精子制动液及其制备方法
专利汇可以提供精子制动液及其制备方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种精子 制动 液 及其制备方法，该精子制动液包含对精子进行处理的组合物、 杀菌剂 及指示剂。本发明的精子制动液各项指标达到体外培养液的标准使用安全且易于判断培养液是否变质，为 辅助生殖技术 提供有 力 保证。，下面是精子制动液及其制备方法专利的具体信息内容。
1.一种精子制动液，其特征在于，包含对精子进行处理培养的组合物、杀菌剂及指示剂。
2.根据权利要求1所述的精子制动液，其特征在于，所述杀菌剂为庆大霉素
9.5-10.5mg/L。
3.根据权利要求1所述的精子制动液，其特征在于，所述指示剂为酚红，浓度
9.5-10.5mg/L。
4.根据权利要求1所述的精子制动液，其特征在于，所述组合物中包含氯化钠 92.815-102.585mmol/L, 氯 化 钾 4.465-4.935mmol/L，硫 酸 镁 0.19-0.21mmol/L，氯化钙1.9-2.1 mmol/L，碳酸氢钠3.8-4.2mmol/L，4-羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES
19.95-22.05mmol/L，葡萄糖2.66-2.94mmol/L，丙酮酸钠0.314-0.347mmol/L，乳酸钠
2.2743-2.5137g/L，丙氨酰谷氨酰胺0.95-1.05mmol/L，牛磺酸0.095-0.105mmol/L，非必需氨基酸0.95%-1.05%，v/v,磷酸二氢钾0.352-0.389mmol/L,庆大霉素9.5-10.5 mg/L,酚红9.5-10.5mg/L,人血清白蛋白4.75%-5.25%，v/v，聚乙烯吡咯烷酮PVP 66.5-73.5g/L。
5.根据权利要求4所述的精子制动液，其特征在于，所述非必需氨基酸为L-丙氨酸、 L-天冬酰胺、 L-天冬氨酸 、 L-谷氨酸、甘氨酸、 L-脯氨酸、 L-丝氨酸中的一种或者几种。
6.根据权利要求1所述的精子制动液，其特征在于，精子制动液的溶剂采用超纯水。
7.制备如权利要求1-6任一项所述的精子制动液方法，其特征在于包括下面步骤：
（1）基础液的配制
a、先按照比例称量各组分，并分开放置；
b、先将除杀菌剂、指示剂、碳酸氢钠、人血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮PVP外的称量好的组分溶于超纯水中，溶解过程中遵循先固体后液体，NaHCO3最后加入的原则；
c、向步骤b所得溶液中加入称量好的杀菌剂、指示剂和NaHCO3；
d、检测溶液渗透压和pH值，如果pH值不在范围内则用配制好的盐酸和氢氧化钠溶液调节pH值，并记录最终渗透压和pH值，得到基础液；
（2）精子制动液原液的配制
a、在基础液中加入PVP，将加了PVP的基础液在超净工作台下利用0.2μm的滤膜过滤除菌,得到滤液A；
b、在滤液A中加入人血清白蛋白，震荡或搅拌混合均匀，得到精子制动液的原液；
（3）精子制动液原液的处理
a、在无菌环境下对精子制动液原液进行分装封口，得到精子制动液，将其放置冰箱或冷库内保存；
b、取分装好的精子制动液进行检测，检测项目是pH值、渗透压、细胞毒性、皮内刺激、致敏、无菌、热原、细菌内毒素、体外鼠胚试验、精子活力试验来判断精子制动液是否合格。
精子制动液及其制备方法
技术领域
背景技术
发明内容
a、先按照比例称量各组分，并分开放置；
b、先将称量好的组分（除杀菌剂、指示剂、碳酸氢钠、人血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮PVP）溶于超纯水中，溶解过程中遵循先固体后液体，NaHCO3最后加入的原则；
c、向步骤b所得溶液中加入称量好的杀菌剂、指示剂和NaHCO3；
d、检测溶液渗透压和pH值，如果pH值不在范围内则用配制好的盐酸和氢氧化钠溶液调节pH值，并记录最终渗透压和pH值，得到基础液；
（2）精子制动液原液的配制
a、在基础液中加入PVP(PVP学名是聚乙烯吡咯烷酮，一种水溶性的具有高效粘合性的合成聚合物)，将加了PVP的基础液在超净工作台下利用0.2μm的滤膜过滤除菌,得到滤液A；
b、在滤液A中加入人血清白蛋白，震荡或搅拌混合均匀，得到精子制动液的原液；
（3）精子制动液原液的处理
a、在无菌环境下对精子制动液原液进行分装封口，得到市售的精子制动液，将其放置冰箱或冷库内保存。
具体实施方式
本发明精子制动液的制备方法，包括下面步骤：
a、先按照比例称量各组分，并分开放置；
b、先将称量好的组分（除杀菌剂、指示剂、碳酸氢钠、人血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮PVP）溶于超纯水中，溶解过程中遵循先固体后液体，NaHCO3最后加入的原则；
c、向步骤b所得溶液中加入称量好的杀菌剂、指示剂和NaHCO3，将溶液定容到所需体积；
d、检测溶液渗透压和pH值，如果pH值不在范围内则用配制好的盐酸和氢氧化钠溶液调节pH值，并记录最终渗透压和pH值，得到基础液；
（3）精子制动液原液的配制
a、在基础液中加入PVP(PVP学名是聚乙烯吡咯烷酮，一种水溶性的具有高效粘合性的合成聚合物)，将加了PVP的基础液在超净工作台下利用0.2μm的滤膜过滤除菌,得到滤液A；
b、在滤液A中加入人血清白蛋白，震荡或搅拌混合均匀，得到精子制动液的原液。
取一定量成品用pH计进行检测记录三次的值并取平均值为最终液体的pH值，在范围内为合格。
（九）体外鼠胚试验
1.超数排卵
选择6~8周龄雌鼠，经腹腔注射PMSG 10 IU/只；48 h后经腹腔注射hCG 10 IU/只，注射hCG当日雌鼠与同品系雄鼠合笼过夜。
2）阴性对照组的囊胚形成率≥80 %。
1） 准备一个试管，用一个10毫升移液管取10毫升精子洗涤液加到试管内，用于试验。
注：如第一个精子计数器10格内有20个活动精子，20个不活动精子，第二个精子计数器10格内有16个活动精子，18个不活动精子。那么，精子的浓度为：{（20+20）+ （16+18）}/2= 37 x 106/毫升。活动力为：（20/40+16/34）/2=48.5%。
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