丹参多酚酸盐的制备方法和用途
专利汇可以提供丹参多酚酸盐的制备方法和用途专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开一种丹参多酚酸盐的制备方法,采用热 水 提取大孔 树脂 分离,精制丹参多酚酸盐。它主要的活性成分为 丹酚酸 B镁盐,含量高达60%,所得的丹酚酸盐可在心脑血管药物中应用。，下面是丹参多酚酸盐的制备方法和用途专利的具体信息内容。
1.一种制备丹参多酚酸盐的方法，其特征在于
a.粉碎后的丹参用水热提，提取充分后水被浓缩，浓缩液离心过滤；
b.过滤液经大孔树脂吸附并用水淋洗除去杂质；
c.吸附于大孔树脂上的多酚酸盐经用含水低级醇洗脱；
d.洗脱液减压浓缩至一定体积加入无水乙醇醇沉，倾出上清液弃去
沉淀物；
e.倾出之上清液减压浓缩至干，干燥粉碎得丹酚酸盐。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于大孔树脂可为以苯乙 烯为架桥材料的聚苯乙烯型多孔性吸附树脂。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于吸附于大孔树脂上的 产品用含水C1-C5的低级醇洗脱。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于吸附于大孔树脂的产 品用含水C1-C5的低级醇洗脱，洗脱液浓度为30-80％。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所得的多酚酸盐可在 治疗心脑血管药物中应用。
本发明涉及中药丹参提取物，更具体地说由丹参提取精制而成的丹参多 酚酸盐。
单味中草药用于治疗疾病是中医药及民间医药的一种重要手段。丹参是 一味对预防和治疗心血管疾病如心绞痛、冠心病和中风等有效的中药。目前 丹参的一般使用方法归纳起来主要有两大类：
1.单味丹参饮片或与其他中药一起煎煮成汤药后服用。
2.由工厂加工成各种剂型的成品药如：口服剂、注射剂和气雾剂等后使 用。
丹参成品药尤其是注射剂在临床上应用广泛。丹参的化学成份主要由脂 溶性成份和水溶性成份两部分组成。先前丹参的化学工作大多集中于脂溶性 成份，从中分离出丹参酮为代表的一系列二萜化合物，经药理试验证实此类 化合物具有一定的生理活性。其后陈政雄等(药学通报。1981，16(9)， 2425)首先进行了丹参的水溶性成份的研究，发现了原儿茶醛、丹参素、丹 参酚酸甲和乙等水溶性化合物，药理活性显示它们具有一定的增强小鼠耐缺 氧能力的作用。鉴于丹参酚酸难于获得纯品，而原儿茶醛及丹参素较易分离 和合成获得，故现有的丹参成药制剂如丹参注射液的质量控制主要控制水溶 性的丹参素和原儿茶醛的含量，而口服制剂则同时检测水溶性的丹参素和脂 溶性的丹参酮。大量的药理和临床研究结果表明丹参的水溶性成份的活性强 于脂溶性成份，原儿茶醛有毒副作用，丹参素代表丹参的活性不甚合理。80 年代末黎莲娘等比较系统地对丹参酚酸类化合物进行了大量工作，分离出丹 酚酸A、B和C等化合物，但同样未能从根本上阐明丹参的主要活性成份。 ((a)Planta Medica 1984，50(3)，227；1992，58(2)，197；(b)J.Nat.Prod. 1988，51(1)，145；(C)Phytochemistry.1992，31(2)，1068；(d)Chinese Chem.Lett.1993，4(6)，501)日本学者西冈五夫等研究丹参治疗肾不全 有效成份时，分离出丹酚酸B镁盐，但仍未阐明其对丹参活性的贡献(Chem， Pharm.Bull.1989，37(2)，340)。由于丹参的有效成份研究滞后，国内丹参制剂 的质量和效果得不到保障，不同厂家的产品或同一厂家的不同批号产品临床 效果差异较大，缺乏可靠的质控依据。
本发明的目的是通过对丹参水溶液成份的提取工艺研究，模索出一种简 易、高效制备丹参多酚酸盐的方法并确定以丹参多酚酸盐混合物中的丹酚酸 B镁盐作质量控制指标，提高其治疗心脑血管疾病使用效果。
本发明主要将丹参粉碎后用水热提，提取充分后水被浓缩，浓缩液离心 过滤，过滤液经大孔树脂吸附，用水淋洗除去杂质，吸附于大孔树脂上的多 酚酸盐经用含水低级醇洗脱，洗脱液减压浓缩至一定体积，加入无水乙醇， 醇沉，倾出上清液弃去沉淀物，倾出的上清液减压浓缩至干。干燥粉碎得丹 酚酸盐。
本发明通过下列步骤实施。
[丹参水溶性成份的分离]
粉碎丹参药材，然后用热水提取，提取液减压浓缩离心过滤，溶液进一 步经Sephadex LH-20，TSK gel Toyopearl HW 40 F，MCI gel CHP 20P.Cosmosil ODS等反相层析担体柱层析分别获得八个化合物经化学和波谱方法测定各 个化合物结构如下：
丹酚酸盐是丹参水溶性酚性成份的混合物，主要含有丹酚酸B镁盐(化 合物6)，丹酚酸盐混合物与现有丹参水溶性成份产品如丹参注射液，在有 效成份的种类，含量和活性等方面有很大差别。经用HPLC定量分析表明， 丹酚酸B镁盐是丹参水溶性成份中的主要组分，其含量占丹参水溶性酚性成 份的60％。
[生物活性测定]
丹参成份的抗氧化作用采用Liu等(Biochemical Pharmacology 1992， 43(2)，147)报道的方法测定，抗血小板聚集和耐缺氧试验采用梁子钧(李 仪奎等，中药药理实验方法等，上海科学技术出版社，1991年第82页)和 陈奇东(李仪奎等，中药药理实验方法学，上海科学技术出版社，1991年， 第110页)报道的方法测定。测定结果见表一至表六。
丹参丹酚酸盐的八个化合物除化合物7得量极微外，其余七个化合物分 别对其抗氧化、抗血小板聚集及小鼠耐缺氧进行试验，从表一至表四可知化 合物6在四个筛选模型上均显示最强活性，丹参素则活性并不理想。利用氢 型阳离子交换树脂分别制备了化合物6和丹参多酚酸盐的相应酸化物，进一 步比较了盐和酸在抗血小板聚集的小鼠耐缺氧模型上的活性强度从表五和表 六可见丹参丹酚酸盐作为混合物其活性在高剂量时与化合物6相当，低剂量 时则不如化合物6，它们的酸化物活性最差。上述化学与药理结果表明化合 物6的含量可作为丹参多酚酸盐的质控指标，经生物活性试验证明丹参多酚 酸盐可在治疗心脑血管药物中的应用。
表一.丹参成份对四氯化碳诱导大鼠肝细胞产生MDA的影响 化合物 浓度 (μM) MDA量 统计值 效果 1 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++ 2 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++ 3 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++ 4 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++ 5 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++ 6 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++ 8 0.5 1.0 ↓P＜0.001 ↓P＜0.001 ++ ++
注：-无效，+有效，++显效
表二.丹参成份对H2O2诱导大鼠红细胞的溶血的影响 化合物 抑制率 效果 1 2 3 4 5 6 8 100％ 100％ 100％ 100％ 100％ 100％ 100％ ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++
注：1)-无效，+有效，++显效。
2)样品浓度为0.33mg/ml，体外。
表三.丹参成份对缺氧小鼠的影响 化合物 存活时间 统计结果 效果 1 P＞0.05 - 2 P＜0.01， 延长42％ ++ 3 P＜0.05， 延长23％ + 4 P＜0.05， 延长45％ + 5 P＞0.05 - 6 P＜0.01， 延长65％ ++ 8 P＜0.01， 延长69％ ++
注：1)-无效，+有效，++显效。
表四.丹参成份对大鼠血小板聚集的影响 化合物 浓度 (μg/ml) 抑制率 效果 1 180 900 0％ 0％ - 2 180 900 0％ 13％ - 3 180 900 0％ 18％ - 4 180 900 0％ 28％ - 5 180 900 0％ 44％ + 6 180 450 900 0％ 15％ 74％ + 8 180 900 0％ 20％ -
注：-无效，+有效，++显效
表五.化合物6和丹酚酸盐以及它们的酸化物的抗血小板聚集活性 试样 浓度(μg/ml) 抑制率(％) 6 900 450 94 74 6酸化物 900 450 68 22 丹酚酸盐 900 450 94 20 丹酚酸盐 酸化物 900 450 23 0
注：体外试验。
表六.化合物6和丹酚酸盐以及它们的酸化物对缺氧小鼠的影响(200mg/Kg) 试样 成活时间 延长率 6 78％ 6酸化物 28％ 丹酚酸盐 78％ 丹酚酸盐 酸化物 14％
[丹参多酚酸盐的制备]
将切碎的丹参用沸水煮提2-4次，首次水用量约为生药量的4-8倍，提 取液经浓缩后过滤，通过大孔树脂吸附(大孔树脂是以苯乙烯为架桥材料制 得的市售多孔性吸附层析担体，可以用Amberlite XAD系列及类同的国产树 脂，例如扬洲制药厂的1300-1大孔树脂等)用水洗去杂质，再用含水C1- C5的低级醇洗脱，洗脱低级醇为甲醇、乙醇或丙醇等，含水低级醇的浓度为 30-80％，含水醇用量约为生药量的5-10倍，收集低级醇洗脱液，减压浓缩， 最终醇沉的乙醇浓度为75-95％，醇沉溶液体积相当于生药量的0.5-2倍，成 品收率为生药量的2.5％以上。
下面给出最佳实施例进一步说明本发明但并不对本发明限制。
实施例1
100公斤粉碎后的丹参药材，投入提取罐，在90-100℃依次用600、300、 250立升水煮提三次，每次提取时间为2小时，合并三次提取液，离心过滤 后将上清液减压浓缩至250立升。将浓缩液缓缓流过装有300立升1300-1 大孔树脂(杨洲制药厂生产)的吸附柱，用800立升水洗吸附柱除去杂质后， 再以600立升50％乙醇洗出丹酚酸盐。收集50％乙醇洗出液，减压浓缩至10 立升后，在搅拌下缓缓加入90立升无水乙醇，加毕放置2小时，然后离心 倾出上清液弃去沉淀物，上清液浓缩至干，进一步干燥并粉碎得棕褐色丹酚 酸盐粉3公斤，按生药材计得率为3％。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 丹参提取物及其用途 | 2020-05-08 | 445 |
| 一种精肝颗粒的质量控制方法 | 2020-05-12 | 582 |
| 用于治疗脑缺血的药物组合物及其应用 | 2020-05-13 | 113 |
| 治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法和用途 | 2020-05-08 | 456 |
| 复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法 | 2020-05-11 | 644 |
| 一种血必净注射液中多个小分子化学成分的检测方法 | 2020-05-13 | 482 |
| 止痛化癥胶囊的HPLC指纹图谱检测方法 | 2020-05-15 | 365 |
| 一种丹酚酸B及其粉雾剂胶囊和制备方法 | 2020-05-14 | 110 |
| 一种丹参茎叶中丹酚酸类成分的提取方法 | 2020-05-15 | 736 |
| 双链连接的细胞毒性药物偶联物 | 2020-05-13 | 531 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
