专利汇可以提供一种肺炎支原体培养基专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种 肺 炎支原体培养基,其为在一个容器中盛装有一固体培养基和一液体培养基,所述的固体培养基在所述的容器内部呈现出一个斜面,同时所述斜面的1/4~1/2浸没在所述的液体培养基中;所述容器还包括一个可密封所述容器的内部空间的密封部件;所述的固体培养基的组分除包括15~25g/L琼脂外,其余组分与所述的液体培养基的组分相同。本发明的培养基用于检测肺炎支原体,提高了检测的特异性,且可得到单克隆菌落,方便基于检测结果作下游的进一步研究工作。,下面是一种肺炎支原体培养基专利的具体信息内容。
1.一种肺炎支原体培养基,其特征在于,其是一种肺炎支原体双相培养基,其为在一个容器中盛装有一固体培养基和一液体培养基,所述的固体培养基在所述的容器内部呈现出一个斜面,同时所述斜面的1/4~1/2浸没在所述的液体培养基中;所述容器还包括一个可密封所述容器的内部空间的密封部件;
所述的液体培养基的组分包括40~60g/L牛肉膏、7~12g/L蛋白胨、4~6g/L氯化钠、70~130mL/L牛血清、10~20mL/L DMEM液体培养基质、8~15mL/L质量体积百分数为
10~40%酵母浸液、3~7g/L葡萄糖、0.3~0.7mL/L质量体积百分数为0.2~0.6%酚红指示剂、0.005~0.015g/L制霉素、600~1500IU/L青霉素和0.5~1.0g/L尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸;所述的DMEM液体培养基质通过如下方法制得:将低糖DMEM粉末溶于水形成
10g/mL浓度;
所述的固体培养基的组分除包括15~25g/L琼脂外,其余组分与所述的液体培养基的组分相同。
2.如权利要求1所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,所述的容器的直径为3~
7cm,所述的容器的长度为6~15cm。
3.如权利要求1所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,所述的密封部件为与所述容器可以紧密贴合的盖子或者是用于封口的塑料封口膜。
4.如权利要求1所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,所述的液体培养基的组分包括45~55g/L牛肉膏、8~10g/L蛋白胨、5~6g/L氯化钠、80~110mL/L牛血清、12~
18mL/L DMEM液体培养基质、10~12mL/L质量体积百分数为20~30%酵母浸液、4~6g/L葡萄糖、0.4~0.6mL/L质量体积百分数为0.3~0.6%酚红指示剂、0.008~0.012g/L制霉素、800~1200IU/L青霉素和0.5~1.0g/L尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸。
5.如权利要求1所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,所述的固体培养基由如下制备方法制备而得:将所述的固体培养基的各组分简单混合,以水溶解,调节pH后再进行过滤除菌,然后加热至60~80℃溶化后,转到所述的容器中冷却形成斜面;所述的液体培养基由如下制备方法制备而得:将所述的液体培养基的各组分简单混合,以水溶解,调节pH后再进行过滤除菌,然后加热至60~80℃溶化后,转到所述容器中,并覆盖所述固体培养基形成的斜面的1/4~1/2。
6.如权利要求5所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,所述的调节pH为将pH调节至
7.5~8.0。
7.如权利要求1所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,其是一种肺炎支原体双相培养基,其为在一个直径是5cm、长度是8cm的透明塑料管中盛装有一部分固体培养基和一部分液体培养基,所述的固体培养基在所述的透明塑料管中形成一个斜面,所述的斜面的1/3浸没在所述的液体培养基中,所述的透明塑料管还包括一个能紧密贴合所述透明塑料管的盖子;
所述的液体培养基的组分包括45g/L牛肉膏、8g/L蛋白胨、5g/L氯化钠、80mL/L牛血清、12mL/LDMEM液体培养基质、10mL/L质量体积百分数为30%酵母浸液、4g/L葡萄糖、0.4mL质量体积百分数为0.6%酚红指示剂、0.008g/L制霉素、800IU/L青霉素和0.5g/L尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸;
所述的固体培养基的组分除包括15.0g/L琼脂外,其余组分与所述的液体培养基的组分相同。
8.如权利要求1所述的肺炎支原体培养基,其特征在于,其是一种肺炎支原体双相培养基,其为在一个直径是7cm、长度是10cm的透明玻璃管中盛装有一部分固体培养基和一部分液体培养基,所述的固体培养基在所述的透明玻璃管中形成一个斜面,所述的斜面的
1/3浸没在所述的液体培养基中,所述的透明玻璃管还包括一能密封所述透明玻璃管内部空间的塑料封口薄膜;
所述的液体培养基的组分包括55g/L牛肉膏、10g/L蛋白胨、6g/L氯化钠、110mL/L牛血清、18ml/L DMEM液体培养基质、12mL/L质量体积百分数为20%酵母浸液、6g/L葡萄糖、
0.6mL质量体积百分数为0.3%酚红指示剂、0.012g/L制霉素、1200IU/L青霉素和1.0g/L尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸;
所述的固体培养基的组分除包括25g/L琼脂外,其余组分与所述的液体培养基的组分相同。
9.一种以如权利要求1~8任一项所述的肺炎支原体培养基检测肺炎支原体的方法,其包括如下步骤:
(1)将待测样本接种于所述的液体培养基中,轻摇混匀后倾斜容器,使一部分混有待测样本的液体培养基平铺于所述的固体培养基上,即完成接种;
(2)将步骤(1)完成接种的培养容器置于培养箱中培养,培养温度为36~38℃,培养箱内的CO2浓度为5%~10%,所述的百分比为体积百分比;
(3)培养24~48小时判断初步检测结果,对阳性样本继续培养3~7天,得最终检测结果;
所述的判断初步检测结果的标准为:若液体培养基变红且清晰透明,可以初步报告阳性;所述的最终检测结果的判断标准为:若固体斜面上有油煎蛋样菌落生长,且符合肺炎支原体生化特征,最终报告肺炎支原体阳性。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述的培养温度为37℃,所述培养箱内的CO2浓度为8%。
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