技术领域
[0001] 本
发明涉及一种季铵盐类化合物及其制备方法与用途。
背景技术
[0002] 局部麻醉药(Local anesthetics，局麻药)是一类能在用药局部可逆性的阻断感觉神经冲动发生与传递的药品，简称“局麻药”。在动物或人意识清醒的条件下，在局部可逆的阻断感觉神经冲动产生与
信号传导，使有关神经支配的部位出现暂时性感觉丧失，从而可逆的引起局部组织痛觉消失的一类药物。一般的，局麻药的作用局限于
给药部位并随药物从给药部位扩散而迅速消失。局部麻醉药通过直接抑制神经细胞和
纤维膜上的相关离子通道，阻滞动作电位的产生和神经冲动的传导，从而产生局部麻醉作用。目前公认的局麻药作用机制，是阻断神经细胞膜上的
电压门控性Na+通道，使神经冲动传导阻滞，从而产生局部麻醉作用。
[0003] 临床目前所使用的局麻药均为不具备电荷的疏
水性化合物，因此容易通过扩散和渗透方式通过细胞膜进入神经细胞达到钠通道的阻断位点。这些麻醉药阻断钠通道从而阻断神经元的兴奋性。实际上，这些局部麻醉药分子虽然容易通过扩散进入神经细胞内发挥作用，但同时也容易通过扩散作用从给药部位迅速扩散，游离出神经细胞，导致局部麻醉作用无法长时间持续。即使加大使用剂量也只能在一定程度内延长局部麻醉时间，这些局部麻醉药物，无法获得理想的长时间局部麻醉作用。目前临床常用的局部麻醉药物作用时间大多不超过4小时。由于传统局部麻醉药的作用维持时间较短，不得不使用
镇痛泵来维持神经阻滞，采取椎管内、神经根、皮下等部位的置管，大大增加了医疗成本和感染的发生率。
[0004] 另一方面，传统局部麻醉药物对神经的阻滞并不具有特异的选择性，在使用过程中广泛地阻滞多种神经纤维，影响感觉、痛觉、运动以及交感神经等多种神经功能，这一药理特点极大的限制了局部麻醉药在临床中的广泛应用。例如
膝关节置换术后患者早期的功能锻炼康复尤为重要，但是目前使用的局麻药中并无选择性阻滞痛觉的药物，大部分手术患者由于使用局部麻醉药，导致患者的运动神经被阻滞，无法恢复运动功能从而使得术后康复受限。局部麻醉药研究急需引入新的研究思路，开发选择性阻滞感觉功能而不影响运动功能的长效局部麻醉药物以满足临床需求。
[0005] 传统局部麻醉药物化学结构中一般都含有至少一个及以上非酰胺叔N
原子。当该N原子被取代时，将获得相应的季铵盐化合物。季铵盐化合物的分子结构由于具有一个正电荷，穿透细胞膜能
力显著降低。例如：对利多卡因的叔胺N原子进行乙基取代后将得到被称为QX-314的季铵盐化合物(式Ⅱ)。与QX-314相似，QX-222(式Ⅲ)也是另外一种结构类似的季铵盐。在特殊的条件下，QX-314与QX-222有可能产生局部麻醉效果。由于QX-314和QX-222结构中带有正电荷，正常情况下无法穿过细胞膜，因而无法快速地产生局部麻醉作用。但其一旦穿过细胞膜，就能在神经细胞内对钠离子通道进行显著的抑制，从而产生持久的局部麻醉作用(Courtney KR.J Pharmacol Exp Ther.1975,195:225–236)。目前的研究发现，QX-314能在辣椒素(瞬时受体电位通道香
草酸亚型1激动剂，即TRPV1Agonist)的协助下，通过TRPV1通道的激活，顺利进入神经细胞内，从而产生长时间神经阻滞(Craig R.Ries.Anesthesiology.2009；111:122–126)。但辣椒素的强烈刺激性使其难以具有应用前景。
[0006] 虽然有研究表明，QX314与临床上使用的如布比卡因、利多卡因等局部麻醉药物合用能够迅速产生的麻醉作用，可避免辣椒素的刺激性。但以上药物的协同使用依然无法达到理想的局部麻醉效果。在外加
表面活性剂条件下，亦可帮助QX314进入细胞膜，引起超过8小时的局麻作用(Daniel S.Kohane，PNAS.2010；107:3745-3750)。目前研究已发现，QX314的安全性问题主要表现为局部神经损伤，鞘内注射时会引起实验动物死亡等。在QX-314的
基础上，发展了一系列具有表面活性剂结构的长链化合物。该类化合物虽然可以在一定程度上获得较长的局部麻醉效果，但由于该类化合物具有类似表面活性剂的结构，虽然能够一定程度获得长效作用，但也会造成局部
注射部位严重的肌肉和神经损伤，安全性差。同时，目前已报道的类似化合物也不具有选择性局部麻醉作用，无法满足临床的需求。因此，无论是QX314单独使用、QX314与其它活性药物联合使用，还是具有表面活性剂结构特征的QX314长链化合物都存在安全性差、局部麻醉选择性差的
缺陷。
发明内容
[0007] 针对上述问题，本发明提供了一类新的季铵盐化合物，兼具长效局部麻醉作用和选择性局部麻醉作用(感觉神经阻滞时间大于运动神经阻滞时间)，与现有的QX314、QX314组合物以及具有表面活性剂结构特征的长链化合物相比，具有局部麻醉作用时间长、局部麻醉选择性好、神经损伤更小、安全性高的优点。
[0008] 本发明提供了式Ⅰ所示的化合物、或其药学上可接受的盐、或其立体异构体、或其
溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物：
[0009]
[0010] 式中，
[0011] X、Y各自独立地选自O、S或NR10，其中R10选自H、氘或C1～4的烷基；
[0012] Z-为药学上可接受的阴离子；
[0013] R1选自n1个R11取代的芳基；
[0014] R2选自n1’个R11’取代的芳基；
[0015] 其中，n1、n1’各自独立地选自0～5的整数，R11、R11’各自独立地选自氘、C1～4的烷基、C1～4的烷
氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、
氨基、巯基、酯基；
[0016] 当R3和R4其中一个为C1的烷基时，另一个可独立选自C1～4的烷基；
[0017] 当R3和R4其中一个为C2的烷基时，另一个可独立选自C1、C3、C4的烷基；
[0018] 当R3和R4其中一个为C3的烷基时，另一个可独立选自C3～4的烷基；
[0019] 当R3和R4其中一个为C4的烷基时，另一个可独立选自C4的烷基；
[0020] L1选自取代或未取代的C1～14的亚烷基；其中，所述亚烷基的主链中含有0～4个杂原子，所述杂原子选自O、S、NR12，其中所述R12选自氢、氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基；所述取代基为氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素；
[0021] 当式Ⅰ中虚线为无时，L2选自氢、氘、取代或未取代的C1～8的烷基、取代或未取代的C1～8的烷氧基，所述取代基为氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素；
[0022] 当式Ⅰ中虚线为键时，L2选自取代或未取代的C1～8的亚烷基，所述取代基为氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素。
[0023] 进一步地，所述药学上可接受的阴离子Z-为卤素阴离子、
硫酸根、
醋酸根、
酒石酸根、
对甲苯磺酸根、甲磺酸根、枸橼酸根。
[0024] 进一步地，所述药学上可接受的阴离子Z-为卤素阴离子。
[0025] 进一步地，所述药学上可接受的阴离子Z-为Br-。
[0026] 进一步地，所述化合物的药学上可接受的盐是指由式Ⅰ所示化合物与药学上可接受的
无机酸或
有机酸形成。
[0027] 进一步地，所述无机酸或有机酸为
盐酸、
氢溴酸、乙酸、硫酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、
碳酸、酒石酸、月桂酸、
马来酸、枸橼酸或苯
甲酸。
[0028] 进一步地，X、Y各自独立地选自O、S或NR10，其中R10选自H、氘或C1-2的烷基。
[0029] 进一步地，R1选自n1个R11取代的芳基；
[0030] R2选自n1’个R11’取代的芳基；
[0031] 其中，n1、n1’各自独立地选自为0～5的整数，R11、R11’各自独立地选自氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、氨基、巯基、酯基；
[0032] 当R3为C1的烷基时，R4可独立选自C1-2的烷基。
[0033] 进一步地，R1选自n1个R11取代的芳基；
[0034] R2选自n1’个R11’取代的芳基；
[0035] 其中，n1、n1’各自独立地选自为0～5的整数，R11、R11’各自独立地选自氘、C1～3的烷基、甲氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、氨基、巯基、酯基。
[0036] 进一步地，L1选自取代或未取代的C2～14的亚烷基；
[0037] 其中，所述亚烷基的主链中含有0～3个杂原子，所述杂原子选自O、S、NR12，其中所述R12选自氢、氘、C1～2的烷基；所述取代基为氘、C1～2的烷基、C1～2的烷氧基；
[0038] 当式Ⅰ中虚线为无时，L2选自氢、氘、取代或未取代的C1～8的烷基，所述取代基为氘、C1～2的烷基；
[0039] 当式Ⅰ中虚线为键时，L2选自取代或未取代的C2～6的亚烷基，所述取代基为氘、C1～2的烷基、C1～2烷氧基。
[0040] 进一步地，L1选自取代或未取代的C2～14的亚烷基；
[0041] 其中，所述亚烷基的主链中含有0～2个杂原子，所述杂原子选自O、S、NR12，其中所述R12选自氢、氘；所述取代基为氘、C1～2的烷基；
[0042] 当式Ⅰ中虚线为无时，L2选自氢、氘、C1～8的烷基；
[0043] 当式Ⅰ中虚线为键时，L2选自取代或未取代的C2～6的亚烷基，所述取代基为氘、甲基、甲氧基。
[0044] 进一步地，所述化合物如式Ⅱ所示：
[0045]
[0046] 式中，
[0047] X、Y各自独立地选自O、NR10，其中R10选自H、氘或C4烷基；
[0048] R11、R11’各自独立地选自氘、C1～3的烷基、甲氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、氨基、巯基、酯基；
[0049] n1、n1’各自独立地选自2～3的整数；
[0050] L1选自C3～14的亚烷基；
[0051] 其中，所述亚烷基的主链中含有0～2个杂原子，所述杂原子选自O、S、NR12，其中所述R12选自氢、氘；
[0052] L2选自取代或未取代的C2～6的亚烷基，所述取代基为甲基、甲氧基。
[0053] 进一步地，所述化合物如式Ⅲ所示：
[0054]
[0055] 式中，
[0056] X、Y各自独立地选自O、S、NR10，其中R10选自H、氘或C1～4烷基；
[0057] R11、R11’各自独立地选自氘、C1烷基、甲氧基、卤素；
[0058] n1、n1’各自独立地选自2～5的整数；
[0059] L1选自C2～10的亚烷基；
[0060] 其中，所述亚烷基的主链中含有0～2个杂原子，所述杂原子选自O、S、NR12，其中所述R12选自氢、氘；
[0061] L2选自氢、氘、C1～8的亚烷基。
[0062] 本发明还提供了一种制备前述化合物、或其药学上可接受的盐、或其立体异构体、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物的方法，它包括以下步骤：
[0063]
[0064] 式(Ⅱ)所示的季铵盐化合物与式(Ⅲ)所示的胺类化合物在
碱的存在下反应，即得式(Ⅰ)所示的目标化合物。
[0065] 进一步地，所述有机碱为三乙胺或1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯。
[0066] 进一步地，所述反应是在极性质子溶剂中进行。
[0067] 进一步地，所述溶剂为醇类溶剂，优选地，所述溶剂为甲醇或
乙醇。
[0068] 本发明还提供了前述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其立体异构体、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物在制备局部麻醉的药物中的应用。
[0069] 进一步地，所述局部麻醉的药物使得感觉神经阻滞时间长于运动神经阻滞时间。
[0070] 进一步地，所述局部麻醉为长效局部麻醉和/或选择性局部麻醉。
[0071] 进一步地，所述局部麻醉的时间超过24小时。
[0072] 本发明还提供了一种药物，它是以前述的化合物、或其药学上可接受的盐、或其立体异构体、或其溶剂合物、或其前体药物、或其代谢产物，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。
[0073] 本发明中提供的化合物和衍
生物可以根据IUPAC(国际纯粹与应用化学联合会)或CAS(化学文摘服务社，Columbus，OH)命名系统命名。
[0074] 关于本发明的使用术语的定义：除非另有说明，本文中基团或者术语提供的初始定义适用于整篇
说明书的该基团或者术语；对于本文没有具体定义的术语，应该根据公开内容和上下文，给出本领域技术人员能够给予它们的含义。
[0075] “取代”是指分子中的氢原子被其它不同的原子或分子所替换。
[0076] 卤素为氟、氯、溴或碘。
[0077] “烷基”是烷
烃分子中少掉一个氢原子而成的烃基，例如甲基-CH3,乙基-CH3CH2等。C14烷基是指含有一个至四个碳原子的直链或支链的烃链。
[0078] “亚烷基”是指烷烃分子中少掉两个氢原子而成的烃基，例如亚甲基-CH2-,亚乙基-CH2CH2-等。“C1-4亚烷基”是指含有一个至四个碳原子的直链或支链的烃链。
[0079] “取代或未取代的C1-12烷基”是指C1-12烷基可以是被取代的，也可以没有取代基的。
[0080] “L1选自取代或未取代的C1～12的亚烷基；其中，亚烷基的主链中含有0～4个杂原子”是指含有一个至十二个碳原子的直链或支链的烃链；该烃链可以是取代的，也可以是未取代的；该烃链的主链中含有杂原子，杂原子为O、S或取代的N。
[0081] “当式Ⅰ中虚线为无时”是指式Ⅰ中的虚线不存在；即此时L2不参与形成环，此时，L2选自氢、氘、取代或未取代的C1～8的烷基、取代或未取代的C1～8的烷氧基，所述取代基为氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素；
[0082] “当式Ⅰ中虚线为键时”是指L2与N原子和与羰基相连的碳原子形成环，此时L2选自取代或未取代的C1～8的亚烷基，所述取代的取代基为氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素；此时，式Ⅰ所示化合物的结构式为：
[0083]
[0084] “芳基”指具有共轭的π
电子体系的全碳单环或稠合多环(也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，例如苯基和
萘基。所述芳基环可以稠合于其它环状基团(包括饱和和不饱和环)，但不能含有杂原子如氮，氧，或硫，同时连接母体的点必须在具有共轭的π电子体系的环上的碳原子上。芳基可以是取代的或未取代的，即可以被0～4个氘、C1～4的烷基、C1～4的烷氧基、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、氨基取代。
[0085] 术语“药学上可接受的盐”指本发明化合物与药学上可接受的无机酸和有机酸所形成的盐，适合与对象(例如，人)的组织
接触，而不会产生不适度的
副作用的盐。其中，优选的无机酸包括(但并不限于)：盐酸、氢溴酸、
磷酸、
硝酸、硫酸；优选的有机酸包括(但并不限于)：甲酸、乙酸、丙酸、丁二酸、萘二磺酸(1,5)、亚细亚酸、草酸、酒石酸、乳酸、水杨酸、
苯甲酸、戊酸、二乙基乙酸、
丙二酸、
琥珀酸、富马酸、庚二酸、
己二酸、马来酸、苹果酸、氨基磺酸、苯丙酸、葡糖酸、
抗坏血酸、烟酸、异烟酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、
柠檬酸，以及氨基酸。
[0086] 术语“溶剂合物”指本发明化合物与药学上可接受的溶剂形成溶剂合物，其中，所述药学上可接受的溶剂包括(但并不限于)：水、乙醇、甲醇、异丙醇、丙二醇、四氢呋喃、二氯甲烷。
[0087] 术语“立体异构体”指本发明化合物所涉及
手性碳原子可以为R构型，也可以为S构型，或其组合。
[0088] 本发明提供了一种结构新颖的季铵盐类化合物及其制备方法与用途，该化合物具有起效快，单次给药后具有长时间局部麻醉的效果，感觉神经阻滞时间大于运动神经阻滞时间，兼具长效局部麻醉作用和选择性局部麻醉作用，显著降低了QX314、QX314组合物以及具有表面活性剂结构特征季铵盐化合物的副作用，具有更好的安全性，即本发明式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐，可用于制备安全的、具有长时间局部麻醉和选择性局部麻醉作用的药物，具有局部麻醉作用时间长、局部麻醉选择性好、神经损伤更小、安全性高的优点。
[0089] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的
修改、替换或变更。
[0090] 以下通过
实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
[0091] 本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
[0092] 实施例1、本发明化合物的制备
[0093]
[0094] 化合物1a(10.0g,45.39mmol)溶于15mL的1,3-二溴丙烷，加热至75℃反应40h,TLC监测(DCM:MeOH＝10:1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，生成粘稠的糖浆状物质，倾出上层清液，剩余粗产品15g，使用30mL甲醇溶解后与
硅胶进行拌样，干法上样后硅胶柱柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得粗产品7.0g。乙酸乙酯和二氯甲烷重结晶，制备得到6.6g类白色固体粉末(中间体1b)，产率：34.4％,用于下一步反应。
[0095] 将上述制备得到的中间体1b(1.00g,2.37mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(0.604g,2.61mmol，CAS:15883-20-2)溶于10mL的乙醇中,加入DIPEA(0.99g,0.78mL,4.74mmol),升温至80℃，加热40小时,蒸干溶剂，粗产品，硅胶柱柱层析纯化，洗脱剂：
CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得600mg白色固体(1)。产率：44.15％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.35(s,1H),7.84(s,1H),7.11–7.01(m,6H),4.89(s,2H),3.80–
3.45(m,6H),3.20(s,3H),2.71-2.57(m,2H),2.28-2.17(m,14H),2.02(m,1H),1.90-1.63(m,6H),1.60-1.27(m,3H)。
[0096] 实施例2、本发明化合物的制备
[0097]
[0098] 化合物2a(10.0g,40.32mmol)溶于20mL的1,3-二溴
丁烷，加热至75℃反应24h,,TLC监测(DCM：MeOH＝10：1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，反应液
固化有白色固体产生，滤出粗产品16.0g白色固体，硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝20:1,收集洗脱液，浓缩得到5.9g白色固体(中间体2b)，产率：31.5％，用于下一步反应。
[0099] 上述制备得到的中间体2b(1.0g，2.16mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(0.55g，2.37mmol，CAS:15883-20-2)溶于15mL的乙醇,加入DIPEA(0.53g，0.68ml，4.12mol),30℃反应10天,蒸干溶剂，粗产品硅胶柱层析纯化，洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得995mg白色粉末状固体(2)。产率：75.1％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):9.79(s,1H),7.60(s,1H),7.02-6.90(m,5H),4.33(s,2H),3.63-3.41(m,6H),3.25-
3.01(m,2H),2.94(s,2H),2.08(s,6H),2.07(s,6H),1.89-1.74(m,12H),1.60-1.40(m,1H),
1.40-1.20(m,6H)。
[0100] 实施例3、本发明化合物的制备
[0101]
[0102] 化合物3a(2.0g，8.06mmol)溶于4mL的1,5-二溴戊烷，加热至70℃反应24h,,TLC监测(DCM：MeOH＝20:1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，反应液固化有白色固体产生，滤出粗产品1.6g白色固体，硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝20:1,收集洗脱液，浓缩得到1.8g白色粉末状固体(中间体3b)，产率：46.7％，用于下一步反应。
[0103] 上述制备得到的中间体3b(1.8g，3.77mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(0.96g，4.14mmol，CAS:15883-20-2)溶于30ml的乙醇和5ml甲醇混合溶剂,加入DIPEA(0.97g，1.24ml，7.54mmol),30℃反应18天。待反应完全后硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得到白色粉末状固体产品500mg(3)，产率：20.1％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.24(s,1H),8.39(s,1H),7.05-6.87(m,5H),4.68(s,2H),3.60-
3.50(m,6H),3.30-3.05(m,2H),2.90-2.70(m,1H),2.35(s,1H),2.17-2.14(m,12H),2.05-
1.55(m,10H),1.49-1.31(m,11H)。
[0104] 实施例4、本发明化合物的制备
[0105]
[0106] 化合物4a(10.0g,40.3mmol)溶于15mL的1,8-二溴辛烷，加热至75℃反应40h,TLC监测(DCM：MeOH＝10：1)。加入适量的乙酸乙酯，生成粘稠的糖浆状物质，倾出上层清液，剩余固体溶解拌样，硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得粗产品7.4g。乙酸乙酯和二氯甲烷重结晶，制备得到6.9g类白色固体粉末(中间体4b)，直接用于下一步反应。
[0107] 将上述制备得到的中间体4b(1.00g,1.92mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(498mg,2.11mmol，CAS:15883-20-2)溶于10mL的乙醇,加入DIPEA(0.63mL,3.84mmol),升温至80℃，加热40小时。蒸干溶剂，粗产品硅胶柱层析纯化，洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得600mg白色固体(4)。收率：46.6％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.50(s,1H),8.13(s,1H),7.11–7.01(m,5H),4.88(s,2H),3.64–3.61(d,J＝7.02Hz,4H),3.48(s,2H),2.96(s,1H),2.86-2.79(m,2H),2.27(s,6H),2.23(s,6H),2.17-1.96(m,4H),1.76(s,10H),1.60-1.42(m,14H)。
[0108] 实施例5、本发明化合物的制备
[0109]
[0110] 化合物5a(1.0g,3.8mmol)溶于1mL的双(2-溴乙基)醚，缓慢滴加至1.5ml双(2-溴乙基)醚中，加热至70℃反应,TLC监测反应(DCM：MeOH＝10：1)。待反应完全后，蒸干溶剂，粗产品硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝20:1,收集洗脱液，浓缩得黑褐色化合物1.3g(中间体5b)，产率：69.0％，进行下一步反应。
[0111] 将上述制备得到的中间体5b(1.3g，2.6mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(0.67g，2.89mmol，CAS:15883-20-2)溶于15mL的乙醇,加入DIPEA(0.86ml，5.2mmol),30℃反应13天,TLC监测反应(DCM:MeOH＝10:1)。待反应完全后，蒸干溶剂，粗产品硅胶柱层析纯化，洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得500mg白色固体(5)。产率：29.4％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.09(s,1H),9.81(s,m),8.69(s,1H),7.06–6.90(m,6H),4.73(s,2H),4.67–3.97(d,J＝4.05Hz,2H),3.85-3.63(m,8H),3.28-3.16(m,2H),3.07-2.95(m,1H),2.65-2.56(m,1H),2.30-1.95(m,13H),1.80-1.60(m,4H),1.60-1.12(m,11H)。
[0112] 实施例6、本发明化合物的制备
[0113]
[0114] 化合物6a(10.0g,39.4mmol)溶于15mL的1,3-二溴丙烷，加热至75℃反应40h,TLC监测(DCM:MeOH＝10:1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，生成粘稠的糖浆状物质，倾出上层清液，剩余粗产品14g，使用30mL甲醇溶解后与硅胶进行拌样，干法上样后硅胶柱柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得粗产品8.0g。乙酸乙酯和二氯甲烷重结晶，制备得到7.6g类白色固体粉末(中间体6b)，产率：42.3％,用于下一步反应。
[0115] 将上述制备得到的中间体6b(1.00g,2.19mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(0.559g,2.4mmol，CAS:15883-20-2)溶于10mL的乙醇中,加入DIPEA(0.57g,0.72mL,4.38mmol),升温至80℃，加热40小时。蒸干溶剂，粗产品，硅胶柱柱层析纯化，洗脱剂：
CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得500mg白色固体(6)。产率：37.6％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.35(s,1H),7.84(s,1H),7.11–7.01(m,5H),4.89(s,2H),3.80–3.45(m,
6H),3.20(s,3H),2.71-2.57(m,2H),2.28-2.17(m,14H),2.02(m,1H),1.90-1.63(m,6H),
1.60-1.27(m,3H)。
[0116] 实施例7、本发明化合物的制备
[0117]
[0118] 化合物7a(10.0g,37.88mmol)溶于15mL的1,8-二溴辛烷，加热至75℃反应40h,TLC监测(DCM：MeOH＝10：1)。加入适量的乙酸乙酯，生成粘稠的糖浆状物质，倾出上层清液，剩余固体溶解拌样，硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得粗产品8.4g。乙酸乙酯和二氯甲烷重结晶，制备得到7.4g类白色固体粉末(中间体7b)，直接用于下一步反应。
[0119] 将上述制备得到的中间体7b(1.00g,1.87mmol),N-(2,6-二甲基苯基)-2-哌啶甲酰胺(475mg,2.05mmol，CAS:15883-20-2)溶于10mL的乙醇,加入DIPEA(0.62mL,3.74mmol),升温至80℃，加热40小时。蒸干溶剂，粗产品硅胶柱层析纯化，洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得500mg白色固体(7)。收率：38.8％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.50(s,1H),8.13(s,1H),7.11–7.01(m,6H),4.88(s,2H),3.64–3.61(d,J＝7.02Hz,4H),3.86(s,3H),3.48(s,2H),2.96(s,1H),2.86-2.79(m,2H),2.27(s,6H),2.23(s,3H),2.17-1.96(m,4H),1.76(s,10H),1.60-1.42(m,14H).。
[0120] 实施例8、本发明化合物的制备
[0121]
[0122] 化合物8a(2.0g，8.54mmol)溶于4mL的1,5-二溴戊烷，加热至70℃反应24h,,TLC监测(DCM：MeOH＝20:1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，反应液固化有白色固体产生，滤出粗产品1.8g白色固体，硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝20:1,收集洗脱液，浓缩得到1.6g白色粉末状固体(中间体8b)，产率：39.2％，用于下一步反应。
[0123] 上述制备得到的中间体8b(1.5g，3.23mmol),8c(0.91g，3.55mmol)溶于30ml的乙醇和5ml甲醇混合溶剂,加入DIPEA(0.83g，1.06ml，6.46mmol),30℃反应18天。待反应完全后硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得到白色粉末状固体产品600mg(8)，产率：29.0％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.24(s,1H),8.39(s,1H),7.05-6.87(m,5H),4.68(s,2H),3.60-3.50(m,6H),3.33(s,3H),2.90-2.70(m,1H),2.35(s,1H),
2.17-2.14(m,12H),2.05-1.55(m,10H),1.49-1.31(m,11H)。
[0124] 实施例9、本发明化合物的制备
[0125]
[0126] 化合物9a(10.0g,45.45mmol)溶于15mL的1,3-二溴丙烷，加热至75℃反应40h,TLC监测(DCM:MeOH＝10:1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，生成粘稠的糖浆状物质，倾出上层清液，剩余粗产品14g，使用30mL甲醇溶解后与硅胶进行拌样，干法上样后硅胶柱柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1,收集洗脱液，浓缩得粗产品8g。乙酸乙酯和二氯甲烷重结晶，制备得到7.2g类白色固体粉末(中间体9b)，产率：37.5％,用于下一步反应。
[0127] 将上述制备得到的中间体9b(1.00g,2.37mmol),9c(0.504g,2.61mmol)溶于10mL的乙醇中,加入DIPEA(0.99g,0.78mL,4.74mmol),升温至80℃，加热40小时。蒸干溶剂，粗产品，硅胶柱柱层析纯化，洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得500mg白色固体1
(9)。产率：39.6％。H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):10.35(s,1H),7.84(s,1H),7.11–7.01(m,
6H),4.89(s,2H),3.80–3.45(m,6H),3.20(s,3H),2.71-2.57(m,2H),2.32(s,3H)2.28-2.17(m,11H),2.02(m,1H),1.90-1.63(m,2H),1.60-1.27(m,3H)。
[0128] 实施例10、本发明化合物的制备
[0129]
[0130] 化合物10a(10.0g,37.59mmol)溶于20mL的1,3-二溴丁烷，加热至75℃反应24h,,TLC监测(DCM：MeOH＝10：1，Rf＝0.3)。加入适量的乙酸乙酯，反应液固化有白色固体产生，滤出粗产品15.0g白色固体，硅胶柱层析纯化。洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝20:1,收集洗脱液，浓缩得到6.5g白色固体(中间体10b)，产率：35.9％，用于下一步反应。
[0131] 上述制备得到的中间体10b(1.0g，2.07mmol),10c(0.47g，2.28mmol)溶于15mL的乙醇,加入DIPEA(0.54g，0.69ml，4.14mol),30℃反应10天。蒸干溶剂，粗产品硅胶柱层析纯化，洗脱剂：CH2Cl2:MeOH＝10:1，收集洗脱液，浓缩得900mg白色粉末状固体(10)。产率：71.6％。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ(ppm):9.79(s,1H),7.60(s,1H),7.02-6.90(m,5H),4.33(s,2H),3.26-3.06(m,6H),2.64-2.42(m,4H),2.10(s,6H),2.09(s,6H),1.89-1.74(m,8H),
1.40-1.20(m,9H)。
[0132] 实施例11、本发明化合物的制备
[0133]
[0134] 将实施例4产物200mg溶解于二氯甲烷10mL，
冰浴下滴加等物质的量浓度的0.1mol/L的盐酸-甲醇溶液，减压浓缩至干。
真空干燥，得到淡黄色固体(11)。
[0135] 实施例12、本发明化合物的制备
[0136]
[0137] 将实施例10产物200mg溶解于二氯甲烷10mL，加入1eq的对甲苯磺酸，减压浓缩至干。真空干燥，得到淡黄色固体(12)。
[0138] 实施例13、本发明化合物的制备
[0139]
[0140] 将实施例8产物200mg溶解于二氯甲烷10mL，加入0.5eq的D-酒石酸，减压浓缩至干。真空干燥，得到淡黄色固体(13)。
[0141] 按照上述实施例的制备方法，得到以下实施例化合物14-77：
[0142]
[0143]
[0144]
[0145]
[0146] 以下利用实验例的方式来说明本发明化合物的有益效果。
[0147] 实验例1、本发明化合物局部麻醉效果的研究
[0148] 选取实施例1-77化合物，利多卡因阳性对照组、左布比卡因阳性对照组分别给予8组完全适应实验环境的受试大鼠，每组8只。
[0149] 给药剂量为：利多卡因组浓度为2％水溶液，左布比卡因组浓度为0.75％水溶液，待测药物浓度均为20mmol/mL的蒸馏水溶液。
[0150] 每只大鼠给药或对照的注射体积为0.5ml，通过神经
定位器导向定位，注射于大鼠坐骨神经附近。通过von Frey刺激仪，刺激大鼠注射药物体侧足底，观测局部麻醉效果。同时，由后肢蹬踏试验(Postural Extensor Thrust,PET)评价大鼠运动功能情况：垂直提起大鼠并使注射侧后肢蹬在电子天平
台面上，此时大鼠后肢肌力由肢体蹬踏天平而显示出的数值表示。肢体完全麻痹时，读数为肢体自身重量，约20g。测量值超过基线与肢体重量差值的一半视为运动功能恢复，小于或等于该值视为运动功能消失。
[0151] 表1本发明化合物的坐骨神经局部麻醉效果
[0152]
[0153] 实验结果表明，该类药物在坐骨神经阻滞模型中能够产生大于24小时的局部麻醉作用，同时感觉神经阻滞时间显著大于运动神经阻滞时间，且相差时间大于或等于5小时。
[0154] 实验例2、本发明化合物局部麻醉效果的研究
[0155] 250～300克体重的大鼠背部剃毛消毒后，在裸露的背部一侧画出直径约1.5厘米圆形，并将圆形进行6等分。在中心的
皮肤处皮下注射含有本发明实施例1～13的化合物的的溶液0.5mL(以生理盐水为溶剂，布比卡因浓度为23mmol/L，本发明
专利所述化合物浓度范围6mmol/L)。将Von Frey纤维丝中100克力度的纤维丝与针头绑定进行皮肤局部刺激。药物注射1min后，使用上述方法在6个划分范围内进行刺激，若在同一等分范围内的连续3次刺激均未出现背部皮肤收缩行为，视为药效效应阳性，若出现背部皮肤收缩则视为局部麻醉效应消失。6个等分范围中有4个或4个以上区域显示局部麻醉阳性，则视为药物的局部麻醉有效，6个等分范围中少于4个区域显示阳性，视为局部麻醉失效。每种化合物使用10只大鼠进行实验。
[0156] 表2本发明化合物的皮下浸润局部麻醉效果
[0157]
[0158] 实验结果表明，该类药物在大鼠皮下浸润模型中能够产生大于24小时的局部麻醉作用。
[0159] 实验例3、本发明化合对神经病理损伤的研究
[0160] 选取实施例1-13化合物，利多卡因阳性对照组、左布比卡因阳性对照组分别给予8组完全适应实验环境的受试大鼠，每组8只。
[0161] 给药剂量为：利多卡因组浓度为2％水溶液，左布比卡因组浓度为0.75％水溶液，待测药物浓度均为20mmol/mL的蒸馏水溶液。每只大鼠给药或对照的注射体积为0.5ml，注射于大鼠坐骨神经附近。在坐骨神经注射后第7天和第14天，将实验大鼠异氟醚麻醉下心脏注射布比卡因安乐死。取注射部位坐骨神经约1.5cm，保存于10％甲
醛溶液中48h，HE
染色并切成5μm厚度的切片。
[0162] 给药剂量为：利多卡因组浓度为2％水溶液，左布比卡因组浓度为0.75％水溶液，待测药物浓度均为6mmol/L的蒸馏水溶液。每只大鼠给药或对照的注射体积为0.5ml，注射于大鼠背部皮下。在皮下注射后第7天和第14天，将实验大鼠异氟醚麻醉下心脏注射布比卡因安乐死。取注射部位皮肤组织，保存于10％甲醛溶液中48h，HE染色并切成5μm厚度的切片。
[0163] 神经病理损伤评估显示：实施例1-13化合物与利多卡因阳性对照组、左布比卡因阳性对照组相比，在神经损伤、血管增生、脱髓鞘程度、肌肉
炎症、结缔组织炎症程度方面都没有显著差异，具有良好的安全性。
[0164] 综上，本发明提供了一种结构新颖的季铵盐类化合物及其制备方法与用途，该化合物具有起效快，单次给药后具有长时间局部麻醉(大于24小时)的效果，具有神经阻滞选择性(感觉神经阻滞时间大于运动神经阻滞时间，且相差时间大于或等于5小时)，兼具长效局部麻醉作用和选择性局部麻醉作用，显著降低了QX314、QX314组合物以及具有表面活性剂结构特征季铵盐类化合物的副作用，具有更好的安全性，即本发明式Ⅰ化合物及其药学上可接受的盐，可用于制备安全的、具有长时间局部麻醉和选择性局部麻醉作用的药物，具有局部麻醉作用时间长、局部麻醉选择性好、神经损伤更小、安全性高的优点。
