氧硫杂环戊烷、其制备方法和含此类化合物的药物组合物

本发明涉及有机化学领域，更确切地说，涉及药物化学领域。

更具体地说，其对象物质是在2位上有一个氧硫杂环戊烷环取代 的2′，3′-二脱氧核苷。

具体地说，本发明的对象物质是有顺式构型(2R-5S)或(2S- 5R)的5-(胞嘧啶-1-基)-1，3-氧硫杂环戊烷，其通式为： 可以用以下两种空间表达式中的一种来代表： 式中R是一个从单环或双环氮杂环衍生的酰基基团或芳烷基基团，且 2位上的羟甲基基团相对于2和5这两个位置所确定的平面而言处于 顺式位置。

取代基R所取的各种定义当中，可区分为

a)烟酸衍生物，其中该杂环是一种吡啶结构，且酰基片断处于 2、3或4位上，其通式为Ia 式中X是一个氢、一个卤原子、一个硝基、一个低级烷氧基或一个三 氟甲基基团，而n是1～3的一个整数；

b)二氢吡啶酸衍生物，其中该杂环是一个1，4-二氢吡啶结构， 且酰基处于2、3或4位上，其通式为Ib 式中R1是一个有1～10个碳原子的烷基基团，X和n的定义同上；

c)季铵化烟酸衍生物，其中氮原子带有一个烷基取代基，且酰 基在2、3或4位上，其通式为Ic 式中A是一个无机或有机阴离子，R1、X和n的定义同上；

d)喹啉酸衍生物，其中该杂环是一个双环结构，其通式为Id 式中羧基基团可以在2、3或4位上，X代表一个氢、一个卤素、一 个三氟甲基基团、一个低级烷氧基或一个硝基基团，n′代表1～6 的一个整数；

e)二氢喹啉酸类，通式为Ie 式中R1和X的定义同上，n′是1～6的一个整数；

f)季铵化喹啉酸类，通式为If 式中R1、X和n′的定义同上，酰基基团在2、3或4位上，而A 是一个无机或有机阴离子；

g)(二氢吡啶基)烷基衍生物，通式为Ig 式中R1、X和n的定义同上，m是1～6的一个整数；以及它们与 无机或有机酸的酸加成盐。

通式I的化合物可以拆解成其光学活性异构体。因此，可以得到 异构体(+)和异构体(-)。

逆转录病毒感染是严重感染的原因，尤其是获得性免疫缺陷综合 征(AIDS)感染的原因，后者是一种往往致死和在较小程度上导致肝 炎的病毒性感染。目前有几种核苷型或杂核苷型化合物在临床上用于 治疗这些退行性病毒感染。先有化合物是AZT(3′一叠氮基-2′， 3′-二脱氧胸苷)衍生物(Proc.Natl.Acad.Sci.82，7096- 7100，1985)、ddC(2′，3′-二脱氧胞苷)衍生物(Proc.Natl. Acad.Sci.86，1911-15，1986)、d4T(2′，3′-二脱氢-3′ -脱氧胸苷)衍生物(Biochem.Biophys.Res.Comm.142，128- 34，1987)、ddl(2′，3′-二脱氧肌苷)衍生物(Antiviral. Chem.Chemother 2，221，1991)、欧洲专利申请90301335.7中公 开的BCH-189或3TC(2′，3′-二脱氧-3′-硫代胞苷)衍生物 等。可供医师利用的抗退行性病毒化合物的数目有限和有限疗效，表 明需要探索能提高疗效和减少副作用的新化合物。

已经知道2-[(1-羟甲基)-1，3-氧硫杂环戊烷-5-基] 胞嘧啶的一些衍生物，即羟甲基官能的酯类(欧洲专利申请0382526) 或嘧啶环5位的卤代衍生物(R.F.SCHINAZI et al.Antimicrob. Agents and Chemotherapy 36(1992)2423-2431)。

本发明的化合物具有抑制人体逆转录病毒、尤其VIH和B型肝炎 (HBV)复制的能力。从BCH-189或TC-3衍生的化合物在其结构中 包括一个与胞嘧啶的外环代氨基结合的1，4-二氢-1-甲基-3- 喹啉甲酰基。这种特定结构实体使得在实验药理学上能增加和促进血 -脑屏障的渗透(Pharmacol.Ther.19，337-396，1983-Methods Enzymol 112，381-396，1985-Drug Des.Del，1，51-64，(1986) -J.Med.Chem.31，244-249，1988-J.Med.Chem.32，1782- 1788，1989-J.Med.Chem.32，1774-1781，1989)。

这些化合物的化学合成已经用经典实验方案进行。这些新型杂核 苷的性能要求用化合物2′，3′-二脱氧-3′-硫代胞嘧啶作为起 始原料，在化学文献上已报道了它的几种合成方法(J.Org.Chem. 56，6503，1991-J.Org.Chem.57，2217，1992-Tet.Letter 33， 4625，1992-Nucleosides and Nucleotides 12，225，1993)。本 申请中也描述了从这种衍生物出发的、作为本发明对象物质的化合物 的合成和与其有关的中间体化合物的合成。

本发明也涉及通式I化合物的生产工艺，该工艺在于让一种顺式 5-(胞嘧啶-1-基)-1，3-氧硫杂环戊烷与通式ROH羧酸的一 种官能衍生物发生作用，式中R是从一个芳族或二氢芳族单环或双环 氮杂环衍生的一个酰基片断，或与通式R′Z的一种芳烷基化活性衍生 物发生作用，式中R′是从一个芳族或二氢芳族单环或双环氮杂环衍 生的一个芳烷基基团，而Z是一个易断裂的不稳定基团。

更准确地说，ROH酸的官能衍生物是一种卤化物，一种酐，一种 从碳化二亚胺得到的混酐，或一种活泼酯如苯酚酯。

在芳烷基化衍生物的情况下，Z是一个卤原子或一个烷基-或芳 基磺酰基。

本发明也涉及作为对象物质的、有抗病毒作用的药物组合物，其 特征在于它们包括至少一种通式I化合物或其与无机酸或有机酸的酸 加成盐作为活性组分，并掺合或缔合一种惰性、无毒、药物上可接受 的载体或赋形剂，使之尤其适合于局部或全身性施用。

在这些组合物中，通式I活性组分的含量范围因给药方式而异， 为每单元剂量0.1mg～100mg。

实例I

顺式2-(二苯基权丁基甲硅氧基甲基)-5-[N4-(3″- 吡啶基羰基)胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体1

在室温、氮气流下，向二氯甲烷(7ml)和二甲基甲酰胺(2ml) 的混合物中添加1当量烟酸(27mg，0.21mmol)、1.1当量BOP(93mg， 0.23mmol)、1.1当量HOBT(31mg，0.23mmol)、1当量5′-叔丁基 二苯基甲硅烷基-2′，3′-二脱氧-3′-硫代胞苷(39mg，0.23 mmol)和4当量DIEA(146μl，0.84mmol)。混合物在室温搅拌过夜， 用5％柠檬酸溶液(10ml)洗涤，然后用5％碳酸氢钠水溶液(10ml) 洗涤。得到的混合物用乙酸乙酯(3×10ml)萃取，用Na2SO4干燥， 蒸发。残留物在硅胶板上纯化，得到48mg纯化合物。 [1H]NMRδ(CDCl3)＝1.1(s，9H，tBu)，3.1-3.6(m，2H，CH2-O)，3.7-4.2(m，2H，C4H2) 5.25(t，1H，C5-H)，3.1-3.6(m，2H，CH2-O)，5.5(d，1H，C5.-H)，6.35(q，1H，C2-H)；7.4-7.8 (m，1H，芳基)；8.0(d，1H，C6′-H)；8.3(d，1H，烟酸基)；8.8(d，1H，烟酸基)；8.8 (d，1H，烟酸基)；9.1(d，1H，烟酸基)。

实例II

顺式2-(羟甲基)-5-[N4-(3"-吡啶基羰基)胞嘧啶 -1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体2

化合物1(25mg，0.05mmol)溶解在3ml无水四氢呋喃中。向 此溶液中添加3当量(135μl，0.15mmol)氟化四丁铵。此溶液在室 温混合3小时。蒸发溶剂后，得到的产物在制备硅胶板上色谱法分离 (洗脱剂：甲苯/CH3OH 15％)。得到13mg所希望的化合物。 [1H]NMRδ(CDCl3)＝3.1-3.6(m，2H，CH2-O)，3.7-4.2(m，2H，C4H2)，5.25(t，1H，C5- H)，5.5(d，H，C5′-H)；6.35(q，1H，C2-H)，7.4-7.8(m，1H，ar芳基ue)；8.0(d，1H，C6′-H)， 83(d，1H，烟酸基)；8.8(d，1H，烟酸基)，91(s，1H，烟酸基)。

实例III

顺式2-(叔丁基二苯基甲硅氧基甲基)-5-[N4-(3″- (甲苯磺酰基))胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体4

向化合物5(56mg，0.12mmol)的吡啶(3ml)溶液中，在60℃、 氮气氛下，添加2当量对甲苯磺酰氯(46mg，0.24mmol)。在室温搅 拌20小时后，混合物蒸发、用5％柠檬酸溶液(10ml)洗涤，然后 用乙酸乙酯(3×10ml)萃取。合并的有机相用Na2SO4干燥、蒸发， 分离出48mg所希望的化合物。 [1H]NMR：(CDCl3)＝1.1(s，9H，叔丁基)；2.45(s，3H，CH3 甲苯磺酰基)；3.15-3.55(m，2H，C2-CH2-O)；3.85-4.2(m， 2H，C4H2)；5.25(t，1H，C5-H)；6.3(t，1H，C2-H)；7.3- 7.7(m，14H，ArH)；8.05(d，1H，C6-H)。

实例IV

顺式2-(二苯基叔丁基甲硅氧基甲基)-5-[N4-(3"- (吡啶基羰基)胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体3

在90℃、氮气氛下，向衍生物4(47mg，0.075mmol)的卢剔啶 (2ml)溶液中添加6当量(46μl，0.45mmol)吡啶基甲胺。在搅 拌下使加热保持48小时。冷却后混合物蒸发、用5％柠檬酸溶液 (10ml)洗涤，然后用乙酸乙酯(3×10ml)萃取，用Na2SO4干燥。 蒸发后残留物用硅胶板色谱法(洗脱剂：EtOAc/MeOH，10/1)纯 化。

实例V

顺式2-(叔丁基二苯基甲硅氧基甲基)-5-(胞嘧啶-1′ -基)-1，3-氧硫杂环戊烷异构体5

2′，3′-二脱氧-3′-硫代胞苷(105mg，0.45mmol)的吡啶 (6ml)溶液在氮气氛下用二苯基叔丁基甲硅烷基氯(140μl，0.5 mmol)处理。反应混合物在室温搅拌24小时。真空浓缩后向其中添 加30ml水，用乙酸乙酯(3×20ml)萃取。然后，合并的有机相用 Na2SO4干燥，浓缩至干，得到白色固体形式的化合物5(210mg， 定量产率)。 Rf(AcOEt/MeOH2/1)＝0，62 [1H]NMR(CDCl3)δ：1，1(s，9H，叔丁基)；3，1-3，6(m，2H，C2-CH2-O)；3，7-4，2(m，2H， C4-H2)；5，25(t，1H，C5-H)；5，5(d，H，C5.-H)；6，35(q，1H，C2-H)7，4-7，8(m，10H，2Ph)； 8，0(d，1H，C6′-H)。

实例VI

顺式2-(羟甲基)-5-[N4-(1"-甲基-3"-吡啶基 羧基)胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体6，呈碘化 物形式

在氮气氛下，向1当量(46mg，0.14mmol)化合物2的4ml无 水乙腈溶液中添加9当量(1.25mmol，77μl)甲基碘。得到的溶液 在50℃加热48小时。蒸发溶剂后，残留物用闪急色谱法纯化，洗脱 剂为BuOH/H2O/乙酸(5∶2.5∶2.5)。得到一种黄色固体(55mg)。 [1H]NMR：(DMSO d6)δ＝3.25(t，2H，CH2-4)；3.90(dd，2h，C2-CH2)；4，45(s，3H， N+-CH3)；5.25(t，1H，CH-5)；6.30(t，1H，CH-2)；6.92(d，1H，CH-6′)；7.30(d，1H，烟酸基)； 7.85(d，1H，烟酸基)；8.05(d，1H，CH-5′)；8.20(d，1H，烟酸基)；7.85(d，1H，烟酸基)； 9.01(d，1H，烟酸基)。 质谱(FAB+)349(M-1)+

实例VII

顺式2-(羟甲基)-5-[N4-(1″-甲基-1"，4″-二 氢-3"-吡啶基羰基)胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异 构体7

在3ml含10％水的脱气甲醇溶液中溶解30mg(0.06mM)化合物 6。向此溶液中添加15mg碳酸氢钠和60mg连二亚硫酸钠。反应混合 物在氮气下搅拌3小时。溶液变成橙色。蒸发溶剂，然后把这些盐重 新悬浮在少量甲醇中。过滤。滤液用薄层(1mm)制备色谱法(洗涤 剂∶甲苯/甲醇，1∶1)纯化，得到6mg黄白色固体。 质谱(FAB+)349(M-1)+

实例VIII

顺式2-羟甲基-5-[N4-(3"-喹啉基羧基)胞嘧啶-1′ -基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体8

向2ml无水二甲基甲酰胺中添加74.4mg(0.43mmol)喹啉基- 3-羧酸，然后添加96mg(0.47mmol)1，3-二环己基碳化二亚胺 和63.4mg(0.47mmol)羟基苯并三唑水合物。混合物在室温、氮气下 搅拌1小时。出现一种二环己基脲白色沉淀，然后添加100mg(0.43 mmol)2，3′-二脱氧-3′-硫代胞苷。混合物搅拌过夜。然后在 减压下蒸发二甲基甲酰胺，残留物用NaCl饱和水溶液(10ml)水解。 残留物用乙酸乙酯(2×10ml)萃取2次。把有机相合并、用硫酸镁 干燥、过滤。蒸发溶剂。产物用闪急色谱法(洗脱剂∶乙酸乙酯/甲 醇，98∶2)纯化，得到78mg白色固体(0.2mmol)，产率为46.5％。 MP＝116-118℃ IR＝1656cm-1(酰胺官能团的羰基)。 [1H]NMR：(DMSO d6)δ＝11，75(s，1H，NH)；9，40(d，1H，CH-2”)；9，15(d，1H，CH-4”)； 8，65(d，1H，CH-5′)；8，20(m，2H，CH-8″et-CH-5＂)；8，0(m，1H，CH-6＂)；7，80(m，1H，CH- 7″)；7，45(d，1H，CH-6′)；6，35(t，1H，CH-2)；5，55(t，1H，CH-5)；3，98(t，2H，C2-CH2-4) [13C]NMR：(DMSO d6)δ＝37，14(C-4)；61，95(CH2O-C2)；87，28(C-2)；88，29(C- 5)；95，85(C-5′)；122，21(C-3″)；126，28(C-6″)；127，71(C-5″)；129，63(C-10″)；129，87 (C-7″)；132，08(C-8″)；137，65(C-4″) 138，89(C-6′)；148，91(C-9″)；149，29(C-2″)； 163，16(C-2′)；164.51(C-4′) 质谱：(Fab+)385(M＋1)+，769(2M＋1)+

实例IX

顺式2-羟甲基-5-[N4-(1"-甲基-3"-喹啉基羰基) 胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体9，呈碘化物形式

制备化合物8(78mg，0.20mmol)的4ml乙腈溶液。向此溶液 中添加112μl(1.8mmol)甲基碘，混合物在氮气下在40℃加热24 小时。脱除溶剂，然后把粗残留物溶解在少量乙腈中。添加乙醚使之 沉淀。由此得到一种橙色固体(60mg，产率55％)。 MP＝156-159℃ [1H]NMR(CD3OD)δ＝3.32(t，2H，CH2-4)3.99(dd，2H，C2-CH2)，4.80(s， 3H+N-CH3)5.38(t，1H，CH-5)，6.0(d，1H，CH-6′)，6.33(t，1H，CH-2)，8.13(m，1H，CH-7＂)，8.39 (m，1H，CH-6″)，8.60(m，2H，CH-8＂)，8.72(d，1H，CH-5′)， 9.79(d，1H，CH-4＂)，9.95 (d，1H，CH-2″)。 质谱(Fab+)399[M-1]+，799[2(M-1)]+

实例X

顺式2-羟甲基-5-[N4-(1″-甲基-1″，4"-氢- 3″-喹啉基羰基)胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体 10

向30mg(0.057mmol)化合物9的3ml脱气含水甲醇(3ml含 水10％的甲醇)溶液中添加15mg碳酸氢钠和60mg连二亚硫酸钠。整 个混合物在氮气下搅拌1小时。蒸发溶剂，粗残留物用制备色谱法 (洗脱剂∶乙酸乙酯/甲醇1∶1)纯化。最后得到10mg玻璃态黄 色固体，产率46％。 [1H]NMR：(D2O)δ＝3.24(m，3＋2H，NCH3＋CH2-4＂)；3.48(m，2H，CH2-4)；3.93 (m，2H，C2H2)；5.29(t，1H，CH-5)；6.96(d，1H，CH-6′)；7.13(m，2H，CH-6＂＋CH-7＂)；7.27 (m，2H，CH-5＂＋CH-8＂)；7.45(d，1H，CH-2＂)；8.23(d，1H，CH-5′) 质谱    ：(Fab+)399(M-1)+

实例XI

顺式2-羟甲基-5-[N4-(2-(α，α，α-三氟间甲苯胺 基)烟酸基)胞嘧啶-1′-基]-1，3-氧硫杂环戊烷异构体11

向2′，3′-二脱氧-3′-硫代胞苷(50mg，0.2mmol)的5ml 无水DMF溶液中添加1.1当量BOP(93mg，0.23mmol)、1当量硝氟 灭酸(2-(α，α，α-三氟间甲苯胺基)烟酸)和4当量DIEA (146μl，0.84mmol)。混合物在室温搅拌过夜，用5％柠檬酸溶液 (10ml)洗涤，然后用5％碳酸氢钠水溶液(10ml)洗涤。得到的混 合物用乙酸乙酯(3×10ml)萃取、用硫酸钠干燥，然后蒸发。

残留物用硅胶柱色谱法(洗脱剂∶乙酸乙酯/甲苯1∶9)纯化。 得到一种白色固体(49mg，产率为48％)。

抗病毒性能评估试验

抗HIV试验-实验方案

a)通用条件

仪器：使用一台Beckman TL100型超离心机。放射标记粒子的计 数用一台惠普公司仪器Tri Carb Model 1600进行。多核巨细胞 (syncithia)是用一台反转显微镜Labovert观察的。

溶菌缓冲剂NTE的组成：

三羟甲基氨基甲烷   10mM

NaCl               100mM

EDTA               1mM

b)细胞培养物中抗病毒性能的评估试验

抗病毒作用评估是以HIV-1病毒对MT4细胞系的致细胞病变效 应研究为依据的。MT4细胞系来源于从患者分离的、已被TLHV-I病 毒转化的T细胞。HIV-1病毒的致细胞病变效应是通过形成在显微 镜下可见的多核巨细胞即所谓《syncithia》而显示出来的。HIV-1 的这种效应可在感染之后4～5天观察到。随后有细胞死亡。

这种致细胞病变效应与病毒对细胞的感染、与其细胞内复制并与 这些细胞的病毒抗体表达呈正相关。因此，这种效应的抑制对应于对 HIV-1病毒增殖的抑制。

MT4细胞在如下RPMI 1640培养基中保持3×105个细胞/ml： 10％在56℃去补体30分钟的胎牛血清(激素、血清生长因子……)， 1％谷氨酰胺，1％青霉素-链霉素，和2μg/ml能促进病毒粘着 到细胞上的Polyren。

抗病毒剂处理的作用是连续的。事实上，这种效应存在于该病毒 感染之前、期间和之后。用10％胎牛血清进行相继稀释，以便能使 MT4细胞培养8天和观察到形成多核巨细胞。

MT4试验

感染之前：把3×106个细胞/100μl分配在一块有96孔的 微滴板上，以2000转/分离心3分钟。然后，将沉淀物与100μl不 同浓度的待测试抗病毒剂一起在37℃预培养1小时。

感染：感染是在上述微孔中，在添加100TCIU(感染单位)HIV- 1病毒时实现的(这一数量的HIV-1病毒被确定为能在4或5天后 诱发形成多核巨细胞)。在病毒感染和以100TCIU稀释时，抗病毒剂 总是存在的。

感染之后：在37℃培养1小时之后，MT4细胞用RPMI1640培养 基洗涤3次，并在24孔的微滴板上，对待测试化合物的每个浓度都 以每微升3×105个细胞进行培养。当经过D3这一天时，把MT4细 胞稀释到1/3。保持抗病毒剂浓度。在显微镜下观察每天多核巨细胞 的出现，以检测相对于HIV-1对照组的任何可能延迟。在D8这一 天进行逆转录酶测定。当这些细胞没有被感染时，这就表明受到所试 验抗病毒剂的保护。

逆转录酶的测定

逆转录酶是一种依赖于RNA的DNA聚合酶。这种酶使得能发生逆 转录病毒复制。多亏有它，转录到DNA上的病毒RNA才能进入细胞染 色体组。原病毒DNA被细胞酶转录到病毒RNA上。为了测定逆转录酶 活性，要用95000转/分超离心5分钟，使1ml培养物上清液浓缩 100倍。超离心后得到的病毒沉淀物重新悬浮于10μl(缓冲剂NTE＋ TRITON 0.1％(聚氧乙烯醚))中。后者用来溶解病毒并释放出逆转 录酶。在离体试验中，逆转录酶活性就是所要寻找的证据。这种酶使 用一种具有12～18个残基的引物寡dT的合成板模多聚腺苷酸。这个 反应的放射标记基质是[3H]dTTP(1mCi/ml放射活性胸苷三磷酸 酯)。新生成的氚标记大分子用三氯乙酸沉淀，用过滤法使之与游离 态[3H]TTP分离。逆转录酶的酶活性是通过配合物聚-rA/聚-dT 中所结合的放射活性测定的。在添加起放大器作用的闪烁液体之后， 用粒子计数器测定这种放射标记。

抗HBV试验-实验方案

在用于评估化合物对B型肝炎病毒(HBV)的活性的几种方法学 中，已利用了鸭的B型肝炎病毒(Duck HBV)模式(J.Med. Virology(1990)31，82-89；Viral Hepatitis and Liver Disease(1988)506-509；Hepatology(1989)10，186-191)。 离体测试化合物的抗HBV活性所需的培养物材料是用受到鸭B型肝炎 病毒(DHBV)感染的鸭肝细胞制作的(Antimicrob.Agents Chemother.(1989)33，336-339；J.Med.Virology 40，59-64； Antivir Res.(1993)21，155-171；Antimicrob.Agents Chemother.(1993)37，1539-1542)。的确，鸭的B型肝炎病毒被 公认为非常接近于人体B型肝炎病毒(Viral Hepatitis and Liver Disease(1988)526-529；Antiviral Research(1987)8，189- 199)。在标准化条件(Virology(1989)171，564-572)下，鸭肝 细胞的培养物使得能进行DHBV的全复制。所测试化合物的抗病毒活 性是作为受感染肝细胞培养10天期间产生的病毒DNA数量的函数测 定的。

实验步骤

一只受DHBV感染的3周龄雄性幼鸭用来产生肝细胞。这只鸭在 麻醉下宰杀，用Guillouzou的方法学(“分离与培养的肝细胞研究”， J.Libbey Eurotex Ltd/INSERM 1986)进行肝细胞分离。这些细胞 在Leibowitz′s培养基中培养，向其中添加5μg/ml牛胰岛素、7 ×10-5摩尔可的松半琥珀酸盐和1.5％二甲基亚砜(DMSO)。细胞的 密度是8×106个细胞，把它们喷洒在100×20mm的培养盒中。在细 胞分散开之后，向培养物中添加被试化合物。在l0天期间每天更新 培养基。细胞上清液中鸭B型肝炎病毒的病毒DNA产量是借助于 Fourel等人的“涂点”(Dot blot)杂化法(Viral Hepatitis and Liver Disease，1988，506-509；Hepatology，1989，10，186- 191)测定的。抑制作用用细胞上清液中存在的DNA数量相对于未用 核苷衍生物处理的DHBV感染培养物的百分率表示。

病毒学结果

HIV试验

已在本专利申请中描述了其合成并在以前的先有技术中给出了有 关结构的化合物，在受感染细胞具有MT4类型的情况下，对BRU HIV- 1病毒(BRU是有经验的病毒菌株)复制的抑制有影响。表I中描述 了这些试验的结果。第1栏是最有代表性的、所研究的化合物的名称， 而在第2栏中报告的是所谓IC50值(该成分对于在受感染MT4细胞中 在感染后D7天测定的HIV复制给出50％抑制的浓度)。观察和计数 所形成多核巨细胞的数目，并与受感染MT4细胞但未用抗病毒化合物 处理的情况下计数的结果比较，确定IC50值。

DBHV试验

按照本文件实验部分介绍的步骤，对最有代表性的所述化合物测 试了它们对鸭HBV病毒(DHBV)复制的影响。在表II中描述了这些试 验的结果。

缩略语 AcOEt：乙酸乙酯 DNA：脱氧核糖核酸 PTSA：对甲苯磺酸 RNA：核糖核酸 AZT：3′-叠氮基-2′，3′-二脱氧胸苷或Zidovudine BOP：苯并三唑甲酰氧三(二甲胺基)鏻六氟磷酸盐 TLC：薄层色谱法 DCC：N，N′-二环己基碳化二亚胺 DCU：N，N′-二环己基脲 DIEA：N，N-二异丙基-N-乙基胺 DMF：N，N-二甲基甲酰胺 DHBV：鸭B型肝炎病毒 FAB+：快速正原子轰击 3HdTTP：1mCi/ml放射活性标记的胸苷三磷酸酯 HOBT：1-羟基苯并三唑 IR：红外光谱 MP：熔点 NMR：核磁共振 AIDS：获得性免疫缺陷综合症 MS：质谱 TBAF：四丁基二苯基甲硅烷基氟 TBDPSCl：四丁基二苯基甲硅烷基氯 3-TC：(-)-(2R，3S)-2-羟甲基-5-(胞嘧啶-1′

  -基)-1，3-氧杂环戊烷或Lamivudine TCIU：感染单位 THF：四氢呋喃 RPM：转/分 TsCl：甲苯磺酰氯 UV：紫外 HIV：人体免疫缺陷病毒 HBV：B型肝炎病毒 HLTV：人体亲淋巴T细胞病毒

表I 本发明核苷对HIV-I病毒复制的抑制效果，用IC50值表示     化合物号     化合物     IC50     9     ＞100μM     10     1-10μM     8     10μM     6     化合物号     化合物     IC50     7     2  0.1-1μM     11  ＜100μM BCH-189 (参考产物)  1μM

表II 本发明核苷对DHBV病毒复制的抑制效果     化合物号     化合物     IC50     BCH-189     (参考     化合物)  1±0.5μM     2  2±0.5μM     8  2μM     9  2μM     化合物号     化合物     IC50     10     2μM     6     在试验中     7     在试验中