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脂肪干细胞分离装置

阅读：58发布：2020-05-08

专利汇可以提供脂肪干细胞分离装置专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本发明提供脂肪干细胞分离装置。本发明包括：第一密封盖，其具备使贯通形成在上部面的连通口开闭的辅助盖，具有从下部面延长的规定长度的操纵杆；第一圆筒外壳，在其上端外周面形成与形成在上述第一密封盖的下端内周面的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部，由此通过第一密封盖开放的上部被选择性地开闭，并且形成第一空间；第二圆筒外壳，其将形成在配置有上述操纵杆的第一圆筒外壳的下端的颈部的颈孔作为介质，与上述第一圆筒外壳相连通；盖连接部，其组装在上述第二圆筒外壳的开放的下部，以便在与上述第二圆筒外壳之间形成第二空间；第二密封盖，其具备对应插入于贯通形成在所述盖连接部的排出口的封闭部件，而组装在所述盖连接部。，下面是脂肪干细胞分离装置专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种脂肪干细胞分离装置，其特征在于，包括：
第一密封盖，其具备使贯通形成在上部面的连通口开闭的辅助盖，具有从下部面延长的规定长度的操纵杆；
第一圆筒外壳，在其上端外周面形成与形成在所述第一密封盖的下端内周面的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部，由此通过第一密封盖开放的上部被选择性地开闭，并且形成第一空间；
第二圆筒外壳，其将形成在配置有所述操纵杆的第一圆筒外壳的下端的颈部的颈孔作为介质，与所述第一圆筒外壳相连通；
盖连接部，其组装在所述第二圆筒外壳的开放的下部，以便在与所述第二圆筒外壳之间形成第二空间；
第二密封盖，其具备对应插入于贯通形成在所述盖连接部的排出口的封闭部件，而组装在所述盖连接部。
2.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，
所述操纵杆由与从所述第一密封盖的封闭的下部面向直下部以规定长度延长的盖延长管的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部形成在上部端的规定长度的杆部件形成，或者由与从贯通形成在所述第一密封盖的封闭的上部面的贯通孔向直下部以规定长度延长的盖延长管的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部形成在长度中间的规定长度的杆部件形成。
3.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，
所述颈部的颈孔包括上部引导管，所述上部引导管以规定长度延长，以便引导所述操纵杆的下部端进入，所述上部引导管包括开口形成的至少一个狭缝。
4.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，
所述封闭部件形成为从所述第二密封盖的上部面中央以规定高度延长的柱子形状，以便进入从所述排出口向下延长的下部延长管的内部孔进行封闭。
5.根据权利要求4所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，
在所述封闭部件的外侧包括内周面形成有内螺纹部的连接管，以便与形成在所述下部延长管的外周面的外螺纹部螺纹结合。
6.根据权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，包括：
过滤部，其用于去除包含在通过所述第二密封盖所分离的所述盖连接部而向外部排出的对象物中的异物，
所述过滤部包括：上部盖，其上部面中央设置有与所述盖连接部的排出口连通连接的流入口；过滤体，其设置在从与所述流入口对应的上部盖的下部面以规定长度延长的过滤管的端部，用于去除异物；以及过滤外壳，其组装有所述上部盖和开放的上部端，以排出通过所述过滤体来进行过滤的对象物的方式具有至少一个流出口。
7.根据权利要求6所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，
所述过滤体包括：内部过滤网，其入口端固定在所述过滤管的端部；外部过滤网，其具备比所述内部过滤网的网眼尺寸相对小的网眼尺寸，配置在所述内部过滤网的外侧。
8.根据权利要求7所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述内部过滤网的出口端与所述外部过滤网的出口端隔着规定间距相互隔开。

说明书全文

脂肪干细胞分离装置

技术领域

[0001] 本发明涉及一种从脂肪组织中分离脂肪干细胞的装置，更详细地，涉及一种如下的脂肪干细胞分离装置(DEVICE FOR SEPARATING THE ADIPOSE STEM CELLS)，其可以从脂肪组织中轻松分离提取通过离心机离心分离的脂肪干细胞(Stromal Vascular Fraction，SVF)。

背景技术

[0002] 一般而言，干细胞是一种既有自我复制能力，又有分化为两个以上细胞的能力的细胞。近年来，除了从骨髓中获得干细胞的研究之外，可从脂肪组织中获得干细胞的研究也正在进行。

[0003] 从脂肪组织中分离的脂肪来源干细胞是一种具有可以分化为脂肪细胞、肌肉细胞、软骨细胞，骨细胞等多种类型细胞的能力的多分化能干细胞(pluripotent stem cell)。

[0004] 这种脂肪干细胞相比于骨髓来源的充质干细胞，自我再生能力优异，容易进行体外培养，可分离脂肪干细胞的脂肪组织丰富，提取方法简单又安全。

[0005] 并且，据悉，脂肪干细胞在分化能力、细胞学特性、免疫学特性、组织再生能力等几乎所有特性上与骨髓来源的充质干细胞相同。

[0006] 即，脂肪干细胞作为具有能代替骨髓来源的充质干细胞的高可能性的干细胞，医学实用性相当优异。

[0007] 并且，脂肪干细胞相比于充质干细胞，获取组织的过程容易又安全，具有对组织供需没有限制的优点，容易进行体外培养，从组织接近性、安全性、有效性及经济方面来看，可以视为在充质干细胞之上。

[0008] 通常使用的脂肪干细胞的分离及培养法实施如下的方法：重新粉碎吸入或切除的脂肪，且将组织分解为胶原酶(collagenase)后，在通过离心分离沉淀而分离的基质血管组分(stromal vascular fraction；SVF)中培养细胞。

[0009] 另一方面，通常，在一个分离容器中，实现从脂肪组织中分离脂肪干细胞的所有过程，此时，由于在过程中所生成的产物的排出及废弃等，工艺变得复杂。为了解决上述问题，还利用两个分离容器来实现从脂肪组织中分离脂肪干细胞的过程。

[0010] 即，当使用两个分离容器时，由于在一个分离容器中实现处理脂肪组织的过程，而在另一个分离容器中实现处理所分离的干细胞的过程，因此分离容器(使用的消耗品)的数量增加，用于使分离容器发生旋转的结构要素也增加，从而产生分离时间及根据分离装置的费用增加的问题。

[0011] (专利文献1)KR10-1749932B1

发明内容

[0012] 因此，本发明为解决上述技术问题而提出，其目的在于，提供一种如下的脂肪干细胞分离装置，其可以通过简化从脂肪中提取分离脂肪干细胞(SVF)的过程来减少提取时间和费用，提高所提取分离的脂肪干细胞(SVF)的过滤率，可增加提取量。

[0013] 本发明所要解决的技术问题不限于前述的技术问题，本领域技术人员可以根据以下的记载而明确地了解到未提及的其它技术问题。

[0014] 本发明的优选实施例作为用于实现上述目的具体技术手段，提供一种脂肪干细胞分离装置，该脂肪干细胞分离装置包括：第一密封盖，其具备使贯通形成在上部面的连通口开闭的辅助盖，具有从下部面延长的规定长度的操纵杆；第一圆筒外壳，在其上端外周面形成与形成在上述第一密封盖的下端内周面的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部，由此通过第一密封盖开放的上部被选择性地开闭，并且形成第一空间；第二圆筒外壳，其将形成在配置有上述操纵杆的第一圆筒外壳的下端的颈部的颈孔作为介质，与上述第一圆筒外壳相连通；盖连接部，其组装在上述第二圆筒外壳的开放的下部，以便在与上述第二圆筒外壳之间形成第二空间；第二密封盖，其具备对应插入于贯通形成在上述盖连接部排出口的封闭部件，而组装在上述盖连接部。

[0015] 优选地，上述操纵杆可以由与从上述第一密封盖的封闭的下部面向直下部以规定长度延长的盖延长管的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部形成在上部端的规定长度的杆部件形成，或者由与从贯通形成在上述第一密封盖的封闭的上部面的贯通孔向直下部以规定长度延长的盖延长管的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部形成在长度中间的规定长度的杆部件形成。

[0016] 优选地，上述颈部的颈孔可以包括上部引导管，上述上部引导管以规定高度延长，以便引导上述操纵杆的下部端进入，上述上部引导管可以包括开口形成的至少一个狭缝。

[0017] 优选地，上述封闭部件可以形成为从上述第二密封盖的上部面的中央以规定高度延长的圆柱形状，以便进入从上述排出口向下延长的下部延长管的内部孔进行封闭。

[0018] 更优选地，可以在上述封闭部件的外侧包括内周面形成有内螺纹部的连接管，以便与形成在上述下部延长管的外周面的外螺纹部螺纹结合。

[0019] 优选地，包括用于去除包含在通过上述第二密封盖所分离的上述盖连接部而向外部排出的对象物中的异物的过滤部，上述过滤部可以包括：上部盖，其上部面中央设置有与上述盖连接部的排出口连通连接的流入口；过滤体，其设置在从与上述流入口对应的上部盖的下部面以规定长度延长的过滤管的端部，用于去除异物；以及过滤外壳，其组装有上述上部盖和开放的上部端，以排出通过上述过滤体来进行过滤的对象物的方式具有至少一个流出口。

[0020] 更优选地，上述过滤体可以包括：内部过滤网，其入口端固定在上述过滤管的端部；外部过滤网，其具备比上述内部过滤网的网眼尺寸相对小的网眼尺寸，配置在上述内部过滤网的外侧。

[0021] 更优选地，上述内部过滤网的出口端与上述外部过滤网的出口端能够隔着规定间距相互隔开。

[0022] 如上所述的本发明的优选实施例具有以下效果。

[0023] 通过操纵杆的精密又细致的旋转操作来轻易地对连接第一圆筒外壳和第二圆筒外壳的颈部的颈孔进行开放和封闭，从而可以将离心分离而分层的细胞沉淀物分离移送至不同空间，因此可以提高脂肪干细胞的分离提取量及纯度。

[0024] 简化从通过抽脂手术获得的脂肪组织中只分离脂肪干细胞(SVF)来提取的过程，由此减少提取时间和费用，从而可以提高使用时的便利性，提高用户的满意度。

[0025] 在从利用洗涤液清洗的细胞沉淀物分离提取的最终过程中通过过滤部，从而可以去除细胞沉淀物中包含的异物，因此可以提高最终得到的脂肪干细胞的清洁度，提高最终提取的脂肪干细胞的清洁度及纯度。附图说明

[0026] 图1a是示出根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置的整体立体图。

[0027] 图1b是示出根据发明实施例的脂肪干细胞分离装置的剖面立体图。

[0028] 图2是示出根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置的分解立体图。

[0029] 图3a和图3b是示出根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置中采用的操纵杆的其他实施方式的剖面立体图和分解立体图。

[0030] 图4是示出根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置的第二圆筒外壳和盖连接部的结合状态的放大图。

[0031] 图5是示出根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置的过滤部的剖面立体图。

[0032] 图6是在根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置适用过滤部的使用状态图。

[0033] 图7a至图7h是根据本发明实施例的脂肪干细胞分离装置的使用状态图。

[0034] 附图标记的说明

[0035] 10：第一密封盖

[0036] 20：第一圆筒外壳

[0037] 30：第二圆筒外壳

[0038] 40：盖连接部

[0039] 50：第二密封盖

[0040] 60：过滤部

[0041] 70：注射器

具体实施方式

[0042] 以下，参照附图对本领域技术人员可容易实施本发明的优选实施例进行详细说明。只是，对本发明优选实施例的结构原理进行详细说明时，如果认为相关公知功能或结构的具体说明可能不必要地模糊了本发明的主旨，将省略对其的详细说明。

[0043] 并且，在整个附图中，针对具有类似的功能及作用的部分，使用相同的附图标记。

[0044] 并且，在整个说明书中，当某一部分与另一部分“连接”时，其不仅包括“直接连接”的情况，也包括以在其中间配置不同元件的方式“间接连接”的情况。并且，在没有特别相反的记载的情况下，“包括”某一结构要素是指，还能够包括其他结构要素，而不是排除其他结构要素。

[0045] 如图1a至图2所示，根据本发明优选实施例的脂肪干细胞分离装置100可以包括第一密封盖10、第一圆筒外壳20、第二圆筒外壳30、盖连接部40及第二密封盖50，以便能够利用一个容器更加轻易地从脂肪组织中分离获取脂肪干细胞。

[0046] 如图1a、图1b及图2所示，上述第一密封盖10是具备使贯通形成在上部面的连通口11开闭的辅助盖12、具有从下部面向直下部以规定长度延长的操纵杆13而选择性地开放或封闭上述第一圆筒外壳20的开放的上部的盖部件。

[0047] 上述辅助盖12可以由具有与形成在从上述连通口11以规定高度延长的中空管11a的外部面的外螺纹部螺纹结合的内螺纹部的盖部件形成。

[0048] 上述操纵杆13可以由上端一体地设置在上述第一密封盖10的下部面、且与上述第一密封盖一起移动的规定长度的杆部件形成。

[0049] 如图1b及图2所示，这种操纵杆13可以由与形成于设置在上述第一密封盖10的封闭的下部面的盖延长管14的内周面的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部形成在上部端的规定长度的杆部件形成，或者由上端部一体地设置在上述第一密封盖10的封闭的下部面的规定长度的杆部件形成。

[0050] 其中，对于上述操纵杆13，虽然以上部端一体地结合在上述第一密封盖的封闭的下部面，通过第一密封盖的旋转操作来进行上下移动的方式进行示出而说明，但是并不限于此，可以通过对上述第一密封盖的单独操作来进行上下移动。

[0051] 即，如图3a及图3b所示，上述操纵杆13由具有与形成在盖延长管14的内部面的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部的规定长度的杆部件形成，其中，上述盖延长管14从贯通形成在上述第一密封盖10的封闭的上部面的贯通孔向下延长，上述操纵杆13的上部端一部分通过上述盖延长管14以第一密封盖10的上部面向外部露出。

[0052] 因此，通过上述第一密封盖10或者上述操纵杆13的正方向或逆方向旋转操作，上述操纵杆13能够以选择性地开闭后述的颈部20a的颈孔21的方式进行上下移动。

[0053] 如图1a、图1b及图2所示，对于上述第一圆筒外壳20而言，在开放的上端外周面形成与形成在上述第一密封盖10的下端内周面的内螺纹部15螺纹结合的外螺纹部25，由此通过第一密封盖10开放的上部被选择性地开闭，上述第一圆筒外壳20是形成规定尺寸的第一空间S1的中空型圆筒部件。

[0054] 优选地，上述第一圆筒外壳20将设置在上端外部面的O型环部件23作为介质，与上述第一密封盖10组装后进行密封处理。

[0055] 并且，上述第一密封盖10设置有在与通过上述辅助盖开闭的连通口对应的区域形成十字型狭缝的硅板，从而当注入如通过由上述辅助盖的分离而开放的连通口、注射器的注入口的脂肪干细胞提取物的注入对象物时，可以防止外部空气流入第一空间。

[0056] 并且，上述第一密封盖10包括形成从上述第一空间S1向外部排出的通道的至少一个单向止回阀，从而当注入如脂肪干细胞提取物的注入对象物时，第一空间S1的空气顺畅地排出至外部，因此可以防止第一空间的内部压力不必要地过度上升。

[0057] 如图1a、图1b、图2及图4所示，上述第二圆筒外壳30是将形成在配置有上述操纵杆13的第一圆筒外壳20的下端的颈部20a的颈孔21作为介质，与上述第一圆筒外壳20的第一空间S1相连通的中空型圆筒部件。

[0058] 上述颈部20a大致形成为以从上述第一圆筒外壳20向颈孔21处内径逐渐变窄的方式延长后，以从上述颈孔21越向上述第二圆筒外壳30内径越大的方式延长的沙漏剖面形状。

[0059] 并且，上述颈部20a的颈孔21包括以规定高度延长的上部引导管22，以便引导上述操纵杆13的下部端进入，上述上部引导管22的外部面开口形成有至少一个狭缝22a，以便能够通过上述颈孔21将填充在上述第二圆筒外壳30的内部空间的液体引导排出至上述第一圆筒外壳20处，上述颈孔21可以包括向下部以规定长度延长的下部引导管24。

[0060] 并且，可以在上述操纵杆13的下部端外部面包括与上述颈孔21的内部面相接而产生密封力的至少一个O型环13a。

[0061] 因此，上述第一圆筒外壳20与第二圆筒外壳30将上述颈部20a作为介质，彼此连接为一体，与此同时，将上述颈孔21作为介质彼此连通，可以通过进行旋转操作时上下移动的操纵杆13来选择性地开闭上述颈孔。

[0062] 即，如果上述操纵杆13的下部端位于颈孔21或下部引导管24，则上述颈孔21处于封闭状态，与此不同地，如果上述操纵杆的下部端位于上部引导管22的狭缝22a，则根据上述操纵杆的下部端的位置而狭缝的一部分实现开放，因此，填充在上述第一圆筒外壳20的第一空间的液体可以通过上述狭缝22a和颈孔21引导排出至第二圆筒外壳30处。

[0063] 如图1a、图1b、图2及图4所示，上述盖连接部40可拆装地组装在上述第二圆筒外壳30的开放的下部，以便在上述第二圆筒外壳30的内部形成具有相对小于上述第一空间S1的体积的第二空间S2。

[0064] 对于这种盖连接部40而言，主体中央形成有排出口41，并且可以在外侧边缘包括与形成在上述第二圆筒外壳30的下端外侧边缘的组装槽对应结合的组装凸缘。

[0065] 并且，优选地，与上述第二圆筒外壳30对应的盖连接部40的上部面43形成为沿贯通形成有上述排出口41的中央向下倾斜的剖面形状，以便能够增加形成在上述盖连接部40与上述第二圆筒外壳30之间的第二空间S2的体积。

[0066] 其中，上述第二圆筒外壳30的开放的下部端与上述盖连接部40的结合通过形成在上述第二圆筒外壳的开放的下部端内周面的内螺纹部35与形成在上述盖连接部的外周面的外螺纹部的螺纹结合来实现，从而可以调节上述第二空间的体积增加或减少，但是本发明并不限于此，上述第二圆筒外壳30的开放的下部端与上述盖连接部40可以通过形成在上述第二圆筒外壳30的下部端的组装槽与形成在上述盖连接部40的外周面的组装凸缘的弹性结合来实现组装。

[0067] 因此，当通过下部端位于上述下部引导管24的操纵杆13的向上移动而上述颈孔21与狭缝22a彼此连通连接时，填充在上述第一圆筒外壳20的液体中的一部分通过上述颈孔21引导排出至上述第二圆筒外壳30的第二空间S2，由此填充在上述第二空间S2。

[0068] 并且，当通过上述操纵杆13的向下复原移动而上述颈孔21处于封闭状态时，只有相当于离心分离而分层的液体的下部层的液体被分离而填充在上述第二圆筒外壳30的第二空间S2。

[0069] 如图1a、图1b、图2及图4所示，上述第二密封盖50是具备对应插入于贯通形成在上述盖连接部40的主体中央的排出口41的封闭部件51而可拆装地组装在上述盖连接部40的下部端的盖部件。

[0070] 这种封闭部件51可以形成为从上述第二密封盖50的上部面中央以规定高度延长的柱子形状，以便进入从上述盖连接部40的排出口41以规定长度向下延长的下部延长管42的内部孔来进行封闭。

[0071] 可以在上述封闭部件51的外侧包括内周面形成有内螺纹部52a的连接管52，以便与形成在上述下部延长管42的外周面的外螺纹部42a螺纹结合，其中，上述连接管52从上述第二密封盖50的上部面中央以规定长度延长。

[0072] 此时，优选地，位于上述连接管52的内部中心的封闭部件51形成为相对高于上述连接管52的高度，以便上述下部延长管42的端部先进入。

[0073] 并且，在上述第二密封盖50的外侧边缘包括向上弯曲的外侧裙板部54，以便与上述盖连接部40的下端外侧边缘相结合，其之间具有至少一个O型环部件53，由此可以增加密封力。

[0074] 因此，上述第二密封盖50通过上述连接管52与下部延长管42的螺纹结合来与上述盖连接部40相结合的同时，通过进入上述下部延长管42的内部的封闭部件51来对上述盖连接部40的排出口41进行密封处理。

[0075] 另一方面，可以包括用于去除包含在通过上述第二密封盖50所分离的盖连接部40的排出口41而向外部排出的对象物(脂肪干细胞)中的异物的过滤部60。

[0076] 如图5及图6所示，这种过滤部60可以包括：上部盖61，其上部面中央设置有与上述第二密封盖所分离的盖连接部40的排出口41连通连接的流入口62；过滤体64，其设置在从与上述流入口62对应的上部盖61的下部面以规定长度延长的过滤管63的端部，用于去除异物。

[0077] 上述过滤部60可以包括过滤外壳65，其组装有上述上部盖61的开放的下部端和开放的上部端，内部配置有上述过滤体64，以排出通过上述过滤体来进行过滤的流体的方式具有至少一个流出口66。

[0078] 上述过滤体64可以包括：内部过滤网64a，入口端固定在上述过滤管63的端部；外部过滤网64b，其具备比上述内部过滤网64a的网眼尺寸相对小的网眼尺寸，配置在上述内部过滤网的外侧。

[0079] 优选地，作为上述内部过滤网64a下端的出口端与作为上述外部过滤网64b下端的出口端以规定间距彼此隔开。

[0080] 上述流入口62可以形成为内部面形成有内螺纹部的中空管形态，以便与形成在从上述排出口41延长的下部延长管42的外部面的外螺纹部42a螺纹结合。

[0081] 此时，当上述流入口62形成为外部面形成有外螺纹部的中空管时，可以将单独的衔接管作为介质，与形成有上述外螺纹部42a的下部延长管42实现连通组装。

[0082] 上述流出口66可以形成为与形成在注射器70的注入口的内螺纹部螺纹结合的外螺纹部66a形成在外部面的中空管形态，以便能够收集通过上述过滤部60的过滤体64而过滤的对象物。

[0083] 因此，在上述第二圆筒外壳30与盖连接部40之间所形成的第二空间S2残留的最终分离对象物(脂肪干细胞)可以在通过上述过滤部60完成过滤之后，由与上述流出口66连通结合的单独的注射器70，在不与大气中的空气接触的情况下，被迅速分离提取。

[0084] 利用具有上述结构的脂肪干细胞分离装置分离脂肪干细胞的方法通过依次执行准备步骤、脂肪干细胞提取步骤，一次清洗步骤及二次清洗步骤来提取最终的脂肪干细胞。

[0085] 在上述准备步骤中，首先利用带鲁尔锁(luer lock)的注射器从人体中提取规定量的脂肪组织，此时，所提取的脂肪组织是每一次以规定量多次反复进行提取的。

[0086] 并且，当将所提取的脂肪组织投入至其他注射器的内部来进行存储之后，摇动注射器使脂肪组织发生沉淀时，因比重差异上述注射器内部可以分层为血液层、脂肪提取液层及油层。

[0087] 接着，工作人员通过上述注射器的活塞操作从上述注射器中仅分离提取在上述血液层与油层之间分层的脂肪提取液层。

[0088] 在上述脂肪干细胞提取步骤中，从在上述准备步骤中获得的脂肪提取液提取脂肪干细胞。

[0089] 即，如图7a所示，对第一密封盖10的辅助盖12(其封闭上述第一圆筒外壳20的开放的上部)进行开放，上述颈部20a的颈孔21由操纵杆13的下部端而封闭的状态下，将在上述注射器中分层的脂肪提取液P1以经由已开放的连接口11的方式投入至第一圆筒外壳的第一空间S1之后，向第一空间S1投入规定量的如胶原酶(collagenase)溶液的酶溶液(C)，其中，上述胶原酶为使胶原或明胶成分发生水解的酶。

[0090] 此时，对于将上述脂肪提取液P1投入至第一圆筒外壳的第一空间S1的工作而言，工作人员通过注射器的活塞操作将沉淀在注射器的最下层的血液层排出至外部之后，可以通过上述注射器的活塞操作仅将沉淀在中间层的脂肪提取液层以经由已开放的连通口的方式投入至第一圆筒外壳的第一空间S1。

[0091] 接着，将关上上述辅助盖12而密封连通口11的本发明的分离装置100装载于振荡培养箱(shaking incubator)之后进行搅拌，从而执行促进上述脂肪提取液与酶溶液之间的酶反应的振荡工序。

[0092] 并且，如果将从上述振荡培养箱中取出的本发明的分离装置100放置在离心机中，且在规定时间内以规定强度的离心力进行一次离心分离时，则酶反应的脂肪组织液会在进行一次离心分离后，因比重差异从第一圆筒外壳20的第一空间S1下部向上部处依次分层为包括脂肪干细胞的细胞沉淀物P和酶反应的酶反应液C。

[0093] 连续地，如图7b所示，工作人员通过上述第一密封盖10或者操纵杆13的旋转操作来使操纵杆上升，以便上述操纵杆的下部端位于上部引导管22的狭缝22a。

[0094] 在这种状态下，如果离心机中执行二次离心分离工序，则最下层的细胞沉淀物P经由部分开放的狭缝22a和完全开放的颈孔21而移送至第二圆筒外壳的第二空间S2，由此填充在上述第二空间S2。

[0095] 并且，如果确认由从外部可通过肉眼确认的透明的材料制成的第一、第二圆筒外壳及通过颈部分层的细胞沉淀物P与酶反应液C之间的交界层B位于颈孔21，则以上述操纵杆13的下部端位于颈孔21的方式使操纵杆13下降，由此封闭已开放的颈孔。

[0096] 因此，以切断第一圆筒外壳的酶反应液C流入上述第二圆筒外壳的第二空间S2的方式上述颈孔由操纵杆的下部端而被封闭的同时，上述第一圆筒外壳的第一空间S1内仅残留有酶反应液C，随着细胞沉淀物P填充在上述第二圆筒外壳的第二空间S2，上述酶反应液和细胞沉淀物实现分离。

[0097] 此时，在上述颈孔中上下移动的操纵杆13在主体内部形成下部端开口的收容部13b，从而以大于上述第二空间的内部体积的容量分离的细胞沉淀物的一部分流入收容部
13b，因此可以提高分离效率。

[0098] 在这种状态下，如图7c所示，利用以与通过上述第二密封盖50的分离而向外部露出的盖连接部40的下部延长管42连通连接的方式组装的注射器71向外部提取填充在上述第二圆筒外壳30的第二空间S2的细胞沉淀物P。

[0099] 与此不同地，残留在上述第一圆筒外壳20的第一空间S1的酶反应液C可以通过上述辅助盖12的开放或者第一密封盖10的开放而排出至外部。

[0100] 其中，如图7c所示，对于为了清洗残留在上述第二圆筒外壳30的第二空间S2的细胞沉淀物P的工序而向外部提取的工作，虽然以通过在分离上述第二密封盖的状态下连通组装在下部延长管42的注射器71来实现的方式进行示出而说明，但是本发明并不局限于此，如图7b所示，也可以通过具有贯通在组装上述第二密封盖50的状态下对应插入于下部延长管42的封闭部件51的注射针的其他注射器而在不与空气接触的情况下进行上述工作。

[0101] 即，上述注射针贯通的封闭部件51形成为具有长度中间已切断的规定厚度的切断区域51a的中空管柱子形状，上述切断区域可以与中空管形态的封闭部件一体地形成，或者形成为单独的压入部件，这种切断区域的材料可以由具有注射针可贯通的刚性的柔性材料组成。

[0102] 如图7d及图7e所示，在上述一次清洗步骤中，在上述第一圆筒外壳20的第一空间S1利用一次洗涤液W1对细胞沉淀物P进行清洗，仅分离提取通过清洗而去除杂质的细胞沉淀物P。

[0103] 这种洗涤液可以通过选择相对于提取的细胞沉淀物以规定比率混合的盐水来进行使用，但是并不限于此，可以选择性地使用其他洗涤液。

[0104] 对第一密封盖10的辅助盖(其封闭新准备的分离装置的第一圆筒外壳的开放的上部)12进行开放，通过开放的连通口11分别将从上述脂肪干细胞提取工序中提取的规定量的细胞沉淀物P和如盐水的规定量的一次洗涤液W1依次投入至上述第一圆筒外壳的第一空间S1，由此填充在上述第一空间S1。

[0105] 此时，优选地，上述一次洗涤液W1根据将要清洗的细胞沉淀物P的投入量和规定比率而定量投入。

[0106] 在这种状态下，如果在离心机中以规定时间内通过规定强度的离心力进行三次离心分离，则上述细胞沉淀物P由一次洗涤液W1而被清洗的同时，去除分离如吸附于包括在上述细胞沉淀物的脂肪细胞、脂肪前体细胞及干细胞上的酶反应液的污染物。

[0107] 如图7d所示，通过这种离心分离，上述第一圆筒外壳20的第一空间S1中的所清洗的细胞沉淀物P和一次洗涤液W1因比重差异而从下部向上部处依次分层。

[0108] 并且，如图7e所示，在上述第一圆筒外壳20的第一空间S1中分层的一次洗涤液W1由通过上述辅助盖已开放的连通口11进入的注射器的注射针吸入而被去除，从而上述第一空间S1内仅残留有细胞沉淀物P。

[0109] 此时，用于在上述第一空间中充分分离细胞沉淀物P和一次洗涤液W1的离心分离工序在上述颈孔21由操纵杆13的下部端而被封闭，保持第二空间的清洁度的状态下进行为宜。

[0110] 如图7f、图7g及图7h所示，在上述二次清洗步骤中，在上述第一圆筒外壳20的第一空间S1利用洗涤液W2对一次清洗的细胞沉淀物P进行二次清洗，仅分离通过清洗而去除杂质的细胞沉淀物P并向外部提取。

[0111] 即，如图7f所示，对上述辅助盖12进行开放，通过已开放的连通口11将如盐水的规定量的两次洗涤液W2投入至上述第一圆筒外壳的第一空间S1，且以规定比率与残留在第一空间的细胞沉淀物P进行混合。

[0112] 并且，如果通过上述第一密封盖或操纵杆的旋转操作而上述操纵杆发生上升移动，如图7g所示，则会完全开放上述颈孔，由此第一空间与第二空间相连通，在这种状态下，如果在离心机以规定时间内通过规定强度的离心力进行四次离心分离，则上述细胞沉淀物P由二次洗涤液W2而被清洗的同时，再次去除分离如吸附于包括在上述细胞沉淀物的脂肪细胞、脂肪前体细胞及干细胞的酶反应液的污染物。

[0113] 通过这种离心分离，上述第一、第二圆筒外壳20、30的第一、第二空间S1、S2中的所清洗的细胞沉淀物P和二次洗涤液W2因比重差异而从下部向上部处依次分层。

[0114] 并且，使上述操纵杆13发生下降移动，操纵杆的下部端位于颈孔而封闭颈孔时，二次洗涤液残留在第一圆筒外壳的第一空间，上述第二圆筒外壳的第二空间内残留有所清洗的细胞沉淀物。

[0115] 此时，相比于内部体积相对多量的细胞沉淀物的一部分从上述第二空间流入以开口的方式形成在上述操纵杆的下部端的内部孔的内部，由此可填充在内部孔的内部。

[0116] 因此，残留在上述第一圆筒外壳20的第一空间S1的二次洗涤液W2通过辅助盖12的开放或者第一密封盖10的开放而排出至外部，与此不同地，对于向上述第二圆筒外壳30的第二空间S2分离移送的细胞沉淀物P而言，通过与由上述第二密封盖50的分离而向外部露出的盖连接部40的下部延长管42组装的过滤部60来过滤包含在细胞沉淀物P的异物的同时，向外部提取细胞沉淀物P。

[0117] 即，如图6所示，设置在上述过滤部的上部盖的流入口与从上述第二密封盖分离时向外部露出的盖连接部的排出口41延长的下部延长管42螺纹结合而实现连通，设置在上述过滤部的过滤外壳65的流出口与提取用注射器70相结合而实现连通。

[0118] 在通过上述第一密封盖10或者辅助盖12的开放而第一圆筒外壳20的上部已开放的状态下，当上述操纵杆的下部端位于上部引导管22的狭缝22a时，由于向外部去除洗涤液的第一圆筒外壳20的第一空间S1与残留有所清洗的细胞沉淀物的第二圆筒外壳30的第二空间S2彼此连通，因此，当执行上述提取用注射器的拉动工作时，细胞沉淀物P移送至具有与上述排出口相连接的流入口的过滤部的内部。

[0119] 连续地，向上述过滤部60的内部移送的细胞沉淀物P连续通过由上述内部过滤网64a和外部过滤网64b组成的过滤体64，由此去除异物，去除异物的细胞沉淀物P通过与设置在过滤外壳的下部端的流出口相结合的提取用注射器而被提取全量，从而结束脂肪干细胞分离工作。

[0120] 以上说明的本发明不会被前述的实施例及附图所限定，对于本领域技术人员而言，显而易见的是，在不脱离本发明的技术思想的前提下，可以进行多种替换、变形及变更。

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脂肪干细胞分离装置

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