一种柿树组织培养培养基
阅读：508发布：2024-02-17
专利汇可以提供一种柿树组织培养培养基专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种柿树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基。增殖和生根培养通过添加合适量的龙眼汁，能促进柿树不定芽的生长，繁殖系数高，且在增殖的同时诱导生根，缩短培育周期。生根率和移栽成活率高，遗传 稳定性 好。，下面是一种柿树组织培养培养基专利的具体信息内容。
1.一种柿树组织培养的培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其特征在于：
每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙440mg/L、七水硫酸镁
370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；
(2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠
0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
(3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L；
(4)植物生长调节剂：6-苄基腺嘌呤0.3-1.0mg/L、萘乙酸0.1-0.2mg/L、龙眼汁
0.3-0.5mg/L；
余量为蒸馏水；
每升(L)生根培养基的组分及各组分的含量如下：
(1)大量元素：硝酸钾475mg/L、硝酸铵412.5mg/L、二水氯化钙110mg/L、七水硫酸镁
92.5mg/L、磷酸二氢钾41mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L；
(2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠
0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
(3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/；
(4)植物生长调节剂：ABT6号0.4-0.6mg/L、吲哚乙酸0.1-0.3mg/L、龙眼汁
0.3-0.5mg/L；
余量为蒸馏水；
所述龙眼汁为新鲜龙眼去除枝叶、病虫果、烂果、腐果、未成熟果，清洗、去除果皮果核，果肉压榨，得到的果汁，灭菌得到。
一种柿树组织培养培养基
技术领域
[0001] 本发明涉及组织培养基，尤其涉及一种柿树组织培养培养基。
背景技术
[0002] 柿子是柿树科浆果类温带落叶果树，原产我国，在我国已有一千多年的种植历史。目前我国种植面积最大，而且柿果产量最多。柿子柔嫩多汁、甘甜爽口、营养丰富。有甜柿和涩柿两种，涩柿不可直接食用，需要经过脱涩处理，甜柿可以鲜食。柿子的营养成分十分丰富，含有丰富的蔗糖、葡萄糖、果糖、蛋白质、胡萝卜素、维生素C、瓜氨酸、碘、钙、磷、铁。
新鲜柿子含碘很高，能够防治地方性甲状腺肿大。柿子性味性寒，味甘涩，归经肺经，有润肺生津，清热止血，涩肠健脾，解酒降压等功效。柿子含有大量的单宁。单宁又叫鞣酸，是一种多酚的聚合物，是一种由儿茶酚等聚合而成多酚聚合物，含有许多邻位的酚羟基，因而有许多功能。Seguin于1796年定义了一个专门术语Tannin(单宁)来表示植物水浸提物中能使生皮转化为革的化学成分。后来通过研究逐渐认识到，植物浸提物中能产生鞣制作用的是一系列多酚类化合物，其有效成分的分子量在500-3000之间。单宁又称鞣酸，淡黄色至浅棕色无晶粉末，属于多元苯酚的复杂化合物。将植物单宁又改称为植物多酚(plant polyphonies)，即存在于柿果使其呈涩味的酚类物质称为柿单宁(kaki tannin)。柿单宁具有防晒保湿、抗皱美容、防腐杀菌、预防心血管疾病、吸附金属离子以及和蛋白质相互作用等诸多功能。
新鲜柿子含碘很高，能够防治地方性甲状腺肿大。柿子性味性寒，味甘涩，归经肺经，有润肺生津，清热止血，涩肠健脾，解酒降压等功效。柿子含有大量的单宁。单宁又叫鞣酸，是一种多酚的聚合物，是一种由儿茶酚等聚合而成多酚聚合物，含有许多邻位的酚羟基，因而有许多功能。Seguin于1796年定义了一个专门术语Tannin(单宁)来表示植物水浸提物中能使生皮转化为革的化学成分。后来通过研究逐渐认识到，植物浸提物中能产生鞣制作用的是一系列多酚类化合物，其有效成分的分子量在500-3000之间。单宁又称鞣酸，淡黄色至浅棕色无晶粉末，属于多元苯酚的复杂化合物。将植物单宁又改称为植物多酚(plant polyphonies)，即存在于柿果使其呈涩味的酚类物质称为柿单宁(kaki tannin)。柿单宁具有防晒保湿、抗皱美容、防腐杀菌、预防心血管疾病、吸附金属离子以及和蛋白质相互作用等诸多功能。
[0003] 目前柿树繁殖育苗主要采用以下几种方法：(1)分株繁殖：3-4月挖取母株支根上萌发的幼株进行移植，此时幼株叶片尚未展开，但长有须根，挖取时要保证幼株有约10cm长的支根和较完整的须根；(2)分根繁殖：春季气温回升时，在支根上出现许多突起的白色不定芽，把这种支根挖出，按长10-15cm切成根段，斜插或平埋于沙床中，淋水保湿，半个月后根段即可长成幼株；(3)种子繁殖：果实成熟呈橙红色或红色时采收，取出种子用沙覆盖保存，或播入苗床，行距20cm，株距5-7cm，播后除草。种子长出2片叶后，移入营养袋育苗，营养土用腐熟的农家肥与泥土、草皮灰混合而成，苗期淋水和施浓度稍淡的肥料；(4)无性繁殖：主要是用长穗一茎带两节间一叶长约8-lOcm，土壤选用石灰消毒，再铺心土、用生根剂浸泡的育苗方法。
[0004] 目前采用繁殖育苗方法有一定的效果，但是成活率等不稳定，这就大大制约了柿树的繁殖，成为加快开发利用柿子的瓶颈。
发明内容
[0005] 本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种柿树组织培养培养基，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：
[0006] 每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下：
[0007] (1)大量元素：硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙440mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；
[0008] (2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
[0009] (3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L；
[0011] 余量为蒸馏水；
[0012] 每升(L)生根培养基的组分及各组分的含量如下：
[0013] (1)大量元素：硝酸钾475mg/L、硝酸铵412.5mg/L、二水氯化钙110mg/L、七水硫酸镁92.5mg/L、磷酸二氢钾42.5mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L；
[0014] (2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
[0015] (3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/；
[0016] (4)植物生长调节剂：ABT6号0.4-0.6mg/L、吲哚乙酸0.1-0.3mg/L、龙眼汁0.3-0.5mg/L；
[0017] 余量为蒸馏水。
[0019] 本发明柿树组织培养基中的继代、生根培养基的配制方法为：
[0020] 1母液的配制与保存
[0021] 1.1为便于取样，宜先配制各种母液，分为大量元素母液、微量元素母液、有机物母液和各种植物生长调节剂母液。蔗糖、琼脂不宜配成母液，需要时直接称样；
[0022] 1.2大量元素母液浓度成100倍溶液，有机物、微量元素母液配成200倍溶液，植物生长调节试剂母液的浓度配成1mg/ml；
[0023] 1.3母液选用无菌的蒸馏水、去离子水或超纯水配制，大量生产时用煮沸过的水；
[0024] 1.4配制大量元素母液时，每个组分应单独溶解，后按氮、钙、镁、磷的顺序逐个混合，否则容易引起沉淀；
[0026] 1.6母液配制后应及时使用，贮存时间不宜超过1个月；
[0028] 2培养基的配制
[0029] 2.1依照培养基配方，按比例量取各种母液；
[0030] 2.2在定量容器内放入准备配制培养基总量的约1/2以上的纯净水，并加入适量的糖，然后边搅拌边逐一加入所需量的母液；
[0031] 2.3琼脂可加热熔化后加入，如有搅拌设备时也可直接加入琼脂粉，然后用纯净水补足所需配制培养基的总量，搅拌均匀即可；
[0032] 2.4培养基中的糖，在大量组培苗生产中，一般可用市售白糖，但最好是用蔗糖而不要用甜菜糖；
[0034] 2.6配制好的培养基要尽快分装到培养容器中，以免培养基凝固或变稠而难以分装；
[0035] 2.7分装培养基时应注意避免培养基粘在瓶口上，如果粘有培养基，在盖瓶盖或瓶塞前必须用干净纱布擦净瓶口。
[0036] 3培养基消毒灭菌
[0037] 3.1将分装好的培养基装于高压灭菌锅内消毒；
[0038] 3.2加热初期，当消毒锅消毒室的气压达0.05Mpa时，打开冷凝阀，排尽消毒室内冷空气；
[0041] 3.5培养基应置于空气少流动和少灰尘的干净环境冷却，否则在降温进气过程中导致霉菌孢子进入培养器皿，产生霉菌污染。
[0042] 4培养基储藏
[0043] 4.1培养基应尽量现配现用；
[0044] 4.2可在空气干净且不流动的环境短时间储藏培养基，但储藏超过1个月的培养基应废弃不用。
[0045] 本发明柿树组织培养的方法为：
[0046] 1.无菌芽的获取
[0047] 柿树果实为肉质果，7-8月份成熟，当果实由青色转为黄色带红，果肉变软时采摘，将果实揉搓，用清水洗净后得种子，并将其及时置于阴凉处晾干，剥去外壳。在超净台上用75％酒精浸泡消毒10s，无菌水漂洗2-3次，再用0.1％升汞溶液消毒15min，无菌水漂洗5次。将经消毒处理的种子接种在诱导培养基上进行初始培养，诱导种子发芽以获取无菌材料。外植体初次培养时，需全暗培养10天左右，再放到弱光下进行培养，大约经过20天左右的种子开始萌芽，然后再移至见光的地方培养。
[0048] 2.芽的增殖培养
[0049] 将诱导获得的无菌芽接种至继代培养基上进行芽的继代增殖，一般40天继代-1一次，继代材料均放在培养室内培养，培养室温度为(25±2)℃,光照12h.d ,光照度
2000lx。
2000lx。
[0050] 3.生根的诱导
[0051] 芽条长至约2-3cm时，将较健壮的芽苗由丛生芽上单个切下转至生根培养基上诱导生根，其余芽苗转至继代培养基上继续进行增殖培养。生根培养需要在弱光下培养15天左右，此时小苗的基部形成白色突起，并逐渐伸长，20天后可形成明显根系，逐渐长成完整的小植株，此时期宜逐步增加光照使小苗变得粗壮。
[0052] 4.生根苗的移栽
[0053] 待生根小苗充分木质化，叶片舒展，叶色浓绿，茎轴伸长，苗高约3-4cm时即可进行大棚移栽。移栽时先取出小苗，洗净基部的培养基后，移栽于经0.1％高锰酸钾消毒过用营养袋装好的育苗基质上，移栽后浇透定根水，保持一定的温度和湿度，并要定期进行喷药进行防病处理。
[0054] 与目前现有技术相比，本发明的优点是：
[0055] 1、增殖和生根培养通过添加合适量的龙眼汁，能促进甜茶不定芽的生长，繁殖系数高，且在增殖的同时诱导生根，缩短培育周期。
[0056] 2、生根率和移栽成活率达到99.5％以上，遗传稳定性好。
具体实施方式
[0057] 下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0058] 实施例1：
[0059] 柿树组织培养的培养基配方，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：
[0060] 每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下：
[0061] (1)大量元素：硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙440mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；
[0062] (2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
[0063] (3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L；
[0064] (4)植物生长调节剂：6-苄基腺嘌呤1.0mg/L、萘乙酸0.2mg/L、龙眼汁0.4mg/L；
[0065] 余量为蒸馏水。
[0066] (1)大量元素：硝酸钾475mg/L、硝酸铵412.5mg/L、二水氯化钙110mg/L、七水硫酸镁92.5mg/L、磷酸二氢钾41mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L；
[0067] (2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
[0068] (3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/；
[0069] (4)植物生长调节剂：ABT6号0.5mg/L、吲哚乙酸0.3mg/L、龙眼汁0.5mg/L；
[0070] 余量为蒸馏水。
[0071] 实施例2：
[0072] 柿树组织培养的培养基配方，该培养基包括继代培养基和生根培养基，其中：
[0073] 每升(L)继代培养基的组分及各组分的含量如下：
[0074] (1)大量元素：硝酸钾1260mg/L、硝酸铵1320mg/L、二水氯化钙440mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L；
[0075] (2)微量元素：四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6.2mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、碘化钾0.83mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L；
[0076] (3)有机物：肌醇100mg/L、甘氨酸2.0mg/L、盐酸吡哆醇(VB6)0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸硫胺素(VB1)0.1mg/L、半胱氨酸15mg/L；
[0077] (4)植物生长调节剂：6-苄基腺嘌呤0.5mg/L、萘乙酸0.15mg/L、龙眼汁0.3mg/L；
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