统出 现了功能障碍。所涉及的两个主要神经递质系统是多巴胺能系统和谷 氨酸能系统。
因此，急性精神病性症状可能受多巴胺能药物刺激(Capuano等， 2002)，经典的抗精神病药(如氟哌啶醇)对多巴胺D2受体具有高亲和 力(Nyberg等，2002)。基于多巴胺能神经递质系统的机能亢进(苯丙胺 机能亢进、阿扑吗啡升高)的动物模型被用来模拟精神分裂症的阳性症 状。
另外，越来越多的证据表明，谷氨酸能神经递质系统在精神分裂 症的发展中起着重要作用(Millan，2005)。因此，NMDA拮抗剂(如苯 环利定和氯胺酮)能够刺激人和啮齿动物的精神分裂症性症状 (Abi-Saab等，1998；Lahti等，2001)。苯环利定和MK-801的急性给 药诱发模拟精神病性症状的大鼠的机能亢进、刻板症和共济失调。此 外，与多巴胺能模型相反，基于NMDA拮抗剂的精神病动物模型不 仅模拟精神病的阳性症状，而且还模拟精神病的阴性和认知症状 (Abi-Saab等，1998；Jentsch和Roth，1999)。因此，NMDA拮抗剂还 诱发认知缺陷和社交互动缺陷(social interaction deficit)。
迄今为止，已经在哺乳动物中鉴定出磷酸二酯酶的11个家族 (Essayan，2001)。PDE在细胞信号级联中的作用是使环状核苷酸cAMP 和/或cGMP失活(Soderling和Beavo，2000)。由于cAMP和cGMP在 G蛋白偶联受体的信号级联中是重要的第二信使，因此PDE参与在生 物体稳态中发挥作用的各种各样的生理机制。
PDE家族在它们对环状核苷酸的底物专一性、调节机制及对抑制 剂的敏感性方面都各不相同。此外，它们差异性地定位于生物体内器 官的细胞之间，甚至在细胞内。这些差异导致PDE家族差异性地参与 不同的生理功能。
PDE10A主要在脑内表达，即在脑的伏隔核和尾状壳核中表达。 适度表达区域有丘脑、海马、额皮质和嗅结节(Menniti等，2001)。有 研究指出所有这些脑区都参与精神分裂症的病理机理(Lapiz等， 2003)，因此该酶的定位表明了在精神病病理机理中的重要作用。
在纹状体中，PDE10A主要见于中等棘状神经元，并主要与这些 神经元的突触后膜缔合(Xie等，2006)。根据这一定位，PDE10A可能 对由多巴胺能和谷氨酸能诱导的信号级联输入到中等棘状神经元两 个神经递质系统产生重要影响，这两个神经递质系统在精神病的病理 机理中起着重要作用。
具体地讲，磷酸二酯酶(PDE)10A既水解cAMP又水解cGMP， 对cAMP的亲和力(Km＝0.05μM)比对cGMP的亲和力(Km＝3μM)高 (Sonderling等，1999)。
有研究指出精神病患者的cGMP和cAMP及其下游底物水平发生 紊乱(Kaiya，1992；Muly，2002；Garver等，1982)。另外，研究表明 在大鼠和患者中氟哌啶醇的治疗分别与cAMP和cGMP水平提高有关 (Leveque等，2000；Gattaz等，1984)。由于PDE10水解cAMP和cGMP 两者(Kotera等，1999)，因此抑制PDE10A还可能引起cAMP和cGMP 增加，从而在环状核苷酸水平上具有与氟哌啶醇类似的作用。
PDE10A抑制剂的抗精神病潜力得到了Kostowski等人研究(1976) 的进一步支持，该项研究表明，中等选择性PDE10A抑制剂罂粟碱， 减轻大鼠阿扑吗啡诱发的刻板症(一种精神病动物模型)，加重大鼠氟 哌啶醇诱发的僵住症，并同时降低大鼠脑内的多巴胺浓度。这些活性 也见于使用经典抗精神病药的情况。这一点进一步得到有关专利申请 的支持，该专利申请证实罂粟碱作为PDE10A抑制剂用于治疗精神病 (美国专利申请号2003/0032579)。
除主要改善精神病阳性症状的经典抗精神病作用以外，PDE10A 还具有改善精神病的阴性和认知症状的潜力。
焦点集中在多巴胺能输入中等棘状神经元中，PDE10A抑制剂通 过上调cAMP和cGMP水平作为D1激动剂和D2拮抗剂发挥作用， 因为Gs蛋白偶联多巴胺D1受体的活化增加胞内cAMP，而Gi蛋白 偶联多巴胺D2受体的活化则通过抑制腺苷酸环化酶活性降低了胞内 cAMP水平(Mutschler等，2001)。
由D1受体信号转导介导的胞内cAMP水平升高似乎调节负责额 叶前皮质工作记忆(working memory)的一系列神经元过程(Sawaguchi， 2000)，有报道指出D1受体活化可改善精神分裂症患者的工作记忆缺 陷(Castner等，2000)。因此，看来有可能的是该途径的进一步改进还 可改善精神分裂症的认知症状。
Rodefer等人(2005)进一步说明了PDE10A抑制对精神病阴性症 状的作用，他们指出在大鼠中，罂粟碱能逆转由亚慢性给予NMDA 拮抗剂苯环利定所诱发的注意力定势转移缺陷(attentional set-shifting deficit)。包括注意力转移到新刺激的能力受损在内的注意力缺陷，这 属于精神分裂症的阴性症状。在研究中，注意力缺陷通过给予苯环利 定7天后经冲洗期而诱发。PDE10A抑制剂罂粟碱能够使由亚慢性治 疗诱发的持久性缺陷(enduring deficit)发生逆转。
专利和其它文献中大量记载了咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮 类化合物的合成和某些医药用途。
在EP 0 400 583和US 5,055,465申请(均属于Berlex Laboratories， Inc.)中公开了一组咪唑并喹喔啉酮类化合物、其氮杂类似物及其制备 方法。研究证实这些化合物具有纤维扩张(inodilatory)、血管扩张和静 脉扩张等作用。其治疗活性以抑制磷酸二酯酶3(PDE3)为基础。
EP 0 736 532公开了吡啶并[3，2-e]吡嗪酮类化合物及其制备方法。 该申请指出这些化合物具有止喘和抗过敏性质。该发明的实例是 PDE4和PDE5的抑制剂。
WO 00/43392公开了咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮类化合物 的用途，这类化合物是PDE3和PDE5的抑制剂，可用于治疗勃起功 能障碍、心力衰竭、肺张力过强(pulmonic hypertonia)和伴有供血不足 的血管疾病。
WO 01/68097中所公开的另一组吡啶并[3，2-e]吡嗪酮类化合物是 PDE5的抑制剂，可用于治疗勃起功能障碍。
D.Norris等人(Tetrahedron Letters 42(2001)，4297-4299)也描述了 咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪酮类化合物的制备方法。
WO 92/22552涉及通常在3位被羧酸基团及其衍生物取代的咪唑 并[1，5-a]喹喔啉类化合物。该申请指出这些化合物可用作抗焦虑药和 镇静药/催眠药。
相比之下，已经公开的仅仅是数量有限的咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪类化合物及其医药用途。
WO 99/45009描述了一组下式(I)的咪唑并吡嗪类化合物：

Q的定义部分是形成6元杂环，包括吡啶。虽然R1、R2和R3表 示各种各样的取代基，但是-NR4R5基团的定义特别重要。
R4和R5各自独立地为氢、R6或-C(O)R6，或者整个NR4R5基团形 成3-8元饱和环或不饱和环。
R6为烷基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基、环烯基、环烯基 烷基、芳基、芳烷基、杂环基或杂环基烷基，所述各基团是未取代或 取代的。
所记载的这些化合物是蛋白酪氨酸激酶的抑制剂，可用于治疗蛋 白酪氨酸激酶相关疾病，例如免疫疾病。
有趣的是，对于权利要求9中所列的所有实例，NR4R5基团的结 构限于这样的方式，即R4和R5之一为氢，对于另一个R6为苯基(未 取代或取代的)。
NR4R5基团的这种结构选择与同一公司发表的SAR数据一致(P. Chen等，Bioorg.Med.Chem.Lett.12(2002)，1361-1364和P.Chen等， Bioorg.Med.Chem.Lett.12(2002)，3153-3156)。
发明概述
本发明涉及式(II)化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物和前 药。
本发明涉及下式(II)化合物或其药学上可接受的盐和衍生物：

其中A与N之间的化学键为单键或双键，
如果化学键为双键，则A为C，如果化学键为单键，则A为CH，
m为0或1，
n为0或1，
其中R1和R2独立选自：
H，
环状基团，
C1-8烷基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、OH、O-C1-3 烷基和/或环状基团，
C2-8烯基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、OH、O-C1-3 烷基和/或环状基团，
C2-8炔基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、OH、O-C1-3 烷基和/或环状基团，
饱和、单不饱和或多不饱和的具有3-8个原子的碳环系统(例如苯 基)，或者具有5-15个环原子的杂环系统(含有至少一个选自N(包括 N-氧化物)、O和S的杂原子)，所述各基团任选被以下基团单取代或 多取代：卤素、氨基、C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、硝基、C1-3 烷基、O-C1-3烷基和/或环状基团，和
R3选自：
H，
环状基团，
N3，
CN，
R6、OR6、SR6、SOR6、SO2R6，
NH(CO)OR6、N((CO)OR6)2、NR6((CO)OR6)，
NH-(C＝O)-NH2、NR6-(C＝O)-NH2，
NH-(C＝O)-NHR6、NR6-(C＝O)-NHR6，
NH-SO2R6、N(SO2R6)2和NR6(SO2R6)，
其中R6在所有情况下都独立地为：
环状基团，
C1-8烷基、C3-8环(杂)烷基，
C2-8烯基、C3-8环(杂)烯基，
或C2-8炔基，所述各基团任选被以下基团单取代或多取代：卤素、 OH和/或O-C1-3烷基和/或环状基团，
R7、OR7、SR7、NHSO2R7、N(SO2R7)2或N(R8)SO2R7，
其中R7为芳基、杂芳基、芳基-C1-5烷基、杂芳基-C1-5烷基，其 中芳基为苯基或萘基，杂芳基为5-15个环原子的芳族杂环系统(含有 至少一个选自N(包括N-氧化物)、S和O的原子)，其中芳基和杂芳 基任选被以下基团单取代或多取代：卤素、氨基、C1-3烷基氨基、二 -C1-3烷基氨基、硝基、C1-3烷基、O-C1-3烷基和/或环状基团，
R8为C1-5烷基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、OH、 O-C1-3烷基和/或环状基团，
R4选自：
H，
卤素，
环状基团，
R9，
OH或OR9，
NH(C＝O)-C1-3烷基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、OH、 O-C1-3烷基和/或环状基团，或
NH2、NHR9或NR9R10，
其中R9和R10独立选自：
-环状基团，
-C1-6烷基或C3-6环(杂)烷基，任选被以下基团单取代或多取代： 卤素、OH、O-C1-3烷基和/或环状基团，
-芳基-C1-5烷基，其中芳基为苯基，任选被以下基团单取代或多 取代：卤素、氨基、C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、硝基、C1-3烷基、 OH、O-C1-3烷基和/或环状基团，或
-NR9R10一起形成5、6或7元饱和环或不饱和环，可含有最多3 个杂原子，优选为N(包括N-氧化物)、S和/或O，任选被以下基团单 取代或多取代：卤素、氨基、C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、C1-3 烷基、O-C1-3烷基和/或芳基-C1-5烷基，其中芳基为苯基，任选被以下 基团单取代或多取代：卤素、氨基、C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、 硝基、C1-3烷基、O-C1-3烷基和/或环状基团，和
R5选自：
H，
C1-5烷基、C3-6环烷基或(CO)-C1-5烷基，任选被以下基团单取代 或多取代：卤素、OH、O-C1-3烷基和/或环状基团。
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
术语“烷基”、“烯基”和“炔基”是指具有最多8个碳原子、 优选最多6个碳原子、更优选最多5个碳原子的直链或支链基团，例 如甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、丙基、烯丙基、丙炔基、丁基、丁 烯基、丁炔基等，任选被上述指定基团取代。
术语“环(杂)烷基”和“环(杂)烯基”是指环状基团，可以任选 含有一个或多个选自N(包括N-氧化物)、O和S的杂原子，任选被上 述指定基团取代。
术语“环状基团”是指饱和或不饱和的芳族碳环或碳杂环 (carboheterocycle)，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、氨基、 C1-3烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、硝基、C1-3烷基、OH、O-C1-3烷基 和/或环状基团。所述环状基团优选含有3-20个、特别是4-10个C原 子。碳杂环可含有1-6个、特别是1-3个优选选自O、N、S和/或P 的杂原子。环状基团可以通过C原子或任选通过N、O、S、SO或SO2 基团相结合。环状基团的一个实例为苯基。
本发明一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中A与N之间 的化学键为双键。
本发明另一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中m和n均 为0。
本发明又一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R1选自：
H，
C1-4烷基，特别是C2-4烷基，任选被以下基团单取代或多取代： 卤素、OH、O-C1-3烷基和/或环状基团，或
苯基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、氨基、C1-3烷基 氨基、二-C1-3烷基氨基、硝基、C1-3烷基、O-C1-3烷基和/或环状基团。
尤其优选为C2-4-烷基，例如丙基(例如正丙基或异丙基)或苯基， 其任选被取代。
本发明又一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R2为：
H或
C1-4烷基，特别是甲基，其任选被取代(例如被卤素取代)。尤其 优选为氢、甲基或三氟甲基。
本发明又一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R3为H、 CN或C1-3烷基(例如甲基)。
本发明又一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R3为 NH-(C＝O)OR6，特别是NH-(C＝O)-OC1-5烷基，任选被上述指定基团 单取代或多取代。
本发明又一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R3为 NH-SO2R6，特别是NH-SO2-C1-5烷基，任选被上述指定基团单取代或 多取代。
本发明又一个优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R4选自：
H、C1-3烷基、O-C1-3烷基、NH2、NHC1-3烷基，其中烷基任选被 以下基团单取代或多取代：卤素、OH、O-C1-3烷基和/或环状基团，或
NH(C＝O)-C1-3烷基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、OH、 O-C1-3烷基和/或环状基团，或
环丙基、环丁基、四氢吡咯基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、1，2，3- 三唑基、1，2，4-三唑基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基，任选被以下基团单 取代或多取代：卤素、OH、C1-5烷基和/或O-C1-3烷基或芳基-C1-5烷基， 其中芳基为苯基，任选被以下基团单取代或多取代：卤素、氨基、C1-3 烷基氨基、二-C1-3烷基氨基、硝基、C1-3烷基、O-C1-3烷基和/或环状 基团，例如

本发明又一个尤其优选的实施方案涉及式(II)化合物，其中R4为 H、C1-3烷基或O-C1-3烷基，特别是H或OCH3。
具体的式(II)化合物的实例是下列化合物：
(1)4，8-二甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(2)4，8-二甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(3)4，8-二甲氧基-1-乙基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(4)4，8-二甲氧基-1，3-二甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(5)4，8-二甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(6)1-乙基-4-异丙氧基-8-甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(7)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-丙氧基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(8)4-环戊氧基-1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(9)4-异丙氧基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(10)8-甲氧基-1，3-二甲基-4-(2，3，6-三氟苄氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(11)4-(2，4-二氯苄氧基)-1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(12)4-(2-氯-6-氟苄氧基)-1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(13)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-(2，3，6-三氟苄氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(14)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-(2，4，6-三甲基苄氧基)-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
(15)4-(2-氯-6-氟苄氧基)-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(16)4-(2，6-二氟苄氧基)-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(17)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-(2-苯基乙氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(18)8-甲氧基-3-甲基-4-(2-苯基乙氧基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(19)8-甲氧基-1，3-二甲基-4-(2-苯基乙氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(20)8-甲氧基-3-甲基-4-(2-苯基乙氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(21)8-甲氧基-3-甲基-4-(3-苯基丙氧基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(22)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-(3-苯基丙氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(23)1，3-二甲基-8-甲氧基-4-(3-苯基丙氧基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(24)4-[(3，5-二甲基异噁唑-4-基)甲氧基]-1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-咪 唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(25)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-甲硫基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(26)8-甲氧基-3-甲基-4-甲硫基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(27)1，3-二甲基-8-甲氧基-4-甲硫基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(28)8-甲氧基-3-甲基-4-甲硫基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(29)4-氰基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(30)4-氰基-8-甲氧基-3-甲基-1-乙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(31)4-叠氮基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(32)8-甲氧基-3-甲基-4-甲基亚磺酰基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(33)8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(34)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-甲基亚磺酰基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(35)8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(36)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(37)4-乙基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(38)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(39)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪盐 酸盐
(40)1-乙基-3，4-二甲基-8-甲氧基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(41)1，3，4-三甲基-8-甲氧基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(42)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-(3，3，3-三氟丙基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(43)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-戊基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(44)1-环己基-3，4-二甲基-8-甲氧基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(45)3，4-二甲基-1-己基-8-甲氧基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(46)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-苯乙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(47)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-苯基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(48)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-苯基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪二 盐酸盐
(49)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-(2-氯苯基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(50)3，4-二甲基-8-甲氧基-1-(4-氟苯基)-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(51)1-丙基-3，4，8-三甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(52)1-丙基-3，4-二甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(53)1-丙基-4，8-二甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(54)8-二氟甲氧基-3，4-二甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(55)3，4-二甲基-8-(哌啶-1-基)-甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(56)3，4-二甲基-8-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
(57)3，4-二甲基-8-(2-乙基-4-甲基-咪唑-1-基)-甲氧基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(58)3，4-二甲基-8-(2-丙基-4-甲基-咪唑-1-基)-甲氧基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(59)4-二氟甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪-8- 醇
(60)8-甲氧基-3-甲基-5-氧代-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(61)3，4-二甲基-8-甲氧基-5-氧代-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(62)8-甲氧基-4-甲氧基羰基氨基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(63)4-乙氧基羰基氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(64)4-(N，N-二甲氧基羰基)-氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(65)8-甲氧基-4-(甲氧基羰基-甲基-氨基)-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
(66)8-甲氧基-3-甲基-4-(3-甲基-脲基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(67)8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4-脲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(68)8-甲氧基-3-甲基-4-(3-异丙基-脲基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(69)8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(70)4-(N，N-双-甲磺酰基)-氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(71)4-乙磺酰基氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(72)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(73)8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4-三氟甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(74)8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4-丙基磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(75)4-异丙基磺酰基氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(76)8-甲氧基-3-甲基-4-(4-甲基苯磺酰基氨基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
(77)4-[N，N-双-(4-甲基苯磺酰基)-氨基]-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪 唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(78)8-甲氧基-3-甲基-1-(3，3，3-三氟丙基)-4-甲磺酰基氨基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(79)1-己基-8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(80)8-甲氧基-3-甲基-1-苯乙基-4-甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(81)8-甲氧基-3-甲基-1-苯基-4-甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
(82)1-(2-氯苯基)-8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
(83)1-(4-氟苯基)-8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
(84)3-甲基-8-(4-甲基-2-丙基-咪唑-1-基)-1-丙基-4-甲磺酰基氨基-咪 唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(85)3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪 -8-醇氢溴酸盐
(86)3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪 -8-醇
(87)8-二氟甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶 并[3，2-e]吡嗪
(88)8-环丙基甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
(89)3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(90)8-甲氧基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
(91)8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(92)8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪盐酸盐
(93)1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪
(94)3，5-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
(95)5-乙酰基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
及其药学上可接受的盐和衍生物。
尤其优选的式(II)化合物选自3，4-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]-吡啶并[3，2-e]-吡嗪及其药学上可接受的盐和衍生物。
此外，本发明还涉及式(II)化合物的生理上可接受的盐、溶剂合 物和衍生物。式(II)化合物的衍生物例如为酰胺、酯和醚。此外，术语 “衍生物”还包括式(II)化合物的前药和代谢物。
可以用无机酸或有机酸中和碱，或者用无机碱或有机碱中和酸来 获得生理上可接受的盐。合适的无机酸的实例为盐酸、硫酸、磷酸或 氢溴酸，而合适的有机酸的实例为羧酸、磺酸(sulpho acid或sulphonic acid)，例如乙酸、酒石酸、乳酸、丙酸、乙醇酸、丙二酸、马来酸、 富马酸、单宁酸、琥珀酸、海藻酸、苯甲酸、2-苯氧基苯甲酸、2-乙 酰氧基苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、柠檬酸、马来酸、水杨酸、3-氨基 水杨酸、抗坏血酸、恩波酸、烟酸、异烟酸、草酸、葡萄糖酸、氨基 酸、甲磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、乙烷-1，2-二磺酸、苯磺酸、4- 甲基苯磺酸或萘-2-磺酸。合适的无机碱的实例为氢氧化钠、氢氧化钾 和氨，而合适的有机碱的实例为胺，然而，优选叔胺例如三甲胺、三 乙胺、吡啶、N，N-二甲基苯胺、喹啉、异喹啉、α-甲基吡啶、β-甲基 吡啶、γ-甲基吡啶、喹哪啶和嘧啶。
另外，可以按照本身已知方式，用季铵化剂将具有叔氨基的衍生 物转化成相应的季铵盐，获得式(II)化合物的生理上可接受的盐。合适 的季铵化剂的实例为烷基卤化物(例如碘甲烷、溴乙烷和正丙基氯)， 还有芳基烷基卤化物，例如苄基氯或2-苯基溴乙烷。
此外，在含有不对称碳原子的式(II)化合物的情况下，本发明涉 及D型、L型和D型、L型混合物，同样如果存在不止一个不对称碳 原子，则还涉及非对映体。这些含有不对称碳原子的式(II)化合物，通 常形成外消旋体，可以按照已知方式拆分成旋光异构体，例如使用旋 光酸。然而，也可从开始时使用旋光原料，然后获得相应的旋光化合 物或非对映体化合物作为终产物。
研究发现本发明的化合物在药理上具有重要性质，可以用于治 疗。式(II)化合物可以单用，也可以彼此联用或与其它活性化合物联用。 本发明的化合物是磷酸二酯酶10的抑制剂。因此，这正是本发明的 部分主题，即式(II)化合物及其盐以及包含这些化合物或其盐的药物制 剂可用于治疗或预防与磷酸二酯酶活性过强有关的疾病、伴有和/或涉 及磷酸二酯酶活性过强的疾病和/或其中抑制磷酸二酯酶10是有价值 的疾病。
预料不到的是，式(II)化合物是有效的酶PDE10抑制剂。
这正是本发明的一个实施方案，即式(II)化合物，包括其盐、溶 剂合物和前药以及包含有效量的式(II)化合物或其盐、溶剂合物或前药 之一(其用量有效抑制PDE10)的药物组合物可用于治疗哺乳动物(包 括人)的中枢神经系统疾病。
更具体地讲，本发明涉及治疗神经障碍和精神障碍，包括但不限 于(1)精神分裂症和其它精神病；(2)心境[情感]障碍；(3)神经性障碍、 应激相关障碍和躯体形式障碍，包括焦虑症；(4)进食障碍；性功能障 碍，包括性欲亢进；(5)成人人格与行为障碍；(6)通常在婴儿期、儿童 期和青春期首次诊断出的障碍；(7)智力迟钝；和(8)心理发育障碍；(9) 包括哺乳动物(包括人)的认知缺陷症状的障碍；(10)造作性障碍。
(1)可以按照本发明治疗的精神分裂症和其它精神病的实例包括 但不限于不同类型的连续性或间歇性精神分裂症(例如类偏狂型精神 分裂症、青春型精神分裂症、紧张型精神分裂症、混合型精神分裂症、 残留型精神分裂症和精神分裂症样障碍)；精神分裂症型障碍 (schizotypal disorder)(例如边缘性精神分裂症、潜隐型精神分裂症、发 病前驱型精神分裂症、先兆型精神分裂症、假神经症型精神分裂症、 假病态人格型精神分裂症和精神分裂症型人格障碍)；持续性妄想型障 碍(persistent delusional disorder)；急性精神病性障碍、短暂性精神病性 障碍和持续性精神病性障碍；感应性妄想型障碍(induced delusional disorder)；不同类型(例如躁狂型、抑郁型或混合型)的分裂情感性精神 障碍；产褥期精神病等以及未分类的非器质性精神病。
(2)可以按照本发明治疗的心境[情感]障碍的实例包括但不限于 与双相性精神障碍有关的躁狂发作和单纯躁狂发作、轻躁狂、伴有精 神病性症状的躁狂症；双相性情感障碍(包括例如双相性情感障碍目前 为轻躁狂和有精神病性症状躁狂发作或无精神病性症状躁狂发作)；抑 郁性障碍，例如单次发作抑郁性障碍或复发性重性抑郁性障碍、抑郁 性障碍产后发作、有精神病性症状的抑郁性障碍；持续性心境[情感] 障碍，例如循环情感性障碍、精神抑郁症；经前期烦躁不安症。
(3)可以按照本发明治疗的属于神经性障碍、应激相关障碍和躯 体形式障碍的障碍实例包括但不限于恐怖性焦虑障碍，例如主要但并 不只是与精神病有关的广场恐怖和社交恐怖；其它焦虑障碍，例如惊 恐性障碍和广泛性焦虑障碍；强迫症；严重应激反应和适应性障碍， 例如创伤后应激障碍；分离性障碍和其它神经性障碍，例如人格解体 -现实解体综合征。
(5)可以按照本发明治疗的成人人格与行为障碍的实例包括但不 限于偏执性、分裂型、分裂样、反社会性、边缘性、戏剧性、自恋性、 回避性、社交紊乱性、情绪不稳定型、强迫性、焦虑型和依赖型等特 定的人格障碍类型；混合型人格障碍；习惯与冲动控制障碍(例如拔毛 癖、放火癖、适应不良攻击行为(maladaptive aggression))；性偏好障碍。
(6)可以按照本发明治疗的通常在婴儿期、儿童期和青春期首次 诊断出的障碍的实例包括但不限于运动过度性障碍、注意力缺陷/多动 症(AD/HD)、品行障碍；品行与情绪混合性障碍；非器质性遗尿症、 非器质性遗粪症；刻板性运动障碍和其它特定的行为情感障碍，例如 无多动症注意力缺陷障碍，过度自慰咬甲癖、抠鼻癖和吮拇癖；心理 发育障碍，特别是儿童期分裂样障碍和广泛性发育障碍，例如与阿斯 珀格综合征(Asperger′s syndrome)有关的精神病发作。
(8)心理发育障碍的实例包括但不限于言语和语言发育障碍、学 校技能发育障碍，例如特定算术技能障碍、阅读障碍和拼写障碍和其 它学习障碍。主要在婴儿期、儿童期和青春期诊断出这些障碍。
(9)用于本文“包括作为认知缺陷症状的障碍”中的术语“认知 缺陷”是指特定个体与同龄普通群体内的其他个体相比，在一个或多 个认知方面(例如记忆力、智力、学习和逻辑能力或注意力)的功能低 于正常水平或低于最佳水平。
(10)可以按照本发明治疗的包括作为认知缺陷症状的障碍的实 例包括但不限于主要但并不只是与精神病有关的认知缺陷；年龄相关 记忆减退、帕金森病(Parkinson′s disease)、阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease)、多梗死性痴呆、路易体痴呆(Lewis body dementia)、脑卒中、 额颞痴呆、进行性核上麻痹、亨廷顿舞蹈病(Huntington′s disease)和HIV 疾病、大脑创伤、药物滥用和轻度认知障碍。
(11)另外，本发明涉及伴有基底神经节功能异常的运动障碍。可 以按照本发明治疗的伴有基底神经节功能异常的运动障碍的实例包 括但不限于不同亚型的张力障碍，例如局灶性张力障碍、多发性局灶 性或节段性张力障碍、扭转张力障碍、半身性、全身性和迟发性运动 障碍(由精神药物诱发)、静坐不能、运动障碍例如亨廷顿舞蹈病、帕 金森病、路易体病、腿多动综合征、PLMS。
(12)本发明还涉及治疗器质性(包括症状性)精神障碍，尤其是器 质性妄想性(精神分裂症样)障碍、与痴呆有关的早老性或老年性精神 病、癫痫和帕金森病及其它器质性和症状性精神病的精神病；谵妄； 感染性精神病；由脑病、脑损伤、脑功能障碍所致人格和行为障碍。
(13)本发明涉及治疗由精神活性化合物(psychoactive compound) 所致的精神障碍和行为障碍，更特别是因治疗由以下物质诱发的精神 病和残留性和迟发性精神病：酒精、类阿片、大麻素类、可卡因、致 幻药、其它兴奋剂包括咖啡因、挥发性溶剂和其它精神活性化合物。
(14)本发明还涉及哺乳动物(包括人)的学习和记忆能力的全面 改善。
采用有效剂量的本发明化合物或其盐以及生理上可接受的载体、 稀释剂和/或辅料用于生产药物组合物。活性化合物的剂量可随给药途 径、患者的年龄和体重、待治疗疾病的性质和严重程度和类似因素而 变化。日剂量可按单剂量给予，单剂量可一次给予，或者再分成两次 以上的日剂量，通常为0.001-2000mg。特别优选的选择为日剂量 0.1-500mg，例如0.1-100mg。
合适的给药形式为口服、胃肠外、静脉内、经皮、局部、吸入、 鼻内和舌下制剂。特别优选使用口服、胃肠外(例如静脉内或肌内)制 剂、鼻内制剂(例如干粉剂)或舌下制剂，来给予本发明的化合物。可 使用常用的草药制剂形式，例如片剂、糖衣片剂、胶囊剂、可分散粉 剂、颗粒剂、水性溶液剂、含酒精水性溶液剂、水性或油性混悬剂、 糖浆剂、果汁剂或滴剂。
固体药物形式可包含惰性成分和载体物质，例如碳酸钙、磷酸钙、 磷酸钠、乳糖、淀粉、甘露醇、藻酸盐、明胶、瓜尔胶、硬脂酸镁、 硬脂酸铝、甲基纤维素、滑石粉、高分散性硅酸、硅油、较高分子量 脂肪酸(例如硬脂酸)、明胶、琼脂或植物或动物脂肪和油或固体高分 子量聚合物(例如聚乙二醇)；
如有需要，适于口服给药的制剂可额外包含矫味剂和/或甜味剂。
液体药物形式可是无菌的和/或如果适当的话，可包含辅助物质， 例如防腐剂、稳定剂、湿润剂、渗透剂、乳化剂、铺展剂、增溶剂、 用于调节渗透压或用于缓冲的盐、糖或糖醇和/或粘度调节剂。
这类添加剂的实例为酒石酸盐和柠檬酸盐缓冲液、乙醇和螯合剂 (例如乙二胺四乙酸及其无毒盐)。高分子量聚合物，例如液体聚氧化 乙烯、微晶纤维素、羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、葡聚糖或明胶 适于调节粘度。固体载体物质的实例为淀粉、乳糖、甘露醇、甲基纤 维素、滑石粉、高分散性硅酸、高分子量脂肪酸(例如硬脂酸)、明胶、 琼脂、磷酸钙、硬脂酸镁、动物和植物脂肪和固体高分子量聚合物(例 如聚乙二醇)。
胃肠外或局部应用的油性混悬剂可以是合成或半合成的植物油， 例如在所有情况下，在脂肪酸链上具有8-22个碳原子的液体脂肪酸与 具有1-6个碳原子的一元醇至三元醇酯化的酯，所述脂肪酸例如棕榈 酸、月桂酸、十三烷酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、肉豆蔻酸、山 萮酸、十五烷酸、亚油酸、反油酸、巴西烯酸(brasidic acid)、芥酸或 油酸，所述醇例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇或其异构体、乙二 醇或甘油。这类脂肪酸酯的实例为市售的饱和植物脂肪酸三甘油酯 (miglyol)、豆蔻酸异丙酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸异丙酯、PEG6-癸 酸、饱和脂肪醇的辛酸/癸酸酯、聚氧乙烯甘油三油酸酯、油酸乙酯、 蜡状脂肪酸酯(例如人造鸭尾腺油脂(ducktail gland fat))、椰子脂肪酸异 丙酯、油酸油酯、油酸癸酯、乳酸乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、己二酸 二异丙酯、多元醇脂肪酸酯，等等。不同粘度的硅油或脂肪醇(例如异 十三烷醇、2-辛基十二烷醇、琼蜡基十八烷醇或油醇)或脂肪酸(例如 油酸)也适用。还可使用植物油，例如蓖麻油、杏仁油、橄榄油、芝麻 油、棉籽油、落花生油或大豆油。
合适的溶剂、胶凝剂和增溶剂为水或水混溶性溶剂。合适物质的 实例为醇(例如乙醇或异丙醇、苯甲醇、2-辛基十二烷醇、聚乙二醇)、 邻苯二甲酸盐/酯、己二酸盐/酯、丙二醇、甘油、二丙二醇、三丙二 醇、蜡、甲基溶纤剂、溶纤剂、酯、吗啉、二噁烷、二甲亚砜、二甲 基甲酰胺、四氢呋喃、环己酮等。
可在水或有机溶剂中溶解或溶胀的纤维素醚，例如羟丙基甲基纤 维素、甲基纤维素或乙基纤维素或可溶淀粉，可用作成膜剂。
胶凝剂和成膜剂的混合物也是极为适用的。在这种情况下，特别 使用离子型高分子例如羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸及 其盐、淀粉半乙醇酸钠(sodium amylopectin semiglycolate)、海藻酸或 丙二醇藻酸的钠盐、阿拉伯树胶、黄原胶、瓜尔胶或角叉菜胶。下列 物质可用作额外的制剂助剂：甘油、不同粘度的石蜡、三乙醇胺、胶 原、尿囊素和novantisolic acid。对于制剂可能还需要使用表面活性剂、 乳化剂或湿润剂，例如十二烷基硫酸钠、脂肪醇醚硫酸盐、N-月桂基 -β-亚氨基二丙酸二钠、聚乙氧基化蓖麻油或失水山梨醇单油酸酯、失 水山梨醇单硬脂酸酯、聚山梨酯(polysorbate)(例如吐温(Tween))、琼 蜡醇、卵磷脂、甘油单硬脂酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、烷基酚聚乙二 醇醚、十六烷基三甲基氯化铵或一烷基/二烷基聚乙二醇醚磷酸单乙醇 胺盐。用于稳定乳液剂的稳定剂(例如蒙脱石或胶态硅酸)，或防止活 性物质分解的例如抗氧化剂(例如生育酚或丁基羟基苯甲醚)或防腐剂 (例如对羟基苯甲酸酯)，同样也可用来制备所需制剂。
胃肠外给药的制剂可呈单独的剂量单位形式，例如安瓿剂或小瓶 剂。优选使用活性化合物的溶液剂，优选水溶液剂，特别是等渗溶液 剂以及混悬剂。这些注射剂形式可制备成即用制剂或者在使用前通过 将活性化合物(例如冻干剂，如果适当的话还含有其它固体载体物质)， 与所需的溶剂或悬浮剂混匀来直接制备。
鼻内制剂可呈水性或油性溶液剂，或者呈水性或油性混悬剂。它 们也可呈冻干剂，在使用前用合适的溶剂或悬浮剂制备。
吸入制剂可呈粉剂、溶液剂或混悬剂。优选吸入制剂为粉剂的形 式，例如活性成分与合适的制剂助剂(例如乳糖)的混合物。
制剂在常规抗菌或无菌条件下生产、分装和密封。
如上文所述，本发明的化合物可与其它活性剂(例如用于治疗中 枢神经系统疾病的治疗活性化合物)一起给予作为联合疗法。这些其它 的化合物可以是PDE10抑制剂，或者可以是具有不是基于PDE10抑 制活性的化合物，例如多巴胺D2受体调节剂或NMDA调节剂。对于 联合治疗，活性成分可配制成含有若干活性成分的单一剂量形式的组 合物和/或在单独剂量形式中含有各个活性成分的药盒。用于联合疗法 的活性成分可以共同给予或单独给予。
式(II)化合物的合成优选从下式(III)的咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪酮开始：

其中R1、R2和R4如上所述。
式(III)化合物的制备详见例如WO 00/43392、WO 01/68097以及 D.Norris等(Tetrahedron Letters 42(2001)，4297-4299)。
按照文献已知标准方法和曾用于WO 99/45009的方法，通过用卤 化试剂POCl3、PCl3、PCl5、SOCl2、POBr3、PBr3或PBr5等处理，使 式(III)化合物卤化，得到例如下式(IV)的4-氯或4-溴-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪类化合物：

其中X为Cl或Br，R1、R2和R4如上定义。
优选用相应的醇或硫醇HOR6、HOR7、HSR6或HSR7处理式(IV) 中间体来制备式(II)化合物，其中m和n为0，A与N之间的化学键 为双键，R3选自如上定义的OR6、SR6、OR7或SR7。
实施例：
中间体A1：4-氯-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
将16g 8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪 -4-酮和120ml POCl3混合，加热回流8小时。冷却至室温后，反应混 合物用1200ml碎冰/水处理并搅拌1小时。产物用2 x 300ml二氯甲 烷萃取。所收集的有机层用2 x 300ml水洗涤后，用Na2SO4干燥。减 压除去溶剂。
产量：14.5g
熔点：121-123℃
可按该方法制备下式(IV)的许多其它中间体A。一些实施例如下：


中间体A25：4-氯-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪-8- 醇
将2g 4-氯-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡 嗪(中间体A1)悬浮于50ml二氯甲烷中。在0-5℃下滴加3ml三溴化 硼(bortribromide)后，在0-5℃下搅拌1小时，在室温下再搅拌4小时 后，静置过夜。将反应混合物慢慢加到10g碳酸钾的100ml水溶液 中。在搅拌和恒定的pH>7(加入10％碳酸钾溶液)下，滤出沉淀物后 用水洗涤。
产量：1.87g
熔点：227-234℃(EtOH)
式(IV)的其它中间体A可按照本方法制备。加热回流6小时获得 其中X＝Br的实例。一些实施例如下：
  中间体 X R1 R2 R4 m.p.[℃] A25 -Cl -C3H7 -CH3 -OH 227-234 A26 -Br -C2H5 -CH3 -OH >360℃ (x HBr) A27 -Br -C6H11 -CH3 -OH 212-216
中间体A28：4-氯-8-二氟甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
将5.51g(0.02mol)4-氯-3-甲基-1-丙基-9H-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪-8-醇(中间体A25)和2g(0.05mol)氢氧化钠溶于20ml二甲 基甲酰胺。10分钟后滴加2.53ml(0.03mol)氯二氟乙酸的搅拌溶液。 搅拌下将混合物在150℃浴温下加热5小时。冷却后，产物用乙酸乙 酯(200ml，300ml)萃取，合并的有机相用水(2 x 100ml)洗涤，有机相 经硫酸钠干燥，滤出后蒸发至干。
所得的具有3种烷基化产物的残余物用制备型色谱法纯化(硅胶， 二氯甲烷/甲醇＝9/1，体积/体积)。
产量：1.21g
熔点：95-98℃
实施例1：4，8-二甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
将1.5g中间体A1溶于15ml甲醇和15ml二氯甲烷的混合物中。 加入1g固体KOH。将混合物加热回流7小时。在室温下加入30ml 水。分离有机层。水层用20ml二氯甲烷萃取。合并的有机层用2 x 20ml水洗涤。彻底除去溶剂。残余物用LC纯化。
产量：1.2g
熔点：112-115℃
用上述实施例1的相同合成路线和反应条件制备下列实施例的化 合物：



优选将式(IV)中间体用格氏试剂(Grignard reagent)乙氧基羰基-二 氟甲基氯化镁处理，然后用氰盐(例如KCN)取代，来制备式(II)化合物， 其中m和n为0，A与N之间的化学键为双键，R3为-CN。
实施例29：4-氰基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
将3g中间体A1加到32g乙氧基羰基-二氟甲基氯化镁的100ml 四氢呋喃(THF)溶液中。将混合物搅拌并加热回流10小时。然后除去 溶剂，加入15ml N，N-二甲基甲酰胺和2g KCN。将该反应混合物加 热回流5小时。此后加入100ml甲苯。有机层用3 x 50ml水洗涤。 除去溶剂后用制备型HPLC纯化。
产量：0.2g
熔点：178-180℃
也采用实施例29所述相同方法和反应条件合成实施例30。
实施例30：4-氰基-8-甲氧基-3-甲基-1-乙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
产量：0.14g
熔点：171-178℃
将式(IV)中间体用叠氮盐(例如NaN3)处理，来制备式(II)化合物， 其中m和n为0，A与N之间的化学键为双键，R3为-N3。
实施例31：4-叠氮基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
将1.5g中间体A1搅拌倒入10ml N，N-二甲基甲酰胺中。在室温 下加入1g NaN3。将混合物加热至60℃并搅拌5小时。加入100ml 甲苯。分离有机层，用3 x 30ml水洗涤。除去90ml溶剂。反应产物 析出。粗产物通过从甲苯中结晶而被纯化。
产量：1.2g
熔点：>205℃(分解)
通过氧化相应的式(II)化合物(其中R3为-SR6)，来制备其中m和n 为0、A与N之间的化学键为双键、R3为(SO)R6或(SO2)R6(其中R6 如上定义)的式(II)化合物。
实施例32：8-甲氧基-3-甲基-4-甲基亚磺酰基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
和
实施例33：8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
将0.7g8-甲氧基-3-甲基-4-甲硫基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪(实施例26)溶于40ml二氯甲烷。在0-5℃下，分批加入0.8g 3-氯过氧苯甲酸。将混合物在室温下搅拌2小时，溶液依次用2 x 30ml 饱和NaHCO3溶液和2 x 30ml水洗涤。从分离的有机层中除去溶剂。 实施例32和实施例33的粗制混合物用制备型HPLC分离。
实施例32：
产量：0.2g
熔点：144-147℃
实施例33：
产量：0.25g
熔点：42-46℃
用实施例31所述相同合成路线和反应条件来制备实施例34：
实施例34：1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-4-甲基亚磺酰基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
产量：0.23g
熔点：189-192℃
优选通过氢化(例如在催化剂(例如钯)存在下用氢进行氢化)式(IV) 中间体，来制备式(II)化合物，其中m和n为0，A与N之间的化学 键为双键，R3为氢。
实施例35：8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
将2g中间体A1悬浮于50ml乙醇中。加入1ml三乙胺和1g 钯催化剂。压热器用作反应容器。将氢加压至压力20巴。此刻将混 合物在30℃下搅拌4小时。过滤后除去溶剂。将粗产物溶于100ml 二氯甲烷。该溶液用50ml水洗涤。除去溶剂从而分离出纯的产物。
产量：1.3g
熔点：134-135℃
同样采用上述实施例35的相同方法和反应条件来合成实施例 36。
实施例36：1-乙基-8-甲氧基-3-甲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
产量：1.0g
熔点：159-162℃
优选用相应的烷基有机金属试剂、烯基有机金属试剂或炔基有机 金属试剂(例如乙基溴化镁)处理式(IV)中间体，来制备式(II)化合物， 其中m和n为0，A与N之间的化学键为双键，R3为如上所述的R6。
实施例37：4-乙基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
将7g中间体A1悬浮于150ml四氢呋喃中。加入30ml乙基溴 化镁的四氢呋喃(3M)溶液。将混合物在室温下搅拌4小时。过滤后除 去溶剂。粗产物用制备型HPLC纯化。
产量：5.1g
熔点：78-81℃
采用上述实施例37的相同合成路线和反应条件来制备下列化合 物：


在合成上述中间体A28的过程中获得其中R3＝CH3的类似化合 物。用制备型色谱法分离所得的3种烷基化产物，得到实施例59。
实施例59：4-二氟甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪-8-醇
产量：0.81g
熔点：292-297℃
从其中m和n为0、A与N之间的化学键为双键的式(II)化合物 通过氧化(例如用3-氯过氧苯甲酸氧化)，来合成其中m为0、n＝1、 A与N之间的化学键为双键的式(II)化合物。
实施例60：8-甲氧基-3-甲基-5-氧代-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
将6g 8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪 (实施例35)溶于300ml二氯甲烷。在30分钟内分批加入12g3-氯过 氧苯甲酸的40ml乙酸溶液。将反应混合物在室温下搅拌16小时，溶 液依次用2 x 50ml饱和NaHCO3溶液和50ml水洗涤。除去溶剂。粗 产物用制备型HPLC纯化。
产量：1.5g
熔点：228-232℃
采用与实施例37所述相同的合成路线和反应条件来合成实施例 42。
实施例61：3，4-二甲基-8-甲氧基-5-氧代-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
产量：1.4g
熔点：154-157℃
优选用NH3或烷基胺(例如C1-5烷基胺)处理式(IV)中间体以形成 相应的4-氨基衍生物(按照WO 99/45009中的方法)，来制备式(II)化合 物，其中m和n为0，A与N之间的化学键为双键，R3为NH(CO)OR6、 N((CO)OR6)2、N(R6((CO)OR6)、NH(CO)NH2、NH(CO)NHR6、 NR6(CO)NH2和NR6(CO)NHR6。这些4-氨基衍生物(中间体B)用合适 的试剂(例如氯甲酸酯或酰胺)处理以制备最终产物。

中间体B
中间体B1：4-氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
将10g中间体A1和200ml NH3(32％)水溶液在压热器中混合并 加热至130℃8小时。反应混合物用200ml水稀释。析出的反应产物 经分离后用水和二氯甲烷洗涤，并减压干燥。
产量：8.5g
熔点：219-221℃
实施例62：8-甲氧基-4-甲氧基羰基氨基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
1.4g中间体B1与20ml二氯甲烷、5ml甲醇和1ml三乙胺一起 进行搅拌。在0℃下，慢慢加入0.6g氯甲酸甲酯的10ml二氯甲烷溶 液。将混合物在0℃下搅拌2小时。然后将溶液加热回流10小时。溶 液用30ml饱和NaHCO3溶液和30ml水洗涤。除去溶剂，粗产物用 制备型HPLC纯化。
产量：0.22g
熔点：137-138℃
采用与上述实施例62所述相同的合成路线和反应条件制备的其 它实施例化合物如下：
实施例63：4-乙氧基羰基氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
产量：0.3g
熔点：122-124℃
实施例64：4-(N，N-双-甲氧基羰基-)氨基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑 并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
产量：0.45g
熔点：137-138℃
实施例65：8-甲氧基-4-(甲氧基羰基-甲基-氨基)-3-甲基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
产量：0.04g
熔点：105-109℃
实施例66：8-甲氧基-3-甲基-4-(3-甲基-脲基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
543mg中间体B1和960mg N，N′-羰基二咪唑与20ml四氢呋喃 一起在回流下搅拌3小时。在室温下，慢慢加入3ml40％甲胺溶液。 将溶液加热回流30分钟。减压除去溶剂后，残余物用50ml二氯甲烷 和2 x 25ml水萃取。除去有机层。粗产物用制备型HPLC纯化。
产量：0.4g
熔点：178-181℃
采用与上述实施例66所述相同的合成路线和反应条件制备的其 它实施例化合物如下：
实施例67：8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4-脲基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪
产量：0.5g
熔点：185-187℃
实施例68：8-甲氧基-3-甲基-4-(3-异丙基-脲基)-1-丙基-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
产量：0.3g
熔点：165-166℃
优选按照WO 99/45009中的方法，用NH3或烷基胺(例如C1-5烷 基胺)处理式(IV)中间体形成相应的4-氨基衍生物，来制备式(II)化合 物，其中m和n为0，A与N之间的化学键为双键，R3为NH-SO2R6、 N(SO2R6)2、N(R6)(SO2R6)、NHSO2R7、N(SO2R7)2和N(R8)SO2R7，其 中R6、R7和R8如上定义。这些4-氨基衍生物(中间体B)用磺酰氯或形 成最终的氨磺酰的酐处理。
实施例69：8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪
将10g中间体B1与350ml甲苯和14g甲磺酸酐混合。将混合 物加热回流1小时。此时在70℃下加入16ml三乙胺。然后将混合物 搅拌1小时。加入100ml水。产物析出，过滤后用3 x 80ml水和3 x 80ml甲苯洗涤。产物从甲苯中结晶出来。
产量：9g
熔点：243-246℃
采用与上述实施例46所述相同的合成路线和反应条件制备的其 它实施例化合物如下：


实施例85：3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪-8-醇氢溴酸盐
将3g8-甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡 啶并[3，2-e]吡嗪(实施例69)悬浮于150ml二氯甲烷中。在0-5℃下滴 加3.3g三溴化硼(bortribromide)后，在0-5℃下搅拌30分钟，在室温 下搅拌30分钟，再在30℃下搅拌2小时。将反应混合物慢慢加到10g 碳酸钠的100ml水溶液中。在搅拌和恒定的pH>7(加入10％碳酸钾 溶液)下，滤出沉淀物，用水洗涤，干燥后用乙醇重结晶。
产量：0.5g
熔点：302-306℃
实施例86：3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e] 吡嗪-8-醇
可按照实施例85的方法但无需在30℃下搅拌2小时，来制备实 施例86。
产量：0.5g
熔点：295-297℃
实施例87：8-二氟甲氧基-3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
将4.98g3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪-8-醇(实施例86)和1.6g氢氧化钠溶于20ml二甲基甲酰胺。 搅拌10分钟后，滴加1.85ml氯二氟乙酸。搅拌下将混合物在150℃ 浴温下加热5小时。冷却后，产物用乙酸乙酯(200ml，300ml)萃取， 合并的有机相用水(2 x 100ml)洗涤，有机相经硫酸钠干燥，过滤后蒸 发至干。
所得残余物用制备型色谱法分离(硅胶，二氯甲烷/甲醇＝9/1，体 积/体积)。
产量：0.66g
熔点：210-214℃
实施例88：8-环丙基甲氧基-3-甲基-1-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并 [1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
将0.83g3-甲基-4-甲磺酰基氨基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪-8-醇(实施例86)溶于20ml二甲基甲酰胺。加入1.14g碳 酸铯后滴加0.44ml环丙基溴。搅拌下将混合物在60℃下加热1小时 后，在130℃浴温下加热3小时。冷却后，产物用乙酸乙酯(2 x 50ml) 和水(2 x 50ml)萃取，有机相经硫酸钠干燥，过滤后蒸发至干。所得 残余物用制备型色谱法分离(硅胶，二氯甲烷/甲醇＝95/5，体积/体积)。
产量：0.26g
熔点：212-216℃
式(IV)中间体例如在催化剂(例如钯)存在下用氢还原，来制备式 (II)化合物，其中m＝1，n为0，A与N之间的化学键为单键，R5为 氢。
实施例89：3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并[3，2-e]吡嗪
将6g中间体A12悬浮于200ml乙醇中。加入3ml三乙胺和3g 钯催化剂。压热器用作反应容器。将氢加压至压力20巴。此时将混 合物在70℃下搅拌4小时。过滤后除去溶剂。将粗产物溶于100ml 二氯甲烷。该溶液用50ml水洗涤。除去溶剂从而分离出纯的产物。
产量：4.5g
熔点：169-172℃
采用与实施例89所述相同的合成路线和反应条件制备的其它实 施例化合物如下：

  实施例 R1 R2 R4 R5 m.p.[℃] 89 -C3H7 -CH3 -H -H 169-172 90 -C3H7 -H -OCH3 -H 45-49 91 -C3H7 -CH3 -OCH3 -H 157-160 92 -C3H7 -CH3 -OCH3 -H x HCl 228-231 93 -C2H5 -CH3 -OCH3 -H 139-142
例如在阮内镍(Raney-Nickel)和氢存在下，式(II)化合物(其中m＝ 1，n为0，A与N之间的化学键为单键，R5为氢)用C1-5烷基醛处理， 来制备式(II)化合物，其中m＝1，n为0，A与N之间的化学键为单 键，R5为C1-5烷基。
实施例94：3，5-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪
将1g8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪(实施例91)悬浮于70ml甲醇中。加入1ml甲醛和0.5g阮 内镍。压热器用作反应容器。将氢加压至压力20巴。此时将混合物 在45℃下搅拌8小时。过滤后馏出溶剂。
产量：0.97g
熔点：113-116℃
式(II)化合物(其中m＝1，n为0，A与N之间的化学键为单键， R5为氢)用烷基酰氯或酐处理，来制备式(II)化合物，其中m＝1，n为 0，A与N之间的化学键为单键，R5为-(C＝O)-C1-5烷基。
实施例95：5-乙酰基-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a] 吡啶并[3，2-e]吡嗪
将1g8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-4，5-二氢-咪唑并[1，5-a]吡啶并 [3，2-e]吡嗪(实施例91)悬浮于25ml二氯甲烷中。加入0.8g三乙胺。 在0℃下加入0.4g乙酰氯的5ml二氯甲烷溶液。将混合物在室温下 搅拌2小时。加入25ml水。分离有机层。馏出溶剂。
产量：1g
熔点：114-116℃
优选的化合物(实施例38/39)的合成见以下流程中的所有步骤：
步骤1：6-甲氧基-2-(4-甲基-2-丙基-咪唑-1-基)-3-硝基-吡啶
在5℃的反应温度下，向由20.0g KOH(固体)、25.8g4-甲基-2- 丙基咪唑和130ml二甲基甲酰胺制备的悬浮液中分批加入38.0g2- 氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶。将反应混合物在室温下搅拌75分钟。然后 将反应混合物倒入600ml水中。再次搅拌混合物1小时。期间所需产 物析出。经过滤收集所得固体，用100ml水洗涤三次后，在干燥箱中 真空干燥(40℃)。
产量：40g
熔点：96-103℃
步骤2：3-氨基-6-甲氧基-2-(4-甲基-2-丙基-咪唑-1-基)-吡啶
向由138.2g6-甲氧基-2-(4-甲基-2-丙基-咪唑-1-基)-3-硝基-吡啶 和900ml乙醇制备的溶液中加入4g钯/活性炭。将反应混合物加热至 40℃后在压力(10-15巴)下氢化。在室温下，滤出催化剂后蒸发滤液。 向固体残余物中加入150ml甲基叔丁基醚(MTBE)。搅拌30分钟后， 产物经过滤收集，用50ml MTBE洗涤两次后，在干燥箱中真空干燥 (40℃)。
产量：100g
熔点：124-128℃
步骤3：8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]-吡啶并[3，2-e]-吡嗪酮
将20g 3-氨基-6-甲氧基-2-(4-甲基-2-丙基-咪唑-1-基)-吡啶和60g 尿素的混合物加热至160℃。将反应混合物搅拌2小时。然后加入10ml 冰醋酸。再继续搅拌6小时。使反应混合物冷却。在70℃温度下加入 300ml水，将混合物在50℃下搅拌1小时。将热的混合物过滤，用 50ml水洗涤两次后，在干燥箱中干燥。
产量：20.5g
熔点：297-300℃
步骤4：4-氯-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]-吡啶并[3，2-e]-吡 嗪
将27g8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]-吡啶并[3，2-e]-吡嗪 酮和225ml三氯氧化磷的混合物加热回流8小时。向冷却的混合物中 加入250ml甲苯后，馏出350ml液体。随后用150ml甲苯进行同一 程序，只是馏出250ml液体。使反应混合物在室温下冷却，然后倒入 500g冰/500ml水的混合物中。30分钟后，混合物用250ml二氯甲烷 萃取两次。二氯甲烷层然后依次用500ml水、碳酸钠(3％的水溶液) 和500ml水洗涤。有机层用硫酸钠干燥。除去硫酸钠后，蒸发二氯甲 烷，将粗产物在干燥箱中真空干燥(40℃)。
产量：26.5g
熔点：119-123℃
步骤5：3，4-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]-吡啶并[3，2-e]-吡嗪 (实施例38)
向由20g4-氯-8-甲氧基-3-甲基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]-吡啶并 [3，2-e]-吡嗪(中间体3)和400ml四氢呋喃制备的溶液中滴加80ml甲 基溴化镁(3M的乙醚溶液)(历时2小时)。将反应混合物在室温下搅 拌6小时。之后，将混合物倒入含有100g冰和10g氯化铵的300g 水的混合物中。混合物用300ml二氯甲烷萃取四次。分离有机层后， 用硫酸钠干燥。除去硫酸钠后，蒸发二氯甲烷，得到黄橙色粗产物。 将该残余物在150ml乙醚中搅拌。1小时后，滤出产物并在干燥箱中 干燥。产量为11.9g粗产物(含量>95％)。
向0.05mol粗产物和100ml二氯甲烷的溶液中加入2.5当量溶于 100ml水的盐酸。将混合物剧烈搅拌。然后分离出二氯甲烷层后，水 层用100ml二氯甲烷萃取6次。向有机层中加入15g碳酸钠。过滤 固体沉淀物后，蒸发二氯甲烷，得到黄色结晶。
产量：18.6g
熔点：91-92.5℃
步骤6：3，4-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-咪唑并[1，5-a]-吡啶并[3，2-e]-吡嗪 盐酸盐(实施例39)
向13.52g纯的3，4-二甲基-8-甲氧基-1-丙基-咪唑并-[1，5-a]-吡啶 并[3，2-e]-吡嗪和100ml二氯甲烷的溶液中加入2.5当量溶于100ml 水的盐酸。将混合物剧烈搅拌。然后分离出二氯甲烷层后，水层用 100ml二氯甲烷萃取6次。蒸发二氯甲烷，得到黄色结晶(收率85％； 黄色结晶；熔点171-175℃)。
产量：13.05g
熔点：171-175℃
预料不到的是，式(II)化合物是有效的酶PDE10抑制剂。如果某 种物质抑制PDE10的IC50<10μM，优选<1μM，则认为该物质有效 地抑制PDE10。
PDE10的制备和表征
分别测定了大鼠、猪和豚鼠纹状体制备物中磷酸二酯酶同工酶10 (PDE10)的活性。分别从雄性Wistar大鼠(180-200g)、雄性杂交猪(150 kg)和雄性豚鼠(CRL(HA)，500g)采集纹状体并在-70℃下冷冻。
对所制备的含有PDE10催化结构域的脑区基因区段进行了扩增 和测序。因此，按照RNeasy试剂盒(Qiagen；Hilden；Germany)的说 明书，从不同动物冷冻的纹状体中分离出RNA，并采用RT-PCR的第 一链cDNA合成试剂盒所提供的寡核苷酸引物(Oligo-Primer)(Roche； Mannheim；Germany)转录成cDNA。这些cDNA用作PCR反应的模 板以扩增PDE10的催化结构域。对于PCR反应，使用Taq-聚合酶 (Promega；Mannheim；Germany)。因此，通过pCR2.1载体(Invitrogen； Karlsruhe；Germany)的TA-克隆，可直接克隆出扩增产物。对于猪和 豚鼠，将克隆载体转化至大肠杆菌(E.coli)(XL-2)中，在细胞内复制， 制备并且证实含有用于测定的基因序列。
下列引物用于PCR反应：
P1：tgcatctacagggttaccatggagaa        (SEQ ID NO：1)
P2：tatccctgcaggccttcagcagaggctct     (SEQ ID NO：2)
P3：ttcacatggatatgcgacggtaccttct      (SEQ ID NO：3)
P4：Ctgtgaagaagaactatcggcgggttcctta   (SEQ ID NO：4)
对于猪，用P1和P2作引物获得成功。并对下列序列(SEQ ID NO：5) 进行了鉴定：
tgcatctacagggttaccatggagaagctgtcctaccacagcatttgtaccgcggaagagtggcaaggcc
tcatgcgcttcaaccttcccgtccgtctttgcaaggagattgaattgttccacttcgacattggtccttttgaaaa
catgtggcctggaatctttgtctatatggttcatcgcttctgtgggacggcctgctttgagcttgaaaagctgtgt
cgttttatcatgtctgtgaagaagaactatcgtcgggttccttaccacaactggaagcacgcggtcacggtg
gcacactgcatgtacgccatcctccagaacagccacgggctcttcaccgacctcgagcgcaaaggact
gctaatcgcgtgtctgtgccacgacctggaccacaggggcttcagcaacagctacctgcagaaattcgac
caccccctggccgctctctactccacgcccaccatggagcagcaccacttctcccagaccgtgtccatcct
ccagttggaagggcacaacatcttctccaccctgagctccagtgagtacgagcaggtgcttgagatcatc
cgcaaagccatcattgccacagacctcgctttgtactttggaaacaggaaacagttggaggagatgtacc
agaccggatcgctaaaccttaataaccagtcacatagagaccgcgtcattggtttgatgatgactgcctgt
gatctctgttccgtgacaaaactgtggccagtaacaaaactgacggcaaatgatatatatgcggaattctg
ggccgagggcgatgaggtgaagaagctgggaatacagcctattcccatgatggacagagacaagaa
ggacgaagtcccacaaggccagctcggattctacaacgcggtagctatcccctgctacaccaccctcac
ccagatcttcccgcccacagagcctcttctgaaggcctgcagggata
对于豚鼠，用P4和P2以及P2和P3作引物获得成功。
用P4和P2对下列序列(SEQ ID NO：6)进行了鉴定：
ctgtgaagaagaactatcggcgggttccttaccacaactggaagcatgcagtcacggtggcgcactgcat
gtacgccatacttcaaaacaacaatggcctcttcacagaccttgagcgcaaaggcctgctaattgcctgtct
gtgccatgacctggaccacaggggcttcagtaacagctacctgcagaaattcgaccaccccctggctgc
gttgtactccacctccaccatggagcaacaccacttctcccagacggtgttcatcctccagctggaaggac
acaacatcttctccaccctgagctccagcgagtacgagcaggtgctggagatcatccgcaaagccatcat
cgccactgacctcgcactgtactttgggaacaggaagcagttggaggagatgtaccagacagggtcgct
gaacctcaataaccagtcccatcgagaccgcgtcatcggcttgatgatgactgcctgcgatctttgctctgtg
acgaaactatggccagttacaaaattgacagcaaatgatatatatgcagagttctgggctgagggggatg
agatgaagaagttggggatacagcccatccctatgatggacagagacaagaaggatgaagtccctcaa
ggacagcttggattctacaatgctgtggccatcccctgctataccaccctgacgcagatcctcccacccac
agagcctctgctgaaggcctgcagggata
用P2和P3对下列序列(SEQ ID NO：7)进行了鉴定：
tagagcctctgctgaaggcctgcagggataacctcaatcagtgggagaaggtaattcgaggggaagag
acagcaatgtggatttcaggcccagcaactagcaaaagcacatcagggaagccgaccaggaaggtc
gatgactgatcctgaggtgatgtctgcctagcaactgactcaacctgcttctgtgacttcgttctttttatttttattt
ttttaacggggtgaaaacctctctcagaaggtaccgtcgcatatccatgtgaa
序列的比对显示大鼠(已公布的基因编号NM_022236 3437bp；编 码序列：281-2665；催化结构域1634-2665)与豚鼠之间几乎完全一致。 在大鼠与猪之间检测出较大差异。只采用了编码区比对。基因比对见 图3。
这就出现了催化结构域中蛋白质序列的下列差异，见有关蛋白质 比对(图4)。
对于PDE10活性的酶试验，将0.5g分离后冷冻的纹状体在10ml 50mM Tris/Mg缓冲液中于4℃匀浆，按100000g离心1小时。上清 液被称为胞质部分，取出并保存在冰上。将沉淀悬浮于部分中，取出 保存在冰上。将沉淀悬浮于除含有1％曲通(Triton)以外其它相同的缓 冲液中，在4℃下保温45分钟。将两个部分分别加到的 5ml Hi TrapTM QHP柱上。在4℃下洗柱后，对于胞质部分，结合PDE 蛋白用递增的氯化钠梯度(0mM-500mM氯化钠)的50mM Tris/Mg缓 冲液洗脱，对于膜部分则存在1％曲通(Triton)。洗脱后将收集的部分 用100nM[3H]-CAMP在特异性PDE抑制剂存在或不存在时测定 PDE10活性，预期在某一浓度下达100％抑制。合并具有PDE10活性 的部分，等分后在-20℃下冷冻备用。
从FPLC合并的部分用蛋白质印迹法进一步表征。结果表明，含 有PDE10A的合并部分含有大量的其它细胞蛋白质。然而，用特异性 抗体通过蛋白质印迹法清楚地检测到PDE10(图1)。
结果证明该蛋白质存在于大鼠、猪和豚鼠的纹状体制备物中。该 蛋白质的主要部分则存在于膜部分(图2)。
PDE10的抑制
在微量滴定板中用一步方法测定PDE10活性。100μl反应混合物 含有50mM Tris-HCl/5mM MgCl2缓冲液(pH＝7.4)(Sigma， Deisenhofen，Germany；Merck，Darmstadt，Germany)、0.1μM[3H]-cAMP (Amersham，Buckinghamshire，UK)和酶。在不含酶时测定了非特异 性活性。通过加入底物溶液开始反应，反应在37℃下进行30分钟。 加入25μl YSi-SPA微珠(Amersham-Pharmacia)终止酶活性。1小时后， 用液体闪烁计数器测量微量滴定板(Microbeta Trilux)中的混合物。使 用机器人Biomek(Fa.Beckman)吸取经过保温的混合物。纹状体，对 于猪纹状体和豚鼠纹状体分别为88nM和66.7nM。cGMP是PDE10 的第二底物，对于来自这些物种的PDE10，其Km值分别为1800nM、 2200nM和1700nM。对于cGMP试验，使用500nM底物。分别在 化合物试验使用酶之前，测定了实验中酶的最佳量，并使各个酶制备 物和底物最优化。为了测定IC50值，使用希尔图(Hill-plot)、2参数模 型。其它PDE亚型的特异性抑制剂不会显著抑制PDE10制备物。罂 粟碱用作最常用的PDE10抑制剂，对于大鼠、猪和豚鼠纹状体的 PDE10，抑制PDE10的IC50值分别为142nM、110nM和77nM。
  实施例 大鼠PDE10的抑制 IC50[μM] 35 0.061 38 0.112 62 0.035 63 0.563 69 0.011 70 0.072 91 0.159 95 0.335
  实施例 猪PDE10的抑制 IC50[μM] 1 0.010 29 0.013 30 0.020 31 0.171 35 0.040 38 0.006 39 0.005 40 0.024 41 0.118 42 0.059
  43 0.035 44 0.003 45 0.053 46 0.049 47 0.006 48 0.007 49 0.001 52 0.053 53 0.043 54 0.018 55 0.014 57 0.011 58 0.002 59 0.011 60 0.023 62 0.006 63 0.189 65 0.559 66 0.752 67 0.083 68 0.141 69 0.005 71 0.126 72 0.088 73 0.019 75 0.078 79 0.011 80 0.037 84 0.025 85 0.013 86 0.023 87 0.015 91 0.108 95 0.222
  实施例 豚鼠PDE10的抑制 IC50[μM] 29 0.018 30 0.051 38 0.019 47 0.015 58 0.004 62 0.026 69 0.011
式II化合物显示出对MK-801诱发的精神病动物模型的机能亢进 和刻板嗅探(stereotyped sniffing)的抗精神病作用。
试验方法：
对于MK-801诱发的精神病，使用体重为150-180g的雌性Wistar 大鼠(Crl：(W1)BR，Charles River，Sulzfeld，Germany)。动物按每组 5只关养在标准条件下，12小时光/暗周期(0600时开灯)，自由进食 (Pellets，ssniff M/R15， GmbH，Soest/Westfalen)和饮水。
MK-801(地佐环平，MW337.37)获自Tocris，由Biotrend Chemikalien GmbH，，Germany分销。
给药时间表/剂量：
  物质 剂量[mg/kg] 预处理[分钟] 应用次数[n] 给药途径 MK-801 0.1 10 1 腹膜内 实施例91 15，30 30 1 腹膜内 实施例35 10，30 30 1 口服 实施例95 10，30 30 1 口服 实施例62 2.5，5.0 30 1 口服 实施例38 1.0，2.5，5.0 30 1 口服 实施例69 1.0，2.5，5.0 30 1 口服 实施例29 2.5，5.0，7.5，10 30 1 口服 实施例47 5.0，7.5，10 30 1 口服 实施例30 5.0，10，15，20 60 1 口服 实施例55 10，30 30 1 口服
化合物的制备：
将化合物新鲜悬浮于0.5％羟乙基纤维素中，从而达到每种物质 0.5ml/100g的给药体积和剂量。将羟乙基纤维素溶解于蒸馏水中。
将MK-801溶于盐水从而达到0.5ml/100g的给药体积。在给药 方法之前和给药期间，将悬浮液和溶液置于磁力搅拌器中。
由NMDA拮抗剂MK-801诱导的行为一般公认为是大鼠模型的 精神病。腹膜内给药后，MK-801诱发大鼠的刻板嗅探、机能亢进和 共济失调。
用MotiTest仪器(TSE，Bad Homburg，Germany)记录了大鼠的自 主活动。试验区包括一正方形活动台(45 x 45cm)，周围是保护性有机 玻璃墙壁(20cm高)，大鼠可在其中自由运动。用沿活动台各墙壁底部 安装的32支红外光电管记录了水平运动。通过计算机程序“ActiMot” (TSE，Bad Homburg，Germany)测定活性[秒钟]。
按照Andiné等人(1999)所述方法，由实验人员在1小时内每5分 钟(12次间隔)对刻板嗅探进行了评分。在记录时间结束时，将12次间 隔的评分相加。
  评分 刻板嗅探 0 无刻板嗅探 1 不连续嗅探(自由间隔>5秒钟) 2 连续嗅探
实验当天，将雌性大鼠置于实验室，在试验前适当时间给予试验 化合物或溶媒。在试验之前10分钟腹膜内给予MK-8010.1mg/kg。
在试验开始时，将大鼠放在MotiTest仪器的正方形活动台中央。 记录1小时内大鼠的行为。每一轮后，取出动物，彻底清洁实验箱并 干燥。
统计结果：
结果用单因素方差(ANOVA)进行了分析。Tukey检验用于各个比 较。P<0.05视为显著。
结果：
结果见图5、图6、图7和图8。
图5表示实施例91、35、95和55的化合物对MK-801诱发的精 神病的作用。
在试验前10分钟经腹膜内给予0.1mg/kg MK-801。按上述剂量 在试验前30分钟给予化合物。记录了1小时内的活动和刻板嗅探。 Cs＝用MK-801刺激的对照。对MK-801刺激的对照(＝Cs)的显著性： *p<0.05，***p<0.001。
图6表示实施例38和47的化合物对MK-801诱发的精神病的作 用。
在试验前10分钟经腹膜内给予0.1mg/kg MK-801。在试验前30 分钟给予上述剂量的化合物。记录了1小时内的活动和刻板嗅探。Co ＝无MK-801刺激的对照。Cs＝用MK-801刺激的对照。对无刺激对 照(Co)的显著性：##p<0.01，###p<0.001。对MK-801刺激对照(Cs) 的显著性：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图7表示实施例62和69的化合物对MK-801诱发的精神病的作 用。
在试验前10分钟经腹膜内给予0.1mg/kg MK-801。在试验前30 分钟给予上述剂量的化合物。记录1小时内的活动和刻板嗅探。Co＝ 无MK-801刺激的对照。Cs＝用MK-801刺激的对照。对无刺激对照 (Co)的显著性：##p<0.01，###p<0.001。对MK-801刺激对照(Cs)的 显著性：*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001。
图8表示实施例29和30的化合物对MK-801诱发的精神病的作 用。
在试验前10分钟经腹膜内给予0.1mg/kg MK-801。在试验前30 分钟给予上述剂量的化合物。记录1小时内的活动和刻板嗅探。Co＝ 无MK-801刺激的对照。Cs＝用MK-801刺激的对照。对无刺激对照 (Co)的显著性：##p<0.01，###p<0.001。对MK-801刺激对照(Cs)的 显著性：*p<0.05，***p<0.001。
实施例91的化合物自腹膜内15mg/kg起开始显著减轻MK-801 诱发的机能亢进和刻板嗅探。口服30mg/kg的实施例95和55化合物 显著逆转MK-801诱发的机能亢进和刻板嗅探。实施例35在30mg/kg 显著逆转MK-801诱发的机能亢进，自口服30mg/kg起开始显著逆转 刻板嗅探。实施例30的化合物自口服10mg/kg起开始显著逆转 MK-801诱发的机能亢进和刻板嗅探。实施例47的化合物自口服 7.5mg/kg起开始显著逆转MK-801诱发的机能亢进和刻板嗅探。实施 例29自7.5mg/kg起开始显著逆转MK-801诱发的机能亢进，并且自 口服5mg/kg起开始显著逆转刻板嗅探。实施例62的化合物自口服 5mg/kg起显著逆转MK-801诱发的机能亢进和刻板嗅探。实施例38 和69的化合物自5.0mg/kg起开始显著逆转MK-801诱发的机能亢进， 并自口服2.5mg/kg起开始显著逆转刻板嗅探。实验结果为化合物的 抗精神病潜力提供了证据。

参考文献
1.Abi-Saab WM，D′Souza DC，Moghaddam B和Krystal JH(1998).The NMDA anatgonist model for schizophrenia：promise and pitfalls(精神分裂症的NMDA 拮抗剂模型的前途与缺点).Pharmacopsychiatry 31，增刊2：104-109。
2.Capuano B，Crosby IT，Lloyd EJ(2002).Schizophrenia：genesis，receptorology and current therapeutics(精神分裂症的发生、受体学与最新治疗药).Curr Med Chem 9：521-548。
3.Castner SA，Williams GV和Goldman-Rakic PS(2000).Reversal of antipsychotic-induced working memory deficits by short-term dopamine D1 receptor stimulation(抗精神病药诱发的工作记忆缺陷通过短期多巴胺D1受 体刺激而逆转).Science 287：2020-2022。
4.Essayan DM(2001).Cyclic nucleotide phosphodiesterases(环状核苷酸磷酸二 酯酶).JAllergy ClinImmunol 108：671-680。
5.Garver DL，Johnson C，Kanter DR(1982).Schizophrenia and reduced cyclic AMP production：evidence for the role of receptor-linked events(精神分裂症与 cAMP产生减少：受体关联事件作用的证据).Life Sci 31：1987-1992。
6.Gattaz WF，Cramer H，Beckmann H(1984).Haloperidol increases the cerebrospinal fluid concentrations of cyclic GMP in schizophrenic patients(氟 哌啶醇增加精神分裂症患者的脑脊液cGMP浓度).Biol Psychiatry 19： 1229-1235。
7.Jentsch JD，Roth RH(1999).The neuropsychopharmacology of phencyclidine： from NMDA receptor hypofunction to the dopamine hypothesis of schizophrenia(苯环利定的神经精神药理学：从NMDA受体功能减退到精神 分裂症的多巴胺假设).Neuropsychopharmacology 20：201-225。
8.Kaiya H(1992).Second messenger imbalance hypothesis of schizophrenia(精 神分裂症的第二信使失调假设).Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids 46： 33-38。
9.Kostowski W，Gajewska S，Bidzinski A，Hauptman M(1976).Papaverine， drug-induced stereotypy and catalepsy and biogenic amines in the brain of the rat(罂粟碱、药物诱发的刻板症和僵住症与大鼠脑的生物胺).Pharmacol Biochem Behav 5：15-17。
10.Kotera J，Fujishige K，Yuasa K，Omori K(1999).Characterization and phosphorylation of PDE10A2，a novel alternative splice variant of human phosphodiesterase that hydrolyzes cAMP and cGMP(水解cAMP和cGMP的人 磷酸二酯酶的新的替代剪接变体PDE10A2的表征与磷酸化)。Biochem Biophys Res Commun 261.551-557。
11.Lahti AC，Weiler MA，Tamara Michaelidis BA，Parwani A，Tamminga CA (2001).Effects of ketamine in normal and schizophrenic volunteers(氯胺酮对 正常和精神分裂症志愿者的影响).Neuropsychopharmacology 25：455-467。
12.Lapiz MD，Fulford A，Muchimapura S，Mason R，Parker T，Marsden CA(2003). Influence of postweaning social isolation in the rat on brain development， conditioned behavior，and neurotransmission(断奶后社交隔离对大鼠脑发育、 条件性行为和神经传递的影响).Neurosci Behav Physiol 33：13-29。
13.Leveque JC，Macias W，Rajadhyaksha A，Carlson RR，Barczak A，Kang S，Li XM，Coyle JT，Huganir RL，Heckers S，Konradi C (2000). Intracellular modulation of NMDA receptor function by antipsychotic drugs(由 抗精神病药物对NMDA受体功能的胞内调节).J Neurosci 20：4011-4020。
14.Lindenmayer JP，Czobor P，Volavka J，Lieberman JA，Citrome L，Sheitman B， Chakos，M，McEvoy JP(2002).Olanzapine in refractory schizophrenia after failure of typical or atypical antipsychotic treatment：an open-label switch study (难治性精神分裂症在典型或非典型抗精神病治疗失败后转用奥氮平的开放 标记转换研究).J Clin Psychiatry 63：931-935。
15.Menniti FS，Strick CA，Seger TF，Ryan AM(2001). Immunohistochemical localisation of PDE10A in the rat brain(大鼠脑中 PDE10A的免疫组织化学定位).William Harvey Research Conference，Porto， 12月6-8日。
16.Millan MJ(2003).The neurobiology and control of anxious states(神经生物学 与焦虑状态的控制).Prog Neurobiol 70：83-244。
17.Muly C(2002).Signal transduction abnormalities in schizophrenia：the cAMP system(精神分裂症中的信号转导异常：cAMP系统).Psychopharmacol Bull 36：92-105。
18.Nyberg S，Olsson H，Nilsson U，Maehlum E，Halldin C，Farde L(2002).Low striatal and extra-striatal D2 receptor occupancy during treatment with the atypical antipsychotic sertindole(非典型抗精神病药舍吲哚治疗期间纹状体 下和纹状体外D2受体占用率).Psychopharmacology 162：37-41。
19.Rodefer JS，Murphy ER，Baxter MG(2005).PDE10A inhibition reverses subchronic PCP-induced deficits in attentional set-shifting in rats(PDE10A抑制 逆转大鼠注意力定势转移中亚慢性PCP诱导的缺陷).Eur.J Neurosci 21： 1070-1076。
20.Sawaguchi，T(2000).The role of D1-dopamine receptors in working memory-guided movements mediated by frontal cortical areas(D1多巴 胺受体在由额皮质区介导的工作记忆指导的运动中的作用).Parkinsonism Relat Disord 7：9-19。
21.Soderling SH，Bayuga SJ，Beavo JA(1999).Isolation and characterization of a dual-substrate phosphodiesterase gene family：PDE10A(双底物磷酸二酯酶基 因家族PDE10A的分离与表征)，Proc NatlAcad USA 96(12)：7071-7076。
22.Soderling，S.H.和Beavo，J.A.(2000).Regulation of cAMP and cGMP signaling： new phosphodiesterases and new functions(cAMP和cGMP信号转导的调节： 新的磷酸二酯酶和新的功能).Curr.Opin.Cell Biol 12：174-179。
23.Xie Z，Adamowicz WO，Eldred WD，Jakowski AB，Kleiman RJ，Morton DG， Stephenson DT，Strick CA，Williams RD，Menniti FS(2006).Cellular and subcellular localization of PDE10A，a striatum-enriched phosphodiesterase (PDE10A在富集磷酸二酯酶的纹状体中的细胞定位与亚细胞定位). Neuroscience 139：597-607。
序列表
<110>埃尔比昂有限责任公司(ELBION GMBH)
<120>吡啶并[3，2-e]吡嗪类化合物及其作为磷酸二酯酶10抑制剂的用途和制备方法
<130>38035P WO
<140>PCT/EP 2007/004748
<141>2007-05-29
<150>US 60/809,242
<151>2006-05-30
<160>7
<170>PatentIn version 3.3
<210>1
<211>26
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物P1
<220>
<221>引物_结合
<222>(1)..(26)
<400>1

<210>2
<211>29
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物P2
<220>
<221>引物_结合
<222>(1)..(29)
<400>2

<210>3
<211>28
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物P3
<220>
<221>引物_结合
<222>(1)..(28)
<400>3

<210>4
<211>31
<212>DNA
<213>人工序列
<220>
<223>引物P4
<220>
<221>引物_结合
<222>(1)..(31)
<400>4

<210>5
<211>967
<212>DNA
<213>小型猪(Sus scrofa)
<220>
<221>其他特征
<222>(1)..(967)
<223>猪：用P1和P2引发
<400>5

<210>6
<211>732
<212>DNA
<213>猪(Sus sp.)
<220>
<221>其他特征
<222>(1)..(732)
<223>豚鼠：用P4和P2引发
<400>6

<210>7
<211>266
<212>DNA
<213>猪(Sus sp.)
<220>
<221>其他特征
<222>(1)..(266)
<223>豚鼠：用P2和P3引发
<400>7