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시알로키메릭 화합물{SIALOCHIMERIC COMPOUNDS}
본 발명은 일반적으로, 다른 약물들에 내성이거나 내성이 아닐 수도 있는 A형 및 B형 인플루엔자 바이러스뿐만 아니라 다른 유형의 바이러스들, 예를 들어 플라비바이러스 및 또한 원생동물 및 다른 미생물들에 대해 억제 효과를 발휘함을 특징으로 하는 신규 부류의 화합물, 그의 제조 방법, 약학 제형, 및 동물 및 인간 건강에 영향을 미치는 바이러스, 세균 및 원생동물을 포함한 특정 미생물에 의해 유발되는 다양한 병의 치료를 위한 약품으로서 그의 용도에 관한 것이다. 발명의 설명 본 발명은 일반적으로, 다른 약물들에 내성이거나 내성이 아닐 수도 있는 A형 및 B형 인플루엔자 바이러스 중 어느 하나, 다른 유형의 미생물들, 예를 들어 플라비바이러스와 같은 바이러스 및 원생동물에 대해 억제 효과를 발휘함을 특징으로 하는 신규 부류의 화합물, 그의 제조 방법, 상기 화합물을 함유하는 약학 제형, 및 바이러스, 세균 및 원생동물과 같은 상기 미생물에 의한 감염으로부터 발생하는 동물 및 인간 건강에 영향을 미치는 다양한 병의 치료를 위한 약품으로서 그의 용도에 관한 것이다.
A형 및 B형 인플루엔자 바이러스는 대유행 인플루엔자의 주요 원인으로 가장 널리 알려진 바이러스들 중 하나이지만, 다른 유형의 바이러스, 예를 들어 플라비바이러스, 특히 HCV, 및 레트로바이러스, 특히 HIV, 및 원생동물, 특히 말라리아 원충 및 트리파노소마증은 훨씬 더 심한 병적인 상태로 진행할 수 있으며 매년 전 세계적으로 수백만 명을 사망케 한다. 따라서 상기 도입부는, 숙주 세포 표면상의 시알화된 글리칸에 의해 노출되고, 지금까지 알려지지 않은 인자들에 의해 좌우되는 복잡한 주기 및 다 인자 기전들에 의해 바이러스를 들어가게 하거나 나오게 하는 시알산(또한 N-아세틸-뉴라민산 또는 더 간단히 뉴라민산으로서 공지됨, 또한 약어 NANA 또는 Meu5Ac로서 나타냄, 본 발명에서는 약어 SA로 나타냄)에 결합하는 바이러스 효소 헤마글루티닌(HA) 및 뉴라미니다제(NA)에 의해 입증된 특이성에 관한 것이다(1)(2)(3). 결과적으로, 1974 년 이래로 상기 효소들 및 또한 상기 바이러스 복제를 억제할 수 있는 활성 약물을 동정하고자 계속적인 탐색이 있어왔으며, 따라서 시알산(편의상 본 발명에 나타낸다)의 일부 동족체들의 독특한 효능이 관찰되었다. 더욱 또한, 원생동물 및 다른 미생물들은 일반적으로 표적 세포 표면상의 시알화된 글리칸에 의해 노출된 시알산에 대한 상기 단세포 병원체의 HA 또는 NA 효소들의 전형적인 부착으로부터 매개된 유사한 기전을 사용한다. 일부 항바이러스 약물, 특히 SA 동족체에 대해 지난 10 년 동안 획득한 결과들은 상기 바이러스 및 미생물의 생명 유지 및 생식 기전을 변경시킴으로써 급속하게 진화하는 상기 바이러스 및 미생물의 놀라운 능력으로 인해 뜻밖의 내성이 나타남으로써 침해되었으며, 따라서 상기 약물들의 효능이 상기 미생물의 다양한 정도의 내성의 결과로서 감소하거나 무효화된다. 아다만탄 유도체(M2 단백질 억제제) 및 오셀타미비어 모두에 대한 바이러스 약물-내성의 발생이 최근에 보고되었다. 일부 바이러스 균주는 약 40%까지의 사례에서 아다만틴 유도체에 대해 매일 증가하는 내성을 나타내는 반면, 오셀타미비어 내성은 모든 A/H1N1 바이러스 사례의 약 15 내지 20%에서 보고되었다. 실제로 바이러스 막의 전형적인 특징은 방사상 돌기의 존재이며, 이는 특이적인 A형 및 B형 인플루엔자 바이러스의 경우에, HA (4)(5)(6) 및 NA (7)(8)(9)(10)에 상응한다. A형 균주의 바이러스 막 중에는 또한 동종사량체성 M2 단백질이 존재하며, 이는 바이러스 고갈에 중요한 역할을 한다. 더욱 또한, C형 인플루엔자 바이러스는 3 가지 생물학적 활성, 즉 수용체 결합(H), 수용체 불활성화(E) 및 융합(F)을 책임지는 헤모글루티닌-에스테라제 융합(HEF)으로서 공지된 당단백질을 나타낸다(11)(12)(13). 1 세대 항바이러스 제품들(대개 아다만틴 유도체, 예를 들어 아만타딘, 리만타딘, 메만틴 및 다른 유사 화합물들)은 A형 인플루엔자 바이러스의 이온 채널의 M2 단백질을 차단한다. M 2 양성자 채널을 통해 H + 이온의 유입 흐름을 봉쇄하는 것은 상기 바이러스 고갈을 억제하며 유리 리보핵단백질의 세포질 내로의 방출을 억제한다. 이는 오직 인플루엔자 바이러스 균주 A의 경우에만 발생하며, M 2 단백질이 존재하지 않는 균주 B의 경우는 아니다. 약 10년 동안 항바이러스 전략은 A형 및 B형 인플루엔자 바이러스 막의 뉴라미니다제(NA)를 선택적으로 억제할 수 있는 2세대 항바이러스 약물의 개발을 향하였다. 상기 NA 효소는 상기 바이러스 고갈 및 새로 생산된 바이러스의 감염된 세포 내로의 방출을 촉진한다. 뉴라미니다제 억제제는 숙주 세포 및 바이러스 막의 표면상에 존재하는 시알산의 잔기들과 맞물리지 않도록 상기 뉴라미니다제의 활성 부위를 차단하는 듯하다. 실제로, 1999년 이래로, 제 2 부류의 선택적인 뉴라미니다제 억제제, 예를 들어 자나미비어 및 오셀타미비어가 임상에 도입되었다. 첫 번째 것은 오직 흡입 경로에 의해서만 투여될 수 있고 경구 경로에 의해서는 거의 흡수되지 않으며(약 2%) 따라서 이는 오직 인플루엔자 예방을 위해서만 사용이 지시된다. 오직 오셀타미비어만이 경구 투여에 따라 전신 효과를 보이나, 요즘에는, 앞서 관찰된 바와 같이, 높은 바이러스 내성 발생률을 나타낸다. 임상 실험의 마지막 단계에 있는 NA의 또 다른 신규 억제제(문헌에서 CS 89958(R-125489로서 나타낸 화합물의 활성 대사산물)로서 나타낸다)(14)는 장기간 활성의 이점을 가지며, 효소들에 의해 간신히 불활성화되나, 자나미비어와 같이, 오직 코 흡입에 의해서만 국소적으로 투여될 수 있다는 한계를 나타내며, 따라서 오직 예방을 위해서만 사용될 수 있다. 더욱이, 많은 국제적인 발행물들이 점점 더 많은 수의 바이러스 돌연변이 및 융합을 보고하고, 보다 특히 내성 변체를 생성시키는 A형 바이러스는 매우 병원성이고 예측할 수 없게 공격성이기 때문에, 과학자들 사이에서 경각심이 점점 증가하고 있다. 이와 관련하여 최근 수년간 A형 조류 인플루엔자 바이러스(H5N1) 및 A형 돼지 인플루엔자(H1N1)가 과학자들에 의해 심각한 위험으로서 주시되었는데, 그 이유는 이들 바이러스가 오셀타미비어(경구 경로 투여에 적합한 유일하게 입수 가능한 제품이다)-내성 바이러스 균주에 의해 유발된 매우 위험한 대유행병을 생성시킬 수 있기 때문임에 주목할만하다. 실제로, 약물 내성에 관한 한, 이미 관찰된 바와 같이, 아다만탄 유도체에 내성인 바이러스 균주의 발생률 증가(15)(16)(17)(18)(19)가 보고되었다. 가장 중대한 발견은 상기 내성이, 항바이러스 활성을 억제하는 용량보다 훨씬 더 많은 용량의, 알쯔하이머에서의 메만틴 및 파킨슨병에서의 아만타딘의 만성적이고 다량의 사용에 따른 결과인 듯하며, 따라서 A형 인플루엔자 바이러스의 내성 균주가 선택되게 한다는 것이다. 더욱이, 보다 최근의 발행물들은 계절적 전염병으로부터 단리된, A형 바이러스 균주(돼지 인플루엔자, A/H1N1 형)의 존재를 강조하였으며, 상기 균주는 경구 경로에 의해 투여될 수 있는 유일한 뉴라미니다제 억제제인 오셀타미비어에 내성인 유전자 돌연변이를 보이고(20)(21)(22)(23)(24)(25), 그 결과 상기 오셀타미비어-내성 균주에 의해 감염된 환자들을 구하기가 대단히 어렵다. 감염 단계가 언급된 병원체들의 효소를 어떻게 사용하는지를 고려함으로써, HA가 상기 바이러스 또는 미생물(세균 또는 원생동물 또는 다른 것들)이 숙주 세포의 세포벽에 결합하는 첫 번째 단계에 원인임을 알았다. 실제로, HA는, 발현이 pH-의존성인, 세포벽의 당접합체의 시알산과 맞물리지 않은 잔기들과 결합한다. 따라서, HA 억제제는 숙주 세포 표면에의 부착(바이러스, 세균 또는 원생동물)을 방지하여, 영향을 미치는 특이적인 A형 및 B형 바이러스의 경우에, 생식 주기에 들어가, 상기 주기를 완료하고 방출되어 다른 세포에 대한 감염을 연장하는 바이러스의 수를 상당히 감소되게 할 수 있다. 적합한 HA 억제제가 아직 발견되지 않았으며 결과적으로 HA 억제제를 시중에서 입수할 수 없다. 상기에 비추어, 지금까지 HA가 숙주 세포막의 표면상에 노출된 시알화된 글리칸과 결합하는 상기 초기 단계와 대비되는 방법은 없는 듯하다. 그러나 상기 문헌은 SA에 대한 HA의 낮은 친화성을 개시하고 있지만, 일부 저자들이 이미 pH 변화가 인플루엔자 바이러스의 다양한 균주들의 융합 기전을 방해할 수도 있음을 개시한 것에 대한 보고를 빠뜨렸다(26)(27). 마지막으로 아직까지 상기 개시된 단계들 중 둘 이상의 원인이 되는 당단백질 및 단백질을 억제할 수 있고 따라서 상기 HA 및/또는 M2 단백질 및/또는 뉴라미니다제(NA)를 순차적으로 또는 동시에 억제하거나 또는 상기 바이러스 복제에 관련된 둘 또는 셋 이상의 기전을 순차적으로 및/또는 동시에 방해할 수 있는(내성의 개시를 또한 최소화하면서 약물의 효능을 현저하게 증가시킬 수 있는 인자들이다) 제품은 보고되지 않았다. 더욱이, 플라비바이러스에 의해 지속되는 다른 감염들, 예를 들어 C형 간염, 황열 및 뎅기열은 세계 여러 지역들에서 매우 흔하며 높은 병원성 및 사망률 수준을 생성시키고, 따라서 이들은 여전히 감염 환자 수 및 사망자 수를 점점 더 증가시키고 있다. 이러한 병리학들의 경우, 유효 치료를 보장할 수 있는 약물을 입수할 수 없다. 그러나, C형 간염 바이러스(HCV)에 대한 현행 전략은 리바비린(모노포스페이트로서), 구아노신 모노포스페이트의 합성에 의한 억제, 따라서 세포 내 수준의 감소이다. 최근의 임상 프로토콜에서 리바비린은 peg화된 인터페론 알파-2a 또는 peg화된 인터페론 알파-2b와 관련되었으며, 이들을 수년간 시중에서 입수할 수 있었으나, 결과는 불명확하다. 또한, 다른 플라비바이러스에 의해 지속되어 높은 사망자 수에 이르게 되는 바이러스 감염의 초기 또는 급성 단계를 적합하게 치료할 수 있는 의학적 물질을 입수할 수 없다. 오늘날 백신에 의한 예방을 확립하는 것만이 가능하나, 이용 가능한 용량의 부족에 비추어, 황열의 경우 발생하는 바와 같이, 오직 전염병 창궐을 제한하는 것만이 허락된다. 상기 플라비바이러스에 의해 유발된 질병을 치료하기 위한 특정 약물의 결여는 상기 감염을 대단히 위험하게 하는데, 그 이유는 상기 감염이 치명적인 사건들의 높은 발생률을 야기하기 때문이다. 상기를 기초로, 인간 및 포유동물에 대한 일련의 다른 바이러스 병원체들에 대해 광범위한 활성을 제공하기 위해 개별적인 분자가 바이러스 복제를 다수의 결합된, 연속적이고 동시적인 기전들로 억제할 수 있을 뿐만 아니라, A형 및 B형 인플루엔자 바이러스 및 다음 수년간 예상되는 여러 변체들의 약물내성을 방지하는 신규의 항바이러스 화합물의 필요성이 긴급하고 절실하다. 내면화 및 내적인 증식을 위해 숙주 세포 벽에 결합하는 상기 바이러스들에 의해 사용되는 기전이 인간 및 포유동물의 다른 병원체들에 의해 사용되는 기전과 매우 유사하다는 사실에 비추어, 복합 효과를 제공하는 화합물이 또한 이들 감염에 유용할 수 있다. 실제로, 상기 숙주 세포의 초기 감염 단계에서 세균, 변형체 및 다른 단세포 감염 인자들이 HA 및 NA와 유사한 효소들을 사용함으로써, 상기 세포 표면상의 당단백질의 SA에 결합한다. 따라서, 또한 세균 및 바이러스 및 혼합된 세균-바이러스 감염, 및 또한 세계적으로 높은 사망률을 갖는 다른 병원성 미생물들을 동일한 화합물로 억제할 수 있으며 이에 대한 필요성이 증가하고 있다. 현행 항바이러스제 및 본 발명 항바이러스제의 원리 WO 92/06691(1992년 4월 30일자로 공개된 PCT/AU90/00501)의 콜맨 피엠(Colman PM) 등, 특허 EP 0539204 A1(1993년 4월 28일자로 공개된 유럽 특허 출원 제 92309684.6 호)의 이츠스타인 엘엠(Itzstein LM), 및 또한 특허 WO91/16320(1991년 10월 31일자로 공개된 출원 PCT/AU91/00161)의 같은 이츠스타인 엘엠 폰 등은 상기 바이러스 NA에 결합하는 화합물을 개시하며, 상기 화합물은 결과적으로 바이러스 활성의 시험관 내 억제제로서 간주되고 있다. 유사하게, 1993년에 폰 이츠스타인은 널리 공지된 발행물 "네이처"(28)에서, 인플루엔자 바이러스의 생식 주기에 대한 시알리다제 억제제의 이론적인 효과를 개시하고 있다. 미국 특허 제 5,952,375 호(1996년 2월 26일자로 출원된 출원 US 08/606,624)에서 비숍버거 엔더블유(Bischofberger NW) 등은 신규의 NA 억제 화합물을 보인다. 국제 공보 WO99/33781(1999년 7월 8일자로 공개된 국제 출원 PCT/US98/26871)에서 저자 바부 와이에스(Babu YS) 등(29)은 특이적인 NA 억제제로서 한정된 일련의 다른 화합물들을 보인다. 자나미비어, 오셀타미비어, 페라미비어, 라니나미비어와 같은 NA를 억제하는 대부분의 모든 최근의 항바이러스제들은 시알산(SA)의 동족체이며 따라서 이들은 오직 일부 A형 인플루엔자 균주의 바이러스 NA의 억제 기전과 경쟁하지만, B형 인플루엔자 바이러스나 다른 바이러스 질병들을 치료하지 못하고 치료에 사용될 수도 없다. 결과적으로, 이들의 사용을 또한 다른 단세포 미생물들로 확장할 수는 없는 것처럼 보인다. 유사하게, 널리 공지된 문헌[Martindale 33.th Ed.(2002) p. 639-43](30)에 개시된 바와 같이, 현행의 의료 행위는 다른 바이러스 병원체에 침범된 인간 환자들에서 퓨린 뉴클레오사이드의 동족체, 예를 들어 리바비린 또는 비라미딘과, HVC에 의해 지속된 만성 감염의 치료를 위한 사이토킨, 예를 들어 인터페론 알파-2b(또는 인터페론 알파-2a 또는 peg화된 알파 2b)와의 동시 투여를 병행한다. 실제로 리바비린 모노포스페이트 및 유사 유도체는 구아노신 모노포스페이트의 합성 및 세포 내 농축을 억제하는 반면, 상기 트라이포스페이트 염은 mRNA-구아닐일 트랜스퍼라제를 방해하는 것으로 생각된다. 상기 언급한 경우에서와 같이, 바이러스 전염은 일반적으로 숙주 세포 벽 상에 존재하는 표면 수용체들, 주로 SA 및 HA 당단백질을 함유하는 글리칸들의 상호작용에 의해 발생하며, 따라서 과학자들은 현재 바이러스 복제의 상기 전염 과정을 변경시키거나 저지하기 위해서 상기 전형적인 기전에 그들의 노력을 집중하고 있다. 유사한 기전이 또한 플라비바이러스 복제를 좌우하는데, 차이는 숙주 세포의 표면 수용체가 여러 가지이고 완전히 확인되지 않은 것처럼 보인다. 그러나, 또한 플라비바이러스의 경우 상기 비리온의 표면과 숙주 세포의 수용체 간의 분자 상호작용이 상기 감염의 첫 번째 단계이다. 이러한 특징은 바이러스 종 및 특정한 세포 향성, 및 또한 독성에 공통이다. 실제로 일부 바이러스의 세포 수용체들이 한정되었고 바이러스 부착의 독특한 전략들을 나타내었으며, 이는 세포 표면에 결합하는 특정 단백질로부터 숙주 세포 중에 주로 존재하는 탄수화물, 예를 들어 시알산 및 헤파란 설페이트의 라디칼들과의 상호작용에 이르기까지 다양하다. 다수의 바이러스들에 대해서 숙주 세포의 특정 수용체들이 확인되지 않았다. 특정 세포 내로의 여러 수용체들의 사용 또는 위상학적 차이가 이렇게 놓친 지식의 이유일 수 있다. 실제로 플라비바이러스의 결합 시스템에 대해 같은 기전이 제안되었다(31). 여러 플라비바이러스가 척추동물 및 절지동물의 세포에서 복제되며 많은 변종 및 조직 향성을 나타낸다. 40 내지 80 kDa의 분자 질량을 갖는 다수의 잠재적인 후보 수용체 단백질들이 상호작용 시험에서 플라비바이러스와 관련되었다(32)(33)(34)(35)(36). 더욱이 헤파란 설페이트의 중요한 역할이 척추동물 세포에 대한 뎅기-2 바이러스의 결합에서 입증되었다(31). 글루코스아민글리칸(GAG)이 또한, 높은 친화성 수용체에 대한 다음 결합을 준비하기 위해서 세포 표면상의 바이러스 입자를 농축시키는 과정 동안 상호작용 분자로서 다른 바이러스들에 의해서 어떻게 사용되는지는 매우 본질적이다(37). 그러나, 오늘날 각각의 플라비바이러스에 대해 고도로 친화성인 수용체의 작용 및 성질을 평가하는 실험적인 시험은 수행되고 있지 않다. 플라비바이러스의 결합 및 후속적인 내면화는 E 단백질(약 50 kDa)(이는 플라비바이러스의 주 당단백질 입자이다)에 의해 매개된다(고찰을 위해, 챔버스(Chambers TJ) 등(38) 및 모나트(Monath TP) 등(39)에 의한 발행물들을 참조하시오). 단백질 E는 상기 막의 작은 단백질 M(8 kDa)과 올리고머를 형성하며 비리온의 이용 가능한 표면의 큰 부분을 구성한다. 상기는 단백질 E가 상기 바이러스 및 보호 항체를 중화하는 항원 표적을 필수적으로 구성함을 결정한다. 이와 관련하여 상기 모나트 등의 문헌["Flaviviruses"](39)을 참조하시오. 단백질 E 변이의 표현형 분석과 함께 진드기(TBE)에 의해 유발된 바이러스 뇌염의 플라비바이러스의 단백질 E의 외부영역의 결정 구조의 정의(40)는 플라비바이러스의 결합 및 내면화와 관련된 작용 도메인 및 기전들을 밝혔다(또한 상기 모나트 등의 문헌["Flaviviruses"](39)을 참조하시오). 뇌 플라비바이러스 머레이 계곡 뇌염 바이러스(MVE)의 숙주 세포에 대한 배열과 관련된 유전자형 변화에 대한 연구는 세포 향성 및 독성에 대한 E 단백질의 잔기 390의 중요한 역할을 암시하였다(41). 상기 원형 바이러스에서 발견된 390 Asp는 인간 선암종(SW13)의 세포 주 상에서 MVE의 계대 배양 후 His, Gly, Ala 또는 Asn이 변형되었고, 따라서 인간 세포 주의 생육 증가 및 따라서 또한 마우스에서 독성의 약화를 생성시켰다. 상기 MVE의 E 단백질 중의 390 잔기는 서열 Arg-Gly-Asp(RGD)의 부분이며, 이는 외부 여분의 세포 기질 및 세포-세포 부착에 있어서 인테그린의 중요한 결합 요소이다(42). 상기 증거는 일부 플라비바이러스의 결합에 있어서 인테그린의 가능한 연루와 함께, 상기 390 잔기를 포함하는, 잘 보호되고 친수성인 영역 내로의 플라비바이러스 수용체의 결합 부위의 위치에 대한 첫 번째 가설을 지지하였다(42). 더욱이, 상기 요소 RDG는 모든 플라비바이러스의 E 단백질 내부에서 추적할 수 없다, 즉 일본 뇌염 바이러스(JEV)(43), 황열 바이러스(YFV) 균주 17D(44) 및 복잡한 혈청 JEV의 다른 구성원들의 관련된 서열 RGE/T(45)(46)(47)에서 추적 가능하지만, 뎅기 바이러스의 E 단백질 중의 상응하는 아미노산들은 관련되지 않았고(48)(49)(50) TBE로 결실되었다(51). YFV의 백신 17D 균주 중의 RGD 서열이 독성 아시비(Asibi) 변종(상응하는 아미노산 Thr-Gly-Asp을 나타낸다)의 숙주 세포의 적응 결과로서 어떻게 나타나는지는 고유하다(52). 상기 서열들의 비교를 기초로 하여, 인테그린이 구제역 바이러스(53)(54) 및 콕사키바이러스(55)(상기 숙주 세포 내로의 유입에 대해 인테그린 RGD-매개된 결합에 의해 폐쇄된 의존성을 나타낸다)와 대조적으로, 일반적인 부착형 결합 플라비바이러스를 나타내지는 않는 듯하다. 상기 TBE의 E 단백질의 결정 구조는 일부 플라비바이러스의 RGD를 보호하는 친수성 영역의 결합 수용체 중의 작용을 구체적으로 입증한다. 상기 서열은 E 단백질의 면역글로불린-유사 영역 III에 놓인 용매(FG)에 노출된 고리 중에 위치하고 숙주 세포의 향성을 수반하는 돌연변이 및 상기 상이한 플라비바이러스의 독성이 이 영역에 놓인다(56). 실제로, 일부 저자들은 감염성 클론의 사용으로 MVE 중의 RDG 부분에 치환을 도입함으로써 상기 추정적인 플라비바이러스 중의 상기 수용체와 결합하는 영역이 마우스에서 상기 바이러스 생육, 부착 및 상기 배양 세포 및 독성에 대한 내면화에 효과를 생성시키는 것을 관찰하였다. 이 주제에 대한 보다 양호한 서지 상 개관을 갖기 위해서, 다수의 다른 발행물들을 참고할 수 있다(56)(33)(57)(58)(59). 최종적으로, HCV는 세계적으로 추정 상 1억 7천만 명(대략 1형 인간 면역결핍 바이러스에 감염된 수의 5 배)을 감염시킨 주요 인간 병원체로서 여겨지므로, 큰 우려 중 하나이다. 상기 HCV 감염된 개인의 상당 부분은 10 가지 중증 진행성 간 질병, 예를 들어 경변 및 간세포 암종이 발병한다. 현재, 대부분의 유효 HCV 요법은 알파인터페론과 리바비린의 조합을 사용하여, 환자의 40%에서 지속적인 효능을 이끌어 내었다. 최근의 임상 결과는 peg화된 알파-인터페론이 단일요법으로서 변경되지 않은 알파-인터페론보다 우수함을 입증한다. 그러나, peg화된 알파-인터페론과 리바비린의 조합을 수반하는 실험적인 치료 섭생이라 할지라도, 환자의 상당 부분은 지속적인 바이러스 부하 감소를 갖지 못하고 있다. 따라서, HCV 감염의 치료를 위해 또한 유효한 요법을 개발하기 위한 분명하고도 오랫동안 소망해온 필요성이 존재한다.
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일반적인 내용 본 발명의 주요 실시태양은 바이러스, 특히 인플루엔자 바이러스, 간염 바이러스, 및 중증 바이러스 질병, 특히 시알산(SA)이 관련된 것들, 예를 들어 플라비바이러스에 의해 지속되는 것들의 원인인 다른 바이러스에 대해 현저한 억제 효과를 나타내는 신규 부류의 화합물을 입수할 수 있게 하는 것이다. 상기 신규 화합물은 바이러스 막의 효소 단백질, 예를 들어 HA, 및 구조 바이러스 단백질, 예를 들어 M 2 단백질, 및 해당 효소, 예를 들어 NA의 연합되고 선택적인 억제를 발휘한다, 보다 특히 바이러스 및 세균 뉴라미니다제 및 인간 및 동물에 영향을 미치는 다수의 다른 미생물에 대한 방해를 나타낸다. 더욱 또한 본 발명의 신규 화합물은 또한 C형 간염 바이러스(HVC) 및 플라비바이러스의 다양한 유형들에 대해 억제 활성을 이끌어내는 것으로 여겨진다. 본 발명의 또 다른 목적하는 실시태양은 통상적으로 사용되는 항바이러스제에 대해 교차 내성을 나타내지 않으면서, 중증 감염의 원인인 대부분의 통상적인 바이러스들의 복제 및 전염 과정의 개선되고 덜 비싼 억제제를 제공하는 것이다. 본 발명의 또 다른 추가의 목적은 본 발명의 신규 억제제 및 다른 공지된 항바이러스제와의 합리적인 조합의 투여를 위한 개선된 방법을 제공하는 것이다. 추가의 태양은 상기 실시태양들에 유용한 약학 조성물을 제공하는 것이다. 상기 및 추가의 목적들은 전부 본 발명의 평가로부터 당해 분야의 숙련가들에게 보다 자명할 것이다.
아다만탄 유도체(전형적으로 A형 인플루엔자 바이러스 중에 깊이 존재하는 M 2 단백질의 방해를 이끌어낸다) 및/또는 리바비린(RNA-의존성 복제에 돌연변이를 유도하거나 또는 몇몇 바이러스 RNA-의존성 RNA 폴리머라제를 억제함)의 부분을 함유하는, 바이러스 작용을 억제하기에 유효한 화합물들은 WO 2008/090151에 개시된 것들이지만, 종종 바이러스, 세균 및 원생동물 중에 존재하는 헤마글루티닌(HA) 및/또는 뉴라미니다제(NA)의 작용의 추가의 억제를 함께 상승적으로 이끌어내도록 고안된 신규의 화합물이 특히 바람직하며, 따라서 저자들은 놀랍고도 뜻밖의 결과에 도달함으로써 상기 미답의 연구 분야를 더욱 조사하였다.
도 1 - THE 08/01 대 Flu A/H1N1
도 2 - THE 08/01 대 Flu A/H3N2
도 3 - THE 08/01 대 Flu B
도 4 - THE 08/01 대 Flu A/H1N1(H275Y) + Flu A/H1N1
도 5 - 시험 결과 HCV(THE 08/01, THE 10/01, THE 10/09).
발명의 간단한 설명 첫 번째 태양에서 본 명세는 하기 본 발명에 나타낸 바와 같은 화학식 I의 화합물 및 그의 선형 또는 분지된 C 1 -4 카복시 모노 또는 폴리 에스터, 부가염, 용매화물, 분리된 거울상 이성질체 및 정제된 부분입체 이성질체를 제공한다: [화학식 I] 상기 화학식 I의 화학 구조에서, X는 결합 -O- 또는 -CH 2 -를 나타내고; R은 -H 또는 선형 또는 분지된 C 1 -4 알킬 그룹을 나타내고; R 1 은 -(NH) n -(CH 2 ) m -(T)(여기에서 독립적인 방식으로 n은 1 또는 2이고, m은 0, 1, 2, 3 및 4이다), -NH-CO-NH-(T) 또는 -NH-C(NH)-NH-(T)을 나타내고, 여기에서 상기 -(T) 부분은 하기의 구조들 중 어느 하나를 갖는 고리로부터 나타내고: ?상기 -(T-1) 부분의 화학 구조에서: - R 5 는 -H, -CH 3 , -C 2 H 5 , -CH-(C 2 H 5 ) 2 중 어느 하나를 나타내고; - R 6 은 -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-C 2 H 5 중 어느 하나를 나타내고; - R 7 은 -O-CH-(CH 3 ) 2 , -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 를 나타낸다; ?상기 -(T-4) 부분의 화학 구조에서: - Z는 -H, -CH-(C 2 H 5 ) 2 , -CO-(CH 2 ) 6 -CH 3 를 나타낸다; R 2 는 -OH, -NH 2 , -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 , -NH-C(NH)NH 2 를 나타내고; 여기에서 임의로 상기 선행하는 R 2 부분들 중 어느 하나의 오직 하나의 말단 수소만이 부분 -(T) 또는 -(W)에 의해서 또는 또 다른 공지된 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 화합물의 부분에 의해서 치환될 수 있으나, 단 R 3 의 수소는 어떠한 부분에 의해서도 치환되지 않을 것이고; R 3 은 -OH, -NH 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 , 또는 -NH-C(NH)NH 2 를 나타내고; 여기에서 임의로 상기 선행하는 R 3 부분들 중 어느 하나의 오직 하나의 말단 수소만이 부분 -(T) 또는 -(W)에 의해서 또는 또 다른 공지된 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 화합물의 부분에 의해서 치환될 수 있으나, 단 R 2 의 수소는 어떠한 부분에 의해서도 치환되지 않을 것이고; R 4 는 -CHOH-CHOH-CH 2 -OH, -(W), -CHOH-CH 2 -(W) 또는 -CH 2 -(W)를 나타내고, 여기에서 상기 -(W) 부분은 하기의 구조들 중 어느 하나를 갖는 고리로부터 나타내고: ?상기 -(W-1) 부분의 화학 구조에서: - R 8 은 결합 작용기: -NH-, -CH 2 -NH-, -CH(CH 3 )-NH-, -NH-CH(CH 3 )-NH-, -C(CH 3 ) 2 -CH 2 -NH-, -NH-CO-CH 2 -O-CH 2 -CH 2 -NH- 또는 를 나타내고; - R 9 는 -H, -CH 3 또는 -C 2 H 5 를 나타내고; - R 10 은 -H, -CH 3 또는 -C 2 H 5 를 나타낸다; 또는 ?상기 -(W-2) 부분의 화학 구조에서: - R 11 은 결합 작용기: -NH-, -CO-NH- 또는 -C(NH)-NH-를 나타낸다. 또한 본 발명의 화합물을 포유동물, 특히 인간에게 투여하기에 적합한 약학적으로 허용 가능한 담체 중에 단독으로 또는 본 발명의 하나 이상의 화합물 또는 다른 활성제와 함께 함유하는 약학조성물이 본 발명 내에 포함된다. 본 발명의 또 다른 실시태양에서, 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 M 2 단백질의 활성을, 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 단백질 M 2 를 함유하는 것으로 의심이 가는 샘플을 본 발명의 화합물 또는 조성물로 처리하는 단계를 포함하는 방법에 의해 억제할 수 있다. 본 발명의 또 다른 태양은 숙주에게 임의의 적합한 투여 경로에 의해 치료 유효 용량의 본 발명에 개시된 본 발명에 따른 화합물을 투여함을 포함하는, 상기 숙주에서 예를 들어 간염 바이러스의 인플루엔자 바이러스에 의해 야기된 바이러스 감염을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다. 더욱이 또 다른 실시태양에서 본 발명의 화합물은 다른 미생물에 대해서도 또한 활성을 나타내며, 따라서 본 발명의 화합물은 세균 및 바이러스에 의해 지속되는 혼합된 감염의 치료에 매우 유용하고, 또한 플라비바이러스가 원인인 다른 바이러스 병원체의 치료에 유용하며, 포유동물의 숙주 세포의 감염에 대해 동일한 기전을 사용하는 다른 단세포 미생물 및 원생동물에 대해 잠재적인 활성을 또한 나타낸다. 본 발명의 다른 실시태양들에서, 본 발명 화합물의 신규의 합성 방법을 또한 제공한다. 발명의 상세한 설명 본 발명은 일부 조합으로부터 때때로 발생할 수 있는 현재 공지된 화합물들을 의도적으로 제외하지만, 특정 바이러스 활성을 발휘하는 것으로 이미 공지된 분자의 부분들을 함유하는 화합물 및 또한 중간체로서 이미 공지된 화합물 또는 그의 부분을 사용하는 방법들은 본 발명의 범위 내에 있는 실시태양들로 간주한다. 본 발명은 하기 형태의 화학식 I의 화합물 및 그의 선형 또는 분지된 C 1 -4 카복시 모노 또는 폴리 에스터, 부가염, 용매화물, 분리된 거울상 이성질체 및 정제된 부분입체 이성질체에 관한 것이다: [화학식 I] 상기 식에서, X는 결합 -O- 또는 -CH 2 -를 나타내고; R은 -H 또는 선형 또는 분지된 C 1 -4 알킬 그룹을 나타내고; R 1 은 -(NH) n -(CH 2 ) m -(T)(여기에서 독립적인 방식으로 n은 1 또는 2이고, m은 0, 1, 2, 3 및 4이다), -NH-CO-NH-(T) 또는 -NH-C(NH)-NH-(T)을 나타내고, 여기에서 상기 -(T) 부분은 하기의 구조들 중 어느 하나를 갖는 고리로부터 나타내고: ?상기 -(T-1) 부분의 화학 구조에서: - R 5 는 -H, -CH 3 , -C 2 H 5 , -CH-(C 2 H 5 ) 2 를 나타내고; - R 6 은 -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-C 2 H 5 를 나타내고; - R 7 은 -O-CH-(CH 3 ) 2 , -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 를 나타낸다; ?상기 -(T-4) 부분의 화학 구조에서: - Z는 -H, -CH-(C 2 H 5 ) 2 , -CO-(CH 2 ) 6 -CH 3 를 나타낸다; R 2 는 -OH, -NH 2 , -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 , -NH-C(NH)NH 2 를 나타내고; 여기에서 임의로 상기 선행하는 R 2 부분들 중 어느 하나의 오직 하나의 말단 수소만이 부분 -(T) 또는 -(W)에 의해서 또는 또 다른 공지된 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 화합물의 부분에 의해서 치환될 수 있으나, 단 R 3 의 수소는 어떠한 부분에 의해서도 치환되지 않을 것이고; R 3 은 -OH, -NH 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 , 또는 -NH-C(NH)NH 2 를 나타내고; 여기에서 임의로 상기 선행하는 R 3 부분들 중 어느 하나의 오직 하나의 말단 수소만이 부분 -(T) 또는 -(W)에 의해서 또는 또 다른 공지된 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 화합물의 부분에 의해서 치환될 수 있으나, 단 R 2 의 수소는 어떠한 부분에 의해서도 치환되지 않을 것이고; R 4 는 -CHOH-CHOH-CH 2 -OH, -(W), -CHOH-CH 2 -(W) 또는 -CH 2 -(W)를 나타내고, 여기에서 상기 -(W) 부분은 하기의 구조들 중 어느 하나를 갖는 고리로부터 나타내고: ?상기 -(W-1) 부분의 화학 구조에서: - R 8 은 결합 작용기: -NH-, -CH 2 -NH-, -CH(CH 3 )-NH-, -NH-CH(CH 3 )-NH-, -C(CH 3 ) 2 -CH 2 -NH-, -NH-CO-CH 2 -O-CH 2 -CH 2 -NH- 또는 를 나타내고; - R 9 는 -H, -CH 3 또는 -C 2 H 5 를 나타내고; - R 10 은 -H, -CH 3 또는 -C 2 H 5 를 나타낸다; 또는 ?상기 -(W-2) 부분의 화학 구조에서: - R 11 은 결합 작용기: -NH-, -CO-NH- 또는 -C(NH)-NH-를 나타낸다. 바람직한 실시태양에서 화학식 I의 주 고리 중의 X는 시알산 고리의 전형적인 -O-에 의해서, 또는 -CH 2 -에 의해서 나타내며, 상기 링커 -O-가 바람직한데 그 이유는 생성되는 시알로키메릭 화합물이 숙주 세포의 세포막의 시알화된 글리칸의 시알산(당단백질 헤마글루티닌(HA) 및 바이러스, 세균 또는 원생동물 뉴라미니다제(NA)와 상호작용한다)과 보다 양호한 친화성을 나타내기 때문이다. 또 다른 전형적인 실시태양에서 R은 카복실 그룹이 HA 및 NA에 특이적인 다른 당단백질과 상호작용하기 위해 자유롭게 남아 있도록 -H를 나타낸다. 또 다른 추가의 대체 실시태양에서 R은 선형 또는 분지된 C 1 -4 알킬 그룹, 예를 들어 메틸 또는 보다 전형적으로 에틸 그룹을 나타내는데, 그 이유는 생성되는 에스터가 쉽게 가수분해 가능하고 상기 자유로운 카복실 그룹을 신속하게 유리시킬 수 있기 때문이다. 추가의 바람직한 실시태양 R 1 에서 알킬아민 그룹 -(NH) n -(CH 2 ) m -(T)는 전형적으로는 간단한 아민 부분 -NH-(T)를 특징으로 하며 주 고리의 2 번 위치의 탄소 원자와 -(T) 부분의 4 번 위치의 탄소 원자 간의 2차 아민 결합이 바람직하다. 더욱 또한, 상기 부분 R 1 을 전형적으로는 -NH-CO-NH-(T) 또는 -NH-C(NH)-NH-(T)에 의해 나타내며, 상기 부분 -(T)은 본 발명에 보다 상세히 나타낸 구조들 중 어느 하나를 갖는 고리를 특징으로 한다. 실제로, 추가의 바람직한 실시태양에서, -(T)는 본 발명에서 앞서 개시한 바와 같이, 단지 아민, 알킬아민, 아미드 및 구아니딘 결합 작용기 중 어느 하나를 사용하여, 화학식 I의 주 핵에 결합된 5 환 또는 6 환 고리를 나타내며, 전형적으로는 하기 부분 -(T-1), -(T-2), -(T-3) 및 -(T-4) 중 하나를 특징으로 한다. 보다 특정한 실시태양에서 -(T)는 하기 화학식 및 부분들을 갖는 부분 -(T-1)에 의해 나타낸다: 상기 식에서, 개별적으로, R 5 는 -H 또는 알킬 그룹을 나타내고, 중요성이 증가하는 순서로, -H, -CH 3 , -CH-(C 2 H 5 ) 2 , 또는 보다 바람직하게는 -C 2 H 5 를 나타내는 반면, 전형적으로 R 6 은 -NH-CO-CH 3 또는 -NH-CO-C 2 H 5 를 나타내고 R 7 은 -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 또는 -O-CH-(CH 3 ) 2 를 나타낸다. 가장 바람직한 조합에서 -(T-1)은 R 5 가 -C 2 H 5 인 경우 동시에 R 6 이 -NH-CO-CH 3 를 나타내고 R 7 은 -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 를 나타낸다. 추가의 실시태양에서 -(T)는 전형적으로는 하기 구조를 특징으로 하는 부분적으로 치환된 6 환상 고리 -(T-2)를 나타낸다: 또한, -(T)가 -(T-3)을 나타내는 경우, 전형적으로는 하기 구조를 특징으로 하는 부분적으로 치환된 5 환상 고리가 본 발명에 포함된다: 또 다른 보다 전형적인 실시태양에서 -(T)는 하기의 구조 및 치환체를 특징으로 하는 부분적으로 치환된 6 환상 고리 -(T-4)를 나타낸다: 상기 식에서, Z는 수소 원자 (-H) 또는 -CH-(C 2 H 5 ) 2 또는 바람직하고 보다 전형적으로는 -CO-(CH 2 ) 6 -CH 3 를 나타내며, 따라서 에스터이다. 추가의 바람직한 조합에서 R 2 는 -OH 또는 -NH 2 를 나타내지만, 또한 다른 부분들, 예를 들어 보다 바람직하게는 -NH-CO-CH 2 -OH, -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-C 2 H 5 또는 -NH-C(NH)NH 2 를 나타내고, 이는 상기 고리의 다른 가장 가까운 탄소 원자들 중의 치환의 성질과 관련하여 선택된다. 또 다른 전형적인 실시태양에서 R 3 은 상기 부분이 본 발명 화합물의 주 고리인 키메릭 사본인 SA 중에 또한 존재한다는 점에 비추어 -NH-CO-CH 3 를 나타낸다. 더욱이 R 3 이 아민 부분, 예를 들어 비 제한적으로 -NH 2 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 , -NH-C(NH)NH 2 를 나타내거나, 또는 옥시드릴 그룹 -OH를 나타내는 것이 전형적이다. 또 다른 추가의 전형적인 실시태양에서 R 4 는 -CHOH-CHOH-CH 2 -OH를 나타내나, 일반적으로 R 4 가 보다 높은 분자량 부분, 예를 들어 비 제한적으로 -CHOH-CH 2 -W 또는 -CH 2 -W 또는 또한 간단히 -W를 나타내는 경우가 전형적으로 바람직하며, 여기에서 -W 부분은 전형적으로는 주 구조 I에 결합하는 아민 또는 아미드 결합 작용기를 갖도록, 전형적으로 치환된 바와 같은 아다만탄 고리 -(W-1), 또는 리보퓨라노실-1,2,4-트라이아졸 고리 -(W-2)로 포함된다. 전형적인 실시태양은 -W가 바람직하게는 하기의 구조 및 치환체들을 나타내는 아다만탄 고리 -W-1을 나타냄을 포함한다: 상기 식에서, R 8 은 전형적으로는 아미드 결합, 예를 들어 비 제한적으로 -NH-, -CH 2 -NH-, -CH(CH 3 )-NH-, -NH-CH(CH 3 )-NH-, -C(CH 3 ) 2 -CH 2 -NH-, -NH-CO-CH 2 -O-CH 2 -CH 2 -NH- 또는 예를 들어 하기 고리로서 환상 지방족 아민을 나타낸다: 추가의 전형적인 바람직한 실시태양에서 -(W-1)의 R 9 및 R 10 은 대칭적으로 동일하며, 이들은 -H, -CH 3 또는 -C 2 H 5 일 수 있다. 본 발명의 보다 바람직한 실시태양에서 -(W-1)은 R 8 이 -CH 2 -NH-를 나타내고 R 9 및 R 10 이 둘 다 수소 원자(-H)인 특정 조합임을 특징으로 한다. 본 발명의 또 다른 추가의 실시태양에서 -W는 전형적으로는 하기의 구조 및 치환체들을 특징으로 하는, 리보퓨라노실-1,2,4-트라이아졸 고리 -(W-2)를 나타낸다: 상기 식에서, R 11 은 전형적으로는 결합 작용기, 예를 들어 -NH-, 또는 비 제한적인 예로서 -CO-NH- 또는 -C(NH)-NH-를 나타낸다. 또 다른 전형적인 실시태양은 부분 -(T-1)을 포함하는 부분 -(T)의 존재를 특징으로 하는 본 발명의 이치환된 화합물을 특징으로 하며, 여기에서 동시에 R 5 는 -C 2 H 5 를 나타내고, R 6 은 -NH-CO-CH 3 를 나타내고, R 7 은 -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 를 나타내고, 부분 -(W)는 -(W-1)을 포함하며, 이때 동시에 R 8 은 -NH-를 나타내고 R 9 및 R 10 은 둘 다 수소 원자를 나타내고, 이때 추가로 R 2 및 R 3 은 -(T)도 -(W)도 함유하지 않는다. 또 다른 가장 바람직한 실시태양에서, 본 발명 화합물의 물리 화학적 성질은 화학식 I에 포함된 개별적인 부분들에 비해 현저한 개선을 나타낸다. 실제로, 상기 부분 -(W)가 친지성이고, 따라서 그의 수용성을 개선시키기 위해 하이드로클로라이드 또는 다른 무기 염이 일반적으로 사용되는 반면, -(W)를 포함하는 화합물은 사용 전에 염으로 변형시킬 필요 없이 물에 용해성이다. 그러나, 상기 수용성은 상기 화합물을 보다 생물학적으로 이용 가능하게 하여 흡수율 및 조직 내로의 침투를 모두 개선시킨다. 또 다른 추가의 바람직한 실시태양에서 보다 강한 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 효과가 요구되는 경우, R 2 는 -OH 또는 -NH 2 를 나타내지만, 다른 부분, 예를 들어 -NH-CO-CH 2 -OH, -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 또는 -NH-C(NH)NH 2 를 포함하는 경우, 임의로 상기 선행하는 R 2 부분 중 어느 하나의 임의의 하나의 말단 수소는 부분 -(T) 또는 -(W)에 의해서 또는 또 다른 공지된 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 화합물의 부분에 의해서 치환될 수도 있으나, 단 R 3 의 다른 수소는 어떠한 부분에 의해서도 치환되지 않을 것이다. 유사하게, 또 다른 추가의 바람직한 실시태양에서, R 3 은 -OH 또는 -NH 2 를 나타내지만, 또한 다른 부분, 예를 들어 -NH-CO-CH 2 -OH, -O-CH-(C 2 H 5 ) 2 , -NH-CO-CH 3 , -NH-CO-CH 2 -OH, -NH-CO-C 2 H 5 또는 -NH-C(NH)NH 2 를 포함하는 경우, 임의로 상기 선행하는 R 3 부분 중 어느 하나의 임의의 하나의 말단 수소는 부분 -(T) 또는 -(W)에 의해서 또는 또 다른 공지된 항바이러스, 항세균 또는 항원생동물 화합물의 부분에 의해서 치환될 수도 있으나, 단 R 2 의 다른 수소는 어떠한 부분에 의해서도 치환되지 않을 것이다. 그러나, 숙련가는 여러 다른 실시태양들이 가능하지만, 이 중에서 가장 바람직한 조합은 하기 표에 나타낸 것들임을 안다. 놀랍게도, 본 발명의 또 다른 전형적인 실시태양에서, 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 M 2 단백질 이온-채널의 활성을, 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 M 2 단백질을 함유하는 것으로 의심이 가는 바이러스 샘플을 본 발명에 개시된 바와 같은 본 발명의 화합물 또는 조성물로 처리함으로써 억제하거나 차단할 수 있다. 또 다른 태양에서 본 발명은 포유동물 숙주에게 임의의 적합한 투여 경로에 의해 치료 유효 용량의 본 발명에 따른 화합물을 투여함을 포함하는, 상기 숙주에서 바이러스 감염, 특히 A 및 B 인플루엔자 또는 플라비바이러스, 보다 특히 HCV로부터의 감염을 치료 또는 예방하는 방법에 관한 것이다. 그러나, 뜻밖에 놀랍게도, 본 발명의 화합물 또는 조성물은, 상기 표적 숙주 세포 내로의 부착 및 내면화의 경우 상기 표적 세포막의 펩타이드글리칸의 시알산에 대한 결합이 요구됨에 비추어, 그의 시알로모방 활성으로 인해, 다른 미생물, 특히 세균 및 원생동물에 있어서 당단백질 효소 헤모아글루티닌 및 또한 뉴라미니다제를 모두 억제하거나 차단할 수 있다. 또 다른 실시태양에서, 본 발명 화합물의 신규의 일반적인 합성 방법을 또한 제공한다. 본 발명 화합물의 제조를 위한 제조 중간체의 다수의 예시적인 방법들은 이미 숙련가에게 공지되어 있으나, 편의상 하기에 보고하지만, 이들이 본 발명의 주제는 아니다. 대조적으로, 본 발명 화합물의 추가의 예시적인 제조 방법을 하기에 제공하지만, 이들은 적용 가능한 방법들의 범위를 제한하고자 하지 않는다. 일반적으로, 반응 조건, 예를 들어 온도, 반응 시간, 용매, 후처리 과정 등은 수행되는 특정 반응에 대해 당해 분야에 통상적인 것들일 것이다. 인용된 기준 물질은 본 발명에 인용된 물질과 함께 상기와 같은 조건의 상세한 설명을 함유한다. 예시적인 방법으로서, 지시된 방법을 또한 본 발명의 화합물의 일반적인 합성으로서 적용할 수 있다. 그럼에도 불구하고, 숙련가는 다른 표준 과정들을 이용할 수 있고 이들을 사용하여 동일한 물질을 제공할 수 있음을 알 것이다. 본 발명에 따른 화합물을, 예를 들어 포유동물에 대한 투여에 적합하게 하는 약학적으로 허용 가능한 담체 중에 단독으로 또는 예를 들어 본 발명의 또 다른 화합물 또는 하나 이상의 활성제와 함께 함유하는 약학 조성물이 또한 본 발명 내에 포함된다. 본 발명의 추가의 태양은 본 발명의 화합물 또는 약학 조성물 또는 이들의 혼합물을 사용하는 포유동물의 치료를 상기 바이러스, 세균 및 원생동물 감염을 또한 억제할 수 있는 또 다른 치료 유효 용량의 활성제와 동시에 또는 교번 치료로 병행함으로써 상기와 같은 바이러스, 세균, 및 혼합된, 또는 원생동물 질병 또는 병을 치료 또는 예방하는 방법을 포함한다. 본 발명의 화합물은 임의의 또는 모든 비대칭 원자에서 풍부하거나 분리된 광학 이성질체를 또한 포함한다. 라세미 및 부분입체 이성질체 혼합물 모두뿐만 아니라 거울상 이성질체 또는 부분 입체 이성질체 짝이 실질적으로 없는, 단리되거나 합성된 개별적인 광학 이성질체가 모두 본 발명의 범위 내에 있다. 상기 라세미 혼합물을 현행 및 공지된 기법, 예를 들어 산 또는 염기와 같은 광학 활성 형태로부터 수득한 부분입체 이성질체 염의 분리를 사용함으로써 거의 순수한, 상기 혼합물의 개별적인 광학 이성질체들로 분리할 수 있으며, 이때 이들은 광학 활성 물질로 추가로 복구된다. 많은 경우에, 목적하는 광학 이성질체를, 상기 목적하는 출발 물질의 적합한 입체 이성질체의 사용으로부터 출발하는 입체특이적인 반응에 의해 합성한다. 본 발명의 조성물은 본 발명에서 언급한 화합물들의 염, 특히 예를 들어 무기 또는 바람직하게는 유기산 또는 염기를 함유하는 약학적으로 허용 가능한 무독성 염을 임의로 포함한다. 본 발명 화합물의 안정성 또는 물리적 특성을 개선하기 위해서 상기 화합물의 수용성 염이 필요한 경우 염화가 바람직한 과정이다. 본 발명의 또 다른 태양은 특별히 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제의 활성을 억제하고, 상이한 정도로, 또한 부수적으로 M 2 단백질 및/또는 RNA-폴리머라제 및/또는 RNA-의존성 복제에 영향을 미치는 방법에 관한 것으로, 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 M 2 단백질 및/또는 RNA-폴리머라제를 함유하는 것으로 의심이 가는 샘플을 본 발명의 화합물로 처리하는 단계를 포함한다. 본 발명의 화합물은 부수적으로 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제의 억제제로서 작용하는 것으로 여겨진다. 그러나, 상기 화합물은 또한 M 2 단백질 및 RNA-폴리머라제의 억제제이다. 실제로, 상기 억제제는 상기 하나 이상의 억제제를 끌어당기거나 상기 억제제에 들어맞거나 또는 본 발명에 보고된 바와 같이, 동반 억제를 이끌어낼 수 있는 상기 억제제의 독특한 키메릭 기하학에 비추어 헤마글루티닌, 뉴라미니다제, M 2 단백질 및 RNA-폴리머라제의 표면상 또는 공동 중의 위치에 결합할 것이다. 실제로, 상기 신규의 억제제들은 상기 언급된 감염 당단백질과 맞물리고/맞물리거나 경쟁하는 그들의 유사한 구조에 비추어, 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 M 2 단백질 및/또는 RNA-폴리머라제의 표면 또는 공동의 부위들에 결합할 듯하다. 그러나, 헤마글루티닌, 뉴라미니다제, M 2 단백질 및 RNA-폴리머라제에 결합하는 화합물들은 특정 효소 및/또는 당단백질과 다양한 정도의 친화성 및 가역성으로 결합할 수 있다. 상기 감염 효소 및/또는 당단백질과 실질적으로 비가역적으로 결합하는 화합물들이 본 발명의 방법에 사용하기에 이상적인 후보들이다. 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제를 함유하는 감염 유기체는 세균(하에모필루스 인플루엔티아에, 스트렙토코커스 뉴모니아에, 비브리오 콜레라에, 클로스트리듐 페르프린젠스, 아쓰로박터 시알로필루스) 및 바이러스, 특히 오쏘믹소바이러스 또는 파라믹소바이러스, 예를 들어 A 및 B형 인플루엔자 바이러스, 파라인플루엔자 바이러스, 리노바이러스, 코로나바이러스, 플라비바이러스(HVC 및 황열 및 뎅기열의 원인인 것들), 코로나바이러스 돌연변이체 및/또는 변형된 코로나바이러스, 폴리오마바이러스, 이하선염 바이러스, 뉴캐슬병 바이러스, 조류 흑사병 바이러스, 및 센다이 바이러스 및 적어도 단세포 기생충, 예를 들어 말라리아 및 트리파노소마증의 기생충을 포함한다. 이들 유기체 중 임의의 것으로부터 획득되거나 또는 이들 내에서 발견되는 헤마글루티닌 또는 뉴라미니다제 활성의 동반 억제는 본 발명의 범위 내에 있다. 추가의 태양으로서 본 발명은 일부 선별된 화합물이 또한 A형 인플루엔자 바이러스 뉴라미니다제 및 또한 오셀타미비어-내성 균주를 억제하여, 놀랍게도 본 발명의 화합물들을 독특하게 한다. 본 발명의 화합물은 또한 조류, 예를 들어 오리 및 거위, 포유동물, 예를 들어 설치류, 돼지 및 인간에 있어서 상기와 같은 감염의 치료 또는 예방에 유용하다. 추가의 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 바이러스, 세균 및 원생동물 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제에 대한 억제 활성을 평가하기 위한 통상적인 기법에 의해 상기와 같은 효소 활성에 대해 선별되었다. 본 발명과 관련하여, 전형적으로는 화합물들을 먼저 시험관 내에서 헤마글루티닌 및 뉴라미니다제의 억제에 대해 선별한다. 본 발명의 추가의 태양은 본 발명의 화합물로 A형 인플루엔자 바이러스 균주와 같이, M2-단백질을 함유하는 것으로 의심이 가는 샘플을 처리하는 단계를 포함하는, M2-단백질 이온-채널을 통한 H+ 이온의 유입을 차단하고, 탈피 및 세포질 내로 유리 리보핵단백질의 방출을 억제하는 방법에 관한 것이다. 실제로, 본 발명의 화합물은 또한 상기 바이러스 M2-단백질 작용을 차단함으로써 작용하는 것으로 여겨진다. 본 발명의 또 다른 추가의 태양은 본 발명의 화합물로 상기 의심이 가는 샘플을 처리함으로써 HVC의 RNAm 및 RNA 폴리머라제 합성을 차단함을 포함하는, 구아노신 모노포스페이트 및 RNAm 구아닐일트랜스퍼라제의 합성을 억제하는 방법에 관한 것이다. 또 다른 바람직한 실시태양에서, 본 발명의 화합물은 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 M 2 양성자 이온 채널 및/또는 RNA-폴리머라제 합성의 억제제로서 동시에 작용하는 것으로 여겨진다. 유사하게 상기 동일한 억제 효과가 말라리아와 같이, 단세포 기생충에 의해 또한 노출되는 헤마글루티닌 및/또는 뉴라미니다제 및/또는 바이러스 M2-단백질 및/또는 RNA-폴리머라제 합성에서 나타난다. 오셀타미비어-내성 균주에 대한 놀라운 활성을 포함하여 상기 놀라운 항바이러스 활성을 확인하기 위해서, 본 발명의 실시예 7 및 실시예 8의 화합물(각각 THE 08/01 및 THE 10/01 코드로 표지됨)의 A형 및 B형 인플루엔자 바이러스 활성에 대한 별도의 시험관 내 선별 결과들을 하기에 요약하였다. 연구 디자인(I) - A형 및 B형 인플루엔자 바이러스 A/H1N1 및 A/H3N2의 균주 및 B형 인플루엔자 바이러스의 균주에 대한 화합물 THE 08/01 및 THE 10/01의 항바이러스 활성 선별을 별도로 수행하였다. 물질 및 방법 1. 인플루엔자 바이러스 균주의 증식 및 적정 인플루엔자 바이러스 A/H3N2(A/파나마/2007/99), A/H1N1(A/뉴칼레도니아/20/99) 및 B(B/파르마/1/07)의 균주들을 복제 허용 세포 주 MDCK(매딘 다비 개 신장)에 퍼뜨렸다. 간단히, 상기 인플루엔자 바이러스들을 MDCK 세포의 융합 단층에 접종하고 5일간 37 ℃, 5% CO 2 에서 배양하였다. 상기와 같이 하여 상기 상등액을 수거하고 적정하였다. 플라크 형성 시험(플라크 분석, PA)에 의해 분석 측정을 수행하였다. 보다 구체적으로, 베이스 10에 대한 각 단리물의 일련의 희석물을 12 웰 플레이트 중의 융합 MDCK 단층에 접종하였다. 37 ℃, 5% CO 2 에서 1 시간 동안 배양 후에, 상기 바이러스 접종물을 회수하고 감염 배지(10 ㎍/㎖ 트립신, 2% 아가를 함유하는 MEM(최소 필수 배지))를 가하였다. 37 ℃, 5% CO 2 에서 3일 동안 배양 후에, 상기 세포 단층을 5% 글루타르알데하이드 용액으로 고정시키고, 아가 제거 후에 5% 카볼-푹신 용액으로 착색하였다. 플라크를 가시적으로 카운트하고 상기 단리물의 분석을 플라크 형성 단위(플라크 형성 단위, PFU)/㎖(PFU/㎖)로서 나타내었다. 2. 항바이러스 활성의 평가 2.1. 분석 화합물의 제조 화합물 THE 08/01(실시예 7의 화합물) 및 THE 10/01(실시예 8의 화합물) 각각을 멸균 증류수 중에 100 mM의 농도로 적합하게 재조성하였다. 이어서, 베이스 10에 대한 각 시험 화합물의 일련의 희석물을 0.01 μM 내지 100 μM의 간격으로 제조하였다. 2.2. 플라크 감소 분석(PRA) 시험 중인 각 화합물에 대해 12 웰 플라크(10 5 세포/㎖) 중에서 증식된, MDCK 세포의 융합 단층을 약 50 PFU/㎖(PFU = 플라크 형성 단위)의 각각의 바이러스 단리물(A/H3N2, A/H1N1 및 B)로 감염시켰다. 37 ℃, 5% CO 2 에서 1 시간 후에, 상기 바이러스 흡수를 증대시키기 위해서, 상기 바이러스 접종물을 제거하고 상기 세포 단층을 MEM 배양 배지에 의해 2 회 세척하였다. 중층 배지(10 ㎍/㎖ 트립신, MEM 중의 2% 아가)를 분석 화합물의 일련의 희석물(간격: 0.01 μM 내지 100 μM)을 함유하는 각 웰에 가하였다. 상기 시험을 중복 수행하고, 동시에 상기 항바이러스 화합물을 함유하지 않는 반응 대조군을 제조하였다. 상기 배양물을 37 ℃, 5% CO 2 에서 3일간 배양하였다. 그 후에, 상기 세포 단층을 5% 글루타르알데하이드를 사용하여 고정시키고 실온에서 3 시간 이상 배양하여 상기 아가 내로의 침투를 증대시켰다. 아가 제거 후에, 상기 세포 단층을 5% 카볼-푹신 용액에 의해 착색하였다. 상기 플라크를 가시적으로 카운트하고 플라크 억제 정도를 시험 중인 화합물을 함유하지 않는 대조군에 관하여 계산하였다. 따라서 상기 화합물이 없는 대조군에 대해 플라크 수를 50% 감소시킬 수 있는 각 화합물의 농도(EC50)를 측정하였다. 이러한 이유로 인해 용량-반응 곡선을 그래프패드 프리즘 생물통계학 소프트웨어에 의해 작성하였다. 3. 결과 THE 08/01 및 THE 10/01은 시험된 A 및 B형 인플루엔자 바이러스에 대한 항바이러스 활성을 입증하였다. 상기 시험된 인플루엔자 바이러스에 대한 화합물 THE 08/01 및 THE 10/01의 용량-반응 곡선을 상기 EC50 및 관련된 신뢰도 구간(95% CI)을 외삽하면서 S자 함수로부터 나타낸다. 예시적인 표현으로서, THE 08/01의 S자 함수를 도 1, 2 및 3에 보고한다. 특히, EC50을 하기에 보고한다: EC50 THE 08/01 대 A/H1N1: 9.9 μM (95% CI: 4.5-21.5 μM); EC50 THE 08/01 대 A/H3N2: 15.4 μM (95% CI: 2.5-95.8 μM); EC50 THE 08/01 대 B: 125.5 μM (95% CI: 7.8-2014.0 μM); 및 EC50 THE 10/01 대 A/H1N1: 11.7 μM (95% CI: 7.3-29.8 μM); EC50 THE 10/01 대 A/H3N2: 18.3 μM (95% CI: 9.6-83.2.8 μM); EC50 THE 10/01 대 B: 99.5 μM (95% CI: 11.4-1937.6 μM). 4. 결론 상기 수행된 시험에 의해 획득된 결과는 하기를 고려하게 한다: THE 08/01은 A 및 B형 인플루엔자 바이러스 모두에 대해 항바이러스 활성을 나타내었다. 상기 항바이러스 활성은 B형 바이러스의 경우보다 A형 바이러스에 대해 10 배 더 높게 나타났다. 유사한 결과가 THE 10/01에 의해 성취되었다. 연구 디자인(II) - 인플루엔자 바이러스 A/H1N1(H275Y)(오셀타미비어-내성) 뉴라미니다제-A/H1N1을 암호화하는 유전자에서 H275Y 변이(H275Y)를 나타내는 A형 인플루엔자 바이러스 서브유형 H1N1에 대한 화합물 THE 08/01의 항바이러스 활성에 대한 시험관 내 평가. 상기 화합물 THE 08/01의 인플루엔자 억제 활성을 인플루엔자 바이러스 A/H1N1의 단리물(H275Y) 및 변이되지 않은 인플루엔자 바이러스 A/H1N1에 대해 측정하였다. 물질 및 방법 1. 인플루엔자 바이러스의 증식 및 적정 인플루엔자 바이러스 A/H1N1(H275Y)(A/파르마/38/2008) 및 A/H1N1(A/뉴칼레도니아/20/1999)의 균주들을 배아 계란 상에 퍼뜨렸다. 간단히, 상기 인플루엔자 바이러스 균주를 요막 경로에 의해, 계란에 접종하고 3일간 37 ℃에서 배양하고 상기 요막액을 수거하고 적정하였다. 플라크 형성 시험(플라크 분석, PA)에 의해 상기 분석의 측정을 수행하였다. 구체적으로, 베이스 10에 대한 각 바이러스 단리물의 일련의 희석물을 12 웰 플레이트 중의 허용 세포 MDCK(마딘-다비 개 신장)의 융합 단층에 접종하였다. 37 ℃, 5% CO 2 에서 1 시간 동안 배양 후에, 상기 세포 접종물을 회수하고 감염 배지(10 ㎍/㎖ TPCK-트립신, 2% 아가를 함유하는 MEM)를 가하였다. 37 ℃, 5% CO 2 에서 3일 동안 배양 후에, 상기 세포 단층을 5% 글루타르알데하이드 용액으로 고정시키고, 아가 제거 후에 5% 카볼-푹신 용액으로 착색하였다. 플라크를 가시적으로 카운트하고 상기 단리물의 분석을 플라크 형성 단위(플라크 형성 단위, PFU)/㎖(PFU/㎖)로서 나타내었다. 2. 시험 화합물의 항바이러스 활성의 평가 2.1. 시험 화합물의 제조 화합물 THE 08/01을 멸균 증류수 중에 1 mM의 농도로 적합하게 재조성하였다. 그 후에, 베이스 10에 대해, 일련의 희석물을 0.01 μM 내지 100 μM의 범위로 제조하였다. 2.2. 플라크 감소 분석(플라크 감소 분석, PRA) 12 웰 플레이트(10 5 세포/㎖) 중에서 증식된, MDCK 세포의 융합 단층을 약 50 PFU/㎖의 각각의 바이러스 단리물(A/H1N1(H275Y) 및 A/H1N1)로 감염시켰다. 상기 바이러스 흡수를 증대시키기 위해서, 37 ℃, 5% CO 2 에서 1 시간 후에, 상기 바이러스 접종물을 제거하고 상기 세포 단층을 MEM 배양 배지에 의해 2 회 세척하였다. 중층 배지(MEM 중의 10 ㎍/㎖ TPCK-트립신, 2% 아가)를 평가 중인 화합물의 일련의 희석물(간격: 0.01 μM 내지 100 μM)을 함유하는 각 웰에 가하였다. 상기 시험을 중복 수행하고, 동시에 상기 항바이러스 화합물을 함유하지 않는 반응 대조군을 수립하였다. 이어서 상기 배양물을 37 ℃, 5% CO 2 에서 3일간 배양하였다. 그 후에, 상기 세포 단층을 5% 글루타르알데하이드 용액을 사용하여 고정시키고 실온에서 3 시간 이상 배양하여 상기 아가 내로의 침투를 증대시켰다. 아가 제거 후에, 상기 세포 단층을 5% 카볼-푹신 용액에 의해 착색하였다. 상기 플라크를 가시적으로 카운트하고 50%의 플라크 억제 정도를 시험 중인 화합물을 함유하지 않는 대조군에 관하여 계산하였다(EC50). 따라서 상기 화합물이 없는 대조군에 대해 플라크 수를 50% 감소시킬 수 있는 각 화합물의 농도(EC50)를 측정하였다. 이를 위해서 용량-반응 곡선을 그래프패드 프리즘 생물통계학 소프트웨어에 의해 작성하였다. 3. 결과 THE 08/01은 A/H1N1에 대해 측정된 경우에 필적할만한 인플루엔자 바이러스 A/H1N1(H275Y)에 대한 시험관 내 항바이러스 활성을 입증하였다. 상기 시험된 2 개의 인플루엔자 바이러스에 대한 화합물 THE 08/01의 용량-반응 곡선을 도 4에 나타낸 S자 함수로부터 나타낸다. 상기 곡선의 작성은 상기 EC50 및 관련된 신뢰도 구간(95% CI)의 외삽을 허용하였다. 보다 특히: EC50 THE 08/01 대 A/H1N1(H275Y): 14.5 μM (95%CI: 5.2-41.5 μM); EC50 THE 08/01 대 A/H1N1: 16 μM (95%CI: 3.1-81.8 μM). 4. 결론 상기 수행된 시험들로부터 획득된 결과는 THE 08/01이 인플루엔자 바이러스 A/H1N1 및 변이 H275Y를 나타내는 A/H1N1(오셀타미비어에 대한 내성을 부여한다)의 단리물에 대한 필적할만한 항바이러스 활성을 나타낸다는 결론을 내리게 한다. 따라서 상기 데이터는 종래 기술의 화합물들에 대한 본 발명 화합물의 증대된 항바이러스 활성의 몇몇 증거를 제공한다. 실제로, 헤마글루티닌에 대한 억제의 가설을 예견할 수 있도록 때때로 매우 낮은 농도에서 상기 시험된 화합물 모두의 증대된 항바이러스 활성이 존재한다. 그러나, B형 바이러스 중 M 2 단백질의 부재 하에서(M2 단백질은 전형적으로는 오직 A형 인플루엔자 바이러스 중에만 존재한다) B형 바이러스에 대한 뜻밖의 활성은 헤마글루티닌 및/또는 M 2 단백질 억제를 부수적으로 수반하는 새로운 작용 기전의 가설을 지지하는 것으로 보인다. 그러나, 상기 화합물들은 균주 A/H1N1-275Y(오셀타미비어에 대해 내성)에 대해 약한 활성을 나타내었으므로, 상기 뉴라미니다제 억제 효과는 또한 상기 언급한 활성(헤마글루티닌 및/또는 M 2 단백질 억제)에 동반되는 듯하다. 이는 추가의 특정 연구의 목적일 것이다. 본 발명의 화합물을 통상적인 담체 및 부형제와 함께 제형화할 수 있으며, 상기 담체 및 부형제는 통상적인 관행에 따라 선택될 것이다. 정제는 부형제, 윤활제, 충전제, 결합제 등을 함유할 것이다. 수성 제형을 멸균 형태로 제조하며, 경구 투여 이외의 투여에 의해 전달하고자 하는 경우 상기 제형은 일반적으로 등장성일 것이다. 모든 제형들은 문헌[" Handbook of Pharmaceutical Excipients ", 4. th Edition, Rowe RC et al, Pharmaceutical Press (2003)]에 나타낸 바와 같은 부형제들을 임의로 함유할 것이다. 부형제는 아스코르브산 및 다른 산화방지제, 킬레이트제, 예를 들어 EDTA, 탄수화물, 예를 들어 덱스트린, 하이드록시알킬셀룰로스, 하이드록시알킬-메틸셀룰로스, 스테아르산 등을 포함한다. 본 발명의 하나 이상의 화합물(이후부터 활성 화합물이라 칭한다)을 치료하려는 병에 적합한 임의의 경로에 의해 투여할 수 있다. 적합한 경로는 경구, 직장, 코, 국소(구강 및 설하 포함), 질 및 비 경구(피하, 근육 내, 정맥 내, 피 내, 척추강 내 및 경막 외 포함) 등을 포함한다. 바람직한 경로는 예를 들어 수용자의 조건에 따라 변할 수 있음을 알 것이다. 본 발명 화합물의 이점은 상기 화합물을 경구에 의해 생물학적으로 이용 가능하며 경구 약학 형태로 투여할 수 있지만; 반드시 폐 내 또는 비 내 경로에 의해 투여할 필요가 있는 것은 아니다. 상기 활성 화합물 또는 그의 회합물을 수득한 바와 동일한 고체형(분말)으로 투여할 수 있지만, 이를 통상적인 약학 조성물 중에서 제형화하여 보다 편리하게 투여하는 것을 권장할 수 있다. 수의학 및 인간 모두에게 사용될 수 있는 본 발명의 제형은 상기 정의한 바와 같은 본 발명의 하나 이상의 활성 화합물을 하나 이상의 허용 가능한 담체 및 임의로 다른 치료 성분들과 함께 포함한다. 상기 담체(들)는 상기 제형의 다른 성분들과 상용성이고 그의 수용자에게 생리학적으로 무해하다는 의미에서 "허용 가능해야"한다. 상기 제형은 상기 투여 경로에 적합한 것들을 포함한다. 상기 제형을 편의상 단위 투여형으로 제공할 수 있으며 제약 분야에 널리 공지된 방법들 중 임의의 방법에 의해 제조할 수 있다. 기법 및 제형은 일반적으로 문헌["Remington's Pharmaceutical Sciences" Mack Publishing Co., Easton, Pa., USA ]에서 발견된다. 상기와 같은 방법은 활성 성분을 하나 이상의 보조 성분들을 구성하는 담체와 회합하는 단계를 포함한다. 일반적으로 상기 제형은 활성 성분을 액체 담체 또는 미분 고체 담체 또는 이들 모두와 균일하고 긴밀하게 회합하고, 이어서 필요에 따라 상기 생성물을 목적하는 대로 성형함으로써 제조될 수 있다. 경구 투여에 적합한 본 발명의 제형을, 각각이 소정 량의 활성 성분을 함유하는 캡슐, 사세 또는 정제와 같은 고체 단위로서; 분말 또는 과립으로서; 수성 액체 또는 비 수성 액체 중의 용액 또는 현탁액으로서; 또는 수중 유적형 액체 유화액 또는 유중 수적형 액체 유화액으로서 제조할 수 있다. 상기 활성 성분을 또한 큰 덩어리, 연약 또는 페이스트로서 제공할 수도 있다. 정제는 임의로 하나 이상의 보조 성분과 함께 압착 또는 성형에 의해 제조된다. 압착 정제는 적합한 기계에서 활성 성분을, 임의로 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 보존제, 표면 활성 또는 분산제와 혼합하여, 자유 유동 형태, 예를 들어 분말 또는 과립으로 압착시킴으로써 제조될 수 있다. 성형된 정제는 적합한 기계에서 불활성 액체 희석제로 적신 분말화된 활성 성분의 혼합물을 성형함으로써 제조할 수 있다. 상기 정제들을 임의로 코팅하거나 새김 눈을 그을 수 있으며 임의로 상기 정제로부터 활성 성분의 느리거나 조절된 방출을 제공하도록 제형화한다. 눈 또는 다른 외부 조직, 예를 들어 입 및 피부의 감염의 경우, 상기 제형을 바람직하게는 예를 들어 0.075 내지 20% w/w(0.1% w/w의 증분으로 0.1% 내지 20% 범위, 예를 들어 0.6% w/w, 0.7% w/w 등의 활성 성분(들)을 함유한다), 바람직하게는 0.2 내지 15% w/w 및 가장 바람직하게는 0.5 내지 10% w/w의 양으로 활성 성분(들)을 함유하는 국소 연고 또는 크림으로서 적용할 수 있다. 연고로 제형화 시, 상기 활성 성분(들)을 파라핀 또는 수 혼화성 연고 베이스와 함께 사용할 수 있다. 한편으로, 상기 활성 성분을 수중 유적형 크림 베이스와 함께 크림 중에서 제형화할 수 있다. 경우에 따라, 상기 크림 베이스의 수성 상은 예를 들어 30% w/w 이상의 다가 알콜, 예를 들어 2 개 이상의 하이드록실 그룹을 갖는 알콜, 예를 들어 프로필렌 글리콜, 부탄 1,3-다이올, 만니톨, 솔비톨, 글리세롤 및 폴리에틸렌 글리콜(PEG 400 포함) 및 그의 혼합물을 포함할 수 있다. 상기 국소 제형은 또한 바람직하게는 피부 또는 다른 감염 부위를 통한 상기 활성 성분의 흡수 또는 침투를 증대시키는 화합물을 포함할 수도 있다. 상기와 같은 피부 침투 향상제의 예로는 다이메틸 설폭사이드 및 관련된 동족체가 있다. 본 발명 유화액의 유성 상을 공지된 방식으로 공지된 성분들로부터 구성할 수도 있다. 상기 상은 단지 유화제(달리 유화액으로서도 공지됨)만을 포함할 수도 있지만, 하나 이상의 유화제와 지방 또는 오일 또는 지방 및 오일과의 혼합물을 포함하는 것이 바람직하다. 바람직하게, 친수성 유화제는 안정제로서 작용하는 친지성 유화제와 함께 포함된다. 오일 및 지방을 모두 포함하는 것이 바람직하다. 동시에, 안정제(들)의 존재 또는 부재 하의 상기 유화제(들)는 소위 유화 왁스를 구성하며, 상기 왁스는 상기 오일 및 지방과 함께 소위 유화 연고 베이스를 구성하며, 상기 베이스는 상기 크림 제형의 오일 분산된 상을 형성한다. 본 발명의 제형에 사용하기에 적합한 유화액 및 유화 안정제는 트윈(Tween)(등록상표) 60, 스판(Span)(등록상표) 80, 세토스테아릴 알콜, 벤질 알콜, 미리스틸 알콜, 글리세릴 모노-스테아레이트 및 30 나트륨 라우릴 설페이트를 포함한다. 상기 제형에 적합한 오일 또는 지방의 선택은 목적하는 화장품 성질을 성취하는 것을 기준으로 한다. 상기 크림은 바람직하게는 튜브나 다른 용기로부터 새는 것을 방지하기 위해 적합한 점조도로 번들거리지 않고, 얼룩이 없으며 세척 가능한 제품이어야 한다. 직 쇄 또는 분지 쇄, 일- 또는 이염기성 알킬 에스터, 예를 들어 다이-아이소아디페이트, 아이소세틸 스테아레이트, 코코넛 지방산의 프로필렌 글리콜 다이에스터, 아이소프로필 미리스테이트, 데실 올리에이트, 아이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트, 2-에틸헥실 팔미테이트 또는 크로다몰(Crodamol) CAP로서 공지된 분지 쇄/에스터의 블렌드를 사용할 수 있으며, 상기 마지막 3 개가 바람직한 에스터이다. 이들을 필요한 성질에 따라 단독으로 또는 함께 사용할 수 있다. 한편으로, 높은 융점의 지질, 예를 들어 백색 연질 파라핀이 사용된다. 눈에 대한 국소 투여에 적합한 제형은 또한 점안제를 포함하며, 여기에서 상기 활성 성분은 적합한 담체, 특히 활성 성분용 수성 용매에 용해되거나 현탁된다. 상기 활성 성분은 상기와 같은 제형 중에 바람직하게는 0.5 내지 20%, 유리하게는 0.5 내지 10%, 특히 약 2.0% w/w의 농도로 존재한다. 구강의 국소 투여에 적합한 제형은 착색된 베이스 중에, 대개는 슈크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트 중에 활성 성분을 포함하는 로젠지; 젤라틴 및 글리세린, 또는 슈크로스 및 아카시아와 같은 불활성 베이스 중에 활성 성분을 포함하는 알약; 및 적합한 액체 담체 중에 활성 성분을 포함하는 구강세정제를 포함한다. 직장 투여용 제형은 예를 들어 코코아 버터 또는 살리실레이트를 포함하는 적합한 베이스를 갖는 좌약으로서 제공될 수 있다. 폐 내 또는 코 투여에 적합한 제형은 0.1 내지 500 마이크론 범위의 입자 크기(마이크론의 증분으로 0.1 내지 500 마이크론의 범위, 예를 들어 0.5, 1, 30 마이크론, 35 마이크론 등의 입자 크기를 포함한다)를 가지며, 폐포에 도달하기 위해서 비강을 통한 급속 흡입에 의해서 또는 구강을 통한 흡입에 의해서 투여된다. 적합한 제형은 활성 성분의 수성 또는 유성 용액을 포함한다. 에어로졸 또는 건조 분말 투여에 적합한 제형을 통상적인 방법에 따라 제조할 수 있으며 다른 치료제, 예를 들어 하기 개시하는 바와 같은 A 또는 B형 인플루엔자 감염의 치료 또는 예방에 앞서 사용된 화합물들과 함께 전달할 수도 있다. 질 투여에 적합한 제형을 활성 성분 이외에 당해 분야에 적합한 것으로 공지된 상기와 같은 담체를 함유하는 페서리, 탐폰, 크림, 젤, 페이스트, 폼 또는 분무 제형으로서 제공할 수도 있다. 비 경구 투여에 적합한 제형은 상기 제형을 의도하는 수용자의 혈액과 등장성으로 만드는 산화방지제, 완충제, 세균발육 저지제 및 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비 수성 멸균 주사 용액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수도 있는 수성 및 비 수성 멸균 현탁액을 포함한다. 상기 제형을 단위 용량 또는 수회 용량 용기, 예를 들어 밀봉된 앰풀 및 바이알 중에서 제공할 수 있으며, 사용 직전에 상기 멸균 액체 담체(용매), 예를 들어 주사용 수의 첨가만을 필요로 하는 동결 건조된 상태로 보관할 수도 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액을 앞서 개시한 종류의 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조한다. 바람직한 단위 투여 제형은 본 발명에서 상기 인용한 바와 같은 활성 성분의 매일 용량 또는 단위 매일 하위 용량, 또는 그의 적합한 분획을 함유하는 것들이다. 상기에 특별히 언급한 성분들 이외에, 본 발명의 제형은 문제의 제형 유형에 관하여 당해 분야에 통상적인 다른 작용제들을 포함할 수 있으며, 예를 들어 경구 투여에 적합한 것들은 풍미제를 포함할 수 있다. 본 발명은 상기 정의한 바와 같은 하나 이상의 활성 성분을 그에 대한 수의학 담체와 함께 포함하는 수의학 조성물을 추가로 제공한다. 수의학 담체는 상기 조성물을 투여하기에 유용한 물질이며 달리 수의학 분야에서 불활성이거나 허용 가능하고 상기 활성 성분과 상용성인 고체, 액체 또는 수성 물질일 수 있다. 이들 수의학 조성물을 경구, 비 경구 또는 임의의 다른 목적하는 경로에 의해 투여할 수 있다. 본 발명의 화합물을 사용하여 활성 성분으로서 본 발명의 하나 이상의 화합물을 함유하는 조절된 방출 약학 제형("조절된 방출 제형")을 제공할 수 있으며, 이때 상기 활성 성분의 방출은 덜 빈번한 투여를 허용하거나 또는 주어진 활성 성분의 약동학 또는 독성 프로파일을 개선하도록 통제되고 조절된다. 활성 화합물의 유효 용량은 최소한 치료되는 병의 성질, 독성, 상기 화합물이 예방학적으로 사용되는지(보다 낮은 용량) 또는 활성 인플루엔자 감염에 대해 사용되는 지의 여부, 전달 방법, 및 약학 제형에 따라 변하며, 통상적인 연구를 사용하여 스칼라 용량으로 임상의에 의해 결정될 것이다. 이는 하루에 약 0.0001 내지 약 100 ㎎/체중 ㎏, 전형적으로는 하루에 약 0.01 내지 약 10 ㎎/체중 ㎏, 보다 전형적으로는 하루에 약 0.01 내지 약 5 ㎎/체중 ㎏, 보다 전형적으로는 하루에 약 0.05 내지 약 0.5 ㎎/체중 ㎏인 것으로 예상될 수 있다. 예를 들어, 흡입의 경우 대략 체중 70 ㎏ 성인 인간에 대한 상기 매일 후보 용량은 1 ㎎ 내지 1000 ㎎, 바람직하게는 5 ㎎ 내지 <500 ㎎의 범위일 것이며, 단일 또는 수회 용량의 형태를 취할 수 있다. 보다 큰 매일 치료 유효 용량을 또한 환자의 병리 상태에 의해 필요한 경우 투여할 수 있다. 본 발명의 활성 화합물을 또한 다른 활성 성분과 함께 사용한다. 상기와 같은 조합은 치료되는 병, 성분들의 교차 반응성 및 상기 조합의 약성을 근거로 선택된다. 예를 들어, 호흡계의 바이러스 감염, 특히 인플루엔자 감염을 치료하는 경우, 본 발명의 조성물을 항바이러스제(예를 들어 아만티딘, 리만타딘 및 리바비린), 점액용해제, 거담제, 기관지확장제, 항생제, 해열제, 또는 진통제와 병용한다. 통상적으로, 항생제, 해열제 및 진통제를 본 발명의 화합물과 함께 투여한다. 본 발명을 당해 분야의 통상적인 숙련가가 하기 실시예의 주제를 만들고 사용할 수 있도록 충분히 상세히 개시하였다. 하기 실시예의 방법 및 조성물의 몇몇 변형들을 본 발명의 범위 및 진의 내에서 수행할 수 있음은 자명하다. 본 발명을 하기 예시적인 실시태양들 및 첨부되는 도 1 내지 5를 참조로 추가로 개시할 것이다: 도 1 - THE 08/01 대 Flu A/H1N1 도 2 - THE 08/01 대 Flu A/H3N2 도 3 - THE 08/01 대 Flu B 도 4 - THE 08/01 대 Flu A/H1N1(H275Y) + Flu A/H1N1 도 5 - 시험 결과 HCV(THE 08/01, THE 10/01, THE 10/09). 실시예 실시예 1 Neu5Ac의 메틸 에스터의 메틸-베타-케토사이드의 제조 350 ㎖의 절대 에탄올 중에 용해된 시알산 4.50 ㎎(14.55 mmol)을 10.0 g의 다우엑스(Dowex) 50(H + ) * 수지와 혼합하고 상기 현탁액을 일정한 교반 하에서 48 시간 동안 환류시켰다. 레소르시놀-HCl 및 티오바비튜르산(TBA)에 의한 분석학적 측정은 24 및 48 시간째에 Neu5Ac의 85% 및 97%가 각각 메틸-베타-케토사이드로 전환됨을 보였다. 이어서 상기 샘플을 흐름 여과지 상에서 여과하고 용출액을 회전 증발기에 의해 농축 건조시켜 유성의 황색을 띤 액체를 제공하고, 이어서 이를 감소된 부피의 에틸 에테르:메탄올(3:1 w/w) 혼합물로 회수하고 상기 용액을 4 ℃에서 24 내지 48 시간 동안 정치시켰다. 결정 물질을 여과에 의해 회수하고 P 2 O 5 상에서 건조시켰다. 수율: 2.90 g(MW 337.4). 생성 화합물은 레소르시놀-HCl 반응에 대해 양성이고(시알산과 동일한 강도로) TBA 반응에 대해 음성이다. ( * ) 상기 다우엑스 50(H + ) * 수지는 실온에서 60 분 동안 1.0M 염산 용액 60 ㎖에 의해 활성화될 것이다. 이어서 상기 수지를 물로 충분히 세척하고 그 후에 사용 전에 메탄올로 세척할 것이다. 실시예 2 온화한 알칼리 가수분해에 의한 Neu5Ac의 메틸-베타-케토사이드의 제조 Neu5Ac의 메틸 에스터의 메틸-베타-케토사이드 2.90 g의 Neu5Ac의 메틸 에스터의 메틸-베타-케토사이드(8.60 mmol)를 2.5 시간 동안 실온에서 배양 하에 0.06M 수산화 나트륨 200 ㎖에 용해시켰다. 이어서 상기 용액을 중화시키고 이를 다우엑스 50(H + ) 수지에 통과시켜 탈이온화한다. 이어서 상기 용출액을 동결건조시켜 백색을 띤 고체를 제공하였다. 수율: 2.64 g(MW 332.4). 상기 수득된 화합물은 레소르시놀-HCl 반응에 대해 양성이고 TBA 반응에 대해 음성을 생성시켰다. 실시예 3 C7-Neu5Ac의 메틸-베타-케토사이드의 제조 Neu5Ac의 메틸-베타-케토사이드 2.90 g(8.20 mmol)에 의해 구성된, 선행 단계에 의해 수득된 동결건조된 분말을 0.2M NaIO 4 (나트륨 메타퍼요오데이트) 214.0 ㎖을 가하면서, 증류수 100 ㎖에 용해시켰다. Neu5Ac:NaIO 4 의 메틸-베타-케토사이드의 몰 비는 1:5.24이었다. 상기 용액을 실온에서 일정하게 교반하면서 암실에서 2 시간 동안 유지시켰다. 0.1M 바륨 아세테이트의 수용액 260.0 ㎖을 상기 혼합물에 가하여 상기 형성된 요오데이트 및 과잉의 퍼요오데이트를 침전시켰다. 상기 혼합물을 흐름 여과지를 사용하여 여과하였다. 상기 용출액을 이산화 탄소 기포 발생에 의해 포화시켜 과잉의 바륨 아세테이트를 침전시키고 이어서 여과지 상에서 여과하였다. 상기 용출액을 동결건조시켜 약간 황색을 띤 고체를 제공하였다. 수율: 1.806 g(MW 260.24). 상기 수득된 화합물은 레소르시놀-HCl 반응에 대해 양성이고 TBA 반응에 대해 음성을 생성시켰다. 실시예 4 C7-Neu5Ac의 제조 상기를 C7-Neu5Ac의 메틸-베타-케토사이드의 온화한 가수분해에 의해 수득한다. 선행 실시예에서 수득한 동결건조된 분말(7.0 mmol에 상응한다)을 약 4.0의 pH에서 2.3 mM 폼산 40 ㎖에 용해시키고 1 시간 동안 80 ℃로 가열하였다. 이어서 상기 용액을 동결 건조시켰다. 수율: 1.674 g(MW 246.21). 상기 수득된 화합물은 레소르시놀-HCl 반응에 대해 양성이고 TBA 반응에 대해 음성이다. 실시예 5 DEAE-세파덱스 A-25에의 C7-Neu5Ac의 흡수 선행 단계에서 수득한 동결 건조된 분말(6.80 mmol에 상응한다)을 메탄올:물(1:1 v/v) 200 ㎖에 용해시킨다. 이어서 20.0 g의 DEAE-세파덱스 A-25를 가하고 상기 샘플을 연속적으로 교반하면서 4 ℃에서 밤새 유지시킨다. 일단 상기 기간이 지나면, 상기 형성된 C7-Neu5Ac-DEAE-세파덱스 A-25의 복합체를 메탄올:증류수(1:1 v/v)로 수 회 세척한다. 이어서 상기 복합체를 증류수 600 ㎖에 용해시킨다. 실시예 6 아만타딘-C7Neu5Ac의 제조 선행 실시예에서 수득한 현탁액 30.0 ㎖(0.34 mmol의 C7-Neu5Ac를 함유한다)에 시알산의 1.5 배 과잉의 아만타딘(0.51 mmol) 및 또한 상기 반응 동안 형성된 이민을 환원시켜 안정한 2차 아민으로 변화시키는데 필요한 100 ㎖의 붕수소화 나트륨을 가한다. 생성 샘플을 밤새 연속적으로 교반하면서 4 ℃에서 배양한다. 이어서 상기 젤을 메탄올:증류수(1:1 v/v)로 몇 번 더 세척한다. 아만타딘-C7-Neu5Ac로 구성된 상기 수득된 유도체를 100 ㎖의 클로로폼:메탄올:35% NH 4 OH의 혼합물(60:35:8, v/v/v)과 함께 DEAE-세파덱스 A-25에 의해 용출시킨다. 상기 젤을 실온에서 1 시간 동안 상기 용매 혼합물과 함께 배양 유지시킨다. 상기 샘플을 원심분리시킨 후에, 고체 잔사를 버리고(DEAE-세파덱스 A-25) 아만타딘-C7-Nu5Ac를 함유하는 상등액을 회전 건조기에 의해 건조시킨다. 이어서 상기 유도체를 증류수 100 ㎖에 용해시키고 동결건조시킨다. 상기 샘플을 동결건조시켜 보관할 수 있다. 실시예 7 하기의 화학식을 갖는 화합물[아만타딘-C7-Neu5Ac-C 16 H 28 N 2 O 4 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(아만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 100.0 ㎖에 용해시킨다. 그 후에 상기 화합물 C 16 H 28 N 2 O 4 . PO 4 H 3 {CAS [204255-11-8] ; MW 410.4}을 상기 복합체의 시알산 함량에 비해 1.5 배(0.51 mmol) 몰 과잉으로 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 2 시간 동안 배양한다. 이어서 NaBH 3 CN (시아노붕수소화 나트륨)을 C 16 H 28 N 2 O 4 : NaBH 3 CN (1 : 0.5 ; W/W)의 비로 가하고 생성 혼합물을 60 ℃에서 밤새 배양한다. 그 후에 10.0 g의 DEAE-세파덱스 A-25를 가하고 상기 혼합물을 밤새 4 ℃에서 연속적으로 교반하면서 배양하고 상기 기간 후에 새로 수득한 화합물 아만타딘-C7-Neu5Ac-C 16 H 27 N 2 O 4 -DEAE-세파덱스 A-25를 메탄올:증류수(1:1, V/V)의 혼합물로 수 회 세척한다. 상기 방식으로 수득되고 아만타딘-C7-Neu5Ac-C 16 H 27 N 2 O 4 로 구성된 유도체를 200.0 ㎖의 클로로폼:메탄올:35% NH 4 OH의 혼합물(60:35:8; V/V/V)로 DEAE-세파덱스 A-25로부터 용출시킨다. 상기 젤을 실온에서 1 시간 동안 상기 용매 혼합물과 함께 배양한다. 그 후에 상기 샘플을 원심분리시키고, 고체 잔사를 버리고(DEAE-세파덱스 A-25) 상등액을 회전 건조기에 의해 건조시켜, 화합물 아만타딘-C7-Neu5Ac-C 16 H 27 N 2 O 4 를 수득한다. 이어서 상기 화합물을 완전히 용해될 때까지 적합한 부피의 증류수 내로 회수하고 이어서 동결건조시킨다. 상기 샘플을 바람직하게는 동결 장치에서 보관한다. 실시예 8 하기의 화학식을 갖는 화합물[아만타딘-C7-Neu5Ac-C 12 H 20 N 4 O 7 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(아만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 10 ㎖에 용해시키고 2.69 g의 C 12 H 20 N 4 O 7 {CAS [139110-80-8] ; MW 332.30}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.37 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH3CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 9 하기의 화학식을 갖는 화합물[아만타딘-C7-Neu5Ac-C 15 H 28 N 4 O 4 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(아만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 10 ㎖에 용해시키고 2.66 g의 C 15 H 28 N 4 O 4 {CAS [229614-55-5] ; MW 328.41}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.37 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH3CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 10 하기의 화학식을 갖는 화합물[아만타딘-C7-Neu5Ac-C 13 H 22 N 4 O 7 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(아만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 10 ㎖에 용해시키고 2.80 g의 C 13 H 22 N 4 O 7 {CAS [203120-17-6] ; MW 472.53}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.43 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH 3 CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 11 리만타딘-C7Neu5Ac의 제조 실시예 5로부터 수득한 샘플 61.08 ㎖에 10 ㎖의 증류수 및 1.75 g의 리만타딘-HCl을 가한다. 상기 샘플을 4 ℃에서 밤새 교반하면서 배양한다. 화학적으로 불안정한 상기 수득한 이민은 나중에 안정한 2차 아민으로 환원되며, 6 개의 샘플 각각에 1.75 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH 4 )을 가하고 상기 샘플을 실온에서 1 시간 동안 배양한다. 상기 모든 샘플들을 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 30 및 50 ㎖의 증류수로 원심분리시킨다. 다시 원심분리하고 상등액을 제거한다. 실시예 12 하기의 화학식을 갖는 화합물[리만타딘-C7-Neu5Ac-C 16 H 28 N 2 O 4 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(리만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 10 ㎖에 용해시키고 3.32 g의 C 16 H 28 N 2 O 4 ?PO 4 H 3 {CAS [204255-11-8] ; MW 410.4}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.7 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH 3 CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 13 하기의 화학식을 갖는 화합물[리만타딘-C7-Neu5Ac-C 12 H 20 N 4 O 7 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(리만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 10 ㎖에 용해시키고 2.69 g의 C 12 H 20 N 4 O 7 {CAS [139110-80-8] ; MW 332.30}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.37 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH3CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 14 하기의 화학식을 갖는 화합물[리만타딘-C7-Neu5Ac-C 15 H 28 N 4 O 4 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 화합물(리만타딘-C7-Neu5Ac)을 증류수 10 ㎖에 용해시키고 2.66 g의 C 15 H 28 N 4 O 4 {CAS [229614-55-5] ; MW 328.41}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.37 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH 3 CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 15 하기의 화학식을 갖는 화합물[리만타딘-C7-Neu5Ac-C 13 H 22 N 4 O 7 ]의 제조 선행 단계로부터 수득한 복합체(리만타딘-C7-Neu5Ac)를 증류수 10 ㎖에 용해시키고 2.80 g의 C 13 H 22 N 4 O 7 {CAS [203120-17-6] ; MW 472.53}을 가한다. 상기 샘플을 60 ℃에서 교반하에 2 시간 동안 배양한다. 1.43 g의 시아노붕수소화 나트륨(NaBH 3 CN)을 가한다. 상기 샘플을 밤새 교반하면서 60 ℃에서 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 30 및 50 ㎖의 증류수로 1 회 이상 세척한다. 다시 원심분리시키고 상등액을 제거한다. 50 ㎖의 용매 혼합물 클로로폼:메탄올:15M NH 4 OH(60:35:8; V/V/V)을 가한다. 상기 샘플을 실온에서 교반하면서 1 시간 동안 배양한다. 원심분리시키고 상등액을 회전 건조기에서 건조시킨다. 상기 건조된 샘플을 최소 부피의 물 중에 넣는다. 상기 샘플을 -20 ℃에서 동결 장치에서 동결건조시키고 보관한다. 실시예 16 HCV에 대한 활성의 평가 화합물 THE 08/01, THE 10/01 및 THE 10/09의 항바이러스 활성의 평가(표 1 참조)는 당해 분야에 공지된 기법에 따라 JFH-1 HCV 상에서 수행하였다. 이에 대한 요약을 본 발명에 동봉한다. 물질 및 방법 1. 단계 I: 재조합 바이러스의 생산 재조합 바이러스를 인간 간종양 Huh7.5의 세포 주에 재조합 RNA를 형질감염시켜 생산하였다. 획득된 바이러스를 동일한 세포 주에서 배양하고, 이어서 후속 단계에 사용하기 전에 병소 형성 단위(FFU)를 카운트하였다. 이를 위해서 세포를 각 웰 당 10,000 세포의 농도로 미세플레이트에 시딩하였다. 18 시간 후에 세포를 일련의 바이러스 현탁액 희석물로 감염시키고 6 시간 동안 배양한 다음 배지를 새로운 배지로 대체하였다. 3일 후에 세포층을 고정하고 항-HCV-코어 항체로 착색하고, 각 희석물 중의 병소 형성 단위를 카운트하였다. 2. 단계 II: 시험관 내 감염(단기)에 대한 활성의 평가 24 웰 플레이트의 플레이트상에 시딩된 Huh7.5 세포의 단층을 0.01의 감염 다중도(MOI)로 JFH-1로 감염시켰다. 37 ℃에서 1.5 시간 동안 배양 후(바이러스가 흡착되게 한다), 상기 세포 단층을 배지로 3 회 세척하였다. 그 후에, 일련의 시험 중인 화합물의 희석물(0.004 ㎍/㎖ 내지 0.5 ㎍/㎖)을 함유하는 배양 배지 MEM(최소 필수 배지)을 가하였다. 상기 시험을 3 회 중복 수행하는 동시에, 블랭크 대조군도 또한 제조하였다. 상기 세포를 2일간 37 ℃, 5% CO 2 중에서 배양하였다. 최종적으로, 상기 바이러스 복제에 대한 억제 효과를 FFU 기법에 의해 측정하였다. 3. 결과 및 결론 상기 시험된 화합물은 JFH-1 HCV에 대해 약한 억제를 나타내었다. 보다 특히, 상기는 THF 10/09에 대해 현저한 결과를 생성시켰다. 결과를 도 5에 요약한다. |
