一种解淀粉芽孢杆菌培养物、制备方法及其应用
阅读：536发布：2020-05-13
专利汇可以提供一种解淀粉芽孢杆菌培养物、制备方法及其应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种解 淀粉 芽孢杆菌培养物、制备方法及其应用，培养物种解淀粉芽孢杆菌活菌数为150-250亿/g；其以预处理白 酒糟 粉为主要 发酵 基料，膨化玉米粉作为 碳 源，碳酸氢二铵作为氮源经过固体发酵制备而得；其中预处理白酒糟的制备方法包括烘干去除 水 分和酒精，除稻壳，将稻壳制备成 生物 质 碳后与烘干后的酒糟混合共同经过膨化处理制备得到预处理白酒糟粉，将本发明的解淀粉芽孢杆菌培养物用于动物 饲料 添加剂，可以有效防止腹泻，促进动物的生长速度。，下面是一种解淀粉芽孢杆菌培养物、制备方法及其应用专利的具体信息内容。
1.一种解淀粉芽孢杆菌培养物，其特征在于，解淀粉芽孢杆菌活菌数为150-250亿/g；
其以预处理白酒糟粉为主要发酵基料，膨化玉米粉作为碳源，碳酸氢二铵作为氮源发酵而得。
2.根据权利要求1所述的一种解淀粉芽孢杆菌培养物，其特征在于，所述白酒糟粉的制备方法如下：
(1)烘干：将新鲜的白酒糟进行60～80℃烘干至含水量低于15％；将烘干后的白酒糟进行粉碎，得白酒糟粗粉；
(2)除稻壳：将白酒糟粗粉加入到清水中搅拌30～45min后静置3～5h，除去漂浮在水面的稻壳；将稻壳烘干后制备成生物质碳；
(3)沉淀物处理：将沉淀物再次进行60～80℃烘干至含水量低于10％；
(4)膨化处理：将白酒糟粗粉与步骤(2)中的生物质碳混合后进行低温膨化，得到预处理白酒糟粉。
3.一种如权利要求1或2所述解淀粉芽孢杆菌培养物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)配制固态发酵基料：预处理白酒糟粉为主要发酵基料，膨化玉米粉作为碳源、磷酸氢二胺作为氮源，碳酸钙作为酸度调节剂；其中膨化玉米粉的添加量为5～15％(w/w预处理白酒糟粉)；磷酸氢二铵的添加量为5％(w/w预处理白酒糟粉)；碳酸钙的添加量为1.5～
2.0％(w/w预处理白酒糟粉)；
(2)解淀粉芽孢杆菌种子液的制备：将解淀粉芽孢杆菌用液体培养基活化，接代培养，制成种子液；
(3)发酵：将(2)中制备得到的种子液接种到(1)中的固态发酵基料中，接种量为1～5％(w/v)，用无菌水调节固态发酵基料的初始含水量为40～45％；
实时调整发酵基料的温度、湿度以及pH；
(4)成品制备：发酵结束之后，对发酵料进行冻干、粉碎过筛，即得。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(2)具体过程如下：配制发酵种子液的培养基：蛋白胨1％、酵母膏0.5％、葡萄糖1％、磷酸二氢钾0.1％、七水合硫酸镁
0.05％、碳酸钙0.5％，调节pH为7.2～7.5，115℃灭菌15min；35℃恒温摇床培养，转速
180rpm/min，培养16h～20h，直至OD600nm达2.0～2.5。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述发酵条件如下：发酵基料堆积厚度15cm～20cm，发酵过程中每隔2h翻料一次，维持基料整体温度在30℃～33℃。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中接种方式为稀释喷洒接种，用无菌水稀释后采用喷水壶均匀喷洒，接种过程中边接种边翻料。
7.如权利要求1或2所述的解淀粉芽孢杆菌培养物在动物饲料添加剂方面的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：用于防止动物腹泻。
9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：添加量为动物饲料的5～8％。
10.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述动物为猪、牛和羊。
一种解淀粉芽孢杆菌培养物、制备方法及其应用
技术领域
背景技术
[0002] 鲜白酒糟是以粮食为主要原料，采用独特的固态发酵和固态蒸馏传统酿酒工艺制得白酒后的副产物。由于酿酒过程中的生物发酵主要是将粮食中淀粉转化为酒精，虽然因所用原料、工艺的不同，酒糟中的营养成分及同一成分的含量亦不相同，但成分基本相近。酒糟中的营养成分除来自糖化、发酵不彻底余留部分原料残余物外，主要来自菌体及其新陈代谢产物和菌体自溶物，同时发酵过程中还产生酵母菌、活性肽、有机酸和一些生物活性因子，如嘌呤、嘧啶、类脂化合物、酶类等，这是一般谷物所不能比拟的。然而酒糟中还含有
40％-50％的发酵填充物——稻壳(其中含粗纤维、木质素及SiO2)，即使发酵过程在各种酶的作用下，纤维有所降解，但粗纤维依然高达20％左右，严重影响畜禽的消化和吸收，降低了酒糟的营养价值。此外，鲜白酒糟水分高达60％左右，如果不及时加以处理，特别是夏秋高温季节，就会腐败变质，不仅浪费了宝贵的资源，还会严重污染周围环境。此外，白酒糟中残余一定的酒精，对某些特定时期的动物的生长有一定的不良影响，比如，由于酒糟中含有
40％-50％的稻壳，据分析，稻壳中粗纤维含量44.5％、木质素含量21.4％、灰分含量
19.9％，而灰分中90％以上是SiO2，畜禽食入后不但不能提供营养，反而还要付出大量的能量消化稻壳。喂养实践证实，用含稻壳的鲜糟喂乳母猪，母猪奶汁质量下降，致使仔猪拉痢；
喂公猪使公猪精子畸形，降低母猪受胎率，且引起公猪呼吸急促、心跳加快、血管收缩等症状，影响了猪的正常发育；另外，白酒糟热性大，不适宜夏季饲喂。可见，新鲜白酒糟虽然营养物质丰富，但是并不适宜直接饲喂动物。因此，提供一种白酒糟的应用方式是本领域亟待解决的技术问题。
40％-50％的发酵填充物——稻壳(其中含粗纤维、木质素及SiO2)，即使发酵过程在各种酶的作用下，纤维有所降解，但粗纤维依然高达20％左右，严重影响畜禽的消化和吸收，降低了酒糟的营养价值。此外，鲜白酒糟水分高达60％左右，如果不及时加以处理，特别是夏秋高温季节，就会腐败变质，不仅浪费了宝贵的资源，还会严重污染周围环境。此外，白酒糟中残余一定的酒精，对某些特定时期的动物的生长有一定的不良影响，比如，由于酒糟中含有
40％-50％的稻壳，据分析，稻壳中粗纤维含量44.5％、木质素含量21.4％、灰分含量
19.9％，而灰分中90％以上是SiO2，畜禽食入后不但不能提供营养，反而还要付出大量的能量消化稻壳。喂养实践证实，用含稻壳的鲜糟喂乳母猪，母猪奶汁质量下降，致使仔猪拉痢；
喂公猪使公猪精子畸形，降低母猪受胎率，且引起公猪呼吸急促、心跳加快、血管收缩等症状，影响了猪的正常发育；另外，白酒糟热性大，不适宜夏季饲喂。可见，新鲜白酒糟虽然营养物质丰富，但是并不适宜直接饲喂动物。因此，提供一种白酒糟的应用方式是本领域亟待解决的技术问题。
发明内容
[0003] 本发明目的之一在于提供一种解淀粉芽孢杆菌培养物，其以白酒糟为主要发酵产物，不仅提供了一种白酒糟的应用方式，还能提高解淀粉芽孢杆菌培养物中的活菌数量。
[0004] 本发明的目的之二在于提供一种解淀粉芽孢杆菌培养物的制备方法，其以解淀粉芽孢杆菌为发酵菌种，通过固态发酵的方式将白酒糟进行处理，制备得到培养物。
[0005] 本发明的目的之三在于提供一种解淀粉芽孢杆菌培养物的应用。
[0006] 为实现上述技术目的，本发明采用的技术方案如下：
[0007] 技术方案一：
[0009] 作为本发明的进一步改进，所述白酒糟粉的制备方法如下：
[0011] (2)除稻壳：将白酒糟粗粉加入到清水中搅拌30～45min后静置3～5h，除去漂浮在水面的稻壳；将稻壳烘干后制备成生物质碳；白酒糟外表面包裹着稻壳，而且经过酿酒过程使稻壳与酒糟颗粒的结合更加紧密，难以去除，利用稻壳的密度低，容易漂浮于水中的特点可以除去稻壳粉末；为了去除更彻底，优选的，本步骤操作重复至少3次；
[0012] (3)沉淀物处理：将沉淀物再次进行60～80℃烘干至含水量低于10％；
[0013] (4)膨化处理：将白酒糟粗粉与步骤(2)中的生物质碳混合后进行低温膨化，得到预处理白酒糟粉；低温膨化过程采用挤压膨化方式，膨化率为8～15％。
[0014] 白酒糟稻壳制备的生物质碳不同于普通的粗纤维，其经过长时间的酿酒发酵过程，含有一些活性基团和一些活性物质，将这部分稻壳制备成生物炭再添加到白酒糟中，不仅将白酒糟中的粗纤维转化为生物质碳，而且生物质碳中的活性基团和活性物质还可以预防白酒糟变质，促进白酒糟发酵。
[0015] 挤压技术是集混合、搅拌、粉碎、加热、杀菌、膨化及成型等一体的技术，主要应用于谷物的加工。挤压膨化是将物料喂入挤压机中，借助螺杆输送，通过摩擦、高压和高温使物料经受挤压、熔融、杀菌等一系列复杂的连续化过处理，最终，物料从设备末端被挤出，压力骤然降至常态。挤压产生高温高压，使物料成分积累大量能量，在骤释至常态时，向熵增加方向进行，发生膨化。基料经膨化处理之后，会形成多孔状，利于发酵的进行。另外基料成本价格低廉，不会造成资源的浪费，符合可持续发展战略。将稻壳产生的生物质碳与白酒糟粗粉一起经过挤压膨化，可以使白酒糟粗粉与生物质碳均产生多孔结构，且还会产生一些交叉串联的空间网状结构，提供了更大的表面积和更多的活性位点。
[0016] 技术方案二：
[0017] 一种解淀粉芽孢杆菌培养物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
[0018] (1)配制固态发酵基料：预处理白酒糟粉为主要发酵基料，膨化玉米粉作为碳源、磷酸氢二胺作为氮源，碳酸钙作为酸度调节剂；其中膨化玉米粉的添加量为5～15％(w/w预处理白酒糟粉)；磷酸氢二铵的添加量为5％(w/w预处理白酒糟粉)；碳酸钙的添加量为1.5～2.0％(w/w预处理白酒糟粉)；
[0020] (3)发酵：将(2)中制备得到的种子液接种到(1)中的固态发酵基料中，接种量为1～5％(w/v)，用无菌水调节固态发酵基料的初始含水量为40～45％；实时调整发酵基料的温度、湿度以及pH；
[0021] (4)成品制备：发酵结束之后，对发酵料进行冻干、粉碎过筛，即得。
[0022] 作为本发明的进一步改进，步骤(2)具体过程如下：配制发酵种子液的培养基：蛋白胨1％、酵母膏0.5％、葡萄糖1％、磷酸二氢钾0.1％、七水合硫酸镁0.05％、碳酸钙0.5％，调节pH为7.2～7.5，115℃灭菌15min；35℃恒温摇床培养，转速180rpm/min，培养16h～20h，直至OD600nm达2.0～2.5。
[0023] 作为本发明的进一步改进，步骤(3)所述发酵条件如下：发酵基料堆积厚度15cm～20cm，发酵过程中每隔2h翻料一次，维持基料整体温度在30℃～33℃。
[0024] 作为本发明的进一步改进，步骤(3)中接种方式为稀释喷洒接种，用无菌水稀释后采用喷水壶均匀喷洒，接种过程中边接种边翻料。
[0025] 技术方案三：
[0026] 一种解淀粉芽孢杆菌培养物在动物饲料添加剂方面的应用。
[0027] 更进一步的，所述应用主要用于防止动物腹泻。
[0028] 更进一步的，添加剂的添加量为动物饲料的5～8％。
[0029] 更进一步的，所述动物为猪、牛和羊。
[0030] 与现有技术相比，本发明具有以下技术效果：
[0031] 白酒糟是酿酒过程中产生的主要副产物，价格低，而且供应量十分充足，酒糟的主要成分有蛋白质、粗纤维、脂肪、维生素以及各种微量元素，通常都是作为普通饲料出售。但是用鲜酒糟直接饲喂牛、羊等牲畜，酒糟中含有大量不易被动物消化吸收的粗纤维，因此喂养效果欠佳，经济附加值较低。而且鲜酒糟易霉变、酒精含量高，同时含有抗营养物质，过量直接饲喂易造成牲畜中毒或影响牲畜生长发育。本发明一方面通过将稻壳转化为生物质碳添加到白酒糟中，同白酒糟混合后一起经过膨化，使生物质碳填充到白酒糟的形成孔隙中，大大提高了白酒糟的活性。去稻壳过程将新鲜白酒糟中的稻壳和酒精去除，最大限度的降低白酒糟对饲喂动物的不良影响。
[0032] 解淀粉芽孢杆菌是一种益生菌，广泛存在于自然界中，是已经被允许使用的作为饲料添加剂酶制剂的益生菌，解淀粉芽孢杆菌在生长过程中可产生对真菌和细菌有抑制作用的生物抗菌活性物质，比如：丰源素、表面活性素等对多种病原菌有良好的抑制效果。
[0033] 发酵过程中，解淀粉芽孢杆菌可以产生一系列的胞外酶对酒糟中的纤维以及粗蛋白进行转化，极大地提高了酒糟的经济价值，同时得到了高活性的解淀粉芽孢杆菌，可作为益生菌添加至动物饲料中，能够有效防止动物腹泻，有效促进动物的生长速度。本发明对酒糟的高值化，提升酒糟的资源化利用率以及减少酒糟造成的环境污染都有十分重要的意义。
具体实施方式
[0034] 应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限值和下限值之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述的范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限值和下限值可独立地包括或排除在范围内。
[0035] 技术方案一：
[0036] 一种解淀粉芽孢杆菌培养物，解淀粉芽孢杆菌活菌数为150-250亿/g；其以预处理白酒糟粉为主要发酵基料，膨化玉米粉作为碳源，碳酸氢二铵作为氮源发酵而得。
[0037] 作为本发明的进一步改进，所述白酒糟粉的制备方法如下：
[0038] (1)烘干：将新鲜的白酒糟进行60～80℃烘干至含水量低于15％；将烘干后的白酒糟进行粉碎，得白酒糟粗粉；烘干的过程一方面是为了除去水分，另一方面是为了除去酒精；
[0039] (2)除稻壳：将白酒糟粗粉加入到清水中搅拌30～45min后静置3～5h，除去漂浮在水面的稻壳；将稻壳烘干后制备成生物质碳；白酒糟外表面包裹着稻壳，而且经过酿酒过程使稻壳与酒糟颗粒的结合更加紧密，难以去除，利用稻壳的密度低，容易漂浮于水中的特点可以除去稻壳粉末；为了去除更彻底，优选的，本步骤操作重复至少3次；
[0040] (3)沉淀物处理：将沉淀物再次进行60～80℃烘干至含水量低于10％；
[0041] (4)膨化处理：将白酒糟粗粉与步骤(2)中的生物质碳混合后进行低温膨化，得到预处理白酒糟粉；低温膨化过程采用挤压膨化方式，膨化率为8～15％。
[0042] 技术方案二：
[0043] 一种解淀粉芽孢杆菌培养物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
[0044] (1)配制固态发酵基料：预处理白酒糟粉为主要发酵基料，膨化玉米粉作为碳源、磷酸氢二胺作为氮源，碳酸钙作为酸度调节剂；其中膨化玉米粉的添加量为5～15％(w/w预处理白酒糟粉)；磷酸氢二铵的添加量为5％(w/w预处理白酒糟粉)；碳酸钙的添加量为1.5～2.0％(w/w预处理白酒糟粉)；
[0045] (2)解淀粉芽孢杆菌种子液的制备：将解淀粉芽孢杆菌用液体培养基活化，接代培养，制成种子液；
[0046] (3)发酵：将(2)中制备得到的种子液接种到(1)中的固态发酵基料中，接种量为1～5％(w/v)，用无菌水调节固态发酵基料的初始含水量为40～45％；实时调整发酵基料的温度、湿度以及pH等条件；
[0047] (4)成品制备：发酵结束之后，对发酵料进行冻干、粉碎过筛，即得。
[0048] 作为本发明的进一步改进，步骤(2)具体过程如下：配制发酵种子液的培养基：蛋白胨1％、酵母膏0.5％、葡萄糖1％、磷酸二氢钾0.1％、七水合硫酸镁0.05％、碳酸钙0.5％，调节pH为7.2～7.5，115℃灭菌15min；35℃恒温摇床培养，转速180rpm/min，培养16h～20h，直至OD600nm达2.0～2.5。
[0049] 作为本发明的进一步改进，步骤(3)所述发酵条件如下：发酵基料堆积厚度15cm～20cm，发酵过程中每隔2h翻料一次，维持基料整体温度在30℃～33℃。
[0050] 作为本发明的进一步改进，步骤(3)中接种方式为稀释喷洒接种，用无菌水稀释后采用喷水壶均匀喷洒，接种过程中边接种边翻料。
[0051] 技术方案三：
[0052] 一种解淀粉芽孢杆菌培养物在动物饲料添加剂方面的应用。
[0053] 更进一步的，所述应用主要用于防止动物腹泻。
[0054] 更进一步的，添加剂的添加量为动物饲料的5～8％。
[0055] 更进一步的，所述动物为猪、牛和羊。
[0056] 为了更好地说明本发明的内容，在下文的具体实施例中给出了众多的具体细节。本领域技术人员应当理解，没有某些具体细节，本发明同样可以实施。在另外一些实施例中，对于本领域技术人员熟知的方法、手段未作详细描述，以便于凸显本发明的主旨。本发明中，表示原料含量的单位均基于重量份计，除非另外说明。另外，关于本发明的技术指标的测定方法均为本领域内使用标准方法，具体可参见最新的国家标准，除非另外说明。
[0057] 以下实施例中的解淀粉芽孢杆菌均均为商购产品，购自潍坊益昊生物技术有限公司的即鹅淀粉芽孢杆菌菌剂。
[0058] 实施例1：
[0059] 取新鲜白酒糟5kg，添加15％(w/w白酒糟)膨化玉米粉、0.5％(w/w白酒糟)磷酸氢二铵，补水配制成发酵基料。将发酵基料平铺在发酵车间，堆积厚度15cm，调整发酵车间温度，基料升温至35±0.2℃。将活化好的解淀粉芽孢杆菌稀释后按1％(w/v)接种量均匀喷洒在发酵基料表面。发酵过程前12h每隔4h翻料一次，发酵12h后每隔2h翻料一次,发酵过程中每6h取样测定pH。总发酵时间72h，发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达221亿/g；将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0060] 其中，本实施例中白酒糟粉的制备方法如下：
[0061] (1)烘干：将新鲜的白酒糟进行80℃烘干至含水量低于15％；将烘干后的白酒糟进行粉碎，得白酒糟粗粉；
[0062] (2)除稻壳：将白酒糟粗粉加入到清水中搅拌45min后静置4h，除去漂浮在水面的稻壳；将稻壳烘干后制备成生物质碳；白酒糟外表面包裹着稻壳，而且经过酿酒过程使稻壳与酒糟颗粒的结合更加紧密，难以去除，利用稻壳的密度低，容易漂浮于水中的特点可以除去稻壳粉末；为了去除更彻底，优选的，本步骤操作重复3次；
[0063] (3)沉淀物处理：将沉淀物再次进行80℃烘干至含水量低于10％；
[0064] (4)膨化处理：将白酒糟粗粉与步骤(2)中的生物质碳混合后进行低温膨化，得到预处理白酒糟粉；低温膨化过程采用挤压膨化方式，膨化率为8％。
[0065] 为验证膨化玉米粉的添加量对于培养物中解淀粉芽孢杆菌活菌数的影响，设置实施例2-4。
[0066] 实施例2：
[0067] 本实施例与实施例1的区别仅在于，添加8％(w/w白酒糟)膨化玉米粉，其余步骤和参数均同实施例1。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达181亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0068] 实施例3：
[0069] 本实施例与实施例1的区别仅在于，添5％(w/w白酒糟)膨化玉米粉，其余步骤和参数均同实施例1。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达157亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0070] 实施例4：
[0071] 本实施例与实施例1的区别仅在于，添10％(w/w白酒糟)膨化玉米粉，其余步骤和参数均同实施例1。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达202亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0072] 通过实施例1-4的对比可知，膨化玉米粉的添加量对于解淀粉芽孢杆菌活菌数具有较大的影响，随着碳源膨化玉米粉的添加量减少，解淀粉芽孢杆菌活菌数也随之减少。
[0073] 为验证解淀粉芽孢杆菌接种量对最终的活菌数的影响，设置了实施例5-6。
[0074] 实施例5：
[0075] 本实施例与实施例1的区别仅在于，将活化好的解淀粉芽孢杆菌稀释后按3％(w/v)接种量均匀喷洒在发酵基料表面，其余步骤和参数均同实施例1。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达232亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0076] 实施例6：
[0077] 本实施例与实施例1的区别仅在于，将活化好的解淀粉芽孢杆菌稀释后按5％(w/v)接种量均匀喷洒在发酵基料表面，其余步骤和参数均同实施例1。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达250亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0078] 由实施例1和实施例5-6的对比可知，种子液的初始添加量与培养物中的活菌数呈正相关，但是随接种量的变化增加不是太大，这可能受营养物质的含量的限制。
[0079] 为验证发酵时间对培养物中解淀粉芽孢杆菌活菌数的影响，设置实施例7。
[0080] 实施例7:
[0081] 本实施例与实施例1的区别仅在于，总发酵时间96h，其余步骤和参数均同实施例1。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达225亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0082] 实施例7与实施例1的对比可知，延长发酵时间可以增加培养物中的活菌数量。
[0083] 对比例1：本对比例与实施例1的区别仅在于，将白酒糟中的的稻壳直接除去，而非将其碳化后制备成生物质碳再添加到白酒糟中。发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达195亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0084] 对比例2：本对比例与实施例1的区别仅在于，白酒糟不除稻壳。其余步骤均同实施例1，发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达182亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。对比例1和对比例2中活菌数量的对比可知，稻壳的存在对于活菌数量的影响并不是太显著。
[0085] 对比例3：本对比例与实施例1的区别仅在于，白酒糟和生物质碳不经过膨化。其余步骤均同实施例1，发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达154亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0086] 对比例4：本对比例与实施例1的区别仅在于，玉米粉、白酒糟和生物质碳均不经过膨化。其余步骤均同实施例1，发酵结束后，采用稀释涂布平板法计数，解淀粉芽孢杆菌活菌数可达128亿/g。将发酵培养物烘干后粉碎，过100目筛。测量并计算粗蛋白含量、可溶性蛋白含量以及粗纤维的变化率，计入表1。
[0087] 表1
[0088]
[0089] 注：﹢代表含量的提高，-代表含量的降低，计算方法是以发酵前固体发酵基料中总蛋白含量、可溶性蛋白含量与粗纤维蛋白含量为基准进行计算，计算方法为本领域公知常识，在此不做赘述。总蛋白含量检测采用凯氏定氮法，可溶性蛋白含量检测采用考马斯亮蓝G-250染色法。粗纤维含量检测按照GB/T 6434-94进行。以上检测方法均为公知常识，在此不做赘述。
[0090] 应用例1：
[0091] 选取河北沧州某大型养猪场，随机选取3-4月龄的肉猪分为12组，每周5只，将实施例1-7的发酵培养物代替15wt％的常规饲料，用于饲喂猪，其中一组作为空白对照组，只饲喂常规饲料。每组的日常管理采用统一标准。
[0092] 饲喂45天后，将各组实验猪的生长状况进行统计，统计结果见表2。
[0093] 表2
[0094] 增重量％ 腹泻总次数 死亡数量
实施例1 31.9 2 0
实施例2 30.5 3 0
实施例3 33 3 0
实施例4 34.6 2 0
实施例5 32 2 0
实施例6 32.9 1 0
实施例7 35.1 1 0
对比例1 26 5 0
对比例2 16.9 16 2
对比例3 27.6 4 0
对比例4 25 6 1
空白对照组 21 8 1
实施例1 31.9 2 0
实施例2 30.5 3 0
实施例3 33 3 0
实施例4 34.6 2 0
实施例5 32 2 0
实施例6 32.9 1 0
实施例7 35.1 1 0
对比例1 26 5 0
对比例2 16.9 16 2
对比例3 27.6 4 0
对比例4 25 6 1
空白对照组 21 8 1
[0095] 经过小范围实验验证，将实施例1-7的饲料添加剂应用于饲喂牛和羊时也同样适用，经过对比，日粮中添加20％的饲料添加剂的羊比空白对照组高15-21％。日两种添加25％的发酵培养物的牛60天后增重量比空白对照组高19-27％。
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