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萤火虫专用饲料及其在萤火虫高效养殖中的应用

阅读:243发布:2020-05-08

专利汇可以提供萤火虫专用饲料及其在萤火虫高效养殖中的应用专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了萤火虫专用 饲料 及其在萤火虫高效养殖中的应用。所述萤火虫专用饲料由以下原料制备而成:蜗 牛 粉、花粉、鱼粉、 啤酒 酵母 粉、功能 淀粉 、高温 豆粕 水 解 物或者 糖化 高温豆粕水解物、花蜜、多糖、桑叶蛋白。本发明所述萤火虫专用饲料通过选择上述组分形成人工养殖饲料保证了萤火虫生长过程中所要的糖类及 蛋白质 ,使萤火虫的取食不仅仅依赖于蜗牛田螺等天然 生物 ,并且饲喂本发明提供的萤火虫专用饲料后不仅保证萤火虫的正常生长发育,而且还保证萤火虫成虫寿命。,下面是萤火虫专用饲料及其在萤火虫高效养殖中的应用专利的具体信息内容。

1.萤火虫专用饲料,其特征在于,所述萤火虫专用饲料由以下原料制备而成:蜗粉、花粉、鱼粉、啤酒酵母粉、功能淀粉、高温豆粕解物或者糖化高温豆粕水解物、花蜜、多糖、桑叶蛋白。
2.根据权利要求1所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉42~80重量份、花粉10~30重量份、鱼粉10~25重量份、啤酒酵母粉10~20重量份、功能淀粉50~70重量份、高温豆粕水解物或者糖化高温豆粕水解物
25~60重量份、花蜜13~30重量份、多糖2~10重量份、桑叶蛋白1~4重量份。
3.根据权利要求2所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶自然晾干或烘干后粉碎过筛,得到桑叶粉末;以1~5g/L的氢化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比20~40g/L混合均匀,经超声处理20~40分钟后,于40~60℃浸提1~3小时,过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1~5mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5~3,离心分离,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
4.根据权利要求1或2所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.1~0.5mol/L、pH值为7.2~7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物配置成质量分数2~10%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:(2~3),室温搅拌20~50分钟后,用0.1~1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9~
10;再搅拌10~20分钟,加热到50~60℃,于70~75℃超声处理50~90分钟;反应结束后迅速冷却至室温,离心除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
5.根据权利要求1、2、4中任一项所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:称取8~15g高温豆粕溶于100~300mL水中,用0.1~1mol/L的柠檬酸调节pH值至4~4.5;按照500~700U/g的添加量加入纤维素酶,在超声条件下酶解20~30分钟;超声结束后,用0.5~1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9~10,按照50000~
60000U/g的添加量加入性蛋白酶,在50~60℃酶解2~4小时;酶解结束后,沸水浴处理5~10分钟;最后将溶液离心分离,取上清液;将上清液用0.5~1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.2~7.4,真空冷冻干燥即得高温豆粕水解物。
6.根据权利要求2所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述功能淀粉为木薯淀粉。
7.根据权利要求2所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:(10~50)混合均匀,得到混合物;向混合物中加入水,再加入直径5~15mm的氧化锆球,混合物:水:氧化锆球的质量比为(1~1.5):1:(4~6),在转速100~400转/分钟球磨处理1~3小时,获得球磨产物;将球磨产物真空干燥6~12小时,研磨并过筛,得到功能淀粉。
8.根据权利要求2所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:(10~50)混合均匀,得到混合物;向混合物中加入水,再加入直径5~15mm的氧化锆球,混合物:水:氧化锆球的质量比为(1~1.5):1:(4~6),在转速100~400转/分钟球磨处理1~3小时,获得球磨产物;将球磨产物真空干燥6~12小时;向1~5g果胶中加水80~120mL,搅拌至果胶溶解,然后加入40~70g干燥后的球磨产物,室温搅拌1~3小时,于40~50℃真空干燥5~10小时,然后于120~125℃热处理1~2小时,研磨粉碎过筛,得到所述功能淀粉。
9.根据权利要求2所述的萤火虫专用饲料,其特征在于,所述多糖为酵母甘露聚糖、磷酸化酵母甘露聚糖、硫酸化酵母甘露聚糖、羧甲基化酵母甘露聚糖、羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖、羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖中的一种或多种的混合物。
10.权利要求1~9中任一项所述的萤火虫专用饲料在萤火虫高效养殖中的应用。

说明书全文

萤火虫专用饲料及其在萤火虫高效养殖中的应用

技术领域

[0001] 本发明涉及人工养殖技术领域,特别是涉及萤火虫专用饲料及其在萤火虫高效养殖中的应用。

背景技术

[0002] 萤火虫是萤科昆虫的通称,全世界约有2000种,分布于热带、亚热带和温带地区。小至中型,长而扁平,头狭小,体壁与鞘翅十分柔软。前胸背板平坦,常盖住头部。眼睛是半圆球形的,雄性的眼睛常大于雌性。腹部7~8节,末端下方有发光器,能发黄绿色光。萤火虫夜间活动,卵、幼虫和蛹也往往能发光,成虫发光有引诱异性的作用。幼虫捕食蜗和小昆虫,喜欢栖息于潮湿温暖草木繁盛的地方。萤火虫作为反映生态的指标以及特殊的发光性,让越来越多的人开始关注这种大自然的小精灵了,因其非常具观赏性可以作为生态旅游资源的开发与利用。
[0003] 由于环境恶化,目前很多地方已难见萤火虫。因此,人工高效生产养殖萤火虫具有重要价值:
[0004] 1.可以满足环境教育与自然教育的需求。自然界中有很多发光性生物,萤火虫具有代表性,除满足儿童的好奇心以外,还可以作为探讨其生物学的试验研究。
[0005] 2.种源保存,保护生物多样性
[0006] 3.环境指示生物,用于检测环境质、污染程度等指标。萤火虫尾部发光囊中含有两种化学物质:萤光素和腺甙磷酸。腺甙磷酸的数量越多,发出的光越强,把腺甙磷酸放进受到有机生物污染的水中,可以测出水中微生物的活动情况,从而鉴定水的污染程度。
[0007] 4.生物技术材料。萤火虫的荧光素可以作为生化材料,甚至可以用于定位肿瘤细胞的位置,广泛地应用于感染、肿瘤免疫及治疗、自身免疫性疾病、器官移植、基因治疗、药物开发等实验领域。
[0008] 5.生物防治。萤火虫可以血吸虫中间寄主钉螺为食物,通过人工释放萤火虫可以达到消灭钉螺,控制血吸虫病传播的目的。
[0009] 6.萤火虫放飞
[0010] 1)婚礼萤火虫放飞:目前最有潜、市场最庞大的项目,可以是自己结婚定购,也可以是定购萤火虫送给结婚的朋友。
[0011] 2)生日萤火虫放飞:生日人人过,年年过,如果做好了,市场很庞大,一般是年轻朋友,想通过这种特殊的礼物表达对亲朋好友的祝福,象征永恒的爱情,家庭幸福。
[0012] 3)情人节礼物:主要针对年轻最有消费能力的群体,可推出象征爱情的(两只萤火虫装、或者11只萤火虫装等等吉利数字)精美礼盒,通过这种别出心裁的礼物、象征爱情的礼物来表达自己的爱意。
[0013] 4)庆典萤火虫放飞:公司开业、楼盘开盘、产品发布、周年纪念、晚会、聚会等等一系列大型活动均可放飞萤火虫。目前市场最庞大的项目,通过这种特殊的庆祝方式、以及这种少有罕见的放飞方式,可以提高该活动和公司的知名度,以及众多媒体关注。
[0014] 5)通过跟各大公园合作,以及相匹配的展会活动合作,主要消费的群体是中小学的学生和参展的观众。
[0015] 6)标本展览:可在冬季搞标本展或给中小学校制作标本室。

发明内容

[0016] 本发明所要解决的技术问题之一是提供一种萤火虫专用饲料,所述萤火虫专用饲料由以下原料制备而成:蜗牛粉、花粉、鱼粉、啤酒酵母粉、功能淀粉、高温豆粕水解物或者糖化高温豆粕水解物、花蜜、多糖、桑叶蛋白。
[0017] 进一步地,所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉42~80重量份、花粉10~30重量份、鱼粉10~25重量份、啤酒酵母粉10~20重量份、功能淀粉50~70重量份、高温豆粕水解物或者糖化高温豆粕水解物25~60重量份、花蜜13~30重量份、多糖2~10重量份、桑叶蛋白1~4重量份。
[0018] 进一步地,所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶自然晾干或烘干后粉碎过筛,得到桑叶粉末;以1~5g/L的氢化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比20~40g/L混合均匀,经超声处理20~40分钟后,于40~60℃浸提1~3小时,过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1~5mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5~3,离心分离,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0019] 进一步地,所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.1~0.5mol/L、pH值为7.2~7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物配置成质量分数2~10%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:(2~3),室温搅拌20~50分钟后,用0.1~1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9~10;再搅拌10~20分钟,加热到50~60℃,于
70~75℃超声处理50~90分钟;反应结束后迅速冷却至室温,离心除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0020] 进一步地,所述高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:称取8~15g高温豆粕溶于100~300mL水中,用0.1~1mol/L的柠檬酸调节pH值至4~4.5;按照500~700U/g的添加量加入纤维素酶,在超声条件下酶解20~30分钟;超声结束后,用0.5~1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9~10,按照50000~60000U/g的添加量加入性蛋白酶,在50~60℃酶解2~4小时;酶解结束后,沸水浴处理5~10分钟;最后将溶液离心分离,取上清液;将上清液用0.5~1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.2~7.4,真空冷冻干燥即得高温豆粕水解物。
[0021] 进一步地,所述功能淀粉为木薯淀粉。
[0022] 进一步地,所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:(10~50)混合均匀,得到混合物;向混合物中加入水,再加入直径5~15mm的氧化锆球,混合物:水:氧化锆球的质量比为(1~1.5):1:(4~6),在转速100~400转/分钟球磨处理1~3小时,获得球磨产物;将球磨产物真空干燥6~12小时,研磨并过筛,得到功能淀粉。
[0023] 进一步地,所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:(10~50)混合均匀,得到混合物;向混合物中加入水,再加入直径5~15mm的氧化锆球,混合物:水:氧化锆球的质量比为(1~1.5):1:(4~6),在转速100~400转/分钟球磨处理1~3小时,获得球磨产物;将球磨产物真空干燥6~12小时;向1~5g果胶中加水80~120mL,搅拌至果胶溶解,然后加入40~70g干燥后的球磨产物,室温搅拌1~3小时,于40~50℃真空干燥5~10小时,然后于120~125℃热处理1~2小时,研磨粉碎过筛,得到所述功能淀粉。
[0024] 进一步地,所述多糖为酵母甘露聚糖、磷酸化酵母甘露聚糖、硫酸化酵母甘露聚糖、羧甲基化酵母甘露聚糖、羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖、羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖中的一种或多种的混合物。优选地,所述多糖为羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖和羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖以质量比1:1组成的混合物。
[0025] 本发明所要解决的技术问题之二是提供萤火虫专用饲料在萤火虫高效养殖中的应用。
[0026] 本发明所述萤火虫专用饲料通过选择上述组分形成人工养殖饲料保证了萤火虫生长过程中所要的糖类及蛋白质,使萤火虫的取食不仅仅依赖于蜗牛田螺等天然生物,并且饲喂本发明提供的萤火虫专用饲料后不仅保证萤火虫的正常生长发育,而且还保证萤火虫成虫寿命。

具体实施方式

[0027] 实施例中原料介绍如下:
[0028] 蜗牛粉,厂家西安四季生物科技有限公司。
[0029] 花粉,厂家蓝天县颐蜂堂生态蜜蜂园有限公司,具体使用油菜花粉。
[0030] 鱼粉,厂家海兴海之源饲料有限公司,饲料级。
[0031] 啤酒酵母粉,厂家山东鑫卓源化工有限公司。
[0032] 高温豆粕,厂家安徽常青藤饲料贸易有限公司。
[0033] 花蜜,厂家山西圣康蜂业有限公司,具体使用百花蜜。
[0034] 桑叶,厂家镇雄县母亨镇冬瓜树农业生态园。
[0035] 纤维素酶,厂家南京东恒华道生物科技有限责任公司,酶活力1万U/g。
[0036] 碱性蛋白酶,具体使用地衣芽孢杆菌酶,厂家南京东恒华道生物科技有限责任公司,酶活力24万U/g。
[0037] 0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液,厂家天津市康科德科技有限公司。
[0038] 葡萄糖,厂家吴江市明辉精细化工有限公司。
[0039] 木薯淀粉,厂家济南舜昌化工有限公司。
[0040] 茶多酚,CAS号:84650-60-2,厂家西安青芷生物技术有限公司。
[0041] 直径5mm的氧化锆球,厂家淄博赢驰陶瓷新材料有限公司。
[0042] 果胶,厂家石家庄宁诺商贸有限公司。
[0043] 酵母细胞壁,厂家济南海伟化工有限公司。
[0044] 在未作具体说明的情况下,搅拌转速为100转/分钟。
[0045] 在未作具体说明的情况下,真空冷冻干燥的工艺条件为:预冻温度-80℃,预冻时间2小时,冷冻温度-70℃,冷冻时间24小时,绝对压强100Pa。
[0046] 在未作具体说明的情况下,室温指的是25℃。
[0047] 实施例1
[0048] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0049] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0050] 所述高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:称取8g高温豆粕溶于100mL蒸馏水中,用0.1mol/L的柠檬酸调节pH值至4.2;按照600U/g的添加量加入纤维素酶,在超声功率300W、超声频率25kHz的条件下酶解20分钟;超声结束后,用0.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9,按照60000U/g的添加量加入碱性蛋白酶,在56℃酶解3小时;酶解结束后,沸水浴处理10分钟;最后将溶液以4000转/分钟离心20分钟,取上清液;将上清液用0.5mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至7.4,真空冷冻干燥即得高温豆粕水解物。
[0051] 所述功能淀粉为木薯淀粉。
[0052] 所述多糖为酵母甘露聚糖,通过以下方法提取得到:称量5g酵母细胞壁,加入50mL质量分数3%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀后在100℃油浴中冷却回流反应2小时;然后自然冷却至室温,用2mol/L的盐酸调节pH至7,在3000转/分钟的条件下离心10分钟,取上层溶液;将上层溶液使用1mol/L的盐酸调节pH到3,以3000转/分钟离心20分钟,取上清液;将上清液用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH到7,在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时,得到粗产物;将粗产物用其重量40倍的无水乙醇溶解,以6000转/分钟离心30分钟,并收集沉淀;将沉淀真空冷冻干燥24小时,得到酵母甘露聚糖。
[0053] 实施例2
[0054] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0055] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0056] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0057] 所述功能淀粉为木薯淀粉。
[0058] 所述多糖为酵母甘露聚糖,通过以下方法提取得到:称量5g酵母细胞壁,加入50mL质量分数3%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀后在100℃油浴中冷却回流反应2小时;然后自然冷却至室温,用2mol/L的盐酸调节pH至7,在3000转/分钟的条件下离心10分钟,取上层溶液;将上层溶液使用1mol/L的盐酸调节pH到3,以3000转/分钟离心20分钟,取上清液;将上清液用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH到7,在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时,得到粗产物;将粗产物用其重量40倍的无水乙醇溶解,以6000转/分钟离心30分钟,并收集沉淀;将沉淀真空冷冻干燥24小时,得到酵母甘露聚糖。
[0059] 对实施例1中的高温豆粕水解物和实施例2中的糖化高温豆粕水解物进行抗氧化能力测定,包括DPPH自由基的清除率、超氧阴离子自由基的清除率和羟自由基的清除率。
[0060] 参照文献《油茶籽糖蛋白的分离纯化及其功能活性研究》(李婷婷,江南大学,2014:6-:27)对DPPH自由基的清除率进行测定。
[0061] 参照文献《裸燕麦糖蛋白的提取纯化及抗氧化作用研究》(张艳,河北农业大学,2010:27-28)对超氧阴离子自由基的清除率进行测定。
[0062] 参照文献《回心草总黄清除羟基自由基活性研究》(李超,粮油加工,2010(8):163-165)对羟自由基的清除率进行测定。
[0063] 具体测试结果见表1。
[0064] 表1抗氧化能力测试表
[0065]
[0066] 实施例3
[0067] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0068] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0069] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0070] 所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:12混合均匀,得到混合物;向混合物中加入蒸馏水,再加入直径5mm的氧化锆球,混合物:蒸馏水:氧化锆球的质量比为1.5:1:4.5,在转速350转/分钟球磨处理3小时,获得球磨产物;将球磨产物在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时,研磨并过100目筛,得到功能淀粉。
[0071] 所述多糖为酵母甘露聚糖,通过以下方法提取得到:称量5g酵母细胞壁,加入50mL质量分数3%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀后在100℃油浴中冷却回流反应2小时;然后自然冷却至室温,用2mol/L的盐酸调节pH至7,在3000转/分钟的条件下离心10分钟,取上层溶液;将上层溶液使用1mol/L的盐酸调节pH到3,以3000转/分钟离心20分钟,取上清液;将上清液用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH到7,在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时,得到粗产物;将粗产物用其重量40倍的无水乙醇溶解,以6000转/分钟离心30分钟,并收集沉淀;将沉淀真空冷冻干燥24小时,得到酵母甘露聚糖。
[0072] 实施例4
[0073] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0074] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0075] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0076] 所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:12混合均匀,得到混合物;向混合物中加入蒸馏水,再加入直径5mm的氧化锆球,混合物:蒸馏水:氧化锆球的质量比为1.5:1:4.5,在转速350转/分钟球磨处理3小时,获得球磨产物;将球磨产物在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时;向2g果胶中加蒸馏水84mL,搅拌至果胶溶解,然后加入55g干燥后的球磨产物,室温搅拌1小时,于40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥5小时,然后于120℃热处理2小时,研磨粉碎过100目筛,得到所述功能淀粉。
[0077] 所述多糖为酵母甘露聚糖,通过以下方法提取得到:称量5g酵母细胞壁,加入50mL质量分数3%的氢氧化钠水溶液,搅拌均匀后在100℃油浴中冷却回流反应2小时;然后自然冷却至室温,用2mol/L的盐酸调节pH至7,在3000转/分钟的条件下离心10分钟,取上层溶液;将上层溶液使用1mol/L的盐酸调节pH到3,以3000转/分钟离心20分钟,取上清液;将上清液用2mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH到7,在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时,得到粗产物;将粗产物用其重量40倍的无水乙醇溶解,以6000转/分钟离心30分钟,并收集沉淀;将沉淀真空冷冻干燥24小时,得到酵母甘露聚糖。
[0078] 实施例5
[0079] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0080] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0081] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0082] 所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:12混合均匀,得到混合物;向混合物中加入蒸馏水,再加入直径5mm的氧化锆球,混合物:蒸馏水:氧化锆球的质量比为1.5:1:4.5,在转速350转/分钟球磨处理3小时,获得球磨产物;将球磨产物在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时;向2g果胶中加蒸馏水84mL,搅拌至果胶溶解,然后加入55g干燥后的球磨产物,室温搅拌1小时,于40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥5小时,然后于120℃热处理2小时,研磨粉碎过100目筛,得到所述功能淀粉。
[0083] 所述多糖为羧甲基化酵母甘露聚糖,通过以下方法制备得到:将1g酵母甘露聚糖(参照实施例1制备得到)溶解于12.5g质量分数20%的氢氧化钠水溶液中,搅拌1小时;然后加入质量分数30%的氯乙酸溶液7.5g,再补加乙醇至出现白色沉淀;以2℃/分钟加热至70℃,于70℃反应4小时;而后自然冷却至室温,用1mol/L的盐酸调节pH至7,得到混合液;将混合液转移至截留分子量30kDa的透析袋中,蒸馏水透析2天,收集透析液;将透析液以5000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥得到羧甲基化甘露聚糖。
[0084] 实施例6
[0085] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0086] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0087] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0088] 所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:12混合均匀,得到混合物;向混合物中加入蒸馏水,再加入直径5mm的氧化锆球,混合物:蒸馏水:氧化锆球的质量比为1.5:1:4.5,在转速350转/分钟球磨处理3小时,获得球磨产物;将球磨产物在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时;向2g果胶中加蒸馏水84mL,搅拌至果胶溶解,然后加入55g干燥后的球磨产物,室温搅拌1小时,于40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥5小时,然后于120℃热处理2小时,研磨粉碎过100目筛,得到所述功能淀粉。
[0089] 所述多糖为羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖,通过以下方法制备得到:将1g羧甲基化酵母甘露聚糖(参照实施例5制备得到)溶解在15mL N,N-二甲基甲酰胺中,隔绝空气,室温搅拌1小时,得到羧甲基化酵母甘露聚糖溶液;同时,在浴及搅拌下,在15mL吡啶中加入2mL三氯氧磷,得到三氯氧磷溶液;将羧甲基化酵母甘露聚糖溶液加入三氯氧磷溶液中,以2℃/分钟加热至35℃,继续于35℃反应0.5小时;而后自然冷却至室温,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,得到混合液;将混合液转移至截留分子量30kDa的透析袋中,蒸馏水透析
2天,收集透析液;将透析液以5000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥得到羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖。
[0090] 实施例7
[0091] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0092] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0093] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0094] 所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:12混合均匀,得到混合物;向混合物中加入蒸馏水,再加入直径5mm的氧化锆球,混合物:蒸馏水:氧化锆球的质量比为1.5:1:4.5,在转速350转/分钟球磨处理3小时,获得球磨产物;将球磨产物在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时;向2g果胶中加蒸馏水84mL,搅拌至果胶溶解,然后加入55g干燥后的球磨产物,室温搅拌1小时,于40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥5小时,然后于120℃热处理2小时,研磨粉碎过100目筛,得到所述功能淀粉。
[0095] 所述多糖为羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖,通过以下方法制备得到:将1g羧甲基化酵母甘露聚糖(参照实施例5制备得到)溶解在15mL N,N-二甲基甲酰胺中,隔绝空气,室温搅拌1小时,得到羧甲基化酵母甘露聚糖溶液;同时,在冰浴及搅拌下,向9mL吡啶中加入1.5mL氯磺酸,得到氯磺酸溶液;将羧甲基化酵母甘露聚糖溶液加入氯磺酸溶液中,以2℃/分钟加热80℃,于80℃反应1.5小时;反应完毕后,自然冷却至室温,用1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH至7,得到混合液;将混合液转移至截留分子量30kDa的透析袋中,蒸馏水透析2天,收集透析液;将透析液以5000转/分钟离心20分钟,收集上清液;将上清液真空冷冻干燥得到羧甲基硫酸化甘露聚糖。
[0096] 实施例8
[0097] 所述萤火虫专用饲料由以下重量份的原料制备而成:蜗牛粉46重量份、花粉20重量份、鱼粉14重量份、啤酒酵母粉14重量份、功能淀粉50重量份、糖化高温豆粕水解物40重量份、花蜜13重量份、多糖4重量份、桑叶蛋白4重量份。
[0098] 所述桑叶蛋白通过以下方法制备得到:将桑叶于60℃烘箱烘干4小时后,粉碎过200目筛,得到桑叶粉末;以5g/L的氢氧化钠水溶液作为浸提液,将桑叶粉末和浸提液以质量体积比40g/L混合均匀,经超声功率300W、超声频率25kHz处理30分钟后,于40℃浸提1小时,使用300目尼龙布过滤取滤液,获得桑叶蛋白提取液;使用1mol/L的盐酸调节桑叶蛋白提取液的pH值至2.5,以4000转/分钟离心20分钟,收集底部沉淀;将底部沉淀真空冷冻干燥,得到所述桑叶蛋白。
[0099] 所述糖化高温豆粕水解物通过以下方法制备得到:用0.2mol/L、pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液将高温豆粕水解物(参照实施例1制备得到)配制成质量分数5%的溶液;随后加入葡萄糖,高温豆粕水解物与葡萄糖的质量比为1:2,室温搅拌20分钟后,用0.1mol/L的氢氧化钠水溶液调节pH值至9;再搅拌10分钟,以2℃/分钟加热到54℃,在超声功率150W、超声温度75℃的条件下超声处理75分钟;反应结束后迅速冷却至室温,以4000转/分钟离心15分钟除去不溶物,上清液冷冻干燥得到所述糖化高温豆粕水解物。
[0100] 所述功能淀粉通过以下方法制备得到:将茶多酚和木薯淀粉以质量比1:12混合均匀,得到混合物;向混合物中加入蒸馏水,再加入直径5mm的氧化锆球,混合物:蒸馏水:氧化锆球的质量比为1.5:1:4.5,在转速350转/分钟球磨处理3小时,获得球磨产物;将球磨产物在40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥12小时;向2g果胶中加蒸馏水84mL,搅拌至果胶溶解,然后加入55g干燥后的球磨产物,室温搅拌1小时,于40℃、绝对压强0.06MPa的条件下干燥5小时,然后于120℃热处理2小时,研磨粉碎过100目筛,得到所述功能淀粉。
[0101] 所述多糖为羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖和羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖以质量比1:1组成的混合物。其中羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖参照实施例6制备得到,羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖参照实施例7制备得到。
[0102] 实施例9
[0103] 萤火虫专用饲料在萤火虫高效养殖中的应用,通过以下步骤实现:
[0104] 步骤A卵的孵化:将卵、培养皿及消毒土基质置于室内自然状态下,也可以放在光照培养箱,在温度25℃、环境湿度60%、光照(白天:黑夜)为12h:12h的条件下孵化,一般一个月即可孵化;孵化完成后,将幼虫转移至养殖盒内;
[0105] 步骤B幼虫的养殖:幼虫的养殖包括1~3龄幼虫的养殖和4龄及之后龄期幼虫的养殖;将刚孵化后的1龄幼虫用毛笔或轻轻挑出,放在养殖盒内,将萤火虫专用饲料放在滤纸片或者其他小型器具里,并置于水面上方干燥处,让幼虫定点取食;待幼虫生长至4龄及之后龄期时,将萤火虫专用饲料放入养殖盒,让幼虫寻食,直至生长为老熟幼虫;
[0106] 步骤C蛹期的管理:将消毒后的粘性土壤加水调成含水量至30%,在老熟幼虫栖息上方放置化蛹平台,使得老熟幼虫化蛹;
[0107] 步骤D成虫期的养殖和产卵:成虫从蛹室飞出,交配产卵;产卵后,成虫死亡,收集卵粒。
[0108] 分别将实施例1~8的萤火虫专用饲料应用于实施例9中,并对幼虫的存活率和产卵率进行测试。
[0109] 发育周期=幼虫至成虫的生长周期。
[0110] 成活率=成虫数量/幼虫数量×100%。
[0111] 具体测试结果见表2。
[0112] 表2发育周期和成活率测试表
[0113]
[0114]
[0115] 从上述数据可以看出,实施例2与实施例1相比,使用糖化高温豆粕水解物替换高温豆粕水解物,将糖分子引入高温豆粕水解物结构中,增强了高温豆粕水解物的抗氧化能力,阻止幼虫受到细菌和寄生虫的侵害,提高幼虫存活率,缩短生长周期。茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称,其主要成分包括儿茶素类、黄酮类、黄酮醇类、酚酸类、缩酚酸类及聚合物酚类。实施例3甘薯淀粉经过球磨处理后,淀粉的结晶结构被破坏,增加了淀粉和茶多酚反应的敏感性,在保护茶多酚反应活性同时,增强了功能淀粉的营养功能。实施例4则在实施例3基础上加入果胶,通过热反应提高功能淀粉的酸、热稳定性,而且减少萤火虫驯养过程中传染性疾病的发生。实施例4~8证实,与酵母甘露聚糖相比,羧甲基硫酸化酵母甘露聚糖和羧甲基磷酸化酵母甘露聚糖的抗氧化活性和营养价值明显提高,尤其是实施例8采用两者复配,实现了协同增效的技术效果。
[0116] 应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为了清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
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