本发明涉及通式(I)的酰化的6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯基胺(其中R1 到R5和A到D的定义如下文中所述)的任何形式的立体异构体或其以任何 比例的混合物、或其药学可接受的盐、以及它们用作药剂的用途。

内皮NO合酶(eNOS，NOS-III)属于一组通过氧化精氨酸产生一氧化 氮(NO)的三个同功酶。内皮释放的NO在许多关键性的心血管机理中是至 关重要的。它具有一种血管舒张效应并抑制血小板的聚集、白细胞到内皮 的粘附和内膜平滑肌细胞的增殖。

内皮NO合酶可在转录和转录后的水平上进行生理和病理调节。已经 存在于内皮中的酶可以通过特定的氨基酸的磷酸化作用、以及通过与特定 的蛋白质直接相互作用而进行钙-依赖和钙-无关的活化。这些通常是短暂 的NO释放的刺激物为细胞外精氨酸、17β-雌激素以及通过血流(剪应力) 施加于内皮的腔表面上的机械刺激。后者还导致在转录水平上的eNOS调 节。因此，例如，Sessa等人(Circ.Research74(1994)349-353)得以借助运 动锻炼和伴随此增加的剪应力实现eNOS的显著增加。

在转录后水平上的调节是否与体内相关，往往没有清楚无误的证明。 因此，例如，大剂量的精氨酸给药仅仅会使患有冠心病的病人的内皮-依赖 的血管舒张得到短暂的改善。

另一方面，eNOS蛋白正调节的重要性已被科学地承认了。因此，人 们发现HMG-CoA还原酶抑制剂西伐它汀的保护作用可以部分地归因于 (除脂类降低外)eNOS体内表达的增加(Endres等人，Proc.Natl.Acad. Sci.USA 95(1998)8880-8885)。另外已知在eNOS基因(“eNOS启动子”) 的5′-旁侧区中的单点突变以及与此有关的eNOS基因转录速度的下降与日 本人口中冠状动脉痉挛危险的增加有关(Nakayama等人，Circulation 99 (1999)2864-2870)。

因此现在的假设是，在大量的疾病特别是心血管疾病中eNOS调节的 转录和转录后机理被严重干扰。即使在多种心血管疾病的早期，衬套于血 管内皮中的这种类型的机能障碍也可能导致生理活性的NO的不足，这随 着可度量的疾病生理和形态变异形式的病症的发展而表达出来。因此，在 早期动脉粥样硬化形成中的关键步骤由于内皮NO释放的降低，例如，低 密度脂蛋白的氧化作用、血管内膜中的单核细胞的补充和沉积、和内膜细 胞的增殖而被加速。动脉粥样化形成的后果是在血管的内壁上形成斑块， 其可以反过来通过剪应力的减少而导致内皮NO释放的进一步下降以及病 状的进一步恶化。由于内皮NO也是一种血管扩张剂，它们的降低还经常 导致高血压，后者作为独立的危险因素可导致进一步的器官损坏。

这些病症的治疗方法的目标相应地必须通过增加内皮NO表达来阻断 这一连串事件。可在预先损坏的血管中导致NO合酶体外超量表达的基因 转移实验事实上能够阻碍所述的病症的发展，并因此可作为此方法的正确 性的证明(Varenne等人，Hum.Gene Ther.11(2000)1329)。

在文献中已经公开了某些低分子量化合物，它们(在细胞培养中)可 以导致在eNOS转录和表达上的直接效应。然而，已经提及的抑制素是迄 今为止可能显示出作为一种副作用而使eNOS体内增加的唯一的物质。然 而考虑到这类物质的副作用的已知范围，还不清楚在毒理学上无问题的剂 量下，这种效果能到什么程度。

Liao等人，在WO 99/47153和WO 00/03746要求保护rhoGTPase抑 制因子和试剂的用途，该rhoGTPase抑制因子和试剂可影响肌动蛋白细胞 骨架的机体组成以增加内皮细胞中的eNOS，并用于治疗各种病症例如， 中风或肺动脉高血压。然而，该专利中没有指明实现这一目的的具体方式。

因此，现实中存在对一种能够上调内皮细胞中的eNOS表达的化合物 的强烈的需要。本发明的目的在于提供了显示此能力的化合物。

此目的可通过通式(I)的酰化的6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯基胺的任 何一种立体异构形式或其以任何比例的混合物或其药学可接受的盐来实 现。

在上述式中，

R1和R4各自独立地选自以下基团：

H；未取代和至少单取代的C1-C10-烷基，C2-C10-链烯基和C2-C10-炔基， 其中取代基选自：F、OH、C1-C8-烷氧基、(C1-C8-烷基)硫基、CN、COOR6、 CONR7R8、以及未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基，其中取代基选自： 卤素、拟卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基和CF3；未取代的和至少单取代 的苯基和杂芳基，其中取代基选自：卤素、拟卤素、C1-C3-烷基、C1-C3- 烷氧基和CF3；R9CO；CONR10R11；COOR12；CF3；卤素；拟卤素；NR13R14； OR15；S(O)mR16；SO2NR17R18；和NO2；

R2和R3各自独立地选自以下基团：

H；卤素；拟卤素；未取代和至少单取代的C1-C10-烷基，其取代基选自 OH、苯基和杂芳基；OH；C1-C10-烷氧基；苯氧基；S(O)mR19；CF3；CN； NO2；(C1-C10-烷基)氨基；二(C1-C10烷基)氨基；(C1-C6-烷基)-CONH-；未 取代和至少单取代的苯基-CONH-和苯基-SO2-O-，其取代基选自：卤素、 拟卤素、CH3和甲氧基；(C1-C6-烷基)SO2-O-；未取代和至少单取代的(C1-C6- 烷基)CO，其取代基选自：F、二(C1-C3-烷基)氨基，吡咯烷基和哌啶基； 和苯基-CO，其苯基部分可以带有选自C1-C3-烷基、卤素和甲氧基的一个 或多个取代基；

A选自：CH2、CHOH和CH-(C1-C3-烷基)；

B选自CH2和CH-(C1-C3-烷基)；

C独立地具有与B相同的含义；

D独立地具有与B相同的含义；

R5是Ar基团或Hetar基团，这两种基团都可以是未取代的或带有一个或 多个选自下列的取代基：卤素；拟卤素；NH2；未取代和至少单取代的C1-C10- 烷基，C2-C10-链烯基，C2-C10-炔基，C1-C10-烷氧基，(C1-C10-烷基)氨基， 二(C1-C10-烷基)氨基，其取代基选自：F、OH、C1-C8-烷氧基、芳氧基、(C1-C8- 烷基)硫基、NH2、(C1-C8-烷基)氨基，和二(C1-C8-烷基)氨基；C3-C5-烷二 基；苯基；杂芳基；芳基-或杂芳基取代的C1-C4-烷基；CF3；NO2；OH； 苯氧基；苄氧基；(C1-C10-烷基)COO；S(O)mR20；SH；苯基氨基；苄基氨 基；(C1-C10-烷基)-CONH-；(C1-C10-烷基)-CON(C1-C4-烷基)-；苯基 -CONH-；苯基-CON(C1-C4-烷基)-；杂芳基-CONH-；杂芳基-CON(C1-C4- 烷基)-；(C1-C10-烷基)-CO；苯基-CO；杂芳基-CO；CF3-CO；-OCH2O-； -OCF2O-；-OCH2CH2O-；-CH2CH2O-；COOR21；CONR22R23；CNH(NH2)； SO2NR24R25；R26SO2NH-；R27SO2N(C1-C6-烷基)-；以及包含1到3个选自 N、O和S的杂原子的、饱和的或至少单不饱和的脂肪族单核5-到7-元杂 环，该杂环可以被一个或多个选自下列的取代基取代：卤素、C1-C3-烷基、 C1-C3-烷氧基、OH、氧代和CF3，其中所述杂环可以任选地与所述Ar基 团或所述Hetar基团稠合；其中，存在于所述Ar基团或所述Hetar基团 的所述取代基中的全部芳基、杂芳基、苯基、包含芳基的、包含杂芳基和 包含苯基的基团，都可以被选自下面的一个或多个取代基取代：卤素、拟 卤素、C1-C3-烷基、OH、C1-C3-烷氧基，和CF3；

R6选自下面的基团： H；可被一个或多个选自氟、C1-C8-烷氧基和二(C1-C8-烷基)氨基的取代基 取代的C1-C10-烷基；芳基(C1-C4-烷基)和杂芳基-(C1-C4-烷基)，其可被一个 或多个选自卤素、C1-C4-烷氧基和二(C1-C6-烷基)氨基的取代基取代；

R7选自下面的基团：

H；可被一个或多个选自F、C1-C8-烷氧基、二(C1-C8-烷基)氨基和苯基的 取代基取代的C1-C10-烷基；苯基；茚满基；和杂芳基；且其中每个上述的 芳族基可以是未取代的或带有一个或多个选自卤素、拟卤素、C1-C3-烷基、 C1-C3-烷氧基和CF3的取代基；

R8是H或C1-C10-烷基；

R9选自下面的基团：未取代的或带有一个或多个选自F、(C1-C4)-烷氧基、 二(C1-C3-烷基)氨基的取代基的C1-C10-烷基；以及未取代的和至少单取代 的苯基和杂芳基，其取代基选自C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基、卤素、拟卤 素，和CF3；

R10独立地具有与R7相同的含义；

R11独立地具有与R8相同的含义；

R12独立地具有与R6相同的含义；

R13选自下面的基团：H；C1-C6-烷基；未取代和取代的苯基、苄基、杂芳 基、(C1-C6-烷基)-CO、苯基-CO，和杂芳基-CO，其中取代基选自卤素、 拟卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这 样的取代基；

R14独立地具有与R13相同的含义；

R15选自下面的基团：H；C1-C10-烷基；(C1-C3-烷氧基)-C1-C3-烷基；以及 取代和未取代的苄基、苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素、拟卤素、C1-C3- 烷基、C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这样的取代基；

R16选自：可被一个或多个选自F、OH、C1-C8-烷氧基、芳氧基、(C1-C8- 烷基)硫基、(C1-C8-烷基)氨基和二(C1-C8-烷基)氨基的取代基取代的C1-C10- 烷基；CF3；以及取代和未取代的苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素、 拟卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这 样的取代基；

R17独立地具有与R7相同的含义；

R18独立地具有与R8相同的含义；

R19独立地具有与R16相同的含义；

R20独立地具有与R16相同的含义；

R21独立地具有与R6相同的含义；

R22独立地具有与R7相同的含义；

R23独立地具有与R8相同的含义；

R24独立地具有与R7相同的含义；

R25独立地具有与R8相同的含义；

R26独立地具有与R16相同的含义；

R27独立地具有与R16相同的含义；

杂芳基是包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5到10-元芳香、单- 或双环杂环；

Hetar基团是包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5到10-元芳香、 单-或双环杂环；

芳基是苯基、萘-1-基或萘-2-基；

基团Ar是苯基、萘-1-基或萘-2-基；

m为0，1或2。

如果在式(I)化合物中，基团或取代基例如芳基、杂芳基、烷基等等， 可以出现若干次，那么它们全部彼此独立地具有所指出的含义且可以因此 在具体的情况下是彼此相同的或不同的。一个例子是二(C1-C10-烷基)氨基， 其中烷基取代基可以是相同或不同的。

烷基，链烯基和炔基残基可以是直链或支化的，脂肪族的或环状的。 这也适用于当它们为其它基团的一部分的情况，例如在烷氧基，烷氧羰基 或氨基中，或当它们被取代的时候。

烷基的例子有甲基，乙基，丙基，丁基，戊基，己基，庚基，辛基， 壬基，癸基，这些残基的正异构体，异丙基，异丁基，异戊基，仲丁基， 叔丁基，新戊基，3，3-二甲基丁基。这里术语烷基还清楚地包括含有至少三 个碳原子的环烷基残基和环烷基-烷基残基(被环烷基取代的烷基)。这样的 环烷基残基的例子是环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基和环辛基。 所有环烷基基团可以被一个或多个相同的或不同的(C1-C4)-烷基残基取代， 特别是被甲基取代。取代的环烷基残基的例子是4-甲基环己基，4-叔丁基 环己基或2，3-二甲基环戊基。此外，除非另有说明，这里的术语烷基还包 括未取代的烷基以及被一个或多个，例如一个、两个、三个或四个相同或 不同的残基，例如芳基基团，取代的烷基。在取代的烷基残基，例如芳烷 基、羟烷基(例如-(C1-C3)-烷基-OH)或烷氧基烷基(例如-(C1-C3)-烷基 -O-(C1-C4)-烷基)中，取代基可以出现在任何需要的位置上。

烯基和炔基基团的例子是乙烯基残基，1-丙烯基残基，2-丙烯基残基(烯 丙基残基)，2-丁烯基残基，2-甲基-2-丙烯基残基，3-甲基-2-丁烯基残基， 乙炔基残基，2-丙炔基残基(炔丙基残基)，2-丁炔基残基或3-丁炔基残基。 这里术语烯基还清楚地包括含有至少三个碳原子的环烯基残基和环烯基- 烷基残基(被环烯基取代的烷基)。环烯基残基的例子是环戊烯基，环己烯 基，环庚烯基和环辛烯基。所有环烯基可以被一个或多个相同的或不同的 (C1-C4)-烷基残基取代，特别是被甲基取代。此外，除非另有说明，这里的 术语烯基和炔基还包括未取代的烯基和炔基残基以及被一个或多个，例如 一个、两个、三个或四个相同或不同的残基，例如芳基基团，取代的烯基 和炔基。在被取代的烯基和炔基残基中，例如芳基烯基、羟基烯基例如 -(C2-C3)-烯基-OH或烷氧基烯基例如-(C1-C3-烷基)-O-(C2-C4-烯基)-中，取 代基可以出现在任何需要的位置上。

C3-C5-烷二基的例子是-CH2CH2CH2-，-CH2-CH(CH3)-， -CH2CH2CH2CH2-和-CH2CH2CH2CH2CH2-基团。

如果不是另有说明，以上所述苯基残基、萘基和茚满基残基和杂环的 残基(包括杂芳基残基)可以是未取代或带有一个或多个，例如一个、两个、 三个或四个，上述定义中所指出的、可以出现在任何需要的位置上的取代 基。如果在式(I)的化合物中存在硝基取代基，优选总计在分子中仅仅存在 至多两个硝基。在单取代的苯基残基中，取代基可以在2-位，3-位或4-位， 在二取代的苯基残基中，取代基可以在2，3-位，2，4-位，2，5-位，2，6-位，3，4- 位或3，5-位。在三取代的苯基残基中取代基可以在2，3，4-位，2，3，5-位，2，3，6- 位，2，4，5-位，2，4，6-位或3，4，5-位。在四取代的苯基残基中，取代基可以在 2，3，4，5-位，2，3，4，6-位，或2，3，5，6-位。甲苯基(＝甲基苯基)可以是2-甲苯基， 3-甲苯基或4-甲苯基。萘基可以是1-萘基或2-萘基。在单取代的1-萘基残 基中取代基可以在2-位，3-位，4-位，5-位，6-位，7-位或8-位，在单取代 的2-萘基残基中取代基可以在1-位，3-位，4-位，5-位，6-位，7-位或8- 位。在较高取代的萘基基团中，例如在带有两或三个取代基的1-萘基基团 或2-萘基基团中，取代基还可以位于所有可能的位置。茚满基残基包括茚 满-1-基残基和茚满-2-基残基，它们可以是未取代的或带有一个或多个所指 出的取代基的。在茚满基残基被取代的情况下，取代基可以在任何可能的 位置。

与一价残基有关的以上定义及以下的定义对于二价残基亚苯基，亚萘 基和亚杂芳基也同样适用。二价残基可以与相邻的基团通过任何环碳原子 相连接。在亚苯基残基的情况下，可以在1，2-位(邻亚苯基)，1，3-位(间亚苯 基)或1，4-位(对亚苯基)相连接。在亚萘基残基的情况下，自由键可以在1，2- 位(＝1，2-亚萘基或1，2-萘二基)或在1，3-位，1，4-位，1，5-位，1，6-位，1，7-位， 1，8-位，2，3-位，2，6-位或2，7-位。在含有一个杂原子的5-元环芳族化合物， 例如，噻吩或呋喃的情况下，两个自由键可以在2，3-位，2，4-位，2，5-位或 3，4-位。衍生自吡啶的二价残基可以2，3-，2，4-，2，5-，2，6-，3，4-或3，5-吡啶 二基残基。在不对称二价残基的情况下，本发明包括全部位置异构体，即， 在例如2，3-吡啶二基残基的情况下，它包括其中一个相邻的基团存在于2- 位而另一个相邻的基团存在于3-位的化合物以及其中一个相邻的基团存在 于3-位而另一个相邻的基团存在于2-位的化合物。

除非另有说明，杂芳基残基，亚杂芳基残基，杂环基残基和由两个基 团与一个氮键合形成的环优选衍生自含有相同或不同的一个、两个、三个 或四个杂原子的杂环；更优选它们衍生自含有相同或不同的一个、两个或 三个，特别是一个或两个杂原子的杂环。除非另有说明，杂环可以是单环 的或多环的，例如单环、双环或三环的。优选它们是单环或双环的。环优 选5-元环，6-元环或7-元环。可以衍生出式(I)化合物中所出现的残基的单 环和双环杂环体系的例子是吡咯，呋喃，噻吩，咪唑，吡唑，1，2，3-三唑， 1，2，4-三唑，1，3-二氧杂环戊烯，1，3-噁唑(＝噁唑)，1，2-噁唑(＝异噁唑)， 1，3-噻唑(＝噻唑)，1，2-噻唑(＝异噻唑)，四唑，吡啶，哒嗪，嘧啶，吡嗪， 吡喃，噻喃，1，4-二噁烯，1，2-噁嗪，1，3-噁嗪，1，4-噁嗪，1，2-噻嗪，1，3- 噻嗪，1，4-噻嗪，1，2，3-三嗪，1，2，4-三嗪，1，3，5-三嗪，1，2，4，5-四嗪，吖庚 因，1，2-二氮杂，1，3-二氮杂，1，4-二氮杂，1，3-氧杂，1，3-硫杂， 吲哚，苯并噻吩，苯并呋喃，苯并噻唑，苯并咪唑，苯并二氧杂环戊二烯， 喹啉，异喹啉，1，2-二氮杂萘，喹唑啉，喹喔啉，酞嗪，噻吩并噻吩，1，8- 萘啶及其它萘啶，蝶啶，或吩噻嗪，它们每个在饱和形式(全氢化形式)或 在部分不饱和形式(例如在二氢形式或四氢形式)或在最大限度不饱和的形 式下，其相应的形式是已知的和稳定的。此处使用的术语“芳基”和术语 “杂芳基”包括其中两个环都是芳香族的双环残基以及其中仅仅一个环是 芳香族的双环残基。独立地，这也分别适用于术语“基团Ar”或术语“基 团Hetar”。适宜的杂环包括，例如，饱和杂环吡咯烷，哌啶，哌嗪，吗啉 和硫吗啉。杂环基团的饱和度已在它们的各自的定义中指明了。不饱和杂 环可以在环系内含有例如，一个，两个或三个双键。5-元环和6-元环尤其 也可以是芳香族的。

衍生自这些杂环的取代基可以通过任何适宜的碳原子相连接。衍生自 氮杂环的残基可以在环中的氮原子上带有一个氢原子或一个取代基，其例 子包括吡咯，咪唑，吡咯烷，吗啉，哌嗪残基，等等。氮杂环残基还可以 通过一个环氮原子相连接，特别是当相应的杂环残基是与一个碳原子键合 的情况下。例如，噻吩基残基可以以2-噻吩基残基或3-噻吩基残基存在； 呋喃基残基以2-呋喃基残基或3-呋喃基残基存在；吡啶基残基以2-吡啶基 残基，3-吡啶基残基或4-吡啶基残基存在；哌啶基残基以1-哌啶基残基(＝ 哌啶子基残基)，2-哌啶基残基，3-哌啶基残基或4-哌啶基残基存在；(硫基) 吗啉基残基以2-(硫基)吗啉基残基，3-(硫基)吗啉基残基或4-(硫基)吗啉基 残基(＝硫吗啉代残基)存在。衍生自1，3-噻唑或咪唑的、通过一个碳原子相 连接的残基可以是通过其2-位，4-位或5-位相连接的。

在杂环基团被取代的情况下，它可以带有一个或多个，例如一个、两 个、三个或四个相同或不同的取代基。杂环中的取代基可以存在于任何需 要的位置上，例如在2-噻吩基残基或2-呋喃基残基中存在于3-位和/或 4-位和/或5-位；在3-噻吩基残基或3-呋喃基残基中存在于2-位和/或4-位 和/或5-位；在2-吡啶基残基中存在于3-位和/或4-位和/或5-位和/或6-位； 在3-吡啶基残基中存在于2-位和/或4-位和/或5-位和/或6-位；在4-吡啶基 残基中存在于2-位和/或3-位和/或5-位和/或6-位。适宜的氮杂环还可以以 N-氧化物存在或以含有衍生自药学可接受的酸的反离子的季盐形式存在。 例如吡啶基残基可以以吡啶-N-氧化物形式存在。

卤素是氟，氯，溴或碘，优选氟或氯。

拟卤素的例子是CN和N3，优选的拟卤素是CN。

本发明包括式(I)化合物的所有立体异构形式。存在于式(I)化合物中的 不对称中心各自独立地具有S构型或R构型。本发明包括所有可能的对映 体和非对映体，和以所有比例的两个或多个立体异构体的混合物，例如对 映体和/或非对映体的混合物。因此，根据本发明的可以以对映体形式存在 的化合物可以以纯的对映体形式存在，包括左旋和右旋的对映体，以外消 旋物的形式和以两种对映体以所有比例的混合物的形式存在。对于顺式/ 反式异构体，本发明包括顺式和反式以及这些形式的各种比例的混合物的 形式。所有这些形式都是本发明的目的。如果需要的话，单独的立体异构 体的制备可以通过常规方法分离混合物，例如色谱分离法或结晶，通过使 用立体化学均一的起始原料进行合成或通过立体选择性合成来进行。任选 地在进行立体异构体的分离之前可以进行衍生化。立体异构体混合物的分 离可以在合成过程中式(I)化合物的阶段进行，或在中间体的阶段进行。本 发明包括式(I)化合物的所有互变异构形式。例如，除(S)-2-甲基-3H-苯并咪 唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺以外，本发明还包含其互 变异构形式(S)-2-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺。

在根据式(I)的化合物中含有一个或多个酸性或碱性基团的情况下，本 发明还包含它们相应的药学或毒理学可接受的盐，特别是它们的可药用的 盐。因此，含有酸性团的式(I)化合物可以存在这些基团，并且根据本发明 可以以例如碱金属盐、碱土金属盐或铵盐形式使用。这样的盐的更准确的 例子包括钠盐，钾盐，钙盐，镁盐或与氨或有机胺例如，乙胺，乙醇胺， 三乙醇胺或氨基酸成的盐。含有一个或多个碱性基团，即可以被质子化的 基团的式(I)化合物，根据本发明可以以其与无机酸或有机酸的加成盐的形 式存在并使用。适宜的酸的例子包括氯化氢，溴化氢，磷酸，硫酸，硝酸， 甲磺酸，对甲苯磺酸，萘二磺酸，草酸，乙酸，酒石酸，乳酸，水杨酸， 苯甲酸，甲酸，丙酸，特戊酸，二乙基乙酸，丙二酸，琥珀酸，庚二酸， 富马酸，马来酸，苹果酸，氨基磺酸，苯基丙酸，葡糖酸，抗坏血酸，异 烟酸，柠檬酸，己二酸，及其它本领域技术人员已知的酸。如果式(I)化合 物在分子中同时含有酸性和碱性原子团，除以上提及的盐形式外，本发明 还包括内盐或内铵盐(两性离子)形式。根据式(I)的相应的盐可以通过本领 域技术人员已知的常规方法得到，例如通过将其与有机或无机酸或碱在溶 剂或分散剂中接触，或通过与其它盐的阴离子交换或阳离子交换来实现。 本发明还包括由于具有低生理可配伍性而不适合于直接用于药物、但可用 于，例如作为化学反应的中间体使用或用于药学可接受的盐的制备的所有 式(I)化合物的盐。

此外本发明包括式(I)化合物的所有溶剂化物，例如水合物或与醇的加 合物，式(II)化合物的活性代谢物，以及式(I)化合物的衍生物和前体药物， 其中含有生理学可允许的和可裂去的基团，例如酯，酰胺和其中式(I)中所 描述的N-H基团被N-烷基例如N-甲基，或N-酰基基团，例如N-乙酰基或 N-精氨酰基替代的化合物，包括在N-酰基基团中的官能团上形成的药学可 接受的盐。

优选的式(I)化合物是那些其中的一个或多个残基具有以下所给出的 含义的化合物，其中所有优选的取代基定义的结合构成本发明的主题。本 发明的所有优选的化合物还包括所有的立体异构的形式和它们以任何比例 的混合物，和它们的药学可接受的盐。

在本发明的优选实施方案中，式(I)的取代基R1到R5，A，B，C和D 和芳基和杂芳基基团相互独立地具有下面的含义。因此，一个或多个取代 基R1到R5，A，B，C和D可以具有以下的优选的含义、较优选的含义、 更优选的含义、最优选的含义、或特别优选的含义。

R1优选选自：H；C1-C4-烷基；C1-C4-烷氧基；CF3；卤素；拟卤素； (C1-C4-烷基)-S(O)m-；和未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基，其中取 代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3，其中杂芳基选 自包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5-到6-元杂环；R1更优选H、 卤素或C1-C4-烷基。

R2优选选自：H；卤素；拟卤素；和C1-C3-烷基；R2更优选是H。

R3优选选自：H；卤素；拟卤素；和C1-C3-烷基；R3更优选是H。

R4优选选自：H；C1-C4-烷基；C1-C4-烷氧基；CF3；卤素；拟卤素； (C1-C4-烷基)-S(O)m-；和未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基，其中取 代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3，其中杂芳基选 自包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5-到6-元杂环；R4更优选H， 卤素或C1-C4-烷基；R4最优选H。

R1到R4特别地各自为H。

A优选选自CH2和CHOH；A特别是CH2。

B，C和D优选相互独立地选自CH2和CH-CH3；更优选B和C各自 是CH2同时D是CH2或CH-CH3；最优选B，C和D是CH2。

R5优选选自：Ar基团或Hetar基团，这两种基团都可以是未取代的 或带有一个或多个选自下列的取代基的：卤素；CN；NH2；未取代和至少 单取代的C1-C8-烷基，C2-C8-烯基，C2-C8-炔基，C1-C8-烷氧基，(C1-C8- 烷基)氨基，二(C1-C8-烷基)氨基，其中取代基选自氟，C1-C6-烷氧基，苯氧 基，(C1-C6-烷基)硫基，NH2，(C1-C6-烷基)氨基，和二(C1-C6-烷基)氨基； C3-C5-烷二基；苯基；杂芳基；苯基-或杂芳基-取代的C1-C2-烷基；CF3； OH；苯氧基；苄氧基；(C1-C6-烷基)COO；S(O)m(C1-C6)-烷基；S(O)m-苯 基；S(O)m杂芳基；SH；苯基氨基；苄基氨基；(C1-C6-烷基)-CONH-；(C1-C6- 烷基)-CON(C1-C4-烷基)-；苯基-CONH-；苯基-CON(C1-C4-烷基)-；杂芳 基-CONH-；杂芳基-CON(C1-C4-烷基)-；(C1-C6-烷基)-CO；苯基-CO；杂 芳基-CO；CF3-CO；-OCH2O-；-OCF2O-；-OCH2CH2O-；-CH2CH2O-； COO(C1-C6-烷基)；-CONH2；-CONH(C1-C6-烷基)；-CON(二(C1-C6-烷基))； CNH(NH2)；-SO2NH2；-SO2NH(C1-C6-烷基)；-SO2NH(苯基)；-SO2N(二 (C1-C6-烷基))；(C1-C6-烷基)SO2NH-；(C1-C6-烷基)SO2N(C1-C6-烷基)-；苯 基-SO2NH-；苯基-SO2N(C1-C6-烷基)-；杂芳基-SO2NH-；杂芳基 -SO2N(C1-C6-烷基)-；以及包含1到3个选自N、O和S的杂原子的、饱和 的或至少单不饱和的脂肪族单核5-到7-元杂环，该杂环可以被一个或多个 选自下列的取代基取代：卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，OH，氧代和 CF3，其中所述杂环可以任选地与所述Ar基团或所述Hetar基团稠合；其 中，任选存在于所述Ar基团或所述Hetar基团的所述取代基中的所有杂 芳基、苯基、包含杂芳基和包含苯基的基团，都可以被选自下面的一个或 多个取代基取代：卤素、拟卤素、C1-C3-烷基、OH、C1-C3-烷氧基，和CF3。

R5更优选选自：苯基或Hetar基团，这两种基团都可以是未取代的或 带有一个或多个选自下列的取代基：卤素；CN；NH2；未取代和至少单取 代的C1-C6-烷基，C2-C6-烯基，C2-C6-炔基，C1-C3-烷氧基，(C1-C4-烷基) 氨基，二(C1-C4-烷基)氨基，其中取代基选自氟，C1-C3-烷氧基，(C1-C3- 烷基)硫基，和NH2；C3-C5-烷二基；苯基；杂芳基；苯基-或杂芳基-取代 的C1-C2-烷基；CF3；OH；(C1-C4-烷基)COO；S(O)m(C1-C4)-烷基；(C1-C4- 烷基)-CONH-；(C1-C4-烷基)-CON(C1-C4-烷基)-；(C1-C4-烷基)-CO；苯基 -CO；杂芳基-CO；CF3-CO；-OCH2O-；-OCF2O-；-OCH2CH2O-； -CH2CH2O-；COO(C1-C6-烷基)；-CONH2；-CONH(C1-C4-烷基)；-CON(二 (C1-C4-烷基))；CNH(NH2)；-SO2NH2；-SO2NH(C1-C4-烷基)；-SO2NH(苯 基)；-SO2N(二(C1-C4-烷基))；(C1-C4-烷基)SO2NH-；(C1-C4-烷 基)SO2N(C1-C4-烷基)-；以及包含1到3个选自N、O和S的杂原子的、饱 和的或至少单不饱和的脂肪族单核5-到7-元杂环，该杂环可以被一个或多 个选自下列的取代基取代：卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，OH，氧代 和CF3，其中所述杂环可以任选地与所述苯基或所述Hetar基团稠合；其 中，任选存在于所述苯基或所述Hetar基团的所述取代基中的所有杂芳基、 苯基、包含杂芳基和包含苯基的基团，都可以被选自下面的一个或多个取 代基取代：卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，OH，C1-C3-烷氧基，和CF3。

R5更优选选自：苯基或Hetar基团，这两种基团都可以是未取代的或 带有一个或多个选自下列的取代基的：F；Cl；Br；C1-C3-烷基；C1-C3- 烷氧基甲基；2-氨基-3，3，3-三氟丙基-；CF3；C3-C5-烷二基；苯基；杂芳基； 苄基；杂芳基-甲基；OH；C1-C3-烷氧基；苯氧基；三氟甲氧基；2，2，2-三 氟乙氧基；(C1-C4-烷基)COO；(C1-C3-烷基)硫基；苯基硫基；(C1-C3-烷基) 磺酰；苯磺酰；NH2；(C1-C4-烷基)氨基；二(C1-C4-烷基)氨基；(C1-C3-烷 基)-CONH-；(C1-C3-烷基)-SO2NH-；(C1-C3-烷基)-CO；苯基-CO；-OCH2O-； -OCF2O-；-CH2CH2O-；COO(C1-C4-烷基)；-CONH2；-CONH(C1-C4-烷 基)；-CON(二(C1-C4-烷基))；CN；-SO2NH2；-SO2NH(C1-C4-烷基)；-SO2N(二 (C1-C4-烷基))；吡咯烷基；哌啶基；吗啉基；和硫吗啉基；其中，任选存 在于所述苯基或所述Hetar基团的所述取代基中的所有杂芳基、苯基、包 含杂芳基和包含苯基的基团，都可以被选自下面的一个或多个取代基取代： 卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，OH，C1-C3-烷氧基，和CF3；

R5最优选选自：4-氟苯基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-(C1-C3-烷氧基)- 苯基，4-三氟甲氧基苯基，2-溴-4-氟苯基，2-氯-4-氟苯基，3，4-二甲基苯基， 2，4-二甲基苯基，4-氯-2-甲基苯基，2-羟基-4-甲基苯基，2-羟基-4-乙氧苯基， 2甲氧基-4-甲基苯基，4-苯氧基苯基，3-氟-4-甲基苯基，苯并[1，3]二氧杂 环戊烯-5-基，2，2-二氟-苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基，2，3-二氢苯并呋喃-5- 基，1-(4-氯-苯基)-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基，1-(4-氟-苯基)-3，5-二甲基-1H- 吡唑-4-基，1H-苯并三唑-5-基，1H-吲哚-4-基，1H-吲哚-6-基，1-异丙基-2- 三氟甲基-1H-苯并咪唑-5-基，1-甲基-3-氧代-1，2，3，4-四氢-喹喔啉-6-基，1- 苯基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-基，2-(2-羟基-吡啶-4-基)-1H-苯并咪唑-5-基， 2-(4-氰基苯基)-1H-苯并咪唑-5-基，2，4-二甲基-噁唑-5-基，2，4-二甲基吡啶 -5-基，2，4-二甲基-噻唑-5-基，2，5-二甲基-1H-吡咯-3-基，2，5-二甲基-1-苯 基-1H-吡咯-3-基，2，5-二甲基-1-吡啶-4-基甲基-1H-吡咯基，2，5-二甲基-2H- 吡唑-3-基，2，6-二氯-吡啶-3-基，2，6-二甲氧基-吡啶-3-基，2，6-二甲基-吡 啶-3-基，2-氨基-4，6-二甲基-吡啶-3-基，2-氨基-6-氯-吡啶-3-基，2-氨基-吡 啶-3-基，2-氯-6-甲基-吡啶-3-基，2-氯-吡啶-4-基，2-环丙基-4-甲基-噻唑-5- 基，2-二甲基氨基-4-甲基-噻唑-5-基，2-二甲基氨基-吡啶-4-基，2-乙基-5- 甲基-2H-吡唑-3-基，2-羟基-6-甲基-吡啶-3-基，2-甲基-1H-苯并咪唑-5-基， 2-甲基-3H-苯并咪唑-5-基，2-甲基-吡啶-3-基，2-甲基-6-三氟甲基-吡啶-3- 基，2-甲基-噻唑-5-基，2-吗啉-4-基-吡啶-4-基，2-吗啉-4-基-嘧啶-5-基，2- 吡咯烷-1-基-吡啶-4-基，3，5-二甲基-1H-吡唑-4-基，3-氨基-5，6-二甲基吡嗪 -2-基，3-氨基-5-甲基-吡嗪-2-基，3-氨基-吡嗪-2-基，3-二甲基氨基-4-甲基- 苯基，3-二甲基氨基-苯基，3H-苯并咪唑-5-基，1H-苯并咪唑-5-基，3-甲磺 酰基氨基-2-甲基-苯基，3-甲磺酰基氨基-苯基，3-甲基-异噁唑-4-基，3-吗 啉-4-基-苯基，3-哌啶-1-基-苯基，3-吡咯烷-1-基-苯基，4-(2，2，2-三氟-乙氧 基)-苯基，4，6-二甲基-吡啶-3-基，4-氨基-2-乙基硫烷基-嘧啶-5-基，4-氨基 -2-甲基-嘧啶-5-基，4-氯-3-甲磺酰基氨基-苯基，4-氯-3-氨磺酰基-苯基，4- 甲基-3-甲基氨基-苯基，4-甲基-噻唑-5-基，吡啶-2-基，5，6，7，8-四氢-喹啉-3- 基，5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-基，5-甲基磺酰基-2-甲基-苯基，5-甲基-1- 苯基-1H-吡唑-4-基，5-甲基-异噁唑-3-基，5-甲基-吡啶-3-基，5-甲基-吡嗪 -2-基，6-氯-吡啶-3-基，6-氰基-吡啶-3-基，6-二甲基氨基-吡啶-3-基，6-乙 炔基-吡啶-3-基，6-甲氧基甲基-吡啶-3-基，6-甲氧基-吡啶-3-基，6-甲基-2- 甲基氨基-吡啶-3-基，6-甲基氨基-吡嗪-2-基，6-甲基-吡啶-3-基，6-吗啉-4- 基-吡啶-3-基，6-吡咯烷-1-基-吡啶-3-基，咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基，6-三氟 甲基-吡啶-3-基，和嘧啶-4-基。

杂芳基优选是包含一个、两个或三个选自N、O和S的杂原子的5到 10-元、芳香、单-或双环杂环；杂芳基最优选选自：呋喃基，吡咯基，噻 吩基，噻唑基，异噻唑基，噁唑基，异噁唑基，吡唑基，咪唑基，哒嗪基， 吡嗪基，吡啶基，嘧啶基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，苯并噁唑基，喹啉 基，异喹啉基，喹喔啉基，喹唑啉基，吲哚基，苯并呋喃基，苯并噻吩基， 和吲唑基。

Hetar基团优选是包含一个、两个或三个选自N、O和S的杂原子的 5到10-元、芳香、单-或双环杂环；Hetar基团最优选选自：呋喃基，吡咯 基，噻吩基，噻唑基，异噻唑基，噁唑基，异噁唑基，吡唑基，咪唑基， 哒嗪基，吡嗪基，吡啶基，嘧啶基，苯并咪唑基，苯并噻唑基，苯并噁唑 基，喹啉基，异喹啉基，喹喔啉基，喹唑啉基，吲哚基，苯并呋喃基，苯 并噻吩基，和吲唑基。

芳基优选苯基。

m优选为0或2。

其中某些或所有上述基团具有以上定义的优选的含义、较优选的含义、 更优选的含义、最优选的含义、或特别优选的含义的式(I)的化合物也是本 发明的目的。

根据通式(I)的最优选的化合物、以它们的任何形式的立体异构体或它 们以任何比例的混合物或其药学可接受的盐选自：2，5-二甲基-1-吡啶-4-基 甲基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺，5-甲基-1- 苯基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺，1H-吲哚-6- 羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺，5-甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9- 四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺，2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢 -5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺，2-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H- 苯并环庚烯-6-基)-酰胺，2-氨基-6-氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺，N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-4-(2，2，2-三氟-乙氧基)-苯甲 酰胺，6-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺，6-甲基 -2-甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺，3-氨基-5，6-二甲 基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)酰胺，4-氟-N-(6，7，8，9-四 氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺，3-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯-6-基)-苯甲酰胺，2，4-二甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺，2-氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺，2，6- 二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺，3-氨基-5-甲基-吡嗪 -2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺，和3-氨基-吡嗪-2-羧酸 (6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺。

在本发明的另一个实施方案中，根据式(I)的取代基R1到R5，A，B， C和D和芳基和杂芳基基团具有下面的含义。

R1和R4各自独立地选自以下基团：

H；未取代和至少单取代的C1-C10-烷基，C2-C10-链烯基和C2-C10-炔 基，其中取代基选自F，OH，C1-C6-烷氧基，(C1-C6-烷基)硫基，CN，COOR6， CONR7R8，未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素， 拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3；未取代的和至少单取代的苯基 和杂芳基，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和 CF3；R9CO；CONR10R11；COOR12；CF3；卤素；拟卤素；NR13R14；OR15； S(O)mR16；SO2NR17R18；和NO2；

R2和R3各自独立地选自以下基团：

H；卤素；拟卤素；未取代和至少单取代的C1-C6-烷基，其取代基选 自OH，苯基，和杂芳基；OH；C1-C6-烷氧基；苯氧基；S(O)mR19；CF3； CN；NO2；(C1-C6-烷基)氨基；二(C1-C6-烷基)氨基；(C1-C6-烷基)-CONH-； 未取代和至少单取代的苯基-CONH和苯基-SO2-O-，其中取代基选自卤素， 拟卤素，CH3和甲氧基；(C1-C6-烷基)SO2-O-；未取代和至少单取代的(C1-C6- 烷基)CO，其中取代基选自F，二(C1-C3-烷基)氨基，吡咯烷基和哌啶基； 以及苯基-CO，其苯基部分可以被选自C1-C3-烷基，卤素和甲氧基的一个 或多个取代基取代；

A选自CH2，CHOH和CH-(C1-C3-烷基)；

B选自CH2和CH-(C1-C3-烷基)；

C独立地具有与B相同的含义；

D独立地具有与B相同的含义；

R5是未取代的或带有一个或多个选自下列的取代基的芳基或杂芳基 基团：卤素；拟卤素；C1-C10-烷基；C3-C5-烷二基；苯基；苯基取代的C1-C4- 烷基；CF3；OH；C1-C10-烷氧基；苯氧基；苄氧基；CF3O；(C1-C10-烷基)COO； S(O)mR20；(C1-C10-烷基)氨基；二(C1-C10-烷基)氨基；(C1-C10-烷基)-CONH-； (C1-C10-烷基)-CON(C1-C3-烷基)-；(C1-C10-烷基)-CO；CF3-CO；-OCH2O-； -OCF2O-；-OCH2CH2O-；-CH2CH2O-；苯基氨基；苯基-CO；COOR21； CONR22R23；SO2NR24R25；以及包含1到3个选自N、O和S的杂原子的、 芳香或脂肪族单核5-到7-元杂环，其可被选自卤素；拟卤素；C1-C3-烷基； C1-C3-烷氧基和CF3的取代基取代；其中，存在于所述芳基或杂芳基基团 的所述取代基中的所有苯基和包含苯基的基团，都可以被选自下面的一个 或多个取代基取代：卤素、拟卤素、C1-C3-烷基、C1-C3-烷氧基，和CF3；

R6是H，C1-C6-烷基或苄基；

R7选自：

H；可以被苯基-取代的C1-C6-烷基；苯基；茚满基；和杂芳基；且其 中每个上述的芳香基都可以是未取代的或带有一个或多个选自下列基团的 取代基的：卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3；

R8是H或C1-C6-烷基；

R9是C1-C6-烷基，其可以是未取代的或带有一个或多个选自下列基团 的取代基的：F；二(C1-C3-烷基)氨基；和未取代和至少单取代的苯基和杂 芳基，其中取代基选自C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，卤素，拟卤素，和CF3；

R10独立地具有与R7相同的含义；

R11独立地具有与R8相同的含义；

R12独立地具有与R6相同的含义；

R13选自：H；C1-C6-烷基；和未取代和取代的苯基，苄基，杂芳基， 苯基-CO，和杂芳基-CO，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基， C1-C3-烷氧基，和CF3，且其中可以存在一个或多个此类取代基；

R14是H或C1-C6-烷基；

R15选自：H；C1-C6-烷基；和取代和未取代的苄基，苯基和杂芳基， 其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，和CF3，且其 中可以存在一个或多个此类取代基；

R16选自：C1-C6-烷基；CF3；和取代和未取代的苯基和杂芳基，其中 取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，和CF3，且其中可 以存在一个或多个此类取代基；

R17独立地具有与R7相同的含义；

R18独立地具有与R8相同的含义；

R19独立地具有与R16相同的含义；

R20独立地具有与R16相同的含义；

R21独立地具有与R6相同的含义；

R22独立地具有与R7相同的含义；

R23独立地具有与R8相同的含义；

R24独立地具有与R7相同的含义；

R25独立地具有与R8相同的含义；

杂芳基是包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5到10-元、单- 或双环芳香杂环；

芳基是苯基，萘-1-基或萘-2-基；

m为0，1或2。    

根据通式(I)的化合物优选通过酰化相应的6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯基胺来制备，任选地接着对这样得到的化合物进一步官能化。酰化作用 可以任选地通过以上的胺与一种酸和适宜的偶联剂，例如碳二亚胺、HATU 或TOTU，在碱例如二异丙基乙基胺的存在下反应进行，或通过以上的胺 与酰氯使用溶剂例如二氯甲烷、THF、甲苯或二氧六环在碱例如三乙胺的 存在下反应来进行。酰化作用优选在室温下进行。

用作离析物的6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯基胺可以根据文献中公开 的方法制备。合适的方法已经公开在，例如，Vejdelek，Z.J.等人，Collect. Czech.Chem.Commun 39；(1974)2819；Cannon，J.G等人，J.Med.Chem. 23(1980)745；Seidl，G.等人，Chem.Ber.97(1964)249；或Lal，B.等人， J.Med.Chem.15(1972)23。

合成式(I)的化合物的所有的反应对技术人员来说是本身已知的，可以 按照或类似于文献中记载的方法在标准条件下进行，例如Houben-Weyl， Methoden der Organischen Chemie(有机化学的方法)，Thieme-Verlag， Stuttgart，或Organic Reactions，Joh n Wiley & Sons，New York。根据各 个实例的具体情况，为了在式(I)化合物的合成期间避免副反应，通过引入 保护基暂时地阻断官能团，并在合成的后面的阶段将它们去保护，或以前 体基团(该前体基团在随后的反应阶段转变为所需的官能团)的形式引入官 能团是必要的或有利的。这样的合成策略和适宜于各具体情况的保护基和 前体基团是技术人员已知的。如果需要的话，可以通过常规的纯化方法， 例如重结晶或色谱分离法纯化式(I)的化合物。用于制备式(I)的化合物的原 料化合物是可商购的或可以按照或类似于文献方法制备的。由以上确定的 合成法得到的化合物是本发明的另一个目的。

WO 00/51970公开了通式(II)的化合物和它们用于控制(potentation) 胆碱功能活性的用途。

在上述式中：

Z1和Z2各自是芳基或芳(低级)烷基，或合起来形成低级亚烷基或低级亚烯 基，每个基团可以被芳基取代或可以与任选被低级烷基、低级烷氧基、芳 基、芳氧基或卤素取代的环烃稠合，

Z3是低级烷基，低级烷氧基，芳基，芳氨基或芳氧基(各基团可以被低级 烷氧基或卤素取代)，吡啶基，或吡啶氨基，

X是CH或N，

Y是单键或-NH-，和

Q是

参照式(II)中Z1和Z2的定义，据该文介绍，优选的低级亚烷基是1，4- 亚丁基或1，5-亚戊基，优选的低级亚烯基是亚丁烯基，亚戊烯基或甲基亚 戊烯基，优选的环烃是苯且优选的芳基是苯基。

此外，据该文介绍，通式(II)的化合物中优选那些Z1和Z2合起来一起 形成可被芳基取代或可以与任选被低级烷氧基取代的苯稠合的低级亚烯 基，Z3为可被卤素、吡啶基或吡啶氨基取代的芳基或芳氨基，X为CH或 N，Y为单键或-NH-，且Q是

的化合物。

因此，通式(I)的酰化的6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯基胺没有明确地在 WO 00/51970中公开。WO 00/51970中明确地公开的化合物不是本发明的 目的。

本发明的目的还通过用作药物的根据通式(I)的6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯基胺，以其任何形式的立体异构体和它们以任何比例的混合物和它 们的药学可接受的盐实现的，

其中

R1和R4各自独立地选自以下基团：

H；未取代和至少单取代的C1-C10-烷基，C2-C10-链烯基和C2-C10-炔基， 其取代基选自：F，OH，C1-C8烷氧基，(C1-C8-烷基)硫基，CN，COOR6， CONR7R8，以及未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基，其中取代基选自 卤素，拟卤素，C1-C3-烷基， C1-C3-烷氧基和CF3；未取代的和至少单取代 的苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧 基和CF3；R9CO；CONR10R11；COOR12；CF3；卤素；拟卤素；NR13R14； OR15；S(O)mNR16；SONR17R18；和NO2；

R2和R3各自独立地选自以下基团：

H；卤素；拟卤素；未取代和至少单取代的C1-C10-烷基，其取代基选自：

OH，苯基，和杂芳基；OH；C1-C10-烷氧基；苯氧基；S(O)mR19；CF3； CN；NO2；(C1-C10-烷基)氨基；二(C1-C10烷基)氨基；(C1-C6-烷基)-CONH-； 未取代和至少单取代的苯基-CONH-和苯基-SO2-O-，其中取代基选自卤 素，拟卤素，CH3和甲氧基；(C1-C6-烷基)SO2-O-；未取代和至少单取代的 (C1-C6-烷基)CO，其中取代基选自F，二(C1-C3-烷基)氨基，吡咯烷基和哌 啶基；和苯基-CO，其苯基部分可以被选自C1-C3-烷基，卤素和甲氧基的 一个或多个取代基取代；

A选自CH2，CHOH和CH-(C1-C3-烷基)；

B选自CH2和CH-(C1-C3-烷基)；

C独立地具有与B相同的含义；

D独立地具有与B相同的含义；

R5是基团Ar或基团Hetar，这两种基团都可以是未取代的或带有一个或 多个选自下列的取代基的基团：卤素；拟卤素；NH2；未取代和至少单取 代的C1-C10-烷基，C2-C10-链烯基，C2-C10-炔基，C1-C10-烷氧基，(C1-C10- 烷基)氨基，二(C1-C10-烷基)氨基，其取代基选自：F，OH，C1-C8-烷氧基， 芳氧基，(C1-C8-烷基)硫基，NH2，(C1-C8-烷基)氨基，和二(C1-C8-烷基)氨 基；C3-C5-烷二基；苯基；杂芳基；芳基-或杂芳基-取代的C1-C4-烷基； CF3；NO2；OH；苯氧基；苄氧基；(C1-C10-烷基)COO；S(O)mR20；SH； 苯基氨基；苄基氨基；(C1-C10-烷基)-CONH-；(C1-C10-烷基)-CON(C1-C4- 烷基)-；苯基-CONH-；苯基-CON(C1-C4-烷基)-；杂芳基-CONH-；杂芳基 -CON(C1-C4-烷基)-；(C1-C10-烷基)-CO；苯基-CO；杂芳基-CO；CF3-CO； -OCH2O-；-OCF2O-；-OCH2CH2O-；-CH2CH2O-；COOR21；CONR22R23； CNH(NH2)；SO2NR24R25；R26SO2NH-；R27SO2N(C1-C6-烷基)-；以及包含 1到3个选自N、O和S的杂原子的、饱和的或至少单不饱和的脂肪族单 核5-到7-元杂环，其中杂环可被选自卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基， OH，氧代和CF3的一个或多个取代基取代，其中所述杂环可以任选地与 所述Ar基团或所述Hetar基团稠合；其中，存在于所述Ar基团或所述 Hetar基团的所述取代基中的所有芳基、杂芳基、苯基、包含芳基的、包 含杂芳基和包含苯基的基团，都可以被选自下面的一个或多个取代基取代：

卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，OH，C1-C3-烷氧基，和CF3；

R6选自：

H；可被一个或多个选自氟、C1-C8-烷氧基和二(C1-C8-烷基)氨基的取代基 取代的C1-C10-烷基；芳基(C1-C4-烷基)和杂芳基-(C1-C4-烷基)，其可被一个 或多个选自卤素、C1-C4-烷氧基和二(C1-C6-烷基)氨基的取代基取代；

R7选自：

H；可被一个或多个选自F、C1-C8-烷氧基、二(C1-C8-烷基)氨基和苯基的 取代基取代的C1-C10-烷基；苯基；茚满基；和杂芳基；且其中每个上述的 芳族基可以是未取代的或带有一个或多个选自卤素、拟卤素、C1-C3-烷基、 C1-C3-烷氧基和CF3的取代基；

R8是H或C1-C10-烷基；    

R9选自可以是未取代的或带有一个或多个选自下列的取代基的C1-C10-烷 基：F，(C1-C4)-烷氧基，二(C1-C3-烷基)氨基；以及未取代的和至少单取代 的苯基和杂芳基，其取代基选自C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，卤素，拟卤 素，和CF3；

R10独立地具有与R7相同的含义；

R11独立地具有与R8相同的含义；

R12独立地具有与R6相同的含义；

R13选自：H；C1-C6-烷基；未取代和取代的苯基，苄基，杂芳基，(C1-C6- 烷基)-CO，苯基-CO，和杂芳基-CO，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3- 烷基，C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这样的取代基；

R14独立地具有与R13相同的含义；

R15选自：H；C1-C10-烷基；(C1-C3-烷氧基)-C1-C3-烷基；以及取代和未取 代的苄基、苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基， C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这样的取代基；

R16选自：可被一个或多个选自F、OH、C1-C8-烷氧基、芳氧基、(C1-C8- 烷基)硫基、(C1-C8-烷基)氨基和二(C1-C8-烷基)氨基的取代基取代的C1-C10- 烷基；CF3；以及取代和未取代的苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素， 拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这 样的取代基；

R17独立地具有与R7相同的含义；

R18独立地具有与R8相同的含义；

R19独立地具有与R16相同的含义；

R20独立地具有与R16相同的含义；

R21独立地具有与R6相同的含义；

R22独立地具有与R7相同的含义；

R23独立地具有与R8相同的含义；

R24独立地具有与R7相同的含义；

R25独立地具有与R8相同的含义；

R26独立地具有与R16相同的含义；

R27独立地具有与R16相同的含义；

杂芳基是包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5到10-元、芳香、 单-或双环杂环；

Hetar基团是包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5到10-元、芳香、 单-或双环杂环；

芳基是苯基，萘-1-基或萘-2-基；

基团Ar是苯基，萘-1-基或萘-2-基；

m为0，1或2。

其中一个或多个、包括所有的上述的基团具有优选的含义、较优选的 含义、更优选的含义、最优选的含义、或特别优选的含义的用作药物的式 (I)的化合物也是本发明的一个目的。

在进一步的实施方案中，本发明的目的是通过用作药物的式(I)的化合 物实现的，其中取代基R1到R5，A，B，C和D以及芳基和杂芳基基团具 有下面的含义：

R1和R4各自独立地选自以下基团：

H；未取代和至少单取代的C1-C10-烷基，C2-C10-链烯基和C2-C10-炔基， 其取代基选自：F，OH，C1-C6-烷氧基，(C1-C6-烷基)硫基，CN，COOR6， CONR7R8，未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基，其中取代基选自卤素， 拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3；未取代的和至少单取代的苯基 和杂芳基，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和 CF3；R9CO；CONR10R11；COOR12；CF3；卤素；拟卤素；NR13R14；OR15； S(O)mR16；SO2NR17R18；和NO2；

R2和R3各自独立地选自以下基团：

H；卤素；拟卤素；未取代和至少单取代的C1-C6-烷基，其取代基选自OH， 苯基，和杂芳基；OH；C1-C6-烷氧基；苯氧基；S(O)mR19；CF3；CN； NO2；(C1-C6-烷基)氨基；二(C1-C6-烷基)氨基；(C1-C6-烷基)-CONH-；未 取代和至少单取代的苯基-CONH和苯基-SO2-O-，其中取代基选自卤素， 拟卤素，CH3和甲氧基；(C1-C6-烷基)SO2-O-；未取代和至少单取代的(C1-C6- 烷基)CO，其中取代基选自F，二(C1-C3-烷基)氨基，吡咯烷基和哌啶基； 以及苯基-CO，其苯基部分是可以被选自C1-C3-烷基，卤素和甲氧基的一 个或多个取代基取代的；

A选自CH2，CHOH和CH-(C1-C3-烷基)；

B选自CH2和CH-(C1-C3-烷基)；

C独立地具有与B相同的含义；

D独立地具有与B相同的含义；

R5是未取代的或带有一个或多个选自下列的取代基的芳基或杂芳基基团： 卤素；拟卤素；C1-C10-烷基；C3-C5-烷二基；苯基；苯基取代的C1-C4-烷 基；CF3；OH；C1-C10-烷氧基；苯氧基；苄氧基；CF3O；(C1-C10-烷基)COO； S(O)mR20；(C1-C10-烷基)氨基；二(C1-C10-烷基)氨基；(C1-C10-烷基)-CONH-； (C1-C10-烷基)-CON(C1-C3-烷基)-；(C1-C10-烷基)-CO；CF3-CO；-OCH2O-； -OCF2O-；-OCH2CH2O-；-CH2CH2O-；苯基氨基；苯基-CO；COOR21； CONR22R23；SO2NR24R25；以及包含1到3个选自N、O和S的杂原子的、 芳香或脂肪族单核5-到7-元杂环，其可被选自卤素；C1-C3-烷基；C1-C3- 烷氧基和CF3的一个或多个取代基取代；其中，存在于所述芳基或杂芳基 基团的所述取代基中的所有苯基和包含苯基的基团都可以被选自下面的一 个或多个取代基取代：卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，和CF3； R6是H，C1-C6-烷基或苄基；

R7选自：

H；可以被苯基-取代的C1-C6-烷基；苯基；茚满基；和杂芳基；且其中每 个上述的芳族基都可以是未取代的或带有一个或多个选自下列取代基的基 团：卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3；

R8是H或C1-C6-烷基；

R9是C1-C6-烷基，其可以是未取代的或带有一个或多个选自下列的取代基 的：F；二(C1-C3-烷基)氨基；以及未取代的和至少单取代的苯基和杂芳基， 其取代基选自C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基，卤素，拟卤素，和CF3；

R10独立地具有与R7相同的含义；

R11独立地具有与R8相同的含义；

R12独立地具有与R6相同的含义；

R13选自：H；C1-C6-烷基；和未取代和取代的苯基，苄基，杂芳基，苯基 -CO，和杂芳基-CO，其中取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3- 烷氧基和CF3，且其中可以存在一个或多个这样的取代基；

R14是H或C1-C6-烷基；

R15选自：H；C1-C6-烷基；和取代和未取代的苄基，苯基和杂芳基，其中 取代基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以 存在一个或多个这样的取代基；

R16选自：C1-C6-烷基；CF3；和取代和未取代的苯基和杂芳基，其中取代 基选自卤素，拟卤素，C1-C3-烷基，C1-C3-烷氧基和CF3，且其中可以存在 一个或多个这样的取代基；

R17独立地具有与R7相同的含义；

R18独立地具有与R8相同的含义；

R19独立地具有与R16相同的含义；

R20独立地具有与R16相同的含义；

R21独立地具有与R6相同的含义；

R22独立地具有与R7相同的含义；

R23独立地具有与R8相同的含义；

R24独立地具有与R7相同的含义；

R25独立地具有与R8相同的含义；

杂芳基是包含一个或多个选自N、O和S的杂原子的5到10-元、单-或双 环芳香杂环；

芳基是苯基，萘-1-基或萘-2-基；

m为0，1或2。

根据通式(I)的化合物可用于上调内皮NO合酶的表达，是用于治疗各 种疾病的有用的药物化合物。在本发明的上下文中，治疗包括相应的疾病 的治疗以及预防。

可以用根据本发明的化合物治疗的疾病的例子包括：心血管疾病例如 稳定型和不稳定型心绞痛，冠心病，变异型心绞痛(痉挛)，急性冠状动脉 综合症，心力衰竭，心肌梗塞，中风，血栓症，外周塞性血管病(PAOD)， 内皮机能障碍，动脉粥样硬化，再狭窄，PTCA(经皮冠状动脉腔内成型 术)后的内皮损伤，高血压包括原发性高血压，肺动脉高血压，和继发性 高血压(肾血管高血压，慢性肾小球性肾炎)，勃起机能障碍，室律不齐， 和降低绝经后的妇女或摄入避孕药后的心血管疾病危险。

另外式(I)的化合物可以用于治疗和预防糖尿病和糖尿病并发症(肾病， 视网膜病)，血管生成，支气管哮喘，慢性肾衰竭，肝硬化，骨质疏松症， 受限制的记忆特性或受限制学习能力。

优选的适应症是稳定性心绞痛，冠心病，高血压，内皮机能障碍，动 脉粥样硬化和糖尿病并发症。

根据式(I)的化合物还可以与其它药学活性化合物并用，优选那些能够 提高根据通式(I)的化合物的效果的化合物。这样的化合物的例子包括：抑 制素；ACE-抑制剂；AT1-拮抗剂；精氨酸酶-抑制剂；PDE V-抑制剂；钙 -拮抗剂；α-阻断剂；β-阻断剂；metimazol和类似的化合物；精氨酸； 四氢生物蝶呤；维生素，特别是维生素C和维生素B6；烟酸。

可以将式(I)的化合物和它们的药学可接受的盐，任选地结合其它药学 活性化合物直接作为药物，或以其混合物或以药物制剂作为药物对动物、 优选哺乳动物、特别是人给药。因此，本发明的进一步的主题是用作药物 的式(I)的化合物和它们的药学可接受的盐，它们作为内皮NO合酶的转录 刺激剂的用途，特别是它们在治疗和预防以上所述综合症中的用途以及它 们在制备为了达到上述目的的药物中的用途。此外，本发明的主题是包括 有效剂量的至少一种式(I)的化合物和/或它们的药学可接受的盐和药学可 接受的载体(即一或多种药学可接受的载体物质和/或添加剂)的药物制剂 (或药物组合物)。

根据本发明的药物可以是口服给药的，例如以药丸，片剂，胶片片剂， 糖衣片，颗粒剂，硬胶囊和软胶囊，水溶液，醇或含油溶液，糖浆剂，乳 剂或悬浮液的形式，或直肠给药，例如以栓剂的形式。给药还可以胃肠外 进行，例如以皮下、肌肉或静脉内注射或输液的溶液的形式。其它适宜的 给药形式是，例如，经皮或局部给药，例如以油膏、酊剂，喷雾剂或透皮 治疗系统的形式，或以鼻喷剂或烟雾剂混合物的形式吸入给药，或例如， 微胶囊，植入片或条材。优选的给药形式取决于，例如，被治疗的疾病和 其严重程度。

药物制剂中式(I)的化合物和/或其药学可接受的盐的量通常为每剂0.2 到800毫克，优选在0.5到500毫克，特别地优选在1到200毫克的范围， 但根据药物制剂的种类，剂量还可以更高。药物制剂通常包括0.5到90重 量百分数的式(I)的化合物和/或它们的药学可接受的盐。药物制剂可以以本 身已知的方法进行制剂。为此目的，将一种或多种式(I)的化合物和/或它们 的药学可接受的盐，连同一种或多种固态或液态药物载体物质和/或添加剂 (或辅助的物质)而且，如果需要的话，结合其它具有治疗或预防药作用的 药学活性化合物，制成适宜的给药形式或剂型，然后将其用作人或兽医学 的药物。

对于药丸、片剂、糖衣片和硬胶囊的制备，可以使用例如，乳糖，淀 粉，例如玉米淀粉，或淀粉衍生物，滑石粉，硬脂酸或其盐，等等。用于 软胶囊和栓剂的载体是例如，脂肪，石蜡，半固态和液态多元醇，天然的 或硬化的油剂，等等。用于制备溶液的适宜的载体，例如用于注射液或乳 剂或糖浆剂的溶液的载体是，例如，水，生理氯化钠溶液，醇例如乙醇， 甘油，多元醇，蔗糖，转化糖，葡萄糖，甘露糖醇，植物油，等等。还可 以将式(I)的化合物和它们的药学可接受的盐冷冻干燥，并将得到的冷冻干 燥物，例如，用于制备注射或输液用的制剂。用于微胶囊、植入片或条材 的适宜的载体是例如，羟基乙酸和乳酸的共聚物。

除根据本发明的化合物和载体以外，药物制剂还可以含有添加剂，例 如填料，崩解剂，结合剂，润滑剂，润湿剂，稳定剂，乳化剂，分散剂， 防腐剂，甜味剂，着色剂，调味剂，香料，增稠剂，稀释剂，缓冲物质， 溶剂，增溶剂，用于实现补给效果的试剂，用于改变渗透压力的盐、涂布 剂或抗氧化剂。

式(I)的化合物和/或它们的药学可接受的盐的服药量取决于个体的情 况，且按照常例，按具体情况调节以取得最佳的效果。因此，取决于要治 疗的疾病的性质和严重程度，以及被治疗的人或动物的性别、年龄、重量 和个体响应度，还所使取决于用的化合物的作用效果和时间，治疗是急性 或慢性还是预防性的，或取决于是否还给予除了式(I)的化合物之外的其它 活性化合物。通常，大约为0.01到100毫克/千克，优选0.1到10毫克/千 克，特别为0.3到5毫克/千克(在每种情况下为每千克体重的毫克量)的日 剂量是适于对大约75千克重的成年人给药以得到预期的结果。日剂量可以 以单剂给药或在特别是当大量给药时，可被分成若干个单独的剂量，例如 两个，三个或四个单独的剂量。在某些情况下，取决于个体响应性，可能 需要向上或向下偏离所给的日剂量。

式(I)的化合物还可以用于与上述所指出的目的不相同的其它目的。非 限制性的例子包括诊断的目的，用作生化的用具，和作为制备进一步的化 合物例如药学活性的化合物的中间体。

现在将通过下面的实施例举例说明本发明：

实施例：

6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基胺的制备

在45℃下将12g(75mmol)苯并环庚烯溶于200毫升甲醇并加入 9.66g(82.5mmol)亚硝酸异戊酯。随后在10分钟内滴加加入10毫升浓HCl。 将混合物在45℃下搅拌3小时。将由此得到的残余物浓缩后，在硅胶上色 谱分离，用二氯甲烷-甲醇混合物(98∶2，v/v)作为流动相。收率： 8,5g(60％)。

将以上的中间体8g溶于400毫升冰醋酸中，加入5ml浓硫酸，并将 中间体用3g钯/活性炭在10巴压力下氢化20小时。

滤出催化剂后，将混合物倒入水中，用乙酸乙酯提取。然后将水相用 氢氧化钠溶液处理，得到碱性的相，随后用二氯甲烷提取。干燥和浓缩后 将由此得到的残余物倒入乙酸乙酯中，加入稀HCl得到相应的盐酸盐。收 率：4,2g(50％)。

通过减少氢化的时间以类似的方式得到下面的产物：

6-氨基-6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-5-醇

用于酰化苯并环庚烯基胺的一般方法：

将2.5mmol相应的苯并环庚烯基胺与550毫克三乙基胺和5毫升二氧 六环混合，然后加入2.5mmol酰氯并在室温下搅拌2小时。

然后将得到的混合物倒在冰/HCl混合物上，将得到的沉淀用乙酸乙酯 提取，用硫酸钠干燥，而后浓缩。将由此得到的残余物通过HPLC分离。

根据以上的方法得到下面的化合物(实施例1-6)：

实施例1：4-氟-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

[M+H+]测定值284

熔点：165℃

通过HPLC分离对映体(Chiralpeak AD，洗脱剂：正庚烷∶异丙醇10∶ 1)；

a)(-)-4-氟-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

保留时间：10.11

b)(+)-4-氟-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

保留时间：11.52

实施例2：4-氟-N-(5-羟基-6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰 胺

熔点：156℃

实施例3：4-氯-2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰 胺

[M+H+]测定值314

保留时间：5.42

条件：c    

实施例4：2-氯-4-氟-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

[M+H+]测定值318

保留时间：5.19

条件：c

实施例5：4-乙氧基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

[M+H+]测定值310

保留时间：5.25

条件：c

实施例6：2，4-二氟-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

[M+H+]测定值302

保留时间：5.30

条件：c

实施例7：(S)-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺

向1,2克(6,8毫摩尔)2-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸的50毫升绝对THF 溶液中，加入溶于4ml二甲基甲酰胺(DMF)中的2,44g(7,44毫摩尔)O-[(氰 基乙氧基羰基亚甲基)-氨基]-N，N，N′，N′-四甲基脲四氟硼酸盐(TOTU)和 1,93克(14,9毫摩尔)乙基二异丙基胺，将混合物在室温下搅拌30分钟。加 入1.0克(6.2毫摩尔)(S)-6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基胺并将反应搅拌3 小时。将得到的混合物加入到饱和碳酸氢钠溶液中，用乙酸乙酯提取，用 硫酸钠干燥，并在硅胶上色谱分离(用二氯甲烷/甲醇95∶5作为洗脱液)。 收率：1,38g(70％)，做为选择，还可以通过HPLC纯化化合物(RP18，乙 腈/水，0,1％TFA)。

熔点：206℃；

1H-NMR(300MHz，d6-DMSO)：1,28-1,46(m，1H，H-Alkyl)，1,80-2,13(m，3H，H-  

Alkyl)，2,5(m，CH3 and DMSO)，2,72-2,90(m，3H，H-Alkyl)，3,07-3,20(m，1H，H-

Alkyl)，3,80(broad q，1H，H-6)，7,07-7,20(m，4H，H-1，H-2，H-3，H-4)，7,47(d，1H，H-

6′/H-7′)，7,67(d，1H，H-7′/H-6′)，7,98(s，1H，H-4′)，8,31(d，1H，NHCO)，12,40(s，1H，

NH).

做为选择，可用外消旋的6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基胺以同样方 式合成化合物，并用手性制备HPLC分离得到的外消旋物。(Daicel ChiralpeakAD，20μ，250×50mm，溶剂：乙腈/异丙醇＝95∶5+0.1％ 二乙胺，流速：50毫升/分钟，逆流方式(reflush mode))。

[M+H+]测定值320

保留时间：8.95

条件：a

实施例8：(R)-2-甲基-3H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值320

保留时间：13.33

条件：a

实施例9：4-溴-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值344

保留时间：5.42    

条件：c

实施例10：6-氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值301

保留时间：4.96

条件：c

实施例11：2-羟基-6-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值297

保留时间：4.12

条件：c

实施例12：1H-吲哚-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值305

保留时间：4.66

条件：c

实施例13：1H-苯并三唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值307

保留时间：4.26

条件：c

实施例14：1-(4-氯-苯基)-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢 -5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值434

保留时间：5.59

条件：c

实施例15：2，6-二甲氧基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值327

保留时间：5.55

条件：c

实施例16：2-氯-6-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值315

保留时间：4.87

条件：c

实施例17：4-甲基-2-苯基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值363

保留时间：5.65

条件：c

实施例18：2-甲基-4-三氟甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值355

保留时间：5.17

条件：c

实施例19：5-三氟甲基-噻吩并[3，2-B]吡啶-6-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯 并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值391

保留时间：4.87

条件：c

实施例20：1H-吲哚-6-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值305

保留时间：4.77

条件：c

实施例21：6-氰基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值292

保留时间：4.86

条件：c

实施例22：苯并[1，2，3]噻二唑-4-羧酸-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值324

保留时间：5.12

条件：c

实施例23：2-氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺(对映 体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：282

保留时间：5.21

条件：a

实施例24：2-氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺(对映 体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值282

保留时间：5.90

条件：a

实施例25：2-氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺盐酸 盐

将223毫克(0.79毫摩尔)实施例24的化合物溶于20毫升甲醇，用0.5 毫升2N HCl处理并部分蒸干。由残余溶液中结晶得到标题化合物，并通 过过滤收集。收率：183毫克(73％)。

[M+H+]测定值：282

实施例26：2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺(对映 体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：281

保留时间：4.27

条件：b

实施例27：2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺(对映 体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：281

保留时间：6.94

条件：b

实施例28：2，4-二甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：301

保留时间：5.26

条件：b

实施例29：2，4-二甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：301

保留时间：5.99

条件：b

实施例30：5-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：346

保留时间：5.44

条件：a

实施例31：5-甲基-1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值346

保留时间：6.28

条件：a

实施例32：5-甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰 胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：282

保留时间：6.17

条件：b

实施例33：5-甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰 胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：282

保留时间：7.53

条件：b

实施例34：1-苯基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯-6-基)-酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：400    

保留时间：3.64

条件：a

实施例35：1-苯基-5-三氟甲基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯-6-基)-酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：400

保留时间：3.81

条件：a

实施例36：(S)-2-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺盐酸盐

该化合物是由实施例7的化合物根据实施例25的方法制备的。

[M+H+]测定值：320

实施例37：N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-6-三氟甲基-烟酰胺 (对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：335

保留时间：4.06

条件：a

实施例38：N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-6-三氟甲基-烟酰胺 (对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：335

保留时间：5.96

条件：a      

实施例39：2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-6-三氟甲基- 烟酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：349

保留时间：3.29

条件：a

实施例40：2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-6-三氟甲基- 烟酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：349

保留时间：3.82

条件：a

实施例41：2-二甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-异烟 酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例148所述制备，

[M+H+]测定值：310

保留时间：1.72

条件：d

实施例42：2-氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-异烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：301

保留时间：2.40

条件：d

实施例43：3-二甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲 酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：309

保留时间：6.17

条件：b

实施例44：3-二甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H苯并环庚烯-6-基)-苯甲 酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：309

保留时间：7.71

条件：b

实施例45：3-氨基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰 胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：283

保留时间：5.05

条件：b

实施例46：3-氨基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰 胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：283

保留时间：5.60

条件：b

实施例47：(+)-2，5-二甲基-1-吡啶-4-基甲基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9- 四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：374

保留时间：7.42

条件：b

实施例48：(-)-2，5-二甲基-1-吡啶-4-基甲基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9-四 氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：374

保留时间：9.07

条件：b

实施例49：(+)-2，5-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：283

保留时间：3.63

条件：e

实施例50：(-)-2，5-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：283

保留时间：4.02

条件：e

实施例51：5-甲基-异噁唑-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：271

保留时间：2.41

条件：d

实施例52：2，4-二甲基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：296

保留时间：1.99

条件：d

实施例53：6-吡咯烷-1-基-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：336

实施例54：6-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺(对映 体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：281

保留时间：8.96

条件：b

实施例55：6-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺(对映 体II)    

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：281

保留时间：14.54

条件：b

实施例56：2-氨基-4，6-二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：310

保留时间：8.13

条件：b

实施例57：2-氨基-4，6-二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：310

保留时间：13.88

条件：b

实施例58：2，4-二甲基-噁唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：285

保留时间：1.75

条件：f

实施例59：3-氨基-5-甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：1.86

条件：f

实施例60：6-乙炔基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺； 与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：291

保留时间：1.79

条件：f

实施例61：5-氨基-1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：347

保留时间：1.80

条件：f

实施例62：4-氨基-2-吡啶-3-基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：360

保留时间：2.86

条件：f

实施例63：4-氨基-2-吡啶-4-基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：360

保留时间：2.82

条件：f

实施例64：2-吗啉-4-基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：353

保留时间：1.75

条件：f

实施例65：2-苯基氨基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：359

保留时间：1.84

条件：f

实施例66：4-氨基-2-吡啶-2-基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：360

保留时间：2.71

条件：f

实施例67：3-甲基-2-吡啶-4-基-1H-吲哚-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯-6-基)-酰胺；

与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：396

保留时间：2.57

条件：f

实施例68：2-(2-羟基-吡啶-4-基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢 -5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：399

保留时间：2.62

条件：f

实施例69：嘧啶-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺；与 三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：268

保留时间：2.80

条件：f

实施例70：2，6-二氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺； 与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：335

保留时间：2.96

条件：f

实施例71：2-甲基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰 胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：282

保留时间：2.86

条件：f

实施例72：3-氨基-5，6-二甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：311

保留时间：3.05

条件：f

实施例73：2，6-双二甲基氨基-嘧啶-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺；

与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：354

保留时间：3.07

条件：f

实施例74：4-氨基-2-乙基硫基(硫烷基)-嘧啶-5-羧酸6，7，8，9-四氢-5H- 苯并环庚烯-6-基)-酰胺；

与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：343

保留时间：2.89

条件：f    

实施例75：6-吡咯烷-1-基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：337

保留时间：3.03

条件：f

实施例76：6-甲基氨基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：2.80

条件：f

实施例77：6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：365

保留时间：2.59

条件：f

实施例78：5-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：336

保留时间：2.56

条件：f    

实施例79：5-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：365

保留时间：2.51

条件：f

实施例80：5-吗啉-4-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：352

保留时间：2.57

条件：f

实施例81：6-二甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：310

保留时间：2.44

条件：f

实施例82：6-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：336

保留时间：2.64

条件：f

实施例83：5-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基氨基甲酰基)-吡啶-2- 羧酸乙酯；

与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：453

保留时间：2.81

条件：f

实施例84：4-氨基-2-(4，4-二甲基-2-氧代-咪唑烷-1-基)-嘧啶-5-羧酸 (6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：281

保留时间：2.67

条件：f

实施例85：咪唑并[1，2-a]吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：306

保留时间：2.91

条件：f

实施例86：2-甲基-1-苯基-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：396

保留时间：2.75

条件：f

实施例87：1-异丙基-2-三氟甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢 -5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：416

保留时间：3.06

条件：f

实施例88：N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-4-三氟甲基-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：335

保留时间：2.83

条件：f

实施例89：3，5-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：284

保留时间：2.64

条件：f

实施例90：噌啉-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺；与 三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：318

保留时间：2.76    

条件：f

实施例91：5-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺；与 三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：281

保留时间：2.65

条件：f

实施例92：2-乙基-5-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：298

保留时间：2.90

条件：f

实施例93：4-甲基-[1，2，3]噻二唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：288

保留时间：2.85

条件：f

实施例94：3-甲基-异噁唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：271

保留时间：2.28    

条件：f

实施例95：1-(4-氟-苯基)-3，5-二甲基-1H-吡唑-4-羧酸(6，7，8，9-四氢 -5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：378

保留时间：2.60

条件：f

实施例96：2，5-二甲基-1-苯基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并 环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：359

保留时间：2.87

条件：f

实施例97：3-甲磺酰基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯 甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：359

保留时间：4.68

条件：f

实施例98：4-氯-3-甲磺酰基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：393

保留时间：4.90      

条件：f

实施例99：3-甲磺酰基氨基-2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：373

保留时间：4.61

条件：f

实施例100：4-氨基-2-甲基-嘧啶-5-羧酸(6，7，8，9四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：2.07

条件：f

实施例101：6-吗啉-4-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：352

保留时间：4.40

条件：f

实施例102：6-甲氧基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6基)-烟酰胺； 与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：4.9

条件：f

实施例103：2，6-二-吗啉-4-基-嘧啶-4-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺；

与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：438

保留时间：5.56

条件：f

实施例104：2-甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：287

保留时间：4.63

条件：f

实施例105：2-(4-氰基-苯基)-1H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯 并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：407

保留时间：5.02

条件：f

实施例106：3-哌啶-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：349

保留时间：4.73

条件：f

实施例107：3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：364

保留时间：3.49

条件：f

实施例108：3-吗啉-4-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：351

保留时间：5.11

条件：f

实施例109：4-甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：287

实施例110：4，6-二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺 (对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：295

保留时间：10.32

条件：b

实施例111：4，6-二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺 (对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：295

保留时间：17.01

条件：b    

实施例112：2，6-二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺 (对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：295

保留时间：6.37

条件：b

实施例113：2，6-二甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰胺 (对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：295

保留时间：10.41

条件：b

实施例114：(S)-3-氨基-5-甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：2.52

条件：d

实施例115：(S)-3-氨基-5，6-二甲基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯 并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：311

保留时间：2.60

条件：d

实施例116：(S)-6-甲基氨基-吡嗪-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：2.28

条件：d

实施例117：(S)-6-二甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：310

保留时间：1.75

条件：d

实施例118：(S)-6-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：336

保留时间：1.82

条件：d

实施例119：(S)-3-甲磺酰基氨基-4-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：373

保留时间：2.26

条件：d

实施例120：(S)-2-环丙基-4-甲基-噻唑-5-羧酸6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：327

保留时间：2.52

条件：d

实施例121：(S)-2，5-二甲基-1-苯基-1H-吡咯-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H- 苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：359

保留时间：2.83

条件：d

实施例122：(S)-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：284

保留时间：2.28

条件：d

实施例123：6-甲基-2-甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺(对映体I)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：310

保留时间：9.35

条件：g

实施例124：6-甲基-2-甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-烟酰胺(对映体II)

如实施例7所述制备，由外消旋的胺为原料，并分离得到的外消旋物。

[M+H+]测定值：310

保留时间：9.88

条件：g

实施例125：(S)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-4(2，2，2-三氟-乙 氧基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：364

实施例126：(S)-3H-苯并咪唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：306

保留时间：3.81

条件：d

实施例127：1-甲基-3-氧代-1，2，3，4-四氢-喹喔啉-6-羧酸(6，7，8，9-四氢 -5H-苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：350

实施例128：(S)-2-氨基-6-氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：316

保留时间：2.52

条件：d

实施例129：(S)-2-二甲基氨基-4-甲基-噻唑-5-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H- 苯并环庚烯-6-基)-酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：330

保留时间：1.91

条件：d

实施例130：(S)-6-甲氧基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：297

保留时间：2.34

条件：d

实施例131：(S)-3-二甲基氨基-4-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯 -6-基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：323

保留时间：1.85

条件：d

实施例132：(S)-3-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：335

保留时间：2.71

条件：d

实施例133：(S)-6-甲氧基甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 烟酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：311

保留时间：2.00

条件：d

实施例134：5，6，7，8-四氢-喹啉-3-羧酸(6，7，8，9四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：321

保留时间：1.83

条件：f

实施例135：4-甲基-3-甲基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：309

保留时间：2.15

条件：f

实施例136：2-氯-5-甲磺酰基氨基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：393

保留时间：2.78

条件：f

实施例137：2-氨基-6-氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-烟酰 胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：316

保留时间：2.91

条件：f

实施例138：4-氯-3-氨磺酰基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 苯甲酰胺；与三氟乙酸成的盐

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：379

保留时间：2.75

条件：f

实施例139：3-甲基磺酰基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯 甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：344

保留时间：2.74    

条件：f

实施例140：5-甲基磺酰基-2-甲基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-苯甲酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：358

保留时间：2.77

条件：f

实施例141：3，6-二氯-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

如实施例7所述制备，

[M+H+]测定值：336

保留时间：5.19

条件：c

实施例142：4-苄基氨基-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-酰胺

标题化合物是由4-氯-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺用苄胺作溶剂在130℃反应得到的。4小时后，真空除去溶剂。将残余 物与乙酸乙酯和H2O搅拌。过滤结晶固体提供取代产物，收率52％。

[M+H+]测定值：372

保留时间：2.00

条件：d

实施例143A：3-苄基氨基-6-氯-吡啶-2-羧酸6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺

将溶于6毫升苄胺的实施例141的化合物(383毫克，1,14mmol)的溶 液在130℃下搅拌4小时。降温到室温后，真空除去溶剂。将残余物溶于 乙酸乙酯，并用H2O和1N HCl洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并真空浓 缩。通过硅胶色谱分离法纯化，提供标题化合物的结晶固体，收率分别为 56％(实施例143A)和35％(实施例143B)。

[M+H+]测定值406

保留时间：6.20

条件：c

实施例143B：6-苄基氨基-3-氯-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环 庚烯-6-基)-酰胺

如实施例143A中所述制备

[M+H+]测定值：406

保留时间：5.46

条件：c

实施例144：3-氨基-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

将255毫克(0,63毫摩尔)实施例143A的化合物溶于15毫升甲醇和1 毫升二氯甲烷。加入催化量的Pd/C(10％)后，将反应混合物在室温下在 H2氛围下搅拌3小时。用celith过滤反应混合物，并将滤液真空浓缩。

[M+H+]测定值：282

保留时间：2.58

条件：d

实施例145：3-甲磺酰基氨基-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚 烯-6-基)-酰胺

向溶于3毫升吡啶中的实施例144的化合物(113毫克，0.40mmol)溶 液加入催化量的DMAP(二甲基苯酚)和50.4毫克(0.44mmol)甲磺酰氯 的0.5毫升二氯甲烷溶液。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟，而后在室 温下搅拌5小时。将反应在室温下保持过夜，而后加入另外1.2当量的甲 磺酰氯，并将反应混合物在50℃下搅拌10小时。真空除去溶剂后，将粗 产品溶于乙酸乙酯，用H2O洗涤三次，并用硫酸钠干燥。用硅胶色谱分离 法提供138毫克标题化合物的结晶固体。

[M+H+]测定值：360

保留时间：2.68

条件：d

实施例146：4-氨基-吡啶-2-羧酸(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 酰胺

按照对于实施例144的化合物所述的方法将实施例142的化合物脱苄 基，用甲醇/甲酸(23∶1)作为溶剂，得到标题化合物的无色固体。

[M+H+]测定值：282

保留时间：1.69

条件：d

实施例147：(R)-(+)-4-溴-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-苯甲 酰胺

如实施例7所述制备，由(R)-6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基胺为原 料。

[M+H+]测定值344

保留时间：5.42

条件：c

实施例148：2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6- 基)-异烟酰胺；与三氟乙酸成的盐

将200mg(0,67mmoles)2-氯-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-异 烟酰胺(实施例42)和2ml N-甲基哌嗪在反应釜中加热8小时至180℃。蒸 干得到的混合物，用制备HPLC纯化(RP 18，乙腈/水，0.1％TFA)。收率： 170毫克(70％)。

[M+H+]测定值：365

保留时间：3.75

条件：c

实施例149：(+)-2-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H苯并环庚烯-6-基)- 异烟酰胺

根据实施例148所描述的方法制备，随后通过手性HPLC分离对映体。

[M+H+]测定值：336

保留时间：6.60

条件：b

实施例150：(-)-2-吡咯烷-1-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)- 异烟酰胺

根据实施例148所描述的方法制备，随后通过手性HPLC分离对映体。

[M+H+]测定值：336

保留时间：8.15

条件：b

实施例151：(-)-2-吗啉-4-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-异 烟酰胺

根据实施例148所描述的方法制备，随后通过手性HPLC分离对映体。

[M+H+]测定值：352

保留时间：5.25

条件：b

实施例152：(+)-2-吗啉-4-基-N-(6，7，8，9-四氢-5H-苯并环庚烯-6-基)-异 烟酰胺

根据实施例148所描述的方法制备，随后通过手性HPLC分离对映体。

[M+H+]测定值：352

保留时间：6.22

条件：b

实施例3-152所用的色谱条件(HPLC) 条件a        Chiralpak AD，250×4,6mm，10μ(Daicel)，乙腈∶

         异丙醇∶正庚烷＝50∶3∶4，1毫升/分钟 条件b        Chiralpak AD，250×4,6mm，10(Daicel)，乙腈，

         1毫升/分钟 条件c        Merck Porospher 55×2mm，5μ，

         梯度：95％H2O(0,05％三氟乙酸)到95％乙腈，4分

         钟，95％乙腈1,5分钟，0,5毫升/分钟) 条件d        YMC J′Sphere ODS H80，33×2.1mm，3μ，

         梯度：90％H2O(0,05％三氟乙酸)到95％乙腈，2.5分

         钟，95％乙腈0.8分钟，1毫升/分钟 条件e        Chiralpak AD，250×4，6mm，10μ(Daicel)，

         乙腈∶甲醇＝95∶5.1毫升/分钟 条件f        LiChroCart 55-2，PuroSpher STAR；

         RP 18e(MERCK)，

         溶剂A：乙腈/水(90∶10)+0.5％甲酸；

         溶剂B：乙腈/水(10∶90)+0.5％甲酸；

         梯度：95％B 0.5分钟，95％B到5％B 1.75分钟，

         5％B 2.5分钟；1毫升/分钟 条件g        Chiralpak AD，250×4,6mm，10μ(Daicel)，

         正庚烷：乙醇/甲醇＝50∶1∶1，1毫升/分钟

保留时间以分钟给出(对于每种条件)

eNOS转录活化的测定

eNOS转录的活化作用的测定详细描述于Li等人，“Activation of protein kinase C alpha and/or epsilon enhances transcription of the human endothelial nitric oxide synthase gene”，Mol.Pharmacol.1998；53： 630-637。

简要地说，将3.5kB长的eNOS基因的5′起始密码子的片段克隆，测 序并在荧火虫荧光素酶表达质粒克隆，以通过报告基因的活动监测eNOS 启动子的活化作用。用转染的和表达此启动子-报告基因构造的人内皮细胞 系来进行化合物的检测。将细胞用化合物培养18小时。

此前将所有化合物溶解在无菌的DMSO(二甲亚砜)中。使DMSO 在完全培养基中的最后浓度为0.5％。根据该厂家的说明书用标准荧光素酶 试验体系(Promega，产品目录No E150)测定这些细胞中的报告基因表达的 诱导。将用化合物孵育的细胞中的荧光素酶诱导与仅用溶剂用孵育的细胞 相比较。将两种活性的比例(转录诱导比，TIR)对化合物浓度作图。典型地， TIR值在低浓度下起始比例为1表示没有化合物效果，而达到最大TIR值 (TIR(max))则表示eNOS转录的增加。用图表表示作为化合物浓度的变化 的函数的转录诱导比的EC50值。

在第二个试验中根据对eNOS蛋白的检测确定了化合物对eNOS-转录 的影响。按照标准方法分离并培养原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)。用化 合物将融合的细胞孵育18小时，并通过定量的免疫组化和免疫印迹法 (Westernblotting Procedure)测定其对eNOS蛋白表达的影响。化合物 孵育后，将HUVEC溶解在含有10mM Tris-HCl、pH 8.0、1％SDS和蛋 白酶抑制剂的冰浴的溶解缓冲液中。对溶解产物进行标准变性聚丙烯酰胺 凝胶电泳，并渗出到硝化纤维素膜上。使用一种特殊的原代单克隆抗体 (Transduction Laboratories，英国)和碱性磷酸酶标记的二级抗体(Jackson Labs)，基于化学荧光检测方法将一种特定的eNOS蛋白带显现出来并进行 定量。

结果见以下的表。   化合物号：   EC-50   (μM) TIR(max)     1   0.02     3.3     1a   0.001     3.2     1b   6.0     2.9     2   6.0     2.2     3   ＜0.08     2.2     4   ＜0.08     2.8     5   ＜0.08     3.0     6   ＜0.08     3.0     7   0.075     3.3     10   0.256     3     11   2.1     2.0     12   0.136     3.0     13   8.8     2.0     14   1.2     1.7     15   0.779     3.1     16   0.038     2.9     20   0.016     3.1     21   8.2     2.6     22   0.083     3.1     24   0.030     3.1     25   0.031     3.1   化合物号：   EC-50   (μM) TIR(max)     26     1.8     3.1     28     0.049     3.4     29     9.6     3.4     30     0.020     3.5     31     5.0     2.8     32     0.047     3     33     3.3     2.6     34     0.060     2.8     35     3.3     3.5     36     0.050     3.3     37     0.283     2.9     39     0.496     2.9     43     0.080     3.2     45     0.060     2.9     47     0.020     3.4     48     0.590     3.4     49     0.040     3     50     1.8     3     54     0.042     3.2     56     0.168     3     58     19     2.5     59     0.019     3.2     61     2.3     3.4     64     16     3.1   化合物号：    EC-50    (μM)  TIR(max)     70     2.0     3.1     72     0.071     3.1     74     34     3.1     76     0.572     3.1     81     0.053     3.3     82     0.283     3.2     85     15     3     91     2.3     2.9     96     0.020     3     97     1.0     2.5     98     0.574     2.6     99     2.8     2.5     101     6.0     3.1     102     0.083     2.9     106     4.8     2.5     108     14     3.1     109     1.8     2.8     110     1.0     3.1     112     0.040     3.1     114     0.030     2.9     115     0.020     3     116     0.150     2.9     117     0.136     3     118     0.140     3   化合物号：   EC-50   (μM) TIR(max)     119     0.230     3     120     0.041     3.1     122     0.015     2.85     123     0.260     2.9     124     0.006     2.9     125     0.040     3     126     0.351     2.9     127     4.9     2.7     128     0.002     3.1     129     0.100     3.1     130     0.110     3.1     131     0.440     3.1     132     0.050     3.1     133     0.128     3.1     134     3.0     3.5     135     0.589     3     137     0.090     3     138     10     3     139     1.9     3     140     1.3     3     141     0.250     3.2     142     3.0     2.5     143B     28     2.5     144     0.010     2.9   化合物号：   EC-50   (μM) TIR(max)     145     3.8     1.6     146     2.4     2.9     149     3.4     3

根据本发明的化合物的效果还可以通过下面的动物模型进行研究。(动 物试验是按照德国动物保护法和美国国立卫生研究院的“the Guide for the Care and Use of LaboratoryAnimals”中所给出的使用实验动物的用途指南 进行的)。

动物和治疗(实验A-C)

使用ApoE和eNOS缺乏的小鼠(C57BL/6J background，Jackson Laboratory，Bar Harbor，Me)。所有动物是10-12星期大且重22到28 克的。手术之前三天将小鼠分成4组(apoE对照组，n＝10-12；具有测试 化合物的apoE，n＝10-12；eNOS对照组，n＝10-12；具有测试化合物的 eNOS，n＝10-12)并接受标准啮齿动物食物(含有4％脂肪和0.001％胆固 醇；在下面指定为安慰剂组)或标准啮齿动物食物+测试化合物(10或30毫 克/千克/天，口服)。

A  ApoE缺失小鼠的抗高血压的效果

使用计算机化的尾套法(Visitech Systems，Apex，Nc)测定有意识的 小鼠的血压。在对ApoE缺乏的小鼠和eNOS缺乏的小鼠用试验化合物处 理后，将血压与用安慰剂治疗的结果相比较。

B新内膜形成和动脉粥样化形成的抑制作用(股动脉套)

用相应的化合物(10毫克/千克/天压入鼠粮)对ApoE缺乏的小鼠治疗3 天后，腹膜内注射戊巴比妥(60毫克/千克)接着肌肉注射甲苯噻嗪(2毫克/ 千克)使动物麻醉，并在股动脉上装一个套，如Moroi等人所描述(J Clin Invest.101：1225-32，1998)。简单地说，切开左侧股动脉。围绕动脉安插一 个由PE-50管(内径0.56mm，外径0.965mm，Becton Dickinson，Mountain View，Ca)制成的非闭合的2.0mm聚乙烯套并原位用两个7-0缝线接结。 自围绕的组织中分离右侧股动脉，但不安插套。手术后用相应的化合物继 续治疗14天。然后杀死动物。取出主动脉通过定量的免疫组化和免疫印迹 法进行血管eNOS表达的测定。采集两种股动脉，置于福尔马林中并嵌入 石蜡中。从左侧股动脉的被套的部分和相应的右动脉的部分中切下20个横 断面(10微米)。对各部分进行标准苏木素伊红染色。使用图像分析计算机 程序(LeicaQWin，Leica Imaging Systems，Cambridge，GB)进行形态学 (Morphometric)分析。对每个断面测定腔管、新内膜和中膜的区域。为 此目的，新内膜定义为腔管和内部弹性层之间的区域，中膜定义为在内部 和外部的弹性层之间区域。新内膜的面积和中膜的面积之间的比例用新内 膜/中膜的比例来表示。将化合物组中得到的结果与安慰剂组的结果相比 较。

C在长期治疗中动脉粥样硬化斑块形成的预防

将相应的化合物压入鼠粮中对ApoE缺乏的小鼠处理16星期并最终将 鼠处死。除去各个小鼠的主动脉，置于福尔马林中固定并嵌入石蜡中。通 过主动脉(由主动脉弓到隔膜)中的脂质损伤的形成测定斑块形成并用油 红O染色剂进行分析。此实验使用股动脉定量测定相应的化合物对血管 eNOS表达的影响。将化合物组中得到的结果与安慰剂组的结果相比较。

D患病的ApoE缺乏的小鼠中的冠状动脉功能的改善

在实验中使用老年雄性野生C57BL/6J小鼠(Charles River Wiga GmbH，Sulzfeld)，和6个月大的、重28到36克的apoE缺乏的小鼠 (C57BL/6J background，Jackson Laboratory，Bar Harbor，Me)。将小鼠 分成3组(C57BL/6，n＝8；apoE对照组，n＝8；具有相应的化合物的apoE， n＝8)并接受8星期的标准啮齿动物食物(含有4％脂肪和0.001％胆固醇)或 标准啮齿动物食物+相应的化合物(30毫克/千克/天，口服)。

用戊巴比妥钠(100毫克/千克i.p.(腹膜内))麻醉小鼠，并迅速地切除 心脏，投入到冰冷的灌注缓冲液中。将导管插入主动脉并连接到灌注器上 (HUGO SACHS ELECTRONICS，Freiburg，德国)，将灌注器以60mmHg 的恒定灌注压力立即启动。以逆流方式用改性的Krebs碳酸氢盐缓冲液灌 注心脏，用95％O2和5％CO2维持平衡并保持在37.5℃。

将斜角的小管(PE 50)穿过肺静脉进入左心室，并从心室壁中拉出，通 过凹槽端在顶端固定，并连接到尖端-微压计上(Millar 1.4 French)。将导管 通过相同的肺静脉插入左侧心房，并将心脏用恒定的10mmHg的预加压 力和60mmHg后负荷压力转到工作方式。使用超音速流探测器 (HSE/Transonic Systems Inc.)对主动脉的流出量和前房的流入量进行连续 地测定。以前房流量和主动脉流量的差计算冠脉血流量。以1000Hz的采 样率将所有血液动力学数据数字化并用带有专业软件(HEM，Notocord)的 电脑记录。

使心脏稳定化30分钟。在稳定状态期间和在加容量和加压期间测定所 有功能性的血液动力学数据。    

通过改变预加负荷压力构建左心室功能曲线。为了获得预加负荷曲线， 设置60mmHg的后负荷，并以5到25mmHg范围内每5mmHg为一步 对预加负荷进行调整。使心脏在负载压力和容量之间的基线条件下保持稳 定。