专利汇可以提供一种肺纤维化早期诊断标志物筛查体系及联合检测试剂盒专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 属于医疗技术领域且公开了一种 肺 纤维 化早期诊断标志物筛查体系及联合检测 试剂 盒 ,所述肺纤维化具体诊断方法:1.病人 数据库 及 血液样本 库的建立;2.肺纤维化标志物的筛查及其单克隆 抗体 的制备;3.制备肺纤维化标志物蛋白抗体芯片检测系统;4.抗体芯片检测血清样本;5.抗体芯片制备的条件优化;6.统计学分析;7.制定随访调查表。本发明具有高通量、多样本、高特异性和敏感性的 生物 检测技术,具有极其重要的临床应用价值。,下面是一种肺纤维化早期诊断标志物筛查体系及联合检测试剂盒专利的具体信息内容。
1.一种肺纤维化早期诊断标志物筛查体系及联合检测试剂盒,其特征在于,所述肺纤维化具体诊断方法:
1)病人数据库及血液样本库的建立:
在多家医院尤其是三级甲等医院以及全国肺纤维化多中心研究医院收集弥漫性间质性肺疾病病人血液样本,建立血液样本库,并根据临床资料进行分类管理;同时,收集所有研究对象详细的一般人口特征、影像学和病理学资料,建立系统详实的资料数据库;为了验证肺纤维化患者生物标志物的特异性和敏感性,我们将募集肺纤维化病人及正常健康人(吸烟和不吸烟者)、支气管哮喘病人和COPD病人,具体分组如下:
(1)弥漫性间质性肺疾病组(ILD组):募集100例弥漫性间质性肺疾病病人,其中特发性肺间质纤维化组(IPF组)病人50例,风湿系统疾病相关的肺纤维化(CTD组)病人30例,其他病人组(包括外源性过敏性肺泡炎、肺血管炎、及其他病理类型的特发性间质性肺炎)20例;
(2)正常对照组:健康吸烟组和健康不吸烟组各20例;
(3)支气管哮喘对照组病人20例;
(4)COPD对照组病人20例;
2)肺纤维化标志物的筛查及其单克隆抗体的制备
(1)肺纤维化标志物的筛查及体系的建立
应用RT-PCR和Western blot分别检测4种不同细胞来源的主要生物标志物SP-A、SP-D、KL-6、TGF-β、TNF-α、IL-8、IL-13、IL22、ET-1、MMP7、NAPSINA、CCL18、YKL40、CCN2、VEGF在肺纤维化病人及健康者、健康吸烟者、哮喘患者、慢阻肺病人的基因和蛋白质表达水平,并结合影像学和病理学特征,筛选出相对可靠和稳定的敏感和特异性因子作为标志物、并排除其他疾病可能出现的干扰因 素;
应用现有ELISA技术对所筛查的特异标志物进行含量测定,再根据肺纤维化的程度、病因进行归类和分组;
(2)生物标志物单克隆抗体的制备:购买所筛选出的肺纤维化生物标志物蛋白质作为抗原,采用杂交瘤技术在小鼠体内制备其单克隆抗体,并进行纯化,ELISA法检测其抗体效价,对其抗原性、免疫原性、亲和性进行验证;
3)制备肺纤维化标志物蛋白抗体芯片检测系统:
(1)芯片的选择:选用载玻片作为片基,将载玻片硅烷化;
(2)抗体芯片的制备:将上述生物标志物的单克隆抗体通过点阵法在载玻片上进行点样,制备好的芯片放入湿盒中,4℃过夜;准备用于下一步血清样本的检测;
4)抗体芯片检测血清样本:
(1)血清样本的标记:将血清样本进行生物素标记,备用;
(2)抗体芯片检测血清样本:将制备好的抗体芯片于室温下封闭1小时,洗涤后将血清样本加样于芯片上,加荧光染料孵育后洗涤,用荧光芯片扫描仪进行信号检测;所得检测数据采用分析软件进行分析与校正;
5)抗体芯片制备的条件优化:
在整个芯片制备过程中,通过对点样方式、点样浓度、封闭剂的种类、封闭时间、样品生物素标记试剂与血清蛋白的比例以及血清样本最终检测所用的分析浓度等条件一一进行优化;
6)统计学分析:
将肺纤维化生物标志物蛋白芯片检测结果应用SPSS统计软件进行统计学分析,并与传统ELISA法测得数据进行统计学比较,观察其特异性和敏感性;
7)制定随访调查表:
对入组肺纤维化样例进行长期跟踪随访,每隔2个月检测一次肺纤维化生物标志物,观察指标的变化与疾病进展、治疗效果及预后的关系。
标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
---|---|---|
血浆S100A12在ST段抬高型心肌梗死预后中的应用 | 2020-05-18 | 117 |
胃癌患者的预后方法 | 2020-05-21 | 369 |
白介素26作为生物标志物在诊断、预后或治疗监测脓毒症中的应用 | 2020-05-15 | 568 |
抑瘤素M作为生物标志物在制备脓毒症诊断试剂中的应用 | 2020-05-27 | 172 |
RCAN1.4作为诊断肝细胞癌的诊断标志物的应用 | 2020-05-14 | 428 |
一种基于FUCA1基因的胶质母细胞瘤辅助诊断、预后评价试剂盒及其使用方法 | 2020-05-25 | 335 |
AQP1是一项人神经胶质瘤总生存期(OS)及无进展生存期(PFS)的预后指标 | 2020-05-12 | 835 |
针对VEGF的ELISA | 2020-05-23 | 108 |
lncRNA UCA1在作为卵巢癌诊断或预后效果检验的生物标记物中的应用 | 2020-05-26 | 453 |
一种基于自动控制技术的短波预后选器性能优化方法 | 2020-05-15 | 730 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台,是提供专利分析,专利查询,专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据,免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析,涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度,系统通过AI智能系统对图表进行解读,只需1分钟,一键生成行业专利分析报告。