技术领域
[0001] 本
发明属于通过组织培养技术的
植物再生技术领域，具体涉及沙棘组培苗的扦插移植方法。
背景技术
[0002] 沙棘(拉丁学名：Hippophae rhamnoides Linn.)为多年生落叶果树，灌木或小乔木。其果实、
果皮、
叶片、树皮及其加工制品含有280多种生理活性物质，具有强烈的消炎、杀菌、止痛和促进组织再生的特殊功效。其中许多成分在杀死和抑制
肿瘤细胞、抗
辐射、抗凝血、降血压、防
止血管栓塞、抗衰老、抗疲劳、增强
机体活
力和免疫力等方面都显示出神奇的
治疗效果。
[0003] 沙棘枝叶茂盛、侧根发达、根蘖性极强，能迅速串根自蘖形成密集的群体，并能与放线菌、细菌、分枝杆菌等共生形成大量根瘤，具有比大豆更强的固氮能力(每公顷可固氮180kg)。此外，具有生长迅速，耐干旱，耐盐
碱瘠薄，御严寒酷暑，具有保持
水土、防
风固沙、改良
土壤和适应性强等促进生态平衡的明显作用，不仅是干旱风沙地区造林绿化的先锋树种，也是重要的薪炭林和
饲料林树种。所以，在当前的退耕还林、农林产业结构调整中，种植沙棘具有重要的营养价值、生态价值和经济价值。
[0004] 沙棘雌雄异株，靠
种子繁殖在生产上难以保持优良品种的特性；根蘖繁殖繁殖系数较低。目前沙棘繁殖的主要方法有：有性繁殖与
无性繁殖两种，其中，无性繁殖又分为三种：硬枝扦插、半木质化扦插和组织培养。组织培养不受时间限制、在材料极少的情况下组织培养是最佳方法，同时也是实现苗木规模化生产、开展基因遗传转化育种、保存种质资源、植物抗寒耐盐等机理研究等方面必选的途径之一。但是，传统的组培繁殖在继代培养后，要经过生根培养的步骤，让组培继代芽在瓶内的培养基中生根，然后再移栽至基质中，工序复杂，瓶内生根培养要求严格的无菌操作才能保证育苗
质量，而且成本相对较高，加之移栽培养，更需消耗较多的人力物力。
发明内容
[0005] 为了解决
现有技术中存在的问题，本发明提供了沙棘组培苗的扦插移植方法。
[0006] 本发明提供沙棘组培苗的扦插移植方法，包括以下步骤：
[0007] (1)制备组培苗；
[0008] (2)配制扦插基质；
[0009] (3)配制生根剂：生根剂为：6-BA 50mg/L+IAA 30mg/L；
[0010] (4)沙棘组培苗的扦插与培养：将组培苗浸泡在生根剂中3min，之后，将其插入到扦插基质中，扦插结束后，当天用水淋透基质，用塑料
薄膜覆盖于育苗盘之上，将其快速移入遮阴度为75％-85％的遮阴棚中，培育扦插苗期间按照常规方法淋水、除草、
施肥和
病虫害防治；
[0011] (5)出圃。
[0012] 作为优选，步骤(1)中，所述制备组培苗的方法为：选取沙棘当年生枝条的茎尖作为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养，选取增殖25-30d，长3-5cm生长状况良好的丛生苗作为扦插材料：用清水将根部的培养基洗净，将丛生苗剪成单株，仅保留茎顶端的2-3片叶片。
[0013] 作为优选，步骤(2)中，所述扦插基质是将珍珠岩、蛭石和草炭土按照1:2:4的体积比混合制备得到的。
[0014] 作为优选，步骤(1)-(3)的制备顺序可以互换。
[0015] 作为优选，步骤(4)中，保持遮阴棚中
温度为20-30℃，
相对湿度为80％-90％。
[0016] 作为优选，步骤(4)中，在每年的4-7月进行沙棘组培苗的扦插。
[0017] 作为优选，步骤(4)中，浸泡部分占整个组培苗长度的1/5-1/4。
[0018] 作为优选，步骤(5)中，苗高45cm以上时出圃。
[0019] 本发明将组培苗的生根与移栽合并在一个步骤中，不需要在瓶内培养至生根再移栽，相比于传统的组培无性繁殖方法，进一步缩短了育苗时间，同时简化了工序，降低了成本，有利于在短期内实现规模化培育沙棘组培苗。
具体实施方式
[0020] 以下的
实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为市售。
[0021] 本发明的沙棘组培苗的扦插移植方法包括以下步骤：
[0022] (1)制备组培苗：选取沙棘当年生枝条的茎尖作为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养，选取增殖25-30d，长约3-5cm生长状况良好的丛生苗作为扦插材料：用清水将根部的培养基洗净，将丛生苗剪成单株，仅保留茎顶端的2-3片叶片；
[0023] (2)配制扦插基质：将珍珠岩、蛭石和草炭土按照1:2:4的体积比混合制备得到扦插基质，用消毒液消毒后，将扦插基质装入育苗盘中。消毒液可以为现有技术中的任意一种，比如质量浓度为3％的
硫酸亚
铁水溶液，比如3g/L的高锰酸
钾溶液等。
[0024] 扦插基质有多种，本发明对珍珠岩、
泥炭、红心土、蛭石和
膨润土等多种基质材料进行组合，然后筛选得到最优配方：珍珠岩、蛭石和草炭土的体积比为1:2:4，在该配方时，与下述的生根剂配伍，沙棘的生根率最高。
[0025] (3)配制生根剂：生根剂为：6-苄
氨基腺嘌呤(6-BA)50mg/L+吲哚乙酸(IAA)30mg/L。
[0026] 步骤(1)-(3)的顺序可以互换。
[0027] (4)沙棘组培苗的扦插与培养：在每年的4-7月进行沙棘组培苗的扦插。将组培苗浸泡在生根剂中3min，浸泡部分占整个组培苗长度的1/5-1/4，之后，将其插入到扦插基质中，扦插结束后，当天用水淋透基质，用塑料薄膜覆盖于育苗盘之上，将其快速移入遮阴度为75％-85％的遮阴棚中，保持遮阴棚中温度为20-30℃，相对湿度为80％-90％，培育扦插苗期间按照常规方法淋水、除草、施肥和病虫害防治。
[0028] (5)出圃：苗高45cm以上，出圃。
[0029] 生根剂及沙棘组培苗在生根剂中的浸泡时间的选择：
[0030] 选择不同
激素、激素浓度以及浸泡时间三个因素作为变量。分别选择激素为6-BA、IAA、6-BA+IAA，激素浓度设置为10mg/L、30mg/L、50mg/L、70mg/L，浸泡时间选择为1min、3min、5min、7min。每组选择50株组培苗，按照上述方法进行沙棘组培苗的扦插移植。结果发现，在上述各条件下，各组的平均生根率范围在30-98％之间，其中，当生根剂为：6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)50mg/L+IAA(吲哚乙酸)30mg/L，浸泡时间为3min时，扦插6d后苗出根，平均生根率达98％，生长后根系长，根系为白色，地上部分
颜色为绿色。
[0031] 实施例1
[0032] 本发明的沙棘组培苗的扦插移植方法包括以下步骤：
[0033] (1)制备组培苗：选取沙棘当年生枝条的茎尖作为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养，选取增殖28d，长约4cm生长状况良好的丛生苗作为扦插材料：用清水将根部的培养基洗净，将丛生苗剪成单株，仅保留茎顶端的2片叶片；
[0034] (2)配制扦插基质：将珍珠岩、蛭石和草炭土按照1:2:4的体积比混合制备得到扦插基质，用消毒液消毒后，将扦插基质装入育苗盘中。消毒液为质量浓度为3％的硫酸亚铁水溶液。
[0035] (3)配制生根剂：生根剂为：6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)50mg/L+IAA(吲哚乙酸)30mg/L。
[0036] (4)沙棘组培苗的扦插：在每年的5月进行沙棘组培苗的扦插。将组培苗浸泡在生根剂中3min，浸泡部分占整个组培苗长度的1/5，之后，将其插入到扦插基质中，扦插结束后，当天用水淋透基质，用塑料薄膜覆盖于育苗盘之上，将其快速移入遮阴度为80％的遮阴棚中，保持遮阴棚中温度为25℃，相对湿度为85％，培育扦插苗期间按照常规方法淋水、除草、施肥和病虫害防治。
[0037] (5)出圃：苗高45cm以上，出圃。
[0038] 实施例2
[0039] 本发明的沙棘组培苗的扦插移植方法包括以下步骤：
[0040] (1)制备组培苗：选取沙棘当年生枝条的茎尖作为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养，选取增殖25d，长约3cm生长状况良好的丛生苗作为扦插材料：用清水将根部的培养基洗净，将丛生苗剪成单株，仅保留茎顶端的3片叶片；
[0041] (2)配制扦插基质：将珍珠岩、蛭石和草炭土按照1:2:4的体积比混合制备得到扦插基质，用消毒液消毒后，将扦插基质装入育苗盘中。消毒液为3g/L的高锰酸钾溶液。
[0042] (3)配制生根剂：生根剂为：6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)50mg/L+IAA(吲哚乙酸)30mg/L。
[0043] (4)沙棘组培苗的扦插：在每年的4月进行沙棘组培苗的扦插。将组培苗浸泡在生根剂中3min，浸泡部分占整个组培苗长度的1/5，之后，将其插入到扦插基质中，扦插结束后，当天用水淋透基质，用塑料薄膜覆盖于育苗盘之上，将其快速移入遮阴度为75％的遮阴棚中，保持遮阴棚中温度为20℃，相对湿度为80％，培育扦插苗期间按照常规方法淋水、除草、施肥和病虫害防治。
[0044] (5)出圃：苗高45cm以上，出圃。
[0045] 实施例3
[0046] 本发明的沙棘组培苗的扦插移植方法包括以下步骤：
[0047] (1)制备组培苗：选取沙棘当年生枝条的茎尖作为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养，选取增殖30d，长约5cm生长状况良好的丛生苗作为扦插材料：用清水将根部的培养基洗净，将丛生苗剪成单株，仅保留茎顶端的2片叶片；
[0048] (2)配制扦插基质：将珍珠岩、蛭石和草炭土按照1:2:4的体积比混合制备得到扦插基质，用消毒液消毒后，将扦插基质装入育苗盘中。消毒液为质量浓度为3％的硫酸亚铁水溶液。
[0049] (3)配制生根剂：生根剂为：6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)50mg/L+IAA(吲哚乙酸)30mg/L。
[0050] (4)沙棘组培苗的扦插：在每年的7月进行沙棘组培苗的扦插。将组培苗浸泡在生根剂中3min，浸泡部分占整个组培苗长度的1/4，之后，将其插入到扦插基质中，扦插结束后，当天用水淋透基质，用塑料薄膜覆盖于育苗盘之上，将其快速移入遮阴度为85％的遮阴棚中，保持遮阴棚中温度为30℃，相对湿度为90％，培育扦插苗期间按照常规方法淋水、除草、施肥和病虫害防治。
[0051] (5)出圃：苗高45cm以上，出圃。
[0052] 最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行
修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
