含唾液酸的肠代乳品的组合物和配制方法

(1)发明领域：

本发明总的来说涉及含有唾液酸的婴儿和儿童营养代乳品 (formula)和制备这种代乳品的方法。

(2)相关技术的描述：

唾液酸(N-乙酰神经氨酸或NANA)是人母乳的天然存在的组分， 发现在母乳中它与各种寡糖和糖蛋白结合。虽然人母乳中含有大量的 唾液酸，但是大多数婴儿代乳品含的唾液酸小于初乳中发现的唾液酸 的25％。此外，代乳品中70％的唾液酸是与糖蛋白结合的，与人母 乳不同，其中75％的唾液酸与寡糖结合。参见Heine，W.等， Monatsschr Kinderheilkd 141：946-50(1993)，Wang，B.等，Am J Clin Nutr 74：510-5(2001)和Nakano，T.等，Acta Paediatr Taiwan 42：11-17 (2001)。母乳喂养的婴儿唾液酸的累积通常高于代乳品喂养的婴儿不 足为奇。参见Wang，B.等，J Pediatr 138：914-6(2001)。有证据提示唾 液酸在新生儿脑发育和功能中是重要的，在脑中唾液酸是神经节苷脂 的主要组分。参见Carlson，S.E.，Am J Clin Nutr 41：720-6(1985)， Morgan，B.和Winnick，M.，J Nutr 110：416-24(1980)，Svennerholm，L. 等，Biochim Biophys Acta 1005：109-17(1989)和Wang，B.等，Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol 435-9(1998)。

基于母牛乳的代乳品唾液酸含量通常低。在一项研究中，在几种 酪蛋白/乳清组合代乳品中唾液酸浓度小于200mg唾液酸/L。此外， 基于大豆蛋白的代乳品所含唾液酸的水平大大低于基于母牛乳的代 乳品。因此，无乳糖和基于大豆蛋白的代乳品都将显示极低的唾液酸 含量。

有几个已知的各种缀合形式唾液酸的来源。这些包括但不限于游 离N-乙酰神经氨酸(或唾液酸)、寡糖唾液酸乳糖(sialyllactose)、含 唾液酸的神经节苷脂、和蛋白酪蛋白巨肽(macropeptide)(CMP)(也 称为糖巨肽(glycomacropeptide)(GMP)和酪蛋白糖巨肽 (caseinoglycomacropeptide)(cGMP))。

本领域已经提及向某些营养代乳品中添加唾液酸或唾液酸来 源。例如，美国专利6,506,422公开了一种特定的营养代乳品，其含 有酪蛋白糖巨肽和免费赠送的除苯丙氨酸之外的必需氨基酸，用来给 罹患苯丙酮尿症的患者施用。没有提及婴儿代乳品中发现的唾液酸的 水平。

美国专利6,270,827公开了含有人乳蛋白或重组宿主抗性因子的 制剂，其中之一是重组人κ-酪蛋白，以补充合成的婴儿代乳品。

美国专利4,762,822公开了N-乙酰神经氨酸或含有唾液酸的神经 节苷脂在婴儿代乳品中保护新生儿不受产生胃肠疾病的生物危害的 用途。

国际专利申请WO 01/60346 A2公开了一种营养制剂，其含有寡 糖低聚果糖(oligofructose)和唾液酸乳糖作为益生元物质以促进肠 中可以与婴儿代乳品结合使用的双歧杆菌的生长。

尽管在现有技术中提及唾液酸和唾液酸来源在婴儿代乳品中的 用途，但有用的是提供唾液酸量提高至类似于母乳中量的婴儿代乳 品，和特别是，提供营养全面的婴儿代乳品。此外，有用的是提供唾 液酸量提高，同时还提供类似于母乳的氨基酸谱的婴儿代乳品。

                      发明概述

简言之，本发明涉及含唾液酸浓度提高的cGMP的新婴儿代乳 品。

本发明还涉及含唾液酸浓度提高和苏氨酸水平降低的cGMP的 新婴儿代乳品。

本发明还涉及生产婴儿代乳品的新方法，其包括将唾液酸浓度提 高的cGMP与足以提供营养全面的代乳品的蛋白质、碳水化合物和 脂类来源混合。

因此，已发现本发明提供了唾液酸量提高至类似于母乳中量的婴 儿代乳品，和特别是，营养全面的婴儿代乳品，还提供了唾液酸量提 高，同时还提供类似于母乳的氨基酸谱的婴儿代乳品，和特别是，苏 氨酸含量降低的婴儿代乳品。

                  优选实施方案详述

现在详细参考本发明的实施方案，下面阐述其中一个或多个实 例。以解释本发明的方式提供每个实例，而不限制本发明。事实上， 可以在不背离本发明的范围或精神的情况下对本发明做出各种修改 和变化，这对本领域技术人员来说是显而易见的。例如，被说明或描 述为一个实施方案的部分的特征可以用在另一方实施方案上以产生 更进一步的实施方案。

因此，本发明意欲包括这种落入所附权利要求和它们等同方案的 范围内的修改和变化。本发明的其他目的、特征和方面公开于下列详 述中或由它们可显而易见。本领域普通技术人员理解本讨论仅仅是示 例性实施方案的说明，并且没有意欲限制本发明的更宽泛方面。

已经发现某些唾液酸水平提高的基于cGMP的产品可用于生产 唾液酸含量提高的婴儿代乳品。这些代乳品适于维持婴儿和儿童和正 常生长和发育。具体而言，新代乳品包括唾液酸水平提高的一种营养 适当的唾液酸来源或来源组合。设计代乳品中的唾液酸水平模拟0-12 个月哺乳时间段中母乳中发现的总唾液酸。

本发明的某些创新方面包括新的基于cGMP的产品的用途，其所 含唾液酸水平高于现在市场上可买到的cGMP产品中正常发现的。 根据各种来源成分的唾液酸含量，这些新产品可以单独或联合使用， 以达到模拟母乳中发现的唾液酸水平。

本发明涉及有和没有乳糖的基于乳蛋白的代乳品、非基于乳的代 乳品的组合物和配制方法，所述非基于乳的代乳品包括基于大豆蛋白 的代乳品、氨基酸代乳品和稻蛋白代乳品，它们含有浓度可与人乳中 发现的唾液酸相比较的唾液酸。本发明的性质和新颖性包括恰当选择 含有唾液酸的成分以达到用于特定婴儿和儿童的代乳品的适当唾液 酸水平和适当的营养物。

例如，在含有乳糖的基于母牛乳蛋白的代乳品中，这种组合物中 补充的唾液酸可以来自一种来源或来源的组合，尤其是游离唾液酸 (神经氨酸)、3′-唾液酸乳糖、6′-唾液酸乳糖或其他含唾液酸的寡糖， 和酪蛋白糖巨肽(cGMP)或其他含唾液酸的乳蛋白级分，包括乳清蛋 白。本发明中使用的唾液酸乳糖缀合物可以替换这些制剂中通常使用 的部分乳糖，而酪蛋白糖巨肽(cGMP)和其它乳蛋白级分可以替换代 乳品的部分蛋白级分。在无乳糖，也无乳蛋白的代乳品的情况下，可 以使用游离唾液酸、其他含唾液酸的非母牛乳蛋白级分、或含唾液酸 的除乳糖外的寡糖。这些组合物的脂肪、维生素和矿物质浓度在其他 方面营养上适合于婴儿。这些制剂中唾液酸的总浓度将模拟母乳中发 现的并且一般地可以在约250mg/L(如在成熟人母乳中发现的)至约 1500mg/L(如在人初乳中发现的)的范围内。

本发明提供了营养全面的制剂，其包括一种或多种唾液酸来源， 其量模拟在人母乳中发现的唾液酸浓度。本发明另外提供了制备这种 制剂的方法，所述制剂为下列形式-有和没有乳糖的基于乳蛋白的代 乳品，非基于乳的代乳品，包括基于大豆蛋白的代乳品、氨基酸代乳 品和稻蛋白代乳品。

本发明方法中唾液酸的施用和掺入形式并不重要，只要以有效量 施用。一种方便的施用形式是将唾液酸添加至婴儿代乳品(包括用于 足月和早产婴儿的代乳品)、较大婴儿(follow-on)代乳品、学步儿童的 饮料、乳、酸乳酪或发酵产品。可供选择地，唾液酸可以以不是代乳 品喂养的部分的添加物施用，例如滴剂、囊剂或与其他营养物例如维 生素联合。唾液酸还可以添加至适于喂养给年幼儿童的其他营养物， 例如固体婴儿食物、果汁、明胶、曲奇饼、糖果等。婴儿和儿童营养 领域的普通技术人员可以开发出在营养物中施用唾液酸的其他实 例。所有这些唾液酸施用的形式，以及其它形式包括在本发明范围 内。

在本发明的一个实施方案中，唾液酸作为婴儿代乳品的部分施 用。本发明中使用的婴儿代乳品一般地是营养全面的并且含有适当类 型和量的脂类、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。脂类或脂肪 的量一般地可以从大约3至大约7g/100kcal变化。蛋白质的量一般 地可以从大约1至大约5g/100kcal变化。碳水化合物的量一般地可 以从大约6至大约16g/100kcal变化。蛋白质来源可以是本领域使用 的任何来源，且可以包括例如脱脂乳、乳清蛋白、酪蛋白、大豆蛋白、 水解蛋白和氨基酸。脂类来源可以是本领域使用的任何来源，例如植 物油，如棕榈油、豆油、棕榈油精油、玉米油、低芥酸菜子油、椰子 油、中链甘油三酯油、高油酸的向日葵油和高油酸的红花油。碳水化 合物来源可以是本领域已知的任何来源，例如乳糖、葡萄糖聚合物、 玉米糖浆固体、麦芽糖糊精、蔗糖、淀粉和稻糖浆固体。

本发明还涉及生产婴儿代乳品的新方法，其包括将唾液酸浓度提 高的cGMP与足以提供营养全面的代乳品的蛋白质、碳水化合物和 脂类来源混合。高唾液酸cGMP可以是本文论述的任何这种产品， 且蛋白质、碳水化合物和脂类来源，以及婴儿代乳品中正常发现的任 何其他有用和需要的组分都是本领域熟知的。

方便地，几种市场上可买到的婴儿代乳品可以用作唾液酸或唾液 酸来源添加剂的基础代乳品。例如，可以向Enfamil Lipil with iron(可从Mead Johnson & Company，Evansville，Indiana，美国获得) 补充有效量的唾液酸并用于实践本发明的方法。本文实施例中描述了 适合在本发明中使用的特殊婴儿代乳品。

制剂中来自全部蛋白质来源的总蛋白营养上应该适于婴儿，其一 般为每升大约12g至每升18g，在一些实施方案中，可以是大约每 升14g。制剂的总唾液酸可以为每升大约250至大约1500mg，在一 个实施方案中，为每升大约300至大约600mg。该制剂可以含有下 列含唾液酸的蛋白组分之一或组合：(1)最高达到100％的来自乳清蛋 白浓缩物的蛋白级分，如可从几个来源商业获得的，包括Davisco， New Zealand Milk或Formost Farms，其显示出每克蛋白大约20-30 mg唾液酸，并因此贡献每升代乳品大约140至大约560mg唾液酸； (2)最高达到100％的来自脱脂乳粉的蛋白级分，如可从几个来源商业 获得的，包括New Zealand Milk，其显示出每克蛋白大约2-10mg唾 液酸，并因此贡献每升代乳品大约27至大约139mg唾液酸；(3)最高 达到每升6g的酪蛋白糖巨肽(cGMP)或相关蛋白级分，如可从各种来 源商业获得的，其含大约81％蛋白和每克蛋白大约40至大约300mg 唾液酸，但是一般地大约40至60mg SA/gm蛋白，并因此贡献每升 代乳品大约194至大约1458mg唾液酸，但是一般地大约194至290 mg SA/升代乳品；和(4)最高达到大约6g/升的唾液酸水平提高的 cGMP级分。

当使用cGMP时，可以使用适当的加工从乳中提取酪蛋白糖巨 肽。例如，可以从由乳清蛋白浓缩获得的保留物(retentate)中提取 酪蛋白糖巨肽。这可以通过从保留物中至少部分除去乳糖，然后添加 乙醇以引起沉淀来进行。然后收集上清液并干燥以提供酪蛋白糖巨 肽。美国专利No.5,216,129，在此以不抵触本文描述的信息的程度全 部引入作为参考，其提供了这个方法的更详细说明。可供选择地， cGMP可以从商业来源购买到，例如Tatua Co-Operative Dairy Company Limited，Tatuanui，Morrinsville，新西兰，MD Foods Ingredients amba of DK-6920 Videbaek，丹麦或来自DMV International of NCB-laan 80，NL-5460 BA Veghel，荷兰。

已经发现对本组合物和方法有用的优选类型的cGMP是唾液酸 浓度提高的基于cGMP的产品。本文使用的术语“唾液酸浓度提高 的cGMP”意思指乳的含酪蛋白糖巨肽(cGMP)的级分，其已被处理 以使唾液酸水平增加，和其中唾液酸水平以任何量比处理前高。唾液 酸水平提高的cGMP产品在以下实施例7和8中描述。

一个这种产品，其实例在实施例7中描述，在本文可以称作“唾 液酸水平提高的cGMP”或“高唾液酸cGMP”。高唾液酸cGMP具 有大于大约60mg/gm蛋白的唾液酸含量。优选唾液酸含量大于大约 100mg/gm蛋白，更优选大于大约150mg/gm蛋白，然而更优选大于 200mg/gm蛋白的唾液酸含量。一般地，这个产品的干燥粉末产品的 蛋白含量为大约50重量％-60重量％，唾液酸含量为大约190-230 mg/gm蛋白或大约100-130mg/gm粉末。比较起来，正规cGMP干 燥粉末(例如，从Tatua Co-Operative Dairy Company Limited获得的 糖巨肽)含81重量％的蛋白，且唾液酸含量大约52mg/gm蛋白或42 mg/gm粉末。因此显然在粉末重量基础上，高唾液酸cGMP的唾液 酸含量已提高至超过正规糖巨肽粉末大约3倍，以及在产品的蛋白含 量基础上，超过大约4倍。为了对比目的，电渗析(ED)乳清粉末在干 燥基础上含大约14％蛋白，和含大约30mg唾液酸/gm蛋白，或大约 4.3mg唾液酸/gm粉末。

使用高唾液酸cGMP作为婴儿代乳品中蛋白质来源的优点是在 可以不替换过多量的代乳品中使用的常规蛋白质来源的情况下增加 代乳品的唾液酸含量。这个特征是有用的，因为它允许代乳品中蛋白 的氨基酸谱最小的破坏。

在高唾液酸cGMP的特殊实施方案中，该产品的氨基酸苏氨酸水 平低于新产品所来源的糖巨肽中的那个氨基酸水平。本文使用的这类 高唾液酸cGMP被称作“唾液酸水平提高和苏氨酸降低的cGMP”或 “苏氨酸降低的高唾液酸cGMP”。这类产品的实例在以下实施例8 中描述。

苏氨酸降低的高唾液酸cGMP的唾液酸含量大于大约60mg/gm 蛋白，且苏氨酸浓度低于大约15gm/16gm氮。优选唾液酸含量大于 大约100mg/gm蛋白，更优选大于大约150mg/gm蛋白，然而更优 选的是唾液酸含量大于200mg/gm蛋白，一般地，苏氨酸降低的高唾 液酸cGMP的唾液酸含量为大约85至大约150mg唾液酸(SA)/克粉 末，优选大约90至大约140mg SA/g粉末，其可以与高唾液酸cGMP 的唾液酸含量相比较。然而，苏氨酸降低的高唾液酸cGMP的苏氨 酸含量仅是商品化cGMP产品的大约四分之一。优选地，苏氨酸含 量低于大约10g/16g氮，更优选低于大约7gm/16gm氮，更优选低 于大约5g/16g氮，然而更优选低于大约4g/16g氮。用一种替换方 式表示，苏氨酸含量低于蛋白氨基酸总重量的大约8重量％，优选低 于大约6％，更优选低于大约4％，然而更优选低于大约3％。

由这类唾液酸提高的产品提供的优点是除唾液酸增加伴氨基酸 谱破坏降低之外，正如以上讨论的，婴儿代乳品中蛋白质来源的苏氨 酸水平可以最小化。为了降低或消除高苏氨酸尿症 (hyperthreoninuria)，或由饮食中高苏氨酸水平引起或加剧的其它 紊乱的可能性，这在一些实施方案中是需要的。

例如，本发明的婴儿代乳品可以被配制为唾液酸含量至少200 mg/升和总蛋白含量12至16克/升，其中不多于40重量％是由唾液 酸浓度提高的cGMP提供的。优选地，这种婴儿代乳品的总蛋白含 量为13至15克/升，其中不多于30重量％是由唾液酸浓度提高的 cGMP提供的，更优选地，该婴儿代乳品的总蛋白含量为13至15克 /升，其中不多于15重量％是由唾液酸浓度提高的cGMP提供的。

还例如，本发明的婴儿代乳品可以被配制为唾液酸含量至少400 mg/升和总蛋白含量13至15克/升，其中不多于15重量％是由唾液 酸浓度提高的cGMP提供的。

下列实施例描述本发明的示例性实施方案。考虑到本文公开的本 发明的说明书或实践，本文权利要求范围内的其他实施方案对于本领 域技术人员来说将是显而易见的。意图是认为说明书连同实施例仅是 示例性的，本发明的范围和精神由实施例之后的权利要求显示。在实 施例中，所有百分数都以重量基础给出，除非另有陈述。

                      实施例1

这个实施例阐明了适于用于本发明的添加唾液酸的商品化婴儿 代乳品中的营养物组分。

表1：婴儿代乳品的营养物信息(Enfamil Lipil with Iron) 营养物 (正常稀释) 每100卡 (5 fl oz) 蛋白，g 2.1 脂肪，g 5.3 碳水化合物，g 10.9 水，g 134 亚油酸，mg 860 维生素： A，IU 300 D，IU 60 E，IU 2 K，μg 8 硫胺素(维生素B1)，μg 80 核黄素(维生素B2)，μg 140 B6，μg 60 B12，μg 0.3 烟酸，μg 1000 叶酸(叶酸)，μg 16 泛酸，μg 500 生物素，μg 3 C(抗坏血酸)，mg 12 胆碱，mg 12 肌醇，mg 6 矿物质： 钙，mg 78 磷，mg 53 镁，mg 8 铁，mg 1.8 锌，mg 1 锰，μg 15 铜，μg 75 碘，μg 10 硒，μg 2.8 钠，mg 27 钾，mg 108 氯化物，mg 63

这个特殊代乳品的成分是：矿物质降低的乳清、脱脂乳、植物油 (棕榈油精、大豆、椰子和高油酸的向日葵油)、乳糖和小于1％：高 山被孢霉(mortierella alpina)油、对隐甲藻(crypthecodinium cohnii) 油、维生素A棕榈酸酯、维生素D3、维生素E乙酸酯、维生素K1、 盐酸硫胺素、盐酸维生素B6、维生素B12、烟酰胺、叶酸、泛酸钙、 生物素、抗坏血酸钠、肌醇、氯化钙、磷酸钙、硫酸亚铁、硫酸锌、 硫酸锰、硫酸铜、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸钾、氢氧化钾、亚硒酸 钠、牛磺酸、核苷酸(腺苷5′-一磷酸、胞苷5′-一磷酸、鸟苷5′-一磷 酸二钠、尿苷5′-一磷酸二钠)。

为使用这个特殊代乳品实践本发明，必须向表1所述组合物中添 加例如大约每升250mg至大约每升1500mg的含唾液酸的成分。唾 液酸的这个添加量将是蛋白总量的部分(每100卡大约2.1克总蛋白)

                      实施例2

这个实施例阐明了一种特殊的蛋白质来源组合，唾液酸总含量大 约每升250mg。表2所列成分将用于替换表1所述代乳品的蛋白质 组分。

                         表2：蛋白质来源组合物A 成分     mg SA/gm     蛋白   成分中   蛋白的％     g成分/L    g蛋白/L  mg SA/L 乳清蛋白 浓缩物     23.00   35.00     20.26    7.09  163.08 脱脂乳粉， 低热     6.37   34.00     15.38    5.23  33.31 cGMP     52.00   81.00     1.45    1.17  61.07

注意：表中“SA”是指唾液酸。

                      实施例3

这个实施例阐明了一种特殊的蛋白质来源组合，唾液酸总含量大 约每升360mg。表3所列成分将用于替换表1所述代乳品的蛋白质 组分。

                          表3：蛋白质来源组合物B 成分   mg SA/gm   蛋白   成分中   蛋白的％     g成分/L     g蛋白/L   mg SA/L 乳清蛋白 浓缩物   23.00   35.00     37.00     12.95   297.85 cGMP   52.00   81.00     1.45     1.17   61.07

注意：表中“SA”是指唾液酸。

                      实施例4

这个实施例阐明了一种特殊的蛋白质来源组合，唾液酸总含量大 约每升600mg。表4所列成分将用于替换表1所述代乳品的蛋白质 组分。

                   表4：蛋白质来源组合物B 成分   mg SA/gm   蛋白 成分中 蛋白的％     g成分/L   g蛋白/L mg SA/L 乳清蛋白 浓缩物   23.00 35.00     13.00   4.55 104.65 cGMP     52.00     81.00     12.00      9.72     505.44

注意：表中“SA”是指唾液酸。

                     实施例5

表5阐明了一种可能的营养全面婴儿代乳品，其唾液酸总含量大 约每升250mg。

                         表5：示例性含唾液酸的婴儿代乳品 成分     重量     每10000升     中的量 乳糖(95％固体)     573.000kg 脂肪掺合物     332.500kg 乳清蛋白浓缩物(36％蛋白，5.8％灰分)     202.578kg 脱脂乳固体(36％蛋白，52％CHO)     153.844kg 酪蛋白糖巨肽(cGMP，81.18％蛋白)     14.500kg 甘油单酯和甘油二酯     7.233kg 三代磷酸钙     6.520kg 单细胞花生四烯酸油     6.485kg 用于Enfamil AR Liquid的干燥维生素预混合物     5.250kg 抗坏血酸     2924.250g 肌醇     834.750g 玉米糖浆固体     654.938g 牛磺酸     582.750g 烟酰胺     119.438g 泛酸钙     44.730g 维生素B12，在淀粉中为0.1％     29.400g 生物素，1％研制剂     25.095g 盐酸硫胺素     13.913g 核黄素     10.238g 盐酸吡哆醇     8.138g 叶酸     2.363g 卵磷脂浓缩物     3.694kg 柠檬酸钾     3.350kg 单细胞二十二碳六烯酸油     3.243kg 用于Enfamil Powder的核苷酸预混合物     2.900kg 麦芽糖糊精，15DE     2552.290g 胞苷5’-一磷酸，游离酸     202.710g 尿苷5’-一磷酸，二钠盐     59.740g 腺苷5’-一磷酸，游离酸     47.357g 鸟苷5’-一磷酸，二钠盐     37.903g 角叉莱聚糖     2.826kg 氯化镁     1.657kg 氯化钙，二水合物     1.200kg 氯化胆碱     0.700kg 硫酸亚铁七水合物     0.682kg 柠檬酸钠，二水合物，粒状的     0.455kg 痕量矿物质预混合物w/亚硒酸盐研制剂     0.392kg 硫酸锌，一水合物     276.238g 亚硒酸钠研制剂，0.5％     65.907g 硫酸铜，粉末     29.510g 乳糖，研磨A     16.323g   成分     重量     每10000升     中的量   硫酸镁，一水合物     4.022g   维生素A、D、E、K预混合物，Enfamil Liquid     0.324kg   醋酸生育酚     160.882g   大豆油     139.612g   维生素A棕榈酸酯     17.253g   维生素D3浓缩物     5.715g   维生素K1，液体     0.538g   抗坏血酸     0.150kg   L-肉碱     0.150kg   脱氟水，适量至     10310.986kg   氢氧化钾     -

表6和表7以1)重量比重量、2)重量比体积和3)卡的百分比详述 了表5所述制剂的具体组分的含量。这个特殊制剂的比重是 1.0310986。

       表6：婴儿制剂组合物 组分     ％w/w     ％w/v 蛋白     1.38     1.42 脂肪     3.50     3.61 碳水化合物     7.20     7.43 灰分     0.37     0.38 总固体     12.45     12.84

表7：婴儿代乳品热量分配 组分     ％ 蛋白     8.38 脂肪     47.83 碳水化合物     43.79

                    实施例6

表8阐明了实施例5呈现的制剂每100卡以及每100毫升代乳品 的营养含量。

                   表8：婴儿制剂的营养含量     每100Cal     每100ml 卡，Cal     100     68 蛋白，g     2.1     1.42 脂肪，g     5.3     3.6 碳水化合物，g     10.9     7.4 亚油酸，mg     860     580 亚麻酸，mg     80     54 花生四烯酸，mg     34     23 二十二碳六烯酸，mg     17     11.5 维生素A，IU     300     200 维生素D，IU     60     41 维生素E，IU     2     1.35 维生素K1，mcg     12     8.1 硫胺素，mcg     120     81 核黄素，mcg     140     95 维生素B6，mcg     60     41 维生素B12，mcg     0.5     0.3 烟酸，mcg     1200     812 叶酸，mcg     16     10.8 泛酸，mcg     500     340 生物素，mcg     3     2 维生素C，mg     14     9.5 胆碱，mg     12     8.1 肌醇，mg     6     4.1 牛磺酸，mg     6     4.1 L-肉碱，mg     2     1.35 钙，mg     78     53 磷，mg     53     36 镁，mg     8     5.4 铁，mg     1.8     1.2 锌，mg     1     0.68 锰，mcg     26     17.6 铜，mcg     85     57 碘，mcg     15     10 钠，mg     27     18.3 钾，mg     108     73 氯化物，mg     63     43 硒，mcg     2.8     1.89 唾液酸，mg     37     25 钙/磷比率     -     - AMP等同物，mg(a)     0.5     0.34 CMP等同物，mg(a)     2.5     1.69 GMP等同物，mg(a)     0.3     0.20 UMP等同物，mg(a)     0.9     0.61 核苷酸等同物，mg(a)     4.2     2.84 TPAN-AMP，mg     --     -- TPAN-CMP，mg     --     -- TPAN-GMP，mg     --     -- TPAN-UMP，mg     --     -- 总TPAN，mg     --     -- TPAN-CMP/TPAN-GMP比率     --     --

注意：核苷酸和对应核苷的总和表示为核苷酸重量。

                      实施例7

这阐述了唾液酸水平提高的cGMP产品的生产。

将富含GMP的干酪乳清的级分通过使用阴离子层析而分级分离 以产生唾液酸提高的级分。这个产品显示出类似于当前市场上可买到 的GMP(可从Tatua Co-Operative Dairy Company Limited，Tatuanui， Morrinsville，新西兰获得)的氨基酸谱，但是含有的唾液酸含量是当前 GMP产品的1.5-3倍。

如果需要，唾液酸提高的级分可以通过例如电渗析被脱盐，并可 以干燥以产生干燥粉末产品，然后其可用于引入液体或干燥婴儿代乳 品混合物。这种产品是高唾液酸cGMP并且到本申请申请日时可以 从Tatua Co-Operative Dairy Company Limited获得，产品被命名为 X4738、X4739、X4740和X4741。表9中描述了那些材料的蛋白含 量、唾液酸含量和氨基酸谱。

表9：高唾液酸cGMP产品的四个实例的氨基酸谱和唾液酸含量。 氨基酸   高唾液酸cGMP产品样品   X4738     X4739     X4740     X4741     平均值     cGMP     粉末 ED 乳清 粉末 精氨酸   1.22     0.96     0.69     0.7     0.89     1.4 组氨酸   0.76     0.7     0.59     0.59     0.66     1 异亮氨酸   10.36     8.42     11.28     11.51     10.39     11.6 亮氨酸   4     3.36     3.19     3.21     3.44     4.6 赖氨酸   7.48     7.91     6.89     7.08     7.34     8.3 甲硫氨酸   2     2.04     1.63     1.63     1.83     1.5 胱氨酸   0.21     0.47     0.13     0.09     0.23     0.2 苯丙氨酸   1.54     5.88     1.96     2.08     2.87     1.8 酪氨酸   0.35     0.17     0.1     0.09     0.18     0.4 苏氨酸   13.13     15.16     17.18     17.57     15.76     15.9 色氨酸   0     0     0     0     0.00     0 缬氨酸   8.69     7.55     9.38     9.51     8.78     9.7 丙氨酸   6.8     6.58     6.41     8.53     6.58     6.6 天冬氨酸   10.61     12.12     9.93     10     10.67     11.1 谷氨酸   22.91     24.23     23.28     23.14     23.39     26.2 甘氨酸   1.37     1.46     1.31     1.34     1.37     1.5 脯氨酸   11.13     10.19     10.78     9.57   10.42   14.2 丝氨酸   8.14     9.66     8.74     9.06   8.90   8.1 总计   110.7     116.86     113.47     113.7   113.68   124.1 ％蛋白   51.88     49.92     57.87     60.05   54.93   81     14.31 mgSA/gm 蛋白   188.43     227.25     224.83     215.68   214.05   52     29.92 mgSA/gm 粉末   97.76     113.44     130.11     129.52   117.71   42.12     4.28 平均值 氨基酸水平表示为每16克氮的氨基酸克数。 cGMP粉末是来自Tatua Co-Operative Diary Company Ltd.的商品化糖巨肽。 ED乳清粉末是商品化电渗析乳清粉末 样品X4738-X4741是可从Tatua Co-Operative Dairy Company Limited，Tatuanui，Morrinsville， 新西兰获得的高唾液酸cGMP样品。

                      实施例8

这阐述了唾液酸水平提高和苏氨酸水平低的cGMP产品的生 产。

使富含GMP的干酪乳清的级分接受部分蛋白水解，随后使用阴 离子层析分级分离，以产生唾液酸提高和苏氨酸含量低的级分。这个 产品含有的唾液酸含量是当前可获得的GMP产品的1.5-3倍，但是 苏氨酸水平降低至起始GMP材料的大约四分之一。

如果需要，唾液酸提高、苏氨酸低的级分可以通过例如电渗析被 脱盐，并可以干燥以产生干燥粉末产品，然后其可用于引入液体或干 燥婴儿代乳品混合物。这种产品是苏氨酸降低的高唾液酸cGMP并 且到本申请申请日时可以从Tatua Co-Operative Dairy Company Limited，Tatuanui，Morrisnville，新西兰获得，产品被命名为W4733。 表10中描述了材料的蛋白含量、唾液酸含量和氨基酸谱。

表10：苏氨酸降低的高唾液酸cGMP的氨基酸谱和唾液酸含量。 氨基酸     苏氨酸降低的     高唾液酸cGMP     W4733     cGMP     粉末     ED乳清     粉末 精氨酸     2.3     1.4 组氨酸     0     1 异亮氨酸     13.1     11.6 亮氨酸     5.3     4.6 赖氨酸     3.2     8.3 甲硫氨酸     0.7     1.5 胱氨酸     0.1     0.2 苯丙氨酸     0     1.8 酪氨酸     0     0.4 苏氨酸     3.8     15.9 色氨酸     0     0 缬氨酸     16.3     9.7 丙氨酸     15.9     6.6 天冬氨酸     6.3     11.1 谷氨酸     38.9     26.2 甘氨酸     2.5     1.5 脯氨酸     16.9     14.2 丝氨酸     0     8.1 总计     125.4     124.1 ％蛋白     81     14.31 mgSA/gm蛋白     52     29.92 mgSA/gm粉末     138.03     42.12     4.28 (重复分析)     117.02 平均值     127.525 氨基酸水平表示为每16克氮的氨基酸克数。 cGMP粉末是来自Tatua Co-Operative Diary Company Ltd.的商品化糖巨肽。 ED乳清粉末是商品化电渗析乳清粉末 样品W4731、W4733和W4735是可从Tatua Co-Operative Dairy Comoany Limited，Tatuanui，Morrinsville，新西兰 获得的苏氨酸降低的、唾液酸提高的cGMP样品。

注意到新产品的苏氨酸水平是商品化cGMP的大约四分之一。因 此，据信苏氨酸降低的高唾液酸cGMP在婴儿代乳品中的应用可以 提供正常需要的大约14g蛋白/升的蛋白水平下高水平唾液酸的代乳 品，而且仍提供需要的氨基酸谱和低水平苏氨酸。

                      实施例9

这个阐明了唾液酸水平提高的cGMP级分在婴儿代乳品中的用 途。

唾液酸水平提高的cGMP产品可以以与乳清粉末或正常cGMP 粉末相同的方式在婴儿代乳品中用作蛋白质来源。例如，表11显示 了可以预期的婴儿代乳品的唾液酸含量，其中蛋白含量通过常规来源 提供。使用的cGMP粉末的量是有限的，以避免与需要的婴儿标准 谱所提供的蛋白氨基酸谱的过度偏差。

表11：常规来源提供的含蛋白的婴儿代乳品的唾液酸含量 蛋白质来源 mg唾液酸/ gm蛋白  蛋白  百分比 克蛋白/ 升  mg  唾液酸/升 乳清蛋白 浓缩物 23  35％ 6.82  156.77 脱脂乳粉， 低热 6.37  34％ 6.25  39.8 cGMP粉末 52  81％ 1.11  57.62 总计 14.17  254.18

这个制剂中使用的cGMP粉末可以被唾液酸水平提高的新 cGMP产品替代，如实施例7中的如上描述。表12表明当如此行事 时，制剂的唾液酸含量超过两倍，无蛋白的氨基酸谱的进一步破坏。

表12：含常规来源加唾液酸水平提高的cGMP产品提供的蛋白的婴儿 代乳品的唾液酸含量 蛋白质来源 mg唾液酸/ gm蛋白  蛋白  百分比 克蛋白/ 升  mg  唾液酸/升 乳清蛋白 浓缩物 23  35％ 6.82  156.77 脱脂乳粉， 低热 6.37  34％ 6.25  39.8 唾液酸提高 的cGMP产品 214  54.93％ 1.11  237.54 总计 14.17  434.12

如果唾液酸水平提高的cGMP粉末靠牺牲脱脂乳粉以上述水平 的两倍使用，则代乳品的唾液酸含量可以增加到表13中所示的水 平。

表13：含常规来源加唾液酸水平提高的cGMP产品提供的蛋白的婴儿 代乳品的唾液酸含量

蛋白质来源 mg唾液酸/ gm蛋白 蛋白 百分比 克蛋白/ 升 mg 唾液酸/升 乳清蛋白 浓缩物 23 35％ 6.82 156.77 脱脂乳粉， 低热 6.37 34％ 5.14 32.74 唾液酸提高 的cGMP产品 214 54.93％ 2.22 475.08 总计 14.18 664.59

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