专利汇可以提供一种肝癌双重靶向磁性纳米颗粒的制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种肝癌双重靶向 磁性 纳米颗粒的制备方法。本发明的制备方法包括超 顺磁性 纳米颗粒(SPIO)的制备,对 超顺磁性 纳米颗粒(SPIO)进行PEG修饰,以及利用DSPE-PEG2000修饰SPIO交联双抗anti-CD34&anti-AFP步骤。本发明制备得到的纳米颗粒可靶向甲胎蛋白阳性的肝癌细胞和肝癌新生血管内皮细胞,磁共振MR成像可以活体动态示踪SPIO-PEG-BsAb,从分子 水 平实现评价靶向肝癌诊断的重要作用。本发明实现了肝癌细胞和肝癌血管双重 分子成像 的目的,将为肝癌及其它 恶性 肿瘤 的分子水平诊断和抗血管生成靶向 治疗 的动态评价提供了新思路和新途径。,下面是一种肝癌双重靶向磁性纳米颗粒的制备方法专利的具体信息内容。
1.一种肝癌双重靶向磁性纳米颗粒的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)超顺磁性纳米颗粒(SPIO)的制备:
将乙酰丙酮铁、二苄醚、油酸和油胺混合均匀,然后加热反应,得到油酸修饰的超顺磁性Fe3O4纳米颗粒;
(2)对超顺磁性纳米颗粒(SPIO)进行PEG修饰:
将DSPE-PEG2000和SPIO以一定质量比混合,加热超声混匀,然后加热反应一段时间,再经后处理步骤,得到黑色透明的PEG修饰的超顺磁性纳米颗粒;
(3)制备肝癌双重靶向磁性纳米颗粒:
将anti-CD34和anti-AFP两种抗体分别加入超滤管中离心,加入硼酸盐缓冲液进行吹打均匀,预处理后混合待用;取步骤(2)得到的PEG修饰的超顺磁性纳米颗粒,调节pH值至5-
6,然后加入EDC和NHS进行活化;最后用预处理后混合的抗体溶液重悬PEG修饰的超顺磁性纳米颗粒,置于摇床反应,反应结束后利用分子筛分离未反应的抗体,得到肝癌双重靶向磁性纳米颗粒。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)的乙酰丙酮铁、二苄醚、油酸和油胺的摩尔比为2:15:6:6~2:30:12:10。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)加热反应为先将混合物加热至180~220℃反应40~80min,然后再升温至260~300℃反应30~60min。相比一步法加热,采用分段加热法更利于纳米铁粒子的分散和粒径的均一性。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)DSPE-PEG2000和SPIO的质量比为2:1。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)具体为将DSPE-PEG2000溶于氯仿,再将分散于正己烷的SPIO与DSPE-PEG2000的氯仿溶液混合,并于60~80℃下超声仪超声混匀5~20分钟,再缓慢加入去离子水,置于旋转蒸发仪下于60~80℃水浴作用15~30min,待反应体系冷却至室温后,经超声处理15~30min使颗粒分散均匀,再将其多次离心,得到上层黑色透明的PEG修饰的超顺磁性纳米颗粒。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)超滤管为30KD超滤管,离心速度为2000-4000rpm。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中硼酸盐缓冲液的pH值为8~9。
8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)中anti-CD34、anti-AFP、PEG修饰的超顺磁性纳米颗粒、EDC和NHS的质量比为1:1:3:1:0.5~1:1:6:2:1。
9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)活化温度为20~30℃,反应时间为20~30min。
10.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)摇床反应时间为1~3小时。
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