【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は免疫応答の修飾作用を有する新規な環状アミノフェニル酢酸誘導体、その光学異性体並びにそれらの塩及びそれらを有効成分とする自己免疫疾患治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】免疫応答の関与する慢性疾患（関節リウマチや自己免疫疾患）
の治療には、抗炎症剤や免疫調節剤などが使用されている。 前者は対症療法であり、免疫異常や病状の進行を改善しない。 これに対し、後者は金製剤やＤ−ペニシラミン、レバミゾール、ロベンザリット等が知られており、
注目されている。 しかし、従来の免疫調節剤は、薬効の発現が遅い。 しかも、長期間に亘る治療が必要であるにもかかわらず、重篤な副作用が出現するため、使用が制限されている。

【０００３】本発明者らも、有効でより安全性の高い抗リウマチ剤の開発を目的として、鋭意研究を重ねており、先に環状アントラニル酸誘導体が免疫調節作用及び抑制性Ｔ細胞の誘導能を有し、かつリウマチ性関節炎に対する治療効果を有することを発見した（特開平１−27
9867号公報、特開平３−17061 号公報）。 しかし、環状アミノフェニル酢酸誘導体でかかる作用を有する化合物は知られてない。

【０００４】本発明の化合物と置換基を異にする環状アミノフェニル酢酸誘導体では、抗炎症、解熱鎮痛作用を有するものが特開昭58−116466号公報、米国特許 3,77
8,511号（1973）に記載されているが、免疫応答の修飾作用については全くふれられていない。 これら公知化合物は胃腸障害を起こす可能性が示唆され、シクロオキシゲナーゼ阻害作用を有する非ステロイド系抗炎症薬の範疇にはいるもので、有効性や安全性の点から満足のいくものではない。 又、モノアミンオキシダーゼ阻害作用を示す環状アミノフェニル酢酸誘導体も知られているが（ケミカルアブストラクト64巻1753c (1966)、同70巻10
292f (1969))、これらも本発明の化合物と構造並びに作用を異にするものである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、更に関連化合物の研究を重ねた結果、一般式（１）

¹は炭素数１〜４の低級アルキル基を、Ｘは水素原子又はハロゲン原子を表す）で示される新規な環状アミノフェニル酢酸誘導体、その光学異性体並びにそれらの塩が、免疫応答の顕著な修飾作用を有し、かつ従来の免疫調節剤にみられない速効性を有し、しかもシクロオキシゲナーゼ阻害作用を示さないことを発見した。 即ち、リウマチ性関節炎の代表的な病態モデルであるアジュバント関節炎に対して速効的で、かつ持続性の治療効果を示し、また、抗体産生細胞の出現を抑制することを見い出した。 安全性も確認するに至り、本発明を完成した。

【０００６】本発明によれば、一般式（１）で表される化合物は、例えば以下に述べる方法によって製造することができる。

【０００７】即ち、一般式（２）

¹は炭素数１〜４の低級アルキル基を、Ｘ及びＸ

¹は水素原子又はハロゲン原子を表す）で表されるキノリン誘導体を還元することによって、一般式（１）で表される本発明化合物を製造することができる。 （式中、Ｒ、Ｒ

¹及びＸは前記に同じ意味を表す）

【０００８】この還元は、一般式（２）の化合物を適当な溶媒、例えばメタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等に溶解し、接触還元触媒、例えばパラジウム炭素の存在下に、水素気流下、常圧から50kg／cm
²で、常温から80℃の温度で実施することができる。
又、適当な溶媒、例えばメタノール、エタノール、酢酸の中でシアノ水素化ホウ素ナトリウムを作用させることによっても製造することができる。

【０００９】また、一般式（１ａ）

¹は前記に同じ意味を表す）で表される化合物を不活性溶媒中、ハロゲン化剤、例えばフッ素、塩素、次亜ハロゲン酸、Ｎ−ハロゲノコハク酸イミド、ハロゲンピリジン系塩素コンプレックス等と反応させることによって一般式（１ｂ） （式中、Ｘ

²はハロゲン原子を、Ｒ及びＲ

¹は前記に同じ意味を表す）で表される本発明化合物を製造することができる。

【００１０】更に、一般式（１ｃ）

²は炭素数１〜４の低級アルキル基を、Ｒ

¹

及びＸは前記に同じ意味を表す）で表されるエステル誘導体は、常法に従って酸又はアルカリで加水分解することによって、容易に一般式（１ｄ） （式中、Ｒ

¹及びＸは前記に同じ意味を表す）で表される本発明化合物に誘導することができる。

【００１１】また、一般式（１ｄ）

¹及びＸは前記に同じ意味を表す）で表されるカルボン酸誘導体は、常法に従ってエステル化することによって、容易に一般式（１ｃ） （式中、Ｒ

¹ 、Ｒ

²及びＸは前記に同じ意味を表す）で表される本発明化合物に誘導することができる。

【００１２】なお、一般式（２）で表される本発明の重要な中間体は公知の方法で製造することができる。

【００１３】又、一般式（１）で表される本発明化合物は、少なくとも１個の不斉炭素を有するため、少なくとも２個の光学異性体が存在するが、本発明はそれらの光学異性体及びそのラセミ体も含有するものである。

【００１４】光学異性体の合成に関しては、例えばジャーナル・オブ・メディシナルケミストリー30巻 839頁（1987年）に記載されているＮ−トシル−Ｌ−プロリンを用いたテトラヒドロキノリン誘導体のジアステレオ異性体に対する分割方法を応用することにより、本発明化合物の光学異性体が合成できる。

【００１５】次、一般式（１）で表される化合物は、要すれば常法に従ってその塩、例えば酸付加塩として、塩酸、硫酸、燐酸、メタンスルホン酸、乳酸、クエン酸、
酒石酸等の塩に、又、アルカリ塩としてはナトリウム、
カリウム、マグネシウム等の金属塩に変換することができる。

【００１６】

【実施例】次に本発明を具体例によって説明するが、これらの例によって本発明が限定されるものではない。

【００１７】（実施例１） 4-クロロ-2- メチルキリノン-6- 酢酸メチル

【００１８】(a) p-アミノフェニル酢酸メチル（５
ｇ）、アセト酢酸t-ブチル（5.27ｇ）及びp-トルエンスルホン酸（300mg)をベンゼン（80mL）に溶解し、モレキュラーシーブ（MS４オングストローム）を入れたディーンスターク脱水装置を備えて５時間加熱還流した。 溶媒を減圧留去し残渣をシリカゲルカラムで精製して3-[4-
(メトキシカルボニルメチル）フェニルアミノ]-3-メチルアクリル酸t-ブチル（2.89ｇ）の無色油状物を得た。

【００１９】(b) この油状物にジフェニルエーテル（20
mL）を加え 240〜250 ℃で30分間加熱攪拌した。 冷後ヘキサン（500mL)を加え上澄みを除き、オキシ塩化リン（20mL）を加えて２時間加熱還流した。 反応液を減圧濃縮し、残渣に酢酸エチルを加えてから飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和した。 有機層を水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。 残渣をシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；酢酸エチル：
ヘキサン＝２：３）で精製して目的物（1.62ｇ）の微黄色結晶を得た。

【００２０】（実施例２） 4-クロロ-2- エチルキノリン-6- 酢酸メチル

【００２１】p-アミノフェニル酢酸メチル（４ｇ）、プロピオニル酢酸エチル（４ｇ）及びp-トルエンスルホン酸（200mg)を（実施例１）(a) と同様に処理し、3-エチル-3-[4-（メトキシカルボニルメチル）フェニルアミノ］アクリル酸エチル（7.52ｇ）の無色油状物を得た。
この油状物を（実施例１）(b) と同様にジフェニルエーテル（30mL）中で加熱閉環させ更にオキシ塩化リン（30
mL）を作用させシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；
酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製して目的物（3.
13ｇ）の黄色油状物を得た。

【００２２】（実施例３） 4-クロロ-2-(n-プロピル）
キノリン-6- 酢酸メチル

【００２３】p-アミノフェニル酢酸メチル（４ｇ）、ブチリル酢酸エチル（4.75mL）、及びp-トルエンスルホン酸（500mg)を（実施例１）(a) と同様に処理し、3-[4-
(メトキシカルボニルメチル）フェニルアミノ］-3-(n-
プロピル）アクリル酸エチル（4.15ｇ）の無色油状物を得た。 この油状物を（実施例１）(b) と同様にジフェニルエーテル（30mL）中で加熱閉環させ、更にオキシ塩化リン（20mL）を作用させシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製して目的物（1.65ｇ）の黄色油状物を得た。

【００２４】（実施例４） 4-クロロ-2-(i-プロピル）
キノリン-6- 酢酸メチル

【００２５】p-アミノフェニル酢酸メチル（４ｇ）、イソブチリル酢酸エチル（4.8mL)及びp-トルエンスルホン酸（500mg)を（実施例１）(a) と同様に処理し、3-[4-
(メトキシカルボニルメチル）フェニルアミノ］-3-(i-
プロピル）アクリル酸エチル（3.75ｇ）の無色油状物を得た。 この油状物を（実施例１）(b) と同様にジフェニルエーテル（30mL）中で加熱閉環させ、更にオキシ塩化リン（30mL）を作用させシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製して目的物（1.35ｇ）の褐色油状物を得た。

【００２６】（実施例５） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
メチルキノリン-6- 酢酸メチル

【００２７】4-クロロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチル（2.34ｇ）、トリエチルアミン（1.3mL)をエタノール（70mL）に溶解し、10％パラジウム炭素（500mg)を加えて水素圧50kg／cm ²で80℃にて水素添加した。 ２時間後触媒を濾去し、濾液を減圧濃縮し、残渣に酢酸エチル（300mL)を加え、水及び飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濃縮して目的物（2.00ｇ）の無色油状物を得た。

【００２８】（実施例６） 2-エチル-1,2,3,4- テトラヒドロキノリン-6- 酢酸メチル

【００２９】4-クロロ-2- エチルキノリン-6- 酢酸メチル（3.13ｇ）、トリエチルアミン（1.65mL）をエタノール（80mL）に溶解し、10％パラジウム炭素（300mg)存在下、（実施例５）と同様に水素添加して目的物（2.38
ｇ）の黄色油状物を得た。

【００３０】（実施例７） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
(n-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル

【００３１】4-クロロ-2-(n-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル（1.65ｇ）、トリエチルアミン（0.84mL）をエタノール（80mL）に溶解し、10％パラジウム炭素（300m
g)存在下、（実施例５）と同様に水素添加して目的物（1.08ｇ）の微黄色油状物を得た。

【００３２】（実施例８） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
(i-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル

【００３３】4-クロロ-2-(i-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル（1.35ｇ）、トリエチルアミン（0.7mL)をエタノール（70mL）に溶解し、10％パラジウム炭素（300mg)
存在下、（実施例５）と同様に水素添加して、目的物（0.82ｇ）の微黄色油状物を得た。

【００３４】（実施例９） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
メチルキノリン-6- 酢酸

【００３５】1,2,3,4-テトラヒドロ-2- メチルキノリン
-6- 酢酸メチル（800mg)をエタノール（10mL）に溶解し、これに１規定水酸化ナトリウム水溶液（６mL）を加えて室温で20分間攪拌した。 反応液に水（50mL）を加え濃塩酸でｐＨ７とし、食塩を加えて塩析後、酢酸エチルで抽出し無水硫酸ナトリウムで乾燥した。 濃縮後、残渣を酢酸エチル−ヘキサンから再結晶して目的物（380mg)
の微褐色結晶を得た。

【００３６】融点 122〜123 ℃

【００３７】（実施例10） 2-エチル-1,2,3,4- テトラヒドロキノリン-6- 酢酸

【００３８】2-エチル-1,2,3,4- テトラヒドロキノリン
-6- 酢酸メチル（１ｇ）を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（420mg)の白色結晶を得た。

【００３９】融点93〜94℃

【００４０】（実施例11） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
(n-プロピル）キノリン-6- 酢酸

【００４１】1,2,3,4,- テトラヒドロ-2-(n-プロピル）
キノリン-6- 酢酸メチル（480mg)を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（300mg)の白色結晶を得た。

【００４２】融点96〜97℃

【００４３】（実施例12） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
(i-プロピル）キノリン-6- 酢酸

【００４４】1,2,3,4,- テトラヒドロ-2-(i-プロピル）
キノリン-6- 酢酸メチル（300mg)を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（190mg)の微黄色結晶を得た。

【００４５】融点99〜100 ℃

【００４６】（実施例13） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチル

【００４７】1,2,3,4-テトラヒドロ-2- メチルキノリン
-6- 酢酸メチル（1.15ｇ）をジメチルホルムアミド（20
mL）に溶解し、N-クロロコハク酸イミド（730mg)を加えて80℃で１時間攪拌した。 反応液を減圧濃縮し、残渣を酢酸エチル（100mL)に溶解し、水及び飽和食塩水で洗い無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。 残渣をシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；酢酸エチル：ヘキサン＝１：１）で精製して目的物（730mg)の黄色油状物を得た。

【００４８】（実施例14） 8-クロロ-2- エチル-1,2,
3,4- テトラヒドロキノリン-6- 酢酸メチル

【００４９】2-エチル-1,2,3,4- テトラヒドロキノリン
-6- 酢酸メチル（1.30ｇ）をジメチルホルムアミド（30
mL）に溶解し、N-クロロコハク酸イミド（780mg)を加えて（実施例13）と同様に処理し、目的物（940mg)の微黄色油状物を得た。

【００５０】（実施例15） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2-(n-プロピル）キノリン-6-酢酸メチル

【００５１】1,2,3,4-テトラヒドロ-2-(n-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル（600mg)をジメチルホルムアミド（20mL）に溶解し、N-クロロコハク酸イミド（360mg)を加えて（実施例13）と同様に処理し、目的物（470mg)の黄色油状物を得た。

【００５２】（実施例16） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2-(i-プロピル）キノリン-6-酢酸メチル

【００５３】1,2,3,4-テトラヒドロ-2-(i-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル（450mg)をジメチルホルムアミド（20mL）に溶解し、N-クロロコハク酸イミド（270mg)を加えて（実施例13）と同様に処理し、目的物（370mg)の黄色油状物を得た。

【００５４】（実施例17） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸

【００５５】8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチル（730mg)を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（520mg)の微黄色針状晶を得た。

【００５６】融点 147〜148 ℃

【００５７】（実施例18） 8-クロロ-2- エチル-1,2,
3,4- テトラヒドロキノリン-6- 酢酸

【００５８】8-クロロ-2- エチル-1,2,3,4- テトラヒドロキノリン-6- 酢酸メチル（940mg)を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（610mg)の白色針状晶を得た。

【００５９】融点 107〜108 ℃

【００６０】（実施例19） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2-(n-プロピル）キノリン-6-酢酸

【００６１】8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2-(n-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル（470mg)を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（250mg)の白色針状晶を得た。

【００６２】融点 112〜113 ℃

【００６３】（実施例20） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2-(i-プロピル）キノリン-6-酢酸

【００６４】8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2-(i-プロピル）キノリン-6- 酢酸メチル（370mg)を（実施例９）と同様にアルカリ加水分解して目的物（210mg)の微黄色結晶を得た。

【００６５】融点99℃

【００６６】（実施例21） 1-[N- トシル-L- プロリル]-1,2,3,4-テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチル（ジアステレオ異性体の合成）

【００６７】1,2,3,4-テトラヒドロ-2- メチルキノリン
-6- 酢酸メチル（5.40ｇ）、N-トシル-L- プロリルクロライド（9.93ｇ）及びピリジン（2.9mL)をジクロロエタン（16mL）に加え、70〜80℃で２時間攪拌した。 冷却後、反応液を塩化メチレン （500mL)に溶解し、水及び飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。 残渣をシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；酢酸エチル：塩化メチレン＝
１：８）で精製して前出するフラクションから異性体Ａ
（5.32ｇ）及び後出するフラクションから異性体Ｂ（5.
46ｇ）を得た。

【００６８】・異性体Ａ：白色粘性アモルファス 比旋光度［α］ _D ²³ ＋ 147°（Ｃ＝0.65、クロロホルム） ・異性体Ｂ：微褐色アモルファス様結晶 融点 133〜13
5 ℃ 比旋光度［α］ _D ²³ − 312°（Ｃ＝0.86、クロロホルム）

【００６９】

【００７０】（実施例22） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
メチルキノリン-6- 酢酸（光学異性体Ａ）

【００７１】（実施例21）の異性体Ａ（3.62ｇ）をジメチルスルホキシド（30mL）に溶解し、水酸化カリウム（10ｇ）及び水（40mL）を加えて 120℃で５時間攪拌した。 反応液に氷水（200mL)を加え濃塩酸でｐＨ３として酢酸エチル（200mL 、４回）で抽出した。 抽出液を水及び飽和食塩水で洗い、無水硫酸ナトリウムで乾燥し濃縮して、目的物（1.64ｇ）の褐色アモルファスを得た。

【００７２】（実施例23） 1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
メチルキノリン-6- 酢酸（光学異性体Ｂ）

【００７３】（実施例21）の異性体Ｂ（5.31ｇ）を（実施例22）と同様に処理して目的物（2.13ｇ）の褐色アモルファスを得た。

【００７４】（実施例24） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6酢酸-(+)- 異性体

【００７５】（実施例23）の1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
メチルキノリン-6- 酢酸（光学異性体Ｂ、2.13ｇ）をメタノール（30mL）に溶解し、室温でチオニルクロライド（６mL）をゆっくりと加えて１時間室温で攪拌した。 反応液を濃縮して残渣に氷水を加え、炭酸水素ナトリウム水溶液で中和後酢酸エチルで抽出した。 抽出液を水及び飽和食塩水で洗い無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。 残渣をシリカゲルカラムクロマト（展開溶媒；酢酸エチル：ヘキサン＝１：２）で精製し1,2,3,4-テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチルの光学異性体（2.03ｇ）の微黄色油状物を得た。 次いでこの油状物（1.92ｇ）を（実施例13）と同様N-クロロコハク酸イミド（1.29ｇ）で処理して8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチルの光学異性体（1.
20ｇ）の微黄色油状物とし、さらにこれを（実施例９）
と同様にアルカリ加水分解して目的物（810mg)の白色プリズム晶を得た。

【００７６】融点 134〜135 ℃

_D

²³ ＋68.3°（Ｃ＝0.6 、クロロホルム）

【００７７】（実施例25） 8-クロロ-1,2,3,4- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸(-)-異性体

【００７８】（実施例22）の1,2,3,4-テトラヒドロ-2-
メチルキノリン-6- 酢酸（光学異性体Ａ、1.64ｇ）を（実施例24）と同様に、1,2,3,4-テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチルの光学異性体（1.30ｇ、微黄色油状物）とし、次いでクロル化して8-クロロ-1,2,3,4
- テトラヒドロ-2- メチルキノリン-6- 酢酸メチルの光学異性体（670mg 、黄色油状物）とし、さらにアルカリ加水分解して目的物(450mg）の白色プリズム晶を得た。

【００７９】融点 135〜136 ℃

_D

²³ −70.4°（Ｃ＝0.5 、クロロホルム）

【００８０】次に動物での試験例を示す。

【００８１】（試験例１） 血管透過性亢進抑制作用

【００８２】５％アラビアゴム水溶液に懸濁した本発明化合物を ddy系雄性マウス（６週齢）に経口投与した。
投与45分後に１％エバンスブルーを尾静注（0.1ml/10g
BW）し、直ちに１％酢酸を腹腔内に投与（0.1ml/10g
BW）した。 酢酸注射30分後に屠殺し、腹腔内を2ml/10
g BWの生理食塩水で洗浄した。 洗浄液を遠心分離（3,
000rpm）し、上清について 630nmでの吸光度を測定した。 検量線からエバンスブルー量を求め、対照群に対する抑制率を求めた。 これらの結果を表１に示した。

【００８３】

【表１】

【００８４】表１に示す通り、酢酸注射によって惹起される血管透過性亢進作用を本発明化合物は有意に抑制した。

【００８５】（試験例２） アジュバント関節炎に対する治療効果

【００８６】マイコバクテリウム・ブチリカム（Mycoba
cterium butyricum 、死菌）を流動パラフィンに懸濁し、ＳＤ系ラット（雌８週齢）の右後肢に注射（0.6mg/
rat)してアジュバント関節炎を発症させた。 0.3％ＣＭ
Ｃ溶液に懸濁した本発明化合物をアジュバント注射14日後から連日７日、経口投与した。 以後、経日的に非注射肢（左後肢）膨脹を容積法で測定し、増加量を求め、その結果を表２に示した。

【００８７】

【表２】

【００８８】表２に示すように、本発明化合物には、アジュバント関節炎に対し、有意な治療効果が認められた。

【００８９】（試験例３）アジュバント注射21日後の浮腫測定後、ラットのアジュバント非注射肢を切断した。
切断した後肢の軟Ｘ線撮影を行ない、田中らの方法（応用薬理，24：571-584, 1982)に従って、関節破壊の程度をスコアー化し、その結果を表３に示した。

【００９０】

【表３】

【００９１】表３に示すように、本発明化合物は25mg/k
g にて、有意の骨破壊抑制を示した。

【００９２】（試験例４） in vitro抗ＳＲＢＣ−ＰＦ
Ｃアッセイ

【００９３】マウス（ＢＤＦ ₁ ）の脾蔵を摘出し、脾細胞浮遊液を調製した。 脾細胞浮遊液（２×10 ⁷ cells/m
l）とＳＲＢＣ（羊赤血球）浮遊液（１×10 ⁷ cells/m
l）を各50μl ずつ96ウェルプレートに播種し、ＤＭＳ
Ｏに溶解した本発明化合物を含む培地（ＲＰＭ１−1640
＋10％ＦＣＳ） 100μl を添加した（ＤＭＳＯの最終希釈濃度0.25％）。 プレートを37℃、５％ＣＯ ₂存在下で５日間培養した後、Jerne法によりＰＦＣアッセイを行い、ＩｇＭ抗体産生細胞数を計測し、その結果を表４に示した。

【００９４】

【表４】

【００９５】表４に示すように、本発明化合物は、in v
itro抗ＳＲＢＣ−ＰＦＣアッセイで、ＩｇＭ抗体産生細胞の出現を有意に抑制した。 参考例１（特開昭58−1164
66号の実施例11の化合物36）及び参考例２（特開昭58−
116466号の実施例11の化合物38）には、有意の作用が認められなかった。

【００９６】

【発明の効果】以上のように、一般式（１）で表される本発明化合物は、免疫応答の修飾作用を有し、かつ炎症性の病態モデルに対し、速効作用を示す。 にもかかわらず、シクロオキシゲナーゼ阻害作用を示さない。 従って本発明化合物には、慢性関節リウマチに対する治療効果のみならず諸種自己免疫疾患に対する治療効果も期待できる。