How to use the ceramide derivatives |
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| 申请号 | JP2001570614 | 申请日 | 2001-03-28 | 公开(公告)号 | JP2003528851A | 公开(公告)日 | 2003-09-30 |
| 申请人 | ザ リポソーム カンパニー、インコーポレーテッド; | 发明人 | アリ，シャウカット; ジャノフ，アンドリュー・エス; タン，シン‐イー・イヴェット; メイヒュー，エリック; | ||||
| 摘要 | (57)【要約】 【課題】 セラミド誘導体、セラミド誘導体を含有する製薬学的組成物、および疾患等の治療薬としてのセラミド誘導体の治療用途を提供する。 【解決手段】 式（Ｉ）、 【化１】 | ||||||
| 权利要求 | 【特許請求の範囲】 【請求項１】 式、 【化１】 （式中、 ＲはＣ n Ｈ 2n+1であり、ｎは１〜１８の整数であり、 ＡはＣＨ 2 −ＣＨ 2 、ＣＨ 2 −ＣＨ（ＯＨ）またはｃｉｓ、ｔｒａｎｓもしくはｃ ｉｓ＋ｔｒａｎｓＣＨ＝ＣＨであり、 ＭはＣ（Ｏ）またはＣＨ 2であり、 ＱはＣ、ＯＣまたはＳ（Ｏ 2 ）Ｎであり、 ＹはＨ、ＯＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、アリール、フェニル、ＮＨ 2 、ＮＯ 2 、Ｃ 6 Ｈ 5 、ハロゲン、ＮＨ−Ｐ 1 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨ、Ｃ 6 Ｈ 5 、アルキル、ＮＨ 2 、ＮＨ−Ｐ 1またはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）である場合には、Ｚは存在せず、Ｘ、ＹおよびＺが異なる部分として存在する場合には、本発明の化合物はα−炭素に対してＲ配置、Ｓ配置またはＲ配置とＳ配置の任意の組み合わせを有し、 ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ 6 Ｈ 5 、Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ 3 ） 3 、Ｏ−Ｓｉ（Ｃ 4 Ｈ 9 ） 3 、Ｏ−Ｓｉ（Ｃ 6 Ｈ 5 ） 3 、Ｃ 1 −Ｃ 17アルキル、−ＣＨ 2 −Ｏ−Ｘ 1または【化２】 であり、 ｋは０〜６の整数であり、 Ｒ 1 、Ｒ 2およびＲ 3は、各々独立に、Ｈ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6アルケニル、Ｃ 2 −Ｃ 6シクロアルキルまたはアリールであり、 Ｘ 1はＨ、ＯＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、Ｃ 2 −Ｃ 6シクロアルキル、アリール、フェニル、ハロゲン、ＮＯ 2 、ＣＮ 、Ｃ（Ｏ）Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、ＮＨ 2 、ＮＨＣＨ 3 、ＣＯＮＨ 2 、Ｎ（ＣＨ 2 ＣＨ 2 ） 2 Ｃｌ 2 、Ｂ（ＯＨ） 2 、フリル、Ｏ −アルキルまたはアリールスルホネートであり、 Ｘ 2は−Ｏ−ＣＨ 2 −であり、Ｘ 3は−Ｏ−ＣＨ 2 −または−Ｏ−であり、Ｘ 2およびＸ 3は一体として複素環を形成し、 Ｐ 1はＨまたはアミノ保護基である）の化合物。 【請求項２】 ＹおよびＺが各々独立にＨまたはＣ 6 Ｈ 5である、請求項１に記載の化合物。 【請求項３】 ＭがＣ（Ｏ）であり、ＸがＢｒまたはＣ 1 −Ｃ 17アルキル基であり、ＱがＣであり、ＺがＨ、Ｃ 6 Ｈ 5基、アルキル基またはＣ（Ｏ）ＯＨである、請求項１に記載の化合物。 【請求項４】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化３】 である、請求項１に記載の化合物。 【請求項５】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化４】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺがＨである、請求項１に記載の化合物。 【請求項６】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化５】 であり、 ＹがＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺがＨである、請求項１に記載の化合物。 【請求項７】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化６】 であり、 ＹがＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺがＨである、請求項１に記載の化合物。 【請求項８】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化７】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 Ｘ 4がＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、ＣＮ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルであり、 ＹがＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺがＨである、請求項１に記載の化合物。 【請求項９】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化８】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨであり、 ＺがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである、請求項１に記載の化合物。 【請求項１０】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化９】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨであり、 ＺがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである、請求項１に記載の化合物。 【請求項１１】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１０】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨであり、 ＺがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである、請求項１に記載の化合物。 【請求項１２】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１１】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2 、ＮＯ 2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺがＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚが存在しない、請求項１に記載の化合物。 【請求項１３】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１２】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2 、ＮＯ 2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺがＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚが存在しない、請求項１に記載の化合物。 【請求項１４】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが−ＣＨ 2 −Ｏ−Ｘ 1であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ Ｎ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ 3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2 、ＮＯ 2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺがＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚが存在しない、請求項１に記載の化合物。 【請求項１５】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１３】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、 ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2 、ＮＯ 2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺがＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚが存在しない、請求項１に記載の化合物。 【請求項１６】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１４】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、 ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＺがＮＨ 2またはＮＨ−Ｐ 1である、請求項１に記載の化合物。 【請求項１７】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１５】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、 ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ 2 、ＮＨ−Ｐ 1 、（Ｏ）または（Ｓ）である、請求項１に記載の化合物。 【請求項１８】 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘが【化１６】 であり、 Ｘ 1がＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、 ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールである、請求項１に記載の化合物。 【請求項１９】 Ｐ 1が、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｔｒｏｃ，シリル、スルホニル、アセチルおよびベンジルからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。 【請求項２０】 Ｄ−ｔｈｒｅｏ配置を有する、請求項１に記載の化合物。 【請求項２１】 Ｌ−ｔｈｒｅｏ配置を有する、請求項１に記載の化合物。 【請求項２２】 Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏ配置を有する、請求項１に記載の化合物。 【請求項２３】 Ｌ−ｅｒｙｔｈｒｏ配置を有する、請求項１に記載の化合物。 【請求項２４】 ＸがＢｒであり、ＹがＨであり、ＺがＨである、請求項３ に記載の化合物。 【請求項２５】 ｎが１１であり、ＡがＣＨ 2 −ＣＨ 2である、請求項２４に記載の化合物。 |
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| 说明书全文 | 【発明の詳細な説明】 【０００１】 ［技術分野］ 本発明は、セラミド誘導体と、セラミド誘導体を含有する製薬学的組成物と、 n Ｈ 2n+1であり、ｎは１〜１８の整数であり、 ＡはＣＨ 2 −ＣＨ 2 、ＣＨ 2 −ＣＨ（ＯＨ）またはｃｉｓ、ｔｒａｎｓもしくはｃ
2であり、 ＱはＣ、ＯＣまたはＳ（Ｏ 2 ）Ｎであり、 ＹはＨ、ＯＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、アリール、フェニル、ＮＨ 2
2 、Ｃ 6 Ｈ 5 、ハロゲン、ＮＨ−Ｐ 1 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨ、Ｃ 6 Ｈ 5 、アルキル、ＮＨ 2 、ＮＨ−Ｐ 1またはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）である場合には、Ｚは存在せず、Ｘ、ＹおよびＺが異なる部分として存在する場合には、本発明の化合物はα−炭素に対してＲ配置、Ｓ配置またはＲ配置とＳ配置の任意の組み合わせを有し、 ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ 6 Ｈ 5 、Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ 3 ） 3 、Ｏ−Ｓｉ（Ｃ 4 Ｈ 9 ） 3 、Ｏ−Ｓｉ（Ｃ 6 Ｈ 5 ） 3 、Ｃ 1 −Ｃ 17アルキル、−ＣＨ 2 −Ｏ−Ｘ 1または【化１８】 であり、 ｋは０〜６の整数であり、 Ｒ 1 、Ｒ 2およびＲ 3は、各々独立に、Ｈ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6アルケニル、Ｃ 2 −Ｃ 6シクロアルキルまたはアリールであり、 Ｘ 1はＨ、ＯＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−
2 −Ｃ 6シクロアルキル、アリール、フェニル、ハロゲン、ＮＯ 2 、
3 、ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、
2 、Ｎ 3 、ＮＨＣＨ 3 、ＣＯＮＨ 2 、Ｎ（ＣＨ 2 ＣＨ 2 ） 2 Ｃｌ 2 、Ｂ（ＯＨ） 2 、
2は−Ｏ−ＣＨ 2 −であり、Ｘ 3は−Ｏ−ＣＨ 2 −または−Ｏ−であり、Ｘ 2
3は一体として複素環を形成し、 Ｐ 1はＨまたはアミノ保護基である）の化合物に関係する。 本発明のセラミド誘導体は、Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏ、Ｄ−ｔｈｒｅｏ、Ｌ−ｅｒｙｔｈｒｏおよびＬ−
6 Ｈ 5である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、ＸはＢｒまたはＣ 1 −Ｃ 17アルキル基であり、ＱはＣであり、ＺはＨ、Ｃ 6 Ｈ 5基、アルキル基またはＣ（Ｏ）ＯＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化１９】 である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２０】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２１】 であり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２２】 であり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２３】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 Ｘ 4はＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、ＣＮ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルであり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２４】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨであり、 ＺはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２５】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨであり、 ＺはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２６】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨであり、 ＺはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２７】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２８】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは−ＣＨ 2 −Ｏ−Ｘ 1であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化２９】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３０】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 O−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 S−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＺはＮＨ 2またはＮＨ−Ｐ 1である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは、 【化３１】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 O−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 S−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ 2 、ＮＨ−Ｐ 1 、（Ｏ）または（Ｓ）である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３２】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 O−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 S−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールである。 Ｐ 1は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｔｒｏｃ，シリル、スルホニル、アセチルおよびベンジルである。 【００１３】 本発明はまた、上記のセラミド誘導体を含有する製薬学的組成物と、脂質および上記のセラミド誘導体を含有する脂質二重膜を有するリポソームとを含む。 本発明は、抗癌、抗炎症または抗ウィルスに有効な量のセラミド誘導体を癌、炎症性疾患またはウィルス感染症に罹患した動物に投与することによって動物を治療する方法を含む。 【００１４】 ［発明の詳細な説明］ 本発明は、著しい抗悪性腫瘍作用を示す新規セラミド誘導体を含む。 本発明のセラミド誘導体は、式Ｉ、 【化３３】 （式中、 ＲはＣ n Ｈ 2n+1であり、ｎは１〜１８の整数であり、 ＡはＣＨ 2 −ＣＨ 2 、ＣＨ 2 −ＣＨ（ＯＨ）またはｃｉｓ、ｔｒａｎｓもしくはｃ
2であり、 ＱはＣ、ＯＣまたはＳ（Ｏ 2 ）Ｎであり、 ＹはＨ、ＯＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、アリール、フェニル、ＮＨ 2
2 、Ｃ 6 Ｈ 5 、ハロゲン、ＮＨ−Ｐ 1 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨ、Ｃ 6 Ｈ 5 、アルキル、ＮＨ 2 、ＮＨ−Ｐ 1またはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）である場合には、Ｚは存在せず、Ｘ、ＹおよびＺが異なる部分として存在する場合には、本発明の化合物はα−炭素に対してＲ配置、Ｓ配置またはＲ配置とＳ配置の任意の組み合わせを有し、 ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ 6 Ｈ 5 、Ｏ−Ｓｉ（ＣＨ 3 ） 3 、Ｏ−Ｓｉ（Ｃ 4 Ｈ 9 ） 3
6 Ｈ 5 ） 3 、Ｃ 1 −Ｃ 17アルキル、−ＣＨ 2 −Ｏ−Ｘ 1または【化３４】 であり、 ｋは０〜６の整数であり、 Ｒ 1 、Ｒ 2およびＲ 3は、各々独立に、Ｈ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6アルケニル、Ｃ 2 −Ｃ 6シクロアルキルまたはアリールであり、 Ｘ 1はＨ、ＯＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−
2 −Ｃ 6シクロアルキル、アリール、フェニル、ハロゲン、ＮＯ 2 、
3 、ＣＯＣＨ 3 、ＣＨ 2 ＯＨ、
2 、Ｎ 3 、ＮＨＣＨ 3 、ＣＯＮＨ 2 、Ｎ（ＣＨ 2 ＣＨ 2 ） 2 Ｃｌ 2 、Ｂ（ＯＨ） 2 、
2は−Ｏ−ＣＨ 2 −であり、Ｘ 3は−Ｏ−ＣＨ 2 −または−Ｏ−であり、Ｘ 2
3は一体として複素環を形成し、 Ｐ 1はＨまたはアミノ保護基である）のものである。 本発明のセラミド誘導体は、Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏ、Ｄ−ｔｈｒｅｏ、Ｌ−ｅｒｙｔｈｒｏおよびＬ−ｔｈｒ
6 Ｈ 5である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、ＸはＢｒまたはＣ 1 −Ｃ 17アルキル基であり、ＱはＣであり、ＺはＨ、Ｃ 6 Ｈ 5基、アルキル基またはＣ（Ｏ）ＯＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３５】 である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３６】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３７】 であり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３８】 であり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭがＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化３９】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 Ｘ 4はＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、ＣＮ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルであり、 ＹはＨ、ＣＨ 3 、ＮＨ 2またはＮＯ 2であり、 ＺはＨである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４０】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨであり、 ＺはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４１】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨであり、 ＺはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４２】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨであり、 ＺはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキルまたはＣ 2 −Ｃ 6シクロアルキルである。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４３】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４４】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは−ＣＨ 2 −Ｏ−Ｘ 1であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＯＣＨ 3 、ＮＯ 2 、Ｃ
3 、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４５】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＹはＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、アリール、フェニル、ＯＨ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、ＮＨ 2
2 、（Ｏ）または（Ｓ）であり、 ＺはＨまたはＣ（Ｏ）ＯＨであり、Ｙが（Ｏ）または（Ｓ）の場合に、Ｚは存在しない。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４６】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＺはＮＨ 2またはＮＨ−Ｐ 1である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは、 【化４７】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールであり、 ＹがＨ、ＯＨ、ハロゲン、ＮＨ 2 、ＮＨ−Ｐ 1 、（Ｏ）または（Ｓ）である。 ＭはＣ（Ｏ）であり、Ｘは【化４８】 であり、 Ｘ 1はＨ、Ｃ 1 −Ｃ 6アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｏ−アルキル、Ｃ 1 −Ｃ 6 Ｓ−アルキル、
3 、ＣＨ 2 ＯＨ、フェニルまたはアリールである。 Ｐ 1は、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｔｒｏｃ，シリル、スルホニル、アセチルおよびベンジルである。 【００１６】 本発明はまた、新規セラミド誘導体を含有する製薬学的組成物を含む。 製薬学的組成物は、製薬学的に許容されうる担体を含んでもよい。 本発明はまた、抗癌、抗炎症または抗ウィルス感染症に有効な量のセラミド誘導体を、癌、炎症性疾患またはウィルス感染症に罹患している動物に投与することによって、動物を治療する方法も含む。 「抗癌に有効な量」は、癌細胞または異常に増殖している他の細胞の増殖を遅くするかもしくは停止する、または癌細胞の細胞死を生ずる量である。 「抗炎症に有効な量」は、患者の炎症応答を遅くするまたは停止する量である。 「抗ウィルスに有効な量」は、ウィルスの増殖を遅くするかもしくは停止する、またはウィルスの死を生ずる量である。 【００１７】 セラミド誘導体を合成するために使用する方法は特に限定されず、参照として全体の内容が本明細書に組み入れられているＲ． Ｓｅｌｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｙ
3 （ＣＨ 2 ） 14 −
3
2 ） 14 Ｃｏ−ＣＨ（ＮＨ 3 ）−ＣＨ 2 ＯＨおよびＣＯ 2を生ずることによって動物細胞内に形成される（例えば、Ｌ．Ｓｔｒｙｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒ
3 （ＣＨ 2 ） 14 −ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ（ＮＨ 3 ）−Ｃ
2 ＯＨ）に変換され、次いでスフィンゴシン（ＣＨ 3 （ＣＨ 2 ） 12 ＣＨ＝ＣＨ−
2 ）−ＣＨ 2 ＯＨ）に変換される。 次いで、スフィンゴシンのアミド基に脂肪酸が結合して、セラミド（ＣＨ 3 （ＣＨ 2 ） 12 ＣＨ＝ＣＨ−
2 ＯＨ）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ（ここで、Ｒは脂肪酸鎖である）を生ずる。 ホスホリルコリン基（ＰＯ 4 ＣＨ 2 ＣＨ 2 −Ｎ（ＣＨ 3 ） 3 ）がセラミドのヒドロキシル基に結合してスフィンゴミエリンＣＨ 3 （ＣＨ 2 ） 12 ＣＨ＝ＣＨ
2 ＰＯ 4 ＣＨ 2 ＣＨ 2 −Ｎ（ＣＨ 3 ） 3 ）−ＮＨ−ＣＯ−Ｒ）
t Ｂｕ）、Ｎ
2 ＮＨ−ｉプロリルセラミド化合物の場合と同様である）、細胞毒性を増加する助けとなることがある。 【００２０】 以下の説明は、生物活性を増強するために、標的結合を増加する理論的概念を示唆している。 【化４９】 【００２１】 種々の鎖長のアルキル鎖を含有する本発明の化合物は、本発明の教示内容を考慮すると、当業者に周知で容易に実施される数多くの方法によって合成される（
９４ ：６１９０（１９７２）；２：Ｊ． Ｏ
５９ ：６６８（１９９４）；３：Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎ
１７ ：５６９（１９７８）；４： Ｖｏｇｅｌ 'ｓ Ｔｅｘｔｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅ ｍｉｓｔｒｙ （５ｔｈ ｅｄ．），ｐｐ． ７６９−７８０）５：Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃ
４０ ：５７４（２９７５）；６：Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ５９ ：１８２
２５ ：２０９８（１９６０）；８：Ｓｙ
９０ ：
Ｏｘｉｄａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｏｒｇ ａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ （Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏ
３０ １３２６（１９８７）；１３：Ｓｙｎｔｈ． Ｃｏｍｍｕｎ． ９ ：７５７（
３７ ：２８９６（１９９４）；４：Ｊ． Ｍｅｄ
３０ ：１３２６（１９８７）；１６：Ｒｅｃ． Ｃｈｅｍ． Ｐｒｏｇ
２９ ：８５（１９６８）および１７： Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄｓ Ｈａｎｄ ｂｏｏｋ （Ｍａｒｃｅｌｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９
2 Ｃｌ 2 ）中でカルボン酸無水物または塩化物およびトリエチルアミン（Ｅｔ 3 Ｎ）と反応させた。 ほとんどの反応の終了時間は５分以内であった。 反応は、標準としてセラミド（Ｃ 6 、Ｓｉｇｍａ）を使用して薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）でモニターした。 ほとんどの誘導体のＲ f値はＣＨＣｌ 3 ／
3 ／ＭｅＯＨ（９３：７）
f ＝０．５（９：１、クロロホルム：メタノール）の望ましい生成物を得た。 最後に、生成物をシクロヘキサンで凍結乾燥して、
3 ）で得た：７．２（ｄ，１Ｈ，Ｎ Ｈ ），５．８（ｍ，１Ｈ，Ｃ Ｈ ＝ＣＨ），５．５（
Ｈ ），４．３（ｓ，１Ｈ，Ｃ Ｈ −ＯＨ），４．０（ｄｄ，
Ｈ 2 ＯＨ），３．９（ｓ，２Ｈ，Ｃ Ｈ 2 Ｂｒ），３．７（ｍ，１Ｈ，Ｃ Ｈ −ＮＨ），２．５（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ），２．４（ｓ，１Ｈ，ＯＨ），２．１（
Ｈ 2 ），１．６（ｓ，２Ｈ，ホモアリルＣ Ｈ 2 ），１．３（ｓ
Ｈ 2 ） 10 ），０．９（ａｐｐ．ｔ，３Ｈ，□−Ｃ Ｈ 3 ）． ＥＳＩ−
+ ），親ｍ／ｚ４０２（Ｍ−Ｈ 2 Ｏ）． Ｈ + ． 【化５１】 スキーム２ 【００２６】 対応する２−ブロモカルボン酸を使用したことを除いて上記と同じ手法でアシル鎖長がＣ 4 〜Ｃ 20の他のセラミドを製造した。 得られた生成物はＴＬＣおよび１Ｈ ＮＭＲで特徴づけた。 ２−クロロ酢酸および２−ヨード酢酸をそれぞれ使用したことを除いて上記と同じ手法で２−クロロおよび２−ヨードＣ 2セラミドを製造し、ＴＬＣおよび 1 Ｈ ＮＭＲで特徴づけた。 【００２７】 ［実施例３： 抗悪性腫瘍作用の評価］ 種々のセラミドを上記のように製造し、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）アッセイ（以下に記載）を使用して樹立されているいくつかの腫瘍細胞系統に対する抗腫瘍活性について評価した。 特定の白血病系統に対するセラミドの抗腫瘍活性も以下のように評価した。 ＨＴ２９、ヒト結腸癌はＡｍｅｒｉｃａｎ ｔｙｐｅ ｃ
2雰囲気下において増殖させた。 細胞種に応じて、３，０００〜１０，０００
50は、未処理の対照試料と比較したときの、
0 ）／（Ｃ−Ｔ 0 ）×１００（ここで、Ｔ＝所定の薬物濃度において処理したウェルの平均光学密度、Ｔ 0 ＝０時のウェルの平均光学密度、およびＣ＝対照ウェルの平均光学密度）。 細胞死が生じたことを示すＴ＜Ｔ 0の場合には、細胞死の割合は（Ｔ−Ｔ 0 ）／（Ｔ 0 ）×１００として算出した。 【００２９】 ［実施例５： 細胞増殖アッセイＩＩ］ 白血病系統（懸濁細胞）におけるＧＩ 50を測定するために、総細胞タンパク質を測定するＳＲＢアッセイを使用する代わりに、細胞数を直接計測した。 薬物処理の１日前に、４０，０００／細胞ウェル、０．５ｍｌ容量を２４ウェルプレートに接種した。 望ましい最終濃度の２倍にストック溶液を完全培地で希釈し、各希釈液の０．５ｍｌ量を指定のウェルに添加した。 ３日のインキュベーション後、Ｃｏｕｌｔｅｒカウンター（Ｚ−Ｍ，Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用して細胞数を計測することによって細胞増殖を測定した。 細胞計測は０時にも実施し、試験結果から引いて正味の増殖を得た。 ＧＩ 50は、未処理の対照試料と比較した正味の増殖の５０％を生ずる試験薬物の濃度を示す。 【００３０】 上記のように製造した種々のセラミドを、上記の材料と技法を使用して評価した。 評価結果は以下の実施低に詳細に示す。 【００３１】 ［実施例６］ 以下の式のセラミドを以下のように製造した： 【化５２】 （式中、Ｒ＝（ＣＨ 2 ） 12 ＣＨ 3 、Ｚ＝Ｈ、ＸおよびＹは以下の表１および２に規定されるとおりである）。 従って、ＸおよびＹがＨである場合には、Ｃ 2セラミドの構造が描かれる。 ＧＩ 50は、上記のＳＲＢアッセイによって測定した。 細胞は、示したセラミド誘導体で３日間処理し、次いで固定してアッセイした。 結果は表１および２に報告する。 【００３２】 【表１】 【００３３】 【表２】 【００３４】 ２−ＢｒＣ２セラミドとＣ２セラミド（細胞透過性合成セラミド）間の差といっても、セラミドの２位において水素が臭素に置換されているだけであるが、この修飾は、親化合物と比較して増殖阻止をかなり増強した。 本発明者らは、マウスおよびヒトのいくつかの癌細胞系統においてこの２つのセラミドのＧＩ 50を比較し、驚くべきことに、２−ＢｒＣ２セラミドはＣ２親セラミドと比較して５〜
50は２０〜３０μＭであったが、２−ＢｒＣ２セラミドのＧＩ 50は０．２〜６μＭであった。 興味深いことに、２−Ｂｒ−Ｃ２セラミドは固形腫瘍系統（１〜６μＭ）より白血病（＜１
50は上記のＳＲ
50は、上記のＳＲＢアッセイで測定し、結果を表４に報告する。 【００４０】 【表４】 【００４１】 表４が示すように、Ｄ−ｅｒｙｔｈｒｏ異性体は、ＨＴ−２９およびＡ−５４
6細胞を１％ホルムアルデヒドと共にＰ
50濃度（
50 ）（図１Ｆ）、本発明者らだけが、他の系統において観察されている凝縮した染色質顆粒ではなく核全体の陽性染色を観察した。 また、処理時間を長くすることにより、細胞は脆弱になり、本発明者らはアッセイ中に細胞消失の増加を見た。 【００４４】 ２−ＢｒＣ２セラミド誘導性アポトーシスを定量するために、同じ種類のＴＵ
50濃度の２倍）の２−Ｂｒ
2 、１ｍＭ ＥＤＴＡ
50は上記のＳＲＢアッセイによって測定した。 「＋」は、最大試験濃度、５０μＭにおいて細胞死が観察されたことを示す（試験試料のＯＤが０時の試料より小さい場合）。 「−」は、５０μＭにおいて細胞死が観察されなかったことを示す。 【００４８】 【表５】 【００４９】 【表６】 【００５０】 【表７】 【００５１】 【表８】 【００５２】 本発明は具体的な実施例および実施態様に言及して記載されているが、当業者は、添付の請求の範囲に規定されている本発明の精神および範囲から逸脱することなく、種々の等価な構成要素と交換できることを容易に認識している。 【図面の簡単な説明】 【図１Ａ−図１Ｈ】 ヒト腫瘍細胞系統における２−Ｂｒ−Ｃ２セラミド誘発性アポトーシスを示す一連の蛍光顕微鏡写真である。 対照（未処理）Ｕ９３７（図１Ａ）、ＭＣＦ７（
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl. 7識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｋ 31/40 Ａ６１Ｋ 31/40 31/405 31/405 31/695 31/695 38/00 Ａ６１Ｐ 3/10 Ａ６１Ｐ 3/10 29/00 29/00 31/12 31/12 35/00 35/00 Ｃ０７Ｃ 233/22 Ｃ０７Ｃ 233/22 233/60 233/60 235/08 235/08 237/06 237/06 237/18 237/18 237/20 237/20 255/19 255/19 271/22 271/22 311/17 311/17 Ｃ０７Ｍ 7:00 // Ｃ０７Ｍ 7:00 Ａ６１Ｋ 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＯＡ(ＢＦ ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ， ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，Ｇ Ｍ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ， ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ， ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，Ｂ Ｚ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＯ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ， ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ， ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，Ｐ Ｔ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ， ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 タン，シン‐イー・イヴェット アメリカ合衆国カリフォルニア州94546， カストロ・ヴァリー，フーバー・ドライヴ 18905 (72)発明者 メイヒュー，エリック アメリカ合衆国ワシントン州98199，シア トル，ウェスト・バーチュナ・ストリート 3905 (72)発明者 ジャノフ，アンドリュー・エス アメリカ合衆国ペンシルヴァニア州19067， ヤードリー，カウンテス・ドライヴ 560 Ｆターム(参考） 4C084 AA02 BA01 BA14 BA23 CA59 NA14 ZB11 ZB26 ZB33 ZC35 4C086 AA03 BA13 BC05 BC13 BC38 DA44 NA14 ZB11 ZB26 ZB33 ZC35 4C206 AA03 GA01 GA02 GA03 GA07 GA26 HA21 NA14 ZB11 ZB26 ZB33 ZC35 4H006 AA01 AB22 AB27 AB28 AB29 BJ20 BJ50 BM10 BM73 BN10 BN30 BP10 BP30 BS10 BU26 |
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