用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂
阅读：336发布：2024-02-01
专利汇可以提供用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种用于控制果实采后病害的复配化学 杀菌剂 ，每L复配化学杀菌剂中的有效成分由以下含量的成分组成：咪鲜胺1~10 毫克，双胍三辛烷基苯磺酸盐1~10毫克，嘧霉胺1~10毫克，咯菌腈1~10毫克。本发明提供的复配化学杀菌剂能在大幅度降低化学杀菌剂使用量的前提下，有效控制果实（特别是柑橘）的采后病害，具有重要的应用推广价值。，下面是用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂专利的具体信息内容。
1.用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂，其特征是每升复配化学杀菌剂中的有效成分由以下含量的成分组成：
咪鲜胺1～10毫克，
双胍三辛烷基苯磺酸盐1～10毫克，
嘧霉胺1～10毫克，
咯菌腈1～10毫克。
2.用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂，其特征是每升复配化学杀菌剂由含有
1～10毫克咪鲜胺的咪鲜胺类杀菌剂、含有1～10毫克双胍三辛烷基苯磺酸盐的双胍三辛烷基苯磺酸盐类杀菌剂，含有1～10毫克嘧霉胺的嘧霉胺类杀菌剂、含有1～10毫克咯菌腈的咯菌腈类杀菌剂和作为余量的水组成。
3.根据权利要求1或2所述的用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂，其特征是每升复配化学杀菌剂中的有效成分由以下含量的成分组成：
咪鲜胺10毫克，
双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克，
嘧霉胺10毫克，
咯菌腈10毫克。
用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂
技术领域
[0001] 本发明涉及果实采后病害防治技术领域，更具体的是一种用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂。
背景技术
[0002] 由各种病原真菌引起的柑橘果实采后病害占柑橘果实总损耗的50%左右。目前，国内外控制柑橘采后病害的主要措施仍然是依赖于化学杀菌剂。化学杀菌剂具有作用机理明确、效价高且效果稳定、并能控制采前潜伏感染的病原菌等优点，所以直到现在仍然是控制采后病害的主要方法之一。中国发明专利（申请号200910028802.2，一种柑橘保鲜剂）提供了可控制柑橘病害的多种化学杀菌剂，包括甲基托布津，多菌灵。中国发明专利（申请号200910028804.1）提供了可控制柑橘病害的化学杀菌剂，包括2,4-D钠盐，托布津。中国发明专利（申请号201110209305.X）提供了可控制柑橘病害的多种化学杀菌剂，包括醚菌酯、唑菌胺脂、肟菌酯、烯肟菌酯等。
[0003] 由于传统上长期广泛使用一种杀菌剂会引起严重的病原微生物耐药性问题，不仅导致杀菌剂的效力降低，而且会增强提高杀菌剂的使用量的需求和开发新型杀菌剂的需求。但是开发一个新型杀菌剂的成本很高，在欧美大约需要1.84~2亿美元的开发经费。
[0004] 咪鲜胺（Prochloraz）类杀菌剂，双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）类杀菌剂，嘧霉胺（Pyrimethanil）类杀菌剂和咯菌腈（Fludioxonil）是目前可用于果实防腐保鲜的化学杀菌剂。。
发明内容
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂，每L复配化学杀菌剂中的有效成分由以下含量的成分组成：
[0006] 咪鲜胺（Prochloraz）1~10 毫克，
[0007] 双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）1~10毫克，
[0008] 嘧霉胺（Pyrimethanil）1~10毫克，
[0009] 咯菌腈（Fludioxonil）1~10毫克。
[0010] 作为本发明的用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂的改进：每L复配化学杀菌剂由含有1~10 毫克咪鲜胺的咪鲜胺（Prochloraz）类杀菌剂、含有1~10 毫克双胍三辛烷基苯磺酸盐的双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）类杀菌剂，含有1~10 毫克嘧霉胺的嘧霉胺（Pyrimethanil）类杀菌剂和含有1~10 毫克咯菌腈的咯菌腈（Fludioxonil）类杀菌剂和作为余量的水组成。
[0011] 作为本发明的用于控制果实采后病害的复配化学杀菌剂的改进，每L复配化学杀菌剂中的有效成分由以下含量的成分组成：
[0012] 咪鲜胺（Prochloraz）10 毫克，
[0013] 双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）10毫克，
[0014] 嘧霉胺（Pyrimethanil）10毫克，
[0015] 咯菌腈（Fludioxonil）10毫克。
[0016] 本发明是一种基于低剂量化学杀菌剂复合使用控制果实采后病害的方法。本发明实际使用时，将含有1~10 毫克咪鲜胺的咪鲜胺（Prochloraz）类杀菌剂、含有1~10 毫克双胍三辛烷基苯磺酸盐的双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）类杀菌剂，含有1~10 毫克嘧霉胺的嘧霉胺（Pyrimethanil）类杀菌剂和含有1~10 毫克咯菌腈的咯菌腈（Fludioxonil）化学杀菌剂混合后，用水定容至1L；从而获得本发明所述的复配化学杀菌剂。
[0017] 本发明所提供的基于咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺和咯菌腈的化学杀菌剂低剂量配合使用的果实病害控制方法，与单一使用化学杀菌剂的方法相比，能降低原使用浓度20到100倍以上，从而大幅度降低使用化学杀菌剂可能存在的潜在的危害，而且由于所使用的低剂量杀菌剂组合中包含了多种杀菌剂的类型，也将大幅度降低病原菌产生抗药性的可能性。此外由于所使用浓度的大幅度降低，也能大幅度的降低使用化学杀菌剂的成本。因此，使用本发明的复配化学杀菌剂，具有安全性高、操作简便、成本低廉、效果显著等优点，具有良好的实际应用前景和价值。
[0018] 综上所述，本发明提供的复配化学杀菌剂能在大幅度降低化学杀菌剂使用量的前提下，有效控制果实（特别是柑橘）的采后病害，具有重要的应用推广价值。
[0019] 本发明实际使用时，可将采后的新鲜果实放入本发明所述的复配化学杀菌剂中浸泡1~3分钟，接着擦干果实表面残留的复配化学杀菌剂，然后按照常规的方式进行包装和储存。
具体实施方式
[0020] 实验1 低剂量杀菌剂组合（复配化学杀菌剂）对控制梨果实青霉病的影响[0021] 1、实验材料：
[0022] 果实为梨，品种为水晶梨。病原菌：扩展青霉。
[0023] 所使用杀菌剂为：
[0025] 百可得，双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）类杀菌剂，剂型为40%可湿性粉剂，购自大日本油墨化学工业株式会社，正常使用推荐浓度为200-400mg/kg。
[0026] 施加乐（Scale），嘧霉胺（Pyrimethanil）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自拜耳作物科学公司，正常使用推荐浓度为1000-1500倍液。
[0027] 适乐时，咯菌腈（Fludioxonil）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自瑞士先正达作物保护有限公司，正常使用推荐浓度为1:167-250。
[0028] 作为对照用的杀菌剂---维鲜，抑霉唑（Imazalil）类杀菌剂，剂型为50%乳油，购自比利时扬森制药公司，正常使用推荐浓度为每5毫升加水7.5-10公斤。
[0029] 2、处理：
[0031] （2）、防腐保鲜效果对比实验：用灭菌的打孔器在水果腰部穿刺均一的3mm深×6mm宽的伤口。在每个伤口处分别对应加入以下一种溶液30μl：
[0033] 2)处理2，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1毫克，其余为水。
[0034] 即，每升复配化学杀菌剂由含有抑霉唑1毫克的维鲜和作为余量的水组成。以下类同。
[0035] 3)处理3，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克，其余为水。
[0036] 4)处理4，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑100毫克，其余为水。
[0037] 5)处理5，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1000毫克，其余为水。
[0038] 6)处理6，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐1毫克，其余为水。
[0039] 即，每升复配化学杀菌剂由含有双胍三辛烷基苯磺酸盐1毫克的百可得和作为余量的水组成。以下类同。
[0040] 7)处理7，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克，其余为水。
[0041] 8)处理8，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐100毫克，其余为水。
[0042] 9)处理9，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐1000毫克，其余为水。
[0043] 10)处理10，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺1毫克，其余为水。
[0044] 即，每升复配化学杀菌剂由含有嘧霉胺1毫克的施加乐（Scale）和作为余量的水组成。以下类同。
[0045] 11)处理11，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0046] 12)处理12，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺100毫克，其余为水。
[0047] 13)处理13，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺1000毫克，其余为水。
[0048] 14)处理14，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0049] 15)处理15，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0050] 16)处理16，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克和嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0051] 17)处理17，本发明：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克、嘧霉胺10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0052] 即，每L复配化学杀菌剂由含有10 毫克咪鲜胺的扑霉灵、含有10 毫克双胍三辛烷基苯磺酸盐的百可得，含有10 毫克嘧霉胺的施加乐、含有10 毫克咯菌腈的适乐时和作为余量的水组成。
[0053] 18)处理18，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺14毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐14毫克、嘧霉胺14毫克，其余为水。
[0054] 19)处理19，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺14毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐14毫克、咯菌腈14毫克，其余为水。
[0055] 20)处理20，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺14毫克、嘧霉胺14毫克、咯菌腈14毫克，其余为水。
[0056] 21)处理21，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐14毫克、嘧霉胺14毫克和咯菌腈14毫克，其余为水。
[0057] 备注说明：以上各个处理中指的均是有效剂量，例如，处理17是指扑霉灵、百可得、施加乐、适乐时和水进行混合；从而使所得的每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克、嘧霉胺10毫克和咯菌腈10毫克。
[0058] 以上处理完成2小时后（即加入杀菌剂2小时后），取5×104cfu/ml的扩展青霉菌悬液30μl，接种在每个水果伤口处。将这些处理过的水果放在400×300×200mm塑料筐中，用PE保鲜膜进行覆盖密封，保持95％的相对湿度。并将其于25℃下保藏。定时对果实伤口病害发生率和病斑直径进行观察和统计。结果以平均发病率（%）和平均病斑直径（mm）表示。每处理重复3次，每个重复6个果实。整个实验重复3次。
[0059] 3、结果：如表1所示，抑霉唑、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺单独使用时，只有在浓度100毫克/升时，才能产生对梨果实青霉病病害有效的控制。当浓度在10毫克/升时，抑霉唑、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺单独均不能对该病害产生抑制作用。而嘧霉胺与咯菌腈在浓度10毫克/升复合使用时仅能降低病害发生率14%左右；抑霉唑、双胍三辛烷基苯磺酸盐、咯菌腈在浓度10毫克/升复合使用时仅能降低病害发生率33%左右；抑霉唑、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺在浓度10毫克/升复合使用时仅能降低病害发生率47%左右。
[0060] 如处理18~处理21所示，选用本发明所述的任意3种成分进行复配，即使总含量为42毫克（略大于本发明的40毫克）时，使用效果也远远不如本发明。
[0061] 但是本发明提供的低剂量杀菌剂组合咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺、咯菌腈在浓度10毫克/升复合使用时能完全抑制梨果实青霉病病害的发生。
[0062] 因此本发明提供的低剂量杀菌剂组合的抑制病害的效力非常显著，且能大幅度降低杀菌剂的使用量。
[0063] 表1 低剂量杀菌剂组合对梨果实青霉病的控制（第3天）
[0064]
[0065] 实验2 低剂量杀菌剂组合（复配化学杀菌剂）对控制早柑果实青霉病的影响[0066] 1、实验材料：
[0067] 果实为柑橘，品种为早桔。病原菌：指状緑霉。
[0068] 所使用杀菌剂为：
[0069] 扑霉灵，咪鲜胺（Prochloraz）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自以色列马克西姆化学公司，正常使用推荐浓度为250-500mg/kg。
[0070] 百可得，双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）类杀菌剂，剂型为40%可湿性粉剂，购自大日本油墨化学工业株式会社，正常使用推荐浓度为200-400mg/kg。
[0071] 施加乐Scale，嘧霉胺（Pyrimethanil）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自拜耳作物科学公司，正常使用推荐浓度为1000-1500倍液。
[0072] 适乐时，咯菌腈（Fludioxonil）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自瑞士先正达作物保护有限公司，正常使用推荐浓度为1:167-250。
[0073] 2、处理：
[0074] （1）、水果预处理：选取外观整齐、无病虫害的果实，先用自来水清洗，然后再浸入0.1%（质量浓度）的次氯酸钠溶液中消毒2分钟，取出，再用自来水冲洗干净，洗去残余次氯酸钠，晾干备用。
[0075] （2）、防腐保鲜实验：用灭菌的打孔器在水果腰部穿刺均一的3mm深×6mm宽的伤口。在每个伤口处分别对应加入以下一种溶液30μl：
[0076] 1)处理1，空白对照：即水处理。
[0077] 2)处理2，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1毫克，其余为水。
[0078] 3)处理3，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克，其余为水。
[0079] 4)处理4，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑100毫克，其余为水。
[0080] 5)处理5，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1000毫克，其余为水。
[0081] 6)处理6，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0082] 7)处理7，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克、嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0083] 8)处理8，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克、咪鲜胺10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0084] 9)处理9，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑10毫克、咪鲜胺10毫克和嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0085] 10)处理10，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0086] 11)处理11，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克和双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克，其余为水。
[0087] 12)处理12，本发明：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克、嘧霉胺10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0088] 13)处理13，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐1毫克和咯菌腈1毫克，其余为水。
[0089] 14)处理14，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐1毫克、嘧霉胺1毫克，其余为水。
[0090] 15)处理15，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1毫克、咪鲜胺1毫克和咯菌腈1毫克，其余为水。
[0091] 16)处理16，对比例：每升复配化学杀菌剂中含抑霉唑1毫克、咪鲜胺1毫克和嘧霉胺1毫克，其余为水。
[0092] 17)处理17，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺1毫克和咯菌腈1毫克，其余为水。
[0093] 18)处理18，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺1毫克和双胍三辛烷基苯磺酸盐1毫克，其余为水。
[0094] 19)处理19，本发明低浓度组合：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺1毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐1毫克、嘧霉胺1毫克和咯菌腈1毫克，其余为水。
[0095] 以上处理完成2小时后（即加入杀菌剂2小时后），取5×104cfu/ml的指状緑霉菌悬液30μl，接种在每个水果伤口处。将这些处理过的水果放在400×300×200mm塑料筐中，用PE保鲜膜进行覆盖密封，保持95％的相对湿度。并将其于25℃下保藏。定时对果实伤口病害发生率和病斑直径进行观察和统计。结果以平均发病率（%）和平均病斑直径（mm）表示。每处理重复3次，每个重复6个果实。整个实验重复3次。
[0096] 3、结果：
[0097] 如表2所示，空白对照在接种病原菌后的第3天发病率即达73.3%，到第四天时100%发病，其病斑直径分别达8毫米和31.3毫米。不同浓度的杀菌剂抑霉唑均能抑制病害的发生和发展，但只有浓度为1000毫克/升的抑霉唑能在4天内完全抑制病害的发生。而浓度为10毫克/升的组合，包括抑霉唑与双胍三辛烷基苯磺酸盐、咯菌腈，抑霉唑、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺，抑霉唑、咪鲜胺、咯菌腈，抑霉唑、咪鲜胺、嘧霉胺，咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐虽然在第3天时能完全抑制病害，但到第4天时的发病率均在20%以上；而浓度为10毫克/升的嘧霉胺和咯菌腈组合，对病害不能有效的抑制。
[0098] 但是本发明提供的低剂量杀菌剂组合咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺、咯菌腈在浓度10毫克/升复合使用时能完全抑制早桔果实青霉病病害的发生。
[0099] 即使是本发明提供的低剂量杀菌剂组合咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺、咯菌腈在浓度1毫克/升复合使用时，也能在第3天降低40个左右百分点的发病率。
[0100] 因此本发明提供的低剂量杀菌剂组合的抑制病害的效力非常显著，且能大幅度降低杀菌剂的使用量。
[0101] 表2 低剂量杀菌剂组合对早桔果实青霉病的控制
[0102]
[0103]
[0104] 实验3 低剂量杀菌剂组合（复配化学杀菌剂）对控制椪柑果实青霉病的影响[0105] 1、实验材料：
[0106] 果实为柑橘，品种为椪柑。病原菌：指状緑霉。
[0107] 所使用杀菌剂为：
[0108] 扑霉灵，咪鲜胺（Prochloraz）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自以色列马克西姆化学公司，正常使用推荐浓度为250-500mg/kg。
[0109] 百可得，双胍三辛烷基苯磺酸盐（Iminoctadine tris）类杀菌剂，剂型为40%可湿性粉剂，购自大日本油墨化学工业株式会社，正常使用推荐浓度为200-400mg/kg。
[0110] 施加乐Scale，嘧霉胺（Pyrimethanil）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自拜耳作物科学公司，正常使用推荐浓度为1000-1500倍液。
[0111] 适乐时，咯菌腈（Fludioxonil）类杀菌剂，剂型为悬浮剂，购自瑞士先正达作物保护有限公司，正常使用推荐浓度为1:167-250。
[0112] 2、处理：
[0113] （1）、水果预处理：选取外观整齐、无病虫害的果实，先用自来水清洗，然后再浸入0.1%（质量浓度）的次氯酸钠溶液中消毒2分钟，取出，再用自来水冲洗干净，洗去残余次氯酸钠，晾干备用。
[0114] （2）、防腐保鲜实验：用灭菌的打孔器在水果腰部穿刺均一的3mm深×6mm宽的伤口。在每个伤口处分别对应加入以下一种溶液30μl：
[0115] 1)处理1，空白对照：即水处理
[0116] 2)处理2，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克，其余为水。
[0117] 3)处理3，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克，其余为水。
[0118] 4)处理4，对比例：每升复配化学杀菌剂中含嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0119] 5)处理5，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咯菌腈10毫克，其余为水。
[0120] 6)处理6，本发明：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克、嘧霉胺10毫克和咯菌腈10毫克，其余为水。
[0121] 7)处理7，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺20毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克和嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0122] 8)处理8，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐20毫克和嘧霉胺10毫克，其余为水。
[0123] 9)处理9，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺10毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克和嘧霉胺20毫克，其余为水。
[0124] 10)处理10，对比例：每升复配化学杀菌剂中含双胍三辛烷基苯磺酸盐10毫克、嘧霉胺10毫克和咯菌腈20毫克，其余为水。
[0125] 11)处理11，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺8毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐8毫克、嘧霉胺8毫克和咯菌腈8毫克，其余为水。
[0126] 12)处理12，对比例：每升复配化学杀菌剂中含咪鲜胺12毫克、双胍三辛烷基苯磺酸盐12毫克、嘧霉胺12毫克和咯菌腈12毫克，其余为水。
[0127] 以上处理完成2小时后，取5×104cfu/ml的指状緑霉菌悬液30μl，接种在每个水果伤口处。将这些处理过的水果放在400×300×200mm塑料筐中，用PE保鲜膜进行覆盖密封，保持95％的相对湿度。并将其于25℃下保藏。定时对果实伤口病害发生率和病斑直径进行观察和统计。结果以平均发病率（%）和平均病斑直径（mm）表示。每处理重复3次，每个重复6个果实。整个实验重复3次。
[0128] 3、结果：
[0129] 如表3所示，空白对照在接种病原菌后的第3天发病率即达100%，到第3天和第四天时的病斑直径分别达29.9毫米和34.3毫米。咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺、咯菌腈在浓度10毫克/升单独使用时，除咪鲜胺有一定的抑制效果外，其余3种杀菌剂均不能抑制椪柑果实青霉病病害的发生。
[0130] 而本发明提供的浓度分别为10毫克/升的咪鲜胺、双胍三辛烷基苯磺酸盐、嘧霉胺、咯菌腈低剂量杀菌剂组合能在第3天降低发病率50个百分点，第4天时也能降低发病率30~40个百分点，其平均病斑直径分别仅为空白对照的20.1%和28.6%。而任意3种成分复配，有效量之和为40mg的4组对比例（处理7-10），其对病害的抑制结果均不如本发明提供的“处理6”组合；当4种有效成分的含量均下降到8mg所得的“处理组”的抑菌结果，明显低于本发明提供的“处理6”；当4种有效成分的含量提高到12mg所得的“处理组”抑菌效果，与本发明提供的“ 处理6”的效力基本相当。
[0131] 因此本发明提供的低剂量杀菌剂组合的抑制病害的效力非常显著，且能大幅度降低杀菌剂的使用量。
[0132] 表3 低剂量杀菌剂组合对椪柑果实青霉病的控制
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