技术领域

本申请提供了与糖(如葡萄糖、果糖和/或蔗糖)水平被调节(如提高)的植物有关的 方法和材料。例如，本申请提供了糖水平升高的植物以及制备糖水平升高的植物和 植物产品的方法和材料。

                              背景

糖是尝起来甜的糖类。糖可作为甜味和能量来源用于食品和饮料，在生物化学 上很重要。蔗糖(sucrose/table sugar)是白色的结晶固体。蔗糖是由两个单糖-葡萄糖 和果糖—组成的二糖，这两个单糖之间通过1→2-α，β-糖苷键连接。在商业上，蔗 糖提取自甘蔗或甜菜，然后纯化和结晶。其它市售来源是高粱、海枣和糖槭。单糖， 如葡萄糖(通过酶或酸水解蔗糖产生)是生物细胞所用的能量储备。葡萄糖的氧化称为 糖酵解。基本上所有细胞中都发生此氧化，将葡萄糖氧化为乳酸或丙酮酸。在有氧 条件下，大部分组织中主要产物是丙酮酸，该途径称为有氧糖酵解。当氧气耗尽时， 例如在长时间剧烈运动中，许多组织中的主要糖酵解产物是乳酸，此过程称为无氧 糖酵解。除葡萄糖以外的其它糖，如果糖，可以在转变为可进入糖酵解的合适中间 体后进入该途径。糖酵解产生NADH和ATP。糖酵解期间产生的NADH通过氧化性 磷酸化为线粒体ATP合成提供能源。ATP为基本上所有的细胞和生物体活性提供能 量。生物体，从最简单的细菌到人，都采用ATP作为主要的能源通货。

                            发明概述

本申请提供了涉及调节植物的糖水平的方法和材料。例如，本申请提供了糖水 平升高的植物、能够生长成糖水平升高的植物的植物细胞和种子、糖水平升高的植 物产品(如糖提取物、糖浆、糖蜜、食物、食品和动物饲料)以及制备这种植物、植物 细胞和植物产品的方法。能够产生水平升高的糖的植物可用作糖来源或糖水平升高 的植物产品的来源。例如，由能够产生水平升高的糖的植物制备糖能够使糖制造商 提高糖产率(如每英亩数吨糖)。此外，糖水平升高的植物和植物产品可用作每份所含 营养价值和味道增加的食物或食品成分。

在一个实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含 编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的氨基酸序列的 序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、Ceres克隆SEQ ID NO： 9、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共 有序列，与不包含分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植 物具有不同的糖水平。序列相同性可以是85％或更高，90％或更高，或者95％或更 高。

在另一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含 编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的氨基酸序列的 序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9和 图6所示共有序列，与不包含分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细 胞产生的植物具有不同的糖水平。序列相同性可以是85％或更高，90％或更高，或 者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含 编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的氨基酸序列的 序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：4和图6所示共有序列，与不包含分离核酸的相应对照植物 的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物具有不同的糖水平。序列相同性可以是85％ 或更高，90％或更高，或者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含 编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的氨基酸序列的 序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：4，与不包含分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由 该植物细胞产生的植物具有不同的糖水平。序列相同性可以是85％或更高，90％或 更高，或者95％或更高。

另一方面，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含编码多肽 的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽包含对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序 列，与不包含分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物具 有不同的糖水平。

另一方面，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含编码多肽 的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸 序列，与不包含分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物 具有不同的糖水平。

又一方面，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将包含编码多肽 的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽包含对应于图6所示共有序列的氨基 酸序列，与不包含分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植 物具有不同的糖水平。

在另一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将(a)和 (b)引入植物细胞，其中(a)是包含编码多肽的核酸序列的第一种分离核酸，该多肽与 选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO： 10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO： 2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共 有序列；(b)是包含编码多肽的核酸序列的第二种分离核酸，该多肽与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高；与不包含第一种分离核酸和第二 种分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物具有不同的糖 水平。

在又一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将(a)和 (b)引入植物细胞，其中(a)是包含编码多肽的核酸序列的第一种分离核酸，该多肽包 含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共有序列；(b)是包含编码 多肽的核酸序列的第二种分离核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序 列；与不包含第一种分离核酸和第二种分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由 该植物细胞产生的植物具有不同的糖水平。

在另一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将(a)和 (b)引入植物细胞，其中(a)是包含编码多肽的核酸序列的第一种分离核酸，该多肽与 选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO： 10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO： 2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8；(b)是包含 编码多肽的核酸序列的第二种分离核酸，该多肽与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸 序列的序列相同性为80％或更高；与不包含第一种分离核酸和第二种分离核酸的相 应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物具有不同的糖水平。

在又一实施方式中，提供了一种调节植物糖水平的方法。该方法可包括将(a)和 (b)引入植物细胞，其中(a)是包含编码多肽的核酸序列的第一种分离核酸，该多肽包 含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8；(b)是包含编码多肽的核酸序列的第 二种分离核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列；与不包含第一种 分离核酸和第二种分离核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植 物具有不同的糖水平。

不同糖水平可以是一种或多种糖，如葡萄糖、果糖或蔗糖的水平升高。不同糖 水平可以是葡萄糖和果糖水平升高，或者是葡萄糖、果糖和蔗糖水平升高。

在另一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将包含编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的 氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6 所示共有序列；和(b)将该植物细胞培养成植物。序列相同性可以是85％或更高，90％ 或更高，或者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将包含编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的 氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9和图6所示共有序列；和(b)将该植物细胞培养成植物。序列相同性可以是85％ 或更高，90％或更高，或者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将包含编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的 氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：4和图6所示共有序列；和(b)将该植物细胞 培养成植物。序列相同性可以是85％或更高，90％或更高，或者95％或更高。

另一方面，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包括：(a)将 包含编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽与选自下组的氨基酸序 列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、 SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：4；和(b)将该植物细胞培养成植物。序列相同性可以 是85％或更高，90％或更高，或者95％或更高。

另一方面，提供了产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包括：(a)将包含 编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14 的氨基酸序列；和(b)将该植物细胞培养成植物。

另一方面，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包括：(a)将 包含编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽包含对应于SEQ ID NO： 2的氨基酸序列；和(b)将该植物细胞培养成植物。

又一方面，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包括：(a)将 包含编码多肽的核酸序列的分离核酸引入植物细胞，该多肽包含对应于图6所示共 有序列的氨基酸序列；和(b)将该植物细胞培养成植物。

在另一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将第一种分离核酸和第二种分离核酸引入植物细胞，第一种分离核酸所含核 酸序列编码的多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共有序列，第二种分离核酸所含核酸序列编码的多肽与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高；和(b)将该植物细胞培养成植 物。

在另一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将第一种分离核酸和第二种分离核酸引入植物细胞，第一种分离核酸所含核 酸序列编码的多肽包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、 SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、 SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共有 序列，第二种分离核酸所含核酸序列编码的多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基 酸序列；和(b)将该植物细胞培养成植物。

在另一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将第一种分离核酸和第二种分离核酸引入植物细胞，第一种分离核酸所含核 酸序列编码的多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8，第二种分离核酸所含核酸序列编码的多肽与对应于SEQ ID NO：14的氨基 酸序列的序列相同性为80％或更高；和(b)将该植物细胞培养成植物。

在又一实施方式中，提供了一种产生糖水平被调节的植物的方法。该方法可包 括：(a)将第一种分离核酸和第二种分离核酸引入植物细胞，第一种分离核酸所含核 酸序列编码的多肽包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、 SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、 SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8，第二种分离核 酸所含核酸序列编码的多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列；和(b)将该植 物细胞培养成植物。

调节的糖水平可以是一种或多种糖，如葡萄糖、果糖或蔗糖的水平升高。调节 的糖水平可以是葡萄糖和果糖水平升高，或者是葡萄糖、果糖和蔗糖水平升高。

分离核酸或外源性核酸可操作性连接于调控区，如启动子。启动子可以是广泛 表达的启动子，如p326、YP0158、YP0214、YP0380、PT0848、PT0633、YP0050、 YP0144或YP0190。启动子可以是细胞特异性或组织特异性启动子，如种子特异性 启动子、根特异性启动子或非种子果实组织启动子。种子特异启动子可以是油菜籽 蛋白启动子、Arcelin-5启动子、菜豆蛋白基因启动子、大豆胰蛋白酶抑制剂启动子、 ACP启动子、硬脂酰-ACP去饱和酶基因、β-伴大豆球蛋白(conglycinin)启动子的大 豆α亚基、油质蛋白启动子、15kD玉米醇溶蛋白启动子、16kD玉米醇溶蛋白启动 子、19kD玉米醇溶蛋白启动子、22kD玉米醇溶蛋白启动子、27kD玉米醇溶蛋白 启动子、Osgt-1启动子、β-淀粉酶基因启动子或大麦醇溶蛋白基因启动子。根特异 性启动子可以是CaMV 35S启动子或烟草RD2基因启动子的根特异性亚域。非种子 果实组织启动子可以是聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonidase)启动子、香蕉TRX启动 子或瓜肌动蛋白启动子。启动子可以是组成型启动子，如35S、p32449或p13879。 启动子可以是诱导型启动子。

也提供了植物细胞。在一个实施方式中，该植物细胞可包含含有编码多肽的核 酸序列的外源性核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高： SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ BD NO：6、 SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、 SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共有序列，与不包含该外源性核酸的相 应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中该外源性核酸的表达能有效 导致糖水平不同。序列相同性可以是85％或更高，90％或更高，或者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含含有编码多肽的核酸 序列的外源性核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高： SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO： 6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9和图6所示共有序列，与不包 含该外源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中该外源 性核酸的表达能有效导致糖水平不同。序列相同性可以是85％或更高，90％或更高， 或者95％或更高。

另一方面，提供了植物细胞。该植物细胞可包含含有编码多肽的核酸序列的外 源性核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO： 14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：4和图6所示共 有序列，与不包含该外源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生 的植物中该外源性核酸的表达能有效导致糖水平不同。序列相同性可以是85％或更 高，90％或更高，或者95％或更高。

在又一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含含有编码多肽的核酸 序列的外源性核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高： SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO： 4，与不包含该外源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物 中该外源性核酸的表达能有效导致糖水平不同。序列相同性可以是85％或更高，90％ 或更高，或者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含含有编码多肽的核酸 序列的外源性核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列，与不包含该外 源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中该外源性核酸 的表达能有效导致糖水平不同。

在另一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含含有编码多肽的核酸 序列的外源性核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列，与不包含该 外源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中该外源性核 酸的表达能有效导致糖水平不同。

另一方面，提供了植物细胞。该植物细胞可包含含有编码多肽的核酸序列的外 源性核酸，该多肽包含对应于图6所示共有序列的氨基酸序列，与不包含该外源性 核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中该外源性核酸的表 达能有效导致糖水平不同。

又一方面，提供了植物细胞。该植物细胞可包含：(a)包含编码多肽的核酸序列 的第一种外源性核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高： SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、 SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、 SEQ ID NO：8和图6所示共有序列；和(b)包含编码多肽的核酸序列的第二种外源性 核酸，该多肽与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高； 与不包含第一种外源性核酸和第二种外源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由 该植物细胞产生的植物中第一种外源性核酸和第二种外源性核酸的表达能有效导致 糖水平不同。

在另一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含：(a)包含编码多肽的 核酸序列的第一种外源性核酸，该多肽包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、 SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、 SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8 和图6所示共有序列；和(b)包含编码多肽的核酸序列的第二种外源性核酸，该多肽 包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列；与不包含第一种外源性核酸和第二种外 源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中第一种外源性 核酸和第二种外源性核酸的表达能有效导致糖水平不同。

在另一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含：(a)包含编码多肽的 核酸序列的第一种外源性核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为 80％或更高：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、 SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、 SEQ ID NO：3，和SEQ ID NO：8；和(b)包含编码多肽的核酸序列的第二种外源性核 酸，该多肽与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高；与 不包含第一种外源性核酸和第二种外源性核酸的相应对照植物的糖水平相比，由该 植物细胞产生的植物中第一种外源性核酸和第二种外源性核酸的表达能有效导致糖 水平不同。

在又一实施方式中，提供了植物细胞。该植物细胞可包含：(a)包含编码多肽的 核酸序列的第一种外源性核酸，该多肽包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、 SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、 SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO： 8；和(b)包含编码多肽的核酸序列的第二种外源性核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列；与不包含第一种外源性核酸和第二种外源性核酸的相应对照 植物的糖水平相比，由该植物细胞产生的植物中第一种外源性核酸和第二种外源性 核酸的表达能有效导致糖水平不同。

不同糖水平可以是一种或多种糖，如葡萄糖、果糖或蔗糖的水平升高。不同糖 水平可以是葡萄糖和果糖水平升高，或者是葡萄糖、果糖和蔗糖水平升高。一种或 多种糖水平升高可以在植物细胞产生的植物的非种子组织、种子、根或果实中发生。

植物或植物细胞可以是以下属之一的成员：冷杉属(Abies)、剪股颖属(Agrostis)、 葱属(Allium)、油丹属(Alseodaphne)、腰果属(Anacardium)、凤梨属(Ananus)、须芒草 属(Andropogon)、拟南芥属(Arabidopsis)、落花生属(Arachis)、芹属(Apium)、Aragrostis、 泡叶藻属(Ascophyllum)、天门冬属(Asparagus)、颠茄属(Atropa)、燕麦属(Avena)、琼 楠属(Beilschmiedia)、红木属(Bixa)、芸苔属(Brassica)、金盏花属(Calendula)、辣椒属 (Capsicum)、红花属(Carthamus)、角叉菜属(Chondrus)、菊苣属(Chicorium)、樟属 (Cinnamomum)、柑桔属(Citrus)、西瓜属(Citrullus)、木防己属(Cocculus)、椰子属 (Cocos)、咖啡属(Coffea)、榛属(Corylus)、江蓠属(Gracilaria)、巴豆属(Croton)、隐甲 藻属(Crypthecodinium)、香瓜属(Cucumis)、南瓜属(Cucurbita)、杉木属(Cunninghamia)、 萼距花属(Cuphea)、狗牙根属(Cynodon)、胡萝卜属(Daucus)、石竹属(Dianthus)、番 荔枝属(Duguetia)、油棕属(Elaeis)、浒苔属(Enteromorpha)、大戟属(Euphoria)、羊茅 属(Festuca)、黑麦草属(Festulolium)、榕属(Ficus)、草莓属(Fragaria)、岩藻属(Fucus)、 海罂粟属(Glaucium)、大豆属(Glycine)、甘草属(Glycyrrhiza)、棉属(Gossypium)、红 球藻属(Haematococcus)、向日葵属(Helianthus)、萱草属(Heterocallis)、橡胶树属 (Hevea)、海条藻属(Himanthalia)、大麦属(Hordeum)、天仙子属(Hyoscyamus)、莴苣 属(Lactuca)、胶藤属(Landolphia)、浮萍属(Lemna)、亚麻属(Linum)、木姜子属(Litsea)、 黑麦草属(Lolium)、番茄属(Lycopersicon)、羽扇豆属(Lupinus)、马郁兰属(Majorana)、 苹果属(Malus)、木薯属(Manihot)、苜蓿属(Medicago)、薄荷属(Mentha)、芭蕉属(Musa)、 烟草属(Nicotiana)、盒形藻属(Odontella)、木犀榄属(Olea)、稻属(Oryza)、红皮藻属 (Palmaria)、黍属(Panicum)、Pannesetum、银胶菊属(Parthenium)、鳄梨属(Persea)、 碧冬茄属(Petunia)、菜豆属(Phaseolus)、梯牧草属(Phleum)、刺葵属(Phoenix)、云杉 属(Picea)、松属(Pinus)、黄连木属(Pistacia)、豌豆属(Pisum)、早熟禾属(Poa)、杨属 (Populus sect)、紫菜属(Porphyra)、李属(Prunus)、梨属(Pyrus)、萝卜属(Raphanus)、 蓖麻属(Ricinus)、蔷薇属(Rosa)、迷迭香属(Rosmarinus)、悬钩子属(Rubus)、甘蔗属 (Saccharum)、柳属(Salix)、裂壶藻属(Schizochytrium)、黑麦属(Secale)、千里光属 (Senecio)、白芥属(Sinapis)、茄属(Solanum)、高粱(Sorghum)、菠菜属(Spinacia)、螺 旋藻属(Spirulina)、千金藤属(Stephania)、小麦属(Triticum)、万寿菊属(Tagetes)、可可 属(Theobroma)、三叶草属(Trifolium)、胡芦巴属(Trigonella)、石莼属(Ulva)、裙带菜 属(Undaria)、越桔属(Vaccinium)、野豌豆属(Vicia)、豇豆属(Vigna)、葡萄属(Vitis)、 玉蜀黍属(Zea)。

植物或植物细胞可以是以下物种之一的成员：凤梨(Ananus comosus)、拟南芥 (Arabidopsis thaliana)、芜青(Brassica rapa)、欧洲油菜(Brassica napus)、甘蓝(Brassica oleracea)、红木(Bixa orellana)、金盏花(Calendula officinalis)、樟树(Cinnamomum camphora)、小果咖啡(Coffea arabica)、大豆(Glycine max)、洋甘草(Glycyrrhiza glabra)、 陆地棉(Gossypium hirsutum)、草棉(Gossypium herbaceum)、莴苣(Lactuca sativa)、番 茄(Lycopersicon esculentum)、辣薄荷(Mentha piperita)、留兰香(Mentha spicata)、粉芭 蕉(Musa paradisiaca)、稻(Oryza sativa)、灰白银胶菊(Parthenium argentatum)、迷迭香 (Rosmarinus officinalis)、马铃薯(Solanum tuberosum)、可可(Theobroma cacao)、普通 小麦(Triticum aestivum)、葡萄(Vitis vinifera)和玉蜀黍(Zea mays)。

植物或植物细胞可以是以下物种之一：苜蓿、苋菜、苹果、豆类(包括四季豆、 利马豆、干豆、青豆)、花椰菜、甘蓝、胡萝卜、蓖麻子、鹰嘴豆、樱桃、菊苣、巧 克力、三叶草、咖啡、棉花、棉花籽、海甘蓝、桉树、亚麻、葡萄、柚子、柠檬、 小扁豆、莴苣、亚麻籽、芒果、瓜类(如西瓜、哈密瓜)、芥末、橙、花生、桃、梨、 豌豆、胡椒、李子、白杨、马铃薯、油菜籽(高芥酸和菜籽油)、红花、芝麻、大豆、 菠菜、草莓、甜菜、向日葵、茶、番茄、香蕉、大麦、海枣、饲料、大蒜、小米、 燕麦、油椰、洋葱、菠萝、爆米花、米、黑麦、高粱、苏丹草、甘蔗、甜玉米、柳 枝稷、草坪草、小麦、冷杉、松、云杉、褐藻、绿藻、红藻和微藻类。

也提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节的转基因植物。在 一个实施方式中，转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多 肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共有序列。序列相同性可以是85％或更高，90％或更高，或者95％ 或更高。

在另一实施方式中，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节 的转基因植物。该转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多 肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14，SEQ ID NO：2，SEQ ID NO：5，SEQ ID NO：10，SEQ ID NO：6，SEQ ID NO：11，SEQ ID NO：4，SEQ ID NO：9和图6所示共有序列。序列相同性可以是85％或更高，90％ 或更高，或者95％或更高。

另一方面，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节的转基因 植物。该转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多肽与选自 下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、 SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：4和图6所示共有序列。序列相同性 可以是85％或更高，90％或更高，或者95％或更高。

又一方面，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节的转基因 植物。该转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多肽与选自 下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、 SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：6和SEQ ID NO：4。序列相同性可以是85％或更高， 90％或更高，或者95％或更高。

在另一实施方式中，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节 的转基因植物。该转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多 肽包含对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

在另一实施方式中，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节 的转基因植物。该转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多 肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列。

在另一实施方式中，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节 的转基因植物。该转基因植物可包含含有编码多肽的核酸序列的外源性核酸，该多 肽包含对应于图6所示共有序列的氨基酸序列。

在又一实施方式中，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节 的转基因植物。该转基因植物可包含：(a)包含编码多肽的核酸序列的第一种外源性 核酸，该多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：5、 SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、 SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8 和图6所示共有序列；和(b)包含编码多肽的核酸序列的第二种外源性核酸，该多肽与 对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高。

另一方面，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节的转基因 植物。该转基因植物可包含：(a)包含编码多肽的核酸序列的第一种外源性核酸，该 多肽包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、 SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、 SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6所示共有序列；和(b)包含 编码多肽的核酸序列的第二种外源性核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨 基酸序列。

另一方面，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节的转基因 植物。该转基因植物可包含：(a)包含编码多肽的核酸序列的第一种外源性核酸，该 多肽与选自下组的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8；和(b) 包含编码多肽的核酸序列的第二种外源性核酸，该多肽与对应于SEQ ID NO：14的 氨基酸序列的序列相同性为80％或更高。

又一方面，提供了与相应对照植物相比，一种或多种糖的水平被调节的转基因 植物。该转基因植物可包含：(a)包含编码多肽的核酸序列的第一种外源性核酸，该 多肽包含选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、 SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：7、 SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8；和(b)包含编码多肽的核酸序列 的第二种外源性核酸，该多肽包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列。

也提供了转基因植物产品、由转基因植物生产产品的方法和由转基因植物生产 的产品。在一个实施方式中，提供了转基因植物的组织，如非种子组织、茎、种子 或果实。在另一实施方式中，提供了包含转基因植物的非种子组织的食品。在另一 实施方式中，提供了包含转基因植物的种子的食品。在另一实施方式中，提供了包 含非种子组织或种子的动物饲料。在又一实施方式中，提供了衍生自茎的动物饲料。

在一个实施方式中，提供了生产糖的方法。该方法包括从本文提供的转基因植 物，如甘蔗或甜菜中榨取糖。榨取物可以是液体或固体。该糖可以是蔗糖、葡萄糖 和/或果糖中的一种或多种。

在另一实施方式中，提供了生产乙醇的方法。该方法包括发酵来自本文所提供 的转基因植物如玉米的植物物质。

另一方面，提供了基于转基因植物的产品，包括糖、糖蜜、袋装种子、袋装糖、 瓶装糖浆、液体榨取物或固体榨取物。

也提供了分离核酸。分离核酸可包含编码多肽的核酸序列，该多肽与选自下组 的氨基酸序列的序列相同性为80％或更高：SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8和图6 所示共有序列。也提供了包含核酸的重组载体。

本文提供了糖调节性多肽。糖调节性多肽可包含对应于SEQ ID NO：5的氨基 酸序列。糖调节性多肽可包含对应于SEQ ID NO：10的氨基酸序列。糖调节性多肽 可包含对应于SEQ ID NO：6的氨基酸序列。糖调节性多肽可包含对应于SEQ ID NO： 11的氨基酸序列。糖调节性多肽可包含对应于SEQ ID NO：4的氨基酸序列。糖调 节性多肽可包含对应于SEQ ID NO：9的氨基酸序列。糖调节性多肽可包含对应于 SEQ ID NO：7的氨基酸序列。糖调节性多肽可包含对应于SEQ ID NO：12的氨基 酸序列。糖调节性多肽可包含对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列。糖调节性多肽可 包含对应于SEQ ID NO：8的氨基酸序列。糖调节性多肽可包含对应于图6所示共有 序列的氨基酸序列。

糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：5的氨基酸序列的序列相同性至少 为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。 糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：10的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。糖 调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：6的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。糖 调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：11的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。在 一些情况下，糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：4的氨基酸序列的序列相同 性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％) 的多肽。糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：9的氨基酸序列的序列相同性至 少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。 在一些情况下，糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：7的氨基酸序列的序列相 同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％) 的多肽。糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：12的氨基酸序列的序列相同性 至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多 肽。糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。糖 调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：8的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。糖 调节性多肽可包含与对应于图6所示共有序列的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽。

本文提供了编码糖调节性多肽的核酸。这种核酸可用于转化植物细胞。编码包 含对应于SEQ ID NO：5的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含 对应于SEQ ID NO：10的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含 对应于SEQ ID NO：6的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对 应于SEQ ID NO：11的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对 应于SEQ ID NO：4的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应 于SEQ ID NO：9的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于 SEQ ID NO：7的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于 SEQ ID NO：12的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于 SEQ ID NO：3的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于 SEQ ID NO：8的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于图 6所示共有序列的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。

编码与对应于SEQ ID NO：5的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相 同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸可用于转化 植物细胞。在一些情况下，编码与对应于SEQ ID NO：10的氨基酸序列的序列相同 性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％) 的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：6的氨基酸序列的序 列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或 99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：11的氨基酸序 列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、 98％或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：4的氨 基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、 97％、98％或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。在一些情况下，编码与对应 于SEQ ID NO：9的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、 90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码与对 应于SEQ ID NO：7的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、 85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编 码与对应于SEQ ID NO：12的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为 80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细 胞。编码与对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相 同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸可用于转化 植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：8的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如 序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸可用 于转化植物细胞。在一些情况下，编码与对应于图6所示共有序列的氨基酸序列的 序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％ 或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。

编码包含对应于SEQ ID NO：5的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含 对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编 码包含对应于SEQ ID NO：10的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于 SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。在一些情 况下，编码包含对应于SEQ ID NO：6的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含 对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编 码包含对应于SEQ ID NO：11的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于 SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码包含 对应于SEQ ID NO：4的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于 SEQ ID NO：9的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14 的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。在一些情况下，编码包含 对应于SEQ ID NO：7的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于 SEQ ID NO：12的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO： 14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于SEQ ID NO：3的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14的氨基 酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。在一些情况下，编码包含对应于 SEQ ID NO：8的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14 的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码包含对应于图6所示 共有序列的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14的氨 基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。

编码与对应于SEQ ID NO：5的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相 同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第一种核酸和编 码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为 80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第二种核酸可用于转化 植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：10的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如 序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第一种核 酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相 同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第二种核酸可用 于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：6的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第 一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如 序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第二种核 酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：11的氨基酸序列的序列相同性 至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多 肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第 二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：4的氨基酸序列的序列相 同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％) 的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性至 少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽 的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：9的氨基酸序列的序 列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或 99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同 性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％) 的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：7的氨基酸序 列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、 98％或99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序 列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或 99％)的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：12的氨 基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、 97％、98％或99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序 列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、 98％或99％)的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：3 的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、 95％、97％、98％或99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨 基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、 97％、98％或99％)的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：8的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、 93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14 的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、 95％、97％、98％或99％)的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于图 6所示共有序列的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、 90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO： 14的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、 95％、97％、98％或99％)的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。

本文所用所有科技术语与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义相 同，除非另有定义。虽然可用与本文所述相似或等价的方法和材料实施本发明，但 下面描述了合适的方法和材料。将本文提及的所有发表物、专利申请、专利和其它 参考文献全文纳入本文作参考。万一有抵触，本说明书，包括定义将控制范围。此 外，材料、方法和实施例仅为说明性，不旨在限制。

以下的附图和详述部分中列出本发明的一个或多个实施方式的详细情况。从详 述部分和附图，以及权利要求书中可以明显看出本发明的其它特征、目的和优点。

                            附图说明

图1是Ceres克隆625627的核苷酸序列(SEQ ID NO：13)。

图2是Ceres克隆625627编码的氨基酸序列(SEQ ID NO：14)。

图3是Ceres克隆32380的核苷酸序列(SEQ ID NO：1)。

图4是Ceres克隆32380编码的氨基酸序列(SEQ ID NO：2)。

图5是相对于对照植物，T2 ME02225植物中葡萄糖和果糖水平的图。

图6是SEQ ID NO：2的氨基酸序列与功能同源和直向氨基酸序列SEQ ID NO： 5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO： 12、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8的比对。列 出了比对确定的共有序列。

                           发明详述

本文提供的材料和方法可用于制备糖(如葡萄糖、果糖和蔗糖)水平被调节的植 物、植物组织和植物产品。例如，本文提供了种子和/或非种子组织中糖水平升高的 植物。该方法可包括用编码糖调节性多肽的一种或多种核酸转化植物细胞，其中一 种或多种多肽的表达导致一种或多种糖的水平被调节(如水平提高或降低)。用这种方 法产生的植物和植物质(如种子、非种子组织)可用作(例如)食物糖源，或者作为包含 在营养补剂中的糖源。

多肽

本文提供了分离多肽，包括糖调节性多肽。本文所用术语“多肽”指两个或多 个亚基氨基酸、氨基酸类似物或其它肽模拟物的化合物，不管翻译后修饰(如磷酸化 或糖基化)。亚基可通过肽键或其它键，如酯键或醚键连接。术语“氨基酸”指天然 和/或非天然或合成的氨基酸，包括D/L光学异构体。该定义包括全长蛋白质及其类 似物、突变体和片段。

提到多肽时，“分离”或“纯化”指将该多肽与通常在天然情况下发现与其共存 的细胞组分(如其它多肽、脂质、糖和核酸)在某种程度上分离。纯化多肽可在非还原 性聚丙烯酰胺凝胶上产生单个主条带。纯化多肽可以是至少约75％纯(如至少80％、 85％、90％、95％、97％、98％、99％或100％纯)。可通过(例如)由天然来源提取、化 学合成或宿主细胞或转基因植物的重组生产获得纯化多肽，并可采用(例如)亲和色 谱、免疫沉淀、大小排阻色谱和离子交换色谱纯化多肽。可采用合适方法，包括但 不限于柱色谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳或高效液相色谱测定纯化程度。

本文所述的是糖调节性多肽。糖调节性多肽可通过任何机制有效调节一种或多 种糖的水平。例如，糖调节性多肽可调节糖合成、稳定性和/或降解。在一些情况下， 这种多肽是含有AP2 DNA-结合域的转录因子。AP2 DNA-结合域是各植物独特的转 录因子家族的区别特征。该家族的原型成员是AP2(APETALA2)和EREBP(乙烯-反应 性元件结合蛋白)。AP2/REBP基因组成一个多基因大家族，它们在整个植物生命周 期中起到各种作用：从几种发育过程(如花器身份确定或叶表皮细胞身份的控制)的关 键调节物，至形成植物用来对各种类型的生物和环境应激作出反应的机制的一部分。

图2所示SEQ ID NO：14列出了本文中标为Ceres克隆625627的克隆的氨基酸 序列，预计该克隆包含AP2 DNA-结合域。糖调节性多肽可能是包含SEQ ID NO：14 所列氨基酸序列的多肽。或者，糖调节性多肽可以是具有SEQ ID NO：14所列序列 的多肽的直向同源物、同源物或变体。例如，糖调节性多肽可具有与SEQ ID NO： 14所列氨基酸序列的序列相同性至少为60％(如序列相同性为61％、66％、68％、70％、 72％、74％、76％、78％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、 89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％)的氨基酸序列。

在其它情况下，糖调节性多肽是DNA指导的RNA聚合酶，如DNA指导的RNA 聚合酶II。DNA指导的RNA聚合酶能催化将DNA转录为RNA。

图4所示SEQ ID NO：2列出了本文标为Ceres克隆32380的拟南芥(Arabidopsis) 克隆的氨基酸序列，预计该克隆包含DNA指导的RNA聚合酶II第三大亚基。图6 提供了具有SEQ ID NO：2所列氨基酸序列的多肽的同源物和直向同源物。

糖调节性多肽可以是包含SEQ ID NO：2所列氨基酸序列的多肽。或者，糖调 节性多肽可以是具有SEQ ID NO：2所列序列的多肽的直向同源物、同源物或变体。 例如，糖调节性多肽可具有与SEQ ID NO：2所列氨基酸序列的序列相同性至少为 60％(如序列相同性为61％、66％、68％、70％、72％、74％、76％、78％、80％、81％、 82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、 95％、96％、97％、98％或99％)的氨基酸序列。例如，糖调节性多肽可包含对应于 Ceres克隆698259(SEQ ID NO：5)、Ceres克隆698259T(SEQ ID NO：10)、Ceres克 隆244359(SEQ ID NO：6)、Ceres克隆244359T(SEQ ID NO：11)、Ceres克隆692249 (SEQ ID NO：4)、Ceres克隆692249T(SEQ ID NO：9)、gi|50898416(SEQ ID NO：7)、 gi|50898416T(SEQ ID NO：12)、gi|21593370(SEQ ID NO：3)、gi|21593370T(SEQ ID NO：8)或图6所示共有序列的氨基酸序列。

在一些情况下，糖调节性多肽可包含与对应于SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、 SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：7、 SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8、或图6所示共有序列的氨基酸序 列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、 98％或99％)的多肽。

可通过比对同源和/或直向同源氨基酸序列(如图6所列氨基酸序列)并测定各位 置上最普遍的氨基酸或氨基酸类型确定糖调节性多肽的共有氨基酸序列。例如，可 通过比对对应于图6所示SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：8的氨基酸序列确定共有序列。

可用来鉴定糖调节性多肽的其它方法包括糖调节性多肽突变体的功能互补。也 可通过分析核苷酸和多肽序列比对鉴定合适的糖调节性多肽。例如，在核苷酸或多 肽序列数据库中进行查询可鉴定具有SEQ ID NO：2所列氨基酸序列的多肽的同源物 和/或直向同源物。序列分析可包括非冗余数据库的BLAST、交互BLAST或 PSI-BLAST分析。数据库中与特定查询多肽的序列相同性大于35％的蛋白质可以成 为候选物，以进一步评价其作为糖调节性多肽的适用性。如果需要，可手工检查这 些候选物，以降低需要进一步评价的候选物的数量。通过选择似乎具有怀疑存在于 糖调节性多肽中的结构域的候选物进行手工检查。

一般地，糖调节性多肽的保守区的氨基酸序列相同性至少为40％(如氨基酸序列 相同性至少45％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％或至少90％)。靶多肽 和模板多肽的保守区的氨基酸序列相同性至少为92％、94％、96％、98％或99％。可 以从氨基酸或核苷酸序列推导出氨基酸序列相同性。在某些情况下，可以鉴定糖调 节性多肽中高度保守的结构域。这些保守区可用于鉴定功能上相似的多肽。

结构域是可用于表征蛋白质家族和/或蛋白质某部分的多肽中的毗连氨基酸组。 这种结构域具有“指纹”或“签名”，“指纹”或“签名”可包括保守的(1)一级序列、 (2)二级结构和/或(3)三维构象。通常，各结构域与保守的一级序列或序列基序相连。 通常，这些保守的一级序列基序与特定的体外和/或体内活性有关。结构域可以是任 何长度，包括待转录的整个多核苷酸。

鉴定模板多肽或对象多肽中保守区可有助于产生野生型糖调节性多肽的变体。 可通过以下方法鉴定保守区：定位模板多肽的一级氨基酸序列内是重复序列，形成 某些二级结构(如螺旋和β折叠)，建立带正电或带负电的结构域或者代表蛋白基序或 结构域的区域。参见例如，Pfam网站，如万维网sanger.ac.uk/Pfam/和 genome.wustl.edu/Pfam/在线上描述了各种蛋白基序和结构域的共有序列。 Sonnhammer等，1998，Nucl.Acids Res.26：320-322；Sonnhammer等，1997，Proteins 28：405-420；和Bateman等，1999，Nucl.Acids Res.27：260-262包括了Pfam数据库 所含信息的说明。从Pfam数据库，可将蛋白基序和结构域的共有序列与模板多肽序 列进行比对，以确定保守区。

也可通过比较紧密相关物种的相同或相关多肽的序列确定保守区。紧密相关物 种优选为同一科的物种。在一些实施方式中，比对两个不同物种的序列就足够了。 例如，来自拟南芥和玉蜀黍的序列可用于鉴定一个或多个保守区。

如果需要，可用本领域普通技术人员已知的技术将多肽分类为糖调节性多肽。 可将这些技术分为两大类：全局糖分析和类型特异性糖分析。全局糖分析技术可包 括测定细胞、细胞组或组织(如非种子组织与种子组织)中的总糖水平。类型特异性糖 分析技术可包括测定特定糖类型(即葡萄糖、果糖或蔗糖)的水平。

多核苷酸

本文也提供了分离核酸，包括编码本文所述糖调节性多肽的分离核酸。在本文 中，术语“核酸”和“多核苷酸”可互换使用，它们指RNA和DNA，包括cDNA、 基因组DNA、合成(如化学合成)的DNA和含有核酸类似物的DNA(或RNA)。多核 苷酸可具有任何三维结构。核酸可以是双链或单链(即正义链或反义链)。多核苷酸的 非限制性例子包括基因、基因片段、外显子、内含子、信使RNA(mRNA)、转移RNA、 核糖体RNA、siRNA、微小RNA、核酶、cDNA、重组多核苷酸、分支多核苷酸、 质粒、载体、任意序列的分离DNA、任意序列的分离RNA、核酸探针和引物、以及 核酸类似物。

提到核酸时，本文所用“分离”指与基因组，如植物基因组中存在的其它核酸， 包括在基因组中通常侧接于该核酸一侧或两侧的核酸分离的核酸。提到核酸时，本 文所用术语“分离”也包括任何非天然产生的序列，因为在天然情况下没有发现这 种非天然产生的序列，它们没有天然产生基因组的紧密毗连序列。

分离核酸可以是(例如)DNA分子，如果在天然产生基因组中通常紧密侧接于该 DNA分子的核酸序列之一被去除或不存在。因此，分离核酸包括但不限于：独立于 其它序列、以单独分子存在的DNA分子(如化学合成的核酸，或者聚合酶链反应(PCR) 或限制性核酸内切酶处理产生的cDNA或基因组DNA片段)，以及掺入载体的DNA、 自主复制质粒、病毒(如副逆转录病毒、逆转录病毒、慢病毒、腺病毒、腺伴随病毒 或疱疹病毒)或原核或真核生物的纯化基因组DNA。此外，分离核酸可包括工程改造 的核酸，如作为杂交或融合核酸的一部分的DNA分子。存在于(例如)cDNA文库或 基因组文库，或含有基因组DNA限制性消化物的凝胶片中的几百个至几百万个其它 核酸中的核酸，不被认为是分离核酸。

可通过(例如)化学合成或PCR制备核酸。PCR指扩增靶核酸的方法或技术。可 采用PCR从DNA以及RNA中扩增特定序列，包括总基因组DNA或总细胞RNA 中的序列。例如，《PCR引物：实验室手册》(PCR Primer：A Laboratory Manual)， Dieffenbach和Dveksler编，Cold Spring Harbor Laboratory Press，1995中描述了各种 PCR方法。通常，用感兴趣区域末端或更远处的序列信息设计与待扩增模板的反义 链序列相同或相似的寡核苷酸引物。也可获得可将位点特异性核苷酸序列修饰引入 模板核酸的各种PCR方案。

提到核酸时，术语“外源性”指该核酸是重组核酸构建物的一部分，或者不是 在其天然环境下。例如，外源性核酸可以是从一种物种引入另一物种的序列，即异 源核酸。一般地，通过重组核酸构建物将这种外源性核酸引入其它物种。外源性核 酸也可以是某种生物体天然具有并再引入该生物体细胞的序列。常常可通过连接于 该外源性核酸的非天然序列，如侧接重组核酸构建物中天然序列的非天然调控区的 存在，将包含天然序列的外源性核酸与天然存在的序列区分开来。此外，稳定转化 的外源性核酸一般整合到发现天然序列的位置以外的位置上。应理解，可将外源性 核酸引入祖细胞，而非所研究的细胞。例如，含有外源性核酸的转基因植物可以是 稳定转化植物和非转基因植物之间杂交的后代。认为这种后代含有外源性核酸。

因此，本文提供的是编码任何前述糖调节性多肽的核酸。分离的多核苷酸的一 个例子是图1所示的SEQ ID NO：13，它列出了本文中标为Ceres克隆625627的克 隆的核苷酸序列。分离的多核苷酸的另一个例子是图3所示SEQ ID NO：1，它列出 了本文标为Ceres克隆32380的拟南芥克隆的核苷酸序列。也考虑了所述多核苷酸(和 编码多肽)的片段、融合物、互补物和反向互补物(reverse complement)。

编码糖调节性多肽的一种或多种核酸可用于转化植物细胞，以使由该植物细胞 产生的植物的一种或多种糖水平被调节(如提高)。例如，编码包含对应于SEQ ID NO： 14的氨基酸序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。编码与对应于SEQ ID NO：14 的氨基酸序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、 95％、97％、98％或99％)的多肽的核酸也可用于转化植物细胞。

在某些情况下，编码包含对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列的多肽的核酸可 用于转化植物细胞。在其它情况下，编码包含对应于SEQ ID NO：5、SEQ ID NO： 10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO： 7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8或图6所示共有序列的氨基酸 序列的多肽的核酸可用于转化植物细胞。

在一些情况下，编码与对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列的序列相同性至少 为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的 核酸可用于转化植物细胞。在其它情况下，编码与对应于SEQ ID NO：5、SEQ ID NO： 10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO： 7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8或图6所示共有序列的氨基酸 序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、 98％或99％)的多肽的核酸可用于转化植物细胞。

编码糖调节性多肽的两种或多种核酸也可用于转化植物细胞，以使由该植物细 胞产生的植物的一种或多种糖水平被调节(如提高)。例如，编码包含对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14的氨基 酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。在某些实施方式中，编码包含对 应于SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO： 4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO： 8或图6所示共有序列的氨基酸序列的多肽的第一种核酸和编码包含对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。

在其它情况下，编码与对应于SEQ ID NO：2的氨基酸序列的序列相同性至少 为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的 第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序列相同性至少为 80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或99％)的多肽的第 二种核酸可用于转化植物细胞。此外，编码与对应于SEQ ID NO：5、SEQ ID NO： 10、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO： 7、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：8或图6所示共有序列的氨基酸 序列的序列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、 98％或99％)的多肽的第一种核酸和编码与对应于SEQ ID NO：14的氨基酸序列的序 列相同性至少为80％(如序列相同性为80％、85％、90％、93％、95％、97％、98％或 99％)的多肽的第二种核酸可用于转化植物细胞。

应理解，本文所述方法可利用糖调节性多肽中携带突变的非转基因植物细胞或 植物。例如，上述多肽之一的编码序列中携带T-DNA插入、缺失、颠换型突变或转 换性突变的植物可影响糖水平。

本文所用术语“序列相同性百分数”指任何给定查询序列和主题序列之间的相 同程度。可按如下方法测定任何查询核酸或氨基酸序列，如糖调节性多肽，相对于 另一种主题核酸或氨基酸序列的相同性百分数。用计算机程序ClustalW(1.83版，默 认参数)对查询核酸或氨基酸序列和一种或多种主题核酸或氨基酸序列进行比对，在 全长上进行核酸或蛋白序列的比对(全局比对)。

ClustalW计算查询序列和一种或多种主题序列之间的最佳匹配，并通过比对它 们测定相同性、相似性和差异。可将一个或多个残基的缺口插入查询序列、主题序 列或二者中，以最大程度进行序列比对。在核酸序列的快速成对比对中，采用以下 默认参数：字长：2；窗口大小：4；评分方法：百分数；顶端对角线数量：4；缺口 罚分：5。在核酸序列的多重比对中，采用以下参数：缺口开放罚分：10.0；缺口延 伸罚分：5.0；重量转换：是。在蛋白序列的快速成对比对中，采用以下参数：字长： 1；窗口大小：5；评分方法：百分数；顶端对角线数量：5；缺口罚分：3。在蛋白 序列的多重比对中，采用以下参数：加权矩阵：块和(blosum)；缺口开放罚分：10.0； 缺口延伸罚分：0.05；亲水性缺口：开；亲水性残基：Gly、Pro、Ser、Asn、Asp、 Gln、Glu、Arg和Lys；残基特异性缺口罚分：开。输出是反映序列间关系的序列比 对。可以在(例如)贝勒药物研究开拓者学院网站 (searchlauncher.bcm.tmc.edu/multi-align/multi-align.html)和在欧洲生物信息研究院万 维网址(ebi.ac.uk/clustalw)上运行ClustalW。为了确定查询序列和主题序列之间的“相 同性百分数”，用比对中匹配的碱基或氨基酸的数量除以匹配和错配的碱基或氨基酸 的总数，然后乘以100。

应注意，相同性百分数值可四舍五入至小数点后一位。例如，78.11、78.12、78.13 和78.14四舍五入至78.1，而78.15、78.16、78.17、78.18和78.19四舍五入至78.2。 也应注意，长度值总是整数。

重组构建物、载体和宿主细胞

也提供了含有如本文所述核酸的载体。“载体”是复制子，如质粒、噬菌体或粘 粒，其中可能插入了另一DNA节段，以便复制插入的节段。通常，载体与合适的调 控区相连时能够复制。合适的载体骨架包括例如：本领域常用载体，如质粒、病毒、 人工染色体、BAC、YAC或PAC。术语“载体”包括克隆和表达载体，以及病毒载 体和整合载体。“表达载体”是包含一个或多个调控区的载体。合适的表达载体包括 但不限于：质粒和衍生自(例如)噬菌体、杆状病毒、烟草花叶病毒、疱疹病毒、巨细 胞病毒、牛痘病毒、腺病毒、腺伴随病毒和逆转录病毒的病毒载体。许多载体和表 达系统可购自诸如Novagen(Madison，WI)，Clontech(Palo Alto，CA)，Stratagene(La Jolla，CA)和Invitrogen/Life Technologies(Carlsbad，CA)等公司。

术语“调控区”指影响转录或反义起始和速率、以及转录或多肽产物的稳定性 和/或流动性的核苷酸序列。调控区包括但不限于：启动子序列、增强子序列、效应 元件、蛋白识别位点、可诱导元件、启动子控制元件、蛋白结合序列、5′和3′非翻译 区(UTR)、转录起始位点、终止序列、聚腺苷酸化序列、内含子和可存在于编码序列 内的其它调控区，如分泌信号和蛋白酶酶切位点。

本文所用术语“操作性连接”指调控区和可转录序列在核酸中的定位能够允许 或有利于可转录序列的转录。例如，当RNA聚合酶能够将编码序列转录为mRNA 时，调控区操作性连接于编码序列，然后可将mRNA翻译为编码序列编码的蛋白。

启动子参与了RNA聚合酶和其它蛋白的识别和结合，以启动和调节转录。为了 使编码序列在启动子控制下，一般必须将多肽翻译阅读框的翻译起始位点定位于启 动子下游的约1-50个核苷酸之间。然而，启动子可以定位于翻译起始位点上游多达 约5,000个核苷酸处，或者可以定位于转录起始位点上游约2,000个核苷酸处。启动 子一般包含至少一个核心(基本)启动子。启动子也可包含至少一个控制元件，如上游 元件。所述元件包括上游激活区(UAR)和(任选的)影响多核苷酸转录的其它DNA序 列如合成上游元件。所包含启动子的选择取决于几项因素，包括但不限于：效率、 选择性、诱导性、所需表达水平和细胞或组织特异性。

组成型启动子

在大部分(但不一定是所有)环境条件和发育或细胞分化状态下，组成型启动子可 促进操作性连接的核酸的转录。本文所提供核酸构建物中可包含的组成型启动子的 非限制性例子包括花椰菜花叶病毒(CaMV)35S转录起始区、甘露氨酸合酶(MAS)启 动子、获自根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)的T-DNA的1′或2′启动子、玄 参花叶病毒35S启动子、肌动蛋白启动子如稻米肌动蛋白启动子、泛素启动子如玉 米泛素-1启动子、p32449和p13879。

广泛表达的启动子

当启动子在许多，但不是全部植物组织中促进转录时，称其为“广泛表达的” 启动子。例如，广泛表达启动子可促进茎、芽、芽尖(顶端)和叶的一种或多种中操作 性连接序列的转录，但促进转录的程度弱或在诸如花和发育种子的再生组织等组织 中根本不促进转录。在某些情况下，操作性连接于序列的广泛表达的启动子可促进 该连接序列在植物芽中的转录，使其比发育种子中的转录水平高至少2倍，如至少3、 5、10或20倍。在其它情况下，广泛表达的启动子可促进在植物芽中的转录，使其 比花的再生组织中的转录水平高至少2倍，如至少3、5、10或20倍。根据上述内 容，认为CaMV 35S启动子不是广泛表达的启动子。本文所提供核酸构建物中可包 含的广泛表达启动子的非限制性例子包括p326、YP0158、YP0214、YP0380、PT0848、 PTO633、YP0050、YP0144和YP0190启动子。参见例如，2005年8月19日提交的 美国专利申请号11/208,308。

组织-、器官-和细胞-特异性启动子分别仅仅或主要在特定的组织、器官和细胞 类型中产生转录。在一些实施方式中，非种子组织启动子，如营养组织特异性启动 子可能是合适的调控区。营养组织包括茎、薄壁组织、基本分生组织、维管束、形 成层、韧皮部、皮层、芽端分生组织、侧芽分生组织、根端分生组织、侧根分生组 织、叶原基、叶肉或叶表皮。

根特异性启动子

根特异性启动子仅仅或主要在根组织中产生转录。根特异性启动子的例子包括 CaMV 35S启动子的根特异性亚域(Lam等，Proc Natl Acad Sci USA 86：7890-7894 (1989))；Conlding等，Plant Physiol.93：1203-1211(1990)报道的根细胞特异性启动子 和烟草RD2基因启动子。

种子特异性启动子

在一些实施方式中，可采用主要对种子特异的启动子。种子特异性启动子主要 在种子发育期间的胚乳和子叶组织中进行转录。本文提供的核酸构建物可包含的种 子特异性启动子的非限制性例子包括油菜籽蛋白启动子、Arcelin-5启动子、菜豆蛋 白基因启动子(Bustos等，Plant Cell 1(9)：839-853(1989))、大豆胰蛋白酶抑制剂启动 子(Riggs等，Plant Cell 1(6)：609-621(1989))、ACP启动子(Baerson等，Plant Mol Biol， 22(2)：255-267(1993))、硬脂酰-ACP去饱和酶基因(Slocombe等，Plant Physiol 104(4)： 167-176(1994))、β-伴大豆球蛋白启动子的大豆α亚基(Chen等，Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A.83：8560-8564(1986))、油质蛋白启动子(Hong等，Plant Mol Biol 34(3)：549-555 (1997))、玉米醇溶蛋白启动子如15kD玉米醇溶蛋白启动子、16kD玉米醇溶蛋白启 动子、19kD玉米醇溶蛋白启动子、22kD玉米醇溶蛋白启动子和27kD玉米醇溶蛋 白启动子。还有合适的是稻米谷蛋白-1基因的Osgt-1启动子(Zheng等，Mol.Cell Biol. 13：5829-5842(1993))、β-淀粉酶基因启动子和大麦醇溶蛋白基因启动子。

非种子果实组织启动子

也可采用在非种子果实组织中有活性的启动子，如聚半乳糖醛酸酶启动子、香 蕉TRX启动子和瓜肌动蛋白启动子。

雌配子体特异件启动子

为了实现雌配子体特异性表达，采用优选在雌配子体组织中驱动转录的调控元 件，如胚囊启动子。最合适的是优选在极性核或中央细胞中、或在极性核的前体中 驱动转录，但不在卵细胞或卵细胞前体中驱动转录的调控元件。也可接受转录模式 由极性核延伸至早期胚乳发育的调控元件，但最优选受精后胚乳组织中的转录快速 下降。不优选受精卵或发育胚胎中的表达。

可能合适的雌性生殖组织启动子包括衍生自以下基因的启动子：玉米MAC1(参 见Sheridan(1996)Genetics，142：1009-1020)；玉米Cat3(参见GenBank编号L05934； Abler(1993)Plant Mol.Biol，22：10131-1038)；拟南芥viviparous-1(参见GenBank编 号U93215)；拟南芥atmycl(参见Urao(1996)Plant Mol.Biol.，32：571-57；Conceicao (1994)Plant，5：493-505)。

其它雌配子体组织启动子包括衍生自以下基因的启动子：拟南芥Fie(GenBank 编号AF129516)；拟南芥Mea和拟南芥Fis2(GenBank编号AF096096)；胚珠 BEL1(Reiser(1995)Cell，83：735-742；Ray(1994)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，91：5761- 5765；GenBank编号U39944)；Fie 1.1(美国专利6,906,244)和拟南芥DMC1(参见 GenBank编号U76670)。卵巢-特异性启动子包括番茄pz7基因启动子和番茄pz130 基因启动子。其它示范性雌配子体组织特异性启动子包括以下拟南芥启动子： YP0039、YP0101、YP0102、YP0110、YP0117、YP0119、YP0137、DME启动子、 YP0285和YP0212。可用于单子叶植物如水稻的雌配子体组织启动子包括以下启动 子：Y678g10、p756a09、Y790g04、p780a10、Y730e07、Y760g09、p530c10、p524d05、 p523d11和p472e10。

有光合活性的组织启动子

有光合活性的组织启动子仅仅或主要在光合活性组织中产生转录。这种启动子 的例子包括核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶(RbcS)启动子如美洲落叶松(Larix laricina)的 RbcS启动子，松树cab6启动子(Yamamoto等，Plant Cell Physiol.35：773-778(1994))， 小麦的Cab-1基因启动子(Fejes等，Plant Mol.Biol 15：921-932(1990))，菠菜的CAB-1 启动子(Lubberstedt等，Plant Physiol.104：997-1006(1994))，水稻的cab1R启动子(Luan 等，Plant Cell 4：971-981(1992))，玉米的丙酮酸、正磷酸盐二激酶(PPDK)启动子 (Matsuoka等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90：9586-9590(1993))，烟草Lhcb1*2启动 子(Cerdan等，Plant Mol.Biol.33：245-255(1997))，拟南芥SUC2蔗糖-H+协同转运启 动子(Truernit等，Planta.196：564-570(1995))和菠菜的类囊体膜蛋白启动子(psaD、 psaF、psaE、PC、FNR、atpC、atpD、cab、rbcS)。

基本启动子

基本启动子是装配启动转录所需转录复合物所必需的最小序列。基本启动子常 包括“TATA框”元件，可定位于转录起始位点上游约15-35个核苷酸之间。基本启 动子也可包括“CCAAT框”元件(一般是序列CCAAT)和/或GGGCG序列，它可定 位于转录起始位点上游约40-200个核苷酸之间，一般约60-120个核苷酸之间。

其它启动子

其它类型的启动子包括但不限于：诱导型启动子，如响应于外界刺激如化学物 质、发育刺激或环境刺激产生转录的启动子。其它合适启动子包括美国专利申请序 列号60/505,689；60/518,075；60/544,771；60/558,869；60/583,691；60/619,181； 60/637,140；10/957,569；11/058,689；11/172,703和PCT/US05/23639所列启动子， 如启动子YP0086(gDNA ID 7418340)、YP0188(gDNA ID 7418570)、YP0263(gDNA ID 7418658)、p13879、p32449、PT0758；PT0743；PT0829；YP0096和YP0119。

其它调控区

5′非翻译区(UTR)被转录但不被翻译，该非翻译区位于转录起始位点和翻译起始 密码子之间，可包括+1核苷酸。3′UTR可位于翻译终止密码子和转录物末端之间。 UTR可具有特别功能，如提高mRNA信使稳定性或翻译衰减。3′UTR的例子包括但 不限于聚腺苷酸化信号和转录终止序列。

编码区的3′端的聚腺苷酸化区域也可操作性连接于编码序列。聚腺苷酸化区域 可来自天然基因，来自各种其它植物基因，或来自转移-DNA(T-DNA)。

合适的增强子是章鱼碱合酶(ocs)基因上游区域的顺式调控元件(-212至-154)。 Fromm等，The Plant Cell 1：977-984(1989)。

本文提供的载体也可包括例如，复制起点、支架附着区(SAR)和/或标记。标记 基因可在植物细胞上产生选择性表型。例如，标记可产生生物杀伤剂抗性，如抗生 素(如卡那霉素、G418、博来霉素或潮霉素)抗性，或除草剂(如氯磺龙(chlorosulfuron) 或草胺膦)。此外，表达载体可包括经设计有利于表达多肽的操作或检测(如纯化或定 位)的标签序列。标签序列，如绿色荧光蛋白(GFP)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、聚组 氨酸、c-myc、血凝素或FlagTM标签(Kodak，New Haven，CT)序列一般表达为与编码 多肽的融合物。这种标签可插入多肽中的任何位置，包括羧基和氨基末端。

应理解，重组多核苷酸中可存在一种以上调控区，如内含子、增强子、上游激 活区和诱导元件。因此，一种以上调控区可操作性连接于编码糖调节性多肽的序列。

本文提供的重组DNA构建物一般包括插入适合转化植物细胞的载体的多核苷 酸序列(如编码糖调节性多肽的序列)。可以采用(例如)标准的重组DNA技术制备重 组载体(参见例如，Sambrook等(1989)，《分子克隆：实验室手册》(Molecular Cloning： A Laboratory Manual)，第2版，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor， NY)。

转基因植物和细胞

本文提供的任何载体均可用于转化植物细胞，如果需要，也可用于产生转基因 植物。因此，也提供了含有本文所述核酸的转基因植物和植物细胞，以及制备这种 转基因植物和植物细胞的方法。可通过将构建物整合入基因组转化，即可稳定转化 植物或植物细胞。稳定转化的细胞在每次细胞分裂中一般都能保留引入的核酸序列。 或者，也可瞬时转化该植物或植物细胞，以便使构建物不整合入其基因组。瞬时转 化的细胞在每次细胞分裂中一般会丢失一些或全部引入的核酸构建物，以致于在足 够次数的细胞分裂后不能在子细胞中检测到引入的核酸。瞬时转化的和稳定转化的 转基因植物和植物细胞都可用于本文所述方法。

一般地，本文所述方法所用的转基因植物细胞构成了整个植物的一部分或全部。 可用适合于所研究种类的方式，在培养箱、温室或田野中培养所述植物。可根据特 定目的，如将重组核酸引入其它品系、将重组核酸转移至其它物种或进一步选择其 它所需特征的需要培养转基因植物。或者，对于适应这种技术的转基因植物种类， 可进行无性繁殖。后代包括特定植物或植物品系的后代。现有植物的后代包括F1、 F2、F3、F4、F5、F6和后代植物，或BC1、BC2、BC3和后代植物形成的种子，或F1BC1、 F1BC2、F1BC3和后代植物形成的种子。可培养转基因植物产生的种子，然后使其自 花授粉(或异型杂交并自花授粉)，以获得核酸构建物纯合的种子。

或者，可在悬浮培养物、或者组织或细胞培养物中培养转基因植物细胞，以产 生次级代谢物。为了进行本文所提供的方法，可采用固体和/或液体组织培养技术。 采用固体培养基时，可将转基因植物细胞直接放置在培养基上，或可放置在接触培 养基的滤膜上。采用液体培养基时，可将转基因植物细胞放置在漂浮装置，如接触 液体培养基的多孔性膜上。一般通过加入琼脂由液体培养基制备固体培养基。例如， 固体培养基可以是含有琼脂以及合适浓度的生长素如2，4-二氯苯氧基乙酸(2，4-D)和 合适浓度的细胞分裂素如激动素的Murashige和Skoog(MS)培养基。

转化各种高等植物物种的技术是本领域已知的。可用许多已知方法，包括电穿 孔、显微注射和生物射弹法将本文所述的多核苷酸和/或重组载体引入植物宿主的基 因组。或者，多核苷酸或载体可以与合适的T-DNA侧接区组合，并引入常规的根癌 土壤杆菌宿主载体。本领域熟知这种根癌土壤杆菌-介导的转化技术，包括去武装和 采用双元载体。其它基因转移和转化技术包括通过钙或PEG进行原生质体转化、电 穿孔介导的裸露DNA的摄入、植物组织的电穿孔、病毒载体介导的转化和微粒轰击 (参见例如，美国专利5,538,880；5,204,253；5,591,616和6,329,571)。如果细胞或组 织培养物用作转化的受体组织，可用本领域技术人员已知的技术从转化培养物再生 植物。

本文所述的多核苷酸和载体可用于转化许多单子叶和双子叶植物以及植物细胞 系统，包括双子叶植物，如苜蓿、苋菜、苹果、豆类(包括菜豆、利马豆、干豆、青 豆)、花椰菜、甘蓝、胡萝卜、蓖麻子、鹰嘴豆、樱桃、菊苣、巧克力、三叶草、咖 啡、棉花、棉籽、海甘蓝、桉树、亚麻、葡萄、柚子、柠檬、小扁豆、莴苣、亚麻 子、芒果、瓜类(如西瓜、哈密瓜)、芥菜、橙、花生、桃、梨、豌豆、胡椒、李子、 白杨、马铃薯、油菜籽(高芥酸和菜籽油)、红花、芝麻、大豆、菠菜、草莓、甜菜、 向日葵、茶、番茄，以及单子叶植物，例如香蕉、大麦、海枣、非甜质玉米、大蒜、 粟、燕麦、油椰、洋葱、菠萝、爆裂种玉米、水稻、黑麦、高粱、苏丹草、甘蔗、 甜玉米、柳枝稷、草坪草和小麦。裸子植物如冷杉、松和云杉也可能合适。也可采 用褐藻、绿藻、红藻和微藻类。

因此，本文所述的方法和组合物可用于(例如)属于以下目的双子叶植物：马兜铃 目(Aristochiales)、菊目(Asterales)、肉穗果目(Batales)、桔梗目(Campanulales)、白花 菜目(Capparales)、石竹目(Caryophyllales)、木麻黄目(Casuarinales)、卫矛目 (Celastrales)、山茱萸目(Cornales)、岩梅目(Diapensiales)、五桠果目(Dilleniales)、续 断目(Dipsacales)、柿树目(Ebenales)、杜鹃花目(Ericales)、杜仲目(Euucomiales)、大戟 目(Euphorbiales)、豆目(Fabales)、山毛榉目(Fagales)、龙胆目(Gentianales)、牻牛儿 苗目(Geraniales)、小二仙草目(Haloragales)、金缕梅目(Hamamelidales)、八角目 (Illiciales)、胡桃目(Juglandales)、脣形目(Lamiales)、樟目(Laurales)、玉蕊目 (Lecythidales)、银毛木目(Leitneriales)、木兰目(Magnoliales)、锦葵目(Malvales)、杨 梅目(Myricales)、桃金娘目(Myrtales)、睡莲目(Nymphaeales)、罂粟目(Papeverales)、 胡椒目(Piperales)、车前目(Plantaginales)、白花丹目(lumbaginales)、川苔草目 (Podostemales)、花葱目(Polemoniales)、远志目(Polygalales)、蓼目(Polygonales)、报 春花目(Primulales)、山龙眼目(Proteales)、大花草目(Rafflesiales)、毛茛目 (Ranunculales)、鼠李目(Rhamnales)、蔷薇目(Rosales)、茜草目(Rubiales)、杨柳目 (Salicales)、檀香目(Santales)、无患子目(Sapindales)、瓶子草科(Sarraceniaceae)、玄 参目(Scrophulariales)、昆栏树目(Trochodendrales)、山茶目(Theales)、伞形目 (Umbellales)、荨麻目(Urticales)和堇菜目(Violales)。本文所述的方法和组合物也可用 于(例如)属于以下目的单子叶植物：泽泻目(Alismatales)、天南星目(Arales)、棕榈目 (Arecales)、凤梨目(Bromeliales)、鸭跖草目(Commelinales)、环花草目(Cyclanthales)、 莎草目(Cyperales)、谷精草目(Eriocaulales)、水鳖目(Hydrocharitales)、灯心草目 (Juncales)、百合目(Liliales)、茨藻目(Najadales)、兰目(Orchidales)、露兜树目 (Pandanales)、禾本目(Poales)、帚灯草目(Restionales)、霉草目(Triuridales)、香蒲目 (Typhales)、姜目(Zingiberales)和属于裸子植物门，如松杉目(Pinales)、银杏目 (Ginkgoales)、苏铁目(Cycadales)和买麻藤目(Gnetales)的植物。

所述方法和组合物可用于一大类植物种类，包括以下属的种类：双子叶植物属 芹属、油丹属、腰果属、拟南芥属、落花生属、颠茄属、琼楠属、红木属、芸苔属、 辣椒属、金盏花属、红花属、菊苣属、樟属、柑桔属、西瓜属、木防己属、椰子属、 咖啡属、榛属、巴豆属、香瓜属、南瓜属、萼距花属、胡萝卜属、石竹属、番荔枝 属、大戟属、榕属、草莓属、海罂粟属、大豆属、甘草属、棉属、向日葵属、橡胶 树属、天仙子属、莴苣属、胶藤属、亚麻属、木姜子属、番茄属、羽扇豆属、马郁 兰属、苹果属、木薯属、苜蓿属、薄荷属、烟草属、木犀榄属、银胶菊属、鳄梨属、 碧冬茄属、菜豆属、黄连木属、豌豆属、杨属、李属、梨属、萝卜属、蓖麻属、蔷 薇属、迷迭香属、悬钩子属、柳属、千里光属、白芥属、茄属、菠菜属、千金藤属、 万寿菊属、可可属、三叶草属、胡芦巴属、越桔属、野豌豆属、豇豆属、葡萄属； 以及单子叶植物属葱属、须芒草属、凤梨属、Aragrostis、天门冬属、燕麦属、狗牙 根属、油棕属、羊茅属、黑麦草属、萱草属、大麦属、浮萍属、黑麦草属、芭蕉属、 稻属、黍属、Pannesetum、梯牧草属、早熟禾属、刺葵属、甘蔗属、黑麦属、高粱、 小麦属和玉蜀黍属；以及裸子植物属冷杉属、杉木属、云杉属和松属。

本文所述的方法和组合物也可用于褐藻，如泡叶藻(Ascophyllum nodosum)、墨角 藻(Fucus yesiculosus)、齿缘墨角藻(Fucus serratus)、延伸海条藻(Himanthalia elongate) 和裙带菜(Undaria pinnatifida)；红藻，如脐形紫菜(Porphyra umbilicalis)、掌状红皮藻 (Palmaria palmata)、江蓠(Gracilaria verrucosa)和皱叶角叉菜(Chondrus crispus)；绿藻， 如石莼(Ulva spp.)和浒苔(Enteromorpha spp.)；以及微藻，如螺旋藻(Spirulina sp.)(钝 顶螺旋藻(S.platensis)和极大螺旋藻(S.maxima))和长耳齿状藻(Odontella aurita)。此 外，该方法和组合物还可用于寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii)、裂壶藻 (Schizochytrium spp.)和雨生血球藻(Haematococcus pluvials)。

在一些实施方式中，植物可以是选自下组的种类：凤梨、拟南芥、芜青、欧洲 油菜、甘蓝、红木、金盏花、樟树、小果咖啡、大豆、洋甘草、陆地棉、草棉、莴 苣、番茄、辣薄荷、留兰香、粉芭蕉、稻、灰白银胶菊、迷迭香、马铃薯、可可、 普通小麦、葡萄和玉蜀黍。例如，在某些实施方式中，可优选以下种类的植物：凤 梨、芜青、欧洲油菜、甘蓝、小果咖啡、大豆、陆地棉、草棉、莴苣、番茄、辣薄 荷、留兰香、粉芭蕉、稻、灰白银胶菊、马铃薯、可可、普通小麦、葡萄和玉蜀黍。

可通过选择或筛选工程改造的植物质的特定特征或活性，如标记基因或抗生素 抗性基因所编码的特征或活性鉴定和分离转化的细胞、愈伤组织、组织或植物。这 种筛选和选择方法是本领域普通技术人员所熟知的。此外，可用物理和生化方法鉴 定转化物。它们包括用于检测多核苷酸的Southern分析或PCR扩增；用于检测RNA 转录物的Northern印迹、S1 RNA酶保护、引物延伸、定量实时PCR或逆转录PCR (RT-PCR)扩增；用于检测多肽和多核苷酸的酶或核酶活性的酶学测定；以及用于检 测多肽的蛋白质凝胶电泳、Western印迹、免疫沉淀和酶联免疫测定。可采用其它技 术如原位杂交、酶染色和免疫染色检测多肽和/或多核苷酸的存在或表达。进行所有 参考技术的方法是熟知的。将多核苷酸稳定地掺入转基因植物后，可用(例如)标准育 种技术将其引入其它植物。

与缺少转基因或不表达转基因的相应对照植物(或植物细胞)相比，转基因植物 (或植物细胞)可具有改变的表型。多肽在植物中(如在合适的时间、合适的组织中或 在合适的表达水平)表达时可影响植物(如转基因植物)的表型。可评估相对于不表达 感兴趣的外源性多核苷酸的对照植物的表型影响，对照植物有(例如)对应的野生型植 物、未进行感兴趣的外源性多核苷酸的转基因但与感兴趣的转基因植物遗传背景相 同的对应植物、或多肽表达被阻抑、抑制或不诱导(例如表达在诱导型启动子的控制 下时)的相同遗传背景的对应植物。当某植物显示出的多肽或编码该多肽的mRNA的 量是感兴趣植物所显示量的10％以下(如小于9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、 2％、1％、0.5％、0.1％、0.01％或0.001％)时，可以称该植物“不表达”该多肽。可 用以下方法评价表达，包括例如，定量实时PCR、RT-PCR、Northern印迹、S1 RNA 酶保护、引物延伸、Western印迹、蛋白质凝胶电泳、免疫沉淀、酶联免疫测定、芯 片试验和质谱。应注意，如果多肽在组织特异性或广泛表达的启动子的控制下表达， 那么可在整个植物中或所选组织中评价表达。相似地，如果多肽在特定时间，如发 育中的特定时间或诱导后的特定时间表达，那么可在所需时间上选择性评价表达。

当植物中表达本文所述糖调节性多肽时，转基因植物中一种或多种糖(如葡萄 糖、果糖或蔗糖)水平可升高。例如，转基因植物的非种子组织中葡萄糖、果糖和/ 或蔗糖中一种或多种的水平可升高。与不表达该转基因的相应对照植物中的糖水平 相比，糖水平可升高至少5％(如5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、 65、70、75、80、85、90、95、100、105、110、115、120、125、130、135、140、 145、150、175、200、225、250、275、300、350、400、450、500、550、600、650、 700、800、900或1000％)。例如，与对照植物的相应水平相比，植物的非种子组织 中葡萄糖、果糖或蔗糖的水平可升高至少7％-约120％或其间任何值，如至少9％、 10％、11％、15％、18％、20％、21％、22％、24％、27％、29％、30％、31％、35％、 36％、37％、40％、43％、50％、51％、60％、63％、70％、75％、80％、90％、105％ 或115％。在一些情况下，与对照植物的相应水平相比，植物的非种子组织中葡萄糖 水平可升高至少10％-约120％或其间任何值，如至少15％、18％、21％、24％、27％、 29％、31％、35％、37％、40％、43％、50％、60％、70％、75％、80％、90％、105％ 或115％。在一些情况下，与对照植物的相应水平相比，植物的非种子组织中果糖水 平可升高至少7％-约115％或其间任何值，如至少10％、15％、18％、20％、24％、30％、 36％、40％、44％、50％、55％、60％、70％、75％、80％、90％、105％或110％。在 其它情况下，与对照植物的相应水平相比，植物的非种子组织中蔗糖水平可升高至 少10％-约100％或其间任何值，如至少12％、15％、18％、24％、29％、35％、40％、 45％、51％、56％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、92％或97％。在其它情况 下，与对照植物的相应水平相比，植物的非种子组织中葡萄糖和果糖水平可升高至 少7％-约120％或其间任何值，如至少10％、12％、15％、18％、20％、21％、24％、 27％、29％、30％、31％、35％、36％、37％、40％、43％、50％、60％、70％、75％、 80％、90％、105％或115％。

种子、榨取物、非种子组织、动物饲料和制品

本文也提供了基于本文所述转基因植物的组合物，如食品和饲料品，以及制品， 如袋装种子。一般地，以基本均一的种子混合物为条件，通过本领域已知方式包装 到包装材料中，形成制品。包装材料如纸和布是本领域熟知的。这种袋装种子的包 装袋外优选附有包装标签，如固定在包装材料上的标签或标记、印刷在包装材料上 的标签或插入包装袋中的标签。包装标签可标明，其中所含种子掺入了使该种子生 长出的植物的一种或多种组织中一种或多种糖含量增加的转基因。

本文所述的转基因植物的种子本身可用于(例如)生长出植物，或可用于制备食品 如面粉、植物油、不溶性纤维。本文所述转基因植物的非种子组织本身可用于食品 或可用于制备食品，如新鲜、罐装和冷冻的水果和蔬菜。本文所述转基因植物的种 子和非种子组织也可用作动物饲料。本文所述转基因植物也可用于制备谷物，如小 麦、燕麦、稻米、大麦、昆诺阿藜和黑麦。这种产品可用于增加食物中的糖含量和 增加甜味。

本文所述转基因植物也可用作适合发酵生产乙醇的原料。例如，可发酵玉米穗 轴、玉米杆、甘蔗、甜菜、水果(新鲜或干燥的)、柑桔糖蜜、高粱茎和棉花来生产乙 醇。也可用甘蔗汁或糖蜜作为原料生产燃料乙醇。由糖含量提高的植物质生产乙醇 可提高乙醇产量。

本文所述转基因植物也可用作采用本领域已知技术榨糖的来源。例如，可由甘 蔗、甜菜、海枣、高粱和糖槭中榨糖。也可从甘蔗中榨取糖蜜。可纯化得到的榨取 物。可将纯化的糖、糖浆、糖汁或含糖榨取物包括到营养补充剂以及加工食品中， 如软饮料、运动饮料、冰淇淋、烘烤品、调味品、沙司、番茄酱、罐头食品、肉类、 沙拉、糖果、果汁、蔬菜汁、糖浆、休闲食品、冷冻主菜、早餐谷类、早餐面包、 婴儿食品和高果糖玉米糖浆。糖也可包括在细胞培养基中。

方法

本文也提供了采用所述多核苷酸、多肽、植物细胞、转基因植物、种子和组织 的方法。例如，提供了调节植物，如植物的非种子组织或种子中糖水平的方法。该 方法包括将本文所述的一种或多种外源性核酸引入植物细胞。调节水平可以是糖， 包括葡萄糖、果糖和/或蔗糖中一种或多种的水平升高。

也提供了产生糖水平(如葡萄糖、果糖和/或蔗糖水平升高)被调节的植物的方法， 该方法包括将上述一种或多种外源性核酸引入植物细胞，由该植物细胞培养出植物。 葡萄糖、果糖和/或蔗糖中一种或多种水平升高可以在植物的种子和/或非种子组织中 发生。

也提供了生产糖的方法。该方法包括从本文所述转基因植物(如甘蔗或甜菜)中榨 糖。可用本领域已知技术从这些植物中榨糖。

糖水平升高的转基因植物(如玉米、小麦和甜菜)也可用于乳酸酯/乳酸的生产过 程。乳酸酯可用于产生聚交酯聚合物(参见例如，美国专利号6,291,597)。而且，糖 可用于产生聚交酯聚合物。

最后，提供了生产乙醇的方法。该方法包括发酵基于本文所提供转基因植物的 植物质。可用本领域已知技术使植物质发酵产生乙醇(参见例如，美国专利号 6,509,180和6,927,048)。

当本文所述多核苷酸和多肽非天然地表达(例如相对于在植物中的位置，如根与 茎；环境条件；植物种类；发育时间和/或表达水平)时，它们可产生糖水平被调节的 植物。这些特征可用于利用或最大程度利用植物产品，包括但不限于非种子组织、 根、种子、花、果实、榨取物和油。例如，本文提供的核酸可用于产生参与糖合成 的一种或多种多核苷酸的表达增加的转基因植物。在一些情况下，本文提供的核酸 可用于产生参与维持糖水平(如调节糖降解)的一种或多种多肽的表达增加或降低的 转基因植物。在一些情况下，本文提供的核酸可用于产生参与调节糖合成或维持糖 水平所涉及的一种或多种基因表达的一种或多种多肽的表达增加的转基因植物。这 些转基因植物可产生的一种或多种糖(如葡萄糖、果糖或蔗糖)水平较高，如本文所述。 因此，本文提供的多核苷酸和多肽可用于制备在农业和营养工业中有具体应用的转 基因植物。以下实施例进一步描述本发明，但它们不限制权利要求书所述的本发明 范围。

                            实施例

                       实施例1-转基因植物

实施例中采用以下符号：T1：第一代转化子；T2：第二代，自花受粉的T1植物 的后代；T3：第三代，自花受粉的T2植物的后代；T4：第四代，自花受粉的T3植物 的后代。将独立转化称为事件。

Ceres克隆625627(SEQ ID NO：13)含有与两种不同核苷酸序列同源的核苷酸序 列。5′端的前510个核苷酸对应于含有AP2 DNA-结合域的大豆表达序列标签 (GenBank登录号AW734757)的一部分。核苷酸505-725对应于编码ATP酶相关蛋白 的核酸序列的一部分。Ceres克隆625627编码了174个氨基酸的多肽。

Ceres克隆32380(SEQ ID NO：1)编码了232个氨基酸的多肽，预计该多肽是 DNA指导的RNA聚合酶II的第三大亚基。

构建Ti质粒载体，使其含有操作性连接于35S启动子的Ceres克隆625627或 Ceres克隆32380。用于这些构建物的Ti质粒载体CRS338含有草胺膦蛋白乙酰转移 酶基因，它能使转化植物产生FinaleTM抗性。用各Ti质粒载体分别转化野生型拟南 芥Wassilewskija(Ws)植物，基本如Bechtold等，CR.Acad.Sd.Paris，316：1194-1199 (1993)所述。

含有Ceres克隆625627或Ceres克隆32380的拟南芥品系分别称为ME02225或 ME05896。用FinaleTM抗性、绿叶组织提取物的PCR扩增和PCR产物的测序，验证 了ME02225中Ceres克隆625627载体的存在以及ME05896中Ceres克隆32380载 体的存在。作为对照，用空载体SR00559转化野生型拟南芥Wassilewskija(Ws)植物。

ME02225和ME05896中各选十个事件，筛选T1代中可见的表型改变。所有T1 代植物的物理性质都与对照植物相同。

                 实施例2-ME02225事件中的糖水平分析

将从ME02225的T1事件中收集的种子混合物培养成植物。抽苔10天后收获植 物。收集四株隔开的FinaleTM-抗性T2植物的非种子组织(如地上组织)并立即用液氮 冷冻。将该组织储存于-80℃，随后冻干72小时。将冷冻组织碾成细粉，准备用气相 色谱-质谱(GC-MS)分析。简要说，一式三份用甲醇萃取冷冻组织，然后用二氯甲烷 萃取。用转甲基作用、甲氧基胺化和三甲基化衍生极性相。将衍生的萃取物(2μL)注 射到Shimadzu GC-MS QP-2010(Shimadzu Scientific Instruments，美国密苏里州哥伦 比亚)中。用Shimadzu GC-MS Solutions软件(Shimadzu Scientific Instruments)分析数 据。简要说，身份验证后，用保留时间标准和参比离子峰比值对靶离子峰面积进行 积分。根据内标并相对于对照样品标准化靶离子峰面积。对标准化的葡萄糖和果糖 的峰面积求平均，并计算标准差。

与相应对照植物的非种子组织的葡萄糖和果糖水平相比，ME02225的T2植物的 非种子组织的葡萄糖和果糖水平升高。如图5所示，与相应对照植物的葡萄糖和果 糖水平相比，ME02225的T2植物的葡萄糖和果糖水平分别增加105％和90％。

除分析从种子混合物生长出的ME02225植物以外，单独分析ME02225的事件。 分别种植ME02225的四个事件各自产生的种子。将ME02225的四个事件各自产生 的T2和T3植物培养到抽苔后10天。收集各事件的四株FinaleTM抗性植物的非种子 组织，用液氮冷冻，储存于-80℃。将冷冻组织冻干72小时并储存于-80℃。将冻干 组织碾成细粉，准备用GC-MS分析。简要说，用甲醇萃取冻干的植物组织三次，然 后用二氯甲烷萃取。用甲氧胺和N-甲基-N-(三甲基甲硅烷基)三氟乙酰胺(MSTFA)衍 生极性相。用GC-MS分析衍生的萃取物，如上所述分析数据。

GC-MS分析显示，与对照植物相比，事件-02和-04的FinaleTM-抗性T2植物的 葡萄糖水平显著升高。如表1所示，与相应对照植物相比，事件-02和-04的葡萄糖 水平分别增加24％和35％。

              表1：ME02225事件的T2和T3植物的葡萄糖水平(％对照)   Ws对照   ME02225-02   ME02225-03   ME02225-04   ME02225-05   T2   100±12   124±3   109±21   135±8   77±3   p值   NA   0.07   0.56   0.02   0.08   T3   100±12   137±6   108±7   129±11   103±4   p值   NA   ＜0.01   0.28   0.02   0.61

也用GC-MS分析四个ME02225事件的FinaleTM-抗性T3植物的葡萄糖水平。与 对照植物相比，事件-02和-04的葡萄糖水平显著增加。如表1所示，与相应对照植 物相比，事件-02和-04的葡萄糖水平分别增加了37％和29％。

GC-MS分析也显示，与对照植物相比，事件-02和-04的FinaleTM-抗性T2植物 的果糖水平显著增加。如表2所示，与相应对照植物相比，事件-02和-04的果糖水 平分别增加了10％和30％。事件-02的果糖水平升高10％不具有统计学显著性。

                表2：ME02225事件的T2和T3植物的果糖水平(％对照)   Ws对照   ME02225-02   ME02225-03   ME02225-04   ME02225-05   T2   100±17   110±8   101±15   130±6   70±6   p值   NA   0.41   0.92   0.08   0.08   T3   100±13   140±10   110±12   130±10   100±9   p值   NA   ＜0.01   0.45   ＜0.01   ＜0.01

也用GC-MS分析四个ME02225事件的FinaleTM-抗性T3植物的果糖水平。与对 照植物相比，事件-02和-04的果糖水平显著增加。如表2所示，与相应对照植物相 比，事件-02和-04的果糖水平分别增加了40％和30％。

在萌发、开花初期、莲状叶(rosette)直径、生殖力、植物高度和总体形态/体系结 构方面，T2 ME02225和对照植物没有可观察的差异或统计学显著性差异。

                实施例3-分析ME05896事件的糖水平

用GC-MS分析五个ME05896事件的FinaleTM-抗性T2植物的蔗糖水平，如上所 述。如表3所示，与相应对照植物相比，事件-01和-02的蔗糖水平分别增加了63％ 和22％。

也用GC-MS分析五个ME05896事件的FinaleTM抗性T3植物的蔗糖水平。如表 3所示，ME05896的T3植物所表现出的糖水平升高趋势类似于T2植物，尤其是在事 件-01的情况下。

                     表3：ME05896事件的T2植物的蔗糖水平(增加倍数)   ME05896-01   ME05896-02   ME05896-03   ME05896-04   ME05896-10   对照  T2   1.63±0.12   1.22±0.07   1.07±0.04   1.01±0.08   1.07±0.08   1.00±0.13  p值   ＜0.01   0.08   0.40   0.90   0.48   NA  T3   1.14±0.09   1.01±0.03   1.07±0.03   1.02±0.05   0.89±0.03   1.00±0.06  p值   0.10   0.40   0.01   0.40   0.01   NA

            实施例4-测定功能同源物和/或直向同源序列

如果主题序列编码的蛋白在功能和/或活性上类似于查询序列编码的蛋白，那么 认为主题序列是查询序列的功能同源物和/或直向同源物。用称为交互BLAST(Rivera 等，Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)，1998，95：6239-6244)方法鉴定来自可用的公共和 专利肽序列数据库，包括NCBI NR蛋白质数据库和私人的Ceres数据库(Ceres克隆 序列的肽翻译数据库)中潜在的功能同源物和/或直向同源序列。

开始交互BLAST法之前，用BLAST在来源物种的所有多肽中搜索特定的查询 多肽，以鉴定与查询多肽的序列相同性为80％或更高的多肽。查询多肽与鉴定为与 查询多肽的序列相同性为80％或更高的多肽一起被称为簇。

主要的交互BLAST法由两轮BLAST搜索组成：正向搜索和反向搜索。在正向 搜索步骤中，用感兴趣物种的所有蛋白序列BLAST检索来自来源种类SA的查询多 肽序列“多肽A”。用E-值截止值10-5和相同性截止值35％确定最佳匹配、或最高命 中。在最高命中中，认为E值最低的命中是最佳命中和潜在的功能同源物和/或直向 同源物。与最佳命中或初始查询多肽的序列相同性为80％或更高的任何其它最高命 中也被认为是潜在的功能同源物和/或直向同源物。对所有感兴趣种类重复此方法。

在交互Blast法的反向搜索中，用来源种类SA的所有蛋白序列BLAST检索正 向搜索中从所有种类中鉴定出的最高命中。正向搜索的最高命中如果将上述簇的多 肽返回为其最佳命中，也被认为是潜在的功能同源物和/或直向同源物。

手工检查潜在的功能同源物和/或直向同源物，以选择鉴定的功能同源物和/或直 向同源物。结果见图6。与SEQ ID NO：2的相同性百分数见下表4。   名称   物种  SEQ ID NO：   ％相同性   Ceres克隆32380   拟南芥  2   100.00   gi|21593370   拟南芥  3   86.80   Ceres克隆692249   大豆  4   76.40   Ceres克隆244359   玉蜀黍  6   73.50   gi|50898416   水稻日本亚种  7   72.40   Ceres克隆698259   普通小麦  5   70.10   gi|21593370T   拟南芥  8   87.00   Ceres克隆692249T   大豆  9   76.02   Ceres克隆244359T   玉蜀黍  11   70.00   gi|50898416T   水稻日本亚种  12   68.97   Ceres克隆698259T   普通小麦  10   66.52

                          其它实施方式

应理解，虽然与本发明详述一起描述了本发明，但上述说明书旨在说明而非限 制所附权利要求书的范围所确定的本发明范围。所附权利要求书的范围包括其它方 面、优点和修改。

                      相关申请的交叉引用

本申请根据35 U.S.C.119要求以全文纳入本文作参考的2004年9月14日提交 的美国临时申请号60/610,356的优先权。

                                 序列表

<110>赛乐斯股份有限公司(Ceres，Inc.)

<120>调节植物糖水平

<130>11696-137002/WO2

<141>2005-09-14

<150>60/610,356

<151>2004-09-14

<160>14

<210>1

<211>922

<212>DNA

<213>拟南芥(Arabidopsis thaliana)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(922)

<223>Ceres克隆ID编号32380

<220>

<221>CDS

<222>(90)..(786)

<223>参照SEQ ID NO：2

<400>1

ctctccaaat ttcttcttct tctccggcga agaaatcgaa aagtcattac cctaagagtc  60

ccagagtcgt cagaaggaac agcttttgaa atggacggtg tcacatacca aagattccca  120

acggtgaaga tccgtgagct taaagatgac tacgccaagt tcgagcttcg tgaaaccgac  180

gtttcaatgg ccaacgctct ccgtcgcgta atgatctccg aagtccccac catggcaatc  240

catctcgtca aaatcgaggt taattcctct gttctcaacg acgagttcat tgctcaacga  300

cttcgtctca tccctctcac tagcgagcgt gctatgagca tgcggttctg tcaagattgt  360

gaagattgta acggagatga acattgcgag ttctgctctg ttgagtttcc ccttagtgct  420

aagtgtgtta ctgaccaaac cctagatgtt actagtaggg atctctacag tgctgatcct  480

actgttactc ctgttgattt cactagtaac tcatctactt ctgattcaag cgagcacaag  540

ggaattatca ttgcgaaact acgcagggga caagagttga agcttaaagc attagcgagg  600

aaaggaattg ggaaagatca tgcgaaatgg tctcctgcag ctactgttac gtatatgtat  660

gagcctgaca ttattatcaa tgaagagatg atgaacactt tgacagatga ggaaaaaatt  720

gacttgattg agagcagtcc taccaaagtg tttggcatta ccggacaggt taatttcgat  780

gttctgtaag aataacatct atacaagttt atagctttga gacttcaata tgattgtact  840

actttatagg ctaccatgct ttgaaatata tgtatgtgat gtggtgtatg aattttcttt  900

aagtgtttag tgcgtttagc cc                                         922

<210>2

<211>232

<212>PRT

<213>拟南芥(Arabidopsis thaliana)

<220>

<221>misc_feature

<222>(16)..(130)

<223>Pfam名称：RNA_pol_L；Pfam描述：RNA聚合酶Rpb3/Rpb11二聚化结构域

<220>

<221>misc_feature

<222>(53)..(181)

<223>Pfam名称：RNA_pol_A_bac；Pfam描述：RNA聚合酶Rpb3/RpoA插入结构域

<400>2

Met Asp Gly Val Thr Tyr Gln Arg Phe Pro Thr Val Lys Ile Arg Glu

1               5                   10                  15

Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Glu Thr Asp Val Ser

            20                  25                  30

Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ser Glu Val Pro Thr Met

        35                  40                  45

Ala Ile His Leu Val Lys Ile Glu Val Asn Ser Ser Val Leu Asn Asp

    50                  55                  60

Glu Phe Ile Ala Gln Arg Leu Arg Leu Ile Pro Leu Thr Ser Glu Arg

65                  70                  75                  80

Ala Met Ser Met Arg Phe Cys Gln Asp Cys Glu Asp Cys Asn Gly Asp

                85                  90                  95

Glu His Cys Glu Phe Cys Ser Val Glu Phe Pro Leu Ser Ala Lys Cys

            100                 105                 110

Val Thr Asp Gln Thr Leu Asp Val Thr Ser Arg Asp Leu Tyr Ser Ala

        115                 120                 125

Asp Pro Thr Val Thr Pro Val Asp Phe Thr Ser Asn Ser Ser Thr Ser

    130                 135                 140

Asp Ser Ser Glu His Lys Gly Ile Ile Ile Ala Lys Leu Arg Arg Gly

145                 150                 155                 160

Gln Glu Leu Lys Leu Lys Ala Leu Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

                165                 170                 175

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Tyr Met Tyr Glu Pro

            180                 185                 190

Asp Ile Ile Ile Asn Glu Glu Met Met Asn Thr Leu Thr Asp Glu Glu

        195                 200                 205

Lys Ile Asp Leu Ile Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Gly Ile Thr

    210                 215                 220

Gly Gln Val Asn Phe Asp Val Leu

<210>3

<211>319

<212>PRT

<213>拟南芥(Arabidopsis thaliana)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(319)

<223>公共GI编号21593370

<400>3

Met Asp Gly Ala Thr Tyr Gln Arg Phe Pro Lys Ile Lys Ile Arg Glu

1               5                   10                  15

Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Glu Thr Asp Val Ser

            20                  25                  30

Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ser Glu Val Pro Thr Val

        35                  40                  45

Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser Val Leu Asn Asp

    50                  55                  60

Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Ser Leu Thr Ser Glu Arg

65                  70                  75                  80

Ala Met Ser Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala Cys Asp Gly Asp

                85                  90                  95

Gly Gln Cys Glu Phe Cys Ser Val Glu Phe Arg Leu Ser Ser Lys Cys

            100                 105                 110

Val Thr Asp Gln Thr Leu Asp Val Thr Ser Arg Asp Leu Tyr Ser Ala

        115                 120                 125

Asp Pro Thr Val Thr Pro Val Asp Phe Thr Ile Asp Ser Ser Val Ser

    130                 135                 140

Asp Ser Ser Glu His Lys Gly Ile Ile Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly

145                 150                 155                 160

Gln Glu Leu Lys Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

                165                 170                 175

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro

            180                 185                 190

Asp Ile Ile Ile Asn Glu Asp Met Met Asp Thr Leu Ser Asp Glu Glu

        195                 200                 205

Lys Ile Asp Leu Ile Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Gly Met Asp

    210                 215                 220

Pro Val Thr Arg Gln Val Val Val Val Asp Pro Glu Ala Tyr Thr Tyr

225                 230                 235                 240

Asp Glu Glu Val Ile Lys Lys Ala Glu Ala Met Gly Lys Pro Gly Leu

                245                 250                 255

Ile Glu Ile Ser Pro Lys Asp Asp Ser Phe Ile Phe Thr Val Glu Ser

            260                 265                 270

Thr Gly Ala Val Lys Ala Ser Gln Leu Val Leu Asn Ala Ile Asp Leu

        275                 280                 285

Leu Lys Gln Lys Leu Asp Ala Val Arg Leu Ser Asp Asp Thr Val Glu

    290                 295                 300

Ala Asp Asp Gln Phe Gly Glu Leu Gly Ala His Met Arg Gly Gly

305                 310                 315

<210>4

<211>319

<212>PRT

<213>大豆(Glycine max)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(319)

<223>Ceres克隆ID编号692249

<400>4

Met Glu Gly Gly Val Ser Tyr Ala Arg Met Pro Arg Val Lys Ile Arg

1               5                   10                  15

Glu Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Asp Thr Asp Ala

            20                  25                  30

Ser Ile Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu Val Pro Thr

        35                  40                  45

Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser Val Leu Asn

    50                  55                  60

Asp Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu Thr Ser Glu

65                  70                  75                  80

Arg Ala Met Ser Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala Cys Asp Gly

                85                  90                  95

Asp Gly Gln Cys Glu Phe Cys Ser Val Glu Phe His Leu Arg Val Lys

            100                 105                 110

Cys Met Thr Asp Gln Thr Leu Asp Val Thr Ser Lys Asp Leu Tyr Ser

        115                 120                 125

Ser Asp Pro Thr Val Ser Pro Val Asp Phe Ser Asp Pro Ser Ala Thr

    130                 135                 140

Asp Ser Asp Asn Asn Arg Gly Ile Ile Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly

145                 150                 155                 160

Gln Glu Leu Lys Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

                165                 170                 175

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro

            180                 185                 190

Glu Ile His Ile Asn Glu Asp Leu Met Glu Thr Leu Thr Leu Glu Glu

        195                 200                 205

Lys Arg Glu Trp Val Asp Ser Ser Pro Thr Arg Val Phe Glu Ile Asp

    210                 215                 220

Pro Val Thr Gln Gln Val Met Val Val Asp Ala Glu Ala Tyr Thr Tyr

225                 230                 235                 240

Asp Asp Glu Val Leu Lys Lys Ala Glu Ala Met Gly Lys Pro Gly Leu

                245                 250                 255

Val Glu Ile Ile Ala Arg Gln Asp Ser Phe Ile Phe Thr Val Glu Ser

            260                 265                 270

Thr Gly Ala Val Lys Ala Ser Gln Leu Val Leu Asn Ala Ile Glu Ile

        275                 280                 285

Leu Lys Gln Lys Leu Asp Ala Val Arg Leu Ser Glu Asp Thr Val Glu

    290                 295                 300

Ala Asp Asp Gln Phe Gly Glu Leu Gly Ala His Met Arg Gly Gly

305                 310                 315

<210>5

<211>331

<212>PRT

<213>普通小麦(Triticum aestivum)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(331)

<223>Ceres克隆ID编号698259

<400>5

Met Glu Arg Ser Ala Ala Gly Ala Ser Tyr Gln Arg Phe Pro Arg Val

1               5                   10                  15

Arg Ile Arg Glu Leu Lys Asp Glu Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Lys Asp

            20                  25                  30

Thr Asp Ala Ser Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu

        35                  40                  45

Val Pro Thr Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Ser Asn Ser Ser

    50                  55                  60

Val Leu Asn Asp Glu Phe Leu Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu

65                  70                  75                  80

Thr Ser Ser Ala Ala Met Ser Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala

                85                  90                  95

Cys Asp Gly Asp Gly Ser Cys Glu Tyr Cys Ser Val Glu Phe His Leu

            100                 105                 110

Ala Ala Arg Ala Thr Asp Ser Gly Gln Thr Leu Glu Val Thr Ser Thr

        115                 120                 125

Lys Asp Leu Arg Ser Thr Asp Pro Lys Val Cys Pro Val Asp Gln Gln

    130                 135                 140

Arg Glu Tyr Gln Gln Ala Leu Gly Asn Val Asp Ala Tyr Glu Pro Asp

145                 150                 155                 160

Ala Ala Gly Asp His Arg Gly Ile Leu Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly

                165                 170                 175

Gln Glu Leu Arg Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

            180                 185                 190

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro

        195                 200                 205

Asp Ile Arg Ile Asn Gln Glu Leu Met Glu Thr Leu Thr Leu Glu Glu

    210                 215                 220

Lys Gln Ser Trp Val Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Asp Ile Asp

225                 230                 235                 240

Pro Val Thr Gln Gln Val Thr Ile Val Asp Pro Glu Ala Tyr Thr Tyr

                245                 250                 255

Asp Asp Glu Val Ile Lys Lys Ala Glu Ala Met Gly Lys Pro Gly Leu

            260                 265                 270

Val Glu Ile Asn Ala Lys Glu Asp Ser Phe Val Phe Thr Val Glu Thr

        275                 280                 285

Thr Gly Ala Ile Thr Ala Tyr Glu Leu Ile Met Asn Ala Ile Thr Val

    290                 295                 300

Leu Arg Gln Lys Leu Asp Ala Val Arg Leu Gln Asp Asp Asp Gly Asp

305                 310                 315                 320

Leu Gly Glu Leu Gly Ala His Leu Ile Gly Gly

                325                 330

<210>6

<211>328

<212>PRT

<213>玉蜀黍(Zea mays)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(328)

<223>Ceres克隆ID编号244359

<400>6

Met Asp Arg Pro Ser Gly Thr Ser Tyr Gln Arg Phe Pro Arg Val Arg

1               5                   10                  15

Ile Arg Glu Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Asp Thr

            20                  25                  30

Asp Ala Ser Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu Val

        35                  40                  45

Pro Thr Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser Val

    50                  55                  60

Leu Asn Asp Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu Thr

65                  70                  75                  80

Ser Ala Ala Ala Met Gln Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala Cys

                85                  90                  95

Asp Gly Asp Gly Ser Cys Glu Tyr Cys Ser Val Glu Phe His Leu Ser

            100                 105                 110

Val His Ala Thr Asp Ser Asp Gln Thr Leu Glu Val Thr Ser Asn Asp

        115                 120                 125

Leu Arg Ser Met Asp Pro Lys Val Cys Pro Val Asp Gln Ala Arg Ala

    130                 135                 140

Tyr Gln His Ala Leu Gly Gly Thr Asp Pro Phe Gly Ala Asn Ala Ser

145                 150                 155                 160

Asn Glu Asn Arg Gly Ile Leu Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly Gln Glu

                165                 170                 175

Leu Arg Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp His Ala

            180                 185                 190

Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro Asp Ile

        195                 200                 205

Arg Ile Asn Glu Glu Leu Met Glu Thr Leu Thr Val Glu Glu Arg Ile

    210                 215                 220

Ser Leu Ile Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Glu Leu Asp Ser Ala

225                 230                 235                 240

Asn Gln Val Val Val Lys Asn Ala Glu Ala Tyr Thr Tyr Asp Asp Glu

                245                 250                 255

Val Ile Lys His Ala Glu Ala Ile Gly Lys Pro Gly Leu Val Glu Ile

            260                 265                 270

Thr Ala Lys Glu Asp Ser Phe Val Phe Thr Val Glu Thr Thr Gly Ala

        275                 280                 285

Ile Thr Ala Tyr Glu Leu Ile Met Asn Ala Ile Thr Val Leu Arg Gln

    290                 295                 300

Lys Leu Asp Ala Val Arg Leu Gln Asp Asp Asp Gly Asp Leu Gly Glu

305                 310                 315                 320

Leu Gly Ala His Leu Gly Gly Pro

                325

<2l0>7

<211>330

<212>PRT

<213>稻(Oryza sativa)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(330)

<223>公共GI编号50898416

<400>7

Met Glu Arg Ala Ala Gly Gly Val Ser Tyr Gln Arg Phe Pro Arg Val

1               5                   10                  15

Arg Ile Arg Glu Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Asp

            20                  25                  30

Thr Asp Ala Ser Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu

        35                  40                  45

Val Pro Thr Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser

    50                  55                  60

Val Leu Asn Asp Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu

65                  70                  75                  80

Thr Ser Ala Ala Ala Met Ala Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala

                85                  90                  95

Cys Asp Gly Asp Gly Ser Cys Glu Tyr Cys Ser Val Glu Phe His Leu

            100                 105                 110

Ala Ala Arg Ala Thr Asp Ser Asp Gln Thr Leu Glu Val Thr Ser Asn

        115                 120                 125

Asp Leu Arg Ser Thr Asp Pro Lys Val Cys Pro Val Asp Gln Ala Arg

    130                 135                 140

Ala Tyr Gln His Ala Leu Gly Gly Thr Glu Pro Phe Asp Thr Ala Ala

145                 150                 155                 160

Ala Ala Asp Gln Arg Gly Ile Leu Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly Gln

                165                 170                 175

Glu Leu Arg Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp His

            180                 185                 190

Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro Glu

        195                 200                 205

Ile Arg Ile Asn Glu Glu Leu Met Glu Thr Leu Thr Leu Glu Glu Lys

    210                 215                 220

Arg Asn Leu Val Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Asn Ile Asp Pro

225                 230                 235                 240

Asn Thr Gln Gln Val Val Val Glu Asp Ala Glu Ala Tyr Thr Tyr Asp

                245                 250                 255

Asp Glu Val Ile Lys Lys Ala Asp Ala Met Gly Lys Pro Gly Leu Ile

            260                 265                 270

Glu Ile Asn Ala Lys Glu Asp Ser Phe Ile Phe Thr Val Glu Thr Thr

        275                 280                 285

Gly Ala Ile Thr Ala Tyr Glu Leu Ile Met Asn Ala Ile Thr Val Leu

    290                 295                 300

Arg Gln Lys Leu Asp Ala Val Arg Leu Gln Asp Asp Asp Ala Asp Leu

305                 310                 315                 320

Gly Glu Leu Gly Ala His Leu Val Gly Gly

                325                 330

<210>8

<211>226

<212>PRT

<213>玉蜀黍(Zea mays)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(226)

<223>公共GI编号21593370T

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(226)

<223>公共GI编号21593370的截短部分

<400>8

Met Asp Gly Ala Thr Tyr Gln Arg Phe Pro Lys Ile Lys Ile Arg Glu

1               5                   10                  15

Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Glu Thr Asp Val Ser

            20                  25                  30

Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ser Glu Val Pro Thr Val

        35                  40                  45

Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser Val Leu Asn Asp

    50                  55                  60

Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Ser Leu Thr Ser Glu Arg

65                  70                  75                  80

Ala Met Ser Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala Cys Asp Gly Asp

                85                  90                  95

Gly Gln Cys Glu Phe Cys Ser Val Glu Phe Arg Leu Ser Ser Lys Cys

            100                 105                 110

Val Thr Asp Gln Thr Leu Asp Val Thr Ser Arg Asp Leu Tyr Ser Ala

        115                 120                 125

Asp Pro Thr Val Thr Pro Val Asp Phe Thr Ile Asp Ser Ser Val Ser

    130                 135                 140

Asp Ser Ser G1u His Lys Gly Ile Ile Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly

145                 150                 155                 160

Gln Glu Leu Lys Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

                165                 170                 175

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro

            180                 185                 190

Asp Ile Ile Ile Asn Glu Asp Met Met Asp Thr Leu Ser Asp Glu Glu

        195                 200                 205

Lys Ile Asp Leu Ile Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Gly Met Asp

    210                 215                 220

Pro Val

225

<210>9

<211>226

<212>PRT

<213>玉蜀黍(Zea mays)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(226)

<223>Ceres克隆ID编号692249T

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(226)

<223>Ceres克隆ID编号692249的截短部分

<400>9

Met Glu Gly Gly Val Ser Tyr Ala Arg Met Pro Arg Val Lys Ile Arg

1               5                   10                  15

Glu Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Asp Thr Asp Ala

            20                  25                  30

Ser Ile Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu Val Pro Thr

        35                  40                  45

Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser Val Leu Asn

    50                  55                  60

Asp Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu Thr Ser Glu

65                  70                  75                  80

Arg Ala Met Ser Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala Cys Asp Gly

                85                  90                  95

Asp Gly Gln Cys Glu Phe Cys Ser Val Glu Phe His Leu Arg Val Lys

            100                 105                 110

Cys Met Thr Asp Gln Thr Leu Asp Val Thr Ser Lys Asp Leu Tyr Ser

        115                 120                 125

Ser Asp Pro Thr Val Ser Pro Val Asp Phe Ser Asp Pro Ser Ala Thr

    130                 135                 140

Asp Ser Asp Asn Asn Arg Gly Ile Ile Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly

145                 150                 155                 160

Gln Glu Leu Lys Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

                165                 170                 175

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro

            180                 185                 190

Glu Ile His Ile Asn Glu Asp Leu Met Glu Thr Leu Thr Leu Glu Glu

        195                 200                 205

Lys Arg Glu Trp Val Asp Ser Ser Pro Thr Arg Val Phe Glu Ile Asp

    210                 215                 220

Pro Val

225

<210>10

<211>240

<212>PRT

<213>普通小麦(Triticum aestivum)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(240)

<223>Ceres克隆ID编号698259T

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(240)

<223>Ceres克隆ID编号698259的截短部分

<400>10

Met Glu Arg Ser Ala Ala Gly Ala Ser Tyr Gln Arg Phe Pro Arg Val

1               5                   10                  15

Arg Ile Arg Glu Leu Lys Asp Glu Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Lys Asp

            20                  25                  30

Thr Asp Ala Ser Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu

        35                  40                  45

Val Pro Thr Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Ser Asn Ser Ser

    50                  55                  60

Val Leu Asn Asp Glu Phe Leu Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu

65                  70                  75                  80

Thr Ser Ser Ala Ala Met Ser Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala

                85                  90                  95

Cys Asp Gly Asp Gly Ser Cys Glu Tyr Cys Ser Val Glu Phe His Leu

            100                 105                 110

Ala Ala Arg Ala Thr Asp Ser Gly Gln Thr Leu Glu Val Thr Ser Thr

        115                 120                 125

Lys Asp Leu Arg Ser Thr Asp Pro Lys Val Cys Pro Val Asp Gln Gln

    130                 135                 140

Arg Glu Tyr Gln Gln Ala Leu Gly Asn Val Asp Ala Tyr Glu Pro Asp

145                 150                 155                 160

Ala Ala Gly Asp His Arg Gly Ile Leu Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly

                165                 170                 175

Gln Glu Leu Arg Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp

            180                 185                 190

His Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro

        195                 200                 205

Asp Ile Arg Ile Asn Gln Glu Leu Met Glu Thr Leu Thr Leu Glu Glu

    210                 215                 220

Lys Gln Ser Trp Val Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Asp Ile Asp

225                 230                 235                 240

<210>11

<211>238

<212>PRT

<213>玉蜀黍(Zea mays)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(238)

<223>Ceres克隆ID编号244359T

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(238)

<223>Ceres克隆ID编号244359的截短部分

<400>11

Met Asp Arg Pro Ser Gly Thr Ser Tyr Gln Arg Phe Pro Arg Val Arg

1               5                   10                  15

Ile Arg Glu Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Asp Thr

            20                  25                  30

Asp Ala Ser Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu Val

        35                  40                  45

Pro Thr Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser Val

    50                  55                  60

Leu Asn Asp Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu Thr

65                  70                  75                  80

Ser Ala Ala Ala Met Gln Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala Cys

                85                  90                  95

Asp Gly Asp Gly Ser Cys Glu Tyr Cys Ser Val Glu Phe His Leu Ser

            100                 105                 110

Val His Ala Thr Asp Ser Asp Gln Thr Leu Glu Val Thr Ser Asn Asp

        115                 120                 125

Leu Arg Ser Met Asp Pro Lys Val Cys Pro Val Asp Gln Ala Arg Ala

    130                 135                 140

Tyr Gln His Ala Leu Gly Gly Thr Asp Pro Phe Gly Ala Asn Ala Ser

145                 150                 155                 160

Asn Glu Asn Arg Gly Ile Leu Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly Gln Glu

                165                 170                 175

Leu Arg Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp His Ala

            180                 185                 190

Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro Asp Ile

        195                 200                 205

Arg Ile Asn Glu Glu Leu Met Glu Thr Leu Thr Val Glu Glu Arg Ile

    210                 215                 220

Ser Leu Ile Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Glu Leu Asp

225                 230                 235

<210>12

<211>239

<212>PRT

<213>玉蜀黍(Zea mays)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(239)

<223>公共GI编号50898416T

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(239)

<223>公共GI编号50898416的截短部分

<400>12

Met Glu Arg Ala Ala Gly Gly Val Ser Tyr Gln Arg Phe Pro Arg Val

1               5                   10                  15

Arg Ile Arg Glu Leu Lys Asp Asp Tyr Ala Lys Phe Glu Leu Arg Asp

            20                  25                  30

Thr Asp Ala Ser Met Ala Asn Ala Leu Arg Arg Val Met Ile Ala Glu

        35                  40                  45

Val Pro Thr Val Ala Ile Asp Leu Val Glu Ile Glu Val Asn Ser Ser

    50                  55                  60

Val Leu Asn Asp Glu Phe Ile Ala His Arg Leu Gly Leu Ile Pro Leu

65                  70                  75                  80

Thr Ser Ala Ala Ala Met Ala Met Arg Phe Ser Arg Asp Cys Asp Ala

                85                  90                  95

Cys Asp Gly Asp Gly Ser Cys Glu Tyr Cys Ser Val Glu Phe His Leu

            100                 105                 110

Ala Ala Arg Ala Thr Asp Ser Asp Gln Thr Leu Glu Val Thr Ser Asn

        115                 120                 125

Asp Leu Arg Ser Thr Asp Pro Lys Val Cys Pro Val Asp Gln Ala Arg

    130                 135                 140

Ala Tyr Gln His Ala Leu Gly Gly Thr Glu Pro Phe Asp Thr Ala Ala

145                 150                 155                 160

Ala Ala Asp Gln Arg Gly Ile Leu Ile Val Lys Leu Arg Arg Gly Gln

                165                 170                 175

Glu Leu Arg Leu Arg Ala Ile Ala Arg Lys Gly Ile Gly Lys Asp His

            180                 185                 190

Ala Lys Trp Ser Pro Ala Ala Thr Val Thr Phe Met Tyr Glu Pro Glu

        195                 200                 205

Ile Arg Ile Asn Glu Glu Leu Met Glu Thr Leu Thr Leu Glu Glu Lys

    210                 215                 220

Arg Asn Leu Val Glu Ser Ser Pro Thr Lys Val Phe Asn Ile Asp

225                 230                 235

<210>13

<211>725

<212>DNA

<213>大豆(Glycine max)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(725)

<223>Ceres克隆ID编号625627

<220>

<221>CDS

<222>(39)..(561)

<223>参照SEQ ID NO：14

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(725)

<223>嵌合DNA

<400>13

aatataacca cctcacattt ttttcatcac tccttaaaga tgacaacagc agaaaaaact    60

tcaaacttgg atctcatacg ccaacacctc tttggtgaaa acatcatctc agactcctcc    120

tcctttgtct ccaatctcca tcatcatcct gtgaaacttg aacccccctc atcaccagaa    180

tttgatttca cctcatatat cttagataac aacacaagca gcaacttctt cacattcctt    240

gaaggctatg atttggtggc agacatgaag tttgtaattg attcagacaa caccaccacc    300

atggtgatcc cttcaaagga ggttataaag aaatgcaata ttaattctcc tgaagaacaa    360

ccaatggtgt catcatcatc agaagagaag ccaacaatga aaaagtcaga acattatgat    420

gaggcaaagc gttatagggg agttaggaga aggccatggg ggaaatttgc tgctgaaatc    480

cgtgacccta caaggaaagg gacaagggtt actagaagat cttcgtcgtc caatgcttcc    540

ttgcccgcaa gcccattgcg ataattagtt acagcattgg aaaagaataa gcaatgttct    600

cgattgcact tcattccctt tcaaaagaag gcaatttggg ggcaagcttc ttttttgttc    660

atagccgaat tagtcacaac atttattcat tggatgcaac attgggactc ttggaaagtg    720

ttggc                                                                725

<210>14

<211>174

<212>PRT

<213>大豆(Glycine max)

<220>

<221>misc_feature

<222>(1)..(174)

<223>嵌合多肽

<220>

<221>misc_feature

<222>(130)..(174)

<223>Pfam名称：AP2；Pfam描述：AP2结构域

<400>14

Met Thr Thr Ala Glu Lys Thr Ser Asn Leu Asp Leu Ile Arg Gln His

1               5                   10                  15

Leu Phe Gly Glu Asn Ile Ile Ser Asp Ser Ser Ser Phe Val Ser Asn

            20                  25                  30

Leu His His His Pro Val Lys Leu Glu Pro Pro Ser Ser Pro Glu Phe

        35                  40                  45

Asp Phe Thr Ser Tyr Ile Leu Asp Asn Asn Thr Ser Ser Asn Phe Phe

    50                  55                  60

Thr Phe Leu Glu Gly Tyr Asp Leu Val Ala Asp Met Lys Phe Val Ile

65                  70                  75                  80

Asp Ser Asp Asn Thr Thr Thr Met Val Ile Pro Ser Lys Glu Val Ile

                85                  90                  95

Lys Lys Cys Asn Ile Asn Ser Pro Glu Glu Gln Pro Met Val Ser Ser

            100                 105                 110

Ser Ser Glu Glu Lys Pro Thr Met Lys Lys Ser Glu His Tyr Asp Glu

        115                 120                 125

Ala Lys Arg Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg Pro Trp Gly Lys Phe Ala

    130                 135                 140

Ala Glu Ile Arg Asp Pro Thr Arg Lys Gly Thr Arg Val Thr Arg Arg

145                 150                 155                 160

Ser Ser Ser Ser Asn Ala Ser Leu Pro Ala Ser Pro Leu Arg

                165                 170