癌症是美国及世界关注的主要大众健康问题。据估计，1998年美 国会诊断出一百万以上的侵入性癌症的新病例。此疾病最普遍的形 式为肺、乳腺、前列腺、结肠和直肠的实体瘤。一般来说，通过结合 体外实验和造影方法来诊断癌症。造影方法包括X射线计算体层照相 术、磁共振造影、超声造影和放射性核素闪烁照相术。通常给患者 使用造影剂以提高通过X射线CT、MRI和超声获得的影像，而给肿瘤 局部使用放射性药物需要放射性核素照相术。
癌症的治疗一般包括使用外光束放射治疗和化疗，根据此疾病 的类型和程度，它们可以单独或联合进行。已提供了一些化疗制剂， 但是它们一般对肿瘤和正常组织缺乏特异性，导致相当的副作用。这 些治疗对死亡率的影响是有限的，其证据是一些癌症的死亡率仍很 高。仍需要更有效和特异性的治疗。
尽管为癌症的诊断提供了多种造影方法，仍需要有所改进的方 法。具体地讲，需要能够更好地区分癌症及其它病症或良性生理异常 的方法。达到这种改进的手段是给患者使用金属药物，该药物通过结 合只在肿瘤中表达的或在肿瘤中比在其它组织中表达程度显著大的 受体，特异性地定位在肿瘤中。对于某些放射性药物可以通过其可造 影的发射，或对于磁共振造影剂通过其对附近区域中水松弛率的作用， 在外部检测金属药物的定位。
当金属药物包含发射颗粒的放射性同位素时，此肿瘤特异性金 属药物方法还可以用于治疗癌症。在肿瘤部位的同位素的放射活性 的衰变导致足够的离子化辐射，其对肿瘤细胞造成毒性。此方法对肿 瘤的特异性使接触细胞毒试剂的正常组织的量最小化，并因此可以提 供副作用更少、更有效的治疗。
为了在癌症造影和治疗中达到这些所需的改进，以前的努力集 中于使用放射性核素标记的结合肿瘤细胞表面受体的单克隆抗体、 抗体片段及其它蛋白质或多肽。这些放射性药物的特异性常非常高， 但是它们仍存在一些缺点。首先，由于其分子量大，其重血流中清除 得非常慢，导致影像中长时间的血液背景。也是由于其分子量，其在 肿瘤部位不能从脉管中容易地渗出。这导致非常有限量的放射性药 物接近这些受体，并因此导致造影中信号强度非常低，为治疗提供细 胞毒作用不足。
已对癌症造影和治疗进行了另一种方式的研究，其中包括使用 结合肿瘤细胞表面受体的小分子，如肽。在很多国家中，In-111标记 的促生长素抑制素受体结合肽，In-111-DTPA-D-Phe1-八肽(octeotide)已 用于临床，用来给表达了促生长素抑制素受体的肿瘤造影(Baker等， Life Sci.，1991，49，1583-91和Krenning等，Eur.J.Nucl.Med.，1993，20， 716-31)。已研究了高剂量的此放射性药物对这些类型的癌症的潜在 的治疗作用(Krenning等，Digestion，1996，57，57-61)。一些研究组研究 了使用Tc-99m标记的In-111-DTPA-D-Phe1-八肽的类似物进行造影以 及用Re-186标记的类似物进行治疗(Flanagan等，U.S.5556939，Lyle等， U.S.5382654和Albert等，U.S.5650134)。
血管生成是由原来存在的毛细管或以前的毛细小静脉形成新血 管的过程；其是多种生理过程的重要组成部分，包括排卵、胚胎发 育、伤口修复和心肌中侧枝血管生成。其还是一些病症如肿瘤生长 和转移、糖尿病性视网膜病和斑点变性疾病。该过程开始于对多种 细胞因子和生长因子应答从而激活已存在的血管内皮细胞。肿瘤释 放因子或血管生成因子通过与这些因子的特异性细胞表面受体作用 刺激血管内皮细胞。被激活的内皮细胞分泌降解这些血管基膜的 酶。然后内皮细胞增殖并侵入肿瘤组织。这些内皮细胞分化形成腔， 使已存在血管产生新血管的侧枝。这些新的血管再为肿瘤提供营养， 让其进一步生长并产生转移的途径。
在正常条件下，内皮细胞增殖是非常缓慢的过程，但是在胚胎 形成、排卵和伤口愈合期间，其在短时间内增加。细胞中这种临时的 增加被一些生长刺激因子和生长抑制因子联合控制而逆转。在病理 新血管形成中，此正常的平衡被破坏，导致内皮细胞增殖的连续增 加。已鉴定的一些原血管生成因子包括碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)、血管生成素、TGF-α、TGF-β和血管内皮生长因子(VEGF)。 而α-干扰素、β-干扰素和血小板反应蛋白是新血管形成抑制剂的实 例。
内皮细胞在细胞外基质中的增殖和迁移是通过与多种细胞粘附 分子作用来介导的(Folkman，J.，Nature Medicine，1995，1，27-31)。整 联蛋白是杂二聚细胞表面受体的一个变体系统，通过它们内皮细胞与 细胞外基质、彼此或与其它细胞连接。整联蛋白αvβ3是带有暴露的三 肽Arg-Gly-Asp部分的多种细胞外基质蛋白的受体，并介导细胞粘附 其配体：玻连蛋白、纤连蛋白和纤维蛋白原等。整联蛋白αvβ3在正常 血管上的表达最低，但是在多种人肿瘤的血管细胞上其表达显著上 调。αvβ3受体的作用是介导内皮细胞和细胞外基质的相互作用，并加 速细胞向血管生成信号肿瘤细胞方向的迁移。依赖于整联蛋白αvβ3的 中介，bFGF或α-TNF诱导新血管形成，而VEGF诱导的新血管形成依 赖于αvβ3(Cheresh等，Science，1955，270，1500-2)。诱导整联蛋白α1β1 和α2β1在内皮细胞表面上的表达是VEGF促进新血管形成的另一个重 要机理(Senger等，Proc.Natl.Acad，Sci USA，1997，84，13612-7)。
血管生成因子与内皮细胞表面受体如受体酪氨酸激酶DGFR、 FGFR、PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、tie、neuropilin-1、 endoglin、内皮唾液酸蛋白和Ax1。受体Flk-1/KDR、neuropilin-1和 Flt-1识别VEGF，而这些作用在VEGF诱发的血管生成中起了关键的 作用。受体酪氨酸激酶的Tie亚族也主要在血管形成期间表达。
由于血管生成对肿瘤生长和转移的重要性，开放了一些化疗方 法来干扰或阻止此过程。这些方法之一包括使用抗血管生成蛋白如 血管生成抑制素(angiostatin)和内抑制素(endostatin)。血管生成抑制 素是纤溶酶原的38 kDa片段，在动物模型中已表明它是内皮细胞增殖 的强抑制剂(O′Reilly等，Cell，1994，79，315-328)。内抑制素是胶原 XVIIId 20 KD的C末端片段，也已表明它是一种强抑制剂(O′Reilly等， Cell，1997，88，277-285)。在动物模型中已表明用内抑制素进行系统治 疗带来了强的抗肿瘤活性。但是，生物来源的这两种化疗制剂的人临 床实验受到了缺乏应用性的阻碍。
抗血管生成治疗的其它方法是使用与血管生成的脉管系统中表 达的内皮细胞表面受体相互作用的靶向部分，该部分连接化疗试剂。 Burrows和Thorpe(Proc.Nat.Acad.Sci，USA，1993，90，8996-9000)描述 了使用抗体-免疫毒素共轭物通过破坏肿瘤的脉管系统来消灭小鼠模 型中的肿瘤。此抗体是针对主要组织相合性复合体的内皮细胞II类 抗原产生的，然后与细胞毒试剂脱糖基化蓖麻毒A链轭合。该研究组 (Clin.Can.Res.，1995，1，1623-1634)研究了使用针对内皮细胞表面受 体endoglin产生的抗体，轭合脱糖基化的蓖麻毒A链。在小鼠模型中 这两类共轭物都表现出强的抗肿瘤活性。但是，给人常规使用时它们 仍具有缺点。因为对于大多数抗体或其它大的、外来蛋白质，存在相 当的免疫毒性的危险，这会限制或妨碍给人使用。另外，虽然脉管系 统靶向性可以改善连接的化疗试剂的局部浓度，但是这些试剂仍必须 从抗体载体裂解，并被转运或扩散进入细胞以产生细胞毒性。
因此，需要提供抗血管生成的药物和肿瘤或新脉管系统造影剂， 其不具有扩散性或转运差、可能性的免疫毒性、有限的应用和/或缺 乏特异性的缺点。
抗血管生成治疗的另一种应用是在治疗类风湿性关节炎(RA) 中。在RA中，侵润的巨噬细胞、免疫细胞或炎性细胞过度产生的血 管生成因子诱发高度血管化的血管翳向内生长。因此，需要有新的药 物来破坏高度血管化的血管翳，并因此治疗此疾病。
在治疗血管生成中，在局部缺血或灌注性差的身体区域中改善 血流也日益受到人们的青睐。一些研究者使用生长因子局部给药以 引起新的脉管系统在四肢或心脏形成。生长因子VEGF和bFGF对于此 应用是最普通的。最近的出版物包括：Takeshita，S.等，J.Clin.Invest.， 1994，93，662-670；和Schaper，W.和Schaper，J.，副循环：心脏，脑，肾， 四肢，Kluwer Academic Publishers，Boston，1993。例如，Henry，T.等(J. Amer.College Cardiology，1998，31，65A)描述了重组人VEGF通过治疗 性血管生成来改善患者中心肌灌注。患者接受rh VEGF的输液，并在 治疗后30和60天通过核灌注造影监控以确定心肌灌注的改善。通过 核灌注造影显示约50％的患者显示了改善，其中5/7通过血管造影术 显示了新的侧枝形成。因此，需要发现一种控制改善了的心脏血流的 方法，其靶向新的侧枝血管本身，而不象核灌注造影那样是新侧枝血 管的局部结果。
对一些心血管疾病的检测、造影和诊断需要改进，包括再狭 窄、动脉粥样硬化、心肌再灌注损伤和心肌局部缺血、昏迷或梗 塞。最近已确定在所有这些病症中，整联蛋白受体αvβ3扮演了重要角 色。
例如，进行了血管成形术或支架放置术的约30-50％的患者中发 生再狭窄并发症，其中逐渐增殖的表达αvβ3的血管平滑肌细胞引起新 的内膜增生和最终再闭塞(Cardiovascular Res.，1997，36，408-428；DDT， 1997，2，187-199；Current Pharm.Design，1997，3，545-584)。
由初期内皮损伤产生的动脉粥样硬化，其导致在损伤部位上的 单核细胞的募集和内膜下迁移。释放生长因子，其引起内侧平滑肌细 胞增殖并迁移至内膜层。迁移的平滑肌细胞表达αvβ3。
在再灌注损伤中，嗜中性白细胞移动是整联蛋白依赖性的，且 整联蛋白介导进入可变边缘区的初期侵润。因为嗜中性白细胞从边 缘区域移动到坏死区域，在再灌注后3至5小时内在侵润嗜中性白细胞 中发生了对α5β1、α4β1和αvβ5的诱导(Circulation，1999，100，1-275)。
已知冠状动脉的急性或慢性闭塞导致心脏中的新血管生成，因 为本身的侧枝血管需得到补充以试图减轻局部缺血。但是，即使逐步 的闭合也常带来梗塞的区域，因为所发生的新血管生成不足以防止损 伤。已证明心脏的新血管形成与生长因子VEGF和FGF表达的增加以 及生长因子受体flt-1和flk-1/KDR的上调有联系(Drugs，1999，58，391- 396)。
发明概述
本发明的一个目的是提供改进的抗血管生成的药物，其中含有 结合于在肿瘤新脉管系统中表达的玻连蛋白受体的靶向部分、选择 性存在的连接基团和放射性同位素。此玻连蛋白受体结合的化合物 将放射性同位素靶向于此肿瘤新脉管系统。放射β或α-粒子的放射性 同位素发射细胞毒量的离子化辐射，其导致细胞的死亡。辐射的穿透 能力排除了将细胞毒试剂扩散或被转运进入该细胞以造成细胞毒性 的需要。
本发明的另一个目的是提供治疗肿瘤类风湿性关节炎的药物。 这些药物含有与血管生成期间上调的受体结合的靶向部分、选择性 存在的连接基团和发射细胞毒辐射(即β粒子、α粒子和Auger或 Coster-Kronig电子)的放射性同位素。在类风湿性关节炎中，高度血管 化血管翳的向内生长是由侵润性巨噬细胞、免疫细胞或炎性细胞过 度产生的血管生成因子引起的。因此，发射细胞毒辐射的本发明的放 射性药物可以用来破坏新的血管生成的脉管系统，因此达到了治病目 的。
本发明的另一个目的是提供造影剂，其中含有与可造影部分(如 发射γ射线或正电子的放射性同位素、磁共振造影剂、X射线造影剂 或超声造影剂)轭合的玻连蛋白受体结合化合物。这些造影剂用于肿 瘤新脉管系统造影、心脏中治疗性血管生成的干预、应答急性或慢 性冠状血管闭塞，血管成形术后再狭窄，动脉粥样硬化和斑痕形成的 自然血管生成过程以及再灌注损伤。
本发明的另一个目的是提供用于制备本发明药物的化合物。这 些化合物包含含有与血管生成期间或心血管疾病期间上调的受体结 合的非肽类喹诺酮的靶向部分Q、选择性存在的连接基团Ln及金属螯 合剂或结合部分Ch。这些化合物可以具有连接于该金属螯合剂或结 合部分的一个或多个保护基。这些保护基为这些试剂长期保存提供 了改进的稳定性，并在放射性药物合成前或合成时立即除去。或者， 本发明的化合物包含含有与血管生成期间或心血管疾病期间上调的 受体结合的肽类或拟肽类(peptidomimetic)的靶向部分Q、选择性存 在的连接基团Ln及表面活性剂Sf。
本发明的药物可以用于诊断和/或治疗目的。本发明的诊断用放 射性药物是包含诊断用放射性核素(即具有可造影的γ射线或正电子放 射的放射性金属离子)。本发明的治疗性放射性药物是含有治疗用核 素、放射离子化辐射如β粒子、α粒子和Auger或Coster-Kronig电子的 放射性金属离子。
含发射γ射线或正电子的放射活性金属离子的药物用于肿瘤造影， 并通过γ闪烁照相术或正电子发射断层照相术。含发射γ射线或正电子 的放射活性金属离子的药物也用于治疗性血管生成造影，应答急性或 慢性冠状血管闭塞、血管成形术后再狭窄、动脉粥样硬化和斑痕形 成的自然血管生成过程的造影，以及γ闪烁照相术或正电子发射断层 照相术引起的再灌注损伤的造影。含发射放射性金属离子的粒子的 药物通过给肿瘤转运细胞毒量的辐射用于治疗癌症。含发射放射性 金属离子的粒子的药物也用于通过破坏血管生成性脉管系统的形成 来治疗类风湿性关节炎。含顺磁性金属离子的药物用作磁共振造影 剂。含一种或多种X射线吸收剂或原子序数为20或更大的“重”原子的 药物用作X射线造影剂。含生物相容性气体、液体载体和表面活性剂 微球的微泡用作超声造影剂。
发明详述
[1]因此，在第一个实施方案中，本发明提供了新的化合物，其 中包含：靶向部分和螯合剂，其中结合螯合剂的靶向部分是喹诺酮非 肽类，且其结合于血管生成期间上调的受体，而该化合物在靶向部分 和螯合剂之间具有0-1个连接基团。
[2]在优选的实施方案中，受体是整联蛋白αvβ3或αvβ5，而该化 合物是如下通式的化合物：
(Q)d-Ln-Ch或(Q)d-Ln-(Ch)d′
其中Q是式(II)的化合物：
包括其立体异构体形式，或其立体异构体形式的混合物，或其 药用盐或前药，其中：
R1e选自： 和
Ae是-CH2-或-N(R10e)-；
A1e和Be独立地是-CH2-或-N(R10e)-；
De是-N(R10e)-或-S-；
Ee-Fe是-C(R2e)＝C(R3e)-或-C(R2e)2C(R3e)2-；
Je是-C(R2e)-或-N-；
Ke、Le和Me独立地是-C(R2e)-或-C(R3e)-；
R2e和R3e独立地选自：
H、C1-C4烷氧基、NR11eR12e、卤素、NO2、CN、CF3、C1-C6烷 基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)、芳基(C1- C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基羰基和被0-4 个R7e取代的芳基，
或者，当R2e和R3e是相邻原子上的取代基时，它们可以与它们连 接的碳原子一起形成5-7元碳环或5-7元杂环芳香或非芳香环系，所述 碳环或杂环被0-2个选自如下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基、卤素、氰基、氨基、CF3和NO2；
R2ae选自：
H、C1-C10烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)、芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C2-C7烷基)羰基、芳基羰基、 (C2-C10烷氧基)羰基、C3-C7环烷氧羰基、C7-C11双环烷氧羰基、芳氧 羰基、芳基(C1-C10烷氧基)羰基、C1-C6烷基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰 基、芳基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰基和C3-C7环烷基羰基氧基(C1-C4 烷氧基)羰基；
R7e选自：
H、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、芳基、芳基(C1-C4烷基)- 、(C1-C4烷基)羰基、CO2R18ae、SO2R11e、SO2NR10eR11e、OR10e和 N(R11e)R12e；
Ue选自：
-(CH2)ne-、-(CH2)neO-(CH2)me-、-(CH2)neN(R12)-(CH2)me-、 -NH(CH2)ne-、-(CH2)ne-C(＝O)-(CH2)me-、-(CH2)neS(O)pe(CH2)me-、 -(CH2)neNHNH(CH2)me-、-N(R10e)C(＝O)-、-NHC(＝O)(CH2)ne-、 -C(＝O)N(R10e)-和-N(R10e)S(O)pe-；
Ge是N或CR19e；
We是-C(＝O)-N(R10e)-(C1-C3亚烷基)-，其中该亚烷基被R8e和R9e 取代：
R8e和R9e独立地选自：
H、CO2R18be、C(＝O)R18be、CONR17R18be、被0-1个R6e取代的C1- C10烷基、被0-1个R6e取代的C2-C10链烯基、被0-1个R6e取代的C2-C10链 炔基、被0-1个R6e取代的C3-C8环烷基、被0-1个R6e取代的C5-C6环烯 基、(C1-C10烷基)羰基、C3-C10环烷基(C1-C4烷基)-、被0-3个R6e取代 的苯基、被0-3个R6e取代的萘基、含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂 环，其中所述杂环可以是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述 杂环被0-2个R7e取代，被0-2个R7e取代的C1-C10烷氧基，羟基、硝基、 -N(R10e)R11e、-N(R16e)R17e、芳基(C0-C6烷基)羰基、芳基(C3-C6烷基)、 杂芳基(C1-C6烷基)、CONR18aeR20e、SO2R18ae和SO2NR18aeR20e，
条件是任何上述烷基、环烷基、芳基或杂芳基可以是未被取代 或独立地被1-2个R7e取代；
R6e选自：
H、C1-C10烷基、羟基、C1-C10烷氧基、硝基、C1-C10烷基羰 基、-N(R11e)R12e、氰基、卤素、CF3、CHO、CO2R18be、 C(＝O)R18be、CONR17eR18be、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、NR10eSO2R21e、S(O)pR11e、SO2NR10eR11e、被0-3 个选自卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和 -NMe2的基团取代的芳基、芳基(C1-C4烷基)-，所述芳基被0-3个选自卤 素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和-NMe2的基团 取代、及含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂环，其中所述杂环可以 是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述杂环被0-2个R7e取代；
R10e选自：
H，CF3，C3-C6链烯基，C3-C11环烷基，芳基，(C3-C11环烷基)甲基， 芳基(C1-C4烷基)和被0-2个R6e取代的C1-C10烷基；
R11e选自：
H、羟基、C1-C8烷基、C3-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环 烷基)甲基、C1-C6烷氧基、苄氧基、芳基、杂芳基、杂芳基(C1-C4烷 基)-、芳基(C1-C4烷基)、金刚烷基甲基和被0-2个R4e取代的C1-C10烷 基；
R4e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、(C1- C10烷基)羰基、芳基、杂芳基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷 基)-，其中所述芳基或杂芳基被0-2个独立地选自C1-C4烷基、C1-C4烷 氧基、F、C1、Br、CF3和NO2的取代基取代，
或者，当R10e和R11e都是同一氮原子上的取代基时(如在 -NR10eR11e中)，它们可以与它们连接的氮原子一起形成选自如下的杂 环：3-氮杂双环壬基、1，2，3，4-四氢-1-喹啉基、1，2，3，4-四氢-2-异喹啉 基、1-哌啶基、1-吗啉基、1-吡咯烷基、磺基吗啉基、噻唑烷基和1- 哌嗪基；所述杂环被0-3个选自如下的基团取代：C1-C6烷基、芳基、 杂芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C3-C7环烷基)羰基、 (C1-C6烷氧基)羰基、芳基(C1-C4烷氧基)羰基、C1-C6烷基磺酰基和芳 基磺酰基；
R12e选自：
H、C1-C6烷基、三苯基甲基、甲氧基甲基、甲氧基苯基二苯基 甲基、三甲硅烷基乙氧基甲基、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰 基、(C1-C6烷基)氨基羰基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷 基(C1-C4烷基)-、芳基、杂芳基(C1-C6烷基)羰基、杂芳基羰基、芳基 (C1-C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、芳基羰基、C1-C6烷基磺酰基、芳基 磺酰基、芳基(C1-C6烷基)磺酰基、杂芳基磺酰基、杂芳基(C1-C6烷基) 磺酰基、芳氧羰基和芳基(C1-C6烷氧基)羰基，其中所述芳基被0-2个 选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、CF3和硝基的取代基取代；
R16e选自：
-C(＝O)OR18ae、-C(＝O)R18be、-C(＝O)N(R18be)2、 -C(＝O)NHSO2R18ae、-C(＝O)NHC(＝O)R18be、-C(＝O)NHC(＝O)OR18ae、 -C(＝O)NHSO2NHR18be、-SO2R18ae、-SO2N(R18be)2和 -SO2NHC(＝O)OR18be；
R17e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)；
R18ae选自：
选择性地通过一个键取代在Ln上的C1-C8烷基、选择性地通过一 个键取代在Ln上的C3-C11环烷基、选择性地通过一个键取代在Ln上的 芳基(C1-C6烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的杂芳基(C1-C6 烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的(C1-C6烷基)杂芳基、选择 性地通过一个键取代在Ln上的联芳基(C1-C6烷基)、选择性地通过一 个键取代在Ln上的杂芳基、被3-4个R19e取代并选择性地通过一个键取 代在Ln上的苯基、被0-4个R19e取代并选择性地通过一个键取代在Ln上 的萘基以及与Ln连接的一个化学键，其中所述芳基或杂芳基选择性地 被0-4个R19e取代；
R18be是H或R18ae；
R19e选自：
H、卤素、CF3、CO2H、CN、NO2、-NR11eR12e、OCF3、C1-C8 烷基、C2-C6链烯基、C2-C6链炔基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)-、芳基(C1-C6烷基)-、C1-C6烷氧基、C1-C4烷氧羰基、芳基、 芳基-O-、芳基-SO2-、杂芳基和杂芳基-SO2-，其中所述芳基和杂芳基 被0-4个选自氢原子、卤素、CF3、C1-C3烷基和C1-C3烷氧基的基团取 代；
R20e选自：
羟基、C1-C10烷基氧基、C3-C11环烷基氧基、芳氧基、芳基(C1- C4烷基)氧基、C2-C10烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰 基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10 环烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10环烷氧羰基氧基(C1-C2烷基) 氧基-、C3-C10环烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、芳氧羰基(C1-C2烷基)氧 基-、芳氧羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、芳基羰基氧基(C1-C2烷基)氧 基-、C1-C5烷氧基(C1-C5烷基)羰基氧基(C1-C2烷基)氧基、(5-(C1-C5 烷基)-1，3-二氧杂-环戊-2-酮-基)甲氧基、(5-芳基-1，3-二氧杂-环戊-2- 酮-基)甲氧基和(R10e)(R11e)N-(C1-C10烷氧基)-；
R21e选自：
C1-C8烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环烷基)甲 基、芳基、芳基(C1-C4烷基)-和被0-2个R7e取代的C1-C10烷基；
R22e选自：
-C(＝O)-R18be、C(＝O)N(R18be)2、-C(＝O)NHSO2R18ae、 -C(＝O)NHC(＝O)OR18be、-C(＝O)NHC(＝O)R18ae和-C(＝O)NHSO2NHR18be；
Ye选自：
-COR20e、-SO3H、-PO3H、-CONHNHSO2CF3、 -CONHSO2R18ae、-NHCONHSO2R18ae、-CONHSO2NHR18be、 -NHCOCF3、-NHCONHSO2R18ae、-NHSO2R18ae、-OPO3H2、-OSO3H、 -PO3H2、-SO2NHCOR18ae、-SO2NHCO2R18ae、 和
me是0-2；
ne是0-4；
pe是0-2；
re是0-2；
条件如下：ne和me的选择应使连接R1e和Ye的原子数在8-14的范围 内；
d选自1，2，3，4，5，6，7，8，9和10；
d′是1-100；
Ln是下式的连接基团：
((W)h-(CR6R7)g)x-(Z)k-((CR6aR7a)g′-(W)h′)x′；
    W独立地选自：O、S、NH、NHC(＝O)、C(＝O)NH、
NR8C(＝O)、C(＝O)NR8、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、
NHC(＝S)NH、NHC(＝O)NH、SO2、SO2NH、(OCH2CH2)s、
(CH2CH2O)s′、(OCH2CH2CH2)s″、(CH2CH2CH2O)t和(aa)t′；
aa在每次出现时彼此独立地是氨基酸；
    Z选自：被0-3个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的C3-10环 烷基和被0-3个R10取代的含有1-4个独立地选自N、S和O的杂原 子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a和R8独立地选自：H、＝O、COOH、 SO3H、PO3H、被0-3个R10取代的C1-C5烷基、被0-3个R10取代的 芳基、被0-3个R10取代的苄基和被0-3个R10取代的C1-C5烷氧基、 NHC(＝O)R11、C(＝O)NHR11、NHC(＝O)NHR11、NHR11、R11和与 Ch连接的键；
R10独立地选自：与Ch连接的键、COOR11、C(＝O)NHR11、 NHC(＝O)R11、OH、NHR11、SO3H、PO3H、-OPO3H2、 -OSO3H、被0-3个R11取代的芳基、被0-1个R12取代的C1-C5烷基、 被0-1个R12取代的C1-C5烷氧基和被0-3个R11取代的含有1-4个独 立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R11在每次出现时彼此独立地选自：H、被0-1个R12取代的芳 基、被0-1个R12取代的含有1-4个独立地选自N、S和O的杂原子 的5-10元杂环环系、被0-1个R12取代的C3-10环烷基、被0-1个R12 取代的聚亚烷基二醇、被0-1个R12取代的碳水化合物、被0-1个 R12取代的环糊精、被0-1个R12取代的氨基酸、被0-1个R12取代的 多羧基烷基、被0-1个R12取代的多氮杂烷基、被0-1个R12取代的 含有2-10个氨基酸的肽、3，6-O-二磺基-B-D-吡喃半乳糖基、双 (膦酰基甲基)甘氨酸以及与Ch连接的键；
R12是与Ch连接的键；
k选自0、1和2；
h选自0、1和2；
h′选自0、1和2；
g选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g′选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
s选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
s′选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
s″选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
t选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
t′选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
x选自0、1、2、3、4和5；
x′选自0、1、2、3、4和5；
Ch是具有选自如下的结构式的金属结合单元：
A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7和A8在每次出现时独立地选 自NR13、NR13R14、S、SH、S(Pg)、O、OH、PR13、PR13R14、 P(O)R15R16和与Ln连接的键；
E是键、CH或间隔基，所述间隔基在每次出现时独立地选 自：被0-3个R17取代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0- 3个R17取代的C3-10环烷基、被0-3个R17取代的杂环-C1-10烷基，其 中的杂环基团是含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的 5-10元杂环环系、被0-3个R17取代的C6-10芳基-C1-10烷基、被0-3 个R17取代的C1-10烷基-C6-10芳基-、被0-3个R17取代的含有1-4个 彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R13和R14彼此独立地选自：与Ln连接的键、氢、被0-3个R17取 代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个R17取代的C1-10 环烷基、被0-3个R17取代的杂环-C1-10烷基，其中的杂环基团是含 有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、 被0-3个R17取代的C6-10芳基-C1-10烷基、被0-3个R17取代的C1-10烷 基-C6-10芳基-、被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S 和O的杂原子的5-10元杂环环系及电子，条件是，当R13或R14之 一是电子时，则另一个也是电子；
或者，R13和R14合在一起形成＝C(R20)(R21)；
R15和R16彼此独立地选自与Ln连接的键、-OH、被0-3个R17 取代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个R17取代的 C3-10环烷基、被0-3个R17取代的杂环-C1-10烷基，其中的杂环基团 是含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环 系、被0-3个R17取代的C6-10芳基-C1-10烷基、被0-3个R17取代的C1-10 烷基-C6-10芳基-、被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独立地选自 N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R17在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的键、＝O、 F、Cl、Br、I、-CF3、-CN、-CO2R18、-C(＝O)R18、 -C(＝O)N(R18)2、-CHO、-CH2OR18、-OC(＝O)R18、 -OC(＝O)OR18a、-OR18、-OC(＝O)N(R18)2、-NR19C(＝O)R18、 -NR19C(＝O)OR18a、-NR19C(＝O)N(R18)2、-NR19SO2N(R18)2、 -NR19SO2R18a、-SO3H、-SO2R18a、-SR18、-S(＝O)R18a、 -SO2N(R18)2、-N(R18)2、-NHC(＝S)NHR18、＝NOR18、NO2、 -C(＝O)NHOR18、-C(＝O)NHNR18R18a、-OCH2CO2H、2-(1-吗啉基) 乙氧基、C1-C5烷基、C2-C4链烯基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基 甲基、C2-C6烷氧基烷基、被0-2个R18取代的芳基、含有1-4个彼 此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R18、R18a和R19在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的 键、H、C1-C6烷基、苯基、苄基、C1-C6烷氧基、卤化物、硝 基、氰基和三氟甲基；
Pg是巯基保护基；
R20和R21彼此独立地选自：H、C1-C10烷基、-CN、 -CO2R25、-C(＝O)R25、-C(＝O)N(R25)2、被0-3个R23取代的C2-C10 1- 烯烃、被0-3个R23取代的C2-C10 1-炔烃、被0-3个R23取代的芳 基、被0-3个R23取代的含有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂 原子的不饱和5-10元杂环环系、被0-3个R23取代的不饱和C3-10碳 环；
    或者，R20和R21与它们所连接的二价碳基团合在一起形成：
    R22和R23彼此独立地选自：H、R24、被0-3个R24取代的C1-C10
烷基、被0-3个R24取代的C2-C10链烯基、被0-3个R24取代的C2-C10
链炔基、被0-3个R24取代的芳基、被0-3个R24取代的含有1-4个彼
此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、被0-3个R24
取代的C3-10碳环；
    或者，R22、R23合在一起形成稠合芳香族环系或含有1-4个
彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
    a和b表示选择性双键的位置，n是0或1；
    R24在每次出现时彼此独立地选自：＝O、F、Cl、Br、I、
-CF3、-CN、-CO2R25、-C(＝O)R25、-C(＝O)N(R25)2、-N(R25)3+、
-CH2OR25、-OC(＝O)R25、-OC(＝O)OR25a、-OR25、
-OC(＝O)N(R25)2、-NR26C(＝O)R25、-NR26C(＝O)OR25a、
-NR26C(＝O)N(R25)2、-NR26SO2N(R25)2、-NR26SO2R25a、-SO3H、
-SO2R25a、-SR25、-S(＝O)R25a、-SO2N(R25)2、-N(R25)2、＝NOR25、
-C(＝O)NHOR25、-OCH2CO2H和2-(1-吗啉基)乙氧基；而
    R25、R25a和R26在每次出现时彼此独立地选自：氢和C1-C6烷 基；
    及其可药用盐。
[3]在更优选的实施方案中，本发明提供了化合物，其中：Q是下 式(IV)的化合物：
包括其立体异构体形式，或其立体异构体形式的混合物，或其 药用盐或前药，其中：
R1e选自： 和
R2e和R3e独立地选自：
H、C1-C4烷氧基、NR11eR12e、卤素、NO2、CN、CF3、C1-C6烷 基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)、芳基(C1- C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基羰基和被0-4 个R7e取代的芳基，
或者，当R2e和R3e是相邻原子上的取代基时，它们可以与它们连 接的碳原子一起形成5-7元碳环或5-7元杂环芳香或非芳香环系，所述 碳环或杂环被0-2个选自如下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基、卤素、氰基、氨基、CF3和NO2；
R2ae选自：
H、C1-C10烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)、芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C2-C7烷基)羰基、芳基羰基、 (C2-C10烷氧基)羰基、C3-C7环烷氧羰基、C7-C11双环烷氧羰基、芳氧 羰基、芳基(C1-C10烷氧基)羰基、C1-C6烷基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰 基、芳基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰基和C3-C7环烷基羰基氧基(C1-C4 烷氧基)羰基；
R7e选自：
H、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、芳基、芳基(C1-C4烷基)- 、(C1-C4烷基)羰基、CO2R18ae、SO2R11e、SO2NR10eR11e、OR10e和 N(R11e)R12e；
Ue选自：
-(CH2)ne-、-(CH2)neO-(CH2)me-、-NH(CH2)ne-、 -(CH2)ne-C(＝O)-(CH2)me-、-(CH2)neS(O)pe(CH2)me-、-(CH2)neNHNH(CH2)me-、 -N(R10e)C(＝O)-、-NHC(＝O)(CH2)ne-和-C(＝O)N(R10e)-；
Ge是N或CR19e；
R8e选自：
H、CO2R18be、C(＝O)R18be、CONR17R18be、被0-1个R6e取代的C1- C10烷基、被0-1个R6e取代的C2-C10链烯基、被0-1个R6e取代的C2-C10链 炔基、被0-1个R6e取代的C3-C8环烷基、被0-1个R6e取代的C5-C6环烯 基、(C1-C10烷基)羰基、C3-C10环烷基(C1-C4烷基)-、被0-3个R6e取代 的苯基、被0-3个R6e取代的萘基、含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂 环，其中所述杂环可以是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述 杂环被0-2个R7e取代；
R9e选自：
被0-1个R6e取代的C1-C10烷基、被0-2个R7e取代的C1-C10烷氧 基、H、硝基、N(R11e)R12e、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、-NR10eSO2R21e、羟基、OR22e、-N(R10e)R11e、 -N(R16e)R17e、芳基(C0-C6烷基)羰基，芳基(C1-C6烷基)、杂芳基(C1-C6烷 基)、CONR18aeR20e、SO2R18ae和SO2NR18aeR20e，
条件是任何上述烷基、环烷基、芳基或杂芳基可以是未被取代 或独立地被1-2个R7e取代；
R6e选自：
H、C1-C10烷基、羟基、C1-C10烷氧基、硝基、C1-C10烷基羰 基、-N(R11e)R12e、氰基、卤素、CF3、CHO、CO2R18ae、C(＝O)R18be、 CONR17eR18be、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、NR10eSO2R21e、S(O)pR11e、SO2NR10eR11e、被0-3 个选自卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和 -NMe2的基团取代的芳基、芳基(C1-C4烷基)-，所述芳基被0-3个选自卤 素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和-NMe2的基团 取代、及含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂环，其中所述杂环可以 是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述杂环被0-2个R7e取代；
R10e选自：
H、CF3、C3-C6链烯基、C3-C11环烷基、芳基、(C3-C11环烷基)甲 基、芳基(C1-C4烷基)和被0-2个R6e取代的C1-C10烷基；
R11e选自：
H、羟基、C1-C8烷基、C3-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环 烷基)甲基、C1-C6烷氧基、苄氧基、芳基、杂芳基、杂芳基(C1-C4烷 基)-、芳基(C1-C4烷基)、金刚烷基甲基和被0-2个R4e取代的C1-C10烷 基；
R4e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、杂芳基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)-，其中所述芳基 或杂芳基被0-2个独立地选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、F、Cl、Br、 CF3和NO2的取代基取代，
R12e选自：
H、C1-C6烷基、三苯基甲基、甲氧基甲基、甲氧基苯基二苯基 甲基、三甲硅烷基乙氧基甲基、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰 基、(C1-C6烷基)氨基羰基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷 基(C1-C4烷基)-、芳基、杂芳基(C1-C6烷基)羰基、杂芳基羰基、芳基 (C1-C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、芳基羰基、C1-C6烷基磺酰基、芳基 磺酰基、芳基(C1-C6烷基)磺酰基、杂芳基磺酰基、杂芳基(C1-C6烷基) 磺酰基、芳氧羰基和芳基(C1-C6烷氧基)羰基，其中所述芳基被0-2个 选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、CF3和硝基的取代基取代；
R16e选自：
-C(＝O)OR18ae、-C(＝O)R18be、-C(＝O)N(R18be)2、-SO2R18ae和 -SO2N(R18be)2；
R17e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)；
R18ae选自：
选择性地通过一个键取代在Ln上的C1-C8烷基、选择性地通过一 个键取代在Ln上的C3-C11环烷基、选择性地通过一个键取代在Ln上的 芳基(C1-C6烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的杂芳基(C1-C6 烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的(C1-C6烷基)杂芳基、选择 性地通过一个键取代在Ln上的联芳基(C1-C6烷基)、选择性地通过一 个键取代在Ln上的杂芳基、被3-4个R19e取代并选择性地通过一个键取 代在Ln上的苯基、被0-4个R19e取代并选择性地通过一个键取代在Ln上 的萘基以及与Ln连接的一个化学键，其中所述芳基或杂芳基选择性地 被0-4个R19e取代；
R18be是H或R18ae；
R19e选自：
H、卤素、CF3、CO2H、CN、NO2、-NR11eR12e、OCF3、C1-C8 烷基、C2-C6链烯基、C2-C6链炔基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)-、芳基(C1-C6烷基)-、C1-C6烷氧基、C1-C4烷氧羰基、芳基、 芳基-O-、芳基-SO2-、杂芳基和杂芳基-SO2-，其中所述芳基和杂芳基 被0-4个选自氢原子、卤素、CF3、C1-C3烷基和C1-C3烷氧基的基团取 代；
R20e选自：
羟基、C1-C10烷基氧基、C3-C11环烷基氧基、芳氧基、芳基(C1- C4烷基)氧基、C2-C10烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰 基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10 环烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10环烷氧羰基氧基(C1-C2烷基) 氧基-、C3-C10环烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、芳氧羰基(C1-C2烷基)氧 基-、芳氧羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、芳基羰基氧基(C1-C2烷基)氧 基-、C1-C5烷氧基(C1-C5烷基)羰基氧基(C1-C2烷基)氧基、(5-(C1-C5烷 基)-1，3-二氧杂-环戊-2-酮-基)甲氧基、(5-芳基-1，3-二氧杂-环戊-2-酮- 基)甲氧基和(R10e)(R11e)N-(C1-C10烷氧基)-；
R21e选自：
C1-C8烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环烷基)甲 基、芳基、芳基(C1-C4烷基)-和被0-2个R7e取代的C1-C10烷基；
R22e选自：
-C(＝O)-R18be、-C(＝O)N(R18be)2、-C(＝O)NHSO2R18ae、 -C(＝O)NHC(＝O)OR18be、-C(＝O)NHC(＝O)R18ae和-C(＝O)NHSO2NHR18be；
me是0-2；
ne是0-4；而
pe是0-2；
条件如下：ne和me的选择应使连接式(IV)中R1e和-COR20e的原子 数在8-14的范围内；
d选自1，2，3，4和5；
d′是1-50；
    W独立地选自：O、S、NH、NHC(＝O)、C(＝O)NH、
NR8C(＝O)、C(＝O)NR8、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、
NHC(＝S)NH、NHC(＝O)NH、SO2、(OCH2CH2)s、(CH2CH2O)s′、
(OCH2CH2CH2)s″、(CH2CH2CH2O)t和(aa)t′；
aa在每次出现时彼此独立地是氨基酸；
    Z选自：被0-1个R10取代的芳基、被0-1个R10取代的C3-10环
烷基和被0-1个R10取代的含有1-4个独立地选自N、S和O的杂原
子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a和R8独立地选自：H、＝O、COOH、 SO3H、PO3H、被0-1个R10取代的C1-C5烷基、被0-1个R10取代的 芳基、被0-1个R10取代的苄基和被0-1个R10取代的C1-C5烷氧基、 NHC(＝O)R11、C(＝O)NHR11、NHC(＝O)NHR11、NHR11、R11和与 Ch连接的键；
k是0或1；
s选自0、1、2、3、4和5；
s′选自0、1、2、3、4和5；
s″选自0、1、2、3、4和5；
t选自0、1、2、3、4和5；
A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7和A8在每次出现时独立地选 自NR13、NR13R14、S、SH、S(Pg)、OH和与Ln连接的键；
E是键、CH或间隔基，所述间隔基在每次出现时独立地选 自：被0-3个R17取代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0- 3个R17取代的C3-10环烷基和被0-3个R17取代的含有1-4个彼此独 立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R13和R14彼此独立地选自：与Ln连接的键、氢、被0-3个R17取 代的C1-C10烷基、被0-3个R17取代的芳基、被0-3个R17取代的含 有1-4个彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系及 电子，条件是，当R13或R14之一是电子时，则另一个也是电子；
或者，R13和R14合在一起形成＝C(R20)(R21)；
R17在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的键、＝O、 F、Cl、Br、-I、-CF3、-CN、-CO2R18、-C(＝O)R18、 -C(＝O)N(R18)2、-CH2OR18、-OC(＝O)R18、-OC(＝O)OR18a、 -OR18、-OC(＝O)N(R18)2、-NR19C(＝O)R18、-NR19C(＝O)OR18a、 -NR19C(＝O)N(R18)2、-NR19SO2N(R18)2、-NR19SO2R18a、-SO3H、 -SO2R18a、-S(＝O)R18a、-SO2N(R18)2、-N(R18)2、-NHC(＝S)NHR18、 ＝NOR18、-C(＝O)NHNR18R18a、-OCH2CO2H和2-(1-吗啉基)乙氧基；
R18、R18a和R19在每次出现时彼此独立地选自：与Ln连接的 键、H和C1-C6烷基；
R20和R21彼此独立地选自：H、C1-C5烷基、-CO2R25、被0-3 个R23取代的C2-C5 1-烯烃、被0-3个R23取代的C2-C5 1-炔烃、被0- 3个R23取代的芳基和被0-3个R23取代的含有1-4个彼此独立地选自 N、S和O的杂原子的不饱和5-10元杂环环系；
或者，R20和R21与它们所连接的二价碳基团合在一起形成：
R22和R23彼此独立地选自：H和R24；
或者，R22、R23合在一起形成稠合芳香族环系或含有1-4个
彼此独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
a和b表示选择性双键的位置，n是0或1；
R24在每次出现时彼此独立地选自：-CO2R25、
-C(＝O)N(R25)2、-CH2OR25、-OC(＝O)R25、-OR25、-SO3H、
-N(R25)2和-OCH2CO2H；而
R25在每次出现时独立地选自：氢和C1-C3烷基。
[4]在更加优选的实施方案中，本发明提供了包括其立体异构 体形式，或其立体异构体形式的混合物，或其药用盐或前药的化合物， 其中：
R1e选自： 和
R2e和R3e独立地选自：
H、C1-C4烷氧基、NR11eR12e、卤素、NO2、CN、CF3、C1-C6烷 基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)、芳基(C1- C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基羰基和被0-4 个R7e取代的芳基，
或者，当R2e和R3e是相邻原子上的取代基时，它们可以与它们连 接的碳原子一起形成5-7元碳环或5-7元杂环芳香或非芳香环系，所述 碳环或杂环被0-2个选自如下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基、卤素、氰基、氨基、CF3和NO2；
R2ae选自：
H、C1-C10烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)、芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C2-C7烷基)羰基、芳基羰基、 (C2-C10烷氧基)羰基、C3-C7环烷氧羰基、C7-C11双环烷氧羰基、芳氧 羰基、芳基(C1-C10烷氧基)羰基、C1-C6烷基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰 基、芳基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰基和C3-C7环烷基羰基氧基(C1-C4 烷氧基)羰基；
R7e选自：
H、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、芳基、芳基(C1-C4烷基)- 、(C1-C4烷基)羰基、CO2R18ae、SO2R11e、SO2NR10eR11e、OR10e和 N(R11e)R12e；
Ue选自：
-(CH2)ne-、-NH(CH2)ne-、-N(R10e)C(＝O)-和-NHC(＝O)(CH2)ne-；
Ge是N或CR19e；
R8e是H；
R9e选自：
H、硝基、N(R11e)R12e、OC(＝O)R10e、OR10e、 OC(＝O)NR10eR11e、NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、 NR10eC(＝O)NR10eR11e、NR10eSO2NR10eR11e、-NR10eSO2R21e、羟基、 OR22e、-N(R10e)R11e、-N(R16e)R17e、芳基(C0-C4烷基)羰基，芳基(C1-C4 烷基)、杂芳基(C1-C4烷基)、CONR18aeR20e、SO2R18ae和SO2NR18aeR20e，
条件是任何上述烷基、环烷基、芳基或杂芳基可以是未被取代 或独立地被1-2个R7e取代；
R10e选自：
H、三氟甲基、C3-C6链烯基、C3-C6环烷基、芳基、(C3-C6环烷 基)甲基、芳基(C1-C4烷基)和被0-2个R6e取代的C1-C4烷基；
R6e选自：
H、C1-C4烷基、羟基、C1-C4烷氧基、硝基、C1-C4烷基羰基、 -N(R11e)R12e、氰基、卤素、CF3、CHO、CO2R18be、C(＝O)R18be、 CONR17eR18be、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、NR10eSO2R21e、S(O)pR11e、SO2NR10eR11e、被0-3 个选自卤素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、三氟甲基、S(O)meMe和 -NMe2的基团取代的芳基、芳基(C1-C4烷基)-，所述芳基被0-3个选自卤 素、C1-C4烷氧基、C1-C4烷基、三氟甲基、S(O)meMe和-NMe2的基团 取代、及含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂环，其中所述杂环可以 是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述杂环被0-2个R7e取代；
R11e选自：
H、羟基、C1-C4烷基、C3-C6链烯基、C3-C6环烷基、(C3-C6环烷 基)甲基、C1-C4烷氧基、苄氧基、芳基、杂芳基、杂芳基(C1-C4烷 基)-、芳基(C1-C4烷基)、金刚烷基甲基和被0-2个R4e取代的C1-C4烷基；
R4e选自：
H、C1-C4烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、杂芳基、芳基(C1-C4烷基)-和杂芳基(C1-C4烷基)-，其中所述芳基 或杂芳基被0-2个独立地选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、F、Cl、Br、 CF3和NO2的取代基取代，
R12e选自：
H、C1-C4烷基、(C1-C4烷基)羰基、(C1-C4烷氧基)羰基、苯基 (C1-C4烷基)-、苯基磺酰基、苯基氧羰基和苯基(C1-C4烷氧基)羰基， 其中所述苯基被0-2个选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、CF3和硝 基的取代基取代；
R16e选自：
-C(＝O)OR18ae、-C(＝O)R18be、-C(＝O)N(R18be)2、-SO2R18ae和 -SO2N(R18be)2；
R17e选自：
H、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)；
R18ae选自：
选择性地通过一个键取代在Ln上的C1-C8烷基、选择性地通过一 个键取代在Ln上的C3-C11环烷基、选择性地通过一个键取代在Ln上的 芳基(C1-C6烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的杂芳基(C1-C6 烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的(C1-C6烷基)杂芳基、选择 性地通过一个键取代在Ln上的联芳基(C1-C6烷基)、选择性地通过一 个键取代在Ln上的杂芳基、被3-4个R19e取代并选择性地通过一个键取 代在Ln上的苯基、被0-4个R19e取代并选择性地通过一个键取代在Ln上 的萘基以及与Ln连接的一个化学键，其中所述芳基或杂芳基选择性地 被0-4个R19e取代；
R18be是H或R18ae；
R19e选自：
H、卤素、CF3、CO2H、CN、NO2、-NR11eR12e、OCF3、C1-C6 烷基、C2-C6链烯基、C2-C6链炔基、C3-C6环烷基、C3-C6环烷基(C1- C4烷基)-、芳基(C1-C4烷基)-、C1-C4烷氧基、C1-C4烷氧羰基、芳基、 芳基-O-、芳基-SO2-、杂芳基和杂芳基-SO2-，其中所述芳基和杂芳基 被0-4个选自氢原子、卤素、CF3、C1-C3烷基和C1-C3烷氧基的基团取 代；
R20e选自：
羟基、C1-C6烷基氧基、C3-C6环烷基氧基、芳氧基、芳基(C1-C4 烷基)氧基、C2-C10烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰基 氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10环 烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10环烷氧羰基氧基(C1-C2烷基) 氧基-、C3-C10环烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、芳氧羰基(C1-C2烷基)氧 基-、芳氧羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、芳基羰基氧基(C1-C2烷基)氧 基-、C1-C5烷氧基(C1-C5烷基)羰基氧基(C1-C2烷基)氧基、(5-(C1-C5烷 基)-1，3-二氧杂-环戊-2-酮-基)甲氧基、(5-芳基-1，3-二氧杂-环戊-2-酮- 基)甲氧基和(R10e)(R11e)N-(C1-C10烷氧基)-；
R21e选自：
C1-C4烷基、C2-C6链烯基、C3-C6环烷基、(C3-C6环烷基)甲基、 芳基、芳基(C1-C4烷基)-和被0-2个R7e取代的C1-C10烷基；
R22e选自：
-C(＝O)-R18be、-C(＝O)N(R18be)2、-C(＝O)NHSO2R18ae、 -C(＝O)NHC(＝O)OR18be、-C(＝O)NHC(＝O)R18ae和-C(＝O)NHSO2NHR18be；
me是0-2；
ne是0-4；而
pe是0-2；
Ch是
A1选自基团：OH和与Ln连接的键；
A2、A4和A6各自是N；
A3、A5和A8各自是OH；
A7是与Ln连接的键或与Ln连接的NH-化学键；
E是被0-1个R17取代的C2烷基；
R17是＝O；
或者，Ch是
A1选自基团：OH和与Ln连接的键；
A2、A3和A4各自是N；
A5、A6和A8各自是OH；
A7是与Ln连接的键；
E是被0-1个R17取代的C2烷基；
R17是＝O；
或者，Ch是
A1是NH2或N＝C(R20)(R21)；
E是化学键；
A2是NHR13；
R13是被R17取代的杂环，该杂环选自吡啶或嘧啶；
R17选自与Ln连接的化学键、C(＝O)NHR18和C(＝O)R18；
R18是与Ln连接的化学键；
R24选自基团：-CO2R25、-OR25、-SO3H和-N(R25)2；而
R25在每次出现时独立地选自基团：氢和甲基。
[5]在另一个更加优选的实施方案中，本发明提供了化合物，包 括其对映异构和非对映异构形式、或其对映异构或非对映异构形式 的混合物、或其药用盐或前药，其中Q选自：
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰 基氨基]-2-(3，5-二甲基异恶唑-4-基磺酰基氨基)丙酸，
3-(7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰 基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰 基氨基]-2-(正丁氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰 基氨基]-2-(正丁基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-(正丁氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-(苯基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-(正丁基磺酰基)氨基丙酸，
3-[7-[(2-氨基噻唑-4-基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰 基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰 基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基 氨基]-2-(3，5-二甲基异恶唑-4-基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基 氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-(7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基 氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基 氨基]-2-((4-联苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基 氨基]-2-(1-萘基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(苯并咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(4-甲基咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(4，5-二甲基咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(4，5，6，7-四氢苯并咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹 啉-4-酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(吡啶-2-基氨基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基 氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-(2-氨基吡啶-6-基)-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基羰基氨 基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(7-氮杂苯并咪唑-2-基)甲基]-1-甲基-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(苯并咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]丙酸，
3-[7-[(吡啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮- 3-基羰基氨基]丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(正丁氧基羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(苯基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(正丁基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉- 4-酮-3-基羰基氨基]-2-(正丁氧基羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(苯基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-(正丁基磺酰基)氨基丙酸，
3-[7-[(2-氨基噻唑-4-基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮- 3-基羰基氨基]-2-(苯基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(2-氨基噻唑-4-基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮- 3-基羰基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑啉-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(四氢嘧啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-(苄氧羰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-(苯基磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-((2，6-二氯苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-((4-联苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(苯并咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4- 酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(4-甲基咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉- 4-酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(4，5-二甲基咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟 喹啉-4-酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(4，5，6，7-四氢苯并咪唑-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8- 二氟喹啉-4-酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-[(吡啶-2-基氨基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3- 基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，
3-[7-(2-氨基吡啶-6-基)-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉-4-酮-3-基 羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸，及
3-[7-[(7-氮杂苯并咪唑-2-基)甲基]-1-(2-苯基乙基)-6，8-二氟喹啉- 4-酮-3-基羰基氨基]-2-((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基氨基)丙酸。
[6]在另一个更加优选的实施方案中，本发明提供了选自如下化 合物：
2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨 基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯 基)苯基)-磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3- 氢醌基))羰基氨基)丙酸；
3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨 基)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二 烷基)乙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯 基)磺酰基)氨基)丙酸；
2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨 基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙 氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲 基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸；
3-((1-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶基))羰 基氨基)丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸；
3-((1-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶基))羰 基氨基)丙基)-7-(((1-羟基咪唑-2-基)氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基 氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸；
3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨 基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)-乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙 酰基氨基)丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨 基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸；
2-(2-氮杂-2-(5-(N-(1，3-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨 基)甲基)4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)(2-吡啶基))氨基)乙烯基)苯磺酸；
2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环 十二烷基乙酰基氨基)-6-氨基己酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基) 氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基 氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸；
2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环 十二烷基乙酰基氨基)-6-(2-(双(膦酰基甲基)氨基)乙酰基氨基)己酰基 氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯 基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌 基))羰基氨基)丙酸共轭物；和
2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2-((2-((2-(双(羧甲基)氨基)乙基)(羧甲 基)氨基)乙基)(羧基甲基)氨基)乙酰基氨基)-3-磺基丙基)丙氧基)乙氧 基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3- ((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸； 和
或其药用盐。
[7]在进一步优选的实施方案中，本发明提供一种含有权利要 求2的化合物或其药用盐以及药用载体的试剂盒。
[8]在另一个更优选的实施方案中，所述试剂盒还含有一种或 多种辅助配体和还原剂。
[9]在另一个更优选的实施方案中，辅助配体是tricine和 TPPTS。
[10]在另一个更优选的实施方案中，还原剂是锡(II)。
[11]在第二个实施方案中，本发明提供新的诊断或治疗用金属 药物组合物，该组合物含有：金属、能够螯合金属和靶向部分的螯合 剂，其中的靶向部分与螯合剂相结合，所述靶向部分是喹诺酮非肽 且与在血管生成过程中上调的受体相结合，并且所述化合物在靶向 部分和螯合剂之间有0-1个连接基团。
[12]在另一个优选的实施方案中，金属药物是诊断用放射性药 物，所述金属是选自99mTc、95Tc、111In、62Cu、64Cu、67Ga和68Ga的 放射性同位素，且在所述非肽靶向部分和螯合剂之间存在连接基 团。
[13]在另一个更优选的实施方案中，靶向部分是喹诺酮非肽， 受体是αvβ3或αvβ5。
[14]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是99mTc或 95Tc，所述放射性药物还含有能够稳定放射性药物的第一辅助配体和 第二辅助配体。
[15]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是99mTc。
[16]在另一个优选的实施方案中，放射性药物选自如下：
99mTc(2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-(二氮烯基(diazenido))(3-吡啶基)) 羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基)磺酰 基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基 氨基)丙酸)(tricine)(TPPTS)；
99mTc(2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-(二氮烯基)(3-吡啶基))羰基氨基) 丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺 酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰 基氨基)丙酸)(tricine)(TPPDS)；
99mTc(3-((1-(3-((6-(二氮烯基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙基)-7-((咪 唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基) 磺酰基)氨基)丙酸)(tricine)(TPPTS)；
99mTc(3-((1-(3-((6-(二氮烯基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙基)-7-(((1- 羟基咪唑-2-基)氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三 甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸)(tricine)(TPPTS)；
99mTc(3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-(二氮烯基)(3-吡啶基))羰基氨 基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基)-7-((咪 唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基) 磺酰基)氨基)丙酸)(tricine)(TPPTS)；
99mTc(2-(2-(5-(N-(1，3-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨 基)甲基)4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)(2-吡啶基)二氮烯基))(tricine)(TPPTS)；
99mTc(3-{[1-(3-{2-[(6-(二氮烯基)(3-吡啶基))羰基氨基](2R)-3-磺 基丙基}丙基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代(3-氢醌基)]羰基氨 基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸)(tricine)(TPPTS)。
[17]在另一个优选的实施方案中，所述放射性同位素是111In。
[18]在另一个优选的实施方案中，所述放射性药物选自如下：
[19]在另一个优选的实施方案中，金属药物是治疗用放射性药 物，所述金属是选自186Re、188Re、153Sm、166Ho、177Lu、149Pm、 90Y、212Bi、103Pd、109Pd、159Gd、140La.、198Au、199Au、169Yb、 175Yb、165Dy、166Dy、67Cu、105Rh、111Ag和192Ir的放射性同位素，非 肽靶向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[20]在另一个更优选的实施方案中，靶向部分是喹诺酮非肽， 受体是αvβ3或αvβ5。
[21]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是
153Sm。
[22]在另一个更优选的实施方案中，放射性同位素是
177Lu。
[23]在另一个优选的实施方案中，放射性药物选自如下： 和
[24]在另一个优选的实施方案中，放射性同位素是90Y。
[25]在另一个优选的实施方案中，放射性药物选自如下： 和
[26]在另一个更优选的实施方案中，金属药物是MRI造影剂， 所述金属是选自Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)的顺磁金属离子， 靶向部分是喹诺酮非肽且在靶向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[27]在另一个更优选的实施方案中，靶向部分是喹诺酮非肽， 受体是αvβ3或αvβ5。
[28]在另一个更优选的实施方案中，金属离子是Gd(III)。
[29]在另一个更优选的实施方案中，造影剂是：
[30]在另一个更优选的实施方案中，金属药物是X-射线造影 剂，所述金属选自Re、Sm、Ho、Lu、Pm、Y、Bi、Pd、Gd、La、 Au、Yb、Dy、Cu、Rh、Ag和Ir，靶向部分是喹诺酮非肽，受体是 αvβ3或αvβ5，并且在靶向部分和螯合剂之间存在连接基团。
[31]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中治疗 类风湿性关节炎的新方法，该方法包括：通过注射或输注向患者施用 能够定位于新血管生成脉管系统内的权利要求19所述的治疗用放射 性药物。
[32]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中治疗 癌症的新方法，该方法包括：通过注射或输注向需要治疗的患者施用 权利要求19所述的治疗用放射性药物。
[33]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对血 管生成进行造影的新方法，该方法包括：(1)通过注射或输注向患者施 用权利要求11所述的诊断用放射性药物、MRI造影剂或X-射线造影 剂；(2)在新血管生成所在的区域对患者造影。
[34]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症造影的新方法，该方法包括：(1)通过注射或输注向患者施用权利要 求12的诊断用放射性药物；(2)用平面或SPECTγ闪烁照相术或正电子 发射X线断层照相术给患者造影。
[35]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症造影的新方法，该方法包括：(1)施用权利要求26的MRI造影剂；(2) 用磁共振成像给患者造影。
[36]在另一个更优选的实施方案中，本发明提供在患者中对癌 症造影的新方法，该方法包括：(1)施用权利要求30的X-射线造影剂； (2)用计算机控制的X-射线断层照相术对患者造影。
[37]在第三个实施方案中，本发明提供新化合物，该化合物含 有靶向部分和表面活性剂，其中的靶向部分与表面活性剂相结合， 所述靶向部分是非肽并且与在血管生成过程中上调的受体相结合， 并且所述化合物在靶向部分和表面活性剂之间有0-1个连接基团。
[38]在一个优选的实施方案中，靶向部分包含喹诺酮非肽，且 在靶向部分和表面活性剂之间存在连接基团。
[39]在一个更优选的实施方案中，受体是整联蛋白αvβ3或 αvβ5，所述化合物是下式的化合物：
       (Q)d-Ln-Sf
其中Q是式(II)的化合物：
包括其立体异构体形式，或其立体异构体形式的混合物，或其 药用盐或前药，其中：
R1e选自： 和
Ae是-CH2-或-N(R10e)-；
A1e和Be独立地是-CH2-或-N(R10e)-；
De是-N(R10e)-或-S-；
Ee-Fe是-C(R2e)＝C(R3e)-或-C(R2e)2C(R3e)2-；
Je是-C(R2e)-或-N-；
Ke、Le和Me独立地是-C(R2e)-或-C(R3e)-；
R2e和R3e独立地选自：
H、C1-C4烷氧基、NR11eR12e、卤素、NO2、CN、CF3、C1-C6烷 基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)、芳基(C1- C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基羰基和被0-4 个R7e取代的芳基，
或者，当R2e和R3e是相邻原子上的取代基时，它们可以与它们连 接的碳原子一起形成5-7元碳环或5-7元杂环芳香或非芳香环系，所述 碳环或杂环被0-2个选自如下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基、卤素、氰基、氨基、CF3和NO2；
R2ae选自：
H、C1-C10烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)、芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C2-C7烷基)羰基、芳基羰基、 (C2-C10烷氧基)羰基、C3-C7环烷氧羰基、C7-C11双环烷氧羰基、芳氧 羰基、芳基(C1-C10烷氧基)羰基、C1-C6烷基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰 基、芳基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰基和C3-C7环烷基羰基氧基(C1-C4 烷氧基)羰基；
R7e选自：
H、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、芳基、芳基(C1-C4烷基)- 、(C1-C4烷基)羰基、CO2R18ae、SO2R11e、SO2NR10eR11e、OR10e和 N(R11e)R12e；
Ue选自：
-(CH2)ne-、-(CH2)neO-(CH2)me-、-(CH2)neN(R12)-(CH2)me-、 -NH(CH2)ne-、-(CH2)ne-C(＝O)-(CH2)me-、-(CH2)neS(O)pe(CH2)me-、 -(CH2)neNHNH(CH2)me-、-N(R10e)C(＝O)-、-NHC(＝O)(CH2)ne-、 -C(＝O)N(R10e)-和-N(R10e)S(O)pe-；
Ge是N或CR19e；
We是-C(＝O)-N(R10e)-(C1-C3亚烷基)-，其中该亚烷基被R8e和R9e 取代：
R8e和R9e独立地选自：
H、CO2R18be、C(＝O)R18be、CONR17R18be、被0-1个R6e取代的C1- C10烷基、被0-1个R6e取代的C2-C10链烯基、被0-1个R6e取代的C2-C10链 炔基、被0-1个R6e取代的C3-C8环烷基、被0-1个R6e取代的C5-C6环烯 基、(C1-C10烷基)羰基、C3-C10环烷基(C1-C4烷基)-、被0-3个R6e取代 的苯基、被0-3个R6e取代的萘基、含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂 环，其中所述杂环可以是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述 杂环被0-2个R7e取代，被0-2个R7e取代的C1-C10烷氧基，羟基、硝基、 -N(R10e)R11e、-N(R16e)R17e、芳基(C0-C6烷基)羰基、芳基(C3-C6烷基)、 杂芳基(C1-C6烷基)、CONR18aeR20e、SO2R18ae和SO2NR18aeR20e，
条件是任何上述烷基、环烷基、芳基或杂芳基可以是未被取代 或独立地被1-2个R7e取代；
R6e选自：
H、C1-C10烷基、羟基、C1-C10烷氧基、硝基、C1-C10烷基羰 基、-N(R11e)R12e、氰基、卤素、CF3、CHO、CO2R18be、 C(＝O)R18be、CONR17eR18be、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、NR10eSO2R21e、S(O)pR11e、SO2NR10eR11e、被0-3 个选自卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和 -NMe2的基团取代的芳基、芳基(C1-C4烷基)-，所述芳基被0-3个选自卤 素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和-NMe2的基团 取代、及含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂环，其中所述杂环可以 是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述杂环被0-2个R7e取代；
R10e选自：
H，CF3，C3-C6链烯基，C3-C11环烷基，芳基，(C3-C11环烷基)甲基， 芳基(C1-C4烷基)和被0-2个R6e取代的C1-C10烷基；
R11e选自：
H、羟基、C1-C8烷基、C3-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环 烷基)甲基、C1-C6烷氧基、苄氧基、芳基、杂芳基、杂芳基(C1-C4烷 基)-、芳基(C1-C4烷基)、金刚烷基甲基和被0-2个R4e取代的C1-C10烷 基；
R4e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、(C1- C10烷基)羰基、芳基、杂芳基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷 基)-，其中所述芳基或杂芳基被0-2个独立地选自C1-C4烷基、C1-C4烷 氧基、F、Cl、Br、CF3和NO2的取代基取代，
或者，当R10e和R11e都是同一氮原子上的取代基时(如在 -NR10eR11e中)，它们可以与它们连接的氮原子一起形成选自如下的杂 环：3-氮杂双环壬基、1，2，3，4-四氢-1-喹啉基、1，2，3，4-四氢-2-异喹啉 基、1-哌啶基、1-吗啉基、1-吡咯烷基、磺基吗啉基、噻唑烷基和1- 哌嗪基；所述杂环被0-3个选自如下的基团取代：C1-C6烷基、芳基、 杂芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C3-C7环烷基)羰基、 (C1-C6烷氧基)羰基、芳基(C1-C4烷氧基)羰基、C1-C6烷基磺酰基和芳 基磺酰基；
R12e选自：
H、C1-C6烷基、三苯基甲基、甲氧基甲基、甲氧基苯基二苯基 甲基、三甲硅烷基乙氧基甲基、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰 基、(C1-C6烷基)氨基羰基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷 基(C1-C4烷基)-、芳基、杂芳基(C1-C6烷基)羰基、杂芳基羰基、芳基 (C1-C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、芳基羰基、C1-C6烷基磺酰基、芳基 磺酰基、芳基(C1-C6烷基)磺酰基、杂芳基磺酰基、杂芳基(C1-C6烷基) 磺酰基、芳氧羰基和芳基(C1-C6烷氧基)羰基，其中所述芳基被0-2个 选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、CF3和硝基的取代基取代；
R16e选自：
-C(＝O)OR18ae、-C(＝O)R18be、-C(＝O)N(R18be)2、 -C(＝O)NHSO2R18ae、-C(＝O)NHC(＝O)R18be、-C(＝O)NHC(＝O)OR18ae、 -C(＝O)NHSO2NHR18be、-SO2R18ae、-SO2N(R18be)2和 -SO2NHC(＝O)OR18be；
R17e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)；
R18ae选自：
选择性地通过一个键取代在Ln上的C1-C8烷基、选择性地通过一 个键取代在Ln上的C3-C11环烷基、选择性地通过一个键取代在Ln上的 芳基(C1-C6烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的杂芳基(C1-C6 烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的(C1-C6烷基)杂芳基、选择 性地通过一个键取代在Ln上的联芳基(C1-C6烷基)、选择性地通过一 个键取代在Ln上的杂芳基、被3-4个R19e取代并选择性地通过一个键取 代在Ln上的苯基、被0-4个R19e取代并选择性地通过一个键取代在Ln上 的萘基以及与Ln连接的一个化学键，其中所述芳基或杂芳基选择性地 被0-4个R19e取代；
R18be是H或R18ae；
R19e选自：
H、卤素、CF3、CO2H、CN、NO2、-NR11eR12e、OCF3、C1-C8 烷基、C2-C6链烯基、C2-C6链炔基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)-、芳基(C1-C6烷基)-、C1-C6烷氧基、C1-C4烷氧羰基、芳基、 芳基-O-、芳基-SO2-、杂芳基和杂芳基-SO2-，其中所述芳基和杂芳基 被0-4个选自氢原子、卤素、CF3、C1-C3烷基和C1-C3烷氧基的基团取 代；
R20e选自：
羟基、C1-C10烷基氧基、C3-C11环烷基氧基、芳氧基、芳基(C1- C4烷基)氧基、C2-C10烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰 基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10 环烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10环烷氧羰基氧基(C1-C2烷基) 氧基-、C3-C10环烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、芳氧羰基(C1-C2烷基)氧 基-、芳氧羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、芳基羰基氧基(C1-C2烷基)氧 基-、C1-C5烷氧基(C1-C5烷基)羰基氧基(C1-C2烷基)氧基、(5-(C1-C5 烷基)-1，3-二氧杂-环戊-2-酮-基)甲氧基、(5-芳基-1，3-二氧杂-环戊-2- 酮-基)甲氧基和(R10e)(R11e)N-(C1-C10烷氧基)-；
R21e选自：
C1-C8烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环烷基)甲 基、芳基、芳基(C1-C4烷基)-和被0-2个R7e取代的C1-C10烷基；
R22e选自：
-C(＝O)-R18be、C(＝O)N(R18be)2、-C(＝O)NHSO2R18ae、 -C(＝O)NHC(＝O)OR18be、-C(＝O)NHC(＝O)R18ae和-C(＝O)NHSO2NHR18be；
Ye选自：
-COR20e、-SO3H、-PO3H、-CONHNHSO2CF3、 -CONHSO2R18ae、-NHCONHSO2R18ae、-CONHSO2NHR18be、 -NHCOCF3、-NHCONHSO2R18ae、-NHSO2R18ae、-OPO3H2、-OSO3H、 -PO3H2、-SO2NHCOR18ae、-SO2NHCO2R18ae、 和
me是0-2；
ne是0-4；
pe是0-2；
re是0-2；
条件如下：ne和me的选择应使连接R1e和Ye的原子数在8-14的范围 内；
d选自1，2，3，4，5，6，7，8，9和10；
Ln是下式的连接基团：
((W)h-(CR6R7)g)x-(Z)k-((CR6aR7a)g′-(W)h′)x′；
    W每次出现时独立地选自：O、S、NH、NHC(＝O)、
C(＝O)NH、NR8C(＝O)、C(＝O)NR8、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、
NHC(＝S)NH、NHC(＝O)NH、SO2、SO2NH、(OCH2CH2)20-200、 (CH2CH2O)20-200、(CH2CH2CH2O)20-200和(aa)t′； aa在每次出现时彼此独立地是氨基酸；
Z选自：被0-3个R10取代的芳基、被0-3个R10取代的C3-10环 烷基和被0-3个R10取代的含有1-4个独立地选自N、S和O的杂原 子的5-10元杂环环系；
R6、R6a、R7、R7a和R8每次出现时独立地选自：H、＝O、 COOH、SO3H、PO3H、被0-3个R10取代的C1-C5烷基、被0-3个 R10取代的芳基、被0-3个R10取代的苄基和被0-3个R10取代的C1- C5烷氧基、NHC(＝O)R11、C(＝O)NHR11、NHC(＝O)NHR11、 NHR11、R11和与Sf连接的键；
R10每次出现时独立地选自：与Sf连接的键、COOR11、 C(＝O)NHR11、NHC(＝O)R11、OH、NHR11、SO3H、PO3H、 -OPO3H2、-OSO3H、被0-3个R11取代的芳基、被0-1个R12取代的 C1-C5烷基、被0-1个R12取代的C1-C5烷氧基和被0-3个R11取代的含 有1-4个独立地选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系；
R11在每次出现时彼此独立地选自：H、被0-1个R12取代的烷 基、被0-1个R12取代的芳基、被0-1个R12取代的含有1-4个独立地 选自N、S和O的杂原子的5-10元杂环环系、被0-1个R12取代的C3-10 环烷基、被0-1个R12取代的聚亚烷基二醇、被0-1个R12取代的 碳水化合物、被0-1个R12取代的环糊精、被0-1个R12取代的氨基 酸、被0-1个R12取代的多羧基烷基、被0-1个R12取代的多氮杂烷 基、被0-1个R12取代的含有2-10个氨基酸的肽、3，6-O-二磺基-B- D-吡喃半乳糖基以及与Sf连接的键；
R12是与Sf连接的键；
k选自0、1和2；
h选自0、1和2；
h′选自0、1和2；
g选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
g′选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
t′选自0、1、2、3、4、5、6、7、8、9和10；
x选自0、1、2、3、4和5；
x′选自0、1、2、3、4和5；
Sf是表面活性剂，其是类脂或下式的化合物：
A9选自：OH和OR27；
A10是OR27；
R27是C(＝O)C1-20烷基；
E1是被1-3个R28取代的C1-10亚烷基；
R28在每次出现时独立地选自：R30、-PO3H-R30、＝O、 -CO2R29、-C(＝O)R29、-C(＝O)N(R29)2、-CH2OR29、-OR29、 -N(R29)2、C1-C5烷基和C2-C4链烯基；
R29在每次出现时独立地选自：R30、H、C1-C6烷基、苯基、 苄基和三氟甲基；
R30是与Ln连接的键；
及其药用盐。 [40]在更优选的实施方案中，本发明提供了下式的化合物： Q-Ln-Sf
其中Q是下式(IV)的化合物：
包括其立体异构体形式，或其立体异构体形式的混合物，或其 药用盐或前药，其中：
R1e选自： 和
R2e和R3e独立地选自：
H、C1-C4烷氧基、NR11eR12e、卤素、NO2、CN、CF3、C1-C6烷 基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)、芳基(C1- C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰基、芳基羰基和被0-4 个R7e取代的芳基，
或者，当R2e和R3e是相邻原子上的取代基时，它们可以与它们连 接的碳原子一起形成5-7元碳环或5-7元杂环芳香或非芳香环系，所述 碳环或杂环被0-2个选自如下的取代基取代：C1-C4烷基、C1-C4烷氧 基、卤素、氰基、氨基、CF3和NO2；
R2ae选自：
H、C1-C10烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)、芳基、芳基(C1-C4烷基)-、(C2-C7烷基)羰基、芳基羰基、 (C2-C10烷氧基)羰基、C3-C7环烷氧羰基、C7-C11双环烷氧羰基、芳氧 羰基、芳基(C1-C10烷氧基)羰基、C1-C6烷基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰 基、芳基羰基氧基(C1-C4烷氧基)羰基和C3-C7环烷基羰基氧基(C1-C4 烷氧基)羰基；
R7e选自：
H、羟基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、芳基、芳基(C1-C4烷基)- 、(C1-C4烷基)羰基、CO2R18ae、SO2R11e、SO2NR10eR11e、OR10e和 N(R11e)R12e；
Ue选自：
-(CH2)ne-、-(CH2)neO-(CH2)me-、-NH(CH2)ne-、-(CH2)ne-C(＝O)-(CH2)me-、 -(CH2)neS(O)pe(CH2)me-、-(CH2)neNHNH(CH2)me-、 -N(R10e)C(＝O)-、-NHC(＝O)(CH2)ne-和-C(＝O)N(R10e)-；
Ge是N或CR19e；
R8e选自：
H、CO2R18be、C(＝O)R18be、CONR17R18be、被0-1个R6e取代的C1- C10烷基、被0-1个R6e取代的C2-C10链烯基、被0-1个R6e取代的C2-C10链 炔基、被0-1个R6e取代的C3-C8环烷基、被0-1个R6e取代的C5-C6环烯 基、(C1-C10烷基)羰基、C3-C10环烷基(C1-C4烷基)-、被0-3个R6e取代 的苯基、被0-3个R6e取代的萘基、含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂 环，其中所述杂环可以是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述 杂环被0-2个R7e取代；
R9e选自：
被0-1个R6e取代的C1-C10烷基、被0-2个R7e取代的C1-C10烷氧 基、H、硝基、N(R11e)R12e、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、-NR10eSO2R21e、羟基、OR22e、-N(R10e)R11e、 -N(R16e)R17e、芳基(C0-C6烷基)羰基，芳基(C1-C6烷基)、杂芳基(C1-C6烷 基)、CONR18aeR20e、SO2R18ae和SO2NR18aeR20e，
条件是任何上述烷基、环烷基、芳基或杂芳基可以是未被取代 或独立地被1-2个R7e取代；
R6e选自：
H、C1-C10烷基、羟基、C1-C10烷氧基、硝基、C1-C10烷基羰 基、-N(R11e)R12e、氰基、卤素、CF3、CHO、CO2R18be、C(＝O)R18be、 CONR17eR18be、OC(＝O)R10e、OR10e、OC(＝O)NR10eR11e、 NR10eC(＝O)R10e、NR10eC(＝O)OR21e、NR10eC(＝O)NR10eR11e、 NR10eSO2NR10eR11e、NR10eSO2R21e、S(O)pR11e、SO2NR10eR11e、被0-3 个选自卤素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和 -NMe2的基团取代的芳基、芳基(C1-C4烷基)-，所述芳基被0-3个选自卤 素、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基、三氟甲基、S(O)meMe和-NMe2的基团 取代、及含1-3个N、O或S杂原子的5-10元杂环，其中所述杂环可以 是饱和的、部分饱和的或完全不饱和的，所述杂环被0-2个R7e取代；
R10e选自：
H、CF3、C3-C6链烯基、C3-C11环烷基、芳基、(C3-C11环烷基)甲 基、芳基(C1-C4烷基)和被0-2个R6e取代的C1-C10烷基；
R11e选自：
H、羟基、C1-C8烷基、C3-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环 烷基)甲基、C1-C6烷氧基、苄氧基、芳基、杂芳基、杂芳基(C1-C4烷 基)-、芳基(C1-C4烷基)、金刚烷基甲基和被0-2个R4e取代的C1-C10烷 基；
R4e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、杂芳基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)-，其中所述芳基 或杂芳基被0-2个独立地选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、F、Cl、Br、 CF3和NO2的取代基取代，
R12e选自：
H、C1-C6烷基、三苯基甲基、甲氧基甲基、甲氧基苯基二苯基 甲基、三甲硅烷基乙氧基甲基、(C1-C6烷基)羰基、(C1-C6烷氧基)羰 基、(C1-C6烷基)氨基羰基、C3-C6链烯基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷 基(C1-C4烷基)-、芳基、杂芳基(C1-C6烷基)羰基、杂芳基羰基、芳基 (C1-C6烷基)-、(C1-C6烷基)羰基、芳基羰基、C1-C6烷基磺酰基、芳基 磺酰基、芳基(C1-C6烷基)磺酰基、杂芳基磺酰基、杂芳基(C1-C6烷基) 磺酰基、芳氧羰基和芳基(C1-C6烷氧基)羰基，其中所述芳基被0-2个 选自C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、CF3和硝基的取代基取代；
R16e选自：
-C(＝O)OR18ae、-C(＝O)R18be、-C(＝O)N(R18be)2、-SO2R18ae和 -SO2N(R18be)2；
R17e选自：
H、C1-C6烷基、C3-C7环烷基、C3-C7环烷基(C1-C4烷基)-、芳 基、芳基(C1-C6烷基)-和杂芳基(C1-C6烷基)；
R18ae选自：
选择性地通过一个键取代在Ln上的C1-C8烷基、选择性地通过一 个键取代在Ln上的C3-C11环烷基、选择性地通过一个键取代在Ln上的 芳基(C1-C6烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的杂芳基(C1-C6 烷基)-、选择性地通过一个键取代在Ln上的(C1-C6烷基)杂芳基、选择 性地通过一个键取代在Ln上的联芳基(C1-C6烷基)、选择性地通过一 个键取代在Ln上的杂芳基、被3-4个R19e取代并选择性地通过一个键取 代在Ln上的苯基、被0-4个R19e取代并选择性地通过一个键取代在Ln上 的萘基以及与Ln连接的一个化学键，其中所述芳基或杂芳基选择性地 被0-4个R19e取代；
R18be是H或R18ae；
R19e选自：
H、卤素、CF3、CO2H、CN、NO2、-NR11eR12e、OCF3、C1-C8 烷基、C2-C6链烯基、C2-C6链炔基、C3-C11环烷基、C3-C7环烷基(C1- C4烷基)-、芳基(C1-C6烷基)-、C1-C6烷氧基、C1-C4烷氧羰基、芳基、 芳基-O-、芳基-SO2-、杂芳基和杂芳基-SO2-，其中所述芳基和杂芳基 被0-4个选自氢原子、卤素、CF3、C1-C3烷基和C1-C3烷氧基的基团取 代；
R20e选自：
羟基、C1-C10烷基氧基、C3-C11环烷基氧基、芳氧基、芳基(C1- C4烷基)氧基、C2-C10烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰 基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C2-C10烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10 环烷基羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、C3-C10环烷氧羰基氧基(C1-C2烷基) 氧基-、C3-C10环烷氧羰基(C1-C2烷基)氧基-、芳氧羰基(C1-C2烷基)氧 基-、芳氧羰基氧基(C1-C2烷基)氧基-、芳基羰基氧基(C1-C2烷基)氧 基-、C1-C5烷氧基(C1-C5烷基)羰基氧基(C1-C2烷基)氧基、(5-(C1-C5烷 基)-1，3-二氧杂-环戊-2-酮-基)甲氧基、(5-芳基-1，3-二氧杂-环戊-2-酮- 基)甲氧基和(R10e)(R11e)N-(C1-C10烷氧基)-；
R21e选自：
C1-C8烷基、C2-C6链烯基、C3-C11环烷基、(C3-C11环烷基)甲 基、芳基、芳基(C1-C4烷基)-和被0-2个R7e取代的C1-C10烷基；
R22e选自：
-C(＝O)-R18be、-C(＝O)N(R18be)2、-C(＝O)NHSO2R18ae、 -C(＝O)NHC(＝O)OR18be、-C(＝O)NHC(＝O)R18ae和-C(＝O)NHSO2NHR18be；
me是0-2；
ne是0-4；而
pe是0-2；
条件如下：ne和me的选择应使连接式(IV)中R1e和-COR20e的原子 数在8-14的范围内；
    W每次出现时独立地选自：O、S、NH、NHC(＝O)、
C(＝O)NH、NR8C(＝O)、C(＝O)NR8、C(＝O)、C(＝O)O、OC(＝O)、
NHC(＝S)NH、NHC(＝O)NH、SO2、SO2NH、(OCH2CH2)20-200、
(CH2CH2O)20-200、(OCH2CH2CH2)20-200、(CH2CH2CH2O)20-200和
(aa)t′；
aa在每次出现时独立地是氨基酸；
    Z选自：被0-1个R10取代的芳基、被0-1个R10取代的C3-10环
烷基和被0-1个R10取代的含有1-4个独立地选自N、S和O的杂原
子的5-10元杂环环系；
    R6、R6a、R7、R7a和R8每次出现时独立地选自：H、＝O、
COOH、SO3H、PO3H、被0-1个R10取代的C1-C5烷基、被0-1个
    R10取代的芳基、被0-1个R10取代的苄基和被0-1个R10取代的C1-
C5烷氧基、NHC(＝O)R11、C(＝O)NHR11、NHC(＝O)NHR11、
NHR11、R11和与Sf连接的键；
    k是0或1；
    Sf是表面活性剂，其是脂类或下式的化合物：
    A9是OR27；
    A10是OR27；
    R27是C(＝O)C1-15烷基；
    E1是被1-3个R28取代的C1-4亚烷基；
    R28在每次出现时独立地选自：R30、-PO3H-R30、＝O、
-CO2R29、-C(＝O)R29、-CH2OR29、-OR29和C1-C5烷基；
    R29在每次出现时独立地选自：R30、H、C1-C6烷基、苯基和 苄基；
    R30是与Ln连接的键；
    及其药用盐。
[41]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了新的超声造影 剂组合物，其中含有：
(a)权利要求39的化合物，其中含有：结合整联蛋白αvβ3的喹诺 酮、表面活性剂和在此喹诺酮和此表面活性剂之间存在的连接基团；
(b)非肠道给药用载体；和
(c)产生声波的气体。
[42]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了新的超声造影 剂组合物，其中还含有：1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂酸 (phosphotidic acid)、1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基3-磷脂酰胆碱和N-(甲 氧基聚乙二醇5000氨基甲酰基)-1，2-二棕榈酰基-sn-甘油基-3-磷脂 酰乙醇胺。
[43]在另一个优选的实施方案中，产生声波的气体是C2-5全氟 烃。
[44]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给癌症患者造 影的方法，其包括：(1)通过注射或输液，给患者使用权利要求41的造 影剂组合物；及(2)用声纳照相术给患者造影。
[45]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给新血管形成 患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液，给患者使用权利要 求41的造影剂组合物；及(2)给患者区域造影，其中新血管的形成位 于该区域中。
[46]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给治疗性血管 生成的患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液，给患者使用 权利要求41的造影剂组合物；及(2)给患者区域造影，其中新血管的 形成位于该区域中。
[47]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给动脉粥样硬 化患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液，给患者使用权利 要求41的造影剂组合物；及(2)给动脉粥样硬化的区域造影。
[48]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给再狭窄患者 造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液，给患者使用权利要求41 的造影剂组合物；及(2)给再狭窄的区域造影。
[49]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给心脏局部缺 血患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液，给患者使用权利 要求41的造影剂组合物；及(2)给局部缺血的心肌区域造影。
[50]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给心肌再灌注 损伤患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液，给患者使用权 利要求41的造影剂组合物；及(2)给再灌注损伤的区域造影。
[51]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了新的治疗性放 射性药物组合物，其中含有：
(a)治疗量的权利要求19的放射性药物；及
(b)非肠道给药用载体。
[52]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了新的诊断用药 物组合物，其中含有：
(a)诊断用放射性药物、权利要求11所述的MRI造影剂或X射线 造影剂；及
(b)非肠道给药用载体。
[53]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了治疗再狭窄患 者的方法，其中包括：给患者系统或局部使用治疗量的权利要求19的 放射性药物，该药物能定位于该再狭窄区域并转运有效量的辐射。
[54]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给动脉粥样硬 化患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液给患者输液诊断 用放射性药物、权利要求11所述的MRI造影剂或X射线造影剂；(2)给 患者的动脉硬化区域造影。
[55]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给再狭窄患者 造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液给患者输液诊断用放射 性药物、权利要求11所述的MRI造影剂或X射线造影剂；(2)给患者的 再狭窄区域造影。
[56]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给心脏局部缺 血患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液给患者输液诊断 用放射性药物、权利要求11所述的MRI造影剂或X射线造影剂；(2)给 患者的局部缺血的心肌区域造影。
[57]在另一个优选的实施方案中，本发明提供了给心肌再灌注 损伤患者造影的方法，其中包括：(1)通过注射或输液给患者输液诊 断用放射性药物、权利要求11所述的MRI造影剂或X射线造影剂；(2) 给患者的再灌注损伤的心肌区域造影。
本发明的另一个方面，是制备用作癌症造影剂的放射性药物的 诊断试剂盒。本发明的诊断试剂盒包括一个或多个装有灭菌的、无 热源的制剂的小瓶，该制剂中含有预定量的本发明的试剂，以及选择 性存在的其它组分如一种或两种辅助配体、还原剂、转移配体、缓 冲剂、冻干助剂、稳定助剂、助溶剂和制菌剂。在该制剂中一种或 多种选择性存在的组分包含常常会改进由最后的操作者进行的放射 性药物合成的容易程度、制备此试剂盒的容易程度、该试剂盒的储 藏期限或该放射性药物的稳定性及贮藏期限。包含含有肼或腙结合 部分试剂的诊断试剂盒，需要包含一种或多种辅助配体。含所有或部 分该制剂的一个或多个小瓶可以是独立的灭菌溶液或冻干固体的形 式。
本发明的另一方面包括给癌症患者造影的方法，其中包括：(1) 用本发明的试剂合成本发明的诊断用放射性药物，该药物能定位于肿 瘤中；(2)通过注射或输液给患者使用所述放射性药物；(3)用平面或 SPECTγ闪烁照相术或正电子发射断层照相术给所述患者造影。
本发明的另一方面包括给癌症患者造影的方法，其中包括：(1) 通过注射或输液给患者使用本发明的顺磁金属药物，该药物能定位于 肿瘤中；及(2)用磁共振造影术给所述患者造影。
本发明的另一方面包括给癌症患者造影的方法，其中包括：(1) 通过注射或输液给患者使用本发明的X射线造影剂，该造影剂能定位 于肿瘤中；及(2)用X射线计算断层照相术给所述患者造影。
本发明的另一方面包括给癌症患者造影的方法，其中包括：(1) 通过注射或输液给患者使用本发明的超声造影剂，该造影剂能定位于 肿瘤中；及(2)用声纳造影术给所述患者造影。
本发明的另一方面包括治疗患者所患癌症的方法，其中包括：(1) 通过注射或输液给患者使用本发明的治疗性放射性药物，该药物能定 位于肿瘤中。
定义
本文中描述的化合物可以具有不对称中心。除非另行说明，所 有的手性、非对映异构和外消旋形式包括在本发明中。烯烃、C＝N双键等的很多几何异构体也可以存在于本文中所述的化合物中，且所 有的这样的稳定异构体包括在本发明中。应领会本发明的化合物含 不对称取代的碳原子，且可以以光学活性或外消旋的形式分离。本领 域中熟知如何制备光学活性形式，如通过拆分外消旋形式或通过由光 学活性起始物开始合成。已知肽键具有两种不同的异构体(顺式和反 式)；这两种也都可以存在于本文中描述的化合物中，且所有这样的 稳定异构体包括在本发明中。用常规的3个字母的氨基酸缩写指定特 定氨基酸的D和L异构体，如下列实例所指定：D-Leu或L-Leu。
当在任何取代基中或任何结构式中，任何可变情况发生一次以 上时，其每次出现的定义独立于所有其它出现时的定义。因此，例如， 如果说明一个基团被0-2个R52取代，则所述基团可以选择性地被最多 2个R52取代，而每次出现时R52独立地选自可能的R52的定义清单中。 另外，例如，对于基团-N(R53)2，在N上的两个R53取代基中的每个独立 地选自可能的R53的定义清单中。取代基和/或变体的结合是可以允许 的，如果这种结合带来稳定的化合物。当与取代基键合的键以与环中 连接两个原子的键交叉表示时，则此取代基可以与环中的任何原子键 合。
术语“非肽”优选靶向部分的骨架核中少于3个酰氨键，或优选在 该靶向部分中少于3个氨基酸或氨基酸模拟物。
术语“金属药物”指含金属的药物。该金属是在诊断应用中引起 可造影信号的原因，并且是放射性治疗应用中细胞毒辐射的根源。放 射性药物是其中金属是放射性同位素的金属药物。
“试剂”指能直接转化进入本发明的金属药物中的本发明的化合 物。试剂可以直接用于制备本发明的金属药物，或者可以是本发明的 试剂盒的组成部分。
术语“结合试剂”指对玻连蛋白受体具有亲和性并能与之结合的 本发明的金属药物。本发明的结合试剂的Ki＜1000nM。
“稳定的化合物”或“稳定的结构”在本文中指足以从反应混合物 中以可利用的纯度分离的并足以配制为有效的药物制剂化合物。
术语“取代”在本文中指指定的原子或基团上的一个或多个氢原 子被选自指定的基团代替，条件是不超过该指定的原子或基团的正常 化合价，且该取代带来稳定的化合物。当取代基是酮基(即＝O)时，则 该原子上的两个氢原子被替换。
术语“键”在本文中指单键或双键。
术语“盐”在本文中，如《CRC理化手册》(CRC Handbook of Chemistry和Physics)，第65版，CRC Press，Boca Raton，Fla，1984中所定 义的产生离子的任何物质，除氢原子或羟基离子。在本文中，“药用 盐”指通过制备酸加成盐或碱加成盐修饰的所公开化合物的衍生物。 药用盐的实例包括但不限于碱性残基如胺的无机酸或有机酸盐；酸性 残基如羧酸的碱金属或有机盐，等等。
术语“药用”在本文中用于指在声医学判断范围内适于接触人或 动物组织而不产生过度的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或 并发症，适当的受益/危险比例相称的那些化合物、物质、组合物和/ 或剂型。
在本文中，“药用盐”指通过制备其酸加成盐或碱加成盐修饰的所 公开化合物的衍生物。药用盐的实例包括但不限于碱性残基如胺的 无机酸或有机酸盐；酸性残基如羧酸的碱金属或有机盐，等等。药用 盐包括母体化合物的常规无毒盐或季铵盐，例如，与无毒无机或有机 酸形成的。例如，这样的常规无毒盐包括由无机酸如氢氯酸、氢溴 酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等衍生的；以及由有机酸如乙酸、 丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、酒石酸、枸橼酸、抗坏血 酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、 水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲 磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙基磺酸等制备的盐。
本发明的药用盐可以由含碱性或酸性部分的母体化合物通过常 规化学方法合成。一般来说，可以通过这些化合物的游离酸或碱形式 与化学计量的适宜的碱或酸在水或在有机溶剂或在二者的混合物中 反应制备这样的盐；一般来说，优选非水介质如乙醚、乙酸乙酯、乙 醇、异丙醇或乙腈。适宜盐的清单见Remington′s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418， 将其公开内容引入本文中作为参考。
在本文中，＂烷基＂包括具有特定碳原子数的支链和直链饱和的脂 族烃基团，其实例包括但不限于，甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁 基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基和癸基； “环烷基”或＂碳环＂旨在包括饱和的和部分不饱和环基团，包括一-、二 或多环环系，如环丙基，环丁基，环戊基，环己基，环庚基，环辛基和 金刚烷基；“双环烷基”或＂双环＂旨在包括饱和的双环基团如[3.3.0]双 环辛烷、[4.3.0]双环壬烷、[4.4.0]双环癸烷(萘烷)，[2.2.2]双环辛烷 等。
在本文中，术语＂链烯烃＂或＂链烯基＂旨在包括具有特定碳原子数 的、直链或支链构型的并具有可以发生在该链中任何稳定点的一个 或多个不饱和碳碳双键的烃，如乙烯基、丙烯基等等。
在本文中，术语＂炔＂或＂链炔基＂旨在包括具有特定碳原子数的、 直链或支链构型的并具有可以发生在该链中任何稳定点的一个或多 个不饱和碳碳三键的烃，如乙炔基、丙炔基等等。
在本文中，＂芳基＂或＂芳香残基＂指苯基或萘基，当被取代时，该 取代可以在任何位置。
在本文中，术语＂杂环＂或＂杂环系统＂是指稳定的5至7元单环或双 环，或者7至10元双环杂环，其是饱和的、部分不饱和或不饱和(芳香)， 且其含有选自N、O和S的1至4个杂原子，并包括其中任何上述定义的 杂环与苯环稠合的双环。其中氮和硫杂原子可以选择性地被氧化。 该杂环可以在任何杂原子或碳原子上连接侧基，其应产生稳定的结 构。如果所得化合物是稳定的，则本文中描述的杂环可以在碳原子或 氮原子上发生取代。如果特别说明，则杂环中的氮原子可以选择性地 季铵化。优选当该杂环中S和O原子的总数超过1时，则这些杂原子彼 此不相邻。优选该杂环中S和O原子的总数不超过1。在本文中，术语 ＂芳香杂环系统＂指稳定的5至7元单环或双环，或者7至10元双环杂环， 其含有选自N、O和S的1至4个杂原子。优选该芳杂环中S和O原子总 数不超过1。
杂环的实例包括但不限于，1H-吲唑基、2-吡咯烷酮基、2H，6H- 1，5，2-二噻嗪基、2H-吡咯基、3H-吲哚基、4-哌啶酮基、4aH-咔唑、 4H-喹嗪基、6H-1，2，5-噻二嗪基、吖啶基、氮杂环辛四烯基、苯并咪 唑基、苯并呋喃基、苯并噻喃基、苯并磺基苯基、苯并恶唑基、苯 并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异恶唑基、苯并异噻唑 基、苯并咪唑酮基、咔唑基、4aH-咔唑基、-咔啉基、苯并二氢吡喃 基、苯并吡喃基、噌啉基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪、二氢 呋喃并[2、3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、 咪唑基、1H-吲唑基、假吲哚基(indolenyl)、二氢吲哚基、吲哚嗪 基、吲哚基、异苯并呋喃基、异苯并二氢吡喃、异吲唑基、异二氢 吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、吗啉基、萘 啶基、八氢异喹啉基、恶二唑基、1，2，3-恶二唑基、1，2，4-恶二唑基、 1，2，5-恶二唑基、1，3，4-恶二唑基、恶唑基.、恶唑基、恶唑烷基、萘 嵌二氮苯基、菲啶基、菲咯啉基、吩砒嗪、吩嗪基、吩噻嗪基、苯 并氧杂硫杂环己二烯基、吩恶嗪基、2，3-二氮杂萘基、哌嗪基、哌啶 基、蝶啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡 嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑基、吡 啶并咪唑基、吡啶并噻唑、吡啶基(pyridinyl)、吡啶基、嘧啶基、吡 咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔 啉基、奎宁环基、咔啉基、四氢呋喃、四氢异喹啉基、四氢喹啉 基、6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2、5-噻 二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑 基、噻吩并恶唑基、噻吩并咪唑基、苯硫基、三嗪基、1，2，3-三唑 基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，3，4-三唑基、夹氧蒽基。优选杂 环包括但不限于、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪 唑基、吲哚基、苯并咪唑基、1H-吲唑基、恶唑烷基、苯并三唑基、 苯并异恶唑基、羟吲哚基、苯并恶唑啉基或靛红酰基(isatinoyl)。还 包括含有例如上述杂环的稠环和螺环化合物。
在本文中，术语“烷芳基”指带有1-10个碳原子的无机的芳基；术 语“芳味剂”指带有芳基的含1-10个碳原子的烷基；术语“芳基烷芳基” 指带有1-10个碳原子的烷基的芳基，该烷基上带有另一个芳基；而术 语“杂环烷基”指带有杂环的含1-10个碳原子的烷基。
“聚亚烷二醇”是分子量小于约5000，以羟基或烷基醚部分终止 的聚乙二醇、聚丙二醇或聚丁二醇。
“碳水化合物”是多羟基醛、酮、醇或酸或其衍生物，包括具有 缩醛类型的聚合连接的其聚合物。
＂环糊精＂是环状低聚糖。环糊精的实例包括但不限于，α-环糊 精、羟基乙基-α-环糊精、羟基丙基-α-环糊精、β-环糊精、羟基丙基- β-环糊精、羧甲基-β-环糊精、二羟基丙基-β-环糊精、羟基乙基--环 糊精、2，6-二-O-甲基-β-环糊精、硫酸化-β-环糊精、γ-环糊精、羟基 丙基-γ-环糊精、二羟基丙基-γ-环糊精、羟基乙基-γ-环糊精及硫酸化 γ-环糊精。
在本文中，术语“多羧基烷基”指2至约100个碳原子和多个羧基 取代基的烷基；而术语“多氮杂烷基”指具有2至约100个碳原子，被多 个氨基间隔或取代的直链或支链烷基。
“还原剂”是与放射性核素反应的化合物，其一般是相对无反应 性的、高氧化态的化合物，通过将电子(一个或多个)转移给放射性核 素来降低其氧化态，于是使其更具反应性。用于制备放射性药物及用 于制备所述放射性药物的诊断试剂盒的还原剂，包括但不限于氯化亚 锡、氟化亚锡、甲脒亚磺酸、抗坏血酸、半胱氨酸、膦及亚铜或亚 铁盐。其它还原剂描述于Brodack等，PCT申请94/22496，将其引入本 文作为参考。
“转移配体”是与金属离子形成中间复合物的配体，该复合物的 稳定性足以防止不需要的副反应，但又不稳定得足以转变为金属药 物。当金属药物的形成是热力学有利的时，此中间体复合物的形成是 动力学有利的。用于制备放射性药物及用于制备所述放射性药物的 诊断试剂盒的转移配体，包括但不限于葡萄糖酸盐、葡庚糖酸盐、甘 露糖醇、葡糖二酸、N，N，N′，N′-亚乙二胺四乙酸、焦磷酸盐和亚甲基 二膦酸盐。总之，转移配体包含氧原子或氮原子供体原子。
术语“供体原子”指通过化学键直接与金属连接的原子。
“辅助配体”或“辅配体”是在放射性药物的合成过程中掺入 到放射性药物中的配体。他们的作用是将放射性核素与螯合剂或试 剂的放射性核素结合单位一起组成内配位层。对于由二元配体系统 组成的放射性药物，放射性核素内配位层由一种或多种螯合剂或者 来自一种或多种试剂的结合单位与一种或多种辅助或辅配体组成， 只要总共有两种配体、螯合剂或结合单位即可。例如，由一种螯合 剂或来自一种试剂的结合单位以及两个相同的辅助或辅配体组成的 放射性药物和由两种螯合剂或者来自一种或两种试剂的结合单位以 及一种辅助或辅配体组成的放射性药物均被认为是由二元配体系统 组成的。对于由四元配体组成的放射性药物，放射性核素内配位层 由一种或多种螯合剂或者来自一种或多种试剂的结合单位以及一种 或多种两类不同辅助或辅配体组成，只要总共有三类配体、螯合剂 或结合单位即可。例如，由一种螯合剂或来自一种试剂的结合单位 以及两种不同辅助或辅配体组成的放射性药物被认为是由三元配体 系统组成的。
用于制备放射性药物以及用于制备所述放射性药物的诊断试剂 盒的辅助配体或辅配体由一个或多个氧、氮、碳、硫、磷、砷、硒 及碲供体原子组成。配体可以是在放射性药物合成过程中的转移配 体并可作为另一放射性药物的辅助配体或辅配体。一个配体是否称 为转移配体或辅助配体或辅配体取决于所述配体是否保留在放射性 药物的放射性核素内配位层，这是由放射性核素与螯合剂或者试剂 的结合单位的配位化学决定的。
“螯合剂”或“结合单位”是试剂上通过与一个或多个供体原 子形成化学键而与金属离子结合的部分或基团。
术语“结合位点”指体内或体外结合生物活性分子的位点。
“诊断试剂盒”或“试剂盒”包括在一个或多个小瓶中的组分 的收集(称为制剂)，这些组分用于由最终用户在临床或药剂学设备中 合成诊断用放射性药物。所述试剂盒提供除最终用户通常可得到的 组分(例如水或注射用盐水)之外的所有合成及使用诊断放射性药物所 必需的组分、放射性核素溶液、在合成放射性药物过程中用于加热 试剂盒的装置，如果需要，还包括给患者施用所述放射性药物所需 的装置，例如注射器和屏幕，以及成像装置。
将治疗用放射性药物、X射线造影剂药物、超声造影剂药物以 及用于核磁共振成像造影的金属药物以其在单个小瓶中所含的制剂 的最终形式，例如冻干固体或者水溶液，提供给最终用户。最终用户 将冻干物用水或盐水重新构建，然后取耐受剂量或者仅从水溶液制 剂中取所提供的剂量。
“冻干助剂”是对冻干的物理特性例如玻璃转化温度有利的组 分，将所述助剂加到制剂中以改善用于冻干的制剂的所有组分的组 合物的物理特性。
“稳定助剂”是加到金属药物或者诊断试剂盒中以稳定所述金 属药物或者延长所述试剂盒在其必须使用前的保存期的组分。稳定 助剂是抗氧剂、还原剂或自由基清除剂并可通过优先与降解其他组 分或金属药物的物质反应来改善稳定性。
“助溶剂”是改善一种或多种组分在制剂所需介质中的溶解度 的组分。
“制菌剂”是在制剂使用前的贮存过程中或者用诊断试剂盒合 成放射性药物后，抑制细菌在所述制剂中生长的组分。
本文使用下列缩写： Acm                    乙酰氨基甲基 b-Ala，β-Ala或bAla    3-氨基丙酸 ATA                    2-氨基噻唑-5-乙酸或2-氨基噻唑-5-乙酰基 Boc                    叔丁氧羰基 CBZ，Cbz或Z            苄氧羰基 Cit                    瓜氨酸 Dap                    2，3-二氨基丙酸 DCC                    二环己基碳二亚胺 DIEA                   二异丙基乙胺 DMAP                   4-二甲基氨基吡啶 EOE                    乙氧基乙基 HBTU                   2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲六
                   氟磷酸盐 hynic                  boc-肼基烟酰基(nicotinyl)或2-[[[5-[羰基]-
                   2-吡啶基]亚肼基]甲基]苯磺酸 NMeArg或MeArg          a-N-甲基精氨酸 NMeAsp                 a-N-甲基天冬氨酸 NMM                    N-甲基吗啉 OcHex                  O-环己基 OBzl                   O-苄基 oSu                    O-琥珀酰亚氨基 TBTU                   2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲四
                   氟硼酸盐 THF                    四氢呋喃基 THP                    氢吡喃基 Tos                    甲苯磺酰基 Tr                     三苯甲基
本文使用下列常规三字母氨基酸缩写；本文不使用常规的一个 字母的氨基酸缩写：
    Ala＝丙氨酸
    Arg＝精氨酸
    Asn＝天冬酰胺
    Asp＝天冬氨酸
    Cys＝半胱氨酸
    Gln＝谷氨酰胺
    Glu＝谷氨酸
    Gly＝甘氨酸
    His＝组氨酸
    Ile＝异亮氨酸
    Leu＝亮氨酸
    Lys＝赖氨酸
    Met＝甲硫氨酸
    Nle＝正亮氨酸
    Orn＝鸟氨酸
    Phe＝苯丙氨酸
    Phg＝苯基甘氨酸
    Pro＝脯氨酸
    Sar＝肌氨酸
    Ser＝丝氨酸
    Thr＝苏氨酸
    Trp＝色氨酸
    Tyr＝酪氨酸
    Val＝缬氨酸
本文所用术语“泡”指通常以存在一个或多个膜或壁包围的中 央空腔为特征的小泡，所述空腔用气体或其前体填充。举证性的泡 包括例如脂质体、微胶粒等。
“类脂”指含有亲水组分和疏水组分的合成的或天然的两亲化 合物。类脂包括例如脂肪酸、中性脂肪、磷脂、糖脂、脂肪族醇和 蜡、萜和甾类。
“类脂组合物”指含有类脂化合物的组合物。举证性的类脂组 合物包括悬浮液、乳剂和小泡组合物。
“类脂制剂”指含类脂化合物和生物活性剂的组合物。
“小泡”指以存在中央空腔为特征的球形体。优选的小泡从类 脂，包括本文所述的各种类脂配制的。在任何给定的小泡中，类脂 可以是单层或双层形式，可以用单-或双层-类脂形成多种单或双层之 一。在一种以上单或双层的情况下，单或双层通常是同心的本文所 述的类脂小泡包括通常称为脂质体、微胶粒、泡、微泡、微球等的 小泡。因此，可以用所述类脂形成单层小泡(由单层或双层组成)，寡 层小泡(由约两个或约三个单层或双层组成)或者多层小泡(由约3个以 上单层或双层组成)。所述小泡的中央空腔可以按照需要用液体，例 如包括水、气体、气体前体和/或固体或溶质物质包括例如生物活性 剂填充。
“小泡组合物”指从类脂制备的并含小泡的组合物。
“小泡制剂”指含小泡和生物活性剂的组合物。
“脂质体”指两亲化合物的球形簇或聚集体，通常为一个或多个 同心层形式，例如，双层形式。它们也被称之为类脂小泡。
血管生成是从预先存在的脉管系统形成新的毛细血管的过程； 它是各种生理过程包括排卵、胚胎发育、创伤修复以及心肌中并行 血管产生的重要部分。它对许多疾病例如肿瘤生长和迁移，糖尿病视 网膜病以及黄斑变性来说也是非常重要的。该过程开始于现有血管 内皮细胞应答各种细胞因子和生长因子而产生的激活作用。被激活 的内皮细胞分泌降解血管基膜的酶。然后所述内皮细胞增殖并迁移 进入细胞外基质形成腔，随后形成新的血管。
在正常条件下，内皮细胞增殖是非常缓慢的过程，但在胚胎形 成、排卵和创伤愈合过程中，它可以在短时间内增加。在细胞更新过 程中的这种暂时增加受许多生长刺激因子和生长抑制因子的联合控 制。在病理性的血管生成中，这种正常平衡被打乱，导致内皮细胞持 续增加。已鉴定的部分血管生成因子包括碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)，血管生成素，TGF-α，TGF-β和血管内皮生长因子(VEGF)，而 α干扰素、β干扰素和血小板反应蛋白是血管生成抑制剂的实例。
血管生成因子与内皮细胞表面受体例如受体酪氨酸激酶EGFR、 FGFR、PDGFR、Flk-1/KDR、Flt-1、Tek、Tie、neuropilin-1、 endoglin、内皮唾液酸蛋白和Ax1相互作用。受体Flk-1/KDR、 neuropilin-1和Flt-1识别VEGF，这些作用在VEGF诱导的血管生成中起 关键作用。在血管形成过程中，还主要表达受体酪氨酸激酶的Tie亚 家族。
内皮细胞在细胞外基质中的增殖和迁移是通过与各种细胞粘附 分子的相互作用而介导的。整联蛋白是一个杂二聚体细胞表面受体 的多样化家族，通过该物质，内皮细胞与细胞外基质彼此相连并与其 他细胞相连。由bFGF或TNF-α诱导的血管生成作用依赖于整联蛋白 αvβ3参与，而由VEGF诱导的血管生成作用依赖于整联蛋白 αvβ5(Cheresh等，科学(Science)，1995，270，1500-2)。内皮细胞表面上 整联蛋白α1β1和α2β1表达的诱导作用是VEGF促进血管生成的另一重 要机制(Senger等，美国国家科学院院报(Proc。Natl。Acad。Sci。 USA)1997，94，13612-7)。
本发明的药物由用于玻连蛋白受体的非肽导向部分组成，在血管 生成的肿瘤维管系统中表达或者上调节所述受体。
本发明的超声造影剂含有与生物相容性气体、液体载体和表面 活性剂微球相连或者掺入生物相容性气体、液体载体和表面活性剂 微球中的多种血管生成肿瘤维管系统导向部分，在导向部分和微泡 间还含有可选择的连接部分，LN。在本文中，术语液体载体指水溶 液，术语表面活性剂指溶液的界面张力减小的任何两亲物质。在EP 0727225A2中公开了用于形成表面活性剂微球的适宜表面活性剂的目 录，该文献引入本文作为参考。术语表面活性剂微球包括纳米球、 脂质体、泡等。生物相容性气体可以是空气或者碳氟化合物，例如 C3-C5全氟烷烃，例如全氟丙烷、全氟丁烷或者全氟戊烷，可提供产 生回波差并由此在超声成像中造影。将所述气体包被或包含在所述 微球中，所述微球，任意地通过连接基团与生物导向(biodirecting)基 团相连。所述连接可以是共价的、离子的或通过范德华力。所述造 影剂的具体实例包括带有多种肿瘤新血管系统受体结合肽或肽模拟 物的类脂包被的全氟化碳。
本发明的X射线造影剂由与一种或多种X射线吸附或原子序数为 20或更大的“重”原子相连的一种或多种血管生成肿瘤维管系统导 向部分组成，在导向部分与X射线吸附原子之间还含有任意的连接部 分Ln。在X射线造影剂中常用的重原子是碘。最近，已公开了由金属 螯合物组成的X射线造影剂(Wallace，R.，US5417959)和多种金属离子 组成的聚螯合物(Love，D.，5679810)。更近一些，已公开了多核簇配 合物作为X射线造影剂(US 5804161、PCT WO91/14460和PCT WO17215)。
本发明的MRI造影剂由与一种或多种顺磁金属离子相连的一种或 多种血管生成肿瘤维管系统导向部分组成，在所述导向部分与顺磁 金属离子间还含有任意的连接部分LN。顺磁金属离子是金属配合物 或金属氧化物颗粒形式。US 5412148和5760191描述了用于MRI造影 剂的有关顺磁金属离子螯合剂的实例。US 5801228、US 5567411和 US 5281704描述了用于MRI造影剂的复合一种以上的顺磁金属离子聚 螯合剂。US 5520904描述了用作MRI造影剂的由顺磁金属离子组成的 组合物。
本发明的药物具有下式(Q)d-Ln-(Ch-X)、(Q)d-Ln-(Ch-X1)d′、 (Q)d-Ln-(X2)d″和(Q)d-Ln-(X3)，其中Q代表与血管生成肿瘤维管系统 中表达的受体结合的非肽，d是1-10，Ln代表任意的连接基团，Ch代 表金属螯合剂或键合部分，X代表放射性同位素，X1代表顺磁金属离 子，X2代表顺磁金属离子或含不溶性固体颗粒的重原子，d″是1- 100，X3代表产生回波的气体的表面活性剂微球。所述药物的玻连蛋 白受体结合部分的非肽识别序列与αvβ3受体相互作用导致所述药物定 位于表达αvβ3受体的血管生成肿瘤维管系统中。
可通过多种方法合成本发明的药物。一种方法是合成靶向非肽 部分，Q，然后将一个或多个部分Q与一个或多个金属螯合剂或键合 部分Ch或者顺磁金属离子或含固体颗粒的重原子或者与产生回波的 气体微泡直接相连。另一种方法是将一个或多个部分Q与连接基团Ln 相连，然后所述连接基团与一个或多个金属螯合剂或键合部分Ch或 者顺磁金属离子或含固体颗粒的重原子或者产生回波的气体微泡相 连。另一种方法是合成携带连接基团Ln片段的非肽，Q，然后将其中 之一种或多种与其余的连接基团相连，然后与一个或多个金属螯合 剂或键合部分Ch或者顺磁金属离子或者含固体颗粒的重原子或者产 生回波的气体微泡相连。
用本领域技术人员已知的标准合成方法可以合成任意地携带连 接基团Ln或连接基团片段的非肽玻连蛋白结合部分，Q。优选的方法 包括但不限于下文描述的那些。
连接基团Ln与肽和非肽Q的连接；螯合剂或结合单元Ch与非肽Q 或与连接基团Ln的连接；以及带有连接基团片段的非肽与连接基团 其余部分的连接(形成(Q)d-Ln部分)，然后再与Ch部分的连接均可以 通过常规方法进行。这些方法包括但不仅限于，酰胺化、酯化、烷 基化以及脲或硫脲的形成。形成这些连接的方法可以参见Brinkley， M。生物结合化学(Bioconjugate Chemistry)1992，3(1)，该文献引入 本文作为参考。
可以采用多种方法，由固体颗粒表面修饰领域的技术人员将非 肽Q与含有顺磁金属离子或重原子的固体颗粒X2连接。通常，将导向 部分Q或组合(Q)dLn与能够和固体颗粒表面组分反应的偶联基团连 接。偶联基团可以是能够和固体颗粒表面的表面羟基反应的多种硅 烷化合物(参见U.S.专利申请09/356178)中的任意一种，并且还包括可 与固体颗粒表面偶联的多膦酸酯、多羧酸酯、多磷酸酯或其混合 物，参见U.S。5,520,904。
可以用多种反应方案将非肽Q与表面活性剂微球X3连接。用如下 反应方案对其举例说明，其中Sf表示形成表面活性剂微球的表面活性 剂部分。 酰化反应：
Sf-C(＝O)-Y+Q-NH2或----------->Sf-C(＝O)-NH-Q
Q-OH             或Sf-C(＝O)-O-Q
Y是离去基或活泼酯
二硫化物偶联：
Sf-SH+Q-SH----------->Sf-S-S-Q
磺酰胺偶联：
Sf-S(＝O)2-Y+Q-NH2----------->Sf-S(＝O)2-NH-Q
还原酰胺化：
Sf-CHO+Q-NH2----------->Sf-NH-Q
在这些反应方案中，取代基Sf和Q也可以颠倒。
连接基团Ln可以起到多种作用。首先，它提供了金属螯合剂或 结合部分Ch、含有顺磁金属离子或重原子的固体颗粒X2、表面活性 剂微球X3以及一种或多种非肽Q之间的间隔基团，从而使Ch-X、Ch- X1、X2和X3干扰识别序列Q与血管生成性肿瘤脉管系统受体之间相互 作用的可能性减至最低。是否需要在试剂中掺入连接基团取决于Q、 Ch-X、Ch-X1、X2和X3本身。如果Ch-X、Ch-X1、X2和X3不能够与Q 以基本不减弱其对受体的亲和性的方式连接，就需要使用连接基 团。连接基团还提供了将多个非肽Q彼此独立地与一个连接在Ch-X、 Ch-X1、X2或X3上的基团相连接的方法。
连接基团还提供了在本发明的药物中掺入药物动力学改性剂的 方法。药物动力学改性剂的作用是指导所注射药物的生物学分布， 它不同于导向部分Q与肿瘤新脉管系统中表达的受体的相互作用。有 多种功能基可以作为药物动力学改性剂，包括但不仅限于，碳水化 合物、聚亚烷基二醇、肽或其它多氨基酸以及环糊精。改性剂可以 用来提高或降低亲水性并提高或降低血液清除率。改性剂还可以用 来指导药物的排除途径。优选的药物动力学改性剂是那些可以产生 中等至快速的血液清除并提高肾脏排泄的改性剂。
对金属螯合剂或结合部分Ch的选择是用来与用于具体应用所选 择的金属离子形成稳定的配合物。对用于诊断用放射性药物的螯合 剂或结合部分的选择是用来与具有可成像γ射线或正电子发射的放射 性同位素如99mTc、95Tc、111In、62Cu、60Cu、64Cu、67Ga、68Ga、86Y 形成稳定的配合物。
用于锝、铜和镓同位素的螯合剂选自二胺二硫醇、单胺-单酰胺 二硫醇、三酰胺-单硫醇、单胺-二酰胺-单硫醇、二胺二肟和肼。螯 合剂通常是含有选自氮、氧和硫的供体原子的四配位基。优选的试 剂由含有胺氮和硫醇硫供体原子以及肼结合单元的螯合剂组成。硫 醇硫原子和肼可以带有保护基，所述保护基可以在用试剂合成放射 性药物之前或者优选在合成放射性药物的过程中就地置换。
硫醇保护基的例子包括Greene和Wuts，“有机合成中的保护基” John Wiley & Sons，New York(1991)中所列的那些，其公开的内容引 入本文作为参考。可以使用本领域已知的任何硫醇保护基。硫醇保 护基的例子包括但不仅限于：乙酰氨基甲基、苯甲酰氨基甲基、1-乙 氧基乙基、苯甲酰基和三苯甲基。
肼结合单元的保护基的例子是腙，可以是醛或酮腙，并带有选 自氢、烷基、芳基和杂环的取代基。特别优选的腙记载于共同未决 申请U.S.S.N。08/476,296中，其公开的内容全文引入本文作为参 考。
当肼结合单元与金属放射性核素结合时，将其称为肼基或二氮 烯基，它是放射性核素与放射性药物其余部分的连接点。二氮烯基 可以是末端的(基团上仅有一个原子与放射性核素结合)或是螯合的。 为了含有螯合的二氮烯基，基团上必需另外有至少一个原子也同放 射性核素结合。与金属结合的原子称为供体原子。
111In和86Y的螯合剂选自环状和无环的多氨基羧酸酯，例如 DTPA、DOTA、DO3A、2-苄基-DOTA、α-(2-苯乙基)1，4，7，10-四氮杂 环十二烷-1-乙酸-4，7，10-三(甲基乙酸)、2-苄基-环己基二亚乙基三胺 五乙酸、2-苄基-6-甲基-DTPA和6，6″-二[N，N，N″，N″-四(羧基甲基)氨基 甲基]-4′-(3-氨基-4-甲氧基苯基)-2，2′：6′，2″-三联吡啶(terprydine)。其中 的不能购买到的配体的合成方法可以参见Brechbiel，M.和Gansow，O.， J。Chem。Soc。Perkin Trans。1992，1，1175；Brechbiel，M.和Gansow， O.，生物结合化学(Bio共轭物Chem.)1991，2，187；Deshpande，S.，等， 核药学杂志(J。Nucl。Med.)1990，31，473；Kruper，J.，美国专利 5,064,956和Toner，J.，美国专利4,859,777，其公开的内容引入本文作为 参考。
金属离子的内配位层包括所有与金属结合的配体或基团。为了 使过渡金属放射性核素稳定，配位数(供体原子数)一般为大于或等于 4并且小于或等于8的整数；也就是说，有4-8个原子与金属结合并且 将其称为具有完整的内配位层。稳定的放射性核素配合物所需的配 位数由放射性核素的特性、其氧化态以及供体原子的类型所决定。 如果螯合剂或结合单元不能提供通过完成其内配位层而稳定金属放 射性核素所需的所有原子，则内配位层由来自其它配体(称为辅助配 体或辅配体，其也可以是末端或螯合的)的供体原子完成。
有多种配体可以作为辅助配体或辅配体，它们的选择取决于多 种因素，例如放射性药物合成的难易性、辅助配体的化学和物理学 性质、形成的速率、收率、所形成的放射性药物的异构体数量、将 所述辅助配体或辅配体施用给患者而不会对所述患者产生不利的生 理学后果的能力、配体在冻干的试剂盒制剂中的相容性。辅助配体 的电荷和亲脂性将会影响放射性药物的电荷和亲脂性。例如，使用 4，5-二羟基-1，3-苯二磺酸盐将会使放射性药物额外带有两个阴离子基 团，因为磺酸盐基团会在生理条件下成为阴离子。使用N-烷基取代 的3，4-羟基吡啶酮会使放射性药物具有不同程度的疏水性，这取决于 烷基取代基的大小。
本发明优选的锝放射性药物由肼基或二氮烯基结合单元和辅助 配体AL1组成，或由一个结合单元和两种类型的辅助配体AL1和AL2组 成，或由由两个氮和两个硫原子组成的四配位螯合剂组成。辅助配 体AL1由两个或多个硬供体原子例如氧和胺氮(sp3杂化的)组成。供体 原子占据放射性核素金属内配位层中的至少两个位点；辅助配体AL1 充当了三配体系统的三个配体之一。辅助配体AL1的例子包括但不仅 限于双氧配体和功能基化的氨基羧酸盐。大量所述的配体可以从商 业途径得到。
辅助双氧配体包括与金属离子通过至少两个氧供体原子配位的 配体。其离子包括但不仅限于：葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、2-羟基异 丁酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、甘露糖醇、葡糖二酸盐、麦芽酚、曲 酸、2，2-二(羟基甲基)丙酸、4，5-二羟基-1，3-苯二磺酸盐或取代或未取 代的1，2-或3，4-羟基吡啶酮(这些例子中的配体名称是指质子化的或非 质子化的配体形式)。
功能基化的氨基羧酸盐包括含有胺氮和氧供体原子的组合的配 体。其例子包括但不仅限于：亚氨基二乙酸、2，3-二氨基丙酸、氮三 乙酸、N，N′-乙二胺二乙酸、N，N，N′-乙二胺三乙酸、羟乙基乙二胺三 乙酸和N，N′-乙二胺二-羟基苯基甘氨酸(这些例子中的配体名称是指质 子化的或非质子化的配体形式)。
在Bridger等，美国专利5,350,837(该文献引入本文作为参考)中公 开了一系列功能基化的氨基羧酸盐，它们可以改善锝标记的肼基修 饰的蛋白质的形成速率。我们发现，其中的某些氨基羧酸盐可以改 善本发明的放射性药物的收率。优选的辅助配体AL1功能基化的氨基 羧酸盐是甘氨酸的衍生物；首选tricine(三(羟甲基)甲基甘氨酸)。
本发明首选的锝放射性药物由一个肼基或二氮烯基结合单元和 两种类型的辅助配体AL1和AL2或二胺二硫醇螯合剂组成。第二种类型 的辅助配体AL2由一个或多个软供体原子组成，所述软供体原子选自： 膦的磷、胂的砷、亚胺的氮(sp2杂化)、硫(sp2杂化)和碳(sp杂化)；具有 p-酸特性的原子。配体AL2可以是单齿的、二齿的或三齿的，齿数由 配体中供体原子的数量确定。二齿配体的两个供体原子之一以及三 齿配体的三个供体原子之一必需是软供体原子。在共同未决申请 U.S.S.N。08/415,908、U.S.S.N。60/013360和08/646,886(其公开的内 容全文引入本文作为参考)中，我们公开了由一种或多种辅助配体或 辅配体AL2组成的放射性药物比不是由一种或多种辅助配体或辅配体 AL2组成的放射性药物更稳定；也就是说，它们具有最少数量的异构 体形式，相对比值不会随着时间明显改变，并且在稀释时仍基本保 持完整。
由膦或胂供体原子组成的配体AL2是三取代的膦、三取代的胂、 四取代的二膦和四取代的联胂。由亚胺的氮组成的配体AL2是不饱和 或芳香性的5或6元含氮杂环。由硫(sp2杂化的)供体原子组成的配体是 磺基羰基，其含有C＝S部分。由碳(sp杂化的)供体原子组成的配体是 异腈，其含有CNR部分，其中R是有机基团。所述配体中的大部分可 以通过商业途径获得。异腈可以按照欧洲专利0107734和美国专利 4,988,827中的描述制备，上述文献引入本文作为参考。
优选的辅助配体AL2是三取代的膦和不饱和或芳香性的5或6元杂 环。首选的辅助配体AL2是三取代的膦和不饱和的5元杂环。
辅助配体AL2可以被烷基、芳基、烷氧基、杂环、芳烷基、烷芳 基和芳基烷芳基所取代并且可以带有或不带有由杂原子如氧、氮、 磷或硫组成的功能基。所述功能基的例子包括但不仅限于：羟基、羧 基、甲酰胺、硝基、醚、酮、氨基、铵、磺酸酯、磺酰胺、膦酸酯 和膦酰胺。可以对功能基进行选择以改变配体的亲脂性和水溶性， 这可以影响放射性药物的生物学特性，例如改变在非靶点组织、细 胞或体液中的分布以及从体内排除的机制和速率。
用于治疗用放射性药物的螯合剂或结合部分，选至于与具有α粒 子、β粒子、Auger或Coster-Kronig电子发射的放射性同位素形成稳定 的配合物，所述放射性同位素是，例如186Re、188Re、153Sm、166Ho、 177Lu、149Pm、90Y、212Bi、103Pd、109Pd、159Gd、140La、198Au、 199Au、169Yb、175Yb、165Dy、166Dy、67Cu、105Rh、111Ag和192Ir。 铼、铜、钯、铂、铱、铑、银和金同位素的螯合剂选自二胺二硫 醇、单胺-单酰胺二硫醇、三酰胺-单硫醇、单胺-二酰胺-单硫醇、二 胺二肟和肼。钇、铋和镧系元素同位素的螯合剂选自环状和无环的 多氨基羧酸酯，例如DTPA、DOTA、DO3A、2-苄基-DOTA、α-(2-苯 乙基)1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1-乙酸-4，7，10-三(甲基乙酸)、2-苄基- 环己基二亚乙基三胺五乙酸、2-苄基-6-甲基-DTPA和6，6″-二 [N，N，N″，N″-四(羧基甲基)氨基甲基]-4′-(3-氨基-4-甲氧基苯基)- 2，2′：6′，2″-三联吡啶。
用于磁共振成像造影剂的螯合剂，选至同顺磁金属离子如 Gd(III)、Dy(III)、Fe(III)和Mn(II)形成稳定的配合物，所述螯合剂选 自环状和无环的多氨基羧酸酯，例如DTPA、DOTA、DO3A、2-苄基- DOTA、α-(2-苯乙基)1，4，7，10-四氮杂环十二烷-1-乙酸-4，7，10-三(甲基 乙酸)、2-苄基-环己基二亚乙基三胺五乙酸、2-苄基-6-甲基-DTPA和 6，6″-二[N，N，N″，N″-四(羧基甲基)氨基甲基]-4′-(3-氨基-4-甲氧基苯基)- 2，2′：6′，2″-三联吡啶。
含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明的锝和铼放射性药物可 以方便地通过将放射性核素的盐、本发明的试剂、辅助配体AL1、辅 助配体AL2和还原剂在含水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。由 含有两个氮和两个硫原子的四齿螯合剂组成的本发明的锝和铼放射 性药物可以方便地通过将放射性核素的盐、本发明的试剂和还原剂 在含水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。
当本发明试剂中的结合单元以腙基团存在时，则必需在与金属 放射性核素配合前将其首先转变成肼，转变成的肼可以是质子化 的，也可以是非质子化的。腙基团向肼的转变可以在与放射性核素 反应前进行(在该情况下，放射性核素和辅助配体或辅配体或配体不 是与试剂混合，而是与带有螯合剂或结合单元的试剂的水解形式混 合)，或者是在放射性核素的存在下进行(在该情况下，试剂本身与放 射性核素和辅助配体或辅配体或配体混合)。在后一种情况下，反应 混合物的pH值必需是中性或酸性的。
或者，含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明放射性药物可以 通过如下方法制得：首先将放射性核素的盐、辅助配体AL1和还原剂 在含水溶液中于0至100℃的温度下混合形成与辅助配体AL1的中间体 放射性核素配合物，然后加入本发明的试剂和辅助配体AL2并继续在 0至100℃的温度下反应。
另外，含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明放射性药物可以 通过如下方法制得：首先将放射性核素的盐、辅助配体AL1、本发明 的试剂和还原剂在含水溶液中于0至100℃的温度下混合形成中间体 放射性核素配合物，然后加入辅助配体AL2并继续在0至100℃的温度 下反应。
锝和铼放射性核素优选是高锝酸盐或高铼酸盐和可药用阳离子 的化学形式。高锝酸盐优选例如从市售的Tc-99m发生器制得的高锝 酸钠。用于制备本发明放射性药物的高锝酸盐的量可以为0.1mCi至 1Ci，更优选1-200mCi。
用于制备本发明的锝和铼放射性药物的本发明试剂的量可以从 0.01μg至10mg，或者更优选为0.5μg-200μg。用量由其它反应物的量 以及所要制备的本发明放射性药物的特性所决定。
辅助配体AL1的用量可以为0.1mg-1g，更优选为1mg-100mg。对 于具体放射性药物的确切用量随着所要制备的本发明放射性药物的 特性、所用的方法以及其它反应物的用量和特性而改变。太大量的 AL1将会导致形成由不含生物学活性分子的锝标记的AL1组成的副产 物，或者由锝标记的含有辅助配体AL1但不含辅助配体AL2的生物学活 性分子组成的副产物。太少量的AL1将会导致其它副产物如锝标记的 含有辅助配体AL2但不含辅助配体AL1的生物学活性分子或还原水解的 锝或锝胶体。
辅助配体AL2的用量可以为0.01mg-1g，更优选为0.01mg-10mg。 对于具体放射性药物的确切用量随着所要制备的本发明放射性药物 的特性、所用的方法以及其它反应物的用量和特性而改变。太大量 的AL2将会导致形成由不含生物学活性分子的锝标记的AL2组成的副产 物，或者由锝标记的含有辅助配体AL2但不含辅助配体AL1的生物学活 性分子组成的副产物。如果试剂带有由一个或多个由以上定义的软 供体原子组成的取代基，则需要比式2试剂的摩尔量过量至少10倍的 辅助配体AL2以防止取代基干扰辅助配体AL2与金属放射性核素的配 位。
用于合成本发明放射性药物的适宜还原剂包括亚锡盐、连二亚 硫酸盐或亚硫酸氢盐、硼氢化物盐和甲脒亚磺酸，其中的盐可以是 任何可药用的形式。优选的还原剂是亚锡盐。还原剂的用量可以从 0.001mg-10mg，更优选0.005mg-1mg。
含有肼基或二氮烯基结合单元的本发明放射性药物的具体结构 取决于所用的本发明试剂的特性、辅助配体AL1的特性、辅助配体AL2 的特性以及放射性核素的特性。用＜100μg/mL的试剂浓度合成的含有 肼基或二氮烯基结合单元的放射性药物将含有一个肼基或二氮烯 基。用＞1mg/mL的浓度合成的放射性药物将含有来自两个试剂分子 的两个肼基或二氮烯基。对于大多数的应用，仅有有限量的生物活 性分子可以被注射，因此并不会引起不利的副作用，例如化学毒 性、干扰生物学过程或改变放射性药物的生物分布。因此，当放射 性药物需要较高浓度的部分由生物活性分子组成的试剂时，必需进 行稀释或在合成后进行纯化以避免所述的副作用。
辅助配体AL1和AL2的特性将决定变量y和z的值。y和z的值可以彼 此独立地是1-2的整数。在组合中，y和z的值将产生由至少5个但不超 过7个供体原子组成的锝内配位层。对于单齿辅助配体AL2，z可以是 1-2的整数；对于二齿或三齿辅助配体AL2，z是。单齿配体的优选组 合是y等于1或2，z等于1。二齿或三齿配体的优选组合是，y等于1，z 等于1。
本发明的铟、铜、镓、银、钯、铑、金、铂、铋、钇和镧系元 素放射性药物可以方便地通过将放射性核素的盐和本发明的试剂在 含水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。这些放射性核素通常以 在无机酸如盐酸、硝酸或硫酸中的稀含水溶液的形式得到。将放射 性核素与1至约1000当量溶于含水溶液中的本发明试剂混合。通常用 缓冲剂将反应混合物的pH保持在3-10。
本发明的钆、镝、铁和锰金属药物可以方便地通过将顺磁金属 离子和本发明的试剂在含水溶液中于0至100℃的温度下混合制得。 这些顺磁金属离子通常以在无机酸如盐酸、硝酸或硫酸中的稀含水 溶液的形式得到。将顺磁金属离子与1至约1000当量溶于含水溶液中 的本发明试剂混合。通常用缓冲剂将反应混合物的pH保持在3-10。
制备的总时间取决于金属离子特性、反应物的特性和用量以及 制备所用的方法。制备可以在1分钟内完成，以＞80％的收率得到放射 性药物，但也可能需要更长的时间。如果需要或希望得到更高纯度 的金属药物，可将产物通过本领域技术人员熟知的多种方法中的任 意一种进行纯化，例如，液相色谱、固相提取、溶剂萃取、透析或 超滤。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的缓冲剂包括但不仅限于，磷酸盐、柠檬酸盐、磺基水杨酸盐 和乙酸盐。更完整的目录可以参见美国药典。
在制备用于制备放射性药物的诊断试剂盒中所用的冷冻干燥助 剂包括但不仅限于甘露糖醇、乳糖、山梨醇、葡聚糖、Ficoll和聚乙 烯吡咯烷酮(PVP)。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的稳定助剂包括但不仅限于，抗坏血酸、半胱氨酸、单磺基甘 油、亚硫酸氢钠、偏亚硫酸氢钠、龙胆酸和肌醇。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的助溶剂包括但不仅限于，乙醇、甘油、聚乙二醇、丙二醇、 聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯、脱水山梨醇单油酸酯、聚山梨酯、 聚(氧乙烯)聚(氧丙烯)聚(氧乙烯)嵌段共聚物(Pluronics)和卵磷脂。优 选的助溶剂是聚乙二醇和Pluronics。
制备金属药物以及在用于制备所述放射性药物的诊断试剂盒中 所用的制菌剂包括但不仅限于，苄醇、氯苄烷铵、氯丁醇和对羟基 苯甲酸的甲酯、丙酯或丁酯。
诊断试剂盒中的组分还可以起到一种以上的功能。还原剂还可 以作为稳定助剂，缓冲剂还可以作为转移配体，冷冻干燥助剂还可 以作为转移配体、辅助配体或辅配体等。
诊断用放射性药物通过静脉内注射给药，通常以盐水溶液的形 式、以1-100mCi/70kg体重的剂量、或优选以5-50mCi的剂量给药。成 像用已知的方法进行。
治疗用放射性药物通过静脉内注射给药，通常以盐水溶液的形 式、以0.1-100mCi/70kg体重的剂量、或优选以0.5-5mCi/70kg体重的 剂量给药。
本发明的磁共振成像造影剂可以按照与美国专利5,155,215；美国 专利5,087,440；Margerstadt等，磁共振医学(Magn。Reson。Med.)， 1986，3，808；Runge等，放射学(Radiology)，1988，166，835；和 Bousquet等，放射学(Radiology)，1988，166，693中所描述的其它MRI 试剂类似的方式使用。通常，将造影剂的无菌水溶液以0.01- 1.0mmol/kg体重的剂量向患者静脉内给药。
当用作X-射线造影剂时，本发明的组合物通常应含有浓度为 1mM-5M、优选0.1M-2M的重原子。通过静脉内注射给药的剂量通常 为0.5mmol/kg至1.5mmol/kg，优选0.8mmol/kg至1.2mmol/kg。成像用 已知的技术进行，优选计算机控制的X-射线断层摄影术。
本发明的超声造影剂通过静脉内注射以10至30μL发生回波的气 体/kg体重的量给药，或通过输注以大约3μL/kg/分钟的速率给药。成 像用已知的超声描计术进行。
在以下实施例的描述过程中，本发明的其它特点将是显而易见 的，给出这些实施例仅仅是为了说明本发明，而并不是想要对其进 行限定。
实施例
以下描述可用于制备本发明化合物的代表性原料和方法。
1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)氢喹啉-3- 甲酸，7-溴-4-氧代氢喹啉-3-甲酸乙酯，1-(三苯基甲基)咪唑-2-基胺和3- 氨基-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯盐酸盐按照PCT WO 98/23608所述方法制备。Boc-L-磺基丙氨酸，Boc-L-磺基丙氨酸 N-羟基苯基酯和Boc-L-磺基丙氨酸对-硝基苯基酯按照下述文献所述 方法制备：Liebigs Ann。Chem。1979，776-783。苯并三唑-1-基氧基- 三吡咯烷基膦六氟磷酸盐(PyBOP)可商购自Novabiochem。(叔丁氧 基)-N-(3-溴丙基)甲酰胺和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰 基)(2-吡啶基))氨基)乙烯基)苯磺酸按照PCT WO 96/40637所述方法制 备。所有其它化学品和溶剂(试剂级)均由所指出的供应商供货直接使 用而无需进行进一步纯化。叔丁氧基羰基(Boc)氨基酸和其它氨基酸 原料可从下述公司商购：Bachem Inc.，Bachem Biosciences Inc。 (Philadelphia，PA)，Advanced ChemTech(Louisville，KY)，Peninsula Laboratories(Belmont，CA)或Sigma(St。Louis，MO)。2-(1H-苯并三 唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)和TBTU购自Advanced ChemTech。N-甲基吗啉(NMM)、间-甲酚、D-2-氨基丁酸(Abu)、三 甲基乙酰氯、二异丙基乙基胺(DIEA)、1，2，4-三唑、氯化亚锡二水合 物和三(3-磺酸根苯基)膦三钠盐(TPPTS)购自Aldrich Chemical Company。二(3-磺酸根苯基)苯基膦二钠盐(TPPDS)按照公开的方法 (Kuntz，E.，美国专利4,248,802)制备。(3-磺酸根苯基)二苯基膦单钠盐 (TPPMS)购自TCI America，Inc。Tricine由Research Organics，Inc提 供。锝-99m-高锝酸盐(99mTcO4-)来自DuPont Pharma 99Mo/99mTc Technelite_发生器。In-111-氯化物(Indichlor_)来自Amersham Medi- Physics，Inc。Sm-153-氯化物和镥-177-氯化物来自University of Missouri Research Reactor(MURR)。钇-90氯化物来自Pacific Northwest Research Laboratories。二甲基甲酰胺(DMF)、乙酸乙酯、 氯仿(CHCl3)、甲醇(MeOH)、吡啶和盐酸(HCl)来自Baker。乙腈、二 氯甲烷(DCM)、乙酸(HOAc)、三氟乙酸(TFA)、乙醚、三乙胺、丙酮 和硫酸镁从市场购得。无水乙醇来自Quantum Chemical Corporation。 合成Boc-Glu-(OTFP)-OTFP
在室温下，在氮气氛下，向Boc-Glu-OH(28.9g，117mmol)的 DMF(500mL)溶液中加入2，3，5，6-四氟苯酚(48.2g，290mmol)的 DMF(50mL)溶液。在搅拌10分钟后，加入EDC(55.6g，290mmol)，将 反应混合物搅拌约96小时。真空除去挥发性物质，将残余物在0.1N HCl(750mL)中研制。向该混合物中加入乙酸乙酯(600mL)，分层。 水层用乙酸乙酯(3×500mL)萃取，合并所有的乙酸乙酯馏分，用水 (300mL)和盐水(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种黄褐色 固体(62g)。将这种黄褐色固体用乙腈洗涤，得到纯形式的标题化合 物(45.5g，73％)。
ESMS：计算值，C22H17F8NO6，543.09；实测值，566.0[M+Na]。 实施例1 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶 基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基)磺 酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰 基氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：N-(3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)(苯基甲氧基) 甲酰胺
将4，7，10-三氧杂-1，13-十三烷二胺(158mL，0.72mol)，TEA(16.7 mL，0.12mol)和MeOH(300mL)的无过氧化物THF(1,000mL)溶液放置 在3升的3-颈烧瓶中，烧瓶备有机械搅拌器、温度计、加料漏斗和氮 气管。
向加料漏斗中加入氯代甲酸苄酯(17.1mL，0.12mol)的无过氧化 物的THF(1,000mL)溶液。将烧瓶的内容物冷却至低于5℃。再将烧瓶 的内容物在低于5℃的温度下搅拌4小时。再将溶液搅拌30分钟，浓缩， 得到一种粘稠的浆液。
将这种浆液吸收于饱和的NaCl(1800mL)和10％Na2CO3(200mL) 中，用乙醚(3×1,000mL)萃取。将合并后的醚萃取液用饱和NaCl(500 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种浅黄色油(36.74g)。快速色 谱处理(7×29cm硅胶柱上)(DCM/MeOH/TEA，20/15/0.5)，得到标题化 合物，为一种无色浆液(19.14g，45％)。1H NMR(CDCl3)：7.33-7.25(m， 5H)，5.59(s，1H)，5.06(s，2H)，3.62-3.45(m，12H)，3.32-3.25(m，2H)， 2.74(t，J＝6.7Hz，2H)，1.75(五重峰，J＝6.0Hz，2H)，1.67(五重峰，J＝ 6.4Hz，2H)，1.33(s，2H)；MS：m/e 355.4[M+H]；高分辨MS：计算值： C18H31N2O5[M+H]：355.2233，实测值：355.2222。 部分B：3-((叔丁氧基)羰基氨基)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((苯基甲氧基) 羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基)磺酰 基)氨基)丙酸甲酯
将联苯基-4，4′-二磺酰氯(2.64g，7.5mmol，从CHCl3中新结晶出来 的)和DCM(200mL)放置在500mL的3颈烧瓶中，烧瓶备有温度计、加 料漏斗和氮气管。
向加料漏斗中加入N-(3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙 基)(苯基甲氧基)甲酰胺(1.77g，5.0mmol)和DIEA(0.87mL，5.0mmol) 的DCM(40mL)溶液。将烧瓶的内容物冷却至低于5℃。将加料漏斗 的内容物加至烧瓶中，同时迅速搅拌3小时，并保持烧瓶的温度低于5 ℃。向加料漏斗中加入N-β-Boc-L-α，β，-二氨基丙酸甲基酯盐酸盐(2.55 g，10mmol)和DIEA(3.8mL，22mmol)的DCM(25mL)溶液。将该溶 液加至烧瓶中，燕在5℃下搅拌15分钟，并在室温下搅拌20小时。将 反应溶液依次用0.1N HCl(100mL)和水(2×100mL)洗涤，干燥 (MgSO4)，浓缩，得到一种粘稠油(5.79g)。快速色谱处理(在5×21cm 硅胶柱上)(85/15 EtOAc/己烷，随后100％EtOAc)，得到一种无色无定 形固体。在甲苯(85mL)中进行重结晶，得到标题化合物，为一种无色 固体(2.52g，59％)。MP：104.5-106.5；1H NMR(CDCl3)：8.00-7.90(m， 4H)，7.72-7.64(m，4H)，7.46-7.24(m，5H)，5.96-5.88(m，1H)，5.86-5.73(m， 1H)，5.41(s，1H)，5.16-5.00(m，3H)，4.15-4.02(m，1H)，3.68-3.39(m，17H)， 3.34-3.22(m，2H)，3.13-3.03(m，2H)，1.80-1.62(m，4H)，1.39(s，9H)；13C NMR(CDCl3)：170.2，156.5，156.1，143.9，143.0，140.4，139.4，136.7， 128.4，128.1，128.0，127.9，127.9，127.8，127.3，80.1，70.6，70.5，70.2， 70.1，70.0，69.6，66.5，56.1，52.9，43.2，42.4，39.3，29.4，28.5，28.2；MS： m/e 868.3[M+NH4]；高分辨MS：计算值：C39H55N4O13S2[M+H]： 851.3207，实测值：851.3226. 部分C：3-((1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)(3- 氢醌基))羰基氨基)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((苯基甲氧基)羰基氨基)丙氧 基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲 酯
将上述部分B的产物(748mg，0.88mmol)溶解于25/75 TFA/DCM(15mL)中，随后，在氮气氛下使其在室温下放置15分钟。 真空除去TFA，将形成的琥珀色油吸收于50/50 ACN/水(50mL)中，用 Bio-Rad AG-3-X4A树脂(氢氧化物型)分批进行处理，使pH值从2升至 6。过滤除去树脂，将滤液进行冷冻干燥，得到粘稠的浅黄色泡沫 物。
在另一个烧瓶中，将1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基) 氨基)甲基)氢喹啉-3-甲酸(432mg，0.80mmol)、TEA(0.33mL)和 HBTU(364mg，0.96mmol)溶解于无水DMF(25mL)中。将形成的溶液 在室温和氮气氛下搅拌10分钟，并与黄色泡沫物在无水DMF(15mL) 中的溶液合并。真空下18小时后除去DMF，得到一种粘稠的黄色油。 将该油吸收于EtOAc(175mL)中，依次用水(25mL)、饱和NaHCO3(50 mL)和饱和NaCl(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种粘稠的 黄色油。
用快速色谱在7×25cm硅胶柱上纯化，采用CHCl3/EtOAc/MeOH 分步梯度洗脱(47/47/6，46/46/8，60/30/10)，得到标题化合物，为一种 浅浅黄色固体(510mg，50％)。MP：136-140；MS：m/e 1273.4[M+H]； 高分辨MS：计算值：C68H73N8O13S2[M+H]：1273.4738，实测值： 1273.4730。 部分D：3-((1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)-咪唑-2-基)氨基)甲基)(3- 氢醌基))羰基氨基)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((苯基甲氧基)羰基氨基)丙氧 基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基)磺酰基)氨基)丙酸
将上述部分C的产物(295mg，0.232mmol)溶解于无过氧化物的 THF(12mL)、水(1.8mL)和3N LiOH(1.2mL)的混合物中，和在室温 和氮气氛下搅拌30分钟。真空除去THF，将形成的混合物溶解于 CHCl3(75mL)和水(50mL)中。水层用05N HCl调节pH3，使两层充分 混合。水层再用CHCl3(2×25mL)萃取。合并的CHCl3萃取液用饱和 NaCl(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一种浅 黄色固体(291mg，100％)。MS：m/e 1259.3[M+H]；高分辨MS：计算值： C67H71N8O13S2[M+H]：1259.4582，实测值：1259.4610。 部分E：2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基) 磺酰基)苯基)苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基)甲基)-1-甲基-4-氧 代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸
将上述部分D的产物(279mg，0.222mmol)溶解于脱气的TFA(30 mL)中，并用Et3SiH(0.424mL，2.66mmol)处理。将溶液在氮气氛下于 70℃加热1小时，浓缩成一种粘稠油。将这种油溶解于水(20mL)中， 并用乙醚(2×20mL)洗涤。合并的乙醚洗涤液用水(10mL)反萃。合 并的水萃取液用等体积的CAN稀释，再用Bio-Rad AG-3-X4A树脂(氢 氧化物型)处理，将pH值从4升至6。过滤除去树脂，将滤液冷冻干燥， 得到标题化合物，为一种无色固体(220mg)。MS：m/e 883.4[M+H]， 442.5[M+2H]；高分辨率MS：计算值：C40H51N8O11S2[M+H]：833.3118， 实测值：833.3118。 部分F：2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨 基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯 基)苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3- 氢醌基))羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述步骤F的产物(15mg，0.0135mmol)、TEA(0.007mL)和2- (2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基))氨基)乙烯基)-苯 磺酸(9.0mg，0.0204mmol)的无水DMF(2.5mL)溶液在室温和氮气氛下 放置22小时。真空除去DMF，将玻璃状固体溶解于20％ACN中，用制 备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，采用0.1％TFA的水 溶液5分钟，再在流速为20mL/分钟下采用包含0.1％TFA的0-63％CAN， 以2.52％/分钟的梯度进行洗脱。收集在21.2分钟洗脱的主产物峰，为 一种无色粉末(3.5mg，20％)。MS：m/e 1186.7[M+H]；高分辨率MS： 计算值：C53H60N11O15S3[M+H]：1186.3432，实测值：1186.3410。 实施例2 (3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2- (((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基) 乙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基)磺 酰基)氨基)丙酸双(三氟乙酸)盐 部分A：2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸苯基甲酯
将(1，4，7，10-四氮杂-4，7-双(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷基)乙 酸叔丁酯(0.922g，1.79mmol)、TEA(1.8mL)和溴代乙酸苄酯(0.86 mL，5.37mmol)的无水DMF(24mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌24小 时。真空除去DMF，将形成的油溶解于EtOAc(300mL)中。将该溶液 依次用水(2×50mL)和饱和NaCl(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩， 得到标题化合物，为一种非晶形固体(1.26g)。MS：m/e 663.5[M+H]。 部分B：2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸
将上述部分A的产物(165mg，0.25mmol)在10％Pd/炭(50mg)上于 EtOH(15mL)中及60psi下氢解24小时。通过过滤助剂经过滤除去催 化剂，再用EtOH洗涤。将滤液浓缩，得到标题化合物，为一种非晶形 固体(134mg，94％)。MS：m/e 573.5[M+H]。 部分C：3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代-(3-氢醌基))羰基氨 基)-2-(((4-(4(((3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰 基)甲基)环十二烷基)乙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基) 磺酰基)苯基)苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯五(三氟乙酸)盐
将实施例1的产物、部分C(68mg，0.0534mmol)和Et3SiH(0.051 mL，0.32mmol)在脱气的TFA(5.0mL)中的溶液在70℃和氮气氛下搅拌 1小时，浓缩至干。将形成的琥珀色油溶解于无水DMF(2mL)中，并 用TEA处理，直至pH低呈碱性。将上述部分B的产物(46mg，0.080 mmol)的无水DMF(1.0mL)溶液加入，再加入HBTU(24mg，0.064 mmol)，将溶液在室温和氮气氛下搅拌3小时。真空除去DMF，将残余 物溶解于50％CAN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上 进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-63％ACN以 2.52％/分钟的梯度进行洗脱。收集在23.8分钟洗脱的主产物峰，经冷 冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末(16mg，15％)。MS：m/e 1451.7[M+H]；高分辨MS：计算值：C69H103N12O18S2[M+H]：1451.6954， 实测值：1451.698。 部分D：3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨 基)-2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二 烷基)乙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯 基)磺酰基)氨基)丙酸双(三氟乙酸)盐
将上述部分C的产物(16mg，0.0102mmol)溶解于无过氧化物的 THF(1mL)，水(0.115mL)和3N LiOH(0.075mL)的混合物中，在室温 和氮气氛下搅拌24小时。将反应物浓缩，获得一种油状固体。将该固 体溶解于50％CAN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上 进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-63％ACN以 2.52％/分钟的梯度进行洗脱。收集在19.0分钟洗脱的主产物峰经冷冻 干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末(2.0mg，17％)。MS：m/e 1269.5[M+H]，635.5[M+2H]，424.3[M+3H]；高分辨率MS：计算值： C56H77N12O18S2[M+H]：1269.4920，实测值：1269.4950。 实施例3 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡 啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6 二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代 (3-氢醌基))羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：4-(3，5-二甲基苯氧基)丁酸乙酯
将钠金属(17.12g，0.744mol)加至无水EtOH(350mL)中，进行搅 拌直至溶解。加入3，5-二甲基苯酚，将溶液在室温下搅拌15分钟。加 入4-溴代乙酸乙酯(58.7mL，0.41mol)，再将溶液在室温和氮气氛下搅 拌28小时。真空除去EtOH，使油状固体在水(1L)和EtOAc(500mL)间 分配。水层再用EtOAc(500mL)萃取。合并后的EtOAc萃取液依次用 饱和NaHCO3(300mL)和饱和NaCl(300mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩， 得到一种琥珀色液体。将该液体通过15cm Vigreux柱进行真空分 馏。收集主馏分(91-117℃/6mm Hg)，得到标题化合物，为一种无色液 体(77.77g，89％)。1H NMR(CDCl3)：6.59(s，1H)，6.52(s，2H)，4.16(q，J- 7.16Hz，2H)，3.98(t，J＝6.14Hz，2H)，2.49(t，J＝7.34Hz，2H)，2.28(s， 6H)，2.11-2.07(m，2H)，1.26(t，J＝7.16Hz，3H)；分析计算值：C14H20O3C，71.16；小时，8.53，实测值：C，71.35；小时，8.59。 部分B：4-(3，5-二甲基苯氧基)丁酸
将上述部分A的产物(75.52g，0.320mol)和KOH小丸(38.5g，0.584 mol)溶解于无水EtOH(1.50L)中，并回流加热3小时。将溶液浓缩成一 种无色固体，将其吸收于水(2.0L)中，用乙醚(2×750mL)洗涤。用浓 HCl(55mL)将水层pH调节至1，将形成的油状ppt萃取进入EtOAc(2× 500mL)中。合并后的EtOAc萃取液依次用水(300mL)和饱和NaCl洗 涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种无色固体(64.13g)。在己烷(500 mL)中进行重结晶，得到标题化合物，为一种无色固体(59.51g， 89％)。MP：66-68.5；1H NMR(CDCl3)：11.70(bs，1H)，6.59(s，1H)， 6.52(s，2H)，3.99(t，J＝6.06Hz，2H)，2.57(t，J＝7.29Hz，2H)，2.28(s，6H)， 2.12-2.08(m，2H)；分析计算值：C12H16O3：C，69.21；小时，7.74，实测值： C，69.23；小时，7.40。 部分C：4-(4-(氯磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基)丁酸
将上述部分B产物(20.8g，0.100mol)的CHCl3(100mL)溶液冷却至 0℃，用氯代磺酸(36mL，0.54mol)进行滴加处理，同时迅速搅拌并保 持反应温度为0℃。将形成的胶状混合物再搅拌10分钟，然后倒入冰/ 水混合物(600mL)中。将形成的固体ppt通过过滤收集，用水(3×75 mL)洗涤和真空干燥，得到一种无色固体(12.52g)。MP：114-115℃(分 解)；1H NMR(CDCl3)：13.84(bs，1H)，6.50(s，2H)，3.91(t，J＝6.48Hz， 2H)，2.48(s，6H)，2.32(t，J＝7.32Hz，2H)，1.89-1.84(m，2H)；IR(KBr cm-1 )：1705(s)，1370(s)，1175(s)；MS：m/e 305.1[M-H]。 部分D：4-(4-(((2-((叔丁氧基)羰基氨基)-1-(甲氧羰基)乙基)氨基)磺酰 基)-3，5二甲基苯氧基)丁酸
将N-β-Boc-1-α，β-二氨基丙酸甲基酯盐酸盐(568mg，2.10mmol)和 DIEA(0.73mL，4.2mmol)的DCM(5mL)溶液冷却至℃，再用部分C的 产物(656mg，2.10mmol)在DCM(20mL)中的悬浮液分几批处理15分 钟。使反应在室温和氮气氛下搅拌18小时。将反应物用DCM(100mL) 稀释，再用水(3×75mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，浓缩，得到粗 产物(698mg)，用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×500mm)上进行纯化， 在流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的18-58.5％ACN以0.96％/ 分钟的梯度进行洗脱。收集在23.8分钟洗脱的主产物馏分，调节至pH 3，部分浓缩以除去CAN，再用DCM(2×100mL)萃取。将DCM萃取 液干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一种无色固体(297mg， 29％)。1H NMR(CDCl3)：δ 6.61(s，2H)，5.66(d，J＝7.2Hz，1H)，4.90(s， 1H)，4.03(bs，2H)，3.86(bs，1H)，3.59(s，3H)，3.49(bs，2H)，2.62(s，6H)， 2.58-2.51(m，2H)，2.18-2.07(m，2H)，1.41(s，9H)；MS：m/e 489.4[M+H]； 高分辨率MS：计算值：C21H33N2O9S[M+Na]：511.1726，实测值： 511.1747；分析计算值：C21H32N2O9S：C，51.62；小时，6.61；N，5.74，实 测值：C，51.47；小时，6.27；N，5.48。 部分E：3-((叔丁氧基)羰基氨基)-2-(((2，6-二甲基-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3- ((苯基甲氧基)羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙 氧基)苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯
将上述部分D的产物(233mg，0.477mmol)、实施例1部分A的产物 (190mg，0.536mmol)、TEA(0.2mL，1.43mmol)和HBTU(226mg， 0.701mmol)的无水DMF(8mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌1小时。真 空除去DMF，将油状残余物吸收于EtOAc(50mL)中，依次用0.1N HCl(35mL)，水(35mL)和饱和NaCl(35mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩， 得到粗产物，为一种黄色粘稠油。进行快速色谱处理(3×18cm硅胶 柱上)(EtOAc/MeOH，95/5)，得到标题化合物，为一种无色粘稠油 (393mg，100％)。1H NMR(CDCl3)：δ7.34-7.28(m，5H)，6.60(s，2H)， 6.26(bs，1H)，5.67(bs，1H)，5.29(bs，1H)，5.08(s，2H)，4.88(bs，1H)，3.99(t， J＝6.1Hz，2H)，3.88-3.84(m，1H)，3.62-3.40(m，17H)，3.37-3.26(m，4H)， 2.62(s，6H)，2.32(t，J＝7.2Hz，2H)，2.08(t，J＝6.3Hz，2H)，1.79-1.70(m， 4H)，1.41(s，9H)；MS：m/e 825.5[M+H]；高分辨MS：计算值： C39H61N4O13S[M+H]：825.3955，实测值：825.3940。 部分F：3-氨基-2-(((2，6-二甲基-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((苯基甲氧基)羰基 氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)苯基)磺酰基) 氨基)丙酸甲酯
将上述部分E的产物(750mg，0.91mmol)溶解于4M HCl/二恶烷 (25mL)中，在室温下搅拌1小时。将溶液用乙醚(500mL)稀释，将形 成的胶态ppt用新鲜的乙醚(2×250mL)研制。将胶状固体溶解于水 (100mL)，中用NaHCO3调节pH至9，从而形成油状ppt。将这种ppt萃 取入DCM(2×75mL)中。将DCM萃取液干燥(MgSO4)，浓缩，得到 标题化合物，为一种无色油(386mg，56％)。MS：m/e 725.5[M+H]。 部分G：2-(((2，6-二甲基-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((苯基甲氧基)羰基氨基)丙 氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)苯基)磺酰基)氨基)-3- ((1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基)) 羰基氨基)丙酸甲酯
将1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)氢喹 啉-3-甲酸(274mg，0.51mmol)，TEA(0.22mL，1.52mmol)和HBTU(192 mg，0.51mmol)的无水DMF(3mL)溶液在室温下搅拌5分钟。将上述部 分F的产物(367mg，0.51mmol)的无水DMF(7mL)溶液加入，将形成的 溶液在室温和氮气氛下搅拌2小时。真空除去DMF，将形成的油状固 体溶解于EtOAc(150mL)中。将EtOAc溶液依次用水(50mL)，饱和 NaHCO3(25mL)和饱和NaCl(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到 一种黄色固体。经硅胶柱快速色谱纯化(采用EtOAc/MeOH分布洗脱 (95/5，92.5/7.5))，得到标题化合物，为一种浅黄色固体(254mg， 43％)。MS：m/e 1247.7[M+H]，624.6[M+2H]。 部分H：2-(((2，6-二甲基-4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((苯基甲氧基)羰基氨基)丙 氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)苯基)磺酰基)氨基)-3- ((1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基)) 羰基氨基)丙酸
将上述部分G的产物(60.0mg，0.048mmol)溶解于无过氧化物的 THF(2.5mL)，水(0.37mL)和3N LiOH(0.244mL)的混合物中，在室温 和氮气氛下搅拌30分钟。真空除去THF，将形成的混合物溶解于 CHCl3(25mL)和水(20mL)中。水层用0.1N HCl调节pH至3，将两层 充分混合。水层再用CHCl3(2×20mL)萃取。合并的CHCl3萃取液用 饱和NaCl(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一 种浅黄色固体(44.0mg，74％)。MS：m/e 1233.7[M+H]；高分辨MS：计 算值：C67H77N8O13S[M+H]：1233.5330，实测值：1233.5330。 I部分：2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基 甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基) 甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸
将上述部分H的产物(42.1mg，0.0341mmol)和Et3SiH(0.033mL， 0.205mmol)溶解于脱气的TFA(3.5mL)中，在氮气氛下于70℃加热1小 时，浓缩，得到一种粘稠的琥珀色油。将这种油溶解于水(20mL)中， 用用乙醚(2×20mL)洗涤。合并的乙醚洗涤液用水(10mL)反萃。合 并的水萃取液用等体积的CAN稀释，再用Bio-Rad AG-3-X4A树脂(氢 氧化物型)处理，将pH值从4升至6。过滤除去树脂，将滤液冷冻干燥， 得到标题化合物，为一种无色固体(34mg)。MS：m/e 857.5[M+H]， 429.4[M+2H]。 J部分：2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨 基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙 氧基)-2，6二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲 基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述部分I的产物(30mg，0.035mmol)，DIEA(0.018mL，0.105 mmol)和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基))氨基) 乙烯基)苯磺酸(18.5mg，0.042mmol)的无水DMF(1.5mL)溶液在室温 和氮气氛下放置20小时。真空除去DMF，将琥珀色油溶解于50％ ACN中，用制备HPLC于Zorbax C-18 RX柱(21.2×250)上进行纯化， 在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-45％ACN以1.5％/分钟 的梯度进行洗脱。收集在21.0分钟洗脱的主产物峰，冷冻干燥，得到 标题化合物，为一种无色粉末(8.9mg，20％)。MS：m/e 1160.6[M+H]， 581.0[M+2H]。 实施例4 3-((1-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶基))羰基氨基) 丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)-甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)7-溴-4-氧代氢喹啉-3-甲酸乙 酯
将7-溴-4-氧代氢喹啉-3甲酸乙酯(6.28g，0.0212mol)，(叔丁氧基)- N-(3-溴丙基)甲酰胺(30.3g，0.127mol)和无水K2CO3(12.5g，0.904mol) 在无水DMF(200mL)中的混合物于60℃及氮气氛下搅拌4小时，然后， 在室温下搅拌72小时。真空除去DMF，将形成的油状固体溶解于 EtOAc(500mL)中。EtOAc溶液依次用水(500mL)，饱和的 NaHCO3(500mL)和饱和NaCl(500mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得 到一种红色油。将这种油吸收于EtOAc(250mL)中，冷却，形成固体 ppt。将这种ppt通过过滤收集，用冷EtOAc洗涤，干燥，得到标题化合 物，为一种无色固体(6.25g，65％)。MP：140-142；1H NMR(CDCl3)： 8.49(s，1H)，8.39(d，J＝8.6Hz，1H)，7.58(s，1H)，7.53(d，J＝8.6Hz，1H)， 4.72(bs，1H)，4.39(q，J＝7.1Hz，2H)，4.20(t，J＝7.6Hz，2H)，3.28-3.24(m， 2H)，2.10-2.06(m，2H)，1.46(s，9H)，1.40(t，J＝7.1Hz，3H)；MS：m/e 455.2.[M+H]；高分辨MS：计算值：C20H26BrN2O5[M+H]：453.1025，实 测值：453.1028。 部分B：1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)-4-氧代-7-乙烯基氢喹啉-3-甲 酸乙酯
将上述部分A的产物(2.98g，6.60mmol)溶解于在100℃下的甲苯 (50mL)中，用四(三苯膦)钯(0)(152mg，0.132mmol)处理。5分钟后， 将混合物用三丁基(乙烯基)锡(1.93mL，6.60mmol)处理，在100℃和氮 气氛下搅拌4.5小时，在室温下搅拌18小时。再加入三丁基(乙烯基) 锡(0.386mL)和四(三苯膦)钯(0)(152mg)，再将混合物在100℃下加热 17小时。真空除去甲苯，将固体残余物用乙醚研制，得到标题化合物， 为一种浅绿色固体(1.67g，63％)。MP：133-135；1H NMR(CDCl3)： 8.52(d，J＝8.4Hz，1H)，8.51(s，1H)，7.55(d，J＝8.4Hz，1H)，7.38(s，1H)， 6.88-6.82(m，1H)，5.97(d，J＝17.4Hz，1H)，5.51(d，J＝10.8Hz，1H)， 4.75(bs，1H)，4.42(q，J＝7.2Hz，2H)，4.27(t，J＝7.8Hz，2H)，3.6-3.25(m， 2H)，2.162.11(m，2H)，1.49(s，9H)，1.45(t，J＝7.2Hz，3H)；MS：m/e 401.3[M+H]；高分辨MS：计算值：C22H29N2O5[M+H]：401.2076，实测 值：401.2075。 部分C：1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)-7-甲酰基-4-氧代氢喹啉-3-甲 酸乙酯
将上述部分B的产物(1.50g，3.75mmol)的二恶烷(119mL)和水(39 mL)的溶液用四氧化锇(19.6mg，0.077mmol)的二恶烷(0.600mL)溶液 在室温和氮气氛下搅拌5分钟。加入高碘酸钠(2.40g，11.2mmol)，并 在在室温下搅拌2小时。真空除去二恶烷，将残余物吸收于DCM(500 mL)中。将DCM溶液依次用水(500mL)和饱和NaCl(500mL)洗涤，干 燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一种橙色油状固体(1.52g， 100％)。1H NMR(CDCl3)：10.17(s，1H)，8.68(d，J＝8.2Hz，1H)，8.64(s， 1H)，8.01(s，1H)，7.88(d，J＝8.2Hz，1H)，4.82(bs，1H)，4.41-4.35(m，4H)， 3.28(s，2H)，2.15-2.07(m，2H)，1.45(s，9H)，1.41(t，J＝7.1Hz，3H)；MS： m/e 403.3[M+H]；高分辨MS：计算值：C21H27N2O6[M+H]：403.1870， 实测值：403.1875。 部分D：1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪 唑-2-基)氨基)甲基)氢喹啉-3-甲酸乙酯
将上述部分C的产物(544mg，1.35mmol)和1-(三苯基甲基)咪唑-2- 基胺(456mg，1.35mmol)的甲苯(60mL)溶液在氮气氛下加热回流5小 时，同时除去水。将溶液冷却，再用Na(OAc)3BH(1.14g，5.38mmol) 处理，在室温下搅拌18小时。将混合物用EtOAc(400mL)稀释，依次 用水(500mL)和饱和NaCl(500mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一 种橙色固体。将这种固体溶解于50％ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在流速为49mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的18-52％ACN以0.60％/分钟的梯度进行洗脱。将在30.8分钟 洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种浅黄色固体 (407mg，60％)。MS：m/e 712.4[M+H]；高分辨MS：计算值： C43H46N5O5[M+H]：712.3499，实测值：712.3485。 部分E：1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪 唑-2-基)氨基)甲基)-氢喹啉-3-甲酸
将上述部分D的产物(997mg，1.40mmol)，水(7.3mL)，3N LiOH(3.5mL)和THF(50mL)的混合物在室温和氮气氛下搅拌3小时。 真空除去THF，将形成的混合物溶解于CHCl3(500mL)和水(100mL) 中。水层用1.0N HCl调节pH至3，将两层充分混合。有机层依次用水 (500mL)和饱和NaCl(500mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化 合物，为一种浅黄色固体(998mg)。MP：153-160℃；1H NMR(CDCl3)： δ14.83(s，1H)，8.76(s，1H)，8.68(s，1H)，8.24(d，J＝6Hz，1H)，7.49- 7.35(m，9H)，7.127.10(m，6H)，6.82(s，1H)，6.52(s，1H)，6.24(d，J＝6Hz， 1H)，5.75(bs，1H)，4.87-4.83(m，2H)，4.77(bs，1H)，4.51(t，J＝9Hz，2H)， 3.38(s，2H)，2.23(s，2H)，1.42(s，9H)；MS：m/e 684.3[M+H]；高分辨MS： 计算值：C41H42N5O5[M+H]：684.3186，实测值：684.3181。 部分F：3-((1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基) 咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺 酰基)氨基)丙酸甲酯
将上述部分E的产物(300mg，0.437mmol)，TEA(0.243mL，1.75 mmol)和HBTU(230mg，0.606mmol)的无水DMF(4mL)溶液在室温下 搅拌5分钟。加入3-氨基-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯 盐酸盐(184mg，0.637mmol)的无水DMF(3mL)溶液，再将溶液在室温 和氮气氛下搅拌2小时。将溶液用EtOAc(200mL)稀释，依次用水(2× 50mL)，饱和NaHCO3(50mL)和饱和NaCl(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)， 浓缩，得到一种粘稠的琥珀色油。在2.5×24cm硅胶柱上进行快速色 谱纯化，采用EtOAc/MeOH分布梯度(98/2，95/5，75/25)洗脱，得到标题 化合物，为一种浅黄色油(330mg，78％)。MS：m/e 966.6[M+H]；高分 辨MS：计算值：C54H60N7O8S[M+H]：966.4224，实测值：966.4224。 部分G：3-((1-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙基)-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基) 咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺 酰基)氨基)丙酸
将上述部分F的产物(51mg，0.052mmol)，水(0.27mL)和3N LiOH(0.13mL)的MeOH(2mL)溶液在室温下放置3.5小时，进行真空浓 缩。将形成的固体溶解于水(10mL)中，用1.0N HCl调节pH至3。将 水层的混合物用DCM(2×30mL)萃取。合并的DCM萃取液用饱和 NaCl(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一种无 色固体(72mg)。MS：m/e 952.5[M+H]；高分辨MS：计算值： C53H58N7O8S[M+H]：952.4067，实测值：952.4056。 部分H：3-((1-(3-氨基丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)-甲基)-4-氧代(3-氢醌基)) 羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸双(三氟乙酸)盐
将上述部分I的产物(0.052mmol)和Et3SiH(0.042mL，0.26mmol)溶 解于脱气的TFA(2mL)中，在70℃下加热2.5小时，浓缩，得到一种琥 珀色油。将这种油溶解于水(25mL)中，并用乙醚(2×15mL)洗涤。合 并的乙醚洗涤液用水(15mL)反萃。合并的水萃取液进行冷冻干燥， 得到标题化合物，为一种无色粉末(34mg，78％)。MS：m/e 610.4[M+H]；高分辨MS：计算值：C29H36N7O6S[M+H]：610.2448，实 测值：610.2462。 部分I：3-((1-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶基))羰 基氨基)丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)-甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)- 2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述部分H的产物(13.7mg，0.0163mmol)，TEA(0.015mL，0.108 mmol)和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基))-氨基) 乙烯基)苯磺酸(8.2mg，0.0186mmol)的无水DMF(2.0mL)溶液在室温 和氮气氛下放置24小时。减压除去DMF，将琥珀色油溶解于50％ ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流 速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-63％ACN以2.52％/分钟的梯 度进行洗脱。将在21.4分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题 化合物，为一种无色粉末(12.5mg，75％)。MS：m/e 913.3[M+H]；高分 辨MS：计算值：C42H45N10O10S2[M+H]：913.2761，实测值：913.2751。 实施例5 3-((1-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶基))羰基氨基) 丙基)-7-(((1-羟基咪唑-2-基)氨基)甲基)-4-氧代-(3-氢醌基))羰基氨基)- 2(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：3-((1-(3-氨基丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基)) 羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸(三氟乙酸盐)
将实施例4部分F的产物(120mg，0.124mmol)和Et3SiH(0.99mL， 6.20mmol)的TFA(10mL)溶液在70℃下加热1小时，浓缩，得到一种琥 珀色油。将这种油溶解于水(50mL)中，用乙醚(2×30mL)洗涤。合并 的乙醚洗涤液用水(20mL)反萃。合并的水萃取液进行冷冻干燥，得 到标题化合物，为一种无色粉末(105mg，100％)。MS：m/e 624.4[M+H]；高分辨MS：计算值：C30H38N7O6S[M+H]：624.2604，实 测值：624.2608。 部分B：3-((1-(3-氨基丙基)-7-(((1-羟基咪唑-2-基)氨基)甲基)-4-氧代(3- 氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸 盐
将上述部分A的产物(105mg，0.126mmol)，水(3.0mL)和3N LiOH(1.82mL)的含过氧化物的THF(4mL)溶液在室温下放置1小时，真 空浓缩。将形成的固体溶解于水(10mL)中，用1.0N HCl调节pH至 5。通过过滤除去不溶性杂质，将滤液冷冻干燥，得到一种无色固 体。将这种固体溶解于水中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250 mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0- 63％ACN以2.52％/分钟的梯度进行洗脱。将在19.5分钟洗脱的主产物 峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末(10.0mg，11％)。 MS：m/e 314.0[M+2H]。 部分C：3-((1-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡啶基)) 羰基氨基)丙基)-7-(((1-羟基咪唑-2-基)氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰 基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述部分B的产物(10.0mg，0.0135mmol)，TEA(0.018mL，0.129 mmol)和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基))氨基) 乙烯基)苯磺酸(7.2mg，0.0163mmol)的无水DMF(4mL)溶液在室温和 氮气氛下放置20小时。真空除去DMF，将琥珀色油溶解于30％ACN 中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为 20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-63％ACN以2.52％/分钟的梯度进 行洗脱。将在21.5分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合 物，为一种无色粉末(3.5mg，25％)。MS：m/e 929.4[M+H]；高分辨MS： 计算值：C42H45N10O11S2[M+H]：929.2710，实测值：929.2698。 实施例6 3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨基)(3-吡 啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基) 丙基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基) 丙基)氨基甲酰基)丙酸
将N-(3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)(叔丁氧基)甲酰 胺(如以下文献所述：D。S。Wilbur等，Bioconjugate。Chem.)(2.00g， 6.24mmol)，TEA(1.0mL，7.49mmol)和琥珀酸酐(624mg，6.24mmol) 的无水DMF(5mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌4小时。减压除去DMF， 得到标题化合物，为一种浅黄色油(2.80g)。MS：m/e 839.5[2M-H]， 419.4[M-H]。 部分B：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲 基)-咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基) 磺酰基)氨基)丙酸甲酯
在室温下，15分钟内，将实施例4部分F的产物(46.1mg，0.477 mmol)溶解于50％TFA/DCM(2.0mL)中，浓缩，得到一种黄色油。将 这种油溶解于无水DMF(1.0mL)中，用TEA使其对pH纸呈碱性。在另 一个烧瓶中，将上述部分A的产物(26.1mg，0.062mmol)，TEA(0.014 mL，0.099mmol)和HBTU(27.7mg，0.074mmol)溶解于无水DMF(1.0 mL)中。将形成的溶液反应5分钟，并与来自TFA脱保护反应的DMF 溶液合并。将合并的溶液在室温和氮气氛下放置20分钟，真空浓缩。 将形成的油溶解于50％ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22× 250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的 18-72％ACN以1.8％/分钟的梯度进行洗脱。将在26.8分钟洗脱的主产 物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末(44.5mg， 68％)。MS：m/e 1268.6[M+H]；高分辨MS：计算值：C68H86N9O13S[M+H]：1268.6065，实测值：1268.6070。 部分C：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((叔丁氧基)羰基氨基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-4-氧代-7-(1-(三苯基甲基)- 咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺 酰基)氨基)丙酸
将上述部分B的产物(31.1mg，0.0227mmol)，3N LiOH(0.091mL) 和水(0.117mL)的MeOH(1.30mL)溶液在室温下搅拌8.5小时。真空除 去MeOH，将含水混合物用水(30mL)稀释，用1.0N HCl调节pH至4。 将形成的含水混合物用DCM(2×50mL)萃取。合并的DCM萃取液用 饱和NaCl(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一 种无色固体(24.6mg，86％)。 部分D：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨 基甲酰基)丙酰基氨基)丙基)-7((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌 基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸双(三氟乙酸盐)
将上述部分C的产物(24.6mg，0.0194mmol)和Et3SiH(0.016mL， 0.097mmol)的TFA(2.0mL)溶液在70和氮气氛下加热3小时，浓缩， 得到一种黄色固体。将这种固体溶解于水(50mL)中，用乙醚(2×25 mL)洗涤。水层进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种浅黄色固体 (20.7mg，93％)。MS：m/e 912.5[M+H]。 部分E：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(3-((6-((1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基)氨 基)(3-吡啶基))羰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙 酰基氨基)丙基)-7((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)- 2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述部分D的产物(15.5mg，0.0136mmol)，TEA(0.010mL， 0.0746mmol)和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基)) 氨基)乙烯基)苯磺酸(8.0mg，0.0182mmol)的无水DMF(2.0mL)溶液在 室温和氮气氛下放置24小时。真空除去DMF，将形成的黄色油溶解于 50％ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化， 采用0.1％TFA洗脱5分钟，再在流速为20mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的0-63％ACN以2.52％/分钟的梯度进行洗脱。将在21.7分钟 洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末 (7.2mg，40％)。MS：m/e 1215.5[M+H]；高分辨MS：计算值： C56H71N12O15S2[M+H]：1215.4603，实测值：1215.4580。 实施例7 2-(2-氮杂-2-(5-(N-(1，3-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2-(((2，4，6- 三甲基苯基)磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲 基)4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧 基)丙基)氨基甲酰基)(2-吡啶基))氨基)乙烯基)苯磺酸双(三氟乙酸盐) 部分A：N，N′-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-甲酯基-2-(((2，4，6-三甲基 苯基)-磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪 唑-2-基)氨基)甲基)氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧 基)乙氧基)丙基-2-((叔丁氧基)羰基氨基)戊烷-1，5-二酰胺
将实施例6部分B的产物(50.5mg，0.0398mmol)的50/50 TFA/DCM(2mL)溶液在室温下反应20分钟，浓缩成一种粘稠油。将这 种油吸收于无水DMF中，用TEA使其对pH纸呈碱性。将这种溶液用 Boc-L-Glu-OH(4.5mg，0.0181mmol)和HBTU(16.6mg，0.0438mmol)处 理，在室温下放置2小时。真空除去DMF，将形成的油溶解于60％ ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流 速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的18-72％ACN以1.8％/分钟的梯 度进行洗脱。将在21.5分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题 化合物，为一种无色粉末(38.8mg，84％)。MS：m/e 2306.5[M+H-Tr]， 2064.4[M+H-2Tr]，1275.0[M+2H]；高分辨MS：计算值：C117H154N19OS2[M+H-Tr]：2305.0753，实测值：2305.0770。 部分B：2-氨基-N，N′-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2-(((2，4，6-三 甲基苯基)磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4- 氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙 基)戊烷-1，5-二酰胺三(三氟乙酸盐)
将上述部分A的产物(38.8mg，0.0152mmol)，3N LiOH(0.075mL) 和水(0.156mL)的MeOH(2.0mL)溶液在室温下搅拌18小时。真空除去 MeOH，将含水混合物用水(50mL)稀释，用0.5N HCl调节pH至3。将 混合物用DCM(2×50mL)萃取。合并的DCM萃取液用饱和NaCl(50 mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种无色固体。将这种固体溶解 于TFA(3.0mL)及Et3SiH(0.031mL，0.178mol)中，在70℃及氮气氛下 加热11小时，浓缩，得到一种黄色油。将这种油溶解于水(25mL)中， 用乙醚(2×25mL)洗涤。将含水溶液冷冻干燥，得到一种浅黄色固 体。将这种固体溶解于水中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250 mm)上进行纯化，采用0.1％TFA洗脱5分钟，再在流速为20mL/分钟下， 采用包含0.1％TFA的0-63％ACN以2.52％/分钟的梯度进行洗脱。将在 22.4分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无 色粉末(5.1mg，18％)。MS：m/e 968.2[M+2H]，646.0[M+3H]。 部分C：2-(2-氮杂-2-(5-(N-(1，3-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2- (((2，4，6-三甲基苯基)-磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨 基)甲基)4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)(2-吡啶基))氨基)乙烯基)苯磺酸双(三氟乙酸 盐)
将上述部分B的产物(5.1mg，0.00224mmol)，TEA(0.002mL， 0.0115mmol)和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基)) 氨基)乙烯基)苯磺酸(1.2mg，0.00272mmol)的无水DMF(2.0mL)溶液 在室温和氮气氛下放置72小时。真空除去DMF，将形成的油溶解于 50％ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化， 采用0.1％TFA洗脱5分钟，再在流速为20mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的0-63％ACN以2.52％/分钟的梯度进行洗脱。将在23.5分钟 洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末 (0.5mg，9.0％)。MS：m/e 1120.0[M+2H]；高分辨MS：计算值： C104H137N22O28S3[M+]：2237.9055，实测值：2237.9120。 实施例8 3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(N-(L-Asp-L-Asp)3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基) 丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4-氧代 (3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸双(三 氟乙酸盐的DOTA共轭物 部分A：苄酯基-L-Asp(O-t-Bu)-L-Asp(O-t-Bu)-OMe
将Cbz-Asp(O-t-Bu)-OH(1.54g，4.76mmol)，H-Asp(O-t-Bu)- OMe·HCl(1.14g，4.76mmol)，DIEA(1.85mL，10.5mmol)和HBTU(1.99 g，5.24mmol)的DMF(20mL)溶液在室温下搅拌18小时。加入水(100 mL)和EtOAc(50mL)，分层。水层用EtOAc(2×50mL)萃取。合并的 EtOAc萃取液依次用水(50mL)，10％KHSO4(2×50mL)和10％ NaHCO3(50mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种油状 固体。将这种固体用乙醚研制，得到标题化合物，为一种无色固体 (2.14g，89％)。MS：m/e 1017.6[2M+H]，509.4[M+H]。 部分B：苄酯基-L-Asp(O-t-Bu)-L-Asp(O-t-Bu)-OH
将上述部分A的产物(200mg，0.393mmol)，LiOH(38mg，0.865 mmol)，水(40mL)和THF(200mL)的混合物在室温下搅拌28小时，浓 缩以除去THF。将含水混合物再用水(20mL)稀释，用EtOAc(20mL) 洗涤。水相用1.0N HCl调节pH至4。用EtOAc(20mL)萃取。EtOAc萃 取液用饱和NaCl(15mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种无色固 体。将这种固体溶解于60％ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22 ×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的 18-90％ACN以2.4％/分钟的梯度进行洗脱。将在19.0分钟洗脱的主产 物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末(95mg， 49％)。 部分C：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(N-(苄氧羰基-L-Asp(O-t-Bu)-L-Asp(O-t- Bu))3-氨基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙 基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)-咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基 氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯
将实施例6部分B的产物(44.0mg，0.0894mmol)在TFA(1.5mL)中 于室温下放置45分钟，浓缩成一种黄色油。将这种油溶解于无水 DMF(2.0mL)中，用TEA使其对pH纸呈碱性。在另一烧瓶中，将上述 部分B的产物(69.3mg，0.0547mmol)溶解于无水DMF(2.0mL)中，并用 TEA(0.015mL，0.104mmol)和HBTU(32.6mg，0.0859mmol)进行预活 化处理。10分钟后，将这种溶液加至来自TFA脱保护反应的DMF溶 液中，将合并的溶液在室温下搅拌30分钟。真空除去DMF，将形成的 油溶解于60％ACN中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上 进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的18-72％ACN 以1.54％/分钟的梯度进行洗脱。将在29.9分钟洗脱的主产物峰用饱和 NaHCO3调节pH至8，浓缩除去ACN。将残余的含水混合物再用 EtOAc(2×40mL)萃取。合并的EtOAc萃取液用饱和NaCl(40mL)洗 涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到标题化合物，为一种无色固体(56.4mg， 63％)。MS：m/e 1644.8[M+H]；高分辨MS：计算值：C87H110N11O19S[M+H]：1644.7700，实测值：1644.771。 部分D：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(N-(L-Asp(O-t-Bu)-1-Asp(O-t-Bu))3-氨 基丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-4-氧代- 7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基氨基)-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯
将上述部分E的产物(55.0mg，0.0335mmol)在10％Pd/C(25mg)上 于MeOH(15mL)中在40psi下氢解3.5小时。通过助滤剂过滤除去催化 剂，将滤液浓缩，得到标题化合物，为一种浅黄色油(41.8mg，83％)。 MS：m/e 1510.8[M+H]。 部分E：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(N-(L-Asp(O-t-Bu)-L-Asp(O-t-Bu))3-氨基 丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-4-氧代-7- (((1-(三苯基甲基)-咪唑-2-基)氨基)甲基)(3-氢醌基))羰基氨基)-2- (((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸甲酯的DOTA-三叔丁基酯共轭 物
将上述部分D的产物(41.8mg，0.0277mmol)，实施例2部分B的产 物(39.9mg，0.0436mmol)，TEA(0.023mL，0.166mmol)和HBTU(15.6 mg，0.0411mmol)的无水DMF(3.0mL)溶液在室温和氮气氛下放置20 小时。真空除去DMF，将形成的油溶解于60％ACN中，用制备HPLC 于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采 用包含0.1％TFA的18-90％ACN以2.4％/分钟的梯度进行洗脱。将在 21.2分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无 色粉末(24.8mg，43％)。MS：m/e 2066.3[M+H]，1033.6[M+2H]；高分 辨MS：计算值：C107H154N15O24S[M+H]：2065.1011，实测值： 2065.1030。 部分F：3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(N-(L-Asp-L-Asp)3-氨基丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)- 4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸 双(三氟乙酸盐)的DOTA共轭物
将上述部分G的产物(18.8mg，0.0091mmol)，水(0.150mL)，3N LiOH(0.015mL)和无过氧化物的THF(1.5mL)溶液在室温下搅拌3小 时。真空除去THF，将含水混合物有水(40mL)稀释，用1.0N HCl调 节pH至7。将混合物用DCM(2×30mL)萃取，将合并的萃取液浓缩， 得到一种黄色油。将这种油溶解于TFA(1.0mL)以及Et3SiH(0.030mL， 0.184mmol)中，在40℃及氮气氛下加热48小时。将溶液浓缩，将形成 的油溶解于水中，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行 纯化，采用0.1％TFA洗脱5分钟，再在流速为20mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的0-63％ACN以2.52％/分钟的梯度进行洗脱。将在19.9分钟 洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色粉末 (1.5mg，9.4％)。MS：m/e 1528.9[M+2H]，765.1[M+2H]，510.7 [M+3H]。 实施例9 DOTA/2-氨基-N，N′-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2-(((2，4，6-三 甲基苯基)磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)4- 氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙 基)戊烷-1，5-二酰胺三(三氟乙酸盐)共轭物 部分A：DOTA-三叔丁基酯/2-氨基-N，N′-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N- (3-羧基-2-(((2，4，6-三甲基苯基)-磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪 唑-2-基氨基)甲基)4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧 基)乙氧基)乙氧基)丙基)戊烷-1，5-二酰胺六(三氟乙酸盐)共轭物
将实施例2部分B的产物，HBTU和DIEA的无水DMF溶液首先在 室温和氮气氛下搅拌15分钟，然后用实施例7部分B的产物进行处 理。将形成的溶液再搅拌18小时，真空除去DMF。将形成的残余物用 制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水：ACN：0.1％TFA梯度洗 脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合物。 部分B：DOTA/2-氨基-N，N′-双(3-(2-(2-(3-(3-(N-(3-(3-(N-(3-羧基-2- (((2，4，6-三甲基苯基)-磺酰基)氨基)乙基)氨基甲酰基)-7-((咪唑-2-基氨 基)甲基)4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)戊烷-1，5-二酰胺三(三氟乙酸盐)共轭物
将上述部分B的产物溶解于脱气的TFA中，用三乙基硅烷处理， 在50℃和氮气氛下加热1小时。将溶液真空浓缩，将形成的残余物用 制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水：ACN：0.1％TFA梯度洗 脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合物。 实施例10 DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-3-磺基丙基)-丙氧基)乙氧基)乙 氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7- ((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸三氟 乙酸盐共轭物 部分A：2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-((叔丁氧基)-羰基氨基)-3-磺基丙基) 丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺 酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰 基氨基)丙酸
将实施例3部分I的产物溶解于无水DMF中，用Boc-磺基丙氨酸 的N-羟基琥珀酰亚胺酯(如以下文献所述：Liebigs Ann.Chem.1979， 776-783)和DIEA处理。将溶液在室温和氮气氛下搅拌18小时，除去除 去DMF。将形成的残余物用制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水： ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合 物。 部分B：DOTA-三叔丁基酯/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-3-磺基丙基) 丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺 酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰 基氨基)丙酸四(三氟乙酸盐)共轭物
将上述部分A的产物溶解于脱气的TFA中，在室温下搅拌15分 钟。将溶液真空浓缩，将形成的残余物溶解于50％ACN中，冷冻干燥， 除去最后痕量的TFA。
在另一个烧瓶中，将实施例2部分B的产物和DIEA的无水DMF溶 液用HBTU处理，使其在室温和氮气氛下反应15分钟。将上述脱保护 的产物加至该溶液中，再在在室温和氮气氛下搅拌18小时。真空除去 DMF，将形成的残余物用制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水： ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合 物。 部分C：DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-3-磺基丙基)丙氧基)乙 氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨 基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基) 丙酸三氟乙酸盐共轭物
将上述部分B的产物和Et3SiH溶解于脱气的TFA中，并在50℃和 氮气氛下加热1小时。将溶液浓缩，将形成的残余物用制备HPLC在 C18柱上进行处理，采用水：ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分 进行冷冻干燥，得到标题化合物。 实施例11 DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-3-(4-(膦酰氧基)苯基)丙酰基氨 基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基) 磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)) 羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐共轭物
以与实施例11相同的过程制备标题化合物，只是用Boc- Tyr(PO3H2)-Osu代替Boc-Cys(O3H)-OSu。 实施例12 DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-3-(4-(磺基氧基)-苯基)丙酰基氨 基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基) 磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)) 羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐共轭物
以与实施例11相同的过程制备标题化合物，只是用Boc- Tyr(SO3H)-Osu代替Boc-Cys(O3H)-OSu。 实施例13 DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-4-(N-(乙基-3，6-O-二磺基-β-D- 吡喃半乳糖基)氨基甲酰基)丁酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基) 氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基 氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸共轭物 部分A：制备Boc-Glu(氨基乙基-3，6-O-二磺基-β-D-吡喃半乳糖基)- OSu
将Boc-Glu-OMe，氨基乙基-3，6-O-二磺基-β-D-吡喃半乳糖苷(如 以下文献所述：Tet.Lett.1997，53，11937-11952)，DIEA和HBTU的无水 DMF溶液在室温和氮气氛下搅拌18小时。真空除去DMF，将形成的 残余物用NaOH水溶液水解。将反应溶液的pH调节至7，用制备阴离 子交换色谱进行纯化，采用诸如DEAE纤维素的树脂，采用Et3NH2CO3梯度。将产物馏分用钠型阳离子交换树脂处理，得到作为钠盐的中间 体羧酸。
将上述化合物，N-羟基琥珀酰亚胺和DCC溶解于无水DMF中，在 室温和氮气氛下搅拌18小时。真空除去DMF，将形成的残余物通过如 上所述制备阴离子交换色谱纯化，得到标题化合物，为三乙基铵盐。 部分B：DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-4-(N-(乙基-3，6-O-二磺 基-β-D-吡喃半乳糖基)氨基甲酰基)丁酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧 基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪 唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸共轭物
以与实施例10相同的过程制备标题化合物，只是用Boc-Glu(氨基 乙基-3，6-O-二磺基-β-D-吡喃半乳糖基)-OSu代替Boc-Cys(O3H)-OSu。 实施例14 DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-4-(N-(6-脱氧-β-环糊精基)氨基 甲酰基)丁酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧 基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲 基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸双(三氟乙酸盐)共轭物 部分A：制备Boc-Glu(6-氨基-6-脱氧-β-环糊精基)-OMe
将Boc-Glu-OMe，6-氨基-6-脱氧-β-环糊精(如下述文献所述：J.Org. Chem.1996，61，903-908)，DIEA和HBTU的无水DMF溶液在室温和氮 气氛下搅拌18小时。真空除去DMF，将形成的残余物用制备HPLC在 C18柱上进行处理，采用水：ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分 进行冷冻干燥，得到标题化合物。 部分B：制备Boc-Glu(6-氨基-6-脱氧-β-环糊精基)-OSu
将上述部分A的产物通过在在室温和氮气氛下，在LiOH，THF和 水的混合物中搅拌4小时进行水解。真空除去THF，将形成的混合物 用水稀释，用1.0N HCl调节pH至3。将混合物用EtOAc萃取，将合并 的萃取液干燥(MgSO4)，浓缩。将形成的物质及N-羟基琥珀酰亚胺和 DCC溶解于无水DMF中，在室温和氮气氛下搅拌18小时。真空除去 DMF，将形成的残余物用制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水： ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合 物。 部分C：DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-4-(N-(6-脱氧-β-环糊精 基)氨基甲酰基)丁酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基) 丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1- 甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸双(三氟乙酸盐)共轭物
以与实施例10相同的过程制备标题化合物，只是用Boc-Glu(6-氨 基6-脱氧-β-环糊精基)-OSu代替Boc-Cys(O3H)-OSu。 实施例15 DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-4-(N-(ω-甲氧基聚亚乙基 (5,000)glycoxy乙基)氨基甲酰基)丁酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基) 丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑- 2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸双(三氟乙酸 盐)共轭物 部分A：制备Boc-Glu(氨基-(ω-甲氧基聚乙二醇)-OMe
将Boc-Glu-OMe，氨基-ω-甲氧基聚乙二醇，(MW＝5,000)，DIEA 和HBTU的无水DMF溶液在室温和氮气氛下搅拌18小时。真空除去 DMF，将形成的残余物用制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水： ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合 物。 部分B：制备Boc-Glu(氨基-ω-甲氧基聚乙二醇)-OSu
将上述部分A的产物通过在在室温和氮气氛下，在LiOH，THF和 水的混合物中搅拌4小时进行水解。真空除去THF，将形成的溶液用 1.0N HCl调节pH至7。采用Sephadex PD-10脱盐柱对溶液脱盐，将产 物洗脱物进行冷冻干燥。将形成的物质与N-羟基琥珀酰亚胺和DCC 一起溶解于无水DMF中，在室温和氮气氛下搅拌18小时。真空除去 DMF，将形成的残余物用制备HPLC在C18柱上进行处理，采用水： ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分进行冷冻干燥，得到标题化合 物。 部分C：DOTA/2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-氨基-4-(N-(ω-甲氧基聚亚乙 基(5,000)glycoxy乙基)氨基甲酰基)丁酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基) 丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑- 2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸双(三氟乙酸 盐)共轭物
以与实施例10相同的过程制备标题化合物，只是用Boc-Glu(氨基- ω-甲氧基聚乙二醇)-Osu代替Boc-Cys(O3H)-OSu。 实施例16 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二 烷基乙酰基氨基)-6-氨基己酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨 基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨 基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸三(三氟乙酸盐)
以与实施例10相同的过程制备标题化合物，只是用Boc-Lys(Cbz)- Osu代替Boc-Cys(O3H)-OSu。 实施例17 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷 基乙酰基氨基)-6-(2-(双(膦酰基甲基)氨基)乙酰基氨基)己酰基氨基)丙 氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰 基)氨基)-3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基 氨基)丙酸共轭物
将双(膦酰基甲基)甘氨酸，DIEA和HBTU的无水DMF溶液在室温 和氮气氛下搅拌15分钟，再用实施例16的产的处理。继续搅拌18小 时，真空除去DMF。将形成的残余物用离子交换色谱进行纯化。 实施例18 2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2-((2-((2-(双(羧甲基)氨基)乙基)(羧甲基)氨 基)乙基)(羧甲基)氨基)乙酰基氨基)-3-磺基丙基)丙氧基)乙氧基)乙氧 基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3-((7-((咪 唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸
将实施例10部分A的产物溶解于脱气的TFA中，在室温下搅拌15 分钟。将溶液真空浓缩，将形成的残余物溶解于50％ACN中，冷冻干 燥，除去最后痕量的TFA。将产物与DIEA和二乙三胺五乙酸酸酐一 起溶解于无水DMF中。将形成的溶液is stirred在室温和氮气氛下for 18小时。真空除去DMF，将形成的残余物用制备HPLC在C18柱上进 行处理，采用水：ACN：0.1％TFA梯度洗脱。将产物馏分进行冷冻干 燥，得到标题化合物。
下列方法描述了本发明式99mTc(VnA)(tricine)(膦)放射性药物的合 成，其中(VnA)代表通过二氮烯基(-N＝N-)或肼基(＝N-NH-)与Tc结合的 玻连蛋白受体拮抗剂。二氮烯基或肼基部分产生于以游离肼或以腙 形式保护的形式存在的肼基烟酰氨基与Tc-99m的反应。Tc内配位层 中的另两个配体是tricine和膦。 实施例19-23 合成配合物[99mTc(HYNIC-VnA)(tricine)(TPPTS)]
向含4.84mg TPPTS，6.3mg tricine，40mg甘露糖醇和琥珀酸缓冲 液(pH4.8)和0.1％Pluronic F-64表面活性剂的冻干小瓶中加入1.1mL 无菌水，0.2mL(20μg)的适宜的HYNIC-共轭的玻连蛋白拮抗药(VnA) 的去离子水或50％乙醇水溶液和0.2mL of 99mTcO4-(50±5mCi)的盐水溶 液。将试剂盒在100℃水浴中加热15分钟，然后，使其在室温下冷却 10分钟。将反应混合物的样品用HPLC进行分析。其RCP结果列于表 1。
HPLC方法
柱：Zorbax C18，25cm×4.6mm
流速：1.0mL/分钟
溶剂A：10mM磷酸钠缓冲注，pH6.0
溶剂B：100％CH3CN
梯度A(实施例19，20，21) t(分钟)        0        20        21        30        31        40 ％溶剂B        0        25        75        75        0         0 梯度B(实施例22) t(分钟)        0        20        30        31        40 ％溶剂B        0        50        50        0         0 梯度C(实施例23) t(分钟)        0        20        21        30        31        40 ％溶剂B        10       30        75        75        0         0 表1.配合物[99mTc(VnA)(tricine)(TPPTS)]的分析和收率结果 实施例号 试剂号 停留时间(分钟) 收率％  19  1  8.8  73  20  3  17.2  81  21  4  17.6  68  22  6  11.7  79  23  7  16.4  52 实施例24 合成3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)- 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷 基)乙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基) 磺酰基)氨基)丙酸的In-111配合物
向铅遮蔽并卷缩的2cc自动取样小瓶中加入溶解于70μl乙酸铵缓 冲液(0.4M，pH4.7)中的35μg实施例2的共轭物，随后，再加入0.05N HCl中的2mCi(20μl)In-111(比活性：17μg/mCi)。将反应混合物在 170-80℃下加热60分钟，用HPLC和ITLC进行分析，配合物以收率为 93％形成；停留时间为19.6分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：10％乙腈/0.1％THA/H2O
溶剂B：乙腈
检测器：碘化钠(NaI)放射分析探针
梯度
t(分钟)   0     25    26    35    36    45
％B       10    20    60    60    10    10 实施例25-26 合成3-((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)- 2-(((4-(4-(((3-(2-(2-(3-(2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷 基)乙酰基氨基)丙氧基)乙氧基)乙氧基)丙基)氨基)磺酰基)苯基)苯基) 磺酰基)氨基)丙酸的177Lu和90Y配合物
向澄清的密封的5mL小瓶中加入0.3mL的实施例2的共轭物(200 μg/mL，0.5M乙酸铵缓冲液中，pH6.9)的溶液，随后再加入0.05mL的 龙胆酸钠(10mg/mL，0.5M乙酸钠缓冲液中，pH6.9)溶液，0.3mL的0.5 M乙酸铵缓冲液(pH6.9)和在0.05N HCl中的0.010mL的90YCl3或 177LuCl3溶液(对于177LuCl3，1000mCi/mL，对于90YCl3，500mCi/mL)。 将反应混合物在100℃下加热30分钟。在冷却至室温后，将形成的溶 液的样品通过放射-HPLC和ITLC进行分析。对于两种配合物，放射标 记物收率为90％(在校正少量胶体后)，停留时间为19.2分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：0.1％THA水溶液
溶剂B：乙腈
t(分钟)    0     20    25    30    31    40
％B        10    25    60    60    10    10
恒定薄层色谱(ITLC)法采用Gelman Sciences硅胶条和1∶1的丙酮 和盐水作为洗脱剂。 实施例27 合成3-((1-(3-(3-(N-(3-(2-(2-(N-(L-Asp-L-Asp)3-氨基丙氧基)-乙氧基)乙 氧基)丙基)氨基甲酰基)丙酰基氨基)丙基-7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-4- 氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-2-(((2，4，6-三甲基苯基)磺酰基)氨基)丙酸的 DOTA共轭物的177Lu配合物
向澄清的密封的5mL小瓶中加入0.5mL的实施例8的共轭物(200 μg/mL，0.5M乙酸铵缓冲液中，pH6.9)的溶液，随后加入0.05mL的龙 胆酸钠(10mg/mL，0.5M乙酸钠缓冲液中，pH6.9)溶液，0.25mL的0.5 M乙酸铵缓冲液(pH6.9)和在0.05N HCl中的0.05mL的177LuCl3溶液 (200mCi/mL)。将反应混合物在100℃下加热30分钟。在冷却至室温 后，将形成的溶液的样品通过放射-HPLC和ITLC进行分析。放射标记 物收率为75％(在校正胶体后)，停留时间为20分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：10mM磷酸缓冲液，pH＝6
溶剂B：100％乙腈
t(分钟)    0    20    25    30    31   40
％B        0    20    50    50    0    0 实施例28 合成2-(((4-(3-(N-(3-(2-(2-(3-(2-(2-((2-((2-(双(羧甲基)氨基)乙基)(羧甲 基)氨基)乙基)(羧甲基)氨基)乙酰基氨基)-3-磺基丙基)丙氧基)乙氧基) 乙氧基)丙基)氨基甲酰基)丙氧基)-2，6-二甲基苯基)磺酰基)氨基)-3- ((7-((咪唑-2-基氨基)甲基)-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)丙酸的 钆配合物
按照下述过程制备实施例18的共轭物的钆配合物。将33.5mg的 共轭物溶解于2mL的1M乙酸铵缓冲液(pH7.0)中，向其中加入1当量 的Gd(NP3)3溶液(0.02M水溶液)。将反应混合物在室温下放置3-5小时， 通过HPLC分离出产物。将包含配合物的馏分进行冷冻干燥，再溶解 于1mL H2O中。配合物的识别由质谱确认。 实施例29 合成(2S)-2-[((2，6-二甲基-4-[3-(N-{2-[3-磺基-2-(3-磺基-2-{2-[1，4，7，10- 四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)丙基]乙基}氨 基甲酰基)丙氧基]苯基}磺酰基)氨基)-3-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1- 甲基-4-氧代(3-氢醌基)}-羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：制备(2S)-3-[(叔丁氧基)-羰基氨基]-2-[({2，6-二甲基-4-[3-(N- {2-[(苯基甲氧基)羰基氨基]乙基}氨基甲酰基)丙氧基]苯基}磺酰基)氨 基]丙酸甲酯
将实施例3部分D的产物(369mg，0.756mmol)，DIEA(0.52mL，3.0 mmol)和HBTU(315mg，0.832mmol)的无水DMF(14mL)溶液在室温和 氮气氛下搅拌5分钟，再用N-(2-氨基乙基)氨基甲酸苄酯盐酸盐(192 mg，0.832mmol)处理，再搅拌1小时。真空除去DMF，将油状残余物 吸收于EtOAc(150mL)中，依次用0.1N HCl(40mL)，水(40mL)和饱 和NaCl(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到一种无色粘稠油。在3 ×16cm硅胶柱上进行快速色谱处理(EtOAc)，得到标题化合物，为一 种无色粘稠油(450mg，89.6％)。1H NMR(CDCl3)：δ7.34-7.27(m，5H)， 6.58(s，2H)，6.31(bs，1H)，5.86(bs，1H)，5.36(bs，1H)，5.14-5.03(m，3H)， 3.96(t，J＝6.0Hz，2H)，3.88-3.83(m，1H)，3.56(s，3H)，3.47-3.25(m，6H)， 2.59(s，6H)，2.31(t，J＝6.9Hz，2H)，2.05(p，J＝6.6Hz，2H)，1.39(s，9H)； 13C NMR(CDCl3)：δ172.9，170.5，160.6，157.3，155.9，141.8，136.3， 128.5，128.2，128.0，116.6，79.9，66.9，55.5，52.8，43.1，40.9，40.3，32.4， 28.2，24.9，23.3；MS：m/e 665.4[M+H]；687.3[M+Na]；高分辨MS：计算 值：C31H45N4O10S[M+H]：665.2856，实测值：665.2883。 部分B：制备(2S)-3-氨基-2-[({2，6-二甲基-4-[3-(N-(2-[(苯基甲氧基)羰 基氨基]乙基)氨基甲酰基)丙氧基]苯基}磺酰基)氨基]丙酸甲酯三氟乙 酸盐
将上述部分A的产物(420mg，0.632mmol)溶解于25/75 DCM/TFA(20mL)中，使其在室温和氮气氛下放置10分钟。将溶液浓 缩，将形成的粘稠油溶解于50％ACN中，对其进行冷冻干燥，得到标 题化合物，为一种无色固体(437mg，102％)。MS：m/e 565.3[M+H]。 部分C：制备(2S)-2-[({2，6-二甲基-4-[3-(N-{2-[(苯基甲氧基)羰基氨基] 乙基}氨基甲酰基)丙氧基]苯基}磺酰基)氨基]-3-{[1-甲基-4-氧代-7- ({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)羰基氨基]丙酸甲酯
将1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)咪唑-2-基)氨基)甲基)氢喹 啉-3-甲酸(702mg，1.30mmol)，DIEA(0.678mL，3.90mmol)和 HBTU(542mg，1.43mmol)的无水DMF(60mL)溶液在室温和氮气氛下 搅拌10分钟，再用上述步骤B的产物(881mg，1.30mmol)处理。在75 分钟后，真空除去DMF，将形成的油用制备HPLC于Vydac C-18柱(50 ×250mm)上进行纯化，在流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的 18-67.5％ACN以1.24％/分钟的梯度进行洗脱。将在18.9分钟洗脱的峰 进行冷冻干燥，得到未反应的1-甲基-4-氧代-7-(((1-(三苯基甲基)-咪 唑-2-基)氨基)甲基)氢喹啉-3-甲酸(308mg)。将在23.7分钟洗脱的主产 物峰进地冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(890mg， 63.0％)。1H NMR(CDCl3/D2O)：δ8.50(s，1H)，8.18(d，J＝8.3Hz，1H)， 7.70(s，1H)，7.51-7.25(m，15H)，7.25-7.12(m，5H)，6.97(s，1H)，6.58(d，J ＝2.3Hz，1H)，6.34(s，2H)，6.32(d，J＝8.5Hz，1H)，5.09(s，2H)，4.65(s， 2H)，4.29-4.23(m，1H)，3.88(s，3H)，3.803.50(m，7H)，3.41-3.28(m，4H)， 2.61(s，6H)，2.26-2.11(m，2H)，1.92-1.76(m，2H)；MS：m/e 1087.4[M+H]； 845.3[M+H-Tr]；高分辨MS：计算值：C60H63N8O10S[M+H]：1087.4388； 实测值：1087.440。 部分D：制备(2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-氨基乙基)氨基甲酰基]丙氧基}-2，6- 二甲基苯基)-磺酰基]氨基}-3-{[1-甲基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪 唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)]羰基氨基}丙酸甲酯
将上述部分C的产物(468mg，0.431mmol)在10％Pd/C(95mg)上于 MeOH(100mL)中在60psi下氢解1小时。通过硅藻土过滤除去催化剂， 将滤液浓缩，得到标题化合物，为一种浅琥珀色油(405mg，98.7％)。 MS：m/e 953.3[M+H]，711.3[M+H-三苯甲基]。 部分E：制备(2R)-N-{2-[4-(4-{[((1S)-1(甲氧羰基)-2-{[1-甲基-4-氧代-7- ({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)]羰基氨基}乙基)氨 基]磺酰基}-3，5-二甲基苯氧基)丁酰基氨基]乙基}-2-[(叔丁氧基)羰基 氨基]丙磺酸
将上述部分E的产物(405mg，0.425mmol)，Boc-L-磺基丙氨酸对 硝基苯基酯(425mg，1.03mmol)和DIEA(0.435mL，2.55mmol)的无水 DMF(20mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌3小时。真空除去DMF，将形 成的油用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在流 速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的9-54％ACN以1.12％/分钟的梯 度进行洗脱。将在37.3分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题 化合物，为一种无色固体(410mg，80.2％)。MS：m/e 1204.4[M+H]， 962.3[M+H-Trt]。 部分F：制备(2R)-N-{2-[4-(4-{[((1S)-1(甲氧羰基)-2-{[1-甲基-4-氧代-7- ({[1(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)]羰基氨基}乙基)氨 基]磺酰基}-3，5-二甲基苯氧基)丁酰基氨基]乙基}-2氨基丙磺酸
将上述部分E的产物(410mg，0.341mmol)溶解于50/50 TFA/DCM(20mL)中，并在在室温下反应10分钟。将溶液浓缩，将形 成的琥珀色油溶解于50％ACN(50mL)中，对其进行冷冻干燥，得到 标题化合物，为一种无色固体(371mg，98.6％)。MS：m/e 1104.4[M+H]， 862.3[M+H-Trt]；高分辨MS：计算值：C55H62N9O12S2[M+H]： 1104.3959；实测值：1104.393。 部分G：制备(2R)-N-[(1R)-1-(N-{2-[4-(4-{[((1S)-1-(甲氧羰基)-2-{[1-甲 基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)羰基氨 基}乙基)氨基]磺酰基}-3，5二甲基苯氧基]丁酰基氨基)乙基]氨基甲酰 基}-2-磺基乙基)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]丙磺酸
将上述部分F的产物(110mg，0.100mmol)，Boc-l-磺基丙氨酸的对 硝基苯基酯(82.4mg，0.200mmol)和DIEA(0.104mL，0.600mmol)的无 水DMF(5.0mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌48小时。真空除去DMF， 将形成的琥珀色油用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行 纯化，在流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的9-54％ACN以 2.52％/分钟的梯度进行洗脱。收集在37.0分钟洗脱的主产物峰，进行 冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(96.0mg，70.9％)。MS： m/e 1355.3[M+H]，1113.3[M-Trt+H]，1013.2[M-Trt-Boc+H]。 部分H：制备(2R)N-[(1R)-1-(N-{2-[4-(4-{[((1S)-1-(甲氧羰基)-2-{[1-甲 基-4-氧代-7-({[1(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)]羰基氨 基}乙基)氨基]磺酰基}-3，5-二甲基苯氧基)丁酰基氨基]乙基}氨基甲酰 基)-2-磺基乙基]-2-氨基丙磺酸
将上述部分G的产物(21mg，0.0155mmol)溶解于50/50 TFA/DCM(5.0mL)中，使其在室温下反应10分钟。将溶液浓缩，将 残余物吸收于50％ACN(15mL)中，进行冷冻干燥，得到标题化合物， 为一种无色固体(18.7mg，96.2％)。MS：m/e 1255.3[M+H]， 1013.2[M+H-三苯甲基]；高分辨MS：计算值：C58H67N10O16S3[M+H]： 1255.3899；实测值：1255.391。 部分I：制备(2R)N-[(1R)-1-(N-{2-[4-(4-{[((1S)-1-(甲氧羰基)-2-{[1-甲 基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)羰基氨 基}乙基)氨基]磺酰基}-3，5-二甲基苯氧基)丁酰基氨基]乙基}氨基甲酰 基)-2-磺基乙基]-2-(2-{1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三[(叔丁氧羰基)甲基]环 十二烷基}乙酰基氨基)丙磺酸
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(30.0mg，0.0327mmol)(如DM-7003所述)，DIEA(0.034mL， 0.196mmol)和HBTU(9.3mg，0.0245mmol)的无水DMF(1.5mL)溶液在 氮气氛和室温下搅拌15分钟，并用上述部分H的产物(18.7mg，0.0137 mmol)进行处理。75分钟后真空除去DMF，将形成的琥珀色油用制 备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分 钟下，采用包含0.1％TFA的22.5-58.5％ACN以0.9％/分钟的梯度进行洗 脱。收集在26.1分钟洗脱的主产物峰，冷冻干燥，得到标题化合物， 为一种无色绒毛状固体(7.5mg，53％)。MS：m/e 1809.7[M+H]。 J部分：制备(2S)-2-[((2，6-二甲基-4-[3-(N-{2-[3-磺基-2-(3-磺基-2-{2- [1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)丙 基]乙基}氨基甲酰基)丙氧基]苯基}磺酰基)氨基]-3({7-[(咪唑-2-基氨 基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述步骤I的产物(7.5mg，0.0039mmol)溶解于无过氧化物的 THF(1.40mL)和水(0.21mL)的溶液中，用3N LiOH(0.14mL)进行处 理。将混合物在室温和氮气氛下搅拌1小时，真空浓缩至干。将形成 的固体残余物溶解于95/5 TFA/Et3SiH(2.0mL)中，在70℃和氮气氛下 加热1小时。将溶液真空浓缩至干，将形成的固体残余物用制备HPLC 于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采 用包含0.1％TFA的0-27％ACN以0.1％/分钟的梯度进行洗脱。将在20.5 分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色绒 毛状固体(4.2mg，71.9％)。MS：m/e 1385.3[M+H]；高分辨MS：计算值： C54H77N14O23S3[M+H]：1385.4448；实测值：1385.446。 实施例30 合成DOTA/(2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-{2-[(4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)- 1-羧基-2-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨 基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基}乙基)氨基甲酰 基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)-4-氨基丁酰基氨基]-3-磺基丙基}乙基)氨 基甲酰基]丙氧基}-2，6-二甲基苯基)磺酰基]氨基}-3-({7-[(咪唑-2-基氨 基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸共轭物双(三氟乙酸 盐) 部分A：制备二-2，3，5，6-四氟苯基(2S)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]戊烷- 1，5-二酸酯
在室温和氮气氛下，向Boc-l-Glu-OH(28.9g，117mmol)的DMF (500mL)溶液中加入2，3，5，6-四氟苯酚(48.2g，290mmol)的DMF(50mL) 溶液。在搅拌10分钟后，加入EDC(55.6g，290mmol)，再将混合物搅 拌96小时。真空除去挥发性物质，将残余物用0.1N HCl(750mL)进地 研制。向混合物中加入EtOAc(600mL)，进行分层。水层用EtOAc(3× 500mL)萃取，合并所有的EtOAc萃取液，依次用水(300mL)和饱和 NaCl(300mL)洗涤，干燥(MgSO3)，浓缩，得到一种黄褐色固体(62 g)。将该黄褐色固体用ACN洗涤，得到纯形式的标题化合物(45.5g， 73.0％)。MS：m/e 566.0[M+Na]。 部分B：制备(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-2-({7-[([1-(三苯 基甲基)咪唑-2-基]氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}-羰基氨基)-1- (甲氧羰基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基}乙基)氨 基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)(4S)-4-[(叔丁氧基)羰基氨基]-丁酰 基氨基]-N-(2-{4-[4-({[(1S)-2-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧 代(3-氢醌基)}羰基氨基)-1-(甲氧羰基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基 苯氧基]丁酰基氨基}乙基)丙磺酸
将实施例29部分F的产物(130mg，0.118mmol)，上述部分A的产 物(27.2mg，0.050mmol)和DIEA(0.070mL，0.40mmol)的无水DMF(4.0 mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌29小时。真空除去DMF，将形成的琥 珀色油用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在流 速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的22.5-8.5％ACN以0.9％/分钟的 梯度进行洗脱。将在35.7分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标 题化合物，为一种无色绒毛状固体(108mg，89.3％)。MS：m/e 2419.6[M+H]，1210.4[M+2H]。 部分C：制备(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-2-({7-[([1-(三苯 基甲基)咪唑-2-基]氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}-羰基氨基)-1- (甲氧羰基)乙基]氨基)磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基)乙基)氨 基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)(4S)-4-氨基丁酰基氨基]-N-(2-{4- [4-({[(1S)-2-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基 氨基)-1(甲氧羰基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基} 乙基)丙磺酸
将上述部分B的产物(107mg，0.0442mmol)溶解于50/50 TFA/DCM(5.0mL)中，使其在室温和氮气氛下反应10分钟。将溶液 浓缩，将形成的琥珀色油溶解于50％ACN(25mL)中，冷冻干燥，得到 标题化合物，为一种浅黄色固体(105mg，98.0％)。MS：m/e 1159.9 [M+2H]，1039.4[M+2H-Trt]。 部分D：制备DOTA三叔丁基酯/(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1-[N-(2-{4-[4- ({[(1S)-2-({7-[([1(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3- 氢醌基)}羰基氨基)-1(甲氧羰基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基] 丁酰基氨基}乙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)(4S)-4-氨基 丁酰基氨基]-N-(2-{4-[4-({[(1S)-2-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基- 4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)-1(甲氧羰基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲 基苯氧基]丁酰基氨基}乙基)丙磺酸共轭物
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(31.6mg，0.0346mmol)(如DM-7003所述)，DIEA(0.072mL， 0.416mmol)和HBTU(9.8mg，0.026mmol)的无水DMF(1.8mL)溶液 在氮气氛和室温下搅拌15分钟，用上述部分C的产物(40.0mg，0.0173 mmol)处理。90分钟后，真空除去DMF，将形成的浅黄色油用制备 HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在流速为80mL/分钟 下，采用包含0.1％TFA的22.5-63.0％ACN以1.01％/分钟的梯度进行洗 脱。将在27.6分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物， 为一种无色固体(29.0mg，62.4％)。MS：m/e 1437.6[M+2H]，1316.6 [M+2H-Trt]。 部分E：制备DOTA/(2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-{2-[(4S)-4-(N-{1-[N-(2-{4-[4- ({[(1S)-1-羧基-2-((7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)} 羰基氨基)乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基}乙基)氨 基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)-4-氨基丁酰基氨基]-3-磺基丙基} 乙基)氨基甲酰基]丙氧基}-2，6-二甲基苯基)磺酰基]氨基}-3-({7-[(咪 唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸共轭物双 (三氟乙酸盐)
将上述部分D的产物(30.0mg，0.0104mmol)，无过氧化物的 THF(3.2mL)，水(0.485mL)和3N LiOH(0.320mL，0.96mmol)的混合 物在室温和氮气氛下搅拌2小时。将溶液真空浓缩至干，将形成的固 体残余物溶解于95/5 TFA/Et3SiH(5.0mL)中。将溶液在70℃和氮气氛 下加热1小时，真空浓缩，将形成的油状固体用制备HPLC于Vydac C- 18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的0-27％ACN以0.1％/分钟的梯度进行洗脱。将在27.8分钟洗 脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色绒毛状固 体(12.8mg，48.5％)。MS：m/e 1096.8[M+2H]，731.8[M+3H]；高分辨 MS：计算值：C91H122N23O33S4[M+H]：2192.7458；实测值：2192.741。 实施例31 合成2-[({4-[3-(N-{2-[(2R)-2-((2R)-3-磺基-2-{2[1，4，7，10-四氮杂-4，7，10- 三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)-3-磺基丙基]乙基}氨基甲酰 基)丙氧基]-2，6-二甲基苯基}磺酰基)氨基](2S)-3-({7-[(咪唑-2-基氨基) 甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐 部分A：制备2-({[4-(3-{N-[2-((2R)-2-氨基-3-磺基丙基)乙基]氨基甲酰 基}丙氧基)-2，6-二甲基苯基]磺酰基}氨基)(2S)-3-{[1-甲基-4-氧代-7- (([1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基))羰基氨基]丙酸
将实施例29部分F的产物(125mg，0.113mmol)，无过氧化物的 THF(3.8mL)，水(0.57mL)和3N LiOH(0.38mL，1.13mmol)的混合物 在室温和氮气氛下搅拌1小时。采用1N HCl(0.70mL)将pH值调节至1， 真空浓缩至干。将形成的固体用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250 mm)上进行纯化，在流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的18- 54％ACN以0.90％/分钟的梯度进行洗脱。将在21.0分钟洗脱的主产物 峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(96.0mg， 77.9％)。MS：m/e 1090.3[M+H]，848.2[M+H-Trt]；高分辨MS：计算值： C54H60N9O12S2[M+H]：1090.3808；实测值：1090.381。 部分B：制备2-({[4-(3-{N-[2-((2R)-2-{(2R)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-3- 磺基丙基}-3-磺基丙基)乙基]氨基甲酰基}丙氧基)-2，6-二甲基苯基]磺 酰基}氨基)(2S)-3-{[1-甲基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基} 甲基)(3-氢醌基)羰基氨基]丙酸
将Boc-1-磺基丙氨酸(37.0mg，0.128mmol)，DIEA(0.040mL，0.228 mmol)和PyBOP(53.0mg，0.102mmol)的无水DMF(1.0mL)溶液在室温 和氮气氛下搅拌15分钟，再加入如上部分A的产物(93.0mg，0.0854 mmol)和DIEA(0.045mL，0.256mmol)的无水DMF(3.0mL)溶液。将形 成的溶液在室温和氮气氛下搅拌1.5小时，浓缩成一种粘稠的琥珀色 油。将其用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在 流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的18-45％ACN以0.68％/分钟 的梯度进行洗脱。将在36.4分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到 标题化合物，为一种无色固体(94.0mg，82.1％)。MS：m/e 1341.2 [M+H]，1099.1[M+H-Trt]，999.1[M+H-Trt-Boc]。 部分C：制备2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(2R)-3-磺基-2-(2-(1，4，7，10-四氮 杂-4，7，10-三[(叔丁氧羰基)甲基]环十二烷基}乙酰基氨基)丙基]-3磺基 丙基}乙基)氨基甲酰基]丙氧基}-2，6-二甲基苯基)-磺酰基]氨基}(2S)- 3-{[1-甲基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌 基)]羰基氨基}丙酸
将上述部分B的产物(90.0mg，0.0672mmol)的50/50 TFA/DCM (10.0mL)溶液在室温和氮气氛下反应10分钟，真空浓缩，得到中间体 胺，为一种琥珀色油。MS：m/e 1241.3[M+H]，999.3[M+H-Trt]；高分 辨MS：计算值：C57H65N10O16S3[M+H]：1241.3742；实测值： 1241.375。
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(123mg，0.134mmol)(如DM-7003所述)，DIEA(0.092mL，0.538 mmol)和PyBOP(52.4mg，0.101mmol)的无水DMF(1.5mL)溶液在氮气 氛和室温下搅拌15分钟，向其中加入上述游离胺(90.0mg，0.0672 mmol)和DIEA(0.046mL，0.269mmol)的无水DMF(1.5mL)溶液。1小 时后，真空除去DMF，将形成的琥珀色油用制备HPLC于Vydac C-18柱 (50×250mm)上进行纯化，在流速为80mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的30.6-45％ACN以0.288％/分钟的梯度进行洗脱。将在25.8 分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固 体(92.0mg，76.3％)。MS：m/e 1795.6[M+H]，1553.5[M+H-Trt]；高分辨 MS：计算值：C85H115N14O23S3[M+H]：1795.7422；实测值：1795.744。 部分D：制备2-[((4-[3-(N-{2-[(2R)-2-((2R)-3-磺基-2-{2-[1，4，7，10-四氮 杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)-3-磺基丙基]乙基} 氨基甲酰基)丙氧基]-2，6-二甲基苯基}磺酰基)氨基](2S)-3-({7-[(咪唑- 2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}-羰基氨基)丙酸三氟乙酸盐
将上述部分C的产物(89.0mg，0.0496mmol)的97/3 TFA/Et3SiH(10.0mL)溶液在70和氮气氛下加热30分钟，真空浓缩。将形成的油 状固体用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在流 速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的4.5-22.5％ACN以0.45％/分钟 的梯度进行洗脱。将在19.5分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到 立体化学纯的标题化合物，为一种无色绒毛状固体(65.0mg，87.5％)。 MS：m/e 1385.4[M+H]。 实施例32 另一种合成中间体2({[4-(3-{N-[2((2R)-2-氨基-3-磺基丙基)乙基]氨基 甲酰基}丙氧基)-2，6-二甲基苯基]磺酰基}氨基)(2S)-3-{[1-甲基-4-氧 代-7-({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)羰基氨基]丙酸 部分A：制备(2S)-2-{[(4-{3-[N-(2-氨基乙基)氨基甲酰基]丙氧基}-2，6- 二甲基苯基)磺酰基]氨基}-3-{[1-甲基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪 唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)]羰基氨基}丙酸
将实施例29部分D的产物(956mg，1.004mmol)，无过氧化物的 THF(35mL)，水(5.3mL)和3N LiOH(3.53mL，10.6mmol)的混合物 在室温和氮气氛下搅拌1小时，用1N HCl(10mL)将pH调节至5-6。 真空除去THF，使胶状黄色固体沉淀。通过滗析除去水层，将固体用 水(15mL)洗涤。将固体进行真空干燥，得到标题化合物，为一种干黄 色固体。 部分B：制备2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-3-磺基丙 基}乙基)氨基甲酰基]丙氧基}-2，6-二甲基苯基)磺酰基1氨基}(2S)-3-[[1- 甲基-4-氧代-7-({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)]羰 基氨基}丙酸
将Boc-1-磺基丙氨酸(175mg，0.60mmol)，DIEA(0.208mL，1.20 mmol)和PyBOP(250mg，0.480mmol)的无水DMF(5.0mL)溶液在室温 和氮气氛下搅拌17分钟，再加入上述部分A的产物(375mg，0.400 mmol)和DIEA(0.070mL，0.400mmol)的无水DMF(4.0mL)溶液。将形 成的溶液在室温和氮气氛下搅拌45分钟，真空浓缩，得到一种琥珀色 油。将其用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化，在 流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的31.5-43.2％ACN以0.292％/ 分钟的梯度进行洗脱。将在22.0分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥， 得到标题化合物，为一种无色固体(430mg，90.4％)。MS：m/e 1190.3[M+H]，948.3[M+H-Trt]。 部分C：制备2-({[4-(3-{N-[2-((2R)-2-氨基-3-磺基丙基)乙基]氨基甲酰 基}丙氧基)-2，6-二甲基苯基]磺酰基}氨基)(2S)-3-([1-甲基-4-氧代-7- ({[1-(三苯基甲基)咪唑-2-基]氨基}甲基)(3-氢醌基)羰基氨基}丙酸
将上述部分B的产物(430mg，0.362mmol)的50/50 TFA/DCM(15 mL)溶液在室温和氮气氛下反应10分钟，真空浓缩。将形成的琥珀色 油吸收于50％ACN(50mL)中，冷冻干燥，得到标题化合物，为一种浅 黄色固体(398mg，100％)。MS：m/e 1090.3[M+H]，848.2[M+H-Trt]。 实施例33 合成DOTA/2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(2R)-2-(4-{N-[(1R)-1-(N-{(1R)-1- [N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-羧基-2-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代 (3-氢醌基)}羰基氨基)-1-羧基乙基]氨基}-磺酰基)-3，5-二甲基苯氧基] 丁酰基氨基}乙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)-2-磺基乙基] 氨基甲酰基}(2S)-2-氨基丁酰基氨基)-3磺基丙基]-3-磺基丙基}乙基)氨 基甲酰基]丙氧基}-2，6-二甲基苯基)磺酰基]氨基)(2S)-3-({7-[(咪唑-2- 基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸共轭物 部分A：制备2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(2R)-2(4-{N-[(1R)-1-(N-{(1R)-1- [N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-羧基-2({7-[({1-(三苯基甲基)咪唑-2-基}氨基)甲 基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)]羰基氨基]-1-羧基乙基]氨基]磺酰基]- 3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基]乙基]氨基甲酰基]-2-磺基乙基]氨基甲 酰基]-2-磺基乙基]氨基甲酰基](2S)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]丁酰基氨 基]-3-磺基丙基]-3-磺基丙基]乙基]氨基甲酰基]丙氧基]-2，6-二甲基苯 基)磺酰基]氨基}(2S)-3-({7-[({1(三苯基甲基)咪唑-2-基}氨基)甲基]-1- 甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸
将实施例31部分C的第一半产物(136mg，0.110mmol)，
DIEA(0.076mL，0.44mmol)和实施例30部分A的产物(26.2mg， 0.050mmol)的无水DMF(3.0mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌7小时。 真空除去DMF，将粘稠的琥珀色油用制备HPLC于Vydac C-18柱(50× 250mm)上进行纯化，在流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的 27-45％ACN以0.45％/分钟的梯度进行洗脱。将在75.2分钟洗脱的主产 物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(129mg， 47.9％)。MS：m/e 1347.3[M+2H]。 部分B：制备2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(2R)-2-(4-{N-[(1R)-1-(N-{(1R)-1- [N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-羧基-2-({7-[({1(三苯基甲基)咪唑-2-基}氨基)甲 基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基)-1-羧基乙基]氨基}磺酰基)- 3，5-二甲基苯氧基]丁酰基氨基)乙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲 酰基)-2-磺基乙基]氨基甲酰基}(2S)-2氨基丁酰基氨基)-3-磺基丙基]-3- 磺基丙基}-乙基)氨基甲酰基]丙氧基}-2，6-二甲基苯基)磺酰基]氨 基}(2S)-3-({7-[({1-(三苯基甲基)咪唑-2-基}氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代 (3-氢醌基)}-羰基氨基)丙酸的DOTA三叔丁基酯共轭物
将上述部分A的产物(34.0mg，0.0126mmol)溶解于50/50 TFA/DCM(12mL)中，使其在室温和氮气氛下反应10分钟。将溶液浓 缩，将形成的琥珀色油真空干燥。
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(23.1mg，0.0253mmol)，DIEA(0.020mL，0.115mmol)和 PyBOP(9.8mg，0.019mmol)的无水DMF(2.0mL)溶液在氮气氛和室温 下搅拌15分钟，再加入上述脱保护反应中的产物和DIEA(0.020mL， 0.115mmol)的无水DMF(2.0mL)溶液。2小时后，真空除去DMF，将形 成的残余物用制备HPLC于Vydac C-18柱(50×250mm)上进行纯化， 在流速为80mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的27-49.5％ACN以0.45％/ 分钟的梯度进行洗脱。将在43.8分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥， 得到标题化合物，为一种无色固体(16.0mg，40.4％)。MS：m/e 1574.8[M+2H]，1453.7[M+2H-Trt]，1332.2[M+2H-2Trt]。 部分C：制备DOTA/2-{[(4-{3-[N-(2-{(2R)-2-[(2R)-2-(4-{N-[(1R)-1-(N- {(1R)-1-[N-(2-{4-[4-({[(1S)-1-羧基-2-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲 基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)-1-羧基乙基]氨基}磺酰基)-3，5-二甲基 苯氧基]丁酰基氨基}乙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰基)-2-磺 基乙基]氨基甲酰基}(2S)-2-氨基丁酰基氨基)-3-磺基丙基]-3-磺基丙 基}-乙基)氨基甲酰基)丙氧基}-2，6-二甲基苯基)磺酰基]氨基)(2S)-3- ({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-1-甲基-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)丙酸共 轭物
将上述部分B的产物(14.0mg，0.00445mmol)溶解于95/5 TFA/Et3SiH(8.0mL)中，在70℃和氮气氛下加热1小时。将溶液真空浓 缩至干，将形成的黄色固体用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm) 上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-27％ACN 以0.9％/分钟的梯度进行洗脱。将在24.5分钟洗脱的主产物峰进行冷 冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(8.2mg，73.9％)。MS：m/e 1247.7[M+2H]。 实施例34 合成(2S)-3-{[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代-1-(3-{2-[1，4，7，10-四氮 杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)(3-氢醌基)羰基氨 基}-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸三(三氟乙酸盐) 部分A：制备(2S)-3-({7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代-1-[3-(2- {1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三[(叔丁氧羰基)甲基]环十二烷基}乙酰基氨 基)丙基](3-氢醌基))羰基氨基)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙 酸三(三氟乙酸盐)
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(89mg，0.0974mmol)(如DM-7003所述)，DIEA(0.103mL，0.607 mmol)和HBTU(28.0mg，0.0735mmol)的无水DMF(1.0mL)溶液在氮气 氛和室温下搅拌15分钟，再用实施例4部分H的产物(30.0mg，0.049 mmol)的无水DMF(1.0mL)溶液处理。3小时后，真空除去DMF，将残 余物用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速 为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的18-72％ACN以1.08％/分钟的梯 度进行洗脱。将在17.5分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题 化合物，为一种无色固体(48.0mg，65.0％)。MS：m/e 1164.7[M+H]。 部分B：制备(2S)-3-{[7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代-1-(3-{2- [1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)(3- 氢醌基)羰基氨基}-2-{[(2，4，6三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸三(三氟乙 酸盐)
将上述部分A的产物(48.0mg，0.0375mmol)的95/5 TFA/Et3SiH(2.1 mL)溶液在50℃和氮气氛下搅拌2小时。将溶液真空浓缩至干，将油 状残余物用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在 流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-36％ACN以1.2％/分钟的 梯度进行洗脱。将在18.6分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标 题化合物，为一种无色固体(25.7mg，51.2％)。MS：m/e 996.5[M+H]； 高分辨MS：计算值：C45H62N11O13S[M+H]：996.4249；实测值： 996.4278。 实施例35 合成3-({1-[3-((2R)-3-磺基-2-{2-[1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环 十二烷基]乙酰基氨基}丙基)丙基]-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代(3- 氢醌基))羰基氨基)(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸双(三 氟乙酸盐) 部分A：制备3-{[1-(3-{(2R)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-3-磺基丙基}丙 基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代(3-氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2- {[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸
将实施例4部分H的产物(105mg，0.125mmol)，Boc-磺基丙氨酸的 N-羟基琥珀酰亚胺酯(如下述文献所述：Liebigs Ann。Chem。1979， 776-783)(146mg，0.467mmol)和DIEA(0.120mL，0.69mmol)的无水 DMF(1.5mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌24小时。真空除去DMF，将 形成的固体残余物用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行 纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的9-36％ACN以 0.1％/分钟的梯度进行洗脱。将在30.3分钟洗脱的主产物峰进行冷冻 干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(73.0mg，67.9％)。MS：m/e 861.3[M+H]。 部分B：制备3-({1-[3-((2R)-2-氨基-3-磺基丙基)丙基]-7-[(咪唑-2-基氨 基)甲基]-4-氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰 基]氨基}丙酸三氟乙酸盐
将上述部分B的产物(70.0mg，0.0814mmol)溶解于2∶1 DCM/TFA(1.5mL)中，使其在室温和氮气氛下反应30分钟。将溶液真 空浓缩至干，将琥珀色油溶解于50％ACN(25mL)中，冷冻干燥，得到 标题化合物，为一种无色固体(70.8mg，99.5％)。MS：m/e 761.2[M+H]； 高分辨MS：计算值：C32H41N8O10S2[M+H]：761.2387；实测值： 761.2393. 部分C：制备3-[(1-{3-[(2R)-3-磺基-2-(2-{1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三[(叔 丁氧基羰基)-甲基]环十二烷基}乙酰基氨基)丙基]丙基}-7-[(咪唑-2-基 氨基)甲基]-4-氧代(3-氢醌基))羰基氨基](2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺 酰基]氨基}丙酸双(三氟乙酸盐)
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(20.8mg，0.0228mmol)(如DM-7003所述)，DIEA(0.006mL， 0.034mmol)和HBTU(6.5mg，0.0171mmol)的无水DMF(0.5mL)溶液在 氮气氛和室温下搅拌5分钟，用上述部分B的产物(10.0mg，0.0114 mmol)和DIEA(0.006mL，0.034mmol)的无水DMF(0.5mL)溶液处理。 继续在室温下搅拌24小时，将反应物用水(3.0mL)稀释，用浓氢氧化 铵(0.003mL)处理，再搅拌10分钟。用0.1N HCl(6.0mL)将溶液pH调 节至3，再用10％ACN(5.5mL)稀释。将该溶液用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的9-36％ACN以0.68％/分钟的梯度进行洗脱。将在36.0分钟 洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体 (12.0mg，68.3％)。MS：m/e 1315.6[M+H]。 部分D：制备3-({1-[3-((2R)-3-磺基-2-{2-[1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧 甲基)环十二烷基]乙酰基氨基}丙基)丙基]-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4- 氧代(3-氢醌基)}羰基氨基)(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙 酸双(三氟乙酸盐)
将上述部分C的产物(12.0mg，0.00778mmol)的95/5 TFA/Et3SiH(1.0mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌18小时。将溶液真空浓缩至干， 将油状残余物用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化， 在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-36％ACN以1.2％/分钟 的梯度进行洗脱。将在21.1分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到 标题化合物，为一种无色固体(8.1mg，75.7％)。MS：m/e 1147.3[M+H]； 高分辨MS：计算值：C48H67N12O17S2[M+H]：1147.4189；实测值： 1147.418. 实施例36 合成3-{[1-(3-{2-[(6-{[(1E)-1-氮杂-2-(2-磺基苯基)乙烯基]氨基}(3-吡啶 基))羰基氨基](2R)-3-磺基丙基}丙基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代 (3-氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸
将实施例35部分B的产物(10.0mg，0.0101mmol)，DIEA(0.007mL， 0.040mmol)和2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡咯烷基)羰基)(2-吡啶基)) 氨基)乙烯基)苯磺酸(5.3mg，0.0120mmol)的无水DMF(0.5mL)溶液在 室温和氮气氛下放置48小时。再加入2-(2-氮杂-2-((5-((2，5-二氧代吡 咯烷基)-羰基)(2-吡啶基))氨基)乙烯基)苯磺酸(2.0mg，0.00455mmol)， 继续搅拌48小时。真空除去DMF，将残余物用制备HPLC于Vydac C- 18柱(22×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含 0.1％TFA的0-36％ACN以0.1％/分钟的梯度进行洗脱。将在30.0分钟洗 脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(2.5 mg，23.3％)。MS：m/e 1064.3[M+H]；高分辨MS：计算值： C45H50N11O14S3[M+H]：1064.27005；实测值：1064.272. 实施例37 合成3-{[1-(3-{(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1-[N-(3-{3-[N-((2S)-2-羧基-2- {[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基)乙基)氨基甲酰基]-7-[(咪唑-2-基氨 基)甲基]-4-氧代氢醌基)丙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}-氨基甲酰 基)(2S)-2-{2-[1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨 基}丁酰基氨基]-3-磺基丙基}丙基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代 (3-氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸双 (三氟乙酸盐) 部分A：制备3-{[1-(3-{(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1[N-(3-{3-[N-((2S)-2-羧基- 2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}乙基)氨基甲酰基]-7-[(咪唑-2-基 氨基)甲基]-4-氧代氢醌基}丙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰 基)(2S)-2-[(叔丁氧基)羰基氨基]-丁酰基氨基]-3-磺基丙基}丙基)-7- [(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代(3-氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三 甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸
将实施例35部分B的产物(38.0mg，0.0434mmol)，DIEA(0.015mL， 0.0869mmol)和实施例30部分A的产物(10.9mg，0.0202mmol)的无水 DMF(1.0mL)溶液在室温和氮气氛下搅拌48小时。真空除去DMF，将 琥珀色油用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在 流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的9-36％ACN以0.68％/分钟的 梯度进行洗脱。将在36.1分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标 题化合物，为一种无色固体(13.5mg，38.6％)。MS：m/e 1732.4[M+H]， 1632.2[M+H-Boc]。 部分B：制备3-([1-(3-((2R)-2-[4-(N-{(1R)-1-[N-(3-{3-[N-((2S)-2-羧基-2- {[(2，4，6-三甲基苯基)-磺酰基]氨基}乙基)氨基甲酰基]-7-[(咪唑-2-基氨 基)甲基]-4-氧代氢醌基}丙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰 基)(2S)-2-氨基丁酰基氨基]-3-磺基丙基}丙基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲 基]-4-氧代(3-氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨 基)丙酸三氟乙酸盐
将上述部分A的产物(13.5mg，0.00779mmol)溶解于50/50 TFA/DCM(1.0mL)中，使其在在室温和氮气氛下反应45分钟。将溶液 真空浓缩至干，得到标题化合物，为一种浅琥珀色油。MS：m/e 1633.3[M+H]。 部分C：制备3-{[1-(3-{(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1[N-(3-{3-[N-((2S)-2-羧基- 2-([(2，4，6-三甲基苯基)-磺酰基]氨基}乙基)氨基甲酰基]-7-[(咪唑-2-基 氨基)甲基]-4-氧代氢醌基}丙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰 基)(2S)-2-{2-[1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三[(叔丁氧羰基)甲基]环十二烷 基]乙酰基氨基}丁酰基氨基]-3-磺基丙基}丙基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲 基]-4-氧代(3-氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨 基}丙酸双(三氟乙酸盐)  
将2-(1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(((叔丁基)氧羰基)甲基)环十二烷 基)乙酸(15.0mg，0.0164mmol)(如DM-7003所述)，DIEA(0.004mL)和 HBTU(4.7mg，0.0124mmol)的无水DMF(0.5mL)溶液在氮气氛和室温 下搅拌8分钟，用上述部分B的产物(0.00779mmol)和DIEA(0.004mL) 的无水DMF(0.5mL)溶液处理。将溶液在室温下搅拌24小时，再用0.1 N NaOH(0.33mL)处理，再搅拌5分钟，用0.1N HCl(0.60mL)将pH调 节至3。将该溶液用水(4.5mL)稀释，用制备HPLC于Vydac C-18柱(22 ×250mm)上进行纯化，在流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的 9-49.5％ACN以1.01％/分钟的梯度进行洗脱。将在26.7分钟洗脱的主 产物峰进行冷冻干燥，得到标题化合物，为一种无色固体(7.0mg， 37.2％)。MS：m/e 1094.4[M+2H]；高分辨MS：计算值： C97H136N21O29S4[M+H]：2186.8696；实测值：2186.867。 部分D：制备3-{[1-(3-{(2R)-2-[4-(N-{(1R)-1[N-(3-{3-[N-((2S)-2-羧基- 2-{[(2，4，6-三甲基苯基)-磺酰基1氨基)乙基)氨基甲酰基]-7-[(咪唑-2-基 氨基)甲基]-4-氧代氢醌基}丙基)氨基甲酰基]-2-磺基乙基}氨基甲酰 基)(2S)-2-{2-[1，4，7，10-四氮杂-4，7，10-三(羧甲基)环十二烷基]乙酰基氨 基}丁酰基氨基]-3-磺基丙基}丙基)-7-[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代(3- 氢醌基)]羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙酸双 (三氟乙酸盐)
将上述步骤C的产物(7.0mg，0.00290mmol)的95/5 TFA/Et3SiH(1.0 mL)的溶液在氮气氛下加热回流3小时。将溶液真空浓缩至干，将油 状残余物用制备HPLC于Vydac C-18柱(22×250mm)上进行纯化，在 流速为20mL/分钟下，采用包含0.1％TFA的0-36％ACN以0.1％/分钟的 梯度进行洗脱。将在26.5分钟洗脱的主产物峰进行冷冻干燥，得到标 题化合物，为一种无色固体(4.5mg，66.1％)。高分辨MS：计算值： C85H112N21O29S4[M+H]：2018.6818；实测值：2018.683。 实施例38 合成实施例29的共轭物的In-111配合物
向遮蔽并卷缩的2cc自动取样小瓶中加入溶解于140μl 0.5M乙酸 铵缓冲液(pH4.8)中的70μg实施例29的共轭物，随后，再加入0.05M HCl中的2mg的龙胆酸钠盐和2.6mCi(7μl)In-111。将反应混合物在 85℃下加热20分钟，用HPLC进行分析，收率为87.9％(两种异构体的 总收率)；停留时间：12.5，13.1分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：10mM乙酸铵
溶剂B：乙腈
检测器：IN-USβ-ram，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)    0    25   26    35    36   45
％B        7    7    60    60    7    7 实施例39 合成实施例30的共轭物的In-111配合物
向铅遮蔽并卷缩的2cc自动取样小瓶中加入溶解于240μl乙酸铵 缓冲液(0.5M，pH4.7)中的120μg实施例30的共轭物，随后，再加入溶 解于20μL水中的2mg的龙胆酸钠盐和在0.05N HCl中的2.3mCi(10μl) In-111(NEN)(比活性：52μg/mCi)。将反应混合物在100℃下加热20分 钟，用HPLC进行分析，收率为94.7％(对两种异构体的总收率)；停留 时间：16.6分钟和17.3分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：10mM乙酸铵
溶剂B：乙腈
检测器：IN-USβ-ram，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)  0     25    26    35    36    45
％B      10    15    60    60    10    10 实施例40 合成实施例31的共轭物的In-111配合物
向遮蔽并卷缩的2cc自动取样小瓶中加入溶解于140μl 0.5M乙酸 铵缓冲液(pH4.8)中的70μg实施例29的共轭物，随后，再加入0.05M HCl中的2mg的龙胆酸钠盐和2.6mCi(7μl)In-111。将反应混合物在 85℃下加热20分钟，用HPLC进行分析，收率为92.2％；停留时间：12.9 分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：10mM乙酸铵
溶剂B：乙腈
检测器：IN-USβ-ram，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)  0    25   26    35    36   45
％B      7    7    60    60    7    7 实施例41 合成实施例33的共轭物的In-111配合物
向遮蔽并卷缩的2cc自动取样小瓶中加入溶解于140μl 0.5M乙酸 铵缓冲液(pH4.8)中的107μg实施例33的共轭物，随后，再加入0.05M HCl中的2mg的龙胆酸钠盐和2.6mCi(7μl)In-111。将反应混合物在 85℃下加热20分钟，用HPLC进行分析，收率为77.9％；停留时间：17.8 分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：10mM乙酸铵
溶剂B：乙腈
检测器：IN-USβ-ram，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)    0    25    26    35    36   45
％B        9    11    60    60    9    9 实施例42 合成实施例34的共轭物的In-111配合物
向铅遮蔽并卷缩的自动取样小瓶中加入溶解于50μl乙酸铵缓冲 液(0.4M，pH4.7)中的25μg实施例34的共轭物，随后，再加入0.05M HCl中的1.2mCi(5μl)In-111(比活性：21μg/mCi)。将反应混合物在80 ℃下加热45分钟，用HPLC和ITLC进行分析，收率为93.5％；停留时间： 16.7分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：25mM磷酸钠缓冲液，pH6
溶剂B：乙腈
检测器：碘化钠(NaI)放射分析探针，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)  0     25    26    35    36    45
％B      10    20    60    60    10    10 实施例43 合成实施例35的共轭物的In-111配合物
向铅遮蔽并卷缩的1cc自动取样小瓶中加入溶解于100μl柠檬酸 铵缓冲液(0.4M，pH4.7)中的40-50μg实施例35的共轭物，随后，再加 入0.05M HCl中的2mCi(5μl)In-111(比活性：25μg/mCi)。将反应混合 物在90-100℃下加热30分钟，用HPLC进行分析，收率为95％；停留时 间：12.5分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：25mM磷酸钠缓冲液，pH6
溶剂B：乙腈
检测器：碘化钠(NaI)放射分析探针，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)  0     25    26    35    36    45
％B      10    20    60    60    10    10 实施例44 合成实施例37的共轭物的In-111配合物
向铅遮蔽并卷缩的2cc自动取样小瓶中加入溶解于300μl柠檬酸 铵缓冲液(0.3M，pH4.8)中的150μg实施例37的共轭物，随后，再加入 0.05M HCl中的4.5mCi(25μl)In-111(NEN)(比活性：33μg/mCi)。将反 应混合物在100℃下加热20分钟，用HPLC进行分析，收率为80％；停 留时间：21分钟。
HPLC方法
柱：Zorbax Rx C18，25cm×4.6mm
柱温：室温
流速：1.0ml/分钟
溶剂A：25mM磷酸钠缓冲液，pH6
溶剂B：乙腈
检测器：碘化钠(NaI)放射分析探针，UV在220nm波长
梯度
t(分钟)  0     25    26    35    36    45
％B      17    19    60    60    17    17 实施例45-51 合成实施例30、31、34、35和37的共轭物的Y-90和Lu-177配合物
向澄清的密封的5mL小瓶中加入0.5-1.0mL的适宜的共轭物溶液 (200μg/mL，0.5M乙酸铵缓冲液中，pH7.0-8.0)，随后再加入0.05mL 的龙胆酸钠(10mg/mL，0.5M乙酸钠缓冲液中，pH7.0-8.0)溶液和在 0.05N HCl中的10-40μL的90YCl3或177LuCl3溶液(10-20mCi)。将反应 混合物在100℃下加热5-10分钟。在冷却至室温后，将形成的溶液的 样品通过HPLC和ITLC进行分析。 配合物实   施例号   同位素 共轭物实   施例号 停留时间   (分钟)   收率     ％   HPLC   方法     45   Y-90     30     14.0     16.0     90     D     46   Y-90     31     14.0     90.5     F     47   Lu-177     31     13.0     85     D     48   Y-90     34     8.0     81.9     A     49   Y-90     35     16.0     89     B     50   Y-90     37     8.2     83.5     B     51   Lu-177     37     14.0     70     G
HPLC方法A：该HPLC方法采用反相C18 Zorbax柱(4.6mm×25 cm，80_孔径)，流速1.0mL/分钟，梯度移动相从85％A(25mM pH6.0 磷酸盐缓冲液)和15％B(乙腈)至75％A和25％B，20分钟。
HPLC方法B：该HPLC方法采用反相C18 Zorbax柱(4.6mm×25 cm，80_孔径)，流速1.0mL/分钟，梯度移动相从90％A(25mM pH6.0 磷酸盐缓冲液)和10％B(乙腈)至80％A和20％B，20分钟。
HPLC方法D：该HPLC方法采用反相C18 Zorbax柱(4.6mm×25 cm，80_孔径)，流速1.0mL/分钟，梯度移动相从87％A(25mM pH6.0 磷酸盐缓冲液)和13％B(乙腈)至86％A和14％B，20分钟。
HPLC方法F：该HPLC方法采用反相C18 Zorbax柱(4.6mm×25 cm，80_孔径)，流速1.0mL/分钟，梯度移动相从92％A(25mM乙酸铵 缓冲液，pH6.8)和8％B(乙腈)至90％A和10％B，20分钟。
HPLC方法G：该HPLC方法采用反相C18 Zorbax柱(4.6mm×25 cm，80_孔径)，流速1.0mL/分钟，等度移动相87％A(25mM乙酸铵缓 冲液，pH6.8)和13％B(乙腈)，0-20分钟。 实施例52 合成99mTc(3-{[1-(3-{2-[(6-(二氮烯酰氨基(diazenido))(3-吡啶基))羰基氨 基](2R)-3-磺基丙基}丙基)-7[(咪唑-2-基氨基)甲基]-4-氧代(3-氢醌基) 羰基氨基}(2S)-2-{[(2，4，6-三甲基苯基)磺酰基]氨基}丙 酸)(tricine)(TPPTS)
向包含4.84mg TPPTS，6.3mg tricine，40mg甘露糖醇，琥珀酸缓 冲液，pH4.8和0.1％Pluronic F-64表面活性剂的经冻干的小瓶中加入 1.1mL无菌注射用水，在去离子水或50％乙醇水溶液的0.2mL(20μg) 的实施例36的共轭物以及0.2mL的99mTCO4-(50±5mCi)的盐水。将试 剂盒在100℃的水浴中加热15分钟，然后在室温下冷却10分钟。对反 应混合物的样品进行HPLC分析。收率为89.0％，停留时间为12.8，13.2 分钟(2种异构体)。
HPLC方法
柱：Zorbax C18，25cm×4.6mm
流速：1.0mL/分钟
溶剂A：10mM磷酸钠缓冲液，pH6.0
溶剂B：100％CH3CN
梯度0-25％B，20分钟内。
实用性
本发明的药物用于患者血管生成肿瘤脉管系统的造影、治疗性 心血管血管生成、与患者玻连蛋白受体表达有关的心脏病或者治疗 患者的癌症。由发射γ射线或正电子的同位素组成的本发明的放射性 药物用于与血管生成新脉管系统有关的病理学过程的造影，包括癌 症、糖尿病性视网膜病、斑点退化、血管成形术后的血管再狭窄和 伤口愈合，以及动脉粥样硬化斑、心肌再灌注损伤和心肌局部缺血、 昏迷或梗塞。由发射β、α或者Auger电子的同位素组成的本发明的放 射性药物通过将细胞毒性剂量的辐射传递到血管生成新脉管系统的 部位而用于治疗与血管生成新脉管系统有关的病理学过程。通过全 身性施用放射性药物，对肿瘤产生细胞毒性辐射进行癌症的治疗。
由选自钆、镝、铁和锰的一种或多种金属顺磁离子组成的本发 明化合物用作与血管生成新脉管系统有关的病理学过程的核磁共振 成像(MRI)的造影剂。
由原子序数为20或大于20的一种或多种重原子组成的本发明化 合物用作与血管生成新脉管系统有关的病理学过程的X射线成像的X 射线造影剂，该病理过程包括血管生成新脉管系统及动脉粥样硬化 斑、心肌再灌注损伤和心肌局部缺血、昏迷或梗塞。
由含产气气体的表面活性剂微球组成的本发明化合物用作与血 管生成新脉管系统有关的病理学过程、以及动脉粥样硬化斑、心肌 再灌注损伤及心肌局部缺血、昏迷或梗塞的超声描记术的超声造影 剂。
在下列体外和体内试验以及模型中检测本发明的代表性化合物 并发现所述化合物是有活性的。
固定的人胎盘αvβ3受体检测
用[I-125]玻连蛋白发展并验证检测条件。检测验证包括 Scatchard格式分析(n＝3)，其中确定受体数(Bmax)和Kd(亲和性)。检 测格式是在IC50确定前，在10和100nM的终浓度初步筛选化合物。 为了确定IC50，评估三个标准(玻连蛋白，抗-avβ3抗体，LM609，及 抗-αvβ5，P1F6)以及五个参考肽。简而言之，所述方法包括将预先 分离的受体固定在96孔平板中，然后孵育过夜。所述受体是从正常 的新鲜的、非感染性的(无HIV、肝炎病毒B和C、梅毒和HTLC)人胎 盘中分离的。将组织溶解，然后经离心除去组织碎片。将溶解产物 过滤。用固定的αvβ3抗体通过亲和色谱分离所述受体。然后用洗涤缓 冲液将平板洗涤3次。加入阻断缓冲液，在室温将平板孵育120分 钟。在该过程中，将待测化合物与[I-125]玻连蛋白在储藏平板中预先 混合。除去阻断缓冲液，用移液管移出化合物混合物。在室温经60 分钟完成竞争。然后除去未结合的物质，将孔分开，进行γ闪烁计 数。
癌症小鼠_的成像
本研究利用c-Neu癌症小鼠_，同时用FVB小鼠作为对照。用戊 巴比妥钠麻醉小鼠并给其注射约0.5mCi的放射性药物。在注射前， 记录在各癌症小鼠_上的肿瘤位置，并用卡尺测量肿瘤大小。将动物 放在相机头部以便给动物的前或后成像。用256×256和2x变焦摄影， 在2小时过程中，得到系列的5分钟动态图象。在完成研究后，通过 画出肿瘤作为所研究的靶区(ROI)以及颈动脉唾液腺下的颈区的背景 部位来评估图象。
该模型还可用于评估由发射β、α或Auger电子的同位素组成的 本发明放射性药物的效力。以适当的量施用所述放射性药物，通过 非侵入性地使带有同步可成像γ发射的那些同位素成像，或者通过切 下肿瘤并用标准技术计数出现的放射性量可以定量分析肿瘤中的摄 入。通过监测对照小鼠中肿瘤的生长速率与在施用本发明放射性药 物的小鼠中的生长率可以评估所述放射性药物的效力。
该模型还可用于评估由顺磁金属为MRI造影剂组成的本发明化 合物。施用适当量的顺磁化合物后，将完整动物放在市售的核磁共 振成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图 象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由重金属为X射线造影剂组成的本发明化 合物。施用适当量的X射线吸附化合物后，将完整动物放在市售X射 线成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图 象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由含产气表面活性剂微球为超声造影剂组 成的本发明化合物。施用适当量的产气化合物后，利用超声探针接 近肿瘤，可以使动物中的肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物 得到的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
兔Matrigel模型
该模型是从用于研究小鼠中血管生成作用的matrigel模型改造过 来的。Matrigel(Becton & Dickinson，USA)是一种富含层粘连蛋白、胶 原IV、巢蛋白、HSPG和其他生长因子的基膜。当与生长因子例如 bFGF[500ng/ml]或VEGF[2μg/ml]混合并静脉内注射到小鼠的中腹部 区域时，它固化成凝胶并在4-8天内刺激注射部位的血管生成作用。 在该兔模型中，给新西兰白兔(2.5-3.0kg)注射2.0ml matrigel，加1μg bFGF和4μg VEGF。在7天后注射放射性药物，然后得到图象。
该模型还可用于评估由发射β、α或Auger电子的同位素组成的 本发明放射性药物的效力。以适当的量施用所述放射性药物，通过 非侵入性地使带有同步可成像γ发射的那些同位素成像，或者通过切 下肿瘤并用标准技术计数出现的放射性量可以定量分析肿瘤中的摄 入。通过监测对照小鼠中血管生成部位的生长速率与在施用本发明 放射性药物的小鼠中的生长率可以评估所述放射性药物的效力。
该模型还可用于评估由顺磁金属为MRI造影剂组成的本发明化 合物。施用适当量的顺磁化合物后，将完整动物放在市售的核磁共 振成像仪中以使血管生成部位成像。通过与从未施用造影剂的动物 得到的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由重金属为X射线造影剂组成的本发明化 合物。施用适当量的X射线吸附化合物后，将完整动物放在市售X射 线成像仪中以使血管生成部位成像。通过与从未施用造影剂的动物 得到的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由含产气表面活性剂微球为超声造影剂组 成的本发明化合物。施用适当量的产气化合物后，利用超声探针接 近肿瘤，可以使动物中的血管生成部位成像。通过与从未施用造影 剂的动物得到的图象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
犬自发肿瘤模型
给带有自发性乳腺瘤的成年狗施用赛拉嗪(20mg/kg)/阿托品(1 ml/kg)。施用镇静剂后，给动物插管，用氯胺酮(5mg/kg)/地西泮(0.25 mg/kg)全麻。用氯胺酮(3mg/kg)/赛拉嗪(6mg/kg)进行持续的化学约 束，按需要滴定。如果需要，在研究过程中，经内气管用房间空气 给动物通风(12下/分钟，25ml/kg)。用20G I.V.导管给外周静脉插入 导管，一个作为化合物的注入口，一个作为血样的输出口。用心动 计数器(Biotech，Grass Quincy，HA)监测由通过肢体导连产生的导连II 心电图引发的心率和EKG。一般在约10分钟(对照)、注入结束时、(1 分钟)、15分钟、30分钟、60分钟、90分钟和120分钟取血样用于全血 细胞计数。放射性药物的剂量是300μCi/kg，通过静脉内快速浓 注，用盐水冲洗。用多种波动描记器(Model 7E Grass)以10mm/min或 10mm/sec的纸速连续监测参数。
用256×256基质，无变焦摄影，进行2小时的侧支成像，得到5分 钟动态图象。将已知源放在成像区(20-90μCi)以评估所研究区域(ROI) 的摄入。还要在注射后24小时得到图象以确定化合物在肿瘤中的滞 留。通过取在划定区的ROI总计数/源并乘以已知μCi来确定摄入。结 果为ROI的μCi。
该模型还可用于评估由发射β、α或Auger电子的同位素组成的 本发明放射性药物的效力。以适当的量施用所述放射性药物，通过 非侵入性地使带有同步可成像γ发射的那些同位素成像，或者通过切 下肿瘤并用标准技术计数出现的放射性量可以定量分析肿瘤中的摄 入。通过监测一段时间内肿瘤的大小可以评估所述放射性药物的效 力。
该模型还可用于评估由顺磁金属为MRI造影剂组成的本发明化 合物。施用适当量的顺磁化合物后，将完整动物放在市售的核磁共 振成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图 象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由重金属为X射线造影剂组成的本发明化 合物。施用适当量的X射线吸附化合物后，将完整动物放在市售X射 线成像仪中以使肿瘤成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图 象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
该模型还可用于评估由含产气表面活性剂微球为超声造影剂组 成的本发明化合物。施用适当量的产气化合物后，利用超声探针接 近肿瘤，可以使动物成像。通过与从未施用造影剂的动物得到的图 象进行比较，很容易看到所述造影剂的效力。
可以用来评价本发明的诊断用放射性药物、磁共振、X-射线和 超声造影剂的心血管疾病模型综述于J.Nucl.Cardiol.，1998，5，167- 83。对于动脉粥样硬化来说，存在若干种已很好确定的兔模型；其中 一个模型用气囊将膈下腹部主动脉脱内皮以刺激再狭窄损伤造成平 滑肌细胞的显著增殖；另一个模型通过气囊脱内皮后接着摄入高胆固 醇饮食产生应激性人高度动脉粥样硬化斑。
充血性心力衰竭的模型描述于Am.J.Physiol.，1998，274，H1516- 23。一般来说，随机指定约克郡猪使其快速心房速率为240跳/分钟， 时间达3周，或者作为对照。在清醒状态下长期用仪器检测这些猪的 左心室功能。将这些猪麻醉。将屏蔽刺激电极缝在左心房，与改良的 程控起搏器连接，并埋于皮下袋中。将心包宽松地闭合，结束胸廓切 开术，并胸膜腔排空空气。恢复7-10天后，将选择进行长期快速起搏 的动物中的起搏器激活。让动物安静，让起搏器停止(只对于起搏 组)。经30分钟的稳定期后，通过注射放射标记的化合物，检测LV功 能指数和几何学(通过心回波描记术作为对照)。对于生物分布，将动 物麻醉，摘除心脏并评价LV尖和心室中部区域。
可逆性冠状动脉闭合和再灌注的大鼠模型描述于McNulty等，J. Am.Physiol.，1996，H2283-9。
显然，就上述教导而言，本发明的许多修改和变化均是可能 的。因此，应理解，在本发明权利要求的范围内，可以按本文的具 体描述实现本发明。