一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液及其制备方法和用途
专利汇可以提供一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液及其制备方法和用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 涉及医疗制剂领域，更具体的涉及一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液及其制备方法和用途；一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液，其特征在于，包括由葡聚糖和/或葡聚糖衍 生物 、 氧 化 铁 颗粒和 水 ，所述葡聚糖和/或葡聚糖衍生物与氧化铁颗粒相结合形成纳米氧化铁杂化物，所述纳米氧化铁杂化物均匀分散在水中。与 现有技术 相比，本发明技术方案的有益效果是：本发明制备出的纳米杂化物分散液有望应用于胃肠癌转移淋巴结评估，并可通过葡聚糖的功能衍生，偶联抗 肿瘤 药物，达到诊疗一体化的目的。，下面是一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液及其制备方法和用途专利的具体信息内容。
1.一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液，其特征在于，包括由葡聚糖和/或葡聚糖衍生物、氧化铁颗粒和水，所述葡聚糖和/或葡聚糖衍生物与氧化铁颗粒相结合形成纳米氧化铁杂化物，所述纳米氧化铁杂化物均匀分散在水中。
2.根据权利要求1所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液，其特征在于，所述纳米氧化铁杂化物的直径为100-180nm之间。
3.根据权利要求1或2所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液，其特征在于，所述纳米氧化铁杂化物由葡聚糖和/或葡聚糖衍生物与铁盐通过共沉淀法制得。
4.权利要求1-3任一项所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的用途，其特征在于，所述用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液用于胃肠癌、乳腺癌、甲状腺癌实体恶性肿瘤的术前、术中局部注射进行淋巴结染色示踪，使用时在胃肠癌粘膜或浆膜下、乳腺癌、甲状腺癌实体恶性肿瘤组织周围局部注射使用。
5.一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：
A.取葡聚糖和/或葡聚糖衍生物与三价铁盐溶于水中，将溶液冷却至0℃左右，低温下混合均匀待用；
B.取二价铁盐溶于水中，转移至惰性气体氛围保护的容器中与步骤A的溶液在低温下混合均匀，用酸调节pH至3-5，然后加入氨水溶液至溶液变为墨绿色，在0-4摄氏度惰性气体氛围下充分反应0.5-4h；
C.调节步骤B中溶液pH至8-12，升高温度至60-100摄氏度，惰性气体氛围下搅拌并继续反应1-6h，搅拌速率为500-20000rpm；
D.反应结束后，待溶液冷至室温，透析除去未反应的葡聚糖与氨水，超声分散，然后水系过滤膜过滤；
E.最后，超滤浓缩得到纳米杂化物分散液，或者冻干后重新溶解得到纳米杂化物分散液。
6.根据权利要求5所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的制备方法，其特征在于，所述葡聚糖分子量为5-500Kda。
7.根据权利要求5所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的制备方法，其特征在于，所述葡聚糖分子量为10~100KDa。
8.根据权利要求5所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的制备方法，其特征在于，所述葡聚糖分子量为30~50KDa。
9.根据权利要求5所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的制备方法，其特征在于，二价铁盐与三价铁盐的化学计量摩尔比为1:1-2.5。
10.根据权利要求5所述的用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液的制备方法，其特征在于，所述氨水溶液为一水合氨溶液，一水合氨溶液中氨的质量百分比浓度为15-28%。
一种用于淋巴示踪的纳米杂化物分散液及其制备方法和用途
技术领域
背景技术
发明内容
B.取二价铁盐溶于水中，转移至惰性气体氛围保护的容器中与步骤A的溶液在低温下混合均匀，用酸调节pH至3-5，然后加入氨水溶液至溶液变为墨绿色，在0-4摄氏度惰性气体氛围下充分反应0.5-4h；
C.调节步骤B中溶液pH至8-12，升高温度至60-100摄氏度，惰性气体氛围下搅拌并继续反应1-6h，搅拌速率为500-20000rpm；
D.反应结束后，待溶液冷至室温，透析除去未反应的葡聚糖与氨水，超声分散，然后水系过滤膜过滤；
E.最后，超滤浓缩得到纳米杂化物分散液，或者冻干后重新溶解得到纳米杂化物分散液。
具体实施方式
A.称取5.0g的葡聚糖（分子量10KDa）与0.64g FeCl3溶于纯水中，将溶液冷却至0℃左右，低温下搅拌均匀待用;
B.称取一定0.26g的FeSO4溶于水中，转移至氮气氛围保护的三口瓶中与步骤A的溶液在低温下搅拌混合均匀，用盐酸调节pH至4左右，而后逐滴加入一水合氨溶液0.8 mL至溶液变为墨绿色，在零摄氏度氮气氛围下充分反应1h；
C.加入质量分数为25%氨水溶液调节步骤B中溶液pH至11，升高温度至80摄氏度，氮气氛围下继续搅拌反应2h，控制搅拌速率10000rpm；
D.反应结束后，待溶液冷至室温，用截流分子量为50000的透析袋透析除去未反应的葡聚糖与氨水，超声分散10min（频率为30kHz），220nm水系过滤膜过滤；
E.超滤浓缩得到纳米杂化物分散液10mL，如图1右所示；
将步骤E的分散液稀释制备1mg/mL的纳米杂化物分散液，取10μL滴于200目表面涂有碳膜的铜网上，1min后，用滤纸吸干多余液体，晾干后利用JEM100CX透射式电子显微镜（日本电子公司，日本）进行观察，分别放大倍数为25 K和100K，电镜照片如图1左和图1中所示。
A.称取4.5g的葡聚糖（平均分子量25KDa）与0.30 g FeCl3·6H2O溶于纯水中，用220nm水系过滤膜过滤，将溶液冷却至0℃左右，低温下磁力搅拌均匀待用;
B.称取0.12g的FeCl2溶于水中，用220nm水系过滤膜过滤，转移至氩气氛围保护的双颈瓶中并与步骤A的溶液在4℃下机械搅拌（2000rpm）混合均匀，而后逐滴加入一水合氨溶液
0.45 mL，在4℃氩气氛围下充分反应0.5h;
C.加入质量分数为28%氨水溶液调节步骤B中溶液pH至10，升高温度至85摄氏度，氩气氛围下继续反应1.5h，机械搅拌（12000rpm）使之混匀;
D.反应结束后，待溶液冷至室温，用截流分子量为50000的透析袋透析除去未反应的葡聚糖与氨水，超色分散20min（频率为25kHz），220nm水系过滤膜过滤;
E.冻干后重新溶解，配置浓度为1mg/mL的纳米杂化物分散液。
A.称取3.5g的葡聚糖（分子量10KDa）与0.45g FeCl3溶于纯水中，用220nm水系过滤膜过滤，将溶液冷却至0℃左右，低温下搅拌均匀待用;
B.称取0.20g的FeCl2·4H2O溶于水中，转移至氮气氛围保护的三口瓶中与步骤A的溶液在低温下机械搅拌（5000rpm）混合均匀，逐滴加入一水合氨溶液0.65 mL至溶液变为墨绿色，在此过程中不断机械搅拌（15000rpm）使其充分混合，在零摄氏度氮气氛围下充分反应
1.5h;
C.加入质量分数为25%氨水溶液调节步骤B中溶液pH至11，升高温度至90摄氏度，氮气氛围下继续反应2h，控制搅拌速率不变（15000rpm）;
D.反应结束后，待溶液冷至室温，用截流分子量为50000的透析袋透析除去未反应的葡聚糖与氨水，超声分散20min（频率为50kHz），220nm水系过滤膜过滤；
E.超滤浓缩得到纳米杂化物分散液30mL。
动物：成年雌性SD（Sprague-DaWley）大鼠（6～7周龄、体重150-200g），购自南方医科大学实验动物中心。
2、纳米炭混悬注射液（50 mg/mL）
【商品名/商标】卡纳琳
【生产厂家】重庆莱美药业股份有限公司
【批准文号】国药准字H20041829
方法：
将雌性SD（Sprague-DaWley）大鼠（6～7周龄、体重150-200g）常规鼠类全价饲料喂养。
自由饮水，饲养房温度为21±20℃，湿度30%~50%，光照时间平均每天12~24小时。将大鼠饲养1周后，分为纳米杂化物分散液组、纳米碳混悬注射液组，每组5~10只。大鼠术前禁食禁水
12~24h，抽取1%戊巴比妥钠注射液注射于大鼠腹腔进行麻醉，固定大鼠前后肢于无菌操作台上，常规消毒，取正中切口约3~10cm切开入腹，暴露胃壁；抽取纳米杂化物分散液组、纳米碳混悬注射液注入大鼠胃壁浆膜下，每只注射5个点，每点约0.05mL；4-0 丝线间断缝合大鼠腹壁全层，术后恢复正常饮食，放入笼中观察。
5），4天后染色淋巴结逐渐褪色（图6）,1周后仍可观察到示踪效果（图7），且纳米杂化物分散液具有高度的淋巴靶向性；
术后1月内纳米杂化物分散液组在脑、心脏、肾脏、肝脏未见代谢痕迹（图8-图11），说明纳米杂化物分散液不会通过血脑屏障，不进入血液循环经肝肾代谢；
观察术后1月内的大鼠腹腔内无胃内容物，无炎性渗出等腹膜炎表现，无网膜与腹壁切口粘连等病理表现，说明两组局部注射安全性好（图12-图15）；但局部注射点的纳米炭仍大量残留，而纳米杂化物分散液的局部注射点残留量减少，说明纳米杂化物分散液组的代谢速度较快，不会长时间滞留于体内。
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