C环氢化青藤碱衍生物及其制备方法和应用
阅读：38发布：2023-02-04
专利汇可以提供C环氢化青藤碱衍生物及其制备方法和应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种C环氢化青藤 碱 A环1位引入卤素、 碳 碳双键取代基、异噁唑啉杂环取代基的衍 生物 及其合成方法和应用。本发明的C环氢化青藤碱衍生物是以青藤碱为母体，通过合成技术(包括微流控合成)，在青藤碱1位通过Heck反应和1，3-偶极环加成反应生成青藤碱衍生物。所得化合物具有较好的抗炎活性，具有用于关节炎， 风 湿性关节炎及其抗炎药物的潜 力 。，下面是C环氢化青藤碱衍生物及其制备方法和应用专利的具体信息内容。
一种C环氢化青藤碱衍生物，其特征在于，结构如下：其中，R为I、其中R2为H、或C1～8的烷基；R3～R7为相同或不同的下列取代基：H、甲基的C1～4的烷基、甲氧基的C1～4的烷氧基、氯、溴、碘。FSA00000251839400011.tif,FSA00000251839400012.tif
2. 一种制备权利要求1所述的C环氢化青藤碱衍生物的方法，其特征在于，包括：首先 以青藤碱为母核，锌汞齐还原成C环氢化青藤碱，与N-碘代丁二酰亚胺反应，得到1位碘取 代的C环氢化青藤碱；在醋酸钯催化下与丙烯酸酯进行Heck反应，生成1位碳碳双键取代 的C环氢化青藤碱衍生物。
3. 一种制备权利要求1所述的C环氢化青藤碱衍生物的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)首先以青藤碱为母核，锌汞齐还原成C环氢化青藤碱，与N-碘代丁二酰亚胺反应，得 到1位碘取代的C环氢化青藤碱，在醋酸钯催化下与丙烯酸甲酯进行Heck反应，生成1位 碳碳双键取代的C环氢化青藤碱衍生物；2)进行芳醛肟和N-氯代丁二酰亚胺的反应，生成氯肟；3)生成的碳碳双键取代的C环氢化青藤碱衍生物与氯肟，进行1，3-偶极环加成反应， 生成1位为异噁唑啉杂环取代基的C环氢化青藤碱衍生物；其中，芳醛肟由相应的芳醛和盐酸羟氨反应制得，其特征结构式如下：
其中R3〜R7为相同或不同的下列取代基：H、甲基的Cb4的烷基、如甲氧基的Cb4的烷氧基、氯、溴或碘。
4. 一种权利要求2或3所述的制备方法的专用装置，其特征在于：包括微量注射泵、 注射器、T-型混合器、接头、石英毛细管和加热装置；所述的注射器设置在微量注射泵上， T-型混合器通过接头与注射器相通的石英毛细管相连接，所述的加热装置为油浴加热器。
5.权利要求1所述的C环氢化青藤碱衍生物在用于制备治疗关节炎，风湿性关节炎及 其抗炎药物中的应用。
C环氢化青藤碱衍生物及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及青藤碱衍生物及其制备方法和应用，具体涉及C环氢化青藤碱衍生物 及其制备方法和应用。
背景技术
[0002] 青藤碱[(9 α，13 α，14 α ) -7,8-didehydro-4-hydroxy-3, 7-dimethoxy-17_meth yl-mophinan-6-one, Sinomenine]是从防己科植物青藤及毛青藤的干燥藤茎中提取的一种 异喹啉类生物碱，青藤碱及其衍生物具有镇痛镇静、镇咳局麻、降血压、抗炎作用，为植物中 很强的组织胺释放剂，在临床上被应用于治疗风湿性和类风湿性关节炎；动物实验提示在 休克和器官损害中有保护作用。其结构式如下：
[0003] 通过对青藤碱的结构修饰，合成结构新颖、筛选活性更高的衍生物是药物化学目 前研究的热点之一。如陈磊等“微生物转化合成羟基化青藤碱及其条件优化”（北京中医 药大学学报2008/10)；康姚洁等“青藤碱对高糖处理下的血管内皮细胞功能的影响”（第 四军医大学学报2009/21)；王毅等“青藤碱对人外周血⑶4+T淋巴细胞增殖和细胞内Ca2+ 浓度影响的体外研究”（中华细胞与干细胞移植2009/01)；吴敏等“青藤碱与卡钼对宫颈 癌Hela细胞增殖的协同抑制研究”（实用妇产科杂志2009/08)；褚建波等“青藤碱凝胶 剂透皮吸收的研究”（中国现代应用药学2009/08)；邓艳平等“盐酸青藤碱缓释组合微丸 系统的研究”（中国药科大学学报2009/03)。从目前的研究成果来看，对C环结构改造的 比较多，如国内的李玉峰等“从青藤碱制备具有（+)-C-Normorphinan骨架的化合物”（有 机化学2009/02)，对C环进行了缩环研究；国外的Cantrell，G. L.等“Process for the preparation of 6-hydroxymorphinan compounds from 6-ketomorphinans" (U. S. Pat. App 1. Publ.，2009312552，17 Dec 2009)，在青藤碱 C 环的 6 位生成了一个羟基；Whittall, J.等"Production of (+)-morphine from (-)-sinomenine" (Brit. UK Pat.Appl., 2392670，IOMar 2004)，把青藤碱C环的碳碳双键还原成了碳碳单键；Hitotsuyanagi，Y.等 "Syntheses of Antitumor Morphinane Alkaloids, Sinococuline and 6-epi_,7-epi_, and 6-epi-7-epi-Sinococuline, from Sinomenine" (Journal of Organic Chemistry, 60 (14)，4549-58 ； 1995)，也报道了青藤碱C环和A环4位羟基的结构修饰。对A环的结构 修饰，目前主要都集中在4位羟基上，杨健等“青藤碱衍生物的合成及其镇痛抗炎作用定量 构效关系”（武汉大学学报2009/01)，以青藤碱为先导化合物，在其A环4位酚羟基进行酰 化、醚化合成了七种青藤碱衍生物。对青藤碱D环的结构修饰也有报道，比如17为N原子 的烃基化、磺酰化(CN. 1785976A ；CN. 1785977A ；CN. 1962638A)。对A环1位的结构修饰研 究的不多，除了罗娟等（CN. 1948291A ；有机化学2007/05)，对1为进行了大量的胺甲基化修 饰外，没见其他系统的研究报道。因此对青藤碱A环1位的结构修饰还有很大的空间，而利 用目前热门的微流控合成技术对青藤碱的结构修饰至今更未见报道。发明内容
[0004] 发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的第一个目的是提供一种青藤碱 A环衍生物，第二个目的是提供这种青藤碱A环衍生物的制备方法，第三个目的是提供这种 青藤碱A环衍生物的应用。
[0005] 技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：
[0006] 一种C环氢化青藤碱衍生物，结构如下：
[0007]
[0009] 本发明的C环氢化青藤碱衍生物具有如下结构：
[0010]
[0011]
[0012] 制备A环1位引入卤素取代基的青藤碱C环氢化青藤碱衍生物方法为青藤碱锌汞 齐还原成C环氢化青藤碱，与NIS反应，生成1碘代C环氢化青藤碱。
[0013] 制备A环1位引入碳碳双键取代基的C环氢化青藤碱衍生物方法为：首先以青藤 碱为母核，锌汞齐还原成C环氢化青藤碱，与N-碘代丁二酰亚胺反应，得到1位碘取代的C 环氢化青藤碱；再在微反应器中，在醋酸钯催化下与丙烯酸酯进行Heck反应，生成1位碳碳 双键取代的C环氢化青藤碱衍生物。
[0014] 制备A环1位引入异噁唑啉杂环取代基的C环氢化青藤碱衍生物的方法为：
[0015] 1)首先以青藤碱为母核，锌汞齐还原成C环氢化青藤碱，与N-碘代丁二酰亚胺反 应，得到1位碘取代的C环氢化青藤碱，再在微反应器中，在醋酸钯催化下与丙烯酸甲酯进 行Heck反应，生成1位碳碳双键取代的C环氢化青藤碱衍生物。
[0016] 2)在微反应器1中生成1位碳碳双键取代的C环氢化C环氢化青藤碱衍生物的同 时，在微反应器2中进行芳醛肟和N-氯代丁二酰亚胺的反应，生成氯肟。
[0017] 3)微反应器1中生成的碳碳双键取代的C环氢化青藤碱衍生物与微反应器2中生 成的氯肟，在微反应器3中，进行1，3-偶极环加成反应，生成1位为异噁唑啉杂环取代基的 C环氢化青藤碱衍生物。芳醛肟由相应的芳醛和盐酸羟氨反应制得，其特征结构式如下：
[0018]
[0019] 其中R3〜R7为相同或不同的下列取代基：H、甲基的Cb4的烷基、甲氧基的C1-4的烷氧基、氯、溴、碘等。
[0020] 一种上述的制备方法的专用装置，包括微量注射泵、注射器、T-型混合器、接头、石 英毛细管和加热装置；所述的注射器设置在微量注射泵上，T-型混合器通过接头与注射器 相通的石英毛细管相连接，所述的加热装置为油浴加热器。
[0021] 上述的C环氢化青藤碱衍生物在用于制备治疗关节炎，风湿性关节炎及其抗炎药 物中的应用。[0022] 有益效果：本发明的C环氢化青藤碱衍生物是以青藤碱为母体，通过合成技术（包 括微流控合成），在青藤碱1位通过Heck反应和1，3-偶极环加成反应生成青藤碱衍生物。 所得化合物具有较好的抗炎活性，具有用于关节炎，风湿性关节炎及其抗炎药物的潜力。附图说明
[0023] 图1是用于合成C环氢化青藤碱A环1位引入碳碳双键取代基的青藤碱衍生物的 微反应器装置图。
[0024] 图2是用于合成C环氢化青藤碱A环1位引入异噁唑啉杂环取代基的青藤碱衍生 物的微反应器装置图。
具体实施方式
[0025] 下面结合具体实施例来对本发明做进一步的解释。
[0026] 实施例1 ： 1-碘代C环氢化青藤碱的合成
[0027] 将3mL浓盐酸稀释至60mL，加入4g HgCl2，溶解后，倒入盛有60g Zn的500mL圆 底烧瓶中，摇荡5min后，倾去水，用浓盐酸洗涤一次，得锌汞齐。称取青藤碱盐酸盐16g，溶 解在120mL盐酸溶液中（40mL水+80mL浓盐酸），倒入锌汞齐中，搅拌下回流5h，补加40mL 浓盐酸后，继续回流5h。反应完成后，冷却，用NH3 · H2O调节pH = 9-10，用二氯甲烷萃取， 合并二氯甲烷，用无水硫酸钠干燥，旋转蒸发，得到粗产品，用DCM ： EA ： CH3OH ： NH3 ·H2O =30 ： 30 ： 2 ： 1的展开剂柱层析分离得到C环氢化青藤碱。室温下，将5.74g C环氢 化青藤碱溶于160mL的二氯甲烷中，搅拌下，于5min中内慢慢加入4. 7g的NIS，继续搅拌 5min，加入120mL的Na2S2O3饱和溶液，搅拌5min，分出二氯甲烷层，分别用适量水、饱和食盐 水洗涤，用无水Na2SO4干燥，旋转蒸发，得到黄色固体，产物进一步柱层析纯化，得到1-碘代 C环氢化青藤碱4，产率为84%。
[0028]
[0029] mp ： 142-144 °C ； ESI-MS m/z :414[M+H]+ ；1H 匪 R(300MHz ； CDCl3 ； TMS) δ :7· 24 (1Η, s)，3. 86 (3H, s)，3. 39 (1H, d, J = 12. 2Hz)，3. 29 (1H, br)，2. 94 (1H, dd, J1 = 12. 2Hz, J2 = 2. 9Hz)，2. 79 (2H, m)，2. 63 (3H, s)，2. 36-2. 28 (1H, m)，2. 21-2. 16 (1H, m)，2. 05-1. 96 (1H, m)， 1. 90-1. 85(lH，m)，1. 63-1. 37(4H，m)，1. 25-1. 05(3H，m)ppm ;13C 匪R(75MHz ;CDC13 ;TMS) δ ： 146. 1,144. 9，129. 1,125. 2,119. 6,87. 9,60. 5,56. 4,48. 1,42. 9,41. 5,37. 3,35. 2,34. 9， 32. 5,26. 0,25. 5,22. 3ppm
[0030] 实施例2 :C环氢化青藤碱A环1位引入碳碳双键取代基的青藤碱衍生物6a_6i的合成
[0031]
[0032] 如图1所示：将反应物用混合溶剂DMF/Et3N(5 ： 1 ν/ν)配制成2mL、0. 5M的反应 液：1-碘代 C 环氢化青藤碱 4 (413mg，Immo 1) ；Pd (OAc) 2 (11. 2mg，0. 05mmol) ；PPh3 (26. 2mg， 0. lmmol)；丙烯酸酯（Immol)。将盛有反应液的注射器置于微量注射泵上，设置流速为 8yL/min ；石英毛细管微反应器置于油浴中，油浴温度85°C;反应液流出时，用水立即淬灭。 待反应完成后，旋掉溶剂和水，加入IOmL乙酸乙酯，用饱和食盐水洗涤（3X5mL)，无水硫酸 钠干燥，浓缩，用硅胶柱分离，展开剂为：二氯甲烷/甲醇，得到C环氢化青藤碱1位肉桂酸 酯衍生物6a-6i。
[0033]衍生物 6a ：产率：93% ；mp :230_232°C ； ESI-MS m/z :370[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：8. 04 (1Η, d, J = 15. 6Hz)，6. 96 (1H, s)，6. 23 (1H, d, J = 15. 6Hz)，3. 89 (3H, s)，3. 80 (3H, s)，3. 36 (1H, m)，3. 01-2. 91 (2H, m)，2. 75-2. 67 (1H, m)，2. 55-2. 49 (1H, m)， 2. 39 (3H, s)，2· 10-2. 01 (1H, m)，1. 83-1. 09(10H, m)ppm ；13CNMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ： 167. 7，146. 8，144. 9，142. 3，132. 1,126. 0，123. 1,116. 1，106. 0,57. 6,55. 9,51. 6,47. 5， 45. 6,42. 5,37. 7, 37. 4，36. 5,26. 9,26. 3, 22. 9，22. Oppm.
[0034]衍生物 6b ：产率：91% ；mp :173_175°C ； ESI-MS m/z :384[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：8. 02(1H, d, J = 15. 6Ηζ)，6· 96(1H, s)，6· 23(1H, d, J = 15. 6Hz)， 4. 25 (2H, q, J = 7. 1Hz)，3. 87 (3H, s)，3. 36 (1H, m)，3. 00-2. 92 (2H, m)，2. 75-2. 67 (1H, m)，2. 55-2. 50 (1H, m)，2. 39 (3H, s)，2. 10-2. 01 (1H, m)，1. 84-1. 07 (10H, m)，1. 32 (3H, t, J =7. 1Hz) ppm ； 13C NMR(75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ： 167. 3，146. 9，145. 0，142. 0，131. 9，125. 9， 123. 1,116. 5，106. 0,60. 3,57. 7,55. 9,47. 5,45. 5,42. 5,37. 7,37. 3,36. 5,26. 8,26. 3， 22. 9,22. 0，14. 3ppm.
[0035]衍生物 6c ：产率：92% ；mp ： 142-144 °C ； ESI-MS m/z :412[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：8. 02(1H, d, J = 15. 6Ηζ)，6· 96(1H, s)，6· 23(1H, d, J = 15. 6Hz)， 4. 19 (2H, t, J = 6. 6Hz)，3. 88 (3H, s)，3. 38 (1H, m)，3. 00-2. 90 (2H, m)，2. 74-2. 66 (1H, m)，2. 54-2. 49 (1H, m)，2. 38 (3H, s)，2. 10-2. 00 (1H, m)，1. 82-1. 07 (14H, m)，0. 95 (3H, t, J =7. 3Hz)ppm ； 13C NMR(75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ： 167. 4，146. 9，145. 0，142. 0，131. 9，125. 9， 123. 1,116. 5，106. 0,64. 3,57. 6,55. 9,47. 5,45. 5,42. 4,37. 7,37. 3,36. 5,30. 7,26. 7，26. 3,22. 9,22. 0，19. 1，13. 7ppm.
[0036]衍生物 6d ：产率：89% ；mp :169-171°C ； ESI-MS m/z :412[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：8. 03(1H, d, J = 15. 6Ηζ)，6· 96(1H, s)，6· 22(1H, d, J = 15. 6Hz)，3. 97 (2H, d, J = 6. 6Hz)，3. 88 (3H, s)，3. 36 (1H, m)，2. 99-2. 87 (2H, m)，2. 72-2. 64 (1H, m) ,2. 54-2. 41 (2H, m)，2. 36 (3H, s) ,2. 07-0. 89(11H, m) ,0. 96 (6H, d, J = 6. 6Hz)ppm ； 13C NMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：167. 4，146. 9，145. 0，142. 1，132. 2，126. 1，123. 1，116. 3，106. 0， 70. 5,57. 6,55. 9,47. 5,46. 6,45. 7,42. 5,37. 8,37. 4,36. 6,27. 8,26. 9,26. 4,22. 9,22. 0， 19. Ippm.
[0037]衍生物 6e ：产率：84% ；mp ： 176-178 Ό ； ESI-MS m/z :412[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：7. 95 (1Η, d, J = 15. 6Hz)，6. 94 (1H, s)，6. 15 (1H, d, J = 15. 6Hz)，3. 86 (3H, s)，3. 35 (1H, m)，2. 96 (1H, d, J = 18. 4Hz)，2. 85 (1H, m)，2. 68-2. 60 (1H, m)，2. 48-2. 43 (1H, m) ,2. 34 (3H, s) ,2. 05-0. 90(11H, m)，1. 51 (9H, m)ppm ； 13C NMR(75MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ： 166. 8，146. 7，144. 9，141. 2，132. 1,126. 0，123. 1,118. 1,105. 9,80. 2,57. 5,55. 9,47. 5， 45. 8,42. 6,37. 8, 37. 5,36. 6,28. 2, 26. 9，26. 4，22. 9,21. 9ppm.
[0038]衍生物 6f ：产率：87% ；mp :151_153°C ； ESI-MS m/z :414[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：8. 05 (1Η, d, J = 15. 6Hz)，6. 95 (1H, s)，6. 28 (1H, d，J = 15. 6Hz)，4. 34 (2H, t, J = 4. 5Hz)，3. 85(3H，s)，3. 65(2H，t，J = 4. 5Hz)，3. 40 (3H，s)，3. 34(lH，m)，2. 96(lH，d，J = 18. 4Hz)，2. 87 (1H, m)，2. 71-2. 63 (1H, m)，2. 50-2. 45 (1H, m)，2. 35 (3H, s)，2. 06-1. 06 (11H, m) ppm ；13C NMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：167. 3，147. 1,145. 0，142. 6，132. 3，126. 1,122. 9，115. 8，106. 0,70. 5,63. 3,58. 9,57. 6,55. 9,47. 5,45. 7,42. 5,37. 8,37. 4,36. 6,26. 9,26. 4， 22. 9,22. Oppm.
[0039]衍生物 6g ：产率：90% ；mp ： 148-150 °C ； ESI-MS m/z :440[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：8. 03(1H, d, J = 15. 6Ηζ)，6· 96(1H, s)，6· 21 (1H, d, J = 15. 6Hz)，4. 19 (2H, t, J = 6. 6Hz)，3. 89 (3H, s)，3. 36 (1H, m)，3. 00-2. 89 (2H, m)，2. 73-2. 65 (1H, m) ,2. 54-2. 47 (1H, m)，2. 38 (3H, s)，2. 10-0. 85 (22H, m) ppm ； 13CNMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS)
δ ：167. 4，146. 8，144. 9，142. 1，132. 2，126. 0，123. 1，116. 5，106. 0,64. 5，57. 6，55. 9， 47. 5,45. 8,42. 6,37. 8,37. 5,36. 6,31. 4,28. 6,26. 9,26. 4,25. 6,22. 9,22. 5,22. 0，13. 9， 11. 7ppm.
δ ：167. 4，146. 8，144. 9，142. 1，132. 2，126. 0，123. 1，116. 5，106. 0,64. 5，57. 6，55. 9， 47. 5,45. 8,42. 6,37. 8,37. 5,36. 6,31. 4,28. 6,26. 9,26. 4,25. 6,22. 9,22. 5,22. 0，13. 9， 11. 7ppm.
[0040]衍生物 6h ：产率：86% ；mp :159-161°C ； ESI-MS m/z :440[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：7. 99 (1Η, d, J = 15. 6Hz)，6. 95 (1H, s)，6. 19 (1H, d, J = 15. 6Hz)，4. 85 (1H, m)，3. 86 (3H, s)，3. 35 (1H, m)，2. 98-2. 89 (2H, m)，2. 73-2. 65 (1H, m)，2. 52-2. 47 (1H, m)， 2. 37 (3H, s) ,2. 06-0. 96(21H, m)ppm ；13C NMR(75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ： 166. 8，146. 8，145. 0， 141. 8，132. 0，126. 0，123. 1,117. 0，106. 0,72. 6,57. 6,55. 9,47. 5,45. 7,42. 5,37. 7,37. 4， 36. 6,31. 7,26. 9, 26. 4，25. 3,23. 7,22. 9, 22. Oppm.
[0041]衍生物 6i ：产率：87% ；mp ： 125-127 °C ； ESI-MS m/z :468[Μ_ΗΓ ；1H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：7. 86 (1Η, d, J = 15. 6Hz)，7. 01 (1H, s)，6. 25 (1H, d, J = 15. 6Hz)，4. 10 (2H, d, J = 5. 7Hz)，3. 89 (3H, s)，3. 59 (1H, m)，3. 42-2. 93 (4H, m)，2. 75 (3H, s)，2. 54-0. 85 (26H, m) ppm ；13C NMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：167. 5，146. 8，144. 8，142. 1，132. 1,126. 1,123. 1，116. 5，106. 1,64. 5,57. 6,55. 9,48. 0,47. 5,45. 8,42. 6,38. 8,37. 8,37. 5,36. 6,30. 5,28. 6，26. 9,26. 4,23. 9,22. 9,22. 5,22. 0，13. 9，11. 7ppm.
[0042] 实施例3 =C环氢化青藤碱A环1位引入异噁唑啉杂环取代基的青藤碱衍生物 15a-18a、15b-18b 的合成
[0043]
[0044] 如图2所示：1)将反应物用混合溶剂DMF/Et3N (5 ： 1 ν/ν)配制成2mL、0. 5M 的反应液：1-碘代 C 环氢化青藤碱 3(413mg，lmmol) ;Pd(0Ac)2(11.2mg,0. 05mmol)； PPh3(26. 2mg,0. lmmol)；丙烯酸甲酯（Immol)。将盛有反应液的注射器置于微量注射泵上， 设置流速为8yL/min;石英毛细管微反应器1置于油浴中，油浴温度85°C。2)将不同取代 基的肟分别配制成ImLUM的DMF溶液，盛于注射器中；将N-氯代丁二酰亚胺配制成lmL、 IM的DMF溶液，盛于注射器中；将盛有反应液的两支注射器置于双通道微量注射泵上，设置 流速4yL/min，石英毛细管微反应器2置于空气中，室温。3)微反应器1的反应液与微反 应器2的反应液通过一个T-型混合器，进入微反应器3中进行反应，石英毛细管微反应器 3置于油浴中，油浴温度70°C。反应液流出时，用水立即淬灭。待反应完成后，旋掉溶剂和 水，加入IOmL乙酸乙酯，用饱和食盐水洗涤（3X5mL)，无水硫酸钠干燥，浓缩，并用硅胶柱 将异构体与杂质初步分离，展开剂为：二氯甲烷/甲醇，用核磁鉴定两种异构体的比例后， 再用硅胶柱分离异构体，得到青藤碱衍生物15a-18a、15b-18b。
[0045] 化合物15，产率：87% ；异构体比例：a ： b = 34 ： 66。
[0046]异构体 15a :mp :158_160°C ； ESI-MS m/z :491[M+H]+ ；1H 匪 R(300MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：7. 75-7. 72 (2Η, m)，7. 42-7. 40 (3Η, m)，6. 80 (1Η, s)，6. 14 (1H, d, J = 5. 4Hz)，4. 26 (1H, d, J = 5. 4Hz)，3. 83 (3H, s)，3. 78 (3H, s)，3. 39 (1H, m)，2. 94 (1H, m)，2. 72 (1H, d, J = 18Hz)， 2. 64-2. 56 (2H, m)，2. 45 (3H, s)，2. 08 (1H，m)，1. 85-1. 11 (10H, m) ppm ； 13C NMR (75MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：170. 0，153. 3，145. 0，144. 4，130. 4，128. 8，128. 3，127. 1,127. 0，126. 8，126. 5， 105. 2,84. 5,61. 9,57. 8,56. 1,53. 2,47. 9,45. 6,42. 4,37. 8,37. 5,36. 7,26. 9,26. 4,22. 9， 21. 6ppm
[0047]异构体 15b :mp :157_159°C ； ESI-MS m/z :491[M+H]+ ；1H 匪 R(300MHz ；CDCl3 ； TMS) δ :ppm ；7. 73-7. 70 (2H, m)，7. 44-7. 41 (3H, m)，6. 88 (1H, s)，6. 19 (1H, d, J = 5. 4Hz)， 4. 21 (1H, d, J = 5. 4Hz)，3. 86 (3H, s)，3. 79 (3H, s)，3. 43 (1H, m)，2. 96 (1H, m)，2. 86 (1H, d, J = 18Hz) ,2. 66-2. 58 (2H, m)，2. 47 (3H, s) ,2. 09 (1H, m)，1. 83-1. 16(10H, m)ppm ； 13C NMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：170. 0，153. 2，145. 0，144. 4，130. 5，128. 8，128. 3，127. 1，127. 0， 126. 7，126. 5，105. 3,84. 1,61. 9,57. 8,56. 1,53. 2,47. 9,45. 3,42. 2,30. 0,37. 6,36. 5，26. 9,26. 4,22. 9,21. 5ppm
[0048] 化合物16，产率：91% ；异构体比例：a ： b = 42 ： 58。
[0049]异构体 16a :mp :155-157 "C ； ESI-MS m/z :505[M+H]+ ；1H NMR(300MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：7. 59 (1Η, s)，7. 47 (1H, d, J = 7. 2Ηζ)，7· 28 (2Η, m)，6· 80 (1Η, s)，6· 11 (1Η, d, J =5. 7Ηζ)，4. 26 (1Η, d, J = 5. 7Ηζ)，3. 83 (3Η, s)，3. 78 (3Η, s)，3. 43-3. 38 (1Η, m)，3. 02 (1H, m)， 2. 78 (1H, d, J = 18Hz)，2. 72-2. 63 (2H, m)，2. 51 (3H, s)，2. 45 (3H, s)，2. 22-2. 13 (1H, m)，
1. 93-1. 12(10H, m) ppm ； 13C NMR(75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：170. 1，153. 5，145. 1，144. 4，138. 6， 131. 3，128. 7，128. 2，127. 3，127. 2，126. 5，125. 5，124. 0，105. 4,84. 3,62. 0,58. 1,56. 1， 53. 2,47. 9,45. 2,42. 2,37. 7,37. 1,36. 6,26. 8,26. 3,22. 8,21. 8,21. 3ppm.
1. 93-1. 12(10H, m) ppm ； 13C NMR(75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：170. 1，153. 5，145. 1，144. 4，138. 6， 131. 3，128. 7，128. 2，127. 3，127. 2，126. 5，125. 5，124. 0，105. 4,84. 3,62. 0,58. 1,56. 1， 53. 2,47. 9,45. 2,42. 2,37. 7,37. 1,36. 6,26. 8,26. 3,22. 8,21. 8,21. 3ppm.
[0050]异构体 16b :mp :159-161 "C ； ESI-MS m/z :505[M+H]+ ；1H NMR(300MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：7. 58 (1Η, s)，7. 47 (1H, d, J = 7. 4Hz)，7. 28 (2H, m)，6. 85 (1H, s)，6. 19 (1H, d, J =6. OHz)，4. 23 (1H, d, J = 6. OHz)，3. 84 (3H, s)，3. 78 (3H, s)，3. 44 (1H, m)，3. 18-3. 15 (1H, m)，
2. 95 (1H, d, J = 18Hz)，2. 77-2. 73 (1H, m)，2. 67-2. 57 (1H, m)，2. 56 (3H, s)，2. 38 (3H, s)， 2. 32-2. 23 (1H, m), 2. 05-1. 15 (10H, m) ppm ；13C 匪R(75MHz ;CDC13 ;TMS) δ ： 169. 9，153. 7， 145. 1，144. 6，138. 5，131. 3，128. 6，128. 2，127. 4，126. 9，126. 8，125. 8，124. 0，105. 5,84. 1， 61. 2,58. 0,56. 0,53. 2,47. 6,44. 9,42. 3,37. 7,37. 0,36. 4,26. 9,26. 3,22. 8,21. 5,21. 3ppm
2. 95 (1H, d, J = 18Hz)，2. 77-2. 73 (1H, m)，2. 67-2. 57 (1H, m)，2. 56 (3H, s)，2. 38 (3H, s)， 2. 32-2. 23 (1H, m), 2. 05-1. 15 (10H, m) ppm ；13C 匪R(75MHz ;CDC13 ;TMS) δ ： 169. 9，153. 7， 145. 1，144. 6，138. 5，131. 3，128. 6，128. 2，127. 4，126. 9，126. 8，125. 8，124. 0，105. 5,84. 1， 61. 2,58. 0,56. 0,53. 2,47. 6,44. 9,42. 3,37. 7,37. 0,36. 4,26. 9,26. 3,22. 8,21. 5,21. 3ppm
[0051] 化合物17，产率：94% ；异构体比例：a ： b = 35 ： 65。
[0052]异构体 17a :mp ： 149-151 °C ； ESI-MS m/z :521[M+H]+ ；1H 匪 R(300MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：7. 67 (2Η, d, J = 8. 8Ηζ)，6. 91 (2Η, d, J = 8. 8Ηζ)，6. 81 (1Η, s)，6. 10 (1Η, d, J = 5. 6Ηζ)， 4. 21 (1Η, d, J = 5. 6Ηζ)，3. 83 (3Η, s)，3. 82 (3H, s)，3. 77 (3H, s)，3. 39 (1H, m)，2. 88 (1H, m)， 2. 67 (1H, d, J = 17. 6Hz)，2. 58-2. 50 (2H, m)，2. 41 (3H, s)，2. 02 (1H, m)，1. 79-0. 89 (10H, m)ppm ； 13C NMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：170. 2，161. 2，152. 9，144. 9，144. 3，128. 4，127. 4， 127. 2，126. 1,120. 8,114. 2，105. 1,84. 2,62. 1,57. 6,56. 0,55. 3,53. 1,47. 8,46. 1,42. 5， 38. 0,37. 9,36. 9, 27. 0,26. 5,23. 0,21. 5ppm
[0053]异构体 17b :mp :156_158°C ； ESI-MS m/z :521[M+H]+ ；1H 匪 R(300MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：7. 66 (2Η, d, J = 8. 8Ηζ)，6. 91 (2Η, d, J = 8. 8Ηζ)，6. 84 (1Η, s)，6. 20 (1Η, d, J = 5. 6Ηζ)，4. 17 (1Η, d, J = 5. 6Ηζ)，3. 87 (3Η, s)，3. 83 (3Η, s)，3. 77 (3H, s)，3. 42 (1H, m)，2. 95 (1H, m)， 2. 85 (1H, d, J = 17. 6Hz)，2. 51-2. 46 (2H, m)，2. 40 (3H, s)，2. 07 (1H, m)，1. 80-1. 11 (10H， m)ppm ； 13C NMR (75MHz ；CDCl3 ；TMS) δ ：170. 0，161. 2，153. 0，144. 9，144. 4，128. 5，127. 7， 127. 0，126. 3，120. 8,114. 3，105. 3,84. 0,61. 5,57. 6,56. 1,55. 3,53. 1,47. 5,45. 8,42. 6， 37. 9,37. 7,36. 8, 27. 2,26. 5,23. 0,21. 3ppm
[0054] 青藤碱衍生物18，产率：86% ；异构体比例：a ： b = 39 ： 61。
[0055]异构体 18a :mp ： 153-155 "C ；ESI-MS m/z ：570, 572 [M+H]+ ^H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：7. 63-7. 53 (4Η, m)，6. 77 (1H, s)，6. 15 (1H, d, J = 5. 4Hz)，4. 26 (1H, d, J =5. 4Hz)，3. 83 (3H, s)，3. 78 (3H, s)，3. 39 (1H, m)，3. 01 (1H, m)，2. 77 (1H, d, J = 18. OHz)， 2. 69-2. 62(2H，m)，2. 49(3H，s)，2. 16 (1H，m)，1. 90-1. ll(10H,m)ppm ； 13C NMR(75MHz ；CDCl3 ； TMS) δ :169. 9，152. 7，145. 0，144. 5，132. 0，128. 2，127. 1,126. 5，126. 0，124. 8，123. 1， 105. 0,84. 7,62. 1,57. 6,55. 3,53. 1,47. 8,46. 1,42. 5,38. 0,37. 9,36. 9,27. 0,26. 5,23. 0， 21. 5ppm。[0056]异构体 18b :mp ： 144-146 "C ；ESI-MS m/z ：570, 572 [M+H]+ ^H NMR(300MHz ； CDCl3 ；TMS) δ ：7. 61-7. 51 (4Η, m)，6. 81 (1H, s)，6. 1 (1H, d, J = 6. OHz)，4. 22 (1H, d, J = 6. OHz)，3. 83 (3H, s)，3. 77 (3H, s)，3. 42 (1H, m)，3. 10 (1H, m)，2. 99 (1H, d, J = 18. OHz)， 2. 75-2. 67 (2H, m)，2. 58 (3H, s)，2. 21 (1H, m)，1. 87-1. 14 (10H, m) ppm ； 13C NMR (75MHz ；CDCl3 ； TMS) δ ：170. 0，152. 6，144. 9，144. 5，132. 1,128. 3，127. 2，126. 6，126. 0，124. 8，123. 1， 105. 0,84. 3,62. 2,57. 6,55. 3,53. 1,47. 6,46. 0,42. 7,38. 1,37. 8,36. 9,27. 1,26. 5,23. 1， 21. 6ppm.
[0057] 实施例4 ：青藤碱衍生物抑制LPS诱导巨噬细胞产生NO活性的测定（10 μ Μ)
[0058] 小鼠单核巨噬细胞RAW264. 7用含5% FBS、100U/mL青霉素、100 μ g/mL链霉素的 H-DMEM培养基，在含5% C02的37°C培养箱中培养。实验时，设置LPS对照组、阴性对照组、 阳性药对照组和测试药物组，将细胞计数调整至每毫升4X IO6个细胞，种于96孔板中，每 孔100 μ L细胞悬液。37°C培养箱中培养2小时后，除开阴性对照组，其余分别加入含有刺 激物的培养基100 μ L。用Griess试剂检测细胞上清中的NO含量实验，培养48小时。
[0060] 1)将冷藏保存的Sulfanilamide溶液和NED溶液恢复至室温；
[0061] 2)每孔吸取待测细胞培养上清50 μ L至96孔板中，分别加入50 μ LSulfanilamide 溶液，室温避光10分钟；
[0062] 3)每孔分别加入50 μ L NED溶液，室温避光10分钟；
[0063] 4) 30分钟内，用酶标仪检测540nm处的吸光值0D540。
[0064] 化合物对NO释放的抑制率计算公式为：
[0065] 抑制率（％ ) = [LPS对照组（0D540)-测试药物组（0D540) ] / [LPS对照组 (0D540)-阴性对照组(0D540) ] X 100
[0066] 所得化合物活性测试结果如下：大多数化合物表现了较好的抑制作用，具有潜在 的用于关节炎，风湿性关节炎及其抗炎作用。
[0067]
[0068]
[0069] 表中数据为抑制率，表示为平均值士标准偏差。化合物浓度为10 μ M。
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
注射泵热门专利
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈