专利汇可以提供一种分离哺乳动物XY精子的方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且一种分离 哺乳动物 XY精子的方法,依据哺乳动物X精子的DNA含量比Y精子多的原理,利用 荧光 染料Hoechst33342对精子DNA 染色 之后通过流式细胞仪将其分离。本 发明 通过改进精子分离之前的保存方法、精子的稀释液、分离精子的鞘液和接收液,在保证分离XY精子效率的同时,提高了精子分离的准确率和分离后精子的活 力 ,适用于黄 牛 、 水 牛、山羊等哺乳动物XY精子的大规模商业化分离生产,并可与人工授精和 体外受精 等动物繁殖新技术相结合,大大提高 畜牧业 生产的效率。,下面是一种分离哺乳动物XY精子的方法专利的具体信息内容。
1.一种分离哺乳动物XY精子的方法,根据哺乳动物X精子的DNA含量比Y精子多的原理,通过荧光染色之后使用流式细胞仪进行分离,其特征是:(1)、在采集的公畜原精液中加入抗生素混合溶液,24小时内恒温下保存。(2)、用不含卵黄的精子稀释液将原精液稀释后加入荧光染色剂、并在水浴锅中孵育染色。水浴结束后加入色素。(3)、在恒温下利用流式细胞仪分离所需的X或Y精子。(4)、用预装有含卵黄的精子接收液的试管收集分离后的X精子和Y精子,分离得到的精液经离心浓缩后可用于人工授精或体外受精,或低温平衡后冷冻保存。
2.如权利要求1所述的分离哺乳动物XY精子的方法,其特征是公畜原精液加入了抗生素混合溶液后,恒温保存的温度为22.5~27.5℃。
3.如权利要求1或2所述的分离哺乳动物XY精子的方法,其特征是精液稀释液的成分及含量为:成分 克/200毫升氯化钠 1.0~1.2氯化钾 0.04~0.05磷酸氢二钠 0.005~0.010碳酸氢钠 0.15~0.18六水氯化镁 0.01~0.02丙酮酸钠 0.04~0.05葡萄糖 0.15~0.20乳酸钠 0.70~0.75毫升/200毫升HEPES 1.5~2.0牛血清白蛋白 0.1~0.8硫酸庆大霉素 0.005~0.010
4.如权利要求1所述的分离哺乳动物XY精子的方法,其特征是在10℃~25℃恒温下利用流式细胞仪分离X或Y精子。
5.如权利要求4所述的分离哺乳动物XY精子的方法,其特征是利用流式细胞仪分离X或Y精子时所用的鞘液成分及含量为:成分 克/1000毫升TRIS 22.00~25.00柠檬酸 10.00~13.00果糖 8.00~10.00氯化钠 0.80~1.00青霉素 0.05~0.29链霉素 0.05~0.25
6.如权利要求4或5所述的分离哺乳动物XY精子的方法,其特征是接收液成分及含量为:成分 克/100毫升TRIS 3.00~4.50柠檬酸 1.50~2.50果糖 1.00~1.50太乐菌素 0.010.02林可霉素 0.03~0.05壮观霉素 0.06~0.08庆大霉素 0.05~0.08使用之前按照体积百分比加入10%~30%的新鲜卵黄。
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