8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成专利检索-螯合物化学元素和化合物专利检索查询-专利查询网

8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成

阅读：452发布：2022-07-23

专利汇可以提供8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明涉及具有通式(I)和(II)的8-羟基喹啉的新对映体衍生物及其合成和其金属络合物和药学上可接受的盐，以及包含这些化合物的医疗和/或药物组合物。本发明的主题的实质涉及以下事实，即现有技术仅公开了外消旋产物的生物学活性和特征，本发明的新对映体衍生物首次出现在本申请中。本发明的主题还涉及用于制备本发明的新对映体衍生物的新立体选择性合成。包含这些对映异构体的新医疗和/或药物组合物适用于治疗指出的疾病，并且对映体用于制备这些组合物。用于制备组合物的这些应用也是本发明的主题。本发明的化合物可优选用作细胞保护、神经保护、心脏保护、抗焦虑和抗抑郁剂，用于治疗神经精神疾病和神经疾病以及与移植和与其缺血和灌注损伤有关的疾病，和抑制器官排斥，优选皮肤移植物排斥。根据我们的研究，在一些情况中，R-对映体具有唯一或高的生物效果。，下面是8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成专利的具体信息内容。

权利要求

1.通式(I)的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物和通式(II)的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物，其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其中
在通式(I)和(II)中
R1表示低级烷基，低级环烷基，芳基，芳烷基或者包含1、2或3个氮、氧或硫原子或其组合的5或6元杂芳基，其中上述基团可任选地被1、2、3、或4个吸电子基团或供电子基团邻位、间位或对位取代；
R2表示氢原子，芳基，芳烷基，包含1、2或3个氮、氧或硫原子或其组合的5或6元杂芳基，其中上述基团可任选地被1、2、3、或4个吸电子基团或供电子基团邻位、间位或对位取代；
R3表示氢原子，低级烷基，-CH2F，-CHF2，-CF3，-CH2CH2F，-CH2CHF2，-CH2CF3，-CH2OR5，-CH2CH2OR6，或-CH2-NR7R8基团；
R4表示氢原子，卤素原子，甲硫基，甲基亚磺酰基，甲基磺酰基，或叠氮基；
R5表示氢原子，或低级烷基；
R6表示氢原子，或低级烷基；
R7表示氢原子，或低级烷基；
R8表示氢原子，或低级烷基；
R7和R8一起表示-(CH2)n-基团，或-CH2CH2OCH2CH2-基团或-CH2CH2SCH2CH2-基团或-CH2CH2NR9CH2CH2-基团，
其中
n是4、5或6；
R9表示低级烷基，或-COR10基团，
R10表示氢原子，低级烷基，甲氧基，或乙氧基；
在通式(I)中
X表示具有“R”构型的氢取代的C原子；
在通式(II)中
Y表示具有“S”构型的氢取代的C原子；
前提是
R1不可表示未取代的苯基，如果
R2表示未取代的苯基，未取代的2-吡啶基，或4-羧基苯基，或2-羧基苯基；
R3表示氢原子或甲基；
R4表示氢原子或氯取代基；
和
R1不可表示3，4-二甲基苯基，如果
R2表示未取代的2-吡啶基；
R3表示甲基并且
R4表示氢原子；
和
R1不可表示2-呋喃基，如果
2
R表示未取代的2-吡啶基；
R3表示氢原子并且
R4表示氯取代基；
和
1
R不可表示未取代的2-吡啶基，如果
R2表示5-甲基异噁唑-3-基；
R3表示氢原子；
R4表示氢原子。
2.如权利要求1所述的通式(I’)的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，
R-对映体
其中
在通式(I’)中
1’
R 表示在间位或对位被吸电子基团取代的芳基，或在邻位、间位或对位被供电子基团取代的芳基；或在间位或对位被吸电子基团双取代的芳基；或在邻位或对位被吸电子基团双取代的芳基；或取代或未取代的杂芳基；
R2’表示在对位被吸电子基团取代的芳基，或在邻位、间位或对位被供电子基团取代的芳基；或者未取代的杂芳基或者在邻位、间位或对位被供电子基团和/或烷基取代的杂芳基或芳基；
R3′表示氢原子
R4’表示氢原子并且
在通式(I’)中
X表示具有“R”构型的氢取代的C原子。
3.如权利要求1所述的通式(II’)的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，
S-对映体
其中
在通式(II’)中
R1’表示在间位或对位被吸电子基团取代的芳基，或在邻位、间位或对位被供电子基团取代的芳基；或在间位或对位被吸电子基团双取代的芳基；或在邻位或对位被吸电子基团双取代的芳基；或取代或未取代的杂芳基；
2’
R 表示在对位被吸电子基团取代的芳基，或在邻位、间位或对位被供电子基团取代的芳基；或者未取代的杂芳基或者在邻位、间位或对位被供电子基团和/或烷基取代的杂芳基或芳基；
R3’表示氢原子；
R4’表示氢原子并且
在通式(I’)中
Y表示具有“S”构型的氢取代的C原子。
4.如权利要求1或2中任一项所述的通式(I”)的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物，及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，
R-对映体
其中
在通式(I”)中
R1”表示任选地被三氟甲基、羟基、氟原子或异丙氧基单或双取代的苯基或吡啶基；
R2”表示任选地被三氟甲基或甲氧基-羰基单或双取代的苯基；或任选地被甲基或氟原子单或双取代的吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、噁唑烷基；
R3”表示氢原子；
R4”表示氢原子；并且
在通式(I”)中
X表示具有“R”构型的氢取代的C原子。
5.如权利要求1或3中任一项所述的通式(II”)的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，
S-对映体
其中
在通式(II”)中
R1”表示任选地被三氟甲基、羟基、氟原子或异丙氧基单或双取代的苯基或吡啶基；
R2”表示任选地被三氟甲基或甲氧基-羰基单或双取代的苯基；或任选地被甲基或氟原子单或双取代的吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、噁唑烷基；
R3”表示氢原子；
R4”表示氢原子；并且
在通式(II”)中
Y表示具有“S”构型的氢取代的C原子。
6.如权利要求1-5中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其特征在于，所述衍生物如下：
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇)，
7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，
7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钠，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，
7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇锌络合物，
7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]4-硝基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]4-硝基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-羟基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-羟基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](4-羟基-3-甲氧基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](4-羟基-3-甲氧基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](5-溴吡啶-2-基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](5-溴吡啶-2-基)甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]2-羟基苯基甲基]-喹啉-8-醇，
7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]2-羟基苯基甲基]-喹啉-8-醇，
5-氯-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
5-氯-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
5-氯-7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-甲基-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-甲基-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(R)-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(S)-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
5-硝基-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
5-硝基-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
7-[(R)-[(吡啶-2-基)[4-(三氟甲基)苯基氨基]甲基]喹啉-8-醇，
7-[(S)-[(吡啶-2-基)[4-(三氟甲基)苯基氨基]甲基]喹啉-8-醇，
2-(羟基甲基)-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，
2-(羟基甲基)-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇。
7.如权利要求1-6中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其特征在于，所述金属络合物是铁、锌或铜络合物。
8.如权利要求1-7中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其特征在于，所述金属络合物是锌络合物。
9.如权利要求6-8中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其特征在于，所述对映体衍生物是7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇。
10.如权利要求6-8中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其特征在于，所述对映体衍生物是7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇。
11.如权利要求6-8中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，其特征在于，所述络合物和盐如下：
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，
7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钠，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，
7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，
7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇锌络合物。
12.包含如权利要求1-11中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物和/或其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐的医疗和/或药物组合物。
13.如权利要求12所述的医疗和/或药物组合物，其特征在于，包含如权利要求1-11中任一项所述的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物和/或其金属络合物和药学上可接受的盐，以及惰性的，药学上可接受的固体或液体运载体和/或赋形剂。
14.如权利要求12-13所述的医疗和/或药物组合物，其特征在于，包含下列的医疗上可接受的运载体和/或赋形剂：淀粉，明胶化的淀粉，纤维素，微晶纤维素或纤维素-衍生物，乳糖，乳糖一水合物，滑石，甘露醇，氯化钠，碳酸钠，蔗糖，麦芽糖，碳酸钙，胶体无水二氧化硅，硬脂酸，硬脂酸镁和/或异麦芽酮糖醇。
15.如权利要求12-14中任一项所述的医疗和/或药物组合物，其特征在于，所述组合物是固体、半固体或液体。
16.如权利要求12-15中任一项所述的医疗和/或药物组合物，其特征在于，所述组合物是片剂、吸入粉末、胶囊、栓剂或注射用溶液。
17.如权利要求12-16中任一项所述的医疗和/或药物组合物，其特征在于，所述组合物是片剂。
18.一种用于制备如权利要求12-17中任一项所述的医疗和/或药物组合物的方法，其特征在于，将权利要求1-11任一项所述的对映体衍生物和/或其金属络合物和/或药学上可接受的盐与权利要求12-17中任一项所述的药学上可接受的惰性，固体或液体运载体和/或赋形剂混合，然后通过使用通常的标准制剂技术配制成权利要求12-17中任一项所述的医疗和/或药物组合物。
19.用于制备如权利要求1所述的通式(I)和(II)的新对映体衍生物和权利要求1或7-8中任一项所述的其络合物和/或药学上可接受的盐的新立体选择性方法，其特征在于，使通式(III)的8-羟基喹啉衍生物
与通式(IV)的胺，
R2-NH2 (IV)
并且与通式(V)的氧代-化合物
反应，使用奎尼丁或奎宁作为催化剂，获得
对映体纯的R-或S-对映体衍生物，这取决于使用的催化剂，其中R1、R2、R3、R4、X和Y表示根据权利要求1定义的基团。
20.如权利要求1和19所述的方法，用于制备如权利要求2、4、6、9和11中任一项所述的具有通式(I’)和(I”)并由化学名称具体命名的新R-对映体衍生物及如权利要求1或7-8中任一项所述的其络合物和/或药学上可接受的盐，其特征在于，所述通式的符号对应于权利要求，并且X表示具有“R”构型的氢取代的碳原子，并且使用奎尼丁作为催化剂。
21.如权利要求1和19所述的方法，用于制备如权利要求3、5、6、10和11中任一项所述的具有通式(II’)和(II”)并由化学名称具体命名的新S-对映体衍生物及如权利要求1或7-8中任一项所述的其络合物和/或药学上可接受的盐，其特征在于，所述通式的符号对应于所述权利要求中的定义，并且Y表示具有“S”构型的氢取代的碳原子，并且使用奎宁作为催化剂。
22.一种如权利要求1、19和20中任一项所述的通用方法，用于制备如所述权利要求所述的新R-对映体衍生物，其特征在于在惰性气氛中，向合适溶剂(180ml)中50mmol奎尼丁的溶液添加甲酸(0.84当量)，然后添加胺衍生物(1当量)，醛化合物(1当量)和8-羟基喹啉衍生物(1.2当量)，然后混合物在合适温度下搅拌直至形成期望量的权利要求1、19和20中任一项所述的R-对映异构体，然后反应混合物真空浓缩至其三分之一体积，残留物溶于二氯甲烷，所述溶液用1M NaOH洗涤并且用1M NaOH另萃取6次，向有机相添加非极性溶剂，然后蒸发掉二氯甲烷并且将获得的溶液添加至100ml的3M HCl，分离相，用3M HCl溶液萃取有机层，向合并的HCl相添加甲基叔丁基醚，然后用40％NaOH溶液将双相体系的pH调节到4，然后过滤掉沉淀的奎尼丁，分离双相滤液，然后由甲基叔丁基醚洗涤水层2次，合并的有机相在硫酸钠上干燥并过滤，向滤液中添加合适溶剂，蒸发掉甲基叔丁基醚，残留物在室温下搅拌
16小时，过滤沉淀的外消旋晶体，然后减压浓缩母液，并将剩余的纯的权利要求1、19和20中任一项所述的R-对映异构体溶解在40ml异丙醇中，在室温下搅拌48小时，然后滤去沉淀的晶体，以得到纯的晶体权利要求1、19和20中任一项所述的R-对映异构体。
23.如权利要求22所述的通用方法，用于制备新R-对映体衍生物，其特征在于，反应混合物和向滤液中添加的合适溶剂是乙腈。
24.如权利要求1、19和21中任一项所述的通用方法，用于制备如所述权利要求所述的新S-对映体衍生物，其特征在于，在惰性气氛中，向合适溶剂(300ml)中的奎宁(55mmol)溶液添加甲酸(0.8当量)，胺(2.5当量)，醛衍生物(3.7当量)，和最后8-羟基喹啉衍生物(1.0当量)，然后混合物在合适温度下搅拌直至形成预期量的权利要求1、19和21所述的S-对映体，真空蒸发掉溶剂，残留物溶解在二氯甲烷中并在硅胶上色谱分离，然后收集含有产物的分级分离部分并蒸发掉溶剂，通过使用己烷-乙酸乙酯梯度的正相快速色谱纯化获得的粗产物，然后收集并浓缩含有产物的分级分离部分，残留物溶解在2-丙醇中并且在2小时搅拌之后，滤掉沉淀的外消旋晶体，然后真空浓缩母液以得到纯的权利要求1、19和21所述的S-对映体，并且使用通常的方法分离并纯化粗产物。
25.如权利要求24所述通用方法，用于制备新S-对映体衍生物，其特征在于，所述反应混合物的合适溶剂是乙腈并且权利要求1、19和21所述的粗S-对映异构体通过过滤、离心分离并通过重结晶或色谱纯化。
26.如权利要求1、19、20和22、23中任一项所述的方法，其特征在于，制备权利要求6和9中任一项所述的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇对映体衍生物。
27.如权利要求1、19、21和24、25中任一项所述的方法，其特征在于，制备权利要求6和
10中任一项所述的7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇对映体衍生物。
28.如权利要求1、19-23中任一项所述的方法，其特征在于，制备权利要求6-8和11中任一项所述的对映体衍生物的盐和金属络合物。
29.如权利要求1-11所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物和如权利要求12所述的医疗和/或药物组合物和如权利要求32-49所述的应用，其特征在于，制备口服医疗和/或药物组合物。
30.如权利要求1-11所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物和如权利要求12所述的医疗和/或药物组合物和如权利要求32-49所述的应用，其特征在于，制备口颊、舌下或直肠医疗和/或药物组合物。
31.如权利要求1-11所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物和如权利要求12所述的医疗和/或药物组合物和如权利要求32-49所述的应用，其特征在于，制备胃肠外医疗和/或药物组合物。
32.如权利要求1-11中任一项所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物或其药学上可接受的盐或金属络合物在制备适于治疗和/或预防神经精神疾病的医疗和/或药物组合物中的用途。
33.如权利要求32所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防焦虑症，精神分裂症，抑郁症，双相障碍的医疗和/或药物组合物。
34.如权利要求33所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防精神分裂症的医疗和/或药物组合物。
35.如权利要求33所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防抑郁症和/或双相障碍的医疗和/或药物组合物。
36.如权利要求1-11中任一项所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物或其药学上可接受的盐或金属络合物在制备适于治疗和/或预防神经疾病的医疗和/或药物组合物中的用途。
37.如权利要求36所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防癫痫，健忘症，不同记忆障碍，认知功能问题，神经变性疾病的医疗和/或药物组合物。
38.如权利要求37所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防健忘症，不同记忆障碍，认知功能问题的医疗和/或药物组合物。
39.如权利要求37所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防癫痫和/或不同记忆障碍的医疗和/或药物组合物。
40.如权利要求37所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防神经变性疾病的医疗和/或药物组合物。
41.如权利要求40所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防阿尔茨海默病，亨廷顿氏病，帕金森病，威尔逊病，肌萎缩侧索硬化(ALS)的医疗和/或药物组合物。
42.如权利要求41所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防阿尔茨海默病的医疗和/或药物组合物。
43.如权利要求41所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防肌萎缩侧索硬化(ALS)的医疗和/或药物组合物。
44.如权利要求1-11中任一项所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物或其药学上可接受的盐或金属络合物在制备适于治疗和/或预防与移植相关和与缺血及其再灌注损伤相关的疾病的医疗和/或药物组合物中的用途。
45.如权利要求44所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防心血管疾病，血管病变，外伤性损伤，神经变性损伤，与移植相关和与缺血及其再灌注损伤相关的疾病的医疗和/或药物组合物。
46.如权利要求44和45中任一项所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防脑、心、肝、肾或肺损伤的医疗和/或药物组合物。
47.如权利要求46所述的用途，其特征在于，制备适于治疗和/或预防外伤性脑损伤的医疗和/或药物组合物。
48.如权利要求44所述的用途，其特征在于，制备适于抑制器官移植物排斥的医疗和/或药物组合物。
49.如权利要求48所述的用途，其特征在于，制备适于抑制皮肤移植物排斥的医疗和/或药物组合物。
50.如权利要求36-43中任一项所述的用途，其特征再于，使用权利要求1、2、4、6、9和11中任一项所述的新8-羟基喹啉R-对映体衍生物或其权利要求1、7-8中任一项所述的药学上可接受的盐或金属络合物。
51.如权利要求1-11中任一项所述的新8-羟基喹啉对映体衍生物或其药学上可接受的盐或金属络合物在制备用权利要求12所述的，适于治疗和/或预防权利要求32-49中任一项所述的疾病并显示与形成金属螯合物的靶蛋白质的有利结合的细胞保护、神经保护、心脏保护医疗和/或药物组合物中的用途。
52.如权利要求12所述的细胞保护、神经保护、心脏保护医疗和/或药物组合物的用途，适于治疗和/或预防患有与细胞死亡相关的疾病的患者的疾病并适于保护免于细胞毒性攻击。
53.如权利要求12所述的医疗和/或药物组合物用于治疗和/或预防权利要求32-49中任一项所述的疾病的用途，可通过医学中的常用方法给予组合物。
54.如权利要求53所述的用途，其特征在于，使用口服或口颊或舌下或直肠或胃肠外医疗和/或药物组合物，其也可通过静脉内或吸入方法给予。
55.如权利要求53和54中任一项所述的用途，其特征在于，使用口服医疗和/或药物组合物。
56.如权利要求12所述的医疗和/或药物组合物用于治疗和/或预防权利要求32-49中任一项所述的疾病的用途。
57.一种用于治疗和/或预防权利要求32-49中任一项所述的疾病的细胞保护、神经保护、心脏保护方法，其特征在于，通过医学中常用方法以医疗有效剂量给予权利要求12所述的医疗和/或药物组合物。
58.如权利要求57所述的方法，其特征在于，通过口服或口颊或舌下或直肠或胃肠外或静脉内或吸入方法给予权利要求12所述的医疗和/或药物组合物。
59.如权利要求57所述的方法，其特征在于，通过口服方法给予权利要求12所述的医疗和/或药物组合物。
60.如权利要求57所述的方法，其特征在于，给予医疗和/或药物组合物用于治疗和/或预防权利要求36-43中任一项所述的疾病，所述医疗和/或药物组合物包含权利要求1、2、4、
6、9和11中任一项所述的新8-羟基喹啉R-对映体衍生物或其权利要求1、7-8中任一项所述的药学上可接受的盐或金属络合物。

说明书全文

8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成

[0001] 本发明涉及通式(I)的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物和通式(II)的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物，其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选铁、铜或锌络合物，

[0002]

[0003] 其中

[0004] 在通式(I)和(II)中

[0005] R1表示低级烷基，低级环烷基，芳基，芳烷基或者包含1、2或3个氮、氧或硫原子或其组合的5或6元杂芳基，其中上述基团可任选地被1、2、3、或4个吸电子基团或供电子基团邻位、间位或对位取代；

[0006] R2表示氢原子，芳基，芳烷基，包含1、2或3个氮、氧或硫原子或其组合的5或6元杂芳基，其中上述基团可任选地被1、2、3、或4个吸电子基团或供电子基团邻位、间位或对位取代；

[0007] R3表示氢原子，低级烷基，-CH2F，-CHF2，-CF3，-CH2CH2F，-CH2CHF2，-CH2CF3，-CH2OR5，-CH2CH2OR6，或-CH2-NR7R8基团；

[0008] R4表示氢原子，卤素原子，甲硫基，甲基亚磺酰基，甲基磺酰基，或叠氮基；

[0009] R5表示氢原子，或低级烷基；

[0010] R6表示氢原子，或低级烷基；

[0011] R7表示氢原子，或低级烷基；

[0012] R8表示氢原子，或低级烷基；

[0013] R7和R8一起表示-(CH2)n-基团，或-CH2CH2OCH2CH2-基团或-CH2CH2SCH2CH2-基团或-9
CH2CH2NRCH2CH2-基团，

[0014] 其中

[0015] n是4、5或6；

[0016] R9表示低级烷基，或-COR10基团，

[0017] R10表示氢原子，低级烷基，甲氧基，或乙氧基；

[0018] 在通式(I)中

[0019] X表示具有“R”构型的氢取代的C原子；

[0020] 在通式(II)中

[0021] Y表示具有“S”构型的氢取代的C原子；

[0022] 前提是

[0023] R1不可表示未取代的苯基，如果

[0024] R2表示未取代的苯基，未取代的2-吡啶基，或4-羧基苯基，或2-羧基苯基；

[0025] R3表示氢原子或甲基；

[0026] R4表示氢原子或氯取代基；

[0027] 和

[0028] R1不可表示3，4-二甲基苯基，如果

[0029] R2表示未取代的2-吡啶基；

[0030] R3表示甲基并且

[0031] R4表示氢原子；

[0032] 和

[0033] R1不可表示2-呋喃基，如果

[0034] R2表示未取代的2-吡啶基；

[0035] R3表示氢原子并且

[0036] R4表示氯取代基

[0037] 和

[0038] R1不可表示未取代的2-吡啶基，如果

[0039] R2表示5-甲基异噁唑-3-基

[0040] R3表示氢原子

[0041] R4表示氢原子。

[0042] 本发明的主题优选涉及通式(I’)的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物和通式(II’)的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物，其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选铁、铜或锌络合物，

[0043]

[0044] 其中

[0045] 在通式(I’)和(II’)中

[0046] R1’表示在间位或对位被吸电子基团取代的芳基，或在邻位、间位或对位被供电子基团取代的芳基；或在间位或对位被吸电子基团双取代的芳基；或在邻位或对位被吸电子基团双取代的芳基；或取代或未取代的杂芳基；

[0047] R2’表示在对位被吸电子基团取代的芳基，或在邻位、间位或对位被供电子基团取代的芳基；或者未取代的杂芳基或者在邻位、间位或对位被供电子基团和/或烷基取代的杂芳基或芳基；

[0048] R3’优选表示氢原子

[0049] R4’优选表示氢原子并且

[0050] 在通式(I’)中

[0051] X表示具有“R”构型的氢取代的C原子；

[0052] 在通式(II’)中

[0053] Y表示具有“S”构型的氢取代的C原子；

[0054] 本发明的主题优选涉及通式(I”)的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物和通式(II”)的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物，其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选铁、铜或锌络合物，

[0055]

[0056] 其中

[0057] 在通式(I”)和(II”)中

[0058] R1”优选表示任选地被三氟甲基、羟基、氟原子或异丙氧基单或双取代的苯基或吡啶基；

[0059] R2”优选表示任选地被三氟甲基或甲氧基-羰基单或双取代的苯基；或任选地被甲基或氟原子单或双取代的吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、噁唑烷基；

[0060] R3”优选表示氢原子；

[0061] R4”优选表示氢原子；

[0062] 在通式(I”)中

[0063] X表示具有“R”构型的氢取代的C原子；

[0064] 在通式(II”)中

[0065] Y表示具有“S”构型的氢取代的C原子；

[0066] 本发明的主题还优选涉及8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物，及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物，特别优选以下详细列出的其锌络合物：

[0067] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇)，

[0068] 7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇，

[0069] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，

[0070] 7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，

[0071] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钠，

[0072] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，

[0073] 7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，

[0074] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇锌络合物，

[0075] 7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]4-硝基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0076] 7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]4-硝基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0077] 7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-羟基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0078] 7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-羟基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0079] 7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](4-羟基-3-甲氧基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0080] 7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](4-羟基-3-甲氧基苯基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0081] 7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](5-溴吡啶-2-基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0082] 7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](5-溴吡啶-2-基)甲基]-喹啉-8-醇，

[0083] 7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]2-羟基苯基甲基]-喹啉-8-醇，

[0084] 7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]2-羟基苯基甲基]-喹啉-8-醇，

[0085] 5-氯-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0086] 5-氯-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0087] 5-氯-7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0088] 2-甲基-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0089] 2-甲基-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0090] 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0091] 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0092] 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(R)-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0093] 2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(S)-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0094] 5-硝基-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0095] 5-硝基-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0096] 7-[(R)-[(吡啶-2-基)[4-(三氟甲基)苯基氨基]甲基]喹啉-8-醇，

[0097] 7-[(S)-[(吡啶-2-基)[4-(三氟甲基)苯基氨基]甲基]喹啉-8-醇

[0098] 2-(羟基甲基)-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0099] 2-(羟基甲基)-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇。

[0100] 本发明的主题还特别优选涉及8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物，及其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物，特别优选以下详细列出的其锌络合物：

[0101] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇，

[0102] 7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇

[0103] 本发明的主题还特别优选涉及8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物的药学上可接受的盐和锌络合物，如以下详细列出：

[0104] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，

[0105] 7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇钾，

[0106] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钠，

[0107] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，

[0108] 7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)-苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯，

[0109] 7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]-甲基]喹啉-8-醇锌络合物，

[0110] 本发明的主题还涉及包含通式(I)和(II)，优选(I’)和(II’)，优选(I”)和(II”)(此后称为本发明的通式)所公开并优选如上述具体命名的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物，和/或其与二价或多价金属的药学上可接受的盐和/或络合物，优选其铁、铜或锌络合物，作为活性剂的医疗和/或药物组合物，其组合物含有惰性、药学上可接受的、固体或液体运载体和/或赋形剂，优选淀粉、明胶化淀粉、纤维素、微晶纤维素或纤维素衍生物、乳糖、乳糖一水合物、滑石、甘露醇、氯化钠、碳酸钠、蔗糖、麦芽糖、碳酸钙、胶体无水二氧化硅、硬脂酸、硬脂酸镁或异麦芽酮糖醇(isomalt)。

[0111] 本发明的主题还涉及医疗和/或药物组合物，优选固体组合物，尤其优选片剂，吸入粉末或胶囊，优选半固体组合物，尤其优选栓剂，或优选液体组合物，尤其优选注射用溶液。

[0112] 本发明的主题还涉及制备医疗和/或药物组合物的方法：所述医疗和/或药物组合物包含由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的药学上可接受的盐和/或络合物，优选其铁、铜或锌络合物的，所述方法通过混合本发明的对映体衍生物和/或其药学上可接受的盐和/或络合物与如上所述的药学上可接受的运载体和/或赋形剂，然后使用常规标准配制技术将该混合物配制成医疗和/或药物组合物，优选配制成片剂，吸入粉末或胶囊，栓剂或溶液，特别优选片剂。

[0113] 本发明的主题还涉及用于制备由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的药学上可接受的盐和/或络合物，优选其铁、铜或锌络合物的新立体选择性方法，具体涉及通式(I)和(II)的对映体衍生物，通过将通式III的8-羟基喹啉衍生物

[0114]

[0115] 与通式(IV)的胺，

[0116] R2-NH2 IV

[0117] 并且与通式(V)的氧代-化合物反应

[0118]

[0119] 使用奎尼丁(获得R-对映体)或奎宁(获得S-对映体)作为催化剂。

[0120]

[0121] 通过该方法，可获得通式(I)的纯R-对映体衍生物或纯S-对映体衍生物，并可用作活性剂或可转化成与二价或多价金属的药学上可接受的盐或络合物，优选其铁、铜或锌络合物，尤其优选转化成其锌络合物或可从其盐或络合物中释放。

[0122] 关于本发明的通式的化合物的其他优选形式，如上所述描述本发明的方法，使用通式本发明的不同形式的通式的起始材料和试剂的(III’)，(III”)，(IV’)，(IV”)和(V”)和(V”)适当索引的合适R’和R”取代基和优选如上述具体命名的化合物。

[0123] 本发明的主题还涉及制备通式(I)、(I’)和(I”)并优选如上述具体命名的8-羟基喹啉衍生物的新R-对映体衍生物，和其与二价或多价金属的药学上可接受的盐和/或络合物，优选其铁、铜或锌络合物，具体涉及通式(I)和(II)对映体衍生物的方法，通过将通式(III)，优选(III’)，更优选(III”)的8-羟基喹啉衍生物与通式(IV)，优选(IV’)，更优选(IV”)的胺并与通式(V)，优选(V’)，更优选(V”)的氧代-化合物反应，优选使用奎尼丁作为催化剂并通过该方法获得纯R-对映体衍生物。

[0124] 本发明的主题还涉及制备通式(I)、(I’)和(I”)并优选如上述具体命名的8-羟基喹啉衍生物的新S-对映体衍生物，和其与二价或多价金属的药学上可接受的盐和/或络合物，优选铁、铜或锌络合物，具体涉及通式(I)和(II)对映体衍生物的方法，通过将通式(III)，优选(III’)，更优选(III”)的8-羟基喹啉衍生物与通式(IV)，优选(IV’)，更优选(IV”)的胺并与通式(V)，优选(V’)，更优选(V”)的氧代-化合物反应，优选使用奎宁作为催化剂并通过该方法获得纯S-对映体衍生物。

[0125] 对于本发明的方法，溶剂，优选有机溶剂或水，特别优选乙腈被用作反应介质。

[0126] 可通过优选使用酸性催化剂，特别优选甲酸来实施反应。

[0127] 为了制备本发明的化合物，根据起始材料，已经按照本发明应用以下新型通用立体选择方法：

[0128] 对于本发明的方法，溶剂，优选有机溶剂或水，特别优选乙腈被用作反应介质。

[0129] 可通过优选使用酸性催化剂，特别优选甲酸来实施反应。

[0130] 为了制备本发明的化合物，根据起始材料，已经按照本发明应用以下新型通用立体选择方法：

[0131] 用于制备具有“R”构型的对映体的方法“R”：

[0132] 向合适溶剂(180ml)中50mmol奎尼丁溶液中，在惰性气氛中添加甲酸(0.84当量)，然后添加胺衍生物(1当量)，醛化合物(1当量)和8-羟基喹啉衍生物(1.2当量)。

[0133] 混合物在合适温度下搅拌直至形成所需的量的产物。

[0134] 反应混合物真空浓缩至其三分之一体积，残留物溶解在二氯甲烷中。溶液用1M NaOH洗涤并另用1M NaOH萃取6次。

[0135] 向有机相中添加非极性溶剂，然后蒸发去除二氯甲烷。向100ml的3M HCl中添加获得的溶液。分离相，并用3M HCl溶液萃取有机层。

[0136] 向合并的HCl相添加甲基-叔丁基醚，然后用40％NaOH溶液将双相系统的pH调节到4。

[0137] 滤去沉淀的奎尼丁，分离双相滤液，然后用甲基-叔丁基醚洗涤水相2次，合并的有机相在硫酸钠上干燥并过滤。

[0138] 向滤液中添加合适的溶剂，蒸发去除甲基-叔丁基醚，并且残留物在室温下搅拌16小时。沉淀的外消旋晶体经过滤。

[0139] 母液经减压浓缩并且将剩余的纯R-对映体溶解在40ml的异丙醇中，在室温下搅拌48小时，然后过滤去除沉淀的晶体，以得到纯晶体R-对映体。

[0140] 用于制备具有S-构型的对映体的方法“S”

[0141] 在惰性气氛中，向合适溶剂(300ml)中的奎宁(55mmol)溶液添加甲酸(0.8当量)，胺(2.5当量)，醛衍生物(3.7当量)，和最后8-羟基喹啉衍生物(1.0当量)。

[0142] 混合物在合适温度下搅拌直至形成所需的量的产物。

[0143] 溶剂在真空中被蒸发去除，残留物溶解在二氯甲烷中并在硅胶上进行色谱分离。

[0144] 收集含分级分离部分的产物并且蒸发去除溶剂。

[0145] 通过使用己烷-乙酸乙酯梯度的正相快速色谱纯化获得的粗产物，然后收集并浓缩含有产物的分级分离部分。

[0146] 残留物溶解在2-丙醇中。在2小时的搅拌之后，过滤去除沉淀的外消旋晶体。母液真空浓缩以得到S-对映体。粗产物通过常用方法(例如，过滤，离心)分离并在必要时通过已知的方法(例如，重结晶或色谱)纯化。

[0147] 本发明的主题还涉及由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉衍生物的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的药学上可接受的盐和/或络合物，优选其铁、铜或锌络合物在制备适于治疗和/或预防神经精神疾病，优选焦虑性障碍，精神分裂症，抑郁症，双相障碍，特别优选双相障碍，抑郁症的医疗和/或药物组合物中的用途。

[0148] 本发明的主题还涉及由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉的R-对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物在制备适于治疗和/或预防神经疾病，优选癫痫，健忘症，不同记忆障碍，认知功能问题，神经变性疾病特别优选记忆障碍，癫痫，健忘症，认知功能问题，阿尔茨海默病，亨廷顿氏病，帕金森病，威尔逊病，肌萎缩侧索硬化(ALS)的医疗和/或药物组合物中的用途。

[0149] 本发明的主题还涉及由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物在制备适于治疗和/或预防缺血及其再灌注损伤，优选心血管疾病，血管病变(catastrophes)，外伤性损伤，神经变性损伤，与移植相关和与缺血及其再灌注损伤相关的疾病，优选脑、心、肝、肾或肺的损伤，尤其优选外伤性脑损伤，和适于抑制器官排斥，优选皮肤移植物排斥，尤其优选适于抑制皮肤移植物排斥的医疗和/或药物组合物中的用途。

[0150] 本发明的主题还涉及由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物在制备金属螯合物形成，细胞保护性，神经保护性和/或心脏保护性医疗和/或药物组合物中的用途，该组合物显示对靶蛋白的有利结合，适于治疗和/或预防神经精神疾病，神经疾病和与缺血相关的疾病。

[0151] 本发明的主题还涉及由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物在制备细胞保护性，神经保护性和/或心脏保护性医疗和/或药物组合物中的用途，该组合物用于保护细胞免于细胞毒性攻击，并用于治疗患有与“细胞死亡”组合的疾病和/或预防其疾病。

[0152] 本发明的主题还涉及由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物用于治疗和预防上述疾病中的用途，其组合物可通过医学中常用方法给予，优选通过口服，口颊，舌下，胃肠外或静脉内，直肠或吸入方法，尤其优选通过口服方法给予。

[0153] 本发明的主题还涉及用于治疗和/或预防心血管疾病，血管病变，外伤性损伤，神经变性损伤，与移植相关和与缺血及其再灌注损伤相关的疾病，优选脑、心、肝、肾或肺的损伤，尤其优选外伤性脑损伤，和抑制器官，优选皮肤移植物排斥，尤其优选适于抑制皮肤移植物排斥的细胞保护性、神经保护性或心脏保护性方法，通过医学中常用方法，优选通过口服，口颊，舌下，胃肠外或静脉内，直肠或吸入方法给予，尤其优选通过口服方法给予医疗和/或药物组合物，该组合物包含本发明的通式所公开并优选如上述具体命名的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物。

[0154] 本发明的主题还涉及用于治疗和/或预防神经疾病，优选癫痫，健忘症，不同记忆障碍，认知功能问题，神经变性疾病特别优选记忆障碍，癫痫，健忘症，认知功能问题，阿尔茨海默病，亨廷顿氏病，帕金森病，威尔逊病，肌萎缩侧索硬化(ALS)的细胞保护性、神经保护性方法，通过医学中常用方法，优选通过口服，口颊，舌下，胃肠外或静脉内，直肠或吸入方法给予，尤其优选通过口服方法给予医疗和/或药物组合物，该组合物包含本发明的通式所公开并优选如上述具体命名的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其与二价或多价金属的络合物和药学上可接受的盐，优选其铁、铜或锌络合物。

[0155] II.历史，本领域现状，作用机制

[0156] 1)由本发明的通式所公开并优选如上所述具体命名的本发明的8-羟基喹啉的新对映体衍生物，和其药学上可接受的盐和金属络合物，优选铁、铜或锌络合物，适于治疗和/或预防不同疾病并包含对象化合物的药物的历史、本领域现状、作用机制的说明。

[0157] 本说明书在下文中引用的现有技术和专利全部都是本领域现状的部分。

[0158] 各种病原学细胞损伤和细胞死亡是许多心血管、神经和炎性疾病的主要特征。在神经变性疾病的情况中，细胞损伤可能以细胞缺氧或缺血，形成各种类型的氧化物或自由基和/或过度生成各种生物介导物(细胞因子、趋化因子、脂质介质)和过度生成和/或聚集不同的毒性肽(例如，β-淀粉样肽)或蛋白质(突触核蛋白、亨廷顿蛋白、朊病毒)的结果出现(综合文献：Orrenius，2007；Mattson，2006)。

[0159] 这些方法通常是独立的；因此，这些以自扩增(“自杀”)胞内循环的部分出现并形成许多人类疾病的确定基础。

[0160] 虽然细胞死亡一般称为凋亡或坏死，这两种形式仅表示细胞损伤形式的范围的2个末端。

[0161] 参与上述细胞死亡过程的胞内机制是复杂的，但通常激活称为胱冬酶和线粒体功能障碍，线粒体去极化，生成活性氧物质和向胞浆中释放线粒体组分的细胞死亡效应物家族(综合文献：Szabó，2005；Duprez等，2009；Degterev和Yuan，2008；Wang等，2009；Stefanis，2005)。

[0162] 在阿尔茨海默病的情况中，神经细胞死亡主要来自聚集的β-淀粉样肽的直接细胞毒性效果，其部分由胱冬酶引发的凋亡生成。

[0163] 认知功能退化的其他原因是在神经传递中起作用的不同突触蛋白质的定量降低和像乙酰胆碱和毒蝇碱的不同受体的降低的活性(Machova等，2008；Bartus，2000)。

[0164] 有越来越多的证据表明，在β-淀粉样肽聚集中，并不是原纤，而是寡聚物形式具有与死亡和痴呆相关的神经病理性变化，像发生蛋白质缠结和神经炎症(例如，降低的树突-刺突和减少数量的活性突触)的关联性(综合文献：Lue等，1999；McLean等，1999；Wang等，1999)。

[0165] 然而，除了β-淀粉样肽的寡聚物形式聚集以外，原纤形式也导致神经元破坏和部分降低通过LDI受体的功能性(Janciauskiene等，1999)。

[0166] 防止细胞损伤和细胞死亡的化合物通常被称为“细胞保护性”化合物。也可通过许多药理学和生物化学方法来实现细胞保护。本文提及了它们的以下示例：氧化剂和自由基的清除剂，某些“死亡效应物途径”的抑制剂，细胞膜的稳定化等。在缺氧和几种相关的疾病过程中，从组织释放铁和铜阳离子，其以导致细胞损伤的已知方式催化Haber-Weiss途径中的羟基自由基形成。这些金属阳离子的失活或螯合物形成可能导致细胞保护效果。进行这些实验以给予铁-螯合物形成铁载体(例如，去铁胺)的方式来降低铁和铜阳离子的催化效率(Lewen等，2000；Britton等，2002)。

[0167] 已知谷氨酸与锌阳离子一起从神经系统细胞的突触体释放，该细胞使用谷氨酸盐或酯作为化学信使。通常，在神经突触中释放的锌在突触体中再次快速构建。由于缺血，持续攻击和脑部病灶，从突触体释放的锌在神经元周围的胞外液体中累积。当过量的锌浸入细胞体时，锌可能通过凋亡和坏死引发细胞死亡。通过该机制的锌-螯合物形成可能导致神经保护并影响各种神经精神疾病的结果(Regland等，2001；Koh等，1996)。

[0168] 因此，锌-螯合剂也可用于通过结合在空斑中出现的锌，由此弱化空斑结构来治疗阿尔茨海默病(Frederickson等，2005；等，2007)。锌-螯合剂也可用于治疗亨廷顿氏病(Nguyen等，2005)。

[0169] 根据另一种细胞保护方式，可诱导介导保护作用的胞内途径。这种方法的原型是所谓的“缺血性预调理”，其中细胞或器官经受短时间的缺血以诱导细胞保护性基因(例如，抗氧化剂酶，热休克蛋白等的基因)的过度生成。诱导血红素加氧酶(HMOX-1)已经在多个实验系统中证明了细胞保护(例如，Li等，2007；Idris等，2008)。

[0170] 已经在美国专利申请公开号US 2008/293699中描述了用于抑制内质网应激的化合物。

[0171] 本领域的部分现状也是我们的较早专利申请，其中最近已经公开了新的外消旋8-羟基喹啉衍生物及其说明，并且其中已经通过基于细胞的筛选测试鉴定了该化合物家族的一些成员用于系统鉴定细胞保护性化合物(WO2011148208)。

[0172] 在该测试中，模拟特定形式的细胞损伤并且筛选化学文库以鉴定防止或阻止细胞损伤的化合物(例如，Gero等，2007)。

[0173] 通过基于细胞的筛选方法的手段，我们已经发现并鉴定了新外消旋8-羟基喹啉衍生物。

[0174] 这些化合物保护细胞免于受到氧化应激诱导的损伤，因此，这些可潜在用于许多疾病的治疗。

[0175] 外消旋化合物显示出各种细胞效应，例如，铁-铜和锌螯合，抑制PARP-活化，抑制线粒体功能障碍，或活化血红素加氧酶。

[0176] 然而，根据我们较早的发明，仅已经描述了外消旋化合物，还完全没有制备其对映体纯的衍生物，并且还未公开其化学特征。

[0177] 此外，关于较早的细胞保护测试，没有提供直接证据表明，外消旋化合物可防止由β-淀粉样肽的不同聚集形式(寡聚物，和高分子量原纤络合物)引发的神经元破坏以及它们是否可用于增加认知功能。

[0178] 较早时，还未知各对映体通过哪种分子机制在神经元、心脏细胞上和在由β寡聚体诱导的神经变性动物模型中实现其积极效果。

[0179] 已显示纯R-对映体衍生物对可能与临床候选物的神经保护性效果和抑制相关神经炎症效果相关的几个靶标有影响。

[0180] 本发明的实施例2的R-对映体化合物在微摩尔浓度上抑制胱冬酶-3和5-脂肪氧化酶，和由活化的T-细胞核因子(NF-AT)调节的转录诱导。

[0181] 胱冬酶-3的活化与衰老中脑部的几种变性过程(Lynch等，2002)和老龄中出现的神经变性疾病的发病(Eckert等，2003)强相关。

[0182] 胱冬酶-3的活化是许多毒性刺激的共同关联点，包括由聚集的β-淀粉样肽诱导的中毒和氧化损伤。

[0183] 活化的胱冬酶-3诱导几种关键胞内蛋白质的降解，最终导致凋亡(Hengartner，2000)。

[0184] 然而，胱冬酶-3不仅在神经变性的晚期起到重要作用，也促进早期的病原性变化，因为其也导致淀粉样前体蛋白(APP)和GGA3衔接子的蛋白水解切割，这两者最终转化成毒性淀粉样肽聚集体。

[0185] 轴突微管相关tau蛋白形成神经原纤缠结也是胱冬酶-3的底物，因此增加的胱冬酶-3的活性降低了全长tau蛋白与微管的结合，最终导致神经炎性变性。

[0186] 此外，已经显示神经元中的原纤tau蛋白沉积并不是由胱冬酶活化诱导的细胞内的变性过程的原因，而是其结果(Calignon等，2010)。

[0187] 从所有这些中，可通过，尤其是通过使用纯本发明和实施例2的R-对映体衍生物用于抑制脑部胱冬酶的来抑制与不同原因的神经变性过程相关的神经元破坏(氧化应激、β-淀粉样肽聚集体的影响)和认知恶化发展过程。

[0188] 钙离子稳态的紊乱和之后钙依赖磷酸酶的活化可诱导与阿尔茨海默病相关的病理性变化(Liu等，2005)。

[0189] 活化的T-细胞核因子(NFAT)被钙依赖磷酸酶去磷酸化，通过去磷酸化在细胞核中易位，引发诱导神经元破坏、星形胶质细胞的活化和神经炎性过程的几种基因的表达。在这些中，诱导白介素-1β(IL-1β)是头等重要的，这是增加的胞外谷氨酸水平的原因之一，并且参与过度兴奋突触活性，通常参与与几种神经变性疾病相关的神经炎性过程的诱导和维持(Sama等，2008)。

[0190] 最近显示，可通过在转基因小鼠中药物抑制NFAT来降低由β-淀粉样引发的神经毒性(Hudry等，2012)。

[0191] 此外，已经在患有不同严重程度的痴呆的阿尔茨海默病患者的脑部样品中指出了不同水平的各NAFT同种型(Abdul等，2009)。

[0192] 同一作者也已经发表了兴奋性氨基酸转运蛋白(EAAT-2)的蛋白质水平被星形胶质细胞中的β-淀粉样寡聚体NFAT依赖性降低，并且谷氨酸导致的神经元破坏的水平增加。

[0193] 使用一般的NFAT抑制剂，可逆转所有这些效果，证明NFAT转录活化在与中枢神经系统相关的病原性过程中起到重要作用，并且通过其抑制，证明NFAT系统可以是与神经变性疾病的治疗相关的重要靶标。

[0194] 熟知对钙依赖磷酸酶/NFAT系统的抑制减少器官移植排斥，因此本发明的化合物也可适于抑制器官移植排斥。

[0195] 众所周知，在器官移植期间，抑制钙依赖磷酸酶/NFAT系统减少器官排斥(参见，Park，2006)：参见M，Park J.NFAT活化调节：免疫抑制的潜在治疗靶标(Regulation of NFAT activation：a potential therapeutic target for immunosuppression).Mol Cells.2006年8月31日；22(1)：1-7)，因此，本发明的化合物也可用于预防移植后器官排斥反应。

[0196] 由A23187离子载体和PMA诱导剂引发的NFAT转录诱导被微摩尔浓度的实施例2和本发明的化合物抑制。

[0197] 因此，可以得出结论，实施例2的对映体纯的R-对映体衍生物能够抑制由β-淀粉样蛋白和细胞内钙的升高诱导的钙依赖磷酸酶活性升高，以及由此产生的钙依赖磷酸酶活性，并因此能够抑制凋亡和神经炎症过程，并且可能在不同的神经变性疾病和移植中产生积极作用。

[0198] 钙依赖磷酸酶/NFAT系统和胱冬酶-3凋亡活化系统相互关联。

[0199] 钙依赖磷酸酶功能诱导胱冬酶-3活化和细胞凋亡(Asai等，1999)。

[0200] 由于实施例2的化合物抑制NFAT转录活性和胱冬酶-3酶活性，本发明的化合物通过双重作用降低神经元破坏，而且对NFAT诱导的神经炎症过程也具有积极作用。

[0201] 因此，设想纯R-对映体衍生物比单独使用NAFT系统活性或单独胱冬酶-3酶抑制化合物有更高的效率。

[0202] 本发明和实施例2的纯R-对映体衍生物的第三靶标是在与中枢神经系统相关的炎症和创伤(兴奋性毒性和缺血)过程中(Zhou等，2006)和与衰老有关的神经变性疾病(Uz等，
1998)中有重要作用的酶5-脂加氧酶(5-LOX)。

[0203] 在转基因小鼠中显示5-LOX的抑制降低β-淀粉样蛋白聚集体并改善认知功能(Firuzi等，2008)。

[0204] 5-LOX活性的增加降低了在突触完整性中重要的PSD-95，突触素和MAP2蛋白的水平(Chu等，2013)。

[0205] 从所有这些得出结论，实施例2的具有微摩尔活性的R-对映体衍生物通过抑制其5-LOX酶有效降低神经炎症过程，并且对与β-淀粉样肽和tau蛋白有关的病理变化具有积极影响。

[0206] 由缺氧引起的细胞损伤是包括脑梗塞、脑中风和心肌梗塞的不同疾病的共有特征。

[0207] 细胞对缺氧适应的重要和中心因素是缺氧诱导因子(HIF)，一种激活几种基因，包括在葡萄糖代谢中，抗氧化系统中，血管发生中或血细胞形成中起重要作用的基因的表达的转录因子(综合文章：Chowdhury等，2008)。

[0208] 结果表明，引起HIF水平上升的影响对缺血性疾病和干细胞的繁殖具有有利影响(Zhang等，2006)。

[0209] 使用前面描述的筛选系统，可以鉴定HIF系统活化小分子，包括几种具有分叉结构的8-羟基喹啉型化合物(Smirnova等，2010)。然而，在实施例中列出的分子中没有任何纯对映体，仅已使用外消旋混合物。

[0210] 对象外消旋化合物以2-10μM的IC50值(2-7倍最大值)活化基因表达。

[0211] 根据本发明，已经发现，实施例2的R-对映体衍生物和实施例3的S-对映体衍生物能够增加细胞中磷酸甘油酸激酶1(PGK-1)，血管内皮生长因子(VEGF)，血红素加氧酶1(HMOX-1)和红细胞生成素(EPO)的基因活性，其均由HIF调节。

[0212] 根据本发明，在EPO基因的情况下发现最高的活化，亚微摩尔浓度下有超过20倍的最大活化值。

[0213] PGK1、VEGF、EPO活化已经在对象文献(Smirnova等，2010)中公开，但未显示8-羟基喹啉型化合物的任何活性。

[0214] 此外，最近已经表明，血红素加氧酶1(HMOX-1)，一种由HIF诱导的抗氧化酶在神经元(Chen等，2000)和脑毛细血管内皮细胞(Bresgen等，2003)中有强细胞保护作用。

[0215] 由于氧化应激在几种神经变性和神经炎症过程中起重要作用，所以HMOX-1的药理学诱导被认为是一种合理且理想的治疗方案(Calabrese等，2003；Jazwa和Cuadrado，2010)。

[0216] HMOX-1的诱导也有利影响了心脏移植的结果(Bach 2006)。

[0217] 在我们早期的出版物中，已经表明，外消旋8-羟基喹啉导致心脏细胞中HMOX-1基因活性增加，部分解释了其在细胞系统中的心脏保护性特征及其在大鼠中由缺血/再灌注导致的肌肉损伤情况中的保护性效果(Korkmaz等，2013)。

[0218] 另一方面，目前还没有检验对映体纯形式的在本专利申请的通式描述的化合物组。

[0219] 显示实施例2的R-对映体衍生物和实施例3的S-对映体衍生物引起星形胶质细胞中HMOX-1的诱导，认为我们所描述的纯对映体都可以具对与氧化应激相关的疾病的细胞保护作用。

[0220] 在EPO基因的情况下，表明实施例2的R-对映体衍生物和实施例3的S-对映体衍生物对基因表达的最高诱导效果。

[0221] 此外，通过口服给药，实施例2的R-对映体衍生物导致老年小鼠的大脑皮质和海马区中的EPO基因活性长期增加。

[0222] 最近显示，EPO在脑中在神经保护中具有突出的作用，并在几种精神疾病如抑郁症，精神分裂症，双相障碍，癫痫(Newton等，2013)，神经变性疾病如阿尔茨海默病，帕金森病(Arabpoor等，2012；Xue等，2007)，创伤性脑损伤，脑血管病变(Mammis等，2009)，以神经炎症为特征的疾病，如多发性硬化(Hagemeyer等，2012)中显示其有利特征，并且在与中枢神经系统相关的其他疾病(如肌萎缩性侧索硬化症(ALS))的动物模型和若干临床试验中有积极效果(Noh等，2014；Merelli等，2013；Chong等，2013)。

[0223] 因此，有几种方法检验目标是将EPO直接摄入大脑。

[0224] 静脉注射EPO可引起系统副作用，因此还有通过鼻部摄取EPO的实验(Merelli等，2011)。

[0225] 然而，这些应用具有若干缺点，包括昂贵的生产，涉及的给药，稳定性，剂量和EPO对可能的血细胞形成器官的副作用。

[0226] 因此，根据有利的方案，可以通过小分子在脑中局部诱导EPO合成。

[0227] 通过本专利申请中所述的本发明的对映体衍生物实现了这一目的，具体实施例是关于实施例2的R-对映体衍生物和实施例3的S-衍生物在细胞系统中的EPO诱导效果。

[0228] 关于实施例2和本发明的R-对映体衍生物，显示它可以在活的动物中增加脑中不同区域的EPO基因活性。

[0229] 通过本发明和本专利申请中公开的化合物的这些特征，在不同的精神疾病，与缺血和中枢神经系统有关的疾病，神经变性疾病，和与脑有关的炎症过程的情况中使用它们是显而易见的。

[0230] 2)本发明的方法的历史

[0231] 该方法实际上是根据本发明的已知Betti反应的修饰，其使得可以通过新立体选择性合成制备新对映体衍生物。

[0232] 在本发明的立体选择方法的过程中，已通过在由我们修改和优化的Betti反应的新对映选择形式中使用金鸡纳树皮(cinchona)立体异构体(奎尼丁或奎宁)制备R-或S-对
映体衍生物(Betti，1900；Betti，1903；Phillips等，1954；Phillips等，1956；Phillips，
1956)。

[0233] 我们的方法的优点是通过99％对映体过量的简单重结晶获得了正确的对映体，而不使用任何分离技术(如手性制备型HPLC)，使用低成本金鸡纳树皮有机催化剂：由奎尼丁催化，可得到R-对映体，由奎宁催化，可得到S-对映体。

[0234] 使用在立体选择性Betti反应的背景文献中公开的已知方法主要使用对映体纯的反应物(例如，芳烷基胺)，然后通过分离手性支持物分离合适的对映体(Palmieri，2000)。

[0235] 在曼尼希反应(Verkade等，2008)的情况下，已知使用金鸡纳树皮生物碱或其改性衍生物的有机催化的不对称反应。III.发明内容

[0236] 本发明的实质和优点可概括如下。

[0237] 对映体纯的R-对映体衍生物防止神经元的破坏，星形胶质细胞和小神经胶质细胞诱导的神经炎症过程，并进一步优选减少与破坏神经毒性和突触系统的淀粉样肽和tau蛋白相关的病理反应。

[0238] 因此，本发明的优选实施例2的化合物减少与神经变性过程相关的认知功能的恶化，并且因此它们可以在治疗与中枢神经系统相关的几种变性疾病中有治疗效果。

[0239] 由于本发明的优选实施例2的对映体纯的化合物有效地影响全部三种经鉴定的靶标(胱冬酶-3，NAFT，5-LOX)，它们不仅在神经变性过程中有效，而且在不同的缺血过程如与心脏血管系统相关的缺血和炎症过程中也有效，因此该化合物也可有效治疗与这些过程有关的疾病。

[0240] 本发明的医疗和/或药物组合物的活性成分是一侧不与铁、铜或锌阳离子络合，另一侧与铁、铜或锌阳离子形成络合物的分子。

[0241] 本发明主题的实质和新颖性的基础是作为现有技术的一部分的所有现有技术文献和专利仅公开了外消旋产物及其特征、生物学效应，本发明的纯的对映体及其特征、生物学效应首次在本专利申请中公开。

[0242] 本发明的实质还是也根据本发明主题通过立体选择性合成来制备本发明主题的新对映体，因此新药物组合物可广泛用于预防和/或治疗在本说明书中列出的疾病，其应用也是本发明主题的一部分。

[0243] 本发明的立体选择性方法的实质是使用奎尼丁催化剂形成对映体纯的R-对映体，使用奎宁催化剂形成对映体纯的S-对映体。

[0244] 本发明的医疗和/或药物组合物可用于作为细胞保护、神经保护和心脏保护剂预防和/或治疗本说明书中所列疾病。

[0245] 因此，本发明的主题还涉及用于通过在医学中常用方法，优选通过口服给予本发明的医疗和/或药物组合物来预防和/或治疗本说明书所列疾病的细胞保护、神经保护和心脏保护方法。IV.附图说明

[0246] 图1

[0247] 具有最低能量的本发明的S-对映体化合物的构象异构体(1)的计算构型。

[0248] 图2

[0249] 在CDCl3(氘代氯仿)溶剂中测量的本发明的R-对映体化合物样品的FTIR(傅立叶变换红外光谱)和VCD(振动圆二色性)光谱。

[0250] 图3

[0251] 总体超过1％的本发明的S-对映体化合物的构象异构体的计算的VCD光谱。

[0252] 图4。

[0253] 用总体加权和计算的在CDCl3中测量的本发明的S-和R-对映体化合物及其构象异构体的理论VCD光谱。

[0254] 图5

[0255] 显示了本发明的R-和S-对映体化合物对不同基质金属蛋白酶的抑制作用。

[0256] 图6

[0257] 显示了本发明的R-对映体化合物对心脏细胞上由过氧化氢引起的体外细胞死亡的作用。

[0258] 图7

[0259] 显示了本发明的R-对映体化合物对SH5Y神经细胞上由过氧化氢引起的体外细胞死亡的作用。

[0260] 图8

[0261] 显示了本发明的S-对映体化合物对心脏细胞上由过氧化氢引起的体外细胞死亡的作用。

[0262] 图9

[0263] 显示了本发明的S-对映体化合物对SH5Y神经细胞上由过氧化氢引起的体外细胞死亡的作用。

[0264] 图10

[0265] 显示了本发明的R-对映体化合物的钠盐在初生皮质神经元细胞上对由β-淀粉样肽的原纤聚集体导致的体外细胞死亡的作用。

[0266] 图11

[0267] 显示了本发明的R-对映体化合物的锌络合物在初生皮质神经元细胞上对由β-淀粉样肽的原纤聚集体导致的体外细胞死亡的作用。

[0268] 图12

[0269] 显示了本发明和实施例2和3的R-对映体和S-对映体化合物对由β-淀粉样肽的寡聚物聚集体导致的体内短期记忆障碍的作用。

[0270] 图13

[0271] 显示了不同浓度的本发明和实施例2的R-对映体化合物对由β-淀粉样肽的寡聚物聚集体导致的体内短期记忆障碍的作用。

[0272] 图14

[0273] 显示了本发明和实施例2和3的R-对映体和S-对映体化合物对由东莨菪碱导致的体内短期记忆障碍的作用。

[0274] 图15

[0275] 本发明和实施例2的R-对映体衍生物对NFAT蛋白转录活性的抑制作用的图。

[0276] 图16

[0277] 本发明和实施例2的R-对映体衍生物对初级(primer)星形胶质细胞中基因表达的影响。

[0278] 图17

[0279] 本发明和实施例2的R-对映体衍生物在长期治疗过程中影响老年动物的海马区和大脑皮质中促红细胞生成素基因表达的作用。

[0280] 图18

[0281] 本发明和实施例2的R-对映体衍生物在皮肤移植后长期治疗过程中影响皮肤移植物存活的作用。

[0282] V.说明书中使用的表述、短于的解释

[0283] 表述“对映体纯”：

[0284] 某种对映体形式含有其他对映体形式达到指定的百分比的特定性质：例如，在纯度为100％的情况下，根本没有其他对映体形式，在纯度为98％的情况下，存在2％的其他对映体形式等。

[0285] 表述“低级烷基”：

[0286] 具有1-4个碳原子的直链或支链烷基，例如，甲基，乙基，异丙基等。

[0287] 表述“环烷基”：

[0288] 包含3-8个碳原子的环状基团，如环丙基，环丁基，环己基等。

[0289] 表述“芳基”：

[0290] 单环或双环芳族烃基，如苯基，萘基。

[0291] 表述“芳烷基”：

[0292] 由上述一个或两个芳基取代的上述烷基，如苄基，β-苯基-乙基等。

[0293] 表述“杂芳基”：

[0294] 含有一个或多个氧、氮和/或硫原子的5或6元芳基，如吡啶基，嘧啶基，吡咯基，噁唑基等。

[0295] 表述“卤素原子”：

[0296] 氟，氯，溴或碘原子

[0297] 表述“吸电子取代基”：

[0298] 表示为取代基的吸电子基团的指示物优选是卤素原子，硝基，三氟甲基，甲基亚磺酰基或甲基磺酰基。

[0299] 表述“供电子基团”：

[0300] 表示为取代基的供电子基团的指示物优选是具有1-4个碳原子的低级烷基，例如，甲基。

[0301] 表述“本发明的通式”

[0302] 通式(I)和(II)，优选(I’)和(II’)，特别优选(I”和II”)的通用含义，其中用逗号标记的通式表示优选的适当取代的版本。

[0303] 药学上可接受的盐：

[0304] 上述的本发明的通式所述并具体命名的本发明的8-羟基喹啉衍生物的新对映体可在羟基上与碱形成盐，并且在喹啉环的7位相连的取代基中的氮原子上与酸形成盐。

[0305] 对于形成盐而言，可使用药学上合适的碱，优选碱金属氢氧化物如氢氧化钠，氢氧化钾，或有机酸，优选溴化氢，乙酸，富马酸，马来酸，苹果酸，琥珀酸，酒石酸，苯磺酸，对甲苯磺酸或甲磺酸。

[0306] 药学上可接受的络合物：

[0307] 上述的本发明的通式所述并具体命名的本发明的8-羟基喹啉衍生物的新对映体可以配位结合二价或多价金属(如铁，锌，铜等)并与它们形成络合物。

[0308] 在这种络合物中，羟基的氧原子和喹诺酮的氮原子的自由电子对参与。

[0309] 螯合物形成效应：

[0310] 上述的本发明的通式所述并具体命名的本发明的8-羟基喹啉衍生物的新对映体能够以与形成络合物相同的方式与上述自由电子对形成螯合物。由于这种螯合物形成特
征，可以在不同疾病中抑制由金属离子引起的不利过程，并且还可以有利地影响含金属离子的蛋白质的功能。

[0311] 疾病的组的解释，适应症

[0312] 以下适应症和疾病的组和统称名词的说明有助于解释和理解本申请的说明书和含有适应症的用途权利要求。

[0313] 1)神经精神疾病

[0314] 焦虑症，精神分裂症，抑郁症，双相障碍

[0315] 2)神经疾病：

[0316] 癫痫症，遗忘症，不同记忆障碍，认知功能问题和神经变性疾病，包括记忆障碍，癫痫症，遗忘症，认知功能问题，阿尔茨海默病，亨廷顿氏病，帕金森病，威尔逊病，肌萎缩性侧索硬化(ALS)。

[0317] 3)缺血及其再灌注损伤，主要与但不仅与心血管疾病，血管病变，创伤性损伤和神经变性创伤，与移植有关的疾病有关：

[0318] 脑损伤，包括创伤性脑损伤，以及心脏，肝脏，肾脏或肺的损伤和器官，优选皮肤移植排斥。

[0319] VI.化学实施例

[0320] 本发明的主题得到以下实施例的支持并且保护范围不限于实施例。

[0321] 实施例1

[0322] 确定绝对构型

[0323] 实施例2和实施例3的分子的外消旋混合物包含一个手性中心，但是它们具有显著的构型自由度，因此需要详细分析构型以确定绝对构型。

[0324] 基于VCD光谱确定绝对构型的本质是从头开始(DFT)计算一个或另一个对映体形式的VCD光谱，然后比较其计算的和测量的光谱。由于VCD光谱包括具有交替信号的大量谱带，所以比较通常是非常可靠的。

[0325] 在计算和测量的光谱带的位置和信号模式对应的情况下，绝对构型对应于所选择的对映体形式的构型，如果镜像，构型是相反的。

[0326] 在更多构象异构体的存在下，应将测得的光谱与作为每种对映体化合物的计算光谱的总体加权平均值获得的理论光谱进行比较。

[0327] 通过与分辨率为4cm-1的Bruker Equinox55FTIR光谱仪连接的Bruker PMA-37型VCD模块，在层厚度为0.05mm的BaF2比色皿中，在CDCl3溶剂中，以100mg/ml浓度，使用由液氮N2冷却的MCT检测器记录样品的FTIR和VCD光谱。

[0328] 光谱仪在指纹范围内进行了优化，因此使用1800-800cm-1范围内通透的光学滤波器，并将该装置的光弹性调制器设定在1300cm-1波数上。

[0329] 借助于Cds标准双折射晶体(CdS多波片，MPW)和偏振滤光器作为金属栅格和KRS-5载体分析仪，实现了装置的校准。

[0330] 在样本和参考的情况下，大约42000个干涉图被平均对应于12小时的记录时间，以优化由VCD光谱的低信号强度引起的不良信噪比。

[0331] 为了校正VCD光谱的基线，从原始光谱中提取在相同条件下记录的溶剂光谱。

[0332] 红外光谱可以与VCG光谱一起从样品的一个通道DC光谱与参考(溶剂)的一个通道DC光谱的比率(这是不含任何手性信息的全局红外信号)中获得。

[0333] 使用Gaussian 09 软件包(Frisch等，2010)在Supermicro服务器(2x Intel XeonTM X56803.3GHz 6核处理器，72GB RAM)上进行量子化学计算。

[0334] 在B3LYP/6-31G**DFT理论水平下，在真空条件下对S-对映体形式进行量子化学计算，构象异构体的映射沿着描述的五个扭转角(θ1-θ5)(图1)进行，用部分系统部分启发式搜索描述分子的挠性。

[0335] 具有优化几何形状的结构的IR和VCD光谱的计算也在B3LYP/6-31G**DFT水平上进行。

[0336] 在B3LYP/6-31G**理论水平的情况下，计算出的频率(波数)值通过可用的0,97比例因子进行校正。

[0337] 为了产生理论光谱，假设为Lorentz图的信号形状，在6cm-1的半高处测量半宽度。

[0338] 为了可视化的振动光谱，已使用GaussView 5.0程序包。

[0339] 为了估计在温度T＝298K时形成的总体，假定了玻尔兹曼分布。根据玻尔兹曼分布，与具有最低自由焓(i＝0)的构象异构体相比，第i个构象异构体的相对总体为：

[0340]

[0341] 第i个构象异构体的摩尔分数(对整个构象异构体混合物测量的总体)为：

[0342]

[0343] 在这种情况下，计算的IR或VCD光谱是每个构象异构体的光谱的加权和：

[0344]

[0345] 可以看出在实施32个计算的构象异构体结果的总体分析之后个体构象异构体之间的能量差异非常小，因此不能确定主要构象异构体。

[0346] 在这当中，11个具有高于1％的总体。总结出这11个构象异构体，它们占99.6％，因此忽略了具有较高能量的构象异构体的光谱贡献。

[0347] 表1中总结了高于1％的总体(population)的11个构象异构体的几何数据、相对自由焓和群。

[0348] 表1.

[0349] 基于B3LYP/6-31G**水平真空状态下进行的量子化学计算，在298K温度下表征S-对映体的扭转角数据，相对自由焓和估计的总体。

[0350]

[0351]

[0352] a仅在CF3基团的间隔处不同

[0353] 所有这些构象异构体的特征在于在羟基的氢原子与喹诺酮环的氮之间具有H键。在这里未提及的一些构象异构体中，这是缺失的，与氨基嘧啶部分的N-原子H键合的构象异构体在能量上也不太有利。具有最低能量的构象异构体的空间结构如方案1所示。

[0354] 红外和VCD光谱，绝对配置的确定

[0355] 根据实施例2的化合物的FTIR和VCD光谱在图2中显示在1700-1000cm-1的光谱范围内。

[0356] 这大致对应于由VCD光谱仪的光学特性和0,05mm比色皿中使用的溶剂(CDCl3)的透射率限制的光谱区域。

[0357] 可以说，VCD光谱中的频带比FTIR频谱中的频带多，指的是在几种情况下，在红外光谱中存在带重叠，因此VCD光谱的相应频带可以仅被识别为“肩”或根本无法识别。

[0358] VCD和红外光谱中的极值(最大值或最小值)原则上应在相同波长处出现；小差异也可以通过带重叠来解释。通常可以显示，芳族和杂芳族环的振动与附着于它们的官能团强耦合，因此对于它们的分配由于其非局部化而相当困难。

[0359] 红外光谱在1326cm-1处的最密集的频带来源于CF3基团对称变形振动与苯环骨架振动的耦合，但相应的VCD带强度非常低。

[0360] VCD中最引人注意的部分之一是1502cm-1和1512cm-1处的负-正带对，其在IR光谱中不分离，但它们在1507cm-1处合并成更宽的频带。根据计算，1512cm-1处的正带具有特殊的鉴别价值，因为它来源于与手性中心相连的C-H键的变形和2-氨基嘧啶基的C-N-H部分的平面内变形振动的耦合。1507-cm-1的负带来源于喹啉环的骨架振动和其OH取代基的平面内OH变形振动，在一定程度上与手性中心的C-H键的变形耦合。1583cm-1处的密集带来源于嘧啶环的骨架振动与其连接的仲氨基的平面内N-H变形振动的耦合。

[0361] S-对映体的相关构象异构体的计算的VCD光谱如图3所示。从谱中可以看出，VCD带的图案强烈依赖于构象异构体，导致高平均化并且由于振动的耦合，不可能从非手性芳族和杂环部分的构象条件中提取出。在上述1500cm-1区域的频带具有高诊断价值的情况下，幸运的是，至少较高总体的构象异构体几乎没有变化。对构象异构体(32个)的所有计算光谱的分析得出，仅在N-H键和手性中心键具有相同方向的构象异构体的情况下，具有诊断价值的这些条带的符号才相反。这些构象异构体是能量上可忽略的，非常不利的形式，总体远低于0.1％。显然，对于绝对构型的确定，需要实验光谱和总体加权的计算光谱(图4)，但是根据图3，还显示了大多数频带的符号(也包括1500cm-1的区域处的频带)与实验VCD光谱的符号相反。

[0362] 考虑到对映体的VCD光谱被镜像，基于测量的光谱以及总体加权的理论计算的光谱的VCD波段的波数和sing-图案(图4)，已经得出结论，实施例的化合物2是R-对映体(方案
2)。测量的VCD光谱与其理论光谱有很好的一致性，并且与分子建模过程中使用的S-构型的分子相比，它具有基本相反的光谱。

[0363] 实施例2

[0364] 对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0365] 在惰性气氛下，将180ml乙腈，16.22g(50mmol，0.5当量)奎尼丁，3.87g(84mmol，0.84当量)甲酸，10.91g(100mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，17.41g(100mmol，1.0当量)4-三氟甲基苯甲醛，和最后17.42g(120mmol，1.2当量)8-羟基喹啉加入到500ml圆底烧瓶中。在乙腈回流温度下搅拌该混合物16小时。

[0366] 将乙腈溶液减压浓缩至其三分之一体积，残留物溶解在100ml二氯甲烷中。将溶液用100ml 1M NaOH溶液洗涤两次，再用50ml 1M NaOH溶液萃取六次。向有机相中加入100ml甲苯，然后蒸发去除二氯甲烷。向100ml的3M HCl中添加获得的溶液。分离相并用30ml 3M HCl溶液萃取甲苯相。向合并的HCl相添加甲基-叔丁基醚，然后用40％NaOH溶液将双相系统的pH调节到4。

[0367] 滤去沉淀的奎尼丁，分离双相滤液，然后用20ml甲基-叔丁基醚洗涤水相2次，合并的醚相在硫酸钠上干燥并过滤。向滤液中加入30ml乙腈，蒸发去除甲基-叔丁基醚，并且乙腈残留物在室温下搅拌16小时。过滤析出的结晶，得到7.61g(18.5mmol，HPLC：95％)外消旋晶体产物。

[0368] 将母液减压浓缩，得到14.3g粗对映体纯的R-异构体(HPLC：80％)。然后将粗R-对映体溶于40ml异丙醇中，室温搅拌48小时，然后滤出沉淀的晶体，得到5.67g(13.8mmol，HPLC：98.9％，ee：99％)的纯晶体R-对映体。

[0369] 1H-NMR(ppm)：10.1，1H，s；8.85，1H，dd；8.30，1H，dd；8.15，1H，d；8.07，1H，d；7.75，1H，d；7.65，2H，d；7.60，2H，d；7.53，1H，dd；7.41，1H，d；7.09，1H，d；6.51，1H，d；2.25，3H，s[0370] 实施例3

[0371] 对映体纯的7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0372] 在惰性气氛下，将300ml乙腈，18g(55mmol，0.5当量)奎宁，3.05g(66mmol，0.80当量)甲酸，22.00g(200mmol，2.5当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，51.00g(290mmol，3.7当量)4-三氟甲基苯甲醛，和最后11.5g(79mmol，1.0当量)8-羟基喹啉加入到1l四颈圆底烧瓶中。

[0373] 在73℃下搅拌该混合物6天。

[0374] 减压蒸发溶剂。将残余物(93.4g)溶于200ml二氯甲烷中，在100g硅胶上进行色谱分离。

[0375] 收集含分级分离部分的产物并且蒸发去除溶剂(60.4g)。通过使用己烷-乙酸乙酯梯度的正相快速色谱纯化获得的粗产物，然后收集并浓缩含有产物的分级分离部分(19.81g)。

[0376] 残留物溶解在190ml的2-丙醇中。在2小时的搅拌之后，过滤去除沉淀的外消旋晶体。将母液真空浓缩，得到13.44g纯产物(HPLC：96.2％，ee：+99％)。

[0377] 1H-NMR(ppm)：10.1，1H，s；8.85，1H，dd；8.30，1H，dd；8.15，1H，d；8.07，1H，d；7.75，1H，d；7.65，2H，d；7.60，2H，d；7.53，1H，dd；7.41，1H，d；7.09，1H，d；6.51，1H，d；2.25，3H，s.[0378] 实施例4

[0379] 对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钾的制备

[0380] 将10g(24.4mmol)实施例2的中性化合物溶于60ml乙醇中，然后逐滴加入乙醇(60ml)中的2.73g(24.4mmol)叔丁醇钾溶液。搅拌1小时后，加入360ml甲基环己烷，并减压蒸去醇。搅拌16小时后，过滤析出的结晶，得到6.09g纯产物(13.6mmol，HPLC：98.1％，ee：+
99％)。

[0381] 1H-NMR(ppm)：9.97，1H，s；8.43，1H，dd；8.07，1H，d；7.87，1H，dd；7.76，2H，d；7.51，2H，d；7.24，1H，d；7.14，1H，dd；6.39，1H，d；6.38，1H，d；6.15，1H，d；3.38，1H，s；2.21，3H，s.[0382] 13C-NMR(ppm)：161.5，160.3，150.0，145.3，139.8，138.0，129.6，128.5，127.3，
124.6，122.7，121.0，109.8，107.6，67.0，56.6，25.1，23.7

[0383] 实施例5

[0384] 对映体纯的7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钾的制备

[0385] 将6.12g(13.9mmol)实施例3的中性化合物溶于17ml乙醇中，然后逐滴加入乙醇(9ml)中的1.56g(13.9mmol)叔丁醇钾溶液。搅拌1小时后，加入55ml甲基环己烷，然后减压蒸除醇，搅拌16小时后，过滤析出的结晶，得到5.08g纯产物(13.6mmol，HPLC：98.1％，ee：+
99％)。

[0386] 1H-NMR(ppm)：9.97，1H，s；8.43，1H，dd；8.07，1H，d；7.87，1H，dd；7.76，2H，d；7.51，2H，d；7.24，1H，d；7.14，1H，dd；6.39，1H，d；6.38，1H，d；6.15，1H，d；3.38，1H，s；2.21，3H，s.[0387] 13C-NMR(ppm)：161.5，160.3，150.0，145.3，139.8，138.0，129.6，128.5，127.3，
124.6，122.7，121.0，109.8，107.6，67.0，56.6，25.1，23.7

[0388] 实施例6

[0389] 对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钠的制备

[0390] 将0.50g(1.22mmol)的实施例2的中性化合物溶于5ml乙醇中，然后将该溶液逐滴加入到1ml(1.22mmol)乙醇钠的乙醇溶液(28mg Na+1ml乙醇)中。搅拌1小时后，加入360ml甲基环己烷，然后减压蒸除醇，搅拌16小时后，过滤析出的结晶，得到408mg(0.94mmol)纯产物。

[0391] 实施例7

[0392] 对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯的制备

[0393] 将22.6g(55.0mmol)实施例2的中性化合物溶于30ml乙醇中，然后逐滴加入乙醇(90ml)中的3.2g(27.5mmol)富马酸溶液。搅拌16小时后，过滤析出的结晶，得到16.8g纯产物(35.9mmol，HPLC：98.1％，ee：99.4％)。

[0394] 1H-NMR(ppm)：8.86，1H，d；8.30，1H，dd；8.15，1H，d；8.06，1H，d；7.74，1H，d；7.65，2H，d；7.59，2H，d；7.55，1H，dd；7.41，1H，d；7.07，1H，d；6.63，1H，s；6.51，1H，d；2.25，3H，s.[0395] 13C-NMR(ppm)：167.4，165.9，161.5，149.5，148.3，148.1，138.0，136.0，133.9，
127.6，127.3，127.1，126.7，125.1，124.5，121.8，117.5，110.3，51.6

[0396] 实施例8

[0397] 对映体纯的7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇富马酸酯的制备

[0398] 将9.21g(22.4mmol)实施例3的中性化合物溶于15ml乙醇中，然后逐滴加入乙醇(40ml)中的1.30g(11.2mmol)富马酸溶液。搅拌16小时后，过滤析出的结晶，得到8.34g纯产物(17.8mmol，HPLC：98.5％，ee：99％)。

[0399] 1H-NMR(ppm)：8.86，1H，d；8.30，1H，dd；8.15，1H，d；8.07，1H，d；7.74，1H，d；7.65，2H，d；7.59，2H，d；7.55，1H，dd；7.41，1H，d；7.07，1H，d；6.63，1H，s；6.51，1H，d；2.25，3H，s.[0400] 13C-NMR(ppm)：167.4，165.9，161.5，149.5，148.3，148.1，138.0，136.0，133.9，
127.6，127.3，127.1，126.7，125.1，124.5，121.8，117.5，110.3，51.6

[0401] 实施例9

[0402] 对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇锌络合物的制备

[0403] 将1.098g(5.0mmol)乙酸锌二水合物溶解在150ml四氢呋喃中，然后逐滴加入四氢呋喃(150ml)中4.104g(10mmol)的实施例2的中性化合物的溶液。向获得的混合物中逐滴加入300ml己烷。

[0404] 搅拌16小时后，过滤析出的结晶，得到2.73g(3.09mmol)纯产物。

[0405] 1H-NMR(ppm)：8.80，1H，d；8.75，1H，s；8.32，1H，d；8.16，1H，d；7.75，2H，d；7.58，2H，d；7.50，2H，d；6.85，1H，d；6.58，1H，d；6.48，1H，d；3.60，1H，t；2.28，3H，s；1.75，1H，s.[0406] 13C-NMR(ppm)：161.5，160.3，150.0，145.3，139.8，138.0，129.6，128.5，127.3，
124.6，122.7，121.0，109.8，107.6，67.0，56.6，25.1，23.7.

[0407] 实施例10

[0408] 对映体纯的7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]4-硝基苯基)甲基]-喹啉-8-醇的制备

[0409] 在惰性气氛下，向18ml乙腈中添加1.622g(5.0mmol，0.5当量)奎尼丁，0.387g(8.4mmol，0.84当量)甲酸，1.091g(10mmol，1.0当量)2-氨基-6-甲基吡啶，4.379g(29mmol，
3.7当量)4-硝基苯甲醛，和最后1.742g(12mmol，1.2当量)8-羟基喹啉。

[0410] 将混合物在室温下搅拌4天。反应混合物如上所述进行处理，得到纯R-对映体的产物(HPLC：98.9％，ee：99％)。

[0411] C22H18N4O3(MS：386.1)；HPLC(Chiralpak ADn-己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝10.30分钟.1H NMR(DMSO-d6)δ2.2(3H，s，CH3)，6.37(1H，d，J＝7.0Hz)，6.49(1H，d，J＝
7.9Hz)，6.98(1H，d，J＝8.8Hz，NHCH)，7.28(1H，t，J＝7.9Hz)，7.40(2H，t，J＝7.9és
8.8Hz)，7.50-7.55(1H，m)，7.59-7.66(3H，m)，8.16(2H，d，J＝8.8Hz)，8.28(1H，d，J＝
13
7.9Hz)，10.1(1H，宽s，OH)；C NMR(DMSO-d6)δ24.2(CH3)，51.5(CH)，105.6(CH)，111.6(CH)，117.7(CH)，121.9(CH)，123.5(2×CH)，124.5(Cq)，126.7(CH)，127.7(Cq)，128.2(2×CH)，136.1(CH)，137.3(CH)，138.2(Cq)，146.2(Cq)，148.4(CH)，149.8(Cq)，152.0，155.7和
157.3(Cq)

[0412] 实施例11

[0413] 对映体纯的7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]4-硝基苯基)甲基]-喹啉-8-醇的制备

[0414] 在惰性气氛下，向30ml乙腈中加入1.8g(5.5mmol，0.7当量)奎宁，0.305g(6.6mmol，0.8当量)甲酸，2.20g(20mmol，2.0当量)2-氨基-6-甲基吡啶，4.38g(29mmol，3.7当量)4-硝基苯甲醛，和最后1.15g(7.9mmol，1.0当量)8-羟基喹啉。

[0415] 将混合物在室温下搅拌6天。反应混合物如上所述进行处理，得到纯S-对映体的产物(HPLC：98.9％，ee：99％)。

[0416] C22H18N4O3(MS：386.1)；HPLC(Chiralpak ADn-己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝10.30分钟.1H NMR(DMSO-d6)δ2.2(3H，s，CH3)，6.37(1H，d，J＝7.0Hz)，6.49(1H，d，J＝
7.9Hz)，6.98(1H，d，J＝8.8Hz，NHCH)，7.28(1H，t，J＝7.9Hz)，7.40(2H，t，J＝7.9és
8.8Hz)，7.50-7.55(1H，m)，7.59-7.66(3H，m)，8.16(2H，d，J＝8.8Hz)，8.28(1H，d，J＝
7.9Hz)，10.1(1H，宽s，OH)；13C NMR(DMSO-d6)δ24.2(CH3)，51.5(CH)，105.6(CH)，111.6(CH)，117.7(CH)，121.9(CH)，123.5(2×CH)，124.5(Cq)，126.7(CH)，127.7(Cq)，128.2(2×CH)，136.1(CH)，137.3(CH)，138.2(Cq)，146.2(Cq)，148.4(CH)，149.8(Cq)，152.0，155.7和
157.3(Cq)

[0417] 实施例12

[0418] 对映体纯的7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-羟基苯基)-甲基]喹啉-8-醇的制备

[0419] 在惰性气氛下，添加18ml乙腈，1.622g(50mmol，0.5当量)奎尼丁，0.387g(8.4mmol，0.84当量)甲酸，1.091g(10mmol，1.0当量)2-氨基-6-甲基吡啶，3.538g(29mmol，
3.7当量)3-羟基苯甲醛，和最后1.742g(12mmol，1.2当量)8-羟基喹啉。

[0420] 将混合物在溶剂的回流温度下搅拌16小时。反应混合物如上所述进行处理，得到纯R-对映体的产物(HPLC：98.9％，ee：99％)。

[0421] C22H18N4O3(MS：357)；HPLC(Chiralpak AD正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝8.90分钟.

[0422] 实施例13

[0423] 对映体纯的7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-羟基苯基)-甲基]喹啉-8-醇的制备

[0424] 在惰性气氛下，向30ml乙腈中加入1.8g(5.5mmol，0.7当量)奎宁，0.305g(6.6mmol，0.8当量)甲酸，2.2g(20mmol，2.0当量)2-氨基-6-甲基-吡啶，3.538g(29mmol，
3.7当量)3-羟基苯甲醛，和最后1.15g(7.9mmol，1.0当量)8-羟基喹啉。

[0425] 将混合物在溶剂的回流温度下搅拌6天。反应混合物如上所述进行处理，得到纯S-对映体的产物(HPLC：98.9％，ee：99％)。

[0426] C22H18N4O3(MS：357)；HPLC(Chiralpak AD正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝17.18分钟.

[0427] 实施例14

[0428] 对映体纯的7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-甲氧基苯基)-甲基]喹啉-8-醇的制备

[0429] 在惰性气氛下，向18ml乙腈中加入1.622g(50mmol，0.5当量)奎尼丁，0.387g(8.4mmol，0.84当量)甲酸，1.091g(10mmol，1.0当量)2-氨基-6-甲基-吡啶，1.52g(10mmol，
1.0当量)4-羟基-3-甲氧基-苯甲醛，和最后1.742g(12mmol，1.2当量)8-羟基喹啉。

[0430] 将混合物在溶剂的回流温度下搅拌16小时。反应混合物如上所述进行处理，得到纯R-对映体的产物(HPLC：95％，ee：99％)。

[0431] C22H18N4O3(MS＝387)；HPLC(Chiralpak AD正己烷/IPA/TEA＝90/10/0,1)：Tr＝8.61分钟.

[0432] 实施例15

[0433] 对映体纯的7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]3-甲氧基苯基)-甲基]喹啉-8-醇的制备

[0434] 在惰性气氛下，向30ml乙腈中加入1.8g(5.5mmol，0.7当量)奎宁，0.305g(6.6mmol，0.8当量)甲酸，2.2g(20mmol，2.0当量)2-氨基-6-甲基-吡啶，4.408g(29mmol，
3.7当量)4-羟基-3-甲氧基-苯甲醛，和最后1.15g(7.9mmol，1.0当量)8-羟基喹啉。

[0435] 将混合物在溶剂的回流温度下搅拌6天。反应混合物如上所述进行处理，得到纯S-对映体的产物(HPLC：95％，ee：99％)。

[0436] C22H18N4O3(MS＝387)；HPLC(Chiralpak AD正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝11.14分钟.

[0437] 实施例16

[0438] 对映体纯的7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](5-溴吡啶-2-基)甲基]喹啉-8-醇的制备

[0439] 根据一般R方法，使用8-羟基喹啉，5-溴吡啶-2-甲醛，2-氨基-6-甲基吡啶和奎尼丁得到纯R-对映体(HPLC：+99％，ee：+99％)。

[0440] C21H17BrN4O(MS＝421)；HPLC(Lux 5u纤维素-4，100*4.6正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝5.20分钟.

[0441] 实施例17

[0442] 对映体纯的7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基](5-溴吡啶-2-基)甲基]喹啉-8-醇的制备

[0443] 根据一般S方法，使用8-羟基喹啉，5-溴吡啶-2-甲醛，2-氨基-6-甲基吡啶和奎宁得到纯R-对映体(HPLC：+99％，ee：+99％)。

[0444] C21H17BrN4O(MS＝421)；HPLC(Lux 5u纤维素-4，100*4.6正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝6.56分钟.

[0445] 实施例18

[0446] 对映体纯的7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]2-羟基苯基)-甲基]喹啉-8-醇的制备

[0447] 根据一般R方法，使用8-羟基喹啉，2-羟基苯甲醛，2-氨基-6-甲基吡啶和奎尼丁得到纯R-对映体(HPLC：+99％，ee：+99％)。

[0448] C22H19N3O2(MS＝357)；HPLC(Lux 5u纤维素-4，100*4.6正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝2.39分钟.

[0449] 实施例19

[0450] 对映体纯的7-[(S)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基]2-羟基苯基)-甲基]喹啉-8-醇的制备

[0451] 根据一般S方法，使用8-羟基喹啉，2-羟基苯甲醛，2-氨基-6-甲基吡啶和奎宁得到纯S-对映体(HPLC：+99％，ee：+99％)。

[0452] C22H19N3O2(MS＝357)；HPLC(Lux 5u纤维素-4，100*4.6正己烷/IPA/TEA＝90/10/0.1)：Tr＝7.04分钟.

[0453] 实施例20

[0454] 对映体纯的5-氯-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0455] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎尼丁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基-嘧啶，然后580mg(3.33mmol，
1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后716mg(4mmol，1.2当量)5-氯-8-羟基喹啉加入圆底烧瓶中。

[0456] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0457] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0458] C22H16ClF3N4O；质量(ESI正模式)：445(444+H+).HPLC(Lux4；己烷：异丙醇95∶5)Tr＝22,8分钟.

[0459] 1H NMR(500MHz，D6MSO)δ10,43(宽s，1H)，8.95-8.91(m，1H)，8.47-8.42(m，1H)，8.20(d，J＝9.6Hz，1H)，8.15(d，J＝4.9Hz，1H)，7.71-7.66(m，1H)，7.65(d，J＝8.2Hz，2H)，
7.58(d，J＝8.1Hz，2H)，7,09(1H，d，J＝9,5Hz)，6,51(1H，d，J＝4,95Hz)，2,24(3H，s)；13C-NMR(125MHz，D6MSO)：25,5，110,5，118,8，123,0，125,0，125,3，125,4，126,6，127,8，132,5，
138,7，147,5，149,2，149,4，161,5.

[0460] 实施例21

[0461] 对映体纯的5-氯-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0462] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎宁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后716mg(4mmol，1.2当量)5-氯-8-羟基喹啉加入圆底烧瓶中。

[0463] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0464] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0465] C22H16ClF3N4O；质量(ESI正模式)：445(444+H+).HPLC(Lux4；己烷：异丙醇95∶5)Tr＝22,8分钟.

[0466] 1H NMR(500MHz，D6MSO)δ10,43(宽s，1H)，8.95-8.91(m，1H)，8.47-8.42(m，1H)，8.20(d，J＝9.6Hz，1H)，8.15(d，J＝4.9Hz，1H)，7.71-7.66(m，1H)，7.65(d，J＝8.2Hz，2H)，
7.58(d，J＝8.1Hz，2H)，7,09(1H，d，J＝9,5Hz)，6,51(1H，d，J＝4,95Hz)，2,24(3H，s)；13C-NMR(125MHz，D6MSO)：25,5，110,5，118,8，123,0，125,0，125,3，125,4，126,6，127,8，132,5，
138,7，147,5，149,2，149,4，161,5.

[0467] 实施例22

[0468] 对映体纯的5-氯-7-[(R)-[(6-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0469] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎尼丁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-6-甲基吡啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后716mg(4mmol，1.2当量)5-氯-8-羟基喹啉加入圆底烧瓶中。

[0470] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0471] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0472] C23H17ClF3N3O；质量(ESI正模式)：444(443+H+).

[0473] 实施例23

[0474] 对映体纯的2-甲基-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0475] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎尼丁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后636mg(4mmol，1.2当量)8-羟基喹啉加入圆底烧瓶中。

[0476] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0477] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0478] C23H19F3N4O，质量(ESI正模式)：425(424+H+)

[0479] 实施例24

[0480] 对映体纯的2-甲基-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0481] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎宁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后636mg(4mmol，1.2当量)8-羟基喹啉加入圆底烧瓶中。

[0482] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0483] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0484] C23H19F3N4O，质量(ESI正模式)：425(424+H+)

[0485] 实施例25

[0486] 对映体纯的2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0487] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎尼丁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后808mg(4mmol，1.2当量)2-((二甲基氨基)甲基)喹啉-8-醇加入圆底烧瓶中。

[0488] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0489] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0490] C25H24F3N5O；质量(ESI正模式)：468(467+H+)

[0491] 实施例26

[0492] 对映体纯的2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0493] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎宁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基嘧啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后808mg(4mmol，1.2当量)2-[(二甲基氨基)甲基]喹啉-8-醇加入圆底烧瓶中。

[0494] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0495] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0496] C25H24F3N5O；质量(ESI正模式)：468(467+H+)

[0497] 实施例27

[0498] 对映体纯的2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(R)-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0499] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎尼丁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基吡啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后808mg(4mmol，1.2当量)2-[(二甲基氨基)甲基]喹啉-8-醇加入圆底烧瓶中。

[0500] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0501] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0502] C26H25F3N4O；质量(ESI正模式)：467(466+H+)

[0503] 实施例28

[0504] 对映体纯的2-[(二甲基氨基)甲基]-7-[(S)-[(4-甲基吡啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0505] 在惰性气氛下，将3ml乙腈，540mg(1.67mmol，0.5当量)奎宁，129mg(2.8mmol，0.84当量)甲酸，364mg(3.33mmol，1.0当量)2-氨基-4-甲基吡啶，然后580mg(3.33mmol，1.0当量)4-(三氟甲基)苯甲醛，和最后808mg(4mmol，1.2当量)2-[(二甲基氨基)甲基]喹啉-8-醇加入圆底烧瓶中。

[0506] 将混合物在75℃下搅拌6天。

[0507] 反应混合物按照常规处理得到纯产物。

[0508] C26H25F3N4O；质量(ESI正模式)：467(466+H+)

[0509] 实施例29

[0510] 对映体纯的5-硝基-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0511] 根据一般R方法，使用5-硝基-8-羟基喹啉，4-(三氟甲基)苯甲醛，2-氨基-4-甲基嘧啶和奎尼丁得到纯R-对映体(HPLC：+99％，ee：+99％)。

[0512] C22H16F3N5O3；质量(ESI正模式)：456(455+H+)

[0513] 实施例30

[0514] 对映体纯的5-硝基-7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0515] 根据一般S方法，使用5-硝基-8-羟基喹啉，4-(三氟甲基)苯甲醛，2-氨基-4-甲基嘧啶和奎宁得到纯S-对映体(HPLC：+99％，ee：+99％)。

[0516] C22H16F3N5O3；质量(ESI正模式)：456(455+H+)

[0517] 实施例31

[0518] 对映体纯的7-[(R)-[(吡啶-2-基)[4-(三氟甲基)苯基氨基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0519] 根据一般R方法，使用8-羟基喹啉，4-(三氟甲基)苯胺，2-吡啶-甲醛和奎尼丁得到纯R-对映体。

[0520] C22H16F3N3O；质量(ESI正模式)：396(395+H+)

[0521] 实施例32

[0522] 对映体纯的7-[(S)-[(吡啶-2-基)[4-(三氟甲基)苯基氨基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0523] 根据一般S方法，使用8-羟基喹啉，4-(三氟甲基)苯胺，2-吡啶-甲醛和奎宁得到纯S-对映体。

[0524] C22H16F3N3O；质量(ESI正模式)：396(395+H+)

[0525] 实施例33

[0526] 对映体纯的2-(羟基甲基)-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0527] 根据一般R方法，使用2-羟甲基-8-羟基喹啉，4-(三氟甲基)苯甲醛，2-氨基-4-甲基嘧啶和奎尼丁得到纯R-对映体。

[0528] C23H19F3N4O2；质量(ESI正模式)441(440+H+)

[0529] 实施例34

[0530] 对映体纯的2-(羟基甲基)-7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇的制备

[0531] 根据一般S方法，使用2-羟甲基-8-羟基喹啉，4-(三氟甲基)苯甲醛，2-氨基-4-甲基嘧啶和奎宁得到纯S-对映体。

[0532] C23H19F3N4O2；质量(ESI正模式)441(440+H+)

[0533] VII.生物学实施例：体外过程

[0534] 实施例35

[0535] 用实施例2和3的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇和7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-
醇抑制基质金属蛋白酶2(MMP-2，72kDa明胶酶)，基质金属蛋白酶8(MMP-8)，基质金属蛋白酶10(MMP-10)，基质金属蛋白酶12(MMP-12)，基质金属蛋白酶13(MMP-13)，和基质金属蛋白酶14(MMP-14)活性。

[0536] 在一组荧光光度法生物化学测量中研究了不同的基质金属蛋白酶活性。重组基质金属蛋白酶在37℃下用不同浓度(25μM-195nM)的实施例2和3的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇和7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇预孵育。

[0537] 所施加的底物的切割产生荧光活性分子，其在通过使用355nm消光和460nm发射滤光器用Wallac Victor微量滴定板读数器开始反应1小时后测量。将酶活性与未用抑制剂处理的对照进行比较，并以百分比给出。图5显示6种研究的MMP酶的活性，其依赖于实施例2和3的化合物的浓度。根据图中所示的IC50值(半最大抑制浓度)，R-和S-对映体以类似的程度抑制研究的酶的活性。

[0538] Example 36

[0539] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇处理体外抑制心肌细胞的H2O2-诱导的细胞死亡。

[0540] 在含有10％牛血清，4mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)，匈牙利)，100U/ml青霉素，和100μg/ml 链霉素的达氏修正伊氏培养基中培养来自胚胎大鼠心脏的细胞系H9c2(ATCC，洛克维尔，10MD，美国)。将细胞在设置在37℃和5％CO2的潮湿空气的培养箱中在100mm TC处理的培养皿(比利时的橙科学公司(Orange Scientific))中培养。为了实时监测细胞活力，使用了Roche xCELLigence SP和DP(ACEA-Roche，匈牙利)，根据细胞电导率的变化，向我们提供了有关细胞活力的信息。在铺板之前，将特殊的96孔e-板用0.2％I型胶原覆盖，然后放入培养箱中30分钟。无细胞基线阻抗在一分钟内测量一次持续10分钟。铺板(6000个细胞/孔)后，测量开始。细胞的处理总是在铺板后的早晨进行。测量进行72小时。

[0541] 结果示于图6。曲线1表示未处理对照，曲线2表示用H2O2处理的对照，曲线3、4、5、6表示不同浓度(3：0.11μM实施例2的化合物+900μM H2O2，4：0.33μM实施例2的化合物+900μM H2O2，5：1μM实施例2的化合物+900μM H2O2，6：3μM实施例2化合物+900μM H2O2)的实施例2的化合物(7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇)。B：与对照细胞相比，治疗后6和24小时的活力百分比。

[0542] 实施例37

[0543] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇处理体外抑制SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞的H2O2-诱导的细胞死亡。

[0544] 将SH-SY5Y细胞(ATCC，洛克维尔，10MD，美国)在设置在37℃和5％CO2的潮湿空气的培养箱中在100mm TC处理的培养皿(比利时的橙科学公司(Orange Scientific))中培养。为了实时监测细胞活力，使用了Roche xCELLigence SP和DP(ACEA-Roche，匈牙利)，根据细胞电导率的变化，向我们提供了有关细胞活力的信息。为了进行铺板，使用补充有10％FBS的DMEM(达氏修正伊氏培养基)。在铺板之前，将特殊的96孔e-板用0.2％I型胶原覆盖，然后放入培养箱中30分钟。无细胞基线阻抗在一分钟内测量一次持续10分钟。铺板(20.000个细胞/孔)后，测量开始。细胞的处理总是在铺板后的早晨进行。测量进行72小时。

[0545] 结果示于图7，曲线1表示未处理对照，曲线2表示用H2O2处理的对照，曲线3、4、5、6表示不同浓度(3：0.11μM实施例2的化合物500μM H2O2，4：0.33μM实施例2的化合物500μM H2O2，5：1μM实施例2的化合物500μM H2O2，6：3μM实施例2化合物500μM H2O2)的实施例2的化合物(7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇)。B：与对照细胞相比，治疗后6和24小时的活力百分比。

[0546] 实施例38

[0547] 用实施例3的化合物7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇处理体外抑制心肌细胞的H2O2-诱导的细胞死亡。

[0548] 在含有10％牛血清，4mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)，匈牙利)，100U/ml青霉素，和100μg/ml链霉素的达氏修正伊氏培养基中培养来自胚胎大鼠心脏的细胞系H9c2(ATCC，洛克维尔，10MD，美国)。将细胞在设置在37℃和5％CO2的潮湿空气的培养箱中在100mm TC处理的培养皿(比利时的橙科学公司(Orange Scientific))中培养。为了实时监测细胞活力，使用了Roche xCELLigence SP和DP(ACEA-Roche，匈牙利)，根据细胞电导率的变化，向我们提供了有关细胞活力的信息。在铺板之前，将特殊的96孔e-板用0.2％I型胶原覆盖，然后放入培养箱中30分钟。无细胞基线阻抗在一分钟内测量一次持续10分钟。铺板(6000个细胞/孔)后，测量开始。细胞的处理总是在铺板后的早晨进行。测量进行72小时。

[0549] 结果示于图8。曲线1表示未处理对照，曲线2表示用H2O2处理的对照，曲线3、4、5、6表示不同浓度(3：0.11μM实施例3的化合物+900μM H2O2，4：0.33μM实施例3的化合物+900μM H2O2，5：1μM实施例3的化合物+900μM H2O2，6：3μM实施例3化合物+900μM H2O2)的实施例3的化合物(7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇)。B：与对照细胞相比，治疗后6和24小时的活力百分比。

[0550] 实施例39

[0551] 用实施例3的化合物7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇处理体外抑制SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞的H2O2-诱导的细胞死亡。

[0552] 将SH-SY5Y细胞(ATCC，洛克维尔，10MD，美国)在设置在37℃和5％CO2的潮湿空气的培养箱中在100mm TC处理的培养皿(比利时的橙科学公司(Orange Scientific))中培养。为了实时监测细胞活力，使用了Roche xCELLigence SP和DP(ACEA-Roche，匈牙利)，根据细胞电导率的变化，向我们提供了有关细胞活力的信息。为了进行铺板，使用补充有10％FBS的DMEM(达氏修正伊氏培养基)。在铺板之前，将特殊的96孔e-板用0.2％I型胶原覆盖，然后放入培养箱中30分钟。无细胞基线阻抗在一分钟内测量一次持续10分钟。铺板(20.000个细胞/孔)后，测量开始。细胞的处理总是在铺板后的早晨进行。测量进行72小时。

[0553] 结果示于图9，曲线1表示未处理对照，曲线2表示用H2O2处理的对照，曲线3、4、5、6表示不同浓度(3：0.11μM实施例3的化合物500μM H2O2，4：0.33μM实施例3的化合物500μM H2O2，5：1μM实施例3的化合物500μM H2O2，6：3μM实施例3化合物500μM H2O2)的实施例3的化合物(7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇)。B：与对照细胞相比，治疗后6和24小时的活力百分比。

[0554] 实施例40

[0555] 用实施例4的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇钾处理用于体外抑制原代皮质神经元中由淀粉样肽的原纤聚集体导致的细
胞死亡。

[0556] 如前所述维持来自Wistar大鼠胚胎的胚胎期第16-17日的皮质神经元[1]。使用的肽：Aβ1-42(巴亨公司(Bachem)，参考H1368，批号1025459)。寡聚体制备：根据SynAging标准操作程序进行Aβ寡聚体的制备。寡聚制剂含有Aβ1-42肽的稳定的二聚体、三聚体和四聚体的混合物，以及肽的单体形式。所有实验装置都使用相同的寡聚体制备方法，并且以先前寡聚体组成，体外神经毒性以及认知障碍诱导为特征。

[0557] 在存在或不存在1μM的Aβ1-42寡聚体的情况下，将原代皮层神经元与增加浓度的实施例2的化合物一起孵育。在孵育24小时后，使用如先前描述的钙黄绿素-AM测定监测神经元活力[1，2]。图10所示的数据从3-4个独立实验(平均值±SEM)获得。使用斯氏t检验(**，p＜0.05，***，p＜0.001)以及ANOVA，随后Scheffe事后检验来检验统计学显著性。

[0558] 实施例41

[0559] 用实施例9的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇锌络合物处理用于体外抑制原代皮质神经元中由淀粉样肽的原纤聚集体导
致的细胞死亡

[0560] 如前所述维持来自Wistar大鼠胚胎的胚胎期第16-17日的皮质神经元[1]。使用的肽：Aβ31-42(巴亨公司(Bachem)，参考H1368，批号1025459)。寡聚体制备：根据SynAging标准操作程序进行Aβ寡聚体的制备。寡聚制剂含有Aβ1-42肽的稳定的二聚体、三聚体和四聚体的混合物，以及肽的单体形式。所有实验装置都使用相同的寡聚体制备方法，并且以先前寡聚体组成，体外神经毒性以及认知障碍诱导为特征。

[0561] 在存在或不存在1μM的Aβ1-42寡聚体的情况下，将原代皮层神经元与增加浓度的实施例2的化合物一起孵育。在孵育24小时后，使用如先前描述的钙黄绿素-AM测定监测神经元活力[1，2]。图11所示的数据从3-4个独立实验(平均值±SEM)获得。使用斯氏t检验(**，p＜0.05，***，p＜0.001)以及ANOVA，随后Scheffe事后检验来检验统计学显著性。

[0562] VIII.生物学实施例：体内过程

[0563] 根据经法国技术研究部批准的国家卫生研究所的实验动物护理和使用指南进行体内实验。在实验过程中，将动物在标准温度(22±1℃)下和光控制的环境(上午7时至下午
8时开灯)中饲养，自由获取食物和水。将雄性C57BL/6小鼠(C57BL/6JRj，参考SC-CJ-12w-M，Janvier，法国)每笼饲养5只动物。从实验开始前一周到实验结束，小鼠单独饲养。动物由实验室人员每天进行监测两次(上午8时和下午4时)。在这个项目中，使用年轻(14周龄)和老年(15-16个月龄)的小鼠。每个实验组使用12只小鼠进行实验。

[0564] 短期工作记忆研究-T迷宫测试

[0565] 如前所述进行Y迷宫测试[1，3]。在测试之前，小鼠被带到实验室持续至少30分钟适应实验室条件。Y迷宫由不透明的树脂玻璃制成，每只臂长40厘米，高16厘米，宽9厘米，角度相等。将装置放置在试验室中，使其在臂和中央区域中以12-15lux均匀地增亮。一次将一只小鼠放在一个臂的末端，并在5分钟检查期间允许在迷宫中自由移动。记录每个臂进入(arm entry)，计入小鼠将其后爪完全放置在所选择的臂中的那些进入情况。变化定义为在重叠三重组上连续进入3个臂。结果被计算为实际检测到的变化与可能的变化的比率的百分比(定义为总臂进入数量减去2)。

[0566] 实施例42.

[0567] 用实施例2和3的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇和7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-
醇对C57BL6/J小鼠体内由淀粉样肽的原纤聚集体导致的短期记忆受损的治疗效果

[0568] 为了检查由Aβ寡聚体引起的记忆障碍，使用了由SynAging开发和验证的小鼠模型[1-3]。接受icv注射的Aβ寡聚体的小鼠产生与海马区突触蛋白水平降低相关的记忆缺陷。在麻醉下，将1μl可溶性Aβ低聚物(50pmol)或载体(盐水)注入右心室。来自前囟点的立体定位坐标如下(mm)：AP-0.22，L-1.0和D-2.5。对于治疗，使用配有26号针的10ml Hamilton微量注射器。使用实施例2和3中所述的分子每天一次进行持续4天，使用口服探针(100μl/动物)。建立了四个实验组：A组-载剂/Aβ寡聚体，B组-实施例2的化合物(4mg/kg体重)和Aβ寡聚体，C组-实施例3的化合物(4mg/kg体重)和Aβ寡聚体，D组-来自实施例2和3的化合物
(4mg/kg体重)和Aβ寡聚体。在Aβ治疗后的第4天，用Y迷宫试验评估短期记忆。

[0569] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇治疗抑制而用实施例3的化合物7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇不抑制对C57BL6/J小鼠体内由淀粉样肽的原纤聚集体导致的
短期记忆受损。

[0570] 实施例43

[0571] 用不同浓度(相对于体重)的实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇对C57BL6/J小鼠体内由淀粉样肽的原纤聚集体导致
的短期记忆受损的治疗效果

[0572] 按照先前实施例16所述进行用Aβ寡聚体的治疗。使用实施例2的检验的化合物每天治疗一次、持续4天，使用口服探针(100μl/动物)。建立了四个实验组：A组-载剂/Aβ寡聚体，B组-实施例2的化合物(0.5mg/kg体重)和Aβ寡聚体，C组-实施例2的化合物(2mg/kg体重)和Aβ寡聚体，D组-实施例2的化合物(4mg/kg体重)和Aβ寡聚体。

[0573] 在Aβ治疗后的第4天，用Y迷宫试验评估短期记忆。结果小结于图13。

[0574] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇治疗以剂量依赖的方式抑制C57BL6/J小鼠体内由淀粉样肽的原纤聚集体导
致的短期记忆受损。

[0575] 实施例44

[0576] 用实施例2和3的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇和7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-
醇对C57BL6/J小鼠体内由东莨菪碱诱导的短期记忆受损的效果

[0577] 东莨菪碱已广泛用于诱导动物中的认知缺陷(通常为短期记忆障碍)[FR4]。试验方案：行为试验前30分钟，在对照和治疗的小鼠(每个实验组12只小鼠)中腹膜内给予东莨菪碱(0.6mg/kg)或载剂。将小鼠返回笼中直到试验开始。实施例2和3中描述的药物候选物的给药用口服喂食(基于PK数据的给药时间)进行。如前所述进行Y迷宫测试。结果小结于图
14。

[0578] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇治疗抑制而用实施例3的化合物7-[(S)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇不抑制对C57BL6/J小鼠体内由东莨菪碱诱导的短期记忆受损。

[0579] 实施例45

[0580] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇抑制胱冬酶-3肽酶的活性

[0581] 在整个实验中，如前所述(Mittl PRE，Marco SD，Krebs JF，Karanewsky DS，Priestle JP，Tomaselli KJ和Grutter MG(1997)与四肽Acetyl-Asp-Val-Ala-Asp氟甲基酮络合的重组人CPP32的结构(Structure of Recombinant Human CPP32 in Complex
with The Tetrapeptide Acetyl-Asp-Val-Ala-Asp Fluoro甲基Ketone).J Biol
Chem.272：6539-6547)在大肠杆菌中产生人胱冬酶-3酶。简言之：在37℃下将酶(150U/ml)与实施例2的化合物(10μM)在改良的HEPES缓冲液(50mM HEPES，pH＝7.4，100mM NaCl，
0.1％CHAPS，1mM EDTA，10％甘油，10mM DTT)中一起预孵育15分钟。加入50mM Ac-DEVD-AMC底物后，反应进行60分钟。通过在360/465nm处的荧光检测产生的AMC(7-氨基-4-甲基香豆素)的量，其给出关于酶活性的信息。在10mM的施用浓度下，实施例2的化合物将胱冬酶3的活性降低了74％。

[0582] 实施例46

[0583] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇对NF-AT(活化的T细胞的核因子)蛋白质的转录抑制

[0584] 基于前述方法(Emmel EA，Verweij CL，Durand DB，Higgins KM，Lacy E和Crabtree GR(1989)环孢菌素A特异性抑制参与T细胞活化的核蛋白质的功能(Cyclosporin A specific inhibits function of the nuclear proteins involved in T cell
activation).Science.246：1617-1620；Karttunen J和Shastri N(1991)使用lacZ报告基因测量单个活T细胞中配体诱导的活化(Measurement of ligand-induced activation in single living T cells using the lacZ reporter gene).Proc Natl Acad Sci
USA.88：3972)，在用表达β-半乳糖苷酶并含有NFATl转录因子的结合位点的报告物构建体转染的人T Jurkat细胞上进行实验。将细胞(3×106个细胞/ml)与RPMI-1640培养基(pH＝
7.4)中的10μM实施例2的化合物在37℃下孵育20分钟。此后，在0.5μM A23187和50ng/ml PMA(12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯)的存在下，再孵育4小时。诱导效应可以通过用实施例2的化合物处理的细胞和未处理的细胞的β-半乳糖苷酶活性来确定，因为它催化FDG(荧光素二-β-D-吡喃半乳糖苷)转化成荧光素。用SpectraFluor Plus酶标仪读取结果。将β-半乳糖苷酶活性的降低与作为阳性对照的1μM环孢菌素A的效果进行比较。实施例2的化合物通过2.2μM半值浓度降低NF-AT蛋白质的转录活性。结果小结于图15。

[0585] 实施例47

[0586] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇抑制5-脂氧合酶活性

[0587] 在整个实验中使用由Sf9细胞产生的人5-脂氧合酶。该酶与10μM实施例2的化合物在室温下预孵育，然后-在加入25μM花生四烯酸底物后，通过荧光测量测定产生的若丹明123的量。通过与未处理的对照反应比较来计算抑制率百分比。在10μM浓度下，实施例2的化合物抑制54％的5-脂氧合酶活性。

[0588] 实施例48

[0589] 实施例2的R-对映体衍生物对原代星形胶质细胞的基因表达影响效果

[0590] 根据文献(《神经细胞培养方案》(Protocols for Neural Cell Culture)2001，第117-127页，第9章.Ruth Cole，Jean de Vellis.从原代大鼠脑培养物制备星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞培养物(Preparation of Astrocyte，Oligodendrocyte，and Microglia Cultures from Primary Rat Cerebral Cultures))中发现的方案从新生大鼠中获得纯星形胶质细胞培养物。将星形胶质细胞(一百万)在设置在37℃和5％CO2的潮湿空气的培养箱中在100mm TC处理的培养皿(比利时的橙科学公司(Orange Scientific))中培养。将实施例2的R-对映体衍生物以以下两种终浓度加入细胞中：330nM和1000nM。细胞还用
1000nM PBT2处理，其具有实施例2的R-对映体的基本结构(8-羟基-喹啉环)，但含有构象差异并被开发用于治疗神经变性疾病(公开号WO/2004/007461)。用100μM DMSO-基母液进行处理。用相同量的DMSO且不用试剂处理对照细胞。每个处理在三个分开的培养皿中进行。处理后，将细胞在37℃下孵育3小时，然后去除培养基，用PBS洗涤细胞，并根据生产商的方案，用AccuzolTM总RNA提取溶液(柏业公司(Bioneer)，韩国大田)从细胞中提取总RNA。使用高容量cDNA逆转录试剂盒(生命技术公司(Life Technologies)，美国加利福尼亚州福斯特城)进行cDNA转录。在测试期间，通过qRT-PCR测定了HIF1a控制的四种基因(PGK1，EPO，HMOX-1，VEGF)的表达，HPRT基因作为对照。将处理的样品中的基因的相对表达与未处理的对照进行比较。在20ul PCR反应体积中UPL(通用探针库)探针(HPRT：95，HMOX1：4，EPO：16，VEGF：1，PGK1：66)，特异性引物(HPRT1：5′-gaccggttctgtcatgtcg-3′，HPRT2：5′-
acctggttcatcatactactacatcac-3′；HMOX1-1：5′-gtcaagcacagggtgacaga-3′，HMOX1-2：5′-ctgcagctcctcaaacagc-3′；EPO1：5′-agtcgcgttctggagaggta-3′，EPO2：5′-
ccttctgcacagcccatt-3′；VEGF1：5′-aaaaacgaaagcgcaagaaa-3′，VEGF2：5′-
tttctccgctctgaacaagg-3′；PGK1-1：5′-ccagataacgaataaccaaagga-3′，PGK1-2：5′-gacttggctccattgtcca-3′)，以及20ng cDNA模板和10μl Lightcycler DNA探针混合物(5x)试剂盒(罗氏)存在下，用 Nano Instrument(罗氏，匈牙利布达佩斯)根据以
下方案进行PCR：在95℃下活化酶10分钟，50个循环：在95℃下变性15秒，杂交和聚合，然后在60℃下检测30秒。结果示于图16。虽然实施例2的化合物引起EPO和HMOX-1基因的剂量依赖性且强烈的活化，但甚至1000nM的PBT2也没有诱导基因活性的差异。

[0591] 实施例49

[0592] 用实施例2的R-对映体衍生物的长期治疗对老年动物的海马区和皮质中红细胞生成素基因表达的影响

[0593] 将24只18月龄的C57BL/6雌性小鼠(Innovo公司，匈牙利布达佩斯)随机分为两组：第1组-未处理对照，第2组-用实施例2的R-对映体处理，在饮用水(20mg/l)中给予，持续四个月。从两组中，通过吸入二氧化碳处死10-10只小鼠。回缩反射停止后，根据所述方案(啮齿类的全动物灌注固定(Whole Animal Perfusion Fixation for Rodents)；Gregory
J.Gage，Daryl R.Kipke，William Shain；J.Vis.Exp.(65)，e3564，doi：10.3791/3564(2012))，整个动物经历采用1×磷酸盐缓冲液的灌注。灌注后，从动物中除去脑组织，并分离海马区和皮质区。每只动物加工一半脑。一半样品用于基因表达研究，另一半用于蛋白质表达(实施例35)研究。

[0594] 为了研究基因表达，根据生产商的方案，使用AccuzolTM总RNA提取溶液(柏业公司，韩国大田)从脑组织中提取总RNA。使用高容量cDNA逆转录试剂盒(生命技术公司(Life Technologies)，美国加利福尼亚州福斯特城)进行cDNA转录。使用实施例33中所述的方法和设备，通过qRT-PCR(使用HPRT基因作为对照)测定编码红细胞生成素基因，EPO基因的表达，但是在这里，应用小鼠特异性UPL探针(HPRT：95，EPO：16)和引物对(小鼠HPRT1：5′-tcctcctcagaccgctttt-3′，小鼠HPRT2：5′-cctggttcatcatcgctaatc-3′；小鼠EPO1：5′-tctgcgacagtcgagttctg-3′，小鼠EPO2：5′-cttctgcacaacccatcgt-3′)。一个海马区对照，一个皮质对照和一个处理的皮层样品没有给出明显的结果。结果示于图17。与未处理的对照小鼠的样品相比，实施例2的R-对映体衍生物的长期处理诱导海马区和皮质EPO表达。

[0595] 实施例50

[0596] 用实施例2的R-对映体衍生物的长期治疗对老年动物的海马区和皮质中红细胞生成素蛋白质表达的影响

[0597] 根据实施例34中所述的实验设置，将24只18月龄的雌性C57BL/6小鼠(Innovo公司，匈牙利布达佩斯)服分为两组：第1组-给予正常饮用水的对照组，第2组-用饮用水
(20mg/l)给予的实施例2的R-对映体处理4个月。脑制备在实施例34所述的条件下进行。脑样品用1×PBS洗涤以除血，然后将组织在1×PBS中匀浆3天，每天将它们在-20℃保持过夜，在白天保持25℃。第三轮冻融后，将样品离心(5分钟，5000rpm)，并收集上清液用于进一步的蛋白质表达研究。根据生产商的方案，使用 ELISA小鼠红细胞生成素(R&D系
统公司，目录号：MEP00B)测定样品的红细胞生成素水平。在测试结束时，使用THERMO-
LABSYSTEMS Multiskan FC吸光度酶标仪在450nm处测量显影的颜色。将通过ELISA获得的结果和在450nm处测量的结果与纯化的小鼠EPO的标准稀释系列进行比较。将基于稀释系列获得的值(pg/ml)与组织的实际蛋白质含量进行比较。在280nm处用BSA蛋白调整的
Nanodrop-1000测量组织匀浆的蛋白质含量。两个海马区和两个皮质对照以及一个经处理的海马区和皮层样品没有给出明显的结果。结果示于图18。与未处理的对照小鼠的样品相比，实施例2的R-对映体衍生物的长期处理在海马区和皮质样品中诱导了增加的EPO蛋白质水平。

[0598] 实施例51

[0599] 用实施例2的化合物7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇抑制皮肤移植物排斥

[0600] 小鼠皮肤移植是测定宿主T细胞对MHC不同供体抗原的相应的标准方法，本实施例中遵循了该方案(Garrod和Cahalan；2008)。简言之，用通过腹膜内注射给予的10mg/kg甲苯噻嗪和100mg/kg氯胺酮的组合麻醉了WT C57BL/6受体小鼠(8-12周龄)和WT BALB/c供体小鼠(8-12周龄)并通过皮下注射给予0.05mg/kg丁丙诺啡来镇痛。将来自WT BALB/c供体小鼠的耳皮(1.0cm2)移植到WT C57BL/6受体的肋部上。用无菌绷带覆盖植入的皮肤(移植物)，其在移植后第7天被去除。

[0601] 接受体不接受处理(对照)，或用实施例2的化合物以5mg/kg剂量口服处理，每天一次，从移植当天直至实验结束。作为阳性对照，我们通过腹膜内给药以5mg/kg的剂量给予他克莫司，每天一次，从移植当天直至实验结束。

[0602] 使用不同的分数来定义移植物质量：完整的移植物(评分0)，排斥的早期阶段(评分1-4，对应于移植物排斥反应的第一个明确信号：1；＞25％排斥率：2；＞50％排斥率：3；＞75％排斥率：4)直至完全移植物排斥(评分5)。不同的分数描述被宿主免疫系统破坏的区域的排斥。评分在移植后第9天和第10天进行。每组包含6只动物。计算各组平均分数和SEM。

[0603] 从结果(图18)可以看出，阳性对照，他克莫司化合物以及实施例2的化合物在第9天和第10天都得到较小的分数，从中我们可以得出结论：两种化合物都能防止皮肤移植物排斥。

[0604] IX.制剂实施例

[0605] 实施例52

[0606] 将20mg活性成分，对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇与微晶纤维素，甘露糖醇，胶体无水二氧化硅和硬脂酸镁混合，并在压力下用通常用于于制片的技术配制混合物。

[0607] 实施例53

[0608] 将20mg活性成分，对映体纯的7-[(R)-[(4-甲基嘧啶-2-基)氨基][4-(三氟甲基)苯基]甲基]喹啉-8-醇与微晶纤维素，甘露糖醇，胶体无水二氧化硅和硬脂酸镁混合，并将均质混合物以固体粉末装入明胶胶囊中。

[0609] 参考文献：

[0610] Abdul等，2009：Abdul HM，Sama MA，Furman JL，Mathis DM，Beckett TL，Weidner AM，Patel ES，Baig I，Murphy MP，LeVine H 3rd，Kraner SD，Norris CM.阿尔茨海默病中的认知衰退与神经钙蛋白/NFAT信号传导中的选择性变化相关(Cognitive decline in Alzheimer′s disease is associated with selective changes in calcineurin/NFAT signaling).J Neurosci.2009，29：12957-12969.；

[0611] Araboor等，2012：Arabpoor Z，Hamidi G，Rashidi B，Shabrang M，Alaei H，Sharifi MR，Salami M，Dolatabadi HR，Reisi P.在阿尔茨海默病的动物模型中红细胞生成素改善海马区形成齿状回中的神经元增殖(Erythropoietin improves neuronal proliferation in dentate gyrus of hippocampal formation in an animal model of Alzheimer′s disease).Adv Biomed Res.2012，1：50.；

[0612] Asai等，1999：Asai A，Qiu Jh，Narita Y，Chi S，Saito N，Shinoura N，Hamada H，Kuchino Y，Kirino T.高水平神经钙蛋白活性有利于神经元细胞凋亡(High level calcineurin activity predisposes neuronal cells to apoptosis).J Biol
Chem.1999，274：34450-34458.；

[0613] Bartus，2000：Bartus，R.T.神经变性疾病，模型和治疗策略：胆碱能假设后生成的所学教训和遗忘的教训(On neurodegenerative diseases，models，and treatment strategies：lessons learned and lessons forgotten a generation following the cholinergic hypothesis).Exp.Neurol.2000，163：495e529.

[0614] Bach，2006：Bach FH.血红素加氧酶-1和移植耐受(Heme Oxygenase-1 and Transplantation Tolerance)Human Immunology 2006，67：430-432.；

[0615] Betti，1900：Betti，M.Gazz.Chim.Ital.1900，30II，301；

[0616] Betti，1903：Betti，M.Gazz.Chim.Ital.1903，33II，2；

[0617] Bresgen等，2003：Bresgen N，Karlhuber G，KrizbaiI，Bauer H等，培养的脑内皮细胞中的氧化应激诱导染色体异常、微核、和凋亡(Oxidative stress in cultured cerebral endothelial cells induces chromosomal aberrations.micronuclei，and
apoptosis)，J.Neurosci.Res.200372：327-333.；

[0618] Britton等，2002：Britton RS，Leicester KL，Bacon BR.铁毒性和螯合治疗(Iron toxicity and chelation therapy).Int J Hematol.2002，76：219-228；

[0619] Calabrese等，2010：Calabrese V，Butterfield DA，Stella AM，营养抗氧化剂和应激耐受的血红素加氧酶途径：阿尔茨海默病中神经保护的新靶标(Nutritional antioxidants and the heme oxygenase pathway of stress tolerance：novel targets for neuroprotection in Alzheimer’s disease)，Ital.J.Biochem.2003，52：177-181.；
靶向血红素加氧酶-1用于神经变性疾病中的神经保护和神经炎症(Targeting heme
oxygenase-1for neuroprotection and neuroinflammation in neurodegenerative
diseases).Jazwa A，Cuadrado A.Curr Drug Targets.2010，11：1517-1531.；

[0620] Chen等，2003：Chen K，Gunter K，Maines MD.过表达血红素加氧酶-1的神经元抵抗氧化应激介导的细胞死亡(Neurons overexpressing heme oxygenase-1resist oxidative stress-mediated cell death)，J.Neurochem.2000，75：304-313.)

[0621] Chong等，2013：Chong ZZ，Shang YC，Mu Y，Cui S，Yao Q，Maiese K.靶向红细胞生成素针对慢性神经变性疾病(Targeting erythropoietin for chronic neurodegenerative diseases).Expert Opin Ther Targets.2013，17：707-720.；

[0622] Chowdhury等，2008：人氧传感机制及其运行(The human oxygen sensing machinery and its manipulation).Chowdhury R，Hardy A，Schofield CJ.Chem Soc
Rev.2008，37：1308-1319.；

[0623] Chu等，2013：Chu J，Li JG，Ceballos-Diaz C，Golde T，PraticòD.5-脂氧合酶对阿尔茨海默病相关的tau病变的影响：体内和体外证据(The influence of 5-lipoxygenase on Alzheimer′s disease-related tau pathology：in vivo and in
vitro evidence).Biol Psychiatry.2013，74：321-328.；

[0624] Cole和de Vellis，2001：Ruth Cole，Jean de Vellis.从原代大鼠脑培养物制备星形胶质细胞、少突胶质细胞和小胶质细胞培养物(Preparation of Astrocyte，Oligodendrocyte，and Microglia Cultures from Primary Rat Cerebral Cultures)，Protocols for Neural Cell Culture 2001，9.fejezet，第117-127页.；

[0625] De Calignon等，2010：de Calignon A，Fox LM，Pitstick R，Carlson GA，Bacskai BJ，Spires-Jones TL，Hyman BT.胱冬酶活化推动并导致缠结(Caspase activation precedes and leads to tangles).Nature.2010，464：1201-1204；

[0626] Degterev和Yuan，2008：Degterev A，Yuan J.细胞死亡程序的扩展和进化(Expansion and evolution of cell death programmes).Nat Rev Mol Cell
Biol.2008，9：378-390；

[0627] Eckert等，2003：Eckert A，Marques CA，Keil U，Schüssel K，Müller WE.在偶发和遗传性阿尔茨海默病中增加的凋亡性细胞死亡(Increased apoptotic cell death in sporadic and genetic Alzheimer′s disease).Ann N Y Acad Sci.2003，1010：604-609.；

[0628] Emmel等，1991：Emmel EA，Verweij CL，Durand DB，Higgins KM，Lacy E和Crabtree GR(1989)环孢菌素A特异性抑制参与T细胞活化的核蛋白质的功能(Cyclosporin A specifically inhibits function of the nuclear proteins involved in T cell
activation).Science.246：1617-1620.；

[0629] Firuzi等，2008：Firuzi O，Zhuo J，Chinnici CM，Wisniewski T，PraticòD.5-脂氧合酶基因破坏在阿尔茨海默病的小鼠模型中减少了淀粉样-β病变(5-Lipoxygenase gene disruption reduces amyloid-beta pathology in a mouse model ofAlzheimer′s disease).FASEB J.2008，22：1169-1178.；

[0630] Frederickson等，2005：Frederickson CJ，Koh JY，Bush AI.健康和疾病中锌的神经学(The neurobiology of zinc in health and disease).Nat Rev Neurosci.2005，6：449-462.；

[0631] Gage等，1999：Gage GJ，Kipke DR，Shain W.来自啮齿类的全动物灌注固定(Whole Animal Perfusion Fixation for Rodents)J.Vis.Exp.2012，(65：e3564；

[0632] Frisch MJ等，2010：Frisch MJ，Trucks GW，Schlegel HB，Scuseria GE等，Gaussian 09rev.B01，Gaussian，Inc.，Wallingford CT，2010.

[0633] Hagemeyer等，2012：Hagemeyer N，Boretius S，Ott C，Von Streitberg A，Welpinghus H，Sperling S，Frahm J，Simons M，Ghezzi P，Ehrenreich H.红细胞生成素减弱小鼠中中毒性脱髓鞘的神经和组织学结果(Erythropoietin attenuates neurological and histological consequences of toxic demyelination in mice).Mol Med.2012，
18：628-635.；

[0634] Hengartner，2000：Hengartner MO.凋亡生物化学(The biochemistry of apoptosis).Nature 2000，407：770-776.；

[0635] Hudri等，2012：Hudry E，Wu HY，Arbel-Ornath M，Hashimoto T，Matsouaka R，Fan Z，Spires-Jones TL，Betensky RA，Bacskai BJ，Hyman BT.抑制NFAT途径减轻了阿尔茨海默病小鼠模型中的淀粉样β神经毒性(Inhibition of the NFAT pathway alleviates amyloid β neurotoxicity in a mouse model ofAlzheimer′s disease).J
Neurosci.2012，32：3176-3192.).

[0636] Idris等，2008：Idriss NK，Blann AD，Lip GY.心血管疾病中的血红素加氧酶-1(Hemoxygenase-1 in cardiovascular disease).J Am Coll Cardiol.2008，52：971-978.[0637] Janciauskiene等，1999：Janciauskiene S，Wright HT，Lindgren S.原纤阿尔茨海默病淀粉样肽Aβ(1-42)刺激PC12细胞中的低密度脂蛋白结合和细胞结合，组有机产生和细胞毒性(Fibrillar Alzheimer′s amyloid peptide Abeta(1-42)stimulates low density lipoprotein binding and cell association，free radical production and cell cytotoxicity in PC12cells).Neuropeptides.1999.33：510-516.

[0638] Jazwa和Cuadrado，2010：Jazwa A，Cuadrado A.靶向血红素加氧酶-1用于神经变性疾病中的神经保护和神经炎症(Targeting heme oxygenase-1 for neuroprotection and neuroinflammation in neurodegenerative diseases).Curr Drug Targets.2010，
11：1517-1531.

[0639] Karttunen等，1991：Karttunen J和Shastri N.使用lacZ报告基因测量单个可见T细胞中配体诱导的活化(Measurement of ligand-induced activation in single viable T cells using the lacZ reporter gene).Proc Natl Acad Sci USA.1991，88：
3972.；

[0640] Koh等，1996：Koh JY，Suh SW，Gwag BJ，He YY，Hsu CY，Choi DW.锌在瞬时全脑血清后选择性神经元死亡中的作用(The role of zinc in selective neuronal death after transient global cerebral ischemia).Science.1996，272：1013-1016；

[0641] Korkmaz等，2013：Korkmaz S，Barnucz E，Loganathan S，Li S，Radovits T，Hegedus P，Zubarevich A，Hirschberg K，Weymann A，Puskás LG，Ozsvári B，FaragóN，Kanizsai I，Fábián G，Gyuris M，Merkely B，Karck M，SzabóC，SzabóG.Q50，一种铁螯合和锌络合剂，改善了缺血/再灌输诱导的心肌损伤的大鼠模型中的心脏功能(Q50，an iron-chelating and zinc-complexing agent，improves cardiac function in rat models of ischemia/reperfusion-induced myocardial injury).Circ J.2013；77：1817-1826.；

[0642] Lewen等，2000：Lewén A，Matz P，Chan PH.CNS损伤中的自由基途径(Free radical pathways in CNS injury).J Neurotrauma.2000，17：871-890；

[0643] Li等，2007：Li C，Hossieny P，Wu BJ，Qawasmeh A，Beck K，Stocker R.血红素加氧酶-1的药物诱导(Pharmacologic induction ofheme oxygenase-1).Antioxid Redox Signal.2007，9：2227-2239；

[0644] Liu等，2005：Liu F，Grundke-Iqbal I，Iqbal K，Oda Y，Tomizawa K，Gong CX.阿尔茨海默病脑部中通过钙蛋白酶I的神经钙蛋白的截短和活化(Truncation and activation of calcineurin A by calpain I in Alzheimer disease brain).J Biol
Chem.2005，280：37755-37762.；

[0645] Lue等，1999：Lue LF1，Kuo YM，Roher AE，Brachova L，Shen Y，Sue L，Beach T，Kurth JH，Rydel RE，Rogers J.可溶性淀粉样β肽浓度作为阿尔茨海默病中突触变化的预测物(Soluble amyloid beta peptide concentration as a predictor of synaptic change in Alzheimer’s disease)，AmJ Pathol 1999，155：853-862.；

[0646] Lynch等，2002：Lynch AM，Lynch MA.大鼠海马区中IL-1 I型受体的年龄相关的增加与胱冬酶-3活化耦合(The age-related increase in IL-1 type I receptor in rat hippocampus is coupled with an increase in caspase-3activation).Eur J Neurosci 2002，15：1779-1788.；

[0647] Machova等，2008：Machova，E.，Jakubik，J.，Michal，P.，Oksman，M.，Iivonen，H.，Tanila，H.，Dolezal，V.转基因APPswe/PS1dE9小鼠中毒蕈碱型透过的损伤(Impairment of muscarinic transmission in transgenic APPswe/PS1dE9 mice).Neurobiol.Aging 2008，29：368e378.；

[0648] Mammis等，2009：Mammis A，McIntosh TK，Maniker AH.红细胞生成素用作外伤性脑损伤中的神经保护剂(Erythropoietin as a neuroprotective agent in traumatic brain injury).Surg Neurol.2009，71：527-531.；

[0649] Mattson，2006：Mattson MP.神经元生命-死亡信号传导、凋亡和神经变性疾病(Neuronal life-and-death signaling，apoptosis，and neurodegenerative
disorders).Antioxid Redox Signal.2006，8：1997-2006.；

[0650] McLean等，1999：C.McLean，R.Cherny，F.Fraser，S.Fuller，M.Smith，K.Beyreuther，A.Bush和C.Masters，Aβ的可溶性集作为阿尔茨海默病中神经变性严重性的决定物(Soluble pool of Aβ amyloid as a determinant of severity of
neurodegeneration in Alzheimer’s Disease)，Ann Neurol 1999，46：860-866；

[0651] Merelli等，2011：Merelli A，Caltana L，Lazarowski A，Brusco A.通过鼻内给予红细胞生成素作为脑缺血中的神经保护剂的潜在用途的实验证据(Experimental evidence of the potential use of erythropoietin by intranasal administration as a neuroprotective agent in cerebral hypoxia).Drug Metabol Drug
Interact.2011，26：65-69.；

[0652] Merelli等，2013：Merelli A，Czornyj L，Lazarowski A.红细胞生成素：脑缺氧、神经变性和癫痫中的神经保护剂(Erythropoietin：a neuroprotective agentin cerebral hypoxia，neurodegeneration，and epilepsy).Curr Pharm Des.2013，19：6791-
801.；

[0653] Mittl等，1997：Mittl PRE，Marco SD，Krebs JF，Karanewsky DS，Priestle JP，Tomaselli KJ和Grutter MG与四肽乙酰基-Asp-Val-Ala-Asp氟甲基酮络合的重组人CPP32的结构(Structure of Recombinant Human CPP32 in Complex with the Tetrapeptide Acetyl-Asp-Val-Ala-Asp Fluoro甲基Ketone).J Biol Chem.1997，272：6539-6547.；

[0654] Newton等，2013：Newton SS，Fournier NM，Duman RS.神经精神病学中的血管生长因子(Vascular growth factors in neuropsychiatry).Cell Mol Life Sci.2013，70：1739-1752.；

[0655] Nguyen等，2005：Nguyen T，Hamby A，Massa SM.氯碘喹啉下调体外突变体亨廷顿蛋白表达并缓和亨廷顿氏病小鼠模型中的病变(Clioquinol down-regulates mutant huntingtin expression in vitro and mitigates pathology in a Huntington′s
disease mouse model).Proc Natl Acad Sci U S A.2005，102：11840-11845.；

[0656] Noh等，2014：Noh MY，Cho KA，Kim H，Kim SM，Kim SH.红细胞生成素调节肌萎缩侧索硬化(ALS)的SOD1(G93A)转基因小鼠模型的免疫-炎性响应(Erythropoietin modulates the immune-inflammatory response of a SOD1(G93A)transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis(ALS)).Neurosci Lett.2014，574：53-58.；

[0657] Orrenius，2007：Orrenius S.线粒体介导的细胞死亡中的活性氧物质(Reactive oxygen species in mitochondria-mediated cell death).Drug Metab Rev.2007，39：443-455.；

[0658] Palmieri，2000：Palmieri，G.具体邻-羟基苄胺促进向醛对映体选择性添加二烷基锌和不对称扩增(A Practical o-Hydroxybenzylamines Promoted Enantioselective Addition of Dialkylzincs to Aldehydes with Asymmetric Amplification)Tetrahedron Asymmetry 2000，11：3361；

[0659] Phillips等，1954：J.P.Phillips，R.W.Keown，Q.Fernando；缩苯氨与8-喹啉醇的反应(The reaction of anils with 8-quinolinol.)，J.Org.Chem.1954，19：907；

[0660] Phillips和Barrall，1956：J.P.Phillips，E.M.Barrall.注：一些酚类的Betti反应(Notes-Betti Reactions of Some Phenols).J.Org.Chem.1956，21：692；

[0661] Phillips，1956：J.P.Phillips，8-喹啉醇的反应(The Reactions Of 8-quinolinol)，Chem.Rev.1956，56：286；

[0662] Regland等，2001：Regland B，Lehmann W，Abedini I，Blennow K，Jonsson M，Karlsson I， M，Wallin A，Xilinas M，Gottfries CG.用氯碘喹啉治疗阿尔茨海默病(Treatment of Alzheimer′s disease with clioquinol).Dement Geriatr Cogn
Disord.2001，12：408-414；

[0663] Sama等，2008：Sama MA，Mathis DM，Furman JL，Abdul HM，Artiushin IA，Kraner SD，Norris CM.星形胶质细胞和神经元之间的白介素-1β-依赖性信号传导严格依赖于星形胶质细胞神经钙蛋白/NFAT活性(Interleukin-1beta-dependent signaling between astrocytes and neurons depends critically on astrocytic calcineurin/NFAT
activity).J Biol Chem.2008，283：21953-21964.；

[0664] 等，2007： S，Pajonk FG，Multhaup G，Bayer TA.幼年APP转基因和野生型小鼠中的铜和氯碘喹啉治疗：对寿命、体重、和金属离子水平的影响(Copper and clioquinol treatment in young APP transgenic and wild-type mice：effects on
life expectancy，body weight，and metal-ion levels).J Mol Med(Berl).2007，85：
405-413.；

[0665] Smirnova等，2010：Smirnova NA，Rakhman I，Moroz N，Basso M，Payappilly J，Kazakov S，Hernandez-Guzman F，Gaisina IN，Kozikowski AP，Ratan RR，Gazaryan IG.利用体内报告物用于高通量鉴定缺氧适应的分支小分子调节剂(Utilization of an in vivo reporter for high throughput identification of branched small molecule
regulators of hypoxic adaptation).Chem Biol.2010，17：380-391.；

[0666] Stefanis，2005：Stefanis L.胱冬酶依赖和独立神经元死亡：神经元损伤的两种不同途径(Caspase-dependent and-independent neuronal death：two distinct pathways to neuronal injury).Neuroscientist.2005，11：50-62.

[0667] Szabó，2005：SzabóC.细胞坏死机制(Mechanisms of cell necrosis).Crit Care Med.2005，33：S530-534；

[0668] Uz等，1998：Uz，T.，Pesold，C.，Longone，P.，和Manev，H.神经元5-脂氧合酶表达的年龄相关的上调：在神经元易损性中的推定作用(Agingassociated up-regulation of neuronal 5-lipoxygenase expression：putative role in neuronal vulnerability)
.FASEB J.1998，12：439-449.；

[0669] Verkade等，2008：Verkade JMM，van Hemert LJC，Quaedflieg PJLM，Rutjes FPJT.有机催化的不对称曼尼希反应(Organocatalysed asymmetric Mannich reactions)；Chem.Soc.Rev.，2008，37：29；

[0670] Wang等，1999：J.Wang，D.W.Dickson，J.Q.Trojanowski和V.M.Lee，可溶性对比不溶性脑Aβ的水平区分阿尔茨海默病与正常和病理性衰老(The levels of soluble versus insoluble brain Abeta distinguish Alzheimer’s disease from normal and pathologic aging)，Exp Neurol.1999，158：328-337.

[0671] Xue等，2007：Xue YQ，Zhao LR，Guo WP，Duan WM.鼻内给予红细胞生成素保护多巴胺能神经元并改善帕金森病的大鼠模型中的神经行为结果(Intrastriatal administration of erythropoietin protects dopaminergic neurons and improves
neurobehavioral outcome in a rat model of Parkinson′s disease)
.Neuroscience.2007，146：1245-1258.；

[0672] Zhang等，2006：Zhang，C.P.，Zhu，L.L.，Zhao，T.，Zhao，H.，Huang，X.，Ma，X.，Wang，H.，和Fan，M.在较低氧中增殖的神经干细胞的特征和缺氧诱导因子-1α的潜在作用(Characteristics of neural stem cells expanded in lowered oxygen and the
potential role of hypoxia-inducible factor-1Alpha).Neurosignals 2006，15：259-
265.；

[0673] Zhou等，2006：Zhou，Y.，Wei，E.Q.，Fang，S.H.，Chu，L.S.，Wang，M.L.，Zhang，W.P.，Yu，G.L.，Ye，Y.L.，Lin，S.C.，和Chen，Z.在大鼠中病灶性脑缺血后脑中5-脂氧合酶表达和活化的空间-时间性质(Spatio-temporal properties of 5-lipoxygenase expression and activation in the brain after focal cerebral ischemia in rats).Life
Sci.2006，79：1645-1656；

[0674] Garrod KR，Cahalan MD(2008)鼠皮肤移植(Murine skin transplantation).J Vis Exp 11：634.

标题	发布/更新时间	阅读量
固定化铁螯合物酶的制备方法及应用	2020-05-13	678
一种甘氨酸镁螯合物的制备方法	2020-05-13	236
寡核苷酸螯合物的用途	2020-05-11	545
寡核苷酸螯合物的用途	2020-05-11	73
一种磁性螯合物及其制备方法、用途	2020-05-14	763
氨基酸螯合物的制备方法	2020-05-14	738
一种含氨基酸螯合物的哺乳母猪饲料	2020-05-12	637
酪蛋白磷酸肽锌螯合物	2020-05-11	1025
硼螯合物	2020-05-11	608
钛螯合物分散液	2020-05-11	219

8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成

8-羟基喹啉衍生物的对映异构体及其合成

该功能需要专业版企业版VIP权限，您可以：