富含瘤胃不稳定成分的颗粒的反刍动物饲料 |
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申请号 | CN201580013314.8 | 申请日 | 2015-03-11 | 公开(公告)号 | CN106102475A | 公开(公告)日 | 2016-11-09 |
申请人 | 巴斯夫欧洲公司; | 发明人 | A·特勒舍尔; U·奥伯弗兰克; | ||||
摘要 | 本 发明 涉及颗粒的 反刍动物 饲料 ,其为颗粒的形式或随后 粉碎 的形式,该颗粒的反刍动物饲料包含至少一种固体颗粒饲料组分与至少一种 瘤胃 不稳定成分(加入至混合物中)的混合物。本发明还涉及所述颗粒的反刍动物饲料的制备方法及其在用于修饰乳脂肪浓度的方法中的用途。 | ||||||
权利要求 | 1.颗粒的反刍动物饲料,其为颗粒形式,该颗粒的反刍动物饲料包含至少一种固体颗粒饲料组分与至少一种瘤胃不稳定成分的混合物,所述瘤胃不稳定成分已经被加入到该混合物中。 |
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说明书全文 | 富含瘤胃不稳定成分的颗粒的反刍动物饲料[0001] 本发明涉及颗粒的反刍动物饲料,其为颗粒的形式,该颗粒的反刍动物饲料包含至少一种固体颗粒饲料组分与至少一种瘤胃不稳定成分(已经被加入至混合物中)的混合物;本发明还涉及它们的制备方法及其在改变乳脂肪浓度的方法中的用途。 [0002] 发明背景 [0003] 反刍动物饲料添加剂可能被反刍生物体进行不期望的化学修饰。例如,在瘤胃微生物修饰多不饱和脂肪酸的背景下,可以观察到脂肪酸碳链上的双键含量和位置可能改变。通常,植物中的不饱和脂肪酸的双键被至少两个单键分隔开。微生物酶能够生成共轭双键系统,其中双键仅被一个单键分隔开。它们包括,例如共轭亚油酸异构体(共轭亚油酸,CLA)。它们主要由亚油酸(C18:2顺式-9,反式-12)开始,通过瘤胃细菌溶纤维丁酸弧菌(Butyrivibrio fibrisolvens)的亚油酸异构酶形成。主要的CLA异构体是顺式-9,反式-11-CLA(C18:2顺式-9,反式-11),其占总CLA含量的约75-92%。相反,乳脂肪降低异构体C18:2反式-10,顺式-12仅以0.03-1.5%的少量存在。这些异构体的一些通过吸收达到反刍动物的组织。在乳母牛的情况中,瘤胃修饰的脂肪酸也被运送入乳。乳脂肪的CLA含量是饲料依赖性非常大的并且约占0.3-1.1%(参见:Kirchgeβner, 第13版, DLG Verlag GmbH),在牧场饲喂的动物中甚至达到4%以上( 等人,2014;刊印中)。 [0004] 由于它们有效的生理学或药理学活性,CLAs受到集中研究。CLAs在细胞培养研究和动物试验中显示出癌症防御和抗炎活性。还已知共轭亚油酸异构体(CLA异构体)在反刍动物中抑制大量基因表达,这些基因负责合成脂肪酸和形成甘油三酯的循环脂肪酸摄入乳腺。特别地,上下文中已经证实C18:2反式-10,顺式-12CLA异构体特别减少脂肪。与减少乳脂肪含量相关的讨论的优点特别在于减缓代谢和增加乳产量。还报道了乳脂肪含量减少0.4-0.5%可以导致膳食产量增加达3-10%(参见Kirchgeβner,参见上文)。 [0005] 这就是为什么CLAs目前通常被加入到产乳饲料(Milchleistungsfutter)中的原因。尽管这些制品在饲喂中已经被批准,但是它们必须使用瘤胃保护的形式,因为未保护的CLAs在瘤胃中进一步被降解成无效的C18:1和C18:0脂肪酸。 [0006] 当被瘤胃微生物降解或化学修饰而失去其生化活性的这些或其它分子被施用于反刍动物时,它们由此必须得到保护以便抵抗瘤胃中这种不期望的微生物活性。文献描述了能够将瘤胃防护作用赋予给多不饱和脂肪酸(PUFAs)、例如CLAs的多种方法。这还从例如Elgersma等人在Fresh Herbage for Dairy Cattle,175-194,2006中的发现中显而易见,该文献描述了不饱和脂肪酸的生化还原率范围为82-98%。在通过瘤胃后,仍然可以检测到已经被摄入的仅约2-22%的多不饱和脂肪酸(PUFAs)。 [0007] 因此,文献(参见Kirchgeβner,参见上文)描述了多种形式的瘤胃保护的脂肪,其抵抗微生物降解和微生物修饰: [0008] 特别提及的是: [0012] d)通过工艺方法(例如用硬化的植物脂肪包裹)防止微生物酶的脂肪。 [0013] EP-A-1 100 489公开了用于减少乳牛乳脂肪含量的方法,其中将有效量的CLA施用于牛。作为防止被瘤胃细菌修饰的方式,提出了通过注射施用活性物质或以包衣形式提供它。 [0015] 图1显示了颗粒和挤出物(本发明的T1和T3)的多种体外温育的CLA制剂随时间的保留特性。 [0016] 发明概述 [0017] 本发明的目的在于提供用于将瘤胃不稳定的饲料组分转化成具有改善的瘤胃稳定性的剂型的简化途经。 [0019] 本发明的具体实施方案 [0020] a)通用定义 [0021] “颗粒”或“颗粒的形式”包含可通过自身已知的方式、借助于常规造粒装置、而且还有常规的挤出或膨胀装置可获得的固体饲料制品。通常,这类颗粒具有约0.5-2或0.8-1.5cm、例如约1cm的长度和范围为0.1-0.8或0.4-0.5cm的直径。这些术语还包括所谓的“粉碎的”颗粒,即通过机械力的作用转化成更小颗粒的颗粒。粉碎的目的通常在于使动物更易于摄取该颗粒,否则就是更好地分布于最终的饲料中。粉碎允许以目标方式减小粒径和增加颗粒数量,例如,得到颗粒混合物含量>50%,例如55-95或60-90或70-80%的颗粒具有范围为约3-6或4-5mm的直径。 [0022] “瘤胃不稳定成分”(纯物质,而且是天然或合成物质的混合物)包含在通过反刍动物瘤胃时可能发生化学修饰(化学经验式的修饰,例如,通过生化还原作用,和/或构型和/或立体化学改变)的化学化合物。通常,这是有机化学物质,特别是作为食品/饲料组分或食品/饲料添加剂具有重要性的有机化学物质。必须特别提及的那些是饱和或者单-或多不饱和羧酸,例如,具有至少6个碳原子的那些,例如下述的CS、PUFA、MUFA或CLA。必须/可以以瘤胃保护的形势施用的另外的饲料添加剂或饲料组分或单一饲料(Einzelfuttermittel)是氨基酸(特别是甲硫氨酸、赖氨酸等)、酶、胆碱和来自维生素类的其它活性物质。 [0023] “瘤胃不稳定混合物”或“瘤胃不稳定饲料混合物”包含至少一种“瘤胃不稳定”成分并且是瘤胃未保护的或不充分的瘤胃保护的,即如果饲喂和通过反刍动物瘤胃,则该成分可能暴露于如上所述的化学改变。 [0024] 在本发明的上下文中,“瘤胃稳定性”或“瘤胃保护作用”是指“瘤胃不稳定”成分通过上述“颗粒”形式被转化成“瘤胃不稳定性”降低状态,直到基本上完全瘤胃保护状态。这种改善的瘤胃稳定性或降低的瘤胃不稳定性可以以简易方式、通过使用试验部分中所述的试验方法(体外或体内)比较颗粒的或非颗粒的混合物中的成分的稳定性来测定。 [0025] “羧酸”(CS)特别是直链或支链、特别是直链饱和或者单-或多不饱和的,任选取代的C6-C30-单羧酸。饱和无支链脂肪酸的实例是己酸、庚酸、辛酸、壬酸、癸酸、十一酸、月桂酸、十三酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、棕榈酸、十七酸、硬脂酸、十九酸、花生酸、山嵛酸、二十四酸、二十六酸和三十酸。单不饱和脂肪酸的实例是棕榈油酸、油酸和芥酸。二不饱和脂肪酸的实例是山梨酸和亚油酸。三不饱和脂肪酸的实例是亚麻酸和桐酸。四-和多不饱和脂肪酸的实例是花生四烯酸、鱼泡酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸。取代的脂肪酸的实例是蓖麻酸((R)-12-羟基-(Z)-9-十八烯酸)。另外适合的脂肪酸是天然存在的脂肪酸,例如贡多酸 和神经酸。如果双键存在于脂肪酸中,则它们可以以顺式和反式形式存在。取代基优选自羟基和低级烷基,例如甲基和乙基。酮基或环氧基也可以存在于烃基中,作为实例,例如在斑鸠菊酸中。另外的官能团是环丙烷、环丙烯和环戊烯环,它们可以通过桥连脂肪酸(例如 和晁模酸)的烃基中的两个相邻的碳原子形成。 [0026] “PUFAs”是脂肪酸分子中具有至少两个共轭或非共轭C=C双键的多不饱和脂肪酸。可以提及的实例是:亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)((5Z,8Z,11Z,14Z,17Z)-二十碳-5,8,11,14,17-五烯酸;或C20:5(ω-3))和二十二碳六烯酸(DHA)((4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-二十二碳-4,7,10,13,16,19-六烯酸)或C22:6(ω-3))。 [0027] “MUFAs”是单不饱和脂肪酸,其可以以顺式或反式构型存在,例如油酸或异油酸。 [0028] 共轭亚油酸(CLA)是C18-单羧酸“亚油酸”的一组异构体,其为二不饱和的并且其两个双键位于9和12位上,并且由此是非共轭的。亚油酸也用缩写“C18:2顺式-9,顺式-12”命名。 [0029] “CLA”主要包括亚油酸的所有共轭的二不饱和异构体(C18:2顺式-9,顺式-12),其中碳链上的两个双键的位置可以向链末端移动或向羧基移动,并且其中共轭双键的立体化学还可以包含任意的变通实施方案(顺式/顺式、反式/反式、顺式/反式),其中“顺式/反式”包括两种顺序“反式-顺式”或“顺式-反式”,其中在每种情况中,这两种顺序的第一个提及的构型涉及最接近羧基的双键: [0030] 作为实例,可以涉及共轭亚油酸“C18:2顺式-9,反式-11”,如下所示: [0031] [0032] 因此,本文所用的名称顺式/反式-9,11-亚油酸、顺式/反式-8,10-亚油酸、顺式/反式-11,13-亚油酸和顺式/反式-10,12-亚油酸包括顺式-反式和反式-顺式异构体,换句话说: [0033] 顺式/反式-9,11-亚油酸包括:C18:2顺式-9,反式-11和C18:2反式-9,顺式11[0034] 顺式/反式-8,10-亚油酸包括:18:2顺式-8,反式-10和18:2反式-8,顺式10[0035] 顺式/反式-11,13-亚油酸包括:18:2顺式-11,反式-13和18:2反式-11,顺式13[0036] 顺式/反式-10,12-亚油酸包括:18:2顺式-10,反式-12和18:2反式-10,顺式12[0037] 类似地将其应用于亚麻酸,其为三不饱和(C18:3,顺式-9,顺式-12,顺式-15)及其顺式/反式异构体。 [0038] 上述有关物质的信息和这些物质的本文所述的用途主要涉及相应的纯物质,而且涉及天然或合成物质混合物,其包含这些物质的至少一种,例如至少一种PUFA或至少一种CLA。 [0040] 合成物质混合物是,例如,富含CLA的商购产品,例如BASF SE的 [0041] 必须提及的其它物质是上述羧酸(CS、PUFA、MUFA、CLA)的瘤胃不稳定衍生物,例如,特别是取代的衍生物。必须提及的实例是在羧酸的烃基上被例如羟基单-或多取代的化合物。必须提及的这类化合物的实例是:10-羟基-顺式-12-十八碳二烯酸。 [0042] b)具体实施方案 [0043] 本发明特别涉及如下实施方案: [0044] 1.颗粒的反刍动物饲料,为颗粒的形式(即相当小的颗粒,通过造粒、挤出、膨胀得到,还有粉碎形式,即通过随后粉碎颗粒、挤出物或膨胀物得到),该颗粒的反刍动物饲料包含至少一种固体颗粒饲料组分与至少一种瘤胃不稳定成分的混合物,所述瘤胃不稳定成分已经被加入到该混合物中(以纯的形式或者作为天然或合成物质混合物的组分)(瘤胃不稳定的),其中,特别地,混合用于与瘤胃不稳定成分一起造粒的各个、几种或全部混合物组分自身未显示任何或不足以显示在所造粒的混合物中的瘤胃稳定活性。特别地,例如在包含CLA的造粒混合物中,这类混合物组分完全不存在或仅以无效量存在,其在非颗粒的CLA混合物中带来了CLA的瘤胃稳定。在上下文中必须提及的实例是具有稳定活性的添加剂,它们存在于瘤胃稳定的商购CLA产品 中,例如,特别是大豆油、石膏或二氧化硅,其存在于本发明的饲料混合物中,完全未造粒或仅是非稳定量。 [0045] 用于制备饲料颗粒的混合物由此可以称作“瘤胃不稳定的”混合物,其仅与“瘤胃稳定性”比较而言,即其瘤胃不稳定性通过本发明的造粒、挤出或膨胀步骤降低。 [0046] 作为结果,本发明优选的情况是,在造粒前,无饲料混合物被加工成已经具有足够瘤胃稳定性的颗粒。例如,本发明由此不包含将瘤胃保护的成分混合物(例如CLA混合物或相当的组合物的混合物)加工成颗粒的反刍动物饲料。 [0047] 2.实施方案1的饲料,其中所述成分是脂肪或油,特别是脂肪酸(具有至少6个碳原子的羧酸)。 [0048] 3.上述实施方案任一项的饲料,其中所加入的瘤胃不稳定成分的量范围为占造粒混合物总重量的0.1-20、1-15、2-10或3-5%重量。 [0049] 4.上述实施方案任一项的饲料,其中所述成分选自具有至少6个碳原子的饱和和单-或多不饱和(特别是二不饱和)羧酸、至少两种具有至少6个碳原子的饱和和/或单-或多不饱和(特别是二不饱和)羧酸的混合物和包含至少一种具有至少6个碳原子的饱和或单-或多不饱和(特别是二不饱和)羧酸、例如C18:2或C18:3羧酸的物质混合物;也包括这类羧酸的取代的衍生物,例如羟基-取代的衍生物,例如10-羟基-顺式-12-十八碳二烯酸。 [0050] 5.上述实施方案任一项的饲料,其中所述成分包含至少一种多不饱和(特别是多不饱和)脂肪酸(PUFA),特别是具有共轭双键。 [0051] 6.实施方案5的饲料,其中所述多不饱和(特别是二不饱和)脂肪酸包括亚油酸的至少一种异构体。 [0052] 7.实施方案6的饲料,其中所述多不饱和脂肪酸是CLA。 [0053] 8.实施方案7的饲料,其中CLA选自: [0054] a)顺式/反式-9,11-亚油酸; [0055] 即C18:2顺式-9,反式-11和18:2反式-9,顺式11 [0056] b)顺式/反式-8,10-亚油酸; [0057] 即C18:2顺式-8,反式-10和18:2反式-8,顺式10 [0058] c)顺式/反式-11,13-亚油酸; [0059] 即C18:2顺式-11,反式-13和18:2反式-11,顺式13 [0060] d)顺式/反式-10,12-亚油酸; [0061] 即C18:2顺式-10,反式-12和18:2反式-10,顺式12 [0062] e)顺式/顺式-9,11-亚油酸; [0063] f)反式/反式-9,11-亚油酸; [0064] g)顺式/顺式-8,10-亚油酸; [0065] h)反式/反式-8,10-亚油酸; [0066] i)顺式/顺式-11,13-亚油酸; [0067] j)反式/反式-11,13-亚油酸; [0068] k)顺式/顺式-10,12-亚油酸; [0069] l)反式/反式-10,12-亚油酸;和上述提及的化合物的至少两种的混合物。 [0070] 9.实施方案8的饲料,其中CLA选自: [0071] a)9-顺式,11-反式-亚油酸(C18:2顺式-9,反式-11); [0072] b)10-反式,12-顺式-亚油酸(C18:2反式-10,顺式12);和 [0073] c)它们的混合物。 [0074] 10.用于制备上述实施方案任一项的颗粒的反刍动物饲料的方法,其中[0075] a.将至少一种固体颗粒饲料组分与根据上述定义的至少一种瘤胃不稳定成分混合; [0077] c.在挤出、膨胀或造粒装置、特别是造粒或挤出装置中,借助于压力作用压制任选处理的混合物,得到颗粒;和 [0078] d.将得到的颗粒任选冷却和/或进行最终的干燥工艺。 [0079] 11.改变由泌乳反刍动物产生的乳中的乳脂肪浓度的方法,其中给所述泌乳反刍动物提供有效量的实施方案1-9任一项的或根据实施方案10制备的颗粒的反刍动物饲料。 [0080] 12.实施方案11的方法,其中所述泌乳反刍动物选自母牛、山羊和绵羊。 [0081] 13.用于制备瘤胃不稳定成分的瘤胃保护的反刍动物饲料的方法,其中[0082] a.将至少一种固体颗粒饲料组分与至少一种瘤胃不稳定成分混合,得到所述成分与至少一种饲料组分的瘤胃不稳定混合物(即不显示出或仅显示出不充分的不稳定成分的瘤胃保护作用的混合物); [0083] b.任选处理得到的混合物; [0084] c.在造粒、挤出或膨胀装置中,借助于压力和任选蒸汽的作用压制任选处理的混合物,得到颗粒;其中颗粒的混合物与非颗粒的混合物相比显示出改善的成分的瘤胃稳定性(即显示出所述成分瘤胃不稳定性降低至优选基本上完全瘤胃保护);和 [0085] d.任选地将由此得到的颗粒冷却和/或进行最终的干燥工艺和任选随后粉碎。 [0086] 14.实施方案1-9之一的饲料,通过根据实施方案13的方法制备。 [0087] d)进一步的实施方案 [0088] d1)饲料颗粒的制备 [0089] 为了制备颗粒的饲料组合物,混合根据本发明配制的瘤胃不稳定成分任选与另外加入的常规动物饲料组分(例如产乳饲料)一起。选择成分的量,使得它例如范围为0.1-20、1-15、2-10或3-5%重量。此后,借助于适合的造粒机使饲料颗粒化。为了这一目的,通常通过经蒸汽(热蒸汽温度达95℃,例如饱和蒸汽)例如20-1240秒处理饲料混合物。可以通过饱和蒸汽的添加量控制造粒过程中的温度增加。不过,这种蒸汽处理也可以省略。 [0090] 颗粒化通常在商购可获得的造粒机(例如来自Bühler GmbH)中进行,可以将该造粒机设计为环型模具压制器。这里的滚筒将预先处理的物质混合物压过环型模具(滚筒与模具之间的间隙宽度例如为1mm)。取决于模具,由此可以制备直径约为2-12mm的颗粒。对于乳牛饲料,应用例如具有4-5mm的内径和40-50mm的槽长度的模具。当混合物通过模具压制时,以最高加工温度为主。在该阶段,可以达到约60-100℃的温度范围。 [0092] 或者,可以通过挤出或膨胀替代造粒(例如使用来自Kahl,Germany的饲料膨胀器)(参见例如,“Feed Manufacturing Technology IV”编辑:McEllhiney,Kansas State Univ.,Pub.,American Feed Industry Assoc,1994;Arlington,VA.,其中可以发现:Extrusion Cooking Systems,Bob Hauck等人,第131-139页;Wilson等人,1998,Journal of Poultry Science,77(增刊1):41)。然后可以粉碎这些工艺中的产物。 [0093] d2)应用 [0094] 可用于生产本发明颗粒的典型饲料组分包括Futtermittelverordnung(FMV;German Feed Regulation)的植物或动物来源的单一饲料,例如谷物副产物、小麦麸细糠、小麦麸;提取的粉、苹果渣、干糖浆化的甜菜浆、鱼粉、肉和骨粉;和/或FMV的单一矿物饲料,例如碳酸盐、磷酸盐、硫酸盐、丙酸盐。适合的其它饲料是谷物,例如小麦、黑麦、大麦、燕麦、玉米、粟或黑小麦;谷物副产物(研磨的副产物),例如麸、饲料、小麦饲料、细糠或小麦粗粉; 油生产中的副产物(提取的粉、榨出物、饼状物);糖生产中的副产物(糖蜜、干甜菜块、饲料用糖、果肉、马铃薯淀粉、玉米谷蛋白、小麦谷蛋白);发酵工业的副产物、啤酒谷物、酵母、麦芽、釜馏物;和动物和其它来源的食物,例如血粉、鱼粉、压制的葡萄汁、马铃薯蛋白质。 [0095] 必须特别提及的那些是小麦、谷粒玉米、大麦、燕麦;大豆;谷物粉,例如小麦或玉米粉、大豆粉、糖浆状甜菜块、小麦饲料、小麦粗粉、玉米谷蛋白饲料、提取的大豆粉、提取的油菜籽粉、啤酒谷物、谷物釜馏物、甜菜糖蜜、燕麦麸;糖,例如葡萄糖和糖醇,还有蛋白质组分,例如大豆浓缩物、鱼粉、谷蛋白例如玉米或小麦谷蛋白、油和脂肪,以及营养物制品,例如游离氨基酸、其盐、维生素(例如A、D、E)和痕量元素(例如Cu,为CuSO4)、矿物成分,例如碳酸钙、氯化钠;磷酸盐和任选的加工助剂,例如助流剂、惰性填充剂等;和任选的防腐剂。 [0096] 典型的产乳饲料组合物包括,例如玉米、小麦、大麦、燕麦、黑麦、柑桔苹果渣、提取的大豆粉、提取的油菜籽食料、大豆壳、棕榈仁榨出物、DDGS、玉米谷蛋白饲料、甜菜块、小麦饲料、小麦麸、亚麻子、糖蜜、石灰、盐、维生素和痕量元素预混合物。 [0097] 现在参照下列应用实施例更具体地示例本发明。 [0098] 试验部分 [0099] 实施例1:当用多种颗粒的CLA饲料配制物饲喂乳牛时乳脂肪减少的研究[0100] a)造粒 [0101] 造粒机:制造商Simon Heessen,Type V3-30C。 [0102] 容量600-650kg/小时 [0103] 模具: [0104] 内径:5mm [0105] 内部长度45mm。 [0106] 间隙宽度1mm [0107] 造粒温度:80℃ [0108] 处理:蒸汽T=135和145℃(取决于压力) [0109] b)所用的CLA配制物 [0110] (1) (包含CLA的商购产品) [0111] 表:5个不同批次的组合物 [0112] [0113] 1GC面积% [0114] (2) [0115] Lutrell由34%Lutalin和添加剂15%二氧化硅、5%石膏和46%氢化大豆油组成,其中瘤胃稳定功能主要受后者影响。 [0116] Lutrell的组成(脂肪酸分布)如下表中所示。 [0117] [0118] (3)Lutalin+Silafett [0119] Silafett的脂肪酸组成=氢化大豆油 [0120] [0121] b)试验设计 [0122] 试验4种试验方案(参见下文的表)。 [0123] 方案1(T1)是对照品(C)并且不包含任何CLA; [0124] 方案2(T2)包含CLA配制物“Lutrell”; [0125] 方案3(T3)包含CLA配制物“Lutalin”和 [0126] 方案4(T4)包含CLA配制物“Lutalin+Silafett”。 [0127] T1 T2 T3 T4 大豆/玉米混合物 10001) 950 983.3 950.0 Lutrell 0 50 0.0 0.0 Lutalin 0 16.7 16.7 Lutalin+Silafett 0 0.0 33.3 1000 1000 1000 1000 [0128] 1)以克计的数据 [0129] 饲料:1kg补充剂由预先颗粒化的25%提取的大豆粉和75%玉米粉组成。 [0130] 将CLA制品混入产乳饲料(25%重量的提取的大豆粉;75%重量的玉米粉)并且将该混合物造粒。 [0131] 试验设计相当于4×4拉丁方(参见下表)。在试验组中,每种情况中,纯CLA以每天每头母牛16.7g相同量计量。 [0132] [0134] 每期为21天;即适应时间为14天,然后是7天的测量期。全部4种试验饲料基于相同的基本成分。 [0135] c)动物 [0136] 根据上述对20头母牛的试验设计试验每种处理方式。将另外的4头母牛指定入试验组,作为储备动物。在本试验开始时,试验母牛处于中间泌乳节段。在本试验开始时的平均乳产量约为32kg FCM/天。试验母牛(German Holstein)选自试验站的群(群性能约11 000kg乳、3.9%脂肪、3.4%蛋白质)并且根据以下标准指定入4个组, [0137] ·泌乳次数(1和以上) [0138] ·乳脂肪含量(基于两次在先的乳产量记录) [0139] ·泌乳天和乳产量 [0140] 目的在于调整可比较的组平均值。 [0141] d)饲喂 [0142] 给全部母牛提供相同的总混合饲料(TMR),每日随机饲喂1次。TMR由谷物青贮饲料、草青贮饲料、干草和约45%浓缩物组成。TMR目标值如下表中所示。这种TMR确保如果母牛摄取约21kg DM这种饲料,则给其提供33kg产乳量的足够营养物。 [0143] [0145] 首先将3种CLA配制物用于制备与产乳饲料的颗粒的预混合物。然后在饲料槽中通过手动将适量的这些预混合物(相当于1kg/动物/天)与TMR混合,目的在于在每种情况中都得到20kg DM TMR中16.7g量的纯物质。对照组接受相同量的相同浓缩物,但不含CLA。 [0146] e)采样和测量的参数 [0147] 饲料 [0148] 为了测定干物质,每日摄取1次TMR样品,并且合并样品,得到每个测量期(7天)的累积样品。将这种累积样品用于根据Weender分析测定粗营养物含量,并且根据Hohenheimer饲料值试验测定能量含量。 [0149] 母牛 [0150] 对于每头母牛,每日记录(各自)TMR摄取量、乳产量和活体重。在7-天测量期期间,从晚间和早晨的乳中取3次等分形式的乳样品,并且测试脂肪、总蛋白质(Nx6.38)、乳糖和尿素含量,并且由Baden-Württemberg乳试验机构测试体细胞计数。在每个试验期的第一周和第二周的中间进行另外的乳试验(制备期)。对每头母牛和每次处理再形成包含7-天测量期的累积乳样品,然后冷冻,以便能够任选对其中的乳脂肪进行脂肪酸分析。 [0151] f)试验结果 [0152] 表:颗粒的饲料形式的Lutalin和Lutrell对饲喂5g反式-10/顺式-12CLA的乳母牛的乳脂肪降低的作用 [0153] [0154] SD:标准偏差 [0155] 令人惊奇地,处理T3和T4导致乳脂肪降低与处理T2相同,尽管T3和T4中的活性物质CLA已经以非瘤胃保护形式被混入产乳饲料。因此,颗粒化保护了瘤胃中T3和T4的活性物质CLA,其保护程度与从Lutrell得知的相同,并且还通过T2得以证实。 [0156] 实施例2:不同颗粒的CLA饲料配制物的瘤胃稳定性研究 [0157] 瘤胃中的稳定性是包含CLA的饲料的乳脂肪降低所必不可少的。为了这一目的,将实施例1中试验的饲料(75%玉米+25%提取的大豆粉)与1.66%Lutalin或5%Lutrell混合,并且将该混合物造粒或挤出。然后将产生的颗粒和挤出物在体外温育4、12和24小时。在预定时间后,停止温育,并且将全部内容物转入容器并且冷冻干燥。随后对这种冷冻干燥的样品物质测定CLA含量。 [0158] a)造粒和挤出 [0159] 粉的制备:共同称重玉米和提取的大豆粉,研磨,并且在水平混合器中混合。加入Lutalin或Lutrell并且混合。混合时间总计为15分钟。在每种情况中将这两种混合物分开。将80kg造粒并且将30kg挤出。 [0160] 造粒机:制造商Simon Heesen,水平模具3.3×35mm,额定处理能力300kg/小时。 [0161] 挤出机:Werner&Pfleiderer 37,模具 额定处理能力达50kg/小时。 [0162] 造粒:造粒温度达到67-68.5℃。 [0163] 挤出:挤出温度达到85℃,已经加入约14%的水。在终产物中发现残留水量为10-12%。 [0164] b)所用的CLA配制物 [0165] (1) (包含CLA的商购产品。组成参见实施例1。 [0166] (2) 纯:包含CLA的商购产品。组成参见实施例1。 [0167] c)试验建立 [0168] 试验4种试验方案(参见下表)。 [0169] 方案1(T1)1种颗粒并且包含CLA配制物“Lutalin” [0170] 方案2(T2)1种颗粒并且包含CLA配制物“Lutrell” [0171] 方案3(T3)1种挤出物并且包含CLA配制物“Lutalin” [0172] 方案4(T4)1种挤出物并且包含CLA配制物“Lutrell” [0173] T1 T2 T3 T4 大豆/玉米混合物 983.3* 950 983.3 950.0 Lutrell 50 0,0 50 Lutalin 16.7 16.7 0 总计 1000 1000 1000 1000 [0174] *以克计的数据 [0175] 饲料:1kg补充剂由25%提取的大豆粉和75%玉米粉组成。 [0176] 在加工步骤后即刻进行的分析显示活性物质CLA使得颗粒化过程保持极为良好,而挤出导致活性损耗约40%。 [0177] d)温育:Hohenheimer饲料值试验(体外试验)中体外降解产物的测定 [0178] Hohenheimer饲料值试验(HFT)是用于评估反刍动物饲料的有活力的饲料值的体外方法。当在确定时间期限后停止温育并且分析温育溶液中活性物质的剩余物时,适合的方案还能够试验HFT中活性物质的瘤胃稳定性。 [0179] 根据VDLUFA方法(Methodenbuch[方法书籍]第III卷,第25.1章)中的规定进行Hohenheimer饲料值试验(HFT)。 [0180] 温育期取决于所述试验目的;由于存在CLA配制物的降解,所以便利地为4-24小时。体外系统可以稳定达48小时;然而,超过这一时间点,必须预期到发酵的生理过程的偏差。在每种情况中,称重500mg试验方案T1-T4(相当于约5mg CLA或对于挤出方案约3mg)。温育期总计为4、12和24小时。对于每一温育期,进行三次测定(每种试验方案T1-T4 3个温育容器)。 [0181] 在相关期限后,通过用冰-水冷却终止温育。将瘤胃流体/缓冲液混合物各自定量地转入玻璃容器,其适合于随后的冷冻干燥步骤。称重空干燥容器,以便在干燥后,能够测定残留重量和使用数据用于随后的定量分析。所用的冷冻干燥系统为来自Christ,37507Osterode的Gamma 1-20。 [0182] e)分析方法:AM/00887/01的改进 [0183] 由于特定的基质和低CLA含量,所以如分析方法中所述的加工(参见第7.4.2章)必须如下所示进行改进。所进行的改进用斜体字表示。 [0184] 如7.4.2中所述称重样品或将其导入250-mL Erlenmeyer瓶中;此后,加入所述量的BHT、抗坏血酸钠和水。 [0185] 然后,加入一满软膏刀尖的酶炭色链霉菌蛋白酶(Pronase),并且在60℃温度将Erlenmeyer瓶放入超声浴15分钟。 [0186] 在加入如7.4.2中所述量的乙醇和乙酸后,使样品在60℃温度恢复入超声浴15分钟。 [0187] 在冷却至室温后,加入提取溶液环己烷/乙酸乙酯80:20(v/v)。然而,仅使用50mL提取溶液而不是通常的100mL。 [0188] 此后,如7.4.2中所述用磁力搅拌器将样品搅拌30分钟,加入70mL饱和氯化钠溶液,并且持续搅拌10分钟。此后,关闭搅拌器,并且将该混合物保持静置,直到相分离为止。 [0190] 用一次性0.45-μm-滤器将得到的样品溶液等份直接过滤入HPLC小瓶。 [0191] 注射体积为20μL而不是通常的10μL。 [0192] f)试验结果 [0193] 总CLA保留(%)(作为甲酯和游离脂肪酸) [0194] [0195] 在这种体外试验中,能够再现已经在实施例1中令人惊奇地发现的颗粒的Lutalin与颗粒的Lutrell相比较的相同乳脂肪降低,因为在两种颗粒方案T1和T2中测定的CLA保留相同。因此,使用这种试验,能够至少确定地评价那些基于相同饲料而仅物理处理方式不同的方案。令人惊奇地,挤出方案T3和T4在每种情况中均显示基本上高于颗粒方案的保留比例-分别在4和12小时后和12和24小时后(参见图1)。 [0196] 因此,可以得出结论:挤出形式的Lutalin(非瘤胃稳定的CLA)与可比较的Lutrell挤出物(已经通过稳定添加剂进行瘤胃稳定化CLA)也具有至少相当的瘤胃稳定性。 [0197] 特别地参考本文提及的出版物的公开内容。 |