CXCR4受体拮抗剂 |
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| 申请号 | CN201180049854.3 | 申请日 | 2011-10-13 | 公开(公告)号 | CN103282360B | 公开(公告)日 | 2016-03-30 |
| 申请人 | 普罗克斯马根有限公司; | 发明人 | 贾尔斯·布朗; 迈克尔·希金博特姆; 阿莉森·斯图尔特; 李·帕蒂安; 阿莉森·卡利; 伊恩·辛普森; 爱德华·丹尼尔·萨沃里; 凯瑟琳·奥利弗; 安德鲁·格雷厄姆·科莱; | ||||
| 摘要 | 式(I)的化合物是CXCR4受体的拮抗剂，其中R1、X、Y和R2如 权利要求 中所定义。 | ||||||
| 权利要求 | 1.式(I)的化合物，或其可药用盐： |
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| 说明书全文 | CXCR4受体拮抗剂[0001] 引言 [0002] 本发明涉及作为CXCR4拮抗剂的化合物、包含所述化合物的组合物、用于制备所述化合物的方法，以及所述化合物在医学中的用途，特别是用于治疗应答于CXCR4受体拮抗的病症例如癌症(包括造血系统的癌症，例如多发性骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌和成神经细胞瘤)、癌症转移、HIV/AIDS、神经病、HIV相关神经病、脑炎症(brain inflammation)、糖尿病性视网膜病、年龄相关黄斑变性和视网膜新血管形成(neo-vascularisation)的用途，以及预防、治疗或改善这些病症的方法。本发明还涉及作为CXCR4拮抗剂之化合物在干细胞采集术(apheresis)方法中的用途，其包括例如在收获(harvesting)之前促进干细胞的释放和动员(mobilisation)，所述干细胞包括造血干细胞和非造血干细胞和祖干细胞(progenitor stem cell)。 背景技术[0003] CXCR4是G蛋白偶联受体，其天然内源性配体是细胞因子SDF-1(基质细胞衍生因子-1(stromal derived factor-1))或CXCL12。CXCR4最初作为CD4的辅助受体而被发现，用于嗜T细胞系的(X4)HIV-1进入T细胞。已证实CXCR4操作(manipulation)(与粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组合)改善造血(Broxmeyer等，2005)和内皮祖细胞(Pitchford等，2009)干细胞动员的结果。CXCR4-SDF-1相互作用还是癌症干细胞在人体内运输的主要调节因素(Croker和Allan，2008)，并且在高表达SDF-1的器官中多种类型癌细胞的进展和转移中发挥关键作用(Zlotnik，2008)。鉴于由CXCR4介导的这些重要生物学功能，CXCR4受体的小分子拮抗剂有望作为未来用于干细胞移植和用于治疗疾病(例如糖尿病性视网膜病、癌症、HIV和AIDS)的治疗剂。 [0004] 造血干细胞动员 [0005] 造血干细胞或HSC广泛地用于治疗造血系统的癌症，例如多发性骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)。HSC的动员和收获允许使用细胞毒性药物杀伤骨髓中的肿瘤细胞。然后，可将之前收获的干细胞重新引入造血系统。 [0006] 通常，干细胞和祖细胞通过由这些细胞表达的CXCR4上局部产生的SDF-1的作用而被吸引到骨髓并且保留在骨髓中(参见，例如Lapidot等，2005)。在用G-CSF处理4或5天之后，可以从供体(同种异体移植)或患者(自体移植)动员用于移植的干细胞。G-CSF用于约70％的造血干细胞移植(其余的是骨髓和脐带移植，Copelan，2006)中，并通过降低干细胞中CXCR4的表达和降低骨髓SDF-1水平而发挥作用(Levesque等，2003)。这些治疗的成功基于成功地再植活(re-engraftment)所分离的干细胞。如果所分离的干细胞不充6 足(＜5×l0/kg)，则再植活不太可能成功，并且将无法治疗患者。用G-CSF处理数天可能仅在约50％的情况下导致充分的产量。目前，使用CXCR4拮抗剂Mozobil来提高动员的效率，导致约90％的成功率。我们预测，CXCR4拮抗剂的单独施用(动员延迟仅为几小时)将产生用于有效移植的充足干细胞(Devine等，2008)。我们预期这些干细胞会表现出升高的再植活效率，因为它们不会使该受体的表达因G-CSF处理而降低。 [0007] 非造血干细胞和祖细胞动员 [0008] 血浆SDF-1的升高已见于多种模型中，包括心肌梗死(Kucia等，2004；Wojakowski等，2004)、卒中(Kucia等，2006)、肝损伤(Hatch等，2002)、肾损伤(Togel等，2005)、胰损伤(Hess等，2003)、骨折(Sata等，2005)和肺损伤(Gomperts等，2006)。推测SDF-1的升高是由组织损伤引起的，并且该细胞因子的梯度起到将相关干细胞吸引到损伤部位的作用。这表明了干细胞疗法在广泛范围的损伤中的实际应用，它们全部通过CXCR4/SDF-1途径调节。有趣的是，Pitchford等(2009)表明不同生长因子(VEGF、GCSF)与CXCR4拮抗剂一起施用导致不同干细胞群体的动员，表明可以使用合适的因子组合来分离干细胞用于修复特定的组织。 [0009] HIV和HIV相关疼痛 [0010] CCR5与HIV之间的关系是已知的(Alkhatib等，1996)。CXCR4和CCR5受体充当HIV感染的进入辅因子。简言之，在病毒插入质膜之前，HIV gp120蛋白与CD4+淋巴细胞或巨噬细胞表面上之CD4的结合暴露出gp120蛋白中的结构域，该结构域随后还与CCR5或CXCR4受体结合。CXCR4拮抗剂已表现出降低病毒之X4毒株的感染性(Fransen等，2008)，因而表明使用CXR4拮抗剂可有效地治疗HIV感染，特别是在与CCR5拮抗剂(例如Maraviroc)组合的情况下。HIV的X4毒株最具致病性，并且这些毒株倾向于在感染的晚期阶段占优势，此时对于患者而言神经性疼痛变为日益严重的问题。疼痛性周围神经病影响约50％的HIV患者。HIV gp120蛋白与神经元细胞和神经胶质细胞上表达的CXCR4和/或CCR5结合(Pardo等，2001；Oh等，2001)，引起周围轴突损伤(peripheral axonal damage)(Melli等，2006)，并启动细胞因子驱动的神经毒性级联(包括神经胶质细胞和免疫细胞)(Herzberg和Sagen，2001；Milligan等，2000，2001)。高效抗逆转录病毒治疗(highly active anti-retroviral therapy，HAART)还可引起疼痛性神经病(Dalakas等，2001)，但预测其变得不常用，因为使用了改进的治疗。 [0011] 因此，我们期望CXCR4拮抗剂表现出抗病毒、认知增强和缓解神经性疼痛的特性，并且可以与其他抗逆转录病毒治疗以及镇痛剂(例如，阿米替林、度洛西汀和阿片类)一起施用。 [0012] 疼痛和炎症 [0013] 因为白细胞和单核细胞穿透血脑屏障也受CXCR4受体影响，所以我们期望脑炎症和神经变性的形式(Bachis等，J.Neuroscience，2006，26，6771)(无论是不是病毒诱导的)适合通过CXCR4拮抗剂来治疗(Kohler等，2008；McAndless等，2008)。类似地，初级感觉神经元上表达CXCR4表明该受体的拮抗剂可以在疼痛的控制中充当镇痛剂(Oh等，J Neurosci.200121，5027-35)。另外，SDF-1对炎性细胞的强效趋化作用(Gouwy等，Eur J Immunol.201141，963-73)表明CXCR4拮抗剂可以作为抗炎治疗剂。 [0014] 视网膜新血管形成 [0015] 视网膜新血管形成是患有糖尿病和年龄相关黄斑变性之患者失明的主要原因。SDF-1/CXCR4轴显著地参与眼的新血管形成，并且已提出将该轴作为治疗糖尿病性视网膜病的靶标。对CXCR4受体的阻断阻止了内皮祖细胞的募集，而内皮祖细胞的募集是新微血管形成(其为糖尿病性视网膜病之病理学的一部分)所必需的(Lima e Silva等，2009)。 我们期望CXCR4拮抗剂的作用与VEGF抗体(例如阿瓦斯丁(avastin))的作用相加合。因此，我们期望CXCR4拮抗剂的局部或玻璃体内施用是伴有糖尿病和衰老之视网膜变性的有效治疗。 [0016] 癌症和癌症转移 [0017] 若干类型的癌症(包括非小细胞肺癌、乳腺癌和成神经细胞瘤)表达CXCR4，并且SDF-1在表现为相应癌细胞之主要转移目的地的内脏器官中高表达(综述请参见Ben Baruch，2008)。CXCR4和SDF-1还参与癌症干细胞的维持(Wang等，2006；Croker和Allan，2008)和放射治疗后肿瘤的复发。在Gelmini S等，2008中讨论了SDF-1/CXCR4轴在癌症和癌症干细胞转移中的作用。CXCR4的阻断防止了放射治疗后的血管生成(vasculogenesis)和多形性成胶质细胞瘤的复发(Kioi等，2010)。该抑制肿瘤衍生之血管发生的能力使得我们期望当用其他抗血管发生剂给药时，CXCR4拮抗剂将是有效的，所述其他抗血管发生剂包括抑制VEGF的那些(例如阿瓦斯丁和阿柏西普(aflibercept))，以及VEGF和PDGF受体的抑制剂，例如西地尼布(cediranib)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、帕唑帕尼(pazopanib)、替沃扎尼(tivozanib)伐他拉尼(vatalanib)、凡德他尼 (vandertanib)、布立尼布(brivanib)、多韦替尼(dovitinib)、莫特塞尼(motesanib)、替拉替尼(telatinib)和阿西替尼(axitinib)(Bhargava和Robinson Curr Oncol Rep(2011)13：103-111)。用于与CXCR4拮抗剂联合的其他抗血管发生剂包括抑制EGF、血管生成素(angiopioetin)、MMP-9、TNF、bFGF、CXCL8、HGF和TF的那些(Nozawa等，Proc Natl Acad Sci U S A.103，12493-12498，2006；Murdoch等，Nature Reviews Cancer8，618-631 2008)。因此，我们期望CXCR4拮抗剂可用于预防转移、抗血管发生治疗、以及癌症干细胞的保护和维持、以及使肿瘤对放射治疗敏化。 [0018] 发明概述 [0019] 本发明提供作为CXCR4受体拮抗剂的一类化合物，及其在应答于CXCR4受体之拮抗作用的适应症(例如上述的那些)中的用途。 [0020] 发明详述 [0021] 根据本发明，提供了式(I)化合物或其可药用盐： [0022] [0023] 其中： [0024] R1选自：氢、C1-4-烷基、氰基、-COR3、-CONR3R4和杂芳基，其中 [0025] (a)所述杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、羟基、氰基、硝基、C1-6-烷基、C3-5-环烷基、C1-4-烷氧基、氟-C1-6-烷基、氟-C1-4-烷氧基、C1-4-烷氧基-C1-4-烷基、氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基、C6-10-芳基、杂芳 5A 5B 5A 5B 4 4 4 基、-NR R 、-C1-4-烷 基 -NR R 、-NRC(O)O-C1-4-烷 基、-NRC(O)-C1-4-烷 基、-NRC(O) 4 4 5A 5B 5A 5B 4 O-氟-C1-4-烷基、-NRC(O)-氟-C1-4-烷基、-NRC(O)NR R 、-C(O)NR R 、-C(O)R、-C(O) 4 4 4 OR、-NRS(O)2-C1-4-烷基和-NRS(O)2-氟-C1-4-烷基，并且 [0026] (b)所述C1-4-烷基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基； [0027] X选自包括式(A)至(F)的基团，其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、氰基、硝基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、氟-C1-4-烷基和氟-C1-4-烷氧1 基，其中标记有＊的键与R相连接，标记有＊＊的键与Y相连接： [0028] [0029] Y选自式(H)、(J)、(K)、(L)和(M)的基团，其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基、在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价C1-4-亚烷基基团、C1-4-烷氧基、氟-C1-4-烷基、在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价氟-C1-4-亚烷基基团和氟-C1-4-烷氧基，其中标记有＊的键与X相连接，标记有＊2 ＊的键与R相连接： [0030] [0031] 并且n和m各自独立地是1或2，R20是氢或C1-4-烷基； [0032] R2选自包括式(N)至(S)的基团，其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、氟-C1-4-烷基和氟-C1-4-烷氧基，其中标记有＊的键与Y相连接： [0033] [0034] 并且o和p各自独立地是1或2，W是O或NR9； [0035] R3选自：氢、C1-6-烷基、C3-5-环烷基、C3-5-环烷基-C1-4-烷基、杂环基、杂环基-C1-4-烷基、C6-10-芳基、杂芳基、C6-10-芳基-C1-4-烷基和杂芳基-C1-4-烷基，其中[0036] (i)所述C1-6-烷基、C3-5-环烷基、杂环基或所述杂环基-C1-4-烷基的杂环基部分、或所述杂环基-C1-4-烷基、C6-10-芳基-C1-4-烷基或杂芳基-C1-4-烷基的C1-6-烷基部分任选5A 5B 地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷氧基和-NR R ，并且[0037] (ii)所述C6-10-芳基或杂芳基，或所述C6-10-芳基-C1-4-烷基的C6-10-芳基部分或所述杂芳基-C1-4-烷基的杂芳基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、羟基、氰基、硝基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、氟-C1-4-烷基、氟-C1-4-烷氧基、C1-4-烷 5A 5B 5A 5B 4 氧基-C1-4-烷基、氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基、-NR R 、-C1-4-烷基-NR R 、-NRC(O)O-C1-4-烷 4 4 4 4 基、-NRC(O)-C1-4-烷基、-NRC(O)O-氟-C1-4烷基、-NR C(O)-氟-C1-4-烷基、-NRC(O) 5A 5B 5A 5B 4 4 4 4 NR R 、-C(O)NR R 、-C(O)R、-C(O)OR、-NRS(O)2-C1-4-烷基和-NRS(O)2-氟-C1-4-烷基； [0038] R4、R5A和R5B各自独立地选自氢、C1-4-烷基和氟-C1-4-烷基， [0039] 或者 [0040] R5A和R5B与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环或杂芳基环，所述环任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基、氟-C1-4-烷基和C1-4-烷氧基， [0041] 或者 [0042] R3和R4与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环或杂芳基环，所述环任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基、氟-C1-4-烷基和C1-4-烷氧基；并且 [0043] R6选自：C1-6-烷基、C3-5-环烷基、C3-5-环烷基-C1-4-烷基、杂环基、杂环基-C1-4-烷基、C6-10-芳基-C1-4-烷基和C6-10-芳基，其中 [0044] (iii)所述C1-6-烷基、C3-5-环烷基、杂环基或所述杂环基-C1-4-烷基或C6-10-芳基-C1-4-烷基的C1-6-烷基部分、或所述杂环基-C1-4-烷基的杂环基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基，并且 [0045] (iv)所述C6-10-芳基或所述C6-10-芳基-C1-4-烷基的C6-10-芳基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、羟基、氰基、硝基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、氟-C1-4-烷基、氟-C1-4-烷氧基、C1-4-烷氧基-C1-4-烷基和氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基； [0046] R7选自：C1-6-烷基、C3-5-环烷基、C3-5-环烷基-C1-4-烷基、杂环基、杂环基-C1-4-烷基、C6-10-芳基-C1-4-烷基和C6-10-芳基以及 [0047] -NR10AR10B，其中 [0048] (v)所述C1-6-烷基、C3-5-环烷基、杂环基或所述杂环基-C1-4-烷基或C6-10-芳基-C1-4-烷基的C1-6-烷基部分、或所述杂环基-C1-4-烷基的杂环基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基，并且 [0049] (vi)所述C6-10-芳基或所述C6-10-芳基-C1-4-烷基的C6-10-芳基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、羟基、氰基、硝基、C1-4-烷基、C1-4-烷氧基、氟-C1-4-烷基、氟-C1-4-烷氧基、C1-4-烷氧基-C1-4-烷基和氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基； [0050] R8A、R8B和R9各自独立地选自：氢、C3-5-环烷基、C1-6-烷基和C6-10-芳基-C1-4-烷基，其中任意烷基残基或环烷基或C6-10-芳基环系统任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、羟基和C1-4-烷氧基， [0051] 或者 [0052] R8A和R8B与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环，所述环任选地与C6-10-芳基或杂芳基环系统稠合，所述4至7元饱和杂环基环或C6-10-芳基或杂芳基环系统任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素、羟基、C1-4-烷基、氟-C1-4-烷基和C1-4-烷氧基； [0053] 以及 [0054] R10A和R10B各自独立地选自氢和C1-6-烷基，其中所述C1-6-烷基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基， [0055] 或者 [0056] R10A和R10B与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环或杂芳基环，所述环任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基、氟-C1-4-烷基和C1-4-烷氧基；前提是 [0057] 当Y是式(H)的哌嗪时，其中n＝1，则R2不是哌啶，其中p＝1且o＝2；并且[0058] 当Y是式(H)的哌嗪时，其中n＝1，则R2不是式(S)的烷基氨基。 [0059] 上式(I)的化合物可以制备为其盐(特别是可药用盐)、N-氧化物、水合物、溶剂合物和多晶型形式。本文中任何要求的化合物或在本文中提及“本发明的化合物”、“本发明所涉及的化合物”、“式(I)的化合物”等，均包括此类化合物的盐、N-氧化物、水合物、溶剂合物和多晶型； [0060] 虽然上述定义潜在地包括高分子量的分子，但是根据药物化学实践的一般原则，优选本发明所涉及化合物应当具有不大于600的分子量。 [0061] 本发明的化合物是CXCR4受体的拮抗剂。因此，在另一宽泛的方面，本发明提供了本发明的化合物在治疗应答于CXCR4介导之活性降低的疾病或病症，或者在制备用于治疗所述疾病或病症的组合物中的用途。 [0062] 应答于CXCR4介导之活性降低的疾病或病症的实例包括：癌症(包括造血系统的癌症(例如多发性骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤)、非小细胞肺、乳腺和成神经细胞瘤)、癌症转移、HIV/AIDS、神经病、HIV相关神经病、疼痛、炎症、脑炎症、神经变性、认知退化(cognative degeneration)、糖尿病性视网膜病、年龄相关黄斑变性、视网膜新血管形成、以及病毒感染。 [0063] 本发明所涉及的化合物可用于离体或在体内降低CXCR4介导的活性。 [0064] 在本发明的一个方面中，本发明的化合物可用于制备用于治疗以下的组合物：癌症(包括造血系统的癌症例如多发性骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、乳腺癌和成神经细胞瘤)、癌症转移、HIV/AIDS、神经病、HIV相关神经病、疼痛、炎症、脑炎症、神经变性、认知退化、糖尿病性视网膜病、年龄相关黄斑变性、视网膜新血管形成、以及病毒感染。 [0065] 在另一方面中，本发明提供了用于治疗前述疾病类型的方法，其包括向患有所述疾病的对象施用有效量的本发明的化合物。 [0066] 在另一方面中，本发明的化合物可用于干细胞采集术，包括造血干细胞动员和非造血干细胞和祖细胞动员。采集术在其最宽泛的含义上是其中血液被抽取并分离为其组分(例如通过透析)的过程；一些组分被保留，其余的用于进一步的医疗过程，例如通过输注返回到供体或其他对象。因此，可以应用采集术来例如从血浆收获干细胞用于干细胞移植中的后续应用。干细胞采集术之治疗应用的另一实例是减轻否则是化疗和放疗之结果的白细胞减少。干细胞在化疗或放疗过程中受到损伤，而干细胞采集术可用于在这些治疗之前从机体收获干细胞，然后放疗或化疗一完成，就使未损伤的细胞返回到机体中。 [0067] 在另一方面中，可以在通过化疗或放疗治疗对象之前实施采集术，以减轻化疗或放疗诱导的白细胞减少。 [0068] 在另一方面中，本发明的化合物可以作为化疗或放疗的辅助来施用，以使肿瘤对化疗或放疗敏化。 [0069] 在另一方面中，本发明的化合物可用于抑制新血管形成、血管发生或血管生成。 [0070] 在本发明的另一方面中，提供了包含本发明化合物和一种或更多种可药用载体和/或赋形剂的药物组合物。 [0071] 在另一方面中，提供了包含本发明化合物和一种或更多种抗血管发生剂的药物组合物。在一个实施方案中，所述抗血管发生剂是VEGF受体的抑制剂。在另一实施方案中，所述抗血管发生剂是PDGF受体的抑制剂。在另一实施方案中，所述抗血管发生剂选自：西地尼布、舒尼替尼、索拉非尼、帕唑帕尼、替沃扎尼伐他拉尼、凡德他尼、布立尼布、多韦替尼、莫特塞尼、替拉替尼和阿西替尼。 [0072] 本发明的化合物可以以多种剂型施用。因此，它们可以经口施用，例如作为片剂、胶囊、含片(troche)、锭剂(lozenge)、水性或油性混悬剂、可分散粉末或颗粒。所述化合物可以以舌下制剂(例如口腔制剂)施用。本发明的化合物还可以肠胃外施用，不论皮下、静脉内、肌内、胸骨内(intrasternally)、经皮、通过吸入、鼻内、或者通过输注技术。所述化合物还可作为栓剂施用。因此，经口、或通过吸入、或鼻内施用本发明的化合物，但优选经口施用本发明的化合物，更优选作为片剂或胶囊施用本发明的化合物。在后一情况中，经常优选以硬明胶胶囊的形式或者以在本领域中已知的多种持续释放制剂之一来施用所述化合物。 [0073] 本发明的化合物通常配制成与可药用载体或稀释剂一起施用。例如，除了活性化合物之外，固体经口形式还可包含稀释剂，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂，例如二氧化硅(silica)、滑石粉(talc)、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙、和/或聚乙二醇；黏合剂，例如淀粉、阿拉伯树胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，例如淀粉、藻酸、藻酸盐或羟乙酸淀粉钠；泡腾混合物；染料；甜味剂；润湿剂，例如卵磷脂、聚山梨醇酯、硫酸月桂酯；以及一般而言，用于药物制剂中的无毒且在药理学上无活性的物质。这样的药物制剂可以以已知的方式来制备，例如通过混合、制粒、制片、包糖衣或包薄膜衣的工艺。 [0074] 用于经口施用的液体分散体可以是糖浆剂、乳剂和混悬剂。糖浆可包含例如蔗糖或具有甘油和/或甘露醇和/或山梨醇的蔗糖作为载体。混悬剂和乳剂可包含例如天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇作为载体。除了活性化合物之外，用于肌内注射的混悬剂或溶液剂还可包含可药用载体，例如无菌水、橄榄油、油酸乙酯、二醇类(例如丙二醇)，以及(如果需要的话)合适量的盐酸利多卡因。 [0075] 因为本发明的化合物优选经口施用，所以本发明还提供了胶囊或片剂形式的包含如上所定义的本发明化合物或其可药用盐和可药用载体的药物组合物。 [0076] 用于注射或输注的溶液剂可包含例如无菌水作为载体，或者优选地它们可以是无菌水性等渗盐水溶液的形式。 [0077] 应理解，对于任意特定患者的具体剂量水平将取决于多种因素，包括所使用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、施用途径、排泄速率、药物联合和正进行治疗之具体疾病的严重程度。如本领域所要求的，给药的最佳剂量水平和频率将通过临床试验来确定。但是，预期典型的剂量将在约0.001至50mg/kg体重的范围内。 [0078] 术语 [0080] 当存在于本发明化合物中的元素以不同同位素存在时，所述同位素例如碳(C13和14 14 15 1 2 C )、氮(N 和N )和氢(H和H (即氘))，这样的化合物构成本发明的一部分，无论存在于化合物中元素的同位素形式如何。具体地，当本发明的化合物在任意位置具有氢原子时，该氢原子可被氘取代。本领域中已知氘取代可以提高生物活性分子的代谢稳定性。 [0081] 术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘取代基。在目前优选的一个实施方案中，卤素是氟或氯。 [0082] 术语“Ca-b-烷基”表示具有a至b个碳原子的直链或支链烷基，其中a和b是整数。例如，“C1-4-烷基”包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基，“C1-6-烷基”包括前述那些及直链和支链戊基和己基。 [0083] 术语“氟-Ca-b-烷基”表示被一个或更多个氟原子取代的直链或支链Ca-b-烷基，其中a和b是整数。例如，氟-C1-4-烷基包括氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基。 [0084] 术语“Ca-b-烷氧基”指通过氧原子与分子其余部分相连的直链或支链Ca-b-烷基，其中a和b是整数。例如，C1-4-烷氧基包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。 [0085] 术语“氟-Ca-b-烷氧基”表示通过氧原子与分子其余部分相连的氟-Ca-b-烷基，其中a和b是整数。例如，“氟-C1-4-烷氧基”基团包括三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基。 [0086] 术语“Ca-b-烷氧基-Cc-d-烷基”表示与具有c至d个碳原子的直链或支链烷基相连的具有a至b个碳原子的直链或支链烷氧基，其中a、b、c和d是整数。例如，“C1-4-烷氧基-C1-4-烷基”包括甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、异丙氧基乙基、正丁氧基乙基和叔丁氧基乙基。在一个替选实例中，“C1-2-烷氧基-C1-4-烷基”包括甲氧基甲基、甲氧基乙基和乙氧基乙基。 [0087] 术语“氟-Ca-b-烷氧基-Cc-d-烷基”表示被一个或更多个氟原子取代的Ca-b-烷氧基-Cc-d-烷基，其中a、b、c和d是整数。例如，“氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基”包括三氟甲氧基甲基和三氟甲氧基乙基。 [0088] 术语“Ca-b-环烷基”表示具有a至b个碳原子的饱和单环烃环，其中a和b是整数。例如，“C3-5-环烷基”包括环丙基、环丁基和环戊基。术语“C3-5-环烷基”还包括与C6-10-芳基(如苯基)稠合的环丙基、环丁基或环戊基环系统。 [0089] 术语“Ca-b-环烷基-Cc-d-烷基”表示与具有c至d个碳原子的直链或支链烷基相连的具有a至b个碳原子的饱和单环烃环，其中a、b、c和d是整数。例如，“C3-5-环烷基-C1-4-烷基”包括环丙基甲基和环丁基甲基。 [0090] 除非另有指明，否则术语“杂环基”或“杂环”表示具有4至7个环原子的饱和单环，其具有至少一个杂原子如O、N或S，其余的环原子是碳。杂环的实例包括哌啶基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丁基(oxetanyl)、氮杂环丁基(azetidiyny)、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二 烷基(dioxanyl)、哌嗪基和高哌嗪基(homopiperazinyl)。当存在时，则所述硫原子可以是氧化形式(即，S＝O或O＝S＝O)。示例性的包含氧化形式硫的杂环基是1，1-二氧化-硫代吗啉基和1，1-二氧化-异噻唑烷基。术语“杂环基”或“杂环”还包括其中“杂环基”或“杂环”与C6-10-芳环系统(如苯基)稠合的环系统。 [0091] 除非另有指明，否则术语“杂环基-Ca-b-烷基”表示通过所述环的碳或氮原子与直链或支链Ca-b-烷基直接相连的如上所定义的杂环，其中a和b是整数。例如，“杂环基-C1-4-烷基”基团包括哌啶-1-基甲基、哌啶-4-基甲基和吗啉-4-基甲基。 [0092] 除非另有指明，否则术语“杂芳基”表示包含5至10个环原子的单环或稠合二环杂芳基环系统，其中，环原子中的一个或更多个不是碳，例如为氮、硫或氧。只有一个环需要是芳香性的并且所述杂芳基部分可以通过任何环中的碳或氮原子与分子的其余部分相连接。杂芳基的实例包括呋喃基、吡咯基、噻吩基、 唑基、异 唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、四唑基、喹唑啉基、吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异二氢吲哚基、吡唑基、哒嗪基、吡嗪基、喹啉基、喹喔啉基、 二唑基、噻二唑基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、1，3-苯并间二氧杂环戊烯基(1，3-benzodioxolyl)、1，4-苯并二氧杂环庚烯基(1，4-benzodioxinyl)、苯并噻唑基、苯并咪唑基、氮杂苯并咪唑基、苯并三唑基和苯并二氢吡喃基(chromanyl)。 [0093] 除非另有指明，否则术语“Ca-b-芳基”表示包含a至b个环原子的单环或稠合双环烃环系统，其中至少一个环是芳环，其中a和b是整数。例如，“C6-10-芳基”基团包括：苯基、茚基、2，3-二氢茚基(茚满基)、1-萘基、2-萘基或1，2，3，4-四氢萘基。 [0094] 除非另有指明，否则术语“Ca-b-芳基-Cc-d-烷基”指与直链或支链Cc-d-烷基直接相连的Ca-b-芳基，其中a、b、c和d是整数。例如，“C6-10-芳基-C1-4-烷基”基团包括苯基甲基(即，苄基)和苯基乙基。 [0095] 除非另有指明，否则术语“杂芳基-Ca-b-烷基”表示通过所述环的碳或氮原子与直链或支链Ca-b-烷基直接相连的如上所定义的杂芳基环，其中a和b是整数。例如，“杂芳基-C1-4-烷基”基团包括2-(吡啶-2-基)-乙基和1，2，4- 二唑-5-基甲基。 [0096] 本发明的化合物可以以一种或更多种几何异构体、光学异构体、对映体、非对映体和互变异构体的形式存在，包括但不限于顺式(cis)和反式(trans)形式，E和Z形式，R、S和内消旋形式，酮和烯醇形式。除非另有指明，否则提及特定化合物时包括所有这些异构体形式，包括其外消旋混合物和其他混合物。适当时，可以通过应用或改良已知方法(例如，色谱技术和重结晶技术)来从其混合物中分离这样的异构体。适当时，可以通过应用改良的已知方法(例如不对称合成)来制备这样的异构体。 [0097] 如本文所使用的，术语“盐”包括碱加成盐、酸加成盐和铵盐。如在上文中简要提到的，酸性的本发明化合物可以与碱形成盐，包括可药用盐，所述碱例如碱金属氢氧化物，例如，氢氧化钠和氢氧化钾；碱土金属氢氧化物，例如，氢氧化钙、氢氧化钡和氢氧化镁；有机碱，例如，N-甲基-D-葡糖胺、胆碱三(羟甲基)氨基-甲烷、L-精氨酸、L-赖氨酸、N-乙基哌啶、二苄胺等。碱性的本发明化合物可以与无机酸(例如，氢卤酸如盐酸或氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸等)和有机酸(例如，乙酸、三氟乙酸、酒石酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、苹果酸、水杨酸、柠檬酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、苯甲酸、苯磺酸、谷氨酸、乳酸、和扁桃酸等)形成盐，包括可药用盐。具有碱性氮的那些化合物(I)还可与可药与反离子(counter-ion)形成季铵盐，所述可药用反离子例如氯离子、溴离子、醋酸根离子、甲酸根离子、对甲苯磺酸根离子、琥珀酸根离子、半琥珀酸根离子、萘双磺酸根离子、甲磺酸根离子、三氟醋酸根离子、昔奈酸根离子(xinafoate)等。对于盐的综述，参见Stahl和Wermuth的Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties，Selection，and Use(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。 [0098] 预期本发明的化合物可以制备为水合物和溶剂合物的形式。在本文中提及(包括本文的权利要求书)“本发明所涉及的化合物”或“本发明的化合物”或“本发明化合物”等时，包括提及所述化合物的盐、水合物和溶剂合物。术语“溶剂合物”在本文中用于描述包含以下的分子复合物：本发明的化合物和化学计算量的一种或更多种可药用溶剂分子(例如，乙醇)。当所述溶剂是水时，使用术语“水合物”。 [0099] 本发明的单个化合物可以以无定形形式和/或若干多晶型形式存在，并且可以以不同的晶体习性(crystal habit)而获得。在本文中(包括本文的权利要求书中)提到“本发明所涉及的化合物”或“本发明的化合物”或“本发明化合物”等时，包括提及无论是无定形形式还是多晶型形式的所述化合物。 [0100] 一些本发明的化合物(在芳环中有氮原子)可形成N-氧化物，并且本发明包括其N-氧化物形式的本发明化合物。 [0101] 在本发明的化合物中，在任何可相容的组合中，并且要考虑到所述化合物优选地具有小于600的分子量： [0102] 基团R1 [0103] 如上所定义，R1选自氢、C1-4-烷基如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基3 3 4 或叔丁基、氰基、-COR、-CONRR和杂芳基如呋喃基、吡咯基、噻吩基、 唑基、异 唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、四唑基、喹唑啉基、吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异二氢吲哚基、吡唑基、哒嗪基、吡嗪基、喹啉基、喹喔啉基、 二唑基、噻二唑基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、1，3-苯并间二氧杂环戊烯基、1，4-苯并二氧杂环庚烯基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基和苯并二氢吡喃基，其中 [0104] (a)所述杂芳基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如氟、氯、溴；羟基；氰基；硝基；C1-6-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基，以及直链或支链的戊基或己基；C3-5-环烷基，例如环丙基、环丁基和环戊基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；氟-C1-6-烷基，例如单氟甲基、二氟甲基或三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；氟-C1-4-烷氧基，例如三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基；C1-4-烷氧基-C1-4-烷基例如甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、异丙氧基乙基、正丁氧基乙基和叔丁氧基乙基；氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基，例如三氟甲氧基甲基和三氟甲氧基乙基；C6-10-芳基，例如苯基、茚基、2，3-二氢茚基(茚满基)、1-萘基、2-萘基或1，2，3，4-四氢萘基；杂芳基例如呋喃基、吡咯基、噻吩基、 唑基、异 唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、四唑基、喹唑啉基、吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异二氢吲哚基、吡唑基、哒嗪基、吡嗪基、喹啉基、喹喔啉基、 二唑基、噻二唑基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、1，3-苯并间二氧杂环戊烯基、1，4-苯并二氧杂环庚烯基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基和苯并二氢 5A 5B 5A 5B 4 4 4 吡喃基、-NR R 、C1-4-烷基、NR R 、-NRC(O)O-C1-4-烷基、-NRC(O)-C1-4-烷基、-NRC(O) 4 4 5A 5B 5A 5B 4 O-氟-C1-4-烷基、-NRC(O)-氟-C1-4-烷基、-NRC(O)NR R 、-C(O)NR R 、-C(O)R、-C(O) 4 4 4 OR、-NRS(O)2-C1-4-烷基和-NRS(O)2-氟-C1-4-烷基，并且 [0105] (b)所述C1-4-烷基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基； [0106] 基团X [0107] 如上所定义，X选自包括式(A)、(B)、(C)、(D)、(E)或(F)的基团，其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如氟、氯、溴；氰基；硝基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；氟-C1-4-烷氧基，例如三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基， [0108] 基团Y [0109] 如上所定义，Y选自：式(H)的基团，例如哌嗪和高哌嗪；式(J)的基团，例如氨基-哌啶和氨基-高哌啶；式(K)的基团，例如氨基-哌啶和氨基-高哌啶；式(L)的基团，例如1，2-二氨基乙烷和1，3-二氨基丙烷；以及式(M)的基团，例如氧基-哌啶；其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价C1-4-亚烷基，例如包括-CH2-、-CH2CH2-和-CH2CH2CH2-；C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价氟-C1-4-亚烷基，实例包括-CH2-、-CH2CH2-和-CH2CH2CH2-，其中一个或更多个氢被氟取代；并且氟-C1-4-烷氧基，例如三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基。 [0110] 基团R2 [0111] 如上所定义，R2选自包括式(N)、(O)、(P)、(Q)、(R)和(S)的基团，其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；以及氟-C1-4-烷氧基，例如三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基， [0112] 基团R3 [0113] 如上所定义，R3选自氢；C1-6-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基、直链或支链的戊基和己基；C3-5-环烷基，例如环丙基、环丁基和环戊基；C3-5-环烷基-C1-4-烷基，例如环丙基甲基和环丁基甲基；杂环基，例如哌啶基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、吡咯烷基、吗啉基、咪唑烷基、硫代吗啉基、二 烷基、哌嗪基、高哌嗪基1，1-二氧化-硫代吗啉基和1，1-二氧化-异噻唑烷基；杂环基-C1-4-烷基，例如哌啶-1-基甲基、哌啶-4-基甲基和吗啉-4-基甲基；C6-10-芳基，例如苯基、茚基、2，3-二氢茚基(茚满基)、1-萘基、2-萘基或1，2，3，4-四氢萘基；C6-10-芳基-C1-4-烷基，例如苯基甲基(即，苄基)和苯基乙基；杂芳基，例如呋喃基、吡咯基、噻吩基、 唑基、异 唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、吡啶基、嘧啶基、四唑基、喹唑啉基、吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、异二氢吲哚基、吡唑基、哒嗪基、吡嗪基、喹啉基、喹喔啉基、 二唑基、噻二唑基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、1，3-苯并间二氧杂环戊烯基、1，4-苯并二氧杂环庚烯基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基和苯并二氢吡喃基，以及杂芳基-C1-4-烷基，例如2-(吡啶-2-基)-乙基和1，2，4- 二唑-5-基甲基，其中 [0114] (i)所述C1-6-烷基、C3-5-环烷基、杂环基或所述杂环基-C1-4-烷基的杂环基部分、或所述杂环基-C1-4-烷基、C6-10-芳基-C1-4-烷基或杂芳基-C1-4-烷基的C1-6-烷基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷氧基例如甲氧基、乙5A 5B 氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基、以及-NR R ，以及[0115] (ii)所述C6-10-芳基或杂芳基、或所述C6-10-芳基-C1-4-烷基的C6-10-芳基部分或所述杂芳基-C1-4-烷基的杂芳基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如氟、氯或溴；羟基；氰基；硝基；C1-4-烷基-，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、 2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；氟-C1-4-烷氧基，例如三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基； C1-4-烷氧基-C1-4-烷基，例如甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、异丙氧基乙基、正丁氧基乙基和叔丁氧基乙基；氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基，例如三氟甲氧基甲基和三氟甲氧 5A 5B 5A 5B 4 4 4 基乙基、-NR R 、-C1-4-烷基-NR R 、-NRC(O)O-C1-4-烷基、-NRC(O)-C1-4-烷基、-NRC(O) 4 4 5A 5B 5A 5B 4 O-氟-C1-4烷基、-NR C(O)-氟-C1-4烷基、-NR C(O)NR R 、-C(O)NR R 、-C(O)R、-C(O) 4 4 4 OR、-NRS(O)2-C1-4烷基和-NR S(O)2-氟-C1-4-烷基； [0116] 基团R4、R5A和R5B [0117] 如上所定义，R4、R5A和R5B各自独立地选自：氢；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；和氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基， [0118] 或者 [0119] R3和R4与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环，例如吡咯烷、哌啶、高哌啶、哌嗪、高哌嗪和吗啉，或者杂芳基环，例如吡咯、咪唑、吲哚、异吲哚、吲唑或嘌呤，所述环任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；以及C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基 [0120] 基团R6 [0121] 如上所定义，R6选自：C1-6-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基，以及直链或支链的戊基和己基；C3-5-环烷基，例如环丙基、环丁基和环戊基；C3-5-环烷基-C1-4-烷基，例如环丙基甲基和环丁基甲基；杂环基，例如哌啶基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、氧杂环丁基、氮杂环丁基、吡咯烷基、吗啉基、咪唑烷基、硫代吗啉基、二 烷基、哌嗪基、高哌嗪基1，1-二氧化-硫代吗啉基和1，1-二氧化-异噻唑烷基；杂环基-C1-4-烷基，例如哌啶-1-基甲基、哌啶-4-基甲基和吗啉-4-基甲基；C6-10-芳基，例如苯基、茚基、2，3-二氢茚基(茚满基)、1-萘基、2-萘基或1，2，3，4-四氢萘基、杂芳基；以及C6-10-芳基-C1-4-烷基，例如苯基甲基(即，苄基)和苯基乙基，其中 [0122] (iii)所述C1-6-烷基、C3-5-环烷基、杂环基、或所述杂环基-C1-4-烷基或C6-10-芳基-C1-4-烷基的C1-6-烷基部分、或所述杂环基C1-4-烷基的杂环基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基，并且 [0123] (iv)所述C6-10-芳基或所述C6-10-芳基-C1-4-烷基的C6-10-芳基部分任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，包括氟或氯；羟基；氰基；硝基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；氟-C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；氟-C1-4-烷氧基，例如三氟甲氧基和2，2，2-三氟乙氧基；C1-4-烷氧基-C1-4-烷基，例如甲氧基甲基、甲氧基乙基、乙氧基乙基、异丙氧基乙基、正丁氧基乙基和叔丁氧基乙基；以及氟-C1-4-烷氧基-C1-4-烷基，例如三氟甲氧基甲基和三氟甲氧基乙基； [0124] 基团R8A、R8B和R9 [0125] 如上所定义，R8A、R8B和R9各自独立地选自：氢；C3-5-环烷基，例如环丙基或环丁基或环戊基；C6-10芳基-C1-4烷基，例如苯基甲基(苄基)；以及C1-6-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基、以及直链或支链的戊基和己基；其中任意烷基残基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基； [0126] 或者 [0127] R8A和R8B与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环，例如吡咯烷、哌啶高哌啶、哌嗪、高哌嗪和吗啉，任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如氟或氯；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；氟-C1-4-烷基和C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基；或者所述4至7元饱和杂环基环任选地与C6-10-芳基或杂芳基环系统融合，所述4至7元饱和杂环基环或C6-10芳基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如氟或氯；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；氟-C1-4-烷基和C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基； [0128] 基团R10A和R10B [0129] 如上所定义，R10A和R10B各自独立地选自：氢；C1-6-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基、直链或支链的戊基和己基，其中所述C1-6-烷基任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基和C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基，[0130] 或者 [0131] R10A和R10B与它们所结合的氮原子一起形成4至7元饱和杂环基环(例如吡咯烷、哌啶高哌啶、哌嗪、高哌嗪和吗啉)或杂芳基环(例如吡咯、咪唑、吲哚、异吲哚、吲唑和嘌呤)，所述环任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基；氟C1-4-烷基，例如氟甲基、三氟甲基、2-氟乙基和2，2，2-三氟乙基；及C1-4-烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。1 3 4 [0132] 在本发明目前优选的一个实施方案中，R是CONR R或杂芳基，例如苯并 唑基、吲哚基、氮杂吲哚基、咪唑基、苯并咪唑基、 唑基、 二唑基或四唑基，其任一个任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如，氟、氯；氰基；C1-6-烷基，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、叔丁基、正丁基；C3-5-环烷基，例如环丙基、环戊基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基；氟-C1-6-烷基，例如三氟甲基、氟-C1-4-烷氧基、和杂芳基如吡啶基。 [0133] 在本发明目前优选的一个替选实施方案中，R1是CONR3R4，其中R4是氢或甲基，3 R选自：四氢吡喃基、异丙基甲基、四氢吡喃基甲基、咪唑基乙基、甲氧基乙基、N-甲基咪唑基甲基、四氢呋喃基甲基、1-氟乙基(1-fluorothyl)、 唑基甲基、吡啶基甲基、2， 2-二氟甲基、四氢呋喃基、甲基、乙基、正丙基或异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基、环丙基、羟乙基、氰乙基、苯基、吡啶基、氯苯基、甲氧基苯基、甲基苯基、羟苯基、噻唑酰基甲基(thiazoloylmethyl)、吲哚基、甲氧基丙基、四氢异喹啉基、呋喃基甲基吡啶基乙基、噻唑 3 基、环丙基甲基。在一个优选的实施方案中，R取代基中的任意一种任选地被一个或更多个任选取代基(例如，卤素或C1-4-烷基)所取代。 [0134] 在本发明目前优选的一个实施方案中，X是式(A)的2，6-吡啶基基团。 [0135] 在本发明目前优选的一个替选优选实施方案中，Y是式(H)的高哌嗪基基团(当n为2时)或式(H)的哌嗪基团(当n为1时)，二者均任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基例如甲基、在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价C1-4-亚烷基基团例如-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-、C1-4-烷氧基例如甲氧基、氟-C1-4-烷基例如二氟甲基和三氟甲基、或在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价氟-C1-4-亚烷基基团，以及氟-C1-4-烷氧基例如单氟甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基。 [0136] 在本发明目前优选的又一实施方案中，Y是式(H)的高哌嗪基基团(当n为2时)或式(H)的哌嗪(当n为1时)，二者均任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟、羟基、C1-4-烷基例如甲基、在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价C1-4-亚烷基基团例如-亚乙基-或-亚丙基-、C1-4-烷氧基例如甲氧基、氟-C1-4-烷基例如二氟甲基和三氟甲基、或在所述高哌嗪或哌嗪的环碳之间形成桥的二价氟-C1-4-亚烷基、以及2 氟-C1-4-烷氧基(例如，单氟甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基)，并且R选自：式(N)的 4-哌啶基团(其中o为2且p为1)、式(R)的1，4-环己基基团或式(Q)的-CH2吗啉-3-基基团(其中w为O)，并且其中所述4-哌啶和所述1，4-环己基以及所述-CH2吗啉-3-基基团任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代：氟；羟基；C1-4-烷基，例如甲基、乙基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基；氟-C1-4-烷基，例如单氟甲基、二氟甲基和三氟甲基，以及氟-C1-4-烷氧基，例如单氟甲氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基。 [0137] 在本发明目前优选的一个替选实施方案中，Y是式(H)的哌嗪基团(其中n为1)，2 如上所定义任选地被取代，并且R是式(N)的4-氮杂 (4-azepine)基团(其中o为2 且p为2)，所述4-氮杂 基团任选地被独立地选自以下的一个或更多个取代基所取代： 氟；羟基；C1-4-烷基，例如甲基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基；氟-C1-4-烷基，例如三氟甲基和氟C1-4-烷氧基。 [0138] 在一个优选实施方案中，R3是吡啶基，其任选地被选自以下的一个或更多个取代基所取代：卤素，例如氟或氯；C1-4-烷基，例如甲基或乙基或异丙基；C1-4-烷氧基，例如甲氧基或氟-C1-4-烷基。 [0139] 在一个替选实施方案中，R3是4-吡啶基，其任选地被一个或更多个甲基所取代。 [0140] 用途 [0141] 本发明的化合物可用于治疗癌症。此类癌症的实例包括造血系统的癌症，例如多发性骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤。可与本发明的化合物联合使用以治疗癌症(包括例如造血系统的癌症)之其他药物的实例包括抑制生长因子(例如，GCSF和VEGF)的药剂(例如，阿瓦斯丁和阿柏西普)。 [0142] 本发明的化合物还可用于治疗损伤，包括心脏、肝、肾、脑和骨的损伤。可与本发明的化合物联合使用用于治疗此类损伤的其他药物的实例包括抑制生长因子(例如，GCSF和VEGF)的药剂。 [0143] 本发明的化合物可用于治疗病毒感染，例如HIV/AIDS。可与本发明的化合物联合使用用于治疗病毒感染的其他药物的实例包括例如：CCR5拮抗剂，包括马拉维若(maraviroc)和SCH532702；以及抗逆转录病毒剂，包括逆转录酶抑制剂(例如，齐多夫定、阿巴卡韦、地达诺新、扎西他滨、司他夫定、拉米夫定、恩曲他滨、替诺福韦、阿德福韦、奈韦拉平依法韦伦、依曲韦林、地拉韦啶，等)，以及HIV蛋白酶抑制剂(例如，沙奎那韦、利托那韦、茚地那韦、奈非那韦、安普那韦)，以及整合酶抑制剂(例如，雷特格韦)，以及抗病毒剂(例如阿昔洛韦和普可那利(plecoranil))。 [0144] 本发明的化合物可用于治疗神经病。神经病的一个实例是HIV相关周围神经病，其影响约50％的HIV患者。可与本发明的化合物联合使用用于治疗神经病(包括HIV相关周围神经病)之其他药物的实例包括阿片剂类(例如芬太尼)、抗癫痫药(例如加巴喷丁和普瑞巴林)，以及三环类抗抑郁药(例如阿米替林)。 [0145] 本发明的化合物可用于治疗视网膜新血管形成，视网膜新血管形成是患有糖尿病和年龄相关黄斑变性之患者失明的主要原因。可与本发明的化合物联合使用用于治疗视网膜新血管形成之其他药物的实例包括VEGF抑制剂，例如阿瓦斯丁和兰尼单抗(lucentis)。 [0146] 本发明的化合物可用于治疗多种类型的癌症，包括非小细胞肺癌、乳腺癌和成神经细胞瘤。可与本发明的化合物组合使用用于治疗癌症之其他药物的实例包括另一些抗癌药物，包括抗血管发生剂(例如阿瓦斯丁)和VEGF受体和PDGF受体的抑制剂(例如兰尼单抗和索坦(sutent))。 [0147] 合成 [0148] 上述式(I)的化合物可以通过常规方法或其类似方法来制备。特别地，根据本发明实施例的中间体和化合物的制备可具体地通过(但不限于)以下方案来阐明。本文的方案中结构变体的定义与本文所描绘之式中相应位置的那些相对应。 [0149] 方案1.式(I)化合物的制备，其中X是式(A)的2，6-吡啶基基团。 [0150] [0151] 其中，R1、R2、R3、R4、X和Y如式(I)所定义。 [0152] 其中X是2，6-吡啶基基团的通式(I)化合物可以通过以下而由通式(III)的2 中间体化合物容易地制备(如上述方案1所示)：用H-Y-R置换卤素，或者作为替代地用 2 2 H-Y-H(或者其合适地保护的变体)置换卤素，然后添加R基团，例如通过与式O＝R 的羰 2 基化合物还原烷基化。基团H-Y-R可以例如通过H-Y-H(或其合适地保护的变体)与式O 2 ＝R的羰基化合物的还原烷基化来制备。通式(III)的中间体化合物可以通过例如以下而 1 3 4 容易地制备：硼酸RB(OH)2与2-氯-6-碘吡啶的铃木反应(Suzuki reaction)；胺R RNH2与6-氯吡啶-2-羧酸的缩合；或者α-卤酮(α-halo ketone)与6-氯吡啶-2-甲酰亚胺酰胺(6-chloropyridine-2-carboximidamide)的缩合。在下文中的实验部分示例了所有这些替代方案。 [0153] 方案2.其中X是式(A)的2，6-吡啶基基团之式(I)化合物的替选制备。 [0154] [0155] 其中，R1、R2、R3、R4、X和Y如式(I)所定义。 [0156] 其中X是2，6-吡啶基基团的通式(I)化合物可作为替代地例如通过以下由通式3 4 (IV)的中间体化合物容易地制备(如上文中的方案2所述)：通过标准规程与胺RRNH2缩 3 合；通过羧酸基团转化为酮基RCO，或者通过羧基转化为杂芳基。通式(IV)的中间体化合物可以由通式(V)的中间体化合物通过叔丁酯的去保护而容易地制备。通式(V)的中间体 2 化合物可依次由6-氯吡啶-2-羧酸叔丁酯通过以下而容易地制备：用H-Y-R置换卤素或 2 者作为替代地通过用H-Y-H(或其合适地保护的变体)置换卤素，然后添加R基团，例如通 2 2 过与式O＝R的羰基化合物的还原烷基化。基团H-Y-R 可例如通过H-Y-H(或其合适地保 2 护的变体)与式O＝R的羰基化合物的还原烷基化来制备。在下文中的实验部分示例了所有这些替代方案。 [0157] 还可以通过标准合成方法将方案1和2中的基团R1和R2转化为替选基团R1和R2。方案1和2所述的途径指X为式(A)的2，6-吡啶基基团。可以使用类似的方法来制备其中X作为替代地为包括式(B)至(G)基团的式(I)化合物。 [0158] 用于各个反应步骤的适当反应条件是本领域技术人员已知的。在实验部分中还描述了用于本发明实施例的具体反应条件。用于制备式(I)化合物的必需原料是可市购的，或者可以通过本领域已知的方法来制备。 [0159] 可以实施在下文的实验部分中描述的方法以得到游离碱形式或作为酸加成盐的本发明化合物。根据用于由碱性化合物制备酸加成盐的常规方法，可以通过将游离碱溶解于合适的有机溶剂中并用酸处理溶液来获得可药用酸加成盐。形成加成盐之酸的实例如上所述。 [0160] 式(I)的化合物可具有一个或更多个手性碳原子，因此，它们可以以光学异构体的形式获得，例如作为纯对映体、或者作为对映体的混合物(外消旋体)或者作为包含非对映体的混合物。分离光学异构体混合物以获得纯对映体是本领域中公知的，并且可例如通过盐与光学活性(手性)酸的分级结晶或者通过在手性柱上进行色谱分离来实现。 [0161] 用于本文所描绘之合成途径的化学品可包括例如溶剂、试剂、催化剂以及保护基试剂和去保护基试剂。保护基的实例是叔丁氧羰基(Boc)和苄基。上述方法还可在本文所具体描述步骤之前或之后另外地包括添加或去除合适保护基的步骤，从而最终允许合成化合物。此外，多个合成步骤可以以交替的顺序或次序进行以得到期望的化合物。可用于合成可用化合物的合成化学转化和保护基方法(保护和去保护)是本领域中已知的，并且包括例如R.Larock，Comprehensive Organic Transformations，VCH Publisher(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley and Sons(1999)；L.Fieser和M.Fieser，Fieser and Fieser′s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1994)；和L.Paquette编著，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1995)及其之后的版本中描述的那些。 [0162] 使用了如下缩略语： [0163]aq 水溶液 BINAP 2，2′-双(联苯基膦基)-1，1′-联萘基 Boc 叔丁氧羰基 DAST 三氟化二乙基氨基硫 DCE 1，2-二氯乙烷 DCM 二氯甲烷 DIPEA N，N-二异丙基乙胺 DMA 二甲基乙酰胺 DME 1，2-二甲氧基乙烷 DMF N，N-二甲基甲酰胺 EDC.HCl 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐 ES+ 电喷雾 ESI+ 电喷雾离子化 Et3N 三乙胺 Et2O 乙醚 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 HBTU 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸盐 HOBt N-羟基苯并三唑 HONB 内-N-羟基双环并[2.2.1]庚-5-烯-2，3-二甲酰亚胺 HPLC 高效液相色谱 HPLC-MS 高效液相色谱-质谱 HRMS 高分辨质谱 IBX 2-碘酰基苯甲酸 Int 中间体 IPA 异丙醇 [0164]LCMS 液相色谱质谱 M 摩尔每升 MeCN 乙腈 MeOH 甲醇 [MH]+ 质子化分子离子 MSD-TOF 质量选择检测器-飞行时间 NEM N-乙基吗啉 NMP N-甲基吡咯烷酮 PPh3 三苯基膦 Proc 方法 sat 饱和 SM 原料 TFA 三氟乙酸 THF 四氢呋喃 TLC 薄层色谱 [0165] 在本文中变体的任何定义中，化学基团列表的列举包括作为所列基团的任何单个基团或组合之变体的定义。本文实施方案的列举包括作为任何单个实施方案或与任何其他实施方案或其部分组合的实施方案。 [0166] 现在将通过以下非限制性实施例对本发明进行进一步举例说明。下文中的具体实施例应解释为仅是说明性的，并且无论如何不以任何方式限制本公开内容的其余部分。无需进一步详述，认为基于本文的描述，本领域技术人员可利用本发明至其最完全的程度。本文所引用的所有参考文献和出版物均通过引用整体并入本文。 [0167] 实施例和中间体化合物 [0168] 实验方法 [0169] 除非另有指明，否则所有试剂都是商业级的并且按照获得时原样使用，而无需进一步纯化。在所有情况下使用试剂级溶剂。在与Agilent 1100 HPLC系统相连接的Agilent MSD-TOF上获得高分辨质谱(high resolution mass spectra，HRMS)。在分析过程中，通过两种质量来检查校准并在需要时自动校正。以正电喷雾模式得到谱图。所得质量范围为m/z 100～1100。使用质量峰的轮廓检测(profile detection)。除非另有说明，否则在使用这样的Agilent 1100系统上进行分析型HPLC，所述系统使用Phenomenex Synergi，RP-Hydro，150×4.6mm，4μm柱，在30℃下1.5mL/分钟的流速和5％至100％乙腈(+0.085％TFA)在水(+0.1％TFA)中的梯度经7分钟，(200nm至300nm)。在配备有RediSep或GraceResolv硅胶柱的CombiFlash Companion系统或者配备有Strata SI-1二氧化硅千兆管(silica gigatube)的Flash Master Personal系统上或者在重力下的玻璃柱(ICN二氧化硅，18μm至32μm， )中进行快速色谱。在配备有Phenomenex Synergi Hydro RP 150×10mm，ACE-5AQ，100×21.20mm或YMC ODS-A100/150×20mm柱的Gilson系统(具有Gilson 321平衡泵和Gilson 215自动进样器的Gilson 322泵)上进行反相HPLC。在配备有Merck RP-18(40-63um)硅胶柱的Gilson系统(Gilson 321泵和Gilson 204级分收集器)上进行反相柱层析。使用Biotage或CEM微波进行微波辐照。使用Thales H-cube或H-cube midi进行氢化。使用ACD 6.0对化合物进行自动命名。所有的化合物在真空烘箱中干燥过夜。将产率四舍五入(round)为最近的％。当未指出产率时，使用粗制中间体。通过TLC、LCMS或HPLC来监控反应。除非另有说明，否则反应在室温下进行。 [0170] 中间体1 [0171] 2-(二苄基氨基)环戊-1-醇 [0172] [0173] 将2-氨基环戊醇盐酸盐(500mg，3.63mmol)和苯甲醛(810mg，7.63mmol)溶解于DCM(20mL)中，添加NaBH(OAc)3(2.31g，10.9mmol)，将反应混合物搅拌24小时。用DCM(50mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)、盐水(30mL)洗涤并干燥(MgSO4)。将反应混合物与异氰酸酯树脂一起搅拌18小时，过滤并在真空中浓缩以得到作+ + 为无色油的粗制标题化合物(436mg，43％)。LCMS(ES)：282.1[MH]。 [0174] 中间体2 [0175] N，N-二苄基-2-氟环戊-1-胺 [0176] [0177] 将中间体1(400mg，1.42mmol)溶解于DCM(20mL)中，添加DAST(344mg，2.13mmol)。将反应混合物搅拌4小时，用DCM(30mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(40mL)洗涤、干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为浅棕色胶状物(gum)的粗制标题化合物(330mg， 82％)。LCMS(ES+)：284.1[MH]+。 [0178] 中间体3 [0179] 2-氟环戊-1-胺 [0180] [0181] 将中间体2(330mg，116mmol)溶解于MeOH(15mL)中，使用H-Cube(80巴(bar)，+60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢化。使用所得MeOH溶液而无需进一步纯化。LCMS(ES)： + 104.0[MH]。 [0182] 中间体4 [0183] 1-氟丙-2-胺 [0184] [0185] 将氟丙酮(500mg，6.57mmol)、苄胺(704mg，6.57mmol)和NaBH(OAc)3(4.18g，19.7mmol)溶解于DCM(20mL)中，搅拌18小时。用DCM(80mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(75mL)、盐水(75mL)洗涤、干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。将残余物溶解于MeOH(10mL)中，加入10％Pd/C(100mg)，将反应混合物在H2气氛下搅拌4天。通过硅藻土+ + (celite)过滤反应混合物，使用所得MeOH溶液而无需进一步纯化。LCMS(ES)：77.8[MH]。 [0186] 中间体5 [0187] 4，4，4-三氟丁-2-胺 [0188] [0189] 使用4，4，4-三氟-2-丁酮代替氟丙酮，与中间体4类似地制备了中间体5。+ + LCMS(ES)：128.1[MH]。 [0190] 中间体6 [0191] 1，1-二氟丙-2胺 [0192]+ [0193] 使用1，1-二氟丙酮代替氟丙酮，与中间体4类似地制备了中间体6。LCMS(ES)：+ 96.0[MH]。 [0194] 中间体7 [0195] 1-(2-氟-1-氟甲基-乙基)-哌啶-4-酮 [0196] [0197] 将 1，4- 戊 二 烯 -3- 醇 (200mg，2.38mmol) 和 IBX(999mg，3.57mmol) 溶 解于DCE(15mL)中，在70℃加热3小时。过滤反应混合物，用MeOH(10mL)稀释，并加入2-氟-1-氟甲基-乙胺(226mg，2.38mmol)。将反应混合物在70℃搅拌3小时。加入异氰酸酯树脂，并将反应化合物在室温下搅拌6小时，过滤并在真空中浓缩以得到作为橙色胶+ + 状物的粗制标题化合物(160mg，38％)。LCMS(ES)：178.1[MH]。 [0198] 中间体8至20 [0199] 与中间体7类似地制备了中间体8至20。参见下表1。 [0200] 表1：哌啶-4-酮中间体的制备 [0201] [0202] [0203] [0204] ＊可市购 [0205] 中间体21 [0206] 1-(2-甲氧基乙基)哌啶-4-酮 [0207] [0208] 将4-哌啶酮盐酸盐单水合物(1.00g，6.50mmol)、2-溴乙基甲醚(1.00g，7.20mmol)和K2CO3(1.80g，13.0mmol)溶解于MeCN(20mL)中，将反应混合物在75℃搅拌6小时。过滤反应混合物，并在真空中除去溶剂。将残余物溶解于DCM(30mL)中，与异氰酸酯树脂一起搅拌2小时，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为无色胶状物的粗制标题化合物(180mg，18％)。 [0209] 中间体22至25 [0210] 与中间体21类似地制备了中间体22至25；参见下表2。 [0211] 表2：哌啶-4-酮中间体的制备 [0212] [0213] [0214] 中间体26 [0215] 1-溴戊-2-酮 [0216] [0217] 将2-戊酮(10.6mL，100mmol)溶解于MeOH(60mL)中，并冷却至-5℃。加入溴(5.13mL，100mmol)，并将反应混合物搅拌4小时，保持温度低于10℃。加入水(30mL)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倒入水(100mL)中，用DCM(2×200mL)萃取。用饱和NaHCO3水溶液(200mL)、水(200mL)洗涤合并的有机级分，干燥(CaCl2)并在真空中浓缩。通过Kugelrohr蒸馏纯化残余物，以得到作为淡黄色油的标题化合物((8.22g，50％)。 [0218] 中间体27至32 [0219] 与中间体26类似地制备了中间体27至32；参见下表3。 [0220] 表3：α-溴酮的制备 [0221] [0222] [0223] 中间体33 [0224] 3-碘己-2-酮 [0225] [0226] 将2-己酮(4.94mL，39.9mmol)和碘(20.2g，79.9mmol)溶解于DME(100mL)中，搅拌24小时。用EtOAc(200mL)稀释反应混合物，并用1M硫代硫酸钾水溶液(200mL)、1M NaCO3水溶液(200mL)和水(100mL)洗涤。干燥有机级分(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过Kugelrohr蒸馏(120℃，1毫巴(mBar))纯化残余物，以得到作为深棕色油的标题化合物(2.46g，27％)。 [0227] 中间体34 [0228] N-{1-[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]丙基}氨基甲酸叔丁酯 [0229] [0230] 将2-叔丁氧羰基氨基丁酸(500mg，2.46mmol)、HBTU(1.03g，2.71mmol)和DIPEA(1.22mL，7.38mmol)溶解于DMF(10mL)中，搅拌30分钟。加入N，O-二甲基羟胺盐酸盐(360mg，3.69mmol)，将反应混合物搅拌1小时。在真空中除去溶剂，通过柱色谱纯化残余+ +物以得到作为乳膏油(cream oil)的标题化合物(380mg，63％)。LCMS(ES)：269.2[MNa]。 [0231] 中间体35 [0232] 4-氨基己-3-酮2，2，2-三氟乙酸 [0233] [0234] 将中间体34(4.97g，20.2mmol)溶解于THF(100mL)中，加入乙基溴化镁(20.0mL，3.2M在2-甲基四氢呋喃中，64.0mmol)。将反应混合物搅拌4小时，用饱和NH4Cl水溶液(20mL)淬灭，并用EtOAc(2×200mL)萃取。用1M HCl水溶液(200mL)、1M Na2CO3水溶液(200mL)洗涤合并的有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(100mL)中，加入TFA(25mL)，将反应混合物搅拌3小时，并在真空中浓缩以得到作为红色胶状物的粗制标题化合物(4.98g)。LCMS(ES+)：116.2[MH]+。 [0235] 中间体36 [0236] 6-氯吡啶-2-羧酸叔丁酯 [0237] [0238] 将6-氯吡啶-2-羧酸(5.00g，31.7mmol)溶解于DCM(150mL)中，并加入草酰氯(5.45mL，63.5mmol)和DMF(1mL)。将反应混合物搅拌3小时，在真空中浓缩并与DCM共沸(azeotrope)。将残余物溶解于THF(150mL)中，并加入叔丁醇钾(3.39mg，47.6mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用水(250mL)淬灭，并用DCM(3×150mL)萃取。用饱和NaHCO3水溶液(150mL)洗涤合并的有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物+ +以得到作为白色固体的标题化合物(3.11g，46％)。LCMS(ES)：236.1[MNa]。 [0239] 中间体37 [0240] 6-氯吡啶-2-羧酸甲酯 [0241] [0242] 将6-氯吡啶-2-羧酸(15.0g，0.11mol)溶解于DCM(300mL)中，经10分钟逐滴加入DMF(1.5mL)和草酰氯(27.4g，0.22mol)。将反应混合物搅拌1小时，经5分钟逐滴加入MeOH(50mL)，将反应混合物搅拌1.5小时。在真空中除去溶剂，并将残余物与+DCM(2×150mL)共沸以得到作为绿色固体的粗制标题化合物(16.5g，100％)。LCMS(ES)： + 154.5[MH]。 [0243] 中间体38 [0244] 6-氯-N-(环丙基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0245] [0246] 将6-氯吡啶-2-羧酸(5.00g，31.7mmol)溶解于DCM(100mL)中，逐滴加入DMF(0.5mL)和草酰氯(6.54mL，76.2mmol)。将反应混合物搅拌2小时，在真空中浓缩并与DCM共沸。将残余物溶解于DCM(100mL)中，逐滴加入DIPEA(22.6mL，127mmol)和氨甲基环丙烷(5.51mL，63.5mmol)，将反应混合物搅拌4小时。用饱和NaHCO3水溶液溶液(250mL)洗涤反应混合物、干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为浅棕色胶状物的粗制标题化合物(6.50g，97％)。LCMS(ES+)：211.2[MH]+。 [0247] 中间体39至44 [0248] 与中间体38类似地制备了中间体39至44；参见下表4。 [0249] 表4：6-氯-吡啶-2-甲酰胺中间体的制备 [0250] [0251] [0252] 中间体45 [0253] 6-氯吡啶-2-甲酰胺 [0254] [0255] 将6-氯吡啶-2-羧酸(1.20g，7.62mmol)和氯化铵(0.81g，15.2mmol)溶解于DCM(20mL)中，加 入 DIPEA(5.31mL，30.5mmol)、HONB(2.05g，11.4mmol)和 HBTU(4.33g，11.4mmol)。将反应混合物搅拌1小时，并在真空中除去溶剂。将残余物在DCM(50mL)与1M HCl水溶液(50mL)之间分配，并用DCM(2×25mL)萃取水溶液级分。用饱和NaHCO3水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤合并的有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。从MeOH/水中+ + 重结晶残余物以得到作为白色固体的标题化合物(1.12g，94％)。LCMS(ES)：157.4[MH]。 [0256] 中间体46 [0257] 6-氯-N-(4-氧代己-3-基)吡啶-2-甲酰胺 [0258] [0259] 使用中间体35代替氯化铵，与中间体45类似地制备中间体46，以得到作为橙色油的粗制标题化合物(33％)。LCMS(ES+)：255.1[MH]+。 [0260] 中间体47 [0261] N-丁基-6-氯吡啶-2-甲酰胺 [0262] [0263] 将 6-氯 - 吡 啶 -2-羧 酸 (500mg，3.17mmol)、EDC.HCl(1.34g，6.98mmol) 和HOBN(1.42g，7.93mmol)溶解于 DCM(30mL)中，加入NEM(914mg，7.93mmol) 和正丁 胺(376μL，3.81mmol)。将反应混合物搅拌16小时，用饱和NaHCO3水溶液(2×20mL)、1M HCl水溶液(2×20mL)、盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余+ +物以得到作为无色液体的标题化合物(321mg，48％)。LCMS(ES)：213.5[MH]。 [0264] 中间体48 [0265] 6-氯-N-乙基吡啶-2-甲酰胺 [0266] [0267] 使用乙胺代替正丁胺，与中间体47类似地制备中间体48，以得到作为无色液体的+ +粗制标题化合物(45％)。LCMS(ES)：185.5[MH]。 [0268] 中间体49 [0269] 6-氯-N-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]吡啶-2-甲酰胺 [0270] [0271] 将6- 氯- 吡 啶-2- 羧 酸(1.00g，6.35mmol) 溶 解 于DCM(20mL) 中，加 入HOBt(1.03g，7.62mmol)、EDC.HCl(1.46g，7.62mmol)和l-(3-氨基丙基)咪唑(0.95g，7.62mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(130mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(100mL)、盐水(30mL)、水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。用水磨碎残余物以得到作为+ + 灰白色固体的粗制标题化合物(1.05g，63％)。LCMS(ES)：266[MH]。 [0272] 中间体50 [0273] 2-(6-氯吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吲哚 [0274] [0275] 将2-氯-6-碘吡啶(400mg，1.67mmol)、N-甲基吲哚-2-硼酸(292mg，1.67mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(154mg，0.13mmol)和Na2CO3(442mg，4.18mmol)溶解于水(10mL)和二氧六环(10mL)中，并使用微波(110℃，吸收高)加热1小时。在真空中除去溶剂，并将残余物在DCM(50mL)与水(30mL)之间分配。用DCM(30mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的+有机级分，并在真空中浓缩以得到作为棕色胶状物的粗制标题化合物(406mg)。LCMS(ES)： + 243.2[MH]。 [0276] 中间体51至60 [0277] 与中间体50类似地制备了中间体51至60；参见下表5。 [0278] 表5：与2-氯-6-碘吡啶的铃木反应 [0279] [0280] [0281] ＊使用相应的频哪醇硼酸酯衍生物代替硼酸 [0282] 中间体61 [0283] 6-氯吡啶-2-甲酰亚胺酰胺 [0284] [0285] 将2-氯-6-氰基吡啶(11.2g，80.8mmol)溶解于EtOH(200mL)中，使HCl气体通过该溶液，保持5分钟，将反应混合物搅拌18小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于7M氨在MeOH(100mL)中的溶液中，搅拌3天。在真空中除去溶剂，并用EtOAc(3×50mL)磨碎+ +残余物以得到作为淡粉色固体的粗制标题化合物(12.3g，98％)。LCMS(ES)：156.2[MH]。 [0286] 中间体62 [0287] 2-氯-6-(5-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶 [0288] [0289] 将中间体61(500mg，3.21mmol)、溴丙酮(296μL，3.53mmol)和K2CO3(444mg，3.21mmol)溶解于EtOH(10mL)中，在回流下加热2小时。再加入溴丙酮(148μL， 1.77mmol)，将反应混合物在回流下加热4小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于1M Na2CO3水溶液(50mL)中，用EtOAc(3×50mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为橙色胶状物的标题化合物(420mg，68％)。 + + LCMS(ES)：194.1[MH]。 [0290] 中间体63至74 [0291] 使用合适的α-溴酮中间体，与中间体62类似地制备中间体63至74；参见下表6。 [0292] 表6：由中间体61制备咪唑 [0293] [0294] [0295] ＊可市购 [0296] 中间体75 [0297] 2-氯-6-(4，5-二乙基-1H-咪唑-2-基)吡啶 [0298] [0299] 将中间体46(1.81g，7.11mmol)和醋酸铵(274mg，3.55mmol)溶解于甲醇(15mL)中的7M氨中，并使用微波在100℃加热30分钟，并在120℃加热30分钟。再加入醋酸铵(1.00g，13.0mmol)，并使用微波将反应混合物在120℃加热2小时，倒入水(100mL)中，用DCM(3×100mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余+ +物以得到作为黄色油的标题化合物(1.54g，92％)。LCMS(ES)：236.1[MH]。 [0300] 中间体76 [0301] 2-氯-6-(4-乙基-1-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶 [0302] [0303] 将中间体63(203mg，0.98mmol)和NaHH(47.0mg，60％分散体在矿物油中，1.17mmol)溶解于THF(10mL)中，加入碘甲烷(67.0μL，1.08mmol)，将反应混合物搅拌2小时，倒入水(25mL)中，用EtOAc(3×25mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空+ + 中浓缩以得到作为淡黄色油的粗制标题化合物(212mg，98％)。LCMS(ES)：222.2[MH]。 [0304] 中间体77 [0305] 2-氯-6-{1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-基}吡啶 [0306] [0307] 将6-氯吡啶-2-羧酸(2.00g，12.7mmol)、3，4-二氨基吡啶(1.52g，14.0mmol)和DIPEA(2.43mL，14.0mmol)溶解于DMF(20mL)中，加入HBTU(5.29g，14.0mmol)。将反应混合物搅拌48小时，并在真空中浓缩。将残余物溶解于EtOAc(100mL)中，用1M Na2CO3水溶液(2×100mL)、水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，溶解于AcOH中，并在120℃加热50分钟。在真空中除去溶剂，将残余物悬于1M Na2CO3水溶液(50mL)中，用EtOAc(5×50mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，并从MeOH中重结晶以得到作为白色固体的标题化合物(534mg，37％)。 [0308] 中间体78 [0309] 6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-羧酸叔丁酯 [0310] [0311] 将中间体36(3.00g，14.0mmol)溶解于DMA(60mL)中，加入高哌嗪(7.03g，70.2mmol)。使用微波(180℃，吸收高)将反应混合物加热35分钟，在真空中除去溶剂。 将残余物溶解于DCM(150mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中除去溶剂以得到作为黄色液体的粗制标题化合物(3.37g，87％)。 + + LCMS(ES)：278.1[MH]。 [0312] 中间体79至118 [0313] 通过使6-氯-2-取代的吡啶与高哌嗪反应，与中间体78类似地制备了中间体79至118；参见下表7。 [0314] 表7：6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)-2-取代的吡啶中间体的制备 [0315] [0316] [0317] [0318] [0319] [0320] ＊在该反应过程中除去了Boc/苯磺酰基保护基 [0321] #可市购 [0322] 中间体119 [0323] N-(环丙基甲基)-6-[4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]吡啶-2-甲酰胺 [0324] [0325] 将中间体81(1.50g，5.50mmol)和4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.09g，5.50mmol)溶解于DCM(30mL)中，加入NaBH(OAc)3(5.79g，27.3mmol)。将反应混合物搅拌4天，用DCM(150mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(2×75mL)、盐水(75mL)洗涤，并干燥(MgSO4)。将反应混合物与异氰酸酯树脂一起搅拌2小时，在真空中除去溶剂。将残余物溶解于DCM(40mL)中，加入TFA(4mL)，将反应化合物搅拌18小时。在真空中除去溶剂，并将残余物脱盐(DCM中的K2CO3)，通过柱色谱纯化以得到作为无色胶状物的标题化合物(600mg，+ + 31％)。LCMS(ES)：357.8[MH]。 [0326] 中间体120至124 [0327] 通过使6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)-2-取代的吡啶与4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯反应并除去Boc保护基，与中间体119类似地制备了中间体120至124；参见下表8。 [0328] 表8：6-[4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-2-取代的吡啶中间体的制备 [0329] [0330] [0331] [0332] 中间体125 [0333] 6-[4-(3-氟哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0334] [0335] 使用中间体83代替中间体81，并且使用3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯，与中间体119类似地制备中间体125，以得到作为无色胶状+ + 物的标题化合物(9％)。LCMS(ES)：399.4[MH]。 [0336] 中间体126 [0337] 1-[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]-4-(3-氟哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [0338] [0339] 使用中间体106代替中间体81，并且使用3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯，与中间体119类似地制备中间体126，以得到作为淡黄色固体的标题化合物(1％)。 [0340] 中间体127 [0341] 6-[4-(2-甲基哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0342] [0343] 使用中间体87代替中间体81，并且使用2-甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯，与中间体119类似地制备中间体127，以得到作为无色胶状物的标题化合物(49％)。 [0344] 中间体128 [0345] 6-{4-[(3R，4R)-3-羟基哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0346] [0347] 将中间体87(2.00g，7.29mmol)溶解于EtOH(30mL)中，加入7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚-3-羧酸叔丁酯(4.36g，21.9mmol)和Et3N(2.03mL，14.6mmol)。将反应混合物在回流下加热20小时，用DCM(200mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物。将残余物溶解于DCM(2mL)中，加入TFA(0.5mL)，将反应混合物搅拌5小时。在真空中除去溶剂，并将残余物溶解于DCM(50mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩，以得到粗制标题化合物。 [0348] 中间体129 [0349] 6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-羧酸叔丁酯 [0350] [0351] 将中间体78(3.37g，12.2mmol)溶解于DCM(125mL)中，加入1-(丙-2-基)哌啶-4-酮(3.61mL，24.3mmol)和NaBH(OAc)3(12.9g，60.8mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(250mL)稀释并用饱和Na2CO3水溶液(150mL)淬灭。用DCM(2×100mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为黄色液体的标题化合物(3.29g，67％)。LCMS(ES+)：403.5[MH]+。 [0352] 中间体130至133 [0353] 通过6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)-2-取代之吡啶的还原烷基化，与中间体129类似地制备中间体130至133；参见下表9。 [0354] 表9：6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)-2-取代之吡啶的还原烷基化 [0355] [0356] [0357] 中间体134 [0358] 6-[4-(4-叔丁基环己基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]吡啶-2-羧酸 [0359] [0360] 将中间体78(1.00g，3.61mmol)和4-叔丁基环己酮(560mg，3.61mmol)溶解于DCM(50mL)中，并加入NaBH(OAc)3(3.06g，14.4mmol)。将反应混合物搅拌3天，用DCM(150mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(100mL)、盐水(75mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(75mL)和TFA(6mL)中，搅拌8天。在真空中除去溶剂，并通+过反相柱色谱纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(536mg，41％)。LCMS(ES)： + 360.5[MH]。 [0361] 中间体135 [0362] 6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-羧酸 [0363] [0364] 将中间体129(3.29g，8.17mmol)溶解于DCM(80mL)中，加入TFA(40mL)，并将反应混合物搅拌18小时。在真空中除去溶剂，并用1M Na2CO3水溶液中和残余物。用DCM洗涤水溶液，在真空中浓缩，并通过反相柱色谱纯化以得到作为白色固体的标题化合物(2.19g，+ +77％)。LCMS(ES)：347.5[MH]。 [0365] 中间体136 [0366] 6-(4-{l-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-l-基)吡啶-2-羧酸 [0367] [0368] 使用中间体130代替中间体129，与中间体135类似地制备中间体136，以得到作+ +为白色固体的标题化合物(77％)。LCMS(ES)：347.5[MH]。 [0369] 中间体137 [0370] N-羟基-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰亚胺酰胺 [0371] [0372] 将中间体131(830mg，2.53mmol)溶解于EtOH(20mL)中，加入盐酸羟胺(880mg，12.7mmol)和NaHCO3(1.06g，12.7mmol)。将反应混合物在80℃于回流下加热2小时。浓缩反应混合物并通过过滤除去沉淀。在真空中浓缩母液(mother liquor)以得到作为浅黄色+ + 胶状物的粗制标题化合物(910mg，99％)。LCMS(ES)：361.1[MH]。 [0373] 中间体138 [0374] l-[6-(5-甲基-1，2，4- 二唑-3-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0375] [0376] 使用中间体132代替中间体131，与中间体137类似地制备中间体138，以得到作+ +为黄色胶状物的粗制标题化合物(65％)。LCMS(ES)：375.3[MH] [0377] 中间体139 [0378] 1-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-4-[6-(2H-1，2，3，4-四唑-5-基)吡啶-2-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0379] [0380] 将中间体131(982mg，3.00mmol)、NaN3(215mg，3.30mmol)和NH4Cl(250mg，4.50mmol)溶解于DMF(5mL)中，并在120℃加热4小时。再加入NH4Cl(125mg，2.25mmol)，将反应混合物在120℃加热5.5小时。在真空中除去溶剂，加入NaN3(100mg，1.53mmol)，并将反应混合物在120℃加热7小时。通过柱色谱纯化残余物以得到作为暗红色固体的标题化合物(168mg，15％)。 [0381] 中间体140 [0382] N-{[甲氧基(甲基)氨基甲酰基]甲基}氨基甲酸叔丁酯 [0383] [0384] 将2-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}乙酸(5.00g，28.5mmol)溶解于DCM(50mL)中，加入CDI(5.09g，31.4mmol)，将反应混合物搅拌1小时。加入N，O-二甲基羟胺盐酸盐(3.06g，31.4mmol)，并将反应混合物搅拌16小时。加入EtOAc(150mL)，用1M HCl水溶液(50mL)、饱和NaHHCO3水溶液(2×50mL)洗涤反应混合物，干燥(Na2SO4)并在真空中浓缩以得到作为白色固体的粗制标题化合物(5.13g，82％)。 [0385] 中间体141 [0386] N-(2-氧代己基)氨基甲酸叔丁酯 [0387] [0388] 在-10℃下，将中间体140(1.09g，5.00mmol)溶解于THF(10mL)中，加入正丁基氯化镁(7.50mL，2.0M于THF中，15.0mmol)，将反应混合物升温至室温过夜。加入饱和NH4Cl水溶液(60mL)，用EtOAc(3×20mL)萃取反应混合物，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为无色油的粗制标题化合物(1.00g，93％)。 [0389] 中间体142 [0390] 1-氨基己-2-酮盐酸盐 [0391] [0392] 将中间体141(995mg，4.62mmol)溶解于HCl(10mL，4.0M于二氧六环中)中，将反应混合物搅拌4小时。在真空中除去溶剂以得到作为灰白色固体的粗制标题化合物(653mg，94％)。 [0393] 中间体143 [0394] N-(2-氧代己基)-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0395] [0396] 将中间体142(252mg，1.66mmol)、中间体135(1.33g，1.66mmol)和HBTU(760mg，1.99mmol)溶解于DCM(7.5mL)和DMF(2.5mL)中，加入DIPEA(1.72g，13.3mmol)，将反应混合物搅拌过夜。加入DCM(10mL)，用水(3×5mL)洗涤反应混合物，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为灰白色固体的标题化合物(457mg，62％)。 [0397] 中间体144 [0398] 6-{4-[-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-羧酸甲酯 [0399] [0400] 将中间体129(105mg，0.26mmol)溶解于HCl(2mL，4.0M于二氧六环中)和DCM(2mL)中，将反应混合物搅拌过夜。加入MeOH(4mL)，将反应混合物在110℃加热7.5小时，在真空中除去溶剂。将残余物在EtOAc和饱和NaHCO3水溶液之间分配，干燥(MgSO4)有机级分，并在真空中浓缩以得到作为橙色油的粗制标题化合物(59.0mg，63％)。 [0401] 中间体145 [0402] 6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-碳酰肼 [0403] [0404] 将中间体144(300mg，0.83mmol)和水合肼(280mg，5.60mmol)溶解于MeOH(5ml)中，并搅拌过夜。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于MeOH中，并在真空中除去溶剂以得到作为淡黄色玻璃状物的粗制标题化合物(265mg，89％)。 [0405] 中间体146 [0406] N’-[(6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-基)羰基]环丙烷碳酰肼 [0407] [0408] 将中间体145(60.0mg，0.16mmol)和Et3N(81.0mg，0.80mmol)溶解于DCM中，冷却至0℃，加入环丙烷羰基氯(16.7mg，0.16mmol)在DCM中的溶液中。将反应混合物升温至室温过夜。加入DCM，并用饱和Na2CO3水溶液将反应混合物洗涤2次，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为灰白色固体的粗制标题化合物(58.0mg，85％)。LCMS(ES+)：429[MH]+。 [0409] 中间体147 [0410] l-(6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-基)丙-1-酮 [0411] [0412] 将中间体131(320mg，0.98mmol)溶解于THF(10mL)中，并冷却至0℃。逐滴加入乙基氯化镁(1.50mL，2.0M于THF中，3.00mmol)，将反应混合物在回流下加热4小时。用饱和NH4Cl水溶液(20mL)和饱和Na2CO3水溶液(20mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(20mL×2)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩以得到作为橙色胶状物的粗制标题化合物(300mg，85％)。 [0413] 中间体148 [0414] (2E)-3-(二甲基氨基)-2-甲基-1-(6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-基)丙-2-烯-1-酮 [0415] [0416] 将中间体147(300mg，0.84mmol)溶解于DMF/DMA(3mL)中，在回流下加热过夜。在真空中除去溶剂，并通过反相HPLC纯化残余物以得到作为橙色胶状物的标题化合物+ + (45.0mg，20％)。LCMS(ES)：414.4[MH]。 [0417] 中间体149 [0418] 5-甲基-1，4-二氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯 [0419] [0420] 将5-甲基-[1，4]二氮杂环庚烷(600mg，5.25mmol)溶解于DMF(7.5mL)中，冷却至0℃。经3小时逐滴加入二碳酸二叔丁酯(1.03g，4.70mmol)和三乙胺(3.60mL，26.0mmol)在DCM(1mL)中的溶液。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(20mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤。用DCM(3×50mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，溶解于DCM(20mL)中，用2M NaOH水溶液(10mL)洗涤。用DCM(3×50mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩以+ + 得到作为黄色油的标题化合物(194mg，17％)。LCMS(ES)：215.3[MH]。 [0421] 中间体150 [0422] N-(环丙基甲基)-6-(7-甲基-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-甲酰胺 [0423] [0424] 将中间体38(60.5mg，0.29mmol)、中间体149(123mg，0.57mmol)和DIPEA(200μl，1.15mmol)溶解于NMP(750μl)中，使用微波(185℃，吸收高)加热80分钟。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(10mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(1mL)洗涤。用DCM(3×20mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物+ + 以得到作为棕色油的粗制标题化合物(50.0mg)。LCMS(ES)：289.4[MH]。 [0425] 中间体151 [0426] 1-苄基-5，5-二氘-1，4-二氮杂环庚烷 [0427] [0428] 将1-苄基-1，4-二氮杂环庚-5-酮(2.00g，9.79mmol)溶解于THF(40mL)中，经5分钟逐滴加入LiAlD4(9.80mL，2.0M于THF中，19.6mmol)，将反应混合物搅拌24小时。用饱和NaHCO3水溶液淬灭反应混合物，过滤并在真空中浓缩以得到作为淡黄色胶状物的粗制标题化合物(1.80g，96％)。 [0429] 中间体152 [0430] 6-(4-苄基-7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0431] [0432] 将中间体39(800mg，3.42mmol)和中间体151(988mg，5.14mmol)溶解于NMP(2mL)中，使用微波(200℃，吸收高)将反应混合物加热3小时。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为淡黄色胶状物的标题化合物(320mg，24％)。LCMS(ES+)：390.4[MH]+。 [0433] 中间体153至156 [0434] 通过使6-氯-2-取代的吡啶与取代的高哌嗪反应，与中间体152类似地制备了中间体153至156；参见下表10。 [0435] 表10：哌啶-4-酮中间体的制备 [0436] [0437] [0438] [0439] 中间体157 [0440] 6-(7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0441] [0442] 将中间体152(315mg，0.81mmol)溶解于MeOH(60mL)中，使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢化。在真空除去溶剂以得到作为白色固体的粗制标题化合物(186mg，77％)。LCMS(ES+)：300.5[MH]+。 [0443] 中间体158 [0444] N-(环丙基甲基)-6-(7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-甲酰胺 [0445] [0446] 使用中间体153代替中间体152，与中间体157类似地制备中间体158，以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(48％)。LCMS(ES+)：277.4[MH]+。 [0447] 中间体159 [0448] 7，7-二氘-1-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0449] [0450] 将中间体151(150mg，0.78mmol)、1-(丙-2-基)哌啶-4-酮(110mg，0.78mmol)和NaBH(OAc)3(496mg，2.34mmol)溶解于DCM(15mL)中，并搅拌4天。用DCM(25mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)、盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)并与异氰酸酯树脂一起搅拌3小时。过滤反应混合物并在真空中除去溶剂。将残余物溶解于MeOH(25mL)中，使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢化。在真空中除去溶剂以得到作为无+ +色胶状物的粗制标题化合物(135mg，76％)。LCMS(ES)：228.5[MH]. [0451] 中间体160 [0452] 1-苄基-3-甲基-1，4-二氮杂环庚-5-酮 [0453] [0454] 将1-苄基-3-甲基-哌啶-4-酮(5.00g，24.6mmol)溶解于CHCl3(50mL)中，将反应混合物冷却至0℃，逐滴加入浓硫酸(12mL)。经10分钟逐份添加NaN3(3.20g，49.2mmol)，将反应混合物在室温下搅拌18小时，并在50℃下搅拌2小时。加入冰水(120mL)，用NaOH中和反应混合物，用DCM(2×50mL)萃取，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为灰白色+ +固体的粗制标题化合物(4.86g，91％)。LCMS(ES)：219.3[MH] [0455] 中间体161 [0456] 1-苄基-3-甲基-1，4-二氮杂环庚烷 [0457] [0458] 将中间体160(4.86g，22.3mmol)溶解于Et2O(100mL)中，经10分钟逐滴加入LiAlH4(11.7mL，4.0M在Et2O中，46.8mmol)中。将反应混合物搅拌4小时，用水淬灭，过滤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为无色胶状物的粗制标题化合物(4.15g，91％)。+ + LCMS(ES)：205.3[MH]。 [0459] 中间体162 [0460] 1-苄基-5，5-二氘-3-甲基-1，4-二氮杂环庚烷 [0461] [0462] 使用LiAlD4代替LiAlH4，与中间体161类似地制备中间体162，以得到作为浅黄色胶状物的粗制标题化合物(84％)。LCMS(ES+)：207.3[MH]+。 [0463] 中间体163至172 [0464] 通过取代的苄基高哌嗪与合适的酮的还原烷基化以及随后的去烷基化，与中间体159类似地制备中间体163至172；参见下表11。 [0465] 表11：哌啶-4-基-高哌嗪中间体的制备 [0466] [0467] [0468] [0469] ＊可市购 [0470] 中间体173 [0471] 6-溴-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0472] [0473] 将2-溴吡啶-6-羧酸(5.00g，24.8mmol)溶解于DCM(100mL)和DMF(1mL)中，经5分钟逐滴加入草酰氯(7.54g，59.4mmol)。将反应混合物搅拌2小时，在真空中除去溶剂。将反应混合物与DCM共沸2次，并溶解于DCM(100mL)中。逐滴加入DIPEA(12.8g，99.0mmol)和4-氨基吡啶(4.66g，49.5mmol)，并将反应混合物搅拌2小时，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。从MeOH中重结晶残余物以得到作为灰白色固体的标+ + 题化合物(5.00g，73％)。LCMS(ES)：278.2[MH]。 [0474] 中间体174 [0475] 6-溴-N-(环丙基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0476] [0477] 使用氨基甲基环丙烷代替4-氨基吡啶，与中间体173类似地制备中间体174，以得+ +到作为浅黄色固体的标题化合物(77％)。LCMS(ES)：255.2[MH]。 [0478] 中间体175 [0479] 6-[5，5-二氘-4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0480] [0481] 将中间体163(734mg，2.57mmol)、中间体173(650mg，2.34mmol)、碳酸铯(1.14g，3.51mmol)、醋酸钯(37.0mg，0.16mmol)和BINAP(146mg，0.23mmol)悬于二氧六环(10mL)中。将反应混合物脱气15分钟，在95℃加热18小时。在真空中浓缩反应混合物，溶解于DCM中，过滤并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物。将残余物溶解于DCM(8mL)中，加入TFA(4mL)，并将反应混合物搅拌2小时。在真空中除去溶剂，并将残余物在DCM(40mL)与Na2CO3饱和水溶液(40mL)之间分配。用DCM(2×40mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩以得到作为黄色液体的标题化合物(602mg，67％)。 + + LCMS(ES)：383.6[MH]。 [0482] 中间体176 [0483] 6-[4-(3-氟哌啶-4-基)-7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0484] [0485] 将中间体157(75.0mg，0.25mmol)和3-氟-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(54.4mg，0.25mmol)溶解于DCM(10mL)中，并添加NaBH(OAc)3(266mg，1.25mmol)。将反应混合物搅拌20天，用DCM(50mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)、盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物，并溶解于MeOH(10mL)和TFA(1mL)中。将反应混合物搅拌18小时，在真空中除去溶剂以得到标题化合物。 [0486] 中间体177 [0487] 1-[6-(5-环 丙 基 -4-甲 基-1H- 咪 唑-2-基 )吡 啶 -2-基]-4-(3-氟 哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [0488] [0489] 使用中间体113代替中间体157，与中间体176类似地制备中间体177，以得到作+ +为黄色液体的粗制标题化合物(100％)。LCMS(ES)：399.2[MH]。 [0490] 中间体178 [0491] 4-(4-苄基-7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯[0492] [0493] 将中间体151(400mg，2.08mmol)、3-氟-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯(452mg，2.08mmol)和NaBH(OAc)3(1.32g，6.24mmol)溶解于DCM(25mL)中，搅拌4天。用DCM(25mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)、盐水(40mL)洗涤，干燥(MgSO4)并与异氰酸酯树脂一起搅拌3小时。过滤反应混合物并在真空中浓缩以得到作为无色胶状物的粗制标+ + 题化合物(480mg，59％)。LCMS(ES)：394.5[MH]。 [0494] 中间体179 [0495] 4-(4-苄基-1，4-二氮杂环庚-1-基)-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0496] [0497] 使用1-苄基-1，4-二氮杂环庚烷代替中间体151，与中间体178类似地制备中间+ +体179，以得到作为无色胶状物的粗制标题化合物(42％)。LCMS(ES)：392.5[MH]。 [0498] 中间体180 [0499] 1-苄基-4-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-5，5-二氘-1，4-二氮杂环庚烷[0500] [0501] 将中间体178(480mg，1.22mmol)溶解于MeOH(20mL)和TFA(2mL)中，搅拌18小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(20mL)中，加入丙酮(142mg，2.44mmol)和NaBH(OAc)3(1.29g，6.10mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(20mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并与异氰酸酯树脂一起搅拌18小时。过滤反应混+合物并在真空中浓缩以得到作为无色胶状物的粗制标题化合物(300mg，73％)。LCMS(ES)： + 336.5[MH]。 [0502] 中间体181 [0503] 1-苄基-4-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0504] [0505] 使用中间体179代替中间体178，与中间体180类似地制备中间体181，以得到作+ +为白色固体的标题化合物(71％)。LCMS(ES)：334.5[MH]。 [0506] 中间体182 [0507] 1-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚烷 [0508] [0509] 将中间体180溶解于MeOH(30mL)中，并使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢化。在真空中除去溶剂以得到作为无色胶状物的粗制标题化合物(155mg，+ + 71％)。LCMS(ES)：246.4[MH]。 [0510] 中间体183 [0511] 1-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0512] [0513] 使用中间体181代替中间体180，与中间体182类似地制备中间体183，以得到作+ +为无色胶状物的粗制标题化合物(73％)。LCMS(ES)：244.4[MH]。 [0514] 中间体184 [0515] N-甲氧基-N-甲基-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0516] [0517] 将中间体135(500mg，1.44mmol)、N，O-二甲基羟胺盐酸盐(422mg，4.33mmol)、DIPEA(1.76mL，10.1mmol)和HBTU(547mg，1.44mmol) 溶 解 于DMF(8mL) 中，搅 拌20 小时。在真空中除去溶剂，用DCM(50mL)稀释残余物，用饱和Na2CO3水溶液(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物+ +(380mg，68％)。LCMS(ES)：390.5[MH]。 [0518] 中间体185 [0519] 6-[5，5-二氘-3-甲基-4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0520] [0521] 使用中间体171代替中间体163，与中间体175类似地制备中间体185，以得到作+ +为黄色液体的标题化合物(21％)。LCMS(ES)：397.2[MH]。 [0522] 中间体186 [0523] 4-{3-苄基-3，6-二氮杂双环[3.2.2]壬-6-基}-3-氟哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0524] [0525] 使用3-苄基3，6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷代替中间体151，与中间体178类似地制备中间体186，以得到作为淡黄色胶状物的标题化合物(93％)。LCMS(ES+)：418.4[MH]+[0526] 中间体187 [0527] 3-苄基-6-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-3，6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷[0528] [0529] 使用中间体186代替中间体178，与中间体180类似地制备中间体187，以得到作+ +为淡黄色胶状物的标题化合物(90％)。LCMS(ES)：360.4[MH]. [0530] 中间体188 [0531] 6-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-3，6-二氮杂双环[3.2.2]壬烷 [0532] [0533] 使用中间体187代替中间体180，与中间体182类似地制备中间体188，以得到作+ +为淡黄色胶状物的标题化合物(44％)。LCMS(ES)：270.4[MH]。 [0534] 中间体189 [0535] 4-{3-苄基-3，6-二氮杂双环[3.2.2]壬-6-基}哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0536] [0537] 使用4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替3-氟-4-氧代-哌啶-1-羧酸叔丁酯，与+中间体186类似地制备中间体189，以得到作为黄色液体的粗制标题化合物。LCMS(ES)： + 400.3[MH]。 [0538] 中间体190 [0539] 4-{3，6-二氮杂双环[3.2.2壬-6-基}哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0540] [0541] 将中间体189(1.29g，3.24mmol)溶解于MeOH(100ml)中，使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢化。在真空中除去溶剂并通过柱色谱纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(596mg，60％)。LCMS(ES+)：310.3[MH]+。 [0542] 中间体191 [0543] 6-[6-(哌啶-4-基)-3，6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0544] [0545] 使用中间体190代替中间体163，与中间体175类似地制备中间体191，以得到作+ +为黄色液体的粗制标题化合物(42％)。LCMS(ES)：407.2[MH]。 [0546] 中间体192 [0547] N-(环丙基甲基)-6-{3，10-二氮杂双环[4.3.1]癸-3-基}吡啶-2-甲酰胺 [0548] [0549] 将10-苄 基-3，10- 二 氮 杂 双 环[4.3.1] 癸 烷 (785mg，3.41mmol)、中 间体174(790mg，3.10mmol)、碳酸 铯(1.00g，3.04mmol)、醋 酸钯(45.0mg，0.20mmol) 和BINAP(192mg，0.31mmol)悬于二氧六环(25mL)中，脱气并在95℃加热18小时。在真空中除去溶剂，用DCM稀释残余物，过滤并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，溶解于EtOH(20mL)中并使用氢气球在50℃经10％Pd(OH)2/C氢化60小时。将反应混合物通过硅藻土过滤，用EtOH洗涤，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到标题化合物(89.0mg，49％)。 [0550] 中间体193 [0551] 6-{3，10-二氮杂双环[4.3.1]癸-3-基}-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0552] [0553] 使用中间体39代替中间体174，与中间体192类似地制备中间体193，以得到作为+ +黄色胶状物的粗制标题化合物(28％)。LCMS(ES)：338.5[MH]。 [0554] 中间体194 [0555] 6-氯-N-(环丙基甲基)-3-甲基吡啶-2-甲酰胺 [0556] [0557] 将6-氯-3-甲基吡啶-2-羧酸(595mg，3.47mmol)、氨基甲基环丙烷(356μL，4.16mmol)、EDC.HCl(1.46g，7.63mmol)、HOBN(1.54g，8.67mmol)和NEM(1.10mL，8.67mmol)溶解于DCM(30mL)中，搅拌16小时。用饱和NaHCO3水溶液(30mL)、1M HCl水溶液(30mL)、盐水(30mL)洗涤反应混合物，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以得到作为黄色固体的标题化合物(215mg，28％)。LCMS(ES+)：225.5[MH]+。 [0558] 中间体195 [0559] N-(环丙基甲基)-6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)-3-甲基吡啶-2-甲酰胺 [0560] [0561] 使用中间体194代替中间体38，与中间体81类似地制备中间体195，以得到作为+ +黄色液体的粗制标题化合物。LCMS(ES)：289.2[MH]。 [0562] 中间体196 [0563] 1-(1，3-噻唑-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [0564] [0565] 将2-溴噻唑(1.00g，6.10mmol)和高哌嗪(2.44g，24.4mmol)溶解于DMA(1mL)中，使用微波(180℃，吸收高)加热30分钟。将反应混合物溶解于DCM(50mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩以得到作为黄色固体的粗制标题化合物(1.05g，94％)。LCMS(ES+)：184.2[MH]+。 [0566] 中间体197 [0567] 6-[(1-苄基哌啶-4-基)氧基]吡啶-2-羧酸 [0568] [0569] 将6-氯吡啶-2-羧酸叔丁酯(1.00g，4.68mmol)和N-苄基哌啶-4-醇(1.88g，9.83mmol)溶解于二氧六环(10mL)中。加入NaH(393mg，于矿物油中的60％分散体， 9.83mmol)，使用微波(80℃，吸收高)将反应混合物加热1小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于MeOH(100mL)中，过滤并在真空中浓缩。通过反相柱色谱纯化残余物，以得到作+ + 为白色固体的标题化合物(860mg，59％)。LCMS(ES)：313.1[MH]。 [0570] 中间体198 [0571] 6-[(1-苄基哌啶-4-基)氧基-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0572] [0573] 将中间体197(430mgg，1.38mmol)溶解于DCM(20mL)中，加入草酰氯(419mg，3.30mmol)。将反应混合物搅拌2小时，在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(20mL)中。 加入DIPEA(711mg，5.51mmol)和4-氨基吡啶(259mgg，2.75mmol)，将反应混合物搅拌3小时。用DCM(50mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(75mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(360mg，67％)。 + + LCMS(ES)：389.2[MH]。 [0574] 中间体199 [0575] 6-(哌啶-4-基氧基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0576] [0577] 将中间体198(360mg，0.93mmol)溶解于MeOH(30mL)中，将反应混合物使用H-Cube(80巴，60℃，1.0mL/分钟)经10％Pd/C氢化。在真空中除去溶剂以得到作为白色固体的粗制标题化合物(231mg，84％)。LCMS(ES+)：299.2[MH]+。 [0578] 中间体200 [0579] 6-{[1-(氮杂环庚-4-基)哌啶-4-基]氧基}-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0580] [0581] 将中间体199(77.0mg，0.26mmol)溶解于DCM(6ml)中，加入N-Boc-六氢-1H-氮杂 -4酮(110mg，0.52mmol)和NaBH(OAc)3(273mg，1.30mmol)。将反应混合物搅拌4天，用DCM(10mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(6mL)中，加入TFA(3mL)，将反应混合物搅拌2小时。在真空中浓缩反应混合物，溶解于DCM(10mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中+ +浓缩以得到作为黄色液体的粗制标题化合物(102mg，100％)。LCMS(ES)：396.2[MH]。 [0582] 中间体201 [0583] 3-({6-[(吡啶-4-基)氨基甲酰基]吡啶-2-基}氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0584] [0585] 将中间体39(250mg，1.07mmol)、3-氨基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(515μl，2.67mmol)和DIPEA(746μl，4.28mmol)溶解于NMP(2mL)中，使用微波(185℃，吸收高)加热200分钟。将反应混合物溶解于DCM(20mL)中，用饱和NH4Cl水溶液(10mL×5)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱部分地纯化残余物以得到作为棕色油的粗制标题化合+ + 物LCMS(ES)：398.2[MH] [0586] 中间体202 [0587] N-(1-{6-[(环丙基甲基)氨基甲酰基]吡啶-2-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯 [0588] [0589] 使用中间体38代替中间体39，并使用4-N-(叔丁氧羰基)氨基哌啶替代3-氨基-哌啶-1-羧酸叔丁酯，与中间体201类似地制备中间体202，以得到作为白色固体的标+ +题化合物(584mg，99％)。LCMS(ES)：375.7[MH]。 [0590] 中间体203 [0591] 6-(4-氨基哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0592] [0593] 将中间体202(584mg，1.56mmol)溶解于MeOH(2mL)中，加入HCl(4mL，2M于Et2O中)。将反应混合物搅拌16小时，在真空中除去溶剂以得到作为浅粉色胶状物的粗制标题化合物(484mg)。 [0594] 中间体204 [0595] (3R)-1-[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-胺 [0596] [0597] 将中间体66(2.00g，9.10mmol)、(R)-吡咯烷-3-基-氨基甲酸叔丁酯(5.08g，27.3mmol)和DIPEA(6.34mL，36.4mmol)溶解于DMA(40mL)中，使用微波(180℃，吸收高)将反应混合物加热2小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(100mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，溶解于DCM(8mL)中，加入TFA(4mL)。将反应混合物搅拌4小时，在真空中除去溶剂，使用MP-TsOH SPE盒(cartridge)将残余物脱盐，用MeOH中的7N氨洗脱。在真空中除去溶剂以得到作为棕色液体的粗制标题化合物(2.45g)。LCMS(ES+)：270.2[MH]+。 [0598] 中间体205 [0599] 4-{[(3R)-1-[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-基]氨基甲酰基}哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0600] [0601] 将中间体204(400mg，1.49mmol)和1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-羧酸(341mg，1.49mmol)溶解于DCM(5mL)中，加入DIPEA(0.65mL，3.71mmol)、EDC(346mg，2.23mmol)和HONB(399mg，2.23mmol)。将反应混合物搅拌18小时，并在DCM(50mL)与饱和Na2CO3水溶液(30mL)之间分配。用DCM(2×20mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为黄色液体的标题化合物(241mg，34％)。 + + LCMS(ES)：481.1[MH]。 [0602] 中间体206 [0603] N-[(3R)-1-[6-(5- 环 丙 基 -1H- 咪 唑 -2- 基 ) 吡 啶 -2- 基 ] 吡 咯烷-3-基]-1-(丙-2-基)哌啶-4-甲酰胺 [0604] [0605] 将中间体205(241mg，0.50mmol)溶解于DCM(6mL)中，加入TFA(3mL)，将反应混合物搅拌3小时。在真空中除去溶剂，使用MP-TsOH SPE盒将残余物脱盐，用MeOH中的7N氨洗脱。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(10mL)中。加入丙酮(0.33mL，4.51mmol)和NaBH(OAc)3(1.06g，5.01mmol)，将反应混合物搅拌18小时，并用饱和Na2CO3水溶液(50mL)淬灭。加入DCM(50mL)，用DCM(2×30mL)萃取水溶液级分。干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(75.0mg，35％)。LCMS(ES+)：423.2[MH]+。 [0606] 中间体207 [0607] (3R)-1-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-胺 [0608] [0609] 使用中间体72代替中间体66，与中间体204类似地制备中间体207，以得到作为+ +棕色液体的粗制标题化合物。LCMS(ES)：284.3[MH]。 [0610] 中间体208 [0611] (3R)-N-[(3R)-1-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-基]吡咯烷-3-甲酰胺 [0612] [0613] 将(R)-吡咯烷-1，3-二羧酸1-叔丁酯(912mg，4.23mmol)、DIPEA(5.16mL，29.6mmol)、HBTU(1.61g，4.23mmol)和中间体207(1.20g，4.23mmol)溶解于DMF(10mL)中，搅拌20小时。在真空中浓缩反应混合物，用DCM(100mL)稀释，并用饱和Na2CO3水溶液(50mL)洗涤。用DCM(2×100mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，并溶解于DCM(6mL)中。加入TFA(3mL)，将反应混合物搅拌 3小时。在真空中浓缩反应混合物，使用SCX盒脱盐，用MeOH中的7N氨洗脱。在真空中浓+ + 缩反应混合物，以得到作为棕色固体的粗制标题化合物(806mg)。LCMS(ES)：381.2[MH]。 [0614] 中间体209 [0615] (3S)-N-[(3R)-1-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-基]吡咯烷-3-甲酰胺 [0616] [0617] 使用(S)-吡咯烷-1，3-二羧酸1-叔丁酯代替(R)-吡咯烷-1，3-二羧酸1-叔丁酯，与中间体208类似地制备中间体209，以得到作为棕色液体的粗制标题化合物。+ + LCMS(ES)：381.2[MH]。 [0618] 中间体210 [0619] (3R)-1-环戊基-N-[(3R)-1-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-基]吡咯烷-3-甲酰胺 [0620] [0621] 将中间体208(269mg，0.71mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入环戊酮(188μl，2.12mmol)和NaBH(OAc)3(749mg，3.53mmol)，将反应混合物搅拌18小时。用饱和Na2CO3水溶液(30mL)淬灭反应混合物，并用DCM(30mL)稀释。用DCM(2×20mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为白色固+ + 体的标题化合物(52.0mg，16％)。LCMS(ES)：449.1[MH]。 [0622] 中间体211 [0623] (3S)-1-环戊基-N-[(3R)-1-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-基]吡咯烷-3-甲酰胺 [0624] [0625] 使用中间体209代替中间体208，与中间体210类似地制备中间体211，以得到作为黄色胶状物的标题化合物(68.0mg，24％)。LCMS(ES+)：449.1[MH]+。 [0626] 中间体212 [0627] 6-[(3R)-3-氨基吡咯烷-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0628] [0629] 使用中间体39代替中间体66，与中间体204类似地制备中间体212，以得到作为+ +白色固体的粗制标题化合物。LCMS(ES)：284.2[MH]。 [0630] 中间体213 [0631] N-(吡啶-4-基)-6-[(3R)-3-{[(3R)-吡咯烷-3-基甲基]氨基}吡咯烷-1-基]吡啶-2-甲酰胺 [0632] [0633] 将中间体212(500mg，1.76mmol)溶解于DCM(15mL)中。加入(3R)-3-甲酰吡咯烷-l-羧酸苄酯(412mg，1.76mmol)和NaBH(OAc)3(411mg，1.94mmol)，将反应混合物搅拌过夜。用DCM(10mL)稀释反应混合物，用水(5mL)淬灭，用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，并溶解于MeOH(21mL)中。使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢化溶液。在真空中除去溶剂以得到粗+ + 制标题化合物(300mg，80％)。LCMS(ES)：367.3[MH]。 [0634] 中间体214 [0635] N-(吡啶-4-基)-6-[(3R)-3-{[(3S)-吡咯烷-3-基甲基]氨基}吡咯烷-1-基]吡啶-2-甲酰胺 [0636] [0637] 使用(3S)-3-甲酰吡咯烷-l-羧酸苄酯代替(3R)-3-甲酰吡咯烷-1-羧酸苄酯，与中间体213类似地制备中间体214，以得到作为黄色胶状物的粗制标题化合物(93％)。+ + LCMS(ES)：367.3[MH]。 [0638] 中间体215 [0639] 6-[(3R)-3-[(哌啶-4-基甲基)氨基]吡咯烷-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0640] [0641] 将中间体212(500mg，1.76mmol)溶解于DCM(20mL)中，加入4-甲酰哌啶-1-羧酸叔丁酯(376mg，1.76mmol)和NaBH(OAc)3(748mg，3.52mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(100mL)稀释，并用水(50mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(50mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，溶解于DCM(40mL)中，并加入TFA(10mL)。将反应混合物搅拌6小时，使用MP-TsOH SPE盒脱盐，用7N氨在MeOH中洗脱，+ +以得到作为黄色胶状物的粗制标题化合物。LCMS(ES)：381.2[MH]。 [0642] 中间体216 [0643] N-(2-氨基乙基)-6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-胺 [0644] [0645] 将中间体66(770mg，3.51mmol)、乙二胺(1.17mL，17.5mmol)和DIPEA(2.44mL，14.0mmol)溶解于NMP(13mL)中，使用微波(200℃至220℃，吸收高)将反应混合物加热80分钟。再加入乙二胺(1.17mL，17.5mmol)，使用微波(220℃，吸收高)将反应混合物加热 50分钟。用DCM(20mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。通过柱色谱部分地纯化残余物以得到作为黄色胶状物的粗制标题化合物(1.20g)。LCMS(ES+)：244.2[MH]+。 [0646] 中间体217至223 [0647] 通过胺与6-氯-2-取代的吡啶的SNAr反应，与中间体216类似地制备了中间体217至223；参见下表12。 [0648] 表12：胺与6-氯-2-取代之吡啶的SNAr反应 [0649] [0650] [0651] 中间体224 [0652] 3-[(2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]吡咯烷-1-羧酸叔丁酯 [0653] [0654] 将吡咯烷-1，3-二羧酸1-叔丁酯(221mg，1.03mmol)、DIPEA(1.25mL，7.19mmol)、HBTU(390mg，1.03mmol)和中间体216(250mg，1.03mmol)溶解于DMF(10mL)中，搅拌20小时。在真空中除去溶剂，用DCM(20mL)稀释残余物，用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤。用DCM(2×20mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分并在真空中浓缩。通过柱色谱+ +纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(335mg，74％)。LCMS(ES)：441.1[MH]。 [0655] 中间体225 [0656] 1-环戊基-N-(2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)吡咯烷-3-甲酰胺 [0657] [0658] 将中间体224(335mg，0.76mmol)溶解于DCM(4mL)中，加入TFA(1mL)，将反应混合物搅拌2小时。在真空中除去溶剂，并将残余物在DCM(20mL)与1M NaOH水溶液(20mL)之间分配。用NaOH将水溶液级分碱化为pH 14，用DCM(3×50mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分并在真空中浓缩。将残余物的一半溶解于DCM(5mL)中，加入环戊酮(60.0μl，0.57mmol)和NaBH(OAc)3(161mg，0.76mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用DCM(10mL)稀释，并用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中+ + 浓缩以得到作为黄色油的粗制标题化合物(150mg)。LCMS(ES)：409.2[MH]。 [0659] 中间体226 [0660] (3R)-N-(2-{[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)吡咯烷-3-甲酰胺 [0661] [0662] 使用中间体218代替中间体207，与中间体208类似地制备中间体226，以得到作+ +为黄色胶状物的粗制标题化合物。LCMS(ES)：355.2[MH]。 [0663] 中间体227 [0664] (3R)-1-环戊基-N-(2-{[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)吡咯烷-3-甲酰胺 [0665] [0666] 使用中间体226代替中间体208，与中间体210类似地制备中间体227，以得到作+ +为黄色胶状物的粗制标题化合物(91％)。LCMS(ES)：423.2[MH]。 [0667] 中间体228 [0668] 3-[(2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)氨基]哌啶-1-羧酸叔丁酯 [0669] [0670] 将中间体216(300mg，1.23mmol)溶解于DCM(5mL)中，加入3-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(270mg，1.36mmol)和NaBH(OAc)3(523mg，2.47mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用DCM(10mL)稀释并用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(226mg，+ +43％)。LCMS(ES)：427.1[MH]。 [0671] 中间体229至233 [0672] 通过中间体216、218和219的还原烷基化，与中间体228类似地制备中间体229至233；参见下表13。 [0673] 表13：中间体205、207和208的还原烷基化 [0674] [0675] [0676] 中间体234 [0677] N-{2-[(2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)氨基甲酰基]乙基}氨基甲酸叔丁酯 [0678] [0679] 使用3-叔丁氧羰基氨基丙酸代替吡咯烷-1，3-二羧酸1-叔丁酯，与中间体224类似地制备中间体234，以得到作为黄色胶状物的粗制标题化合物(61％)。LCMS(ES+)：415.1[MH]+。 [0680] 中间体235 [0681] 3-(环戊基氨基)-N-(2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)丙酰胺 [0682] [0683] 使用中间体234代替中间体224，与中间体225类似地制备中间体235，以得到作+ +为淡黄色油的粗制标题化合物(77％)。LCMS(ES)：383.2[MH]。 [0684] 中间体236 [0685] 1-(丙-2-基)氮杂环庚-4-酮 [0686] [0687] 将N-Boc-六氢-1H-氮杂环庚烷-4-酮(3.00g，14.1mmol)溶解于DCM(50mL)中，加入TFA(15mL)，将反应混合物搅拌2小时。在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(500mL)与饱和Na2CO3水溶液(500mL)之间分配。用DCM(2×250mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(50mL)中，加入丙酮(10mL)和NaBH(OAc)3(2.18g，141mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(200mL)稀释，并用饱和Na2CO3水溶液(150mL)淬灭。干燥(MgSO4)有机级分并在真空中浓缩以得到作为棕色液体+ +的粗制标题化合物(2.18g)。LCMS(ES)：156.2[MH]。 [0688] 中间体237 [0689] 4-(4-{6-[(吡啶-4-基)氨基甲酰基]吡啶-2-基}哌嗪-1-基)氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯 [0690] [0691] 将中间体222(1.88g，6.64mmol)溶解于DCM(125mL)中，加入4-氧代氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯(2.12g，9.95mmol))和NaBH(OAc)3(7.03g，33.2mmol)。将反应混合物搅拌20小时，用DCM(50mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(75mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(100mL)中，与异氰酸酯树脂(4g)一起摇动1.5小时，过滤并在真空中浓缩。通过反相柱色谱纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物+ +(2.17g，68％)。LCMS(ES)：481.5[MH]。 [0692] 中间体238 [0693] 四(2，2，2-三氟乙酸)；6-[4-(氮杂环庚-4-基)哌嗪-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0694] [0695] 将中间体237(1.88g，6.64mmol)溶解于DCM(100mL)中，加入TFA(15mL)，将反应混合物搅拌20小时。在真空中除去溶剂，通过反相柱色谱纯化残余物以得到作为暗红色固体的标题化合物(3.94g，71％)。LCMS(ES+)：381.5[MH]+ [0696] 中间体239 [0697] 2-({4-[6-(丁基氨基甲酰基)吡啶-2-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯 [0698] [0699] 将中间体82(130mg，0.47mmol)溶解于DCM(6mL)中，加入2-甲酸基-吗啉-4-羧酸叔丁酯(111mg，0.52mmol)和NaBH(OAc)3(498mg，2.40mmol)。将反应混合物搅拌过夜。再加入2-甲酸基-吗啉-4-羧酸叔丁酯(50.6mg，0.24mmol)和NaBH(OAc)3(50.9mg，0.24mmol)，将反应混合物搅拌过夜。用DCM(10mL)稀释反应混合物，用水(5mL)淬灭，并用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱部分+ + 地纯化残余物以得到作为黄色油的标题化合物(156mg，70％)。LCMS(ES)：476.4[MH]。 [0700] 中间体240 [0701] 4-{4-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]哌嗪-1-基}氮杂环庚烷-1-羧酸叔丁酯 [0702] [0703] 使用中间体223代替中间体222，与中间体237类似地制备中间体240，以得到作+ +为淡黄色胶状物的粗制标题化合物(56％)。LCMS(ES)：481.3[MH]。 [0704] 中间体241 [0705] 3-[2-(4-苄基-1，4-二氮杂环庚-1-基)-2-氧代乙基]吗啉-4-羧酸叔丁酯[0706] [0707] 将4-N-Boc-吗啉-3-乙酸(500mg，2.04mmol)和苄基高哌嗪(388mg，2.04mmol)溶解于DMF(20mL)中，冷却至0℃。加入DIPEA(553mg，4.28mmol)和HBTU(773mg，2.04mmol)，将反应混合物搅拌2小时。在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(100mL)与水(50mL)之间分配。用1M Na2CO3水溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相柱色谱纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(730mg，86％)。+ + LCMS(ES)：418.4[MH]。 [0708] 中间体242 [0709] 1-(4-苄基-1，4-二氮杂环庚-1-基)-2-[4-(丙-2-基)吗啉-3-基]乙-1-酮[0710] [0711] 将中间体241(730mg，1.75mmol)溶解于DCM(20mL)中，加入TFA(2mL)。将反应混合物搅拌16小时，在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(20mL)中，加入丙酮(1mL)。将反应混合物搅拌30分钟，加入NaBH(OAc)3(1.11g，5.25mmol)，将反应混合物搅拌6天。用DCM(50mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(0.62g，99％)。LCMS(ES+)：360.5[MH]+。 [0712] 中间体243 [0713] 1-{2-[4-(丙-2-基)吗啉-3-基]乙基}-1，4-二氮杂环庚烷 [0714] [0715] 将中间体242(0.62g，1.73mmol)溶解于THF(20mL)中，加入LiAlH4(0.71mL，2.4M THF，1.70mmol)，将反应混合物搅拌16小时。用盐水(10mL)淬灭反应混合物，并在DCM(50mL)与水(20mL)之间分配。用DCM(2×20mL)萃取水溶液级分，用盐水(25mL)洗涤合并的有机级分，干燥(MgSO4)，并在真空中浓缩。使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经 10％Pd/C氢化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(0.42g，95％)。LCMS(ES+)： 256.5[MH]+。 [0716] 中间体244 [0717] 3-(1，2，3，4-四氢异喹啉-2-基)丙基甲磺酸酯 [0718] [0719] 将3-溴-丙醇(100mg，0.72mmol)、K2CO3(249mg，1.80mmol)和1，2，3，4-四氢异喹啉(95.8mg，0.72mmol)溶解于MeCN(2mL)中，将反应混合物在60℃加热18小时。过滤反应混合物并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(10mL)中，加入甲磺酰氯(82.4mg，0.72mmol)和Et3N(87.4mg，0.86mmol)。将反应混合物搅拌1小时，用DCM(20mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩，以得到作为无色胶状物的粗制标题化+ +合物(72.2mg)。LCMS(ES)：270.3[MH]。 [0720] 中间体245 [0721] 3-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)丙基甲磺酸酯 [0722] [0723] 使用 3，3-二氟吡咯烷盐酸盐代替 1，2，3，4-四氢异喹啉 (1，2，3，4-tetrahydrisoquinoline)，与中间体244类似地制备中间体245，以得到作为无色胶状物+ + 的标题化合物(150mg，86％)。LCMS(ES)：244.2[MH]。 [0724] 中间体246 [0725] 6-[4-(3-氯-2-羟基丙基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0726] [0727] 将中间体87(500mg，1.61mmol)和NaHCO3(141mg，1.69mmol)悬于EtOH(20mL)中，加入表氯醇(epichlorohydrin)(156mg，1.69mmol)，将反应混合物搅拌2天。再加入表氯醇(78.0mg，0.85mmol)，将反应混合物搅拌3天。在真空中浓缩反应混合物，通过柱色谱纯化+ +以得到作为白色固体的标题化合物(206mg，32％)LCMS(ES)：404[MH]。 [0728] 中间体247 [0729] 3-[(4-苄基-1，4-二氮杂环庚-1-基)羰基]-4-甲基哌嗪-1-羧酸叔丁酯 [0730] [0731] 将 (S)-4-Boc-哌 嗪 羧 酸 (530mg，2.17mmol) 溶 解 于 MeOH(25mL) 中，加入甲醛(1.76mL，37重量％在水中，21.7mmol)。将反应混合物搅拌30分钟，加入NaBH(OAc)3(0.92g，4.34mmol)，将反应混合物搅拌2小时。在真空中除去溶剂，通过反相柱色谱纯化残余物。将残余物和苄基高哌嗪(0.41g，2.17mmol)溶解于DMF(20mL)中，冷却至 0℃。加入DIPEA(0.59g，4.56mmol)和HBTU(0.82g，2.17mmol)，将反应混合物搅拌3小时。 在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(100mL)与水(50mL)之间分配。用1M Na2CO3水溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相柱色谱纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(0.64g，71％)。LCMS(ES+)：417.4[MH]+。 [0732] 中间体248 [0733] 1-苄基-4-{[1-甲基-4-(丙-2-基)哌嗪-2-基]羰基}-1，4-二氮杂环庚烷 [0734] [0735] 将中间体247(0.64g，1.54mmol)溶解于DCM(20mL)中，加入TFA(2mL)，将反应混合物搅拌16小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(20mL)中，加入丙酮(1mL)。将反应混合物搅拌30分钟，加入NaBH(OAc)3(0.98g，4.63mmol)。将反应混合物搅拌1.5小时，用DCM(50mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空+ +中浓缩以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(0.46g，82％)。LCMS(ES)：359.5[MH]。 [0736] 中间体249 [0737] 1-{[1-甲基-4-(丙-2-基)哌嗪-2-基]甲基}-1，4-二氮杂环庚烷 [0738] [0739] 将中间体248(0.46g，1.27mmol)溶解于THF(20mL)中，加入LiAlH4(0.54mL，2.4M在THF中，1.27mmol)。将反应混合物搅拌16小时，用盐水(10mL)淬灭，并在DCM(50mL)与水(20mL)之间分配。用DCM(2×20mL)萃取水溶液级分，用盐水(25mL)洗涤合并的有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。使用H-Cube(80巴，60℃，1mL/分钟)经10％Pd/C氢+ +化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(0.29g，89％)。LCMS(ES)：255.5[MH]。 [0740] 中间体250 [0741] (2S)-2-(羟基甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯 [0742] [0743] 将(S)-Boc-2-吗啉羧酸(2.00g，8.65mmol)溶解于THF(30mL)中，逐滴加入硼烷(25.9mL，1.0M于THF中，25.9mmol)。将反应混合物在回流下加热2.5小时，用水(10mL)淬灭。在真空中浓缩反应混合物，将残余物溶解于DCM(30mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(2×20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为淡黄色油的粗制标题化合物(1.74g，92％)。LCMS(ES+)：240.3[MNa]+。 [0744] 中间体251 [0745] (2S)-2-(羟基甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯 [0746] [0747] 将中间体250(500mg，2.30mmol)和IBX(1.29g，4.60mmol)溶解于DCE(20mL)中，在70℃加热18小时。过滤反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为淡黄色油的粗制标题化合物(684mg)。 [0748] 中间体252 [0749] (2R)-2-[(4-{6-[(吡啶-4-基)氨基甲酰基]吡啶-2-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)甲基]吗啉-4-羧酸叔丁酯 [0750] [0751] 将中间体83(150mg，0.50mmol)溶解于DCM(6mL)中，加入中间体251(119mg，0.55mmol)和NaBH(OAc)3(535mg，2.52mmol)。将反应混合物搅拌过夜。再加入中间体 251(52.7mg，0.25mmol)和NaBH(OAc)3(51.9mg，0.25mmol)，将反应混合物搅拌2小时。用DCM(10mL)稀释反应混合物，用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物，以得到作为黄色油的标题化合物(211mg，产率84％)。 [0752] 中间体253 [0753] N-(环丙基甲基)-6-{4-[3-(1，3-二氧代-2，3-二氢-1H-异吲哚-2-基)丙基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0754] [0755] 将中间体81(150mg，0.55mmol)、N-(3-溴丙基)-邻苯二甲酰亚胺(147mg，0.55mmol)和K2CO3(113mg，0.82mmol)溶解于MeCN(2mL)中，将反应混合物在60℃搅拌12小时。过滤反应混合物，用DCM洗涤，与异氰酸酯树脂一起搅拌2小时，过滤并在真空中浓+ + 缩以得到作为淡黄色胶状物的标题化合物(240mg，95％)。LCMS(ES)：462.8[MH]。 [0756] 中间体254 [0757] 1-(吡啶-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [0758] [0759] 将2-氯吡啶(3.00g，26.4mmol)、DIPEA(9.20mL，52.8mmol)和高哌嗪(7.90g，79.3mmol)溶解于DMA(10mL)中，使用微波(180℃至200℃，吸收高)加热40分钟。用DCM(150mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(100mL)、盐水(100mL)洗涤，干燥+ (MgSO4)并在真空中浓缩以得到作为棕色液体的标题化合物(3.41g，72％)。LCMS(ES)： + 178.6[MH]。 [0760] 中间体255至257 [0761] 通过2-氯吡啶与高哌嗪的SNAr反应，与中间体254类似地制备了中间体255至257；参见下表14。 [0762] 表14：2-氯吡啶的SNAr反应 [0763] [0764] [0765] 中间体258 [0766] 1-(哌啶-4-基)-4-(吡啶-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [0767] [0768] 将中间体254(400mg，2.26mmol)溶解于DCM(5mL)中，加入Boc-哌啶酮(540mg，2.71mmol)和NaBH(OAc)3(2.39g，11.3mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(20mL)稀释，用水(15mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(2mL)中，加入TFA(1mL)，并将反应混合物搅拌3小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(10mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤，干燥(MgSO4)+ 并在真空中浓缩以得到作为黄色固体的粗制标题化合物(361mg，61％)。LCMS(ES)： + 261.7[MH]。 [0769] 中间体259至261 [0770] 通过中间体255至257的还原烷基化和去保护，与中间体258类似地制备了中间体259至261；参见下表15。 [0771] 表15：4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]吡啶中间体的制备 [0772] [0773] [0774] [0775] 中间体262 [0776] 4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-羧酸叔丁酯 [0777] [0778] 将 中 间 体25(10.0g，44.7mmol)和Boc- 高 哌 嗪 (9.85g49.2mmol)溶 解 于DCM(250mL)中，逐份添加NaBH(OAc)3(47.4g，224mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用水(200mL)淬灭。用1M Na2CO3水溶液(200mL)、盐水(100mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为无色液体的标题化合物(11.0g，60％)。+ + LCMS(ES)：408.7[MH]。 [0779] 中间体263 [0780] 1-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚烷 [0781] [0782] 将中间 体262(11.0g，27.0mmol)溶解 于DCM(100mL)中，加入 TFA(10.0mL，135mmol)，将反应混合物搅拌16小时。在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(200mL)与水(200mL)之间分配。用NaOH将水溶液级分碱化为pH14，用DCM(3×100mL)萃取，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩以得到作为淡黄色液体的标题化合物(7.42g，89％)。 + + LCMS(ES)：308.7[MH]。 [0783] 中间体264 [0784] 2-溴-N-(环丙基甲基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺 [0785] [0786] 将2-溴噻唑-4-羧酸(500mg，2.40mmol)、氨基甲基环丙烷(247μl，2.88mmol)、EDC.HCl(1.01g，5.29mmol)、HOBN(1.08g，6.01mmol) 和NEM(765μl，6.01mmol) 溶 解 于DCM(30mL)中，将反应混合物搅拌16小时。用饱和NaHCO3水溶液(30mL)、1M HCl水溶液(30mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(404mg，64％)。LCMS(ES+)：261.4[MH]+。 [0787] 中间体265 [0788] 2-氯-N-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-6-甲基嘧啶-4-甲酰胺 [0789] [0790] 使用2-氯-4-甲基嘧啶-5-羧酸代替2-溴噻唑-4-羧酸，并且使用1-(3-氨基丙基)咪唑代替氨基甲基环丙烷，与中间体264类似地制备中间体265，以得到粗制标题化合物。LCMS(ES+)：280.5[MH]+。 [0791] 中间体266 [0792] 6-氯-N-(环丙基甲基)-4-甲基吡啶-2-甲酰胺 [0793] [0794] 将6-氯-4-甲基吡啶-2-羧酸(422mg，2.46mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入草酰氯(422μl，4.92mmol)和DMF(100μl)。将反应混合物搅拌3小时，在真空中除去溶剂，将残余物与DCM共沸。将残余物溶解于DCM(10mL)中，加入DIPEA(1.63mL，9.84mmol)和氨基甲基环丙烷(427μl4.92mmol)，将反应混合物搅拌1小时。用DCM(40mL)稀释反应混合物，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)、1M HCl水溶液(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓+缩。通过柱色谱纯化残余物以得到作为黄色液体的标题化合物(494mg，69％)。LCMS(ES)： + 225.5[MH]。 [0795] 中间体267 [0796] 2-氯-N-(环丙基甲基)吡啶-4-甲酰胺 [0797] [0798] 使用2-氯异烟酸代替2-溴噻唑-4-羧酸，与中间体264类似地制备中间体267，+ +以得到作为淡黄色固体的标题化合物(58％)。LCMS(ES)：211.5[MH]。 [0799] 中间体268 [0800] N-(环丙基甲基)-2-(1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-4-甲酰胺 [0801] [0802] 使用中间体267代替中间体38，与中间体81类似地制备中间体268，以得到作为黄色液体的粗制标题化合物。LCMS(ES+)：275.7[MH]+。 [0803] 中间体269 [0804] N-(环丙基甲基)-2-[4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]吡啶-4-甲酰胺 [0805] [0806] 使用中间体268代替中间体81，与中间体119类似地制备中间体269，以得到作为黄色液体的标题化合物(37％)。LCMS(ES+)：358.7[MH]+。 [0807] 中间体270 [0808] 6-氯-N-(环丙基甲基)-5-甲氧基吡啶-2-甲酰胺 [0809] [0810] 使用6-氯-5-甲氧基吡啶-2-羧酸代替2-溴噻唑-4-羧酸，与中间体264类似+ +地制备中间体270，以得到作为无色液体的标题化合物(75％)。LCMS(ES)：241.5[MH]。 [0811] 中间体271 [0812] N-(环丙基甲基)-6-(1，4-二氮杂环庚-1-基)-5-甲氧基吡啶-2-甲酰胺 [0813] [0814] 使用中间体270代替中间体38，与中间体81类似地制备中间体271，以得到作为黄色液体的粗制标题化合物。LCMS(ES+)：305.7[MH]+。 [0815] 中间体272 [0816] N-(环丙基甲基)-5-甲氧基-6-[4-(哌啶-4-基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]吡啶-2-甲酰胺 [0817] [0818] 使用中间体271代替中间体81，与中间体119类似地制备中间体272，以得到作为+ +黄色液体的标题化合物(24％)。LCMS(ES)：388.7[MH]。 [0819] 中间体273 [0820] 6-[4-(哌啶-4-基)-7，7-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0821] [0822] 使用4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯代替3-氟-4-氧代哌啶-羧酸叔丁酯，与中间体+176类似地制备中间体273，以得到作为黄色液体的粗制标题化合物(100％)。LCMS(ES)： + 383.5[MH]。 [0823] 中间体274 [0824] N-(1-{6-[(吡啶-4-基)氨基甲酰基]吡啶-2-基}哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯 [0825] [0826] 使用4-N-(叔丁氧羰基)氨基哌啶代替3-氨基-哌啶-1-羧酸叔丁酯，与中+ 间体201类似地制备中间体274，以得到作为白色固体的粗制标题化合物。LCMS(ES)： + 398.4[MH]。 [0827] 实施例1 [0828] 一般方法A [0829] N-(氧杂环己-4-基甲基)-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0830] [0831] 将中间体135(75.0mg，0.22mmol)、EDC.HCl(91.3mg，0.48mmol)、HONB(97.0mg，0.54mmol)和NEM(275μL，2.16mmol)溶解于DCM(1mL)中。加入4-氨基甲基四氢吡喃(125mg，1.08mmol)，将反应混合物搅拌18小时。用DCM(20mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(20mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相+ 色谱纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(31.4mg，33％)。HRMS(ESI)算得C25H41N5O2：443.326026；实测443.326896。HPLC：Rf 3.70分钟，100％纯度。 [0832] 实施例2 [0833] 一般方法B [0834] N-(氧杂环己-4-基)-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0835] [0836] 将 中 间 体 135(650mg，1.88mmol)、4-氨 基 四 氢 吡 喃 (210mg，2.07mmol)、DIPEA(970mg，7.52mmol)和HBTU(710mg，1.88mmol)溶解于DMF(10mL)中，将反应混合物搅拌20小时。在真空中除去溶剂，用DCM(100mL)稀释残余物，用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中除去溶剂。通过反相HPLC纯化残余物并脱盐(K2CO3于DCM中)以得到作为无色胶状物的标题化合物(300mg，38％)。HRMS(ESI+)算得C24H39N5O2：429.310376；实测429.311726。HPLC：Rf 3.61分钟，100％纯度。 [0837] 实施例3 [0838] N-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0839] [0840] 将中间体135.3TFA(217mg，0.32mmol)溶解于DCM(3mL)中，加入草酰氯(232μl，2.70mmol)和DMF(100μl)，将反应混合物搅拌5小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(3mL)中。加入DIPEA(446μl，2.70mmol)和1-(3-氨基丙基)咪唑(129μl，1.08mmol)，将反应混合物搅拌2.5天。加入DCM(30mL)，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC和柱色谱纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(7.16mg，6％)。HRMS(ESI+)算得C25H39N7O：453.321609；实测453.320079。HPLC：Rf3.92分钟，100％纯度。 [0841] 实施例4至58 [0842] 通过使中间体135和136与合适的胺反应，与实施例1至2类似地制备了实施例4至58；参见下表16。 [0843] 表16：由中间体135和136制备酰胺 [0844] [0845] [0846] [0847] [0848] [0849] [0850] [0851] [0852] [0853] [0854] [0855] [0856] 实施例59 [0857] N-(环丙基甲基)-6-{4-[1-(1，3-二氟丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0858] [0859] 将中间体81(100mg，0.36mmol)和中间体7(64.6mg，0.36mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入NaBH(OAc)3(386mg，1.82mmol)。将反应混合物搅拌4天，用DCM(50mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)、盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(2.80mg，2％)。HRMS(ESI+)算得C23H35F2N5O：435.280967；实测435.280897。HPLC：Rf 3.86分钟，100％纯度。 [0860] 实施例60至124 [0861] 通过使中间体81至88、90至115和117与合适的哌啶-4-酮衍生物反应，与实施例59类似地制备了实施例60至124；参见下表17。 [0862] 表17：中间体81至88、90至115和117的还原烷基化 [0863] [0864] [0865] [0866] [0867] [0868] [0869] [0870] [0871] [0872] [0873] [0874] [0875] [0876] [0877] [0878] ＊中间体可市购 [0879] 实施例125 [0880] N-(环丙基甲基)-3-甲基-6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0881] [0882] 使用中间体195代替中间体81，与实施例63类似地制备实施例125，以得到作为黄色胶状物的标题化合物(12％)。HRMS(ESI+)算得C24H39N5O：413.315461，实测413.315661。HPLC：Rf 4.01分钟，98.7％纯度. [0883] 实施例126 [0884] 1-[1-(2，3-二氢-1H-茚-1-基)哌啶-4-基]-4-(1，3-噻唑-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [0885] [0886] 将中间体196(150mg，0.82mmol)和外消旋中间体19(176mg，0.82mmol)溶解于DCM(15mL)中，加入NaBH(OAc)3(867mg，4.09mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(25mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(30mL)、盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(64.1mg，21％)。HRMS(ESI+)算得C22H30N4S：382.219118，实测382.220358。HPLC：Rf3.45分钟，98.9％纯度。 [0887] 实施例127 [0888] N-(环丙基甲基)-6-{4-[1-(1-甲氧基丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0889] [0890] 将中间体119(90.0mg，0.25mmol)和甲氧基丙酮(22.2mg，0.25mmol)溶解于DCM(7mL)中，加入NaBH(OAc)3(267mg，1.25mmol)。将反应混合物搅拌3天，用DCM(50mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(30mL)、盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物并脱盐(K2CO3于DCM中)以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(13.4mg，12％)。HRMS(ESI+)算得C24H39N5O2：429.310376，实测429.311516。HPLC：Rf3.94分钟，99.1％纯度。 [0891] 实施例128至139 [0892] 通过使中间体119至123与合适的醛或酮反应，与实施例127类似地制备了实施例128至139；参见下表18。 [0893] 表18：中间体119至123的还原烷基化 [0894] [0895] [0896] [0897] [0898] 实施例140 [0899] 1-甲基-2-(6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-基)-1H-1，3-苯并二唑 [0900] [0901] 将中间体135(200mg，0.58mmol)、EDC.HCl(167mg，0.87mmol)、HONB(156mg，0.87mmol)、N-甲基-1，2-苯二胺(177mg，1.45mmol)和DIPEA(144mL，0.87mmol)溶解于DCM(4mL)中，在45℃于密封容器中搅拌过夜。用DCM(20mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤并在真空中浓缩。通过柱色谱纯化残余物并溶解于醋酸(2mL)中，使用微波(150℃，吸收高)加热30分钟。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(25mL)中，用饱和NaHCO3水溶液(25mL)、盐水(25mL)洗涤并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化产物以得到作为无色胶状物的标题化合物(44.3mg，18％)。HRMS(ESI+)算得C26H36N6：433.30742，实测433.30667。HPLC：Rf 3.66分钟，100％纯度。 [0902] 实施例141至152 [0903] 通过使中间体135与合适的苯胺反应，与实施例140类似地制备了实施例141至152；参见下表19。 [0904] 表19：与中间体135的酰胺形成和成环作用 [0905] [0906] [0907] [0908] [0909] 实施例153 [0910] 1-[6-(5-甲基-1，2，4- 二唑-3-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0911] [0912] 将中间体137(125mg，0.35mmol)和DIPEA(108mg，0.83mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入乙酰氯(28.6mg，0.36mmol)，将反应混合物搅拌16小时。将反应混合物在DCM(75mL)与饱和Na2CO3水溶液(25mL)之间分配，分离有机级分，用盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物悬于MeCN(2mL)和二甲苯(5mL)中，加热至150℃，保持3小时。在真空中除去溶剂，通过反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(10.0mg，11％)。HRMS(ESI+)算得C21H32N6O：384.26376，实测384.26221。HPLC：Rf 3.64分钟，98.5％纯度。 [0913] 实施例154 [0914] 1-{1-[(2R)-丁-2-基]哌啶-4-基}-4-[6-(5-丙基-1，2，4- 二唑-3-基)吡啶-2-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0915] [0916] 使用中间体138代替中间体137，并且使用丁酰氯替乙酰氯，与实施例153类似地制备实施例154，以得到作为黄色胶状物的标题化合物(8％)。HRMS(ESI+)算得C24H38N6O：427.31799，实测427.31772。HPLC：Rf 4.60分钟，100％纯度。 [0917] 实施例155至167 [0918] 通过使中间体137与合适的乙酰氯反应，与实施例153类似地制备了实施例155至167；参见下表20。 [0919] 表20：由中间体137合成1，2，4- 二唑 [0920] [0921] [0922] [0923] [0924] 实施例168 [0925] 1-[6-(2-甲基-2H-1，2，3，4-四唑-5-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0926] [0927] 将中间体139(317mg，0.86mmol)溶解于DMF(6mL)中，加入NaHH(69.0mg，在矿物油中的60％分散体，1.71mmol)，将反应混合物搅拌30分钟。将反应混合物冷却至0℃，加入MeI(182mg，1.28mmol)在DMF(1mL)中的溶液。将反应混合物升温至室温过夜，加入盐水(25mL)。用EtOAc(3×15mL)萃取反应混合物，用盐水(10mL)洗涤合并的有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。用庚烷洗涤残余物，通过反相HPLC纯化以得到作为黄色固体的标题化合物(14.0mg，4％)。HRMS(ESI+)算得C20H32N8：384.274993，实测384.276623。HPLC：Rf 6.20分钟，97.7％纯度。 [0928] 实施例169 [0929] 1-[6-(3-环丙基-1，2，4- 二唑-5-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0930] [0931] 将中间体135(130mg，0.36mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入草酰氯(92.0mg，0.72mmol)和DMF(100μL)。将反应混合物搅拌3小时，在真空中除去溶剂。将残余物和DIPEA(111mg，0.86mmol)溶解于DCM(75mL)中，冷却至0℃。加入N′-羟基环丙烷甲酰亚胺酰胺(37.0mg，0.37mmol)，将反应混合物在0℃搅拌1小时，并在室温搅拌1小时。将反应混合物在DCM(75mL)与饱和Na2CO3水溶液(25mL)之间分配，用盐水(25mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物悬于二甲苯(10mL)中，并加热至150℃，保持1小时。在真空中除去溶剂，通过反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(5.20mg，4％)。HRMS(ESI+)算得C23H34N6O：410.27941，实测410.28058。HPLC：Rf 4.18分钟，98.6％纯度。 [0932] 实施例170 [0933] 1-[6-(3-苯基-1，2，4- 二唑-5-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0934] [0935] 使用N’-羟基苯甲酰亚胺酰胺代替N′-羟基环丙烷甲酰亚胺酰胺，与实施例169类似地制备实施例170，以得到作为黄色胶状物的标题化合物(6％)。HRMS(ESI+)算得C26H34N6O：446.27941，实测446.28042。HPLC：Rf 4.73分钟，98.2％纯度。 [0936] 实施例171 [0937] 1-[6-(5-丁 基 -1，3- 唑-2- 基 )吡 啶 -2- 基]-4-[1-( 丙 -2-基 ) 哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0938] [0939] 将中间体143(222mg，0.50mmol)溶解于MeCN(1.5mL)中，加入PPh3(393mg，1.50mmol)和六氯乙烷(355mg，1.50mmol)在MeCN(5mL)中的溶液。将反应混合物搅拌10分钟，加入Et3N(300mg，3.00mmol)，将反应混合物在50℃加热过夜。再加入PPh3(131mg， 0.50mmol)和六氯乙烷(119mg，0.50mmol)在MeCN(1mL)中的溶液，将反应混合物在50℃加热过夜。加入盐水和饱和NaHCO3水溶液，用EtOAc(3×10mL和2×30mL)萃取反应混合物，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为橙色胶状物的标题化合物(20.0mg，9％)。HRMS(ESI+)算得C25H39N5O：425.315461，实测425.316761。 HPLC：Rf 4.74分钟，98.8％纯度。 [0940] 实施例172 [0941] 1-[6-(5-环丙基-1，3，4- 二唑-2-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷 [0942] [0943] 将中间体146(249mg，0.58mmol)和POCl3(7mL)在100℃加热3小时。在真空中除去溶剂，加入饱和Na2CO3水溶液(13mL)，用EtOAc(×3)萃取反应混合物，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(15.0mg，6％)。HRMS(ESI+)算得C23H34N6O：410.27941，实测410.28076。HPLC：Rf3.76分钟，98.1％纯度。 [0944] 实施例173 [0945] 1-[6-(4-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-2-基]-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚烷三盐酸盐 [0946] [0947] 将中间体148(45.0mg，0.11mmol)、水合肼(4mL)和MeOH(几滴)在回流下加热4小时。在真空中除去溶剂，通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物。将残余物溶解于DCM(10mL)和HCl(5mL，2.0M于Et2O中)中，在真空中除去溶剂以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(3.60mg，9％)。HRMS(ESI+)算得C22H34N6：382.284495，实测382.285835。HPLC：Rf 3.30分钟，100％纯度。 [0948] 实施例174至184 [0949] 通过还原烷基化，与实施例63类似地制备了实施例174至184；参见下表21。 [0950] 表21：中间体150和154至158的还原烷基化 [0951] [0952] [0953] [0954] [0955] ＊可市购 [0956] 实施例185 [0957] 6-{4-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0958] [0959] 将中间体43(224mg，0.90mmol)溶解于二氧六环(3mL)中，加入NaOtBu(111mg，1.15mmol)、Pd2(dba)3(30.1mg，0.03mmol)、Xantphos(53.7mg，0.07mmol) 和 中 间 体 183(200mg，0.82mmol)。将反应混合物在100℃加热3天。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM中，过滤并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色固体的标题化合物(5.61mg，1％)。HRMS(ESI+)算得C25H35FN6O：454.285638，实测454.287278。 HPLC：Rf 3.07分钟，99.7％纯度。 [0960] 实施例186 [0961] 6-{5，5-二氘-4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0962] [0963] 将中间体173(150mg，0.54mmol)、中间体159(123mg，0.54mmol)、BINAP(33.6mg，0.05mmol)、醋酸钯(8.50mg，0.04mmol)和Cs2CO3(264mg，0.81mmol)溶解于二氧六环(2mL)中，在100℃加热4天。过滤反应混合物并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(14.1mg，6％)。HRMS(ESI+)算得C24H32[2H]2N6O： 424.29506，实测424.29411。HPLC：Rf 3.43分钟，98.5％纯度。 [0964] 实施例187至202 [0965] 通过与中间体173和174的Buchwald-Hartwig反应，与实施例186类似地制备了实施例187至202；参见下表22。 [0966] 表22：中间体173和174的Buchwald-Hartwig反应 [0967] [0968] [0969] [0970] [0971] [0972] 实施例203 [0973] 6-(4-{1-[(2-氯-4-氟苯基)甲基]哌啶-4-基}-5，5-二氘-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0974] [0975] 将中间体175(200mg，0.52mmol)溶解于DCM(30mL)中，加入2-氯-4-氟苯甲醛(166mg，1.05mmol)和NaBH(OAc)3(554mg，2.61mmol)。将反应混合物搅拌18小时，用DCM(30mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为淡黄色固体的标题化合物(69.7mg，25％)。HRMS(ESI+)算得C28H30[2H]2ClFN6O：524.246666，实测524.245956。HPLC：Rf 3.93分钟，99.3％纯度。 [0976] 实施例204至209 [0977] 通过使中间体175、185、191和273与合适的醛反应，与实施例203类似地制备了实施例204至209；参见下表23。 [0978] 表23：与中间体175、185、191和273的还原烷基化反应 [0979] [0980] [0981] [0982] 实施例210 [0983] 6-{4-[3-氟-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [0984] [0985] 使用中间体125代替中间体175，并且使用丙酮代替2-氯-4-氟苯甲醛，与实施例203类似地制备实施例210，以得到作为无色胶状物的标题化合物(22％)。HRMS(ESI+)算得C24H33FN6O：440.269988，实测440.271298。HPLC：Rf 3.40分钟，100％纯度。 [0986] 实施例211至214 [0987] 通过使中间体126、176和177与合适的酮反应，与实施例210类似地制备实施例211至214；参见下表24。 [0988] 表24：与中间体126、176和177的还原烷基化反应 [0989] [0990] [0991] [0992] 实施例215 [0993] 6-{4-[2-甲基-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [0994] [0995] 使用中间体127代替中间体175，并且使用丙酮代替2-氯-4-氟苯甲醛，与实施例203类似地制备实施例215，以得到作为白色固体的标题化合物(1％)。HRMS(ESI+)算得C26H38N6O：450.31071，实测450.31244。HPLC：Rf3.24分钟，100％纯度。 [0996] 实施例216 [0997] N-(环丙基甲基)-6-{4-[(3R)-3-羟基-1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [0998] [0999] 使用中间体128代替中间体175，并且使用丙酮代替2-氯-4-氟苯甲醛，与实施例203类似地制备实施例216，以得到作为白色固体的标题化合物(14％)。HRMS(ESI+)算得C23H37N5O2：415.294726，实测415.295486。HPLC：Rf3.58分钟，100％纯度。 [1000] 实施例217 [1001] N-(环丙基甲基)-6-{10-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-3，10-二氮杂双环[4.3.1]癸-3-基}吡啶-2-甲酰胺 [1002] [1003] 使用中间体192代替中间体81，与实施例63类似地制备实施例217，以得到作为无色胶状物的标题化合物(11％)。HRMS(ESI+)算得C26H41N5O：439.331111，实测439.333241。HPLC：Rf 4.18分钟，98.9％纯度。 [1004] 实施例218 [1005] 6-(10-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-3，10-二氮杂双环[4.3.1]癸-3-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1006] [1007] 使用中间体193代替中间体192，并且使用中间体25代替1-(丙-2-基)哌啶-4-酮，与实施例217类似地制备实施例218，以得到作为黄色固体的标题化合物(23％)。HRMS(ESI+)算得C31H37ClN6O：544.271738，实测544.271478。HPLC：Rf 4.08分钟，99.4％纯度。 [1008] 实施例219 [1009] 1-(6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-基)丁-1-酮 [1010] [1011] 将中间体184(100mg，0.26mmol)溶解于THF(3mL)中，加入丙基溴化镁(1.28mL，2M于Et2O中，2.57mmol)。将反应混合物搅拌18小时，在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(20mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(15mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(20.2mg，21％)。HRMS(ESI+)算得C22H36N4O：372.288912，实测372.290132。HPLC：Rf 4.18分钟，99.2％纯度。 [1012] 实施例220 [1013] 2-苯基-1-(6-{4-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-基)乙-1-酮 [1014] [1015] 将中间体184(342mg，0.88mmol)溶解于THF(8mL)中，加入苄基氯化镁(8.78mL，1M在Et2O中，8.78mmol)。将反应混合物搅拌18小时，在真空中除去溶剂。将残余物溶解于DCM(20mL)中，用饱和Na2CO3水溶液(15mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(2.83mg，1％)。 HRMS(ESI+)算得C26H36N4O：420.288912，实测420.290762。HPLC：Rf 4.50分钟，99.6％纯度。 [1016] 实施例221 [1017] 6-({1-[1-(丙-2-基)氮杂环庚-4-基]哌啶-4-基}氧基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1018] [1019] 将中间体200(102mg，0.26mmol)溶解于DCM(3mL)中，加入丙酮(19.0μL，0.26mmol)和NaBH(OAc)3(273mg，1.29mmol)。将反应混合物搅拌2天，用DCM(30mL)稀释，并用饱和Na2CO3水溶液(20mL)淬灭。用DCM(2×15mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(0.86mg，1％)。HRMS(ESI+)算得C25H35N5O2：437.279075，实测437.279315。HPLC： Rf3.45分钟，95.6％纯度。 [1020] 实施例222 [1021] 6-({1-[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]哌啶-3-基}氨基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1022] [1023] 将中间体201(54.0mg，0.14mmol)溶解于DCM(4mL)中，加入TFA(1mL)。将反应混合物搅拌2小时。在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(20mL)与1M NaOH水溶液(20mL)之间分配。用NaOH将水溶液级分碱化为pH 14，用DCM(3×50mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM(5mL)中，加入1-(丙-2-基)哌啶-4-酮(40.0μl，0.27mmol)和NaBH(OAc)3(57.0mg，0.30mmol)。将反应混合物搅拌4天。再加入1-(丙-2-基)哌啶-4-酮(40.0μl，0.27mmol)和NaBH(OAc)3(57.0mg，0.30mmol)。将反应混合物搅拌1天。用DCM(10mL)稀释反应混合物，并用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为白色胶状物的标题化合物(2.33mg，4％)。LCMS(ES+)：423.2[MH]+。HPLC： Rf 3.49分钟，99.2％纯度。 [1024] 实施例223 [1025] (3R)-1-[6-(4-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]-N-{[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]甲基}吡咯烷-3-胺 [1026] [1027] 将中间体206(75.0mg，0.18mmol)溶解于THF(5mL)中，将反应混合物冷却至0℃，加入LiAlH4(0.71mL，2.4M于THF中，1.77mmol)。将反应混合物在回流下加热5小时，并冷却至0℃。用Et2O(20mL)稀释反应混合物，用水(0.40mL)和1M NaOH水溶液(0.20mL)淬灭。加入MgSO4，将反应搅拌15分钟，过滤并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为米黄色固体的标题化合物(8.39mg，12％)。HRMS(ESI+)：算得C24H36N6：409.30742，实测409.30701。HPLC：Rf 3.61分钟，99.4％纯度。 [1028] 实施例224 [1029] (3R)-N-{[(3S)-1-环戊基吡咯烷-3-基]甲基}-1-[6-(4-环丙基-5-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-胺 [1030] [1031] 使用中间体210代替中间体206，与实施例223类似地制备实施例224，以得到作为白色固体的标题化合物(22.1mg，44％)。HRMS(ESI+)：算得C26H38N6：435.32307，实测435.32275。HPLC：Rf 3.58分钟，98.4％纯度。 [1032] 实施例225 [1033] (3R)-N-{[(3R)-1-环戊基吡咯烷-3-基]甲基}-1-[6-(4-环丙基-5-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]吡咯烷-3-胺 [1034] [1035] 使用中间体211代替中间体206，与实施例223类似地制备实施例225，以得到作为白色固体的标题化合物(30.3mg，46％)。HRMS(ESI+)：算得C26H38N6：435.32307，实测435.32291。HPLC：Rf 3.57分钟，98.4％纯度。 [1036] 实施例226 [1037] 6-[(3R)-3-({[(3S)-1-环戊基吡咯烷-3-基]甲基}氨基)吡咯烷-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1038] [1039] 将中间体213(300mg，0.82mmol)溶解于DCM(10.0mL)中，加入环戊酮(72.3mg，0.86mmol)和NaBH(OAc)3(347mg，1.64mmol)，将反应混合物搅拌过夜。用DCM(10mL)稀释反应混合物，用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(98.9mg，28％)。HRMS(ESI+)：算得C25H34N6O：435.28669，实测435.28659。HPLC：Rf 3.26分钟，100％纯度。 [1040] 实施例227 [1041] 6-[(3R)-3-({[(3R)-1-环戊基吡咯烷-3-基]甲基}氨基)吡咯烷-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1042] [1043] 使用中间体214代替中间体213，与实施例226类似地制备实施例227，以得到作为浅黄色固体的标题化合物(6％)。HRMS(ESI+)：算得C25H34N6O：435.28669，实测435.28711。HPLC：Rf 3.27分钟，100％纯度。 [1044] 实施例228 [1045] 6-[(3R)-3-{[(1-环戊基哌啶-4-基)甲基]氨基}吡咯烷-1-基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1046] [1047] 将 中 间 体215溶 解 于DCM(10mL)中，加 入 环 戊 酮(170mg，2.02mmol) 和NaBH(OAc)3(779mg，3.68mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用DCM(25mL)稀释并用水(10mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(510mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(10.9mg，1％)。HRMS(ESI+)：算得C26H36N6O：449.30234，实测449.30127。HPLC：Rf 3.25分钟，99.8％纯度。 [1048] 实施例229 [1049] [(1-环戊基吡咯烷-3-基)甲基](2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)胺 [1050] [1051] 在0℃下，将中间体225(150mg，0.37mmol)溶解于THF(5mL)中，逐滴加入LiAlH4(1.00mL，2.4M在THF中，2.40mmol)。将反应混合物在67℃加热18小时。将反应混合物冷却至-5℃，用水(98μl)、15％NaOH水溶液(98μl)和水(300μl)淬灭。用EtOAc(7×10mL)萃取残余物，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过反相HPLC和柱色谱纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(4.07mg，3％)。LCMS(ES+)：395.2[MH]+。HPLC：Rf 3.70分钟，99.6％纯度。 [1052] 实施例230 [1053] 1-环戊基-N-(2-{[6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)哌啶-3-胺 [1054] [1055] 将中间体228(226mg，0.53mmol)溶解于DCM(4mL)中，加入TFA(1mL)，将反应混合物搅拌3小时。在真空中除去溶剂，用MP-TsOHSPE盒使残余物脱盐，用MeOH中的7N氨洗脱。将残余物的一半溶解于DCM(5mL)中，加入环戊酮(19.8μl，0.22mmol)和NaBH(OAc)3(85.7mg，0.40mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用DCM(10mL)稀释，并用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的粗制标题化合物(13.2mg，17％)。 HRMS(ESI+)：算得C23H34N6：395.29177，实测395.29117。HPLC：Rf 3.63分钟，98.2％纯度。 [1056] 实施例231 [1057] N-{2-[(1-环戊基哌啶-3-基)氨基]乙基}-6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-胺 [1058] [1059] 使用中间体229代替中间体228，与实施例230类似地制备实施例231，以得到作为白色固体的标题化合物(22％)。HRMS(ESI+)：算得C24H36N6：409.30742，实测409.30695。HPLC：Rf 3.81分钟，96.7％纯度。 [1060] 实施例232 [1061] 1-环戊基-N-(2-{[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)哌啶-4-胺 [1062] [1063] 使用中间体230代替中间体229，与实施例231类似地制备实施例232，以得到作为白色固体的标题化合物(11％)。HRMS(ESI+)：算得C24H36N6：409.30742，实测409.30737。HPLC：Rf 3.78分钟，98.4％纯度。 [1064] 实施例233 [1065] N-{2-[(1-环戊基吡咯烷-3-基)氨基]乙基}-6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-胺 [1066] [1067] 使用中间体231代替中间体228，与实施例230类似地制备实施例233，以得到作为灰白色固体的标题化合物(11％)。HRMS(ESI+)：算得C22H32N6：381.27612，实测381.27554。HPLC：Rf 3.74分钟，98.5％纯度。 [1068] 实施例234 [1069] 6-[(2-{[1-(丙-2-基)氮杂环庚-4-基]氨基}乙基)氨基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1070] [1071] 使用中间体232代替中间体228，并且使用丙酮代替环戊酮，与实施例230类似地制备实施例234，以得到作为无色胶状物的标题化合物(18％)。HRMS(ESI+)：算得C22H32N6O：396.26376，实测396.26423。HPLC：Rf 3.35分钟，95.1％纯度。 [1072] 实施例235 [1073] 1-[(2R)-丁-2-基]-N-(2-{[6-(4-乙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)哌啶-4-胺 [1074] [1075] 将中间体217(168mg，0.73mmol)溶解于DCM(3mL)中，加入(R)-1-仲丁基-哌啶-4-酮(169mg，1.09mmol)和NaBH(OAc)3(308mg，1.45mmol)。 [1076] 将反应混合物搅拌过夜，用DCM(10mL)稀释，并用水(5mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(66.7mg，25％)。HRMS(ESI+)：算得C21H34N6：371.29177，实测371.29163。HPLC：Rf 3.52分钟，99.5％纯度。 [1077] 实施例236 [1078] N-(2-{[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)-1-(丙-2-基)哌啶-4-胺 [1079] [1080] 使用中间体218代替中间体217，并且使用1-(丙-2-基)哌啶-4-酮代替(R)-1-仲丁基-哌啶-4-酮，与实施例235类似地制备实施例236，以得到作为白色固体的标题化合物(9％)。HRMS(ESI+)：算得C22H34N6：383.29177，实测383.29147。HPLC：Rf 3.60分钟，97.2％纯度。 [1081] 实施例237 [1082] N-(2-{[3-(环戊基氨基)丙基]氨基}乙基)-6-(5-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-胺 [1083] [1084] 使用中间体235代替中间体225，与实施例229类似地制备实施例237，以得到作为淡黄色胶状物的标题化合物(17％)。HRMS(ESI+)：算得C21H32N6：369.27612，实测369.27597。HPLC：Rf 3.62分钟，99.3％纯度。 [1085] 实施例238 [1086] 6-[甲基(2-{甲基[1-(丙-2-基)氮杂环庚-4-基]氨基}乙基)氨基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1087] [1088] 将中间体220(163mg，0.64mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入中间体236(299mg，1.93mmol)和NaBH(OAc)3(880mg，3.21mmol)。将反应混合物搅拌3天，用DCM(20mL)稀释，并用饱和Na2CO3水溶液(20mL)淬灭。用DCM(2×15mL)萃取水溶液级分，干燥(MgSO4)合并的有机级分，并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(2.49mg，1％)。HRMS(ESI+)：算得C24H36N6O：424.29506，实测424.29622。HPLC： Rf 3.43分钟，100％纯度。 [1089] 实施例239 [1090] 6-[(3-{[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]氨基}丙基)氨基]-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1091] [1092] 使用中间体221代替中间体220，并且使用1-(丙-2-基)哌啶-4-酮代替中间体236，与实施例238类似地制备实施例239，以得到作为黄色固体的标题化合物(1％)。HRMS(ESI+)：算得C22H32N6O：396.26376，实测396.26402。HPLC：Rf 3.38分钟，98.3％纯度。 [1093] 实施例240 [1094] 6-(4-{1-[(2-甲基苯基)甲基]氮杂环庚-4-基}哌嗪-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1095] [1096] 将中间体238(250mg，0.30mmol)溶 解于MeCN(20mL)中，加 入K2CO3(220mg，1.58mmol)和2-甲基苄基溴化物(50.0mg，0.29mmol)。将反应混合物在50℃加热3小时，在真空中除去溶剂。将残余物在DCM(100mL)与水(50mL)之间分配，用盐水(50mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中除去溶剂。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(0.050g，38％)。HRMS(ESI+)：算得C29H36N6O：484.29506，实测 484.29613。HPLC：Rf 3.86分钟，98.9％纯度。 [1097] 实施例241 [1098] 6-(4-{1-[(2-氯-4-氟苯基)甲基]氮杂环庚-4-基}哌嗪-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1099] [1100] 将中间体238(50.0mg，0.53mmol)溶解于DCM(20mL)中，加入2-氯-4-氟苯甲醛(170mg，1.05mmol)和NaBH(OAc)3(0.56g，2.63mmol)。将反应混合物搅拌96小时，用DCM(50mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(75mL)、盐水(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(0.060g，23％)。HRMS(ESI+)算得C28H32ClFN6O：522.231016，实测522.233146。HPLC：Rf 3.91分钟，100％纯度。 [1101] 实施例242 [1102] 6-{4-[1-(丙-2-基)氮杂环庚-4-基]哌嗪-1-基}-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1103] [1104] 将中间体237(71.0mg，0.15mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入TFA(1mL)，将反应混合物搅拌18小时。在真空中除去溶剂，将残余物溶解于DCM(10mL)中，加入丙酮(17.2mg，0.30mmol)和NaBH(OAc)3(157mg，0.74mmol)。将反应混合物搅拌7小时，用DCM(20mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(12.4mg，20％)。HRMS(ESI+)：算得C24H34N6O： 422.27941，实测422.28141。HPLC：Rf 3.35分钟，97.4％纯度。 [1105] 实施例243 [1106] 4-{4-[6-(5- 环 丙 基 -4- 甲 基 -1H- 咪 唑 -2- 基 ) 吡 啶 -2- 基 ] 哌嗪-1-基}-1-(丙-2-基)氮杂环庚烷 [1107] [1108] 使用中间体240代替中间体237，与实施例242类似地制备实施例243，以得到作为白色固体的标题化合物(49％)。HRMS(ESI+)：算得C25H38N6：423.32307，实测423.32147。HPLC：Rf 3.67分钟，99.6％纯度。 [1109] 实施例244 [1110] 6-(4-{[(2R)-4-(丙-2-基)吗啉-2-基]甲基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1111] [1112] 使用中间体252代替中间体237，与实施例242类似地制备实施例244，以得到作为白色固体的标题化合物(15％)。HRMS(ESI+)：算得C24H34N6O2：438.274324，实测438.275684。HPLC：Rf 3.51分钟，99.1％纯度。 [1113] 实施例245 [1114] 1-环戊基-4-{4-[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]哌嗪-1-基}氮杂环庚烷 [1115] [1116] 使用环戊酮代替丙酮，与实施例243类似地制备实施例245，以得到作为白色固体的标题化合物(28％)。HRMS(ESI+)：算得C27H40N6：449.33872，实测449.33856。HPLC：Rf 3.80分钟，纯度99.4％纯度。 [1117] 实施例246 [1118] 1-环戊基-N-(2-{[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)氮杂环庚-4-胺 [1119] [1120] 使用中间体233代替中间体240，与实施例245类似地制备实施例246，以得到作为白色固体的标题化合物(12％)。HRMS(ESI+)：算得C25H38N6：423.32307，实测23.32214。HPLC：Rf 3.78分钟，98.1％纯度。 [1121] 实施例247 [1122] {[(3S)-1-环戊基吡咯烷-3-基]甲基}(2-{[6-(5-环丙基-4-甲基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]氨基}乙基)胺 [1123] [1124] 使用中间体227代替中间体206，与实施例223类似地制备实施例247，以得到作为白色固体的标题化合物(8.77mg，8％)。HRMS(ESI+)：算得C24H36N6：409.30742，实测409.30582。HPLC：Rf 3.50分钟，98.2％纯度。 [1125] 实施例248 [1126] 6-(4-{[(2-氯苯基)甲基]氨基}哌啶-1-基)-N-(环丙基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [1127] [1128] 将中间体203(427mg，1.38mmol)和2-氯苯甲醛(193mg，1.38mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入NaBH(OAc)3(1.46g，6.88mmol)。将反应混合物搅拌16小时，用饱和Na2CO3水溶液(5mL)淬灭。用DCM(20mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(3×15mL)、盐水(15mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(22.9mg，4％)。HRMS(ESI+)：算得C22H27ClN4O：399.19462，实测399.19543。PLC：Rf 5.16分钟，100％纯度。 [1129] 实施例249 [1130] 6-(4-{[1-(丙-2-基)哌啶-4-基]氨基}哌啶-1-基)-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1131] [1132] 将中间体274(254mg，0.64mmol)溶解于DCM(8mL)中，加入TFA(2mL)，将反应混合物搅拌过夜。在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(20mL)与1M NaOH水溶液(10mL)之间分配。用NaOH将水溶液级分碱化为pH 14，用DCM(3×50mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，在真空中除去溶剂。将残余物溶解于DCM(6mL)中，加入1-(丙-2-基)哌啶-4-酮(78.0μl，0.53mmol)和NaBH(OAc)3(111mg，0.50mmol)。将反应混合物搅拌3天。再加入1-(丙-2-基)哌啶-4-酮(78.0μL，0.53mmol)和NaBH(OAc)3(111mg，0.50mmol)，将反应混合物搅拌过夜。用DCM(10mL)稀释反应混合物，用水(5mL)淬灭，用饱和Na2CO3水溶液(5mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(22.0mg，11％)。HRMS(ESI+)：算得C24H34N6O：422.27941，实测422.28129。HPLC：Rf 3.53分钟，100％纯度。 [1133] 实施例250 [1134] N-丁基-6-(4-{[4-(丙-2-基)吗啉-2-基]甲基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-甲酰胺 [1135] [1136] 使用中间体239代替中间体237，与实施例242类似地制备实施例250，以得到作为无色胶状物的标题化合物(19％)。HRMS(ESI+)：算得C23H39N5O2：417.310376，实测417.312286。HPLC：Rf 3.99分钟，100％纯度。 [1137] 实施例251 [1138] 6-{4-[(2-氯-4-氟苯基)甲基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-4-基)吡啶-2-甲酰胺 [1139] [1140] 将中间体83(256mg，0.86mmol)溶解于DCM(15mL)中，加入2-氯-4-氟苯甲醛(149mg，0.94mmol)和NaBH(OAc)3(907mg，4.28mmol)，将反应混合物搅拌18小时。用DCM(30mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(35mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(116mg，31％)。HRMS(ESI+)：算得C23H23ClFN5O：439.157516，实测439.157156。HPLC：Rf 4.40分钟， 100％纯度。 [1141] 实施例252 [1142] N-(环丙基甲基)-6-{4-[3-(1，2，3，4-四氢异喹啉-2-基)丙基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [1143] [1144] 将中间体81(100mg，0.36mmol)、K2CO3(75.6mg，0.55mmol)和中间体244(98.2mg，0.36mmol)溶解于MeCN(2mL)中，在70℃加热18小时。过滤反应混合物，用DCM(20mL)洗涤并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(28.4mg，17％)。HRMS(ESI+)：算得C27H37N5O：447.299811，实测447.298621。HPLC：Rf 4.18分钟，97.5％纯度。 [1145] 实施例253 [1146] N-(环丙基甲基)-6-{4-[3-(3，3-二氟吡咯烷-1-基)丙基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}吡啶-2-甲酰胺 [1147] [1148] 使用中间体245代替中间体244，与实施例252类似地制备实施例253，以得到作为无色胶状物的标题化合物(15.3mg，10％)。HRMS(ESI+)：算得C22H33F2N5O：421.265317，实测421.265627。HPLC：Rf 3.85分钟，98.8％纯度。 [1149] 实施例254 [1150] 6-{4-[2-羟基-3-(丙-2-基氨基)丙基]-1，4-二氮杂环庚-1-基}-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [1151] [1152] 将中间体246(206mg，0.51mmol)溶解于IPA(10mL)中，加入异丙胺(151mg，2.55mmol)，将反应混合物在回流下加热3小时。在真空中浓缩反应混合物，通过柱色谱纯化以得到作为白色固体的标题化合物(192mg，88％)。HRMS(ESI+)：算得C23H34N6O2： 426.274324，实测426.276264。HPLC：Rf 2.98分钟，98.3％纯度。 [1153] 实施例255 [1154] 1-[6-(4-环丙基-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基]-4-[4-(吡咯烷-1-基)环己基]-1，4-二氮杂环庚烷 [1155] [1156] 将中间体106(520mg，1.37mmol)和4-(吡咯烷-1-基)环己-1-酮(687mg，4.11mmol)溶解于DCM(10mL)中，加入NaBH(OAc)3(1.02g，4.80mmol)。将反应混合物搅拌过夜，倒入1M Na2CO3水溶液(25mL)中，并用DCM(3×25mL)萃取。干燥(MgSO4)合并的有机级分，在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为白色固体的标题化合物(31.0mg，5％)。HRMS(ESI+)：算得C26H38N6：435.32307，实测435.32434。HPLC：Rf 3.68分钟，99.7％纯度。 [1157] 实施例256 [1158] 6-[4-(4-叔丁基环己基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(吡啶-3-基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [1159] [1160] 将中间体134(100mg，0.28mmol)、3-(氨基甲基)-吡啶(45.1mg，0.42mmol)、HBTU(106mg，0.28mmol)和DIPEA(108mg，0.83mmol)溶解于DMF(2mL)中，搅拌4小时。在真空中除去溶剂，通过反相HPLC纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(2.87mg，2％)。HRMS(ESI+)：算得C27H39N5O：449.315461，实测449.316351。HPLC：Rf 4.77分钟， 99.2％纯度。 [1161] 实施例257 [1162] N-(吡啶-4-基)-6-(4-{4-[2-(三氟甲基)吡咯烷-1-基]环己基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-甲酰胺 [1163] [1164] 将中间体83(100mg，0.34mmol)、4-(2-三氟甲基-吡咯烷-1-基)-环己酮(98.9mg，0.42mmol)和NaBH(OAc)3(356mg，1.68mmol)搅拌7天。用DCM(15mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(25mL)、盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为浅黄色胶状物的标题化合物(5.67mg，3％)。HRMS(ESI+)： 算得C27H35F3N6O：516.282444，实测516.281974。HPLC：Rf 4.11分钟，99.2％纯度。 [1165] 实施例258 [1166] 6-[4-(3-{[(2-氯苯基)甲基]氨基}丙基)-1，4-二氮杂环庚-1-基]-N-(环丙基甲基)吡啶-2-甲酰胺 [1167] [1168] 将中 间体253(200mg，0.43mmol)和 单水 合肼(27.8mg，0.87mmol) 溶解 于EtOH(20mL)中，将反应混合物搅拌6小时。在真空中除去溶剂，加入2-氯苯甲醛(122mg，0.87mmol)、DCM(10mL)和NaBH(OAc)3(459mg，2.17mmol)。将反应混合物搅拌18小时。 用DCM(50mL)稀释反应混合物，用饱和Na2CO3水溶液(40mL)、盐水(30mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(13.2mg，7％)。HRMS(ESI+)：算得C25H34ClN5O：455.245188，实测455.245878。HPLC：Rf 4.36分钟，99.1％纯度。 [1169] 实施例259 [1170] 6-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-甲腈 [1171] [1172] 将实施例136(50.0mg，0.12mmol)溶解于THF(1mL)中，将反应混合物冷却至-5℃，加入三氟乙酸酐(19.8μl，0.14mmol)和Et3N(39.0μl，0.28mmol)。将反应混合物搅拌5小时，在真空中浓缩，用DCM(20mL)稀释，用饱和Na2CO3水溶液(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色固体的标题化合物(12.4mg，26％)。HRMS(ESI+)：算得C23H28ClN5：409.203324，实测409.203394。HPLC：Rf 4.32分钟，98.1％纯度。 [1173] 实施例260 [1174] [6-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)吡啶-2-基]甲醇 [1175] [1176] 将中间体133(190mg，0.43mmol)溶解于MeOH(5mL)中，将反应混合物冷却至0℃。加入NaBH4(64.9mg，1.72mmol)，将反应混合物在60℃搅拌2天。再加入NaBH4(64.9mg， 1.72mmol)，将反应混合物在60℃搅拌3天。在真空中除去溶剂，将残余物在DCM(25mL)与饱和Na2CO3水溶液(20mL)之间分配。干燥(MgSO4)有机级分并在真空中浓缩。通过反相HPLC纯化残余物以得到作为灰白色固体的标题化合物(31.4mg，18％)。HRMS(ESI+)：算得C23H31ClN4O：414.218639，实测414.218919。HPLC：Rf 3.37分钟，100％纯度。 [1177] 实施例261 [1178] 1-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-4-(吡啶-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷[1179] [1180] 将中间体258(361mg，1.39mmol)溶解于DCM(15mL)中，加入2-氯苯甲醛(343μl，3.05mmol)和NaBH(OAc)3(1.18g，5.55mmol)，将反应混合物搅拌18小时。用DCM(30mL)稀释反应混合物，用水(15mL)淬灭。用饱和Na2CO3水溶液(15mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为无色胶状物的标题化合物(49.4mg，9％)。HRMS(ESI+)：算得C22H29ClN4：384.208075，实测384.208755。HPLC： Rf 3.34分钟，99.2％纯度。 [1181] 实施例262至264 [1182] 使用中间体259至261代替中间体258，与实施例261类似地制备了实施例262至264；参见下表25。 [1183] 表25：中间体259至261的还原烷基化反应 [1184] [1185] [1186] 实施例265 [1187] 2-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(环丙基甲基)-1，3-噻唑-4-甲酰胺 [1188] [1189] 将中间体264(100mg，0.38mmol)和中间体263(589mg，1.91mmol)溶解于DMA(2mL)中，使用微波(180℃，吸收高)将反应混合物加热20分钟。将反应混合物在DCM(40mL)与饱和Na2CO3水溶液(30mL)之间分配。用盐水(20mL)洗涤有机级分，干燥(MgSO4)并在真空中浓缩。将残余物溶解于DCM中，与异氰酸酯树脂一起搅拌3小时并过滤。在真空中除去溶剂，通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为灰白色固体的标题化合物(20.4mg，11％)。HRMS(ESI+)：算得C25H34ClN5OS：487.217259，实测487.217919。HPLC：Rf 4.14分钟，99.5％纯度。 [1190] 实施例266 [1191] 2-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-[3-(1H-咪唑-1-基)丙基]-6-甲基嘧啶-4-甲酰胺 [1192] [1193] 使用中间体265代替中间体264，与实施例265类似地制备实施例266，以得到作为黄色胶状物的标题化合物(2％)。HRMS(ESI+)：算得C29H39ClN8O：550.293536，实测550.293396。HPLC：Rf 3.70分钟，100％纯度。 [1194] 实施例267 [1195] 1-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-4-(1，3-噻唑-2-基)-1，4-二氮杂环庚烷 [1196] [1197] 将2-溴噻唑(234mg，1.43mmol)溶解于二氧六环(2mL)中，加入叔丁醇钠(175mg，1.82mmol)、Pd2(dba)3(47.6mg，0.05mmol)、Xantphos(84.9mg，0.10mmol)和中间体 263(400mg，1.30mmol)。将反应混合物在106℃加热3天，在真空中除去溶剂。将残余物溶解于DCM中，过滤并在真空中浓缩。通过柱色谱和反相HPLC纯化残余物以得到作为黄色胶状物的标题化合物(39.7mg，8％)。HRMS(ESI+)：算得C20H27ClN4S：390.164495，实测 390.164375。HPLC：Rf 3.38分钟，99.3％纯度。 [1198] 实施例268 [1199] 6-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(环丙基甲基)-4-甲基吡啶-2-甲酰胺 [1200] [1201] 使用中间体266代替2-溴噻唑，与实施例267类似地制备实施例268，以得到作为黄色胶状物的标题化合物(4％)。HRMS(ESI+)算得C28H38ClN5O：495.276489，实测495.277109。HPLC：Rf 4.51分钟，100％纯度。 [1202] 实施例269 [1203] 2-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(环丙基甲基)吡啶-4-甲酰胺 [1204] [1205] 使用中间体269代替中间体119，与实施例132类似地制备实施例269，以得到作为灰白色固体的标题化合物(12％)。HRMS(ESI+)算得C27H36ClN5O：481.260839，实测481.262979。HPLC：Rf 3.84分钟，98.8％纯度。 [1206] 实施例270 [1207] 6-(4-{1-[(2-氯苯基)甲基]哌啶-4-基}-1，4-二氮杂环庚-1-基)-N-(环丙基甲基)-5-甲氧基吡啶-2-甲酰胺 [1208] [1209] 使用中间体272代替中间体119，与实施例132类似地制备实施例270，以得到作为无色胶状物的标题化合物(6％)。HRMS(ESI+)算得C28H38ClN5O2：511.271403，实测511.273083。HPLC：Rf 4.37分钟，100％纯度。 [1210] 生物学测试 [1211] CXCR4功能性钙测定 [1212] 通过使用钙流量荧光成像读板仪(Fluorescent Imaging Plate Reader)FLIPR测定，以剂量依赖性方式测量化合物拮抗CXCR4活性的能力来常规地测试受试化合物的功能性活性。 [1213] 将人CXCR4转染的HEK293细胞培养于包含4.5g/L葡萄糖、L-谷氨酰胺、丙酮酸盐、50.μg/mL遗传霉素(geneticin)和250μg/mL潮霉素B的DMEM培养基(Dulbecco’s modified Eagle medium)中，并在37℃下保持在潮湿的、5％CO2的受控气氛中。每2至3天进行传代(subcultivation)。2+ 2+ [1214] 在汇合(confluence)时，使用不含Ca 和Mg 的PBS/0.02％(w/v)EDTA使细胞脱5 离(lifted)，以1000rpm离心3分钟并以2.5×10个细胞/mL重悬。将细胞以7500个细胞/孔布平板接种到384孔聚-d-赖氨酸包被的黑色的底部透明的板(Becton Dickinson)中。将该板在37℃、5％CO2下孵育过夜。在实验当天，用孵育缓冲液(包含2.5mM丙磺舒， 0.1％w/vBSA和10mM HEPES的HBSS，pH 7.4，在37℃下)洗涤细胞。洗涤之后，在37℃、 5％CO2下，向细胞加载2μM Fluo-4AM染料(分子探针)(包含0.48μg/mL普朗尼克酸(pluronic acid))保持60分钟。用孵育缓冲液彻底洗涤之后，在使用前将细胞在37℃下预孵育10分钟。 [1215] 使用联合的激动剂/拮抗剂方案来测量胞内钙浓度的变化。使用荧光成像读板仪(FLIPR)(Molecular Devices，Sunnyvale，CA，USA)将化合物(拮抗剂)添加到细胞板中。在化合物添加(10μl)之前每秒记录基础荧光10秒；然后每秒记录荧光1分钟；然后再每 6秒记录荧光1分钟。然后使用FLIPR添加SDFloc(EC50浓度)并且如上所述记录荧光。使用GraphPad Prism4.0(GraphPad Software Inc.，San Diego，CA)进行曲线拟合和参数估计。 [1216] 发现本发明的所有示例性化合物都是CXCR4的高效抑制剂(参见表26)。 [1217] 表26：CXCR4功能性活性 [1218] (A：＜20nM，B：20～100nM，C：100～500nM，D：500～1000nM) [1219] [1220] [1221] 体外测定中对HIV的效力 [1222] 已在两个体外测定中证明了实施例30的高效活性，表明受试化合物用于治疗HIV中的潜在用途。 [1223] 在HIV附着(attachment)测定中测试了实施例30，其检测阻断HIV-1IIIB(噬CXCR4)病毒附着到细胞的化合物。 [1224] 噬CXCR4HIV-1附着测定采用天然表达CXCR4的MAGI-CCR5细胞，其被改造为表达高水平的CD4和CCR5，并且包含基于HIV-1 Tat活化驱动β-半乳糖苷酶基因表达的一个拷贝的HIV-1LTR启动子。洗涤以除去药物和未结合病毒，然后用实施例30和噬CXCR4病毒HIV-1IIIB孵育细胞3小时。加入新鲜培养基，将所述板孵育48小时，之后将抗病毒效力测量为β-半乳糖苷酶报道基因表达的抑制，并且通过MTS染色监测细胞毒性。 [1225] 图1示出实施例30在噬CXCR4 HIV-1附着测定中的作用。更具体地，图1示出实施例30抑制噬CXCR4HIV-1的附着，IC50为40nM。 [1226] 还在HIV抗病毒测定中测试了实施例30，该测定检测通过靶向病毒生活周期而阻断HIV-1IIIB(噬CXCR4)复制的化合物。抗病毒测定采用天然表达CXCR4的MAGI-CCR5细胞，其被改造为表达高水平的CD4和CCR5，并且包含当HIV-1 Tat反式激活时驱动β-半乳糖苷酶基因表达的一个拷贝的HIV-1 LTR启动子。用实施例30和噬CXCR4病毒HIV-1IIIB孵育将细胞孵育48小时，然后作为对β-半乳糖苷酶报道基因表达的抑制而测量抗病毒效力，并且通过MTS染色监测细胞毒性。 [1227] 图2示出实施例30在HIV抗病毒测定中的作用。更具体地，图2示出实施例30抑制HIV-1的抗病毒活性，IC50为30nM。 [1228] 体内效力 [1229] 如通过对集落形成细胞集落(CFC)之频率的评价而进行的评估，该研究调查了单独的实施例30及其与G-CSF的组合诱导C57BL/6小鼠中白细胞的体内动员以及造血祖细胞从骨髓到外周血的能力。在注射后1小时后收集来自各测试组的外周血样本。由从各个小鼠收集的外周血确定白细胞计数(WBC)。评估多能(CFU-GEMM)系的克隆源性祖细胞。将外周血细胞以三个重复的培养物添加至 3434中用于平板接种(0.5～ 3×105个细胞/皿)。将培养物在37℃、5％CO2于潮湿的孵育器中孵育8天。使用倒置显微镜从合适平板接种的培养皿对GFU-GEMM集落数进行显微计数。 [1230] 图3示出与载剂对照组的小鼠相比，在用实施例30处理之后1小时，循环白细胞(WBC)显著增加。用G-CSF处理也导致与载剂组相比循环WBC升高。与单独用G-CSF处理的小鼠相比，用实施例30与G-CSF组合处理1小时后，WBC显著在升高。 [1231] 图4示出用实施例30和/或G-CSF处理后对造血祖细胞的评价。具体地，图4示出与单独用G-CSF处理相比，用实施例30与G-CSF的组合处理后1小时，多能混合造血祖细胞(CFU-GEMM/ml)显著升高。图3和4所示的结果支持实施例30和本发明化的合物通常在干细胞采集术中的用途，特别是干细胞采集术的治疗用途。 |
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