烘焙咖啡豆和生咖啡豆的混合物用于调节皮肤色素沉着的用途
阅读：1033发布：2020-07-27
专利汇可以提供烘焙咖啡豆和生咖啡豆的混合物用于调节皮肤色素沉着的用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 总的涉及用于美容目的的食品补充剂和/或食品领域。更具体地，本发明旨在提供一种包含 烘焙 咖啡豆和未烘焙咖啡豆的混合物的成分，用于 预防 和/或 治疗 皮肤 的过度色素沉着、皮肤 颜色 缺陷 例如老人斑和特征在于色素异常的其它皮肤病症。本发明的目的还在于改善皮肤 色调 以及提供皮肤美白或增白剂。，下面是烘焙咖啡豆和生咖啡豆的混合物用于调节皮肤色素沉着的用途专利的具体信息内容。
1.有效量的至少烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆或其提取物的混合物作为活性剂用于制备口服美容组合物的用途，其中所述口服美容组合物用于治疗和/或预防-黄褐斑、雀斑、白癜风、斑驳病、苯丙酮尿症中观察到的皮肤色素病症；和/或-老年斑。
2.至少一种含有烘培和未烘培咖啡豆或其提取物的成分作为活性剂在制备用于通过皮肤去色素来亮泽和/或增白皮肤色调的组合物中的美容用途。
3.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中在生咖啡豆和烘焙咖啡豆的混合物中，所述咖啡产品中的生咖啡部分和烘焙咖啡部分的重量比为1:99至90:10。
4.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中所述提取物源自咖啡豆，所述咖啡豆选自阿拉比卡咖啡、罗布斯塔咖啡、中果咖啡或大粒咖啡种类。
5.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中所述咖啡豆为去咖啡因的。
6.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中所述咖啡豆提取物占所述组合物总重的10％至100％。
7.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中通过口服途径施用的咖啡豆掺混物为0.01至5000mg/天。
8.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中所述组合物为食品、食品补充剂、营养品或药物。
9.根据权利要求1或2的用途，其中所述组合物是饮料。
10.根据前述权利要求1-2中任一项所述的用途，其中所述组合物进一步包含至少一种类型的死亡、活的或半活形式的食品级微生物。
11.用于黄褐斑、雀斑、白癜风、斑驳病、苯丙酮尿症中观察到的皮肤色素病症和/或老年斑的非治疗美容方法，包括向个体施用有效量的至少烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆或其提取物的混合物的至少一个步骤。
12.用于通过皮肤去色素来亮泽和/或增白皮肤色调的非治疗美容方法，包括向个体施用有效量的至少烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆或其提取物的混合物的至少一个步骤。
烘焙咖啡豆和生咖啡豆的混合物用于调节皮肤色素沉着的
用途
[0001] 本发明总的涉及用于美容目的的食品补充剂和/或食品领域。更具体地，本发明旨在提供一种包含烘焙咖啡豆和生咖啡豆的混合物的成分，用于预防和/或治疗皮肤的过度色素沉着、皮肤颜色缺陷例如老人斑和特征在于色素异常的其它皮肤病症。本发明的目的还在于改善皮肤色调以及提供皮肤亮泽或增白剂。
[0002] 发明背景
[0003] 皮肤颜色主要是由存在于皮肤中的一种棕色色素――黑色素的量和类型决定的。黑色素的量越少皮肤越白，量越多皮肤颜色越深。此外，皮肤的过度色素沉着也是由皮肤中黑色素的过度表达或积聚造成的。因此，黑色素产生所涉及的途径已经成为许多用来降低黑色素产生水平的抑制剂的靶点。在黑色素途径中所涉及的主要的酶之一是酪氨酸酶。
[0004] 黑色素的合成是一个受激素控制的过程，包括由前体阿黑皮素原产生的促黑素细胞激素(MSH)和促肾上腺皮质激素(ACTH)肽。由UVB照射所引起的DNA损伤可以刺激该过程。
[0005] 因此，长时间的日晒会引起皮肤中的许多生化反应，导致例如皮肤晒黑和晒成褐色。日晒的其它后果会随着时间而累积。这些变化可以引起老人斑的出现并产生不均匀的、斑驳的皮肤色调。不幸的是，目前在市场上可购买到的许多产品要么仅有很弱的效果，要么含有不稳定的活性成分，这些成分在掺入最终的配方中时会失去它们的效力。
[0006] 在当今社会，非常希望能够改变皮肤中色素的表达，以促进均匀或亮泽的皮肤色调。许多人希望改变他们的皮肤色调，以减少老人斑等，或者是为了纯粹的美容原因。
[0007] 其结果是，开发有效组合物的尝试都集中在了抑制酪氨酸酶活性的物质上。例如，已提出将各种酪氨酸酶抑制剂例如氢醌、维生素C、半胱氨酸、曲酸、熊果苷和谷胱甘肽等用于局部组合物中。此外，也有人提出将多种皮肤病学组合物用于改善色素异常(例如在黄褐斑、雀斑、白癜风、斑驳病、苯丙酮尿症等中所观察到的那些)的面貌和/或用于美容目的。
[0008] 此外，皮肤漂白组合物的使用也被广泛延伸。然而，它们或者破坏黑色素，或者是抑制其形成。许多这样的组合物含有苛性化学物质，例如过氧化物、酸或甲醛，或硫醇化的物质。不太苛性的疗法具有其它缺点。
[0009] 有人提出使用局部类视色素和局部皮质甾类作为色素减轻剂，还有人提出了激光疗法和化学去皮法，但这些方法的缺点是无法获得所需的响应。
[0010] 其它一些组合物提出在皮肤上使用天然物质，其中有些天然物质已经在亚洲或欧洲使用了数个世纪，用来漂白皮肤和皮肤区域，或用于增强白皙皮肤的美感。其中包括使用柠檬、橙、黄瓜、银杏、长豆角、玫瑰果、老鹳草、肉桂、马郁兰、迷迭香等。
[0011] 为了对抗与异常色素有关的病症或者为了亮泽皮肤色调，已提出使用各种当局部涂抹在皮肤上时能够降低酪氨酸酶活性并因此限制黑色素产生的化合物。不幸的是，目前可以采用的处置方法不能完全令人满意，特别是在经常伴随的副作用方面，例如某些局部活性剂的刺激性副作用。
[0012] 因此，非常希望不存在现有技术中所记载的那些缺点的其它可替代的制剂。具体地讲，非常希望开发出用于通过口服途径施用的营养性美容组合物，其具有改善的稳定性和促进均匀皮肤色调或亮泽皮肤色调的效力。
[0013] 此外，还需要对于治疗和/或预防皮肤色素沉着异常、特别是由于环境因素或衰老所引起的那些异常有效的活性剂。
[0014] 本发明的目的满足了这些需求。
[0015] 发明概述
[0016] 本发明人可以通过提供含有至少一种包含烘焙咖啡豆和生咖啡豆的混合物的成分的食品或食品补充剂组合物实现该目的。
[0017] 因此，本发明的第一个主题涉及有效量的至少一种包含烘焙咖啡和生咖啡部分的成分作为活性剂和/或用于治疗和/或预防皮肤色素沉着异常的美容应用。所述皮肤病症特别是那些由于年龄或环境(例如紫外线)因素引起的异常，例如老人斑。其还可以是在黄褐斑、雀斑、白癜风、斑驳病、苯丙酮尿症等中所观察到的那些。
[0018] 本发明人发现，未烘焙咖啡豆和烘焙咖啡豆的混合物可以有效抑制黑色素的形成(黑素生成)，尽管事实上该提取物对酪氨酸酶的活性的抑制很弱或没有抑制。考虑到酪氨酸酶在黑色素生成中的关键作用以及现有技术中的开发尝试都集中在对该酶的抑制上，该结果是令人惊奇并且出人意料的。
[0019] 对于本发明的目的而言，术语“皮肤”是指面部或身体的皮肤。
[0020] 对于本发明的目的而言，术语“有效量”是指足以获得预期效果的量。
[0021] 对于本发明的目的而言，术语“预防”是指降低所考虑的异常的迹象出现的危险性。
[0022] 本发明还涉及上述成分作为活性剂用于治疗和/或预防皮肤色斑(pigment imperfection)的美容应用。
[0023] 其结果是，肤色变得更亮更均匀，没有皮肤变色或干燥的区域。
[0024] 本发明还涉及有效量的至少一种本发明的包含未烘焙咖啡部分和烘焙咖啡部分的成分作为活性剂用于增白或亮泽皮肤色调的美容应用。
[0025] 本发明人还发现，本发明的成分可以进一步改善皮肤含水量和/或皮肤屏障功能。
[0026] 本发明的应用还包括至少一种包含生咖啡部分和烘焙咖啡部分的成分与有效量的至少一种用于进一步改善皮肤含水量或皮肤老化的活性剂、特别是下述的那些活性剂的组合应用。
[0027] 根据另一方面，本发明的主题是在个体中治疗和/或预防皮肤色斑以及与过度色素沉着有关的病症、特别是美学上的病症的方法、特别是美容方法，该方法包括至少一个向所述个体施用至少一种本发明的包含未烘焙和烘焙咖啡部分的成分的步骤。
[0028] 本发明的组合物可以口服给药。其优点是可以通过迅速并且相对无限制性的给药方式全身作用于整个皮肤的深层(真皮、下皮)。具体地讲，代谢物及其它活性营养物质通过血流的作用特别分布于皮肤基质内。口服给药还具有迅速和相对无限制性给药方式的优点。
[0029] 发明详述
[0030] 根据第一目的，本发明提供了咖啡产品的应用，其取决于咖啡豆的掺混，其部分是烘焙的且其部分是未烘焙或生的咖啡豆。
[0032] “提取物”必须应理解为是指由粗品(在该情况下为经烘焙的或未经烘焙的，去咖啡因的咖啡豆)的醇提取或水-醇提取开始而获得的所有化合物。有利地是，对于制备在组合物中所用的咖啡豆的提取物所选择的咖啡树的种类选自咖啡(Coffea)物种。
[0033] 咖啡树为边缘光滑的、多年生的、强韧的、具有光滑叶子的小型树木(10-15 x4-6cm)。白色的馥郁的花朵在叶腋处轮生成组。果实为绿色的核果，其在成熟时变为红色并且通常含有两个平面凸状的浆果，它们是通过其平面邻接的。尽管只有两个物种(阿拉比卡咖啡(C.Arabica)和中果咖啡(C.canephora))供应咖啡市场的基本需要，但是咖啡树的很多物种以野生状态存在于东非的热带森林中。
[0034] 咖啡“豆”由咖啡“樱桃”即核果开始，通过湿法途径(发酵，洗涤)或干法途径(干燥，然后机械脱壳)获得。果肉的减少除去红色果皮和新鲜的中果皮；其导致咖啡“壳”。剥壳(除去木质化的内果皮)后获得咖啡“浆果”(或豆)。
[0035] 在特定实施方案中，生咖啡部分可以是生阿拉比卡和生罗布斯塔(Robusta)咖啡豆的掺混物。然而，特别优选生咖啡部分基本上或全部源自罗布斯塔咖啡豆。
[0036] 因此，优选至少65％、更优选75％、进一步更优选85％、最优选95％，例如100％重量的生咖啡豆是罗布斯塔咖啡豆。
[0037] 烘焙咖啡部分可以是阿拉比卡咖啡和罗布斯塔咖啡的掺混物，尽管特别优选烘焙咖啡部分基本上或完全源自阿拉比卡咖啡豆。这是因为阿拉比卡咖啡提供了更丰富的味道和浓香的特性，这与具有较高质量的咖啡相关。
[0038] 烘焙咖啡可具有轻度至重度(dark)的不同烘焙水平，优选为60至100的CTN。
[0039] 生咖啡部分和/或烘焙咖啡部分可以至少部分去咖啡因的。这提供这样的制品，其咖啡因水平可从去咖啡因至常规咖啡因水平进行调节。然而，特别优选生咖啡部分来自去咖啡因的咖啡。
[0040] 具体地讲，咖啡豆提取物可通过咖啡豆的水-醇或醇提取、优选借助于甲醇、乙醇或丙醇的提取而获得。优选地，它不含可通过非极性溶剂提取的咖啡豆的级分。用于制备去咖啡因的咖啡提取物的方法为本领域熟知。
[0041] 在本发明的一方面，咖啡产品源自生咖啡豆和烘焙咖啡豆的混合物，其中咖啡产品中生咖啡部分和烘焙咖啡部分的重量比为1:99至90:10，优选30:70至50:50，更优选35:65至45:55，最优选37:63至42:58。此类咖啡产品描述于通过引用而包括的EP1871173中。
[0042] 具体地讲，咖啡产品优选包含：
[0044] (ii)第二部分，由已经烘焙达到比所述第一部分更高的烘焙程度的研磨咖啡组成，其量为以咖啡产品的总重计99-10％重量，
[0045] 其中绿原酸以每100g咖啡产品至少2g、更优选至少4g、进一步更优选至少6g、最优选至少8g，例如至少9g的量存在。
[0046] 根据本发明的组合物可以是任何通常适用于所选择的施用方法的盖仑制剂形式。载体可以具有不同性质，这取决于考虑中的组合物的类型。
[0047] 组合物可以是任何食品或药品，或用于口服应用的美容产品。食品用或药用载体的实例包括完全营养配方、乳制品例如乳、酸奶、奶酪、发酵乳、乳基发酵制品、冰淇淋、谷类制品或发酵的谷类制品、乳基粉末、幼儿和婴儿配方、冷冻或耐贮饮料、糖果食品、巧克力或谷类类型、动物饲料(特别是家养动物)。具体地讲，菊苣或其提取物可以掺入任何其它形式的食品补充剂或强化营养食品中，例如食物棒或压实或未压实粉末。粉末可稀释于水、苏打、乳制品或大豆衍生物，或掺入食物棒中。
[0048] 食品也可进一步包含蛋白质源、碳水化合物源、脂质源、矿物源和/或维生素源。蛋白质、碳水化合物、脂质、矿物和/或维生素的存在可具有数种优势。这些化合物通常有助于成品的味道和口感。它们还提供给身体营养素，当身体受皮肤病症影响时迫切需要这种营养素。它们还允许本发明的产品配制成全营养配方，以使不需要额外的营养。
[0049] 单个成分可包含任何类型的可食用化合物。食品组合物、特别是饮料的典型成分为本领域熟知的，例如乳、奶油、调咖啡用白油(coffee whitener)和咖啡奶精(coffee creamers)。可选地，成分也可以是例如色拉调味料或其部分。消费者可使用此类化合物来改变例如组合物的香气、外观和质地。成分可以是液体或干燥形式，例如溶解和/或悬浮于饮料中的粉末形式。
[0050] 本发明还提供了咖啡饮料产品，例如(a)烘焙及研磨咖啡产品、(b)可溶性咖啡产品、(c)单份式咖啡垫、片或胶囊、(d)即饮型咖啡产品或(e)任何其它适合的咖啡产品，包含作为成分的如本文所定义的咖啡产品。
[0051] 可溶性咖啡或另外称为即溶咖啡，是众所周知的并且其商业化生产已有很多年。其由烘焙及研磨咖啡以多种方法生产，所有该方法为本领域技术人员众所周知。
[0052] 本发明特别适于用作可溶性咖啡产品或任何基于或源自可溶性咖啡产品的产品。例如，咖啡产品也可用于所谓的即饮型饮料。本发明产品适用于的即饮型饮料的实例包括二合一饮料，其包含咖啡组分连同天然或人工甜味剂组分，所述组分任选地用液体例如水或乳预稀释。在这种情况下，咖啡组分可包含本发明的咖啡产品。
[0053] 三合一饮料，其包含咖啡、甜味剂和增白剂例如乳、液体奶精或固体(例如粉末)奶精，可包含本发明的咖啡产品。
[0054] 而且，包含可溶性咖啡作为成分的任何饮料可包含本发明的咖啡产品。
[0055] 组合物可进一步包含更多的适于包含到食品组合物中的成分。常用成分可以是例如糖、人造甜味剂、乳化剂、稳定剂、增稠剂、流动剂、色素(colors)、调味剂、芳香剂(aromas)等。适合的人造甜味剂包括糖精、环己氨基磺酸盐类(cyclamates)、安赛蜜(acetosulfame)、基于L-门冬氨酰基的甜味剂例如阿司巴坦，及其混合物。适合的乳化剂包括单甘油酯、二甘油酯、卵磷脂、单-双甘油酯的二乙酰酒石酸酯、乳化淀粉和其混合物。适合的稳定剂包括磷酸氢二钾和柠檬酸钠。适合的流动剂是硅铝酸钠。在一个实施方案中，组合物包含乳蛋白质和/或植物蛋白质。在进一步的实施方案中，组合物包含乳脂肪和/或植物脂肪。
[0056] 此外，本发明可用作标准煮制物(standard brew)、意式浓缩咖啡(espresso)、批量使用的或在用于家庭制备的单份饮料中使用的基于咖啡的饮料制剂的成分。
[0057] 如果该产品是用于口服施用的营养补充剂，则其可存在于胶囊、明胶胶囊、软胶囊、片剂、糖包衣片剂、丸剂、糊剂或锭剂、口香糖或可饮用的溶液或乳液、糖浆或凝胶中。这类补充剂还可以包含甜味剂、稳定剂、抗氧化剂、添加剂、调味剂和/或着色剂。其配制通过用于生产糖包衣片剂、明胶胶囊、凝胶、控释水凝胶、乳剂、片剂或胶囊的常用方法进行。
[0058] 在该方面，用于口服组合物、特别是用于营养补充剂的佐剂为专业人员所知。尤其且仅仅出于示例性目的，可以提及通常用于食品的润滑剂例如硬脂酸镁、用于即时增溶的产品、胶凝剂、增稠剂、增湿剂、脂肪和/或水性化合物、防腐剂、调质剂(texturizing)、调味剂和/或包衣剂、抗氧化剂和着色材料。
[0060] 微生物的培养上清液还可包括于组合物中。它们可选自乳酸菌、特别是乳杆菌属和/或双歧杆菌属，且更优选地选自约氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、干酪乳杆菌、两岐双岐杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双岐杆菌(Bifidobacterium breve)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、青春双岐杆菌(Bifidobacteriumdolescentis)和假小链双歧杆菌(Bifidobacterium pseudocatenulatum)。根据最优选的实施方案，所用的菌株为根据布达佩斯条约在1992年6月30日保藏于Institut Pasteur、保藏号为CNCM1-1225的约氏乳杆菌(La1)或根据布达佩斯条约在1999年1月12日保藏于Institut Pasteur、保藏号为CNCM I-2116的副干酪乳杆菌(ST11)。下列化合物可例如单独或组合使用。锌及其盐、包括硫酸锌和葡萄糖酸锌(zinc glucanate)、维生素B5、B6、B8、C、E或PP、p-胡萝卜素和类胡萝卜素、大蒜提取物(特别是烯丙基硫化物或大蒜油形式)、硒、姜黄色素、类姜黄素、烟酸、紫草酸(lithospermic acid)和腺苷。应理解，专业人员会选择此类活性化合物，如有可能将它们以这样的方式联合，通过防止所需目标活性受到抑制或减弱而提高作为本发明目的的组合物的预期效应。
[0061] 应用
[0062] 本发明的产品可以通过例如减少黑色素的生成有效地用于治疗或预防皮肤色素沉着异常或在美容上用于亮泽皮肤色调(lightening skin tone)等。确实，烘焙咖啡豆和未烘焙(生)咖啡豆的掺混物显示出可以在体外减少黑色素的合成(实施例1,图1)。酪氨酸酶的生成也减少，但程度有限(图2)，这表明黑色素的减少不是由于酪氨酸酶的抑制，而是由于作用于该酶的上游或下游的机制。
[0063] 本发明的成分还对加固皮肤屏障以及保持皮肤含水量具有积极作用。
[0064] 其结果是，色斑减少，肤色变得更亮更均匀，没有皮肤变色或干燥的区域。
[0065] 因此，本发明的一个主题涉及有效量的至少一种包含烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆的成分作为活性剂用于治疗和/或预防皮肤色素沉着异常，特别是由于年龄或环境因素例如紫外线引起的异常的美容应用。
[0066] 本发明还涉及有效量的至少一种包含烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆的成分作为活性剂用于增白或亮泽皮肤色调的美容应用，这是亚洲人特别希望的。
[0067] 本发明的应用还包括至少一种包含烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆的成分与有效量的至少一种用于改善皮肤含水量或皮肤老化的活性剂、特别是下述的那些活性剂的组合应用。
[0068] 根据另一方面，本发明的主题是在个体中治疗和/或预防皮肤色斑和/或与过度色素沉着有关的病症、特别是美学上的病症的方法、特别是美容方法，该方法包括至少一个向所述个体施用至少一种本发明的包含烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆的成分的步骤。
[0069] 本发明的美容性治疗方法可以特别通过口服施用至少有效量的至少一种本发明的包含烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆的成分来进行。口服施用包括一次或分多次摄入以上所定义的口服组合物。
[0070] 其可以包括单次应用。根据另一个实施方案，应用可以每天重复例如2至3次，持续一天或更多天，且通常持续至少4周或甚至1至15周。
[0071] 此外，为了补充或强化本发明所定义的成分的活性，还可以考虑任选的与口服或局部形式的组合治疗。
[0072] 因此，本发明的包含烘焙咖啡豆和未烘焙咖啡豆的组合物与任选地含有另一种活性成分、特别是益生微生物或其它死亡、活的或半活形式的益生菌或保湿剂(hydrating agent)或抗衰老剂的口服或局部组合物组合的局部或口服治疗可以被看作是药盒。在配制前，将各成分按照本领域技术人员很容易确定的顺序和条件进行混合。
[0073] 在配制前，将各成分按照本领域技术人员很容易确定的顺序和条件进行混合。
[0074] 当然，将根据所需效应以及组合物的施用模式来确定咖啡豆提取物在组合物中的比例。
[0075] 通过口服途径施用的咖啡豆提取物的日剂量可优选包含在0.01至5000mg/天之间，取决于咖啡因含量。优先地，咖啡豆掺混物以允许其以包含在0.5至1000mg/天之间的剂量施用的量存在于根据本发明的组合物中。本发明人已发现根据本发明的咖啡豆掺混物的有效性通常是剂量依赖性的且遵循剂量响应曲线。如果要防止通常温和的皮肤病症或损伤并且将频繁地使用产品，则非常少的量会足以实现所需效应。如果要治疗严重的皮肤色素病症，则更大的量会更合适，尽管少量也会产生效应。
[0076] 优选地，预期用于口服施用的组合物含有范围为组合物重量的10％至100％且优选组合物重量的20％至80％的量的咖啡豆提取物，这取决于产品形式(可溶性咖啡、RTD、咖啡混合物、食品或食品补充剂)。
[0077] 从以下的实施例和附图中可以明显看出本发明的其它优点和特征。因此，以下实施例用于以非限制性的方式说明本发明的领域。除非另有说明，在这些实施例中的百分比是重量百分比，以“…至…”写出的数值范围包括具体指明的上限和下限。
[0078] 附图
[0079] 图1：用咖啡掺混物预处理的鼠黑素细胞的黑色素生成的评估。
[0080] 图2：用咖啡掺混物预处理的鼠黑素细胞的酪氨酸酶生成的评估。
[0081] 图3：用咖啡掺混物预处理的人原代表皮角质形成细胞的丝聚蛋白(filaggrin)合成的评估。
[0082] 图4：用咖啡掺混物预处理的人原代表皮角质形成细胞的透明质酸分泌的评估。实施例
[0083] 实施例1：对皮肤色素沉着的影响
[0084] 为了评估成分对皮肤脱色或促进色素沉着的潜在有益作用，我们用鼠黑素细胞的2D培养物(B16)进行了2项试验：1-评估黑色素生成和2-评估酪氨酸酶生成。
[0085] 1.细胞培养条件
[0086] 将B16细胞在含有1g/L葡萄糖、不含酚红、补充有10％胎牛血清的DMEM中、在增湿培养室中在37℃、含5％CO2的条件下培养。
[0087] 2.由B16鼠黑素细胞系生成黑色素
[0088] 将细胞与选定的成分或试验参照物(曲酸，400μg/mL)一起在存在或不存在MSH类似物NDP-MSH的条件下温育72小时。黑色素的总量(细胞外和细胞内的)通过在405nm测定各样品与黑色素标准品相比在存在或不存在NDP-MSH条件下的光密度来评估。
[0089] 3.由B16鼠黑素细胞系生成酪氨酸酶
[0090] 将细胞与选定的成分或试验参照物(曲酸，400μg/mL)一起温育48小时。通过免疫标记法评估酪氨酸酶的生成。
[0091] 成分
[0092] 我们已测试了咖啡掺混物，包括 提取物(Nestlé Green掺混物)以及其他掺混物例如Stevol(由Naturex提供)和Oryza’s Extract-P。每种咖啡提取物的测试浓度示于表1中。
[0093]
[0094]
[0095] 表1
[0096] 我们已研究最高的无细胞毒性浓度，尽可能标准化不同提取物之间的条件以进一步能够比较它们。因此，已测试40μg/mL浓度的咖啡提取物。
[0097] 结果
[0098] 结果以相对于对照的百分比表示。正如所预期，试验参照物(曲酸)引起了黑色含量的降低。图1显示了用选定的成分处理72小时的B16黑素细胞所生成的黑色素。
[0099] 总的来说，我们已观察到：咖啡提取物对皮肤去色素沉着具有一些潜力，因为与对照条件相比，它们能够减少黑色素和酪氨酸酶的体外生成(图1和2)。包括Protect和烘焙咖啡煮制物的一些提取物降低了黑色素含量而不影响酪氨酸酶生成，表明作用于酪氨酸酶的上游或下游的机制。
[0100] 实施例2：对皮肤屏障功能和含水量的影响
[0101] 通过使用人原代表皮角质形成细胞的2D培养物来评估实施例1的提取物对皮肤屏障功能和皮肤含水量的潜在有益作用，我们进行了2项试验：1-评估由人原代表皮角质形成细胞合成丝聚蛋白和2-评估由人原代表皮角质形成细胞分泌透明质酸。
[0102] 细胞培养条件
[0103] 将人表皮角质形成细胞在限制性(control)角质形成细胞无血清培养基中在增湿培养室中在37℃、含5％CO2的条件下培养。
[0104] 由人表皮角质形成细胞合成丝聚蛋白
[0105] 将细胞与选定的成分或试验参照物(CaCl2，1.5mM)一起温育144小时。通过免疫标记法评估丝聚蛋白的生成。
[0106] 由人表皮角质形成细胞分泌透明质酸
[0107] 将细胞与选定的成分或试验参照物(视黄酸，10-7M)一起温育72小时。通过ELISA测定法定量由上清液中的人表皮角质形成细胞引起的透明质酸释放。
[0108] 结果
[0109] 结果如图3和4所示。将细胞用咖啡掺混物预处理导致丝聚蛋白增加近200％，这表明这些提取物可加固皮肤屏障(图3)。Protect和轻度烘焙咖啡煮制物也增加了透明质酸分泌(图4)，透明质酸是一种由皮肤细胞体内分泌的糖胺聚糖，其通过引诱和存留水分于细胞外间隙中而有助于维持适当的含水量。较强的皮肤屏障确保更好地保护机体免受环境和病原体的攻击。其还限制了通过表皮的水分丢失，从而确保了适宜的皮肤含水量。
[0110] 实施例3：
[0111] 通过在4℃(冰浴)、用Turrax装置以24000rev/min研磨1分钟，将0.5kg烘焙咖啡豆减至粉末，制备罗布斯塔咖啡的烘焙提取物。
[0112] 将所得粉末与pH 8.5的5升0.05M磷酸盐缓冲液混合。将全部混合物在4℃搅拌30分钟，然后在4℃以10000G离心。将上清液通过0.22um滤器过滤(灭菌过滤)。
[0114] 然后，通过超临界色谱法(CO2用作载气)除去咖啡因。因此获得25.5克称为“去咖啡因的冻干提取物”的活性提取物。
[0115] 实施例4：粉棒(Powder stick)
[0116]
[0117] 可以每天食用一条棒。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 用多酚增加黄烷-3-醇的生物利用度 | 2020-05-11 | 79 |
| 一种混合果汁饮料 | 2020-05-12 | 206 |
| 一种能快速鉴别番泻叶提取物的分析方法 | 2020-05-08 | 471 |
| 低型面量取勺 | 2020-05-12 | 889 |
| 一种含人乳低聚糖的婴幼儿营养组合物 | 2020-05-11 | 125 |
| 一种绿色生物水凝胶输送系统及其制备方法 | 2020-05-11 | 812 |
| 一种共轭亚油酸锌制剂及其制备方法 | 2020-05-12 | 956 |
| 一种低致敏性脱腥南极冰藻寡糖的制备方法 | 2020-05-13 | 193 |
| 猫慢性肾脏疾病饮食配方 | 2020-05-12 | 387 |
| 一种蛋白质粉全自动封罐机用自动传输结构 | 2020-05-08 | 690 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
营养品热门专利
-
2 一种蛋鸭饲料
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈