吡啶类和嘧啶类物质及其用途
阅读：138发布：2021-02-09
专利汇可以提供吡啶类和嘧啶类物质及其用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本公开提供式I的吡啶类和嘧啶类物质及其药学上可接受的盐和 溶剂 化物：其中A、G、W1、W2、W3和R5定义如 说明书 中所述。本公开还提供式I的化合物及其药学上可接受的盐和 溶剂化物 的用途。在某些实施方案中，本公开的化合物适用于 治疗 疼痛 。在另一实施方案中，本公开的化合物适用于治疗对钠通道的阻断有反应的病症或者缓解所述病症的症状。，下面是吡啶类和嘧啶类物质及其用途专利的具体信息内容。
1.一种式I的化合物：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
其中：
G选自氰基、二羟烷基、-C(＝O)E、CH(OH)CH(OH)C(＝O)E和-CH(OH)C(＝O)E；
E选自氢、羟基、烷氧基、二羟烷基和-NR1aR1b；
R1a选自氢、烷基、芳烷基、(杂环)烷基、(杂芳基)烷基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(羧酰胺基)烷基、(氰基)烷基、烷氧基烷基、羟烷基和杂烷基；
R1b选自氢和烷基；或者
R1a和R1b与它们所附接的氮原子合起来形成3至8元任选取代的杂环基；
W1、W2和W3各自独立地选自N和CR2；前提条件是W1、W2和W3中的至少一者是N；
R2选自氢、卤基和烷基；
A选自：
R3a选自氢、烷基、杂烷基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(烷氧基)烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、羧酰胺基、任选取代的烷基羰基、任选取代的(烷氧基)羰基和-SO2R6c；
R3b选自任选取代的芳基、任选取代的芳烷基和任选取代的杂芳基；
R3c选自氢和羟基；
前提条件是当R3c是羟基时，则 是单键；
Z1选自-(C＝O)-(CH2)k-、-(CH2)m-、-(CH2)n-O-(CH2)o-和-(CH2)p-N(R4)-(CH2)q-；
k是1、2或3；
m是2、3、4、5或6；
n是2、3或4；
o是0、1或2；
p是2、3或4；
q是0、1或2
Z2选自-(CH2)r-和-(CH2)s-Y1-；
Y1选自-NR11和O；
r是1、2或3；
s是1、2或3；
是单或双键；
R4选自氢、烷基、烯基、炔基、羟烷基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、任选取代的芳烷基、任选取代的(杂芳基)烷基、任选取代的(环烷基)烷基、(氰基)烷基、(羧酰胺基)烷基、-COR6a和SO2R6b；
R6a选自烷基、烷氧基、羟烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、氨基、烷氨基、二烷氨基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基和(二烷氨基)烷基；
R6b选自烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；
6c
R 选自烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；
R5选自氢、卤基、烷基、羟烷基、氰基、杂环基和-X-R7；
X选自-O-、-NR8a-和-(CH2)t-Y2-；
Y2选自-O-和-NR8b-；
t是1、2、3或4；
R7选自氢、烷基、羟烷基、
R8a选自氢和烷基；
8b
R 选自氢和烷基；或者
R8b和R7与它们所附接的氮原子合起来形成3至8元任选取代的杂环基；
R9选自氢、烷基和羟烷基；
R10a和R10b独立地选自氢和烷基；或者
10a 10b
R 和R 与它们所附接的氮原子合起来形成3至8元任选取代的杂环基；且
R11选自氢和烷基。
2.如权利要求1所述的化合物，其具有式II：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
3.如权利要求2所述的化合物，其中Z1是-(CH2)m-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
4.如权利要求2所述的化合物，其中Z1是-(C＝O)-(CH2)k-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
5.如权利要求2所述的化合物，其中Z1是-(CH2)n-O-(CH2)o-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
6.如权利要求2所述的化合物，其中Z1是-(CH2)p-N(R4)-(CH2)q-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
7.如权利要求2所述的化合物，其中：
选自：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
8.如权利要求6或7所述的化合物，其中 是A-6，且R4选自-COR6a和-
SO2R6b，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
9.如权利要求8所述的化合物，其中R4是-COR6a，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
10.如权利要求8所述的化合物，其中R4是-SO2R6b，且R6b是烷基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
3a
11.如权利要求1-10中任一项所述的化合物，其中R 选自烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基和-SO2R6c，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
12.如权利要求11所述的化合物，其中R3a是任选取代的苯基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
13.如权利要求11所述的化合物，其中R3a是(C1-C6)烷基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
14.如权利要求1所述的化合物，其具有式III：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
15.如权利要求14所述的化合物，其中R3b是任选取代的苯基且R3c是氢，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
16.如权利要求14所述的化合物，其中R3b是任选取代的芳烷基且R3c是氢，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
17.如权利要求1-16中任一项所述的化合物，其中R2是氢，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
18.如权利要求1-17中任一项所述的化合物，其中W1是N，W2是CH，且W3是CH，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
19.如权利要求1-17中任一项所述的化合物，其中W1是N，W2是N，且W3是CH，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
20.如权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中G是二羟烷基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
21.如权利要求20所述的化合物，其中G是选自以下的二羟烷基：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
22.如权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中G是-C(＝O)E，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
23.如权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中G是-CH(OH)CH(OH)C(＝O)E，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
24.如权利要求23所述的化合物，其中G是选自以下的-CH(OH)CH(OH)C(＝O)E：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
25.如权利要求1-19中任一项所述的化合物，其中G是-CH(OH)C(＝O)E，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
26.如权利要求25所述的化合物，其中G是选自以下的-CH(OH)C(＝O)E：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
27.如权利要求22-26中任一项所述的化合物，其中E是二羟烷基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
28.如权利要求27所述的化合物，其中E是选自以下的二羟烷基：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
29.如权利要求22-26中任一项所述的化合物，其中E是-NR1aR1b，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
30.如权利要求29所述的化合物，其中E是-NH2，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
31.如权利要求1-30中任一项所述的化合物，其中R5选自氢、羟烷基和-X-R7，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
5
32.如权利要求31所述的化合物，其中R是氢，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
33.如权利要求31所述的化合物，其中R5是-X-R7，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
34.如权利要求33所述的化合物，其中X是-O-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
35.如权利要求33所述的化合物，其中X是-NH-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
36.如权利要求33所述的化合物，其中X是-CH2NH-，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
37.如权利要求33-36中任一项所述的化合物，其中R7选自：
38.如权利要求31所述的化合物，其中R5是二羟烷基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
39.如权利要求38所述的化合物，其中R5是选自以下的二羟烷基：
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
40.如权利要求1所述的化合物，其选自：
6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
7-(6-氨基甲酰基吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，
4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯；
(S)-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯；
6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢苯并[e][1，4]氧氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
(S)-1-(6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢苯并[e][1，4]氧氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-
1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
6-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)吡啶酰胺；
6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶酰胺；
6-(1-(3-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶酰胺；
6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)吲哚啉-5-基)吡啶酰胺；
6-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-2H-色烯-7-基)吡啶酰胺；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-2H-色烯-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
6-(((S)-1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-((3R，4S)-3-羟基-4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-6-(((2-氧代吡咯烷-3-基)氨基)甲基)-2-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-1-(6-(1-环己基-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-环己基-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-1-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶-
2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-1-(6-(1-(4，4-二氟环己基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-5-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)吲哚啉-2-酮；
(S)-1-(6-(1-((4-(三氟甲基)苯基)磺酰基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-7-(4-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-6-氨基甲酰基嘧啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-1-(6-(1-(4-(三氟甲基)苄基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-6-((2-氧代吡咯烷-3-基)氧基)-2-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)嘧啶-4-羧酰胺；
6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
6-(4-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
(S)-1-(6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-1-(6-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，
4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-
1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，
5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
6-(4-乙酰基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
7-(6-氨基甲酰基吡啶-2-基)-N，N-二乙基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酰胺；
6-(4-(环丙烷羰基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
(S)-1-(1-环己基-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，
4]二氮杂卓-4-基)乙-1-酮；
(S)-1-(6-(4-(甲基磺酰基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，
4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
(S)-1-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)乙-1-酮；
(S)-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-N-乙基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酰胺；
(S)-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酰胺；
(S)-1-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)-2-羟基乙-1-酮；
(S)-1-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)-2-(二甲氨基)乙-1-酮；
6-(4-(氰甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-
7-基)吡啶酰胺；
(S)-2-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)乙酰胺；
(S)-2-(1-环己基-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，
4]二氮杂卓-4-基)乙酰胺；
(S)-2-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)-N-甲基乙酰胺；
(S)-2-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-
4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)乙腈；
(S)-1-(6-(4-((1H-咪唑-2-基)甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；
6-(4-烯丙基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
6-(4-(2，3-二羟丙基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺；
6-(4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-7-基)吡啶酰胺；
6-(((S)-1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-7-基)嘧啶-
4-羧酰胺；
6-(((S)-1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-氟苄基)色满-7-基)嘧啶-4-羧酰胺；
(S)-6-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)-4-(1，2-二羟乙基)甲基吡啶腈；
(S)-6-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)-4-(1，2-二羟乙基)吡啶酰胺；
(S)-4-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)-6-(1，2-二羟乙基)吡啶酰胺；
(2R，3S)-2，3-二羟基-3-(6-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)吡啶-2-基)丙酰胺；
(S)-1-(6-(1-异丁基-4-(甲基磺酰基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇；和
(2R，3S)-2，3-二羟基-3-(6-(1-异丁基-4-(甲基磺酰基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)丙酰胺，
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
41.一种药物组合物，其包含如权利要求1-40中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和药学上可接受的载体。
42.一种治疗哺乳动物中对钠通道的阻断有反应的病症或缓解其症状的方法，所述哺乳动物患有所述病症，所述方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的如权利要求
1-40中任一项请求保护的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
43.如权利要求42所述的方法，其中对TTX抗性钠通道的阻断有反应的病症得到治疗。
44.如权利要求43所述的方法，其中对TTX敏感性钠通道的阻断有反应的病症得到治疗。
45.如权利要求42所述的方法，其中对Nav1.7钠通道的阻断有反应的病症得到治疗。
46.一种治疗以下病症或缓解其症状或提供哺乳动物中的局部麻醉的方法：中风、头部创伤所致的神经元损伤、癫痫、惊厥、整体和局灶性缺血后的神经元脱失、疼痛、偏头痛、原发性红斑性肢痛、阵发性极度疼痛病症、小脑萎缩、共济失调、精神发育迟缓、神经变性病症、躁狂抑郁症、耳鸣、肌强直、运动病症或心律不整，所述方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的如权利要求1-40中任一项请求保护的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
47.如权利要求46所述的方法，其中所述方法用于治疗或缓解疼痛。
48.如权利要求47所述的方法，其中所述方法用于先行性或姑息性治疗疼痛。
49.如权利要求47所述的方法，其中所述疼痛选自慢性疼痛、炎性疼痛、神经病理性疼痛、急性疼痛和外科手术疼痛。
50.一种调节哺乳动物中的钠通道的方法，所述方法包括对所述哺乳动物施用至少一种如权利要求1-40中任一项请求保护的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
51.如权利要求50所述的方法，其中Nav1.7钠通道受到调节。
52.一种药物组合物，其包含如权利要求1-40中任一项请求保护的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于治疗对钠离子通道的阻断有反应的病症。
53.一种如权利要求1-40中任一项请求保护的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于治疗对钠离子通道的阻断有反应的病症。
54.如权利要求1-40中任一项请求保护的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，
3 11 14
其中所述化合物是H、C或 C放射性标记的。
55.一种制备药物组合物的方法，所述方法包括掺合治疗有效量的如权利要求1-40中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与药学上可接受的载体。
56.如权利要求1至40中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制造用于治疗病症或缓解其症状的药物中的用途，其中所述病症对钠离子通道的阻断有反应。
57.如权利要求56所述的用途，其中所述病症对Nav1.7钠通道的阻断有反应。
58.如权利要求56所述的用途，其中所述病症是疼痛。
吡啶类和嘧啶类物质及其用途
[0001] 发明背景
[0002] 电压-门控钠通道(VGSC)见于所有的可兴奋细胞中。在中枢神经系统(CNS)和周围神经系统(PNS)的神经元细胞中，钠通道主要负责产生动作电位的快速提升。以此方式，钠通道对神经系统中的电信号的启动和传播至关重要。因此钠通道的适当功能是神经元的正常功能所必需的。因此，异常的钠通道功能被认为会引起多种医学病症(关于遗传性离子通道病症的一般评述参见Hubner等人，Hum.Mol.Genet.11：2435-2445(2002))，包括癫痫(Yogeeswari等人，Curr.Drug Target5：589-602(2004))、心律失常(Noble，Proc.Natl.Acad..Sci.USA 99：5755-5756(2002))、肌强直(Cannon，Kidney Int.57：772-
779(2000))和疼痛(Wood等人，J.Neurobiol.，61：55-71(2004))。
779(2000))和疼痛(Wood等人，J.Neurobiol.，61：55-71(2004))。
[0003] VGSC由一个α-亚基和若干辅助β-亚基组成，前者形成通道的核心并负责电压依赖性门控和离子渗透(参见例如Chahine等人，CNS&Neurological Disorders-Drug Targets7：144-158(2008)以及Kyle和Ilyin，J.Med.Chem.50：2583-2588(2007))。α-亚基是由四个同源结构域组成的大蛋白质。每个结构域含有六个α-螺旋跨膜跨越片段。电压门控钠通道α-亚基的家族目前有九个已知的成员。此家族的名称包括SCNx、SCNAx和Navx.X(参见下表1)。VGSC家族已在系统发生学上分成两个亚家族Nav1.x(除了SCN6A外的所有)和Nav2.x(SCN6A)。Nav1.x亚家族可以在功能上再分成两组，对由河豚毒素阻断敏感者(TTX敏感性或TTX-s)和对由河豚毒素阻断具有抗性者(TTX抗性或TTX-r)。TTX抗性钠通道的亚组有三个成员。SCNSA基因产物(Nav1.5，Hl)几乎仅仅在心脏组织中表达并且已显示引起多种心律失常及其它传导病症(Liu等人，Am.J.Pharmacogenomics3：173-179(2003))。因此，Nav1.5的阻断剂已在临床上应用于治疗这类病症(Srivatsa等人，Curr.Cardiol.Rep.4：
401-410(2002))。剩余的TTX抗性钠通道Nav1.8(SCN10A、PN3、SNS)和Nav1.9(SCN11A、NaN、SNS2)在周围神经系统中表达并显示出在初级伤害感受性神经元中优先表达。这些通道的人类遗传变异体尚未与任何遗传的临床病症相关联。然而，已经在人类多发性硬化(MS)患者的CNS中以及还在MS的啮齿动物模型中发现Nav1.8的异常表达(Black等人，
Proc.Natl.Acad.Sci.USA97：11598-115602(2000))。涉及伤害感受的证据是关联性的(在伤害感受性神经元中优先表达)和直接的(基因敲除)。Nav1.8缺失小鼠对急性伤害性刺激反应显示出典型的伤害感受性行为，但在牵涉的疼痛和痛觉过敏方面具有显著的缺陷
(Laird等人，J.Neurosci.22：8352-8356(2002))。
401-410(2002))。剩余的TTX抗性钠通道Nav1.8(SCN10A、PN3、SNS)和Nav1.9(SCN11A、NaN、SNS2)在周围神经系统中表达并显示出在初级伤害感受性神经元中优先表达。这些通道的人类遗传变异体尚未与任何遗传的临床病症相关联。然而，已经在人类多发性硬化(MS)患者的CNS中以及还在MS的啮齿动物模型中发现Nav1.8的异常表达(Black等人，
Proc.Natl.Acad.Sci.USA97：11598-115602(2000))。涉及伤害感受的证据是关联性的(在伤害感受性神经元中优先表达)和直接的(基因敲除)。Nav1.8缺失小鼠对急性伤害性刺激反应显示出典型的伤害感受性行为，但在牵涉的疼痛和痛觉过敏方面具有显著的缺陷
(Laird等人，J.Neurosci.22：8352-8356(2002))。
[0004] 表1
[0005] 电压门控钠通道基因家族
[0006]
[0007] Nav1.7(PNl、SCN9A)VGSC对由河豚毒素阻断敏感并且在周围交感和感觉神经元中优先表达。已经自包括人、大鼠和兔在内的许多物种克隆了SCN9A基因，并且在人与大鼠基因之间显示出～90％的氨基酸同一性(Toledo-Aral等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 94：1527-1532(1997))。
[0008] 越来越多的证据表明，Nav1.7在各种疼痛状态中起关键作用，包括急性、炎性和/或神经病理性疼痛。小鼠的伤害感受性神经元中SCN9A基因的缺失导致机械和热疼痛阈值增加和炎性疼痛反应的减少或消除(Nassar等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101：12706-12711(2004))。
[0009] 已报道钠通道阻断剂在各种疾病状态的治疗中是有效的，并且可特别应用为局部麻醉剂，例如利多卡因和布比卡因，并用于治疗心律不整，例如普罗帕酮和胺碘酮，以及治疗癫痫，例如拉莫三嗪、苯妥英和卡马西平(参见Clare等人，Drug Discovery Today 5：506-510(2000)；Lai等人，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.44：371-397(2004)；Anger等人，J.Med.Chem.44：115-137(2001)和Catterall，Trends Pharmacol.Sci.8：57-65(1987))。据信这些药剂中的每一者通过干扰钠离子的快速流入而起作用。
[0010] 诸如BW619C89和利法利嗪的其它钠通道阻断剂已显示出在整体和局灶性缺血的动物模型中是神经保护性的(Graham等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.269：854-859(1994)；Brown等人，British J.Pharmacol.115：1425-1432(1995))。
[0011] 还已经报道钠通道阻断剂可适用于治疗疼痛，包括急性、慢性、炎性、神经病理性及其它类型的疼痛，如通常与阵发性极度疼痛病症相关联的直肠、眼部及颌下疼痛；参见例如Kyle和Ilyin.，J.Med.Chem.50：2583-2588(2007)；Wood等人，J.Neurobiol.61：55-71(2004)；Baker等人，TRENDS in Pharmacological Sciences 22：27-31(2001)；和Lai等人，Current Opinion in Neurobiology 13：291-297(2003)；治疗神经病症，如癫痫、惊厥、具有热性惊厥的癫痫、具有良性家族性新生婴儿惊厥的癫痫、遗传的疼痛病症例如原发性红斑性肢痛和阵发性极度疼痛病症、家族性偏瘫偏头痛和运动病症；以及治疗其它精神病症，如自闭症、小脑萎缩、共济失调和精神发育迟缓；参见例如Chahine等人，CNS&Neurological Disorders-Drug Targets7：144-158(2008)以及Meisler和Kearney，J.Clin.Invest.115：2010-2017(2005)。除了上面提到的临床用途外，卡马西平、利多卡因和苯妥英用于治疗神经病理性疼痛，如来自三叉神经痛、糖尿病性神经病变及其它形式的神经损伤的神经病理性疼痛(Taylor和Meldrum，Trends Pharmacol.Sci.16：309-316(1995))。此外，基于慢性疼痛与耳鸣之间的诸多相似性(Moller，Am.J.Otol.18：577-585(1997)；Tonndorf，
Hear.Res.28：271-275(1987))，已经提出应将耳鸣视为慢性疼痛感觉的形式(Simpson等人，Tip.20：12-18(1999))。实际上，利多卡因和卡马西平已显示出治疗耳鸣是有效的(Majumdar，B.等人，Clin.Otolaryngol.8：175-180(1983)；Donaldson，Laryngol.Otol.95：
947-951(1981))。
Hear.Res.28：271-275(1987))，已经提出应将耳鸣视为慢性疼痛感觉的形式(Simpson等人，Tip.20：12-18(1999))。实际上，利多卡因和卡马西平已显示出治疗耳鸣是有效的(Majumdar，B.等人，Clin.Otolaryngol.8：175-180(1983)；Donaldson，Laryngol.Otol.95：
947-951(1981))。
[0012] 急性或慢性疼痛病症的许多患者对目前的疼痛治疗反应差，并且对阿片制剂产生抗性或不敏感性是常见的。此外，许多目前可用的治疗具有不良的副作用。
[0013] 鉴于目前可用的药剂疗效有限和/或不可接受的副作用，迫切需要开发通过阻断钠通道起作用的更有效且更安全的镇痛药。
[0014] 发明概述
[0015] 在一方面，本公开提供由下式I-V表示的吡啶和嘧啶类物质及其药学上可接受的盐和溶剂化物，在本文中统称为“本公开的化合物”。
[0016] 另一方面，本公开提供本公开的化合物作为一种或多种钠(Na+)通道的阻断剂的用途。
[0017] 另一方面，本公开提供作为合成中间体的化合物，其可用于制备一种或多种钠(Na+)通道的阻断剂。
[0019] 另一方面，本公开提供治疗疼痛(例如急性疼痛、慢性疼痛，其包括但不限于神经病理性疼痛、手术后疼痛和炎性疼痛或外科手术疼痛)的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的本公开的化合物。具体地，本公开提供先行性或姑息性治疗疼痛的方法，其方式是通过对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的本公开的化合物。
[0020] 另一方面，本公开提供治疗中风、头部创伤所致的神经元损伤、癫痫、惊厥、具有热性惊厥的一般性癫痫、婴儿期重症肌阵挛癫痫、整体和局灶性缺血后的神经元脱失、偏头痛、家族性原发性红斑性肢痛、阵发性极度疼痛病症、小脑萎缩、共济失调、肌张力障碍、震颤、精神发育迟缓、自闭症、神经变性病症(例如阿尔茨海默氏病(Alzheimer′s disease)、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)或帕金森氏病(Parkinson′s disease))、躁狂抑郁症、耳鸣、肌强直、运动病症或心律不整或缓解其症状或提供局部麻醉的方法，该方法包括对需要这种治疗的哺乳动物施用有效量的本公开的化合物。
[0021] 另一方面，本公开提供一种药物组合物，其包含本公开的化合物和一种或多种药学上可接受的载体。
[0022] 另一方面，本公开提供用于治疗对钠离子通道的阻断有反应的病症的药物组合物，其中该药物组合物包含与一种或多种药学上可接受的载体呈混合物的有效量的本公开的化合物。
[0023] 另一方面，本公开提供调节哺乳动物中的钠通道的方法，该方法包括对哺乳动物施用有效量的至少一种本公开的化合物。
[0024] 另一方面，本公开提供本公开的化合物，其用于治疗哺乳动物中的疼痛，例如急性疼痛、慢性疼痛，其包括但不限于神经病理性疼痛、手术后疼痛和炎性疼痛或外科手术疼痛。
[0025] 另一方面，本公开提供本公开的化合物，其用于治疗哺乳动物中的中风、头部创伤所致的神经元损伤、癫痫、惊厥、具有热性惊厥的一般性癫痫、婴儿期重症肌阵挛癫痫、整体和局灶性缺血后的神经元脱失、偏头痛、家族性原发性红斑性肢痛、阵发性极度疼痛病症、小脑萎缩、共济失调、肌张力障碍、震颤、精神发育迟缓、自闭症、神经变性病症(例如阿尔茨海默氏病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)或帕金森氏病)、躁狂抑郁症、耳鸣、肌强直、运动病症或心律不整或缓解其症状或提供局部麻醉。
[0026] 另一方面，本公开提供经放射性标记的本公开的化合物以及这类化合物在任何适当选定的竞争结合测定和筛选方法中作为放射性配体的用途。因此，本公开进一步提供使用经放射性标记的本公开的化合物筛选能够结合于钠通道或钠通道亚基的候选化合物的方法。在某些实施方案中，化合物用3H、11C或14C进行放射性标记。此竞争结合测定可采用任何适当选定的方法进行。在一个实施方案中，筛选方法包括：i)向包含可溶性或膜相关钠通道、亚基或片段的体外制剂中引入固定浓度的经放射性标记的化合物，引入所处的条件分别允许经放射性标记的化合物结合于该通道、亚基或片段以形成缀合物；ii)用候选化合物滴定该缀合物；和iii)确定候选化合物自所述通道、亚基或片段置换经放射性标记的化合物的能力。
[0027] 另一方面，本公开提供用于制造药物的本公开的化合物，所述药物用于治疗哺乳动物中的疼痛。在一个实施方案中，本公开提供本公开的化合物在制造药物中的用途，所述药物用于姑息性或先行性治疗疼痛，如急性疼痛、慢性疼痛或外科手术疼痛。
[0028] 另一方面，本公开提供用于制造药物的本公开的化合物，所述药物用于治疗哺乳动物中的中风、头部创伤所致的神经元损伤、癫痫、惊厥，具有热性惊厥的一般性癫痫、婴儿期重症肌阵挛癫痫、整体和局灶性缺血后的神经元脱失、偏头痛、家族性原发性红斑性肢痛、阵发性极度疼痛病症、小脑萎缩、共济失调、肌张力障碍、震颤、精神发育迟缓、自闭症、神经变性病症(例如阿尔茨海默氏病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)或帕金森氏病)、躁狂抑郁症、耳鸣、肌强直、运动病症或心律不整或提供局部麻醉。
[0029] 在随后的描述中将部分地给出并且从描述中将会得出或者可以通过实施本公开内容而获悉本公开的另外的实施方案和优点。借助在所附权利要求书中特别指出的要素及组合将会实现和达成本公开的各种实施方案和优点。
[0030] 要理解的是，前述的发明内容及随后的具体实施方式都仅仅是示例和解释性的，并不限制要求保护的本发明。
[0031] 发明详述
[0032] 本公开的一方面基于本公开的化合物作为钠(Na+)通道的阻断剂的用途。鉴于此性质，本公开的化合物适用于治疗对钠离子通道的阻断有反应的病症。
[0033] 在一个实施方案中，本公开的化合物是由式I表示的化合物：
[0034]
[0035] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物，
[0036] 其中：
[0037] G选自氰基、二羟烷基、-C(＝O)E、CH(OH)CH(OH)C(＝O)E和-CH(OH)C(＝O)E；
[0039] R1a选自氢、烷基、任选取代的芳烷基、任选取代的(杂环)烷基、任选取代的(杂芳基)烷基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(羧酰胺基)烷基、(氰基)烷基、烷氧基烷基、羟烷基和杂烷基；
[0040] R1b选自氢和烷基；或者
[0041] R1a和R1b与它们所附接的氮原子合起来形成3至8元任选取代的杂环基；
[0042] W1、W2和W3各自独立地选自N和CR2；前提条件是W1、W2和W3中的至少一者是N；
[0043] R2选自氢、卤基和烷基；
[0044] A选自：
[0045]
[0046] R3a选自氢、烷基、杂烷基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(烷氧基)烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基、任选取代的杂芳基、任选取代的芳烷基、羧酰胺基、任选取代的烷基羰基、任选取代的(烷氧基)羰基和-SO2R6c；
[0047] R3b选自任选取代的芳基、任选取代的芳烷基和任选取代的杂芳基；
[0048] R3c选自氢和羟基；前提条件是当R3c是羟基时，则 是单键；
[0049] Z1选自-(C＝O)-(CH2)k-、-(CH2)m-、-(CH2)n-O-(CH2)o-和-(CH2)p-N(R4)-(CH2)q-；
[0050] k是1、2或3；
[0051] m是2、3、4、5或6；
[0052] n是2、3或4；
[0053] o是0、1或2；
[0054] p是2、3或4；
[0055] q是0、1或2
[0056] Z2选自-(CH2)r-和-(CH2)s-Y1-；
[0057] Y1选自-NR11和O；
[0058] r是1、2或3；
[0059] s是1、2或3；
[0060] 是单或双键；
[0061] R4选自氢、烷基、烯基、炔基、羟烷基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、任选取代的芳烷基、任选取代的(杂芳基)烷基、任选取代的(环烷基)烷基、(氰基)烷基、(羧酰胺基)烷基、-COR6a和SO2R6b；
[0062] R6a选自烷基、烷氧基、羟烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基、氨基、烷氨基、二烷氨基、(氨基)烷基、(烷氨基)烷基和(二烷氨基)烷基；
[0063] R6b选自烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；
[0064] R6c选自烷基、任选取代的环烷基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基；
[0065] R5选自氢、卤基、烷基、羟烷基、氰基、杂环基和-X-R7；
[0066] X选自-O-、-NR8a-和-(CH2)t-Y2-；
[0067] Y2选自-O-和-NR8b-；
[0068] t是1、2、3或4；
[0069] R7选自氢、烷基、羟烷基、
[0070]
[0071] R8a选自氢和烷基；
[0072] R8b选自氢和烷基；或者
[0073] R8b和R7与它们所附接的氮原子合起来形成3至8元任选取代的杂环基；
[0074] R9选自氢、烷基和羟烷基；
[0075] R10a和R10b独立地选自氢和烷基；或者
[0076] R10a和R10b与它们所附接的氮原子合起来形成3至8元任选取代的杂环基；且
[0077] R11选自氢和烷基。
[0078] 在式I中，当Z1是-(C＝O)-(CH2)k-时，则羰基附接于-NR3a-；当Z2是-(CH2)s-Y1-时，则-Y1-是附接的苯基环；并且当X是-(CH2)t-Y2-时，则-Y2-附接于-R7。
[0079] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I表示的化合物和其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中当Z1是-(CH2)p-N(R4)-(CH2)q-、p是2且q是1时，则R4是-COR6a或-SO2R6b。
[0080] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物：
[0081]
[0082] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中R3a、Z1、W1、W2、W3、R5和G如上文关于式I所定义。
[0083] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中Z1是-(CH2)m-，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0084] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中Z1是-(C＝O)-(CH2)k-，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0085] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中Z1是-(CH2)n-O-(CH2)o-，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0086] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中Z1是-(CH2)p-N(R4)-(CH2)q-，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0087] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中：
[0088]
[0089] 选自：
[0090]
[0091] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0092] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中：
[0093]
[0094] 是A-6，且R4选自-COR6a和-SO2R6b，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施4 6a 4 6b 6b
方案中，R 是-COR 。在另一实施方案中，R是-SO2R 。在某一实施方案中，R 是烷基(例如，甲基、乙基和丙基)。
方案中，R 是-COR 。在另一实施方案中，R是-SO2R 。在某一实施方案中，R 是烷基(例如，甲基、乙基和丙基)。
[0095] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中R3a选自烷基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的芳基和任选取代的杂芳基，或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一个实施方案中，R3a是任选取代的苯基。在另一实施方案中，R3a是烷基，包括如(C1-C6)烷基。在某一实施方案中，R3a是异丙基。
[0096] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式II表示的化合物，其中R3a是-SO2R6c，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0097] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式III表示的化合物：
[0098]
[0099] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中R3b、W1、W2、W3、R5、G和 如上文关于式I所定义。
[0100] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式IV表示的化合物：
[0101]
[0102] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中R3b、W1、W2、W3、R5、G和 如上文关于式I3c 3c
所定义。在一个实施方案中，R 是氢。在一个实施方案中，R 是羟基。
所定义。在一个实施方案中，R 是氢。在一个实施方案中，R 是羟基。
[0103] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式V表示的化合物：
[0104]
[0105] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物，其中R3b、W1、W2、W3、R5、G和 如上文关于式I所定义。在一个实施方案中，R3c是氢。在一个实施方案中，R3c是羟基。
[0106] 在一个实施方案中，本公开的化合物是由式III-V中任一式表示的化合物，其中R3b是任选取代的苯基，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0107] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式III-V中任一式表示的化合物，其中R3b是任选取代的芳烷基，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0108] 还在另一实施方案中，本公开的化合物是由式III-V中任一式表示的化合物，其中R3b是任选取代的杂芳基，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0109] 在单独的实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中R2是氢，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0110] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中W1是N，W2是CH，且W3是CH，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0111] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中W1是N，W2是N，且W3是CH，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0112] 在又一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，W1是CH，W2是CH，且W3是N，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0113] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中G是二羟烷基，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，G是选自以下的二羟烷基：
[0114]
[0115] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中G是-CH(OH)CH(OH)C(＝O)E，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，是选自以下的-CH(OH)CH(OH)C(＝O)E：
[0116]
[0117] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，E是-NR1aR1b。在一个实施方案中，E是-NH2。
[0118] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中G是-CH(OH)C(＝O)E，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，G是选自以下的-CH(OH)C(＝O)E：
[0119]
[0120] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，E是-NR1aR1b。在一个实施方案中，E是-NH2。
[0121] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中G是-C(＝O)E，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，E是-NR1aR1b。在一个实施方案中，E是-NH2。在一个实施方案中，E是二羟烷基。在一个实施方案中，E是选自以下的二羟烷基：
[0122]
[0123] 在一个实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中R5选自氢、羟烷基和-X-R7，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0124] 在一个实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中R5是氢，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0125] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中R5是羟烷基，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，R5是二羟烷基。在一个实施方案中，R5是选自以下的二羟烷基：
[0126]
[0127] 在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中R5是-X-R7，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，X是-O-。在一个实施方案中，X是-NH-。在一个实施方案中，X是-CH2-NH-(其中-NH-附接于-R7)。在一个实施方案中，X是-CH2-O-(其中-O-附接于-R7)。
[0128] 还在另一实施方案中，本公开的化合物是由式I-V中任一式表示的化合物，其中R5是-X-R7且R7选自：
[0129]
[0130] 和其药学上可接受的盐和溶剂化物。在一个实施方案中，R9是烷基。
[0131] 在另一实施方案中，本公开的化合物是表2的化合物，和其药学上可接受的盐和溶剂化物。
[0132] 表2
[0133]
[0134]
[0135]
[0136]
[0137]
[0138]
[0139]
[0140]
[0141]
[0142]
[0143] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷基”是指含有一至十二个碳原子(即C1-12烷基)或指定数目的碳原子(即C1烷基，如甲基，C2烷基，如乙基，C3烷基，如丙基或异丙基，等等)的直链或支链脂族烃。在一个实施方案中，烷基基团选自直链C1-10烷基基团。在另一实施方案中，烷基基团选自支链C3-10烷基基团。在另一实施方案中，烷基基团选自直链C1-6烷基基团。在另一实施方案中，烷基基团选自支链C3-6烷基基团。在另一实施方案中，烷基基团选自直链C1-4烷基基团。在另一实施方案中，烷基基团选自支链C3-4烷基基团。在另一实施方案中，烷基基团选自直链或支链C3-4烷基基团。非限制性示例的C1-10烷基基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、异丁基、3-戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。非限制性示例的C1-4烷基基团包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基和异丁基。
[0144] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的烷基”意指如上定义的烷基是未取代的或者是用一个、两个或三个独立地选自以下的取代基取代的：硝基、卤代烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基和环烷基。在一个实施方案中，任选取代的烷基是用两个取代基取代的。在另一实施方案中，任选取代的烷基是用一个取代基取代的。非限制性示例的任选取代的烷基基团包括-CH2CH2NO2、-CH2CH2CO2H、-CH2CH2SO2CH3、-CH2CH2COPh、-CH2C6H11等。
[0145] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“环烷基”是指含有一至三个具有三至十二个碳原子(即C3-12环烷基)或指定数目碳的环的饱和及部分不饱和(含有一或两个双键)的环状脂族烃。在一个实施方案中，环烷基基团具有两个环。在一个实施方案中，环烷基基团具有一个环。在另一实施方案中，环烷基基团选自C3-8环烷基基团。在另一实施方案中，环烷基基团选自C3-6环烷基基团。非限制性示例的环烷基基团包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、降冰片基、十氢化萘、金刚烷基、环己烯基、环戊烯基、环己烯基等。
[0146] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的环烷基”意指如上定义的环烷基是未取代的或者是用一个、两个或三个独立地选自以下的取代基取代的：卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、烷氨基、二烷氨基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、羧酰胺基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基、烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基、烷氧基烷基、(氨基)烷基、羟烷氨基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(氰基)烷基、(羧酰胺基)烷基、巯基烷基、(杂环基)烷基和(杂芳基)烷基。在一个实施方案中，任选取代的环烷基是用两个取代基取代的。在另一实施方案中，任选取代的环烷基是用一个取代基取代的。非限制性示例的任选取代的环烷基基团包括：
[0147]
[0148] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烯基”是指含有一个、两个或三个碳碳双键的如上定义的烷基基团。在一个实施方案中，烯基基团选自C2-6烯基基团。在另一实施方案中，烯基基团选自C2-4烯基基团。非限制性示例的烯基基团包括乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、仲丁烯基、戊烯基和己烯基。
[0149] 出于本公开的目的，如本文中单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的烯基”意指如上定义的烯基是未取代的或者是用一个、两个或三个独立地选自以下的取代基取代的：卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、烷氨基、二烷氨基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、羧酰胺基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基、烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基和杂环基。
[0150] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“炔基”是指含有一至三个碳碳三键的如上定义的烷基基团。在一个实施方案中，炔基具有一个碳碳三键。在一个实施方案中，炔基基团选自C2-6炔基基团。在另一实施方案中，炔基基团选自C2-4炔基基团。非限制性示例的炔基基团包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、2-丁炔基、戊炔基和己炔基基团。
[0151] 出于本公开的目的，如本文中单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的炔基”意指如上定义的炔基是未取代的或者是用一个、两个或三个独立地选自以下的取代基取代的：卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、烷氨基、二烷氨基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、羧酰胺基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基、烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基和杂环基。
[0152] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“卤代烷基”是指被一个或多个氟、氯、溴和/或碘原子取代的烷基基团。在一个实施方案中，烷基基团被一个、两个或三个氟和/或氯原子取代。在另一实施方案中，卤代烷基基团选自C1-4卤代烷基基团。非限制性示例的卤代烷基基团包括氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、五氟乙基、1，1-二氟乙基、2，2-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基、3，3，3-三氟丙基、4，4，4-三氟丁基和三氯甲基基团。
[0153] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“羟烷基”是指用一个或多个例如一个、两个或三个羟基基团取代的烷基基团。在一个实施方案中，羟烷基基团是单羟烷基基团，即是用一个羟基基团取代的。在一个实施方案中，羟烷基基团是二羟烷基基团，即是用两个羟基基团取代的，例如，
[0154]
[0155] 在一个实施方案中，羟烷基基团选自C1-4羟烷基基团。非限制性示例的羟烷基基团包括羟甲基、羟乙基、羟丙基和羟丁基基团，如1-羟乙基、2-羟乙基、1，2-二羟乙基、2-羟丙基、3-羟丙基、3-羟丁基、4-羟丁基、2-羟基-1-甲基丙基和1，3-二羟基丙-2-基。
[0156] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(环烷基)烷基”或“任选取代的(环烷基)烷基”是指用一个、两个或三个任选取代的环烷基基团取代的烷基基团。在一个实施方案中，(环烷基)烷基基团是用一个任选取代的环烷基基团取代的C1-4烷基。在一个实施方案中，(环烷基)烷基基团是用一个任选取代的环烷基基团取代的C1或C2烷基。在一个实施方案中，(环烷基)烷基基团是用一个环烷基基团取代的C1或C2烷基。非限制性示例的(环烷基)烷基基团包括：
[0157]
[0158] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷氧基”是指附接于末端氧原子的任选取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。在一个实施方案中，烷氧基基团选自C1-4烷氧基基团。在另一实施方案中，烷氧基基团选自附接于末端氧原子的C1-4烷基，例如甲氧基、乙氧基和叔丁氧基。
[0159] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷硫基”是指被任选取代的烷基基团取代的硫原子。在一个实施方案中，烷硫基基团选自C1-4烷硫基基团。非限制性示例的烷硫基基团包括-SCH3和-SCH2CH3。
[0160] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷氧基烷基”是指用烷氧基基团取代的烷基基团。非限制性示例的烷氧基烷基基团包括甲氧基甲基、甲氧基乙基、甲氧基丙基、甲氧基丁基、乙氧基甲基、乙氧基乙基、乙氧基丙基、乙氧基丁基、丙氧基甲基、异丙氧基甲基、丙氧基乙基、丙氧基丙基、丁氧基甲基、叔丁氧基甲基、异丁氧基甲基、仲丁氧基甲基和戊氧基甲基。
[0161] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“卤代烷氧基”是指附接于末端氧原子的卤代烷基。非限制性示例的卤代烷氧基基团包括氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基。
[0162] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“芳基”是指具有六至十四个碳原子(即C6-C14芳基)的单环或双环芳族环体系。非限制性示例的芳基基团包括苯基(缩写为“Ph”)、萘基、菲基、蒽基、茚基、薁基、联苯基、亚联苯基和芴基。在一个实施方案中，芳基基团选自苯基或萘基。
[0163] 出于本公开的目的，本文中单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的芳基”意指如上定义的芳基是未取代的或者是用一至五个独立地选自以下的取代基取代的：卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、烷氨基、二烷氨基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、羧酰胺基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基、烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基、烷氧基烷基、(氨基)烷基、羟烷氨基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(氰基)烷基、(羧酰胺基)烷基、巯基烷基、(杂环基)烷基、(环烷氨基)烷基、(卤基(C1-C4)烷氧基)烷基和(杂芳基)烷基。在一个实施方案中，任选取代的芳基是任选取代的苯基。在一个实施方案中，任选取代的苯基具有四个取代基。在另一实施方案中，任选取代的苯基具有三个取代基。在另一实施方案中，任选取代的苯基具有两个取代基。在另一实施方案中，任选取代的苯基具有一个取代基。非限制性示例的取代的芳基基团包括2-甲基苯基、2-甲氧基苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、3-甲基苯基、3-甲氧基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、2，6-二-氟苯基、2，6-二-氯苯基、2-甲基、3-甲氧基苯基、2-乙基、3-甲氧基苯基、3，4-二-甲氧基苯基、3，5-二-氟苯基、3，5-二-甲基苯基、3，5-二甲氧基、4-甲基苯基、2-氟-3-氯苯基和3-氯-4-氟苯基。术语任选取代的芳基意指包括具有稠合的任选取代的环烷基和稠合的任选取代的杂环基环的基团。例子包括：
[0164]
[0165] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“芳氧基”是指附接于末端氧原子的任选取代的芳基。一个非限制性示例芳氧基是PhO-。
[0166] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“杂芳氧基”是指附接于末端氧原子的任选取代的杂芳基。非限制性示例的杂芳氧基包括：
[0167]
[0168] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“芳烷基氧基”是指附接于末端氧原子的芳烷基基团。一非限制性示例的芳烷基氧基是PhCH2O-。
[0169] 出于本公开的目的，术语“杂芳基”或“杂芳族”是指具有5至14个环原子(即C5-C14杂芳基)和1、2、3或4个独立地选自氧、氮和硫的杂原子的单环和双环芳族环体系。在一个实施方案中，杂芳基具有三个杂原子。在另一实施方案中，杂芳基具有两个杂原子。在另一实施方案中，杂芳基具有一个杂原子。在一个实施方案中，杂芳基是C5杂芳基。在另一实施方案中，杂芳基是C6杂芳基。非限制性示例的杂芳基基团包括噻吩基、苯并[b]噻吩基、萘并[2，3-b]噻吩基、噻蒽基、呋喃基、苯并呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、苯并噁嗪酮基(benzooxazonyl)、色烯基、占吨基、2H-吡咯基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、异吲哚基、3H-吲哚基、吲哚基、吲唑基、嘌呤基、异喹啉基、喹啉基、酞嗪基、萘啶基、噌啉基、喹唑啉基、蝶啶基、4aH-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、嘧啶基、菲咯啉基、吩嗪基、噻唑基、异噻唑基、吩噻唑基、异噁唑基、呋咱基和吩噁嗪基。在一个实施方案中，杂芳基选自噻吩基(例如噻吩-2-基和噻吩-3-基)、呋喃基(例如2-呋喃基和3-呋喃基)、吡咯基(例如1H-吡咯-2-基和1H-吡咯-3-基)、咪唑基(例如2H-咪唑-2-基和2H-咪唑-4-基)、吡唑基(例如1H-吡唑-3-基、1H-吡唑-4-基和1H-吡唑-5-基)、吡啶基(例如吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基)、嘧啶基(例如嘧啶-2-基、嘧啶-4-基和嘧啶-5-基)、噻唑基(例如噻唑-2-基、噻唑-4-基和噻唑-5-基)、异噻唑基(例如异噻唑-3-基、异噻唑-4-基和异噻唑-5-基)、噁唑基(例如噁唑-2-基、噁唑-4-基和噁唑-5-基)和异噁唑基(例如异噁唑-3-基、异噁唑-4-基和异噁唑-5-基)。术语“杂芳基”还意指包括可能的N-氧化物。示例性N-氧化物包括吡啶基N-氧化物等。
[0170] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的杂芳基”意指如上定义的杂芳基是未取代的或者是用独立地选自以下的一至四个取代基例如一个或两个取代基取代的：卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、烷氨基、二烷氨基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、羧酰胺基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基、烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基、烷氧基烷基、(氨基)烷基、羟烷氨基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(氰基)烷基、(羧酰胺基)烷基、巯基烷基、(杂环基)烷基和(杂芳基)烷基。在一个实施方案中，任选取代的杂芳基具有一个取代基。在一个实施方案中，任选取代的是任选取代的吡啶基，即2-、3-或4-吡啶基。可取代任何可用的碳或氮原子。在另一实施方案中，任选取代的杂芳基是任选取代的吲哚。
[0171] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“杂环”或“杂环基”是指含有一个、两个或三个具有三至十四个环成员(即3至14元杂环基)和至少一个杂原子的环的饱和及部分不饱和(例如含有一个或两个双键)环状基团。每个杂原子独立地选自氧、硫，包括亚砜和砜，和/或可以是季铵化的氮原子。术语“杂环基”意指包括环状脲基团，如2-咪唑烷酮，和环状酰胺基团，如β-内酰胺、γ-内酰胺、δ-内酰胺和ε-内酰胺。术语“杂环基”还意指包括具有稠合的任选取代的芳基基团的基团，例如吲哚啉基。在一个实施方案中，杂环基基团选自含有一个环及一个或两个氧和/或氮原子的5或6元环状基团。杂环基可任选通过碳或氮原子连接至分子的其余部分。非限制性示例的杂环基基团包括2-氧代吡咯烷-3-基、2-咪唑烷酮、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、吡咯烷基和吲哚啉基。
[0172] 出于本公开的目的，如本文中单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“任选取代的杂环基”意指如上定义的杂环基是未取代的或者是用一至四个独立地选自以下的取代基取代的：卤基、硝基、氰基、羟基、氨基、烷氨基、二烷氨基、卤代烷基、羟烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳氧基、芳烷基氧基、烷硫基、羧酰胺基、磺酰胺基、烷基羰基、芳基羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、脲基、胍基、羧基、羧烷基、烷基、环烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基、烷氧基烷基、(氨基)烷基、羟烷氨基、(烷氨基)烷基、(二烷氨基)烷基、(氰基)烷基、(羧酰胺基)烷基、巯基烷基、(杂环基)烷基和(杂芳基)烷基。取代可发生在任何可用的碳或氮原子上，并且可形成螺环。非限制性示例的任选取代的杂环基基团包括：
[0173]
[0174] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“氨基”是指-NH2。
[0175] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷氨基”是指-NHR15，其中R15是烷基。
[0176] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“二烷氨基”是指-NR16aR16b，其中R16a和R16b各自独立地是烷基，或者R16a和R16b合起来形成3至8元任选取代的杂环基。
[0177] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“羟烷氨基”是指-NHR17，其中R17是羟烷基。
[0178] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“环烷氨基”是指-NR19aR19b，其中R19a是任选取代的环烷基且R19b是氢或烷基。
[0179] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(氨基)烷基”是指用氨基基团取代的烷基基团。非限制性示例的氨基烷基基团包括-CH2CH2NH2、-CH2CH2CH2NH2、-CH2CH2CH2CH2NH2等。
[0180] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(烷氨基)烷基”是指用烷氨基基团取代的烷基基团。一非限制性示例的(烷氨基)烷基基团是-CH2CH2N(H)CH3。
[0181] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(二烷氨基)烷基”是指被二烷氨基基团取代的烷基基团。非限制性示例的(二烷氨基)烷基基团包括-CH2N(CH3)2和-CH2CH2N(CH3)2。
[0182] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(环烷氨基)烷基”是指被环烷氨基基团取代的烷基基团。非限制性示例的(环烷氨基)烷基基团包括-CH2N(H)环丙基、-CH2N(H)环丁基和-CH2N(H)环己基。
[0183] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(卤基(C1-C4)烷氧基)烷基”是指被C1-C4卤代烷氧基基团取代的烷基基团。非限制性示例的(卤基(C1-C4)烷氧基)烷基基团包括-CH2OCH2CF3和-CH2OCF3。
[0184] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(氰基)烷基”是指用一个或多个氰基例如-CN基团取代的烷基基团。非限制性示例的(氰基)烷基基团包括-CH2CH2CN、-CH2CH2CH2CN和-CH2CH2CH2CH2CN。
[0185] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“羧酰胺基”是指式-C(＝O)NR24aR24b的基，其中R24a和R24b各自独立地是氢、任选取代的烷基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳基或任选取代的杂芳基，或者R24a和R24b与它们所附接的氮合起来形成3至8元杂环基基团。在一个实施方案中，R24a和R24b各自独立地是氢或任选取代的烷基。非限制性示例的羧酰胺基基团包括-CONH2、-CON(H)CH3、-CON(CH3)2和-CON(H)Ph。
[0186] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“磺酰胺基”是指式-SO2NR23aR23b的基，其中R23a和R23b各自独立地是氢、任选取代的烷基或任选取代的芳23a 23b
基，或者R 和R 与它们所附接的氮合起来形成3至8元杂环基基团。非限制性示例的磺酰胺基基团包括-SO2NH2、-SO2N(H)CH3和-SO2N(H)Ph。
基，或者R 和R 与它们所附接的氮合起来形成3至8元杂环基基团。非限制性示例的磺酰胺基基团包括-SO2NH2、-SO2N(H)CH3和-SO2N(H)Ph。
[0187] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷基羰基”是指被烷基基团取代的羰基基团，即-C(＝O)-。一非限制性示例的烷基羰基基团是-COCH3。
[0188] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“芳基羰基”是指被任选取代的芳基基团取代的羰基基团，即-C(＝O)-。一非限制性示例的芳基羰基基团是-COPh。
[0189] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“烷基磺酰基”是指被任何上面提到的任选取代的烷基基团取代的磺酰基基团，即-SO2-。一非限制性示例的烷基磺酰基基团是-SO2CH3。
[0190] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“芳基磺酰基”是指被任何上面提到的任选取代的芳基基团取代的磺酰基基团，即-SO2-。一非限制性示例的芳基磺酰基基团是-SO2Ph。
[0191] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“巯基烷基”是指被-SH基团取代的任何上面提到的烷基基团。
[0192] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“羧基”是指式-COOH的基。
[0193] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“羧烷基”是指用-COOH取代的任何上面提到的烷基基团。一非限制性示例的羧烷基基团是-CH2CO2H。
[0194] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“芳烷基”或“芳基烷基”或“任选取代的芳烷基”是指用一个、两个或三个任选取代的芳基基团取代的烷基基团。在一个实施方案中，任选取代的芳烷基基团是用一个任选取代的芳基基团取代的C1-4烷基。在一个实施方案中，任选取代的芳烷基基团是用一个任选取代的芳基基团取代的C1或C2烷基。在一个实施方案中，任选取代的芳烷基基团是用一个任选取代的苯基基团取代的C1或C2烷基。非限制性示例的任选取代的芳烷基基团包括苄基、苯乙基、-CHPh2、-CH2(4-F-Ph)、-CH2(4-Me-Ph)、-CH2(4-CF3-Ph)和-CH(4-F-Ph)2。
[0195] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“脲基”是指式-NR22a-C(＝O)-NR22bR22c的基，其中R22a是氢、烷基或任选取代的芳基，且R22b和R22c各自独立地是氢、烷基或任选取代的芳基，或者R22b和R22c与它们所附接的氮合起来形成4至8元杂环基基团。非限制性示例的脲基基团包括-NH-C(＝O)-NH2和-NH-C(＝O)-NHCH3。
[0196] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“胍基”是指式-NR25a-C(＝NR26)-NR25bR25c的基，其中R25a、R25b和R25c各自独立地是氢、烷基或任选取代的芳基，且R26是氢、烷基、氰基、烷基磺酰基、烷基羰基、羧酰胺基或磺酰胺基。非限制性示例的胍基基团包括-NH-C(＝NH)-NH2、-NH-C(＝NCN)-NH2、-NH-C(＝NH)-NHCH3等。
[0197] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(杂芳基)烷基”或“任选取代的(杂芳基)烷基”是指用一个、两个或三个任选取代的杂芳基基团取代的烷基基团。在一个实施方案中，(杂芳基)烷基基团是用一个任选取代的杂芳基基团取代的C1-4烷基。在一个实施方案中，(杂芳基)烷基是用一个任选取代的杂芳基基团取代的C1或C2烷基。非限制性示例的(杂芳基)烷基基团包括：
[0198]
[0199] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“杂烷基”是指含有1至10个碳原子和至少两个选自O、N或S的可相同或不同的杂原子的稳定直链或支链烃基，其中：1)氮原子和硫原子可任选被氧化；和/或2)氮原子可任选被季铵化。杂原子可位于杂烷基基团的任何内部位置或末端位置，或者位于杂烷基基团附接于分子的其余部分的位置。在一个实施方案中，杂烷基基团含有两个氧原子。在另一实施方案中，杂烷基基团含有两个氮原子。在其它实施方案中，杂烷基基团含有一个氮原子和一个氧原子。非限制性示例的杂烷基基团包括：
[0200] -CH2N(H)CH2CH2N(CH3)2；-CH2N(CH3)CH2CH2N(CH3)2；-CH2N(H)CH2CH2CH2N(CH3)2；-CH2N(H)CH2CH2OH；-CH2N(CH3)CH2CH2OH；-CH2OCH2CH2OCH3、-OCH2CH2OCH2CH2OCH3；-CH2NHCH2CH2OCH2；-OCH2CH2NH2；和-NHCH2CH2N(H)CH3。
[0201] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(杂环基)烷基”是指用一个任选取代的杂环基基团和任选一个羟基基团取代的烷基基团。在一个实施方案中，(杂环基)烷基是用一个任选取代的杂环基基团和一个羟基基团取代的C1-4烷基。在另一实施方案中，(杂环基)烷基是用一个任选取代的杂环基基团取代的C1-4烷基。非限制性示例的(杂环基)烷基基团包括：
[0202]
[0203] 出于本公开的目的，如单独使用或作为另一基团的一部分使用的术语“(羧酰胺基)烷基”是指用一个羧酰胺基基团和任选一个杂环基、氨基、烷氨基或二烷氨基基团取代的烷基基团。在一个实施方案中，(羧酰胺基)烷基是用一个羧酰胺基基团和任选一个杂环基、氨基、烷氨基或二烷氨基基团取代的C1-4烷基。在另一实施方案中，(羧酰胺基)烷基是用一个羧酰胺基基团和一个杂环基、氨基、烷氨基或二烷氨基基团取代的C1-4烷基。在另一实施方案中，(羧酰胺基)烷基是用一个羧酰胺基基团取代的C1-4烷基。非限制性示例的(羧酰胺基)烷基基团包括-CH2CONH2、-C(H)CH3-CONH2、-CH2CON(H)CH3、
[0204]
[0205] 本公开涵盖通过使一个或多个原子被具有不同的原子质量或质量数的原子置换而被同位素标记(即放射性标记)的任何本公开的化合物。可结合到所公开的化合物当中的同位素的例子包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分别如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32p、35S、18F和36Cl，例如3H、11C和14C。可通过本领域中已知的方法制备经同位素标记的本公开的化合物。
[0206] 本公开涵盖经3H、11C或14C放射性标记的本公开的化合物及任何这类化合物作为能够结合于钠通道的放射性配体的用途。例如，本公开的标记化合物的一种用途是特异性受体结合的表征。本公开的标记化合物的另一种用途是替代用于评估结构-活性关系的动物测试。例如，可在竞争测定中在固定浓度的本公开的标记化合物下和在增加浓度的测试化合物下进行受体测定。例如，可以通过将氚引入到特定的化合物当中，例如通过用氚催化脱卤，由此制备本公开的氚化化合物。此方法可包括在例如Pd/C的合适催化剂的存在下在存在或不存在碱的条件下使化合物经卤素合适地取代的前体与氚气反应。其它制备氚化化合物的合适方法可见于Filer，Isotopes in the Physical and Biomedical Sciences，第1卷，Labeled Compounds(A部分)，第6章(1987)。可通过采用具有14C碳的起始材料来制备14C标记的化合物。
[0207] 一些本公开的化合物可含有一个或多个不对称中心，并因此可产生对映体、非对映体及其它立体异构形式。本公开意指涵盖所有这类可能的形式以及它们的外消旋和拆分形式及其混合物的用途。可以考虑本公开内容根据本领域中已知的方法分离个别的对映体。当本文描述的化合物含有烯属双键或其它几何不对称中心时，且除另有规定外，它们旨在包括E和Z几何异构体两者。本公开内容也旨在涵盖所有的互变异构体。
[0208] 如本文所用，术语“立体异构体”是仅其原子在空间中的取向不同的个别分子的所有异构体的总称。其包括对映体和具有超过一个彼此非镜像的手性中心的化合物的异构体(非对映体)。
[0209] 术语“手性中心”是指附接了四个不同基团的碳原子。
[0210] 术语“对映体”和“对映体的”是指无法在其镜像上重叠并因此具有光学活性的分子，其中对映体使偏振光的平面在一个方向上旋转，并且其镜像化合物使偏振光的平面在相反的方向上旋转。
[0211] 术语“外消旋”是指相等部分的对映体的混合物，且该混合物无光学活性。
[0212] 术语“拆分”是指分子的两种对映体形式中的一者的分离或浓缩或耗尽。
[0213] 术语“一种(个)(a/an)”是指一种(个)或多种(个)。
[0214] 术语“治疗(treat/treating/treatment)”意指涵盖对受试者施用本公开的化合物以用于改善或治愈的目的，包括先行性和姑息性治疗。在一个实施方案中，术语“治疗(treat/treating/treatment)”意指涵盖对受试者施用本公开的化合物以用于改善或治愈的目的。
[0216] 本公开涵盖本公开的化合物的盐的制备和用途，包括无毒的药学上可接受的盐。药学上可接受的加成盐的例子包括无机和有机酸加成盐和碱式盐。药学上可接受的盐包括但不限于金属盐，如钠盐、钾盐、铯盐等；碱土金属，如钙盐、镁盐等；有机胺盐，如三乙胺盐、吡啶盐、甲基吡啶盐、乙醇胺盐、三乙醇胺盐、二环己胺盐、N，N′-二苄基乙二胺盐等；无机酸盐，如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、硫酸盐等；有机酸盐，如柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐、乙酸盐、二氯乙酸盐、三氟乙酸盐、草酸盐、甲酸盐等；磺酸盐，如甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐等；和氨基酸盐，如精氨酸盐、天冬氨酸盐、谷氨酸盐等。
[0217] 可通过将特定的本公开的化合物的溶液与药学上可接受的无毒酸的溶液混合来形成酸加成盐，所述药学上可接受的无毒酸如盐酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸、草酸、二氯乙酸等。可通过将本公开的化合物的溶液与药学上可接受的无毒碱的溶液混合来形成碱式盐，所述药学上可接受的无毒碱如氢氧化钠、氢氧化钾、胆碱氢氧化物、碳酸钠等。
[0218] 本公开涵盖本公开的化合物的溶剂化物的制备和用途。溶剂化物通常不显著地改变化合物的生理活性或毒性，且如此可充当药理学等效物。如本文所用的“溶剂化物”是本公开的化合物与溶剂分子的组合、物理缔合和/或溶剂化，例如二溶剂化物、单溶剂化物或半溶剂化物，其中溶剂分子与本公开的化合物的比率分别为约2∶1、约1∶1或约1∶2。此物理缔合涉及不同程度的离子和共价键合，包括氢键合。在某些情况下，溶剂化物可以被分离，如当一个或多个溶剂分子结合到结晶固体的晶格当中时。因此，“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离的溶剂化物两者。本公开的化合物可呈现为与诸如水、甲醇、乙醇等的药学上可接受的溶剂的溶剂化形式，并且本公开旨在包括本公开的化合物的溶剂化和非溶剂化形式。溶剂化物的一种类型是水合物。“水合物”涉及溶剂化物的特定亚组，其中溶剂分子是水。溶剂化物通常可充当药理学等效物。溶剂化物的制备是本领域中已知的。参见例如M.Caira等人，J.Pharmaceut.Sci.，93(3)：601-611(2004)，该文献描述氟康唑与乙酸乙酯和与水的溶剂化物的制备。E.C.van Tonder等人，AAPS Pharm.Sci.Tech.，5(1)：Article 12(2004)和A.L.Bingham等人，Chem.Commun.603-604(2001)描述了溶剂化物、半溶剂化物、水合物等的类似制备。制备溶剂化物的典型非限制性方法将涉及在高于20℃至约25℃的温度下将本公开的化合物溶解在所需溶剂(有机、水或其混合物)中，然后以足以形成晶体的速率冷却溶液，并通过例如过滤的已知方法分离晶体。诸如红外光谱法的分析技术可用于确认溶剂在溶剂化物的晶体中的存在。
[0219] 因为本公开的化合物是钠(Na+)通道的阻断剂，所以可通过使用这些化合物治疗通过钠离子流入介导的许多疾病和病状。本公开因此通常涉及治疗动物中的病症或缓解其症状的方法，其中该病症对钠通道的阻断有反应，所述动物罹患所述病症或有罹患所述病症的危险，所述方法包括对动物施用有效量的一种或多种本公开的化合物。
[0220] 本公开进一步涉及在有需要的动物中调节钠通道的方法，所述方法包括对动物施用调节有效量的至少一种本公开的化合物。
[0221] 更具体地，本公开提供治疗中风、头部创伤所致的神经元损伤、癫痫、整体和局灶性缺血后的神经元脱失、疼痛(例如急性疼痛、慢性疼痛，其包括但不限于神经病理性疼痛、手术后疼痛和炎性疼痛或外科手术疼痛)、神经变性病症(例如阿尔茨海默氏病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)或帕金森氏病)、偏头痛、躁狂抑郁症、耳鸣、肌强直、运动病症或心律不整或缓解其症状或提供局部麻醉的方法。在一个实施方案中，本公开提供治疗疼痛的方法。在另一实施方案中，疼痛的类型是慢性疼痛。在另一实施方案中，疼痛的类型是神经病理性疼痛。在另一实施方案中，疼痛的类型是手术后疼痛。在另一实施方案中，疼痛的类型是炎性疼痛。在另一实施方案中，疼痛的类型是外科手术疼痛。在另一实施方案中，疼痛的类型是急性疼痛。在另一实施方案中，疼痛(例如慢性疼痛如神经病理性疼痛、手术后疼痛或炎性疼痛、急性疼痛或外科手术疼痛)的治疗是先行性的。在另一实施方案中，疼痛的治疗是姑息性的。在每种情况下，这种治疗方法需要对需要这种治疗的动物施用在治疗上可有效实现所述治疗的量的本公开的化合物。在一个实施方案中，这种化合物的量是体外可有效阻断钠通道的量。在一个实施方案中，这种化合物的量是体内可有效阻断钠通道的量。
[0222] 慢性疼痛包括但不限于炎性疼痛、手术后疼痛、癌症疼痛、与转移性癌症相关联的骨关节炎疼痛、三叉神经痛、急性疱疹和疱疹后神经痛、糖尿病性神经病变、灼痛、臂丛撕脱伤、枕骨神经痛、反射性交感神经营养不良、纤维肌痛、痛风、幻肢痛、烧伤疼痛及其它形式的神经痛、神经病理性和特发性疼痛综合症。
[0223] 慢性躯体疼痛通常由对诸如神经卡压、外科手术、癌症或关节炎的组织损伤的炎性反应引起(Brower，Nature Biotechnology 18：387-391(2000))。
[0224] 炎症过程是对组织损伤或外来物质的存在起反应而激活的一系列复杂的生物化学和细胞事件(Levine，Inflammatory Pain，Textbook of Pain，Wall和Melzack编辑，第3版，1994)。炎症常常发生在受伤组织或外来物质的部位，并且有助于组织修复和愈合过程。炎症的基本征象包括红斑(发红)、发热、浮肿(肿胀)、疼痛和机能损失(同上)。大多数炎性疼痛患者不连续地经历疼痛，而是当移动或触摸发炎的部位时经历疼痛增强。炎性疼痛包括但不限于与骨关节炎和类风湿性关节炎相关联的疼痛。
[0225] 慢性神经病理性疼痛是病因不明的异质性疾病状态。在慢性神经病理性疼痛中，疼痛可以是通过多种机制介导的。这种类型的疼痛通常源于对周围或中枢神经组织的损伤。综合症包括与脊髓损伤、多发性硬化、疱疹后神经痛、三叉神经痛、幻觉疼痛、灼痛和反射性交感神经营养不良及下背部疼痛相关联的疼痛。慢性疼痛与急性疼痛的不同之处在于患者遭受异常的疼痛感觉，其可被描述为自发性疼痛、连续浅表烧灼和/或深度酸痛。疼痛可由热、冷和机械痛觉过敏或者由热、冷或机械异常性疼痛诱发。
[0226] 神经病理性疼痛可由周围感觉神经的损伤或感染引起。其包括但不限于来自周围神经创伤、疱疹病毒感染、糖尿症、灼痛、丛撕脱伤、神经瘤、截肢和血管炎的疼痛。来自慢性酒精中毒、人类免疫缺陷病毒感染、甲状腺机能减退、尿毒症或维生素缺乏的神经损伤也引起神经病理性疼痛。中风(脊髓或脑)和脊髓损伤也可诱发神经病理性疼痛。癌症相关的神经病理性疼痛源于相邻神经、脑或脊髓的肿瘤生长压迫。此外，包括化疗和放射治疗在内的癌症治疗也可引起神经损伤。神经病理性疼痛包括但不限于由神经损伤引起的疼痛，举例如糖尿病患者所遭受的疼痛。
[0227] 本公开还涉及本公开的化合物在制造药物方面的用途，所述药物用于治疗罹患病症的动物中的所述病症或缓解其症状，其中所述病症对钠通道的阻断有反应(例如上面列举的任何病症)。
[0228] 化合物的一般性合成
[0229] 可考虑本公开内容采用常规的有机合成或通过下面一般性方案中所示的例示方法制备式I的化合物。
[0230] 一般性方案1
[0231]
[0232] 在一般性方案1中，通过在诸如二噁烷的合适溶剂中，在诸如Pd(dppf)Cl2的合适催化剂和诸如KOAc的合适碱的存在下与化合物B反应使化合物A(其中PG是保护基团，且X是合适的离去基团，如卤化物基、三氟甲磺酸根、甲苯磺酸根、甲磺酸根等)转化成化合物C。通过在诸如DME的合适溶剂中，在诸如Pd(PPh3)2Cl2的合适催化剂和诸如Na2CO3的合适碱的存在下与化合物D反应使化合物C转化成化合物E。
[0233] 一般性方案2
[0234]
[0235] 在一般性方案2中，通过本领域技术人员已知的适当脱保护技术(例如，Wuts，P.G.M.；Greene，T.W.，“Greene′s Protective Groups in Organic Synthesis”，第4版，J.Wiley&Sons，NY，2007)使来自一般性方案1的化合物E转化成化合物G。通过在诸如ACN的合适溶剂中，在诸如DIPEA的合适碱的存在下用合适的烷基卤、三氟甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、甲磺酸酯等进行烷基化，或者通过在诸如DCM的合适溶剂中，在诸如NaBH(OAc)3的合适还原剂的存在下用适当的醛/酮进行还原性氨化使化合物G转化成化合物I。通过在诸如DCM的合适溶剂中，在诸如TEA的合适碱的存在下与适当的磺酰氯反应使化合物G转化成化合物J。
[0236] 一般性方案3
[0237]
[0238] 在一般性方案3中，通过在诸如二噁烷水溶液的合适溶剂中，在诸如Pd(dppf)Cl2的合适催化剂和诸如Na2CO3的合适碱的存在下与化合物L反应使化合物K转化成化合物M。可通过在诸如丙酮水溶液的合适溶剂中与诸如OsO4的合适试剂反应，或者在诸如t-BuOH水溶液的合适溶剂中，与诸如AD-混合物α或β的合适手性试剂反应，使化合物M转化成化合物N。
[0239] 化合物的测试
[0240] 通过用于钠通道阻断剂活性的钠转移和/或电生理学(EP)测定来评定本公开的化合物。本公开的一个方面是基于本公开的化合物作为钠通道阻断剂的用途。基于此性质，认为本公开的化合物适用于治疗对钠离子通道的阻断有反应的病状或病症，例如中风、头部创伤所致的神经元损伤、癫痫、惊厥、具有热性惊厥的一般性癫痫、婴儿期重症肌阵挛癫痫、整体和局灶性缺血后的神经元脱失、偏头痛、家族性原发性红斑性肢痛、阵发性极度疼痛病症、小脑萎缩、共济失调、肌张力障碍、震颤、精神发育迟缓、自闭症、神经变性病症(例如阿尔茨海默氏病、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)或帕金森氏病)、躁狂抑郁症、耳鸣、肌强直、运动病症、心律不整，或提供局部麻醉。还预期本公开的化合物可有效治疗疼痛，例如急性疼痛、慢性疼痛，其包括但不限于神经病理性疼痛、手术后疼痛和炎性疼痛或外科手术疼痛。
[0241] 更具体地，本公开涉及作为钠通道的阻断剂的本公开的化合物。根据本公开内容，在钠转移和/或电生理学测定中，具有适用的钠通道阻断性质的那些化合物对Nav1.1、Nav1.2、Nav1.3、Nav1.4、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.7、Nav1.8和/或Nav1.9显示出约100μM或更小例如约50μM或更小、约25μM或更小、约10μM或更小、约5μM或更小或者约1μM或更小的IC50。在某些实施方案中，本公开的化合物对Nav1.7显示出100μM或更小、约50μM或更小、约25μM或更小、约10μM或更小、约5μM或更小、约1μM或更小、约0.5μM或更小、约0.1μM或更小、约0.05μM或更小或者约0.01μM或更小的IC50。可采用本领域中已知的方法并通过以下荧光成像和电生理学体外测定和/或体内测定来测试本公开的化合物的Na+通道阻断活性。
[0242] 在一个实施方案中，本公开的化合物表现出基本上不穿透哺乳动物中的CNS血脑屏障。这类化合物被称为是“周围限制性的”，作为指定其PNS对比CNS组织选择性的方式。
[0243] 在一个实施方案中，周围限制性的本公开的化合物的PNS∶CNS浓度比为约5∶1、约10∶1、约20∶1、约30∶1；约50∶1；约100∶1、约250∶1、约500∶1、约1000∶1、约5,000∶1、约10,000∶1或更大。可采用本领域中已知的体外和体内方法测试本公开的化合物穿透中枢神经系统的能力。
[0244] 体外测定方案
[0245] 测定
[0246] 重组Nav1.7细胞系：在表达编码人类Nav1.7(登录号NM_002977)的α亚基(Nav1.7、SCN9a、PN1、NE)的cDNA的重组细胞系中进行体外测定。细胞系由耶鲁大学的研究者提供(Cummins等人，J.Neurosci.18(23)：9607-9619(1998))。对于表达Nav1.7的克隆的显性选择，表达质粒共表达新霉素抗性基因。细胞系在人类胚胎肾细胞系HEK293中在CMV主要晚期启动子的影响下构建，并使用限制稀释克隆和使用新霉素类似物G418的抗生素选择来选择稳定的克隆。没有将重组β和γ亚基引入此细胞系当中。也可单独或与各种β亚基、γ亚基或伴侣蛋白组合使用表达自其它物种克隆的重组Nav1.7的另外的细胞系。
[0247] 表达天然Nav1.7的非重组细胞系：作为选择，体外测定可在表达天然非重组Nav1.7的细胞系中进行，如可得自欧洲细胞培养物保藏中心(European Cell Culture Collection)的ND7小鼠神经母细胞瘤X大鼠背根神经节(DRG)杂交细胞系ND7/23(目录号
92090903，Salisbury，Wiltshire，United Kingdom)。测定也可以在来自各种物种的表达天然非重组Nav1.7的其它细胞系中进行，或者在自各种物种分离的新鲜或保存的感觉神经元如背根神经节(DRG)细胞的培养物中进行。也可以进行其它电压门控钠通道的初级筛选或反向筛选(counter-screen)，并且细胞系可采用本领域中已知的方法构建，从合作者或商业机构购买，并且它们可表达重组或天然通道。初级反向筛选用于在HEK293宿主细胞中表达的中枢神经元钠通道之一NaV1.2(rBIIa)(Ilyin等人，Br.J.pharmacol.144：801-812(2005))。在类似于下面描述的初级或替代Nav1.7测定的条件下进行这些反向筛选的药理学型态分析。
92090903，Salisbury，Wiltshire，United Kingdom)。测定也可以在来自各种物种的表达天然非重组Nav1.7的其它细胞系中进行，或者在自各种物种分离的新鲜或保存的感觉神经元如背根神经节(DRG)细胞的培养物中进行。也可以进行其它电压门控钠通道的初级筛选或反向筛选(counter-screen)，并且细胞系可采用本领域中已知的方法构建，从合作者或商业机构购买，并且它们可表达重组或天然通道。初级反向筛选用于在HEK293宿主细胞中表达的中枢神经元钠通道之一NaV1.2(rBIIa)(Ilyin等人，Br.J.pharmacol.144：801-812(2005))。在类似于下面描述的初级或替代Nav1.7测定的条件下进行这些反向筛选的药理学型态分析。
[0248] 细胞维持：除另有说明外，细胞培养试剂购自Herndon，VA的Mediatech。在由含有10％胎牛血清(FBS，Hyclone，Thermo Fisher Scientific，Logan，UT)、100U/mL盘尼西林、
100μg/mL链霉素、2-4mM L-谷氨酰胺和500mg/mL G418的杜尔贝科氏(Dulbecco′s)最低必需培养基组成的生长培养基中常规培养重组Nav1.7/HEK293细胞。对于天然非重组细胞系，省略选择性抗生素，并且可根据需要应用另外的培养基制剂。
100μg/mL链霉素、2-4mM L-谷氨酰胺和500mg/mL G418的杜尔贝科氏(Dulbecco′s)最低必需培养基组成的生长培养基中常规培养重组Nav1.7/HEK293细胞。对于天然非重组细胞系，省略选择性抗生素，并且可根据需要应用另外的培养基制剂。
[0249] 测定缓冲液：通过从新鲜无菌的dH2O的1L瓶(Mediatech，Herndon，VA)中移出120mL并添加100mL不含Ca++或Mg++的10X HBSS(Gibco，Invitrogen，Grand Island，NY)，接着是20mL的1.0M Hepes，pH7.3(Fisher Scientific，BP299-100)，由此配制测定缓冲液。最终缓冲液由20mM Hepes，pH 7.3、1.261mM CaCl2、0.493mM MgCl2、0.407mM Mg(SO)4、5.33mM KCl、0.441mM KH2PO4、137mM NaCl、0.336mM Na2HPO4和0.556mM D-葡萄糖组成(Hanks等人，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.71：196(1949))，并且在整个测定(即，所有洗涤和添加步骤)当中简单制剂通常是碱性缓冲液。
[0250] 用于初级荧光测定的CoroNaTM Green AM Na+染料：初级荧光测定中使用的荧光指示剂是CoroNaTM Green(Invitrogen，Molecular Probes，Eugene，OR)的细胞渗透型式，其是一种在荧光范围内发光的染料(Harootunian等人，J.Biol.Chem.264(32)：19458-19467+(1989))。当染料暴露于其可部分选择性地结合的Na 离子时，此发射的强度而不是波长范围增加。在临荧光测定之前用CoroNaTM Green染料加载表达Nav1.7或其它钠通道的细胞，然后，在激动剂刺激后，在Na+离子通过激活的钠通道孔从细胞外液流入细胞质时检测到Na+离子的转移。染料呈冻干粉末的形式在黑暗中储存，然后根据制造商的指示，在临细胞加载程序前溶解等分试样至在DMSO中为10mM的储备浓度。然后将其在测定缓冲液中稀释成4X浓缩的工作溶液，使得染料在细胞加载缓冲液中的最终浓度为5μM。
[0251] 用于替代荧光测定的膜电位染料：可用于替代荧光测定的荧光指示剂是蓝色型式膜电位染料(MDS，Molecular Devices，Sunnyvale，CA)，其是一种检测膜电位变化之后的分子变化的染料。如果激动剂刺激引发膜电位变化，则预期荧光增加。在荧光测定前将表达Nav1.7或其它钠通道的细胞与膜电位染料一起温育30-60分钟。在测定的KCl预刺激型式的情况下，在临测定前冲刷染料和所有其它组分，并且然后更换染料。在缺少KCl预刺激的型式中，染料保留在细胞上且不冲刷或更换。染料呈冻干粉末形式在黑暗中储存，然后等分试样溶于测定缓冲液中形成20X浓缩的储备溶液，其可用数周。
[0252] 激动剂：在荧光测定中，组合使用两种激动剂，即1)藜芦定；和2)来自黄蝎黑背以色列金蝎(Leiurus quinquestriatus hebraeus)的毒液。藜芦定是一种生物碱小分子，其通过抑制失活而促进捕获通道开口，且蝎毒是一种天然制剂，其包括对电压门控钠通道的不同亚组有选择性的肽毒素。这些蝎毒素抑制它们的同源靶通道的快速失活。激动剂的储备溶液制备成在DMSO中40mM(藜芦定)和在dH2O中1mg/mL(蝎毒)，然后在测定缓冲液中稀释以制成4X或2X储备液(取决于具体的测定)，最终浓度为100M(藜芦定)和10g/mL(蝎毒)。两种激动剂购自Sigma Aldrich，St.Louis，MO。
[0253] 测试化合物将测试化合物溶于DMSO，得到10mM储备溶液。使用DMSO按1∶3连续稀释步骤对储备溶液进行10点的进一步稀释(10,000μM、3.333μM、1.111μM、370μM、123μM、41μM、14μM、4.6μM、1.5μM和0.5μM)。在测定缓冲液中将储备溶液进一步稀释(1∶125)为4X连续稀释储备液，DMSO浓度为0.8％(最终[DMSO]，在测定中，来自化合物组分＝0.2％)，使得测定中的化合物的最终浓度为20μM、6.7μM、2.2μM、0.74μM、0.25μM和0.08μM、0.03μM、0.01μM、
0.003μM和0.001μM。如果特定的测试品看起来特别有效，则将浓度曲线调节例如至低10倍的浓度，以便在更相关的浓度范围内进行剂量-反应。早在动力学读数中，在染料加载和预刺激步骤期间以及然后再次在荧光测定期间添加化合物稀释液。跨越96孔板的中间80个孔按双行添加化合物稀释液，而完全刺激和完全抑制的对照(阳性和阴性)分别位于测定板的左侧和右侧上的顶部4个侧孔和底部4个侧孔中。
0.003μM和0.001μM。如果特定的测试品看起来特别有效，则将浓度曲线调节例如至低10倍的浓度，以便在更相关的浓度范围内进行剂量-反应。早在动力学读数中，在染料加载和预刺激步骤期间以及然后再次在荧光测定期间添加化合物稀释液。跨越96孔板的中间80个孔按双行添加化合物稀释液，而完全刺激和完全抑制的对照(阳性和阴性)分别位于测定板的左侧和右侧上的顶部4个侧孔和底部4个侧孔中。
[0254] 数据分析：根据本领域的技术人员已知的方法或使用 Prism程序4.0或更高版本(可得自GraphPad Software，San Diego，CA)分析数据以确定测试品的IC50值。在每个实验期间评价至少一种标准参考化合物。
[0255] 采用KCl和测试品预温育的 或 钠染料测定：通过以～40,000个细胞/孔的密度，将表达单独或与各种β和γ亚基组合的重组或非重组天然Nav1.7α亚基的重组HEK293细胞或其它宿主细胞涂铺到96孔黑色透明底PDL涂布板里来准备细胞。
如果需要的话，可使用按比例较少的细胞和较少的培养基使测定适于384孔或1,536孔格式。然后在37℃、5％CO2和95％湿度条件下将板在有或没有选择性抗生素的生长培养基中温育过夜，为测定做准备。对于其它电压门控钠通道的反向筛选，程序非常类似，不过可针对具体的细胞系或同种型微调细胞的最佳密度、培养基和后续的测定组分。
如果需要的话，可使用按比例较少的细胞和较少的培养基使测定适于384孔或1,536孔格式。然后在37℃、5％CO2和95％湿度条件下将板在有或没有选择性抗生素的生长培养基中温育过夜，为测定做准备。对于其它电压门控钠通道的反向筛选，程序非常类似，不过可针对具体的细胞系或同种型微调细胞的最佳密度、培养基和后续的测定组分。
[0256] 次日，在测定开始时，自细胞轻轻拂去培养基并用50μl/孔测定缓冲液(没有碳酸氢钠或酚红的1X Hank氏平衡盐溶液、20mM Hepes，pH 7.3)洗涤孔一次，然后与测试品、CoroNaTM Green AM钠染料(用于细胞加载)和用于将细胞的整个群体中的通道再极化和同步的KCl一起预温育。对于此染料加载和预刺激步骤，在洗涤步骤后立即如下添加组分：1)首先，按50μL/孔以在测定缓冲液中4X浓缩物的形式添加化合物稀释液和对照物；2)自储备溶液将CoroNaTM Green AM染料稀释至在测定缓冲液中为20μM(4X浓缩物)并按50μL/孔向板中添加；和3)最后，通过将2M储备溶液稀释到测定缓冲液里制备180mM KCl(2X)的溶液，并且按100l/孔对细胞添加溶液。在测量荧光前将细胞在25℃下黑暗温育30分钟。
[0257] 然后轻拂含有加载染料的细胞的板以移除预温育组分并用100μL/孔测定缓冲液洗涤一次。将测定缓冲液的100μL/孔等分试样回添至板，并且开始实时测定。使用荧光板读数器( 或 MDS，Molecular Devices，Sunnyvale，CA)测量细胞的荧光。通过激光器或PMT光源激发样品(激发波长＝470-495nM)并过滤发射(发射波长＝515-575nM)。此基于细胞的中到高通量测定中的化合物和通道激活剂的添加是在荧光板读数器上进行的，并且每1-3秒借助相机拍摄捕捉结果(以相对荧光单位表示)，然后实时显示并储存。一般地，有15秒基线，相机每1.5秒进行拍摄，然后添加测试化合物，然后进行另一个120秒基线，相机每3秒进行拍摄；且最后，添加激动剂溶液(含藜芦定和蝎毒)。此后捕捉到源于Na+离子结合于CoroNaTM Green染料的荧光振幅增加，历时～180秒。结果以相对荧光单位(RFU)表示，并且可通过以下方式来确定：在刺激的后部分期间使用最大信号；或者在整个激动剂刺激时段期间最大值减去最小值；或者通过求出整个刺激时段的曲线下的面积。
[0258] 测定也可以作为筛选测定进行，在初级筛选期间测试品以标准量(例如10μM)仅存在于多孔板的一个或两个孔中。通常对此筛选中的采样更详尽地(多次)进行型态分析，经受剂量-反应或竞争测定，并在反向筛选中针对其它电压门控钠通道或其它生物学上相关的靶分子进行测试。
[0259] 采用KCl和测试品预温育的 或 膜电位测定：通过以～40,000个细胞/孔的密度，将表达单独或与各种β和γ亚基组合的重组或非重组天然NaV1.7α亚基的重组HEK293细胞或其它宿主细胞涂铺到96孔黑色透明底PDL涂布板里来准备细胞。
如果需要的话，可使用按比例较少的细胞和培养基使测定适于384孔或1,536孔格式。然后在37℃、5％CO2和95％湿度条件下将板在有或没有选择性抗生素的生长培养基中温育过夜，为测定做准备(参见例如Ben.iamin等人，J.Biomol.Screen10(4)：365-373(2005))。对于其它电压门控钠通道的筛选和反向筛选，测定方案是类似的，不过可针对被测试的具体细胞系或钠通道同种型微调细胞的最佳密度、培养基和后续的测定组分。
如果需要的话，可使用按比例较少的细胞和培养基使测定适于384孔或1,536孔格式。然后在37℃、5％CO2和95％湿度条件下将板在有或没有选择性抗生素的生长培养基中温育过夜，为测定做准备(参见例如Ben.iamin等人，J.Biomol.Screen10(4)：365-373(2005))。对于其它电压门控钠通道的筛选和反向筛选，测定方案是类似的，不过可针对被测试的具体细胞系或钠通道同种型微调细胞的最佳密度、培养基和后续的测定组分。
[0260] 次日，在测定开始时，自细胞轻轻拂去培养基并用50μL/孔测定缓冲液(没有碳酸氢钠或酚红的1X Hank氏平衡盐溶液、20mM Hepes，pH 7.3)洗涤孔一次，然后与测试品、膜电位染料(用于细胞加载)和用于将细胞的整个群体中的通道再极化和同步的KCl一起预温育。对于此染料加载和预刺激步骤，在洗涤步骤后立即如下添加组分：1)首先，按50μL/孔以在测定缓冲液中4X浓缩物的形式添加化合物稀释液和对照物；2)自储备溶液将膜电位染料稀释在测定缓冲液中(4X浓缩物)并按50μL/孔向板中添加；和3)最后，通过将2M储备溶液稀释到测定缓冲液里制备180mM KCl(2X)的溶液，并且按100μL/孔对细胞添加溶液。在测量荧光前将细胞在37℃下黑暗温育30-60分钟。
[0261] 然后轻拂含有加载染料的细胞的板以移除预温育组分并用50μL/孔测定缓冲液洗涤一次。将膜电位染料的50μL/孔等分试样回添至板，并且开始实时测定。使用荧光板读数器( 或 MDS，Molecular Devices，Sunnyvale，CA)测量细胞的荧光。通过激光器或PMT光源激发样品(激发波长＝510-545nM)并过滤发射(发射波长＝
565-625nM)。此中化合物(首先)和然后是通道激活剂(稍后)的添加是在荧光板读数器上进行的，并且每1-3秒借助相机拍摄捕捉结果，结果以相对荧光单位(RFU)表示，然后实时显示并储存。一般地，有15秒基线，相机每1.5秒进行拍摄，然后添加测试化合物，然后进行另一个120秒基线，相机每3秒进行拍摄；且最后，添加激动剂溶液(含藜芦定和蝎毒)。此后捕捉到源于检测到膜电位变化的荧光振幅增加，历时～120秒。结果以相对荧光单位(RFU)表示，并且可通过以下方式来确定：在刺激的后部分期间使用最大信号；或者在整个刺激时段期间最大值减去最小值；或者通过求出整个刺激时段的曲线下的面积。
565-625nM)。此中化合物(首先)和然后是通道激活剂(稍后)的添加是在荧光板读数器上进行的，并且每1-3秒借助相机拍摄捕捉结果，结果以相对荧光单位(RFU)表示，然后实时显示并储存。一般地，有15秒基线，相机每1.5秒进行拍摄，然后添加测试化合物，然后进行另一个120秒基线，相机每3秒进行拍摄；且最后，添加激动剂溶液(含藜芦定和蝎毒)。此后捕捉到源于检测到膜电位变化的荧光振幅增加，历时～120秒。结果以相对荧光单位(RFU)表示，并且可通过以下方式来确定：在刺激的后部分期间使用最大信号；或者在整个刺激时段期间最大值减去最小值；或者通过求出整个刺激时段的曲线下的面积。
[0262] 测定也可以作为筛选测定进行，在初级筛选期间测试品以标准量(例如10μM)仅存在于多孔板的一个或两个孔中。通常对此筛选中的采样更详尽地(多次)进行型态分析，经受剂量-反应或竞争测定，并在反向筛选中针对其它电压门控钠通道或其它生物学上相关的靶分子进行测试。
[0263] 没有KCl和测试品预温育的 或 钠染料测定：通过以～40,000个细胞/孔的密度，将表达单独或与各种β和γ亚基组合的重组或非重组天然NaV1.7α亚基的重组HEK293细胞或其它宿主细胞涂铺到96孔黑色透明底PDL涂布板里来准备细胞。
如果需要的话，可使用按比例较少的细胞和培养基使测定适于384孔或1,536孔格式。然后在37℃、5％CO2和95％湿度条件下将板在有或没有选择性抗生素的生长培养基中温育过夜，为测定做准备。对于其它电压门控钠通道的反向筛选，程序非常类似，不过可针对具体的细胞系或同种型微调细胞的最佳密度、培养基和后续的测定组分。
如果需要的话，可使用按比例较少的细胞和培养基使测定适于384孔或1,536孔格式。然后在37℃、5％CO2和95％湿度条件下将板在有或没有选择性抗生素的生长培养基中温育过夜，为测定做准备。对于其它电压门控钠通道的反向筛选，程序非常类似，不过可针对具体的细胞系或同种型微调细胞的最佳密度、培养基和后续的测定组分。
[0264] 次日，在测定开始时，自细胞轻轻拂去培养基并用50μL/孔测定缓冲液(没有碳酸氢钠或酚红的IX Hank氏平衡盐溶液、20mM Hepes，pH 7.3)洗涤孔一次。然后将膜电位染料从测定缓冲液中的储备液的新近稀释的样品(现为4X浓度)添加到96孔板的每个孔中(50μL/孔)。在测量荧光前将细胞在37℃下黑暗温育30-60分钟。
[0265] 在此标准膜电位测定中，然后将含有加载染料的细胞的96孔板直接加载到板读数器上面，无需抽吸染料溶液，并且无需细胞的任何进一步洗涤。使用荧光板读数器(或 MDS，Molecular Devices，Sunnyvale，CA)测量细胞的荧
光。通过激光器或PMT光源激发样品(激发波长＝510-545nM)并过滤发射(发射波长＝565-
625nM)。此动力学测定中化合物(首先，50μL/孔，自4X储备液板)和然后是通道激活剂(稍后，100μL/孔，自2X储备溶液)的添加是在荧光板读数器上进行的，并且每1-3秒借助相机拍摄捕捉结果，结果以相对荧光单位(RFU)表示，然后实时显示并储存。一般地，有15秒基线，相机每1.5秒进行拍摄，然后添加测试化合物，然后进行另一个120秒基线，相机每3秒进行拍摄；且最后，添加激动剂溶液(含藜芦定和蝎毒)。此后捕捉到源于检测到膜电位变化的荧光振幅增加，历时～120秒。结果以相对荧光单位(RFU)表示，并且可通过以下方式来确定：
在刺激的后部分期间使用最大信号；或者在整个刺激时段期间最大值减去最小值；或者通过求出整个刺激时段的曲线下的面积。
光。通过激光器或PMT光源激发样品(激发波长＝510-545nM)并过滤发射(发射波长＝565-
625nM)。此动力学测定中化合物(首先，50μL/孔，自4X储备液板)和然后是通道激活剂(稍后，100μL/孔，自2X储备溶液)的添加是在荧光板读数器上进行的，并且每1-3秒借助相机拍摄捕捉结果，结果以相对荧光单位(RFU)表示，然后实时显示并储存。一般地，有15秒基线，相机每1.5秒进行拍摄，然后添加测试化合物，然后进行另一个120秒基线，相机每3秒进行拍摄；且最后，添加激动剂溶液(含藜芦定和蝎毒)。此后捕捉到源于检测到膜电位变化的荧光振幅增加，历时～120秒。结果以相对荧光单位(RFU)表示，并且可通过以下方式来确定：
在刺激的后部分期间使用最大信号；或者在整个刺激时段期间最大值减去最小值；或者通过求出整个刺激时段的曲线下的面积。
[0266] 测定也可以作为筛选测定进行，在初级筛选期间测试品以标准量(例如10μM)仅存在于多孔板的一个或两个孔中。通常对此筛选中的采样更详尽地(多次)进行型态分析，经受剂量-反应或竞争测定，并在反向筛选中针对其它电压门控钠通道或其它生物学上相关的靶分子进行测试。
[0267] 电生理学测定
[0268] 细胞人工电生理学：将表达hNav1.7的HEK-293细胞涂铺在预涂有标准DMEM培养基(Mediatech，Inc.，Herndon，VA)中的聚-D-赖氨酸的35mm培养皿上，并在5％CO2温育箱中在37℃下温育。涂铺后大约12-48小时使用培养的细胞。
[0269] 细胞自动化电生理学：将表达hNav1.7的HEK-293细胞涂铺在标准DMEM培养基(Mediatech，Inc.)中的组织培养烧瓶上，并在5％CO2温育箱中在37℃下温育。涂铺后大约
12-48小时使用培养的细胞。
12-48小时使用培养的细胞。
[0270] 人工电生理学：在实验的当天，将35mm培养皿放置在配有灌注系统的倒置显微镜的平台上，所述灌注系统以新鲜的记录培养基(recording media)连续地灌注培养皿。使用重力驱动的超灌注系统将测试溶液直接施加于评价的细胞。此“射手(shooter)”系统由连接至机动化水平平移器的系列玻璃吸移管组成。射手的出口位于离所关注的细胞大约100μm处。
[0271] 采用全细胞膜片钳构造记录全细胞电流，使用Axopatch 200B放大器(Axon Instruments，Foster City CA)、1322A A/D转换器(Axon Instruments)和pClamp软件(v.8；Axon Instruments)并储存在个人计算机上。形成千兆封口(Gigaseal)并以电压钳模式建立全细胞构造，并且记录通过hNav1.7通道产生的膜电流。使用当充满吸移管溶液时电阻值在1.5MΩ与2.0MΩ之间的硼硅酸盐玻璃吸移管并且串联电阻(＜5MΩ)被补偿75-
80％。在50kHz下进行信号采样并且在3kHz下进行低通过滤。
80％。在50kHz下进行信号采样并且在3kHz下进行低通过滤。
[0272] 自动化电生理学：在实验的当天，通过移除培养基并用适当的酶消化以使细胞悬浮在外部溶液中来准备细胞。
[0273] 采用全细胞膜片钳构造记录全细胞电流，使用Patchliner(Nanion Technologies，Munich Germany)、EPC 10科卓(quadro)放大器(HEKA，Bellmore，New York)和PatchControl HT 10905(Nanion Technologies)及PatchMaster v2x73软件(HEKA)，并储存在个人计算机上。形成千兆封口并以电压钳模式建立全细胞构造，并且记录通过
hNav1.7产生的膜电流。NPC-16芯片具有当充满吸移管溶液时在1.0MΩ与2.0MΩ之间的电阻值和串联电阻(＜5MΩ)。在25kHz下进行信号采样并且在3kHz下进行低通过滤。
hNav1.7产生的膜电流。NPC-16芯片具有当充满吸移管溶液时在1.0MΩ与2.0MΩ之间的电阻值和串联电阻(＜5MΩ)。在25kHz下进行信号采样并且在3kHz下进行低通过滤。
[0274] 电压方案人工电生理学：在以电压钳模式建立全细胞构造后，运行电压方案以建立每个细胞的1)测试电位(Vmax)，2)保持电位(Vh)，和3)调节电位。
[0275] 在以电压钳模式建立全细胞构造后，运行标准I-V方案以确定引出最大电流(Imax)的电位。此电位是测试电位(Vt)。为确定100％的通道处于失活状态的调节电位，采用系列的十五个100ms长的去极化预脉冲，以10mV步进递增，紧接着5ms测试脉冲至Vmax，运行标准稳态失活(SSIN)方案。此方案还允许确定所有通道处于休眠状态的保持电位。
[0276] 对于引起从失活恢复显著迟延的化合物，使用以下方案产生对通道的失活状态的亲和力(Ki)的估计量。从负端无残余失活的保持电位，使细胞去极化至调节电压，历时2-5秒，返回到负保持电位，历时10-20ms，以解除快速失活，然后去极化至测试电位，历时～15ms。每10-15秒重复此电压方案，首先在不存在测试化合物的情况下建立基线，然后在存在测试化合物的情况下建立基线。
[0277] 建立稳定的基线后，施加测试化合物并评估通过测试脉冲引出的电流的阻断。在一些情况下，施加多个累积浓度以确定阻断40-60％之间的此电流的浓度。通过用对照溶液过冷一次试图冲刷化合物观察到稳态阻断。Ki的估计值计算如下：
[0278] Ki＝[药物]＊{FR/(1-FR)}， 方程1
[0279] 其中[药物]是药物的浓度，和
[0280] FR＝I(药物后)/I(对照)， 方程2
[0281] 其中I是峰值电流振幅。如果使用多个浓度，则由逻辑方程对针对相应的药物浓度绘出的FR的拟合确定Ki。
[0282] 在替代方案中，检查hNav1.7电流的电压钳方案如下。在以电压钳模式建立全细胞构造后，运行两种电压方案以建立每个细胞的1)保持电位；和2)测试电位。
[0283] 休眠阻断：为确定大部分通道处于休眠状态的膜电位，采用100ms预脉冲×10mV去极化步骤运行标准稳态失活(SSIN)方案。用于测试休眠阻断的保持电位(Vh1)通常比其中采用失活方案观察到失活的第一电位更超极化20mV。
[0284] 从此保持电位，运行标准I-V方案以确定引出最大电流的电位(Vmax)。此电位是测试电位(Vt)。
[0285] 化合物测试方案是每10-15秒重复的从Vh1(由SSIN确定)至Vt(由I-V方案确定)的系列10ms去极化。在建立稳定的基线后，施加高浓度的测试化合物(最高浓度的溶解度允许或其提供～50％阻断)并评估电流的阻断。通过用对照溶液过冷一次试图冲刷化合物观察到稳态阻断。通道的休眠状态的亲和力计算如下：
[0286] Kr＝[药物]＊{FR/(1-FR)}， 方程3
[0287] 其中[药物]是药物的浓度，和
[0288] FR＝I(药物后)/I(对照)， 方程2
[0289] 其中I是峰值电流振幅并用于估计休眠阻断解离常数Kr。
[0290] 失活通道的阻断：为评估失活通道的阻断，使保持电位去极化，使得当脉冲至与上面相同的Vt时20-50％的电流振幅减少。这是第二保持电位(Vh2)。此去极化的大小取决于初始电流振幅和由缓慢失活所致的电流损耗的速率。记录电流减少以确定在此电位下可用通道的分数(h)。
[0291] h＝I@Vh2/Imax。 方程4
[0292] 在此膜电压下，一定比例的通道处于失活状态，且因此通过阻断剂的抑制包括与休眠和失活通道的相互作用。
[0293] 为确定测试化合物对失活通道的效力，每10-15秒通过从Vh2至Vt的10ms电压步进引出系列电流。在建立稳定的基线后，施加低浓度的化合物。在一些情况下，将必须施加多个累积浓度以确定阻断40-60％之间的电流的浓度。试图冲刷以重新建立基线。相对于投影基线测量分数反应以确定Kapp。
[0294] Kapp＝[药物]＊{FR/(1-FR)}， 方程5
[0295] 其中[药物]是药物的浓度。
[0296] 此Kapp值连同计算的Kr和h值用于采用以下方程计算化合物对失活通道的亲和力(Ki)：
[0297] Ki＝(1-h)/((1/Kapp)-(h/Kr))。 方程6
[0298] 电压方案自动化电生理学：如上所述采用类似的电压方案，然而将测试电位(Vt)设成预定的电压。如上所述确定Kapp。
[0299] 溶液和化学品：对于电生理学记录，外部溶液是补充有10mM HEPES(pH用NaOH调节至7.34且摩尔渗透压浓度调节至320)的标准HBSS或补充有10mM HEPES(pH用NaOH调节至7.4；摩尔渗透压浓度＝320)的台氏(Tyrode)盐溶液(Sigma，USA)。内部吸移管溶液含有(以mM计)：NaCl(10)、CsF(140)、CaCl2(1)、MgCl2(5)、EGTA(11)、HEPES(10：pH7.4，305mOsm)。化合物首先制备为DMSO中的系列储备溶液，然后溶于外部溶液；最终稀释液中的DMSO含量不超过0.3％。在此浓度下，DMSO不影响钠电流。用于建立基线的媒介物溶液还含有0.3％的DMSO。
[0300] 数据分析人工电生理学：使用Clampfit软件(pClamp，v.8；Axon Instruments)离线分析数据并使用GraphPad Prizm(v.4.0)软件绘图。
[0301] 数据分析自动化电生理学：使用Igor Pro(v 6.2.2.2；Wave Metrics，Inc.，Lake Oswego，OR)和Microsoft XL(Microsoft Office 2010，v14x，Microsoft，Renton WA)离线分析数据。
[0302] 疼痛的体内测定
[0303] 可在福尔马林模型中测试本公开的化合物的抗感受伤害活性，如Hunskaar等人，J.Neurosci.Methods 14：69-76(1985)中所述。在所有实验中可使用雄性Swiss Webster NIH小鼠(20-30g；Harlan，San Diego，CA)。在实验当天撤走食物。将小鼠置于普列克斯玻璃(Plexiglass)广口瓶中至少1小时以适应环境。适应期过后，将小鼠称重并且经i.p.或p.o.施用给予所关注的化合物或适当体积的媒介物(例如，10％Tween-80或0.9％盐水及其它药学上可接受的媒介物)作为对照。i.p.给药后十五分钟以及p.o.给药后30分钟，将福尔马林(在盐水中的5％甲醛溶液20μL)注入小鼠的右后爪的背侧面。将小鼠转移到普列克斯玻璃广口瓶中并监测舔或咬被注射的爪所花费的时间量。注射福尔马林后以5分钟间隔记录舔和咬的时间历时1小时。在光照周期期间以不知情的方式进行所有的实验。福尔马林反应的早期阶段被测量为0-5分钟之间的舔/咬，且从15-50分钟测量晚期阶段，可通过单向方差分析(ANOVA)来分析媒介物与药物处理组之间的差异。P值＜0.05被认为是显著的。如果化合物具有阻断福尔马林诱导的舔爪活动的早期和第二阶段的活性，则认为它们治疗急性和慢性疼痛是有效的。
[0304] 炎性或神经病理性疼痛的体内测定
[0305] 测试动物：每次实验使用在实验开始时体重在200-260g之间的大鼠。将大鼠按组安置并且在所有的时间可自由获取食物和水，除了在口服施用测试化合物之前，这时在给药前将食物移走16h。对照组用于与用本公开的化合物处理的大鼠比较。对照组施用如用于测试化合物的载体。施用于对照组的载体的体积与施用于测试组的载体和测试化合物的体积相同。
[0306] 炎性疼痛：为评估本公开的化合物对治疗炎性疼痛的作用，采用炎性疼痛的弗氏不完全佐剂(“FCA”)模型。FCA诱导的大鼠后爪的炎症与持续的炎性机械和热痛觉过敏的发展相关联，并且提供临床上适用的止痛药物的抗痛觉过敏作用的可靠预测(Bartho等人，Naunyn-Schmiedeberg′s Archives of Pharmacol.342：666-670(1990))。在损伤之前，通过确定缩爪阈值(PWT)评估动物对有害机械刺激的反应，或者通过确定缩爪潜伏期(PWL)评估对有害热刺激的反应，如下所述(基线PWT或PWL)。然后，每个动物的左后爪施用50μL的50％FCA足底内注射液。注射后24小时，再次评估PWT或PWL(施用前PWT或PWL)。然后向大鼠施用测试化合物或30mg/Kg阳性对照化合物(例如吲哚美辛)的单次注射液。然后在施用后
1、3、5和24小时确定对有害机械或热刺激的反应(施用后PWT或PWL)。每只动物的痛觉过敏的逆转百分比定义为：
1、3、5和24小时确定对有害机械或热刺激的反应(施用后PWT或PWL)。每只动物的痛觉过敏的逆转百分比定义为：
[0307]
[0308] 神经病理性疼痛：为评估测试化合物治疗神经病理性疼痛的作用，可采用Seltzer模型或Chung模型。
[0309] 在Seltzer模型中，神经病理性疼痛的部分坐骨神经结扎模型被用于在大鼠中产生神经病理性痛觉过敏(Seltzer等人，Pain 43：205-218(1990))。在异氟烷/O2吸入麻醉下进行左坐骨神经的部分结扎。在诱导麻醉后，将大鼠的左大腿剃毛并通过小的切口使坐骨神经以高大腿水平暴露，并且在靠近刚好在后二头肌半腱肌神经分支离开共同坐骨神经的点的远端的转子(trocanther)的部位仔细地清除周围结缔组织。将7-0丝缝线用3/8弯曲的反切微型针插入神经里并紧紧地结扎，使得神经厚度的背部1/3至1/2保持在结扎内。用单个肌肉缝合线(4-0尼龙(Vicryl))和氰基丙烯酸酯(vetbond)组织胶闭合伤口。外科手术之后，用抗生素粉末涂洒伤口区域。除了不操纵坐骨神经外，假治疗的大鼠经历相同的外科手术程序。外科手术后，将动物称重并置于暖垫上，直至它们从麻醉中恢复。然后将动物返回到它们的饲养笼，直到开始行为测试。通过在外科手术之前(基线)，然后在临施用药物或媒介物之前，以及施用药物或媒介物后的1、3和5小时，针对动物的同侧(受伤侧)的后爪如下所述确定PWT，由此评估动物对有害机械刺激的反应。神经病理性痛觉过敏的逆转百分比定义为：
[0310]
[0311] 在Chung模型中，神经病理性疼痛的脊神经结扎(SNL)模型被用于在大鼠中产生机械痛觉过敏、热痛觉过敏和触觉异常性疼痛。在异氟烷/O2吸入麻醉下进行外科手术。在诱导麻醉后，造成3cm切口，并以L4-S2水平将左椎旁肌与脊柱棘突分离。用一对小的咬骨钳仔细地移除L6横突以在视觉上识别出L4-L6脊神经。分离左L5(或L5和L6)脊神经并用丝线紧紧地结扎。确认完全止血并使用诸如尼龙缝合线或不锈钢卡钉的非吸收性缝合线缝合伤口。除了不操纵脊神经外，假治疗的大鼠经历相同的外科手术程序。外科手术后将动物称重，皮下(s.c.)注射施用盐水或林氏(ringers)乳酸盐，用抗生素粉末涂洒伤口区域并将它们保持在暖垫上，直到它们从麻醉中恢复。然后将动物返回到它们的饲养笼，直到开始行为测试。通过在外科手术之前(基线)，然后在临施用本公开的化合物或媒介物之前，以及施用本公开的化合物或媒介物后的1、3和5小时，针对动物的左后爪如下所述确定PWT，由此评估动物对有害机械刺激的反应。也可如下所述评估动物对有害热刺激的反应或触觉异常性疼痛。Kim等人，Pain50(3)：355-363(1992)中描述了神经病理性疼痛的Chung模型。
[0312] 触觉异常性疼痛：可以在动物中测量对非有害机械刺激的敏感性以评估触觉异常性疼痛。将大鼠转移到具有金属丝网底板的升高的测试笼中并使之适应五至十分钟。将系列的von Frey单丝施加于后爪的脚底面以确定动物的缩回阈值。使用的第一细丝具有9.1gms(.96log值)的屈曲重量，并且施加多达五次，以观察其是否引出缩回反应。如果动物具有缩回反应，则施加系列中的下一个最轻细丝多达五次，以确定其是否也可引出反应。用后续较小的细丝重复此程序，直到没有反应，并记录引出反应的最轻细丝的特性。如果动物从最初的9.1gms细丝没有缩回反应，则施加重量增加的后续细丝，直到细丝引出反应并记录此细丝的特性。对于每只动物，在每个时间点进行三次测量，确定平均缩回阈值。可以在药物施用之前和药物施用后1、2、4和24小时进行测试。
[0313] 机械痛觉过敏：可以在大鼠中按SNL诱导的机械痛觉过敏模型测试代表性的本公开的化合物。在动物中采用爪压力测试测量对有害机械刺激的敏感性以评估机械痛觉过敏。在大鼠中，使用压痛仪(7200型，可商购自意大利的Ugo Basile)确定对有害机械刺激起反应的后爪缩回阈值(“PWT”)，以克测量，如Stein(Biochemistry&Behavior引：451-455(1988))中所述。将大鼠的爪置于小的平台上，并且以分级的方式施加点状重物，直到最重250克。终点取为爪完全缩回时的重量。在每个时间点对每只大鼠确定PWT一次。可以仅在受伤的爪中测量或者在受伤和未受伤的爪中测量PWT。在外科手术之前测试大鼠以确定基线或正常PWT。在外科手术后2至3周，在施用药物之前和在施用药物后的不同时期(例如1、3、5和24小时)再次测试大鼠。施用药物后PWT的增加指示测试化合物降低机械痛觉过敏。
[0314] 抗惊厥活性的体内测定
[0315] 可以在i.v.、p.o.或i.p.注射后在小鼠或大鼠中采用许多抗惊厥测试中的任一者，包括最大电休克惊厥测试(MES)，来测试本公开的化合物的体内抗惊厥活性。使用Ugo Basile ECT装置(7801型)，在体重15-20g的雄性NSA小鼠和体重在200-225g之间的雄性Sprague-Dawley大鼠中通过施加电流(对于小鼠：50mA，60脉冲/秒，0.8毫秒脉冲宽度，1秒持续时间，D.C.；对于大鼠：99mA，125脉冲/秒，0.8毫秒脉冲宽度，2秒持续时间，D.C.)诱导最大电休克惊厥。通过在背侧面上夹紧松弛的皮肤约束小鼠，并且将涂盐水的角膜电极抵靠两个角膜轻轻保持。允许大鼠在工作台顶部上自由活动并使用耳夹电极。施加电流并长达30秒的时间观察动物出现强直性后肢伸肌反应。强直惊厥定义为自身体的平面后肢延伸超过90度。可以按量子方式处理结果。
[0316] 药物组合物
[0317] 本公开的化合物可以呈不存在任何其它组分的原料化学品的形式对哺乳动物施用。也可以将本公开的化合物作为含有化合物与合适的药学上可接受的载体相组合的药物组合物的一部分对哺乳动物施用。这种载体可选自药学上可接受的赋形剂和助剂。
[0318] 本公开范围内的药物组合物包括其中本公开的化合物与一种或多种药学上可接受的载体相组合的所有组合物。在一个实施方案中，本公开的化合物在组合物中的存在量可有效实现其预期的治疗目的。虽然个体需求可能有所变化，但确定每种化合物的有效量的最佳范围是本领域技术范围内的事项。通常地，可以对哺乳动物例如人口服施用本公开的化合物，每天剂量为每kg哺乳动物体重约0.0025至约1500mg或其等效量的药学上可接受的盐或溶剂化物，以治疗特定的病症。对哺乳动物施用的本公开的化合物的适用口服剂量是每kg哺乳动物体重约0.0025至约50mg或其等效量的药学上可接受的盐或溶剂化物。对于肌肉内注射，剂量通常为口服剂量的约一半。
[0319] 单位口服剂量可包含约0.01mg至约1g的本公开的化合物，例如约0.01mg至约500mg、约0.01mg至约250mg、约0.01mg至约100mg、0.01mg至约50mg例如约0.1mg至约10mg的化合物。可以每日一次或多次施用单位剂量，例如作为一个或多个片剂或胶囊，每个含有约
0.01mg至约1g的化合物，或其等效量的药学上可接受的盐或溶剂化物。
0.01mg至约1g的化合物，或其等效量的药学上可接受的盐或溶剂化物。
[0320] 可以对可能会经历本公开的化合物的有益效果的任何动物施用本公开的药物组合物。这类动物中最重要的是哺乳动物，例如人和伴侣动物，不过本公开并非旨在如此限制。
[0321] 可通过能实现其预期目的的任何方式施用本公开的药物组合物。例如，可通过口服、肠胃外、皮下、静脉内、肌肉内、腹膜内、经皮、鼻内、经粘膜、直肠、阴道内或经颊途径或通过吸入施用。施用的剂量和施用的途径将有所变化，这取决于具体受试者的情况，并考虑诸如以下的因素，如接受者的年龄、性别、健康状况和体重，要治疗的病状或病症，并行治疗的种类(如果有的话)，治疗的频率，以及所需效果的性质。
[0322] 在一个实施方案中，本公开的药物组合物可口服施用并且被配制成片剂、糖衣丸、胶囊或口服液体制剂。在一个实施方案中，口服制剂包含含有本公开的化合物的挤出多颗粒。
[0323] 作为选择，本公开的药物组合物可经直肠施用并配制成栓剂。
[0324] 作为选择，本公开的药物组合物可通过注射施用。
[0325] 作为选择，本公开的药物组合物可经皮施用。
[0326] 作为选择，本公开的药物组合物可通过吸入施用或通过鼻内或经粘膜施用。
[0327] 作为选择，本公开的药物组合物可通过阴道内途径施用。
[0328] 本公开的药物组合物可含有约0.01至99重量百分比且优选约0.25至75重量百分比的活性化合物。
[0329] 本公开的方法，如治疗有需要的动物中的对钠通道的阻断有反应的病症或缓解其症状的方法，可进一步包括与本公开的化合物相组合对动物施用第二治疗剂。在一个实施方案中，以有效量施用其它的治疗剂。
[0330] 其它治疗剂的有效量是本领域技术人员已知的。然而，熟练技术人员在其技能范围内完全可以确定其它治疗剂的最佳有效量范围。
[0331] 本公开的化合物(即第一治疗剂)和第二治疗剂的作用可以是累加的或者在一个实施方案中是协同的。作为选择，第二治疗剂可用于治疗与施用第一治疗剂所针对的病症或病状不同的病症或病状，并且所述病症或病状可以是或者可以不是本文中定义的病状或病症。在一个实施方案中，本公开的化合物与第二治疗剂同时施用；例如，可以施用包含有效量的本公开的化合物和有效量的第二治疗剂两者的单一组合物。因此，本公开进一步提供一种药物组合物，其包含本公开的化合物、第二治疗剂和药学上可接受的载体的组合。作为选择，可以同时施用包含有效量的本公开的化合物的第一药物组合物和包含有效量的第二治疗剂的第二药物组合物。在另一实施方案中，在施用有效量的第二治疗剂之前或之后施用有效量的本公开的化合物。在此实施方案中，在第二治疗剂发挥其治疗作用时施用本公开的化合物，或者在本公开的化合物发挥其治疗病症或病状的治疗作用时施用第二治疗剂。
[0332] 第二治疗剂可以是阿片类激动剂、非阿片类止痛剂、非类固醇抗炎剂、抗偏头痛药、Cox-II抑制剂、β肾上腺素能阻断剂、抗惊厥药、抗抑郁药、抗癌剂、用于治疗成瘾性病症的药物、用于治疗帕金森氏病和帕金森症的药剂、用于治疗焦虑症的药剂、用于治疗癫痫的药剂、用于治疗惊厥的药剂、用于治疗中风的药剂、用于治疗瘙痒病状的药剂、用于治疗精神病的药剂、用于治疗ALS的药剂、用于治疗认知病症的药剂、用于治疗偏头痛的药剂、用于治疗呕吐的药剂、用于治疗运动障碍的药剂或用于治疗抑郁症的药剂或它们的混合物。
[0333] 以考虑到本公开内容本身是已知的方式制造本公开的药物组合物，例如借助于常规的混合、制粒、制糖衣、溶解、挤出或冻干方法。因此，可通过如下方式得到用于口服使用的药物组合物，将活性化合物与固体赋形剂组合，如果需要或必要的话任选在添加合适的助剂后磨碎所得混合物并处理颗粒的混合物，以获得片剂或糖衣丸芯。
[0334] 合适的赋形剂包括填充剂如糖类(例如乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇)、纤维素制剂、磷酸钙(例如磷酸三钙或磷酸氢钙)以及粘结剂如淀粉糊(使用例如玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉或马铃薯淀粉)、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯基吡咯烷酮。如果需要的话，可以添加一种或多种崩解剂，如上面提到的淀粉以及还有羧甲基淀粉、交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐，如海藻酸钠。
[0335] 助剂通常是流动调节剂和润滑剂，举例如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐(例如硬脂酸镁或硬脂酸钙)和聚乙二醇。糖衣丸芯具有耐胃液的合适的包衣。出于此目的，可以使用浓糖溶液，其可任选地含有阿拉伯树胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化钛、清漆溶液及合适的有机溶剂或溶剂混合物。为了产生耐胃液的包衣，可以使用合适的纤维素制剂的溶液，如乙酰纤维素邻苯二甲酸酯或羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯。可以向片剂或糖衣丸包衣中添加染料或颜料，例如用于识别或为了表征活性化合物剂量的组合。
[0336] 可以口服使用的其它药物制剂的例子包括由明胶制成的推送配合胶囊或由明胶和诸如甘油或山梨糖醇的塑化剂制成的软密封胶囊。推送配合胶囊可含有呈颗粒形式的化合物，其可与诸如乳糖的填充剂、诸如淀粉的粘结剂和/或诸如滑石或硬脂酸镁的润滑剂以及任选稳定剂混合，或者呈挤出多颗粒形式。在软胶囊中，活性化合物优选溶解或悬浮在诸如脂肪油或液体石蜡的合适液体中。此外，可以添加稳定剂。
[0337] 可能用于直肠施用的药物制剂包括例如栓剂，其由一种或多种活性化合物与栓剂基质的组合构成。合适的栓剂基质尤其包括天然及合成的甘油三酯、石蜡烃。还可以使用由活性化合物与诸如液体甘油三酯、聚乙二醇或石蜡烃的基质材料的组合构成的明胶直肠胶囊。
[0338] 用于肠胃外施用的合适制剂包括呈水溶性形式的活性化合物的水溶液，举例如水溶性盐、碱性溶液或酸性溶液。作为选择，可以将活性化合物的悬浮液制备为油性悬浮液。用于诸如悬浮液的合适的亲脂性溶剂或媒介物可包括脂肪油(例如芝麻油)、合成脂肪酸酯(例如油酸乙酯)、甘油三酸酯或聚乙二醇，如聚乙二醇-400(PEG-400)。水性悬浮液可以含有一种或多种用以增加悬浮液粘度的物质，包括例如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇和/或葡聚糖。悬浮液可任选含有稳定剂。
[0339] 以下实施例是说明性的，并非限制本公开的化合物、组合物和方法。在临床治疗中通常会遇到各种条件和参数，本领域技术人员考虑到本公开内容对其作出的显而易见的合适的修改及变动属于本公开的实质和范围之内。实施例
[0340] 实施例1
[0341] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-氯嘧啶-4-羧酰胺(化合物5)的合成
[0342]
[0343] 将化合物1(34.828g，0.200mol)(Aldrich)、氧氯化磷(100mL，1.092mol)和20滴DMF的混合物在110℃下加热过夜。冷却后将深色混合物用己烷(500mL)稀释并剧烈搅拌。将己烷层倾析，迅速地用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤并经MgSO4干燥。将有机层过滤并小心地真空蒸发，得到26.13g(62％)的化合物2，为浅黄色液体。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.93(s，1H)。
[0344] 经50分钟向化合物2(26.13g，123.6mmol)于Et2O(500mL)中的溶液中滴加0.5M NH3于二噁烷(250mL，125mmol)和DIPEA(22mL，126mmol)中的混合物。在RT下搅拌过夜后将反应混合物真空浓缩以得到残留物，将所述残留物通过快速色谱法(SiO2，10-50％EtOAc/己烷)纯化。将所得到的产物与10mL 10％EtOAc/己烷一起研磨并过滤，得到9.74g(41％)的化合物3，为橙色结晶固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.40(br s，1H)，8.16(br s，1H)，8.10(s，1H)。LC/MS：m/z＝192[M+H]+(计算值：191)。
[0345] 向化合物3(4.80g，25.0mmol)于ACN(100mL)中的溶液里添加(S)-2-氨基丙烷羧酰胺盐酸盐(化合物4)(3.18g，25.54mmol)和DIPEA(9.60mL，55.11mmol)。将混合物在50℃下加热过夜，然后真空浓缩。通过快速色谱法(SiO2，20-60％丙酮/己烷)纯化残留物，得到+4.81g(79％)的化合物5，为淡棕褐色粉末。LC/MS：m/z＝244[M+H](计算值：243)。
[0346] 按类似的方式制备以下化合物：
[0347] (S)-2-氯-6-((2-氧代吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物6)：LC/MS：m/z＝256[M+H]+(计算值：255)；和
[0348] (S)-2-氯-6-((2-氧代吡咯烷-3-基)氧基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物7)：LC/MS：m/z＝257[M+H]+(计算值：256)。
[0349] 实施例2
[0350] (S)-2-氯-6-(((2-氧代吡咯烷-3-基)氨基)甲基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物12)的合成
[0351]
[0352] 将化合物8(1.536g，8.23mmol)(Sigma-Aldrich)、NBS(1.757g，9.87mmol)和过氧化苯甲酰(199mg，0.823mmol)于CCl4(43mL)中的混合物用氩气吹扫2分钟。将混合物在80℃和氩气下加热24h。添加另外的NBS(1.757g，9.87mmol)和过氧化苯甲酰(199mg，0.823mmol)并将混合物在80℃下再加热24h。在冷却到RT后，将混合物过滤并浓缩滤液。将残留物吸附到SiO2上面并通过快速色谱法(SiO2，0-40％EtOAc/己烷)纯化，得到0.44g(20％)的化合物9，为棕色液体。LC/MS：m/z＝266[M+H]+(计算值：265)。
[0353] 在RT下向化合物9(0.125g，1.249mmol)于ACN(6mL)和DIPEA(0.121g，1.249mmol)中的溶液中滴加化合物10(0.331g，1.249mmol)于ACN(2mL)中的溶液。将所得的溶液在RT下搅拌2h并浓缩至干，得到粗化合物11，其直接用于下一步。LC/MS：m/z＝285[M+H]+(计算值：284)。
[0354] 在RT下向含有来自前一步的粗化合物11的20mL小瓶里添加于MeOH(12mL)中的7N NH3。将所得的溶液在RT下搅拌1h并浓缩至干，得到粗化合物12，其不经纯化用于后续步骤。LC/MS：m/z＝270[M+H]+(计算值：269)。
[0355] 实施例3
[0356] (S)-1-(6-溴吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物14)的合成
[0357]
[0358] 在0℃下向化合物13(WO 2012/035421)(2.35g，12.77mmol)于t-BuOH(35mL)和水(35mL)中的溶液里添加AD-混合物-α(17.4g，1.36g/mmol的乙烯基底物，Sigma-Aldrich)。将反应混合物在RT下搅拌过夜，用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，40-80％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到
2.30g(82％)的化合物14，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.61(t，J＝7.6Hz，1H)，
7.45(d，J＝7.6Hz，1H)，7.39(d，J＝7.6Hz，1H)，4.83(dd，J＝10.0，5.6Hz，1H)，3.99-3.94(m，1H)，3.81(五重峰，J＝5.6Hz，1H)，3.74(d，J＝5.6Hz，1H)，2.37(t，J＝6.4Hz，1H)。
2.30g(82％)的化合物14，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ7.61(t，J＝7.6Hz，1H)，
7.45(d，J＝7.6Hz，1H)，7.39(d，J＝7.6Hz，1H)，4.83(dd，J＝10.0，5.6Hz，1H)，3.99-3.94(m，1H)，3.81(五重峰，J＝5.6Hz，1H)，3.74(d，J＝5.6Hz，1H)，2.37(t，J＝6.4Hz，1H)。
[0359] 实施例4
[0360] 7-溴-4-(4-(三氟甲基)苯基)-2H-色烯(化合物21)和4，4，5，5-四甲基-2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-2H-色烯-7-基)-1，3，2-二氧硼杂环戊烷(化合物23)的合成
[0361]
[0362] 在0℃下按小份向3-溴苯酚(化合物15)(2.00g，11.56mmol)于DMF(25mL)中的溶液里添加NaH(0.509g，12.72mmol，60％)。观察到剧烈的气体析出。在0℃下搅拌5分钟，并在RT下搅拌20分钟。冷却到0℃并缓慢添加炔丙基溴(化合物16)(在二甲苯中80重量％)(1.41mL，12.72mmol)。将反应混合物升温至RT并搅拌30分钟。通过添加水小心地淬灭反应混合物并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-10％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到2.34g(96％)的化合物17，为黄色油状物。LC/MS：m/z＝212[M+H]+(计算值：211)。
[0363] 向化合物17(1.250g，5.92mmol)和1-碘-4-(三氟甲基)苯(化合物18)(1.611g，5.92mmol)于THF(20mL)中的溶液里添加TEA(1.65mL，11.85mmol)，接着是Pd(Ph3P)2Cl2(0.125g，0.178mmol)和碘化铜(I)(0.068g，0.355mmol)。发生轻微的放热。将混合物在RT下搅拌1.5h。将混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-5％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到1.55g(74％)的化合物19，为淡黄色油状物。LC/MS：m/z＝356[M+H]+(计算值：355)。
[0364] 向在压力管中的化合物19(1.550g，4.36mmol)于DCM(30mL)中的溶液里添加(乙腈)[(2-联苯)二叔丁基膦]六氟锑酸金(I)(化合物20)(0.034g，0.044mmol，Sigma-Aldrich)。将管密封并在60℃下加热3h。冷却到RT后，将混合物吸附到SiO2上面并通过快速色谱法(SiO2，0-10％EtOAc/己烷)纯化，得到1.26g(81％)的化合物21，为淡黄色油状物。
LC/MS：m/z＝356[M+H]+(计算值：355)。
LC/MS：m/z＝356[M+H]+(计算值：355)。
[0365] 向化合物21(0.750g，2.11mmol)、化合物22(0.563g，2.22mmol)和KOAc(0.622g，6.34mmol)于1，4-二噁烷(10mL)中的溶液里添加Pd(dppf)Cl2(0.086g，0.106mmol)。将反应物在90℃下加热过夜。将混合物冷却到RT，并用水淬灭。用EtOAc萃取混合物。将合并的有机物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-10％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.53g+
(63％)的化合物23，为浅黄色固体。LC/MS：m/z＝403[M+H](计算值：402)。
(63％)的化合物23，为浅黄色固体。LC/MS：m/z＝403[M+H](计算值：402)。
[0366] 实施例5
[0367] (3R，4S)-7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-3-ol(化合物25)的合成
[0368]
[0369] 在0℃下向化合物21(0.470g，1.32mmol)于THF(7mL)中的溶液中滴加于THF(1.456mL，1.456mmol)中的1M硼烷四氢呋喃络合物。将反应混合物在RT下搅拌过夜。滴加
2.5M的NaOH水溶液(1.59mL，3.97mmol)。5分钟后，将混合物冷却到0℃并缓慢添加30％过氧化氢(1.35mL，13.23mmol)。添加完成后，将混合物在回流下加热2h。在冷却到RT后，添加水并用EtOAc萃取混合物。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，
10-30％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.208g(42％)的化合物24，为淡黄色油状物。LC/MS：
m/z＝374[M+H]+(计算值：373)。
2.5M的NaOH水溶液(1.59mL，3.97mmol)。5分钟后，将混合物冷却到0℃并缓慢添加30％过氧化氢(1.35mL，13.23mmol)。添加完成后，将混合物在回流下加热2h。在冷却到RT后，添加水并用EtOAc萃取混合物。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，
10-30％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.208g(42％)的化合物24，为淡黄色油状物。LC/MS：
m/z＝374[M+H]+(计算值：373)。
[0370] 向化合物24(0.200g，0.536mmol)、化合物22(0.143g，0.563mmol)和KOAc(0.158g，1.608mmol)于1，4-二噁烷(5mL)中的混合物里添加Pd(dppf)Cl2(0.022g，0.027mmol)。将反应混合物在90℃下加热过夜，冷却到RT并用水淬灭。将混合物用EtOAc萃取并将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-10％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到
0.157g(70％)的化合物25，为浅黄色固体。LC/MS：m/z＝421[M+H]+(计算值：420)。
0.157g(70％)的化合物25，为浅黄色固体。LC/MS：m/z＝421[M+H]+(计算值：420)。
[0371] 实施例6
[0372] 7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯(化合物30)的合成
[0373]
[0374] 在0℃下向化合物26(1.00g，6.75mmol，Matrix Scientific)于MeOH(10mL)中的溶液里添加Boc2O(1.55g，7.08mmol)。观察到温和的气体析出。15分钟后，将反应物升温到RT并搅拌1h。将反应混合物浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-40％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到1.70g(99％)的化合物27，为白色固体。LC/MS：m/z＝271[M+Na]+(计算值：248)。
[0375] 向化合物27(0.95g，3.83mmol)和化合物18(1.25g，4.59mmol)于甲苯(10mL)中的溶液里添加Cs2CO3(1.75g，5.36mmol)、Pd(OAc)2(0.043g，0.19mmol)和BINAP(0.119g，0.19mmol)。将反应混合物在100℃下加热过夜，冷却到RT，用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-15％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到1.33g(89％)的化合物28，为灰白色固体。LC/MS：m/z＝415[M+Na]+(计算值：392)。
[0376] 在0℃下向化合物28(0.550g，1.40mmol)于ACN(12mL)和DCM(2mL)中的溶液里添加NBS(0.262g，1.47mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌45分钟并然后浓缩。将残留物与CCl4一起研磨并经由过滤移除固体，用CCl4冲洗。将滤液浓缩并通过快速色谱法(SiO2，10-20％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.64g(97％)的化合物29，为灰白色固体。LC/MS：m/z＝494[M+H]+(计算值：493)。
[0377] 向化合物29(1.54g，3.27mmol)和化合物22(0.87g，3.43mmol)于1，4-二噁烷(20mL)中的溶液里添加KOAc(0.96g，9.80mmol)和Pd(dppf)Cl2(0.133g，0.16mmol)。将反应混合物在90℃和氮气下加热过夜，冷却到RT，用EtOAc稀释并用水洗涤。将水层用EtOAc萃取，将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-15％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到1.10g(65％)的化合物30，为白色固体。LC/MS：m/z＝541[M+Na]+(计算值：
518)。
518)。
[0378] 按类似的方式制备以下化合物：
[0379] 7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓(化合物31)：LC/MS：m/z＝418[M+H]+(计算值：417)；
[0380] 7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢苯并[e][1，4]氧氮杂卓(化合物32)：LC/MS：m/z＝420[M+H]+(计算值：419)；
[0381] 8-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓(化合物33)：LC/MS：m/z＝420[M+H]+(计算值：419)；
[0382] 6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉(化合物34)：LC/MS：m/z＝404[M+H]+(计算值：403)；
[0383] 6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(3-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉(化合物35)：LC/MS：m/z＝404[M+H]+(计算值：403)；和
[0384] 5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)吲哚啉(化合物36)：LC/MS：m/z＝390[M+H]+(计算值：389)。
[0385] 实施例7
[0386] 6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-((4-(三氟甲基)苯基)磺酰基)-1，2，3，4-四氢喹啉(化合物41)的合成
[0387]
[0388] 在0℃下向1，2，3，4-四氢喹啉(化合物37)(0.200g，1.502mmol)于DCM(10mL)中的溶液里添加TEA(0.314mL，2.252mmol)，接着是4-(三氟甲基)苯-1-磺酰氯(化合物38)(0.404g，1.652mmol)。将反应混合物在RT下搅拌2h，然后用水淬灭并用DCM萃取。将合并的有机萃取物用1.0M的HCl水溶液洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到0.477g(93％)的化合物39，为米色固体，其不经进一步纯化用于后续步骤。LC/MS：m/z＝342[M+H]+(计算值：341)。
[0389] 在0℃下向化合物39(0.477g，1.397mmol)于ACN(8mL)中的溶液里添加NBS(0.261g，1.467mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌20分钟并在RT下搅拌1h。将混合物浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-20％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.503g(86％)的化合物40，为白色固体。LC/MS：m/z＝421[M+H]+(计算值：420)。
[0390] 向化合物40(0.503g，1.20mmol)、化合物22(0.334g，1.317mmol)和KOAc(0.352g，3.59mmol)于1，4-二噁烷(7mL)中的溶液里添加Pd(dppf)Cl2(0.049g，0.060mmol)。将反应混合物在90℃下加热过夜。冷却到RT后，将混合物用EtOAc萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-30％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到+
0.460g(82％)的化合物41，为白色固体。LC/MS：m/z＝468[M+H](计算值：467)。
0.460g(82％)的化合物41，为白色固体。LC/MS：m/z＝468[M+H](计算值：467)。
[0391] 按类似的方式制备6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)-1，2，3，4-四氢喹啉(化合物42)。LC/MS：m/z＝418[M+H]+(计算值：417)。
[0392] 实施例8
[0393] 5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)吲哚啉-2-酮(化合物49)的合成
[0394]
[0395] 在0℃下向5-溴-1H-吲哚(化合物43)(2.500g，12.75mmol)于DMF(30mL)中的溶液里添加NaH(0.612g，15.30mmol，60％)。将混合物升温到RT，搅拌20分钟并冷却到0℃。以固体形式添加1-(溴甲基)-4-(三氟甲基)苯(化合物44)(3.35g，14.03mmol)。将混合物升温到RT并搅拌1h。将混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-10％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到4.49g(99％)的化合物45，为灰白色固体。LC/MS：m/z＝355[M+H]+(计算值：354)。
[0396] 经5分钟向化合物45(1.000g，2.82mmol)于t-BuOH(20mL)和水(1mL)中的溶液中按份添加NBS(1.508g，8.47mmol)，将混合物在RT下搅拌1.5h，然后真空浓缩。将残留物在水与DCM之间分配，分离各层并用DCM萃取水层。将合并的有机层用1M的NaOH水溶液洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到粗产物，为粘性栗色泡沫状物(1.47g)。TLC和LC/MS显示是三种产物的混合物，即化合物46、47和48。此材料不经纯化用于下一步。
[0397] 向化合物46、47和48的混合物(来自之前的步骤)于AcOH(20mL)中的溶液里添加锌粉(1.845g，28.2mmol)。反应变得轻微放热并形成白色沉淀物。将混合物在RT下剧烈搅拌1h，通过烧结漏斗过滤，得到白色滤饼和滤液。浓缩滤液并将残留物溶于DCM，并用饱和NaHCO3水溶液洗涤。用DCM反萃取水相。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩，得到白色固体(批次A)。将来自上面的白色滤饼悬浮在1M的HCl水溶液中并用DCM萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩，得到另外的白色固体(批次B)。将批次A和B合并，得到0.765g+
(73％)的化合物46，为白色固体。LC/MS：m/z＝371[M+H](计算值：370)。
(73％)的化合物46，为白色固体。LC/MS：m/z＝371[M+H](计算值：370)。
[0398] 向化合物46(0.400g，1.08mmol)、化合物22(0.288g，1.14mmol)和KOAc(0.318g，3.24mmol)于1，4-二噁烷(8mL)中的溶液里添加Pd(dppf)Cl2(0.044g，0.054mmol)。将反应物在90℃下加热过夜。将混合物冷却到RT并用水淬灭。将混合物用EtOAc萃取。将合并的有机物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-20％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到
0.275g(61％)的化合物49，为橙色固体。LC/MS：m/z＝418[M+H]+(计算值：417)。
0.275g(61％)的化合物49，为橙色固体。LC/MS：m/z＝418[M+H]+(计算值：417)。
[0399] 实施例9
[0400] 1-环己基-7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓(化合物54)的合成
[0401]
[0402] 在RT下向2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓(化合物50)(0.295g，2.004mmol)、环己酮(化合物51)(0.415mL，4.01mmol)和AcOH(0.344mL，6.01mmol)于DCE(10mL)中的混合物里添加NaBH(OAc)3(1.062g，5.01mmol)。将反应混合物在RT下搅拌过夜并通过添加饱和NaHCO3水溶液淬灭。将混合物用水稀释并用DCM萃取。将合并的有机萃取物用饱和NaHCO3水溶液洗涤，经MgSO4干燥并浓缩，得到化合物52，为黄色油状物。将此材料不经纯化用于下一步。LC/MS：m/z＝230[M+H]+(计算值：229)。
[0403] 在0℃下向化合物52(0.460g，2.006mmol)于ACN(8mL)中的溶液里添加NBS(0.375g，2.106mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-
5％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.480g(78％)的化合物53，为粘稠的无色油状物。LC/MS：
m/z＝309[M+H]+(计算值：308)。
5％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.480g(78％)的化合物53，为粘稠的无色油状物。LC/MS：
m/z＝309[M+H]+(计算值：308)。
[0404] 向化合物53(0.480g，1.557mmol)、化合物22(0.415g，1.635mmol)和KOAc(0.458g，4.67mmol)于1，4-二噁烷(8mL)中的溶液里添加Pd(dppf)Cl2(0.064g，0.078mmol)。将反应物在90℃下加热过夜。将混合物冷却到RT并用水淬灭。将混合物用EtOAc萃取。将合并的有机物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，0-5％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到
0.353g(64％)的化合物54，为灰白色固体。LC/MS：m/z＝356[M+H]+(计算值：355)。
0.353g(64％)的化合物54，为灰白色固体。LC/MS：m/z＝356[M+H]+(计算值：355)。
[0405] 按类似的方式制备以下化合物：
[0406] 1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓(化合物55)：LC/MS：m/z＝358[M+H]+(计算值：357)；和[0407] 1-(4，4-二氟环己基)-7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷-2-基)-2，3，
4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓(化合物56)：LC/MS：m/z＝392[M+H]+(计算值：391)。
4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓(化合物56)：LC/MS：m/z＝392[M+H]+(计算值：391)。
[0408] 实施例10
[0409] 6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物58)的合成
[0410]
[0411] 向化合物31(0.183g，0.44mmol)和化合物57(0.080g，0.40mmol，Sigma-Aldrich)于DME(2.5mL)和EtOH(1.5mL)中的溶液里添加Pd(PPh3)2Cl2(0.014g，0.02mmol)，接着是2M的Na2CO3水溶液(0.60mL，1.20mmol)。将反应混合物用氮气吹扫并在85℃下搅拌1h。冷却到RT后，将反应物用水稀释并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，30-60％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.127g(78％)的化合物58，为白色1
固体。H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.39(d，J＝2.0Hz，1H)，8.38(br s，1H)，8.21(d，J＝
8.4Hz，1H)，8.20(d，J＝8.0Hz，1H)，8.07(t，J＝8.0Hz，1H)，7.99(d，J＝7.2Hz，1H)，7.73(br s，1H)，7.45(d，J＝8.6Hz，2H)，7.30(d，J＝8.4Hz，1H)，6.74(d，J＝8.6Hz，2H)，3.74(br s，
2H)，2.78-2.68(m，2H)，1.86-1.77(m，2H)，1.71(br s，2H)。LC/MS：m/z＝412[M+H]+(计算值：411)。
固体。H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.39(d，J＝2.0Hz，1H)，8.38(br s，1H)，8.21(d，J＝
8.4Hz，1H)，8.20(d，J＝8.0Hz，1H)，8.07(t，J＝8.0Hz，1H)，7.99(d，J＝7.2Hz，1H)，7.73(br s，1H)，7.45(d，J＝8.6Hz，2H)，7.30(d，J＝8.4Hz，1H)，6.74(d，J＝8.6Hz，2H)，3.74(br s，
2H)，2.78-2.68(m，2H)，1.86-1.77(m，2H)，1.71(br s，2H)。LC/MS：m/z＝412[M+H]+(计算值：411)。
[0412] 按类似的方式制备以下化合物：
[0413] 7-(6-氨基甲酰基吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯(化合物59)：LC/MS：m/z＝535[M+Na]+(计算值：512)；
[0414] (S)-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯(化合物60)：LC/MS：m/z＝520[M+H]+(计算值：
529)；
529)；
[0415] 6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢苯并[e][1，4]氧氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物61)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.52(s，1H)，8.41(br s，1H)，8.29(d，J＝8.4Hz，1H)，8.21(d，J＝8.0Hz，1H)，8.07(t，J＝7.6Hz，1H)，7.99(d，J＝7.6Hz，1H)，7.75(br s，
1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，2H)，7.39(d，J＝8.4Hz，1H)，6.92(d，J＝8.4Hz，2H)，4.63(s，2H)，
3.91(br s，2H)，3.85(br s，2H)。LC/MS：m/z＝414[M+H]+(计算值：413)；
1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，2H)，7.39(d，J＝8.4Hz，1H)，6.92(d，J＝8.4Hz，2H)，4.63(s，2H)，
3.91(br s，2H)，3.85(br s，2H)。LC/MS：m/z＝414[M+H]+(计算值：413)；
[0416] (S)-1-(6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢苯并[e][1，4]氧氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物62)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.14(d，J＝2.0Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.0，2.0Hz，1H)，7.89(t，J＝8.0Hz，1H)，7.81(d，J＝7.6Hz，1H)，7.53(d，J＝
7.6Hz，1H)，7.46(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，1H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，4.86(dd，J＝6.8，4.4Hz，1H)，4.66(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.4Hz，1H)，3.94(s，4H)，3.80(dd，J＝11.2，6.8Hz，1H)。LC/MS：m/z＝431[M+H]+(计算值：430)；
7.6Hz，1H)，7.46(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，1H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，4.86(dd，J＝6.8，4.4Hz，1H)，4.66(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.4Hz，1H)，3.94(s，4H)，3.80(dd，J＝11.2，6.8Hz，1H)。LC/MS：m/z＝431[M+H]+(计算值：430)；
[0417] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物63)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.31(br s，1H)，8.24-8.20(m，2H)，7.95(d，J＝6.8Hz，1H)，7.71(br s，1H)，7.55(br s，
1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，2H)，7.25(d，J＝8.8Hz，1H)，7.13(s，1H)，7.02-6.98(m，3H)，4.60(t，J＝6.8Hz，1H)，4.08(t，J＝5.2Hz，2H)，3.96(t，J＝5.2Hz，2H)，2.04(t，J＝5.2Hz，2H)，
1.38(d，J＝6.8Hz，3H)。LC/MS：m/z＝501[M+H]+(计算值：500)。
1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，2H)，7.25(d，J＝8.8Hz，1H)，7.13(s，1H)，7.02-6.98(m，3H)，4.60(t，J＝6.8Hz，1H)，4.08(t，J＝5.2Hz，2H)，3.96(t，J＝5.2Hz，2H)，2.04(t，J＝5.2Hz，2H)，
1.38(d，J＝6.8Hz，3H)。LC/MS：m/z＝501[M+H]+(计算值：500)。
[0418] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物64)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.58(d，J＝1.6Hz，1H)，8.43(dd，J＝8.0，1.6Hz，1H)，8.32(br s，1H)，7.96(d，J＝6.0Hz，1H)，7.75(br s，1H)，7.57(br s，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.24(d，J＝8.0Hz，1H)，7.12(s，
1H)，7.01(br s，1H)，6.72(d，J＝8.8Hz，2H)，4.59(t，J＝6.8Hz，1H)，3.73(br s，2H)，2.70(br s，2H)，2.83-2.79(m，2H)，1.70(br s，2H)，1.38(d，J＝6.8Hz，3H)。LC/MS：m/z＝499[M++
H](计算值：498)；
1H)，7.01(br s，1H)，6.72(d，J＝8.8Hz，2H)，4.59(t，J＝6.8Hz，1H)，3.73(br s，2H)，2.70(br s，2H)，2.83-2.79(m，2H)，1.70(br s，2H)，1.38(d，J＝6.8Hz，3H)。LC/MS：m/z＝499[M++
H](计算值：498)；
[0419] 6-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)吡啶酰胺(化合物65)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.35(br s，1H)，8.17(dd，J＝7.6，0.8Hz，1H)，8.07-8.00(m，3H)，7.99(t，J＝7.6Hz，1H)，7.69(br s，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz，2H)，4.10(t，J＝5.6Hz，2H)，3.96(t，J＝5.6Hz，2H)，2.05(五重峰，J＝5.6Hz，2H)。LC/MS：m/z＝414[M+H]+(计算值：413)；
[0420] 6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶酰胺(化合物66)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.28(br s，1H)，8.13(d，J＝2.0Hz，1H)，8.05(d，J＝8.0Hz，1H)，7.97(t，J＝8.0Hz，1H)，7.93(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.88(d，J＝7.2Hz，1H)，7.68(br s，
1H)，7.67(d，J＝8.6Hz，2H)，7.44(d，J＝8.6Hz，2H)，7.03(d，J＝8.4Hz，1H)，3.72(t，J＝
6.0Hz，2H)，2.89(t，J＝6.4Hz，2H)，2.01(五重峰，J＝6.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝398[M+H]+(计算值：397)；
1H)，7.67(d，J＝8.6Hz，2H)，7.44(d，J＝8.6Hz，2H)，7.03(d，J＝8.4Hz，1H)，3.72(t，J＝
6.0Hz，2H)，2.89(t，J＝6.4Hz，2H)，2.01(五重峰，J＝6.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝398[M+H]+(计算值：397)；
[0421] 6-(1-(3-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶酰胺(化合物67)：
[0422] 1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.28(br s，1H)，8.09(d，J＝2.0Hz，1H)，8.02(dd，J＝8.0，0.8Hz，1H)，7.95(t，J＝8.0Hz，1H)，7.91(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.86(dd，J＝7.2，
0.8Hz，1H)，7.67(br s，1H)，7.62-7.59(m，3H)，7.45-7.43(m，1H)，6.80(d，J＝8.8Hz，1H)，
3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，2.91(t，J＝6.4Hz，2H)，2.02(五重峰，J＝6.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝
398[M+H]+(计算值：397)；
0.8Hz，1H)，7.67(br s，1H)，7.62-7.59(m，3H)，7.45-7.43(m，1H)，6.80(d，J＝8.8Hz，1H)，
3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，2.91(t，J＝6.4Hz，2H)，2.02(五重峰，J＝6.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝
398[M+H]+(计算值：397)；
[0423] 6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)吲哚啉-5-基)吡啶酰胺(化合物68)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.30(br s，1H)，8.27(d，J＝0.8Hz，1H)，8.07(dd，J＝8.0，0.8Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.4，1.6Hz，1H)，7.98(t，J＝8.0Hz，1H)，7.88(dd，J＝7.6，0.8Hz，1H)，7.70(br s，1H)，7.70(d，J＝8.6Hz，2H)，7.44(d，J＝8.6Hz，2H)，7.34(d，J＝8.4Hz，1H)，4.10(t，J＝8.4Hz，
2H)，3.24(t，J＝8.4Hz，2H)。LC/MS：m/z＝384[M+H]+(计算值：383)；
2H)，3.24(t，J＝8.4Hz，2H)。LC/MS：m/z＝384[M+H]+(计算值：383)；
[0424] 6-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-2H-色烯-7-基)吡啶酰胺(化合物69)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.33(br.s.，1H)，8.16(dd，J＝7.8，1.0Hz，1H)，8.01-8.08(m，1H)，
7.96-8.00(m，1H)，7.92(d，J＝1.8Hz，1H)，7.79-7.87(m，3H)，7.69(br.s.，1H)，7.62(d，J＝
8.0Hz，2H)，7.01(d，J＝8.1Hz，1H)，6.14(t，J＝4.0Hz，1H)，4.94(d，J＝4.0Hz，2H)。LC/MS：
m/z＝397[M+H]+(计算值：396)；
7.96-8.00(m，1H)，7.92(d，J＝1.8Hz，1H)，7.79-7.87(m，3H)，7.69(br.s.，1H)，7.62(d，J＝
8.0Hz，2H)，7.01(d，J＝8.1Hz，1H)，6.14(t，J＝4.0Hz，1H)，4.94(d，J＝4.0Hz，2H)。LC/MS：
m/z＝397[M+H]+(计算值：396)；
[0425] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)-2H-色烯-7-+基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物70)：LC/MS：m/z＝484[M+H](计算值：483)；
[0426] 6-(((S)-1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-((3R，4S)-3-羟基-4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物71)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.04(t，J＝1.7Hz，1H)，7.96-8.01(m，1H)，7.65(d，J＝8.1Hz，2H)，7.38(d，J＝8.1Hz，2H)，7.16(s，1H)，
6.86(dd，J＝8.1，2.6Hz，1H)，4.60(br.s.，1H)，4.15-4.25(m，2H)，4.11(td，J＝6.4，2.1Hz，
1H)，3.97-4.05(m，1H)，1.53(d，J＝7.3Hz，3H)。LC/MS：m/z＝502[M+H]+(计算值：501)；
6.86(dd，J＝8.1，2.6Hz，1H)，4.60(br.s.，1H)，4.15-4.25(m，2H)，4.11(td，J＝6.4，2.1Hz，
1H)，3.97-4.05(m，1H)，1.53(d，J＝7.3Hz，3H)。LC/MS：m/z＝502[M+H]+(计算值：501)；
[0427] (S)-6-(((2-氧代吡咯烷-3-基)氨基)甲基)-2-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物72)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.41(d，J＝2.0Hz，1H)，8.35(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.49(d，J＝8.8Hz，
2H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.09(d，J＝8.8Hz，2H)，4.88(d，J＝16.5，1H)，4.73(d，J＝
16.5Hz，1H)，4.31(dd，J＝10.7，8.7Hz，1H)，4.18(t，J＝5.8Hz，2H)，4.04(t，J＝5.8Hz，2H)，
3.40-3.59(m，2H)，2.62-2.80(m，1H)，2.21-2.39(m，1H)，2.14(五重峰，J＝5.8Hz，2H)。LC/MS：m/z＝527[M+H]+(计算值：526)；
2H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.09(d，J＝8.8Hz，2H)，4.88(d，J＝16.5，1H)，4.73(d，J＝
16.5Hz，1H)，4.31(dd，J＝10.7，8.7Hz，1H)，4.18(t，J＝5.8Hz，2H)，4.04(t，J＝5.8Hz，2H)，
3.40-3.59(m，2H)，2.62-2.80(m，1H)，2.21-2.39(m，1H)，2.14(五重峰，J＝5.8Hz，2H)。LC/MS：m/z＝527[M+H]+(计算值：526)；
[0428] (S)-1-(6-(1-环己基-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1
1，2-二醇(化合物73)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.76-7.83(m，1H)，7.69-7.74(m，2H)，
7.65(d，J＝7.8Hz，1H)，7.39(d，J＝7.8Hz，1H)，6.99(d，J＝9.0Hz，1H)，4.82(dd，J＝6.6，
4.2Hz，1H)，3.94(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.76(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.34-3.41(m，
1H)，3.11(br.s.，2H)，2.86(br.s.，2H)，1.97(d，J＝11.7Hz，2H)，1.87(d，J＝12.8Hz，2H)，
1.72(br.s.，5H)，1.59(qd，J＝12.2，2.9Hz，2H)，1.36-1.51(m，2H)，1.16-1.32(m，1H)。LC/MS：m/z＝367IM+H]+(计算值：366)；
1，2-二醇(化合物73)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.76-7.83(m，1H)，7.69-7.74(m，2H)，
7.65(d，J＝7.8Hz，1H)，7.39(d，J＝7.8Hz，1H)，6.99(d，J＝9.0Hz，1H)，4.82(dd，J＝6.6，
4.2Hz，1H)，3.94(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.76(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.34-3.41(m，
1H)，3.11(br.s.，2H)，2.86(br.s.，2H)，1.97(d，J＝11.7Hz，2H)，1.87(d，J＝12.8Hz，2H)，
1.72(br.s.，5H)，1.59(qd，J＝12.2，2.9Hz，2H)，1.36-1.51(m，2H)，1.16-1.32(m，1H)。LC/MS：m/z＝367IM+H]+(计算值：366)；
[0429] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-环己基-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物74)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.14-8.23(m，2H)，7.05(s，1H)，6.93(d，J＝9.0Hz，1H)，4.58(br.s.，1H)，3.36-3.42(m，1H)，3.14(br.s.，
2H)，2.88(br.s.，2H)，1.96(d，J＝11.2Hz，2H)，1.88(d，J＝13.0Hz，2H)，1.73(br.s.，5H)，
1.56-1.66(m，2H)，1.53(d，J＝7.3Hz，3H)，1.38-1.50(m，2H)，1.19-1.33(m，1H)。LC/MS：m/z＝437[M+H]+(计算值：436)；
2H)，2.88(br.s.，2H)，1.96(d，J＝11.2Hz，2H)，1.88(d，J＝13.0Hz，2H)，1.73(br.s.，5H)，
1.56-1.66(m，2H)，1.53(d，J＝7.3Hz，3H)，1.38-1.50(m，2H)，1.19-1.33(m，1H)。LC/MS：m/z＝437[M+H]+(计算值：436)；
[0430] (S)-1-(6-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物75)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.81(t，J＝7.9Hz，1H)，7.72-7.77(m，2H)，7.66(d，J＝7.7Hz，1H)，7.41(d，J＝7.7Hz，1H)，7.08(d，J＝8.1Hz，1H)，
4.82(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.99-4.08(m，2H)，3.94(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.62(dt，J＝10.3，5.3Hz，1H)，3.55(td，J＝11.3，3.0Hz，2H)，3.10(br.s.，2H)，2.87(br.s.，2H)，1.80-1.95(m，4H)，1.72(br.s.，4H)。LC/MS：m/z＝369[M+H]+(计算值：368)；
4.82(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.99-4.08(m，2H)，3.94(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.62(dt，J＝10.3，5.3Hz，1H)，3.55(td，J＝11.3，3.0Hz，2H)，3.10(br.s.，2H)，2.87(br.s.，2H)，1.80-1.95(m，4H)，1.72(br.s.，4H)。LC/MS：m/z＝369[M+H]+(计算值：368)；
[0431] (S)-1-(6-(1-(4，4-二氟环己基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[b]氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物76)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.81(t，J＝7.9Hz，1H)，7.74-
7.78(m，2H)，7.66(d，J＝7.7Hz，1H)，7.41(d，J＝7.7Hz，1H)，7.07(d，J＝9.0Hz，1H)，4.82(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.94(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，
3.53-3.61(m，1H)，3.07(br.s.，2H)，2.87(br.s.，2H)，2.08-2.20(m，2H)，1.86-2.05(m，
6H)，1.72(br.s.，4H)。LC/MS：m/z＝403[M+H]+(计算值：402)；
7.78(m，2H)，7.66(d，J＝7.7Hz，1H)，7.41(d，J＝7.7Hz，1H)，7.07(d，J＝9.0Hz，1H)，4.82(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.94(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，
3.53-3.61(m，1H)，3.07(br.s.，2H)，2.87(br.s.，2H)，2.08-2.20(m，2H)，1.86-2.05(m，
6H)，1.72(br.s.，4H)。LC/MS：m/z＝403[M+H]+(计算值：402)；
[0432] (S)-5-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苄基)吲哚啉-2-酮(化合物77)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.05(s，1H)，7.91(d，J＝8.1Hz，1H)，7.80-7.86(m，1H)，7.70(d，J＝7.7Hz，1H)，7.66(d，J＝8.1Hz，2H)，7.56(d，J＝8.1Hz，2H)，7.46(d，J＝
7.7Hz，1H)，6.94(d，J＝8.1Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.82(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.93(dd，J＝
11.2，4.2Hz，1H)，3.80(s，2H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)。LC/MS：m/z＝429[M+H]+(计算值：428)；
7.7Hz，1H)，6.94(d，J＝8.1Hz，1H)，5.10(s，2H)，4.82(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.93(dd，J＝
11.2，4.2Hz，1H)，3.80(s，2H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)。LC/MS：m/z＝429[M+H]+(计算值：428)；
[0433] (S)-1-(6-(1-((4-(三氟甲基)苯基)磺酰基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物78)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.89(d，J＝1.3Hz，2H)，7.82-7.88(m，5H)，7.79(s，1H)，7.74(d，J＝7.7Hz，1H)，7.50(d，J＝7.7Hz，1H)，4.83(dd，J＝6.6，
4.2Hz，1H)，3.89-3.97(m，3H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，2.57(t，J＝6.6Hz，2H)，1.72+
(五重峰，J＝6.3Hz，2H)。LC/MS：m/z＝479[M+H](计算值：478)；
4.2Hz，1H)，3.89-3.97(m，3H)，3.77(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，2.57(t，J＝6.6Hz，2H)，1.72+
(五重峰，J＝6.3Hz，2H)。LC/MS：m/z＝479[M+H](计算值：478)；
[0434] (S)-7-(4-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-6-氨基甲酰基嘧啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酸叔丁酯(化合物79)；LC/MS：m/z＝600[M+H]+(计算值：599)；
[0435] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物80)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.27(s，1H)，8.13(d，J＝8.8Hz，1H)，7.62(d，J＝8.4Hz，2H)，7.42(d，J＝8.4Hz，2H)，7.07(s，1H)，6.96(d，J＝8.6Hz，1H)，4.56(br.d，J＝5.9Hz，1H)，3.75(t，J＝5.7Hz，2H)，2.93(t，J＝6.4Hz，2H)，2.09+
(五重峰，J＝6.1Hz，2H)，1.53(d，J＝7.0Hz，3H)。LC/MS：m/z＝485[M+H](计算值：484)；
(五重峰，J＝6.1Hz，2H)，1.53(d，J＝7.0Hz，3H)。LC/MS：m/z＝485[M+H](计算值：484)；
[0436] (S)-1-(6-(1-(4-(三氟甲基)苄基)-1，2，3，4-四氢喹啉-6-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物81)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：7.75(t，J＝7.8Hz，1H)，7.67(d，J＝
2.1Hz，1H)，7.55-7.65(m，4H)，7.48(d，J＝8.0Hz，2H)，7.34(d，J＝7.6Hz，1H)，6.53(d，J＝
8.6Hz，1H)，4.78(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.67(s，2H)，3.91(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.74(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.47-3.52(m，2H)，2.92(t，J＝6.0Hz，2H)，2.09(五重峰，J＝
6.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝429[M+H]+(计算值：428)；
2.1Hz，1H)，7.55-7.65(m，4H)，7.48(d，J＝8.0Hz，2H)，7.34(d，J＝7.6Hz，1H)，6.53(d，J＝
8.6Hz，1H)，4.78(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.67(s，2H)，3.91(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.74(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.47-3.52(m，2H)，2.92(t，J＝6.0Hz，2H)，2.09(五重峰，J＝
6.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝429[M+H]+(计算值：428)；
[0437] (S)-6-((2-氧代吡咯烷-3-基)氧基)-2-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物82)：1HNMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.19-8.27(m，2H)，7.49(d，J＝8.8Hz，2H)，7.41(s，1H)，7.30(d，J＝8.1Hz，1H)，7.08(d，J＝
8.8Hz，2H)，5.95(t，J＝8.4Hz，1H)，4.18(t，J＝5.7Hz，2H)，4.04(t，J＝5.7Hz，2H)，3.47-
3.58(m，2H)，2.82-2.94(m，1H)，2.23-2.40(m，1H)，2.15(五重峰，J＝5.7Hz，2H)。LC/MS：m/z＝514[M+H]+(计算值：513)；和
8.8Hz，2H)，5.95(t，J＝8.4Hz，1H)，4.18(t，J＝5.7Hz，2H)，4.04(t，J＝5.7Hz，2H)，3.47-
3.58(m，2H)，2.82-2.94(m，1H)，2.23-2.40(m，1H)，2.15(五重峰，J＝5.7Hz，2H)。LC/MS：m/z＝514[M+H]+(计算值：513)；和
[0438] 按类似的方式，制备(2R，3S)-2，3-二羟基-3-(6-(5-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢苯并[b][1，4]氧氮杂卓-8-基)吡啶-2-基)丙酰胺(化合物83)。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：7.89(t，J＝7.8Hz，1H)，7.82(d，J＝1.9Hz，1H)，7.73-7.79(m，2H)，7.58(d，J＝
7.7Hz，1H)，7.47(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28(d，J＝8.3Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，2H)，5.22(d，J＝1.4Hz，1H)，4.65(d，J＝1.9Hz，1H)，4.15(t，J＝5.6Hz，2H)，4.01(t，J＝5.6Hz，2H)，2.14(五重峰，J＝5.6Hz，2H)。LC/MS：m/z＝474[M+H]+(计算值：473)。
7.7Hz，1H)，7.47(d，J＝8.8Hz，2H)，7.28(d，J＝8.3Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，2H)，5.22(d，J＝1.4Hz，1H)，4.65(d，J＝1.9Hz，1H)，4.15(t，J＝5.6Hz，2H)，4.01(t，J＝5.6Hz，2H)，2.14(五重峰，J＝5.6Hz，2H)。LC/MS：m/z＝474[M+H]+(计算值：473)。
[0439] 实施例11
[0440] 6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物84)和6-(4-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物85)的合成
[0441]
[0442] 向化合物59(0.183g，0.36mmol)于DCM(5mL)中的悬浮液里添加TFA(1mL)。将橙色反应混合物在RT下搅拌3h，然后浓缩。将残留物溶于DCM并与1M的NaOH水溶液一起剧烈摇动。分离各层并用DCM萃取水层。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩，得到0.140g(95％)的化合物84，为白色固体。通过快速色谱法(SiO2，在DCM中0-4％(在MeOH中的0.5％NH4OH))部分纯化提供分析样品。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.43(d，J＝2.0Hz，1H)，8.39(br s，1H)，8.23(dd，J＝8.0，2.0Hz，1H)，8.21(d，J＝8.4Hz，1H)，8.07(t，J＝8.0Hz，1H)，7.99(d，J＝7.2Hz，1H)，7.73(br s，1H)，7.46(d，J＝8.6Hz，2H)，7.35(d，J＝8.0Hz，1H)，
6.81(d，J＝8.6Hz，2H)，3.79(br s，4H)，2.97(t，J＝4.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝413[M+H]+(计算值：412)。
6.81(d，J＝8.6Hz，2H)，3.79(br s，4H)，2.97(t，J＝4.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝413[M+H]+(计算值：412)。
[0443] 向化合物84(0.080g，0.19mmol)于DCE(3mL)和DCM(1mL)中的悬浮液里添加37％的甲醛水溶液(0.043mL，0.58mmol)，接着是NaBH(OAc)3(0.123g，0.58mmol)。将反应混合物在RT下搅拌1h，然后添加1M的NaOH水溶液(5mL)和DCM(5mL)。将混合物剧烈搅拌15分钟，分离各层并用DCM萃取水层。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法(SiO2，在DCM中0-8％(在MeOH中的0.5％NH4OH))纯化残留物，得到0.072g(87％)的化合物85，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.27(d，J＝2.0Hz，1H)，8.15(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，8.12-8.02(m，3H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.39(d，J＝8.0Hz，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，+
3.92(br s，2H)，3.77(s，2H)，2.96(t，J＝4.4Hz，2H)，2.45(s，3H)。LC/MS：m/z＝427[M+H](计算值：426)。
3.92(br s，2H)，3.77(s，2H)，2.96(t，J＝4.4Hz，2H)，2.45(s，3H)。LC/MS：m/z＝427[M+H](计算值：426)。
[0444] 按类似的方式制备以下化合物：
[0445] (S)-1-(6-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物86)：LC/MS：m/z＝430[M+H]+(计算值：429)；
[0446] (S)-1-(6-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮条卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物87)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.14(d，J＝2.0Hz，1H)，8.05(dd，J＝8.0，2.0Hz，1H)，7.88(t，J＝8.0Hz，1H)，7.80(d，J＝
7.6Hz，1H)，7.52(d，J＝7.6Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.0Hz，1H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，4.84(dd，J＝6.4，4.0Hz，1H)，3.96(dd，J＝11.2，4.0Hz，1H)，3.90(br s，
2H)，3.87(s，2H)，3.79(dd，J＝11.2，6.4Hz，1H)，3.11(t，J＝4.0Hz，2H)，2.46(d，J＝6.8Hz，
2H)，1.02-0.92(m，1H)，0.62-0.55(m，2H)，0.21-0.14(m，2H)。LC/MS：m/z＝484[M+H]+(计算值：483)；
7.6Hz，1H)，7.52(d，J＝7.6Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.0Hz，1H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，4.84(dd，J＝6.4，4.0Hz，1H)，3.96(dd，J＝11.2，4.0Hz，1H)，3.90(br s，
2H)，3.87(s，2H)，3.79(dd，J＝11.2，6.4Hz，1H)，3.11(t，J＝4.0Hz，2H)，2.46(d，J＝6.8Hz，
2H)，1.02-0.92(m，1H)，0.62-0.55(m，2H)，0.21-0.14(m，2H)。LC/MS：m/z＝484[M+H]+(计算值：483)；
[0447] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物88)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.61(d，J＝1.8Hz，1H)，8.51(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.34(d，J＝8.1Hz，1H)，7.19(s，1H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，4.60(br.d，J＝6.4Hz，1H)，3.92(s，4H)，
3.13(t，J＝4.6Hz，2H)，1.55(d，J＝7.3Hz，3H)。LC/MS：m/z＝500[M+H]+(计算值：499)；
3.13(t，J＝4.6Hz，2H)，1.55(d，J＝7.3Hz，3H)。LC/MS：m/z＝500[M+H]+(计算值：499)；
[0448] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)1
苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物89)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.60(d，J＝1.8Hz，1H)，8.50(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.43(d，J＝
8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.1Hz，1H)，7.17(s，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，4.59(br.d，J＝
6.6Hz，1H)，3.87(br.s.，4H)，3.11(br.s.，2H)，2.48(d，J＝6.4Hz，2H)，1.54(d，J＝7.0Hz，+
3H)，0.93-1.04(m，1H)，0.55-0.65(m，2H)，0.15-0.22(m，2H)。LC/MS：m/z＝554[M+H](计算值：553)；和
苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物89)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.60(d，J＝1.8Hz，1H)，8.50(dd，J＝8.3，1.8Hz，1H)，7.43(d，J＝
8.8Hz，2H)，7.31(d，J＝8.1Hz，1H)，7.17(s，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，4.59(br.d，J＝
6.6Hz，1H)，3.87(br.s.，4H)，3.11(br.s.，2H)，2.48(d，J＝6.4Hz，2H)，1.54(d，J＝7.0Hz，+
3H)，0.93-1.04(m，1H)，0.55-0.65(m，2H)，0.15-0.22(m，2H)。LC/MS：m/z＝554[M+H](计算值：553)；和
[0449] (S)-6-((1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-甲基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物90)：1H NMR
(400MHz，MeOH-d4)δ：8.62(d，J＝2.0Hz，1H)，8.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.45(d，J＝
8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.19(s，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，4.60(br.d，J＝
6.6Hz，1H)，3.92(br.s.，2H)，3.76(s，2H)，2.94(t，J＝4.5Hz，2H)，2.44(s，3H)，1.56(d，J＝
7.3Hz，3H)。LC/MS：m/z＝514[M+H]+(计算值：513)。
(400MHz，MeOH-d4)δ：8.62(d，J＝2.0Hz，1H)，8.52(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.45(d，J＝
8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.19(s，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，4.60(br.d，J＝
6.6Hz，1H)，3.92(br.s.，2H)，3.76(s，2H)，2.94(t，J＝4.5Hz，2H)，2.44(s，3H)，1.56(d，J＝
7.3Hz，3H)。LC/MS：m/z＝514[M+H]+(计算值：513)。
[0450] 实施例12
[0451] 6-(4-乙酰基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物91)的合成
[0452]
[0453] 向化合物84(0.070g，0.17mmol)于DCM(3mL)中的溶液里添加TEA(0.035mL，0.25mmol)，接着是AcCl(0.013mL，0.19mmol)。将反应混合物在RT下搅拌30分钟，在此期间形成厚白色沉淀物。将反应混合物用DCM稀释并用水洗涤。用DCM萃取水层并将合并的有机萃取物经MgSO4干燥，浓缩并通过快速色谱法纯化残留物(SiO2，在DCM中0-8％(在MeOH中的
0.5％NH4OH))，得到0.057g(74％)的化合物91，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(旋转异构体的混合物)：δ8.55(d，J＝2.0Hz，0.5H)，8.42(d，J＝2.0Hz，0.5H)，8.38(br s，1H)，
8.29(dd，J＝8.4，2.0Hz，0.5H)，8.24-8.18(m，1.5H)，8.11-8.05(m，1H)，8.00(d，J＝7.2Hz，
0.5H)，7.99(d，J＝7.2Hz，0.5H)，7.77(br s，0.5H)，7.75(br s，0.5H)，7.50(t，J＝8.4Hz，
2H)，7.35(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.31(d，J＝8.4Hz，0.5H)，6.92(d，J＝8.4Hz，1H)，6.91(d，J＝8.4Hz，1H)，4.62(br s，1H)，4.58(br s，1H)，4.00(br s，1H)，3.89(br s，1H)，3.76(br s，1H)，3.72(t，J＝4.6Hz，1H)，2.08(s，1.5H)，1.77(s，1.5H)。LC/MS：m/z＝455[M+H]+(计算值：454)。
0.5％NH4OH))，得到0.057g(74％)的化合物91，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)(旋转异构体的混合物)：δ8.55(d，J＝2.0Hz，0.5H)，8.42(d，J＝2.0Hz，0.5H)，8.38(br s，1H)，
8.29(dd，J＝8.4，2.0Hz，0.5H)，8.24-8.18(m，1.5H)，8.11-8.05(m，1H)，8.00(d，J＝7.2Hz，
0.5H)，7.99(d，J＝7.2Hz，0.5H)，7.77(br s，0.5H)，7.75(br s，0.5H)，7.50(t，J＝8.4Hz，
2H)，7.35(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.31(d，J＝8.4Hz，0.5H)，6.92(d，J＝8.4Hz，1H)，6.91(d，J＝8.4Hz，1H)，4.62(br s，1H)，4.58(br s，1H)，4.00(br s，1H)，3.89(br s，1H)，3.76(br s，1H)，3.72(t，J＝4.6Hz，1H)，2.08(s，1.5H)，1.77(s，1.5H)。LC/MS：m/z＝455[M+H]+(计算值：454)。
[0454] 按类似的方式制备以下化合物：
[0455] 7-(6-氨基甲酰基吡啶-2-基)-N，N-二乙基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮条卓-4-羧酰胺(化合物92)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.28(d，J＝2.0Hz，1H)，8.14-8.02(m，4H)，7.45(d，J＝8.4Hz，2H)，7.34(d，J＝8.4Hz，1H)，7.03(d，J＝8.4Hz，2H)，4.54(s，2H)，4.09(br s，2H)，3.64(t，J＝5.2Hz，2H)，3.12(q，J＝7.2Hz，4H)，0.98(t，J＝7.2Hz，6H)。LC/MS：m/z＝512[M+H]+(计算值：511)；
[0456] 6-(4-(环丙烷羰基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮条卓-7-基)吡啶酰胺(化合物93)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)(旋转异构体的混合物)：δ8.45(d，J＝1.6Hz，0.5H)，8.35(d，J＝1.6Hz，0.5H)，8.21-8.03(m，4H)，7.48(d，J＝8.4Hz，
1H)，7.47(d，J＝8.4Hz，1H)，7.39(d，J＝8.0Hz，0.5H)，7.36(d，J＝8.0Hz，0.5H)，6.98-6.92(m，2H)，4.91(br s，1H)，4.68(br s，1H)，4.11(br s，2H)，3.95(br s，2H)，2.23-2.17(m，
0.5H)，1.86-1.80(m，0.5H)，0.84-0.78(m，2H)，0.74-0.63(m，2H)。LC/MS：m/z＝481[M+H]+(计算值：480)；
1H)，7.47(d，J＝8.4Hz，1H)，7.39(d，J＝8.0Hz，0.5H)，7.36(d，J＝8.0Hz，0.5H)，6.98-6.92(m，2H)，4.91(br s，1H)，4.68(br s，1H)，4.11(br s，2H)，3.95(br s，2H)，2.23-2.17(m，
0.5H)，1.86-1.80(m，0.5H)，0.84-0.78(m，2H)，0.74-0.63(m，2H)。LC/MS：m/z＝481[M+H]+(计算值：480)；
[0457] (S)-1-(1-环己基-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e]1
[1，4]二氮杂卓-4-基)乙-1-酮(化合物94)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.76-7.92(m，3H)，
7.68(d，J＝7.8Hz，1H)，7.41(d，J＝7.8Hz，1H)，7.02(d，J＝8.6Hz，0.4H)，6.98(d，J＝
8.6Hz，0.6H)，4.82(dd，J＝6.4，4.4Hz，1H)，4.73(s，1.2H)，4.68(s，0.8H)，3.94(dd，J＝
11.2，4.4Hz，1H)，3.63-3.82(m，3H)，3.34-3.55(m，3H)，2.12(s，1.8H)，2.11(s，1.2H)，
1.83-2.04(m，4H)，1.68-1.78(m，1H)，1.38-1.65(m，5H)，1.22-1.37(m，1H)。LC/MS：m/z＝
410[M+H]+(计算值：409)；
[1，4]二氮杂卓-4-基)乙-1-酮(化合物94)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.76-7.92(m，3H)，
7.68(d，J＝7.8Hz，1H)，7.41(d，J＝7.8Hz，1H)，7.02(d，J＝8.6Hz，0.4H)，6.98(d，J＝
8.6Hz，0.6H)，4.82(dd，J＝6.4，4.4Hz，1H)，4.73(s，1.2H)，4.68(s，0.8H)，3.94(dd，J＝
11.2，4.4Hz，1H)，3.63-3.82(m，3H)，3.34-3.55(m，3H)，2.12(s，1.8H)，2.11(s，1.2H)，
1.83-2.04(m，4H)，1.68-1.78(m，1H)，1.38-1.65(m，5H)，1.22-1.37(m，1H)。LC/MS：m/z＝
410[M+H]+(计算值：409)；
[0458] (S)-1-(6-(4-(甲基磺酰基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮条卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物95)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.20(d，J＝1.8Hz，1H)，8.11(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，7.91(t，J＝7.7Hz，1H)，7.83(d，J＝
7.9Hz，1H)，7.54(d，J＝7.5Hz，1H)，7.47(d，J＝8.6Hz，2H)，7.40(d，J＝8.1Hz，1H)，6.90(d，J＝8.6Hz，2H)，4.84-4.88(m，1H)，4.45(br.s.，2H)，4.02(br.s.，2H)，3.98(dd，J＝11.2，
4.2Hz，1H)，3.80(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.71(br.s.，2H)，2.84(s，3H)。LC/MS：m/z＝508[M+H]+(计算值：507)；
7.9Hz，1H)，7.54(d，J＝7.5Hz，1H)，7.47(d，J＝8.6Hz，2H)，7.40(d，J＝8.1Hz，1H)，6.90(d，J＝8.6Hz，2H)，4.84-4.88(m，1H)，4.45(br.s.，2H)，4.02(br.s.，2H)，3.98(dd，J＝11.2，
4.2Hz，1H)，3.80(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.71(br.s.，2H)，2.84(s，3H)。LC/MS：m/z＝508[M+H]+(计算值：507)；
[0459] (S)-1-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)乙-1-酮(化合物96)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.24(d，J＝1.8Hz，0.5H)，8.19(d，J＝1.8Hz，0.5H)，8.07(dd，J＝8.4，2.0Hz，0.5H)，8.04(dd，J＝8.1，2.0Hz，0.5H)，7.86-7.95(m，1H)，7.78-7.86(m，1H)，7.53(t，J＝7.4Hz，1H)，7.44-7.50(m，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，0.5H)，7.33(d，J＝8.1Hz，0.5H)，6.89-6.97(m，2H)，4.83-
4.86(m，1H)，4.66(s，1H)，4.62(br.s，1H)，4.03(br.s.，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.93(br.s.，2H)，3.84-3.89(m，1H)，3.75-3.84(m，1H)，2.21(s，1.5H)，1.94(s，1.5H)。LC/MS：m/z＝472[M+H]+(计算值：471)；
4.86(m，1H)，4.66(s，1H)，4.62(br.s，1H)，4.03(br.s.，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.93(br.s.，2H)，3.84-3.89(m，1H)，3.75-3.84(m，1H)，2.21(s，1.5H)，1.94(s，1.5H)。LC/MS：m/z＝472[M+H]+(计算值：471)；
[0460] (S)-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-N-乙基-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酰胺(化合物97)：1H NMR(400MHz，MeOH·d4)δ：
8.24(d，J＝2.0Hz，1H)，8.04(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.9Hz，1H)，7.82(d，J＝
7.7Hz，1H)，7.53(d，J＝7.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，4.85(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.90(br.s.，2H)，3.80(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.75(br.s.，2H)，3.12(q，J＝7.2Hz，2H)，
1.02(t，J＝7.2Hz，3H)。LC/MS：m/z＝501[M+H]+(计算值：500)；
8.24(d，J＝2.0Hz，1H)，8.04(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.9Hz，1H)，7.82(d，J＝
7.7Hz，1H)，7.53(d，J＝7.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，4.85(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.90(br.s.，2H)，3.80(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.75(br.s.，2H)，3.12(q，J＝7.2Hz，2H)，
1.02(t，J＝7.2Hz，3H)。LC/MS：m/z＝501[M+H]+(计算值：500)；
[0461] (S)-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-羧酰胺(化合物98)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.24(d，J＝
1.8Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.7Hz，1H)，7.82(d，J＝7.7Hz，1H)，
7.53(d，J＝7.5Hz，1H)，7.46(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.1Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，
2H)，4.85(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.91(br.s.，
2H)，3.81(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.76(br.s.，2H)。LC/MS：m/z＝473[M+H]+(计算值：
472)；
1.8Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.7Hz，1H)，7.82(d，J＝7.7Hz，1H)，
7.53(d，J＝7.5Hz，1H)，7.46(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.1Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，
2H)，4.85(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.91(br.s.，
2H)，3.81(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.76(br.s.，2H)。LC/MS：m/z＝473[M+H]+(计算值：
472)；
[0462] (S)-1-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)-2-羟基乙-1-酮(化合物99)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：(旋转异构体的混合物)8.22(s，1H)，8.01-8.12(m，1H)，7.87-7.96(m，1H)，7.78-7.86(m，1H)，7.54(t，J＝6.7Hz，1H)，7.47(dd，J＝8.5，5.0Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，0.4H)，7.34(d，J＝8.4Hz，0.6H)，6.92(d，J＝8.8Hz，2H)，4.82-4.88(m，1H)，4.64(br.s.，1.2H)，
4.56(s，0.8H)，4.40(s，0.8H)，4.09(s，1.2H)，3.89-4.06(m，3.8H)，3.77-3.84(m，1H)，3.74(br.t，J＝4.6Hz，1.2H)。LC/MS：m/z＝488[M+H]+(计算值：487)；
4.56(s，0.8H)，4.40(s，0.8H)，4.09(s，1.2H)，3.89-4.06(m，3.8H)，3.77-3.84(m，1H)，3.74(br.t，J＝4.6Hz，1.2H)。LC/MS：m/z＝488[M+H]+(计算值：487)；
[0463] (S)-1-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)-2-(二甲氨基)乙-1-酮(化合物100)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：(旋转异构体的混合物)8.25(s，0.4H)，8.20(s，0.6H)，8.05(d，J＝
8.1Hz，1H)，7.86-7.97(m，1H)，7.78-7.85(m，1H)，7.54(t，J＝7.7Hz，1H)，7.43-7.50(m，
2H)，7.37(d，J＝8.4Hz，0.4H)，7.34(d，J＝8.4Hz，0.6H)，6.93(d，J＝8.6Hz，2H)，4.86(t，J＝5.2Hz，1H)，4.75(br.s.，0.8H)，4.63(br.s.，1.2H)，4.04(br.s.，1H)，3.85-4.01(m，4H)，
3.76-3.84(m，1H)，3.36(s，0.8H)，3.00(s，1.2H)，2.29(s，2.4H)，2.16(s，3.6H)。LC/MS：m/z＝515[M+H]+(计算值：514)；
8.1Hz，1H)，7.86-7.97(m，1H)，7.78-7.85(m，1H)，7.54(t，J＝7.7Hz，1H)，7.43-7.50(m，
2H)，7.37(d，J＝8.4Hz，0.4H)，7.34(d，J＝8.4Hz，0.6H)，6.93(d，J＝8.6Hz，2H)，4.86(t，J＝5.2Hz，1H)，4.75(br.s.，0.8H)，4.63(br.s.，1.2H)，4.04(br.s.，1H)，3.85-4.01(m，4H)，
3.76-3.84(m，1H)，3.36(s，0.8H)，3.00(s，1.2H)，2.29(s，2.4H)，2.16(s，3.6H)。LC/MS：m/z＝515[M+H]+(计算值：514)；
[0464] (S)-1-(6-(1-异丁基-4-(甲基磺酰基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并-[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物124)：LC/MS：m/z＝420.1[M+H]+(计算值：419.2)；和
[0465] (2R，3S)-2，3-二羟基-3-(6-(1-异丁基-4-(甲基磺酰基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)丙酰胺(化合物125)：LC/MS：m/z＝463.2[M+H]+(计算值：462.2)。
[0466] 实施例13
[0467] 6-(4-(氰甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物102)的合成
[0468]
[0469] 向化合物84(0.100g，0.24mmol)于ACN(2mL)和THF(1mL)中的溶液里添加DIPEA(0.13mL，0.73mmol)，接着是化合物101(0.020mL，0.29mmol)。将反应混合物在RT下搅拌过夜，用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-5％MeOH/DCM)纯化残留物，得到0.090g(82％)的化合物102，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.43(d，J＝2.0Hz，1H)，8.35(br s，1H)，8.27(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，
8.19(d，J＝7.6，1H)，8.09(t，J＝8.0Hz，1H)，8.00(d，J＝6.8Hz，1H)，7.79(br s，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，2H)，7.37(d，J＝8.0Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，3.92(br s，2H)，3.87(s，
2H)，3.76(br s，2H)，2.94(t，J＝4.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝452[M+H]+(计算值：451)。
8.19(d，J＝7.6，1H)，8.09(t，J＝8.0Hz，1H)，8.00(d，J＝6.8Hz，1H)，7.79(br s，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，2H)，7.37(d，J＝8.0Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，3.92(br s，2H)，3.87(s，
2H)，3.76(br s，2H)，2.94(t，J＝4.0Hz，2H)。LC/MS：m/z＝452[M+H]+(计算值：451)。
[0470] 按类似的方式制备以下化合物：
[0471] (S)-2-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)乙酰胺(化合物103)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.09-8.03(m，2H)，7.90(t，J＝8.0Hz，1H)，7.81(d，J＝7.6Hz，1H)，7.53(d，J＝8.0Hz，1H)，
7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，4.90-4.84(m，1H)，
3.97(dd，J＝11.2，4.4Hz，1H)，3.90(br s，2H)，3.88(s，2H)，3.80(dd，J＝11.2，6.8Hz，1H)，
3.18(s，2H)，3.11(br.s，2H)。LC/MS：m/z＝487[M+H]+(计算值：486)；
7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.0Hz，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，4.90-4.84(m，1H)，
3.97(dd，J＝11.2，4.4Hz，1H)，3.90(br s，2H)，3.88(s，2H)，3.80(dd，J＝11.2，6.8Hz，1H)，
3.18(s，2H)，3.11(br.s，2H)。LC/MS：m/z＝487[M+H]+(计算值：486)；
[0472] (S)-2-(1-环己基-7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e]1
[1，4]二氮杂卓-4-基)乙酰胺(化合物104)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.85(dd，J＝8.5，
2.1Hz，1H)，7.77-7.83(m，2H)，7.67(d，J＝7.9Hz，1H)，7.41(d，J＝7.5Hz，1H)，7.07(d，J＝
8.5Hz，1H)，4.81(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.93(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.88(s，2H)，3.76(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.42(t，J＝11.2Hz，1H)，3.19(s，2H)，3.17(br.s，2H)，2.87-2.94(m，2H)，2.00(d，J＝11.2Hz，2H)，1.90(d，J＝12.3Hz，2H)，1.73(d，J＝13.0Hz，1H)，1.40-
1.67(m，4H)，1.18-1.37(m，1H)。LC/MS：m/z＝425[M+H]+(计算值：424)；
[1，4]二氮杂卓-4-基)乙酰胺(化合物104)：H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.85(dd，J＝8.5，
2.1Hz，1H)，7.77-7.83(m，2H)，7.67(d，J＝7.9Hz，1H)，7.41(d，J＝7.5Hz，1H)，7.07(d，J＝
8.5Hz，1H)，4.81(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，3.93(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.88(s，2H)，3.76(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.42(t，J＝11.2Hz，1H)，3.19(s，2H)，3.17(br.s，2H)，2.87-2.94(m，2H)，2.00(d，J＝11.2Hz，2H)，1.90(d，J＝12.3Hz，2H)，1.73(d，J＝13.0Hz，1H)，1.40-
1.67(m，4H)，1.18-1.37(m，1H)。LC/MS：m/z＝425[M+H]+(计算值：424)；
[0473] (S)-2-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)-N-甲基乙酰胺(化合物105)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.04-8.09(m，2H)，7.90(t，J＝7.9Hz，1H)，7.81(d，J＝7.7Hz，1H)，7.53(d，J＝7.5Hz，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，6.87(d，J＝8.8Hz，2H)，4.86(dd，J＝
6.7，4.2Hz，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.89(br.s，2H)，3.86(s，2H)，3.79(dd，J＝
11.2，6.7Hz，1H)，3.18(s，2H)，3.08(br.s.，2H)，2.79(s，3H)。LC/MS：m/z＝501[M+H]+(计算值：500)；
6.7，4.2Hz，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.89(br.s，2H)，3.86(s，2H)，3.79(dd，J＝
11.2，6.7Hz，1H)，3.18(s，2H)，3.08(br.s.，2H)，2.79(s，3H)。LC/MS：m/z＝501[M+H]+(计算值：500)；
[0474] (S)-2-(7-(6-(1，2-二羟乙基)吡啶-2-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-1，2，3，5-四氢-4H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-4-基)乙腈(化合物106)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.16(d，J＝2.0Hz，1H)，8.06(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.7Hz，1H)，7.81(d，J＝7.5Hz，1H)，7.53(d，J＝7.7Hz，1H)，7.46(d，J＝8.8Hz，2H)，7.36(d，J＝8.1Hz，1H)，6.89(d，J＝
8.8Hz，2H)，4.84-4.87(m，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.91-4.01(br.s.，2H)，3.84(s，2H)，3.77-3.83(m，3H)，3.07(br.t，J＝4.5Hz，2H)。LC/MS：m/z＝469[M+H]+(计算值：
468)；和
8.8Hz，2H)，4.84-4.87(m，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，3.91-4.01(br.s.，2H)，3.84(s，2H)，3.77-3.83(m，3H)，3.07(br.t，J＝4.5Hz，2H)。LC/MS：m/z＝469[M+H]+(计算值：
468)；和
[0475] (S)-1-(6-(4-((1H-咪唑-2-基)甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶-2-基)乙烷-1，2-二醇(化合物107)：1H NMR
(400MHz，MeOH-d4)δ：8.05(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.90(t，J＝7.7Hz，1H)，
7.80(d，J＝7.9Hz，1H)，7.53(d，J＝7.5Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.37(d，J＝8.1Hz，
1H)，7.02(s，2H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，4.83-4.86(m，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.91(br.s.，2H)，3.82(s，2H)，3.75-3.80(m，3H)，3.00(br.s.，2H)1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.24(d，J＝2.0Hz，1H)，8.04(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.9Hz，1H)，7.82(d，J＝
7.7Hz，1H)，7.53(d，J＝7.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，4.85(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.90(br.s.，2H)，3.80(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.75(br.s.，2H)，3.12(q，J＝7.2Hz，2H)，
1.02(t，J＝7.2Hz，3H)。LC/MS：m/z＝510[M+H]+(计算值：509)。
(400MHz，MeOH-d4)δ：8.05(dd，J＝8.1，1.8Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.90(t，J＝7.7Hz，1H)，
7.80(d，J＝7.9Hz，1H)，7.53(d，J＝7.5Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.37(d，J＝8.1Hz，
1H)，7.02(s，2H)，6.86(d，J＝8.8Hz，2H)，4.83-4.86(m，1H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.91(br.s.，2H)，3.82(s，2H)，3.75-3.80(m，3H)，3.00(br.s.，2H)1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.24(d，J＝2.0Hz，1H)，8.04(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.90(t，J＝7.9Hz，1H)，7.82(d，J＝
7.7Hz，1H)，7.53(d，J＝7.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，6.90(d，J＝8.8Hz，2H)，4.85(dd，J＝6.6，4.2Hz，1H)，4.50(s，2H)，3.97(dd，J＝11.2，4.2Hz，1H)，
3.90(br.s.，2H)，3.80(dd，J＝11.2，6.6Hz，1H)，3.75(br.s.，2H)，3.12(q，J＝7.2Hz，2H)，
1.02(t，J＝7.2Hz，3H)。LC/MS：m/z＝510[M+H]+(计算值：509)。
[0476] 实施例14
[0477] 6-(4-(2，3-二羟丙基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)吡啶酰胺(化合物109)的合成
[0478]
[0479] 向化合物84(0.140g，0.34mmol)于THF(2mL)中的溶液里添加DIPEA(0.18mL，1.02mmol)，接着是烯丙基溴(0.035mL，0.41mmol)。将反应混合物在RT下搅拌过夜，用水淬灭并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-5％MeOH/DCM)纯化残留物，得到0.123g(80％)的化合物108，为白色固体。LC/MS：m/z＝453[M+H]+(计算值：452)。
[0480] 向化合物108(0.060g，0.13mmol)于THF(2mL)和水(0.5mL)中的溶液里添加四氧化锇(在t-BuOH中的2.5％溶液，0.17mL，0.013mmol)，接着是NMO(0.023g，0.20mmol)。将反应混合物在RT下搅拌过夜，然后用饱和NaHCO3水溶液淬灭，并用EtOAc萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，在DCM中0-10％(在MeOH中的0.5％NH4OH))纯化残留物两次，得到0.026g(40％)的化合物109，为白色固体。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ8.29(d，J＝1.6Hz，1H)，8.19(dd，J＝8.0，2.0Hz，1H)，8.15(dd，J＝7.2，1.6Hz，1H)，8.10-
8.04(m，2H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.39(d，J＝7.6Hz，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，3.96-
3.85(m，3H)，3.93(s，2H)，3.54(sept，J＝5.6Hz，2H)，3.16-3.09(m，2H)，2.68(dd，J＝13.2，
4.0Hz，1H)，2.56(dd，J＝13.2，8.0Hz，1H)。LC/MS：m/z＝487[M+H]+(计算值：486)。
8.04(m，2H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.39(d，J＝7.6Hz，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，3.96-
3.85(m，3H)，3.93(s，2H)，3.54(sept，J＝5.6Hz，2H)，3.16-3.09(m，2H)，2.68(dd，J＝13.2，
4.0Hz，1H)，2.56(dd，J＝13.2，8.0Hz，1H)。LC/MS：m/z＝487[M+H]+(计算值：486)。
[0481] 实施例15
[0482] 6-(4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-7-基)吡啶酰胺(化合物110)的合成
[0483]
[0484] 向化合物69(0.154g，0.389mmoI)于MeOH(15mL)中的溶液里添加10％Pd/C(0.041g)。将反应混合物在1个大气压的氢气下搅拌20h。通过硅藻土过滤混合物，将滤液浓缩并通过快速色谱法(SiO2，40-70％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到0.131g(85％)的化合物
110，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.28(br.s.，1H)，8.11(dd，J＝7.9，1.0Hz，
1H)，8.03(t，J＝7.7Hz，1H)，7.97(dd，J＝7.5，1.0Hz，1H)，7.80(d，J＝1.8Hz，1H)，7.69-
7.74(m，3H)，7.68(br.s.，1H)，7.42(d，J＝8.1Hz，2H)，6.85(d，J＝8.1Hz，1H)，4.44(t，J＝
6.5Hz，1H)，4.14-4.28(m，2H)，2.26-2.38(m，1H)，2.03-2.14(m，1H)。LC/MS：M/z＝399[M+H]+(计算值：398)。
110，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.28(br.s.，1H)，8.11(dd，J＝7.9，1.0Hz，
1H)，8.03(t，J＝7.7Hz，1H)，7.97(dd，J＝7.5，1.0Hz，1H)，7.80(d，J＝1.8Hz，1H)，7.69-
7.74(m，3H)，7.68(br.s.，1H)，7.42(d，J＝8.1Hz，2H)，6.85(d，J＝8.1Hz，1H)，4.44(t，J＝
6.5Hz，1H)，4.14-4.28(m，2H)，2.26-2.38(m，1H)，2.03-2.14(m，1H)。LC/MS：M/z＝399[M+H]+(计算值：398)。
[0485] 按类似的方式制备以下化合物：
[0486] 6-(((S)-1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-(三氟甲基)苯基)色满-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物111)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ8.23(br.s.，1H)，7.98-8.01(m，1H)，7.97(d，J＝7.9Hz，1H)，7.91(br.d，J＝6.4Hz，1H)，7.67-7.75(m，3H)，7.52(br.d，J＝
4.6Hz，1H)，7.40(d，J＝8.1Hz，2H)，7.11(s，1H)，6.97(br.d，J＝6.8Hz，1H)，6.79(d，J＝
8.1Hz，1H)，4.50-4.62(m，1H)，4.44(t，J＝6.5Hz，1H)，4.09-4.28(m，2H)，2.23-2.39(m，
1H)，1.96-2.15(m，1H)，1.37(d，J＝6.8Hz，3H)。LC/MS：m/z＝486[M+H]+(计算值：485)；和[0487] 6-(((S).1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-氟苄基)色满-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物112)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.95-8.00(m，1H)，7.90(s，1H)，7.30(m，2H)，
7.25(m，2H)，7.05(m，2H)，4.60(m，1H)，4.20(m，2H)，3.20(m，2H)，2.80(m，1H)，1.70-2.00(m，2H)，1.55(m，3H)。LC/MS：m/z＝500[M+H]+(计算值：499)。
4.6Hz，1H)，7.40(d，J＝8.1Hz，2H)，7.11(s，1H)，6.97(br.d，J＝6.8Hz，1H)，6.79(d，J＝
8.1Hz，1H)，4.50-4.62(m，1H)，4.44(t，J＝6.5Hz，1H)，4.09-4.28(m，2H)，2.23-2.39(m，
1H)，1.96-2.15(m，1H)，1.37(d，J＝6.8Hz，3H)。LC/MS：m/z＝486[M+H]+(计算值：485)；和[0487] 6-(((S).1-氨基-1-氧代丙-2-基)氨基)-2-(4-(4-氟苄基)色满-7-基)嘧啶-4-羧酰胺(化合物112)：1H NMR(400MHz，MeOH-d4)：δ7.95-8.00(m，1H)，7.90(s，1H)，7.30(m，2H)，
7.25(m，2H)，7.05(m，2H)，4.60(m，1H)，4.20(m，2H)，3.20(m，2H)，2.80(m，1H)，1.70-2.00(m，2H)，1.55(m，3H)。LC/MS：m/z＝500[M+H]+(计算值：499)。
[0488] 实施例16
[0489] (S)-6-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)-4-(1，2-二羟乙基)吡啶酰胺(化合物122)的合成
[0490]
[0491] 向化合物30(900mg，1.73mmol)和4，6-二氯甲基吡啶腈(化合物113)(300mg，1.73mmol)于DME(12mL)和EtOH(4mL)中的溶液里添加Pd(PPh3)2Cl2(61mg，0.087mmol)，接着是2.0M的Na2CO3水溶液(2.60mL，5.20mmol)。将反应混合物用氮气吹扫并在RT下搅拌6h。已形成很厚的白色沉淀物。将反应物用水稀释并用EtOAc(2×)萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，10-20％EtOAc/己烷)纯化残留物，得到第一化合物114，为浅黄色固体(303mg；收率33％)，接着是化合物115，为浅黄色固体(364mg；收率
40％)。化合物114：LC/MS：m/z＝551/553[M+Na]+(计算值：529)。化合物115：LC/MS：m/z＝+
551/553[M+Na](计算值：529)。
40％)。化合物114：LC/MS：m/z＝551/553[M+Na]+(计算值：529)。化合物115：LC/MS：m/z＝+
551/553[M+Na](计算值：529)。
[0492] 向化合物114(303mg，0.573mmol)于DCM(10mL)中的溶液里添加TFA(2mL)。将反应混合物在RT下搅拌2.5h，然后浓缩。将残留物溶于DCM，并与1.0M的NaOH水溶液一起剧烈摇动5分钟。用DCM(2×)萃取水层。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩，得到化合物116，1
为黄色粉末，其不经进一步纯化而使用(243mg)。收率99％。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.03(d，J＝2.0Hz，1H)，7.96(d，J＝1.8Hz，1H)，7.93(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.65(d，J＝1.8Hz，
1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.39(d，J＝8.1Hz，1H)，6.79(d，J＝8.8Hz，2H)，3.98(s，2H)，
3.84(br.s.，2H)，3.18(t，J＝4.7Hz，2H)。LC/MS：m/z＝429/431[M+H]+(计算值：428)。
为黄色粉末，其不经进一步纯化而使用(243mg)。收率99％。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.03(d，J＝2.0Hz，1H)，7.96(d，J＝1.8Hz，1H)，7.93(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.65(d，J＝1.8Hz，
1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.39(d，J＝8.1Hz，1H)，6.79(d，J＝8.8Hz，2H)，3.98(s，2H)，
3.84(br.s.，2H)，3.18(t，J＝4.7Hz，2H)。LC/MS：m/z＝429/431[M+H]+(计算值：428)。
[0493] 向化合物116(240mg，0.56mmol)于DCE(5mL)中的溶液里添加环丙烷甲醛(化合物117)(43mg，0.62mmol)，接着是三乙酰氧基硼氢化钠(178mg，0.84mmol)。将反应混合物在RT下搅拌1h，然后用饱和NaHCO3水溶液淬灭，用水稀释并用DCM(2×)萃取。将合并的有机萃取物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，40-60％EtOAc/己烷)纯化残留物以分离出化合物118，为浅黄色泡沫状物(230mg)。收率85％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.03(d，J＝
2.2Hz，1H)，7.90-7.98(m，2H)，7.63(d，J＝1.8Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝
8.4Hz，1H)，6.81(d，J＝8.8Hz，2H)，3.88(s，2H)，3.83(br.s.，2H)，3.05-3.12(m，2H)，2.44(d，J＝6.4Hz，2H)，0.88-1.01(m，1H)，0.55-0.64(m，2H)，0.10-0.19(m，2H)。LC/MS：m/z＝
483/485[M+H]+(计算值：482)。
2.2Hz，1H)，7.90-7.98(m，2H)，7.63(d，J＝1.8Hz，1H)，7.43(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝
8.4Hz，1H)，6.81(d，J＝8.8Hz，2H)，3.88(s，2H)，3.83(br.s.，2H)，3.05-3.12(m，2H)，2.44(d，J＝6.4Hz，2H)，0.88-1.01(m，1H)，0.55-0.64(m，2H)，0.10-0.19(m，2H)。LC/MS：m/z＝
483/485[M+H]+(计算值：482)。
[0494] 在15mL压力管中，将化合物118(220mg，0.45mmol)溶于THF(4mL)。然后添加4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧硼杂环戊烷(化合物119)(0.10mL，0.59mmol)、TBAF(在THF中1.0M，0.91mL，0.91mmol)和Pd(dppf)Cl2CH2Cl2加合物(19mg，0.023mmol)。将反应物用氮气吹扫，然后将管密封并在85℃下加热2h。冷却到RT后，将混合物在水与EtOAc之间分配。用EtOAc萃取水层。将合并的有机物经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0％至5％
1
MeOH/DCM)纯化残留物，得到化合物120，为浅橙色泡沫状固体(173mg)。收率80％。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.04(d，J＝2.0Hz，1H)，7.95(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.86(d，J＝1.1Hz，
1H)，7.65(d，J＝1.1Hz，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.1Hz，1H)，6.79(d，J＝
8.8Hz，2H)，6.76(dd，J＝17.6，10.8Hz，1H)，6.13(d，J＝17.6Hz，1H)，5.69(d，J＝10.8Hz，
1H)，3.88(s，2H)，3.83(br.s.，2H)，3.07-3.13(m，2H)，2.44(d，J＝6.4Hz，2H)，0.88-1.00(m，1H)，0.55-0.62(m，2H)，0.10-0.17(m，2H)。LC/MS：m/z＝475[M+H]+(计算值：474)。
1
MeOH/DCM)纯化残留物，得到化合物120，为浅橙色泡沫状固体(173mg)。收率80％。H NMR(400MHz，CDCl3)δ：8.04(d，J＝2.0Hz，1H)，7.95(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，7.86(d，J＝1.1Hz，
1H)，7.65(d，J＝1.1Hz，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，2H)，7.35(d，J＝8.1Hz，1H)，6.79(d，J＝
8.8Hz，2H)，6.76(dd，J＝17.6，10.8Hz，1H)，6.13(d，J＝17.6Hz，1H)，5.69(d，J＝10.8Hz，
1H)，3.88(s，2H)，3.83(br.s.，2H)，3.07-3.13(m，2H)，2.44(d，J＝6.4Hz，2H)，0.88-1.00(m，1H)，0.55-0.62(m，2H)，0.10-0.17(m，2H)。LC/MS：m/z＝475[M+H]+(计算值：474)。
[0495] 向化合物120(170mg，0.36mmol)于t-BuOH(6mL)和水(6mL)的部分悬浮液里添加AD-混合物-α(500mg；1.4g/mmol的乙烯基底物)。将反应混合物在RT下剧烈搅拌24h，然后用水稀释并用EtOAc(2×)萃取。将合并的有机物用水和盐水洗涤，然后经MgSO4干燥并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-10％MeOH/DCM)纯化残留物以分离出化合物121，为灰白色泡沫状固体(98mg)。收率54％。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.18-8.24(m，2H)，8.09(dd，J＝8.4，
2.2Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，
2H)，4.81-4.85(m，1H)，3.88(s，4H)，3.71-3.79(m，2H)，3.10(br.t，J＝4.3Hz，2H)，2.47(d，J＝6.6Hz，2H)，0.93-1.03(m，1H)，0.55-0.63(m，2H)，0.15-0.23(m，2H)。LC/MS：m/z＝509[M+H]+(计算值：508)。
2.2Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，
2H)，4.81-4.85(m，1H)，3.88(s，4H)，3.71-3.79(m，2H)，3.10(br.t，J＝4.3Hz，2H)，2.47(d，J＝6.6Hz，2H)，0.93-1.03(m，1H)，0.55-0.63(m，2H)，0.15-0.23(m，2H)。LC/MS：m/z＝509[M+H]+(计算值：508)。
[0496] 向化合物121(98mg，0.19mmol)于EtOH(5mL)和水(0.5mL)中的溶液里添加氢化(二甲基次膦酸-kP)[氢双(二甲基次膦酸根合-kP)]铂(II)(8mg，0.019mmol，Strem)。将反应混合物在85℃下搅拌2h，然后冷却到RT并浓缩。通过快速色谱法(SiO2，0-10％MeOH/DCM)纯化残留物以分离出粘稠的油状物。将油状物溶于ACN/水并冻干，得到化合物122，为淡黄色固体(32mg)。收率32％。1H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.30(d，J＝2.0Hz，1H)，8.20(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，8.15(s，1H)，8.12(s，1H)，7.44(d，J＝8.8Hz，2H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，6.88(d，J＝8.8Hz，2H)，4.84-4.89(m，1H)，3.89(br.s.，4H)，3.75(tt，J＝11.5，5.6Hz，2H)，3.12(br.s.，2H)，2.49(d，J＝6.6Hz，2H)，0.94-1.04(m，1H)，0.55-0.63(m，2H)，0.15-0.24(m，
2H)。LC/MS：M/z＝527[M+H]+(计算值：526)。
2H)。LC/MS：M/z＝527[M+H]+(计算值：526)。
[0497] 按类似的方式制备(S)-4-(4-(环丙基甲基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-2，3，4，5-四1
氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)-6-(1，2-二羟乙基)吡啶酰胺(化合物123)。H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.33(d，J＝1.8Hz，1H)，8.01(d，J＝1.8Hz，1H)，7.91(d，J＝2.0Hz，
1H)，7.83(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.41(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，4.90(dd，J＝6.2，4.6Hz，1H)，3.81-3.97(m，6H)，3.08-3.14(m，2H)，2.48(d，J＝6.6Hz，2H)，0.93-1.03(m，1H)，0.56-0.63(m，2H)，0.15-0.22(m，2H)。LC/MS：m/z＝527[M+H]+(计算值：526)。
氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂卓-7-基)-6-(1，2-二羟乙基)吡啶酰胺(化合物123)。H NMR(400MHz，MeOH-d4)δ：8.33(d，J＝1.8Hz，1H)，8.01(d，J＝1.8Hz，1H)，7.91(d，J＝2.0Hz，
1H)，7.83(dd，J＝8.1，2.0Hz，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.41(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.8Hz，2H)，4.90(dd，J＝6.2，4.6Hz，1H)，3.81-3.97(m，6H)，3.08-3.14(m，2H)，2.48(d，J＝6.6Hz，2H)，0.93-1.03(m，1H)，0.56-0.63(m，2H)，0.15-0.22(m，2H)。LC/MS：m/z＝527[M+H]+(计算值：526)。
[0498] 在前述实施例中采用以下缩写：
[0499]
[0500]
[0501] 实施例17
[0502] 已经在 或 测定和/或EP测定中测试了代表性的本公开的化合物的钠通道阻断活性。上面详细描述了测定法。
[0503] 表3中给出了由测定获得的代表性值。
[0504] 表3
[0505] 作为钠通道(Nav)阻断剂的化合物的评价
[0506]
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