发明领域

本发明涉及非氢化的或部分氢化的非动物油，其具有低含量的反式脂 肪酸和改善的尤其适合于食品领域的风味和性能特性，以及其制备方法。

由于消费者变得更为注意脂质营养物对健康的影响，食用不饱和的和 多不饱和脂肪含量高以及反式脂肪含量低的油是所希望的。

含有长链多不饱和脂肪酸(PUFAs)的油可以用作食品成分。重要的 PUFAs包括二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、α-亚麻酸 (ALA)、γ-亚麻酸(GLA)、二十二碳五烯酸(DPA)、花生四烯酸(全 顺式-5，8，11，14-二十碳四烯酸；AA)和十八碳四烯酸(顺式-6，9，12，15-十八 碳四烯酸；SDA)。这些PUFAs中的许多存在于海产油(marine oil)和 植物种子中。PUFAs是细胞的原生质膜中存在的磷脂的重要成分，以及是 人类和动物中其他重要分子的前体，包括环前列腺素、白细胞三烯 (1eukotriene)和前列腺素。此外，PUFAs是正常发育、特别是婴儿大脑 发育中必需的，以及是组织形成和修补所必需的。

PUFAs可以从天然来源提取或者由多种有机体合成。然而，存在若干 与PUFAs从天然来源的工业生产有关的缺点。PUFAs的天然来源，诸如 动物和植物，倾向于具有非常不纯的油组成。从这些来源得到的油会需要 大规模的纯化以分离出一种或多种所需的PUFAs或者产生富含一种或多 种PUFA的油。含有相当大量的EPA和DHA的鱼油会具有令人不愉快的 味道和气味，这会使它们成为不希望的食品成分或食品增补剂。此外，在 一些情况下，鱼油胶囊会包含低含量的所需成分以及保持不希望含量的其 他成分，包括杂质在内。

PUFAs被认为可用于营养、药物、工业和其他目的。因此，从转基因 种子提取PUFAs含量高的油是感兴趣的；已经使这些种子改性以含有与相 应的天然存在的种子相比更高浓度的SDA。

发明概述

本发明的一种实施方案涉及油组合物，基于所述组合物中脂肪酸或其 衍生物的总重量，其包含至少0.4wt％至少一种具有4个或更多碳-碳双键 的多不饱和脂肪酸或其衍生物，所述组合物具有以下任一种特征：过氧化 值小于约1meq/kg以及源自除海产油以外的来源；茴香胺值小于约3以及 源自除海产油以外的来源；至少一种另外的具有4个或更多碳-碳双键的多 不饱和脂肪酸或其衍生物，以及茴香胺值小于约3；至少约400ppm的生 育酚；或小于1wt％的反式脂肪酸。

本发明的另一实施方案涉及油组合物，基于所述组合物中脂肪酸或其 衍生物的总重量，其包含至少0.4wt％至少一种具有4个或更多碳-碳双键 的多不饱和脂肪酸或其衍生物，所述组合物源自转基因种子，其选自拟南 芥(Arabidopsis)、油菜(canola)、胡萝卜、椰子、谷物、棉花、亚麻、 亚麻仁、谷物、棕榈仁、花生、马铃薯、油菜籽(rapeseed)、红花、大 豆、向日葵、烟草和其混合物。

本发明的另一方面涉及用于在运输或储存期间保持油的储存稳定性的 方法，所述方法包括在约4-约45℃的温度下将本发明的油储存在容器中至 少1个月，其中所述油在储存后具有小于3的茴香胺值。

本发明的另一方面涉及用于在运输或储存期间保持油的储存稳定性的 方法，所述方法包括在约4-约45℃的温度下将本发明的油储存在容器中至 少1个月，其中储存期间所述油的茴香胺值的绝对变化不大于约20。

本发明的另一方面涉及用于在运输或储存期间保持油的储存稳定性的 方法，所述方法包括将本发明的油储存在容器中；和冷冻(freezing)所述 容器。

本发明的另一方面涉及用于在运输或储存期间保持油的储存稳定性的 方法，所述方法包括将本发明的油包封在封装材料中。

本发明的另一方面涉及包含本发明的油的食品组合物、饮料、营养增 补剂或食用油。

附图简述

图1A是含有20wt％十八碳四烯酸(SDA)和多种添加的稳定剂的油 组合物的过氧化值(PV)相对时间的图。图1的曲线图显示在55℃下进行 的加速老化实验的结果。

图1B是含有20wt％十八碳四烯酸(SDA)和多种添加的稳定剂的油 组合物的茴香胺值(AV)相对时间的图。图1的曲线图显示在55℃下进 行的加速老化实验的结果。

图2A是20％SDA、4％SDA共混物、具有柠檬酸的20％SDA、以 及对照的豆油组合物的PV相对时间的图。图2的曲线图显示在55℃下进 行的加速老化实验的结果。

图2B是20％SDA、4％SDA共混物、具有柠檬酸的20％SDA、以 及对照的豆油组合物的AV相对时间的图。图2的曲线图显示在55℃下进 行的加速老化实验的结果。

图3A是20％SDA、4％SDA共混物、具有柠檬酸的20％SDA、以 及对照的豆油组合物的PV相对时间的图。图3的曲线图显示在25℃下进 行的室温老化实验的结果。

图3B是20％SDA、4％SDA共混物、具有柠檬酸的20％SDA、以 及对照的豆油组合物的AV相对时间的图。图3的曲线图显示在25℃下进 行的室温老化实验的结果。

图4是20％SDA、20％SDA和柠檬酸、市售鱼油、以及生物等价的 SDA共混油组合物的AV相对时间的图。图4的曲线图显示在55℃下进行 的加速老化实验的结果。

图5是含有200ppm抗坏血酸棕榈酸酯以及0、30、60和120ppm没 食子酸丙酯的20％SDA油组合物的过氧化值(PV)相对时间的图。图5 的曲线图显示在60℃下用薄膜IR法进行的加速老化实验的结果。

图6A是含有(i)抗坏血酸棕榈酸酯(AP)和TBHQ、(ii)柠檬酸 (CA)和抗坏血酸棕榈酸酯(AP)、以及(iii)柠檬酸(CA)、TBHQ 和抗坏血酸棕榈酸酯(AP)的20％SDA油组合物的过氧化值(PV)相对 时间的图。

图6B是含有(i)抗坏血酸棕榈酸酯(AP)和TBHQ、(ii)柠檬酸 (CA)和抗坏血酸棕榈酸酯(AP)、以及(iii)柠檬酸(CA)、TBHQ 和抗坏血酸棕榈酸酯(AP)的20％SDA油组合物的茴香胺值(AV)相对 时间的图。

发明详述

本发明的油在味道和气味方面具有改进的稳定性以及具有低含量的反 式脂肪酸。在一种实施方案中，归因于食用高度不饱和的脂肪的健康益处， 可以将某些本发明的油用作食品成分。已知食用饱和脂肪对心血管健康具 有负面影响。然而，食用具有4个或更多双键的脂肪酸是理想的。归因于 高度的不饱和(4个或更多的双键)，某些本发明的油与不饱和水平较低 (少于4个双键)的油相比不那么稳定。某些本发明的油的较低稳定性引 起脂肪酸的分解反应，其形成不希望的过氧化物和氢过氧化物。那些氧化 产物的随后分解会形成挥发性的和非挥发性的醛和/或酮。非挥发性的组分 会催化所述油的进一步氧化而挥发性组分导致不希望的味道和气味。

本发明的一个方面为油组合物，基于所述组合物中脂肪酸的总重量， 其具有至少约0.4wt％的带有4个或更多碳-碳双键的多不饱和脂肪酸或其 衍生物(例如SDA)含量，所述组合物具有小于约3的茴香胺值以及源自 除海产油以外的来源。

已经通过使影响所述氧化过程速率的许多因素最优化而开发出制备本 发明的油的方法，所述因素包括种子储存和处理、氧化强化剂 (pro-oxidants)(如氧、叶绿素和金属)的浓度、体系的温度、种子肉或 油的曝光以及天然存在(如生育酚)或另外的稳定剂或抗氧化剂的浓度。 这些因素之间的关系复杂。本发明的方法可提供与通过常规方法制备的种 子油相比具有通过感官和风味数据表征的改进的种子油稳定性的油组合 物。

I.油组合物

A.氧化稳定性

本发明的不同油组合物是从多种非动物来源中提取的油。有利地，本 发明的组合物与已知的油组合物相比具有更高的稳定性。

一般而言，油的稳定性对于确定其用途而言是重要的。例如，已知具 有高浓度ω-3脂肪酸的油可提供积极的健康益处和可有利地用作食品成 分。特别地，已知ω-3脂肪酸有益于心血管健康、认知形成(cognitive development)、婴儿营养和有助于防止癌症、类风湿和关节炎以及精神病。 目前，ω-3脂肪酸的一个主要来源是鱼油。由于所述脂肪酸中的大量(3 个或更多)双键，ω-3脂肪酸更具反应性。因此，由于从鱼油加工的ω-3 油的味道和气味，发现ω-3脂肪酸用作食品成分(例如添加至面包、饼干、 沙拉调味料、蛋黄酱、人造奶油和涂抹料、宠物食品、饮料等)的良好来 源已成为一种挑战。相应地，本发明的一个方面提供了一种ω-3脂肪酸来 源，其具有有利于用作食品成分和/或带有潜在健康益处的制品的味道和气 味特征。

一般而言，烯属官能度数目较大的油比烯属官能度数目较低的油具有 更高的氧化速率。描述不饱和脂肪酸(UFAs)氧化的反应流程包括表现为 引发、增长和终止反应的自由基链反应。引发反应的实例包括从脂肪酸中 夺取氢原子以生成具有自由基的脂肪酸。具有多于一个双键以及具有烯丙 基碳的UFAs比具有其他结构的多不饱和脂肪酸更活泼，因为所述烯丙基 氢更容易被夺取以及所述烯丙基自由基比其他自由基更稳定。在增长过程 中，具有烯丙基自由基的UFA可与分子氧反应以生成过氧化物。在增长步 骤中该过氧化物可与另一UFA反应以夺取氢原子并生成另一脂肪酸自由 基。作为选择，在终止步骤中，烯丙基自由基可与另一自由基反应以生成 无活性产物。

影响氧化具有一种或多种不饱和脂肪酸的油的因素是以下的函数：引 发从UFA夺取氢原子的试剂的浓度、分子氧浓度、与自由基反应以形成稳 定产物的化合物(例如，稳定剂或导致终止的其他自由基)的浓度以及提 高或降低所述氧化反应的反应速率的多种其他反应条件。分子氧是维持从 UFAs产生过氧化物所需的最重要物种之一，上文所述的因素具有复杂的 关系。

一般而言，引发自由基物种形成的氧化强化剂的浓度与高度不饱和油 的稳定性的关系取决于具体的氧化强化剂和发生的引发反应。当在整个氧 化反应流程的增长步骤中消耗分子氧时，分子氧浓度与UFA氧化速率之间 的关系近似为线性。然而，分子氧可以参与在整个氧化反应流程中的其他 类型反应。例如，提出的引发机理是通过痕量金属离子从UFA中夺取氢。 此外，已经发现UV光和温度可提高氧对UFAs的直接攻击率。另外认为 UFAs通过从金属催化的水分解所生成的过氧化氢或者通过与痕量单态氧 的反应而被氧化。所有这些反应都似乎有理，以及会导致所述加工因素、 稳定性和下文论述的油品质之间的复杂关系。

虽然稳定剂浓度与UFA氧化速率的关系取决于具体的稳定剂，但是该 关系会由于多于一种稳定剂的存在而复杂化。多种稳定剂的加入可以用于 彼此稳定，当这种情况出现时，两种或更多种稳定剂的组合与单一稳定剂 相比可以更有效终止自由基。例如，稳定剂的这种组合可以具有加和效果 或一起用于产生与使用相同量的任一稳定剂所达到的相比更好的效果。

尽管UFA氧化的所述复杂性，但是通过测量由不同氧化反应产生的某 些类型的化合物可以确定包含UFAs的组合物的稳定性。例如，过氧化值 (PV)是以meq/kg衡量所述油中的过氧化物浓度。过氧化物在UFA氧化 期间生成，因而PV值越高，则越多的UFA氧化已经发生。此外，通过减 少过氧化物的形成或通过除去/分解存在于油中的过氧化物或氢过氧化物 可以最大限度地降低所述油的PV。可以通过多种技术最大限度地降低PV， 包括但是不限于加工程式(processing protocols)。

用于评价油所受到的后氧化应激的另一种衡量标准被称作油的茴香胺 值(AV)。AV表示所述油在测量之前已经经历的氧化量，并且是次级氧 化产物的浓度的衡量标准。油的AV是一个衡量所述油中非挥发性醛和/或 酮量的标准。由于油的AV衡量所述油中非挥发性醛和/或酮浓度(通常无 单位)，因此它是油的氧化历史的一种衡量标准。醛和酮由过氧化物或氢 过氧化物物种的分解产生，所述物种是脂肪酸上烯属官能度的主要氧化产 物。测量油的PV或AV的方法在所属领域中是公知的，以及分别包括 AOCS Cd 8-53和AOCS Cd 18-90。

当评价油的氧化稳定性时，最大限度地减少通过PV和AV测量的氧 化量可以具有重要的意义。例如，过氧化物和氢过氧化物可以容易地分解 以形成异味以及醛和酮，它们可以充当用于进一步氧化分解所述油的催化 剂。

脂肪酸氧化的另一衡量标准是总氧化或totox值。totox值结合对主氧 化产物(PV)和次级氧化产物(AV)的测量并通过方程式2PV+AV计算。

确定氧化稳定性的一种方法是氧化稳定性指数(OSI)；测量OSI的 一种方法是AOCS Cd 12b-92。OSI的值是氧化的最大速率变化之前(一 般称作氧化反应的增长阶段)的时间(通常以小时计)；该时间通常称作 诱导期。虽然有许多影响油的OSI值的因素，但是该值连同其他衡量标准 一起可用于作出关于油稳定性的半定量预测。

确定油的氧化稳定性的另一种方法是采用标准化感官评价。一般而言， 该标准化感官评价评定油的气味、味道、触觉特性和风味、以及通过在所 述油中油炸食品或者将油引入食品中而包含所述油的食品的特性。例如， 可以评价所述油以及用该油制成的食品或具有该油作为成分的食品的许多 特性。另外，经过训练的调查对象可以从不同数值等级中选择以评定在感 官评价中进行实验的油的可接受性等级。所属领域的技术人员将能够设计 适当的感官评价。该感官评价结果确定用于特定用途的油的可接受性以及 因此是油稳定性的一个重要衡量标准。

与油有关的特定气味和味道指示包括熏肉味、豆味(beany)、苦味、 淡味、焦味(burnt)、纸板味(cardboardy)、谷味、深度油炸味、鱼味、 果味、草风味、未熟(green)、干草味、热油、壳味(hully)、氢化油、 猪油、light struck oil、瓜味、金属味、霉味、坚果味、过热油、氧化的 (oxidized)、刺激性(pointy)、石蜡油、花生油、胡桃油、石油、酚、 松油、石油、酚、松油、塑料的、腥味(pondy)、南瓜味、腐臭味、原 味、复原油、橡胶味、皂味、酸味、硫磺味、向日葵籽壳、西瓜、蜡味、 杂草味和木味。通常，含有多于4个双键的油表现出鱼味或腥味特征。本 发明的一种实施方案在于制备含有多于4个双键的油，其在生产时的味道 和气味是淡味的。本发明的另一实施方案是当储存数月时使得这些油保持 其淡味的感官性质。

B.具有带有4个或更多双键的脂肪酸的油组合物

存在两个主要的多不饱和脂肪酸家族，具体而言是ω-3脂肪酸和ω-6 脂肪酸。人类可以从所谓的基本脂肪酸、亚油酸(LA，C18:2ω6)和α- 亚麻酸(ALA，C18:3 ω3)通过Δ6-去饱和途径合成ω-6和ω-3多不饱和 脂肪酸。LA通过Δ12-去饱和酶从油酸(C18:1 ω9)产生。LA又分别通过 Δ6-去饱和酶或延长酶(elongase)转化成γ-亚麻酸(GLA，C18:3 ω6)或 ω6-二十碳二烯酸(EDA)。GLA和EDA然后各自分别通过延长酶或Δ8 去饱和酶转化成二高-γ-亚麻酸(DGLA，C20:3)。DGLA通过Δ5去饱和 酶催化形成花生四烯酸(AA，C20:4 ω6)。作为选择，LA可以转化成α- 亚麻酸(ALA，C18:3 ω3)。ALA又转化成十八碳四烯酸(SDA，C18:4 ω3) 或二十碳三烯酸(EtrA，C20:3 ω3)。SDA和EtrA然后都转化成二十碳 四烯酸(ETA，C20:4)，它转化成EPA。EPA然后通过延长酶转化成二 十二碳五烯酸(DPA，C22:5)，它接着通过Δ4-去饱和酶转化成二十二碳 六烯酸(DPA，C22:6)。然而，这些途径效率很低，而且认为直接从饮 食获得这些多不饱和脂肪酸是必要的。

在本发明的一种示例性的实施方案中，基于所述组合物中脂肪酸或其 衍生物的总重量，油组合物包含至少约0.4、1、2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、 42、43、44或45wt％或更大的至少一种具有4个或更多碳-碳双键的多不 饱和脂肪酸或其衍生物。在一种实施方案中，所述组合物进一步包含至少 约400、450、500、600、700、800、805、810、820、830、840、850、860、 870、880、890、900、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、 1800、1900、2000ppm的生育酚或更多。在另一实施方案中，所述组合物 具有至少约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0meq/kg的 过氧化值，以及源自除了海产油(例如除了鱼油、海藻油等)以外的来源。 在另一实施方案中，所述组合物具有小于约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、 0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、 2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3.0的茴香胺值，以及包含至少 一种另外的具有4个或更多碳-碳双键的多不饱和脂肪酸或其衍生物。在另 一实施方案中，所述组合物进一步包含小于1wt％反式脂肪酸。

此外，本发明涉及油组合物，基于所述组合物中脂肪酸或其衍生物的 总重量，其包含至少约0.4、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、 13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、 29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或 45wt％或更大的至少一种具有4个或更多碳-碳双键的多不饱和脂肪酸或 其衍生物，所述组合物源自拟南芥(Arabidopsis)、油菜、胡萝卜、椰子、 谷物、棉花、亚麻、亚麻仁、玉米、棕榈仁、花生、马铃薯、油菜籽、红 花、大豆、向日葵和/或烟草的转基因种子。在一种实施方案中，所述组合 物具有0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、 2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5 或10.0meq/kg的过氧化值。在另一实施方案中，所述组合物具有0、0.1、 0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、 4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19或20的茴香胺值。在另一实施方案中，所述组 合物具有0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.5、2.0、 2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、 10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25或 26的totox值。在另一实施方案中，所述组合物进一步包含至多100、200、 300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、 1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、 2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、 3700、3800、3900、4000、4100、4200、4300、4400、4500、4600、4700、 4800、4900或5000ppm的生育酚或更大。生育酚是天然存在的稳定剂以 及包括α-生育酚、β-生育酚、γ-生育酚和6-生育酚。在另一实施方案中， 所述组合物进一步包含不大于0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、 8.5、9.0、9.5或10.0wt％反式脂肪酸。在另一实施方案中，所述组合物进 一步包含至少约0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、 9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、 26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、 42、43、44、45、46、47、48、49或50wt％的γ-亚麻酸(GLA，C18:3) 或其衍生物。

示例性的具有3个或更多双键的多不饱和脂肪酸或其衍生物是十八碳 四烯酸(SDA，C18:4)、二十碳四烯酸(ETA)、二十碳五烯酸(EPA， C20:5)、二十二碳五烯酸(DPA，C22:5)、二十二碳六烯酸(DHA)和 花生四烯酸(AA，C20:4)。优选地，上述油组合物的多不饱和脂肪酸或 其衍生物包含至少一种ω-3或ω-6脂肪酸，以及优选包含ω-3十八碳四烯 酸(SDA，C18:4)、ω-3二十碳四烯酸(ETA)、ω-3二十碳五烯酸(EPA， C20:5)、ω-3二十二碳五烯酸(DPA，C22:5)、ω-3二十二碳六烯酸(DHA； C22:6)或ω-6花生四烯酸(AA，C20:4)。

本发明也可用于含有3个碳-碳双键以上的多不饱和脂肪酸含量提高的 转基因植物油。实例包括源自拟南芥(Arabidopsis)、油菜、胡萝卜、椰 子、玉米、棉花、亚麻、亚麻仁、玉蜀黍、棕榈仁、花生、马铃薯、油菜 籽、红花、大豆、向日葵和/或烟草的植物种子。示例性的具有3个或更多 双键的多不饱和脂肪酸或其衍生物是十八碳四烯酸(SDA，C18:4)、二十 碳三烯酸(EtrA，C20:3)、二十碳四烯酸(ETA，C20:4)、二十碳五烯 酸(EPA，C20:5)、二十二碳五烯酸(DPA，C22:5)、二十二碳六烯酸 (DHA，C22:6)、γ-亚麻酸(GLA，C18:3)、二高-γ-亚麻酸(DGLA， C20:3)和花生四烯酸(AA，C20:4)。优选地，上述油组合物的多不饱和 脂肪酸或其衍生物包含至少一种ω-3或ω-6脂肪酸，以及优选包含ω-3十 八碳四烯酸(SDA，C18:4)、ω-3二十碳三烯酸(EtrA，C20:3)、ω-3 二十碳四烯酸(ETA，C20:4)、ω-3二十碳五烯酸(EPA，C20:5)、ω-3 二十二碳五烯酸(DPA，C22:5)、ω-3二十二碳六烯酸(DHA，C22:6)、 ω-6 γ-亚麻酸(GLA，C18:3)、ω-6二高-γ-亚麻酸(DGLA，C20:3)或ω-6 花生四烯酸(AA，C20:4)。

以上在本节中所述的组合物可以进一步包含γ-亚麻酸或其衍生物 (C-γ18:3)或DH-γ-亚麻酸(C-DH-γ20:3)或它的衍生物。

如上文所述，ω-3脂肪酸单元浓度相对较高的油是有利的食品成分。 可以将本发明的方法用于从含有至少一种具有4个或更多碳-碳双键的多不 饱和脂肪酸或其衍生物、例如十八碳四烯酸的含油种子中，基于所述组合 物中脂肪酸总重量以大于约0.4、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、 12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、 28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、 44或45wt％或更大的量提取油，所述组合物具有小于约0.1、0.2、0.3、0.4、 0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、 2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9或3.0的茴香胺值。优选 地，经提取的含油种子是包含与所述油组合物相似的SDA和脂肪酸总含量 的比例的种子。因此，整个种子中的SDA含量是其脂肪酸总浓度的至少约 0.4wt％。此外，整个加工期间油中的SDA含量基于所述组合物中脂肪酸 总重量是至少约0.4、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、 14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、 30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40wt％。

在另一实施方案中，加工期间或之后整个种子或油组合物具有基于所 述组合物中脂肪酸总重量至多约18、19、20、21、22、23、24、25、30、 35或40wt％亚油酸(LA，C18:2n6)含量，以及基于所述组合物中脂肪酸 总重量至少约0.4、5、10、15、20、25、30、35、40或45wt％的SDA含 量。注意在这些组合物或本节所述的任意其他SDA组合物中，可以使另一 种具有4个或更多碳-碳双键的多不饱和脂肪酸或其衍生物替代SDA。

作为选择，油组合物在加工期间或之后具有基于所述组合物中脂肪酸 总重量至少约0.4wt％的SDA含量，以及在加工期间或之后具有至多约0.5、 0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9或2 的AV。在特定的实施方案中，所述油组合物是经过精制、漂白和除味的 (RBD)油组合物，其具有基于所述组合物中脂肪酸总重量至少约0.4wt％ 的SDA含量以及至多约0.1、0.2、0.3、0.4或0.5的AV。

在另一实施方案中，所述RBD油具有基于所述组合物中脂肪酸总重 量至少约0.4wt％的SDA含量以及110℃下至少约0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、 1、1.1、1.2、1.3、1.4或1.5小时的OSI。

此外，在I.B节中所述的油组合物可以源自除了黑加仑油、琉璃苣油、 蓝蓟油、月见草油、醋栗油、大麻油或红加仑油以外的植物油。此外，所 述油组合物可以源自除了鱼油(例如油鲱、沙丁鱼、金枪鱼、鳕鱼、鲭鱼、 鲱鱼)、海藻油或其他海产油以外的油。产生具有4个双键以上的油的藻 类包括金藻、crytophyte、硅藻(diatoms)和腰鞭毛虫(Behrens和Kyle， 1996：J.Food Lipids，3：259-272)，包括源自隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)、菱形藻(Nitzchia sp)、微绿球藻(Nannochloropsis)、舟形藻 (Navicula sp.)、三角褐指藻(Phaedactylum)、紫球藻(Porphyridium) 和裂壶藻(Schizochytrium)的油。另外，在I.B节中所述的油组合物可以 源自转基因拟南芥(Arabidopsis)、油菜、胡萝卜、椰子、谷物、棉花、 亚麻、亚麻仁、玉米、棕榈仁、花生、马铃薯、油菜籽、红花、大豆、向 日葵和/或烟草。最后，上述油组合物可以是未经漂白的油。

如上所述，人类可以通过Δ6-去饱和途径从亚油酸和α-亚麻酸合成ω-6 和ω-3多不饱和脂肪酸，以分别获得γ-亚麻酸和十八碳四烯酸。进一步的 脂肪酸延长及去饱和步骤产生花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯 酸。用于AA和EPA生物合成的可供选择的途径在一些有机体中进行。这 里，LA和ALA首先特定地分别延长至二十碳二烯酸(EDA，C20:2ω6) 和二十碳三烯酸(EtrA，C20:3ω3)。随后，这些产物的Δ8和Δ5去饱和 产生AA和EPA。

DHA和EPA也可以通过聚酮化合物合酶(PKS)途径从丙二酰基-CoA 前体合成。Yazawa，Lipids(1996)31，S297-S300。

近来的报道证明在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中用于多不饱和脂 肪酸合成的这些Δ8-去饱和途径的重构，以及通过分别转移和表达三种基 因编码，来自等鞭金藻Isochrysis galbana的Δ9-特定延长活性(IgASE1) (Qi等，FEBS Lett.(2002)510，159-165)、来自小眼虫(Euglena gracilis) 的Δ8-去饱和酶(EuΔ8)(Wallis and Browse，Arch.Biochem.Biophys.J. (1999)365，307-316)以及来自高山被孢霉(Mortiereila alpina)的Δ5- 去饱和酶(MortΔ5)(Michaelson等，J.Bio1.Chem.(1998)273， 19055-19059)，在转基因植物中AA和EPA的可察觉量的累积(Qi等， Nature Biotechno1.(2004)22，739-745)。另外，Abbadi等(Plant Cell (2004)16，1-15)已经报道了在转基因烟草(Nicotiana tabacum)和亚 麻仁(Linum usitatissimum)中成功的ω3和ω6多不饱和脂肪酸的种子特 定产生。Pereira等(Biochem.J.(2004)378(665-671))报道了在EPA 生物合成中涉及的ω-3脂肪酸去饱和酶。本发明的方法和组合物可用于从 按照上述列举的报道所生产的有机体中提取和/或稳定多不饱和脂肪酸。

本发明多种油中的一些可以从植物组织中提取，包括植物种子组织。 从中可以分离出多不饱和脂肪酸的植物包括具有天然含量的多不饱和脂肪 酸的植物以及经过遗传工程设计以显示提高含量的多不饱和脂肪酸的植 物。具有天然含量的多不饱和脂肪酸的植物的实例包括含油种子作物，如 油菜(canola)、红花和亚麻仁，以及诸如亚麻、月见草(Oenothera biennis)、 琉璃苣(Borago officinalis)和红加仑(Ribes nigrum)、毛束草 (Trichodesma)和蓝蓟的植物。某些苔藓，例如小立碗藓(Physcomitrella patens)，已知天然产生可以按照本发明的方法提取和纯化的多不饱和脂 肪酸。作为另一实例，本发明的方法可用于从例如用下列专利和专利申请 的组合物和方法制成的植物和/或重组体植物(包括例如拟南芥、油菜、胡 萝卜、椰子、谷物、棉花、亚麻、亚麻仁、玉米、棕榈仁、花生、马铃薯、 油菜籽、红花、大豆、向日葵、烟草以及它们的混合物)中提取和/或稳定 多不饱和脂肪酸(包括例如十八碳四烯酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯 酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、二高-γ-亚麻酸、二十二碳五烯酸和十八碳四 烯酸)：US 6,677,145；6,683,232；6,635,451；6,566,583；6,459,018；6,432,684； 6,355,861；6,075,183；5,977,436；5,972,664；5,968,809；5,959,175；5,689,050； 5,614,393；5,552,306和5,443,974，以及WO 02/26946；WO 98/55625； WO 96/21022，以及美国专利申请序号20040078845；20030196217； 20030190733；20030177508；20030163845；20030157144；20030134400； 20030104596；20030082754；20020138874和20020108147(该在先参考文 献通过引用并入本文)。

其他油组合物可以从真菌中提取。从中可以分离出多不饱和脂肪酸的 真菌包括具有天然含量的多不饱和脂肪酸的真菌以及经过遗传工程设计以 显示提高含量的多不饱和脂肪酸的真菌。例如，本发明的方法可用于从例 如用下列专利和专利申请的组合物和方法制成的真菌和/或重组体真菌(包 括例如酵母菌(Saccharomyces)(包括中发酵度酿酒酵母(S.Cerevisiae) 和卡尔酵母(S.Carlsbergensis))、假丝酵母(Candida spp.)、小克银汉 霉(Cunninghamella spp.)(包括雅致小克银汉霉(C.Eiegans)、短刺小克 银汉霉(C.Biakesleegna)和刺孢小克银汉霉(C.Echinulate))、油脂酵母 (Lipomyces starkey)、解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)、克鲁维氏 酵母(Kluyveromyces spp.)、汉逊酵母(Hansenula spp.)、曲霉(Aspergillus spp.)、青霉(Penicillium spp.)、脉孢霉(Neurospora spp.)、细丝水 霉(Saprolegnia diclina)、木霉(Trichoderma spp.)、枝霉(Thamnidium elegans)、毕赤酵母(Pichia spp.)、腐霉菌(Pythium spp.)(包括终极 腐霉(P.Ultimum)、德巴利腐霉(P.Debaryanum)、畸雌腐霉(P.Irregulare) 和凋萎腐霉(P.Insidiosum)、破囊壶菌(Thraustochytrium aureum)以及被 孢霉(Mortierella spp.)(包括长孢被孢霉(M.Elongata)、微小被孢霉(M. Exigua)、喜湿被孢霉(M.Hygrophila)、拉曼被孢霉(M.Ramanniana)、拉 曼被孢霉的变种(M.ramanniana var.Angulispora、M.ramanniana var. Nana)、高山被孢霉(M.Alpina)、深黄被孢霉(M.Isabellina)和葡酒色被孢 霉(M.vinacea)))中提取和/或稳定多不饱和脂肪酸(包括十八碳四烯酸、 二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、二高-γ-亚麻酸、 二十二碳五烯酸和十八碳四烯酸)：US 6,677,145；6,635,451；6,566,583； 6,432,684；6,410,282；6,355,861；6,280,982；6,255,505；6,136,574；5,972,664； 5,968,809；5,658,767；5,614,393；5,376,541；5,246,842；5,026,644；4,871,666 和4,783,408；以及WO 02/26946；以及美国专利申请序号20040078845； 20030196217；20030190733；20030180898；20030177508；20030163845； 20030157144；20030104596；20030082754；20020138874；20020108147 和20010046691(该在先的参考文献通过引用并入本文)。

另外的油组合物可以从微生物中提取。从中可以分离出多不饱和脂肪 酸的微生物包括具有天然含量的多不饱和脂肪酸的微生物以及经过遗传工 程设计以显示提高含量的多不饱和脂肪酸的微生物。所述微生物包括细菌 和蓝细菌。例如，本发明的方法可用于从例如用下列专利和专利申请的组 合物和方法制成的微生物和/或重组体微生物(包括例如埃希氏菌、蓝细菌、 乳酸杆菌和枯草杆菌)中提取和/或稳定多不饱和脂肪酸(包括十八碳四烯 酸、二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、二高-γ-亚 麻酸、二十二碳五烯酸和十八碳四烯酸)：US 6,677,145；6,635,451； 6,566,583；6,432,684；5,972,664；5,614,393和5,552,306，和WO 02/26946， 以及美国专利申请序号20040078845；20030180898；20030177508； 20030163845；20030157144；20030104596；20030082754；20020138874； 20020108147和20010046691(该在先的参考文献通过引用并入本文)。

另外，可以从藻类中提取油组合物。从中可以分离出多不饱和脂肪酸 的藻类包括具有天然含量的多不饱和脂肪酸的藻类以及经过遗传工程设计 以显示提高含量的多不饱和脂肪酸的藻类。具有天然含量的多不饱和脂肪 酸的藻类的实例包括三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)、隐甲藻 (Crypthecodinium cohnii)、巴夫藻(Pavlova)、等鞭金藻(lsochrysis galbana)和破囊壶菌(Thraustochytrium)。例如，本发明的方法可用于 从例如用下列专利和专利申请的组合物和方法制成的藻类和/或重组体藻 类中提取和/或稳定多不饱和脂肪酸(包括十八碳四烯酸、二十二碳六烯酸、 二十碳五烯酸、γ-亚麻酸、花生四烯酸、二高-γ-亚麻酸、二十二碳五烯酸 和十八碳四烯酸)：US 6,727,373；6,566,583；6,255,505；6,136,574；5,972,664； 5,968,809；5,547,699和5,407,957，以及美国专利申请序号20040168648； 20030180898；20030177508；20030163845；20030134400和20010046691 (该在先的参考文献通过引用并入本文)。

C.高PUFA籽油的稳定化

在增强未添加稳定化合物的油组合物的氧化稳定性的同时，油组合物 还可包含稳定剂。通常向油组合物中加入稳定剂以延长引发阶段和推迟增 长阶段的开始。与未添加稳定剂的油的增殖相相比，稳定剂可使增殖相延 缓大约15倍或更高。取决于特定稳定剂的特性，这些化合物可以具有不同 的作用模式。一些稳定剂螯合金属或者与油的三酰甘油酯相互作用并提高 油的氧化速度的其它催化物质。另外的稳定剂作为抗氧化剂分子起作用并 且与可将甘油三酸酯的脂肪酸氧化成过氧化物(反过来，其氧化其它脂肪 酸，如上面I.A.部分所详细描述)的自由基反应。

示例性稳定剂可包括2，4，5-三羟基丙基苯基酮、2，6-二叔丁基苯酚、3，4- 二羟基苯甲酸、3-叔丁基-4-羟基苯甲醚、4-羟甲基-2，6-二叔丁基苯酚、6- 乙氧基-1，2-二氢-2，2，4-三甲基喹啉、阿诺克索牟抗氧剂(anoxomer)、抗 坏血酸、抗坏血酸棕榈酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯、β-阿朴-8′-胡萝卜素酸、 β-胡萝卜素(β-Caraotent)、丁基化羟基苯甲醚(BHA)、丁基化羟基甲 苯(BHT)、咖啡酸、抗坏血酸钙、乙二胺四乙酸钙二钠、角黄素、鼠 尾草酚、香芹酚、过氧化氢酶、没食子酸鲸蜡酯、绿原酸、柠檬酸、丁香 提取物、咖啡豆提取物、醋酸D-α-生育酚、硫代二丙酸二月桂酯、柠檬酸 二钠、EDTA二钠、DL-α-生育酚、醋酸DL-α-生育酚、没食子酸十二烷 基酯、没食子酸十二烷基酯、D-α-生育酚、乙二胺四乙酸、异抗坏血酸、 秦皮乙素(Esculetin)、七叶灵(Esculin)、乙氧基喹啉、没食子酸乙酯、 乙基麦芽醇(ethylmatol)、桉树提取物、阿魏酸、类黄酮(特征为：碳主 链如C6-C3-C6，两个芳环一般通过三碳脂族链连接，其通常缩合形成吡喃 或者较少不常见地形成呋喃环)、黄酮(如芹菜素、白杨素、木犀草素)、 黄酮醇(例如橡精、Nyricetin、Daemfero)、黄烷酮、查尔酮、秦皮素、 富马酸、龙胆提取物、葡糖酸、葡糖氧化酶、对羟基苯甲酸庚酯(heptyl paraben)、橙皮素、羟基肉桂酸(Hydroxycinammic acid)、羟基戊二酸、 羟基对羟苯基乙醇(Hydroxytryrosol)、柠檬酸异丙酯、卵磷脂、柠檬汁 固体、柠檬汁、L-酒石酸、叶黄素、番茄红素、苹果酸、麦芽酚、没食子 酸甲酯、对羟基苯甲酸甲酯(methylparaben)、桑色素、N-羟基琥珀酸、 去甲二氢愈创木酸、没食子酸辛酯、p-香豆酸、磷脂酰胆碱、磷酸、p-羟 基苯甲酸、植酸(肌醇六磷酸酯)、多香果取物、亚硫酸氢钾、乳酸钾、焦 亚硫酸钾、无水酒石酸钾钠、没食子酸丙酯、焦磷酸盐(酯)、槲皮素、米 糠提取物、迷迭香提取物(RE)、迷迭香酸、蒿属植物提取物、芝麻酚、芥 子酸、抗坏血酸钠、抗坏血酸钠、异抗坏血酸钠、异抗坏血酸钠、连二磷 酸钠、连二磷酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠五水合物、三聚 磷酸钠(sodium tryphophate)、豆粉、琥珀酸、蔗糖、丁香酸、酒石酸、 叔丁基氢醌(TBHQ)、麝香草酚、生育酚、醋酸生育酚、生育三烯酚、反 式白藜芦醇、对羟苯基乙醇、香草酸、麦胚芽油、玉米黄质、α-萜品醇和 其组合。

完成了一系列研究(参见实施例1-3)以确定用于本发明油组合物的第 一位的稳定剂以及稳定剂组合。这些稳定剂可选自柠檬酸(CA)、抗坏血 酸棕榈酸酯(AP)、叔丁基氢醌(TBHQ)、没食子酸丙酯(PG)及其组合。 在多种实施方案中，油中的稳定剂是CA、TBHQ及其组合。在多个备选 实施方案中，油中的稳定剂是AP、PG及其组合。在另外优选的实施方案 中，油中的稳定剂是

柠檬酸以大约1ppm至大约100ppm、优选大约20ppm至大约80 ppm、更优选大约40ppm至大约60ppm的浓度加入到油组合物中。抗坏 血酸棕榈酸酯以大约50ppm至大约1000ppm、优选大约100ppm至大约 750ppm、更优选大约400ppm至大约600ppm的浓度加入到油组合物中。 TBHQ以大约10ppm至大约500ppm、优选大约50ppm至大约200ppm、 更优选大约100ppm至大约140ppm的浓度加入到油组合物中。没食子酸 丙酯以大约10ppm至大约120ppm、优选大约50ppm至大约120ppm、 更优选大约100ppm至大约120ppm的浓度加入到油组合物中。两种或更 多种这些稳定剂的组合将具有如上范围的每一稳定剂。

在这些研究种子的一些中，使用了采用一种新型薄膜IR法的加速老 化法。确定油的氧化能力的这种方法包括在惰性环境下制备油组合物；将 所述油组合物层放在红外线板上以形成经处理的红外线板；将经处理的红 外线板放在惰性环境中达到足够的时间以使得该层具有实质上均匀的厚 度；将具有厚度实质上均匀的层的红外线板暴露于空气中；以及定期采集 所述油组合物的红外光谱。该方法的特定方面更加详细地描述于实施例3 中。在该方法的多种实施方案中，在采集红外光谱之间将具有厚度层实质 上均匀的红外线板储存于约25℃至约80℃、优选约50℃至约70℃、甚至 更优选约55℃至约65℃。在该方法的另外方面，间隔约12小时至约36 小时、优选约24小时采集红外光谱。

本发明的另一方面是降低油类茴香胺值(AV)的方法。茴香胺值是用于 成功配制食品产品中具有高不饱和含量的易氧化油使其油稳定性最大化的 重要参数。降低AV大于1的精制、漂白、除味油(RBD油)的AV的新方 法已经公开并且更加详细地描述于下以及实施例4中。通常，方法包括用 能够与油组合物内醛和/或酮结合的AV降低剂处理油组合物，以及物理分 离AV降低剂和油组合物以从油组合物中除去与AV降低剂结合的醛和/或 酮和降低AV。AV降低剂包含附着在能够与所述油组合物物理分离的支持 物上的胺。

降低RBD油中AV的该方法采用了当过氧化物和氢过氧化物分解时 RBD油中非挥发性醛和酮的独特功能性。具体而言，非挥发性醛和酮通 过缩合反应与胺反应形成取代亚胺(取代亚胺有时称作席夫碱)。通过将胺 连接在能与油组合物物理分离的支持物上可将醛和酮从油组合物中去除。 在多种实施方案中，该支持物是不溶性支持物或宏观支持物(macroscopic support)。反应一旦完成，非挥发性醛和酮(此时以取代亚胺的形式)可通 过过滤从油中物理分离，因为它们连接至不溶性支持物上。

上述方法可用于从多种油中，如植物油、鱼油、石油、食用油、油炸 用油、涂覆油及其组合中去除醛和酮。

本方法除了适用于多种油以外，还适宜使用多种胺和支持材料。例如， 胺可以是脂肪胺或芳族胺，优选地，所述胺是芳族胺。支持物可以选自多 种不溶性微粒，包括聚苯乙烯、苯乙烯-二乙烯基苯共聚物、聚乙二醇-聚 苯乙烯接枝聚合物、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、聚丙烯酰胺-PEG共聚物、 二氧化硅、多糖和其组合。在多种优选实施方案中，支持物包括聚苯乙烯， 特别是聚苯乙烯树脂珠。

该处理方法可在油精制过程中的任何步骤采用。树脂可再生或者使用 后丢弃。优选地，树脂被再生；这可通过用热酸水水解突出的亚胺实现。 该种再生允许树脂干燥并且可用于去除更多非挥发性醛和酮。取代亚胺的 形成和树脂的再生可在填充塔或搅拌釜式反应器中进行。

D.高PUFA籽油的感官特性

通常，本发明的含SDA油具有低的总体感受。因此，本发明的另一个 方面是包含至少约0.4、1、2、4、6、8、10、12、14、15、16、17、18、 19、20wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重量)或更高的至少一种多 不饱和脂肪酸(具有4个或更多个碳-碳双键)或其衍生物的油组合物，组合 物具有最高可达约2.5的香味总影响分，其中总影响通过标准感观评估法 确定。

另一个方面是包含至少约0.4、1、2、4、6、8、10、12、14、15、16、 17、18、19、20wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重量)或更高的至 少一种多不饱和脂肪酸(具有4个或更多个碳-碳双键)或其衍生物的油组合 物，组合物具有最高可达约2.5的芳香/香味总影响分，其中总影响通过标 准感观评估法确定。

本发明的油除了具有低的总影响之外，还具有低的鱼腥和/或池塘/海藻 气味。因此，进一步的方面是包含至少约0.4、1、2、4、6、8、10、12、 14、15、16、17、18、19、20wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重 量)或更高的多不饱和脂肪酸(具有4个或更多个碳-碳双键以及18个和 更少碳原子)或其衍生物的油组合物，所述组合物具有最高可达约0.5、1、 1.5、2、2.5、3、3.5、4或4.5的鱼香味分(fishy aroma score)，其中鱼 香味通过标准感观评估法确定。

本发明的另一方面是包含至少约0.4、1、2、4、6、8、10、12、14、 15、16、17、18、19、20wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重量)或 更高的多不饱和脂肪酸(具有4个或更多个碳-碳双键以及18个和更少碳原 子)或其衍生物的油组合物，组合物具有最高可达约0.5、1、1.5、2、2.5 的混合的鱼味/腥味分，其中混合的鱼味/腥味通过标准感观评估法确定。

本发明的另一方面是包含少于约1、5、10、12、14、16、18、20、22、 24、26、28、30、32、34wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重量)的 多不饱和脂肪酸(具有6个碳-碳双键以及22个碳原子)或其衍生物的油组合 物，所述组合物具有最高可达0.5、1、1.5、2、2.5的腥味分，其中腥味通 过标准感观评估法确定。

此外，随着时间的延长，本发明油组合物的品质没有显著的变化。例 如，包含至少大约0.4、1、2、4、6、8、10、12、14、15、16、17、18、 19、20wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重量)或更高的多不饱和脂 肪酸(具有4个或更多个碳-碳双键)或其衍生物的油组合物，当比较评估开 始时的油与储存长达约1、2或更多个月的同一油时香味总影响分差异小于 约0.5或1.0。

另一个方面是包含至少约0.4、1、2、4、6、8、10、12、14、15、16、 17、18、19、20wt％(基于组合物中脂肪酸或其衍生物总重量)或更高的至 少一种多不饱和脂肪酸(具有4个或更多个碳-碳双键)或其衍生物的油组合 物，当比较评估开始时的油与储存长达约1、2或更多个月的同一油时气味 /风味总影响分差异小于约0.5或1.0。

对于上述的多个方面中的每一个，油组合物可以被稳定化或未加稳定 化。稳定化的油组合物更加描述于上面。

II.生产油组合物的方法

一般而言，将下列步骤用于加工种子油：预备、破裂和脱壳、调节、 研磨、成片或压榨、提取、脱胶、精制、漂白和除味。这些步骤各自会在 以下更详细地叙述。该讨论详述了目前商业应用中所用每一步的过程。普 通技术人员会理解所述步骤可以进行组合、以不同顺序使用或者进行变换。

通常，预备步骤包括最初的清洁过程，其除去石块、泥土、枝条、幼 虫、昆虫、金属碎片、以及在种子收获和储存期间聚集的其他碎屑。上述 外来物质会通过包含负面影响其化学稳定性的化合物而影响最终种子油的 品质。优选地，使用叶绿素含量降低以及游离脂肪酸含量降低的成熟的、 未破裂种子。

在预备步骤之后，使种子破裂并脱壳。破裂和脱壳可以用所属领域中 已知的多种方法实现。例如，可以用种子破裂机(seed cracker)使种子破 裂和脱壳，其机械地使种子破裂并脱去外壳和直接将里面的种子肉暴露于 空气中。在破裂后，可以通过脱壳机使外壳与种子肉分开。一方面，由于 外壳和种子之间的密度差异，脱壳机可以使外壳与种子肉分离；外壳不像 种子肉那么致密。例如，抽吸会使外壳与破裂的种子肉分开。脱壳可降低 粗纤维含量，同时增加被提取的种子肉的蛋白质浓度。任选地，在脱壳后， 可以将外壳筛分以回收种子破裂期间生成的细料。回收后，可以将该细料 加回到调节之前的种子肉中。

一旦使得种子破裂，可以任选地使种子肉的氧气暴露最小化，这将减 少油氧化以及改善油品质。此外，本领域技术人员会理解氧气暴露的最小 化可以在每一个随后所述的含油种子加工步骤中独立地发生。

一旦使种子破裂并脱壳，将它们进行调节以使种子肉在进一步加工之 前变柔软。此外，所述调节使得油体裂开。通过在该阶段获得柔软的种子 肉使得就成片、磨碎或其他研磨技术而言的进一步加工更容易。通常，使 得种子肉除去或添加湿分以达到6-10wt％湿分含量。如果除去湿分，该过 程称作烘烤，如果加入湿分，则该过程称作蒸煮(cooking)。通常，用蒸 气将种子肉加热至40-90℃，该蒸气根据该种子肉的湿分含量的调节方向是 干燥的或是湿润的。在一些情形中，在使氧气暴露最小化的条件下或者对 于PUFA含量高的种子而言在较低温度下进行调节步骤。

一旦使种子肉经过调节，可以将它们研磨成所需的粒度或成片至所需 的表面积。在某些情况下，成片或研磨在使氧气暴露最小化的条件下进行。 进行成片或研磨以增加种子肉的表面积，以及同样使得油体裂开，由此促 进更有效的提取。许多研磨技术是适宜的而且在本领域中是已知的。选择 研磨方法和磨碎种子的粒度时的考虑因素视该种子的含油量以及所需的种 子肉或种子的提取效率而定，但是不限于此。当使种子肉成片时，片体通 常约0.1-约0.5mm厚；约0.1-约0.35mm厚；约0.3-约0.5mm厚；或者约 0.2-约0.4mm厚。

任选地，在研磨种子肉之后，可以将它们压榨。通常，当种子肉的含 油量大于该种子的约30wt％时，压榨种子肉。然而，可以压榨具有更高或 更低含油量的种子。可以例如在液压机或机械螺杆中压榨种子肉。通常， 在工作物输入后将种子肉加热到小于约55℃。当压榨时，使种子肉中的油 挤压通过筛网，收集并进行过滤。经收集的油是初榨油。将来自压榨后的 种子肉称作油饼；该油饼含油而且可以进行溶剂提取。

在研磨、成片或任选的压榨之后，可以通过使种子肉或油饼与溶剂接 触从中提取出油。优选地，在提取步骤中将正己烷或异己烷用作溶剂。通 常，使溶剂在与油接触之前脱气。可以用本领域中已知的多种方法进行提 取。例如，提取可以是间歇或连续的工艺，理想地是连续的逆流工艺。在 连续的逆流工艺中，溶剂与种子肉接触，将油滤取入该溶剂中，提供越来 越浓的油与溶剂混合物(即溶剂-油)，同时使榨渣(marc)(即溶剂-固 体)与降低浓度的油与溶剂混合物接触。在提取后，用本领域已知的方法 从油与溶剂混合物中除去溶剂。例如，可以将蒸馏、旋转蒸发或升膜蒸发 器和汽提机用于除去溶剂。在溶剂除去后，如果粗制油仍然含有残留溶剂， 可以将它在约95℃和约60mmHg下加热。

上述经加工的粗制油包含可水合的和不可水合的磷脂。因此，通过加 水以及根据磷脂浓度加热至约40～约75℃大约5-60分钟，使该粗制油脱胶 以除去可水合的磷脂。任选地，可以加入磷酸和/或柠檬酸以使不可水合的 磷脂转化成可水合的磷脂。磷酸和柠檬酸形成金属络合物，这可降低与磷 脂结合的金属离子的浓度(金属络合的磷脂是不可水合的)，因而将不可 水合的磷脂转化成可水合的磷脂。任选地，在与水一起加热后，可以使该 粗制油和水混合物离心分离以将油和水分开，接着除去含有可水合磷脂的 水层。通常，如果在脱胶步骤中加入磷酸和/或柠檬酸，使用约1wt％-约 5wt％、优选约1wt％-约2wt％、更优选约1.5wt％-约2wt％。任选地通过 在使水和磷酸与油接触之前脱气而进行该加工步骤。

此外，粗制油包含游离脂肪酸(FFAs)，其可以通过化学(如苛性碱) 精制步骤除去。当FFAs与碱性物质(如苛性碱)反应时，它们形成能够 提取进入水溶液中的皂类。因而，将粗制油加热至约40-约75℃以及在搅 拌下加入NaOH并进行反应约10-45分钟。接着停止搅拌，然而继续加热， 除去水层以及处理被中和的油以除去皂类。通过水洗该油直至水层具有中 性的pH为止，或者通过用二氧化硅或离子交换材料处理所述被中和的油， 对所述油进行处理。在约95℃和约10mmHg下干燥该油。在一些情形中， 在将苛性碱溶液与油接触之前对其进行脱气。

作为选择，可以通过物理精制除去FFAs，而不是通过化学精制从油中 除去FFAs。例如，在除味期间可以物理精制该油。进行物理精制时，通过 在低压和相对较高的温度下进行真空蒸馏，从油中除去FFAs。通常，FFAs 具有比甘油三酸酯更低的分子量，因而FFAs通常具有较低的沸点，以及 基于该沸点差异和借助于用作共沸物或载气以从除味机中吹扫出挥发物的 氮气或蒸汽汽提，可以使其从甘油三酸酯中分离。

通常，当进行物理精制而不是化学精制时，改变油加工条件以达到相 似的成品规格。例如，当在脱胶步骤中使用酸性水溶液时，由于较高浓度 的不可水合的磷脂(其否则可以在化学精制步骤中除去)，可能需要更高 浓度的酸(例如，直至高出约100％的浓度，优选高出约50％-约100％的 浓度)。另外，使用更大量的漂白材料(例如，直至高出约100％的量， 优选高出约50-约100％的量)。

在漂白之前，可以将柠檬酸(50wt％溶液)以约0.01wt％-约5wt％的 浓度加入到经脱胶的油和/或经化学精制的油中。然后可以在约35℃-约65 ℃的温度和约1mmHg-约760mmHg的压力下加热该混合物约5-约60分 钟。

对经脱胶的油和/或经化学精制的油进行吸附处理(如漂白)以除去过 氧化物、氧化产物、磷脂、角衣片、chlorphyloid、有色物体(color body)、 金属以及在碱炼步骤或其他加工步骤中形成的残留皂类。漂白处理包括将 经脱胶的油或经化学精制的油在约0.1mmHg～约200mmHg的真空下加热 并加入适于除去上述提及的物种的漂白材料(例如中性土(通常称作天然 粘土或漂白土)、酸活化土、活化粘土和硅酸盐)和助滤剂，随之将该混 合物加热到约75-125℃并将漂白材料与经脱胶的油和/或经化学精制的油 接触约5-50分钟。可以有利地使漂白材料在其接触所述经精制的油之前脱 气。所用漂白材料的量是约0.25wt％-约3wt％，优选约0.25wt％-约 1.5wt％，以及更优选约0.5wt％-约1wt％。加热后，对漂白油或者精制、 漂白油进行过滤和除味。

将漂白油或者精制、漂白油进行除味以除去具有强烈气味和风味的化 合物以及残留游离脂肪酸。通过在升高的温度下热漂白可以进一步减轻油 的颜色。可以通过多种技术进行除味，包括间歇和连续的除味单元如间歇 搅拌罐反应器、降膜蒸发器、刮膜蒸发器、填充塔除味器、塔板型除味器 和回路反应器。通常，优选连续的除味工艺。通常，除味条件在约160-约 270℃和约0.002-约1.4kPa下进行。对于连续工艺，特别是在具有用于油 横穿的连续塔板的连续除味器中，优选在约170℃-约265℃的温度下至多2 小时的停留时间；在约240℃-约250℃的温度下至多约30分钟的停留时间。 除味条件可以使用载气以除去挥发性化合物(例如蒸汽、氮气、氩气或不 会降低所述油的稳定性或品质的任何其他气体)。

此外，当采用物理精制而不是化学精制时，在除味步骤中除去更大量 的FFAs，以及改变除味器条件以促进游离脂肪酸的除去。例如，将温度提 高约25℃；可以在约165℃-约300℃的温度下对油除味。特别地，可以在 约250℃-约280℃或者约175℃-约250℃的温度下对油除味。另外，所述 油在除味器中的保留时间增加直至约100％。例如，保留时间可以小于约1、 5、10、30、60、90、100、110、120、130、150、180、210或240分钟。 另外，可以将除味器压力降低至小于约3×10-4、1×10-3、5×10-3、0.01、 0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09或0.1kPa。除味步骤产生 经精制、漂白和除味的(RBD)油。

任选地，通过部分氢化和/或通过添加稳定剂或者通过最大限度地减小 帮助保持油稳定性和品质的微量组分的除去或降解，可以稳定RBD油。 部分氢化通过减少所述油包含的脂肪酸中的双键数目以及从而降低该油的 化学反应性而使油稳定。然而，部分氢化会增加不希望的反式脂肪酸的浓 度。

稳定剂一般用于截取氧化过程中形成的自由基。自由基被稳定剂的截 取使油的氧化减缓，该自由基变成更稳定的自由基或者重排变成稳定的分 子，氧化减缓的原因在于可氧化更多脂肪酸单元的高度反应性的自由基的 浓度降低。

对于第II部分中的各个上述步骤，任选地在每一步中使对氧的暴露最 小化，任选地使对热的暴露最小化，任选地使对UV光的暴露最小化以及 任选地在加工之前、期间或之后向种子肉或种子油中加入稳定剂。用于制 备本发明油的这些和其他工艺改进在代理人卷号MTC 6921.201(38-21 (53354C))、2005年11月4日提交的题为“油组合物的制备方法”的 美国专利申请No.＿＿中得到描述和举例说明，其通过引用全部并入本 文。

III.油组合物的处理和储存

通常，当储存油组合物时，最大限度地减小脂肪酸的进一步氧化是有 利的。一种氧化剂是纯态氧，其通过光和光敏剂产生。纯态氧以大于三线 态氧的数量级的速率反应。因此，一种最大限度地减小进一步氧化的方法 是将所述油储存在暗处或者实质上不透明的容器中，将它们保持在适中的 温度下以及优选在惰性气体存在下保持。优选地，所述油具有稳定性特征， 其与储存条件和/或稳定剂匹配，并将抑制油的风味、气味、颜色等的逆转。

以上在第I部分中所述的油组合物通常具有有利的储存稳定性特征。 例如，在一种实施方案中，在运输或储存期间保持油的储存稳定性的方法 包括在约4-约45℃的温度下将第I部分中所述的油储存在容器中至少1个 月，其中所述油在储存后具有小于3的茴香胺值。在另一实施方案中，在 运输或储存期间保持油的储存稳定性的方法包括在约4-约45℃的温度下将 本发明的油储存在容器中至少1个月，其中储存期间所述油的茴香胺值的 绝对变化不大于约0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、 2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10、11、12、13、14、15、16、 17、18、19或20。此外，可以将油储存在无氧或氧气减少的氛围中。优选 地，可以将所述油在大约室温下储存；优选地，可以将所述油在大约室温 下储存约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月或更长。作为选择 地，可以将所述油在冷藏下储存至少1个月；此外，可以将所述油在冷藏 下储存约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12个月或更长。在另一实 施方案中，所述油源自除了海产油、例如鱼、藻类或磷虾以外的来源。在 本节方法的另一实施方案中，所述油源自除了黑加仑油、琉璃苣油、蓝蓟 油、月见草油、醋栗油、大麻油或红加仑油以外的植物油。

以上在第III部分中所述的方法可以进一步包括在储存之前或期间向 所述油中添加稳定剂。所述稳定剂可以包含至少一种络合剂或至少一种抗 氧化剂。在一种示例性实施方案中，所述稳定剂包括柠檬酸、TBHQ、抗 坏血酸棕榈酸酯、没食子酸丙酯、或者其衍生物或组合。

IV.食品

可以制备包括上面第一部分所述任何油组合物的食品。特别地，食品 组合物可以包含包括以下的食品或食品类似物：含喷雾干燥或冷冻干燥食 品颗粒、挤压食品、肉制品、肉类似物、谷类制品、零食、烘烤食品、健 康食品、油炸食品、乳制品、乳酪类似物、乳制品类似物、宠物食品、动 物饲料或农业饲料。在另一个实施方式中，所述食品为饮料；该饮料可以 是成人营养配方、婴儿营养型配方、果汁、乳饮料、豆奶、酸乳饮料、含 乳果汁饮料(smoothie)或可复原的干燥粉末如植脂末。另外，该食品可 以是营养增补剂、涂抹料、人造黄油、沙拉调味料、食用油、冷藏面制品、 微波爆米花、乳制品(如酸奶、奶酪、干乳酪、酸奶油或蛋黄酱)、烘烤食 品(如面包、卷状物、蛋糕、糕点、曲奇、松饼或饼干)、主菜、配菜、汤、 调味料、麦片、谷类、零食棒、营养棒或甜点。

用本发明方法制备的含四个或大于四个双键的油的优点在于它们的气 味和味道是温和的。它们还能在室温下储存一段时间，并保持味道和感官 性能。此外，它们还具有能冷藏并仍保持温和的优点。这些油还能用本领 域中公知的鱼油稳定的方法封装或冷冻。

在详细描述本发明后，显然在不超出本发明附加权利要求定义的范围内的 修改和变化的可以的。而且，可以理解本发明公开提供的实施例是非限定 性的实施例。

实施例

实施例1：油的加速老化

在丙二醇中制备每种稳定剂溶液。该溶液高涡流5分钟。在氮净化的 手套式袋子中，分别将适量的每种溶液加入到60cc琥珀色带盖玻璃瓶中的 2.5g(2.77ml)实验油中，形成混合物。然后将这些混合物高涡流1分钟。然 后将这些混合物的部分用塑料吸管移出，放入琥珀色小瓶中。

纯油的未加料样品也如上述制备(不加稳定剂)。每种稳定剂以下述浓度 加入：柠檬酸(CA)50ppm，棕榈酸抗坏血酸酯(AP)400ppm，叔丁基对苯二 酚(TBHQ)120ppm。

然后将小瓶(含纯油和掺稳定剂的油)敞开的空气中，直至小瓶顶部空间 充分交换。将小瓶重新盖上，然后在水浴中加热至55℃。取走样品，以不 同的时间间隔测出过氧化值。通常，样品在55℃下存放一天的老化相当于 样品在室温(～22-25℃)下存放10天的老化。具有20重量％SDA和用2005 年11月4日提交的题为“油组合物的制备方法”，代理标记no.MTC 6921.201(38-21(53354C))的美国专利申请系列No.＿＿的实施例45和 46中描述的工艺条件制备的实验油用上述协定老化。该老化研究的结果在 图1的图表中显示。评价有单独添加剂的三种油(CA、AP和TBHQ)和具 有二元添加剂的两种油(CA+AP和CA+TBHQ)。两天后，具有柠檬酸的 SDA油从引发阶段(IP)向传播阶段转变。图1显示AV对时间的图。该图 显示了相对于加入了CA的油，加入了棕榈酸抗坏血酸酯的油有较长的 IP(约8天)，加入TBHQ了的油具有较长的IP(10天)。加入了TBHQ的 油是加入稳定剂的该特定的油的最好的单品。

图1还显示了加入AP和CA及加入TBHQ和CA的油的氧化。加入 AP和CA的油显示的IP比只加入AP的油要短。加入TBHQ和CA的油 的IP是本试验中多种油中最长的。

实施例2：在55℃和25℃下的老化研究

本次研究包括的油为：20％SDA实验样品(TA)，在实验室规模和实验 工厂规模下生产，空白(null)为等值线(isoline)，因此，为SDA负数(2005 年11月4日公开的题为“油组合物的制备方法”，代理标记no.MTC 6921.201(38-21(53354C))的美国专利申请系列No.＿＿的实施例45和 46中描述的工艺条件制备的)，和对照豆油1。此外，将20％SDA油与对 照豆油1或空白油混合，得到4％SDA油混合。基于在55℃下以最少稳定 油开始的PV和AV对时间的这些油的稳定性的相对等级为：TA-Lab＜ TA-(PS)＜TA-PS与CA＜TA-Lab与CA＜＜混合4％(TA-PS空白)与CA＜ 混合4％(TA-PS加对照豆油1)与CA＜空白＜对照豆油1(参见图2)。 稳定性的相对等级通过比较PV或AV值与10相交的时间来测定。通常， 这是在从开始到传播阶段的开始的。在25℃下(参见图3)，这五种油有从 引发阶段到传播阶段的转变(通过AV)，相对于在55℃下得到的数据的相对 位置，它们显示明显的定性和定量上的相似性。

另一个在55℃下的加速老化的研究使用20％SDA加了柠檬酸 (50ppm)、棕榈酸抗坏血酸酯(400ppm)和TBHQ(120ppm)的实验样品。一 个样品中含这些量的所有三种稳定剂的混合物。此外，还包括作为调控剂 的商业鱼油产品如鱼油3(有TBHQ和维生素E)和鱼油4(有棕榈酸抗坏血 酸酯和微生物E)。为了进一步评价这些商业鱼油产品，将它们与对照豆油 1混合，产生相对SDA油的EPA+DHA生物等值。每消耗三个SDA分子， 产生一个EPA分子。因此，如果假定EPA、DPA和DHA的生物功效相同， 为了得到等量的EPA，必须要消耗大于EPA三倍的SDA。由于每种鱼油 和每种油用豆油稀释成了6.67重量％的溶液以与20重量％的SDA油直接 比较，因而测定Ω三脂肪酸的总量。图4显示了三种油的AV对时间的关 系。最初的AV结果显示用AP、TBHQ和AP、TBHQ和CA的混合物稳 定的20％SDA油比鱼油3和鱼油4，包括它们的生物等值稀释，具有更长 的引发阶段。

 相对％ 对照豆油1     鱼油3   鱼油4  C12:0  C14:0     9.03   7.29  C16:0 11.01     20.47   17.73  C16:1 0     12.38   6.97  C18:0 3.72     3.93   3.33  C18:1 n9 21.04     8.94   10.52  C18:1 n7     3.63   2.48  C18:2 55.32     1.64   1.42  C18:3 n6  C18:3 n3 6.43     1.76   1.2  C18:4n3     3.05   3.43  C20:0 0.32  C20:1 0.2     1.57  C20:5 n3     12.54   13.04  C22:0 0.36   1.58  C22:5 n3     2.57   16.76  C22:6 n3     12.55  C24:0

实施例3：IR薄膜氧化研究

油加速老化的方法和氧化稳定性的评估是采用在McGill大学(J.Am. Oil.Chem.Soc.，2003，80，635-41；J.Am.Oil.Chem.Soc.，2004，81，111-6)公 开的方法。使用该方法以在制备期间在空气中保护油和确保一致的膜厚度。 油膜在按在矩形纸板上的PTEE膜(聚四氟乙烯，如Teflon)上制备(便于 安装在IR分光计上)。纸板可从International Crystal Laboratories， Garfield，NJ，零件号码0006-7363购买。

用于实验的油制剂在手套箱中氩气下制备。通常，将0.2-0.5g置于小 瓶中，然后密封，从干燥箱中移走。每个样品至少标记于两个红外线板， 在薄纸上展开以避免污染。然后用人造纤维刷(不是骆驼毛)将一厚层油刷 于标记板上。由于Teflon支持膜有裂缝，因此一些油渗入在支持薄纸上。 为了避免过多的空气暴露，然后马上将板平放在箱子中的新薄纸上。将箱 子移至真空室中，立即抽空并填充氩气。在黑暗中，该板箱在真空室中保 持一晚上。在这期间，所有过多的油渗入到薄纸中得到一致厚度的油膜。

第二天，用Nicolet Model 550傅立叶转变红外分光计在Nicolet的 Omnic 4.1版软件包控制下得到每个板的红外光谱。然后将这些板在60℃ 的烤箱中垂直放置，注意不要让油膜与污染源接触。可以用其他温度，但 由于油中富含PUFA，60℃的温度导致的氧化率可以使氧化曲线在每天一 个光谱的充分精确度下测得。通常，每天测定油膜的红外光谱；进行32 次扫描，光谱范围400-4000cm-1。该光谱范围比想要的和使用的区域要宽， 使用它是因为它提供了一个更宽的基线。根据得到的光谱，用Omnic软件 的“自动基线校正”功能进行基线校正。当油氧化时，在3400cm-1产生宽 峰；这是由在过氧化基中O-H拉伸的吸光率引起的。还观察到与顺式碳- 碳双键有关的3011cm-1的C-H拉伸的吸光率的衰减，这对于确认是有用 的，但是氧化的定量程度通过积分过氧化峰得到。

为了过氧化峰的量，膜的厚度与CH2拉伸在2900cm-1的峰成比例。 通过将板水平放置在薄纸上过夜，通常得到在0.2和0.6之间的油膜的两个 CH2拉伸峰的最高能量的吸光率峰。为了在一致基础上比较光谱，使在基 线校正后及在积分前使光谱标准化，从而使该峰的吸光率为1.0。一旦最高 能量CH2拉伸峰标准化，对过氧化峰积分。为补偿基线弯曲，整个峰不积 分。用于这里出现的数据和下面的校准的最佳积分参数是基线在3222-3583 cm-1的积分和3251-3573cm-1的积分极限。

上述方法的校准如下。过氧化值标准系列通过在新瓶中混合氧化的 Wesson豆油和Wesson豆油制备。氧化的油通过加126gWesson豆油至 250mL圆底烧瓶中，再加入44mg硬脂酸铁(II)制备。该油在90℃油浴空 气喷射过夜(16小时)。油变成黄-棕色。油最后的重量为128g。一些硬脂酸 铁不溶解但粘附于烧瓶，当油转移时将其移走。滴定测试显示氧化的油的 PV为680meq/kg，新鲜的的Wesson豆油小于0.1meq/kg。两种油的混合 物用于制备上述分析的校准标准。

该方法只用于确定来自第一个样品过氧化值的变化。在该上下文中， 发现，

ΔPV(meq/kg)＝Δ面积*228.4

其中ΔPV为过氧化值的变化，Δ面积为峰面积的变化，由Omnic软件记 录。

上述方法用于确定本发明的加入稳定剂的油对于氧化的相对稳定性， 所述稳定剂选自棕榈酸抗坏血酸酯(AP)、丙基没食子酸(PG)、叔丁基对苯 二酚(TBHQ)及其混合物。在这些试验中，发现其他稳定剂推迟实验油的氧 化的效果没有上述稳定剂好，或者其他不允许用于食品。这些较差的效果 和非可用于食品的稳定剂为Carotino，来自Carotino，SDN，BDH(生育 三烯酚和胡萝卜素的混合物)，邻二氮杂菲，五乙烯六胺(PEH)，二乙醇胺 (DEA)，丁基化羟基甲苯(BHT)及其混合物。

研究显示用上述薄膜IR方法，稳定剂或稳定剂组合的效力顺序为(AP +PG)＞AP＞PG＞TBHQ～未处理油。该顺序与实施例1和2中的加速老 化数据有些不同，是因为在常规的老化研究中发现TBHQ是一种非常有效 的稳定剂。但是由于油薄膜的暴露条件，确定薄膜的氧化与散装油相比的 氧化相比很可能经历不同的机理。例如，薄膜油在60℃高温下的油的氧化 更类似，因此应提供与那些OSI数据类似的有关结果。为了验证这些假设， 对这些加入稳定剂的油进行OSI研究。OSI方法如上详述，并且确定OSI 值的一个方法为AOCS Cd 12b-92。

含加入所示稳定剂的20％SDA豆油的OSI值如下表所示，其中对大 部分样品作两种评价。

稳定剂包 OSI值 (在110℃下的hr) 无(对照) 0.50，0.50 120ppm TBHQ 1.80，1.85 120ppm没食子酸丙酯(PG) 2.75，2.85 200ppm抗坏血酸棕榈酸酯(AP) 3.45 200ppm AP+120 PG 4.75 500ppm抗坏血酸棕榈酸酯(AP) 5.80，6.15 500ppm AP+120 PG 7.50，7.85

从OSI数据看到，对OSI数据和对薄膜IR数据的效力顺序是一样的。 加入了PG和AP的20％SDA油组合物的薄膜IR数据的例子如图5所示。

实施例4

AV-降低树脂

用AV＝5.41的SDA菜籽油(canola oil)样品验证特殊树脂能降低油 中AV值的观点。向微量“Wheaton-型”RBF中加入10克油，并将其和 在具有真空能力的装置连接。每次试验向油中加入1克树脂。树脂#1为 2-(4-甲苯磺酰联胺)-乙基-功能化的硅胶，200-400目(Aldrich 552593-25g。 树脂#2是3-氨丙基-功能化的硅胶(Aldrich36，425-8)。然后将混合物在真空 下在系统中脱气。然后将油降低至110℃油浴中，用搅拌棒混合1小时。 将混合物冷却，用0.2um acrodisc过滤，送去分析。重复试验1，因此得 到两组AV值。

EXP# RESIN# AV RBD 对照样 无 5.41  1 1 0.69，0.75  2 2 0.65

实施例5

香味研究(感官研究1)的目的是定性富含SDA的豆油的香味。作为参 考构架，加工对照豆油(无种子油)和几种商业可得的豆油以及含Ω-3的鱼 油和海藻油的香味也都要实验。

香味/味道/口感研究(感官研究2)的目的是定性富含SDA的豆油的香 味、味道和口感。作为参考方案，加工对照豆油(无种子油)和几种商业可 得的豆油以及含Ω-3的鱼油和海藻油的香味、味道、口感也都要实验。

用Spctrum标准感觉评价对下面的实验油、对照油和比较油进行评 价。实验油1是15％富含SDA的RBD豆油(LGNBP739406615BJ9)；实 验油2是15％富含SDA的RBD豆油(LLNBP739406915CK1)；实验油3 是20％富含SDA的RBD豆油(LMNBP739406920AQ6)；实验油4是20％ 富含SDA的RBD豆油(LHNBP739406920BJ7)；实验油5是20％富含SDA 的RBD豆油(LEGLP050115725SN5)；实验油6是20％富含SDA的RBD 豆油(LTAGT050115759SN3)；实验油7是等值线对比RBD豆油 (LMAGT050115757SU0)；实验油8是15％富含SDA的RBD豆油 (LC739046615BX1)；实验油9是21％富含SDA的RBD豆油 (LZAGT050115759SJ9)；实验油10是含有柠檬酸的17％富含SDA的RBD 豆油(LHAGT050716475SO3)；实验油11是含有柠檬酸的17％富含SDA 的RBD豆油(LLAGT050716477SY1)；实验油12是含有柠檬酸的17％富 含SDA的RBD豆油(LEAGT050716481SU5)。对照油1是来自储存空白的 RBD豆油(LGAGT050115757SU9)；对照油2是来自储存空白的含有柠檬 酸的RBD豆油(LNAGT050716474SW4)；对照油3是来自储存空白的含有 柠檬酸的RBD豆油(LMAGT050816495SL7)。

对于感官研究1，用于比较的油组合物如下表所述。豆油1是商业生 产的豆油；豆油2是另一种商业生产的豆油；豆油3是另一种商业生产的 豆油；鱼油1是商业生产的鱼油；亚麻油1是商业生产的亚麻油；海藻油 1是商业生产的海藻油；海藻油2是另一种商业生产的海藻油。

  相对％   鱼油1   亚麻油1    海藻油1    海藻油2  豆油  3     豆油     2     豆油     1 C12:0 0 0  0.58  6.38  0     0 C14:0 7.43 0  12.62  17.74  0.09     0     0.08 C16:0 17.41 0  24.21  13.69  10.48     10.68     10.41 C16:1 9.18 5.03  0.83  2.55  0.09     0     0.09 C18:0 3.30 3.77  0.72  0.53  4.43     3.67     4.17 C18:1 n9 10.24 21.72  0.51  17.18  23.58     22.48     22.95 C18:1 n7 3.10 0  0  0  0     0     1.15 C18:2 1.79 17.07  0.85  0.88  51.61     53.99     52.30 C18:3 n6 0.43 0  0  0  0     0     0.00 C18:3 n3 1.06 51.31  0.18  0  5.07     8.68     7.39 C18:4 n3 3.36 0  0.34  0  0     0     0.00 C20:0 0.00 0.15  0.17  0.11  0.4     0.26     0.31 C20:1 2.56 0.22  0  0  0.14     0     0.17

PCT

 C20:5 n3 17.38 0 1.3 0 0     0  C22:0 0.00 0.13 0.17 0.13 0.29     0.25     0.33  C22:5 n3 2.03 0 0.26 0.31 0     0  C22:6 n3 10.05 0 36.0 40.15 0     0  C24:0 0.00 0 0 0 0     0     0.09

对于感官研究2，每种比较油如下表所示。比较油1是商业生产的RBD 豆油；比较油2是商业生产的RBD豆油；比较油3是商业生产的鱼油； 比较油5是商业生产的鲱鱼鱼油；比较油6是商业生产的鱼油；比较油7 是商业生产的海藻油；比较油8是商业生产的海藻油。

 相对  ％ 比较油 1 比较油 2 比较油 3 比较油 5 比较油 6 比较油 7 比较油 8  C12:0  C14:0 6.21 9.03 6.12 10.04 3.85  C16:0 10.62 11.17 13.09 20.47 12.24 23.27 35.83  C16:1 5.50 12.38 5.01  C18:0 4.35 4.06 3.59 3.93 3.31 1.20  C18:1 n9 21.51 20.82 6.11 8.94 5.4  C18:1 n7 1.20 1.18 1.98 3.63 2.02  C18:2 53.91 55.79 1.64 0.83  C18:3 n6 4.13  C18:3 n3 8.41 6.98 1.76  C18:4 n3 4.52 3.05  C20:0  C20:1 1.57 1.53  C20:5 n3 27.45 12.54 25.61 1.66  C22:0  C22:5 n3 2.57 3.95  C22:6 n3 24.38 12.55 16.66 43.15 46.47

所有实验油和对照油都置于200mL至1000mL的琥珀色带盖玻璃瓶 中。实验油和对照油在制备后立即氮气覆盖及冷冻。实验油和对照油在贮 藏时不打开。比较油从商业生产得到，在生产商的指导的5℃下或-20℃原 始包装下储藏。

用SpectrumTM Descriptive Analysis Method评价所述油(参考文献： Sensory Evaluation Techniques，第三版；Meilgaard，Morten；Civille，Gail Vance.；Carr，B.Thomas；CRC Press LLC，New York，1999；ISBN 0- 8493-0276-5)。测试小组由6-8个经油料评价训练的成员组成。每次实验会 议要同时集合所有小组成员。在室温升高后，用1/2至1盎司的试样进行 评价。

每个产品有所有成员同时评价。评价人员用0(未观察道)至15(极值) 的多数意见得分，评价和讨论总的效果和每个察觉的感官性能。将总效果 和每个描述符的评价用Study Director输入Sensory Ballot。香味性能包括 但不限制：混合的鱼腥/腥味、鱼腥味、腥味、蛋白质/饲料，涂料味、豆味 腥味、发酵味、花香味、坚果味、纸板味、新鲜味、草味、杂草味、植物 油、谷物芯和苯酚/塑料。味道性能包括但不限定有：鱼腥/腥混合味、鱼腥 味、腥味、蛋白质/饲料，涂料味、大豆腥味、发酵的、花香味、坚果味、 纸板味、新鲜味、草味、杂草味、植物油、谷物味、白蛋白、种子/坚果/ 南瓜和苯酚/塑料。基本味道在0至15的范围内进行性能评价：甜味、酸 味、咸味和苦味。化学感觉因素在0至15的范围内进行性能评价：涩味、 焦味、化学感觉。口感在0至15的范围内进行性能评价：粘性。没有评价 但观察和描述了余味。

实验油10至12，以及对照油2和3是新鲜油；它们在开始研究前的 两个月加工成RBD级。这些油在研究的第一实验阶段时测试。作为冷藏 稳定性实验的一部分，对实验油8和9进行评价。在研究开始约1年前对 实验油8进行处理，在-80℃下储藏直至研究开始。该油在研究的第一实验 阶段时测试。在研究开始约6个月前对实验油9和对照油1进行处理，在 -20℃下储存。该油在研究的第一实验阶段时测试。没有其他样品作为冷藏 稳定实验的一部分进行测试。

加速的稳定性实验样品在55℃下保存在温度可控的保温箱内(感官研 究1)。储藏稳定性实验样品在15℃下保存在温度可控的保温箱内(感官研 究2)。

下表显示了仅香味实验(感官研究1)的数据。

表：香味感观评价

    总影响     鱼味     腥味     涂料味     豆味     新鲜味     草味     植物/叶味 鱼油1     6.0     5.0     0.0     1.5     0.0     0.0     0.0     0.0 亚麻油1     4.0     0.0     0.0     0.0     2.0     0.0     0.0     2.5 藻类油2     3.8     0.0     3.8     0.0     0.0     0.0     0.0     0.0 藻类油1     3.0     0.0     3.0     0.0     0.0     0.0     0.0     0.0 实验油4：     3.3     0.0     0.0     2.0     1.2     0.0     0.0     0.0 豆油3     2.5     0.0     0.0     0.0     2.0     0.0     0.0     0.0 实验油2：     2.5     0.0     2.5     0.0     0.0     0.0     0.0     0.0 实验油3：     2.5     0.0     2.5     0.0     0.0     0.0     0.0     0.0 实验油5：     2.2     0.0     2.2     0.0     0.0     0.0     0.0     0.0 实验油1：     1.5     0.0     1.0     0.0     1.0     0.0     0.0     0.0 实验油6：     2.0     0.0     1.5     0.0     0.0     0.5     0.5     0.0 实验油7：     1.0     0.0     0.0     0.3     1.0     0.0     0.0     0.0 豆油1     1.0     0.0     0.0     0.0     1.0     0.0     0.0     1.0

下表显示香味/味道/口感实验(感官研究2)。

表：香味、风味和味道的感观评价

实验油8 在0月 实验油9在 0月和1月、 3月、4月于25℃   实验油10   在0月 实验油11 在0月   实验油12   在0月     对照油1在0月     和1月、2月、     3月于25℃   对照油2   在0月   对照油3   在0月 香味   总影响   1.2 1.8，1.5，5.5， 2.0(3.2)     1.0   1.7     3.5       1.2，1.2，1.2，1.2     1.0     0.8   鱼味/腥味复合   0.0 1.3，0.0，2.5， 1.0(1.0)     0.5   1.2     2.5       0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 鱼味 0.0 0.0，0.0，2.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0   腥味   0.0 1.3藻类，0.0， 0.0，1.0(0.5)     0.5   1.2     2.5       0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 蛋白质/饲料 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0   涂料味   0.0 0.0，0.0，4.0， 0.0(3.0)     0.0   0.0     0.0       0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 豆味 1.0 0.5，1.5，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.5，1.2，1.2，1.2   0.0   0.0   发酵味   0.0   0.0，0.0，0.0，0.0     0.0   0.0     0.0       0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 花香味 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0 坚果味 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0 纸板味 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   1.2     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0 新鲜味 0.0 0.0，0.0，0.0，1.0   0.5 0.7   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.8 草味 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0 杂草味 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0 植物油 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     1.0，0.0，0.0，0.0   1.0   0.0 玉米棒 0.0 0.0，0.0，0.0，0.0   0.0 0.0   0.0     0.0，0.0，0.0，0.0   0.0   0.0 香味/风味 总影响 1.3 2.0，2.5，6.5，   1.0 2.5   3.5     1.0，1.5，1.5，1.8   3.0   0.8

    3.0(4.0)   鱼味/腥味复合       0.0     2.0，1.0，4.0，     1.8(3.0)       0.0       2.0       2.8       0.0，0.0，0.0，0.0       0.0       0.0   鱼味       0.0     0.0，0.0，2.0，     0.0(3.0)       0.0       0.0       0.8       0.0，0.0，0.0，0.0       0.0       0.0 腥味     0.0     2.0，1.0，2.0，1.8     0.0     1.5     2.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 蛋白质/饲料     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0   涂料味       0.0     0.0，0.0，4.0，     0.0(0.5)       0.0       0.0       0.0       0.0，0.0，0.0，0.0       0.0       0.0 豆味     1.3     0.5，1.5，0.0，1.0     0.5     0.0     0.0     0.0，1.5，1.5，1.5     0.0     0.0 发酵味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 花香味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 坚果味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 纸板味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     1.0     0.0，0.0，0.0，0.5     0.0     0.0 新鲜味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.5     0.5     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 草味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 杂草味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 植物油     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     1.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.8 玉米     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 白蛋白     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     1.0，0.0，0.0，0.0     0.0 种子/坚果/南瓜     0.0     0.0，nt，nt，nt     0.0     0.0     0.0     0.0，nt，nt，nt     3.0     nt 基本实验   甜味       1.0     1.5，1.0，1.5，     1.5(1.3)       1.0       1.5       2.0       1.5，1.5，1.5，1.5       1.5       1.5

酸味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 咸味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 苦味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 化学感觉因素 涩味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 焦味     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0     0.0     0.0，0.0，0.0，0.0     0.0     0.0 化学感觉 (模拟舌头的 化学知觉或加温)         0.0         0.0，nt，nt，nt         0.0         0.0         0.0         0.0，nt，nt，nt         1.5         nt 口感   粘度       5.0     6.0，6.0，7.0，     6.3(6.0)       6.5       6.0       6.5       6.0，5.5，5.5，5.7       7.0       6.5                     腥味；腥味，                     豆味；鱼味，                     腥味，涂料味；            新鲜味                      腥味         腥味，鱼味        植物油；豆味； 余味                豆味     腥味(鱼味，沙丁)  腥味(1)                     (2)             (3)          豆味；豆味                   种子味 特性 比较油1 比较油2 比较油3 比较油8 比较油5 比较油7 比较油6 香味 总影响 1.5 2.0 7.0 6.0 4.5 3.0 3.5   鱼味/腥味   0.0   0.0   5.0鱼味 5.0 鱼味/腥味   2.5腥味   3.0腥味   3.0 蛋白质/饲料 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0 0.0

涂料味     0.0     0.0     3.0 2.5     1.0     0.0   0.0 豆味     1.5     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 发酵味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 花香味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 坚果味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 纸板味     0.0     0.0     0.0 0.0     1.5     0.0   0.0 新鲜味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 草味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 杂草味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 植物油     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 玉米棒     0.0     2.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 香味/风味 总影响     1.2     2.2     7.0 7.5     5.0     4.0   3.0   鱼味/腥呋       0.0       0.0       4.0 5.0 鱼味/腥味     5.0     鱼味/腥味       3.3腥味   3.0腥味   ＞鱼味 蛋白质/饲料     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 涂料味     0.0     0.0     0.0 3.5     0.0     0.0   0.0 豆味     1.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 发酵味     0.0     0.0     4.0 0.0     0.0     0.0   0.0 花香味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 坚果味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 纸板味     0.0     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0 新鲜味     0.5     0.0     0.0 0.0     0.0     0.0   0.0

草味     0.5     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 杂草味     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 植物油     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 玉米     0.0     2.2 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 白蛋白     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   1.5 0.0 基本实验 甜味     1.5     2.8 1.0   1.5     1.5   2.0 1.5 酸味     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 咸味     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 苦味     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 化学感觉因素 涩味     0.0     0.0 0.0   0.0     0.0   0.0 0.0 焦味     0.0     1.0 0.0   1.0     0.0   0.0 0.0 口感 粘度     6.5     5.5 7.0   6.5      6.0   6.5 7.0         余味             豆味             玉米 鱼味＝ 具有低涂料味 的凤尾鱼， 鳕鱼肝鱼， Desitin         腥味鱼味   涂料味       腥味     金属味     香味     铁(1)       腥味海藻1   鱼塘喉   刺激       具有一定 鱼味的腥味

实施例6：蛋黄酱制备

将豆油(3720g)和Ω-3植物油(1800g)混合，得到如下的油组合物：

游离脂肪酸，％    0.35

过氧化值    0.09

颜料1.3Y 0.0R

叶绿素，ppm 0.00

甲氧基苯胺值    0.20

脂肪酸组成，％

C14(肉豆蔻酸)                 0.04

C16(棕榈酸)                   11.15

C16:1n7(棕榈油酸)             0.11

C18:0(硬脂酸)                 4.58

C18:1 n9(油酸)                20.24

C18:1(十八酸(Ocadecenoic))    1.36

C18:2n6(亚油酸)               45.17

C18:3n6(γ亚油酸)             3.00

C18:3n3(α亚油酸)             3.41

C18:4n3(十八碳四烯酸

(octadecatetrenoic))          3.21

C20:3n6(二均γ亚油酸)         0.05

C20:4n6(花生四稀酸)           0.20

C20:5n3(二十碳五烯酸

(eicosapentaenoic acid)       2.95

C22:6n3(二十二碳六烯酸)       1.96

C20(花生酸)                   0.35

C20:1 n9(二十烯酸)            0.15

C22(山萮酸)                   0.32

C24(二十四酸)  0.12

其他           1.64

除了上述的油的混合外，还有下面的成分用于制备蛋黄酱：醋(6300g)， 蛋成分(792g)，水(3000g)和盐(1300g)。所有混合容器的顶部空间用氮气覆 盖。然后通过将蛋分散在240g水中来制备乳化敷料。然后加入盐。此后， 将油缓慢地加入到蛋的水分散液中。该过程在快速搅动下进行。将剩下的 水和醋加入，使松散的乳化液通过胶体磨(如Fryma磨)。得到的混合物的 pH值为4.0。所得产品具有蛋黄酱的性能和稳定性。所得产品用于生产火 鸡三明治，凉拌卷心菜和土豆沙拉。与用不含任何多于四个双键的脂肪酸 的油制成的蛋黄酱制成的食品在实验中难以分辨。