诸如皮炎之类的皮肤病是以红斑和疼痛或瘙痒为特征的皮肤发炎的状 况。皮炎是一组异质的皮肤病，且有各种各样的皮肤损伤产生，其中每一 种对于具体的变应原、疾病或感染来说都有可能是独一无二的。在许多情 况下食物或环境因素可能是触发器，但有许多皮肤病的起因或最初的触发 因素还是未知的，或者其可能由例如变应原或抗原引起但即使在阻止或中 断与变应原或抗原接触后仍会持续存在。皮炎可以是慢性的或急性的，而 且治疗常常是针对病因(如已知的话)或针对症状所特异的。
起因未知的皮肤病的一个例子是红斑痤疮。该病可以定义为皮肤炎症， 表现为有面部潮红和/或泛红的病史，主要伴随临床症状是脸部的红斑、浮 肿、毛细血管扩张、丘疹、脓疱和疙瘩。红斑痤疮目前还未能治愈，但一 般对此病的医学治疗包括口服诸如四环素之类的抗生素(1)和用诸如 0.75％和1.0％的甲硝基羟乙唑凝胶等进行局部治疗(2，3)。这两种治疗 都已被证实可以使中度至重度的红斑痤疮减轻。其它可选择的治疗方法包 括异维生素A酸(accutane)，它是一种合成的口服retinoid，已显示出 可以对不应答红斑痤疮普通治疗方式的病人产生效果(4，5)。
涉及特征相似的损伤的其它皮肤病症可能实际上具有不同的起因，因 此需要不同的常规治疗方法。不管皮炎的起因是什么，对于患者来说都是 非常不适的，且治疗通常是侵入性的并可能伴随着明显的副作用。
另一难以治疗并具有多种起因的皮肤病例子是接触性皮炎，它可以由 敏感患者的皮肤与外界刺激物/作用物接触而引发。例如，家畜常常感染一 种类型或另一种类型的皮炎。在狗身上最常见的是跳蚤诱发的皮炎，如果 不迅速治疗，它会发展成为更严重的皮肤感染。狗的超敏反应，尤其是对 跳蚤叮咬的超敏反应是造成动物需到社区兽医诊所诊治的主要原因。常规 上用包括杀虫剂在内的抗跳蚤产品以及局部皮质类固醇治疗这些动物。不 幸的是这些可选的治疗方法都不太理想，因为跳蚤对杀虫剂会产生抗性， 而延长施用皮质类固醇则带来常患库欣病(Cushing’s disease)的风险。一 种类似的人类皮肤病病可以由屋尘螨引起，是由于皮肤与能引发不利反应 的物质或作用物接触产生的皮肤病。
明显地，需要有另外可选择的治疗方案来治疗可能具有未知原因的皮 肤病、尤其是难治的或目前治疗方法对其来说具有明显局限性的皮肤病， 或由外部接触能引起不利皮肤反应的抗原、变应原或作用物而造成的皮肤 病。
因此需要改进对诸如上述的皮肤病的治疗方法，不管是预防性的还是 治疗性的。
本发明的一个目的就是克服或改进现有技术中的至少一个缺陷，或提 供有用的备选方案。
发明简述
现已出乎意料地发现某些益生细菌在以足够量施用于人或动物时，不 但具有下调炎症和/或变态反应的全身和外周标记的能力，还能治疗迄今为 止仍难以治疗或需用副作用显著和功效不稳定的疗法进行治疗的皮肤病。 此外，本发明的益生菌组合物对于治疗由于皮肤接触能引起超敏反应或其 它不利反应的物质或作用物而产生的皮肤病也是有效的。
本发明的一个方面提供了通过对所需患者施用治疗或预防有效量的益 生菌来预防或治疗皮肤病的方法。
本发明的另一方面提供了通过对所需患者施用有效量的益生菌来治疗 一种或多种皮肤病症状的方法。
优选的皮肤病是伴随有可见损伤的皮炎。更优选的是接触性皮炎、脂 溢性皮炎、光化性皮炎、由微生物感染引起的皮炎，等等。可用本发明方 法治疗的一个尤其优选的皮肤病具体实例是红斑痤疮。另一种可从本发明 治疗方法中获益的皮肤病症是湿疹。在除人之外的哺乳动物中，例如狗之 类的宠物中，可用本发明方法和组合物进行治疗的优选皮肤病症是跳蚤引 起的皮炎。然而，对于人体上出现的类似病症，例如屋尘螨引起的皮炎或 接触性皮炎也可用本发明的方法和组合物进行治疗。
优选的能用本发明组合物和方法治疗的皮炎症状选自瘙痒、疼痛和红 斑。
优选的益生菌是乳酸细菌，更优选的是发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)或嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)。最优选的发酵 乳杆菌菌株是VRI-002菌株(获自新南威尔士州大学，微生物保藏中心， 悉尼，新南威尔士州，澳大利亚；2002年12月12日也保藏于澳大利亚政 府分析实验室，AGAL，PO Box 385，Pymble NSW2073，澳大利亚，保 藏号为NM02/32959)。
本发明另一方面提供通过将有效量的益生菌施用于所需患者，使变态 反应和/或炎症的一种或多种免疫标记的水平在具有升高水平的所述标记 的皮炎患者中降低的方法。
优选的免疫标记选自变态反应或Th1和Th2细胞反应所特征性的免疫 球蛋白和/或细胞因子。例如，合适的标记可选自IgE、IL-4、IL-10、IL-12、 干扰素γ，等等。
优选地，益生菌是组合物，诸如食物制品、食品增补剂或药物制剂(如 药片、胶囊、粉末、液体制剂等)的一部分。益生菌或含所说益生菌的组 合物可通过任何已知方式施用，但优选口服的方式施用。益生菌或含所说 益生菌的组合物也可方便地局部施用，或者施用于粘膜表面，或直接施用 于患病的皮肤区域。
还优选的是在皮炎或其它皮肤病发作时或其后不久施用益生菌或含所 说益生菌的组合物。不过，正如实施例中所证实的，已建立的皮肤损伤和 疾病也可以用本发明方法进行有效的治疗。
益生菌或含所说益生菌的组合物可以与治疗皮炎时通常使用的一种或 多种药物活性剂联合施用。益生菌或含所说益生菌的组合物可以与其它治 疗方法同时施用(共施用)或者以任何次序依次施用。
优选的被治疗患者是那些高风险暴露于变应原和/或抗原或可引起皮 炎的其它作用物的患者，或者具有发生皮炎的家族史或遗传素因的个体。 当然，已呈现明显皮炎病征或患晚期皮炎的患者也可有利地利用本发明的 方法进行治疗。
术语“患者”和“个体”可交换使用，在本发明的上下文中其范围包 括能患上或已患上任何起因的皮炎的任何哺乳动物。当然，本发明治疗法 的优选施用对象是人、驯养的宠物和农畜。
优选施用于人患者的益生细菌量是至少1010个细菌。更优选的施用量 是约1010-约1012个细菌。此给药量可以是每天以单一剂量施用，或可以 分为两个或更多个剂量在一天内以不同的时间间隔施用。此治疗法可以短 期施用，如几天至几周，或可以长期施用，如数月或数年。也可以以终生 保养的方式施用。还可考虑间歇给药疗法，这可能涉及以低于每天施用的 频率施用，例如每周施用一次、两次或三次，或类似给药方案。
所需的剂量将随着皮炎的严重程度、疾病的起因、患者的年龄和其它 标准临床参数而变化，其中所述参数可以由本领域熟练技术人员通过常规 手段容易地确定。
优选每天施用益生菌或含所说益生菌的组合物。当然，也可每天施用 几次，或偶尔施用(例如每两天或三天施用一次)，这取决于皮炎治疗的 进展、其起因和严重程度。这些参数也是本领域熟练的技术人员所易于确 定的。
本发明再一方面提供了将益生菌用于制备治疗皮炎或其它皮肤病的药 物的用途。
本发明的另一方面提供了含治疗和/或预防有效量的益生菌以及药用 可接受载体、辅药、溶剂或赋形剂的皮肤病学组合物。
优选的益生菌是乳杆菌，更优选的是发酵乳杆菌。甚至更优选的是发 酵乳杆菌VRI-002菌株。
剂型优选片剂或胶囊，但也可以是粉剂、液体或糊剂/凝胶。
附图简述
图1.A狗和B狗应答口服发酵乳杆菌VRI-002在i)膜(panniculus)， ii)后背弓起(back arching)和iii)无意的搔抓方面的平均VAS值。(评 分：0-无反应，1-低反应性，2-中度反应性，3-高反应性)。
优选实施方案的描述
尽管可以预期口服益生菌可能有助于以食物为载体的变态反应的治疗 或GI道感染的治疗，但在考虑治疗与任何特定感染物或变应原的经口摄 入无关的皮肤病症时，这样的预期则不具有现实性和适用性。本发明的方 法和组合物是为了应用于治疗人和牲畜的各种形式皮肤病而开发的，所述 皮肤病包括皮炎，并尤其是起源或激发因素未知的皮肤病，或者难以治疗 或目前需用伴有显著副作用的疗法治疗的皮肤病。无论是用于治疗人还是 家畜，基本原理是相同的，而且有利的是，无论皮肤病或皮炎的起因如何， 本发明的疗法都可应用。
一般说来，包含诸如发酵乳杆菌VRI-002菌株之类益生细菌在内的制 剂是口服施用的。当施用患者为人时，可以以胶囊形式每日给药两次。通 常有效的日剂量在约108-1012个细菌的范围内，施用频率为每日一次或两 次。如果治疗狗和猫之类的动物，可将合适剂量掺入食物和/或伴随着食物 服用。
益生细菌可被配制成各种组合物以供兽医学上和制药学上使用，通常 为胶囊、片剂、粉剂、糊剂等。这些制剂可通过已知方法利用药物可接受 载体、赋形剂、溶剂或辅药进行配制。这些生产工艺和成份都是众所周知 的，并且在标准教科书和手册中有详细的描述，例如“Remington：制药 科学和实践(Remington：The Science and Practice of Pharmacy)”，1995， Mack Publishing Co.Easton，PA18042，美国，在此将其并入作为参考。
也可用通常众所周知的方法将益生细菌配制入食品或饲料中以及食品 或饲料增补剂中。这样的产品最适合施用于诸如驯养的宠物或农畜之类的 动物。
本发明的方法和组合物可用于：
(1)治疗以免疫系统的成分为基础或由其介导的皮肤病；
(2)特别是治疗多种病因的皮炎；
(3)治疗所有哺乳动物，包括人、驯养的宠物和农畜的皮炎，尤其 是治疗通过皮肤接触所引起的皮炎(如，接触性皮炎)；
(4)对哺乳动物进行预防性治疗来防止皮炎的发生或复发，尤其是 对暴露于可引起皮炎的环境中的患者或那些可能易患皮炎的患者进行预 防。
现参照非限性实施例对本发明进行更具体的描述。
实施例
实施例1： 发酵乳杆菌的制备。
典型地，发酵乳杆菌(VRI-002)在工业条件下生长在以下培养基中：
酵母提取物(20g)、蛋白胨(0.5g)、醋酸钠(1g)、磷酸氢二钠 (Na2HPO4.2H2O；0.2g)、磷酸二氢钾(0.7g)、硫酸镁(MgSO4.7H2O；0.7g)、 硫酸锰(MnSO4.H2O；0.06g)、氯化钙(0.05g)、硫酸亚铁(FeSO4.7H2O； 0.005g)、葡萄糖(30g)和水(加至1升)。细胞生长后，将其离心收获， 并按已知的成熟方法用常规的冷冻保护剂将浆液冷冻干燥。发酵乳杆菌的 制品可立即使用或保存备用。
实施例2： 病例研究1-治疗人患者的红斑痤疮。
用发酵乳杆菌(VRI-002菌株)治疗长期患红斑痤疮的男性患者。该 患者在开始用发酵乳杆菌治疗时已接受抗生素的治疗。
该患者每天接受两次治疗，早晚各服用两粒胶囊，每粒胶囊含7×109 个菌落形成单位(cfu)的发酵乳杆菌。每日总剂量是2.7×1010cfu的发酵 乳杆菌。
在见医前两周，患者停止服用除了发酵乳杆菌之外的所有其它药物。 见医时，在缺乏原开具用于治疗该病的抗生素的情况下，红斑痤疮已有了 明显好转。停服发酵乳杆菌，病症会恢复，但定时服用发酵乳杆菌就可将 其抑制住。
实施例3： 病例研究2-治疗狗身上跳蚤诱发的皮炎。
此研究的目的是确定口服以VRI-002命名的特定发酵乳杆菌益生菌菌 株是否能减轻由于皮肤与能引起或已知会引起皮肤不利反应的作用物发生 外部接触而诱发的皮肤病，如接触性皮炎等的临床病征和症状。用于此目 的的模型是狗身上由跳蚤诱发的皮炎。
选用生活于同一家庭的两条家养狗(一条为Neopolitan Mastif，另一 条为Boxer-cross，平均重量为20-56kg)进行研究。在实验开始时两条狗 均呈现出皮炎的许多临床病征，尤其是严重的瘙痒症，即抓痕、咬伤、尾 根部的脱毛(只有一条狗有此症状)。两条狗都被喂以相同的食物且一起 生活在同一条件下。用20mL注射器给狗饲喂10mL含发酵乳杆菌的UHT 脱脂奶(按实施例1所述制备发酵乳杆菌)，每天与晚餐一起施用，剂量 5×109cfu(一次性给药)，用药14天。在治疗前和停止治疗后3天收集10mL 血液以备IgE和细胞因子测定。
每晚餐后立即由合格的执业兽医进行临床检查。所检测的瘙痒症状参 数是膜应答、背弓起和不知觉的举起后腿和试图抓搔毛发。进行经验性的 直观模似评分(Visual analogue scale，VAS)，根据反应的严重程度将狗 的反应分为0-3级；0相当于无反应，直至3指示高反应性。
免疫学分析
用购买到的ELISA狗变态反应测试试剂盒(Greer实验室，美国)检 测血清中的跳蚤抗原特异性IgE抗体以及许多其它抗原(见表1)的抗体。
用RT-PCR进行外周血单个核细胞中IL-4、IL-5、IL-10和IFN-γ mRNA基因表达的半定量测定，此技术是众所周知且已有文献记载的技术 (Chamizo C等，2001；83：191-202)。在治疗前后取穿刺活检组织(2mm 厚的皮肤切片)进行组织学评价和细胞因子分析。按常规众所周知的程序 用苏木精和伊红(H&E)对组织切片进行染色以检测损伤处是否存在炎性 细胞。用RT-PCR测定细胞因子表达水平。
图1阐明了在研究的14天两条狗在所有瘙痒临床症状方面的个体临床 反应。正如在研究开始时可观察到的，两条狗都呈现瘙痒症的明显病征， 对于所有测量的症状，两条狗的VAS值都为3。在第4至第8天之间每条 狗都开始显示出各种临床症状的好转，到14天时两条狗都不再呈现所说的 临床病征。
变应原反应性IgE测试
用ELISA针对包括跳蚤在内的一系列普通变应原测试血清样品中的 IgE抗体。如下表1中所显示的，在整个表中，与基线水平相比，在用发 酵乳杆菌治疗后，两条狗的IgE变应原反应性全部都有显著的下降。尤其 是，治疗后抗跳蚤抗原的IgE抗体减少，这与被跳蚤感染的狗的常见临床 症状减轻是相关的。不受理论的限制，这可能说明与皮肤超敏反应相关的 Th2 T细胞应答的下调。
表1：抗常见变应原的IgE抗体                       BEAUJOLAIS   变应原           ％R   ％R                 基线值 测试值           JAEGER   ％R    ％R 基线值  测试值   狗牙根           77    63    -18％   石茅             80    66    -18％   早熟禾           57    52    -9％   黑麦草           67    63    -6％   鸭茅             74    62    -16％   黄花草           70    59    -16％   Yorkshire Grass  66    49    -26％   虉草             65    61    -6％   雀稗属种         68    63    -7％   prarie/broome                    63    59    -6％   grass   燕麦草           63    62    -2％   English Couch    70    62    -11％   酸模属/sorrell   66    59    -11％   松树             67    56    -16％   苋               56    52    -7％   藜               59    56    -5％   车前草           63    56    -11％   Short ragweed    55    50    -9％   Western ragweed  50    44    -12％   丝叶泽兰         66    56    -15％   屋尘螨           22    21    -5％   屋尘             17    9     -47％   跳蚤             48    36    -25％   金合欢           69    60    -13％   casurina         75    56    -25％   榆               58    44    -24％   刺柏             63    43    -32％   110    100    -9％   104    90     -13％   120    106    -12％   101    101    0％   103    90     -13％   105    90     -14％   109    90     -17％   99     100    1％   101    100    -1％   94     111    18％   86     110    28％   106    110    4％   109    117    7％   99     91     -8％   124    114    -8％   113    117    4％   127    117    -8％   104    109    5％   121    119    -2％   119    108    -9％   52     62     19％   33     38     15％   119    100    -16％   114    113    -1％   107    117    9％   119    119    0％   80     112    40％
  桦            51     42     -18％   橄榄          62     49     -21％   栎属          55     54     -2％   白千层属灌木  64     62     -3％   女贞          71     52     -27％   链格孢        48     46     -4％   曲霉          101    114    13％   分枝孢子菌    76     78     3％   132    124    -6％   116    108    -7％   94     111    18％   134    134    0％   113    130    15％   86     82     -5％   112    101    -10％   83     79     -5％
从此研究的结果中可见通过在狗饲料中喂食发酵乳杆菌对于治疗这种 形式的皮炎是有效的，尤其是对解决瘙痒症的临床症状是有效的。
实施例4： 病例研究3-痤疮的治疗。
分别治疗两个生活于同一家庭、患痤疮的十几岁(13岁)同卵双生的 男性双胞胎。对双胞胎A每日例行施用含发酵乳杆菌VRI 002的胶囊两粒 (1010cfu/粒胶囊)，而双胞胎B未被施用发酵乳杆菌。两人饮食相同并具 有相似的日常生活。在研究期间(4个月)，注意到与双胞胎B相比，双 胞胎A在前额和鼻子上有明显较少的痤疮。由于痤疮范围和严重程度的差 异，中断了研究并对双胞胎B也施用了发酵乳杆菌胶囊。
实施例5： 湿疹的治疗。
病例研究4：
患者：两岁半的女孩：
●患湿疹已6个月
●肘和膝关节发炎，臀部发炎，并且易哭
●已接受了2年的4个疗程抗生素治疗
●没有定期的排便(每3天)
●饮食：非常高的小麦(食用面糊、面包)、奶制品(每天两瓶牛奶)、 西红柿
开始口服发酵乳杆菌VRI-002，剂量为早晚各半粒胶囊。在治疗的第 一周母亲注意到其病情有所改善。两周后跟踪调查：
●膝和肘关节处的湿疹几乎完全消失
●臀部不再有湿疹
●湿疹第一次出现在上胸椎处
●处理：继续服用发酵乳杆菌3个月
病例研究5：
43岁的男性湿疹患者，左手手掌皮肤上有发炎斑。约13年前被诊断 为湿疹。用皮质类固醇膏等治疗几年。
用发酵乳杆菌VRI 002进行治疗，始于每天2粒胶囊(1010cfu/粒胶囊)， 持续3个月。未施用其它疗法。服用发酵乳杆菌1周后皮肤损伤几乎完全 消去。在指甲和GI道也报道了良好的效果。
病例研究6：
患湿疹的18个月大的孩子(女性)，症状为在右膝后面有直径约3cm 的皮肤红肿区域。出生后不久就出现此损伤，并引起明显的刺激和诱发抓 搔。目前的治疗法包括施用皮质类固醇膏。
停止施用皮质类固醇膏而开始施用发酵乳杆菌VRI 002，每天服用一 粒胶囊(1010cfu/粒胶囊)。未施用其它的治疗法。用发酵乳杆菌治疗一周 后损伤完全消去。未观察到发酵乳杆菌疗法的副作用。
病例研究7：
患者：自约9岁开始患湿疹的成年女性。随着年岁的增长病情缓慢加 重。患者还患有疑似的肠易激及念珠菌感染。她已尝试用多种药膏治疗其 湿疹。最初使用一周类固醇膏，然后发展到施用强类固醇膏Advantan软 膏。患者每月施用3-5小管药膏。当湿疹实在糟糕时，患者服用类固醇片 并尝试抗细菌药膏，但这只使情况变得更坏。皮肤科医生尝试对其施用紫 外光疗法。起初有一些疗效但从未消除湿疹且此疗法增加了疥疮。患者有 时施用抗组胺剂(每次用2-3种不同的类型)。约一个月后，抗组胺剂需 循环成每次一种时，它们变得无效。一度皮肤病医生诊断其为感染性湿疹 并建议病人入院治疗。他们试图使用免疫抑制剂，但被患者拒绝。没有实 施其它的辅助和治疗。
患者开始施用发酵乳杆菌疗法，每天早晚各6粒胶囊(2×109-10×109cfu 发酵乳杆菌/粒胶囊)。
治疗约一周后湿疹的严重程度有了显著的改善。尽管治疗未连续，但 在治疗后的第一个月里湿疹几乎完全消除。起始治疗后3个月，患者不再 需要进一步的发酵乳杆菌治疗。
尽管已参照具体实施例对本发明进行了描述，但本领域的熟练技术人 员将理解本发明可以以许多其它形式来具体实行。
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