本发明涉及含有以具有优异的免疫抑制作用而引人注目的、以下述通式（Ⅰ）表示的巨大环状化合物或者其允许作为药物的盐的药物用长效制剂，更详细地说是关于使在所谓的微小球形态的制剂中含有上述化合物（Ⅰ）或其盐，可以肌肉注射和其他注射，而且可以点眼、吸入、关节注射等局部给药，并且还可以采用经口给药，直肠注入为首的种种给药形式的药物用长效制剂。

通式（Ⅰ）

（式中，R1和R2、R3和R4、R5和R6的邻接的每个对 各自独立地

a）表示2个邻接的氢原子，或者

b）可以在结合的碳原子之间形成又一个键，加之，R2可以是烷基，R7或者表示氢原子、羟基、被保护的羟基，或者烷氧基，或者可以与R1共同表示氧基，

R8和R9独立地表示氢原子、羟基，

R10表示氢原子、烷基、由1个以上的羟基取代的烷基、链烯基、由1个以上的羟基取代的链烯基，或者由氧基取代的烷基，

X表示氧基、（氢原子、羟基）、（氢原子、氢原子）、或者以式-CH2O-表示的基，

Y表示氧基、（氢原子、羟基）、（氢原子、氢原子）、或者以式N-NR11R12或N-OR13表示的基，

R11和R12独立地表示氢原子、烷基、芳基、或者甲苯磺酰基，

R13、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R22和R23、独立地表示氢原子或者烷基，

R20和R21独立地可以是氧基、或者各自独立地可以是（R20a、氢原子）和（R21a、氢原子），R20a和R21a独立地表示羟基、烷氧基，或者以式OCH2OCH2CH2OCH3表示的基，或者R21a表示被保护的羟基，而且R20a和R21a可以共同表示环氧化物中的氧原子，

n表示1、2或3。

此外，Y、R10和R23还可以表示它们与结合的碳原子一起形成且由饱和或不饱和的5节或6节环组成的含有氮原子、硫原子和/或氧原子的杂环基，该杂环基可以由烷基、羟基、1个以上的羟基取代 的烷基、烷氧基、芳基和以式-CH2Se（C5H5）表示的基中选择1个以上的基取代）。以通式（Ⅰ）表示的化合物或允许作为药物的盐，作为具有免疫抑制作用的药物质是公知的，（见特开昭61-148181号公报、欧洲专利申请公开0323042号），可期望用于以心脏、肝脏、肾脏、骨髓、皮肤、角膜、肺脏、胰腺、小肠、肌肉、神经、四肢等脏器移植为首的各医疗领域。

上述化合物（Ⅰ）及其药物允许的盐，可以用与上述两专利公报中描述的相同方法获得。尤其是通过培养次库巴埃希斯（ツクバエンシス）链霉菌No.9993（微工研寄第927号）或者ハィグロスコビカス·サプスベ-シス·セクシコエンシス链霉菌No.7238（微工研寄第928号）而制造的大环内酯类在FR-900506、FR-900520、FR-900523和FR-900525号中已被报道。

化合物（Ⅰ）或者作为药物允许的其盐（以下用化合物（Ⅰ）代表），如上述那样正被期待作为免疫抑制作用物质，在目前世界各国中已证实作为脏器移植手术后的排斥反应抑制剂的效果。但是，在抑制上述手术后的排斥反应时，必须不疏忽大意地连续长时期给药，因此期望开发具有良好的持续性的剂型。

本发明正是着眼于上述那样的情况，提供给生物体用药后由于其有优异的缓慢释放性而显示长时间持续性那样的药物用长效制剂。

本发明的药物用长效制剂，是将由上述化合物（Ⅰ）构成的活性成分封入作为药物所允许的生物分解性高分子物质制成的微小粒体中。

下面首先详细说明在通式（Ⅰ）中使用的各种定义及其具体例子，以及其理想的实施方式。

所谓“低级”，如果没有特别指出，是指具有1-6个碳原子的基。

作为“烷基”的理想例子可以举出直链或支链的脂族烃残基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、戊基、新戊基、己基等低级烷基。

作为“链烯基”的理想例子可以举出含有一个双键的直链或支链脂族烃残基，例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、甲基丙烯基、戊烯基、己烯基等低级链烯基。

作为“芳基”的理想例子可举出苯基、甲苯基、二甲苯基、枯烯基、莱基、萘基等。

作为“被保护的羟基”中的合适的保护基，可以举出例如像甲基硫甲基、乙基硫甲基、丙基硫甲基、异丙基硫甲基、丁基硫甲基、异丁基硫甲基、己基硫甲基等低级烷基硫甲基那样的1-（低级烷基硫）（低级）烷基，作为更理想的保护基可举出C1-C4烷基硫甲基，作为最理想的保护基可举出甲基硫甲基;

可以举出例如三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三丁基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基、三叔丁基甲硅烷基等三（低级）烷基甲硅烷基，例如像甲基-二苯基甲硅烷基、乙基-二苯基甲硅烷基、丙基-二苯基甲硅烷基、叔丁基-二苯基甲硅烷基等低级烷基-二芳基甲硅烷基等那样的三取代甲硅烷基，作为更理想的这种基是三（C1-C4）烷基甲硅烷基和C1-C4烷基二苯基甲硅烷基，作为最理想的这种基是叔丁基-二甲基甲硅烷基和叔丁基-二苯基甲硅烷基;

可以举出像以由羧酸、磺酸和氨基甲酸衍生的脂酰基、芳酰基和 芳基取代的脂酰基那样的酰基;等等。

作为脂酰基可举出：例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁酰基、异丁酰基、戊酰基、异戊酰基、三甲基乙酰基、己酰基、羧基乙酰基、羧基丙酰基、羧基丁酰基、羧基己酰基等，可以有一个以上的羧基那样的合适取代基的低级链烷酰基;例如环丙氧基乙酰基、环丁氧基丙酰基、环庚氧基丁酰基、 氧基乙酰基、甲氧基丙酰基、 氧基丁酰基、 氧基戊酰基、 氧基己酰基等可以有一个以上的低级烷基那样的合适取代基的环（低级）烷氧基（低级）链烷酰基;樟脑磺酰基;例如羧甲基氨基甲酰基、羧乙基氨基甲酰基、羧丙基氨基甲酰基、羧丁基氨基甲酰基、羧戊基氨基甲酰基、羧己基氨基甲酰基等羧基（低级）烷基氨基甲酰基;或者例如三甲基甲硅烷基甲氧基羰乙基氨基甲酰基、三甲基甲硅烷基乙氧基羰丙基氨基甲酰基、三乙基甲硅烷基乙氧基羰丙基氨基甲酰基、叔丁基二甲基甲硅烷基乙氧基羰丙基氨基甲酰基、三甲基甲硅烷基丙氧基羰丁基氨基甲酰基等三（低级）烷基甲硅烷基（低级）烷氧基羰基（低级）烷基氨基甲酰基等有一个以上像被保护的羧基（低级）烷基氨基甲酰基等那样的羧基或者像被保护的羧基那样的合适取代基的低级烷基氨基甲酰基。

作为芳酰基可以举出：例如苯甲酰基、甲苯酰基、二甲苯酰基、萘甲酰基、硝基苯甲酰基、二硝基苯甲酰基、硝基萘甲酰基等可以有一个以上的像硝基那样的合适取代基的芳酰基;例如苯磺酰基、甲苯磺酰基、二甲苯磺酰基、萘磺酰基、氟苯磺酰基、氯苯磺酰基、溴苯磺酰基、碘苯磺酰基等可以有一个以上的像卤素那样的合适取代基的芳烃磺酰基等。

作为以芳基取代的脂酰基可以举出例如苯乙酰基、苯丙酰基、苯 丁酰基、2-三氟甲基-2-甲氧基-2-苯乙酰基、2-乙基-2-三氟甲基-2-苯乙酰基、2-三氟甲基-2-丙氧基-2-苯乙酰基等可以有一个以上的像低级烷氧基和卤代（低级）烷基那样的合适取代基的芳基（低级）链烷酰基等。

在上述酰基中，作为更理想的酰基可举出可以具有羧基的C1-C4链烷酰基，在环烷基部分有二个（C1-C4）烷基的环（C5-C6）烷氧基（C1-C4）链烷酰基、樟脑磺酰基、羧基（C1-C4）烷基氨基甲酰基、三（C1-C4）烷基甲硅烷基（C1-C4）烷氧基羰基（C1-C4）烷基氨基甲酰基，可以有一个或二个硝基的苯甲酰基、带有卤素的苯磺酰基，具有C1-C4烷氧基和卤代（C1-C4）烷基的苯基（C1-C4）链烷酰基等，它们之中，作为最理想的酰基可举出乙酰基、羧基丙酰基、 氧基乙酰基、樟脑磺酰基、苯甲酰基、硝基苯甲酰基、二硝基苯甲酰基、碘苯磺酰基和2-三氟甲基-2-甲氧基-2-苯乙酰基。

作为“由5节或6节环组成的含有氮原子、硫原子和/或氧原子的杂环基”的理想的例子可举出吡咯基、四氢呋喃基等。

化合物（Ⅰ）的药物上允许的盐是无毒的，作为药物允许的惯用的盐，可举出像例如钠盐、钾盐等碱金属盐，例如钙盐、镁盐等碱土金属盐、铵盐，例如三乙胺盐、N-芳基-N-甲胺盐等胺盐那样的与无机或有机碱的盐。

在化合物（Ⅰ）中，往往存在构象异构体或一对以上由不对称碳原子和双键引起的像旋光异构体和几何异构体那样的立体异构体，这样的构象异构体或异构体也包括在本发明的范围之中。

为实施发明的最佳形式

在本发明中使用的所谓生物分解性高分子物质制的微小粒体，一般称作微球，它本身属于公知技术。

但是，使属于巨大环状化合物的本发明上述化合物（Ⅰ）微球化的技术到目前为止尚未找到，具有这样巨大环的化合物（Ⅰ）在微状化时或伴随特别困难性而被制剂化，或者即使被制剂化，也完全不知道是否达到发挥优异的缓慢释放性效果。

现已发现，使用以多乳酸（以下称作PLA）和乳酸-乙醇酸共聚物（以下称作PLGA）为代表的这样的生物分解性高分子物质作为微球构成物质，将化合物（Ⅰ）分散在这种微小粒体中，在非常好的稳定性下化合物（Ⅰ）达到缓慢释放化。

作为在本发明中使用的上述生物分解性高分子物质，除上述的PLA和PLGA之外，作为特别合适的生物分解性高分子物质可例举出聚乙醇酸、α-氰基丙烯酸多烷基酯、聚ε-己内酯、聚氨基酸、多羟基丁酸、多羟基缬草酸、多羟基丁酸-羟基缬草酸共聚物等。

用上述生物分解性高分子物质制成的微小粒体中的化合物（Ⅰ）的含量，根据对人或动物的给药目的和给药路径（部位）作适当规定，但一般推荐为0.01～50%（重量），最好是0.1-20%（重量）。

上述微小粒体的大小没有特别限定，只要能够通过注射针就可以，一般是在200μm以下。

本发明的微小粒体的制造方法没有特别限定，有代表性的方法是，用二氯甲烷、乙腈、二噁烷等有机溶剂溶解生物分解性高分子物质，同时在该溶液中溶解化合物（Ⅰ），在该溶液中加入结晶析出媒介物使微小粒体析出，将其乳化，然后冷冻干燥。这种微小粒体含有化合 物（Ⅰ），微小粒体的直径具有随上述有机溶剂的添加量增多而直径变小的倾向，有机溶剂的添加量少时直径变大。该有机溶剂的添加量相对于生物分解性高分子物质是1-50倍（V/W），最好是1-10倍。

另一方面，作为上述结晶析出媒介物，明胶水溶液、聚乙烯醇、低级醇类（甲醇和乙醇等），酮类（丙酮等）等亲水性溶剂是令人满意的，添加结晶析出溶剂后，体系中结晶溶剂浓度高时，微小粒体直径就变小，另一方面，体系中结晶溶剂浓度低时，微小粒体就出现直径变大的倾向。该结晶析出媒介物的添加量是使添加后的浓度为0.1-10%（重量），最好是0.25-2%（重量）是合适的。

这样提供的微小粒体在分散到适合于给药途径的分散介质中之后给药，例如在进行关节注射等的局部给药时，分散在注射用蒸馏水或生理食盐水中。另外根据需要，在本发明的微小粒体中，或者使微小粒体分散在上述分散介质中作为合适给药形式的注射剂或内服剂等中，可以同时存在作为药物允许的各种添加剂。作为像这样的添加剂，可举出表面活性剂、助溶剂、等渗化剂、无痛化剂、赋形剂、增稠剂、稳定剂、防腐剂等。

本发明的药物用组合物在使其含有以下述文献中揭示的化合物作为有效成分时也能够有效地发挥作用。例如可举出EP-A-353678，特开平2-74330号，PCT/GB90/01262，EP-A-413532，PCT/JP91/00314，英国专利No.9012963.6及No.9014136.7、No.9014681.2、No.9014880.0、No.9014881.8、No.9015098.8、No.9016115.9、No.9016693.5，EP-A-323865及349061、358508、364031、 364032、378317、378320、378321、388153、396399、396400、399579、403242、428365、356399、GB2225576.A，EP-A-402931及427680等。

另外，使用环孢子菌素和雷帕霉素也能够制造本发明的长效制剂。

实施例

下面根据实施例具体说明本发明，但是本发明并不局限于这些实施例。

作为化合物（Ⅰ）

R1、R2、R8、R23＝氢

R7、R9＝羟基 R10＝烯丙基

R14、R15、R16、R17、R18、R19、R22＝甲基

R20＝（R20a、H）（R20a＝甲氧基）

R21＝（R21a、H）（R21a＝羟基）

X、Y＝氧基        n＝2

R3、R4＝与结合的碳原子之间的又一个键

R5、R6＝与结合的碳原子之间的又一个键

再者，选择游离态的化合物。该化合物具有特别优异的免疫抑制作用，下面称作FK506。

微小粒体的制造

将FK506（0.05g）、二氯甲烷（2ml、4ml、8ml）、PLGA（0.5g）混合成均匀溶液，向该溶液中加入1%明胶水溶液（200ml），结晶析出微小球。将其加入高速混合器中，在6℃×5000rpm×5min的条件下进行乳化，在该乳化液中 通入氨气而馏去溶剂，用100μm的网眼过滤后，进行2500rpm×5min的离心分离。用水洗净过滤物后，再进行离心分离，再分散在水中后，进行冷冻干燥。所得微小粒体的直径如下。

2ml二氯甲烷时        37.3μm

4ml二氯甲烷时        16.1μm

8ml二氯甲烷时        7.5μm

血中浓度的推移

在上述所得的微小粒体中使用直径16.1μm的微小粒体，以2mg/Kg的比率对大白鼠进行关节注射。整个血中的FK506浓度推移如图1所示。

如在上述图1（纵坐标是对数标度）中看到的那样，FK506的缓慢释放性持续极长的时间，得出是优异长效药剂的评价。

发明的结果

本发明因为如上述那样构成，所以能够以稳定的微小粒体的形式提供以FK506为首的含有巨大环的化合物（Ⅰ），而且将其给人或动物用药时，显示出继续非常长时间的稳定的缓慢释放性。而且可以作为适合局部投药给药剂提供，与全身给药的情况相比，虽然投给更多的必要量，也不必担心全身毒性。

本发明的药物组成物在使用时添加分散介质，制成悬浮制剂，所调制的制剂的保存稳定性良好，并且即使与体液接触也不产生活性成份的结晶析出，证实了显示优异的生物可用性。另外，这种药物组成物还具有小儿易饮用及能够容易调整给药量的优点。

产业上的利用可能性

本发明的制剂从三环化合物（Ⅰ）的药理作用看，对心脏、肾脏、 肝脏、骨髓、皮肤、角膜、肺、胰腺、小肠、手足、肌肉、神经、椎间盘、气管等脏器或者组织的移植时的排斥反应;由骨髓移植而产生的移植片对宿主反应;慢性关节风湿病、全身性红斑狼疮、桥本甲状腺炎、多发性硬化症，重度肌无力、Ⅰ型糖尿病等自身免疫疾病;以及由病原微生物（例如烟曲霉、尖镰刀孢菌、阿斯特老依呆斯（ァスティデス）毛癣菌等）引起的感染症的治疗和预防是有用的。

另外三环化合物（Ⅰ）的制剂对下述疾病的治疗和予防也是有用的。即炎症性和增植亢进性皮肤病及免疫学的促进皮肤疾病（例如干癣、特异反应性皮炎、接触性皮炎、湿疹状皮炎、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疤疮、水疱疮类天疱疮、表皮水疱症、荨麻疹、血管性水肿、脉管炎、红斑、皮肤嗜酸性白细胞增多症、红斑狼疮、坐疮和圆形脱发症）;

自身免疫疾病的眼病（例如角结膜炎、春季结膜炎、具切特氏病关连的眼色素膜炎、角膜炎、疮疹性角膜炎、圆锥形角膜炎、角膜上皮异营养症、角膜白斑、眼天疱疮、莫伦溃疡、强膜炎、克雷布斯眼障碍、伏-小柳-原田综合症、类肉瘤病等）;

可逆的闭塞性呼吸道疾病[哮喘（例如支气管哮喘、过敏性哮喘、内因性哮喘、外因性哮喘和尘埃性哮喘），尤其是慢性和难治性哮喘（例如迟发型哮喘和呼吸道反应性亢进），以及支气管炎等];

粘膜和血管的炎症（例如胃溃疡、由贫血症和血栓症引起的血管损伤，贫血性肠疾病，肠炎，坏死性全肠炎，由灼伤引起的肠损伤，白三烯B4-促进疾病）;

肠的炎症/过敏性疾病（例如，小儿脂肪便症、直肠炎、嗜酸性胃肠炎、肥胖细胞症、克隆氏病和溃疡性大肠炎）;

在远离胃肠道部位上有综合性征状表现的与食物相关的过敏性疾病（例如偏头痛、鼻炎和湿疹）;

肾病（例如间质性肾炎、古德帕斯彻综合症、溶血性尿毒症综合征和糖尿病性肾炎）;

神经性疾病（例如多发性肌炎、急性感染性多神经炎、美尼尔病、多发神经炎、多发性神经炎、单发性神经炎和神经之障碍）;

内分泌疾病（例如，甲状腺机能亢进和巴塞多病）;

血液疾病（例如，纯赤母细胞病、再生不良性贫血、发育不良性贫血、特发性血小板减少性紫斑病、自身免疫性溶血性贫血、无粒细胞血症、恶性贫血、巨赤母细胞性贫血和红血球发育不全症）;

骨疾病（例如，骨质疏松症）;

呼吸系统疾病（例如，肉样瘤病（类肉样瘤病）、肺纤维症和特发性间质性肺炎）;

皮肤疾病（例如，皮肤肌炎、寻常性白斑、寻常性鱼鳞癣、光线过敏症和皮肤T细胞淋巴肿）;

循环系统疾病（例如，动脉硬化症、动脉粥样硬化症、主动脉炎综合症、结节性多发性动脉炎和心肌症）;

胶原病（例如，硬皮症、韦格纳肉芽肿和斯耶格伦综合征）;

脂肪过多症;

嗜酸性白细胞肋膜炎;

牙周病[例如，牙床、牙周、牙槽骨、（牙的）牙骨质的损伤];

肾病综合症（例如，肾小球肾炎）;

男性脱发症或者老年性脱发症;

肌肉营养障碍;

脓皮症和塞扎莱综合症;

阿狄森病;

活性氧促进疾病[例如，脏器损伤（保存、移植或缺血性疾病（血栓症、心肌梗塞等）时产生的（心脏、肝脏、肾脏、消化道等的）脏器的缺血性血流损伤）;肠疾病（例如内毒素休克、伪膜性大肠炎，由药剂或射线而引起的大肠炎;肾性疾病（例如贫血性急性肾功能不全、慢性肾功能不全）;肺疾病（例如由肺中氧或药剂（如对草快、博来霉素）而引起的中毒、肺癌、肺气肿）;眼病（例如白内障、铁沉积症（眼球铁锈症）、视网膜炎，色素沉积症、老年性斑点变质，玻璃体斑痕、碱灼伤角膜）;皮炎（例如，多形性红斑、海绵状免疫球蛋白A皮炎、粘质皮炎）;以及其他疾病（例如牙床炎、牙周炎、败血症、胰腺炎、或者由环境污染（如大气污染）、老化、致癌物质、癌转移、高山病引起的疾病）];

由组胺或者白三烯C4游离而引起的疾病;

贝切特病（例如，肠型、血管型、神经型、口腔、皮肤、眼、外阴部、关节、副睾丸、肺、肾）等。

此外，三环化合物（Ⅰ）的制剂具有肝脏再生作用和/或肝脏细胞的肥大和过形成的刺激作用。因而，这些化合物对肝病[例如，免疫原性疾病（像自身免疫性肝脏病、原发性胆汁性肝硬变或者硬化性胆管炎那样的慢性自身免疫性肝脏病）、部分肝切除，急性肝坏死（如由毒物、病毒性肝炎、休克或无氧症而引起的坏死）、乙型肝炎、非甲非乙型肝炎、肝硬变（例如酒精性肝硬变）和肝肌能不全（如剧烈症状肝炎、迟发性肝炎及由急性转为慢性的肝肌能不全）]的治疗和预防是有用的。

而且三环化合物（Ⅰ）的制剂由于具有像化学疗法作用的增强作用，巨细胞病毒和艾滋病病毒感染的预防及治疗作用、抑制致癌作用、抗炎症等那样的药理作用，对各种疾病是有用的。