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一种乳酸菌处理生活污的方法

阅读:1发布:2020-11-05

专利汇可以提供一种乳酸菌处理生活污的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 提供一种乳酸菌处理生活污 水 的方法,属于污 水处理 领域,该乳酸菌处理生活污水的方法具体步骤为准备生活污水,初步滤杂,除杂、乳酸菌的分离、乳酸菌的筛选、乳酸菌处理生活污水反应时间的测定、乳酸菌处理生活污水投加量的测定、乳酸菌处理生活污水pH值的测定。本发明的生活 污水处理 方法,经济性好,工艺简单,操作方便,且反应过程中没有有毒物质的产生,能够实现对于生活污水的生态化处理,本发明对于生活污水中的COD去除率可以达到68%以上,对TP的去除率可以达到80%以上,对TN的去除率可以达到30%以上,具有较好的生活污水的处理效果。,下面是一种乳酸菌处理生活污的方法专利的具体信息内容。

1.一种乳酸菌处理生活污的方法,其特征在于,该种乳酸菌处理生活污水的方法中现配制MRS培养基,主要包含以下成分原料:蛋白胨10g/L-15g/L,酵母浸粉5g/L-8g/L,肉浸膏10g/L-15g/L,葡萄糖20g/L-25g/L,柠檬酸二铵2g/L-5g/L,吐温(Tween 80)1mL/L-
3mL/L,乙酸钠5g/L-8g/L,K2HPO4 2g/L-4g/L,MgSO4•7H2O 0.1g/L-0.3g/L,MnSO4•4H2O 
0.15g/L-0.2g/L,一种乳酸菌处理生活污水的方法具体包括以下步骤:
步骤一:准备生活污水,初步滤杂,除杂;
步骤二:乳酸菌的分离;
步骤三:乳酸菌的筛选;
步骤四:乳酸菌处理生活污水反应时间的测定;
步骤五:乳酸菌处理生活污水投加量的测定;
步骤六:乳酸菌处理生活污水pH值的测定。
2.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤一中,在步骤二中,所述的乳酸菌的分离,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:将液体培养基分装在锥形瓶中,包扎,在高压蒸汽灭菌锅中以温度为121℃-
123℃下灭菌20min-25min,灭菌后待冷至温度为45℃-50℃倒入无菌培养皿中;
第二步:在杀菌清尘的工作台上,按照无菌操作要求,从酸奶中吸取质量为10.00mL-
10.02mL的检样,放入装有体积为90.00mL-92.00mL无菌水的锥形瓶内,振摇混匀;
第三步:将检样充分摇匀后,用十倍稀释法稀释成10-1、10-2、10-3、10-4各种稀释度的样品液,取酸奶稀释液分别接种于MRS固体平板上,每稀释度做一个平板;
第四步:在温度为36.5℃-37℃培养48h-50h左右,选取长势良好的两种形态菌落,分别是黄色、卵圆形和白色、较小、形状不规则的,进行形态观察及革兰氏染色,判断是否分别为乳酸球菌和乳酸杆菌;
第五步:将这两个菌落分别在MRS斜面及固体平板上进行划线,在恒温培养箱中以温度为37℃-37.5℃培养24h-26h左右,进行分离纯化,获取单菌落。
3.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤一中,在步骤三中,所述的乳酸菌的筛选,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:从平板上分别挑取纯种乳酸球菌和乳酸杆菌分别接入锥形瓶MRS液体培养基中,以温度为37℃-37.5℃恒温培养24h-26h,放入箱备用(活化过程);
第二步:配制乳酸发酵菌种筛选培养基,分装入6支试管中,每个试管装5.00mL-5.2mL,包扎,以温度为85℃-95℃水浴10min-15min杀菌;
第三步:选取经初步鉴定的乳酸菌,从液体培养液中分别吸取1.00mL-1.2mL接入试管中,每一种菌接3管,置于温度为43℃-45℃恒温培养;
第四步:每隔一小时观察试管凝乳情况,主要是颜色乳清析出情况,有无气泡产生等,每隔2h-2.5h测定球菌发酵液的酸度,选择凝乳效果好、发酵性能较好的菌种,备用。
4.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤一中,在步骤四中,所述的乳酸菌处理生活污水反应时间的测定,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:COD,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.50mL,在37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入
3.00mL-3.2mL专用化剂,试剂和样品充分混合后,放入COD消解仪中165℃以下消解
120min-130min,在COD测定仪中测定COD浓度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳反应时间为48h;
第二步:TP,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.5mL,37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入4.00mL-
4.5mL过硫酸溶液,高压蒸汽灭菌锅中在115℃-120℃温度下灭菌30min-35min,冷却至室温,加入1.00mL-1.50mL抗坏血酸溶液,混匀,30s后加2.00mL-2.50mL钼酸盐溶液充分混匀,室温下放置15min-16min,于700nm处测吸光度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的最佳反应时间为36h;
第三步:TN,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.50mL,37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入5.00mL-
5.5mL性过硫酸钾溶液,高压蒸汽灭菌锅中120℃温度以下灭菌30min-35min,冷却至室温后,加入(1+9)盐酸1.00mL-1.50mL,用无水稀释至25mL标线,混匀后在用紫外分光光度计分别在波长220nm与275nm处测定吸光度,计算出TN浓度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳反应时间为24h。
5.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤一中,在步骤五中,所述的乳酸菌处理生活污水投加量的测定,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:COD,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,在37℃温度以下反应48h-50h后过滤,测定COD浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳投加量为10.00mL;
第二步:TP,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,在37℃温度以下反应36h-38h后过滤,测定TP浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的最佳投加量为5.00mL;
第三步:TN,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,37℃温度以下反应
24h-26h后过滤,测定TN浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳投加量为10.00mL。
6.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤一中,在步骤六中,所述的乳酸菌处理生活污水pH值的测定,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:COD,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入10.00mL-12.00mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应
48h-50h后过滤,测定COD浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳pH值为6.00;
第二步:TP,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入5.00mL-5.5mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应36h-
38h后过滤,测定TP浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的pH值为6.00;
第三步:TN,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入10.00mL-12.00mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应
24h-26h后过滤,测定TN浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳pH值为8.00。
7.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,所述的现配制MRS培养基,可以包含以下成分原料进行配制:蛋白胨10g/L,酵母浸粉5g/L,牛肉浸膏10g/L,葡萄糖20g/L,柠檬酸二铵2g/L,吐温(Tween 80)1mL/L,乙酸钠5g/L,K2HPO4 2g/L,MgSO4•7H2O 
0.1g/L,MnSO4•4H2O 0.15g/L;还可以包含以下成分原料进行配制:蛋白胨15g/L,酵母浸粉
8g/L,牛肉浸膏15g/L,葡萄糖25g/L,柠檬酸二铵5g/L,吐温(Tween 80)3mL/L,乙酸钠8g/L,K2HPO4 4g/L,MgSO4•7H2O 0.3g/L,MnSO4•4H2O 0.2g/L。
8.如权利要求1所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤二中,所述的在乳酸菌的培养过程中,逐步向培养基中加入生活污水,进行驯化。
9.如权利要求8所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤二中,所述的处理生活污水的乳酸菌为驯化后筛选出的乳酸球菌,在液体培养基中的浓度为7.5×
109cfu/mL。
10.如权利要求8所述的乳酸菌处理生活污水的方法,其特征在于,在步骤六中,所述的处理生活污水中COD的反应条件为反应时间54h,投加量9.00mL,溶液pH值6.00。

说明书全文

一种乳酸菌处理生活污的方法

技术领域

[0001] 本发明属于污水处理技术领域,尤其涉及一种乳酸菌处理生活污水的方法。

背景技术

[0002] 随着我国城镇化进程的加快和人们生活水平的提高,用水量逐渐增加,污水排放量也随之增加。
[0003] 生活污水是仅次于工业污水的主要污染源,含有大量水化合物、氮、磷和多种病原生物
[0004] 目前存在于生活污水中的有机物极不稳定,容易腐化而产生恶臭。若生活污水未经处理排放,会严重污染水资源,威胁人们的身体健康。氮磷排入河流,含量过高会导致水体富营养化,水中含量下降,水中生物缺氧死亡,进一步加剧水体污染。
[0005] 但是,现有的处理生活污水的方法存在着生活污水未经处理排放,会严重污染水资源,氮磷排入河流,含量过高会导致水体富营养化,水中含氧量下降,水中生物缺氧死亡,进一步加剧水体污染的问题。
[0006] 因此,发明一种乳酸菌处理生活污水的方法显得非常必要。

发明内容

[0007] 为了解决上述技术问题,本发明提供一种乳酸菌处理生活污水的方法,以解决现有的处理生活污水的方法存在着生活污水未经处理排放,会严重污染水资源,氮磷排入河流,含量过高会导致水体富营养化,水中含氧量下降,水中生物缺氧死亡,进一步加剧水体污染的问题,现配制MRS培养基,主要包含以下成分原料:蛋白胨10g/L-15g/L,酵母浸粉5g/L-8g/L,肉浸膏10g/L-15g/L,葡萄糖20g/L-25g/L,柠檬酸二铵2g/L-5g/L,吐温(Tween 80)1mL/L-3mL/L,乙酸钠5g/L-8g/L,K2HPO4 2g/L-4g/L,MgSO4•7H2O 0.1g/L-0.3g/L,MnSO4•4H2O 0.15g/L-0.2g/L,一种乳酸菌处理生活污水的方法具体包括以下步骤:
步骤一:准备生活污水,初步滤杂,除杂;
步骤二:乳酸菌的分离,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:将液体培养基分装在锥形瓶中,包扎,在高压蒸汽灭菌锅中以温度为121℃-
123℃下灭菌20min-25min,灭菌后待冷至温度为45℃-50℃倒入无菌培养皿中;
第二步:在杀菌清尘的工作台上,按照无菌操作要求,从酸奶中吸取质量为10.00mL-
10.02mL的检样,放入装有体积为90.00mL-92.00mL无菌水的锥形瓶内,振摇混匀;
-1 -2 -3 -4
第三步:将检样充分摇匀后,用十倍稀释法稀释成10 、10 、10 、10 种稀释度的样品液,取酸奶稀释液分别接种于MRS固体平板上,每稀释度做一个平板;
第四步:在温度为36.5℃-37℃培养48h-50h左右,选取长势良好的两种形态菌落,分别是黄色、卵圆形和白色、较小、形状不规则的,进行形态观察及革兰氏染色,判断是否分别为乳酸球菌和乳酸杆菌;
第五步:将这两个菌落分别在MRS斜面及固体平板上进行划线,在恒温培养箱中以温度为37℃-37.5℃培养24h-26h左右,进行分离纯化,获取单菌落;
步骤三:乳酸菌的筛选,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:从平板上分别挑取纯种乳酸球菌和乳酸杆菌分别接入锥形瓶MRS液体培养基中,以温度为37℃-37.5℃恒温培养24h-26h,放入箱备用(活化过程);
第二步:配制乳酸发酵菌种筛选培养基,分装入6支试管中,每个试管装5.00mL-5.2mL,包扎,以温度为85℃-95℃水浴10min-15min杀菌;
第三步:选取经初步鉴定的乳酸菌,从液体培养液中分别吸取1.00mL-1.2mL接入试管中,每一种菌接3管,置于温度为43℃-45℃恒温培养;
第四步:每隔一小时观察试管凝乳情况,主要是颜色乳清析出情况,有无气泡产生等,每隔2h-2.5h测定球菌发酵液的酸度,选择凝乳效果好、发酵性能较好的菌种,备用;
步骤四:乳酸菌处理生活污水反应时间的测定,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:COD,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.50mL,在37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入
3.00mL-3.2mL专用氧化剂试剂和样品充分混合后,放入COD消解仪中165℃以下消解
120min-130min,在COD测定仪中测定COD浓度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳反应时间为48h;
第二步:TP,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.5mL,37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入4.00mL-
4.5mL过硫酸溶液,高压蒸汽灭菌锅中在115℃-120℃温度下灭菌30min-35min,冷却至室温,加入1.00mL-1.50mL抗坏血酸溶液,混匀,30s后加2.00mL-2.50mL钼酸盐溶液充分混匀,室温下放置15min-16min,于700nm处测吸光度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的最佳反应时间为36h;
第三步:TN,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.50mL,37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入5.00mL-
5.5mL性过硫酸钾溶液,高压蒸汽灭菌锅中120℃温度以下灭菌30min-35min,冷却至室温后,加入(1+9)盐酸1.00mL-1.50mL,用无水稀释至25mL标线,混匀后在用紫外分光光度计分别在波长220nm与275nm处测定吸光度,计算出TN浓度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳反应时间为24h;
步骤五:乳酸菌处理生活污水投加量的测定,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:COD,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,在37℃温度以下反应48h-50h后过滤,测定COD浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳投加量为10.00mL;
第二步:TP,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,在37℃温度以下反应36h-38h后过滤,测定TP浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的最佳投加量为5.00mL;
第三步:TN,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,37℃温度以下反应
24h-26h后过滤,测定TN浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳投加量为10.00mL;
步骤六:乳酸菌处理生活污水pH值的测定,具体操作方法包含以下步骤:
第一步:COD,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入10.00mL-12.00mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应
48h-50h后过滤,测定COD浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳pH值为6.00;
第二步:TP,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入5.00mL-5.5mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应36h-
38h后过滤,测定TP浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的pH值为6.00;
第三步:TN,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入10.00mL-12.00mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应
24h-26h后过滤,测定TN浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳pH值为8.00。
[0008] 优选地,所述的现配制MRS培养基,可以包含以下成分原料进行配制:蛋白胨10g/L,酵母浸粉5g/L,牛肉浸膏10g/L,葡萄糖20g/L,柠檬酸二铵2g/L,吐温(Tween 80)1mL/L,乙酸钠5g/L,K2HPO4 2g/L,MgSO4•7H2O 0.1g/L,MnSO4•4H2O 0.15g/L;还可以包含以下成分原料进行配制:蛋白胨15g/L,酵母浸粉8g/L,牛肉浸膏15g/L,葡萄糖25g/L,柠檬酸二铵5g/L,吐温(Tween 80)3mL/L,乙酸钠8g/L,K2HPO4 4g/L,MgSO4•7H2O 0.3g/L,MnSO4•4H2O 
0.2g/L。
[0009] 优选地,在步骤二中,所述的在乳酸菌的培养过程中,逐步向培养基中加入生活污水,进行驯化。
[0010] 优选地,在步骤二中,所述的处理生活污水的乳酸菌为驯化后筛选出的乳酸球菌,在液体培养基中的浓度为7.5×109cfu/mL。
[0011] 优选地,在步骤六中,所述的处理生活污水中COD的反应条件为反应时间54h,投加量9.00mL,溶液pH值6.00。
[0012] 优选地,在步骤六中,所述的处理生活污水中TP的反应条件为反应时间42h,投加量4.00mL,溶液pH值6.00。
[0013] 优选地,在步骤六中,所述的处理生活污水中TN的反应条件为反应时间24h,投加量9.00mL,溶液pH值8.00。
[0014] 与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:由于本发明的一种乳酸菌处理生活污水的方法广泛应用于污水处理技术领域。本发明中选用乳酸球菌,在250mL锥形瓶中加入10mL生活污水,加入培养基稀释至100mL,将锥形瓶放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌,冷却至室温后接种乳酸菌,培养48h后,稀释不同浓度梯度培养基,涂布稀释,如果乳酸菌生长趋势较好,从中提取优势乳酸菌;继续提高培养基中的污水含量,在锥形瓶中加入20mL污水,加入培养基稀释至100mL,灭菌后接种,所接菌种为污水浓度为10%的培养基培养的优势乳酸菌,观察长势,以此类推,不断提高污水在培养基中的比例,直至获得所需优势菌种;本发明的生活污水处理方法,经济性好,工艺简单,操作方便,且反应过程中没有有毒物质的产生,能够实现对于生活污水的生态化处理,本发明对于生活污水中的COD去除率可以达到68%以上,对TP的去除率可以达到80%以上,对TN的去除率可以达到30%以上,具有较好的生活污水的处理效果。
附图说明
[0015] 图1为本发明的乳酸菌处理生活污水的方法流程图
[0016] 图2为本发明实施例的反应时间图。
[0017] 图3为本发明实施例的投加量图。
[0018] 图4为本发明实施例的pH图。
[0019] 图5为本发明实施例的乳酸菌驯化前后处理效果对比图。
[0020] 图6为本发明实施例的乳酸菌的分离方法流程图。
[0021] 图7为本发明实施例的乳酸菌的筛选方法流程图。
[0022] 图8为本发明实施例的乳酸菌处理生活污水反应时间的测定方法流程图。
[0023] 图9为本发明实施例的乳酸菌处理生活污水投加量的测定方法流程图。
[0024] 图10为本发明实施例的乳酸菌处理生活污水pH值的测定方法流程图。

具体实施方式

[0025] 以下结合附图对本发明做进一步描述:图中:
如附图1所示
一种乳酸菌处理生活污水的方法具体包括以下步骤:
S101:准备生活污水,初步滤杂,除杂;
S102:乳酸菌的分离,如附图6所示,具体操作方法包含以下步骤:
S201:将液体培养基分装在锥形瓶中,包扎,在高压蒸汽灭菌锅中以温度为121℃-123℃下灭菌20min-25min,灭菌后待冷至温度为45℃-50℃倒入无菌培养皿中;
S202:在杀菌清尘的工作台上,按照无菌操作要求,从酸奶中吸取质量为10.00mL-
10.02mL的检样,放入装有体积为90.00mL-92.00mL无菌水的锥形瓶内,振摇混匀;
S203:将检样充分摇匀后,用十倍稀释法稀释成10-1、10-2、10-3、10-4各种稀释度的样品液,取酸奶稀释液分别接种于MRS固体平板上,每稀释度做一个平板;
S204:在温度为36.5℃-37℃培养48h-50h左右,选取长势良好的两种形态菌落,分别是黄色、卵圆形和白色、较小、形状不规则的,进行形态观察及革兰氏染色,判断是否分别为乳酸球菌和乳酸杆菌;
S205:将这两个菌落分别在MRS斜面及固体平板上进行划线,在恒温培养箱中以温度为
37℃-37.5℃培养24h-26h左右,进行分离纯化,获取单菌落;
S103:乳酸菌的筛选,如附图7所示,具体操作方法包含以下步骤:
S301:从平板上分别挑取纯种乳酸球菌和乳酸杆菌分别接入锥形瓶MRS液体培养基中,以温度为37℃-37.5℃恒温培养24h-26h,放入冰箱备用(活化过程);
S302:配制乳酸发酵菌种筛选培养基,分装入6支试管中,每个试管装5.00mL-5.2mL,包扎,以温度为85℃-95℃水浴10min-15min杀菌;
S303:选取经初步鉴定的乳酸菌,从液体培养液中分别吸取1.00mL-1.2mL接入试管中,每一种菌接3管,置于温度为43℃-45℃恒温培养;
S304:每隔一小时观察试管凝乳情况,主要是颜色、乳清析出情况,有无气泡产生等,每隔2h-2.5h测定球菌发酵液的酸度,选择凝乳效果好、发酵性能较好的菌种,备用;
S104:乳酸菌处理生活污水反应时间的测定,如附图2和附图8所示,具体操作方法包含以下步骤:
S401:COD,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.50mL,在37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入3.00mL-
3.2mL专用氧化剂,试剂和样品充分混合后,放入COD消解仪中165℃以下消解120min-
130min,在COD测定仪中测定COD浓度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳反应时间为48h;
S402:TP,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.5mL,37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入4.00mL-
4.5mL过硫酸钾溶液,高压蒸汽灭菌锅中在115℃-120℃温度下灭菌30min-35min,冷却至室温,加入1.00mL-1.50mL抗坏血酸溶液,混匀,30s后加2.00mL-2.50mL钼酸盐溶液充分混匀,室温下放置15min-16min,于700nm处测吸光度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的最佳反应时间为36h;
S403:TN,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入到5个250mL锥形瓶中,加入乳酸菌液体培养基5.00mL-5.50mL,37℃以下按照12h、24h、36h、48h、60h反应后过滤,加入5.00mL-
5.5mL碱性过硫酸钾溶液,高压蒸汽灭菌锅中120℃温度以下灭菌30min-35min,冷却至室温后,加入(1+9)盐酸1.00mL-1.50mL,用无氨水稀释至25mL标线,混匀后在用紫外分光光度计分别在波长220nm与275nm处测定吸光度,计算出TN浓度,计算去除率,绘制反应时间与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳反应时间为24h;
S105:乳酸菌处理生活污水投加量的测定,如附图3和附图9所示,具体操作方法包含以下步骤:
S501:COD,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入
1.00mL、2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,在37℃温度以下反应48h-50h后过滤,测定COD浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳投加量为10.00mL;
S502:TP,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入1.00mL、
2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,在37℃温度以下反应36h-
38h后过滤,测定TP浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的最佳投加量为5.00mL;
S503:TN,分别移取污水200.00mL-220.00mL加入6个250mL锥形瓶中,依次加入1.00mL、
2.00mL、3.00mL、5.00mL、10.00mL、15.00mL乳酸菌液体培养基,37℃温度以下反应24h-26h后过滤,测定TN浓度,计算去除率,绘制投加量与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳投加量为10.00mL;
S106:乳酸菌处理生活污水pH值的测定,如附图4和附图10所示,具体操作方法包含以下步骤:
S601:COD,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入10.00mL-12.00mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应
48h-50h后过滤,测定COD浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中COD的最佳pH值为6.00;
S602:TP,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入5.00mL-5.5mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应36h-
38h后过滤,测定TP浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TP的pH值为6.00;
S603:TN,取6个250mL锥形瓶,移取污水200.00mL-220.00mL,加入10.00mL-12.00mL乳酸菌液体培养基,依次调pH为2.00、4.00、6.00、8.00、10.00、12.00,在37℃温度以下反应
24h-26h后过滤,测定TN浓度,计算去除率,绘制pH值与去除率的折线图,得出乳酸菌处理生活污水中TN的最佳pH值为8.00。
[0026] 优选地,所述的现配制MRS培养基,可以包含以下成分原料进行配制:蛋白胨10g/L,酵母浸粉5g/L,牛肉浸膏10g/L,葡萄糖20g/L,柠檬酸二铵2g/L,吐温(Tween 80)1mL/L,乙酸钠5g/L,K2HPO4 2g/L,MgSO4•7H2O 0.1g/L,MnSO4•4H2O 0.15g/L;还可以包含以下成分原料进行配制:蛋白胨15g/L,酵母浸粉8g/L,牛肉浸膏15g/L,葡萄糖25g/L,柠檬酸二铵5g/L,吐温(Tween 80)3mL/L,乙酸钠8g/L,K2HPO4 4g/L,MgSO4•7H2O 0.3g/L,MnSO4•4H2O 
0.2g/L。
[0027] 优选地,在S102中,所述的在乳酸菌的培养过程中,逐步向培养基中加入生活污水,进行驯化。
[0028] 优选地,在S102中,所述的处理生活污水的乳酸菌为驯化后筛选出的乳酸球菌,在液体培养基中的浓度为7.5×109cfu/mL。
[0029] 优选地,在S106中,所述的处理生活污水中COD的反应条件为反应时间54h,投加量9.00mL,溶液pH值6.00。
[0030] 优选地,在S106中,所述的处理生活污水中TP的反应条件为反应时间42h,投加量4.00mL,溶液pH值6.00。
[0031] 优选地,在S106中,所述的处理生活污水中TN的反应条件为反应时间24h,投加量9.00mL,溶液pH值8.00。
[0032] 具体实施实例:根据单因素实验设置正交实验,正交因素水平表如表1:
表1
通过正交实验结果可知:
(1)对COD去除的正交实验中,第7组为最佳正交实验组合:反应时间54h、投加量
9.00mL、溶液pH值6.00,去除率最高为68.41%。
[0033] (2)对TP去除的正交实验中,第9组为最佳正交实验组合:反应时间42h、投加量4.00mL、溶液pH值6.00,去除率最高为80.04%。
[0034] (3)对TN去除的正交实验中,第3组为最佳正交实验组合:反应时间24h、投加量9.00mL、溶液pH值8.00,去除率最高为32.54%。
[0035] 如附图5所示,乳酸菌驯化后处理污水效果去除率高于乳酸菌驯化前处理污水效果去除率,故此解决现有的处理生活污水的方法存在着生活污水未经处理排放,会严重污染水资源,氮磷排入河流,含量过高会导致水体富营养化,水中含氧量下降,水中生物缺氧死亡,进一步加剧水体污染的问题。
[0036] 利用本发明所述的技术方案,或本领域的技术人员在本发明技术方案的启发下,设计出类似的技术方案,而达到上述技术效果的,均是落入本发明的保护范围。
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