4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物
及其制备方法和用途
技术领域
[0001] 本
发明属于化学医药领域，特别涉及4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物及其制备方法和用途。
背景技术
[0002] 伴随全球环境恶化，
恶性肿瘤成为威胁人类健康的首要元凶，最新数据显示，当前中国肿瘤发病率与死亡率都呈
加速状态发展，给社会和家庭带来巨大的压
力。当前主要的
治疗手段为手术治疗、
放射治疗及
化学治疗，其中，大量的临床实践与研究证实了
化疗药物的重要地位，所以寻找新结构、新靶点的化疗药物称为当务之急。
[0003] 在抗肿瘤药物中，针对细胞周期相关蛋白的药物已展示了良好的临床疗效与市场前景如：紫杉醇、长春新
碱等。但是此类化合物存在毒性大、选择性差、易发生耐药等问题。因此，应当对该类药物进行进一步研究，发现潜在的相关蛋白靶点，为肿瘤及耐药肿瘤的治疗提供思路。
[0004] 本发明通过借助计算机辅助药物手段，针对有丝分裂检验点相关蛋白，通过运用药效团技术，筛选相关已知化合物库，并结合计算机对筛选得到的化合物进行从头设计，发现新型化合物。通过设计合成该类化合物，经过体外肿瘤
细胞增殖抑制实验筛选，发现其中一些化合物在多种细胞株上有一定抑制活性，并通过体内急性毒性实验对其毒性进行评价。
发明内容
[0005] 本发明所要解决的第一个技术问题是提供一类4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物，结构如式Ⅰ所示：
[0006]
[0007] 其中，R1～R4独立的为H、C1～C8烷基、C1～C8烷
氧基或卤素；
[0008] R5为
[0009]
[0010] X1～X5独立的为N或C；
[0011] R6为H或C1～C4烷基；
[0012] R7～R25独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C8烷基、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基、C3～C8环烷基、3～8元杂环烷基、 C2～C8烯基、C2～C8炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～8元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～8元杂环烷基或3～8元杂环烯基中的杂
原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0013] 优选的，R1～R4独立的为H、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或卤素；
[0014] R5为
[0015]
[0016] X1～X5独立的为N或C；
[0017] R6为H或C1～C4烷基；
[0018] R7～R25独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C4烷基、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、 C3～C6环烷基、3～6元杂环烷基、 C2～C4烯基、C2～C4炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～6元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～6元杂环烷基或3～6元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0019] 进一步优选的，
[0020] R1～R4独立的为H或C1～C4烷基；
[0021] R5为
[0022]
[0023] X1～X5独立的为N或C；
[0024] R6为H或C1～C4烷基；
[0025] R7～R25独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、6元杂环烷基、 -NO2或-OCF3；所述的6元杂环烷基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0026] 最优选的，
[0027] R1～R4独立的为H或甲基；
[0028] R5为
[0029]
[0030] X1～X5独立的为N或C；
[0031] R6为H；
[0032] R7～R25独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、环丙基、 -NO2或-OCF3；。
[0033] 作为本发明的优选方案，上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物中，R5为 结构如式Ⅱ所示：
[0034]
[0035] 其中，R1～R4独立的为H、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基或卤素；
[0036] X1～X5独立的为N或C；
[0037] R6为H或C1～C4烷基；
[0038] R7～R10独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C8烷基、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基、C3～C8环烷基、3～8元杂环烷基、 C2～C8烯基、C2～C8炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～8元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～8元杂环烷基或3～8元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0039] 优选的，R1～R4独立的为H、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或卤素；
[0040] X1～X5独立的为N或C；
[0041] R6为H或C1～C4烷基；
[0042] R7～R10独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C4烷基、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、3～6元杂环烷基、 C2～C4烯基、C2～C4炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～6元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～6元杂环烷基或3～6元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0043] 进一步优选的，
[0044] R1～R4独立的为H或C1～C4烷基；
[0045] X1～X5独立的为N或C；
[0046] R6为H或C1～C4烷基；
[0047] R7～R10独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、6元杂环烷基、 -NO2或-OCF3；所述的6元杂环烷基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0048] 进一步优选的，
[0049] R1～R4独立的为H或甲基；
[0050] X1～X5独立的为N或C；
[0051] R6为H；
[0052] R7～R10独立的为-H、-F、-Cl或-Br。
[0053] 作为本发明的优选方案，上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物中，R5为 结构式如式Ⅲ所示：
[0054]
[0055] 其中，R1～R4独立的为H、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基或卤素；
[0056] R6为H或C1～C4烷基；
[0057] R11～R15独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C8烷基、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基、C3～C8环烷基、3～8元杂环烷基、 C2～C8烯基、C2～C8炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～8元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～8元杂环烷基或3～8元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0058] 优选的，R1～R4独立的为H、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或卤素；
[0059] R6为H或C1～C4烷基；
[0060] R11～R15独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C4烷基、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、3～6元杂环烷基、 C2～C4烯基、C2～C4炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～6元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～6元杂环烷基或3～6元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0061] 进一步优选的，
[0062] R1～R4独立的为H或C1～C4烷基；
[0063] R6为H或C1～C4烷基；
[0064] R11～R15独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、6元杂环烷基、 -NO2或-OCF3；所述的6元杂环烷基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0065] 进一步优选的，
[0066] R1～R4独立的为H或甲基；
[0067] R6为H；
[0068] R11～R15独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、环丙基、 或-NO2。
[0069] 作为本发明的优选方案，上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物中，R5为 结构式如式Ⅳ所示：
[0070]
[0071] 其中，R1～R4独立的为H、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基或卤素；
[0072] R6为H或C1～C4烷基；
[0073] R16～R20独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C8烷基、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基、C3～C8环烷基、3～8元杂环烷基、 C2～C8烯基、C2～C8炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～8元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～8元杂环烷基或3～8元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0074] 优选的，R1～R4独立的为H、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或卤素；
[0075] R6为H或C1～C4烷基；
[0076] R16～R20独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C4烷基、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、3～6元杂环烷基、 C2～C4烯基、C2～C4炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～6元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～6元杂环烷基或3～6元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0077] 进一步优选的，
[0078] R1～R4独立的为H或C1～C4烷基；
[0079] R6为H或C1～C4烷基；
[0080] R16～R20独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、6元杂环烷基、 -NO2或-OCF3；所述的6元杂环烷基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0081] 进一步优选的，
[0082] R1～R4独立的为H或甲基；
[0083] R6为H；
[0084] R11～R15独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基或C1～C4烷氧基。
[0085] 作为本发明的优选方案，上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物中， R5为 结构式如式Ⅴ所示：
[0086]
[0087] 其中，R1～R4独立的为H、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基或卤素；
[0088] R6为H或C1～C4烷基；
[0089] R21～R25独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C8烷基、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基、C3～C8环烷基、3～8元杂环烷基、 C2～C8烯基、C2～C8炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～8元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～8元杂环烷基或3～8元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0090] 优选的，R1～R4独立的为H、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基或卤素；
[0091] R6为H或C1～C4烷基；
[0092] R21～R25独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C4烷基、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、3～6元杂环烷基、 C2～C4烯基、C2～C4炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～6元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～6元杂环烷基或3～6元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0093] 进一步优选的，
[0094] R1～R4独立的为H或C1～C4烷基；
[0095] R6为H或C1～C4烷基；
[0096] R21～R25独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基、C1～C4烷氧基、C3～C6环烷基、6元杂环烷基、 -NO2或-OCF3；所述的6元杂环烷基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个。
[0097] 进一步优选的，
[0098] R1～R4独立的为H或甲基；
[0099] R6为H；
[0100] R7～R25独立的为-H、-F、-Cl、-Br、-CF3、C1～C4烷基或C1～C4烷氧基。
[0101] 最优选的，上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物，包括以下化合物：
[0102] N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)异烟酰胺、N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-2-氟异烟酰胺、N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-吡嗪-2-酰胺、N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-嘧啶-5-酰胺、N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-哒嗪-4-酰胺、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-氯-3-(三氟 甲 基)苯 基)硫 脲、1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2,6- 二 甲基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-甲基)苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-甲氧基)苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(3-溴苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(2-溴苯基)硫脲、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，
6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-乙氧基)肉桂酰胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-叔丁基基)肉桂酰胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)肉桂酰胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(甲氧乙氧基)苯基)肉桂酰胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(环丙基)苯基)肉桂酰胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，
6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(吗啉基)苯基)肉桂酰胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二 甲基苯 基)噻唑 -2-基)-3-(3-氟-苯基) 肉桂酰 胺、(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(2-氟-苯基)肉桂酰胺、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-苯基硫脲、
1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(甲氧基)苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(2-溴苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-氟苯基)硫脲、1-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)硫脲。
[0103] 上述化合物对应的化学结构分别为：
[0104]
[0105]
[0106] 本发明所要解决的第二个技术问题是提供上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物的制备方法。该方法包括以下步骤：
[0107]
[0108] 其中，R1～R4独立的为H、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基或卤素；
[0109] X1～X5独立的为N或C；
[0110] R5为
[0111]
[0112] R6为H或C1～C4烷基；
[0113] R7～R25独立的为-H、卤素、卤素取代的C1～C8烷基、C1～C8烷基、C1～C8烷氧基、C3～C8环烷基、3～8元杂环烷基、 C2～C8烯基、C2～C8炔基、-CN、-OH、C3～C8环烯基、3～8元杂环烯基、-NO2或-OCF3；所述的3～8元杂环烷基或3～8元杂环烯基中的杂原子为N、O或S，杂原子的个数为1～3个；
[0114] 步骤A：化合物1与乙酰氯在碱性条件下反应制备得到化合物2；所述的碱为
碳酸
钾、碳酸钠、
磷酸钾、碳酸铯或氢氧化钾中任意一种；
[0115] 步骤B：化合物2与乙酰氯在无
水三氯化
铝催化下发生酰基化反应制备得到化合物3；
[0116] 步骤C：化合物3在酸性条件下
水解反应制备得到化合物4；
[0117] 步骤D：化合物4与亚
硝酸钠在
冰盐浴的浓
盐酸中反应形成重氮盐，再与KI发生碘代反应制备得到化合物5；
[0118] 步骤E：化合物5与溴化
试剂发生溴代反应制备得到化合物6；所述的溴化试剂为溴化亚
铜、溴素或四丁基三溴化铵中任意一种；
[0119] 步骤F：化合物6与硫脲发生Hantsch成噻唑反应制备得到化合物7；反应
温度为72～80℃，时间为4h～8h；
[0120] 步骤G：化合物7与6-巯基嘌呤在碱性条件下125～150℃下反应6～8h制备得到化合物8；所述的碱性为氢氧化钾、碳酸钾、叔丁醇钾、碳酸铯或磷酸钾中任意一种；
[0121] 步骤H：化合物8分别与取代异烟酸、取代
肉桂酸缩合，或与取代异氰酸酯、取代异硫氰酸酯成脲制备得到化合物9。
[0122] 上述制备方法步骤A中，反应所用的
溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿或
甲苯中任意一种，反应时间0.5～3h。
[0123] 上述制备方法步骤B中，反应温度为15～30℃，反应时间为1～3h，反应所用的溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、氯仿或甲苯中任意一种。
[0124] 上述制备方法步骤C中，所述的酸性条件为盐酸的条件下，反应温度为80～100℃，水解时间为1～2h。
[0125] 上述制备方法步骤D中，碘代反应温度为15～30℃，碘代反应时间为6～7h。
[0126] 上述制备方法步骤E中，采用溴化亚铜溴代的反应温度为70℃；采用溴素或四丁基三溴化铵溴代的反应温度为15～30℃；反应时间为7～9h。
[0127] 本发明所要解决的第三个技术问题是提供上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途。
[0128] 本发明还提供了上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物的前药或水合物。所述的前药是上述化合物的衍生物，它们自身可能具有较弱的活性或甚至没有活性，但是在
给药后，在生理条件下(例如通过代谢、溶剂分解或另外的方式)被转
化成相应的生物活性形式。
[0129] 本发明还提供了该类药物组合物，是由上述4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物添加其他药学可接受辅助性成分进行制备。
[0130] 本发明的4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺衍生物是在大量筛选的
基础上得到的，具有抗肿瘤活性，为抗肿瘤药物的开发和应用提供了新的选择和思路。
具体实施方式
[0131]
实施例1ⅠA N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)异烟酰胺
[0132]
[0133] 步骤1
[0134]
[0135] 称 取 3，5-二 甲 基 苯 胺 (0.082mol)于 40mL二 氯 甲 烷 中，加 入 无 水K2CO3(0.164mol)，冰浴冷却30min，用恒压滴液漏斗滴加乙酰氯(0.164mol)，滴完后自然升至室温反应2h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应，待反应完全加20mL水淬灭，用二氯甲烷溶解，反复用水洗有机相2次，稀盐
酸洗2次，收集有机相，浓缩干燥得N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺13.30g，为灰白色片状晶体产物；
[0136] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.01(s,3H),2.22(s,6H),6.66(s,1H),7.19(s,2H),9.74(s,1H)步骤2
[0137]
[0138] 称取无水
三氯化铝(369.09mmol)与干燥的二氯甲烷溶液中，冰水浴下滴加乙酰氯(246.06 mmol)，之后加入N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺(82.02mmol)，升温至室温，反应3h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应，待反应结束，将反应液冲析到600mL水+20mL浓盐酸中，再加入二氯甲烷溶解，萃取，收集有机相，浓缩干燥直接投下一步；
[0139] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.03(s,3H),2.14(s,6H),2.42(s,3H),7.26(s,2H),9.88(s,1H)
[0140] 步骤3
[0141]
[0142] 将浓缩后得到的固体中加入60mL2N HCl及60mL水，加热至80～100℃水解2h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应终点。待反应结束，加入饱和
碳酸氢钠淬灭，调制pH＝8～9，有大量固体沉淀析出，抽滤固体，
真空干燥过夜，得到13.04g淡黄色粉末固体，为1-(4-
氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙
酮；
[0143] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.06(s,6H),2.34(s,3H),5.17(s,2H),6.21(s,2H)[0144] 步骤4
[0145]
[0146] 称取1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(82.1mmol)于120mL浓盐酸及40mL水中，冰盐浴下冷却至温度<5℃，滴加NaNO2(98.52mmol)溶液，滴加过程保持温度低于5℃，滴加完毕后反应20min，之后滴加KI(123.15mmol)溶液，加完后自然升至室温反应7h，TLC(PE:EA＝4:1)检测反应
进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠淬灭，用乙酸乙酯萃取4次，合并有机相，柱层析分离纯化，得14.35g褐色油状液体的1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0147] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),2.44(s,3H),7.48(s,2H)[0148] 步骤5
[0149]
[0150] 称取1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(52.17mmol)于乙酸乙酯/氯仿(30mL：10mL)混合溶液，加入CuBr2(102.98mmol)，65～70℃回流8h，TLC(PE:EA＝30:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯萃取，收集有机相，得到棕红色固体
18.6g2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮。直接投下一步。
[0151] 步骤6
[0152]
[0153] 称取2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮(52mmol)及硫脲(52mmol)于80mL
乙醇中，于72～80℃下搅拌过夜，产生大量白色浑浊，反应结束抽滤，用乙醇洗涤
滤饼，干燥得22g白色固体。
[0154] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),6.46(s,1H),6.96(s,2H),7.32(s,2H).[0155] 步骤7
[0156]
[0157] 称取4-(4-碘-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(0.515mmol)、6-巯基嘌呤(1.03mmol)、Cu2O(0.026mmol)、及KOH(1.03mmol)于DMF(40mL)和水(10mL)中，125～130℃下反应过夜。TLC监测反应，待反应结束，加入盐酸水溶液淬灭，用乙酸乙酯和水反复萃取，收集有机相，浓缩干燥得到黄色固体产物。
[0158] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),6.47(s,1H),6.95(s,2H),7.34(s,2H),8.49(s,1H),8.58(s,1H),13.57(s,1H)
[0159] 步骤8
[0160]
[0161] 称取4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(2.29mmol)、异烟酸(2.29mmol)、HATU(2.29mmol)及TEA(11.45mmol)于THF中，常温搅拌过夜，待反应结束，反复用乙酸乙酯和水萃取，收集有机相，柱层析(PE:EA＝4:1)得到纯品，黄色固体，产率65％。
[0162] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),7.31(s,1H),7.42(s,2H),8.00(d,2H),8.52(s,1H),8.60(s,1H),8.82(d,2H),13.33(s,2H)
[0163] MS-ESI(m/z)：482.09(M+Na+)
[0164] 实 施 例2 ⅠB N-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫 )-2,6-二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-2-氟异烟酰胺
[0165]
[0166] 方法同实施例1。
[0167] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),7.28(s,1H),7.25(s,2H),7.75(d,1H),7.86(s,2H),8.60(s,1H),8.82(d,2H),8.62(d,1H),11.03(s,1H),13.13(s,1H)[0168] MS-ESI(m/z)：477.09(M+H+)
[0169] 实施例3ⅠC N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-吡嗪-2-酰胺
[0170]
[0171] 方法同实施例1。
[0172] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),7.25(s,2H),7.28(s,1H),8.53(s,1H),8.57(s,1H),8.89(d,1H),9.02(d,2H),9.96(s,1H),10.03(s,1H),13.43(s,1H)[0173] MS-ESI(m/z)：460.20(M+H+)
[0174] 实施例4ⅠD N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-嘧啶-5-酰胺
[0175]
[0176] 方法同实施例1。
[0177] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),7.22(s,2H),7.26(s,1H),8.53(s,1H),8.57(s,1H),9.36(s,2H),9.51(s,1H),10.03(s,1H),12.03(s,1H)
[0178] MS-ESI(m/z)：460.20(M+H+)
[0179] 实施例5ⅠE N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2,6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-哒嗪-4-酰胺
[0180]
[0181] 方法同实施例1。
[0182] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.16(s,6H),7.22(s,2H),7.26(s,1H),8.12(d,1H),8.53(s,1H),8.57(s,1H),9.51(d,1H),9.79(s,1H),10.03(s,1H),11.02(s,1H)[0183] MS-ESI(m/z)：460.20(M+H+)
[0184] 实 施 例 6ⅠF1-(4-(4-((9H- 嘌 呤 -6-基 )硫 )-2,6-二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)硫脲
[0185]
[0186] 步骤1
[0187]
[0188] 称 取 适 量 的3，5- 二 甲 基 苯 胺(0.082mol) 于40mLDCM中，加 入 无 水K2CO3(0.164mol)，冰浴冷却30min，用恒压滴液漏斗滴加乙酰氯(0.164mol)，滴完后自然升至室温反应2h，TLC(PE:EA＝2:1)检测反应，待反应完全加20mL水淬灭，用DCM溶解，反复用水洗有机相2次，稀盐酸洗2次，收集有机相，浓缩干燥得N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺13.30g，为灰白色片状晶体产物；
[0189] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.01(s,3H),2.22(s,6H),6.66(s,1H),7.19(s,2H),9.74(s,1H)
[0190] 步骤2
[0191]
[0192] 称取适量的无水三氯化铝(369.09mmol)与干燥的二氯甲烷溶液中，冰水浴下滴加乙酰氯(246.06mmol)，之后加入N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺(82.02mmol)，升温至室温，反应3h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应，待反应结束，将反应液冲析到600mL水+20mL浓盐酸中，再加入DCM溶解，萃取，收集有机相，浓缩干燥直接投下一步；
[0193] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.03(s,3H),2.14(s,6H),2.42(s,3H),7.26(s,2H),9.88(s,1H)步骤3
[0194]
[0195] 将浓缩后得到的固体中加入60mL2N HCl及60mL水,加热至80～100℃水解2h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应终点。待反应结束，加入饱和碳酸氢钠淬灭，调制pH＝8～9，有大量固体沉淀析出，抽滤固体，真空干燥过夜，得到13.04g淡黄色粉末固体，为1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0196] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.06(s,6H),2.34(s,3H),5.17(s,2H),6.21(s,2H)[0197] 步骤4
[0198]
[0199] 称取1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(82.1mmol)于120mL浓盐酸及40mL水中，冰盐浴下冷却至温度<5℃，滴加NaNO2溶液，滴加过程保持温度低于5℃，滴加完毕后反应20min，之后滴加KI溶液，加完后自然升至室温反应7h，TLC(PE:EA＝4:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠淬灭，用乙酸乙酯萃取4次，合并有机相，柱层析分离纯化，得14.35g褐色油状液体的1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0200] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),2.44(s,3H),7.48(s,2H)[0201] 步骤5
[0202]
[0203] 称取1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(52.17mmol)于乙酸乙酯/氯仿(30mL：10mL)混合溶液，加入CuBr2(102.98mmol)，65～70℃回流8h，TLC(PE:EA＝30:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯萃取，收集有机相，得到棕红色固体
18.6g2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮。直接投下一步。
[0204] 步骤6
[0205]
[0206] 称取2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮(52mmol)及硫脲(52mmol)于80mL乙醇中，于72～80℃下搅拌过夜，产生大量白色浑浊，反应结束抽滤，用乙醇洗涤滤饼，干燥得22g白色固体。
[0207] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),6.46(s,1H),6.96(s,2H),7.32(s,2H).[0208] 步骤7
[0209]
[0210] 称取4-(4-碘-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(0.515mmol)、6-巯基嘌呤(1.03mmol)、Cu2O(0.026mmol)、及KOH(1.03mmol)于DMF(40mL)和水(10mL)中，125～130℃下 反应过夜。TLC监测反应，待反应结束，加入盐酸水溶液淬灭，用乙酸乙酯和水反复萃取，收集有机相，浓缩干燥得到黄色固体产物。
[0211] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),6.47(s,1H),6.95(s,2H),7.34(s,2H),8.49(s,1H),8.58(s,1H),13.57(s,1H)
[0212] 步骤8
[0213]
[0214] 称取4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(1.51mmol)、4-氯-3-(三氟甲基)-异氰酸酯(3.02mmol)、DIPEA(4.53mmol)于DCM中，常温搅拌过夜，待反应结束，反复用乙酸乙酯和水萃取，收集有机相，柱层析(PE:EA＝15:1)得到纯品，白色粉末，产率45％。
[0215] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),7.12(s,1H),7.41(s,2H),7.67(d,1H),7.72(d,1H),8.13(s,1H),8.51(s,1H),8.60(s,1H),9.45(s,1H),10.83(s,1H),13.60(s,1H)[0216] MS-ESI(m/z)：598.06(M+Na+)
[0217] 实 施 例 7ⅠG1-(4-(4-((9H- 嘌 呤 -6-基 )硫 )-2,6-二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-甲基)苯基)硫脲
[0218]
[0219] 方法同实施例6。
[0220] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),2.32(s,3H),7.12(s,1H),7.41(s,2H),7.67(d,2H),7.72(d,2H),8.51(s,1H),8.60(s,1H),9.02(s,1H),10.57(s,1H),13.71(s,1H)[0221] MS-ESI(m/z)：510.60(M+Na+)
[0222] 实 施 例 8ⅠH1-(4-(4-((9H- 嘌 呤 -6-基 )硫 )-2,6-二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-甲氧基)苯基)硫脲
[0223]
[0224] 方法同实施例6。
[0225] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),3.83(s,3H),6.92(d,2H),7.12(s,1H),7.39(s, 2H),7.57(d,2H),8.51(s,1H),8.60(s,1H),9.02(s,1H),10.57(s,1H),13.71(s,1H)[0226] MS-ESI(m/z)：526.60(M+Na+)
[0227] 实 施 例 9ⅠI1-(4-(4-((9H- 嘌 呤 -6-基 )硫 )-2,6-二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(3-溴苯基)硫脲
[0228]
[0229] 方法同实施例6。
[0230] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.12(s,6H),7.12(s,1H),7.17(t,1H),7.32～7.55(m,4H),7.86(s,1H),8.51(s,1H),8.60(s,1H),9.01(s,1H),10.55(s,1H),11.71(s,1H)[0231] MS-ESI(m/z)：553.47(M+H+)
[0232] 实 施 例10Ⅰ J1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2,6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(2-溴苯基)硫脲
[0233]
[0234] 方法同实施例6。
[0235] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.12(s,6H),7.08(s,1H),7.28～7.37(m,4H),7.78(d,1H),8.06(d,1H),8.51(s,1H),8.60(s,1H),8.82(s,1H),9.55(s,1H),12.71(s,1H)[0236] MS-ESI(m/z)：553.50(M+H+)
[0237] 实施例11ⅠK(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-乙氧基)肉桂酰胺
[0238]
[0239] 步骤1
[0240]
[0241] 称 取 适 量 的3，5- 二 甲 基 苯 胺(0.082mol) 于40mLDCM中，加 入 无 水K2CO3(0.164mol)，冰浴冷却30min，用恒压滴液漏斗滴加乙酰氯(0.164mol)，滴完后自然升至室温反应2h，TLC(PE:EA＝2:1)检测反应，待反应完全加20mL水淬灭，用DCM溶解，反复用水洗有机相2次，稀盐酸洗2次，收集有机相，浓缩干燥得N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺13.30g，为灰白色 片状晶体产物；
[0242] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.01(s,3H),2.22(s,6H),6.66(s,1H),7.19(s,2H),9.74(s,1H)步骤2
[0243]
[0244] 称取适量的无水三氯化铝(369.09mmol)与干燥的二氯甲烷溶液中，冰水浴下滴加乙酰氯(246.06mmol)，之后加入N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺(82.02mmol)，升温至室温，反应3h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应，待反应结束，将反应液冲析到600mL水+20mL浓盐酸中，再加入DCM溶解，萃取，收集有机相，浓缩干燥直接投下一步；
[0245] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.03(s,3H),2.14(s,6H),2.42(s,3H),7.26(s,2H),9.88(s,1H)步骤3
[0246]
[0247] 将浓缩后得到的固体中加入60mL2N HCl及60mL水,加热至100℃水解2h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应终点。待反应结束，加入饱和碳酸氢钠淬灭，调制pH＝8～9，有大量固体沉淀析出，抽滤固体，真空干燥过夜，得到13.04g淡黄色粉末固体，为1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0248] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.06(s,6H),2.34(s,3H),5.17(s,2H),6.21(s,2H)[0249] 步骤4
[0250]
[0251] 称取1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(82.1mmol)于120mL浓盐酸及40mL水中，冰盐浴下冷却至温度<5℃，滴加NaNO2溶液，滴加过程保持温度低于5℃，滴加完毕后反应20min，之后滴加KI溶液，加完后自然升至室温反应7h，TLC(PE:EA＝4:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠淬灭，用乙酸乙酯萃取4次，合并有机相，柱层析分离纯化，得14.35g褐色油状液体的1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0252] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),2.44(s,3H),7.48(s,2H)[0253] 步骤5
[0254]
[0255] 称取1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(52.17mmol)于乙酸乙酯/氯仿(30mL：10mL)混合溶液，加入CuBr2(102.98mmol)，65～70℃回流8h，TLC(PE:EA＝30:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯萃取，收集有机相，的棕红色固体
18.6g2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮。直接投下一步。
[0256]
[0257] 称取2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮(52mmol)及硫脲(52mmol)于80mL乙醇中，于80℃下搅拌过夜，产生大量白色浑浊，反应结束抽滤，用乙醇洗涤滤饼，干燥得22g白色固体。
[0258] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),6.46(s,1H),6.96(s,2H),7.32(s,2H).[0259] 步骤6
[0260]
[0261] 称取4-(4-碘-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(0.515mmol)、6-巯基嘌呤(1.03mmol)、Cu2O(0.026mmol)、及KOH(1.03mmol)于DMF(40mL)和水(10mL)中，125～130℃下反应过夜。TLC监测反应，待反应结束，加入盐酸水溶液淬灭，用乙酸乙酯和水反复萃取，收集有机相，浓缩干燥得到黄色固体产物。
[0262] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),6.47(s,1H),6.95(s,2H),7.34(s,2H),8.49(s,1H),8.58(s,1H),13.57(s,1H)
[0263] 步骤7
[0264]
[0265] 称取4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)苯基)噻唑基-2-胺(2.29mmol)、4-乙氧基肉桂酸(2.29mmol)、HATU(2.29mmol)及TEA(11.45mmol)于THF中，常温搅拌过夜，待反应结束，反复用乙酸乙酯和水萃取，收集有机相，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)得到纯品，类 白色固体，产率50％。
[0266] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):1.34(t,2H),2.12(s,6H),4.08(q,3H),6.79(d,1H),7.01(d,2H),7.16(s,1H),7.37(s,2H),7.60(d,2H),7.69(s,1H),8.32(s,1H),8.48(S,1H),12.39(s,1H),13.52(s,1H)
+
[0267] MS-ESI(m/z)：551.14(M+Na)
[0268] 实施例12ⅠL(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-叔丁基基)肉桂酰胺
[0269]
[0270] 方法同实施例11。
[0271] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):1.30(s,9H),2.15(s,6H),6.92(d,1H),7.22(s,1H),7.41(s,2H),7.50(d,2H),7.58(d,2H),7.74(d,1H),8.53(S,1H),8.62(s,1H),12.41(s,1H),1
3.62(s,1H)
+
[0272] MS-ESI(m/z)：563.18(M+Na)
[0273] 实施例13ⅠM(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)肉桂酰胺
[0274]
[0275] 方法同实施例11。
[0276] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),7.08(d,1H),7.25(s,1H),7.41(s,2H),7.82～7.89(m,5H),8.51(s,1H),8.61(s,1H),12.53(s,1H),13.59(s,1H)[0277] MS-ESI(m/z)：575.10(M+Na+)
[0278] 实施例14ⅠN(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(硝基)苯基)肉桂酰胺
[0279]
[0280] 方法同实施例11。
[0281] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),7.12(d,1H),7.26(s,1H),7.41(s,2H),7.87(d,1H),7.92(d,2H),8.32(d,2H),8.52(s,1H),8.61(s,1H),12.58(s,1H),13.59(s,1H)[0282] MS-ESI(m/z)：552.1(M+Na+)
[0283] 实施例15ⅠO(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4- (甲氧乙氧基)苯基)肉桂酰胺
[0284]
[0285] 方法同实施例11。
[0286] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),3.31(s,3H),3.80(t,2H),4.30(t,3H),6.89(d,1H),7.32(s,1H),7.41(s,2H),7.51(d,2H),7.58(d,2H),7.37(d,1H),8.53(s,1H),8.
62(s,1H),12.39(s,1H),13.60(s,1H)
[0287] MS-ESI(m/z)：559.67(M+H+)
[0288] 实施例16ⅠP(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(环丙基)苯基)肉桂酰胺
[0289]
[0290] 方法同实施例11。
[0291] MS-ESI(m/z)：547.67(M+Na+)
[0292] 实施例17ⅠQ(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(4-(吗啉基)苯基)肉桂酰胺
[0293]
[0294] 方法同实施例11。
[0295] MS-ESI(m/z)：570.70(M+H+)
[0296] 实施例18ⅠR(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(3-氟-苯基)肉桂酰胺
[0297]
[0298] 方法同实施例11。
[0299] MS-ESI(m/z)：525.60(M+H+)
[0300] 实施例19ⅠS(E)-N-(4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑-2-基)-3-(2-氟-苯基)肉桂酰胺
[0301]
[0302] 方法同实施例11。+
[0303] MS-ESI(m/z)：525.60(M+H)
[0304] 实 施 例20Ⅰ T1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2，6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-苯基硫脲
[0305]
[0306] 步骤1
[0307]
[0308] 称 取 适 量 的3，5- 二 甲 基 苯 胺(0.082mol) 于40mLDCM中，加 入 无 水K2CO3(0.164mol)，冰浴冷却30min，用恒压滴液漏斗滴加乙酰氯(0.164mol)，滴完后自然升至室温反应2h，TLC(PE:EA＝2:1)检测反应，待反应完全加20mL水淬灭，用DCM溶解，反复用水洗有机相2次，稀盐酸洗2次，收集有机相，浓缩干燥得N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺13.30g，为灰白色片状晶体产物；
[0309] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.01(s,3H),2.22(s,6H),6.66(s,1H),7.19(s,2H),9.74(s,1H)
[0310] 步骤2
[0311]
[0312] 称取适量的无水三氯化铝(369.09mmol)与干燥的二氯甲烷溶液中，冰水浴下滴加乙酰氯(246.06mmol)，之后加入N-(3,5-二甲基苯基)乙酰胺(82.02mmol)，升温至室温，反应3h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应，待反应结束，将反应液冲析到600mL水+20mL浓盐酸中，再加入DCM溶解，萃取，收集有机相，浓缩干燥直接投下一步；
[0313] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.03(s,3H),2.14(s,6H),2.42(s,3H),7.26(s,2H),9.88(s,1H)
[0314] 步骤3
[0315]
[0316] 将浓缩后得到的固体中加入60mL2N HCl及60mL水,加热至95～100℃水解2h，TLC(PE:EA＝1:1)检测反应终点。待反应结束，加入饱和碳酸氢钠淬灭，调制pH＝8～9，有大量固体沉淀析出，抽滤固体，真空干燥过夜，得到13.04g淡黄色粉末固体，为1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0317] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.06(s,6H),2.34(s,3H),5.17(s,2H),6.21(s,2H)[0318] 步骤4
[0319]
[0320] 称取1-(4-氨基-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(82.1mmol)于120mL浓盐酸及40mL水中，冰盐浴下冷却至温度<5℃，滴加NaNO2溶液，滴加过程保持温度低于5℃，滴加完毕后反应20min，之后滴加KI溶液，加完后自然升至室温反应7h，TLC(PE:EA＝4:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠淬灭，用乙酸乙酯萃取4次，合并有机相，柱层析分离纯化，得14.35g褐色油状液体的1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮。
[0321] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),2.44(s,3H),7.48(s,2H)[0322] 步骤5
[0323]
[0324] 称取1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)苯乙酮(52.17mmol)于乙酸乙酯/氯仿(30mL：10mL)混合溶液，加入CuBr2(102.98mmol)，65～70℃回流8h，TLC(PE:EA＝30:1)检测反应进程，待反应结束，用饱和碳酸氢钠和乙酸乙酯萃取，收集有机相，得到棕红色固体
18.6g2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮。直接投下一步。
[0325] 步骤6
[0326]
[0327] 称取2-溴-1-(4-碘-2，6-二甲基苯基)乙酮(52mmol)及硫脲(52mmol)于80mL乙醇中，于72～80℃下搅拌过夜，产生大量白色浑浊，反应结束抽滤，用乙醇洗涤滤饼，干燥得22g白色固体。
[0328] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.14(s,6H),6.46(s,1H),6.96(s,2H),7.32(s,2H).[0329] 步骤7
[0330]
[0331] 称取4-(4-碘-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(0.515mmol)、6-巯基嘌呤(1.03mmol)、Cu2O(0.026mmol)、及KOH(1.03mmol)于DMF(40mL)和水(10mL)中，125～130℃下反应过夜。TLC监测反应，待反应结束，加入盐酸水溶液淬灭，用乙酸乙酯和水反复萃取，收集有机相，浓缩干燥得到黄色固体产物。
[0332] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.15(s,6H),6.47(s,1H),6.95(s,2H),7.34(s,2H),8.49(s,1H),8.58(s,1H),13.57(s,1H)
[0333] 步骤8
[0334]
[0335] 称取4-(4-((9H-嘌呤-6-基)硫)-2，6-二甲基苯基)噻唑基-2-胺(2mmol)、苯基异硫氰酸酯(2mmol)于吡啶(20ml)中，100～110℃搅拌过夜，待反应结束，反复用乙酸乙酯和水萃取，收集有机相，柱层析(DCM:MeOH＝20:1)得到纯品，黄色固体，产率62％。
[0336] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.19(s,6H),7.15～7.90(m,8H),8.51(s,1H),8.59(s,1H),10.39(s,1H),11.81(s,1H),13.60(s,1H)
[0337] MS-ESI(m/z)：512.1(M+Na+)
[0338] 实 施 例21Ⅰ U1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2，6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)硫脲
[0339]
[0340] 方法同实施例20。
[0341] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.21(s,6H),6.97(s,1H),7.50(s,2H),7.56(d,2H),7.96(d,2H),8.52(s,1H),8.59(s,1H),10.37(s,1H),13.43(s,1H),13.62(s,1H)[0342] MS-ESI(m/z)：580.64(M+Na+)
[0343] 实 施 例22Ⅰ V1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2，6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-(甲氧基)苯基)硫脲
[0344]
[0345] 方法同实施例20。
[0346] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.18(s,6H),3.74(s,3H),6.98(d,3H),7.28(d,2H),7.37(s,2H),8.49(s,1H),8.57(s,1H),9.60(s,1H),13.563(s,1H),13.623(s,1H)+
[0347] MS-ESI(m/z)：542.10(M+Na)
[0348] 实 施 例23Ⅰ W1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2，6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(2-溴苯基)硫脲
[0349]
[0350] 方法同实施例20。
[0351] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.17(s,6H),7.19(m,2H),7.42(s,3H),7.69(d,1H),7.83(d,1H),8.50(s,1H),8.59(s,1H),12,14(s,1H),13.11(s,1H),13.59(s,1H)+
[0352] MS-ESI(m/z)：591.53(M+Na)
[0353] 实 施 例24Ⅰ X1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2，6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-氟苯基)硫脲
[0354]
[0355] 方法同实施例20。
[0356] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.17(s,6H),6.97(s,1H),7.17(t,4H),7.40(t,4H),8.51(s,1H),8.59(s,1H),9.84(s,2H),13.54(s,1H)
[0357] MS-ESI(m/z)：530.63(M+Na+)
[0358] 实 施 例25Ⅰ Y1-(4-(4-((9H-嘌 呤-6- 基)硫)-2，6- 二 甲 基 苯 基) 噻唑-2-基)-3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)硫脲
[0359]
[0360] 方法同实施例20。
[0361] 1H NMR:(DMSO-d6，400MHz):2.20(s,6H),6.98(s,1H),7.49(s,2H),7.54(s,1H),8.14(s,1H),8.3(s,1H),8.52(s,1H),8.58(s,1H),10.4(s,1H),13.34(s,1H),13.61(s,1H)+
[0362] MS-ESI(m/z)：615.08(M+Na)
[0363] 药效学实验部分
[0364] 一、细胞增殖抑制实验
[0365] 1、实验试剂
[0366] 四甲基偶氮唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenylte trazoliumb romide，MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、EL购自美国Sigma公司(St.Louis,MO)。DMEM、RPMI-1640、胎
牛血清以及胰酶自购买于Gibco公司(Auckland,N.Z)。本发明中涉及的新化合物均由我实验室自行合成所得，在体外实验中用DMSO配制成90mmol/L的储备液，并避光储存在﹣20℃
冰箱备用，实验使用时，用完全培养基稀释至所需浓度。
[0367] 细胞系及其培养：本实验室使用的人
乳腺癌细胞株(MDA-MB-231和MDA-MB-468)、人
宫颈癌细胞株(Hela)和人慢性髓性白血病细胞株(K562)均购买于美国模式菌种收集中心(ATCC)。
[0368] 人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231和MDA-MB-468)、人
宫颈癌细胞株(Hela)使用含10％的胎牛血清和抗生素(青霉素100U/mL，
链霉素100U/mL)的DMEM完全培养基培养，并置于37℃、5％CO2、饱和湿度条件下的孵箱。
[0369] 人慢性髓性白血病细胞株(K562)使用含10％的胎牛血清和抗生素(青霉素100U/mL，链霉素100U/mL)的RPMI-1640完全培养基培养，并置于37℃、5％CO2、饱和湿度条件下的孵箱。
[0370] 2、MTT法
[0371] 收集对数生长期的细胞，并根据细胞生长的快慢调整细胞悬液浓度，以2500～4000个细胞/孔的
密度接种到96孔板，每孔体积100μL；将96孔板置于37℃、5％CO2细胞培养孵箱内培养过夜；次日以3倍稀释的方式将化合物稀释成相应的浓度，并分别使用不同浓度的Ⅰa～Ⅰl(终浓度分别为90、30、10、3、1、0.3μmol/L)处理细胞，每个浓度梯度设3～5个复孔，并设置等体积的溶剂对照组，每孔的DMSO的含量均要求在0.1％以下(0.1％的DMSO对细胞增殖没有明显影响)；置37℃、5％CO2细胞培养孵箱内培养96小时，药物处理组和对照组每孔加入20μL MTT溶液(5mg/mL)，继续在孵箱中孵育2～4小时，待甲瓒形成后终止培养，倾去上清液，每孔加150μL DMSO(对于悬浮细胞，待终止培养后，每孔加入50μL的20％SDS溶液，孵育过夜待甲瓒全溶即可)；在摇床上摇15-20分钟，在酶标仪(λ＝570nm)上测定各孔光吸收值(OD570)，取其平均值记录结果。细胞增殖抑制率＝(对 照组OD570-实验组OD570)/对照组OD570×100％。实验至少重复3次，根据不同浓度的抑制率用GraphPad Prism
软件求算IC50。
[0372] 3、实验结果
[0373] ⅠA～ⅠW中部分化合物在四个不同肿瘤细胞株上的体外抗肿瘤增殖作用见表1。
[0374] 表1
[0375]
[0376] 本发明对制备的化合物进行了人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、MDA-MB-468)、人宫颈癌细胞株(Hela)和人慢性髓性白血病细胞株(K562)的体外细胞增殖抑制实验研究，结
