用于化妆品用途的局部麝香葡萄制剂
阅读：630发布：2020-05-13
专利汇可以提供用于化妆品用途的局部麝香葡萄制剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了 皮肤 护理方案，其使用五种组分，所述组分各包括由脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄(Vitis rotundifolia))果渣 溶剂 提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合制成的组合物，用以改善皮肤的外观。所述五种组分包括爽肤 水 、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和精华素。还公开了通过施用有效量的这五种组分来改善皮肤外观的 皮肤护理 方法。，下面是用于化妆品用途的局部麝香葡萄制剂专利的具体信息内容。
1.一种组合，其包含在分开的容器中的五种组分，其中所述五种组分是爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物、洗面奶组合物和精华素组合物，其中所述组分各自包含：
(i)脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄(Vitis rotundifolia))果渣溶剂提取物，其包含液态青铜色麝香葡萄果渣提取物与液态紫色麝香葡萄果渣提取物的组合以产生液态麝香葡萄果渣提取物，其中a)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和所述紫色麝香葡萄果渣提取物是水性提取物；b)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物的混合物促进鞣花酸在所述麝香葡萄果渣提取物中的溶解性；c)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和所述紫色麝香葡萄果渣提取物是经过滤并发酵的提取物；以及d)所述麝香葡萄果渣提取物具有至少约2％的多酚含量；
(ii)β-葡聚糖，和
(iii)葡萄籽提取物。
2.根据权利要求1所述的组合，其中所述爽肤水组合物包含
按所述爽肤水组合物的重量计约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述爽肤水组合物的重量计约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖，和
按所述爽肤水组合物的重量计约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合，其中所述日间保湿霜组合物包含按所述日间保湿霜组合物的重量计约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述日间保湿霜组合物的重量计约0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖，和按所述日间保湿霜组合物的重量计约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合，其中所述夜间保湿霜组合物包含按所述夜间保湿霜组合物的重量计约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述夜间保湿霜组合物的重量计约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖，和按所述夜间保湿霜组合物的重量计约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合，其中所述洗面奶组合物包含
按所述洗面奶组合物的重量计约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述洗面奶组合物的重量计约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖，和
按所述洗面奶组合物的重量计约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合，其中所述精华素组合物包含
按所述精华素组合物的重量计约0.01％至约10.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述精华素组合物的重量计约0.00001％至约1.0％的β-葡聚糖，和
按所述精华素组合物的重量计约0.0001％至约0.1％的葡萄籽提取物。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合，其中所述爽肤水组合物包含
按所述爽肤水组合物的重量计约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述爽肤水组合物的重量计约0.000001％至约0.01％的β-葡聚糖，和按所述爽肤水组合物的重量计约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。
8.根据权利要求1至6中任一项所述的组合，其中所述日间保湿霜组合物包含按所述日间保湿霜组合物的重量计约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述日间保湿霜组合物的重量计约0.001％至约0.01％的β-葡聚糖，和按所述日间保湿霜组合物的重量计约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合，其中所述夜间保湿霜组合物包含按所述夜间保湿霜组合物的重量计约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述夜间保湿霜组合物的重量计约0.000001％至约0.01％的β-葡聚糖，和按所述夜间保湿霜组合物的重量计约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合，其中所述洗面奶组合物包含按所述洗面奶组合物的重量计约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，
按所述洗面奶组合物的重量计约0.000001％至约0.01％的β-葡聚糖，和按所述洗面奶组合物的重量计约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的组合，其中所述精华素组合物包含按所述精华素组合物的重量计约0.1％至约0.5％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，按所述精华素组合物的重量计约0.00001％至约0.1％的β-葡聚糖，和
按所述精华素组合物的重量计约0.005％至约0.1％的葡萄籽提取物。
12.根据权利要求1至11中任一项所述的组合，其中所述五种组分中的至少一者还包含防晒剂。
13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合，其中所述五种组分中的至少一者还包含泛醇、维生素A、维生素C、维生素E、超氧化物歧化酶或其任何组合。
14.根据权利要求13所述的组合，其中所述五种组分中的至少一者包含按所述组分的重量计，
约0.0001％至约1.0％的泛醇，
约0.00005％至约1.0％的维生素A，
约0.00001至约0.1％的维生素C，
约0.001％至约1.0％的维生素E，
约0.00000001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，
或其任何组合。
15.根据权利要求13或14所述的组合，其中所述五种组分中的至少一者包含抗坏血酸磷酸镁。
16.根据权利要求13至15中任一项所述的组合，所述五种组分中的至少一者包含维生素E乙酸酯。
17.根据权利要求13至16中任一项所述的组合，其中所述五种组分中的至少一者包含维生素A棕榈酸酯或视黄醇。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的组合，其中所述五种组分中的至少一者还包含百脉根(lotus japonicus)提取物、北五味子(schizandra chinesis)果实提取物、或两者。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围以重量:重量计为约0.1至约10。
20.根据权利要求19所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围以重量:重量计为约0.3至约3。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中，按所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物包含约
7％至约10％的多酚和少于约5％的单糖，并且其中缩合鞣质少于所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的总多酚含量的约10％。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的总多酚由至少约85％的除缩合鞣质之外的多酚组成。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中，按所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物还包含约0.5％至约5％的纤维、约7％至约14％的蛋白质、约0.05％至约3％的脂肪和约15％至约
20％的有机酸。
24.根据权利要求23所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中，按所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物还包含约1％至约2％的纤维、约7％至约8％的蛋白质、约0.5％至约1.5％的脂肪和约15.5％至约16.5％的有机酸。
25.根据权利要求1至24中任一项所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中，按所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的酚含量包含约2％至约3％的鞣花酸和约30％至约31％的没食子酸。
26.根据权利要求22所述的组合，其中在所述五种组分的每一者中，按所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的酚含量包含约2％至约3％的鞣花酸、约3％至约4％的鞣花酸糖苷、约30％至约31％的没食子酸、约2％至约
3％的槲皮素、约10％至约11％的没食子鞣质、约7％至约8％的鞣花鞣质、约29％至约30％的原花色素、约4％至约5％的花色素苷、约2％至约3％的儿茶素和约6％至约7％的酚酸。
27.根据权利要求1至26中任一项所述的组合，其中在所述五种组分的至少一者中，所述紫色麝香葡萄果渣提取物包含完整紫色麝香葡萄的提取物、来自除完整葡萄之外的紫色麝香葡萄果渣的提取物，或两者。
28.一种皮肤护理方法，其包括：
向皮肤施用有效量的根据权利要求1至27中任一项所述的组合，
其中将所述组合的五种组分中的每一者施用足以改善皮肤外观的时段。
29.根据权利要求28所述的皮肤护理方法，其中所述皮肤表面是面部皮肤表面。
30.根据权利要求28所述的皮肤护理方法，其中改善皮肤外观包括减低以下中的至少一项：皮肤皱纹的深度；皮肤皱纹的数量；皮肤皱纹的长度；或皮肤皱纹的宽度。
31.根据权利要求30所述的皮肤护理方法，其中所述皱纹是眶周皱纹、前额皱纹或脸颊皱纹。
32.根据权利要求28所述的皮肤护理方法，其中改善皮肤外观包括以下中的至少一项：
减低皮肤粗糙度，增加皮肤光滑度，增加皮肤光泽度，增加皮肤紧致度，减少皮肤下垂，增加肤色均匀度，缩小毛孔大小或减少皮肤色素沉着过度。
33.根据权利要求28至32中任一项所述的皮肤护理方法，其中将五种组合施用于皮肤：
a)至少每天一次，持续至少约一周；
b)至少每天两次，持续至少约一周；
c)至少每天一次，持续至少约十二周；或
d)至少每天两次，持续至少约十二周。
34.根据权利要求28至32中任一项所述的皮肤护理方法，其包括：
a)早晨向所述皮肤施用有效量的第一次施用的洗面奶组合物；
b)从所述皮肤冲洗掉第一次施用的所述洗面奶组合物；
c)在步骤b)后施用有效量的日间保湿霜组合物和有效量的精华素组合物；
d)向所述皮肤施用有效量的第二次施用的所述洗面奶组合物；
e)从所述皮肤冲洗掉第二次施用的所述洗面奶组合物；
f)向所述皮肤施用有效量的精华素组合物、爽肤水组合物和有效量的夜间保湿霜组合物，其中步骤a-c和d-f间隔约8个至约16个小时。
用于化妆品用途的局部麝香葡萄制剂
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002] 本申请要求于2017年5月12日提交的美国临时申请第62/505,549号的权益，所述临时申请通过引用并入本文。
技术领域
[0003] 本公开涉及用于皮肤处理的组合，其包括以下组分：爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和/或精华素。每种组分均包括脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物。还公开了使用这些组合来改善皮肤外观的方法。
背景技术
[0004] 活性氧(ROS)是有氧代谢的副产物，因此在人类和其他生物体中不断产生。人类还暴露于环境来源如污染、阳光和饮食中的ROS。尽管ROS有不同的化学形式，但它们都会对细胞成分和大分子的结构和功能(包括皮肤的结构和功能)产生有害作用。皮肤衰老的过程很复杂，涉及时间因素和环境因素。皮肤的最外层，即表皮，提供了防止化学损伤和生物损伤的屏障。表皮的一个功能是减缓ROS渗透到皮肤深层。
[0005] 随着时间的流逝，表皮中新皮肤层的生成速率减缓，导致皮肤逐渐变薄。这会降低表皮提供足够保护免受有害刺激(例如破坏性环境因素)的能力。弱化的屏障可导致例如胶原蛋白和弹性蛋白的降解，这可以表现为皮肤起皱，以及ROS的可渗透性增加。表皮从有害刺激中恢复的能力也随着年龄的增长而降低。
[0006] 已知葡萄提取物具有有益的抗氧化特性。例如，麝香葡萄中含有几种具有生物活性的多酚化合物，包括黄酮类化合物(例如黄酮醇、花色素苷和黄烷酮，以及被称为原花色素(proanthocyanidin)的黄烷-3-醇及其低聚物)和非黄酮类化合物(例如酚酸、鞣质和芪衍生物，例如白藜芦醇)。黄酮类化合物的生物学作用据认为是由于自由基清除、对细胞信号传导途径和基因表达的有益作用以及对快速和异常增殖的哺乳动物细胞的细胞分裂周期的选择性干扰所致。
[0007] 美国专利第4,272,544号公开了四种皮肤护理产品的施用和用途；所述皮肤护理产品即洗面奶制剂(skin cleanser formulation)、粉底霜(skin tonic)、护肤霜和皮肤乳液制剂。美国公开专利申请第2004/0191330号公开了一种皮肤护理方案，其包括水合洗剂，收敛水，眼霜，具有α羟基酸和β羟基酸的面部精华素，具有防晒剂的日霜以及具有废麦芽粕蜡和野生大豆(大豆)蛋白的晚霜。皮肤护理方案中多种组分的使用可以增强胶原蛋白和弹性蛋白的产生，并减少自由基。然而，仍然需要能够减少细纹和皱纹并改善皮肤外观的其它皮肤护理方案。发明内容
[0008] 本文公开了用于改善皮肤外观的方法和组合物，其结合了脱色的葡萄果渣溶剂提取物。使用包括脱色的葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物可通过例如以下来改善皮肤外观：减小皱纹深度，减少皱纹数量，减小皱纹长度，减小皱纹宽度，减低皮肤粗糙度，增加皮肤光滑度，增加皮肤光泽度，增加皮肤紧致度，减少皮肤下垂，增加肤色均匀度，缩小毛孔大小，减少皮肤色素沉着过度，或这些改善的任何组合。公开了使用组分组合的皮肤护理方法。施用率可以是但不限于每天一次或两次，持续一或多个星期。在一些实施方式中，使用包括以下五种组分的组合：爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和精华素。
[0009] 脱色的葡萄溶剂提取物生产的进展允许将这种葡萄提取物用于局部制剂中，包括用于皮肤护理产品。本公开提供了包括脱色的葡萄果渣提取物的组合物，所述葡萄果渣提取物具有较低的缩合鞣质含量，同时在提取物中基本上保留了多酚和所需的抗氧化活性。在一些实例中，脱色的提取物获自青铜色和/或紫色的麝香葡萄(圆叶葡萄)葡萄果渣。本文公开的组合物还包括葡萄籽提取物和β-葡聚糖。
[0010] 在某些实例中，所述组合物包括有效量的脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物，其中所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物包含液态青铜色麝香葡萄果渣提取物与液态紫色麝香葡萄果渣提取物的组合，以产生液态麝香葡萄果渣提取物，其中a)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和所述紫色麝香葡萄果渣提取物是溶剂提取物，b)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物的混合物促进鞣花酸在麝香葡萄果渣提取物中的溶解性，c)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和所述紫色麝香葡萄果渣提取物是经过滤并发酵的提取物，以及d)所述麝香葡萄果渣提取物的多酚含量为至少约2％。还公开了这些组分的组合，用于改善皮肤外观。因此，公开了用于改善诸如面部皮肤的皮肤外观的方法。
附图说明
[0012] 图1是示出在遵循示例性皮肤护理方案12周后展现出眼下皮肤健康改善的人类受试者的百分比的图表，所述改善涉及皱纹数量、长度、宽度、面积和深度的减小。
[0013] 图2是示出图1的受试者的眼下皮肤健康的改善幅度的图表。
[0014] 图3是示出在遵循示例性皮肤护理方案12周后展现出鱼尾纹皮肤健康改善的人类受试者的百分比的图表，所述改善涉及皱纹数量、长度、宽度、面积和深度的减小。
[0015] 图4是示出图3的受试者中的鱼尾纹皮肤健康的改善幅度的图表。
[0016] 图5是示出在遵循示例性皮肤护理方案12周后展现出皮肤粗糙度改善的人类受试者的百分比的图表，所述改善涉及皮肤粗糙度深度、最大和平均粗糙度以及皮肤光滑度。
[0017] 图6是示出图5的受试者中的皮肤粗糙度的改善幅度的图表。
[0018] 图7是示出在遵循示例性皮肤护理方案8周后展现出皮肤紧致度改善的受试者的百分比(左侧条柱)以及皮肤紧致度的改善幅度(右侧条柱)的图表。
[0019] 图8示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对整体面部皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0020] 图9示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对眶周皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0021] 图10示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对前额皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0022] 图11示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对脸颊皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0023] 图12示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对总体皮肤健康进行分析所测得展现出改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)，由专业皮肤分级人员通过目测分级确定。
[0024] 图13示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对皮肤质地进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0025] 图14示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对皮肤光泽度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0026] 图15示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对皮肤紧致度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0027] 图16示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对皮肤下垂进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0028] 图17示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对肤色均匀度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0029] 图18示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对总体面部毛孔大小进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。
[0030] 图19示出了两个图表，其中一个是通过在遵循示例性皮肤护理方案1周、2周、4周、8周和12周后对整体面部皮肤色素沉着过度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比(左图)，而另一个是皮肤健康改善的相应平均百分比(右图)。脸上展现较暗色斑点或杂色斑点的皮肤(表明那些区域的色素沉着更密集)被认为是色素沉着过度。
[0031] 图20是示出在遵循示例性皮肤护理方案12周后在13个特定参数方面感到其皮肤健康改善的受试者的百分比的图表。
[0032] 图21是示例性提取方法的流程图，该方法在用于生产脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的工艺的实施方式中，降低了缩合鞣质含量并同时基本上保留了多酚含量。
[0033] 图22是用于执行图21的方法的系统的示意图。
[0034] 图23A-23B是使用用于生产脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的工艺的实施方式降低鞣质含量之前的前体麝香葡萄果渣提取物(23A)以及之后的脱色提取物(23B)中的多酚的色谱图的比较迹线。在脱色的提取物中，前体提取物的所需多酚概况得以保留，而缩合鞣质的水平大大降低。
[0035] 图24是示出用脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物进行的弹性蛋白酶抑制试验的结果的图，表明了通过抑制弹性蛋白减少对皮肤弹性的影响。
[0036] 图25是示出用脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物进行的胶原酶抑制试验的结果的图。增强的胶原酶抑制可通过避免皮肤中的胶原蛋白流失来改善皮肤紧致度。
[0037] 图26A-26B示出了DPPH测定法的结果，该测定法测量脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的自由基清除能力，以Trolox当量(TE)表示；TE值越高，抗氧化能力越强。如图26B所示，100mcg/ml的TME显示与185mcg的Trolox相同的抗氧化能力，表明如通过DPPH测定法所测得，TME的抗氧化效力是Trolox的1.85倍。Trolox是一种已知的强大抗氧化剂，将其用作抗氧化剂测试的对照物质。
[0038] 图27A-27B示出了TT二聚体测定法的结果。图27A显示，在紫外线B(UVB)暴露之前用1％脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物预处理可以完全防止DNA损伤。提取物优于阳性对照(1mM Trolox)。在UVB暴露后用1％脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物进行处理(后处理)也显示出DNA损伤减少了45％，表明对DNA修复的作用；在预处理和后处理两者中，0.1％的作用均低于1％。图27B呈现了其它结果。与未处理的对照相比，0.25％的TME显示TT二聚体形成显著减少(38％)。与对照相比，GSE+葡聚糖没有显示出显著的减少。当GSE+葡聚糖与TME组合使用时，TT二聚体形成的减少更为显著(减少69％和减少44％)，表明这些成分的组合作用，所有这些成分均包括在所公开组合的组分中。
[0039] 图28示出了UVB暴露后的细胞存活率；与未处理的细胞相比，脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物显著提高了细胞存活率，并且该增加量大于20μM Trolox(阳性对照处理)所观察到的增加量。
[0040] 图29示出了在不同浓度的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物下的酪氨酸酶抑制作用，表明减轻色素沉着过度的能力。
[0041] 图30是在脱色的局部麝香葡萄果渣溶剂提取物(TME)与未经脱色的口服麝香葡萄果渣提取物(OME)之间的TT二聚体DNA损伤比较测定法的图表；在含有0.09％和0.009％的多酚的OME和TME之间，在减少DNA损伤方面没有统计学差异。OME是在先的美国专利第8,568,804号、美国专利第9,132,162号和美国专利第9,173,916号中公开的提取物。
[0042] 图31是示出OME(未脱色，●)和TME(脱色，■)均显示出以剂量相关的方式抑制晚期糖基化终产物(AGE)形成的优异活性(功效)的图。两种提取物在15-20μg多酚/ml的浓度下，对AGE形成的最大抑制作用达到95-100％。但是，如将AGE形成抑制50％所需的浓度(IC50)所指示，OME比TME更有效。OME的IC50值为0.65μg多酚/ml，而TME的IC50值为3.94μg多酚/ml。这表明，虽然鞣质有助于AGE抑制活性，但保留在TME中的其它麝香葡萄多酚在抑制蛋白质糖基化方面与OME同样有效。
具体实施方式
[0043] 本文公开了包含有效量的脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物，以及它们在用于改善皮肤外观的组合中的用途。另外公开了使用这些组合物来改善皮肤外观的皮肤护理方法。所述组合物可以另外包括以足以改善皮肤外观的量存在的其它成分，例如泛醇，维生素A、C和E，超氧化物歧化酶，北五味子(schizandra chinensis)提取物，百脉根(lotus japonicus)提取物或其任何组合。皮肤外观的改善可通过以下测量：皱纹的深度、长度、宽度或数量减小；皮肤粗糙度、皮肤下垂、毛孔大小或色素沉着过度减低；和/或皮肤光滑度、光泽度、紧致度或肤色均匀度增加。
[0044] I.术语
[0045] 提供以下的术语和方法的解释来更好地描述本公开并在本公开的实践中指导本领域普通技术人员。除非上下文另有明确指示，否则术语“或”是指所述的可选要素的单个要素或者两个或更多个要素的组合。如本文所用，“包含”意指“包括”。因此，“包含A或B”意指“包括A、B、或A和B”，且不排除其它要素。
[0046] 除非另有解释，否则在本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的相同的含义。虽然与本文中所述那些相似或等效的方法和材料可用于本公开的实践或测试，但在下面描述了合适的方法和材料。除非另有说明，否则所有百分比和比率均以重量计。术语“约”是指在某个值的特定范围内的量。举例来说，“约”特定分子量或克量表明在该分子量或克量的5％以内。在一个非限制性实例中，“约”100克是指95克至105克。另外，“约”特定百分比是指在0.05％以内。在一个非限制性实例中，“约”2％是指1.95％至2.05％。
[0047] 除非另有说明，否则技术术语根据常规用法使用。分子生物学中常用术语的定义可见于：Benjamin Lewin,Genes V,由牛津大学出版社出版,1994(ISBN 0-19-854287-9)；Kendrew等(编)《,分子生物学百科全书》(The Encyclopedia of Molecular Biology),由Blackwell Science Ltd.出版,1994(ISBN 0-632-02182-9)；和Robert A.Meyers(编)《, 分子生物学和生物技术：综合案头参考》(Molecular Biology and Biotechnology:a Comprehensive Desk Reference),由VCH Publishers,Inc.出版,1995(ISBN 1-56081-
569-8)。
569-8)。
[0048] 为了便于述评本公开的各种实施方式，提供了对特定术语的以下解释：
[0049] 施用：通过任何有效途径向受试者提供或给予药剂。示例性的施用途径包括但不限于局部、口服、注射(例如皮下、肌内、皮内、腹膜内、静脉内和肿瘤内)、舌下、透皮、鼻内、局部和吸入途径。
[0050] 抗氧化组合物：具有抗氧化活性的组合物。
[0051] 抗氧化有效量：在施用一定量组合物的受试者中足以诱导抗氧化作用的量。
[0052] 洗面奶：一种皮肤护理产品，其被配制用于从皮肤表面去除化妆品、死皮细胞、油脂、污垢和其它松散物质。洗面奶通常是皮肤方案中的第一组分，并且在施用爽肤水、精华素和/或保湿霜之前使用。洗面奶可以是凝胶，其在与皮肤接触时会液化，或者是油和水的乳液。洗面奶可以具有各种形式，包括但不限于凝胶、液体、擦拭剂、乳膏或洗液，并且可以起泡或不起泡。
[0053] 组合：通常包括在分开的容器中的两种或更多种单独的组分，当按顺序施用于皮肤时，它们共同起作用以改善皮肤的外观。组合可以包括两种、三种、四种、五种或六种独立的组合物(组分)。组合可以包括爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物、洗面奶组合物和精华素组合物。
[0054] 日间保湿霜：包含防晒剂的保湿霜，例如具有防晒系数(SPF)等级例如约20、约30、约40或约50的防晒剂。日间保湿霜通常是早晨皮肤方案中的最后一个组分，可在施用洗面奶、爽肤水和/或精华素之后以及施用彩妆之前使用。
[0055] 脱色的：“脱色的”提取物是指颜色浅于参考物的提取物，并且其不需要没有着色。本说明书中使用的“脱色的”提取物是指具有降低水平的缩合鞣质以及与红葡萄、红葡萄提取物和红葡萄酒中的缩合鞣质相关类型的深色着色较少的提取物。
[0056] 有效量：组合物单独或与另外的药剂(例如另外的抗氧化化合物)一起诱导所需反应的量。所述有效量可以按单剂或数剂施用，例如每天一次。然而，有效量可以取决于所治疗的受试者、所治疗的病状的类型和施用方式。
[0057] 赋形剂：用作组合物的活性成分的载体的非活性物质。赋形剂可包括用于使具有活性成分的制剂增量，使给药方便和准确，稳定活性成分，并使递送系统在光学上和/或感官上可接受的物质。药物赋形剂的实例包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩(chalk)、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠、脱脂奶粉、丙三醇、丙烯、二醇、水、乙醇等。
[0058] 提取物：植物或其一个或多个部分、例如其果实或种子的至少一些活性成分的溶液或其它制剂。本文公开的提取物是溶剂提取物，其中将种子暴露于液体提取溶剂(例如热水)以从种子中移出活性成分。最初通过溶剂提取获得的提取物可以转变成干燥形式，并仍然被认为是“提取物”。“水性”提取物或“水”提取物是指通过用水且没有其它溶剂(例如乙醇)进行溶剂提取而获得的提取物。
[0059] 黄酮类化合物：一类植物次级代谢产物。黄酮类化合物构成一组重要的膳食多酚化合物，它们广泛分布于植物中。在植物来源例如水果、蔬菜、豆类、坚果、种子、草药、香料、花朵中，以及饮料例如茶、可可、啤酒、葡萄酒和葡萄汁中，已经鉴定了超过4000种化学上独特的黄酮类化合物。
[0060] 以干重计，葡萄籽含有约4％至约8％的黄酮类化合物。葡萄籽中的黄酮类化合物主要指黄烷-3-醇，特别是(+)-儿茶素、(-)-表儿茶素和(-)-表儿茶素3-没食子酸酯及其复合物。葡萄籽中的黄烷-3-醇以单体、低聚或聚合形式存在。两个或更多个化学连接的黄烷-3-醇单体被称为原花色素或低聚原花色素(“OPC”)，其包括原花青素和原花翠素。含有两个单体的OPC称为二聚体，含有三个单体的OPC称为三聚体，含有四个单体的OPC称为四聚体，含有五个单体的OPC称为五聚体，以此类推。低聚物的链长为2至10；聚合物表示链长大于10的组分。因此，葡萄籽提取物中的低聚物包括例如二聚体和三聚体，并且有证据表明聚合物可具有多达50至100个单元。
[0061] 黄酮类化合物存在于葡萄的所有部分中，包括果皮、果汁和果肉，而不仅仅在葡萄籽中。为了使多酚化合物在商业上作为葡萄提取物，包括作为葡萄籽提取物或葡萄果渣提取物使用，这些化合物必须以更浓缩的形式从葡萄中分离。广泛的研究表明，葡萄提取物例如葡萄籽提取物在许多健康领域都是有益的，因为它可以促进年轻的皮肤，细胞健康，弹性和柔韧性。其它研究显示，原花色素有助于保护身体免受阳光损伤，改善视力，改善关节、动脉和身体组织如心脏的柔韧性，以及通过强化毛细血管、动脉和静脉而改善血液循环。
[0062] 改善皮肤外观：实现皮肤外观和/或感觉在视觉和/或物理上可测量的益处，其可以包括减少、预防或延迟皮肤病学皮肤衰老迹象的出现。皮肤病学皮肤衰老迹象包括皮肤起皱，真皮层变薄，弹性和水合水平减低以及色素沉着和发红增加。使用所公开的组合物和方法可提供的益处包括但不限于减小皮肤皱纹的深度、长度、宽度或数量；减低皮肤粗糙度、皮肤下垂、毛孔大小或皮肤色素沉着过度；以及增加皮肤光滑度、光泽度或透亮度、紧致度、弹性或者肤色或着色均匀度。
[0063] 保湿霜：一种皮肤护理产品，其被配制成向皮肤的外层添加水分，并且可以作为将成分局部递送至皮肤的媒介物。保湿霜可以具有不同的作用模式，包括通过在皮肤表面形成一层薄膜以减少水分流失，通过从空气中吸引水蒸气以增加水分，或通过向皮肤表面添加保湿因子。保湿霜可以是乳液，或者是粘性半固体。
[0064] 麝香葡萄(圆叶葡萄)：原产于美国东南部并见于从特拉华州到墨西哥湾以及向西到密苏里州、堪萨斯州、俄克拉荷马州和德克萨斯州的野外的葡萄。麝香葡萄很好地适应了美国东南部温暖潮湿的条件。这种水果结成3至40颗葡萄的小而松散的簇，与欧洲和美国葡萄特征性的大而紧密的串完全不同。该圆形的1至1-1/2英寸的水果具有厚而韧的果皮，并含有多达5粒硬的长圆形籽。在颜色上，所述水果的范围从浅绿青铜色到青铜色、带粉红的红色、紫色和近乎黑色。它们被认为是红葡萄，作为用于本说明书中的术语。
[0065] 有许多不同品种的麝香葡萄，包括雌性(只有雌蕊的)品种，例如黑美人(Black Beauty)、Black Fry、Darlene、Fry、Higgins、Jumbo、Scuppernong、Sugargate、Summit、Supreme和Sweet Jenny，和自交品种例如Carlos、Cowart、Dixieland、Dixie Red、Fry Seedless、Magnolia、Nesbitt、Noble、Redgate、Regale和Sterling。
[0066] 举例来说，本领域技术人员将青铜色品种的麝香葡萄鉴定为包括Carlos、Chowan、Doreen、Higgins、Magnolia、Nevermiss、Pamlico、Roanoke、Scuppernong、Sterling和Summit品种。紫色品种的果皮比青铜色品种的深，并包括Albermarle、Bountiful、Cowart、GA-1、Hunt、NC-1、Noble、Regale、Tarheel和Jumbo。一些紫色品种也被称为黑色。
[0067] 完整麝香葡萄的植物化学成分与葡萄(Vitis vinifera)不同。麝香葡萄具有以高鞣花、没食子和黄酮类糖苷浓度为特征的较高的总酚含量。麝香葡萄中鞣花酸的存在是独特的，并且以游离鞣花酸、鞣花酸糖苷、甲氧基化衍生物和鞣花鞣质的形式存在。另一个独特的特征是在麝香葡萄中观察到的花色素苷化学成分。以非酰化形式作为花翠素、花青素、矮牵牛花色素、芍药花青素和锦葵色素的3,5-二葡萄糖苷(而不是3-葡萄糖苷)存在，这些化合物以及葡萄内存在的其它花色素苷的天然颜色影响为从紫色品种获得的果汁和果渣赋予深紫色。紫色果渣提取物含有花色素苷，而青铜色果渣提取物则不含。
[0068] 青铜色和紫色麝香葡萄中存在的红色和紫色花色素苷是具有抗氧化性质的多酚化合物。紫色和青铜色麝香葡萄含有几种其它黄酮类的多酚，其中黄烷-3-醇和它们的低聚物是存在于完整麝香葡萄中的最丰富的类别，而黄酮醇是第二最丰富的黄酮类化合物。对麝香葡萄果皮级分报道的主要酚类(按递减顺序排列)是鞣花酸、杨梅树皮素、槲皮素和山奈酚，而对籽报道的那些是表儿茶素、儿茶素和没食子酸(Pastrana-Bonilla等《, 农业与食品化学杂志》(J.Agric.Food Chem.)51:5497-5503,2003)。
[0069] 麝香葡萄含有果渣和果汁。“非完整葡萄”包括已从中提取了至少一些果汁的麝香葡萄，并且在一些实例中包括葡萄中少于95％或少于90％的原始果汁。
[0070] 夜间保湿霜：一种不含化学防晒剂的保湿霜。夜间保湿霜通常是晚上皮肤方案中的最后一个组分，可以在施用洗面奶、爽肤水和/或精华素后使用。
[0071] 药学上可接受的媒介物：可用于本公开的药学上可接受的媒介物(载体)是常规的。《雷明顿药物科学》(Remington's Pharmaceutical Sciences),E.W.Martin,Mack Publishing Co.,Easton,PA,第19版(1995)，描述了组合物和制剂，其适合于药物递送一种或多种组合物(例如，一种或多种葡萄提取物组合物)和在自然界中在葡萄提取物中不存在的另外的天然或非天然存在的药剂。使用药学上可接受的载体并不意味着如此制备的产品只可用于药物目的。相反，它意味该产品适合施用于受试者或被受试者消费，例如以局部组合物形式。在特定实施方式中，所述媒介物是用于局部组合物的载体，例如液体、凝胶、泡沫、软膏或洗液。特别有用的媒介物是药学上或美容上可接受用于局部施用的那些，例如一种或多种含水体系、甘油、C1-4醇、脂肪醇、脂肪醚、脂肪酯、多元醇、二醇、植物油、矿物油、脂质体、层状脂质材料、硅油、水或其任何组合。
[0072] 对于局部组合物，例如本文公开的那些，可以将所述麝香葡萄提取物组合物配制成任何合适的产品形式。这样的产品形式包括但不限于气溶胶喷雾、分散体、乳液、泡沫、凝胶、液体、洗液、摩丝、软膏、贴剂、润发油、粉剂、泵式喷雾、固体、溶液、条棒或小毛巾。所述载体也可以是各种现有的皮肤洗液、凝胶、乳膏、软膏、爽肤水、洗面奶、保湿霜或防晒剂，在其中添加了所需浓度例如约0.025重量％至约0.25重量％的麝香葡萄提取物。
[0073] 多酚：已经发现来自葡萄和可可的多酚既增强心血管功能又增强认知健康。黄烷醇(也称为黄烷-3-醇)占葡萄籽和可可多酚的大部分；这类酚类化合物的范围从单体物质如儿茶素和表儿茶素到低聚物(经常称为原花色素)到聚合物(经常称为鞣质或缩合鞣质)。术语“酚类”与本领域和本说明书中的术语多酚可互换使用。
[0074] 多酚也存在于葡萄的其它部分，包括果皮、果汁和果肉中。葡萄中多酚的最高浓度存在于葡萄籽中。葡萄籽是葡萄酒厂和葡萄汁工业的废产物。这些籽含有脂质、蛋白质、碳水化合物，和约4％至约8％的多酚(干重)，取决于品种。葡萄籽提取物可以保护身体免于早衰、疾病和退化。
[0075] 果渣：果汁提取后剩下的果皮、籽和果肉。在一个实例中，果渣提取物是青铜色麝香葡萄果渣提取物、紫色麝香葡萄果渣提取物或其组合。许多不同品种的麝香葡萄果渣可用作原料，并且它们包括雌性(只有雌蕊的)品种，例如黑美人、Black Fry、Darlene、Fry、Higgins、Jumbo、Scuppernong、Sugargate、Summit、Supreme和Sweet Jenny，和自交品种，例如Carlos、Cowart、Dixieland、Dixie Red、Fry Seedless、Magnolia、Nesbitt、Noble、Redgate、Regale和Sterling。麝香葡萄果渣含有具有抗氧化性质的酚类化合物，包括没食子酸和鞣花酸。
[0076] 果渣可以存在于完整的葡萄中，其中完整的葡萄含有至少约90％或至少约95％的葡萄汁，或者果渣可以在压榨葡萄除去果汁之后为基本上分离的且基本上只由果渣组成。
[0077] 纯果渣：已经去除果汁(例如，通过压榨葡萄去除果汁)的葡萄的果渣部分。如本文所用，“纯果渣”是指按其重量百分比含有不超过约1％果汁的果渣。在一些实施方式中，纯果渣按其重量百分比含有不超过约0.5％的果汁。
[0078] 纯化：术语纯化不要求绝对纯度；相反，它旨在作为相对术语。因此，例如，纯化的物质是该物质在其中比该物质在其天然环境中、例如在果实(例如葡萄)中更富集的物质。在一个实施方式中，将制备物纯化，使得该物质占所述制剂的总量的至少约5％(例如但不限于至少约10％、至少约20％、至少约30％、至少约40％、至少约50％、至少约70％、至少约
80％、至少约90％、至少约95％、至少约98％或至少约99％)。
80％、至少约90％、至少约95％、至少约98％或至少约99％)。
[0079] 范围：关于范围，术语“在x至y的范围内”或“从x至y”包括x和y之间的任何值，以及端点x和y。
[0080] 红葡萄：红葡萄是通常用于制造红葡萄酒的葡萄，其鞣质水平通常高于用于制造白葡萄酒的白葡萄。“红葡萄酒”是深色葡萄酒的通称。葡萄酒颜色的确定可以根据国际葡萄及葡萄酒组织(International Organization of Vine and Wine)进行，该组织提供了使用分光光度计和在实验室色空间中的指数计算来评估葡萄酒颜色的方法。用于制造红葡萄酒的葡萄的实例包括Syrah、Merlot、Cabernet Sauvignon、Malbec、Pinot Noir、Zinfandel、Sangiovese、Barbera和麝香葡萄。麝香葡萄(圆叶葡萄)在成熟时颜色范围从青铜色到深紫色到黑色。
[0081] 方案：如本文所用，方案是改善皮肤外观的系统性治疗实践。方案可能包括将一种或多种组分定期施用于皮肤，例如爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和精华素。可以每天一次用一种或所有组分处理皮肤，或者可以一天多次施用组分，例如在早晨和晚上。举例来说，可以在早晨施用日间保湿霜并且可以在晚上施用夜间保湿霜。通常，方案包括多次施用。
[0082] 选择性提取：选择性提取是指目标物(例如缩合鞣质)的优先提取。在一些实施方式中，选择性提取意味着目标物是被提取的主要物质。
[0083] 精华素：一种皮肤护理产品，其被配制成将成分深层递送到皮肤中。因此，精华素通常包含较高浓度的活性成分，并在施用保湿霜之前直接施用于清洁皮肤。精华素的粘度低并且水的比例比油高。
[0084] 皮肤护理组合物：一种局部组合物，其具有可以改善皮肤的健康、美观和/或美容外观的活性成分。这样的改善可以通过例如以下来显现：由诸如年龄衰老、激素老化和光老化等因素引起的皮肤病学衰老迹象减少；皮肤脆性减低、毛孔大小缩小、胶原蛋白和/或弹性蛋白损失；削弱线纹和/或皱纹包括细纹和/或皱纹的出现和/或深度；减少色素沉着过度；改善肤色、光泽度、透明度和/或紧绷度；减少皮肤下垂；促进抗氧化活性；改善皮肤紧致度、饱满度、质地、柔软度和/或柔度；改善前胶原和/或胶原蛋白产生。
[0085] 受试者：活的多细胞脊椎动物生物体，类别包括人类和兽医受试者，例如伴侣动物，包括猫、狗或马。遵循皮肤护理方案或皮肤护理方法以改善皮肤外观的受试者是可以从这种改善中受益的受试者，例如希望抵消由活性氧引起的组织损伤或减少衰老迹象或与衰老皮肤相关的其它病状的受试者。
[0086] 鞣质：天然存在的多酚生物分子，其结合并沉淀蛋白质、氨基酸和生物碱。术语“鞣质”最初指的是来自橡木的木鞣制剂用于将动物皮鞣制成皮革的用途。然而，术语鞣质广泛应用于分子量范围从约500至超过3,000(没食子酸酯)并直至约20,000(原花色素)的大型多酚化合物，其见于植物中，例如红葡萄籽、种子和茎中。就它们的化学组成而言，植物鞣质分为可水解鞣质和缩合鞣质或黄酮类化合物。可水解鞣质是聚合的简单酚类物质，例如没食子酸酯及其二聚体(双没食子酸，鞣花酸)。可水解鞣质可进一步分为水解后产生没食子酸的没食子鞣质和水解后释放鞣花酸的鞣花鞣质。与可水解鞣质相反，缩合鞣质不能通过水解分解。相反，当在酸性介质中进行加热时，它们逐渐聚合并形成具有高分子量的红色无定形花色素苷颜料或不溶性黄褐色产物，称为鞣红。
[0087] 爽肤水：一种皮肤护理产品，其被配制用于清洁皮肤并缩小毛孔大小。在一些实施方式中，可以在洗面奶之后和施用精华素或保湿霜之前施用爽肤水。爽肤水可具有低粘度并且水比例比油高。
[0088] 局部施用：局部施用的药剂只施用于皮肤的特定表面区域，而不是整个身体。在特定实例中，将所述组合物施用于需要改善效果的区域，例如眼睛周围的鱼尾纹区域。举例来说，所述组合物可以局部施用于面部皮肤。旨在施用于皮肤的局部组合物是“皮肤组合物”。
[0089] 超滤：一种膜过滤类型，其中力(例如压力或浓度梯度)导致通过半透膜分离。超滤膜通常以膜的截留分子量(MWCO)来表征。悬浮的固体和较高分子量的溶质保留在截留物中，而水和较低分子量的溶质透过所述膜到渗透物中。不同类型的模块可用于超滤过程。这样的模块的实例是：使用浇铸在塑料管或纸管内部的聚合物膜的管状元件；含有多个中空纤维的中空纤维设计；螺旋缠绕模块，其中平面膜片由薄的网状间隔材料分隔开，所述间隔材料围绕中心穿孔管卷绕并装配到管状钢制压力容器壳体中；以及板和框架组件，其使用放置在平板上的膜，所述平板由网状材料隔开，滤液通过所述网状材料。
[0090] 单位剂量：包含预定量活性物质的物理离散单元，所述预定量结果计算用于单独或共同产生期望的效果、例如治疗效果。单个单位剂量或多个单位剂量可用于提供期望的效果或活性，例如皮肤外观的改善。在一个实例中，单位剂量包括所需量的抗氧化剂。在另一实例中，单位剂量包括所需量的药剂，其减低皱纹深度、皱纹数量、皱纹长度、皱纹宽度、皮肤粗糙程度、皮肤下垂、毛孔大小或皮肤色素沉着过度；增加皮肤光滑度、皮肤光泽度或透亮度、皮肤紧致度、肤色均匀度；或其任何组合。在另一个实例中，单位剂型包含多个预定剂量的活性材料。
[0091] II.皮肤护理方案中使用的组合
[0092] 考虑到已知的老化和暴露于有害刺激物(包括ROS、阳光和污染)对皮肤的影响，需要有效的产品来提供对这些有害因素的保护并改善皮肤外观。本文公开的皮肤护理方案和方法中使用的五种组分通过以消费者可接受的形式组合几种成分来实现这些目的，其在施用时同时有效地改善皮肤的外观。
[0093] 本文所述组合的五种组分中的每一者都包括脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，所述脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物具有降低含量的缩合鞣质、β-葡聚糖和葡萄籽提取物。用脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物制成的局部组合物具有对皮肤有益的多酚概况，但是由于其较低的缩合鞣质含量，所述组合物是相对脱色的。如本文所用，“低的缩合鞣质含量”是指约10重量％以下的缩合鞣质含量。所述组合物包括脱色的麝香葡萄果渣提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物。所述组合物以五组分体系(组合)使用，其可改善皮肤外观，例如减小皱纹的深度、长度、宽度或数量，降低皮肤粗糙度，减少皮肤下垂，增加弹性，缩小毛孔大小，减少皮肤色素沉着过度，增加皮肤光滑度，增加皮肤光泽度，增加皮肤透亮度，增加皮肤紧致度，匀化肤色和/或匀化皮肤着色。这些组合物是依序施加的。
[0094] A.脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物
[0095] 本文公开的组合和方法中使用的组合物包含脱色的麝香葡萄果渣提取物，其与未经脱色的麝香葡萄果渣提取物相比，具有较低水平的缩合鞣质含量。鞣质广泛分布在许多类型的植物中。鞣质可见于叶片、芽、种子、根和茎组织中。鞣质存在于单子叶植物(根据维基百科有44个科)和双子叶植物(根据维基百科有180个科)中，以及存在于裸子植物和被子植物中。下列双子叶植物的所有物种均含有鞣质：槭树科(Aceraceae)、猕猴桃科(Actinidiaceae)、漆树科(Anacardiaceae)、红木科(Bixaceae)、橄榄科(Burseraceae)、使君子科(Combretaceae)、龙脑香科(Dipterocarpaceae)、杜鹃花科(Ericaceae)、茶藨子科(Grossulariaceae)和杨梅科(Myricaceae)。茨藻科(Najadaceae)和香蒲科(Typhaceae)(单子叶植物)的所有物种也都含有鞣质。在诸如柯(Ltihcarpus glaber)、李属(Prunus sp)、民间白坚木(Schinopsis lorentzil)、黑荆树(Acacia mollissima)、葡萄和没药(Commiphora angioensis)的植物物种中存在缩合鞣质(包括原花色素、聚类黄酮鞣质、儿茶酚型鞣质、焦儿茶酚型鞣质、不可水解的鞣质或黄酮烷)。松树皮和云杉皮都含有缩合鞣质。维管植物(例如导管植物(Tracheophytes)、维管植物)也包括缩合鞣质。与任何含有缩合鞣质的这些植物的非脱色前体提取物相比，脱色植物提取物具有较低的缩合鞣质含量。
[0096] 在一些实施方式中，植物提取物是葡萄果渣提取物，例如但不限于含有缩合鞣质的麝香葡萄(圆叶葡萄)葡萄果渣提取物。在一些非限制性实例中，植物提取物是含有缩合鞣质的红色葡萄果渣提取物。在某些实例中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物是由液态麝香葡萄果渣提取物制成的，所述液态麝香葡萄果渣提取物为青铜色和紫色麝香葡萄的组合提取物，具有增强的鞣花酸溶解性(麝香葡萄所独有的)。通过本文公开的任何方法获得的组合的麝香葡萄果渣前体提取物具有一定水平的缩合鞣质，其赋予提取物以深色着色。
[0097] 如在申请人的PCT公开第WO 2010/014870号、PCT公开第WO2010/014873号、美国专利第8,568,804号、美国专利第9,132,162号和美国专利第9,173,916号的公开内容中所讨论(所有五篇文献都通过引用并入本文)，可通过将青铜色和紫色麝香葡萄果渣提取物组合来获得具有改进的鞣花酸溶解性的麝香葡萄提取物。公开了制造组合提取物的各种方法，例如将青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物组合以产生麝香葡萄果渣提取物，其中青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围为约0.1至约10(重量:重量)，例如约0.3至约3(重量:重量)。在某些实例中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物是从这样的组合前体提取物制备的。
[0098] 可以通过分别提取青铜色和紫色麝香葡萄并随后组合提取物，或者通过同时提取以所需比率组合的青铜色和紫色麝香葡萄来制备组合的前体提取物。在所公开的实例中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物是前体组合液态麝香葡萄果渣的水性提取物。
[0099] PCT公开第WO 2010/014870号、PCT公开第WO 2010/01487号、美国专利第8,568,804号、美国专利第9,132,162号和美国专利第9,173,916号公开了前体麝香葡萄果渣提取物组合物具有改善的抗氧化活性。含有脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的组合物的生产方法包括将多酚含量为至少约2％的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣提取物与来自除麝香葡萄外的来源的最低纯度为至少约5％的反式白藜芦醇组合，其中麝香葡萄多酚与反式白藜芦醇的比率在约0.1/1至约10/1(重量:重量)的范围内。包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的组合物的生产方法包括将多酚含量为至少约2％的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣提取物与来自除麝香葡萄外的来源的最低纯度为至少约5％的反式白藜芦醇组合，其中麝香葡萄果渣提取物与反式白藜芦醇的比率在约0.2/1至约50/1(重量:重量)的范围内，例如约5/1至约50/1(重量:重量)，包括约20/1至约50/1(重量:重量)，例如约18至约1(重量:重量)，从而产生具有抗氧化活性的麝香葡萄果渣提取物与反式白藜芦醇混合物。
[0100] 在一些实施方式中，前体液态提取物中青铜色与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围为约0.1至约10，例如约0.3至约3。举例来说，青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率为约2.75至约1(重量:重量)、约2.5至约1(重量:重量)、约2.25至约1(重量:重量)、约2至约1(重量:重量)、约1.5至约1(重量:重量)、或约1至约1(重量:重量)。
在其它实例中，该比率为约10至约1、约7.5至约1、或约5至约1。如本文所用，术语“约”定义为±0.5。在一个特定实例中，青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率为约2.25至约1(重量:重量)。
在其它实例中，该比率为约10至约1、约7.5至约1、或约5至约1。如本文所用，术语“约”定义为±0.5。在一个特定实例中，青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率为约2.25至约1(重量:重量)。
[0101] 在某些实施方式中，组合的前体麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣液态提取物的多酚含量为至少约2％。举例来说，多酚含量为至少约3％、至少约3.5％、至少约4％、至少约4.5％、至少约5％、至少约6％、至少约7％、至少约8％、至少约10％、至少约12％或至少约14％。在一个特定实例中，组合的前体麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣液态提取物的多酚含量为约4％。
[0102] 在一些实施方式中，所公开的组合的前体液态麝香葡萄果渣提取物在液体中包括约20％至约50％的固体，例如至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约37％、至少约40％、至少约42％、至少约44％、至少约46％或至少约48％。在一个特定实例中，组合的前体提取物在液体中包括约40％的固体。
[0103] 液态果渣前体提取物可以通过任何提取方法获得，例如在压力下加压或用溶剂提取。具体的实例是溶剂提取，例如用醇、水(例如热水)或醇和水的组合。
[0104] 提取物可以进一步发酵以除去提取的糖。在一个实例中，发酵是在提取青铜色麝香葡萄果渣和紫色麝香葡萄果渣之后，但在将青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物组合之前进行，以产生液态麝香葡萄果渣提取物。在其它实例中，发酵是在将青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物以所需的提取后比率(例如但不限于约2:25至约1的青铜色:紫色比率)组合后进行的。
[0105] 发酵可以通过本领域技术人员已知的任何方法进行。举例来说，可以将酵母和酵母营养素添加到果渣中，并继续发酵直到残留的糖含量转化为乙醇。在一个实例中，每1000加仑的1X(未浓缩)提取物添加两磅酵母；发酵通常在三天后完成。在其它实例中，酵母的量和/或菌株以及发酵的持续时间和温度可以根据本领域技术人员已知的各个方法而变化。在一些实例中，酶用于澄清和/或沉淀残留物或提高果渣提取物的提取产率。此类酶的实例包括果胶酶，或来自黑曲霉(Aspergillus niger)的酶的共混物，其可从诸如Scott Laboratories的来源商购获得。这些酶可以在发酵之前或期间添加到果渣提取物中。
[0106] 在一些实施方式中，在发酵之前和/或之后，将青铜色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物过滤。过滤可以根据本领域技术人员已知的一般方法进行。在一个特定的实例中，将提取物通过具有适当筛目尺寸的筛网进行过滤，例如USP筛网(通常为120目)或类似的布滤器(例如可从Millipore Corporation商购获得的过滤器)。
[0107] 在某些实施方式中，液态麝香葡萄果渣提取物的制备还包括浓缩青铜色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物，使得每个提取物在液体中包括约20％至约50％的固体，例如至少约25％、至少约30％、至少约35％、至少约37％、至少约40％、至少约42％、至少约44％、至少约46％或至少约48％。在一个特定实例中，将提取物浓缩，使得每个提取物在液体中包括约40％的固体。用于浓缩样品的通常已知的方法，包括本文公开的用于浓缩样品的方法，可以用于浓缩青铜色和紫色提取物。
[0108] 在制备脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的任何前述实例中，可以用完整紫色葡萄代替紫色果渣。紫色麝香葡萄果渣提取物可包括(a)完整紫色麝香葡萄的提取物；(b)来自非完整葡萄的紫色麝香葡萄果渣的提取物；或(c)(a)和(b)的混合物。完整紫色葡萄含有葡萄汁，其是除葡萄果渣以外的花色素苷的来源，并且当从完整葡萄中进行溶剂提取时，发现这些花色素苷令人惊讶地增强了鞣花酸在青铜色和紫色麝香葡萄提取物的混合物中的溶解性。但是，花色素苷的其它来源也可以由除紫色麝香葡萄之外的有色水果(如蓝莓、黑莓或树莓)或有色水果的副产品提供。在一些实例中，花色素苷来自水果加工流的产物(例如，果汁浓缩物)，或者是与水果泥加工流分离的水果加工流的副产物(例如，果皮)。
[0109] 可以通过对前体提取物进行脱色工艺来从前体提取物制备脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物。图21示出了用于降低麝香葡萄果渣提取物的鞣质含量的脱色工艺的实例。前体物质是麝香葡萄果渣提取物液体浓缩物1。在该实例中，浓缩物1是约40％至约45％的固体，如美国专利第8,512,771号和第9,173,916号中所述。通过添加纯净水将浓缩物1稀释到小于约10％的固含量，以产生约8％的固体溶液2(固体百分比可以在约2％至约10％的范围内)。将溶液2加热到约130至约135℉，然后通过微滤装置3来澄清物质。当将前体物质稀释到非常低的固含量水平(约2％至约5％)时，微滤过程效率更好，并且加热也有助于促进该过程。在该具体实例中，微滤装置3是孔径为0.45微米且NMWCO为200,000道尔顿(或200kDa)的机械过滤器，其从溶液中去除微生物和悬浮颗粒以准备用于后续的超滤处理4。在开始第一阶段超滤步骤之前，将澄清后的提取物在储罐中迅速冷却至<50℉。
[0110] 然后将冷却并澄清的提取物进行超滤处理4，其利用1000道尔顿(或1kDa)的标准标称分子量截留超滤膜，在5产生渗透物(级分A)。级分A包括分子量小于约1000的化合物，并且主要包含有机酸、糖和矿物质，但令人惊讶地包含少于约1％的酚类化合物。这些酚类化合物包括痕量的酚酸和黄酮类化合物，例如没食子酸和槲皮素。尽管分子量高达约1,000道尔顿的分子能够渗透超滤膜，但出乎意料地发现，该级分包含的酚酸含量非常低，这可能是由于酚酸与前体物质中包含的其它分子(可能是纤维)之间的物理化学相互作用所致。通过使用低至约500道尔顿和高至约5000(或5kDa)的标准标称分子量截留超滤膜，可以获得这一出乎意料的发现。级分A可以用作其它产品中的“麝香葡萄”型风味组分，但在制备用于本文所述局部组合物的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物的过程中将这种物质弃去。
[0111] 将低分子量超滤(如上所述)中保留的截留物(未通过超滤膜的物质)在纯净水中重配至约2％的固体浓度，并利用截留值为30kDa的超滤膜进行第二次超滤过程6。弃去所得的截留物7(级分C)，并保留含有脱色麝香葡萄果渣提取物的渗透物8(级分B)，以进一步加工成所公开的局部组合物。级分C主要包含聚合的缩合鞣质、蛋白质和纤维。相比之下，级分B富含多酚(约9％至约10％干重)，低糖(少于约4％干重)并大大降低了聚合的缩合鞣质含量(初始缩合鞣质含量最低减少约70％)。尽管分子量高达约30,000道尔顿的分子能够渗透超滤膜，但出乎意料地发现，级分C中保留至少约70％的聚合的缩合鞣质，这可能是由于物理化学相互作用所致。这一意外发现可源自于使用低至约25,000道尔顿(25kDa)且高至约100,000道尔顿(或100kDa)的标准标称分子量截留超滤膜。
[0112] 级分B还含有纤维(约1.0％)、蛋白质(约7.8％)、脂肪(约0.1％)和有机酸(约16.0％)。富含聚合的缩合鞣质的级分C可以用作多种产品中的抗氧化剂来源，但该物质在脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的制备过程中被弃去。此时，在脱色过程中，麝香葡萄果实提取物(级分B)的糖含量极低(小于干重的约4％)，并且聚合的缩合鞣质大大减少。级分B可用于皮肤护理产品，因为它含有强力的多酚，但由于去除了缩合鞣质及其糖含量极低，因此几乎没有或没有棕色变色的可能性。当引入用于局部使用的各种制剂中时，未检测到棕色底色。
[0113] 渗透物8(级分B)通过用活性炭处理(约0.3％重量:重量)进行进一步加工，以去除皮肤护理产品中不希望的有味组分(黄油/酵母味)。用活性炭处理后，将级分B进行最终的微滤过程9，以除去所有痕量的活性炭。微滤后，将溶液浓缩10到约30％至约40％的固含量，然后用氧化镁矿化，以利于干燥后自由流动的粉末。氧化镁以干重计约7.0％的输入量添加至浓缩物中，以完全促进矿化过程，从而形成提取物中存在的所有有机酸的镁盐。最后，将产品进行干燥/研磨11以提供均匀的粒度。在该研磨阶段中添加二氧化硅以防止产品结块。
[0114] 与前体物质相比，级分B在进行上述方法时具有约75％至约80％的质量减少，而多酚含量减少仅约35％至约40％。因此，以等质量为基础将级分B与前体物质进行比较时，级分B中非鞣质多酚含量的所得减少量仅为约18％至约20％。因此，级分B中多酚的主要损失归因于聚合缩合鞣质的化学类别；几乎没有检测到其它多酚化学类别的损失(参见图23中的色谱图)。因此，级分B平均含有约9％的麝香葡萄多酚(主要是非鞣质)，而前体物质平均含有约14％的由鞣质和非鞣质麝香葡萄多酚组成的多酚。表1-3描述了营养素和多酚含量的比较，并且图23提供了前体物质与通过上述方法生产的脱色提取物的色谱比较。
[0115] 表1比较了前体提取物和脱色提取物的营养素概况(以干提取物的百分比呈现)。尽管营养素概况非常相似，但由于前体物质的质量降低，因此营养素类别如蛋白质和简单糖存在一定浓缩。然而，脱色提取物的最终简单糖(单糖)含量非常低(小于约4％至小于约
5％)，因此适用于局部施用的产品。
5％)，因此适用于局部施用的产品。
[0116] 表1.前体和脱色的麝香葡萄提取物的营养素概况。
[0117]
[0118] 表2以干重计示出了每种提取物的总多酚含量，并将多酚含量进一步分为缩合鞣质含量和除缩合鞣质以外的多酚含量。如表2所示，虽然脱色提取物中的总多酚含量降低约35％(90mg/g对140mg/g干重)，但脱色提取物的缩合鞣质含量比前体提取物中的含量低至少约70％(6mg/g对21mg/g干重)。因此，多酚损失的大部分(大约80％)可归因于缩合鞣质的去除，从而证实了使用上述方法，相对于其它多酚而言，优先去除了缩合鞣质。
[0119] 表2前体和脱色的麝香葡萄提取物的多酚含量。
[0120]
[0121] *没食子酸当量测定(经由UV/VIS的总多酚)-经由UV/VIS的缩合鞣质测定＝非缩合鞣质含量。
[0122] 脱色的提取物保留了在前体物质中存在的所有核心多酚(酚酸、黄酮类化合物、花色素苷和可水解的鞣质)(表4中列出)，如图23中的色谱图所示以及在表3中进一步说明，其中对核心/标志麝香葡萄多酚进行了概述。使用分析方法，将前体提取物中约30％的总多酚(140毫克中的43.84毫克)作为单一酚类和/或化合物测量，并与脱色提取物中的相应类别/化合物进行比较。
[0123] 如表3所示，在脱色的提取物中可检测到重要的(在某些情况下是独有的)麝香葡萄多酚类，例如酚酸、鞣花酸、没食子酸、鞣花鞣质和没食子鞣质；在某些情况下，选定化合物例如没食子酸的百分比增加。因此，两种提取物之间多酚含量的主要差异是缩合鞣质含量减少约70％。总之，当以局部制剂的典型使用量添加时，缩合鞣质含量降低与低水平的简单糖一起使得脱色的级分B适于皮肤护理应用。这些制剂可用于皮肤护理，并且在储存时更稳定，使得该产品不会随时间而变成棕色或变暗。
[0124] 表3.前体和脱色的麝香葡萄提取物的多酚概况。
[0125]
[0126] 表4：核心麝香葡萄多酚。
[0127]
[0128] 上面公开的用于选择性地降低缩合鞣质水平的提取方法，有利地保持或改善了对皮肤有益的其它多酚的水平，同时避免了高水平的缩合鞣质的存在所带来的缺点。
[0129] 在某些实施方式中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物是青铜色和紫色麝香葡萄果渣的液态提取物的组合。在脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的一些实施方式中，青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围为约0.1至约10(重量:重量)，例如约0.3至约3(重量:重量)。
[0130] 在一些实例中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的酚含量包括约2％至约3％的鞣花酸和约30％至约31％的没食子酸，例如：约2％至约3％的鞣花酸、约3％至约4％的鞣花酸糖苷、约30％至约31％的没食子酸、约2％至约3％的槲皮素、约10％至约11％的没食子鞣质、约7％至约8％的鞣花鞣质、约29％至约30％的原花色素、约4％至约5％的花色素苷、约2％至约3％的儿茶素和约6％至约7％的酚酸。
[0131] 用于脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的紫色麝香葡萄果渣提取物可以包含完整紫色(圆叶葡萄)麝香葡萄的提取物、来自非完整葡萄的紫色麝香葡萄果渣的提取物、或其两者。
[0132] 在某些实施方式中，按提取物的重量计，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物可包括约7％至约10％的多酚，例如约9％至约10％的多酚，和少于约5％的单糖，例如少于约4％的单糖。在一个特定的实例中，按脱色提取物的重量计，脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物具有约9％至约10％的多酚含量，并且含有少于约4％的单糖。
[0133] 在一些非限制性实例中，缩合鞣质少于脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的总多酚含量的约10％。在另外的非限制性实例中，脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物中的脱色麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物总多酚由至少约85％、例如至少约90％的除缩合鞣质之外的多酚组成。
[0134] 脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物可另外包括来自葡萄果渣的天然存在组分。举例来说，按提取物的重量计，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物可含有约0.5％至约5％的纤维，约7％至约14％的蛋白质，约0.5％至约3％的脂肪和约15％至约20％的有机酸。在某些实例中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物包括约0.5％至约2％或约1％至约2％的纤维，约7％至约9％或约7％至约8％的蛋白质，约0.05％至约1％或约0.5％至约1.5％的脂肪，和约15％至约17％或约15.5％至约16.5％的有机酸，其中各百分比以提取物的重量计。
[0135] B.其它成分
[0136] β-葡聚糖是含有β-D-葡萄糖的天然存在多糖，并且存在于某些谷物、酵母、细菌和真菌的细胞壁中。在一些实例中，β-葡聚糖是从谷物中提取的。在特定的实例中，β-葡聚糖是从燕麦(包括普通燕麦(Avena sativa))中提取的。在某些实例中，β-葡聚糖的分子量为约0.5至约1.0×106Da。β-葡聚糖可以是葡萄糖的多糖，并且可以同时包含1,4和1,3β糖苷键。
[0137] 在一些实施方式中，β-葡聚糖提供健康益处，包括但不限于使皮肤光滑，保湿皮肤，刺激成纤维细胞生长和/或胶原蛋白合成，减少瘢痕变色和刺激免疫防御。
[0138] 葡萄籽提取物来自完整葡萄籽，并含有有益的饮食组分。葡萄籽是酿酒厂和葡萄汁行业的废产物。这些籽含有纤维、脂质、蛋白质、碳水化合物，并且取决于品种，通常含有约4％至约8％的多酚(干重)。葡萄籽的商业提取物，包括葡萄(vitis vinifera)的葡萄籽提取物，通常经过标准化，以提供按干重百分比计约70％至约95％的多酚。
[0139] 本文公开的组合物中包括的葡萄籽提取物可以是葡萄(vitis vinifera)的葡萄籽提取物。在一些实例中，葡萄籽提取物的总多酚含量小于约70％，并且在一些实例中，多酚含量小于约50％。在特定的实例中，葡萄籽提取物含有约38％至约50％的多酚，约9％至约12％的纤维，约1％至约2％的蛋白质，约25％至约30％的糖和少于约1％的脂质。
[0140] 在实施方式中，所述组合物包含约0.001％至约1.0％的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物，例如约0.01％至约0.5％的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物，或约0.025％至约0.25％的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物，其中百分比是基于组合物的总重量。在某些实例中，所述组合物包含约0.000001％至约1.0％的β-葡聚糖，例如约0.000005％至约0.1％的β-葡聚糖，或约0.00005％至约0.05％的β-葡聚糖，其中百分比是基于局部组合物的总重量。在一些实例中，所述组合物包含约0.0001％至约1.0％的β-葡聚糖，例如约0.0001％至约0.1％、约0.0005％至约0.1％的β-葡聚糖，或约0.00005％至约0.05％的β-葡聚糖，其中百分比是基于局部组合物的总重量。在其它实例中，所述组合物包含约0.00001％至约0.1％的葡萄籽提取物，例如约0.0001％至约0.05％的葡萄籽提取物，或约0.0002％至约0.01％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的总重量。
[0141] 所述组合物的实施方式可包含约0.001％至约1.0％的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物、0.000001％至约1.0％的β-葡聚糖和约0.00001％至约0.1％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的总重量。举例来说，按组合物的重量计，所述组合物可包含约0.01％至约0.5％的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物，约0.000005％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.0001％至约0.05％的葡萄籽提取物。在其它实例中，按组合物的重量计，所述组合物包含约0.025％至约0.25％的脱色麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00005％至约0.05％的β-葡聚糖和约0.0002％至约0.01％的葡萄籽提取物。
[0142] 所公开的组合物可以包括其它成分。诸如维生素E的维生素已被证明可在局部施用后使皮肤更柔软和更光滑，这可以抵消太阳和其它环境污染物的某些破坏作用。维生素A棕榈酸酯已被证明可以使皮肤更光滑，并有助于增强细胞更新过程。通过将看起来更年轻的皮肤细胞带到表面，这种增强作用可以使皮肤摆脱最外层的死皮。已知具有抗氧化活性的成分，例如维生素C和超氧化物歧化酶，或者被认为是能使皮肤恢复活力的成分，例如百脉根提取物和北五味子果实提取物，也可以包括在本文公开的任何组合物中。
[0143] 本文公开的组合物还可以包括维生素A(视黄醇及其类似物，例如棕榈酸视黄酯)和/或维生素E(生育酚及其类似物，例如生育酚乙酸酯)。在某些实例中，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物还包括有效量的维生素A、维生素E、或者维生素A和E。在某些公开的实施方式中，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物还包括泛醇、维生素C(及其类似物，例如抗坏血酸磷酸镁、抗坏血酸棕榈酸酯等)和/或超氧化物歧化酶，其含量为当施用于皮肤时足以改善皮肤外观。
[0144] 在一些实施方式中，按组合物的重量计，所述组合物包括约0.0001％至约0.5％的维生素A，例如约0.0005％至约0.01％；约0.00001％至约0.1％的维生素C，例如约0.0001％至约0.001％；约0.001％至约1.0％的维生素E，例如约0.01％至约0.1％；约0.0001％至约1.0％的泛醇，例如约0.0005％至约0.05％；约0.00000001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.0000001％至约0.001％；或其任何组合。在包含维生素C、A和/或E的组合物的非限制性实例中，维生素C可以是抗坏血酸磷酸镁的形式；维生素A可以是维生素A棕榈酸酯的形式；并且维生素E可以是维生素E乙酸酯的形式。
[0145] 在用包括百脉根和/或北五味子果实的提取物的组合物制成的组分的非限制性实例中，按组合物的重量计，所述组合物包含约0.01％至约5.0％的百脉根提取物，例如约0.05％至约0.5％。按组合物的重量计，所述组合物可包含约0.001％至约5.0％的北五味子果实提取物，例如约0.01％或约0.3％。在一个实例中，按组合物的重量计，所述组合物包含约0.5％的百脉根提取物和约0.01％的北五味子果实提取物。在另一个实例中，按组合物的重量计，所述组合物包含约0.05％的百脉根提取物和约0.3％的北五味子果实提取物[0146] 在某些实例中，包括泛醇，维生素C、A或E，超氧化物歧化酶，百脉根和/或北五味子果实的提取物的组合物，或者包括泛醇，维生素C、A和E，超氧化物歧化酶，百脉根提取物和北五味子水果提取物的任何组合的组合物，在局部施用于皮肤时可以改善皮肤外观。
[0147] CTFA国际化妆品成分词典和手册(2004年和2008年)公开了可用于本文所公开的组合物和方法中的多种化妆品成分。这些化妆品成分中的任何一种都可以包括在如本文所公开的任何包括脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的组合物中。
[0148] 所公开的组分可以包括香料(人造的和天然的)，染料和颜料成分(例如，蓝色1、蓝色1色淀、红色40、二氧化钛、D&C蓝色4号、D&C绿色5号、D&C橙色4号、D&C红色17号、D&C红色33号、D&C紫色2号、D&C黄色10号和D&C黄色11号和氧化铁)，吸附剂，润滑剂，溶剂，保湿剂(包括例如润肤剂、成膜剂和影响皮肤自然保湿机制的试剂)，拒水剂，紫外线吸收剂(物理和化学吸收剂，如阿伏苯宗、二氧化钛、氧化锌等)，精油，痕量金属(例如，锌、钙和硒)，抗刺激剂(例如类固醇和非类固醇抗炎药)，植物性提取物(例如芦荟、洋甘菊、黄瓜提取物、白果、人参和迷迭香)，抗微生物剂，抗氧化剂(例如生育酚)，螯合剂(例如植酸钠和乙二胺二琥珀酸三钠)，防腐剂(例如苯氧基乙醇、辛二醇和氯苯甘油醚)，pH调节剂(例如氢氧化钠和柠檬酸)，吸收剂(例如辛烯基琥珀酸淀粉铝、高岭土、玉米淀粉、燕麦淀粉、环糊精和沸石)，皮肤漂白剂和美白剂(例如氢醌和烟酰胺乳酸盐)，温润剂(例如丙三醇、山梨糖醇、尿素和甘露糖醇)，去角质剂，防水剂(例如氢氧化镁/铝硬脂酸盐)，皮肤调理剂(例如芦荟提取物、尿囊素、没药醇、神经酰胺、聚二甲基硅氧烷、透明质酸和甘草酸二钾)。下面提供这些成分中的一些的非限制性实例。
[0149] 紫外线吸收剂或防晒剂：防晒剂可包括在本文公开的保湿霜中。仅防晒剂可能无法完全保护皮肤免受紫外线辐射的不利影响。用本文所述的组合物制成的任何皮肤护理组分可另外包括防晒剂和/或紫外线吸收剂。在一些实施方式中，五种组分中的至少一者还包括防晒剂，例如SPF约15-50的防晒剂。在一个实施方式中，日间保湿霜还包含防晒剂，该防晒剂的SPF可以是约20、约25、约30、约35、约40、约45或约50。
[0150] 可以与本发明的组合物组合使用的紫外线吸收剂包括化学和物理防晒乳(sunblock)。可以使用的化学防晒乳的非限制性实例包括水杨酸酯(水杨酸高甲酯、水杨酸苄酯、水杨酸乙二醇酯、水杨酸异丙基苄酯等)，邻氨基苯甲酸酯，尿刊酸乙酯，胡莫柳酯，二苯甲酰甲烷衍生物(例如阿伏苯宗)，奥克立林等。物理防晒乳的非限制性实例包括金属氧化物(例如二氧化钛和氧化锌)。
[0151] 保湿剂：保湿剂可包括在本文公开的洗面奶、爽肤水、精华素或保湿霜中。可以与本文所述的任何组合物和组分一起使用的保湿剂的非限制性实例包括氨基酸，硫酸软骨素，双甘油，赤藓糖醇，果糖，葡萄糖，甘油，丙三醇聚合物，二醇，1,2,6-己三醇，蜂蜜，透明质酸，氢化蜂蜜，氢化淀粉水解产物，肌醇，乳糖醇，麦芽糖醇，麦芽糖，甘露糖醇，天然保湿因子，丙二醇，聚甘油山梨糖醇，吡咯烷酮羧酸盐，PCA钾，葡萄糖醛酸钠，PCA钠，山梨糖醇，蔗糖，海藻糖，尿素和木糖醇。
[0152] 保湿剂的其它实例包括乙酰化羊毛脂，乙酰化羊毛脂醇，丙氨酸，藻类提取物，库拉索芦荟(aloe barbadensis)，库拉索芦荟提取物，库拉索芦荟凝胶，药蜀葵(althea officinalis)提取物，杏(prunus armeniaca)仁油，精氨酸，精氨酸天冬氨酸，山金车菊(arnica montana)提取物，天冬氨酸，鳄梨(persea gratissima)油，屏障鞘脂，丁醇，蜂蜡，山嵛醇，β-谷甾醇，白桦(betula alba)树皮提取物，琉璃苣(borago officinalis)提取物，金雀花(ruscus aculeatus)提取物，丁二醇，金盏花(calendula officinalis)提取物，金盏花油，蜡大戟(小烛树(euphorbia cerifera))蜡，芥花油，辛酸/癸酸甘油三酯，小豆蔻(elettaria cardamomum)油，巴西棕榈(copernicia cerifera)蜡，胡萝卜(daucus carota sativa)油，蓖麻(ricinus communis)油，神经酰胺，地蜡(ceresin)，醋酸十六烷基酯，辛酸十六烷基酯，棕榈酸十六烷基酯，洋甘菊(anthemis nobilis)油，胆固醇，胆固醇酯，胆固醇羟基硬脂酸酯，柠檬酸，鼠尾草(salvia sclarea)油，可可(theobroma cacao)黄油，可可辛酸/癸酸盐，椰子(cocos nucifera)油，胶原蛋白，胶原蛋白氨基酸，玉米(zea mays)油，脂肪酸，癸基葡萄糖，油酸癸酯，二甲聚硅氧烷共聚多元醇，二甲聚硅氧烷醇，己二酸二辛酯，琥珀酸二辛酯，二季戊四醇六辛酸酯/六癸酸酯，DNA，赤藓糖醇，乙氧基二甘醇，亚油酸乙酯，蓝桉(eucalyptus globulus)油，月见草(oenothera biennis)油，脂肪酸，天竺葵(geranium maculatum)油，葡糖胺，谷氨酸葡萄糖，谷氨酸，甘油，丙三醇，二硬脂酸甘油酯，羟基硬脂酸甘油酯，月桂酸甘油酯，亚油酸甘油酯，肉豆蔻酸甘油酯，油酸甘油酯，硬脂酸甘油酯，硬脂酸甘油酯SE，甘氨酸，硬脂酸乙二醇酯，硬脂酸乙二醇酯SE，糖胺聚糖，榛子(美洲榛(corylus americana))坚果油，榛子(欧洲榛(corylus avellana))坚果油，己二醇，透明质酸，杂交红花(carthamus tinctorius)油，氢化蓖麻油，氢化可可甘油酯，氢化椰子油，氢化羊毛脂，氢化卵磷脂，氢化棕榈甘油酯，氢化棕榈仁油，氢化大豆油，氢化牛脂甘油酯，氢化蔬菜油，水解糖胺聚糖，水解大豆蛋白，羟基化羊毛脂，羟脯氨酸，硬脂酸异鲸蜡基酯，异鲸蜡基硬脂酰硬脂酸酯，油酸异癸酯，异硬脂酸异丙酯，羊毛脂酸异丙酯，棕榈酸异丙酯，硬脂酸异丙酯，异硬脂酰胺DEA，异硬脂酸，乳酸异硬脂酯，新戊酸异硬脂酯，茉莉(jasminum officinale)油，荷荷巴(buxuschinensis)油，海草，石栗(aleurites moluccana)坚果油，乳酸酰胺MEA，薰衣草(lavandula angustifolia)油，卵磷脂，柠檬(citrus medica limonum)油，亚油酸，亚麻酸，澳洲坚果(macadamia ternifolia)坚果油，麦芽糖醇，母菊(chamomilla recutita)油，甲基葡萄糖倍半硬脂酸酯，甲基葡糖聚醚-20，甲基硅烷醇PCA，乳酸肉豆蔻酯，肉豆蔻酸肉豆蔻酯，丙酸肉豆蔻酸酯，新戊二醇二辛酸酯/二癸酸酯，辛基十二烷醇，肉豆蔻酸辛基十二烷基酯，辛基十二烷基硬脂酰硬脂酸酯，羟基硬脂酸辛酯，棕榈酸辛酯，水杨酸辛酯，硬脂酸辛酯，油酸，橄榄(olea europaea)油，甜橙(citrus aurantium dulcis)油，棕榈(elaeis guineensis)油，泛酸，泛硫乙胺，泛醇，泛醇乙醚，PCA，桃(prunus persica)仁油，花生(arachis hypogaea)油，十五内酯，薄荷(mentha piperita)油，磷脂，聚氨基糖缩合物，聚甘油-3二异硬脂酸酯，聚甘油-4癸酸酯，聚季铵盐-24，聚山梨酸酯20，聚山梨酸酯40，聚山梨酸酯60，聚山梨酸酯80，聚山梨酸酯85，肉豆蔻酸钾，棕榈酸钾，吡哆醇二棕榈酸酯，视黄醇，视黄基棕榈酸酯，水稻(oryza sativa)麸皮油，RNA，迷迭香(rosmarinus officinalis)油，玫瑰油，红花(carthamus tinctorius)油，鼠尾草(salvia officinalis)油，檀香(santalum album)油，丝氨酸，精华素蛋白，芝麻(sesamum indicum)油，乳木果油(牛油果(butyrospermum parkii))，透明质酸钠，乳酸钠，棕榈酸钠，PCA钠，聚谷氨酸钠，硬脂酰乳酸钠，脱水山梨糖醇月桂酸酯，脱水山梨糖醇油酸酯，脱水山梨糖醇橄榄酸酯，脱水山梨糖醇棕榈酸酯，脱水山梨糖醇倍半油酸酯，脱水山梨糖醇硬脂酸酯，山梨糖醇，大豆(glycine soja)油，鞘脂，角鲨烷，角鲨烯，硬脂酰胺MEA-硬脂酸酯，硬脂酸，硬脂氧基二甲聚硅氧烷，硬脂氧基三甲基硅烷，硬脂醇，硬脂醇甘草亭酸酯，硬脂基庚酸酯，硬脂基硬脂酸酯，向日葵(helianthus annuus)籽油，向日葵籽蜡，甜杏仁(prunus amygdalus dulcis)油，生育酚，生育酚乙酸酯，生育酚亚油酸酯，三山嵛精，新戊酸十三烷基酯，硬脂酸十三烷基酯，三硬脂精，尿素，蔬菜油，水，蜡，小麦(triticum vulgare)胚芽油和依兰(cananga odorata)油。
[0153] 结构剂：任何公开的组合物可包括结构剂。在某些实例中，结构剂有助于向组合物提供流变特性，以有助于组合物的稳定性。在其它实例中，结构剂也可以用作乳化剂或表面活性剂。结构剂的非限制性实例包括硬脂酸、棕榈酸及其混合物。
[0154] 精油：精油可以包括在本文公开的任何组合物中。精油包括源自草药、花卉、树木和其它植物的油。这些油通常以微小的液滴形式存在于植物细胞之间，并且可以通过本领域技术人员已知的几种方法来提取(例如，蒸汽蒸馏、花香提取法(即通过使用脂肪提取)、浸渍、溶剂提取或机械按压)。当这些类型的油暴露在空气中时，它们往往会蒸发(即挥发油)。因此，许多精油是无色的，但是随着老化，它们会氧化并变深。精油不溶于水，并且可溶于醇、醚、不挥发油(植物油)和其它有机溶剂。在精油中发现的典型物理特性包括沸点在约160℃至约240℃之间并且密度在约0.759至约1.096g/mL之间。
[0155] 精油通常由发现该油的植物来命名。举例来说，玫瑰油或薄荷油分别源自玫瑰或薄荷植物。可以使用的精油的非限制性实例包括芝麻油，澳洲坚果油，茶树油，月见草油，西班牙鼠尾草油，西班牙迷迭香油，芫荽油，百里香油，多香果油，玫瑰油，茴香油，香脂油，佛手柑油，玫瑰木油，雪松油，洋甘菊油，鼠尾草油，香鼠尾草油，丁香油，柏树油，桉树油，茴香油，海茴香油，乳香油，天竺葵油，姜油，葡萄柚油，茉莉油，刺柏油，薰衣草油，柠檬油，柠檬草油，白柠檬油，橘子油，马郁兰油，没药油，橙花油，橙油，广藿香油，胡椒油，黑胡椒油，橙叶油，松油，奥图玫瑰油，迷迭香油，檀香油，留兰香油，甘松油，香根草油，冬青油或依兰油。本领域技术人员已知的其它精油也被认为在本公开的上下文中是有用的。
[0156] 增稠剂：增稠剂可包括在本文公开的任何组合物中。增稠剂(包括稠化剂或胶凝剂)包括可以增加组合物粘度的物质。增稠剂包括那些可以增加组合物粘度而基本上不改变组合物中活性成分的功效的增稠剂。增稠剂还可增加本文所述的组合物和组分的稳定性。在本发明的某些方面，增稠剂包括氢化的聚异丁烯或三羟基硬脂精，或两者的混合物。
[0157] 可以在本公开的上下文中使用的额外增稠剂的非限制性实例包括羧酸聚合物、交联的聚丙烯酸酯聚合物、多糖和树胶。羧酸聚合物的实例包括含有一种或多种衍生自丙烯酸、被取代丙烯酸以及这些丙烯酸和被取代丙烯酸的盐和酯的单体的交联化合物，其中交联剂含有两个或更多个碳碳双键并且衍生自多元醇(参见美国专利第5,087,445号；第4,509,949号；第2,798,053号；CTFA国际化妆品成分词典,第四版,1991,第12页和第80页)。市售的羧酸聚合物的实例包括卡波姆，其为与蔗糖或季戊四醇的烯丙基醚交联的丙烯酸的均聚物(例如，来自B.F.Goodrich的Carbopol.TM.900系列)。交联聚丙烯酸酯聚合物的非限制性实例包括阳离子和非离子聚合物。在一个实施方式中，增稠剂包括丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物。在某些实施方式中，增稠剂包括丙烯酸羟乙酯和丙烯酰基二甲基牛磺酸钠的共聚物。实例描述于美国专利第5,100,660号；第4,849,484号；第4,835,206号；第
4,628,078号；第4,599,379号中。
4,628,078号；第4,599,379号中。
[0158] 多糖的非限制性实例包括纤维素，羧甲基羟乙基纤维素，乙酸丙酸纤维素羧酸酯，羟乙基纤维素，羟乙基乙基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，甲基羟乙基纤维素及其混合物。另一个实例是烷基取代的纤维素，其中纤维素聚合物的羟基基团被羟烷基化(优选羟乙基化或羟丙基化)以形成羟烷基化的纤维素，然后其通过醚键被C10-C30直链或支链烷基基团进一步改性。通常，这些聚合物是C10-C30直链或支链醇与羟烷基纤维素的醚。其它有用的多糖包括硬葡聚糖，其包含(1-3)连接的葡萄糖单元的线性链，其中每三个单元具有(1-6)连接的葡萄糖。
[0159] 可以与本文所述的组合物和组分一起使用的树胶的非限制性实例包括阿拉伯胶，琼脂，海藻胶，海藻酸，藻酸铵，支链淀粉，藻酸钙，角叉菜胶钙，肉碱，角叉菜胶，糊精，明胶，结冷胶，瓜尔胶，瓜尔胶羟丙基三甲基氯化铵，锂蒙脱石，透明质酸，水合二氧化硅，羟丙基壳聚糖，羟丙基瓜尔胶，刺梧桐胶，海草，刺槐豆胶，纳豆胶，藻酸钾，角叉菜胶钾，小核菌胶，羧甲基甲基葡聚糖钠，角叉菜胶钠，黄芪胶，黄原胶及其混合物。
[0160] 防腐剂：任何公开的组分都可以包括防腐剂。可以在本公开内容的上下文中使用的防腐剂的非限制性实例包括苯氧乙醇、氯苯甘醚、辛二醇或其组合。
[0161] 皮肤增白剂：任何公开的组分都可以包括皮肤增白剂。可以用于本发明的上下文中的皮肤增白剂的非限制性实例包括甘草酸二钾、抗坏血酸葡糖苷、烟酰胺、甘草提取物或其组合。
[0162] 药物成分：尽管在一些实施方式中所公开的组分不包括药物活性剂，但是任何所公开的组分都可以包括药物活性剂。药物活性剂的非限制性实例包括抗痤疮剂，用于治疗酒渣鼻的药剂，镇痛药，麻醉剂，抗组胺药，抗炎药(包括非类固醇抗炎药)，抗生素，抗真菌药，抗病毒药，抗微生物药，抗癌活性物质，杀疥螨药，抗虱剂，抗肿瘤药，止汗药，止痒药，抗银屑病药，抗脂溢性药，生物活性蛋白和肽，烧伤治疗剂，烧灼剂，脱色剂，脱毛剂，尿布疹治疗剂，酶，毛发生长刺激剂，毛发生长阻滞剂(包括DFMO及其盐和类似物)，止血剂，角蛋白水解剂，溃疡疮治疗剂，唇疱疹治疗剂，牙齿和牙周治疗剂，光敏活性物质，皮肤保护剂/屏障剂，类固醇(包括激素和皮质类固醇)，晒伤治疗剂，防晒剂，透皮活性物质，鼻用活性物质，疣治疗剂，伤口处理剂和伤口愈合剂。
[0163] III.制剂
[0164] 可以将具有降低缩合鞣质含量的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物掺入到各种皮肤护理产品中，例如油性洗面奶、精华素浓缩液、日间保湿霜、净肤爽肤水和夜间肌肤更新保湿霜。这些中的每一个都可以在分开的容器中提供。所述皮肤护理产品可以组合使用，当施用于皮肤表面时，其可以减少某些衰老皮肤迹象并改善皮肤外观。在一个非限制性实例中，皮肤表面是面部皮肤表面。
[0165] 可以将这些组合物掺入到所有类型的化妆品和皮肤病学上可接受的媒介物中。合适的媒介物的非限制性实例包括乳液(例如，油包水、水包油包水、水包油、水包硅油、硅油包水，油包水包油，硅油包水包油乳液)，乳膏，洗液，溶液(水性和水-醇性)，无水基质(例如口红和粉剂)，凝胶剂和软膏。可以包括其它成分，例如但不限于阳离子表面活性剂、闭塞剂、温润剂、或含硅油的化合物或其任何组合。示例性的其它成分如上所述。
[0166] 包括脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物还可以包含芳香剂、防腐剂、染料、柔软剂和物理反射剂，以及可能在化妆品上或其它方面需要存在的任何其它类别的材料。所述组合物可以是液体、凝胶或半固体形式。成分类型和数量的选择取决于组合物的性质，即凝胶或半固体，并且在化妆品化学家的能力范围内。举例来说，相比于液体组合物，在本发明的半固体组合物中掺入更大量的油或蜡。
[0167] 也考虑将试剂盒用于本公开的某些方面。例如，试剂盒中可以包括包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物。试剂盒可以包括一个或多个容器，每个容器都包括一个组合的组分。容器可以包括瓶子，金属管，层压管，塑料管，分配器，加压容器，阻隔容器，包装，隔间，口红容器，紧凑型容器，可以容纳化妆品组合物的化妆品盘，或其它类型的容器，例如注射或吹塑塑料容器，其中装有分散液或组合物或所需的瓶子、分配器或包装。试剂盒和/或容器的表面可以包括标记。所述标记例如可以是词语、短语、缩写、图片或符号。
[0168] 容器可以分配预定量的本文所述的任何组合物或组分。在其它实施方式中，可以挤压容器(例如，金属、层压板或塑料管)以分配期望量的组合物。在某些实施方式中，所述容器可以包含浸入组合物中并用于向皮肤施用单位剂量的织物垫，例如棉垫(例如，爽肤水垫)。所述组合物可以喷雾剂、气雾剂、液体、流体或半固体形式分配。容器可以具有喷雾、泵送或挤压机构。试剂盒还可以包括使用试剂盒组分的说明以及容器中包括的任何其它组合物的用法。说明可以包括有关如何施用、使用和维护组合物的解释。包装插页通常包括化妆品产品的商业包装中通常包括的说明，所述说明包含关于使用的适应症、用法、剂量、施用、禁忌症和/或警告的信息。指导材料可为书面的、电子形式(例如计算机光盘或压缩光盘)，也可以是可视的(例如视频文件)。
[0169] A.洗面奶
[0170] 洗面奶组合物是一种皮肤护理产品，其被施用于皮肤以去除皮肤表面的化妆品、死皮细胞、油脂、污垢和其它松散物质。洗面奶可以是液体、凝胶或半固体形式。在一个实例中，洗面奶被配制成凝胶，其在与皮肤接触时会液化。洗面奶组合物可以包括水和清洁剂，其可以疏通毛孔并去除油脂。清洁剂，也称为表面活性剂，可以是阴离子、阳离子、非离子或两性离子的。洗面奶还可以包括发泡剂、pH平衡剂和其它药学上可接受的载体。
[0171] 洗面奶组合物可以例如包括水、甘油、表面活性剂、聚合物、防腐剂和香料。在一些实施方式中，洗面奶是按洗面奶组合物的重量计包括约50％至约90％水，例如约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约80％或约85％水的组合物。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包括约1％至约10％的表面活性剂，例如约2％至约8％，例如约
2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在一个实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括约1％至约25％的保湿剂，例如约1％、约5％、约10％、约15％、约20％或约25％的保湿剂。在其它实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括约1％至约5％的乳化剂，例如约1％、约2％、约3％、约4％或约5％的乳化剂。在其它实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括至多约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.5％、约0.8％或约
1％。
2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在一个实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括约1％至约25％的保湿剂，例如约1％、约5％、约10％、约15％、约20％或约25％的保湿剂。在其它实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括约1％至约5％的乳化剂，例如约1％、约2％、约3％、约4％或约5％的乳化剂。在其它实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括至多约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.5％、约0.8％或约
1％。
[0172] 在某些实施方式中，按洗面奶组合物的重量计，洗面奶组合物包含约60％至约80％的水，例如约60％、约65％、约70％、约75％或约80％。在一个实施方式中，洗面奶包含约1％至约10％的癸基葡萄糖，例如约1％、约3％、约5％、约7％或约10％。在某些实施方式中，洗面奶包含约5％至约15％的甘油，例如约5％、约7％、约10％、约12％或约15％。在其它实施方式中，洗面奶包含约1％至约10％的甲基葡糖醇聚醚-20，例如约1％、约3％、约5％、约7％或约10％。在一些实施方式中，洗面奶包含约1％至约5％的聚甘油-4癸酸酯，例如约
1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，洗面奶包含约0.1％至约1％的丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
在进一步的实施方式中，洗面奶包含约0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约
0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，洗面奶包含约0.1％至约1％的防腐剂，例如约
0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。所述成分可以组合形式包括。
1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，洗面奶包含约0.1％至约1％的丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
在进一步的实施方式中，洗面奶包含约0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约
0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，洗面奶包含约0.1％至约1％的防腐剂，例如约
0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。所述成分可以组合形式包括。
[0173] 在一些实例中，洗面奶组合物包含约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.00001％至约0.1％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。举例来说，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00001％至约0.01％的β-葡聚糖和约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00005％的β-葡聚糖和约0.0005％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，洗面奶是包含约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.00001％至约
0.1％的葡萄籽提取物的组合物，其中百分比是基于组合物的重量。
0.1％的葡萄籽提取物的组合物，其中百分比是基于组合物的重量。
[0174] 洗面奶组合物中使用的葡萄籽提取物可以是水性葡萄籽提取物。在一个实施方式中，在洗面奶组合物中使用的β-葡聚糖是水溶液。
[0175] 本文公开的洗面奶组合物还可以包括维生素A。维生素A可以视黄醇及其类似物如棕榈酸视黄酯的形式存在。举例来说，洗面奶组合物包含约0.00005％至约1.0％的维生素A，例如约0.0001％至约0.01％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.0005％的维生素A。
[0176] 本文公开的洗面奶组合物还可以包括维生素E。维生素E可以生育酚及其类似物例如生育酚乙酸酯的形式存在。举例来说，洗面奶组合物包含约0.001％至约1.0％的维生素E，例如约0.005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.01％的维生素E。
[0177] 本文公开的洗面奶组合物还可以包括维生素C。维生素C可以抗坏血酸盐及其类似物如抗坏血酸磷酸镁和抗坏血酸棕榈酸酯的形式存在。举例来说，洗面奶组合物包含约0.00001％至约0.1％的维生素C，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.0001％的维生素C。
[0178] 本文公开的洗面奶组合物还可以包括泛醇。举例来说，洗面奶组合物包含约0.0001％至约1.0％的泛醇，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.001％的泛醇。在一些实施方式中，洗面奶组合物包含约
0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.002％至约0.05％。
0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.002％至约0.05％。
[0179] 本文公开的洗面奶组合物可另外包括超氧化物歧化酶。举例来说，洗面奶组合物包含约0.00000001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.0000005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.0000001％的超氧化物歧化酶。在一些实施方式中，洗面奶组合物包含约0.00001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约
0.00005％至约0.01％。
0.00005％至约0.01％。
[0180] 在某些实例中，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的洗面奶组合物还包括有效量的维生素A、维生素E、泛醇、维生素C或超氧化物歧化酶中的至少一种，当局部施用于皮肤时，其含量足以改善皮肤外观。在一个实例中，洗面奶组合物包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素E、泛醇、维生素C和超氧化物歧化酶。
[0181] 在所公开的包含五种组分的组合的其它实施方式中，按洗面奶组合物的重量计，洗面奶组合物包含约0.01％至约0.05％或约0.02％至约0.04％，例如约0.02％、约0.025％、约0.03％、约0.035％或约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物。在更多实施方式中，洗面奶组合物包含约0.00001重量％至约0.0001重量％或约0.00002重量％至约
0.00009重量％，例如约0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％、约0.00005重量％、约0.00006重量％、约0.00007重量％、约0.00008重量％或约0.00009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，洗面奶组合物包含约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约0.0009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％、约0.005重量％、约0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在一个实施方式中，洗面奶组合物包含约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.0001重量％至约0.1重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约
0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的维生素A。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.00005重量％至约0.01重量％或约
0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.005重量％至约0.1重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素E。在一些实施方式中，洗面奶组合物包含约0.0002重量％至约0.05重量％或约0.0009重量％至约0.005重量％，例如约0.0009重量％、约0.001重量％、约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％或约0.005重量％的泛醇。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.00000005重量％至约0.00001重量％或约0.00000009重量％至约0.0000005重量％，例如约0.00000009重量％、约0.0000001重量％、约0.0000002重量％、约0.0000003重量％、约0.0000004重量％或约0.0000005重量％的超氧化物歧化酶。所述成分可以组合形式包括。因此，洗面奶组合物可包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇和超氧化物歧化酶。这种洗面奶组合物可以与爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、精华素组合物和/或夜间保湿霜组合物结合使用。
0.00009重量％，例如约0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％、约0.00005重量％、约0.00006重量％、约0.00007重量％、约0.00008重量％或约0.00009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，洗面奶组合物包含约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约0.0009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％、约0.005重量％、约0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在一个实施方式中，洗面奶组合物包含约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.0001重量％至约0.1重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约
0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的维生素A。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.00005重量％至约0.01重量％或约
0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.005重量％至约0.1重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素E。在一些实施方式中，洗面奶组合物包含约0.0002重量％至约0.05重量％或约0.0009重量％至约0.005重量％，例如约0.0009重量％、约0.001重量％、约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％或约0.005重量％的泛醇。在其它实施方式中，洗面奶组合物包含约0.00000005重量％至约0.00001重量％或约0.00000009重量％至约0.0000005重量％，例如约0.00000009重量％、约0.0000001重量％、约0.0000002重量％、约0.0000003重量％、约0.0000004重量％或约0.0000005重量％的超氧化物歧化酶。所述成分可以组合形式包括。因此，洗面奶组合物可包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇和超氧化物歧化酶。这种洗面奶组合物可以与爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、精华素组合物和/或夜间保湿霜组合物结合使用。
[0182] B.爽肤水
[0183] 爽肤水组合物是一种皮肤护理产品，其可施用于皮肤以清洁皮肤并缩小毛孔大小，还可以恢复皮肤的pH平衡。爽肤水组合物可以是液体或凝胶的形式。在一个实例中，将爽肤水组合物配制成吸收到棉垫中的液体，以易于施用于皮肤。爽肤水组合物可包括水和温润剂，以及醇(例如乙醇)，防腐剂，收敛剂，肥皂，脂质或表面活性剂，以及其它药学上可接受的载体。收敛剂可以收缩皮肤组织，导致毛孔大小缩小，但是也会引起皮肤干燥。可以包括肥皂、脂质和表面活性剂，因为它们具有清洁皮肤表面的能力。
[0184] 爽肤水组合物可以例如包括水、表面活性剂、保湿剂、醇、香料和防腐剂。在一些实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括约60％至约99％的水，例如约60％、约70％、约80％、约90％、约95％或约99％。在某些实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括至多约1％的表面活性剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约
0.8％或约1％。在一个实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括约1％至约10％的保湿剂，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在其它实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水包括至多约5％的醇，例如约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括至多约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
0.8％或约1％。在一个实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括约1％至约10％的保湿剂，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在其它实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水包括至多约5％的醇，例如约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括至多约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
[0185] 在某些实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括约80％至约99％的水，例如约80％、约85％、约90％、约95％或约99％。在一个实施方式中，爽肤水组合物包括约1％至约10％的甘油，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在某些实施方式中，爽肤水组合物包括约0.1％至约5％的醇，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.1％至约1％的聚山梨醇酯20，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约
0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在另一个实施方式中，爽肤水组合物包括约0.1％至约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约
0.8％或约1％。所述成分可以组合形式包括。
0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在另一个实施方式中，爽肤水组合物包括约0.1％至约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约
0.8％或约1％。所述成分可以组合形式包括。
[0186] 在一些实例中，爽肤水组合物包括约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。举例来说，按组合物的重量计，爽肤水组合物包括约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00001％至约0.01％的β-葡聚糖和约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。在某些实施方式中，按组合物的重量计，爽肤水组合物包括约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00005％的β-葡聚糖和约0.0005％的葡萄籽提取物。在一个实施方式中，爽肤水组合物包括约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.00001％至约
0.01％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。
0.01％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。
[0187] 爽肤水组合物中使用的葡萄籽提取物可以是葡萄籽提取物的水溶液。在一个实施方式中，用于爽肤水组合物中的β-葡聚糖是水溶液。
[0188] 本文公开的爽肤水组合物还可以包括维生素A。维生素A可以视黄醇及其类似物如棕榈酸视黄酯的形式存在。举例来说，爽肤水组合物包含约0.00005％至约1.0％的维生素A，例如约0.0001％至约0.01％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，爽肤水组合物包含约0.0005％的维生素A。
[0189] 本文公开的爽肤水组合物还可以包括维生素E。维生素E可以生育酚及其类似物如生育酚乙酸酯的形式存在。举例来说，爽肤水组合物包含约0.001％至约1.0％的维生素E，例如约0.005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，爽肤水组合物包含约0.01％的维生素E。
[0190] 本文公开的爽肤水组合物还可以包括维生素C。维生素C可以抗坏血酸盐及其类似物如抗坏血酸磷酸镁和抗坏血酸棕榈酸酯的形式存在。举例来说，爽肤水组合物包含约0.00001％至约0.1％的维生素C，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，爽肤水组合物包含约0.0001％的维生素C。
[0191] 本文公开的爽肤水组合物还可以包括泛醇。举例来说，爽肤水组合物包含约0.0001％至约1.0％的泛醇，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，爽肤水组合物包含约0.001％的泛醇。在一个实施方式中，爽肤水组合物包含约
0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.005％至约0.05％。
0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.005％至约0.05％。
[0192] 本文公开的爽肤水组合物可以另外包括超氧化物歧化酶。举例来说，爽肤水组合物包含约0.0000001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.000005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，爽肤水组合物包含约0.000001％的超氧化物歧化酶。在一个实施方式中，爽肤水组合物包含约0.00001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.00005％至约0.01％。
[0193] 在某些实例中，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的爽肤水组合物还包括有效量的维生素A、维生素E、泛醇、维生素C或超氧化物歧化酶中的至少一种，当局部施用于皮肤时，其含量足以改善皮肤外观。在一个实例中，爽肤水组合物包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素E、泛醇、维生素C和超氧化物歧化酶。
[0194] 在包含五种组分的组合的其它实施方式中，按爽肤水组合物的重量计，爽肤水组合物包括约0.01％至约0.05％或约0.02％至约0.04％，例如约0.02％、约0.025％、约0.03％、约0.035％或0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物。在更多实施方式中，爽肤水组合物包括约0.00001重量％至约0.0001重量％或约0.00002重量％至约0.00009重量％，例如约0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％、约0.00005重量％、约
0.00006重量％、约0.00007重量％、约0.00008重量％或约0.00009重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约
0.009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％、约0.005重量％、约
0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约
0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.0001重量％至约0.1重量％或约0.0002重量％至约
0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或0.0009重量％的维生素A。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约
0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在更多的实施方式中，爽肤水组合物包括约0.005重量％至约0.1重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素E。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.0002重量％至约0.05重量％或约0.0009重量％至约0.005重量％，例如约0.0009重量％、约0.001重量％、约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％或约0.005重量％的泛醇。在一些实施方式中，爽肤水组合物包括约
0.0000005重量％至约0.0001重量％或约0.0000009重量％至约0.000005重量％，例如约
0.0000009重量％、约0.000001重量％、约0.000002重量％、约0.000003重量％、约0.000004重量％或约0.000005重量％的超氧化物歧化酶。所述成分可以组合形式包括。因此，爽肤水组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇和超氧化物歧化酶。这种爽肤水可以与洗面奶、日间保湿霜、精华素和/或夜间保湿霜结合使用。
0.00006重量％、约0.00007重量％、约0.00008重量％或约0.00009重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约
0.009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％、约0.005重量％、约
0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约
0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.0001重量％至约0.1重量％或约0.0002重量％至约
0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或0.0009重量％的维生素A。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约
0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在更多的实施方式中，爽肤水组合物包括约0.005重量％至约0.1重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素E。在其它实施方式中，爽肤水组合物包括约0.0002重量％至约0.05重量％或约0.0009重量％至约0.005重量％，例如约0.0009重量％、约0.001重量％、约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％或约0.005重量％的泛醇。在一些实施方式中，爽肤水组合物包括约
0.0000005重量％至约0.0001重量％或约0.0000009重量％至约0.000005重量％，例如约
0.0000009重量％、约0.000001重量％、约0.000002重量％、约0.000003重量％、约0.000004重量％或约0.000005重量％的超氧化物歧化酶。所述成分可以组合形式包括。因此，爽肤水组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇和超氧化物歧化酶。这种爽肤水可以与洗面奶、日间保湿霜、精华素和/或夜间保湿霜结合使用。
[0195] C.日间保湿霜
[0196] 保湿霜组合物是一种皮肤护理产品，其施用于皮肤以向皮肤的外层增加水分，其中还可以包含其它成分，例如防晒剂和/或温润剂。保湿霜组合物可以是日间保湿霜，其中包含防晒剂。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包含SPF为约15至约50的防晒剂，例如SPF为约15、约20、约25、约30、约35、约40、约45或约50的防晒剂。在某些非限制性实例中，日间保湿霜组合物包含SPF为约50的防晒剂。
[0197] 保湿霜可以通过多达三种一般方式作用于皮肤：通过在皮肤表面形成薄膜以减少皮肤中已经存在的水分流失，通过吸引空气中的水蒸气来增加皮肤中的水分，或通过向皮肤表面添加保湿因子。保湿霜组合物可以是液体、凝胶或半固体形式。在一个实例中，保湿霜组合物被配制成乳液。皮肤保湿霜可以使皮肤更柔软和更有弹性。保湿霜组合物可以包括温润剂、脂质、油、表面活性剂和药学上可接受的载体。温润剂可以通过减少水分流失以及将周围的水分吸引到皮肤上来增加皮肤的水分含量。甘油、尿素和胶原蛋白是可以掺入到保湿霜组合物中的温润剂。
[0198] 在某些实例中，日间保湿霜组合物包括水、保湿剂、防晒剂、皮肤调理剂、增稠剂、防腐剂和香料。在一些实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约30％至约70％的水，例如约30％、约40％、约50％、约60％或约70％。在某些实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约0.1％至约30％的防晒剂，例如约0.1％、约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％或约30％。在一个实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约1％至约20％的保湿剂，例如约1％、约
5％、约10％、约15％或约20％。在其它实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约0.1％至约6％的增稠剂，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％、约
4％、约5％或约6％。在一个实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括至多约8％的皮肤调理剂，例如约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约
7％或约8％。在其它实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括至多约2％的防腐剂，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约1.5％或约2％。在一个实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约
0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
5％、约10％、约15％或约20％。在其它实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约0.1％至约6％的增稠剂，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％、约
4％、约5％或约6％。在一个实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括至多约8％的皮肤调理剂，例如约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约
7％或约8％。在其它实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括至多约2％的防腐剂，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约1.5％或约2％。在一个实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约
0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
[0199] 在某些实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约40％至约60％的水，例如约40％、约45％、约50％、约55％或约60％。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包含约1％至约10％的甘油，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在某些实施方式中，日间保湿霜组合物包含约5％至约10％的胡莫柳酯，例如约5％、约6％、约
7％、约8％、约9％或约10％。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包含约1％至约8％的脱水山梨糖醇橄榄油酸酯，例如约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在一些实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.1％至约5％的二氧化硅，例如约0.1％、约
0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包含约
0.1％至约1％的黄原胶，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在另外的实施方式中，日间保湿霜组合物包含约5％至约15％的奥克立林，例如约5％、约8％、约10％、约
12％或约15％。在某些实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.1％至约5％的阿伏苯宗，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.1％至约8％的聚二甲基硅氧烷，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约
3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包含约
0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，日间保湿霜包含约0.5％至约2％的防腐剂，例如约0.5％、约0.8％、约1％、约1.5％或约
2％。所述成分可以组合形式包括。
7％、约8％、约9％或约10％。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包含约1％至约8％的脱水山梨糖醇橄榄油酸酯，例如约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在一些实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.1％至约5％的二氧化硅，例如约0.1％、约
0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包含约
0.1％至约1％的黄原胶，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在另外的实施方式中，日间保湿霜组合物包含约5％至约15％的奥克立林，例如约5％、约8％、约10％、约
12％或约15％。在某些实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.1％至约5％的阿伏苯宗，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％或约5％。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.1％至约8％的聚二甲基硅氧烷，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约
3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包含约
0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，日间保湿霜包含约0.5％至约2％的防腐剂，例如约0.5％、约0.8％、约1％、约1.5％或约
2％。所述成分可以组合形式包括。
[0200] 在一些实例中，日间保湿霜组合物包括约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。举例来说，按组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.001％至约0.01％的β-葡聚糖和约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。在某些实施方式中，按组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.005％的β-葡聚糖和约0.0002％的葡萄籽提取物。
[0201] 日间保湿霜组合物中使用的葡萄籽提取物可以是葡萄籽提取物的水溶液。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物中使用的β-葡聚糖是水溶液。
[0202] 本文公开的日间保湿霜组合物还可以包括维生素E。维生素E可以生育酚及其类似物如生育酚乙酸酯的形式存在。举例来说，日间保湿霜组合物包含约0.001％至约1.0％的维生素E，例如约0.005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，日间保湿霜组合物包含约0.01％的维生素E。
[0203] 本文公开的日间保湿霜组合物还可以包括维生素C。维生素C可以抗坏血酸盐及其类似物如抗坏血酸磷酸镁和抗坏血酸棕榈酸酯的形式存在。举例来说，日间保湿霜组合物包含约0.00001％至约0.1％的维生素C，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，日间保湿霜组合物包含约0.0002％的维生素C。
[0204] 本文公开的日间保湿霜组合物还可以包括泛醇。举例来说，日间保湿霜组合物包含约0.0001％至约1.0％的泛醇，例如约0.0002％至约0.01％。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包含约0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.002％至约0.5％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，日间保湿霜组合物包含约0.0005％的泛醇。
[0205] 本文公开的日间保湿霜组合物可以另外包括超氧化物歧化酶。举例来说，日间保湿霜组合物包含约0.00001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，日间保湿霜组合物包含约0.0002％的超氧化物歧化酶。
[0206] 在某些实例中，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的日间保湿霜组合物还包括有效量的维生素E、泛醇、维生素C或超氧化物歧化酶中的至少一种，当局部施用于皮肤时，其含量足以改善皮肤外观。在一个实例中，日间保湿霜组合物包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素E、泛醇、维生素C和超氧化物歧化酶。
[0207] 在所公开的包含五种组分的组合的一些实施方式中，按日间保湿霜组合物的重量计，日间保湿霜组合物包括约0.01％至约0.05％或约0.02％至约0.04％，例如约0.02％、约0.025％、约0.03％、约0.035％或约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物。在某些实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约
0.009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％、约0.005重量％、约
0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约
0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的葡萄籽提取物。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约
0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.005重量％至约0.1重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约
0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素E。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.0002重量％至约0.05重量％或约0.0003重量％至约0.0007重量％，例如约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％或约0.0007重量％的泛醇。在另外的实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约
0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约
0.0005重量％的超氧化物歧化酶。所述成分可以组合形式包括。因此，日间保湿霜组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素C、维生素E、泛醇和超氧化物歧化酶。这种日间保湿霜可以与洗面奶、爽肤水、精华素和/或夜间保湿霜结合使用。
0.009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％、约0.005重量％、约
0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约
0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的葡萄籽提取物。在一个实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约
0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.005重量％至约0.1重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约
0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素E。在其它实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.0002重量％至约0.05重量％或约0.0003重量％至约0.0007重量％，例如约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％或约0.0007重量％的泛醇。在另外的实施方式中，日间保湿霜组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约
0.00009重量％、约0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约
0.0005重量％的超氧化物歧化酶。所述成分可以组合形式包括。因此，日间保湿霜组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素C、维生素E、泛醇和超氧化物歧化酶。这种日间保湿霜可以与洗面奶、爽肤水、精华素和/或夜间保湿霜结合使用。
[0208] D.夜间保湿霜
[0209] 夜间保湿霜组合物是一种保湿剂组合物，其施用于皮肤以提供保护皮肤表面的屏障，可以作为向皮肤局部递送其它成分的媒介物，但不含化学防晒剂。夜间保湿霜组合物可以是液体、凝胶或半固体形式。在一个实例中，所述夜间保湿霜组合物被配制成油和水的半固体乳液。夜间保湿霜组合物与本文所述的日间保湿霜组分的不同之处在于，夜间保湿霜组合物例如不能通过包含防晒剂来提供防晒作用，并且被设计成将抗衰老成分如维生素A注入到皮肤表面深处。保湿剂组合物(包括夜间保湿霜组合物)可以使皮肤更柔软，以及形成屏障以保持皮肤中的水分。夜间保湿霜组合物可以包括温润剂、脂质、油、表面活性剂和药学上可接受的载体。使用夜间保湿霜组合物可以抵消由于频繁和/或苛刻的清洁而引起的皮肤干燥。夜间保湿霜组合物也可能含有甘油、乳化剂和防腐剂。
[0210] 在某些实例中，夜间保湿霜组合物包括水、保湿剂、pH调节剂、皮肤调理剂、增稠剂、防腐剂和香料。在一些实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约40％至约95％的水，例如约40％、约50％、约60％、约70％、约80％、约90％或约95％。在某些实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约
45％的保湿剂，例如约0.1％、约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约
35％、约40％或约45％。在一个实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的pH调节剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
在其它实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约
1％的增稠剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约1％至约8％的皮肤调理剂。在其它实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括至多约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约
0.8％或约1％。
45％的保湿剂，例如约0.1％、约1％、约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约
35％、约40％或约45％。在一个实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的pH调节剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
在其它实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约
1％的增稠剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约1％至约8％的皮肤调理剂。在其它实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括至多约1％的防腐剂，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在一个实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约
0.8％或约1％。
[0211] 在某些实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约50％至约85％的水，例如约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％或约
85％。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约5％至约15％的甘油，例如约5％、约
10％或约15％。在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约10％的乳木果油，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约8％的聚二甲基硅氧烷，例如约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。
在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的氢氧化钠，例如约0.1％、约
0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约
10％的硬脂酰乳酸钠，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在另外的实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约8％的辛酸/癸酸甘油三酯，例如约1％、约2％、约3％、约
4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约
2％的葵花籽蜡，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％、约1.0％、约1.5％或约2％。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在进一步的实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的防腐剂，例如约
0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。所述成分可以组合形式包括。
85％。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约5％至约15％的甘油，例如约5％、约
10％或约15％。在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约10％的乳木果油，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约8％的聚二甲基硅氧烷，例如约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％或约8％。
在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的氢氧化钠，例如约0.1％、约
0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约
10％的硬脂酰乳酸钠，例如约1％、约3％、约5％、约8％或约10％。在另外的实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约1％至约8％的辛酸/癸酸甘油三酯，例如约1％、约2％、约3％、约
4％、约5％、约6％、约7％或约8％。在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约
2％的葵花籽蜡，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％、约1.0％、约1.5％或约2％。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在进一步的实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.1％至约1％的防腐剂，例如约
0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。所述成分可以组合形式包括。
[0212] 在一些实例中，夜间保湿霜组合物包括约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。举例来说，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00001％至约0.01％的β-葡聚糖和约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。在某些实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00005％的β-葡聚糖和约0.0005％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.005％的β-葡聚糖和约0.0005％的葡萄籽提取物。
[0213] 夜间保湿霜组合物中使用的葡萄籽提取物可以是葡萄籽提取物的水溶液。在一个实施方式中，在夜间保湿霜组合物中使用的β-葡聚糖是水溶液。
[0214] 本文公开的夜间保湿霜组合物包括维生素A。维生素A可以视黄醇及其类似物例如棕榈酸视黄酯的形式存在。举例来说，夜间保湿霜组合物包含约0.00005％至约1.0％的维生素A，例如约0.0001％至约0.01％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.0005％的维生素A。
[0215] 本文公开的夜间保湿霜组合物还可以包括维生素E。维生素E可以生育酚及其类似物如生育酚乙酸酯的形式存在。举例来说，夜间保湿霜组合物包含约0.001％至约1.0％的维生素E，例如约0.01％至约0.5％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.1％的维生素E。
[0216] 本文公开的夜间保湿霜组合物还可以包括维生素C。维生素C可以抗坏血酸盐及其类似物如抗坏血酸磷酸镁和抗坏血酸棕榈酸酯的形式存在。举例来说，夜间保湿霜组合物包含约0.00001％至约0.1％的维生素C，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.0001％的维生素C。
[0217] 本文公开的夜间保湿霜组合物还可以包括泛醇。举例来说，夜间保湿霜组合物包含约0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.01％的泛醇。
[0218] 本文公开的夜间保湿霜组合物可以另外包括超氧化物歧化酶。举例来说，夜间保湿霜组合物包含约0.0000001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.000005％至约0.05％。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包含约0.00001％至约0.1％的超氧化物歧化酶，例如约0.0005％至约0.05％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.000001％的超氧化物歧化酶。
[0219] 本文公开的夜间保湿霜组合物还可以包括北五味子果实的提取物。举例来说，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.001％至约5.0％的北五味子果实提取物。在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包含约0.3％的北五味子果实提取物。
[0220] 在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物还包括百脉根的提取物。举例来说，按组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包含约0.001％至约0.5％的百脉根提取物。在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包含约0.01％至约0.1％，例如约0.05％的百脉根提取物。在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包含约0.3％的北五味子果实提取物和约0.05％的百脉根提取物。
[0221] 在某些实例中，包括脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的夜间保湿霜组合物还包括有效量的维生素A、维生素E、泛醇、维生素C、超氧化物歧化酶、北五味子果实提取物或百脉根提取物中的至少一种，当局部施用于皮肤时，其含量足以改善皮肤外观。在一个实例中，夜间保湿霜组合物包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素E、泛醇、维生素C、超氧化物歧化酶、北五味子果实提取物和百脉根提取物。
[0222] 在所公开的包含五种组分的皮肤护理方案的另一实施方式中，按夜间保湿霜组合物的重量计，夜间保湿霜组合物包括约0.01％至约0.05％或约0.02％至约0.04％，例如约0.02％、约0.025％、约0.03％、约0.035％或约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物。
在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.00001重量％至约0.0001重量％或约
0.00002重量％至约0.00009重量％，例如约0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％、约0.00005重量％、约0.00006重量％、约0.00007重量％、约0.00008重量％或约
0.00009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约0.009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约
0.004重量％、约0.005重量％、约0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约
0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约
0.0009重量％的葡萄籽提取物。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.0001重量％至约0.1重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的维生素A。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约
0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.05重量％至约0.5重量％或约0.09重量％至约0.25重量％，例如约0.09重量％、约0.095重量％、约0.1重量％、约0.15重量％、约0.2重量％或约0.25重量％的维生素E。在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约
0.002重量％至约0.5重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约
0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的泛醇。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.0000005重量％至约0.0001重量％或约0.0000009重量％至约0.000005重量％，例如约0.0000009重量％、约0.000001重量％、约0.000002重量％、约0.000003重量％、约0.000004重量％或约0.000005重量％的超氧化物歧化酶。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约1重量％或约0.1重量％至约0.5重量％，例如约0.1重量％、约0.2重量％、约0.3重量％、约0.4重量％或约0.5重量％的北五味子果实提取物。在某些其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约1重量％或约0.01重量％至约0.05重量％，例如约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的百脉根提取物。所述成分可以组合形式包括。因此，夜间保湿霜组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇、超氧化物歧化酶、北五味子提取物和百脉根提取物。
这种夜间保湿霜组合物可以与洗面奶、爽肤水、精华素和/或日间保湿霜结合使用。
在某些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.00001重量％至约0.0001重量％或约
0.00002重量％至约0.00009重量％，例如约0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％、约0.00005重量％、约0.00006重量％、约0.00007重量％、约0.00008重量％或约
0.00009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约0.01重量％或约0.002重量％至约0.009重量％，例如约0.002重量％、约0.003重量％、约
0.004重量％、约0.005重量％、约0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％或约0.009重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约
0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约
0.0009重量％的葡萄籽提取物。在一个实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.0001重量％至约0.1重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的维生素A。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.00005重量％至约0.01重量％或约0.00009重量％至约0.0005重量％，例如约0.00009重量％、约
0.0001重量％、约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％或约0.0005重量％的维生素C。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.05重量％至约0.5重量％或约0.09重量％至约0.25重量％，例如约0.09重量％、约0.095重量％、约0.1重量％、约0.15重量％、约0.2重量％或约0.25重量％的维生素E。在一些实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约
0.002重量％至约0.5重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约
0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的泛醇。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.0000005重量％至约0.0001重量％或约0.0000009重量％至约0.000005重量％，例如约0.0000009重量％、约0.000001重量％、约0.000002重量％、约0.000003重量％、约0.000004重量％或约0.000005重量％的超氧化物歧化酶。在其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约1重量％或约0.1重量％至约0.5重量％，例如约0.1重量％、约0.2重量％、约0.3重量％、约0.4重量％或约0.5重量％的北五味子果实提取物。在某些其它实施方式中，夜间保湿霜组合物包括约0.001重量％至约1重量％或约0.01重量％至约0.05重量％，例如约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的百脉根提取物。所述成分可以组合形式包括。因此，夜间保湿霜组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇、超氧化物歧化酶、北五味子提取物和百脉根提取物。
这种夜间保湿霜组合物可以与洗面奶、爽肤水、精华素和/或日间保湿霜结合使用。
[0223] E.精华素
[0224] 精华素组合物是一种皮肤护理产品，其施用于皮肤以将生物活性成分深深地递送到皮肤层中。因此，精华素组合物通常含有较高浓度的活性成分。精华素组合物可以是液体、凝胶或半固体形式。在一个实例中，精华素组合物被配制成液体，其具有低粘度并且水比例比油高。在某些实施方式中，精华素组合物被配制为深深渗透到皮肤表面。精华素组合物可以包括合成油或天然油，包括聚烷基硅氧烷，以及乳化剂，醇例如乙醇，脂质，pH平衡剂和其它药学上可接受的载体。也可以添加可以改善精华素组合物向皮肤较深层吸收的成分，例如戊二醇乙醇、二季戊四醇六辛酸酯或六癸酸酯和丙二醇。
[0225] 精华素组合物可以包括例如水、保湿剂、pH调节剂、皮肤调理剂、增稠剂、表面活性剂、防腐剂和香料。在一些实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约50％至约95％的水，例如约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％或约95％。在某些实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约2％至约20％的保湿剂，例如约2％、约5％、约10％、约15％或约20％。在一个实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约0.1％至约1％的pH调节剂，例如约0.1％、约
0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约0.1％至约4％的增稠剂，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％或约4％。
在一个实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约2％至约10％的皮肤调理剂，例如约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％。在一些实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约1％至约15％的表面活性剂，例如约
1％、约5％、约8％、约10％、约13％或约15％。在其它实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包含至多约2％的防腐剂，例如约0.1％、约0.5％、约0.8％、约1％、约
1.3％、约1.5％、约1.8％或约2％。在一个实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约0.1％至约4％的增稠剂，例如约0.1％、约0.5％、约1％、约2％、约3％或约4％。
在一个实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约2％至约10％的皮肤调理剂，例如约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％。在一些实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约1％至约15％的表面活性剂，例如约
1％、约5％、约8％、约10％、约13％或约15％。在其它实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包含至多约2％的防腐剂，例如约0.1％、约0.5％、约0.8％、约1％、约
1.3％、约1.5％、约1.8％或约2％。在一个实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括至多约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。
[0226] 在某些实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组合物包括约60％至约90％的水，例如约60％、约70％、约80％或约90％。在一个实施方式中，精华素包含约2％至约10％的甘油，例如约2％、约5％、约7％或约10％。在某些实施方式中，精华素包含约2％至约10％的聚山梨醇酯20，例如约2％、约5％、约7％或约10％。在其它实施方式中，精华素组合物包括约2％至约10％的二甲聚硅氧烷，例如约2％、约5％、约7％或约10％。在一些实施方式中，精华素组合物包括约0.1％至约1％的氢氧化钠，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，精华素组合物包括约1％至约3％的聚山梨醇酯60，例如约1％、约1.5％、约2％、约2.5％或约3％。在另外的实施方式中，精华素组合物包括约2％至约10％的丙二醇，例如约2％、约5％、约7％或约10％。在某些实施方式中，精华素组合物包括约0.1％至约3％的丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物，例如约0.1％、约
0.5％、约1％、约1.5％、约2％、约2.5％或约3％。在一个实施方式中，精华素组合物包括约
0.1％至约1％的丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物，例如约0.1％、约0.3％、约
0.5％、约0.8％或约1％。在进一步的实施方式中，精华素组合物包括约0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，精华素组合物包括约0.5％至约1.5％的防腐剂，例如约0.5％、约0.8％、约1％、约1.3％或约1.5％。所述成分可以组合形式包括。
0.5％、约1％、约1.5％、约2％、约2.5％或约3％。在一个实施方式中，精华素组合物包括约
0.1％至约1％的丙烯酸酯/丙烯酸C10-C30烷基酯交联聚合物，例如约0.1％、约0.3％、约
0.5％、约0.8％或约1％。在进一步的实施方式中，精华素组合物包括约0.1％至约1％的香料，例如约0.1％、约0.3％、约0.5％、约0.8％或约1％。在其它实施方式中，精华素组合物包括约0.5％至约1.5％的防腐剂，例如约0.5％、约0.8％、约1％、约1.3％或约1.5％。所述成分可以组合形式包括。
[0227] 在一些实例中，精华素组合物包括约0.01％至约10.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.00001％至约1.0％的β-葡聚糖和约0.0001％至约0.1％的葡萄籽提取物，其中百分比是基于组合物的重量。举例来说，按组合物的重量计，精华素组合物包括约0.1％至约0.5％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖和约0.005％至约0.1％的葡萄籽提取物。在某些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包括约0.25％脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，约0.0005％的β-葡聚糖和约0.01％的葡萄籽提取物。在一些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包括约0.25％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、约0.05％的β-葡聚糖和约0.01％的葡萄籽提取物。
[0228] 精华素组合物中使用的葡萄籽提取物可以是葡萄籽提取物的水溶液。在一个实施方式中，用于精华素组合物中的β-葡聚糖是水溶液。
[0229] 本文公开的精华素组合物可以包括维生素A。维生素A可以视黄醇及其类似物如棕榈酸视黄酯的形式存在。例如，精华素组合物包含约0.00005％至约1.0％的维生素A，例如约0.001％至约0.1％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包含约0.01％的维生素A。
[0230] 本文公开的精华素组合物还可以包括维生素E。维生素E可以生育酚及其类似物如生育酚乙酸酯的形式存在。举例来说，精华素组合物包含约0.01％至约10.0％的维生素E，例如约0.05％至约5％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包含约0.1％的维生素E。
[0231] 本文公开的精华素组合物还可以包括维生素C。维生素C可以抗坏血酸盐及其类似物如抗坏血酸磷酸镁和抗坏血酸棕榈酸酯的形式存在。举例来说，精华素组合物包含约0.0001％至约1.0％的维生素C，例如约0.0005％至约0.5％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包含约0.001％的维生素C。
[0232] 本文公开的精华素组合物还可以包括泛醇。举例来说，精华素组合物包含约0.001％至约1.0％的泛醇，例如约0.005％至约0.5％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包含约0.05％的泛醇。
[0233] 本文公开的精华素组合物可以另外包括超氧化物歧化酶。举例来说，精华素组合物包含约0.000001％至约1.0％的超氧化物歧化酶，例如约0.00005％至约0.5％。在一些实施方式中，精华素组合物包含约0.0001％至约1.0％的超氧化物歧化酶，例如约0.005％至约0.5％。在某些实施方式中，按组合物的重量计，精华素组合物包含约0.00001％的超氧化物歧化酶。
[0234] 本文公开的精华素组合物还可以包括百脉根和/或北五味子果实的提取物。举例来说，按组合物的重量计，精华素组合物包含约0.001％至约5.0％的北五味子果实提取物。在某些实施方式中，精华素组合物包含约0.01％的北五味子果实提取物。举例来说，以组合物重量计，精华素组合物包含约0.01％至约5.0％的百脉根提取物。在某些实施方式中，精华素组合物包含约0.5％的百脉根提取物。在一些实施方式中，精华素组合物包含约0.01％的北五味子果实提取物和约0.5％的百脉根提取物。
[0235] 在某些实例中，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的精华素组合物还包括有效量的维生素A、维生素E、泛醇、维生素C、超氧化物歧化酶、北五味子果实提取物或百脉根提取物中的至少一种，当局部施用于皮肤时，其含量足以改善皮肤外观。在一个实例中，精华素组合物包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素E、泛醇、维生素C、超氧化物歧化酶、北五味子水果提取物和百脉根提取物。
[0236] 在所公开的包含五种组分的组合的一个实施方式中，按精华素组合物的重量计，精华素组分包含约0.1％至约0.5％或约0.2％至约0.4％，例如约0.2％、约0.25％、约0.3％、约0.35％或约0.4％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物。在一个实施方式中，精华素组合物包括约0.0001重量％至约0.001重量％或约0.0002重量％至约0.0009重量％，例如约0.0002重量％、约0.0003重量％、约0.0004重量％、约0.0005重量％、约0.0006重量％、约
0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，精华素组合物包括约0.01重量％至约0.1重量％或约0.02重量％至约0.09重量％，例如约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％、约0.05重量％、约0.06重量％、约0.07重量％、约0.08重量％或约0.09重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，精华素组合物包括约0.005重量％至约0.05重量％或约0.01重量％至约0.04重量％，例如约0.01重量％、约0.02重量％、约
0.03重量％或约0.04重量％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，精华素组合物包括约
0.0001重量％至约0.1重量％或约0.005重量％至约0.05重量％，例如约0.005重量％、约
0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％、约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素A。在其它实施方式中，精华素组合物包括约0.0005重量％至约0.05重量％或约0.0009重量％至约0.005重量％，例如约
0.0009重量％、约0.001重量％、约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％或约0.005重量％的维生素C。在另外的实施方式中，精华素组合物包括约0.05重量％至约0.5重量％或约0.09重量％至约0.25重量％，例如约0.09重量％、约0.095重量％、约0.1重量％、约
0.15重量％、约0.2重量％或约0.25重量％的维生素E。在进一步的实施方式中，精华素组合物包括约0.002重量％至约0.5重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的泛醇。
在其它进一步的实施方式中，精华素组合物包括约0.000005重量％至约0.0005重量％或约
0.000009重量％至约0.00005重量％，例如约0.000009重量％、约0.00001重量％、约
0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％或约0.00005重量％的超氧化物歧化酶。在一些实施方式中，精华素组合物包括约0.001重量％至约1重量％或约0.01重量％至约0.05重量％，例如约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的北五味子果实提取物。在某些其它实施方式中，精华素组合物包括约0.01重量％至约5重量％或约0.1重量％至约0.5重量％，例如约0.1重量％、约0.2重量％、约0.3重量％、约0.4重量％或约0.5重量％的百脉根提取物。所述成分可以组合形式包括。因此，精华素组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇、超氧化物歧化酶、北五味子提取物和百脉根提取物。
这种精华素组合物可以与洗面奶，爽肤水，夜间保湿霜和/或日间保湿霜结合使用。
0.0007重量％、约0.0008重量％或约0.0009重量％的β-葡聚糖。在一些实施方式中，精华素组合物包括约0.01重量％至约0.1重量％或约0.02重量％至约0.09重量％，例如约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％、约0.05重量％、约0.06重量％、约0.07重量％、约0.08重量％或约0.09重量％的β-葡聚糖。在其它实施方式中，精华素组合物包括约0.005重量％至约0.05重量％或约0.01重量％至约0.04重量％，例如约0.01重量％、约0.02重量％、约
0.03重量％或约0.04重量％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，精华素组合物包括约
0.0001重量％至约0.1重量％或约0.005重量％至约0.05重量％，例如约0.005重量％、约
0.006重量％、约0.007重量％、约0.008重量％、约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的维生素A。在其它实施方式中，精华素组合物包括约0.0005重量％至约0.05重量％或约0.0009重量％至约0.005重量％，例如约
0.0009重量％、约0.001重量％、约0.002重量％、约0.003重量％、约0.004重量％或约0.005重量％的维生素C。在另外的实施方式中，精华素组合物包括约0.05重量％至约0.5重量％或约0.09重量％至约0.25重量％，例如约0.09重量％、约0.095重量％、约0.1重量％、约
0.15重量％、约0.2重量％或约0.25重量％的维生素E。在进一步的实施方式中，精华素组合物包括约0.002重量％至约0.5重量％或约0.009重量％至约0.05重量％，例如约0.009重量％、约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的泛醇。
在其它进一步的实施方式中，精华素组合物包括约0.000005重量％至约0.0005重量％或约
0.000009重量％至约0.00005重量％，例如约0.000009重量％、约0.00001重量％、约
0.00002重量％、约0.00003重量％、约0.00004重量％或约0.00005重量％的超氧化物歧化酶。在一些实施方式中，精华素组合物包括约0.001重量％至约1重量％或约0.01重量％至约0.05重量％，例如约0.01重量％、约0.02重量％、约0.03重量％、约0.04重量％或约0.05重量％的北五味子果实提取物。在某些其它实施方式中，精华素组合物包括约0.01重量％至约5重量％或约0.1重量％至约0.5重量％，例如约0.1重量％、约0.2重量％、约0.3重量％、约0.4重量％或约0.5重量％的百脉根提取物。所述成分可以组合形式包括。因此，精华素组合物可以包括这些浓度的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖、葡萄籽提取物、维生素A、维生素C、维生素E、泛醇、超氧化物歧化酶、北五味子提取物和百脉根提取物。
这种精华素组合物可以与洗面奶，爽肤水，夜间保湿霜和/或日间保湿霜结合使用。
[0237] IV.改善皮肤外观的皮肤护理方案和方法
[0238] 本文公开的一种、两种、三种、四种或所有五种组分的局部施用可以改善皮肤外观，包括改善衰老迹象，并且有益于总体皮肤健康。因此，公开了使用本文公开的组分中的一种、两种、三种、四种或五种的组合的方法。提出了皮肤护理方法的实施方式，其包括通过向皮肤上施用有效量的所有五种组分的组合来改善衰老皮肤的外观，所述组分包括爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物、洗面奶组合物和精华素组合物，用于至少具有一种衰老迹象的皮肤表面。一种或多种组分(例如，两种、三种、四种或所有五种组分的组合)的施用时间足以改善至少一种衰老迹象的出现。至少一种组分或所有组分的施用可用于改善皮肤健康，例如减轻暴露于太阳或其它有害环境刺激引起的损伤，以减轻其对皮肤的破坏作用。所公开的方法可以减少ROS和其它环境暴露(例如污染和紫外线辐射)对皮肤的影响。城市尘埃是包括重金属在内的城市环境中的污染，其可能对皮肤健康构成威胁，例如对于在城市中生活和工作的暴露于金属污染空气中的人们。本文公开的一种、两种、三种、四种或所有五种组分的局部施用可以减少城市尘埃对皮肤的损害。
[0239] 在一些实施方式中，所公开的方法包括使用一种或多种包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物来改善皮肤健康，如通过实施例中呈现的测定法和分析所测量。当以五步组合使用时，所公开的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物有利地保持或提高了对皮肤治疗是有益的具有抗氧化性质的多酚的水平。
[0240] 所公开的组合物和方法用于改善皮肤外观。所述方法包括将有效量的一种、两种、三种、四种或全部五种组分施用于皮肤。可以将两种、三种、四种或五种组分的组合施用于皮肤。在一些实施方式中，至少一种皮肤衰老迹象得到改善。皮肤外观的改善可通过分析例如以下来确定：皮肤中存在的皱纹的深度、长度、宽度或数量，以及皮肤粗糙度，下垂，毛孔大小，色素沉着过度，光滑度，光泽度或透亮度，紧致度和肤色均匀度。可以通过对这些特性的分析来评估对皮肤有益的测定结果，并且可以包括客观的身体测量和受试者的自我评估。物理测量包括但不限于通过仪器如皮肤弹性测定仪(其测量皮肤可以机械扩张的程度)和成像系统如VISIA肤色分析系统获得的测量。
[0241] 在一些实施方式中，皮肤护理方法包括施用包括五种组分的组合。所施用的组合物包括脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物；这些组合物可以改善皮肤健康和皮肤外观。本文公开的方法的使用可以改善内在的(例如时间的)和外在的(例如环境的)皮肤损伤。有效量的一种或多种所公开的组合物在皮肤上的施用持续足够长的时间，使皮肤外观得到可测量的改善。
[0242] 可以使用所公开的方法治疗显示过早衰老迹象的皮肤。显示过早衰老迹象的皮肤可以出现在受试者身体上的任何位置。最受关注的皮肤表面通常是未被衣物覆盖的皮肤表面，包括面部皮肤表面以及颈部和胸部表面。举例来说，皮肤表面可以是包括脸颊、前额和眶周表面的面部皮肤表面。眶周表面包括但不限于眼下和鱼尾纹区域。这些中的任何一个都可以使用所公开的方法来处理。
[0243] 在一些实施方式中，使用所公开的方法治疗面部皮肤。举例来说，皮肤可以在眶周、前额或脸颊区域。皮肤可以是过早衰老的皮肤，因为它显示出按时间计比被治疗的受试者年龄大的皮肤中通常存在的损伤。在一些实施方式中，皮肤似乎比受试者年龄大5、6、7、8、9、10、11、12、13、14或15岁。在一个非限制性实例中，皮肤可能具有表明其大约30岁的环境或其它损伤，而受试者可能自然年龄仅大约25岁。在一些实施方式中，皮肤因城市尘埃而受损。
[0244] 可以遵循常规治疗方案(称为方案)将所述组分施用于皮肤。有规律且一致地施用五种组分中的一种或多种，例如一种、两种、三种、四种或全部五种组分，可以改善皮肤外观。上面详细地公开了每个组分。任何公开的洗面奶、爽肤水、日间保湿霜、精华素和夜间保湿霜可以任何组合使用。
[0245] 在一些实施方式中，所述方法包括将五种组分施用于皮肤，所述五种组分包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物。在一些实施方式中，所述方法包括定期施用于皮肤。在一个实施方式中，每隔大约24小时一次(每天一次)施用至少一种组分。在一些实施方式中，大约每天两次施用至少一种组分。各施用之间的时间可以改变，并且可能是约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23或约24小时。在某些实施方式中，至少一种组分在早晨施用一次并且另一种组分在晚上施用一次。
[0246] 在另一个实施方式中，每隔大约24小时一次(每天一次)施用所述五种组分。在一些实施方式中，大约每天两次施用所述五种组分。各施用之间的时间可以改变，并且可能是约8、约9、约10、约11、约12、约13、约14、约15、约16、约17、约18、约19、约20、约21、约22、约23或约24小时。在某些实施方式中，五种组分中的至少一种在早晨施用一次并且五种组分中的另一种在晚上施用。
[0247] 在本文公开的任何皮肤护理方法中，不需要在每次处理中都使用所有五种组分。举例来说，五种组分的子集可以每天施用一次并且五种组分的子集可以每天施用两次。在某些实施方式中，洗面奶和精华素组分各自每天两次施用，例如在早晨和晚上，并且日间保湿霜、爽肤水和夜间保湿霜组分各自每天一次施用，例如日间保湿霜仅在早晨施用，而夜间保湿霜和/或爽肤水仅在晚上施用。在另一个实施方式中，日间保湿霜在早晨施用，而夜间保湿霜在晚上施用。在另一个实施方式中，日间保湿霜组合物可以在暴露于环境之前施用，而夜间保湿霜组合物可以在晚上施用。
[0248] 在一些实施方式中，所述方法包括：a)在早晨向皮肤施用有效量的洗面奶组合物的第一次施用；b)从皮肤冲洗掉所述洗面奶组合物的第一次施用；c)在步骤b)之后施用有效量的日间保湿霜组合物和有效量的精华素组合物；d)向皮肤施用有效量的洗面奶组合物的第二次施用；e)从皮肤冲洗掉所述洗面奶组合物的第二次施用；f)将有效量的爽肤水组合物、精华素组合物和有效量的夜间保湿霜组合物施用于皮肤，其中步骤a-c和d-f间隔约8个至约16个小时，例如8、9、10、11、12、13、14、15或16个小时。步骤a-c可以在早晨执行，而步骤d-f可以在晚上执行。
[0249] 在本文公开的任何皮肤护理方法中，可以任何顺序将这五种组分施用于皮肤。在另一个实施方式中，在早晨施用洗面奶、精华素和日间保湿霜，而在晚上施用夜间保湿霜，爽肤水和任选地精华素。在一个实例中，以该顺序同时施用洗面奶、精华素、爽肤水和日间保湿霜。
[0250] 在一些实施方式中，首先施用洗面奶组合物，然后冲洗皮肤。洗面奶可以每天使用1次、2次、3次、4次或5次。在一些非限制性实例中，洗面奶每天使用一次或两次，然后从皮肤上冲洗掉。在其它非限制性实例中，洗面奶在早晨使用并从皮肤上冲洗掉。
[0251] 在其它实施方式中，早晨，首先施用洗面奶组合物，然后冲洗皮肤。冲洗洗面奶组合物后，以任何顺序施用精华素组合物和日间保湿霜组合物。晚上，首先施用洗面奶组合物，然后冲洗皮肤。将洗面奶组合物冲洗后，以任何顺序施用夜间保湿霜和爽肤水。
[0252] 在更多的实施方式中，在冲洗洗面奶组合物之后，施用爽肤水组合物和精华素组合物(以任何顺序)。在一个非限制性实例中，在精华素之前将爽肤水施用于皮肤。在另一个非限制性实例中，在爽肤水之前将精华素施用于皮肤。在一些实施方式中，在施用爽肤水组合物和/或精华素组合物之后，将日间保湿霜组合物施用于皮肤。在其中利用日间保湿霜的一些实施方式中，可以在暴露于环境之前(即早晨)施用日间保湿霜组合物。
[0253] 可以将夜间保湿霜组合物与洗面奶、爽肤水、精华素和/或日间保湿霜组合物分开施用。举例来说，夜间保湿霜组合物可以在晚上(例如在睡眠时间或晚餐时间)施用于皮肤。
[0254] 皮肤护理方法可以施用任何时间长度，其中至少一种衰老迹象改善。举例来说，有效量的五种组分可以施用于皮肤持续至少约一天、至少约一周、至少约两周、至少约四周、至少约八周或至少约十二周。有效量的五种组分可以施用1、2、3、4、5或6个月。在一些实施方式中，五种组分至少每天一次施用于皮肤表面持续至少约一周。在其它实施方式中，五种组分至少每天两次施用于皮肤表面持续至少约一周。在其它实施方式中，五种组分至少每天一次施用于皮肤表面持续至少约十二周，或者至少每天两次施用于皮肤表面持续至少约十二周。
[0255] 在本文提出的任何皮肤护理方法的一些实施方式中，衰老皮肤的外观改善包括降低以下中的至少一项：皮肤皱纹深度、皮肤皱纹数量、皮肤皱纹长度或皮肤皱纹宽度。在某些实施方式中，皱纹是眶周皱纹、前额皱纹或脸颊皱纹。在本文提出的任何皮肤护理方法的另外的实施方式中，衰老皮肤的外观改善包括以下中的至少一项：降低皮肤粗糙度，增加皮肤光滑度，增加皮肤光泽度，增加皮肤紧致度，减少皮肤下垂，增加肤色均匀度，缩小毛孔大小或减少皮肤色素沉着过度。
[0256] 皮肤的改善还可以包括以下中的至少一项：使面部线纹看起来不那么明显，使面部线纹和/或皱纹感觉饱满，改善眼下线纹和/或眶周线纹的外观，改善鱼尾纹的外观，降低和/或减少皱纹的出现，尤其是脸颊、前额上的面部皱纹(例如，眼睛之间的垂直皱纹、眼睛上方的水平皱纹)，和/或口腔周围的皱纹，尤其是深层皱纹、褶皱或皱褶，改善皮肤柔软度，减少和/或消除细纹和/或深纹、褶皱和皱褶，以及使皮肤光滑。用于测量改善的皮肤质量的方法是本领域已知的。参见例如美国专利第6,866,856号和第6,682,763号。
[0257] 可以改善皮肤的质地性质，包括柔度、柔软度和光滑度，从而增强光泽、透明和亮度。可以主观和客观地测量的皮肤的其它和重要的性质包括但不限于皮肤松弛，或者反之皮肤紧密度，以及皮肤内纹理细纹和粗纹的存在和程度。
[0258] 在一个实施方式中，公开了一种方法，所述方法包括使用五种组分的组合，其中所述组分是爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物、洗面奶组合物和精华素组合物，其中每个组分包含：(i)脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物，其包含液态青铜色麝香葡萄果渣提取物与液态紫色麝香葡萄果渣提取物的组合，以产生液态麝香葡萄果渣提取物，其中a)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和所述紫色麝香葡萄果渣提取物是水性提取物；b)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和紫色麝香葡萄果渣提取物的混合物促进了鞣花酸在麝香葡萄果渣提取物中的溶解性；c)所述青铜色麝香葡萄果渣提取物和所述紫色麝香葡萄果渣提取物是经过滤并发酵的提取物；以及d)所述麝香葡萄果渣提取物的多酚含量为至少约2％；(ii)β-葡聚糖，和(iii)葡萄籽提取物，其中在向皮肤表面施用五种组分后皮肤外观得到改善。在一些实施方式中，皮肤表面是面部皮肤表面。在某些实施方式中，爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物和洗面奶组合物各自包含按爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜或洗面奶组合物的重量计约0.001％至约1.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，按爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物或洗面奶组合物的重量计约0.000001％至约0.1％的β-葡聚糖，以及按爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物或洗面奶组合物的重量计约0.00001％至约0.01％的葡萄籽提取物。在其它实施方式中，精华素组合物包含按精华素组合物的重量计约0.01％至约10.0％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，按精华素组合物的重量计约0.00001％至约1.0％的β-葡聚糖和按精华素组合物的重量计约0.0001％至约0.1％的葡萄籽提取物。
[0259] 在一个实施方式中，所公开的方法包括使用爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物和/或洗面奶组合物，其中爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物和/或洗面奶组合物各自包括按爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜或洗面奶组合物的重量计约0.01％至约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，按爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜或洗面奶组合物的重量计约0.00001％至约0.01％的β-葡聚糖，和按爽肤水组合物、日间保湿霜组合物、夜间保湿霜组合物和/或洗面奶组合物的重量计约0.0001％至约0.001％的葡萄籽提取物。在另一个实施方式中，精华素组合物包含按精华素组合物的重量计约0.1％至约0.5％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物，按精华素组合物的重量计约
0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖，和按精华素组合物的重量计约0.005％至约0.1％的葡萄籽提取物。
0.0001％至约0.1％的β-葡聚糖，和按精华素组合物的重量计约0.005％至约0.1％的葡萄籽提取物。
[0260] 当前公开的方法所利用的任何组分都可以包括额外成分。在一些实施方式中，五种组分中的至少一者还包括泛醇、维生素A、维生素C、维生素E、超氧化物歧化酶、百脉根提取物、北五味子果实提取物或上述成分的任何组合。在其它实施方式中，所有五种组分还包括泛醇、维生素A、维生素C、维生素E、超氧化物歧化酶、百脉根提取物、北五味子果实提取物或上述成分的任何组合。在某些实施方式中，维生素C是抗坏血酸磷酸镁的形式，维生素E是维生素E乙酸酯的形式，并且维生素A是维生素A棕榈酸酯或视黄醇的形式。
[0261] 在一些实施方式中，按组合物的重量计，五种组分中的至少一者包括约0.001％至约1.0％的泛醇、约0.00005％至约1.0％的维生素A、约0.00001至约0.1％的维生素C、约0.001％至约1.0％的维生素E、约0.00001％至约0.1％的超氧化物歧化酶或其任何组合。
[0262] 在一些实施方式中，五种组分中的至少一者还包括百脉根提取物、北五味子果实提取物或两者。在某些实施方式中，五种组分中的至少一者包括防晒剂，其例如可具有约50的SPF。所述组分可以是日间保湿霜。
[0263] 在一个实施方式中，所公开的护肤方法可以包括组合的使用，所述组合包括爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和/或精华素组分，其中：
[0264] A)所述爽肤水组合物包括按爽肤水组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00005重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素A；约0.0001重量％的维生素C；约0.01重量％的维生素E；约0.001重量％的泛醇；和约0.000001重量％的超氧化物歧化酶；
[0265] B)所述日间保湿霜组合物包括按日间保湿霜组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.005重量％的β-葡聚糖；约0.0002重量％的葡萄籽提取物；约0.0002重量％的维生素C；约0.01重量％的维生素E；约0.0005重量％的泛醇；和约0.0002重量％的超氧化物歧化酶；
[0266] C)所述夜间保湿霜组合物包括按夜间保湿霜组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00005重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素A；约0.0001重量％的维生素C；约0.1重量％的维生素E；约0.01重量％的泛醇；约0.000001重量％的超氧化物歧化酶；约0.3重量％的北五味子果实提取物；和约0.05重量％的百脉根提取物；
[0267] D)所述洗面奶组合物包括按洗面奶组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00005重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素A；约0.0001重量％的维生素C；约0.01重量％的维生素E；约0.001重量％的泛醇；和约0.0000001重量％的超氧化物歧化酶；以及
[0268] E)所述精华素组合物包括按精华素组合物的重量计约0.25％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.0005重量％的β-葡聚糖；约0.01重量％的葡萄籽提取物；约0.01重量％的维生素A；约0.001重量％的维生素C；约0.1重量％的维生素E；约0.05重量％的泛醇；约0.00001重量％的超氧化物歧化酶；约0.01重量％的北五味子果实提取物；和约0.5重量％的百脉根提取物。
[0269] 在另一个实施方式中，所公开的护肤方法可以包括组合的使用，所述组合包括爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和/或精华素组分，其中：
[0270] A)所述爽肤水组合物包括按爽肤水组合物的重量计约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00001重量％的β-葡聚糖；约0.0001重量％的葡萄籽提取物；约0.0001重量％的维生素A；约0.0005重量％的维生素C；约0.05重量％的维生素E；约0.005重量％的泛醇；和约0.000005重量％的超氧化物歧化酶；
[0271] B)所述日间保湿霜组合物包括按日间保湿霜组合物的重量计约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00001重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素C；约0.05重量％的维生素E；约0.0001重量％的泛醇；和约0.000005重量％的超氧化物歧化酶；
[0272] C)所述夜间保湿霜组合物包括按夜间保湿霜组合物的重量计约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00001重量％的β-葡聚糖；约0.0001重量％的葡萄籽提取物；约0.0001重量％的维生素A；约0.0005重量％的维生素C；约0.4重量％的维生素E；约0.003重量％的泛醇；约0.000003重量％的超氧化物歧化酶；和约0.5重量％的北五味子果实提取物；
[0273] D)所述洗面奶组合物包含按洗面奶组合物的重量计约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.00001重量％的β-葡聚糖；约0.0001重量％的葡萄籽提取物；约0.0003重量％的维生素C；约0.05重量％的维生素E；约0.003重量％的泛醇；和约0.000005重量％的超氧化物歧化酶；以及
[0274] E)所述精华素组合物包括按精华素组合物的重量计约0.4％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.0001重量％的β-葡聚糖；约0.03重量％的葡萄籽提取物；约0.05重量％的维生素A；约0.005重量％的维生素C；约0.5重量％的维生素E；约0.001重量％的泛醇；约0.00003重量％的超氧化物歧化酶；约0.05重量％的北五味子果实提取物；和约0.3重量％的百脉根提取物。
[0275] 在另一个实施方式中，所公开的护肤方法可以包括组合的使用，所述组合包括爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和/或精华素组分，其中：
[0276] A)所述爽肤水组合物包括按爽肤水组合物的重量计约0.01％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.0003重量％的β-葡聚糖；约0.0001重量％的葡萄籽提取物；约0.0003重量％的维生素A；约0.0005重量％的维生素C；约0.05重量％的维生素E；约0.003重量％的泛醇；和约0.00005重量％的超氧化物歧化酶；
[0277] B)所述日间保湿霜组合物包括按日间保湿霜组合物的重量计约0.04％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.0001重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素C；约0.0003重量％的泛醇；和约0.0005重量％的超氧化物歧化酶；
[0278] C)所述夜间保湿霜组合物包括按夜间保湿霜组合物的重量计约0.01％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.0003重量％的β-葡聚糖；约0.0001重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素C；约0.2重量％的维生素E；约0.0005重量％的泛醇；和约0.1重量％的北五味子果实提取物；
[0279] D)所述洗面奶组合物包括按洗面奶组合物的重量计约0.01％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.0003重量％的β-葡聚糖；约0.0001重量％的葡萄籽提取物；约0.0001重量％的维生素A；约0.0005重量％的维生素C；约0.004重量％的泛醇；约0.0000005重量％的超氧化物歧化酶；和约0.1重量％的北五味子果实提取物；以及
[0280] E)所述精华素组合物包括按精华素组合物的重量计约0.05％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.005重量％的β-葡聚糖；约0.03重量％的葡萄籽提取物；约0.05重量％的维生素A；约0.005重量％的维生素C；约0.3重量％的维生素E；约0.002重量％的泛醇；约0.00005重量％的超氧化物歧化酶；约0.03重量％的北五味子果实提取物；和约0.4重量％的百脉根提取物。
[0281] 在另一个实施方式中，所公开的护肤方法可以包括组合的使用，所述组合包括爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和/或精华素组分，其中：
[0282] A)所述爽肤水组合物包括按爽肤水组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.005重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素A；约0.0001重量％的维生素C；约0.01重量％的维生素E；约0.01重量％的泛醇；和约0.0001重量％的超氧化物歧化酶；
[0283] B)所述日间保湿霜组合物包括按日间保湿霜组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.005重量％的β-葡聚糖；约0.0002重量％的葡萄籽提取物；约0.0002重量％的维生素C；约0.01重量％的维生素E；约0.005重量％的泛醇；和约0.0002重量％的超氧化物歧化酶；
[0284] C)所述夜间保湿霜组合物包括按夜间保湿霜组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.005重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素A；约0.0001重量％的维生素C；约0.1重量％的维生素E；约0.01重量％的泛醇；约0.0001重量％的超氧化物歧化酶；约0.3重量％的北五味子果实提取物；和约0.05重量％的百脉根提取物；
[0285] D)所述洗面奶组合物包括按洗面奶组合物的重量计约0.025％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.005重量％的β-葡聚糖；约0.0005重量％的葡萄籽提取物；约0.0005重量％的维生素A；约0.0001重量％的维生素C；约0.01重量％的维生素E；约0.01重量％的泛醇；和约0.0001重量％的超氧化物歧化酶；以及
[0286] E)所述精华素组合物包括按精华素组合物的重量计约0.25％的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物；约0.05重量％的β-葡聚糖；约0.01重量％的葡萄籽提取物；约0.01重量％的维生素A；约0.001重量％的维生素C；约0.1重量％的维生素E；约0.05重量％的泛醇；约0.001重量％的超氧化物歧化酶；约0.01重量％的北五味子果实提取物；和约0.5重量％的百脉根提取物。
[0287] 在一些实施方式中，如本文所公开制备在组分中使用的脱色的麝香葡萄(圆叶葡萄)果渣溶剂提取物。在一些实施方式中，在五种组分的每一种中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围为约0.1至约10(重量:重量)。在某些实施方式中，在五种组分的每一种中，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的青铜色麝香葡萄果渣提取物与紫色麝香葡萄果渣提取物的比率范围为约0.3至约3(重量:重量)。
[0288] 在其它实施方式中，所述组分中包括的脱色的麝香葡萄果渣溶剂包括按脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计约7％至约10％的多酚和少于约5％的单糖，并且所述缩合鞣质少于脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的总多酚含量的约10％。在一个实施方式中，在五种组分的每一者中脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的总多酚由至少约85％的除缩合鞣质之外的多酚组成。按脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，所述组分中包括的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物还包含约0.5％至约5％的纤维、约7％至约14％的蛋白质、约0.05％至约3％的脂肪和约15％至约20％的有机酸。在另一个实施方式中，在五种组分的每一者中，按脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物还包含约1％至约2％的纤维、约7％至约8％的蛋白质、约0.5％至约1.5％的脂肪和约15.5％至约16.5％的有机酸。
[0289] 在其它实施方式中，按脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，每种组分中脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的酚含量包含约2％至约3％的鞣花酸和约30％至约31％的没食子酸。举例来说，在一个实施方式中，按脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的重量计，五种组分中的每一者的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的酚含量包含约2％至约3％的鞣花酸、约3％至约4％的鞣花酸糖苷、约30％至约31％的没食子酸、约2％至约3％的槲皮素、约10％至约11％的没食子鞣质、约7％至约8％的鞣花鞣质、约29％至约30％的原花色素、约
4％至约5％的花色素苷、约2％至约3％的儿茶素和约6％至约7％的酚酸。
4％至约5％的花色素苷、约2％至约3％的儿茶素和约6％至约7％的酚酸。
[0290] V.实施例
[0291] 包括五种组分(爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和精华素)的皮肤护理方案和方法可以改善皮肤的外观，如实施例中呈现的测定法和分析测试所示，其中每种组分都包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物。
[0292] 在实施例1和图24-32中呈现了示例性结果，其指示脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物在皮肤上的作用模式。对于弹性蛋白酶、胶原酶、DPPH、TT二聚体、角质形成细胞活力和酪氨酸酶测试，含有脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的组合物的有益作用(包括抗氧化性质)在图24中概述。这些测试如下所述进行。
[0293] 实施例2和图1-20呈现了在皮肤护理方案和方法中使用五种组分的示例性结果。用于分析的测定法和测试已证明，通过使用五种组分，皮肤外观具有统计学显著改善，如通过评估多个参数来证明，这些参数包括皮肤中存在的皱纹的深度、长度、宽度或数量，以及皮肤粗糙度，下垂，毛孔大小，色素沉着过度，光滑度，光泽度或透亮度，紧致度和肤色均匀度。如下所述对这些参数进行分析和/或定量。
[0294] 皮肤分级参数包括对皮肤健康和外观的总体评估，以及对皮肤光泽度、质地、皱纹、肤色/着色均匀度、粗糙度、毛孔大小和紧致度的分析。经过培训的皮肤分级人员按照标准化量表对这些参数进行分级，所述皮肤分级人员使用改良的Griffiths 10分量表根据以下数字定义对皮肤进行评估，其中必要时使用半分评分来更准确地描述皮肤状况：0＝无(可能的最佳状况)；1至3＝轻度；4至6＝中度；7至9＝重度(可能的最差状况)。使用指定的量表锚评估以下参数：
[0295]
[0296] 对于生物仪器测量，使用以下程序。在参与以下生物仪器测量之前，使受试者于诊所内的指定房间中休息，以适应环境温度和湿度条件至少15分钟。指定房间的温度保持在约68℉至约75℉并且相对湿度范围为约35％至约65％。在适用的研究访视期间，每小时记录指定的候诊室和/或仪器室的温度和湿度。如果无法进行测量，则将受试者编号、位置、时间点、仪器和原因(如果可能的话)记录为备案记录。
[0297] 皮肤弹性测定仪测量：在基线、第1周、第2周、第4周、第8周和第12周，对右眼骨(眼睛中心正下方)进行一次皮肤弹性测定仪测量。使用皮肤弹性测定仪MPA 580(Courage+Khazaka，德国)来测量皮肤的粘弹性质(即紧致度和弹性)。所述仪器对皮肤的一小块区域施加真空并测量皮肤的弹性反应。在测量过程中，探头保持在约90°角。
[0298] 施加约300毫巴的负压，并通过约8mm的探头释放压力(标准设置)。测量持续约30秒，在此期间存在约5秒打开(真空)时间和约10秒关闭(皮肤释放)时间的2个重复循环。在吸力的施加和释放期间记录皮肤进出探头的运动。记录可延展性、回弹性、纯弹性和生物弹性/紧致度的量。
[0299] 色度仪测量：在基线、第1周、第2周、第4周、第8周和第12周，在每个受试者的左脸颊中心(在从眼角向下延伸的线与水平穿过鼻子底部的线的交点处)进行色度仪测量。该设备进行三次重复测量，并产生平均值，对其进行记录。色度仪CR-400(日本柯尼卡美能达(KonicaMinolta,Japan))设置为D65光源。为了评估肤色，色度仪收集了以下数据：L*值描述了从黑色到白色的灰度级相对亮度；随着肤色变亮，分数增加。
[0300] 成像程序描述如下。在进行摄影程序之前，诊所工作人员要确保受试者的面部干净，没有化妆，如研究程序中所述。受试者从要拍照的区域中除去任何珠宝首饰，并在拍摄任何照片之前与诊所内的环境条件平衡至少15分钟。为受试者提供黑色或灰色无光泽头带，以使头发远离面部，并指示正确的头带放置。为受试者提供黑色无光泽衬衫或者披在受试者衣服上的黑色或灰色无光泽布。
[0301] VISIA图像：指示受试者轻轻闭上眼睛，采取中性的非微笑的表情。对于中心视图、右侧视图和左侧视图，为每张照片仔细定位受试者。在基线、第4周、第8周和第12周，使用VISIA CR照相站(新泽西州费尔菲尔德市的Canfield Imaging Systems)，利用佳能Mark II 5D或6D数码SLR相机(日本东京佳能公司)在以下照明条件下对每个受试者拍摄全脸数字图像(右侧、左侧和中心视图)：标准照明1＝可见光(明亮)；标准照明2＝可见光；标准照明3＝评定鱼尾纹区域的光；交叉极化；平行极化；或UV聚光灯(蓝色)。
[0302] VisioScan图像：VisioScan VC 98(Courage+Khazaka electronicGmbH)是具有高分辨率的UVA灯(约340至约400nm)摄像机，其用于直接研究皮肤表面。图像捕获皮肤表面纹理和干燥度。成像区域为约6mm×约8mm，分辨率为约480×约640像素。VisioScan软件用于计算和分析图像的右脸颊上的皮肤粗糙度。在基线、第1周、第2周、第4周、第8周和第12周拍摄图像。
[0303] 实施例1.展现脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物对皮肤的有益作用的生物测定法。
[0304] 各种生物测定法已经证实了脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物在皮肤上的作用模式。示出了关于弹性蛋白酶、胶原酶、DPPH、TT二聚体、角质形成细胞活力和酪氨酸酶测试，包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的示例性皮肤护理组合物的有益作用。这些测试在人类皮肤模型(MatTek EPIDERMTM)中进行如下。
[0305] MatTek EPIDERMTM模型使用正常的人源性表皮角质形成细胞，这些细胞已被培养以形成多层的高度分化的人表皮模型。超微结构分析表明存在角质透明蛋白颗粒、扁丝束、桥粒和多层角质层，其中包含以体内表皮特征性图案排列的细胞间层状脂质层。成熟表皮特异性分化的标志物例如丝聚合蛋白原、K1/K10细胞角蛋白对、外皮蛋白(involucrin)和ITM型表皮转谷氨酰胺酶已在该模型中定位。MatTekEPIDERM 模型也具有有丝分裂和代谢活性。
[0306] 弹性蛋白酶和胶原酶抑制测定法：培养人皮肤成纤维细胞，并将其用作弹性蛋白酶的来源。通过在弹性蛋白酶缓冲液中裂解细胞并保留裂解物的可溶部分，从成纤维细胞中部分纯化该酶。然后将该成纤维细胞裂解物的一部分与测试物质和合成的弹性蛋白酶底物Suc-(Ala3)-p-硝基苯胺(STANA)一起温育。弹性蛋白酶作用于该底物上以释放出对硝基苯胺，可以利用分光光度计通过测量约405nm波长处的吸光度来检测对硝基苯胺。与未受抑制的酶相比，对硝基苯胺释放量的减少表明了对弹性蛋白酶的抑制。
[0307] 基质金属蛋白酶-1(MMP-1)是一种细胞外蛋白酶，其潜伏形式的近似分子量为约52至约56kD。所述酶原裂解后，约22至约46kD的MMP-1成为一种活性酶并且可以降解包括胶原蛋白、明胶和巢蛋白在内的许多底物。在人类皮肤中，可以经由一些疾病状态、暴露于紫外线辐射或作为自然衰老过程的一部分来诱导MMP-1活性增加。这可能会导致失衡状态，其中MMP-1对胶原蛋白的降解超过其更新速率。因此，抑制MMP-1活性的材料可能是有益的。为了筛选MMP-1抑制剂，将活性人重组MMP-1在硫代酯肽底物、潜在抑制剂和5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)的存在下温育。当硫代酯肽底物被MMP-1分解时，其释放出可以与DTNB反应并形成2-硝基-5-硫代苯甲酸的巯基，这可以在约412nm处进行分光光度法检测。
因此，MMP-1活性将与在约412nm处的吸光度成正比，并且在存在抑制剂的情况下，该吸光度将降低。
因此，MMP-1活性将与在约412nm处的吸光度成正比，并且在存在抑制剂的情况下，该吸光度将降低。
[0308] DPPH测定法：该测定法是基于抗氧化剂对稳定自由基2,2-二苯基-1-苦基肼基(DPPH)的清除效应的测量。自由基DPPH在约517nm处具有强吸光度，并且当DPPH与抗氧化剂化合物反应并转化为肼时，该吸光度降低。DPPH测定法被认为是评估抗氧化剂清除活性的有效且容易的测定法，因为所述自由基化合物是稳定的并且不必像在其它自由基清除测定法中那样去生成。
[0309] TT二聚体测定法：该研究使用MatTek EPIDERMTM皮肤模型，其由被培养形成多层的人表皮高度分化模型的正常人源性表皮角质形成细胞组成。将组织用测试物质局部处理过夜然后UVB暴露(评估预防的预处理组)或者在UVB暴露后处理过夜(评估修复的后处理组)。在所述暴露和处理后，从EPIDERMTM组织中提取DNA，并使用基于ELISA的方法测定胸腺嘧啶二聚体含量。
[0310] 紫外线-B辐射暴露对角质形成细胞活力的影响：人表皮角质形成细胞用测试物质处理约24小时，然后暴露于一定剂量的UVB光(约50mj/cm2)。然后经由MTT测定法来确定在UVB暴露后约24小时细胞活力的变化。MTT测定法是细胞代谢活性的比色分析，其反映了细胞活力。活细胞可以摄取MTT，MTT然后通过线粒体还原，导致形成不溶的紫色福尔马肼晶体。然后用异丙醇从所述细胞中提取这些晶体并以分光光度法定量。紫色的强度与活细胞的数量直接成正比并且与测试物质的毒性成反比。
[0311] 酪氨酸酶抑制测定法：将纯化的酪氨酸酶混合在含有L-DOPA的磷酸钠缓冲液中，并与测试物质一起温育。温育约30分钟后，通过比色测定法评估转化为DOPA色素(反映酪氨酸酶活性)的L-DOPA量。曲酸是酪氨酸酶抑制的阳性对照。
[0312] 结果：图24示出了弹性蛋白酶抑制试验的结果，并显示了通过抑制弹性蛋白减少对皮肤弹性的潜在影响。图25示出了胶原酶抑制试验的结果，其展示了通过避免胶原蛋白减少来维持皮肤紧致度的潜力。
[0313] 图26示出了测量自由基清除能力的DPPH测定法的结果，如Trolox当量所示；TE值越高，抗氧化能力越强。脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物提供的抗氧化活性大于约1500Trolox当量。
[0314] 图27示出了TT二聚体测定的结果，其中在UVB暴露之前进行约1％麝香葡萄提取物的预处理可以完全防止DNA损伤。脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物优于阳性对照(1mM Trolox)；UVB暴露后约1％麝香葡萄提取物处理(后处理)也显示出DNA损伤减少了约45％，表明对DNA修复的作用；在预处理和后处理中，约0.1％的作用均低于约1％。图28示出了紫外线B暴露后的细胞存活率；与未处理的细胞相比，脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物显著增加了细胞存活率，并且所述增加甚至好于约20μM Trolox。图29示出了酪氨酸酶抑制，表明防止色素沉着过度的能力。脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物能够基本上抑制酪氨酸酶，并且将预期有助于避免不希望的与年龄或暴露相关的皮肤色素沉着过度。
[0315] 图30是比较测定法，其显示脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物保留了前体提取物的DNA保护活性。图30是脱色的局部麝香葡萄果渣提取物(TME)与尚未脱色的口服麝香葡萄果渣前体提取物(OME)之间的TT二聚体DNA损伤比较测定的图表。OME是在先的美国专利第8,568,804号、美国专利第9,132,162号和美国专利第9,173,916号中公开的提取物。与未处理组相比，TME和OME两者均显著预防由皮肤组织中的UV伤害所造成的DNA损伤，如通过TT二聚体形成减少所测量。在减少DNA损伤方面OME和TME之间没有统计学差异。
[0316] 总之，在局部皮肤护理产品中使用浓度为约0.00001重量％至约1重量％，例如但不限于约0.025重量％至约0.25重量％的所公开的脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物具有降低的缩合鞣质水平，并且还展示了与下列相关的性质：改善皮肤弹性和皮肤紧致度，减少黑斑形成，通过自由基清除改善抗氧化活性，以及防护紫外线-B光，包括增强皮肤修复和增加皮肤细胞存活率。由于脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物保留了总体酚类概况，因此所述提取物的脱色不会显著影响所述提取物的皮肤保护性能。
[0317] 脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物抑制蛋白质糖基化。晚期糖基化终产物(AGE)是通过将糖分子附连于细胞的和循环的蛋白质和脂质上而产生的，这是一种通过氧化应激加速的过程。在体内已经检测到多种AGE分子，并且重要的是，AGE水平的增加与疾病例如糖尿病、神经变性、关节炎和慢性炎性病症相关。此外，有大量证据表明AGE积累是正常衰老过程的潜在原因，不仅AGE水平随着自然年龄而增加，而且延长寿命的干预(例如卡路里限制)也降低AGE水平。老化期间皮肤中的AGE水平增加，并且已经提出胶原蛋白和其它皮肤蛋白质的糖基化促进老化皮肤的外观和功能改变。
[0318] 当前的研究表明，AGE通过两种机制促进细胞老化和功能障碍。首先，糖可以破坏蛋白质，干扰正常功能和降低细胞活力。其次，AGE被认为通过它们与晚期糖基化终产物的受体(RAGE)的相互作用引发炎症的恶性循环；RAGE的激活诱导多种炎性通路，其最终导致细胞死亡。
[0319] 一些但不是全部的多酚已经显示出抑制AGE蛋白的形成。因此测定了含有降低的鞣质水平的脱色局部麝香葡萄溶剂提取物(TME)是否保留了抑制蛋白质糖基化的能力。因此，将TME的作用与原始/口服麝香葡萄提取物(OME)的作用进行比较。AGE形成使用如Farrar等,BioFactors 30:193-200,2007中所述的标准荧光测定法的修改版来测量。简而言之，将血清白蛋白与果糖在磷酸盐缓冲液中于约37℃温育约72小时，并在约370/440激发/发射波长下测量荧光强度。将各种浓度的麝香葡萄提取物(标准化为μg多酚/ml缓冲液)与对照媒介物进行比较，并且结果以对照(媒介物)样品中产生的AGE形成的抑制百分比表示。
[0320] 如图31所示，OME和TME两者均以剂量相关的方式表现出抑制AGE形成的优异活性(功效)。对于这两种提取物，AGE形成的最大抑制在约15至约20μg多酚/ml浓度下达到约95％至约100％。然而，如抑制约50％AGE形成所需的浓度(IC50)所示，OME比TME更有效。OME的IC50值为约0.65μg多酚/ml，而TME的IC50值为约3.94μg多酚/ml。这表明虽然鞣质促进了AGE抑制活性，但保留在TME中的其它麝香葡萄多酚在抑制蛋白质糖基化方面与在OME中存在的那些同样有效。
[0321] 实施例2.使用包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的组合物的皮肤护理方案和方法的功效研究。
[0322] 进行了一项针对人类受试者的研究，以评估五种组分用于皮肤护理的功效，其中每种组分均包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合。该研究涉及57名妇女(28名白人妇女和29名亚裔妇女)，年龄范围为约30岁至约65岁。每个受试者均遵循皮肤护理治疗方案，使用洗面奶、爽肤水垫、精华素、日间保湿霜和夜间保湿霜皮肤护理产品，其包含如表5A和5B中所述的成分范围，持续共十二周。在研究开始时(即第0周)，以及在1周、2周、4周、8周和12周后，由经过培训的皮肤分级人员对每个受试者的皮肤健康进行评估。
[0323] 表5A.五种组分的组合物中使用的成分范围。1
[0324]
[0325] 1所示百分比是组合物总重量的重量百分比。
[0326] 2 TME是所公开的脱色的局部麝香葡萄溶剂提取物。
[0327] 3以棕榈酸视黄酯形式。
[0328] 4以抗坏血酸磷酸镁形式。
[0329] 5以生育酚乙酸酯形式。
[0330] 表5B.五种组分的组合物中使用的额外成分范围。1
[0331]
[0332] 1所示百分比是组合物总重量的重量百分比。
[0333] 2TME是所公开的脱色的局部麝香葡萄溶剂提取物。
[0334] 3以棕榈酸视黄酯形式。
[0335] 4以抗坏血酸磷酸镁形式。
[0336] 5以生育酚乙酸酯形式。
[0337] 在研究中，每个受试者在早晨使用洗面奶、精华素和日间保湿霜产品，而在晚上使用洗面奶、爽肤水垫、精华素和夜间保湿霜产品。在十二周结束时，每个受试者关于他们感知的皮肤健康填写一份自我评估问卷。在十二周的研究期间，受试者对该方案的耐受性良好。
[0338] 经过培训的人员根据下表6中列出的十个分级参数评估受试者的皮肤健康。使用仪器评估四个皮肤健康参数：黑色素水平、回弹性、弹性和皮肤粗糙度。研究结果表明，某些皮肤健康参数在短短一周的治疗中显示出统计学显著改善。
[0339] 表6.确定皮肤健康所评估的参数。
[0340]分级参数 仪器参数
脸颊皱纹 色度仪b：黑色素产生
前额皱纹 皮肤弹性测定仪R2：回弹性
眶周皱纹 皮肤弹性测定仪R7：生物弹性和紧致度
皮肤质地 VisioScan R1：粗糙度深度
毛孔大小 VISIA图像：眼下和鱼尾纹区域中的皱纹
整体色素沉着过度
肤色均匀度
光泽度
紧致度
下垂
脸颊皱纹 色度仪b：黑色素产生
前额皱纹 皮肤弹性测定仪R2：回弹性
眶周皱纹 皮肤弹性测定仪R7：生物弹性和紧致度
皮肤质地 VisioScan R1：粗糙度深度
毛孔大小 VISIA图像：眼下和鱼尾纹区域中的皱纹
整体色素沉着过度
肤色均匀度
光泽度
紧致度
下垂
[0341] 关于粗糙度的仪器结果表明，所有皮肤粗糙度参数(粗糙度深度、最大粗糙度、平均粗糙度和皮肤光滑度)在两周治疗后均显示出统计学显著改善，其持续改善直至研究结束(12周)，显示更光滑的皮肤。皱纹图像分析显示，在四周治疗后，眼下区域(皱纹计数、长度、宽度、面积和深度)有统计学显著改善并持续至研究结束(十二周)。用皮肤弹性测定仪获得的数据显示，在八周治疗后皮肤可延展性(紧致)有统计学显著改善。
[0342] 分级参数结果表明，在一或两周的治疗后，许多参数开始出现统计学显著改善，并持续至研究结束(十二周)。皮肤质地、光泽度和总体健康参数在一周内显示出改善。在两周治疗后，整体面部皱纹、眶周皱纹、前额皱纹、脸颊皱纹、毛孔大小、肤色(颜色)均匀度、紧致度和粗糙度参数得到改善。在四周治疗后，整体色素沉着过度参数得到改善。在八周治疗后，下垂和紧致度参数得到改善。在十二周治疗后，眼下和鱼尾纹参数得到改善。功效研究的结果总结在下表7中。
[0343] 表7.显示统计学显著改善的参数对比治疗时间。
[0344]参数 达到第一次显著改善的时间
皮肤质地(目测光滑度) 1周
光泽度 1周
总体外观/健康整体面容 1周
整体面部皱纹(全脸) 2周
眶周皱纹 2周
前额皱纹 2周
脸颊皱纹 2周
毛孔大小 2周
肤色(颜色)均匀度 2周
紧致度 2周
粗糙度(光滑度提高) 2周
整体色素沉着过度 4周
下垂 8周
紧致度(可延展性) 8周(根据皮肤弹性测定仪)*
眼下区域皱纹 12周(根据VISIA)
鱼尾纹区域皱纹 12周(根据VISIA)
皮肤质地(目测光滑度) 1周
光泽度 1周
总体外观/健康整体面容 1周
整体面部皱纹(全脸) 2周
眶周皱纹 2周
前额皱纹 2周
脸颊皱纹 2周
毛孔大小 2周
肤色(颜色)均匀度 2周
紧致度 2周
粗糙度(光滑度提高) 2周
整体色素沉着过度 4周
下垂 8周
紧致度(可延展性) 8周(根据皮肤弹性测定仪)*
眼下区域皱纹 12周(根据VISIA)
鱼尾纹区域皱纹 12周(根据VISIA)
[0345] *紧致度(可延展性)仅在8周治疗后而非12周后显示出统计学显著改善。
[0346] 在图1-19中示出了在12周研究期间的各个时间的各种皮肤参数的数据。受试者自我评估问卷的结果如图20所示。
[0347] 如图1所示，在约12周的治疗后，有56名受试者的眼下皱纹的数量(计数)、长度、宽度、总大小(面积)和深度得到改善。具体来说，约64％的受试者显示皱纹计数降低；约68％的受试者显示皱纹长度降低，约61％的受试者显示皱纹宽度降低，约66％的受试者显示皱纹面积降低，以及约68％的受试者显示皱纹深度降低。
[0348] 如图2所示，示出了图1的56名受试者在约12周治疗后皮肤健康改善的百分比幅度，所述改善涉及受试者眼下皱纹的数量(计数)、长度、宽度、总大小(面积)和深度。具体来说，皱纹计数降低的幅度为约9％(p＝0.01)；皱纹长度降低的幅度为约15％(p<0.001)；皱纹宽度降低的幅度为约8％(p＝0.043)；皱纹面积降低的幅度为约15％(p<0.001)；以及皱纹深度降低的幅度为约8％(p＝0.04)。
[0349] 如图3所示，在约12周的治疗后，56名受试者的鱼尾纹区域中皱纹的数量(计数)、长度、宽度、总大小(面积)和深度得到改善。具体来说，约57％的受试者显示皱纹计数降低；约68％的受试者显示皱纹长度降低，约52％的受试者显示皱纹宽度降低，约63％的受试者显示皱纹面积降低，以及约45％的受试者显示皱纹深度降低。
[0350] 如图4所示，示出了图3的56名受试者在约12周治疗后皮肤健康改善的百分比幅度，所述改善涉及受试者的鱼尾纹区域中皱纹的数量(计数)、长度、宽度、总大小(面积)和深度。具体来说，皱纹计数降低的幅度为约6％；皱纹长度降低的幅度为约7％(p＝0.027)；皱纹宽度降低的幅度为约5％；皱纹面积降低的幅度为约5％；以及皱纹深度降低的幅度为约1％。
[0351] 如图5所示，在约12周的治疗后，57名受试者的粗糙度深度、最大粗糙度、平均粗糙度和皮肤光滑度得到改善。具体来说，约93％的受试者显示粗糙度深度降低；约91％的受试者显示最大粗糙度降低，约88％的受试者显示平均粗糙度降低，以及约81％的受试者显示皮肤光滑度增加。
[0352] 如图6所示，示出了在约12周的治疗后图5的57名受试者中皮肤健康改善的百分比幅度，所述改善涉及受试者中的粗糙度深度、最大粗糙度、平均粗糙度和皮肤光滑度。具体来说，粗糙度深度降低的幅度为约27％(p<0.001)；最大粗糙度降低的幅度为约26％(p<0.001)；平均粗糙度降低的幅度为约28％(p<0.001)；以及皮肤光滑度增加的幅度为约26％(p<0.001)。
[0353] 如图7所示，研究中52名受试者中约69％在约8周治疗后展现出皮肤紧致度的改善，如用皮肤弹性测定仪所测，并且这些受试者的皮肤紧致度改善幅度为约14％(p＝0.002)。
[0354] 在图8的左图中，在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对整体面部皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比显示在左图。数据显示，约1周后，整体面部分析中约5％的受试者显示总体面部皱纹改善，约2周后约18％显示改善，约4周后约44％显示改善，约8周后约76％显示改善，以及约12周后约88％显示改善。
[0355] 图8的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对整体面部皱纹进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约2％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约5％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约9％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约12％(p<0.001)。
[0356] 在图9的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对眶周皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约9％的受试者显示眶周皱纹改善，约2周后约27％显示改善，约4周后约49％显示改善，约8周后约78％显示改善，以及约12周后约90％显示改善。
[0357] 图9的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对眶周皱纹进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约3％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约6％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约10％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约13％(p<0.001)。
[0358] 在图10的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对前额皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约9％的受试者显示前额皱纹改善，约2周后约38％显示改善，约4周后约67％显示改善，约8周后约87％显示改善，以及约12周后约88％显示改善。
[0359] 图10的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对前额皱纹进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约4％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约7％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约11％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约12％(p<0.001)。
[0360] 在图11的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对脸颊皱纹进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约5％的受试者显示脸颊皱纹改善，约2周后约20％显示改善，约4周后约51％显示改善，约8周后约82％显示改善，以及约12周后约86％显示改善。
[0361] 图11的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对脸颊皱纹进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约2％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约6％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约14％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约16％(p<0.001)。
[0362] 在图12的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对总体健康皮肤外观进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约14％的受试者显示总体健康皮肤外观改善，约2周后约46％显示改善，约4周后约78％显示改善，约8周后约93％显示改善，以及约12周后约93％显示改善。
[0363] 图12的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对总体健康皮肤外观进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比为约1％(p＝0.008)；约2周后，平均改善百分比为约4％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约8％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约12％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约14％(p<0.001)。
[0364] 在图13的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤质地进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约28％的受试者显示皮肤质地改善，约2周后约55％显示改善，约4周后约82％显示改善，约8周后约91％显示改善，以及约12周后约98％显示改善。
[0365] 图13的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤质地进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比为约3％(p<0.001)；约2周后，平均改善百分比为约6％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约10％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约14％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约17％(p<0.001)。
[0366] 在图14的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤光泽度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约46％的受试者显示皮肤光泽度改善，约2周后约66％显示改善，约4周后约87％显示改善，约
8周后约94％显示改善，以及约12周后约95％显示改善。
8周后约94％显示改善，以及约12周后约95％显示改善。
[0367] 图14的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤光泽度进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比为约4％(p<0.001)；约2周后，平均改善百分比为约6％(p<0.001)；约4周后，平均改善百分比为约10％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约12％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约14％(p<0.001)。
[0368] 在图15的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过专业分级人员对皮肤紧致度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，没有受试者显示皮肤紧致度改善，约2周后约13％显示改善，约4周后约38％显示改善，约8周后约82％显示改善，以及约12周后约88％显示改善。
[0369] 图15的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤紧致度进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约1％(p<0.016)；约4周后，平均改善百分比为约4％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约9％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约10％(p<0.001)。
[0370] 在图16的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤下垂进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周和约2周后，没有受试者显示皮肤下垂改善，约4周后约9％显示改善，约8周后约57％显示改善，以及约12周后约75％显示改善。
[0371] 图16的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对皮肤下垂进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周和约2周后，平均改善百分比在统计上不显著；约4周后，平均改善百分比为约1％(在统计上不显著)；约8周后，平均改善百分比为约6％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约8％(p<0.001)。
[0372] 在图17的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对肤色均匀度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。该参数说明了皮肤不均匀和变色的差异。数据显示，约1周后，没有受试者显示肤色均匀度改善，约2周后，约20％显示改善，约4周后约45％显示改善，约8周后约63％显示改善，以及约12周后约70％显示改善。
[0373] 图17的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对肤色均匀度进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约2％(p＝0.022)；约4周后，平均改善百分比为约5％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约7％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约8％(p<0.001)。
[0374] 在图18的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对整体面部毛孔大小进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。数据显示，约1周后，约2％的受试者显示毛孔大小改善，约2周后约11％显示改善，约4周后约31％显示改善，约8周后约44％显示改善，以及约12周后约56％显示改善。
[0375] 图18的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对整体面部毛孔大小进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周后，平均改善百分比在统计上不显著；约2周后，平均改善百分比为约1％(p＝0.031)；约4周后，平均改善百分比为约4％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约5％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约7％(p<0.001)。
[0376] 在图19的左图中，示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对色素沉着过度进行分析所测得展现出皮肤健康改善的受试者的百分比。该参数说明了强烈、剧烈和/或眼睛可检测到的深色或杂色的皮肤斑点的差异。数据显示，约1周后，没有受试者显示色素沉着过度改善，约2周后约7％显示改善，约4周后约26％显示改善，约8周后约44％显示改善，以及约12周后约56％显示改善。
[0377] 图19的右图示出了在约1周、约2周、约4周、约8周和约12周治疗后通过对色素沉着过度进行分析所测得的受试者皮肤健康的平均改善百分比。数据显示，约1周和约2周后，平均改善百分比在统计上不显著；约4周后，平均改善百分比为约3％(p<0.001)；约8周后，平均改善百分比为约5％(p<0.001)；以及约12周后，平均改善百分比为约7％(p<0.001)。
[0378] 图20中的图表示出了在遵循研究治疗约12周后，57名受试者中在13个特定参数方面感到皮肤健康改善的百分比(所有参数都具有p<0.001)。数据显示，如13个参数所评估，大量受试者感到皮肤健康得到改善。具体来说，约93％的受试者感到其皮肤质地得到改善，约79％的受试者感到其肤色得到改善，约75％的受试者感到其毛孔大小得到改善，约72％的受试者感到其皮肤色素沉着过度得到改善，约86％的受试者感到其皮肤光泽度得到改善，约84％的受试者感到其细纹得到改善，约81％的受试者感到其皮肤皱纹得到改善，约93％的受试者感到其总体皮肤健康得到改善，约86％的受试者感到其皮肤紧致度得到改善，约74％的受试者感到其皮肤下垂得到改善，约91％的受试者感到其皮肤水分含量得到改善，约81％的受试者因为其皮肤看起来更年轻而感到其皮肤外观得到改善，以及约67％的受试者因为他们看起来比其自然年龄年轻约一岁以上而感到其皮肤得到改善。
[0379] 因此，所公开的皮肤护理方案和方法通过向皮肤上施加五种组分(爽肤水、日间保湿霜、夜间保湿霜、洗面奶和精华素)来改善皮肤的外观，所述组分各自包括包含脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物、β-葡聚糖和葡萄籽提取物的组合物，当脱色的麝香葡萄果渣溶剂提取物的浓度为约0.001重量％至约1.0重量％，当β-葡聚糖的浓度为约0.0001重量％至约1.0重量％并且当葡萄籽提取物的浓度为约0.00001重量％至约0.01重量％时，所述皮肤护理方案和方法能够显著改善皮肤的外观，如通过皮肤健康的各种参数所测量。这五种组分都包含具有低水平缩合鞣质的组合物。
[0380] 实施例3.显示组合物有效性的DNA微阵列研究
[0381] 金属硫蛋白(MT)基因表达受多种刺激(例如，金属暴露或氧化应激)诱导，并且已知在体内和体外与多种金属(例如，铅、汞、砷、铝、镉等)结合，作为金属的解毒手段，保护细胞免受因暴露于过量有毒金属而造成的损伤。暴露于城市尘埃中时，金属硫蛋白基因表达有所增加。所公开的皮肤护理方法通过与金属例如铅和铝的结合性能而显示对于人皮肤角质形成细胞抵抗空气中的金属的成膜/屏蔽/保护作用，因此通过阻止重金属直接接触皮肤或直接渗透皮肤而对皮肤健康有益。
[0382] 局部麝香葡萄提取物(TME)组合物在与城市尘埃共同处理期间降低了人皮肤角质形成细胞中MT基因的表达，而MT基因表达通过仅暴露于城市尘埃1649b(无TME)得到增强。结果表明，城市尘埃中的金属触发了MT基因表达的增加，但TME组合物通过阻止金属与皮肤角质形成细胞的直接接触而降低了MT基因的表达。所公开的皮肤护理方法提供保护作用以有益于皮肤健康并防止由空气中的金属引起的有害作用。不受理论的束缚，其效果可能是降低金属与皮肤的直接接触，特别是当将所述组合物被施用于皮肤时，例如每天在暴露于污染的空气之前。用TME处理后，城市尘埃1649b(Signa)中存在的水溶性铅和铝物质减少。
[0383] DNA微阵列可用于筛选不同基因表达的变化。将培养的人角质形成细胞单独暴露于城市尘埃或暴露于与测试物质组合的城市尘埃。测试物质为TME加7种活性物质(β-葡聚糖、葡萄籽提取物、泛醇、维生素A、维生素C、维生素E和超氧化物歧化酶)。
[0384] 24小时温育期后，从细胞中提取总RNA，然后通过一系列酶驱动的扩增反应生成mRNA的反义拷贝，其适合用于阵列杂交。用荧光标记RNA，并与DNA微阵列杂交过夜。杂交反应后，使用阵列扫描仪扫描阵列以确定基因表达的变化。所述方法公开如下：
[0385] 人角质形成细胞培养：将人表皮角质形成细胞接种到培养瓶中，并在37±2℃和5±1％CO2下生长。达到汇合后，将细胞用仅补充有城市尘埃或补充有城市尘埃与测试物质(0.1％局部麝香葡萄提取物(TME)+YOUTH复合物中的7种其它活性物质[1.呈棕榈酸视黄酯形式的维生素A与生育酚：0.0005％；2.呈生育酚乙酸酯形式的维生素E：0.01％；3.β-葡聚糖：0.005％；4.葡萄籽提取物：0.0002％；5.呈抗坏血酸磷酸镁形式的维生素C：0.0001％；6.维生素B5(泛醇50％)：0.01％；7.超氧化物歧化酶：0.0001％])的组合的培养基处理。将另一烧瓶的细胞仅用培养基处理并作为未处理的对照。将细胞在37±2℃和5±1％CO2下温育24小时。在温育期结束时，经由抽吸除去培养基，并用冷的磷酸盐缓冲盐水洗涤细胞一次。除去洗涤液后，通过加入700μl硫氰酸胍裂解液裂解细胞。
[0386] RNA分离(Ambion RNAQUEOUSTM试剂盒)：向上述制备的细胞裂解物中，加入等体积的64％乙醇，摇动烧瓶以混合内含物。合并后，将至多700μl的混合物转移到玻璃纤维滤筒中，将滤筒装入1.5ml的收集管中，并将滤筒以14,000RPM离心1分钟。弃去流过物，并将任何剩余的混合物装载到滤筒中，并重复离心过程，直到所有的混合物均已处理。通过随后将700μl的洗涤溶液1(1次)和500μl的洗涤溶液2(2次)施加到滤筒并在14,000RPM下离心1分钟以使每个洗涤物通过滤筒，将过滤器洗涤以从与玻璃纤维结合的RNA中去除任何残留的细胞碎片。每次洗涤后，弃去流过物。在最终洗涤之后，在没有洗涤溶液的情况下进行最后一次离心以除去滤筒中的任何残留洗涤溶液。通过将30μl Tris-EDT A缓冲液(10mM Tris-HCl，1mM EDT A，预热至70-80℃)施加到滤筒上并在新收集管中以14,000RPM将滤筒离心一分钟，洗脱与滤筒内玻璃纤维结合的RNA。对于由细胞裂解物和小组织制备的样品，用另外的30μl预热TE缓冲液重复洗脱过程。对于由较大组织(即全厚度组织)制备的样品，将洗脱过程再重复两次。洗脱RNA后，使用RIBOGREENTM测定法定量其浓度。
[0387] RNA浓度测定法(分子探针(RIBOGREENTM测定法)：RIBOGREENTM试剂以DMSO储备溶液形式提供。试剂在使用前于TE缓冲液中稀释2000倍。RNA测定法需要200μl稀释的RIBOGREENTM试剂(对于每个待测样品)和1ml试剂(对于标准物)。制备后，将稀释的试剂避光储存。通过将源自大肠杆菌的纯化核糖体RNA稀释至以下浓度来制备一系列RNA标准物：2μg/ml、1μg/ml、200ng/ml、40ng/ml和0ng/ml(空白)。在测定之前，将上述制备的RNA样品在TE缓冲液中稀释1000倍。对于RNA测定，将100μl的稀释样品或标准物转移到96孔板的孔中。一式两份地进行样品和标准物的测定。将样品/标准物加入板中之后，将100μl稀释的TMRIBOGREEN 测定试剂加入到孔中，并且将板轻轻混合并使其避光温育5-10分钟。该温育后，用荧光计使用480nm的激发波长和525nm的发射波长读取板。
[0388] mRNA扩增(Ambion MESSAGEAMPTMaRNA试剂盒)：
[0389] 第一链cDNA合成：为了开始第一链合成，将每个样品5μg的总RNA加入到600μl PCR管中，并用DEPC H2O将管中的液体总体积调整为12μl。向每个管中加入1μl的T7 Oligo(dT)引物，并将管在70±2℃下温育10分钟以使RNA变性，然后置于冰上以使引物黏接至mRNA的poly A末端。冷却后，将2μl 10x第一链缓冲液、1μl RNA酶抑制剂和4μl dNTP混合物加入到每个管中，并将管置于42℃。一旦管被加热，就加入1μl逆转录酶，并将管恢复至42±2℃持续2小时。在两个小时结束时，将管短暂离心以收集管底部的所有流体，然后将其置于冰上。
[0390] 第二链合成和cDNA纯化：为了合成cDNA的第二链，将以下各项加入到上述管中(按此顺序)：63μl DEPC H2O，10μl 10x第二链缓冲液，4μl dNTP混合物，2μl DNA聚合酶和1μl RNA酶H。将管混合，然后在16±2℃下温育2小时。在2小时温育即将结束时，将足量的DEPCH2O升温至50±2℃，并用50μl cDNA结合缓冲液(每个样品一个滤筒)平衡cDNA纯化滤筒至少5分钟。样品温育结束后，将250μl cDNA结合缓冲液加入到每个管中并充分混合。将PCR管的内含物转移至cDNA纯化滤筒。将滤筒放置在收集管中并以10,000RPM离心1分钟。弃去流过物，并将650μl的cDNA洗涤溶液加入到滤筒中。再次对滤筒进行离心并弃去流过物，然后最后离心一次，以确保洗涤缓冲液已完全从过滤器中排空。通过将10μl预热的DEPC H2O施加于过滤器并在新的收集管中以10,000RPM的速度将过滤器离心1分钟来洗脱cDNA。再进行一次该洗脱，得到总体积为16-18μl的cDNA溶液。
[0391] 体外转录以合成aRNA和aRNA纯化：通过向cDNA溶液中添加以下试剂开始体外转录：3μl的50mM aaUTP，12μl的ATP/CTP/GTP混合物(25mM)，3μl的50mM UTP，4μl的10x反应缓冲液和4μl的T7酶混合物。将管混合，然后在37±2℃下温育6-14小时。在温育即将结束时，将足够体积的洗脱溶液升温至50-60℃，并用100μl aRNA结合缓冲液平衡aRNA滤筒持续至少5分钟。在温育期结束时，将350μl aRNA结合缓冲液加入到样品管中并充分混合。每个管中还添加了另外250μl的无水乙醇。然后将混合物转移到aRNA滤筒中；将滤筒插入收集管中并以10,000RPM离心1分钟。弃去流过物，将650μl aRNA洗涤缓冲液加入到滤筒中，然后以10,000RPM离心1分钟。弃去流过物后，将滤筒最后离心一次，以去除所有痕量的洗涤缓冲液。然后将滤筒转移到新的收集管中，将25μl预热的洗脱溶液加入到滤筒中。将滤筒在室温下温育2分钟，然后通过以10,000RPM离心1分钟来洗脱aRNA。再进行一次该洗脱，得到总体积为45-50μl的aRNA溶液。通过上述RIBOGREENTM测定法确定aRNA的最终浓度。
[0392] aRNA：染料偶联反应：对于染料偶联反应，将2μg aRNA真空干燥并悬浮在4.5μl偶联缓冲液中。然后加入5.5μl染料混合物(Cy3或Cy5)，并将混合物在室温下在黑暗中温育30分钟。该温育后，加入2.5μl的4M羟胺，并将混合物在室温下在黑暗中再温育15分钟。
[0393] 经标记的aRNA纯化：为了纯化经标记的aRNA，将microconYM-30过滤柱插入收集管中，并填充400μl TE缓冲液。合并Cy3和Cy5探针(各12.5μl)，然后将其加入到microcon过滤器中，并与TE缓冲液充分混合。将过滤器以12,000RPM离心8分钟，并弃去流过物。然后将柱用400μl TE缓冲液洗涤两次，每次都弃去流过物。最后一次洗涤后，将过滤柱倒置，放入新的收集管中，并以12,000RPM离心2分钟以收集探针。
[0394] 微阵列杂交和洗涤(Agilent Technologies微阵列)：为了杂交，将11μl的10x对照靶RNA(由Agilent Technologies原位杂交试剂盒提供)与30μl DEPC水和2.2μl 25x Agilent破碎缓冲液混合。将该混合物在杂交炉中于65℃温育约30分钟。在温育结束后，添加55μl Agilent杂交缓冲液以及上文制备的荧光aRNA探针。Agilent 杂交室通过将玻璃垫片载玻片插入到腔室的下半部分来进行准备。在温育结束时，将杂交混合物(约110μl)施加到玻璃垫片载玻片上，并将Agilent微阵列芯片面朝下放置在该垫片的顶部，以使得杂交溶液夹在玻璃垫片载玻片与芯片的微阵列面之间。然后连接腔室的上半部分，并拧紧连接的指旋螺钉。确认腔室中有良好的气泡形成后，将其放入杂交炉中持续约17小时(65℃并以4RPM旋转)。在杂交期结束时，将微阵列/玻璃垫片从 腔室中取
出，并放入50ml的洗涤溶液1(室温，6x SSC，0.005％Triton X-102)中。垫片从微阵列上脱落后，将阵列转移到磁力搅拌板上的300ml新鲜洗涤溶液1中。洗涤阵列的同时，将溶液以中等速度混合10分钟，然后转移到300ml洗涤溶液2(0.1xSSX，0.005％Triton X-102，4℃)持续5分钟。最后一次洗涤后，将阵列以500RPM离心5分钟以使其干燥。
出，并放入50ml的洗涤溶液1(室温，6x SSC，0.005％Triton X-102)中。垫片从微阵列上脱落后，将阵列转移到磁力搅拌板上的300ml新鲜洗涤溶液1中。洗涤阵列的同时，将溶液以中等速度混合10分钟，然后转移到300ml洗涤溶液2(0.1xSSX，0.005％Triton X-102，4℃)持续5分钟。最后一次洗涤后，将阵列以500RPM离心5分钟以使其干燥。
[0395] 微阵列扫描和分析：用Axon 41 00A扫描仪扫描微阵列，扫描分辨率设置为10μm，并用 Pro软件进行分析。在初始扫描期间，调整扫描仪的PMT增益，以使得cy5/cy3图像计数比在0.9至1.1之间。
[0396] 计算
[0397] RNA RIBOGREENTM测定法：为了得出RIBOGREENTM测定法的标准曲线，绘制了标准物的相对荧光单位与已知RNA浓度(μg/ml)的关系曲线，并进行回归分析以建立最适合这些数据点的Une。测试物质和未处理样品的平均RFU值用于估算每个样品中存在的RNA量。
[0398] 微阵列计算：基因表达水平与微阵列上所探测的基因标志物的荧光强度有关。由于在制造Cy3和Cy5探针时可能存在标记效率差异，因此在评估基因表达变化之前，将两种相应染料之间的荧光测量值进行了归一化。对微阵列的荧光强度进行整体归一化。用校正因子对两种染料的总荧光信号进行归一化，该校正因子将使两种染料的总强度之比等于1。
[0399] 用所公开的组合物和城市尘埃处理角质形成细胞，或者不对其进行处理而仅暴露于城市尘埃。结果如下所示：
[0400]
[0401] 所有 寄存编号已通过引用并入，于2018年4月30日可用。
[0402] 这些结果表明，当使用具有额外活性物质(见上文)的TME时，金属硫蛋白基因表达降低。这证明所公开的组合物保护皮肤细胞免于金属暴露，例如免受含有重金属的城市尘埃的侵害。结果表明所述组合物对皮肤细胞的保护作用。
[0403] 考虑到可以应用所公开的发明原理的许多可能的实施方式，应当认识到，所示的实施方式仅仅是本发明的优选示例，而不应被认为是对本发明范围的限制。相反，本发明的范围由权利要求书限定。因此，我们要求保护所有落入这些权利要求的范围和精神内的发明。
| 标题 | 发布/更新时间 | 阅读量 |
|---|---|---|
| 一种精华乳及其生产工艺 | 2020-05-11 | 739 |
| 改善发育迟缓的营养组合物及其制备方法 | 2020-05-11 | 836 |
| 一种焕白霜 | 2020-05-08 | 490 |
| 促进血钙入骨的维生素K2（MK-7）软胶囊及制备方法 | 2020-05-11 | 368 |
| 一种负离子抑菌组合物、制备方法以及应用 | 2020-05-11 | 298 |
| 一种具有美白淡斑以及净化平滑肌肤的护肤油及制备方法 | 2020-05-13 | 871 |
| 一种建筑装饰用环保材料及其制备方法 | 2020-05-11 | 138 |
| 化妆品 | 2020-05-12 | 721 |
| 一种双剂型保湿精华及其制备方法 | 2020-05-13 | 458 |
| 一种提高免疫力的儿童配方奶粉及其制备方法 | 2020-05-08 | 695 |
高效检索全球专利专利汇是专利免费检索,专利查询,专利分析-国家发明专利查询检索分析平台，是提供专利分析，专利查询，专利检索等数据服务功能的知识产权数据服务商。
我们的产品包含105个国家的1.26亿组数据，免费查、免费专利分析。
分析报告
专利汇分析报告产品可以对行业情报数据进行梳理分析，涉及维度包括行业专利基本状况分析、地域分析、技术分析、发明人分析、申请人分析、专利权人分析、失效分析、核心专利分析、法律分析、研发重点分析、企业专利处境分析、技术处境分析、专利寿命分析、企业定位分析、引证分析等超过60个分析角度，系统通过AI智能系统对图表进行解读，只需1分钟，一键生成行业专利分析报告。
抗坏血酸棕榈酸酯热门专利
QQ群二维码
意见反馈
意见反馈